CH312440A - Procédé de préparation de la relaxine. - Google Patents

Description

  Procédé de     préparation    de la     relaxine:       La présente invention a pour objet     im     procédé de préparation de la     relaxine    à partir  des ovaires d'animaux gravides, particulière  ment des truies. La     relaxine    est considérée  aujourd'hui     connue        une    hormone et certains  chercheurs     estiment    qu'elle constitue une hor  mone de     gestation.    et peut-être la seule hor  mone de ce genre.

   La     relaxine        est        utilisée,    par  exemple, en     gynécologie    pour provoquer     une     dilatation du col de     l'utérus    dans les     accouche-          mente.    Les procédés     utilisés        jusqu'à    ce jour  pour sa production sont relativement peu  satisfaisants soit en raison de leur faible  rendement, soit en raison de la faible     pureté     du produit, ou pour les deux -raisons à la  fois.

   La présente invention     vise    à fournir un  procédé perfectionné     permettant    de préparer  ce produit, dont la.     composition        chimique        est     inconnue, avec des rendements considérable  ment plus     élevés    que ceux que l'on pouvait  atteindre antérieurement et, de     l'avis    de la  titulaire, à un état     sensiblement        plias    pur,  cette dernière     conclusion        découlant;

      de l'ob  servation des     activités    relatives du produit  préparé conformément. à la     présente    inven  tion et {les produits préparés grâce aux pro  cédés déjà connus quant à leur action de  relaxation pelvienne     sur        des    cobayes.  



  La     relaxine    ne se trouve pas à l'état. libre       dans    les     tissus        ovariens,        mais    est liée chi  miquement à     d'autres        constituants        cellulaires,     et, par conséquent, son extraction à l'état pur       lie        réussit        pas    sans autre.

   On a maintenant    trouvé     qu'il    est     possible    d'obtenir la     reaxine          sous        suie    forme relativement pure, en trai  tant des     ovaires    d'animaux gravides par un  acide     dilué,et    en purifiant comme indiqué     ci-          après        l'extrait        ainsi    obtenu.

   Ce traitement par  un acide dilué a pour effet de rompre la  liaison chimique entre la     relaxine    et     les     autres     constituants        cellulaires    et     @de    libérer  la     relaxine.     



  La présente invention a donc pour objet  un procédé de préparation de     relaxine    puri  fiée, ce procédé étant caractérisé en ce qu'on  extrait     des    ovaires     d'animaux    gravides avec  de l'acide dilué, qu'on ajoute du     sel    au mé  lange d'extraction, qu'on sépare les matières       insolubles,    qu'on ajoute     @de    l'acide     triehlor-,     acétique à l'extrait, qu'on récupère le préci  pité qui se forme,

   qu'on extrait la r     elaxine    à       partir    du précipité à     l'aide    d'acétone       aqueuse    et     qu'on        précipite    enfin la     relaxine          purifiée    à partir de l'extrait obtenu en     aug-          mentant    la concentration de     celui-ci    en  acétone.  



  L'invention est     illustrée    par l'exemple       suivant:            Exemple:     On     pile    en -une poudre fine 5,7 kg       d'ovaires        congelés    de     truies        gravides    et on     les     extrait avec 22,8 litres d'acide chlorhydrique  dilué,

   préparé .par addition de 684     culs     d'acide     chlorhydrique    concentré .à une quan  tité d'eau     distillée        suffisante    pour     obtenir    le  volume     désiré.    On agite le mélange pendant      24     heures,        puis    on ajoute 0,912 kg de chlo  rure de     sodiiun    et on continue l'agitation pen  dant 30'     minutes.    On élimine les matières       insolubles    par filtration. Le filtrat clair oc  cupe un volume d'environ 22 litres.  



  On peut extraire .et filtrer à nouveau de  la même manière le résidu     insoluble,        puis     réunir les     deiLx        filtrats        clairs    et rejeter le  résidu, pour obtenir     LLn    rendement amélioré.  



  On ajoute 1,1 kg d'acide     triehloraeétique     au filtrat clair. Il     @se    forme     Lui    précipité-qui  contient 1a     relaxine        brute.    On recueille ce pré  cipité par centrifugation, son poids     est    de  476 g.

   On agite ce précipité avec 1900     cms          d'un        mélange        contenant        80%        en        vol-Lime     d'acétone et.     201/a    en volume.     d'eaLi,,        pendant     30 minutes. On sépare le résidu par centri  fugation. La liqueur     clarifiée    présente un     vo-          lame    de<B>1580</B>     cln3.     



  On reprend ce résidu dans 1,9 litre     d'une     solution contenant     701/a    en volume d'acétone,  19g d'acide     trichloracétique,    28,5     cinS    d'acide       chlorhv#drique        concentré    et amenée au vo  lume     indiqué    avec de l'eau     distillée.    L'acide       trichloracétique    peut être     supprimé,

      mais il  apparaît nécessaire d'ajouter L'acide chlor  hydrique en vue d'obtenir     1e    rendement     maxi-          miun.    On prolonge cette extraction pendant  30     minutes    et on     élimine    le     résidu        insoluble     par centrifugation. On     obtient.        ainsi    1,82 litre  d'extrait clarifié.  



  On     réunit    les liqueurs     claires.        obtenues     grâce à la première et à la seconde extraction  du précipité et on obtient. ainsi un -volume  total de 3100 cors, qu'on ajoute à<B>13,6</B>     litres     d'acétone     aubydre.        Il    se forme un précipité  blanc de     relaxine,    que l'on recueille pas  centrifugation.

   Après séchage, on obtient 8 g  de poudre. -    Pour préparer une solution stérile de       relaxine,    on     détermine    la teneur en cendres de  cette poudre et on en dissout.     Luie    quantité  suffisante dans de l'eau distillée pour obtenir  une solution contenant 0,7 à     1,01/o    de sels mi  néraux. On règle le pli de la solution à  environ 7.

   Parfois, il se forme un précipité  lorsqu'on procède à ce réglage; dans ce cas,  on peut l'éliminer par     centrifugation,    du fait  qu'il ne renferme pas de     relaxine.    On filtre  alors cette solution à travers un filtre en verre       fritté    et, enfin, à travers un filtre dont la po  rosité est égale ou inférieure à 1,2 micron. Si  l'on effectue cette opération     clans    des condi  tions de     stérilité        parfaites,    on obtient une       solution    stable et stérile de     relaxine.  

Claims (1)

1. REVENDICATION: Procédé de préparation de relaxine puri fiée., caractérisé en ce qu'on extrait des ovaires d'animaux gravides âvec de l'acide dilué, qu'on ajoute du sel au mélange d'extraction, qu'on sépare les matières insolubles, qu'on ajoute de l'acide trichloracétique à l'extrait, qu'on récupère. le précipité qui se forme, qu'on extrait la relaxine à partir du précipité à l'aide d'acétone aqueuse et qu'on précipite enfin la relaxine purifiée à partir de l'extrait.

   obtenu en augmentant la concentration de celui-ci en acétone. SOUS-REVENDIC ATION Procédé selon la. revendication, caracté risé en ce qu'on extrait le résidu provenant de l'extraction à l'aide d'acétone aqueuse avec de l'acétone aqueuse acidifiée, et qu'on récu père une quantité supplémentaire de relaxine à partir de l'extrait résultant en augmentant sa concentration: en acétone.