CH631179A5

CH631179A5 - Tetrahydro-4,5,6,7 thieno (2,3-c) et (3,2-c) pyridines et leur procede de preparation.

Info

Publication number: CH631179A5
Application number: CH7178A
Authority: CH
Inventors: Jean-Pierre Maffrand
Original assignee: Parcor
Priority date: 1977-01-07
Filing date: 1978-01-04
Publication date: 1982-07-30
Also published as: IL53708A; AT357532B; PH12856A; PT67501A; FI62308C; GR66061B; GB1574394A; NL7800034A; LU78816A1; DK7578A; AU3223878A; HU175645B; JPS5387394A; SU683625A3; ATA6178A; ES465683A1; DD133673A5; DK147826B; CA1087187A; SE421922B

Description

L'invention est relative à de nouvelles tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(2,3-c)- et (3,2-c)-pyridines, à un procédé pour les préparer et à une io composition thérapeutique contenant une telle pyridine.

Les nouveaux dérivés suivant l'invention répondent aux formules:

COOR

(le) ou

COOR

©et

(II)

COOR

4 (Ile)

COOR

dans chacune desquelles R3 = H et R4 # H.

11. Procédé suivant la revendication 10, caractérisé en ce que l'estérification est effectuée en présence de chlorure d'hydrogène gazeux.

12. Procédé de préparation de dérivés suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'on prépare un dérivé de formule (le) ou (Ile) selon le procédé de la revendication 10 et qu'on fait réagir ce dérivé avec un halogénure de formule R3X, dans laquelle R3 est tel que défini pour les formules (I) et (II), à l'exception de l'hydrogène, et X est un halogène, obtenant ainsi les dérivés de formule:

COOR

(Id) ou dans lesquelles

30 R1 représente l'hydrogène ou un halogène, notamment le chlore, R2 représente l'hydrogène ou un groupe hydroxy,

R3 et R4, qui peuvent être identiques ou différents, représentent chacun l'hydrogène ou un radical alcoyle de 1 à 6 atomes de carbone ou phénylalcoyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone dans le groupe 35 alcoyle, éventuellement substitué sur le noyau phényle par au moins un (notamment de 1 à 3) atome d'halogène ou un groupe alcoyle de 1 à 6 atomes de carbone, alcoxy de 1 à 6 atomes de carbone, hydroxy, nitro, cyano ou trifluorométhyle.

L'invention comprend aussi les sels d'addition avec des acides 40 minéraux ou organiques des dérivés de formule (I) ou (II).

Ces composés peuvent être utilisés comme médicaments ou comme intermédiaires de synthèses.

On a déjà décrit des dérivés de tétrahydro-4,5,6,7-thiénopyridines dans les brevets français Nos 2215948 et 2312247, mais aucun de ces 45 documents ne décrit de tels dérivés comportant un groupe carboxyli-que COOR4 en position ortho de l'atome d'azote du cycle pyridinique.

L'invention a également pour objet un procédé de préparation des composés de formule (I) ou (II), caractérisé en ce qu'on condense 50 avec du formaldéhyde en solution aqueuse, en présence d'un acide minéral fort, un composé de formule:

(Ild)

COOH

(III) ou

COOR

NH,

60

dans chacune desquelles R3 ^ R4 ^H.

13. Composition thérapeutique, caractérisée en ce qu'elle contient, à titre de principe actif, un dérivé de formule (I) ou (II) ou un sel d'addition avec un acide pharmaceutiquement acceptable de celui-ci, et un véhicule pharmaceutiquement acceptable.

14. Composition suivant la revendication 13, caractérisée en ce qu'elle est présentée sous une forme appropriée à l'administration orale, parentérale ou rectale.

(IV)

COOH

631179

4

dans chacune desquelles R1 et R2 ont les significations données à propos des formules (I) et (II), obtenant ainsi un dérivé de formule:

>\.COOH

(Ile)

(la) ou dans chacune desquelles R3 ^ H et R4 = H.

Ces derniers dérivés peuvent à leur tour être estérifiés par io chauffage à reflux dans un alcool de formule R4OH en présence de chlorure d'hydrogène gazeux, obtenant ainsi les dérivés de formule:

COOH

(lia)

dans chacune desquelles R3 = R4 = H.

Cette réaction, dans laquelle l'acide minéral est notamment l'acide chlorhydrique ou l'acide sulfurique, peut généralement être effectuée à température ambiante mais, dans certains cas, il peut être nécessaire de chauffer légèrement le milieu réactionnel, à 50° C par exemple.

Les dérivés (la) et (lia) peuvent être mis à réagir avec un halogénure de formule R3X dans laquelle R3 est tel que défini pour les formules (I) et (II), à l'exception de l'hydrogène, et X est un halogène, obtenant ainsi un dérivé de formule:

COOR

(Id) ou

(Ild)

COOR

COOR-

dans chacune desquelles R3 # R4 ^ H.

