CH651206A5

CH651206A5 - Veterinaer-arzneimittel zur prophylaxe oder behandlung von protozoen-infektionen.

Info

Publication number: CH651206A5
Application number: CH3939/81A
Authority: CH
Inventors: Albert Sjoerdsma; Peter P Mccann
Original assignee: Merrell Dow Pharma
Priority date: 1980-06-16
Filing date: 1981-06-15
Publication date: 1985-09-13
Also published as: JPH0432052B2; NZ197394A; NL8102863A; ZA813953B; DE3123295A1; FR2484255B1; JPS5731613A; IL63087A; NL194153C; AU544990B2; BE889230A; IE51300B1; ATA266581A; IT8148684A0; IE811308L; GB2078735A; IT1171380B; GB2078735B; AU7165481A; NL194153B

Description

Die Erfindung betrifft Veterinär-Arzneimittel zur Prophylaxe oder Behandlung von Protozoen-Infektionen. Die Arzneimittel enthalten a-substituierte Aminosäuren oder a-substituierte Amine als Wirkstoffkomponente.

Polyamine sind in vieler Beziehung mit der Zellteilung in Zusammenhang gebracht worden. Man vermutet, dass die Beeinträchtigung der Biosynthese von Polyaminen durch Enzyminhibitoren eine Verringerung der Zellproliferation in Säugetieren verursacht. Obgleich die physiologische Rolle von Polyaminen noch nicht genau beschrieben worden ist, besteht Anlass, anzunehmen, dass sie an Zellteilung und Wachstum beteiligt sind (vgl. H.G. Williams-Ashman et al., The Italien J. Biochem. 25, 5-32 (1976), A Raina und J. Jan-ne, Med. Biol. 53,121-147 (1975) und D.H. Russell, Life Sciences 13,1635-1647 (1973].

Polyamine sind ausserdem dafür bekannt, dass sie wesentliche Wachstumsfaktoren für gewisse Mikroorganismen sind, wie beispielsweise für E. Coli, Enterobacter, Klebsielle, Staphylococcus aureus, C. cadaveris, Salmonella typhosa und Haemophilus Parainfluenza. Es besteht Anlass, anzunehmen, dass Polyamine im Zusammenhang stehen mit normalem und neoplastischem Säugetier-Zellwachstum, wobei eine Steigerung der Synthese und der Akkumulation von Polyaminen vorliegt, mit einem anschliessenden Stimulus der Proliferation. Es ist ausserdem bekannt, dass ein Zusammenhang zwischen Polyaminbildung und der Wirksamkeit der Decarboxylaseenzyme von Ornithin, S-Adenosylmethio-nen, Arginin und Lysin besteht. Der Ausdruck Polyamine umfasst die Diamine Putrescin und die Polyamine Spermidin und Spermin. Putrescin ist das durch Ornithin-decarboxyla-se katalysierte Decarboxylierungsprodukt von Ornithin. Pu-trescinbildung kann ausserdem durch Decarboxylierung von Arginin unter Bildung von Agmatin erfolgen, das unter Bildung von Putrescin und Harnstoff hydrolysiert wird. Arginin ist ebenfalls an der Ornithinbildung durch die Wirkung des Enzyms Arginase beteiligt. Bei der Aktivierung von Me-thionin durch das Enzym S-Adenosylmethioninsynthetase bildet sich S-Adenosylmethionin, das decarboxyliert wird. Der Propylaminanteil des aktivierten Methionins kann dann in Putrescin umgewandelt werden, um Spermidin zu bilden. Ausserdem kann der Propylaminanteil in Spermidin unter Bildung von Spermin umgewandelt werden. Somit dient Putrescin als Vorstufe zu Spermidin und Spermin. Ausserdem erwies sich Putrescin als Mittel mit einem ausgeprägten regulatorischen Effekt auf den biosynthetischen Weg von Poly-amin. Ausserdem erwies sich eine erhöhte Synthese von Pu-rescin als ein frühes Zeichen, dass ein Gewebe erneuten Wachstumsprozessen unterliegt. Cadaverin, das ein Decarboxylierungsprodukt von Lysin ist, erwies sich als ein Mittel, das die Aktivität von S-Adenosylmethionindecarboxylase stimuliert und spielt ausserdem eine wesentliche Rolle bei den Wachstumsprozessen vieler Mikroorganismen, beispielsweise H. Parainfluenza.

Das Grundprinzip des Polyaminmetabolismus ist von Cohen, Science 205,964 (1979) beschrieben worden. Die offensichtlich einzigartige Rolle des Polyaminmetabolismus bei Trypanosomen und der Abhängigkeit von Trysanoso-men von der Ornithindecarboxylase als eine Quelle von Putrescin stützt weiterhin die Beobachtungen, dass gewisse spezifische Ornithindecarboxylaseinhibitoren der Polyaminsyn-these höchst wirksam bei der Inhibierung des Wachstums von Protozoen sind.

Es wurde gefunden, dass gewisse Verbindungen, die zur Klasse der irreversiblen Inhibitoren von Ornithindecarboxylase gehören, sich zur Inhibierung des Wachstums von Protozoen eignen. Ausserdem erfolgt diese Inhibierung über ein weites Spektrum von Protozoen wie Glieder der Subphyla Sarcomastigophora und Sporozoa. Die nachstehend beschriebenen Verbindungen eignen sich besonders zur Inhibierung des Wachstums von Gliedern der Überklasse Masti-gophora, insbesondere Trypanosoma brucei brucei und s

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Glieder der Klasse Telosporea, insbesondere Eimeria tenella, die Organismen, die Coccidiose in Geflügel verursachen.

Das erfindungsgemässe Veterinär-Arzneimittel zur Prophylaxe oder Behandlung von Protozoen-Infektionen ist nun dadurch gekennzeichnet, dass es a) als Wirkstoffkomponente mindestens eine a-substi-tuierte Aminosäure oder ein a-substituiertes Amin der allgemeinen Formel

Y

Z-C-R1 (I)

worin

Rj Wasserstoff oder Carboxy,

Y CH2F, CHF2, CF3 oder CsCH und Z H2N-(CH2)3, H2N-CH-(CH2)2 oder H2N-CH2CH=CH

bedeuten, wobei, wenn Rj Wasserstoff bedeutet, Y nicht CF3 sein kann und Z H2N-ÇH-(CH2)2 sein muss

CH3

oder deren Salze sowie b) ein pharmazeutisch verträgliches Trägermaterial enthält.

Bei der in vivo-Verabreichung an Tiere, die aktive Protozoen-Infektionen aufweisen, kann das erfindungsgemässe Arzneimittel zur Behandlung solcher Tiere durch Inhibierung des weiteren Wachstums von Protozoen-Infektionen verwendet werden. Ausserdem kann das Arzneimittel prophylaktisch verabreicht werden, um das Auftreten solcher Protozoen-Infektionen zu verhindern.

In den Verbindungen der allgemeinen Formel (I) bedeutet Rx entweder Wasserstoff oder eine Carboxylgruppe.

Falls Rj Wasserstoff ist, wird eine Klasse von a-substituier-ten a,co-Diaminen beschrieben und falls R: die Carboxylgruppe ist, wird eine Klasse von a-substituierten a,co-Diami- _ nocarbonsäuren beschrieben. Das Symbol Y stellt entweder eine acetylenische Gruppe oder eine fluorsubstituierte Methylgruppe dar. Die fluorsubstituierten Methylgruppen werden durch Monofluormethyl-, Difluormethyl- oder Trifluor-methylreste dargestellt. Das Symbol Z stellt entweder die 3-Aminopropylgruppe, die 3-Amino-3-methylpropylgruppe oder die 3-Amino-l-propylengruppe dar. Die gesättigten Gruppen, d.h. die 3-Aminopropylgruppe und die 3-Amino-3-methylpropylgruppe stellen die bevorzugten Seitenketten dar.

Die «wobei wenn»-Begrenzung soll gewisse Klassen von Diaminen von den aktiven Verbindungen ausschliessen. Ausgeschlossen durch diese Begrenzung sind a-substituierte Diamine, worin das Symbol Z die 3-Aminopropylgruppe oder die 3-Amino-l-propylengruppe ist, d.h. diejenigen Verbindungen, die die allgemeinen Formeln y

h2n-(ch2)3-ch-nh2 (ii)

und y

h2n-ch2ch=ch-ch-nh2 (iii)

aufweisen, in denen Y die vorstehend genannte Bedeutung hat.

Insbesondere ausgeschlossen von den verbleibenden a-substituierten Diaminen sind die Species, worin Y die Tri-fluormethylgruppe darstellt. Somit ist Verbindung IV, 4-Me-thyl-l-trifluormethyl-l,4-butandiamin besonders von den aktiven Verbindungen ausgeschlossen.

cp3

h2n-ch-(ch2)2-ch-nh2 (iv)

Eingeschlossen in die Gruppe der aktiven Verbindungen sind a-substituierte Aminosäuren der Formeln y

h2n-(ch2) 3-c-cooh (v)

nh2

y I

h2n-ch-(ch2)2-c-cooh (vi) ch3 nh2

y

I

h2n-ch2ch=ch-c-cooh (vii)

L2

In Formeln (V), (VI) und (VII) besitzt Y die vorstehende Bedeutung.

Die in den erfindungsgemässen Arzneimitteln enthaltenen a-substituierten Amine lassen sich durch folgende allgemeine Formel darstellen y

l h2n-çh-(ch2)2-ch-nh2 (viii)

worin Y CH2F, CHF2 oder C=CH bedeutet, jedoch im Falle der Diamine die CF3-Gruppe ausschliesst.

Beispiele für Salze dieser aktiven Verbindungen sind nicht-toxische Säureadditionssalze mit anorganischen Säuren wie Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure und Phosphorsäure sowie organische Säuren, wie Methansulfon-säure, Salicylsäure, Maleinsäure, Malonsäure, Weinsäure, Zitronensäure, Cyclaminsäure und Ascorbinsäure. Eine bevorzugte Klasse aktiver Verbindungen sind diejenigen, in denen Y die Difluormethylgruppe bedeutet. Eine andere bevorzugte Klasse von Verbindungen ist diejenige, worin Z den 3-Aminopropyl- oder den 3-Amino-3-methylpropylrest bedeutet.

Ausser den vorstehend genannten Salzen schliesst der Ausdruck Salze insbesondere diejenigen inneren Salze oder Zwitterionen der Verbindungen der Formel (I) ein, die am-photerer Natur sind. Ausserdem, während die optische Konfiguration der hierin beschriebenen Verbindungen nicht be5

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sonders bezeichnet ist, soll daraufhingewiesen werden, dass das a-Kohlenstoffatom ein asymmetrisches Zentrum besitzt und dass einzelne optische Isomeren dieser Verbindungen existieren. Somit sind sowohl die d- und 1-optischen Isomeren sowie die racemischen Gemische erfindungsgemäss mit eingeschlossen.

Lactambildung erfolgt, wenn Rj die Carboxylgruppe und Z den 3-Aminopropylrest oder den 3-Amino-3-methyl-propylrest bedeutet, wie durch nachstehende allgemeine Formel dargestellt wird.

NH2

Y - Ç (j = 0 (IX)

(CH2*3~NH

In der obigen allgemeinen Formel hat Y vorstehende Bedeutung. Wo Z die 3-Amino-3-methylpropylgruppe bedeutet, kann die (CH2)3-Gruppe in Formel (IX) ausserdem mit einer 3-Methylgruppe substituiert sein.

Beispiele für bevorzugte aktive Verbindungen sind folgende:

2,5-Diamino-2-(fluormethyl)pentansäure,

2,5-Diamino-2-(difluormethyl)pentansäure,

2,5-Diamino-2-(trifluormethyl)pentansäure,

2,5-Diamino-2-(ethinyl)pentansäure, 2,5-Diamino-2-fluormethyl-5-methylpentansäure, 2,5-Diamino-2-difluormethyl-5-methylpentansäure, 2,5-Diamino-2-trifluormethyl-5-methylpentansäure, s 2,5-Diamino-2-ethinyl-5-methylpentansäure, 2,5-Diamino-2-fluormethyl-3-pentensäure, 2,5-Diamino-2-difluormethyl-3-pentensäure, 2,5-Diamino-2-trifluormethyl-3-pentensäure, 2,5-Diamino-2-ethinyl-3-pentensäure, io l-Fluormethyl-4-methyl-l,4-butandiamin und 1 -Ethinyl-4-methyl-1,4-butandiamin.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I, worin Z H2N-(CH2)3, Y CH2F, CHF2 oder CF3 und Rj Carboxy ist, können durch jeweilige Behandlung eines Esterderivats i5 von Ornithin hergestellt werden, worin die Aminogruppen zweckmässigerweise mit einer starken Base geschützt sind unter Bildung des Carbanionzwischenproduktes. Dieses wird gewöhnlich mit einem geeigneten Halogenmethyl-halo-genalkylierungsmittel in einem aprotischen Lösungsmittel 20 wie Dimethylsulfoxid, Dimethylformamid, Dimethylacet-amid, Benzol, Toluol, Ether, wie Tetrahydrofuran, Diethyl-ether oder Dioxan, in Gegenwart von Hexamethylphosphor-triamid wenn Y kein F2CH- ist etwa Vi bis 48 Stunden bei einer Temperatur von etwa —120 bis 120 °C, vorzugsweise 25 etwa 25 bis 50 °C, umgesetzt und anschliessend einer Säureoder Basenhydrolyse unterworfen. Dies kann durch folgendes Reaktionsschema dargestellt werden:

Z1-CH-COOR2

n=Ç-R3 . - R4

Verb induri gen A

z2-c-coor2 nh2

starke Base

*1

n=c-r3 r4

V

Y 1

COOR2

Alkylierungs-mitfcel verdünnte wäßrige Z^-C-C00R2 . Säure/Hydrazin 1

< £ — . n=c-r3

r4

Verbindungen 3

h2o

(Säure/Base)

Verbindungen 2

V

Y 1

h2n-(ch2)3-ç-cooh nh2

(Formel V) •

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In vorstehendem Reaktionsschema bedeutet Y FCH2, F2CH- oder F3C-; R2 ist ein niederer Alkylrest, wie beispielsweise Methyl, Ethyl, Isopropyl, n-Propyl oder n-Butyl; R3 ist Wasserstoff, Phenyl, eine gerade oder verzweigte Al-kylgruppe mit 1 bis 8 C-Atomen, Methoxy oder Ethoxy; R4 ist Phenyl oder eine gerade oder verzweigte Alkylgruppe mit 1 bis 8 C-Atomen oder R3 und R4 können zusammen eine Alkylengruppe mit 5 bis 7 C-Atomen bilden, d.h. -CH2-(CH2)m-CH2- worin m eine ganze Zahl von 3 bis 5 bedeutet. Beispiele für gerade oder verzweigte Alkylgruppen von 1 bis 8 C-Atomen, die durch R3 und R4 dargestellt werden können, sind beispielsweise Methyl, Ethyl, n-Propyl, Isopropyl, n-Butyl, tert.-Butyl, n-Pentyl, Neopentyl oder Triethylmethylgruppen. Zx bedeutet R3-<p = N(CH2)3-,

O O R4

Rs-ÌnH(CH2)3- oder R6-C>f NH(CH2)3-; R3 und R4 sind gleich und haben vorstehende Bedeutung und R5 und R6 sind jeweils Phenyl, Benzyl oder eine Niederalkylgruppe mit 1 bis 4 C-Atomen, die gerade oder verzweigt ist, wie beispielsweise Methyl, Ethyl oder Isopropyl; Z2 ist

H2N(CH2)3-, R5-?NH(CH2)3- oder R6-0(?:NH(CH2)3-, worin R5 und R6 vorstehende Bedeutung haben.

Bevorzugte geeignete starke Basen, die in vorstehend beschriebenem Reaktionsschema verwendet werden können zur Bildung der Carbanionen-Zwischenprodukte sind diejenigen, die ein Proton vom a-Kohlenstoffatom zur Carboxy-gruppe abspalten können, wie Alkyllithium, beispielsweise Butyllithium oder Phenyllithium, Lithiumdialkylamid, beispielsweise Lithiumdiisopropylamid, Lithiumamid, tertiäres Kaliumbutylat, Natriumamid, Metallhydride, wie beispielsweise Natriumhydrid oder Kaliumhydrid, tertiäre Amine, wie Triethylamin, Lithiumacetylid oder Dilithiumacetylid. Lithiumacetylid, Dilithiumacetylid, Natriumhydrid und Lithiumdiisopropylamid sind besonders bevorzugte Basen.

Bevorzugte geeignete Alkylierungsmittel, die im vorstehend genannten Reaktionsschema verwendet werden können, sind Chlorfluormethan, Bromfluormethan, Fluoriod-methan, Chlordifluormethan, Bromdifluormethan, Difluor-iodmethan, Bromtrifluormethan, Chlortrifluormethan, Tri-fluoriodmethan, Bromchlormethan, Dichlormethan, Chlor-iodmethan, Bromdichlormethan und Dichloriodmethan. Diese Alkylierungsmittel sind wohlbekannt.

Die Entfernung der Schutzgruppen des Amins und der Carbonsäurefunktion können in einer Stufe durch Behandlung von Verbindung 2 mit wässriger Säure, beispielsweise Salzsäure oder Toluolsulfonsäure, bei einer Temperatur von etwa 0 bis 100 °C binnen etwa 4 bis 24 Stunden unter Bildung der Verbindungen der allgemeinen Formel V erzielt werden. Vorzugsweise werden zuerst die Schutzgruppen der Aminfunktion(en) der Verbindungen 2 entfernt, wenn diese Funktionen als Schiff sehe Base geschützt sind durch Behandlung der Verbindungen 2 mit wässriger verdünnter Säure, beispielsweise Salzsäure oder mit Hydrazin oder Phenylhydrazin in Lösungsmitteln, wie niedere Alkohole, wie beispielsweise Methanol oder Ethanol, Ether, chlorierte Kohlenwasserstoffe, Benzol oder Wasser. Die Entfernung der Schutzgruppen der Carbonsäurefunktion und der Amin-gruppen, wenn die Amingruppen nicht als Schiff sehe Base geschützt sind, kann erzielt werden durch Behandlung von Verbindungen 3 mit konzentrierten Säuren, beispielsweise Bromwasserstoffsäure, bei einer Temperatur von 0 bis 100 °C oder in einer wässrigen Base, wie beispielsweise Ammoniumhydroxid.

Die amingeschützten Esterderivate, d.h. Verbindungen 1, worin R3 kein Methoxy oder Ethoxy ist, können auf allgemein bekannte Weise hergestellt werden durch Behandlung eines entsprechenden Aminosäureesters mit einer Carbonyl tragenden Gruppe unter Bildung einer Schiff sehen Base, insbesondere: (a) wenn R3 Wasserstoff ist durch Behandlung des entsprechenden Aminosäureesters mit Benzaldehyd oder einem Alkanal mit 1 bis 9 C-Atomen, der gerade oder verzweigt sein kann, beispielsweise 1-Propanal, 1-Butanal, 2,2-Dimethylpropan-l-al oder 2,2-Diethylbutan-l-al; (b) wenn R3 Phenyl ist durch Behandlung des entsprechenden Aminosäureesters mit Benzophenon oder Phenylalkylketon, worin der Alkylrest 1 bis 8 C-Atome aufweist und gerade oder verzweigt ist, wie beispielsweise Phenylmethylketon, Phenyl-ethylketon, Phenylisopropylketon, Phenyl-n-butylketon oder Phenyl-tert.-butylketon oder (c) wenn R3 eine gerade oder verzweigte Alkylgruppe mit 1 bis 8 C-Atomen ist durch Behandlung des entsprechenden Aminosäureesters mit einem Phenylalkylketon wie vorstehend beschrieben, oder mit einem Dialkylketon, worin jeder Alkylrest 1 bis 8 C-Atome aufweist und gerade oder verzweigt ist, wie beispielsweise Dimethylketon, Diethylketon, Methylisopropylketon, Di-n-Butylketon oder Methyl-tert.-butylketon. Die Carbonyl tragenden Verbindungen sind bekannt oder lassen sich durch bekannte Verfahren herstellen.

Wenn in Verbindung 1 R3 Methoxy oder Ethoxy ist, kann ein entsprechendes Aminosäureesterderivat mit Ben-zoylhalogenid oder einem Alkansäurehalogenid umgesetzt werden, worin die Alkansäure 1 bis 9 C-Atome aufweist und gerade oder verzweigt sein kann, wie Acetylchlorid, Pro-pionylchlorid, Butyrylchlorid, tert.-Butyrylchlorid, 2,2-Di-ethylbutyrsäurechlorid oder Valerylchlorid. Die Reaktion wird vorzugsweise bei 0 °C in einem organischen Lösungsmittel durchgeführt, wie Ether, Methylchlorid, Dimethyl-formamid, Dimethylacetamid oder Chlorbenzol in Gegenwart einer organischen Base, wie Triethylamin oder Pyridin. Am Anschluss an die Reaktion kann man das Reaktionsgemisch sich auf etwa 25 °C 1 Stunde lang erwärmen lassen. Das dabei entstehende Amidderivat wird in der Regel mit einem Alkylierungsmittel kombiniert, wie Methylfluorsulfo-nat, Dimethylsulfat, Methyliodid, Methyl-p-toluolsulfonat oder Trimethyloxoniumhexafluorphosphat (wenn R3 Methoxy ist) oder Triethyloxoniumtetrafluorborat (wenn R3 Ethoxy ist), bevorzugt bei etwa 25 °C in einem chlorierten Kohlenwasserstofflösungsmittel, wie Methylenchlorid, Chlorbenzol oder Chloroform. Das Reaktiongemisch wird insbesondere etwa 12 bis 20 Stunden unter Rückfluss gehalten, auf etwa 25 °C abgekühlt und mit einer organischen Base, wie Triethylamin oder Pyridin versetzt, wonach die Lösung mit einer Kochsalzlösung extrahiert und das Produkt isoliert werden kann.

Wenn R3 und R4 zusammen eine Alkylengruppe in Verbindung 1 bilden mit 5 bis 7 C-Atomen, können die entsprechenden Aminosäureesterderivate durch Behandlung des Aminosäureesters mit einem cyclischen Alkanon unter Bildung einer Schiff sehen Base nach bekannten Verfahren erhalten werden. Zu den bevorzugt verwendbaren cyclischen Alkanonen gehören Cyclopentanon, Cyclohexanon und Cycloheptanon.

Wenn Zx in Verbindung 1 RS<!:NH(CH2)3- oder o o o

R60<ÜnH(CH2)3- bedeutet, können die -(^Rj und -(ÜoR6-Schutzgruppen der entsprechenden freien Aminosäure, d.h. dem Ornithin, zugesetzt werden, indem man die Aminosäure mit überschüssigem Kupfersalz wie Kupfercarbonat in siedendem Wasser etwa 1 bis 6 Stunden behandelt. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur können die unlöslichen Materialien abfiltriert und das Filtrat mit einem entsprechenden Säurehalogenid behandelt werden (wenn Zx

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O

Rs&SIH(CH2)n- ist) oder mit einem entsprechenden Alkyl

O

oder Arylhalogenformiat (wenn Zx RsoÒNH(CH2)n- ist) in einem Lösungsmittel wie Aceton in Gegenwart einer Base wie Natriumbicarbonat oder Natriumhydroxid. Nach dieser Behandlung erfolgt gewöhnlich eine Behandlung mit Schwefelwasserstoff. Zu den bevorzugt verwendbaren Säurehalo-geniden gehören Acetylchlorid, Propionylchlorid, Ben-zoylchlorid oder 2-Phenylacetylchlorid. Zu den verwendbaren Halogenformiaten gehören vor allem Benzylchlorformi-at, Phenylchlorformiat, Methylchlorformiat oder Ethyl-chlorformiat.

Die Lactame der Verbindungen der allgemeinen Formel I, worin R! Carboxy ist, können aus den entsprechenden Aminosäureestern der Formel

Y.

H2N(CH2,3-f-COR7 nh2

hergestellt werden, worin Y die in Formel I angegebene Bedeutung besitzt und R7 eine gerade oder verzweigte Alk-oxygruppe mit 1 bis 8 C-Atomen, wie beispielsweise Methoxy, Ethoxy, Isopropoxy, Butoxy oder Hexyloxy bedeutet. Die Lactame werden z.B. durch Behandlung der Aminosäureester mit einer entsprechenden Base wie Natriumhydroxid, Kaliumhydroxid, Lithiumhydroxid, Natriumcarbonat, Ka-liumcarbonat, Natriummethoxid, Kaliummethoxid, Ka-lium-tert.-butoxid, Natriumamid oder einem organischen Amin wie Trialkylamin, beispielsweise Triethylamin, in einem Lösungsmittel wie ein niederer Alkohol, beispielsweise Methanol, Ethanol, Isopropylalkohol, n-Butanol, Wasser,

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Dimethylformamid, Dimethylsulfoxid, Hexamethylphos-phortriamid oder Gemischen davon hergestellt. Die Reaktion wird vorzugsweise innerhalb Vz bis 24 Stunden bei einer Temperatur von etwa 0 bis 120 °C, gegebenenfalls unter einer Stickstoffatmosphäre, durchgeführt. Die Verbindungen der allgemeinen Formel X können durch bekannte Methoden hergestellt werden, beispielsweise durch Verwendung der entsprechenden Aminosäure und Behandlung der Aminosäure mit einem entsprechenden Alkohol wie Methanol, Ethanol, Isopropylalkohol, n-Butanol oder n-Heptanol, die mit HCl-Gas gesättigt sind.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I, worin Z H2N-ÇH(CH2)2; Y CH2F, CHF2 oder CF3 und Rx Carb-CH3

oxy bedeuten, können nach Verfahren hergestellt werden, die den vorstehend beschriebenen Verfahren analog sind.

Verbindungen der allgemeinen Formel I, worin Z H2N-ÇH(CH2)2 oderH2N-(CH2)3, YCsCHund Rj CH3

Carboxy bedeuten, werden bevorzugt durch Behandlung eines geeigneterweise geschützten Propargylaminderivats, wie ein Silylderivat, mit einer starken Base unter Bildung eines geschützten Propargylamincarbanion-Zwischenprodukts hergestellt. Dieses Carbanionzwischenprodukt kann mit einem Alkylierungsmittel der Formel RSX umgesetzt werden, worin X ein Halogen wie Chlor oder Brom bedeutet und R8 PhHC = N(CH2)„-, worin n die ganze Zahl 3 bedeutet, darstellt.

Das sich dabei bildende alkylierte geschützte Propargyl-aminderivat kann dann mit einer starken Base unter Bildung eines alkylierten geschützten Propargylamincarbanions behandelt werden. Das zweite Carbanion wird gewöhnlich mit einem Acylierungsmittel umgesetzt und die Schutzgruppen können anschliessend durch Säure- oder Basenhydrolyse wie in nachstehendem Reaktionsschema gezeigt, entfernt werden:

(R9>3-Si-CSC-CH2

N=C-Rii

Rio

Verbindungen 4

starke --Base

(R9)3-Si-C=C-CH

(-)

N=C-RII , R10

1

r8X

*8

• {R7)3-Si-GïC~Ç<-)

• i n=c-rn R10

starke „Base

?8

(Rg ) 3—Si-CsTC-CH

N=C-RU

R10

Y

•Acylierungsmittel

Verbindungen* 5

HS

(R9)3-Si-CsC-C-Ri2

N=Ç-R11 R10

h2o

(Säure/Base)

HC5C-C-C00H

nh2

Verbindungen 6

f Formel XI

In vorstehendem Reaktionsschema haben Rs und X vorstehende Bedeutung, Ph bedeutet Phenyl, R10 ist Wasserstoff, Methoxy oder Ethoxy, Rj ! ist Phenyl, tert.-Butyl oder Triethylmethyl, R9 ist eine gerade oder verzweigte Niederal-kylgruppe mit 1 bis 4 C-Atomen, R12 ist ein Carboxyanion, ein Carbonsäureester, ein Carboxamid, ein Nitrii oder eine andere Gruppe, die sich zu einer Carbonsäurefunktion hy-drolysieren lässt und Z ist H2N-C-(CH2)2 oder H2N(CH2)3. ^

Geeignete starke Basen, die sich in vorstehender Reaktion verwenden lassen unter Bildung des jeweiligen Carb-anions sind insbesondere solche, die ein Proton von dem dem Acetylenrest benachbarten Kohlenstoffatom abspalten, wie Alkyllithium. Geeignete verwendbare Alkyllithiumver-bindungen sind z.B. Butyllithium oder Phenyllithium, Li-thiumdiisopropylamid, Lithiumamid, tertiäres Kaliumbuty-lat oder Natriumamid.

Die Alkylierungsmittel R8X, die sich in vorstehender Reaktion verwenden lassen, sind bekannt und lassen sich nach üblichen bekannten Verfahren herstellen. Somit lässt sich der Reaktionsteilnehmer PhHC = N(CH2)n- beispielsweise durch Umsetzung von 3-Brom-n-propylaminhydrochlorid oder 4-Brom-n-butylamin-hydrochlorid mit Benzaldehyd in Gegenwart eines organischen Amins wie Triethylamin in einem geeigneten Lösungsmittel herstellen. Zu den bevorzugt verwendbaren Lösungsmitteln gehören vor allem Diethyl-ether, Tetrahydrofuran, Dioxan, Chloroform oder Dichlor-methan.

Geeignete Acylierungsmittel, die sich in vorstehender Reaktion verwenden lassen, sind Halogenformiate wie Chlor-methylformiat oder Chlorethylformiat, Azido-tert.-butylfor-miat, Cyanogenbromid, Kohlendioxid, Diethylcarbonat, Phenylisocyanat, Triethoxymethyliumtetrafluorborat, N,N-Dimethylcarbamoylchlorid, 2-Methylthio-1,3-dithiolinium-iodid, Ethylencarbonat oder Ethylentrithiocarbonat. Wenn z.B. in der Regel 2-Methylthio-1,3-dithioliniumiodid verwendet wird, ist eine weitere Alkoholysestufe erforderlich mit Hilfe eines niederen Alkohols wie Ethanol oder Isopropylalkohol vor der Hydrolyse der Schutzgruppen.

Die Alkylierungsreaktion erfolgt im allgemeinen leicht in Gegenwart eines aprotischen Lösungsmittels wie Benzol, To-luol, Ether, Tetrahydrofuran, Dimethylsulfoxid, Dimethyl-formamid, Dimethylacetamid oder Hexamethylphosphortri-amid. Die Reaktionstemperatur schwankt in der Regel zwischen —120 °C und etwa 25 °C, wobei eine bevorzugte Reaktionstemperatur etwa — 70 °C ist, wobei die Reaktionszeit im allgemeinen zwischen etwa Vi und 24 Stunden dauert.

Die Entfernung der Schutzgruppen, wie sie in vorstehendem Reaktionsschema dargestellt wird, in der Stufe, die die Umwandlung von Verbindungen 6 zu Verbindungen der Formel XI betrifft, kann durch Behandlung von Verbindungen 6 mit einer wässrigen Säure wie Salzsäure oder Toluol-sulfonsäure erfolgen. Ausserdem lässt sich bevorzugt eine wässrige Base wie Natriumhydroxid oder Kaliumhydroxid oder Hydrazin oder Phenylhydrazin verwenden.

Die Propargylaminderivate der Verbindungen 4, worin R10 Wasserstoff ist, können durch Zugabe von Schutzgruppen an der Acetylenfunktion und der Stickstoff-Funktion von Propargylamin hergestellt werden. Das Schützen der Stickstoff-Funktion des Propargylamins erfolgt gewöhnlich durch Bildung einer SchifFschen Base mit einer nicht enoli-sierbaren Carbonylgruppen tragenden Verbindung wie Benzaldehyd, 2,2-Dimethylpropanal oder 2,2-Diethylbuta-nal. Das bevorzugte Schützen der Acetylenfunktion kann durch Umsetzung der vorstehend beschriebenen Schiff sehen Base mit einem Trialkylsilylchlorid erfolgen, worin der Alkylrest 1 bis 4 C-Atome aufweist und entweder gerade oder

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verzweigt ist. Trialkylsilylchloride, die sich vor allem verwenden lassen, sind Trimethylsilylchlorid oder Triethylsilyl-chlorid.

Die Propargylaminderivate der Verbindungen 4, worin R]0 Methoxy oder Ethoxy ist, können durch Umsetzung von Propargylamin, worin die Acetylenfunktion durch eine Trialkylsilylgruppe geschützt ist, mit Benzoylchlorid, Piva-linsäurechlorid oder 2,2-Diethylbutyrsäurechlorid bei 0 °C in einem geeigneten Lösungsmittel hergestellt werden. Zu den vor allem geeigneten Lösungsmitteln gehören Diethylether, Dioxan, Tetrahydrofuran, Chloroform, Methylenchlorid, Dimethylformamid, Dimethylacetamid oder Chlorbenzol. Die Reaktion erfolgt in der Regel in Gegenwart einer organischen Base, wie Triethylamin oder Pyridin, worauf man das Reaktionsgemisch vorzugsweise sich auf etwa 25 °C 1 Stunde lang erwärmen lässt. Das dabei entstehende Amidderivat kann mit einem Alkylierungsmittel wie Methylfluorsulfonat, Dimethylsulfat, Methyliodid, Methyl-p-toluolsulfonat oder Trimethyloxoniumhexafluorphosphat kombiniert werden, wenn R10 Methoxy ist, oder mit Triethyloxoniumtetrafluor-borat, wenn R10 Ethoxy ist, bevorzugt bei etwa 25 °C in einem chlorierten Kohlenwasserstofflösungsmittel wie Methylenchlorid, Chlorbenzol oder Chloroform. Das Reaktionsgemisch kann etwa 12 bis 20 Stunden unter Rückfluss behandelt, auf etwa 25 °C abgekühlt und mit einer organischen Base wie Triethylamin oder Pyridin versetzt werden. Die dabei entstehende Lösung wird in der Regel mit Kochsalzlösung extrahiert und das gewünschte Produkt isoliert.

Das geschützte Propargylaminausgangsmaterial kann durch Behandlung eines 3-Trialkylsilylprop-2-ynyl-l-imino-benzylderivats, das die Verbindungen 4 darstellt, worin R10 Wasserstoff und Rj i Phenyl ist, mit Hydrazin oder Phenylhydrazin bei etwa 25 °C etwa Vi Stunde erhalten werden, wonach das Gemisch verdünnt wird, beispielsweise mit Pe-trolether, Benzol oder Toluol, und das Amin isoliert wird. Wahlweise kann das Imin mit 0,5 bis IN HCl-Lösung hy-drolysiert und die wässrige Phase unter Erzielung des Amins als Hydrochloridsalz abgedampft werden.

Verbindungen der Formel I, worin Z H2N-ÇH(CH2)2;

CH3

Y CH2F oder CHF2 und Rj Wasserstoff bedeuten, können durch Reduktion eines Ketons der Formel O

Z'-<Ü:-Y (Xii)

worin Z' Phthaloyl-NCH(CH2)2-, Ben-

Rl3 R13

zoyl-NHCH(CH2)2-, Alkanoyl-NHC:H(CH2)2-, Alk-

Rl3

oxycarbonyl-NHCH(CH2)2- oder Benzyloxycarbo-

Rl3

I

nyl-NHCH(CH2)2- bedeuten, worin der Alkanoylrest 2 bis 5 C-Atome aufweist und gerade oder verzweigt ist, der Alk-oxyrest 1 bis 4 C-Atome aufweist und gerade oder verzweigt ist, Y CH2F oder CHF2 und R13 Methyl bedeuten, hergestellt werden. Die Ketone werden z.B. zu den entsprechenden Alkoholen reduziert, die gewöhnlich mit einem Äquivalent eines Imids wie Phthalimid, Succinimid oder Malein-imid, 1,1 Äquivalenten eines Phosphins, wie beispielsweise Triphenylphosphin oder eines Trialkylphosphins, wie Tri-n-butylphosphin und 1,1 Äquivalent Diethylazodicarboxylat in einem geeigneten Lösungsmittel behandelt werden. Zu den geeigneten Lösungsmitteln gehören insbesondere Ether wie Diethylether, Tetrahydrofuran oder p-Dioxan, Benzol

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oder Dimethoxyethan. Die Reaktion erfolgt in der Regel bei etwa 0 bis 100 °C, vorzugsweise etwa 25 °C etwa Vi bis 24 Stunden unter einer inerten Atmosphäre wie Stickstoff oder Argon. Das so erhaltene Imidoderivat kann dann zum freien Amin hydrolysiert werden.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel (XII) worin Y FCH2- bedeutet, können durch Behandlung einer Verbindung der Formel

O

Z'-6-CH2R14 (XIII)

worin Z' vorstehende Bedeutung hat und Ri4 eine geeignete abzuspaltende Gruppe bedeutet, wie Chlor, Brom oder Iod, Mesylat, Tosylat, Triflat oder Trifluoracetat, mit einem geeigneten Fluorierungsmittel, wie Kaliumfluorid, Silberfluo-rid, Cesiumfluorid, Thalliumfluorid oder Tetrabutylammo-niumfluorid in einem geeigneten Lösungsmittel hergestellt werden. Zu den geeigneten Lösungsmitteln gehören insbesondere Dimethoxyethan, Dimethylsulfoxid, Dimethylform-amid, Ethylenglykol, Acetonitril, Aceton, Benzol oder Fluorwasserstoff. Die Reaktion erfolgt vorzugsweise bei einer Temperatur von etwa 0 bis 200 °C binnen einer Zeit von etwa 2 bis 48 Stunden. Die abzuspaltende Gruppe R14 kann ausserdem eine Diazogruppe sein, wobei in diesem Fall das zu verwendende Fluorierungsmittel FluorWasserstoff/Pyri-din ist. Geeignete Lösungsmittel für die Reaktion, worin R14 eine Diazogruppe ist, sind vor allem aprotische Lösungsmittel wie Diethylether, Tetrahydrofuran oder Pentan. Die Reaktionszeit schwankt in der Regel zwischen etwa 30 Minuten bis 24 Stunden bei einer Temperatur von etwa —20 bis 65 °C. Beispielsweise wird eine Verbindung der Formel

O

Z-<Ü:-R14

mit vorstehender Bedeutung, worin R14 eine Diazogruppe ist, in einem geeigneten aprotischen Lösungsmittel einer Fluorwasserstoff/Pyridinlösung zugesetzt und auf-10 °C abgekühlt. Das Reaktionsgemisch wird vorzugsweise heftig bei —10 °C 1 Stunde lang gerührt, 2 Stunden lang auf etwa 25 °C erwärmt und dann über Eis gegossen. Die organische Phase kann abgetrennt, mit einer Base wie Natriumbicarbonat gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter Vakuum unter Bildung des entsprechenden Fluormethylke-tonderivats der Formel XII eingeengt werden.

Die Diazoketonderivate, d.h. die Verbindungen der Formel XIII, worin R14 eine Diazogruppe ist, können über das entsprechende Säurehalogenid der Formel

O

Z'-Ò-Halogenid erhalten werden, worin das Halogenid beispielsweise ein Chlorid ist und Z' die in Formel XII angegebene Bedeutung besitzt. Das in einem aprotischen Lösungsmittel enthaltene Säurehalogenid wie beispielsweise Diethylether, Tetrahydrofuran, Pentan, Hexan, Benzol, Dimethoxyethan oder Dioxan, wird in der Regel einer Lösung von Diazomethan in Ether, die auf etwa —40 bis 20 °C gekühlt wurde, zugesetzt, wobei anschliessend bei etwa 25 °C etwa 1 bis 24 Stunden heftig gerührt wird. Das so erhaltene Diazoketonderivat kann nach üblichen Methoden isoliert werden, wie Verdampfen des Lösungsmittels mit anschliessender Reinigung durch Umkristallisieren oder Chromatographie. Wahlweise kann das Reaktionsgemisch mit einem geeigneten Fluorierungsmittel wie vorstehend beschrieben ohne Isolierung behandelt werden.

Das vorstehend beschriebene entsprechend substituierte Diazoketonderivat kann zur Herstellung von Verbindungen der Formel XIII verwendet werden, worin R14 beispielsweise

Halogen, Mesylat, Tosylat, Triflat oder Trifluoracetat bedeutet, unter Anwendung allgemein bekannter Methoden. Zur Erzielung der Verbindungen der allgemeinen Formel XIII, worin R14 Halogen bedeutet, wie Chlor, Brom oder Jod, kann die entsprechende Verbindung der Formel XIII, worin R14 eine Diazogruppe ist, mit entweder wässrigem Chlorwasserstoff, Bromwasserstoff oder Jodwasserstoff in einem geeigneten aprotischen Lösungsmittel behandelt werden. Zur Erzielung von Verbindungen der Formel XIII, worin R14 Mesylat, Tosylat, Triflat oder Trifluoracetat ist, können die entsprechenden Diazoketonderivate, worin R14 eine Diazogruppe ist, in einem geeigneten aprotischen Lösungsmittel gelöst und mit verdünnter Schwefelsäure behandelt werden, unter Erzielung des entsprechenden Benzylmetha-nolketonderivats. Schliesslich kann das Benzylmethanolke-ton mit einem geeigneten Säurechlorid oder Säureanhydrid unter Verwendung von Methansulfonsäure, p-Toluolsulfon-säure, Trifluormethylsulfonsäure oder Trifluoressigsäure verestert werden.

Die Säurehalogenide, d.h. Verbindungen der Formel

O

Z'-t-Halogenid wie vorstehend beschrieben, sind bekannte Verbindungen, die aus den entsprechenden Säuren hergestellt werden können. So erhält man beispielsweise durch Behandlung der entsprechenden Säure mit Thionylchlorid in einem aprotischen Lösungsmittel wie Diethylether, Tetrahydrofuran, Benzol oder Dichlormethan bei einer Temperatur von etwa 0 °C bis Rückflusstemperatur des Lösungsmittels etwa 1 bis 24 Stunden lang das entsprechende Säurehalogenid. Wahlweise kann auch die Behandlung der entsprechenden Säure mit Oxalylchlorid in einem der vorstehend beschriebenen aprotischen Lösungsmittel bei einer Temperatur von etwa 0 bis 40 °C 1 bis 24 Stunden lang zu dem entsprechenden Säurehalogenid führen.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel XII, worin Y

FCH2- und Z' kein Benzoyl-NH<5(CH2)2- oder Alka-Ri noyl-NHÌ(CH2)2- bedeuten, können ausserdem erhalten werden durch Behandlung einer Verbindung der Formel

Z2-R15 (XIV)

R-13

worin Z2 Phthaloyl-N-ÓH(CH2)2-, Alkoxycarbo-Rl3 Ri3

nyl-NH(î:(CH2)2-, Benzyloxy-NHC(CH2)2-, ß-Methylthio-ethyl oder ß-Benzylthioethyl; R13 Methyl und Rls Chlor, Brom oder Jod, Mesylat oder Tosylat bedeuten. So wird beispielsweise eine Verbindung der Formel XIV mit Triphe-nylphosphon oder Tri-(nieder)-alkylphosphin, wie beispielsweise Tri-n-butylphosphin, in einem Lösungsmittel wie Benzol, Toluol, Methanol, Ethanol, Acetonitril, Tetrahydrofuran, Diethylether oder Dimethoxyethan umgesetzt. Die Umsetzung erfolgt gewöhnlich bei einer Temperatur des Lösungsmittels von 25 °C bis Rückflusstemperatur binnen etwa 10 Minuten bis 48 Stunden. Beim Abkühlen kann der sich bildende Niederschlag mit Lösungsmittel gewaschen und umkristallisiert werden unter Bildung des entsprechenden Phosphoniumsalzes. Das Triphenylphosphonium- oder Tri-alkylphosphoniumsalz wird in der Regel einem Überschuss (bis zu 25%) Natrium- oder Lithiummetall, gelöst in flüssigem Ammoniak, zugesetzt, dem wiederum eine katalytische

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Menge Ferrinitrat zugesetzt wird. Das Rühren wird vorzugsweise etwa 10 Minuten bis 3 Stunden fortgesetzt, wonach das Ammoniak unter einer inerten Atmosphäre wie Stickstoff oder Argon verdampft werden kann. Es kann ein geeignetes Lösungsmittel wie Benzol, Toluol, Diethylether, Tetra- 5 hydrofuran oder Dimethoxyethan zugesetzt und das dabei entstehende substituierte Methylidenphosphoran gesammelt werden. Das Methylidenphosphoran wird im allgemeinen mit einem niederen Alkylester von Monofluoressigsäure in einem Lösungsmittel wie Benzol, Toluol, Diethylether, Te-trahydrofuran oder Dimethoxyethan behandelt. Die Reaktion erfolgt vorzugsweise unter einer inerten Atmosphäre wie Stickstoff oder Argon bei einer Temperatur von etwa 0 °C bis Rückflusstemperatur des Lösungsmittels binnen etwa 30 Minuten bis 24 Stunden. Das Reaktionsgemisch 15 wird gewöhnlich durch Destillation eingeengt, wobei man ein Olefin erhält. Das Olefin kann mit einer wässrigen Mineralsäure wie Salzsäure oder Bromwasserstoffsäure oder einer organischen Säure wie Trifluoressigsäure oder p-Toluolsul-fonsäure in Gegenwart eines Colösungsmittels wie Tetrahy- 20 drofuran, Diethylether oder Benzol etwa 30 Minuten bis 24 Stunden bei einer Temperatur von etwa 0 °C bis Rückflusstemperatur des Lösungsmittels behandelt werden. Die Menge an verwendeter Säure kann von einer katalytischen Menge bis zu einer konzentrierten Säurelösung reichen. 25 In der allgemeinen Formel XIV bedeutet der Ausdruck

R,3

Phthaloyl-N-Cl:H(CH2)2 die Gruppe

?13

;N-ch{CH2)2-'

Rl3

der Ausdruck Alkoxycarbonyl-NHCH(CH2)2- die Gruppe O R13

Alkyl-0-Ì-NHÒH(CH2)2- und der Ausdruck Benzyloxy-carbonyl-NHÓH(CH2)2- die Gruppe

0~c

0 R13

II 1

Z'-Rle

(XV)

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CH2-OCNHCH(CH2)2-

worin Ri j die in Formel XIV angegebene Bedeutung hat und Alkyl eine gerade oder verzweigte Gruppe mit 1 bis 4 C-Atomen bedeutet.

Verbindungen der allgemeinen Formel XII, worin Y F2CH- ist, können durch Behandlung von [[((Methylsulfi-nyl)-methyl]-thio]methan oder [[(Ethylsulfmyl)methyl]-thio]ethan mit einer geeigneten starken Base und anschliessende Alkylierung mit einem geeigneten Derivat der Formel worin Z' die in Formel XII angegebene Bedeutung besitzt und R16 Chlor, Brom, Jod, Mesylat oder Tosylat bedeutet, erhalten werden.

Das dabei sich bildende Z'-substituierte Sulfinylderivat wird gewöhnlich mit einer geeigneten starken Base behandelt und anschliessend alkyliert unter Verwendung eines geeigneten Halogenmethylhalogenalkylierungsmittels wie Chlor-difluormethan, Bromdifluormethan oder Difluoriodmethan. Nach der Alkylierung kann eine Hydrolyse unter Verwendung einer wässrigen Säurelösung erfolgen.

Geeignete starke Basen, die sich zur Herstellung der vorstehend beschriebenen difluormethylsubstituierten Ketonde-rivate verwenden lassen, sind Natriumhydrid, Dilithiumacetylid, Lithiumdiisopropylamid, Butyllithium, Kalium-tert.-butoxid, Natrium-tert.-butoxid, Lithium-tert.-butoxid, Phe-nyllithium, Methyllithium, Natriumamid, Lithiumamid oder Kaliumhydrid.

Die zur Herstellung der Difluormethylketonderivate beschriebene Alkylierung wird vorzugsweise in einem geeigneten Lösungsmittel, wie beispielsweise Tetrahydrofuran, