CA1054939A - Esters des 21-thiol-steroides - Google Patents

Abstract

La présente invention concerne une composition pharmaceutique possédant une activité antiinflammatoire et possédant des effets systémiques réduits comprenant un dérivé de la dexaméthasone de formule générale I: (I) dans laquelle R1 désigne un radical alkyle comprenant un nombre d'atomes de carbone compris entre 4 et 9, ou le radical parafluorophényle, en association avec un excipient pharmaceutique.

Description

lOS~939 La prêsente invention concerne une composition pharmaceutique possedant une activité antiinflammatoire et possêdant des effets syst~miques rêduits comprenant un dêrivê
de la dexamethasone de formule generale I:

CH2 - S - C - Rl C ~ O ' , HO~, tJ~-OHCH3 ( I ) 0~ ~' dans laquelle Rl designe un radical alkyle comprenant un nombre d'atomes de carbone compris entre 4 et 9, ou le radical para-fluorophenyle, en association avec un excipient pharmaceutique.
Plusieurs publications decrivent la modification du 10 groupe 21-hydroxymethyl des corticoides et plus particuliere-ment le remplacement de l'oxygene de cette fonction par du soufre.
Ainsi, le 21-thioacetate d'hydrocortisone est synthe-tise et declare depourvu de toute activite biologique interes-sante (J. Org. Chem. 26, 1233, 1961).
D'autres derives ont ete proposes comme antiinflamma-toires, soit uniquement d'action systemique, soit d'action locale et systemique:
- les 21-thioacetate et 21-thiopropionate de predni-solone (brevet E.U.A. 2,814,632) ont ete decrits comme possé-dant une activite adrenocorticoide accompagnee d'une activite diur~tique importante, - le 21-thioacetate de dexamethasone (brevet français 1187 M) a ete propose comme antiinflammatoire d'action locale et systemique.

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1~)5~939 `,~
L'utilisation therapeutique des corticoides possedant une action systemique provoque generalement des "effets seconds" nefastes (Presse Medicale, No 31, 1419 - 1423, 1970).
Principalement : troubles endocriniens, retention sodique accompagnee d'une fuite potassique, affaiblissement des reactions de defense de l'organisme, ce qui entraSne un effet ~` proinfectieux, ulcerations digestives et perturbations des metabolismes glucidique, proteique et lipidique.
Le nombre et la vari~te de ces "effets seconds"
necessite une prudence certaine et une surveillance serieuse lors de l'emploi de ces produits.
La presente invention a pour but de remedier à ces `~ inconvenients.
. Il a ete constate que de manière surprenante, les structures faisant l'objet de la presente invention, comportant un groupe thioalkanoïque à poids moleculaire eleve, possèdent une activite antiinflammatoire importante mais n'ont que des effets systemiques reduits : les doses therapeutiques restent 'j donc tres eloignees de celles susceptibles d'entra~ner l'appa--~ 20 rition des effets seconds precedemment decrits.
Ainsi certaines des substances selon l'invention , possèdent une activite thymolytique 100 fois moindre que celle : du glucocorticoide de reference alors qu'inversement, leur ,' activite antiinflammatoire locale est superieure à celle de la même reference.
D'une facon generale, les substances faisant l'objet de la composition de la presente invention ont montre une acti-vit~ fortement diminuee ou nulle sur les mêtabolismes gluci-dique et proteique, peu ou pas de regression des surrenales, ni de retention sodique.
En cons~quence, ces substances sont des agPnts thera-. .

~ - 2 -lOS4939 peutiques d'une tres grande s~curité d'emploi et ce meme a forte dose, qui trouvent leur application dans le traitement local des affections inflammatoires telles que celles:
- - des affections cutanees et des muqueuses relevant d'un traitement par les corticoides, - des affections oto-rhino-laryngologiques et ophtal-mologiques de nature inflammatoire et/ou allergique, - des inflammations digestives basses comme les colites, rectocolites et sigmo~dites, - des maladies du collagene, des affections articu-laires et rhumatismales, - de l'asthme, de l'emphyseme et des fibroses respi-ratoires.
En outre, et contrairement aux steroides non soufres correspondants, ces produits presentent une longue duree d'action depourvue d"'effet rebond", ce qui apporte un grand interêt dans le traitement des affections inflammatoires chro-3 niques.
i~ Selon l'invention, les esters des 21-thiol steroides sont prepares par condensation entre:
- d'une part, du derive iode de formule II:

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HO~ -OHCH3 ( I I ) 0~- : ' - d'autre part, des acides S-thiocarboxyliques utili-ses sous leur forme salifiee, de preference sous la forme des sels alcalins de ces acides, notamment le sel de sodium.
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~0~939 Comme acides S-thiocarboxyliques, on emploie des acides tels que:
- les acides thio-alkanoïques comprenant un nombre d'atomes de carbone egal ou superieur a 5 et, de preférence, compris entre 5 et 10, notamment l'acide S-thiopivalique et l'acide S-heptanethioïque, - l'acide para-fluoro-benzoïque.

Pour salifier les acides S-thiocarboxyliques, on procede, de preference, de la maniere suivante:
On introduit dans le reacteur, en agitant, le solvant, de preference de l'acetone anhydre, et l'acide S-thiocarboxylique. Ensuite, on introduit le sodium, de prefe-rence sous forme de solution methanolique de methylate de sodium, que l'on verse goutte a goutte.
Les conditions operatoires du procede de condensation des derives iodes de formule II et des S-thiocarboxylates alcalins sont variables, generalement cependant on opere de la façon suivante:
On introduit dans un reacteur comportant un refrige-rant a reflux, en agitant, le solvant reactionnel, notamment de l'acetone anhydre, puis le derive iode de formule II; ~ la suspension ou la solution ainsi formee on ajoute la solution acetonique du S-thiocarboxylate alcalin preparee precedemment.
Le milieu reactionnel est porte au reflux, puis le solvant est elimine par distillation sous vide.
Il faut cependant noter qu'il est ~galement possible -d'effectuer la condensation en introduisant le derive iode de formule II a l'etat sec ou en solution acetonique dans la solution de S-thiocarboxylate de sodium et en poursuivant la reaction comme il est decrit precedemment.
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105~939 Le produit obtenu est purifie selon les cas soit directement par cristallisation dans un alcool a bas poids moleculaire, soit par chromatographie sur colonne suivie d'une cristallisation dans le ou les solvants appropries.
De preference, le rapport molaire entre le S-thio-carboxylate alcalin et le derive iode de formule II employes est compris entre 1,4 mole de sel alcalin par mole de derive iode et 14 moles de sel alcalin par mole de derive iode.
Les temperatures de reaction sont determines en fonc-tion de la nature du solvant et sont, en principe, comprises .l entre 56C et 102C.
La duree de la reaction de condensation est~favora-blement comprise entre 0.5 heure et 8 heures et, preferentiel-;' lement, entre 1 heure et 3 heures. Pour ces durees de reaction et selon les reactifs mis en oeuvre, les rendements sont sensi-~' blement compris entre 12.5% et 90%. D'une maniere generale, la duree de la reaction est determinee de façon a limiter la for-mation de derives secondaires.
Pour caracteriser l'ester des 21-thiol steroïdes ainsi prepare, on utilise des methodes analytiques chimiques, telles que l'analyse fonctionnelle et l'analyse elementaire centesimale, et des methodes physico-chimiques comme les spectroscopies U.V. et I.R.
Le procede qui vient d'etre decrit dans sa generalite a ete mis en oeuvre pour toute une variete de radicaux Rl, on le verra, notamment, a propos des exemples non limitatifs ci-apres. Ces exemples ont ete choisis de maniere a preciser la mise en oeuvre du procede selon l'invention pour, au moins un type de radicaux appartenant aux familles ci-apres revendi-quees.

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PIVALOYL-21 DIHYDROXY-11~,17~ THIOL-21 DIOXO-3,20 FLUORO-9 METHYL-16~ PREGNADIENE-1,4 (JO 1008) Dans un ballon d'un litre a 3 tubulures avec agita-tion centrale, ampoule d'introduction et protege par une garde a C12Ca on introduit successivement 150 cm3 d'acetone anhydre et 10.35 9 d'acide S-thio-pivalique (87.6 mmoles).
Goutte a goutte, en 12 mn, 27.3 cm3 de solution ` methanolique de methylate de sodium 3.21 M (87.6 mmoles) sont introduits.
Il n'y a pas de modification de temperature mais la " coloration jaune pâle initiale devient plus foncee. Apr~s introduction l'agitation est maintenue 5 mn.
~, D'autre part, dans un reacteur de 10 1 equipe par une agitation centrale, un refrigerant a reflux protege par une ~; garde a C12Ca, une ampoule d'introduction et un thermometre on introduit 200 cm3 d'acetone anhydre puis 3.4 9 (6.76 mmoles) de dihydroxy-11~,17~ iodo-21 dioxo-3,20 fluoro-9~ methyl-16 .i pregnadiène-1,4.
! 20 A cette suspension, la solution acetonique de S-thio-pivalate de sodium preparee plus haut est introduite sous agi-tation en 30 mn. Il n'y a pas de modification de temperature, le milieu jaunit et le produit se dissout progressivement.
La solution est portee 2 h au reflux de l'acetone puis le solvant est elimine par distillation sous vide. Le residu jaune obtenu est concretise dans 1,2 1 d'eau, filtré et seche sous vide a 40C - Poids 2.6 gr.
¦ Le produit purifie par dissolution dans 4 1 de metha-nol bouillant et traitement au noir animal de la solution.
Apres refroidissement, le precipite tres faiblement ~ jaune est filtre et seche sous vide a 40C; Poids 2.39 9; Rende-~ ment: 71.8%.
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. ! - 6 -:i . , - Analyse: C27H37F 05S: Calc. % : C 65.82 H 7.57 F 3.86 S 6.51 Tr. % : C 65.95 H 7.63 F 3.87 ` S 6.5g - Caracteristiques physiques:
o F : 240 - 245C
1 0 ~ ~DO = ~ 92, (dioxanne; c = 1%) ; o r max (methanol) a 236.5 nm, loglO e - 4,270 o Absorptions principales en I.R. (pastille KBr) : 1715, 1660, 1610, 1455, 1140, 980, 950, 930, 900 et 710 cm~l.

~ HEPTANOYL-21 DIHYDROXY-11~,17~ THIOL-21 DIOXO-3,20 FLUORO-9 ;. METHYL-16~ PREGNADIENE-1,4 (JO 1010).
, La r~action est effectuee comme il est decrit dans l'Exemple 1 a partir de 12.81 9 d'acide S-heptanethioïque (87.6 mmoles) et de 30 cm3 de solution de methylate de sodium 2.9 M
(87.6 mmoles) d'une part; et de 3.4 9 de dihydroxy-11~,17 iodo-21 dioxo-3,20 fluoro-9~ methyl-16~ pregnadiene-1,4 (6.76 ;~
mmoles) d'autre part.
Apres reaction et evaporation de l'acetone le residu est repris par 800 cm d'eau et la suspension est extraite par i 3 fois 100 cm3 de chloroforme. Les phases organiques reunies t~ sont sechees et on obtient 4.6 9 de residu huileux apres evapo-~i ration du chloroforme sous vide.
Le residu est d'abord purifie par chromatographie sur . une colonne de 70 9 de Florisi~ 60 - 100 mesh. Apres passage d'hexane puis de benzene, l'elution par le chloroforme permet de recueillir 3.2 9 de produit qui sont cristallises dans un ~ melange ethanol-hexane; Poids 1.25 9; Rdt: 35.5%.
'7 30 - Analyse: C29H41~ 05S: Calc. % : C 66.89 H 7.94 F 3.65 S 6.16 :. - ,. : , .. . : - .

5~939 Tr. % : C 67.19 H 8.14 F 3.70 S 6.22 - Caracteristiques physiques:
O F = 145 - 150C
O ~ ~2DO = + 82, (dioxanne; c = 1.4%) o ~ max (methanol) à 236.5 nm, log10 ~ - 4.294 O Absorptions principales en I.R. (pastille de KBr) . 1710, 1660, 1610, 1455, 1140, 980, 950, 930, 900 et 710 cm~l.

10 PARA-FLUOROBENZOYL-21 DIHYDROXY~ ,17~ THIOL-21 DIOXO-3,20 FLUORO-9~_METHYL-16~ PREGNADIENE-1,4 (JO 1013) La reaction est effectuee selon l'Exemple 1, a partir de 13.689 d'acide S-p.fluorothiobenzoïque (87.6 mmoles), de 24.4 - cm3 de solution de methylate de sodium 3.6 M (87.6 mmoles) et de 3.4 9 de dihydroxy-11~,17~ iodo-21 dioxo-3,20 fluoro-9 methyl-16~ pregnadiene-1,4 (6.76 mmoles).
Après reaction et evaporation des solvants le residu est repris par 800 cm3 d'eau et l'insoluble est filtre et seche sous vide - Poids 4.6 9.
~, 20 Le produit brut est purifie par chromatographie sur une colonne de Florisil~ 60 - 100 mesh (80 9). L'elution par l'hexane puis le benzene elimine des produits colores, puis i l'elution par un melange benzène-chloroforme 1-3 (v/v), donne 0.9 9 de residu qui sont cristallises dans un melange ethanol-hexanei Poids 0.45 9, Rdt: 12.5%.
~ - Analyse: C29H32F205S: Calc. % : C 65.64 H 6.08 F 7.16 ;~ S 6.04 Tr. % : C 65.33 H 6.24 F 7.04 S 5.92 '30 - Caracteristiques physiques:
o F 205 - 210C
0 ~ ~DO ~ 265, (dioxanne; c = 0.5%) .

. . . - , . . , . - -1~)54939 o ~ max (methanol) a 236.5 nm, 1glo e = 4.516 O Absorptions principales en I.R. (pastille de KBr) : 1720, 1660, 1598, 1500, 1220, 1200, 1160, 920, 890, 840, 725 et 620 cm~l.
On va maintenant decrire les tests ayant permis de reveler les proprietes pharmacodynamiques des esters des 21-thiol steroïdes selon l'invention.
ACTIVITE ANTIINFLAMMATOIRE
L'activite antiinflammatoire locale, experimentale, des composes presentes a ete evaluee chez le Rat par leur action antiproliferative (antigranulomateuse), et, pour cer-tains d'entre eux, par leur activite antiarthritique et leur activite antiexsudative.
Z a) Activite antiproliferative L'activite antiproliferative (antigranulomateuse) a ete mise en evidence au moyen d'un test dont le principe est le suivant. -~
L'implantation d'un corps etranger dans un organisme produit un ensemble de reactions inflammatoires qui aboutit, au 20 stade chronique, a la formation d'un granulome de defense ~ autour du corps etranger. La proliferation de ce granulome est Z supprimee ou attenuee par les agents antiinflammatoires.
La technique utilisee est voisine de celle decrite par Winter et Porter (J. Am. Pharm. Ass. ~ 9, 515 (1957) chez le Rat.
On a utilise des lots homogenes de 6 Rats mâles adultes, de souche Wistar, repartis au hasard et de poids com-pris entre 180 et 200 g.
Les implants (ou pellets) etaient prepares a partir 30 de rouleaux de coton dentaire; le poids des pellets etait ' compris entre 35 et 40 mg.

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lOS4339 Les produits a tester etaient dissous dans le dimethylsulfoxyde (DMS0) et les solutions obtenues, deposees sur les pellets sous un volume de 0.2 ml/pellet. Le DMS0 ~tait ensuite evapore sous vide pousse a temperature ambiante, l'eli-mination complete du solvant etant contrôlee par pes~e des pellets. Des pellets "temoins", imbibes de solvant seul, etaient traites de la même maniere.
Immediatement avant leur implantation, les pellets etaient imbibes d'une solution antibiotique (0.1 ml d'une solution de penicilline G et de streptomycine titrant 200,000 UI de penicilline G et 0.1 g de streptomycine sulfate par centimètre cube).
Chaque animal a reçu 2 pellets dans le tissu sous-cutane dorsal, de chaque côte de la colonne vertebrale, a l'angle costolombaire, sous anesthesie legere ~ l'ether. Le jour de l'intervention et trois jours apres, les animaux rece-vaient, par voie sous-cutanee, 0.1 ml de la solution d'anti-biotiques dans la region caudale.
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Six jours apres l'implantation, les animaux etaient sacrifies par inhalation de chloroforme et les granulomes pr~-lev~s et peses (poids frais) puis le poids de depart des pellets de coton etait soustrait du poids total.
Certains steroSdes non soufres entraSnant une forte augmentation du catabolisme proteique pouvant influencer la formation du granulome independamment de leur action anti-inflammatoire, les poids des granulomes ont ete exprimes en pourcentage du poids corporel (technique proposee par G.
Dipasquale et A. Meli: J. Pharm. Pharmacol. (1965), 17, 379-382) et l'effet antiproliferatif des differents composes, en pourcentage d'inhibition par rapports aux granulomes temoins.
Les DE50 ont ete calculees en reportant les resultats sur ., _ 1 o , .
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lOS4939 papier semi-logarithmique. Y
. b) Action antiexsudative `' L'activite antiexsudative a ete mise en evidence au moyen d'un test dont le principe est le suivant.
Ce test consiste a creer, sous la peau dorsale du ' Rat, une poche d'air dans laquelle on injecte un produit irri-tant. Rapidement, une reaction inflammatoire appara~t et se j~ manifeste par l'accumulation de liquide dans la poche d'air.
!` L' introduction d'un produit antiinflammatoire dans la ~ ~ -10 poche d'air reduit plus ou moins completement l'accumulation de :
l'exsudat.
Cette etude a ete realisee chez le Rat male de souche Wistar dont le poids au depart etait compris entre 160 et 180 ~ -9, selon la technique decrite par M. FUKUHARA et S. TSURUFUJI ;~
(Biochem. Pharmas. 18, 475-484, 1969). Chaque lot comprenant 10 animaux repartis au hasard.
Vingt-quatre heures avant le debut du test, chaque animal recevait une injection sous-cutanee de 6 ml d'air dans la region dorsale prealablement rasee.
Le lendemain, on a injecte 4 ml de solution de carra-genine a 2% dans le solute physiologique (NaCl à 0.9%), solu-tion maintenue tiede pour eviter la prise en masse.
Une injection de 0.1 ml d'une solution de penicilline et de streptomycine titrant 200,000 UI de penicilline et 0.1 9 de streptomycine par ml ~tait aussitôt apres, pratiquee dans la region caudale par voie sous-cutanee.
Quatre-vingt-seize heures apres l'administration de carragenine, les produits a l'etude ont ete injectes dans la .
poche sous un volume de 0.2 ml, en suspension dans la carboxy-methylcellulose a 0.5%.
Quatre-vingt-seize heures apres cette derniere injec-. - 1 1 -- - - . . . . . ..

~()S4939 tion, les animaux etaient sacrifies et l'exsudat contenu dans la poche, recueilli par une petite incision pratiquee au scalpel et son volume mesure ~ l'eprouvette.
La difference de volume de l'exsudat entre les ani-maux traites et le lot temoin a ete exprimée en pourcentage d'inhibition. Les DE50 ont ete determinees en reportant ces resultats sur papier semi-logarithmique.
c) Activite antiarthritique L'activite antiarthritique a ete mise en evidence au moyen d'un test dont le principe est le suivant.
Ce test a ete realise selon une methode derivee de celle d~crite par Foldi-Borcsok et Coll. (Arzneimittel Forschung 21, 2025-2030, 1971).
L'injection de Kaolin dans l'articulation tibiometa-tarsienne du Rat provoque une inflammation qui se developpe en deux phases successives:
- une phase aiguë caracterisee par un oedeme de l'articulation ~, - une phase chronique lui succedant, caracterisee par '! 20 la proliferation d'un granulome inflammatoire.
L'intensite de la reaction inflammatoire est evaluee d'après la largeur de l'articulation.
On a utilise des Rats mâles de souche Wistar dont le poids au depart etait compris entre 180 et 200 9. Chaque lot ~ comprenait 10 animaux repartis au hasard dont la largeur de ¦ l'articulation tibiometatarsienne droite etait mesuree au 1/20eme de mm près.
Tous les animaux ont reçu 0.05 ml de suspension de kaolin a 10% dans du solute physiologique â 0.9% en injection intra-articulaire dans l'articulation tibiometatarsienne droite.
Dix-huit heures apres cette injection, on mesurait la largeur de l'articulation (inflammation initiale) et on proc~-dait alors a l'injection intra-articulaire des produits a l'etude en suspension dans la carboxymethylcellulose a 0.5%
sous un volume de 0.05 ml. Les animaux appartenant au lot temoin recevaient 0.05 ml du vehicule par la même voie.
~ Vingt-quatre heures apres cette dernière injection, ~ -J~,' on mesurait a nouveau la largeur de l'articulation traitee et ensuite quotidiennement pendant 9 a 10 jours selon l'evGlution des animaux du lot temoin.
10Les variations de largeur des articulations traitees, ~ representant l'activite antiarthritique des produits a l'~tude, :~ ont ete exprimees en pourcentage de l'inflammation initiale selon la formule:
activite antiarthritique au jour N = ~1 ~n x 100 o~: ~1 augmentation de largeur de l'articulation par rapport a sa largeur initiale, lors de l'inflammation initiale.
' ~n ~ augmentation de largeur de l'articulation par rapport a sa largeur initiale, au jour considere.
Les calculs ont ete effectues en utilisant les moyennes des resultats individuels de chaque lot.
~`' EFFETS SYSTEMIQUES
Les effets systemiques des composes selon l'invention ont et~e evalues par l'intermediaire de leur activite thymolyti-que et pour certains d'entre eux on a recherche leur influence ~
eventuelle sur le metabolisme glucidique, l'equilibre hydro-mineral, la croissance ponderale, les glandes endocrines et le tractus genital, et un eventuel effet ulcerogène.
; d) Effet thymolytique Les effets thymolytiques ont ete recherches au moyen 'J' 30 d'un test dont le principe est le suivant.

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~054~39 L'administration repet~e d'un glucocortico~de posse-dant une activite systemique, entrafne une involution des sys-temes de defence de l'organisme dont deux organes appartenant au système reticulo-endothelial, la rate et le thymus, celui-ci etant le plus sensible a cette action, surtout chez l'animal jeune. L'involution thymique est evaluee par pesee.
Les differents produits ont ete injectes quotidienne-ment par voie orale ou sous-cutanee, durant quatre jours, a des jeunes Rats mâles de souche Wistar, dont le poids au depart etait compris entre 45 et 55 9, repartis au hasard par lots de ~, 10.
Les produits a l'etude ont et~ administres sous un volume de 0.2 ml par animal pour les deux voies, en suspension 1` , . .
, dans:
- la carboxymethylcellulose a 0.5% pour la voie sous-cutanee - la gomme arabique a 5% pour la voie orale.

~d Les animaux des lots temoins ont reçu le même volume du vehicule correspondant.
Quatre-vingt-seize heures apres la premiere adminis-tration, les animaux ont ete sacrifies, les thymus preleves et ~, peses immediatement.
Pour chaque animal, le poids du thymus a etê ramene a 100 9 de poids corporel. L'activite thymolytique des produits a l'etude a ensuite ete exprimee en pourcentage de regression du thymus par rapport aux animaux du lot temoin et la DE50 de chaque produit teste, estimee en reportant le pourcentage d'inhibition obtenu pour chaque dose sur un papier semi-'^ logarithmique.
`' 30 e) Action sur le metabolisme glucidique L'action sur le metabolisme glucidique a ete recher-, :
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~OS4939 .
chee au moyen d'un test dont le principe est le suivant.
Les glucocorticoïdes diminuent les besoins peripheri- ~-ques de l'organisme en glucose, ils augmentent aussi la syn-thèse par le foie, de glycogene (neoglycogenese). Leur action sur le metabolisme glucidique se concretise donc:
1) par une augmentation de la glycemie

2) par une surcharge glycogenique du foie et notamment par la persistance du stock hepatique en glycogene chez l'animal inanitie et traite par un glucocorticoide, par opposition a l'animal non traite.
On a utilise pour cette etude des Rats Wistar males dont le poids au depart etait compris entre 150 et 160 9, repartis au hasard par lots de 10.
Les produits à l'etude ont ete administres par voie orale en suspension dans la gomme arabique a 5%, a raison de 0.5 ml pour 100 9, les animaux du lot temoin recevant le même volume de vehicule par la m~me voie.
Les traitements ont ~te effectues quotidiennement pendant 4 jours, une cinquieme administration etant effectuee 7 heures avant le sacrifice des animaux, celui-ci survenant 96 h apres la première administration.
Dix-huit heures avant le sacrifice, tous les animaux etaient places a la diete hydrique, cette duree de je~ne s'etant montree suffisante pour annuler le stock hepatique de ¦ glycogene des animaux du lot temoin.
Imm~diatement apres le sacrifice des animaux, un echantillon de tissu hepatique etait preleve dans le lobe median et pese. Aussitôt apres, il subissait une digestion dans la potasse a 30% au bain-marie bouillant pendant 20 minutes. Le glycogene contenu dans le digestat etait ensuite dose selon la technique decrite par R.O. Stafford, L.E. Barnes - .. . . .

~OS4939 et Coll. (Proc. Soc. Exp. Med. ~ 3, 371-374, 1955).
La teneur des echantillons de foie en glycogene a ete exprimee en g de glycog2ne pour 100 9 de tissu hepatique.
f) Action sur le metabolisme hydromineral ; L'action sur le metabolisme hydromineral a ete rechercheeau moyen d'un test dont le principe est le suivant.
q Les glucocorticoides ne sont pas tous depourvus d'effets mineralocorticoïdes (exemple l'hydrocortisone). Ceux-ci se manifestent par:
- une moindre elimination renale de sodium (retention sodique) - une deperdition de potassium (fuite potassique) ces d deux effets reproduisant l'action de l'aldosterone.
Cette etude a ete realisee chez le Rat Wistar mSle, ~: de poids compris entre 180 et 190 9.
t Les animaux ont ete repartis au hasard par lots de 1 0 .
Les produits a l'~tude ont ete administres par voie orale en suspension dans la gomme arabique a 5%, les animaux du lot temoin recevant le même volume de vehicule dans les memes conditions.
Les traitements ont ete effectues quotidiennement pendant 4 jours.
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~ L'epreuve fonctionnelle renale a ete realisee 90 ; heures apres la premiere administration du produit teste.
Dix-huit heures avant l'epreuve, les animaux ont ete places a la diete compl2te, celle-ci etant ensuite maintenue ~;
jusqu'au terme de l'experience.
Immediatement avant l'epreuve fonctionnelle renale, les animaux ont recu une surcharge orale en solute physiologi-que egale a 5% en volume de leur poids corporel.

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105~939 L'urine emise durant 5 heures a ete recueillie pour chaque animal, dans un tube de polyethylene.
~ La concentration de sodium a ete determinee dans i chaque echantillon par photometrie de flamme; la quantite totale a ensuite ete calculee en fonction du volume urinaire correspondant. Les valeurs obtenues pour chaque lot ont ete alors comparees selon la methode de Student a la quantite de sodium excretee par les animaux du lot temoin.
g) Action sur le metabolisme proteique L'action sur le metabolisme proteique a et~ recher-chee au moyen d'un test dont le principe est le suivant.
L'administration de glucocorticoïdes entra~ne une perturbation du metabolisme proteique, qui se traduit par un catabolisme proteique exagere, d'oa une fonte tissulaire qu'objectivent une inhibition de la croissance ponderale chez l'animal jeune et une deperdition de poids corporel chez l'adulte.
On a utilise pour cette etude, des Rats immatures, de souche Wistar, dont le poids au depart etait compris entre 45 et 55 9, qui ont ete repartis au hasard par groupes de lO.
Les produits a l'etude ont ete administr~s quotidien-nement durant 4 jours. Les animaux ont ete peses quotidienne-ment durant les 4 jours de traitement et 24 h apres la derniere administration.
Les produits testes ont ~te administres soit par voie : orale, soit par voie sous-cutanee, en suspension dans la gomme arabique a 5% (voie orale) ou dans la carboxymethylcellulose a 0.5% (voie sous-cutan~e), les animaux du lot t~moin recevant le même volume de vehicule par la même voie que les animaux trai-tes correspondants.
La variation moyenne du poids corporel, durant les 96 .. . . . . .

~, . . .

lOS4939 heures de traitement a éte calcul~e pour chaque lot d'animaux.
h) Administration a long terme:
. .
L'action sur les glandes endocrines et le tractus genital, un eventuel effet ulcerogène ont ete recherches, ainsi que les effets sur les metabolismes glucidique et proteique, sur l'equilibre hydromineral apres administration a long terme.
~, Le principe des tests utilises est le suivant.
L'administration repetee de corticoïdes peut entra~-ner une inhibition de la secretion des stimulines antihypophy-saires qui se traduit par une aplasie des glandes-cibles (exem-ple capsules surrenales) et indirectement de certains organes qui sont sous la dependance d'une secretion hormonale (exemple tractus genital). Certains corticoides possèdent en outre une action virilisante ou feminisante, susceptible de provoquer des anomalies des fonctions reproductrices.
L'action ulcerogene de certains corticoïdes, après administration repetee, est bien connue, mais le mecanisme de cette action reste encore discute.
Ces etudes ont ete realisees pour certains des ' 20 produits selon l'invention apres administration sub-chronique.
On a utilise des lots de 10 Rats mâles et 10 Rats femelles de souche Sprague-Dawley E.O.P.S. (S.P.F. en anglais) ~ qui ont reçu les produits a l'ebude par voie sous-cutanée, ; quotidiennement pendant 4 semaines.
Les produits etaient administres en suspension dans la carboxymethylcellulose a 0.5% a raison de 0.5 ml pour 100 9 '1 de poids corporel, a trois doses differentes, les animaux du lot temoin recevant le me~me volume de vehicule seul.
Au terme de cette etude ont ete preleves:
1) les capsules surrenales 2) les gonades (testicules ou ovaires) .. .. . . . .

~054939

3) les vesicules seminales ou les trompes uterines .. 4) l'estomac 5) le duodenum 6) certaines portions de l'intestin gr~le, de l'ileon et du côlon.
Les prelevements numerotes 1) - 2) et 3) ont ete aussit~t peses. Tous ont ~te ensuite fixes pour l'examen his-tologique dans le fixateur de Bouin-Hollande.
Afin de confirmer certains resultats ant~rieurs de 10 l'etude pharmacologique a court terme, on a en outre determine pour chaque lot d'animaux:
- l'evolution ponderale et la consommation de nourri-ture durant le traitement - en fin de traitement : la glycemie l'ionogramme serique l'excretion sodique en 5 heures.
RESULTATS DE L'ETUDE PHARMACOLOGIQUE
. On va maintenant decrire les resultats de l'etude # 20 pharmacologique.
1) Activite ant;proliferative Les DE50 obtenues pour chacun des produits presentes et pour les stero-ides de base correspondants, sont ind;ques dans le tableau I suivant:

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:i "~,,, ,, , . ~ . . . ... . .

TABLEAU I
Derives de la dexamethasone .

dexamethasone (base) : DE50 1 mg/pellet dexamethasone (acetate) : DE50 = 0-4 mg/pellet J0 1008 DE50 = l mg/pellet J0 lOlO DE50 = 0-5 mg/pellet :~
J0 1013 DE50 = 0-5 mg/pellet 2) Activite thymolytique . .
Les DE50 obtenues pour chacun des produits presentes et pour les steroSdes de base correspondants, sont indiques dans le tableau II suivant: (DE50 calculees d'apres les doses totales administrees pendant 4 jours par Rat de 50 g environ).
TABLEAU II
.
Derives de la dexamethasone _ Voie orale Voie sous-cutanee dexamethasone (base) 0.013 mg 0.02 mg ~:
dexamethasone (acetate) 0.01 mg 0.009 mg J0 1008 _ 0.8 mg J0 1010 _ 0.4 mg J0 1013 0.8 mg :
.
3) Rapport de l'activite antiinflammatoire locale/
activite thymolytique Le rapport de l'activite antiinflammatoire locale et de l'activite thymolytique est d'autant plus grand que les produits possedent une activite antiinflammatoire faible (DE50 ~levee au numerateur) et une activite thymolytique importante (DE50 faible au denominateur).

.~
_ 20 -` 1054939 Le rapport est indique au tableau III suivant:
TABLEAU III
. Derives de la dexamethasone 50 dCtl Vl t~ antiprol1ferative :~

DE50 activite thymolytique activite thymo- activite thymo-.; lytique deter- lytique deter-minee par voie minee par voie orale sous-cutanee . 10 dexamethasone (base) 80 50 . dexamethasone (acetate) 40 40 ~;

:~ J0 1008 1.25 :~ J0 1010 1.25 J0 1013 - 0.625 ;~

4) Activite antiarthritique :~d A titre d'exemple, on rapporte les resultats obtenus y avec:
j - un derive de la dexamethasone : le J0 1008 .~ ainsi qu'avec les steroides de reference correspondants.
Les chiffres indiqu~s dans le tableau IV ci-apres representent l'activite antiarthritique des produits, evaluee d'apr~s la diminuation de largeur de l'articulation (en pour-centage de l'inflammation initiale), 24 heures apras leur 3~ injection et 120 heures apres elle.
Les differents produits et les st~roides de reference correspondants ont ete administres dans un rapport de doses egal au rapport de leurs poids moleculaires respectifs.
, ~ .

., ., . ~:
.~ - 21 -ios4s3s TABLEAU IV
. . .
.. . ... ~
Dose 24 heures120 heures . .
dexamethasone base 0.1 mg - 78.8 %51 3 %
JO 1008 0.126 mg 64.7 %90.8 %
, POSOLOGIE
,, .
Les produits décrits dans la presente invention sont utilises preferentiellement par voie locale sur la peau, les muqueuses de l'ensemble de l'appareil O.R.L., les muqueuses de l'appareil respiratoire et les muqueuses digestives hautes et 10 basses. -~
La presente est une demande divisionnaire de la demande 201,149 deposee le 29 mai, 1974.
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., DI~ULGATION SUPPLEMENTAIRE

Suivant le procede decrit dans la divulgation princi-pale le d~canoyl-21 dihydroxy-11~,17a thiol-21 dioxo-3,20 fluoro-9a methyl-16a pregnadiène-1,4 a ete prepare comme suit.

DECANOYL-21 DIHYDROXY-11~,17a THIOL-21 DIOXO-3,20 FLUORO-9a METHYL-16a PREGNADIENE-1,4 (JO 1052) En proc~dant comme dans l'exemple 1 mais a partir de 4.39 grammes d'acide S-decanethio~que (23.3 mmoles), 6.1 cm3 de solution de methylate de sodium 3.8 N (23.3 mmoles) et 9.75 grammes de dihydroxy-11~,17a iodo-21 dioxo-3,20 fluoro-9a methyl-16a pregnadiene-1,4 (19.4 mmoles), on obtient, apres traitement et cristallisation a partir du methanol 6.1 grammes de cristaux blancs; rendement - 51.5%.
- Analyse: C32H47F05S: Calc. % : C 68.29 H 8.42 F 3.65 S 6.16 Tr. % : C 68.36 H 8.38 F 5.90 S 3.34 - Caracteristiques physiques:
o F - 145 - 148C
O ~ ~2DO - ~ 87, (dioxanne, c _ 1%) o y max. (methanol) a 237 nm, loglO E - 5.28 o Absorptions principales dans le spectre infra-rouge (pastille KBr) : 2920, 2850, 1660, 1610, 1600 et 895 cm 1.
Les compositions de la presente invention se presen-tent sous les formes usuelles solides ou liquides, par exemple lotion, gouttes pour les oreilles, les yeux ou le nez, rince-bouche, injection, pastille, onguent, creme, suspension orale ou rectale, poudre et autres formes pharmaceutiques.

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Claims (13)

Les réalisations de l'invention au sujet desquelles un droit exclusif de propriété ou de privilège est revendiqué, sont définies comme il suit:

1. Une composition pharmaceutique possédant une activité antiinflammatoire et possédant des effets systémiques réduits comprenant un dérivé de la dexaméthasone correspondant à la formule générale:

.alpha.
dans laquelle R1 désigne un radical alkyle comprenant de 4 à 9 atomes de carbone ou le radical p-fluorophényl, en association avec un excipient pharmaceutique.

2. La composition selon la revendication 1, dans laquelle le dérivé de la dexaméthasone est le pivaloyl-21 dihydroxy-11.beta.,17.alpha. thiol-21 dioxo-3,20 fluoro-9.alpha. méthyl-16.alpha.
pregnadiène-1,4.

3. La composition selon la revendication 1, dans laquelle le dérivé de la dexaméthasone est l'heptanoyl-21 dihydroxy-11.beta.,17.alpha. thiol-21 dioxo-3,20 fluoro-9.alpha. méthyl-16.alpha.
pregnadiène-1,4.

4. La composition selon la revendication 1, dans laquelle le dérivé de la dexaméthasone est le para-fluoro-benzoyl-21 dihydroxy-11.beta.,17.alpha. thiol-21 dioxo-3,20 fluoro-9.alpha.
méthyl-16.alpha. pregnadiène-1,4.

5. La composition selon la revendication 1, 2 ou 3, dans laquelle l'excipient pharmaceutique est adapté à l'appli-cation locale.

6. La composition selon la revendication 4, dans laquelle l'excipient pharmaceutique est adapté à l'application locale.

7. La composition selon la revendication 1, 2 ou 3, dans laquelle l'excipient pharmaceutique est adapté é l'appli-cation aux muqueuses de l'ensemble de l'appareil du nez, des yeux et de la gorge, ou les muqueuses de l'appareil respira-toire, ou les muqueuses digestives hautes et basses.

8. La composition selon la revendication 4, dans laquelle l'excipient pharmaceutique est adapté é l'application aux muqueuses de l'ensemble de l'appareil du nez, des yeux et de la gorge, ou les muqueuses de l'appareil respiratoire, ou les muqueuses digestives hautes et basses.

9. La composition selon la revendication 1, 2 ou 3, dans laquelle l'excipient pharmaceutique est adapté à l'injec-tion intra-articulaire.

10. La composition selon la revendication 4, dans laquelle l'excipient pharmaceutique est adapté à l'injection intra-articulaire.

REVENDICATIONS ETAYEES PAR LA DIVULGATION SUPPLEMENTAIRE

11. Composition pharmaceutique possédant une activité antiinflammatoire et possédant des effets systémiques réduits comprenant le décanoyl-21 dihydroxy-11.beta.,17.alpha. thiol-21 dioxo-3,20 fluoro-9.alpha. méthyl-16.alpha. pregnadiène-1,4 en association avec un excipient pharmaceutique.

12. La composition selon la revendication 11 dans laquelle l'excipient pharmaceutique est adapté à l'application aux muqueuses de l'ensemble de l'appareil du nez, des yeux et de la gorge, ou la muqueuse de l'appareil respiratoire, ou les muqueuses digestives hautes et basses.

13. La composition selon la revendication 12, dans laquelle l'excipient pharmaceutique est adapté à l'injection intra-articulaire.