30 Suivant une variante, on peut estérifier directement les dérivés de formule (la) ou (Ib) par chauffage à reflux dans l'alcool R4OH précité en présence de chlorure d'hydrogène gazeux, obtenant ainsi (Ib) ou des dérivés de formule:

35

(IIb)

COOR-

dans chacune desquelles R3 = R4 ^ H.

Cette réaction, dans laquelle X est de préférence le chlore, le brome ou l'iode, est effectuée avantageusement dans un solvant inerte, tel qu'un alcanol inférieur, par exemple l'éthanol, ou le diméthylformamide, en présence d'un agent de fixation des acides, tel qu'un carbonate de métal alcalin, par exemple le carbonate de potassium; la température de réaction peut généralement être comprise entre 60° C et la température d'ébullition du solvant utilisé. Lorsque X est le chlore ou le brome, on peut avantageusement ajouter une quantité catalytique ou stœchiométrique d'un iodure de métal alcalin, tel que l'iodure de potassium.

Les composés (Ib) et (IIb) obtenus peuvent être soumis à une hydrolyse basique par chauffage à reflux dans un solvant alcanolique, tel que le méthanol ou l'éthanol, en présence d'un hydroxyde de métal alcalin tel que l'hydroxyde de sodium, obtenant ainsi un dérivé de formule:

COOR

(le) ou

COOR

(Ile)

.COOH

f (le) ou dans chacune desquelles R3 = H et R4 # H.

so Les dérivés de formule (le) ou (Ile) à leur tour peuvent être condensés avec l'halogénure de formule R3X précité, obtenant ainsi les dérivés de formule (Id) ou (Ild).

Les anilines de formule (III) ou (IV) (R1 = Hou Hai; R2 = H) et les sérines de formule (III) ou (IV) (R1 = H ou Hai; R2 = OH) 55 nécessaires au procédé de l'invention peuvent être obtenues comme suit:

— la p-(thiényl-2)alanine est un produit commercial qui peut être préparé selon K. Dittmer, W. Herz et J.S. Chambers, « J. Biol. Chem.» (1946), 166,541;

60 — la p-(thiényl-2)sérine peut être préparée selon G. Weitnauer, «Gazz. Chim. Ital.» (1951), 81, 162;

— la (3-(chloro-5-thiényl-2)alanine peut être préparée selon F. Crowe et F.F. Nord, «J. Org. Chem.» (1950), 15, 688;

— la ß-(chloro-5-tl^nyl-2^rine peut être préparée à partir du 65 chloro-5-thiénaldéhyde-2 en adaptant le procédé de G. Weitnauer cité plus haut: cristaux blancs, F(déc.) = 200-205°, rendement: 83% ;

— la 3-(thiényl-3)alanine peut être préparée selon J. Shapira, R. ShapiraetK. Dittmer, «J. Am. Chem. Soc.» (1953), 75,3655;

— la (3-(thiényl-3)sérine peut être préparée à partir du thiénaldéhyde-3 en adaptant le procédé de G. Weitnauer cité plus haut. Chlorhydrate: cristaux blancs, F = 241°.

Les autres dérivés de formule (III) et (IV) peuvent être préparés par l'un des procédés précités.

Toutes les sérines utilisées possédaient la configuration thréo et, ensuite, les thiénopyridines de formule (I) et (II), dans lesquelles R2 = OH, qui en ont dérivé ont présenté la configuration eis.

Les sels d'addition avec des acides minéraux (chlorhydrique, sulfurique, etc.) ou organique (maléique, etc.) peuvent être préparés par des procédés bien connus des spécialistes.

Les exemples non limitatifs suivants sont donnés à titre d'illustration de la préparation des composés suivant l'invention:

Exemple 1:

Carboxy-6-hydroxy-7-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)-pyridine (Formule lia; R1 = H; R2 = OH; R3 = R4 = H)

On agite à température ambiante pendant 72 h, sous atmosphère d'azote, une solution de 205 g (1 mol) de p-(thiényl-2)sérine dans 1200 cm3 d'une solution aqueuse de formol à 35% et 1100 cm3 d'acide sulfurique 0,5N. Le précipité beige clair obtenu est lavé modérément à l'eau et séché sous vide: F>260° (102,5 g). On ajoute au filtrat la quantité de lessive de soude nécessaire pour neutraliser exactement tout l'acide sulfurique utilisé dans la réaction. Le nouveau précipité obtenu est filtré, lavé avec un peu d'eau puis à l'éthanol et l'éther. On obtient après séchage sous vide un deuxième lot (43,5 g) du produit attendu. Rendement global: 73%.

Exemple 2:

Carboxy-6tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine (Formule IIa; R1 = R2 = R3 = R4 = H)

Obtenue selon le mode opératoire de l'exemple 1 à partir de ß-(thiényl-2)alanine.

Cristaux blancs: F>260° (HzO); rendement: 76%.

Exemple 3:

Carboxy-6-chloro-2-hydroxy-7-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine

(Formule IIa; R1 = Cl; R2 = OH; R3 = R4 = H)

Obtenue selon le mode opératoire de l'exemple 1 à partir de ß-(chloro-5-thiényl-2)sérine.

Cristaux blancs : F > 260° ; rendement 43 %.

Exemple 4:

Carboxy-6-chloro-2-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine (Formule IIa; R1 = Cl; R2 = R3 = R4 = H)

Obtenue selon le mode opératoire de l'exemple 1 à partir de ß-(chIoro-5-thiényl-2)alanine.

Cristaux blancs: F>260°; rendement: 75%.

Exemple 5:

Carboxy-5-hydroxy-4-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(2,3-c)pyridine (Formule la; R1 = H; R2 = OH; R3 = R4 = H)

Obtenue selon le mode opératoire de l'exemple 1 à partir de ß-(thiényl-3)sérine.

Cristaux blancs: F>260°; rendement: 75%.

Exemple 6:

Carboxy-5-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(2,3-c)pyridine (Formule la; R1 = R2 = R3 = R4 = H)

Obtenue selon le mode opératoire de l'exemple 1 à partir de ß-(thiényl-3)alanine.

Chlorhydrate: cristaux blancs: F>260°; rendement: 87%.

631179

Exemple 7:

Benzyl-5-benzyloxycarbonyl-6-hydroxy-7-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine

(Formule IIb; R1 = H; R2 = OH; R3 = R4 = benzyle)

On chauffe à 80° pendant 30 min un mélange de 20,5 g (0,103 mol) de carboxy-6-hydroxy-7-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine de l'exemple 1,28,4 g (0,206 mol) de carbonate de potassium et 200 mg d'iodure de potassium dans 150 cm3 de diméthylformamide. On ajoute 26,07 g (0,206 mol) de chlorure de benzyle et agite ä 100° C pendant 4 h. Après refroidissement, on filtre les sels minéraux, lave à l'éthanol, évapore à sec le filtrat et dissout le résidu dans de l'éther. La phase organique est lavée à l'eau, séchée sur sulfate de sodium et évaporée à sec. L'huile obtenue est transformée en chlorhydrate que l'on recristallise deux fois dans l'éthanol.

Cristaux blancs: F = 175-185°; rendement: 52%.

Exemple 8:

o-Chlorobenzyl-5-o-chlorobenzyloxycarbonyl-6-hydroxy-7-tétra-hydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine

(Formule IIb; R1 = H; R2 = OH; R3 = R4 = o-chlorobenzyle)

Obtenue selon un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 7.

Chlorhydrate: cristaux blancs: F = 160-180° (isopropanol); rendement: 48,5%.

Exemple 9:

o-Méthylbenzyl-5-o-méthylbenzyloxycarbonyl-6hydroxy-7 tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine

(Formule IIb; R1 = H; R2 = OH; R3 = R4 = o-méthylbenzyle)

Obtenue selon un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 7.

Chlorhydrate: cristaux blancs: F = 180-190° (isopropanol/ éthanol); rendement: 48%.

Exemple 10:

Hydroxy-4 o-fluorobenzyloxycarbonyl-5-o-fluorobenzyl-6-tétra-hydro-4,5,6,7-thiéno-(2,3-c)pyridine

(Formule Ib; R1 = H; R2 = OH; R3 = R4 = o-fluorobenzyle)

Obtenue selon un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 7 à partir de hydroxy-4-carboxy-5-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(2,3-c)pyridine (exemple 5) et de chlorure d'o-fluorobenzyle.

Chlorhydrate: cristaux jaune pâle, F = 175° (éthanol); rendement: 57%.

Exemple 11:

Hydroxy-4-benzyloxycarbonyl-5-benzyl-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(2,3-c)pyridine

(Formule Ib; R1 = H; R2 = OH; R3 = R4 = benzyle)

Obtenue selon un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 10.

Chlorhydrate: cristaux blancs: F = 160-165° (éthanol/éther diisopropylique); rendement: 47%.

Exemple 12:

Benzyl-5-benzyloxycarbonyl-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine

(Formule IIb; R1 = R2 = H; R3 = R4 = benzyle)

Obtenue selon un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 7 à partir de carboxy-5-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine de l'exemple 2 et de chlorure de benzyle.

Chlorhydrate: cristaux blancs: F = 135-140° (isopropanol); rendement: 65%.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

631179

Exemple 13:

o-Chlorobenzyl-5-o-chlorobenzyloxycarbonyl-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine

(Formule IIb; R1 = R2 = H; R3 = R4 = o-chlorobenzyle) Obtenue selon un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 12.

Chlorhydrate: cristaux blancs: F = 120-130° (éthanol/isopropa-nol); rendement: 20%.

Exemple 14:

p-Méthoxybenzyl-5-p-méthoxybenzyloxycarbonyl-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine

(Formule IIb; R1 = R2 = H; R3 = R4 = p-méthoxybenzyle)

Obtenue selon un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 12.

Base: cristaux blancs: F = 72° (isopropanol); rendement: 31%. Exemple 15:

p-Nitrobenzyl-5-p-nitrobenzyloxycarbonyl-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine

(Formule IIb; R1 = R2 = H; R3 = R4 = p-nitrobenzyle)

Obtenue selon un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 12.

Base: cristaux beiges: F = 122° (acétonitrile); rendement: 51,5%. Exemple 16:

o-Cyanobenzyl-5-o-cyanobenzyloxycarbonyl-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine

(Formule IIb; R1 = R2 = H; R3 = R4 = o-cyanobenzyle)

Obtenue selon un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 12.

Base: cristaux blancs: F = 107° (isopropanol/acétonitrile); rendement: 44%.

Exemple 17:

(Triméthoxy-3,4,5-benzyl)-5-(triméthoxy-3,4,5-benzyI-oxycarbo-nyl-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine

(Formule IIb; R1 = R2 = H; R3 = R4 = triméthoxy-3,4,5-benzyle)

Obtenue selon un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 12.

Chlorhydrate: cristaux blancs: F = 150-170° (éthanol); rendement: 12%.

Exemple 18:

Butyl-5-butoxycarbonyI-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyri-dine

(Formule IIb; R1 = R2 = H; R3 = R4 = butyle)

Obtenue selon un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 12.

Chlorhydrate: cristaux blancs: F = 141° (isopropanol/éther diisopropylique); rendement: 46%.

Exemple 19:

Phénéthyl-5-phénéthyloxycarbonyl-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine

(Formule IIb; R1 = R2 = H; R3 = R4 = phénéthyle)

Obtenue selon un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 12.

Oxalate: cristaux blancs: F = 160° (éthanol); rendement: 17%. Exemple 20 :

Benzyloxycarbonyl-5-benzyl-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(2,3-c)pyridine

(Formule Ib; R1 = R2 = H; R3 = R4 = benzyle)

Obtenue selon un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 7 à partir de carboxy-5-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(2,3-c)pyridine (exemple 6) et de chlorure de benzyle.

Chlorhydrate: cristaux jaune pâle: F = 135-140° (isopropanol); rendement: 53%.

Exemple 21 :

Chloro-2-benzyl-5-benzyIoxycarbonyl-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine

(Formule IIb; R1 = CI; R2 = H; R3 = R4 = benzyle)

Obtenue selon un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 7 à partir de chloro-2-carboxy-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine (exemple 4) et de chlorure de benzyle.

Chlorhydrate: cristaux beiges: F = 140-160°; rendement: 56%.

Exemple 22

Benzyl-5-carboxy-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine (Formule Ile; R1 = R2 = H; R3 = benzyle; R4 = H)

On chauffe à reflux pendant 2 h une solution de 8 g (0,02 mol) de chlorhydrate de benzyl-5-benzyloxycarbonyl-6-tétrahydro-4,5,6,8-thiéno-(3,2-c)pyridine de l'exemple 12 et 7 cm3 de lessive de soude (d = 1,38) dans 70 cm3 d'éthanol. Le précipité obtenu est dissous par addition d'acide acétique glacial. Après évaporation à sec, le résidu est repris par du chlorure de méthylène et de l'eau. La phase organique est lavée à l'eau, séchée sur sulfate de sodium et évaporée à sec. Le résidu est recristallisé deux fois dans le diméthylformamide. Cristaux blancs: F = 230°; rendement: 69,5%.

Exemple 23:

o-Chlorobenzyl-5-carboxy-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)py-ridine

(Formule Iïc; R1 = R2 = H; R3 = o-chlorobenzyle; R4 = H)

Obtenue selon un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 22.

Chlorhydrate: cristaux blancs: F = 175-180° (éthanol); rendement: 55,5%.

Exemple 24:

(Triméthoxy-3,4,5-benzyl)-5-carboxy-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine

(Formule Ile; R1 = R2 = H; R3 = triméthoxy-3,4,5 benzyl; R4 = H)

Obtenue par un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 22. Base: cristaux beiges: F = 199° (isopropanol/éther diisopropylique); rendement: 57%.

Exemple 25:

Méthyl-5-carboxy-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine (Formule Ile; R» = R2 = H; R3 = méthyle; R4 = H)

Obtenue par un mode opératoire analogue à celui de l'exemple

22.

Chlorhydrate: cristaux blancs: F = 180-200°; rendement: 79%. Exemple 26:

Benzyl-5-carboxy-6-chloro-2-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)py-ridine

(Formule Ile; R1 = Cl; R2 = H ; R3 = benzyle; R4 = H)

Obtenue par un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 22.

Base: cristaux beiges: F = 205°, rendement: 45%.

Exemple 27:

Chloro-2-benzyl-5-éthoxycarbonyl-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine

(Formule Ild; R1 = Cl; R2 = H; R3 = benzyle; R4 = éthyle)

6

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

7

631179

On fait barboter un léger courant de chlorure d'hydrogène dans une solution chauffée à reflux de 450 mg ( 1,46 mol) de chloro-2-benzyl-5-carboxy-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridinede l'exemple 26 dans 5 cm3 d'éthanol absolu. Après 90 min de chauffage, on dissout le précipité obtenu par addition d'eau, basifie à l'ammoniaque et extrait à l'éther. Les extraits éthérés sont lavés à l'eau, séchés sur sulfate de sodium et évaporés à sec. L'huile obtenue est transformée en chlorhydrate que l'on recristallise dans l'isopropanol.

Cristaux beiges, F = 130-140°; rendement: 46%.

Exemple 28:

Méthyl-5-éthoxycarbonyl-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)py-ridine

(Formule Ild; R1 = H; R2 = H; R3 = méthyle; R4 = éthyle)

Obtenue par un mode opératoire analogue à celui de l'exemple 27 à partir de méthyl-5-carboxy-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine de l'exemple 25.

Base: huile jaune pâle: Ebj = 105°; rendement 15%.

Exemple 29:

Chloro-2-méthoxycarbonyl-5-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine

(Formule Ile; R1 = Cl; R2 = H; R3 = H; R4 = méthyle)

On fait barboter un léger courant de gaz chlorhydrique dans une suspension chauffée à reflux de 4,5 g de chloro-2-carboxy-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine dans 50 cm3 de méthanol. Après 1 h de chauffage, on élimine un léger insoluble par filtration et on évapore à sec le filtrat. Le résidu fournit, après recristallisation dans l'isopropanol, des cristaux blanc sale; F. pâteux = 190-200°; rendement: 52%.

Exemple 30:

Chloro-2-o-chlorobenzyl-5-méthoxycarbonyl-6-tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(3,2-c)pyridine

(Formule Ild; R1 = Cl; R2 = H; R3 = o-chlorobenzyle; R4 = méthyle)

On chauffe à 100° pendant 21 h un mélange de 2,1 g (7,86 mmol) de chlorhydrate de chloro-2-méthoxycarbonyl-6-tétrahydro-4,5,6,8-thiéno(3,2-c)pyridine de l'exemple 29,1,27 g (7,86 mmol) de chlorure d'o-chlorobenzyle et 1,1 g (7,86 mmol) de carbonate de potassium dans 20 cm3 de diméthylformamide. Après refroidissement, on filtre les sels minéraux, lave à l'éthanol, évapore à sec le filtrat et dissout le résidu dans de l'éther. La phase organique est lavée à l'eau, séchée sur sulfate de sodium et évaporée à sec. L'huile résiduelle est transformée en chlorhydrate dont la recristallisation dans un mélange isopropanol/éther diisopropylique fournit des cristaux blancs: F = 125-130°; rendement 30%.

Les résultats des essais pharmacologiques et toxicologiques qui sont rapportés ci-dessous mettent en évidence les propriétés des dérivés de l'invention, notamment une faible toxicité et une excellente tolérance ainsi que des activités inhibitrices de l'agrégation plaquet-taire, antisludge et antithrombotique.

L'invention a donc encore pour objet une composition thérapeutique présentant en particulier des activités inhibitrices de l'agrégation plaquettaire, antisludge et antithrombotique, caractérisée en ce qu'elle contient, à titre de principe actif, un dérivé de formule (I) ou (II) ou un sel d'addition avec un acide thérapeutiquement acceptable de celui-ci, et un véhicule pharmaceutiquement acceptable.

I Etude toxicologique

Les composés de l'invention bénéficient d'une excellente tolérance et d'une faible toxicité. Ainsi, la DLs0/24 h/kg d'animal est par exemple de 118 mg pour le dérivé de l'exemple 1, de 235 mg pour le dérivé de l'exemple 2, de 180 mg pour le dérivé de l'exemple 23 et de 325 mg pour le dérivé de l'exemple 25.

En outre, les essais effectués sur la toxicité aiguë, chronique, subchronique et retardée, chez diverses espèces animales, n'ont mis en évidence aucune réaction locale ou générale, aucune perturbation dans les contrôles biologiques régulièrement effectués, aucune anomalie dans les examens microscopiques et macroscopiques chez les animaux sacrifiés et autopsiés en fin d'expérimentation.

II Etude pharmacologique

1. Action inhibitrice de l'agrégation plaquettaire

Chez des rats de souche Wistar, on effectue un prélèvement sanguin dans la veine jugulaire. A partir de ce sang citraté et après centrifugation, on reconstitue un plasma contenant 6000 000 + 20 000 plaquettes par millimètre cube, qui servira dans toutes les mesures d'agrégation.

a) Mesure de l'agrégation plaquettaire à l'ADP

On place 0,4 ml de plasma dans un tube siliconé pourvu d'une barre aimantée elle-même siliconée. Le tube est introduit dans un agrégomètre couplé à un appareil permettant d'enregistrer les variations de densité optique. Lorsque la transmission de la lumière a atteint une valeur stable, on introduit dans le tube 0,5 ml d'une solution contenant 10 jj.M d'ADP (adénosine-diphosphate).

L'agrégation des plaquettes provoque alors une augmentation de la transmission lumineuse suivie d'une diminution consécutive à la phase de désagrégation.

La variation maximale de densité optique ainsi déterminée caractérise l'intensité de l'agrégation.

b) Mesure de l'agrégation plaquettaire au collagène

La solution d'ADP est remplacée par une solution de collagène (extrait de tendons bovins).

c) Résultats

Différents lots de 20 rats sont utilisés, chaque lot recevant un dérivé à tester par la voie orale, à la dose de 100 mg/kg. Les résultats les plus significatifs obtenus, au cours de ces 2 essais, sont rapportés dans le tableau I qui indique le pourcentage d'inhibition de l'agrégation plaquettaire obtenu, par rapport au témoin, 3 h après le traitement.

Tableau I

Traitement Dérivé de l'exemple

Pourcentage d'inhibition

ADP

Collagène

1

63,8

95,8

4

63,1

91,3

5

62,3

90,5

8

61,8

90,4

10

62,2

92,1

11

60,5

91,6

12

61,6

90,8

13

64,4

96,1

17

61,2

92,0

20

60,4

91,5

23

63,9

95,2

25

61,6

92,4

28

60,8

90,2

29

62,7

92,7

30

62,4

93,0

2. Activité antisludge

Cette activité a été étudiée in vitro et in vivo chez le rat.

A — Etude in vitro

Des globules de rat lavés trois fois sont dilués au 1/250 dans du sérum physiologique. Dans chacun des 5 tubes sont placés 0,6 ml de cette suspension et 0,2 ml de sérum physiologique. Chaque tube recevra ensuite respectivement une quantité de 0,25,100 et 200 ug du dérivé à tester contenu dans 0,2 ml de solution. Après une incubation

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

631179

8

de 1 h à 37°, 0,2 ml de solution à 125 j^g/ml de sulfate de protamine est ajouté, suivie d'une nouvelle incubation de Vï h à 37°. Les globules de chaque tube sont ensuite examinés à la cellule de Mallasez et on note le pourcentage de globules libres et celui des amas formés par 2,3,4,5, etc., globules. Les résultats de ce traitement préventif figurent dans le tableau II.

Ce test montre à l'évidence l'activité antisludge des dérivés de l'invention.

L'expérience a été répétée selon un protocole curatif; les globules

* (GR) = globules rouges

B — Etude in vivo

Des rats Wistar de 200 à 300 g sont anesthésiés au pentobarbital (2,5 mg/kg i.p.). Après laparotomie centrale, une anse intestinale avec son mésentère est extériorisée et placée dans une solution de Ringer à 37°, contenue dans une boîte de Pétri ouverte sur un microscope inversé (25 x 10). L'examen des artères mésentériques permet de constater une circulation normale. Après administration de 25 mg/kg de sulfate de protamine par injection directe dans la veine jugulaire, un sludge s'installe avec stases dans plusieurs artérioles.

0,2 ml d'une solution contenant soit 1 mg/ml, soit 0,1 mg/ml du dérivé à tester est alors injecté dans la veine jugulaire. Les témoins ne reçoivent que 0,2 ml de sérum physiologique.

Les résultats moyens observés sur 10 animaux furent les suivants:

A l'injection de 1 mg[ml de dérivé à tester on observe:

— une disparition en 4-8 min du sludge punctiforme avec rouges furent d'abord mis en contact avec le sulfate de protamine, puis, après une incubation de Vi h, 0,2 ml contenant 25 [ig du dérivé à tester furent ajoutés, opération qui fut suivie d'une nouvelle incubation de 1 h à 37°. Les résultats suivants ont été obtenus, le s pourcentage des agglomérats en fonction de leur taille étant consigné dans le tableau III.

On peut donc conclure à une haute signification de la différence entre les valeurs trouvées pour les globules libres de l'essai témoin et celui effectué avec les dérivés suivant l'invention.

réapparition d'une circulation normale du flux plasmatique pariétal et du flux globulaire axial;

— maintien des images du sludge punctiforme chez les témoins.

A l'injection de 0,1 mg/ml de dérivé à tester, on observe:

— la disparition dans les mêmes limites de temps des images punctiformes, le courant normal se rétablit cependant moins rapidement:

— maintien du sludge chez les témoins.

Il apparaît donc que les dérivés de l'invention sont doués d'une forte activité antisludge, que les essais aient été pratiqués in vitro ou in vivo.

3. Propriétés antithrombotiques

La technique utilisée est fondée sur celle décrite par Friedman [(«Amer. J. Med. Sci.» 253,83 (1967)]. Après anesthésie à l'éther et laparotomie médiane de rats femelles de souche Wistar pesant entre 200 et 300 g, la veine cave inférieure est mise à nu. Une spirale

Tableau II

Taille des agglomérats

Témoins

Dérivé de l'ex. 1

Dérivé de l'ex. 13

Dérivé de l'ex. 23

Dérivé de l'ex. 27

25 (ig

50

(ig

100

(ig

200

H-g

25 (ig

50

V%

100

(ig

200 (ig

25 (ig

50 (ig

100

(ig

200

(ig

25 (ig

50

(ig

100

(ig

200

(ig

1*(G.R. libres)

33

64

69

86

89

65

68

87

90

60

65

78

83

62

66

75

84

2

22

25

24

7

9

26

23

8

9

21

25

14

11

16

20

15

9

3

13

11

5

4

2

9

5

3

1

16

6

5

4

17

10

7

5

4

6

0

2

3

0

4

2

0

3

4

1

2

5

4

3

2

5

0

6

3

0

Ö

0

7

5

0

8

4

0

9

2

0

10

4

0

11

2

0

12

1

0

13

0

Tableau III

Taille des agglomérats

Témoins

Dérivé de l'exemple

1

5

13

15

23

26

27

29

1 (globules libres)

36

84

86

87

85

86

87

2

22

12

11

9

11

10

12

10

9

3

9

3

5

2

4

2

3

2

4

6

1

0

1

0

1

5

7

0

6

9

0

7

6

0

8

3

0

9

1

0

10

1

0

NB: 25 rj.g de chaque produit ont été utilisés.

9

métallique aiguisée, longue de 1,8 cm, est introduite dans la lumière du vaisseau au niveau de la bifurcation rénale et vissée vers les veines iliaques, 5 h plus tard l'animal est à nouveau anesthésié à l'éther. On ligature la veine cave inférieure en amont et en aval de la spirale ainsi que les collatérales comprises entre ces deux ligatures. La spirale, 5 avec le thrombus qu'elle retient, est prélevée après ouverture minutieuse de la paroi de la veine cave sur toute la longueur intéressée; elle est ensuite séchée par tamponnements répétés sur du papier filtre et pesée une première fois. Immédiatement après, cette spirale est débarrassée de son thrombus dans un bain de sérum io physiologique, puis séchée et pesée à nouveau. La différence pondérale donne le poids du thrombus. L'examen histologique de ces thrombus a révélé qu'il s'agissait de thrombus blancs.

Différents lots de 10 rats sont traités, chacun par tubage gastrique avec un des dérivés à tester 48 h, 24 h et 2 h avant implantation de la is spirale métallique. Les prélèvements ont été effectués 5 h après cette implantation.

Des essais identiques ont été pratiqués avec le dipyridamole et l'acide acétylsalicylique.

Les résultats sont rassemblés dans le tableau IV : on constate que 20 le dipyridamole est dépourvu d'activité, que l'acide acétylsalicylique est peu actif, alors que les dérivés de l'invention produisent un effet antithrombotique important.

Tableau IV

Produit

Dose

Poids

Poids du administré

corporel thrombus

Témoin

—

248 g

3,75 mg±0,20

Dérivé de l'ex. 1

200 mg/kg

237 g

1,95 mg+0,13

Dérivé de l'ex. 6

200 mg/kg

245 g

1,85 mg±0,12

Dérivé de l'ex. 15

200 mg/kg

243 g

1,89 mg±0,14

Dérivé de l'ex. 22

200 mg/kg

250 g

1,82 mg+0,12

Dérivé de l'ex. 24

200 mg/kg

245 g

1,88 mg±0,13

Dérivé de l'ex. 27

200 mg/kg

242 g

1,95 mg+0,14

Dipyridamole

200 mg/kg

248 g

3,75 mg+0,32

Acide acétyl

salicylique

200 mg/kg

243 g

3,13 mg+0,24

40

Les résultats obtenus mettent en évidence la bonne tolérance et les intéressantes propriétés inhibitrices de l'agrégation plaquettaire,

631179

antisludge et antithrombotique des composés de l'invention qui les rendent très utiles en médecine humaine et vétérinaire.

Le médicament de l'invention peut être présenté, pour l'administration orale, sous forme de comprimés, comprimés dragéifiés, capsules, gouttes et sirop. Il peut aussi être présenté, pour l'administration rectale, sous forme de suppositoires et pour l'administration parentérale sous forme de soluté injectable.

Chaque dose unitaire contient avantageusement de 0,010 g à

0.300.g de principe actif, les doses administrables journellement pouvant varier de 0,010 g à 0,900 g de principe actif selon l'âge du patient et l'affection traitée.

On donnera ci-après, à titre d'exemples non limitatifs, quelques formulations pharmaceutiques du médicament de l'invention.

1. Comprimés:

— dérivé N° 1:0,125g

— excipient: Aérosil standard, amidon de maïs, lactose, talc

2. Comprimés dragéifiés

— dérivé N° 5:0,100 g

— excipient: acide silicique, fécule, Aérosil, sucre, lactose, talc, stéarate de magnésium, kaolin, gomme laque, gomme adragante, colophane, amidon, sucre, oxyde de titane

Capsules

— dérivé N° 10:0,125 g

— excipient: talc, lactose, Aérosil

4. Ampoules injectables

— dérivé N° 18:0,075 g

— excipient: solvant isotonique q.s.p. : 3 ml

5. Suppositoires:

— dérivé N° 27: 0,100 g

— excipient: triglycérides semi-synthétiques

Les études toxicologique et pharmacologique qui viennent d'être rapportées ont mis en évidence la bonne tolérance des dérivés de l'invention ainsi que leurs activités inhibitrices de l'agrégation plaquettaire, antisludge et antithrombotique.

Le médicament de l'invention peut ainsi être administré avec profit, à titre préventif ou curatif, dans le traitement des maladies provoquant une modification pathologique de l'agrégation plaquettaire, telle que les maladies thrombo-emboliques.

3.

25

R

Claims

631179

2

REVENDICATIONS

1. Dérivés de tétrahydro-4,5,6,7-thiéno-(2,3-c)- et (3,2-c)-pyridines de formules:

COOR

CO et
3. Procédé suivant la revendication 2, caractérisé en ce qu'on effectue la condensation à une température comprise entre la température ambiante et 50° C, l'acide minéral étant l'acide chlorhy-drique ou l'acide sulfurique.

5 4. Procédé de préparation de dérivés suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'on prépare un dérivé de formule (la) ou (Ha) selon le procédé de la revendication 2 et qu'on fait réagir ce dérivé avec un halogénure de formule R3X dans laquelle R3 est tel que défini pour les formules (I) et (II), à l'exception de l'hydrogène, et X io est un halogène, obtenant ainsi un dérivé de formule:

(II)

1 COOR4

R

dans lesquelles

R1 représente l'hydrogène ou un halogène,

R2 représente l'hydrogène ou un groupe hydroxy,

R3 et R4, qui peuvent être identiques ou différents, représentent chacun l'hydrogène ou un radical alcoyle de 1 à 6 atomes de carbone ou phénylalcoyle ayant de 1 à 6 atomes de carbone dans le groupe alcoyle, éventuellement substitué sur le noyau phényle par au moins un atome d'halogène ou un groupe alcoyle de 1 à 6 atomes de carbone, alcoxy de 1 à 6 atomes de carbone, hydroxy, nitro, cyano ou trifluorométhyle,

et leurs sels d'addition avec des acides.
2. Procédé de préparation de dérivés suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'on condense avec du formaldéhyde en solution aqueuse, en présence d'un acide minéral fort, un composé de formule: -

COOR-

(Ib) ou

COOR5

(IIb)

25

dans chacune desquelles R3 = R4 ^ H.
5. Procédé suivant la revendication 4, caractérisé en ce qu'on effectue la réaction dans un solvant organique inerte en présence d'un agent de fixation des acides, à une température comprise entre 60° C

30 et la température d'ébullition du solvant.
6. Procédé de préparation de dérivés suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'on prépare un dérivé de formule (Ib) ou (IIb)

- selon le procédé de la revendication 4 et qu'on soumet à une hydrolyse ce dérivé, obtenant ainsi un dérivé de formule:

35

,COOH (m) ou

/S

40

NH, NHo

ì i

(IV)

COOH

COOH

(le) ou

(Ile)

COOH

R

50

dans chacune desquelles R1 et R2 ont les significations données à propos des formules (I) et (II), obtenant ainsi un dérivé de formule:

R

I

.COOH

dans chacune desquelles R3 # H et R4 = H.
7. Procédé suivant la revendication 6, caractérisé en ce que l'hydrolyse est une hydrolyse alcaline effectuée au moyen d'un hydroxyde de métal alcalin dans un solvant alcanolique. .55 8. Procédé de préparation de dérivés suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'on prépare un dérivé de formule (le) ou (Ile) (la) ou selon le procédé de la revendication 6 et qu'on estérifie ce dérivé au moyen d'un alcool de formule R40H, dans laquelle R4 a la définition donnée pour les formules (I) et (II) à l'exception de l'hydrogène, m obtenant ainsi un dérivé de formule:

COOH

(lia)

COOR

(Id) ou dans chacune desquelles R3 = R4 = H.

R " ' R-

dans chacune desquelles R3 ^ R4 # H.

3

631179

(Ild)
15. Composition suivant la revendication 14, sous forme de doses unitaires contenant chacune de 0,010 g à 0,300 g de principe actif.

COOR
9. Procédé suivant la revendication 8, caractérisé en ce que l'estérification est effectuée en présence de chlorure d'hydrogène gazeux.
10. Procédé de préparation de dérivés suivant la revendication 1, caractérisé en ce qu'on prépare un dérivé de formule (la) ou (Ha) selon le procédé de la revendication 2 et qu'on estérifie ce dérivé au moyen d'un alcool de formule R40H, dans laquelle R4 a la définition donnée pour les formules (I) et (II) à l'exception de l'hydrogène, obtenant ainsi un dérivé de formule: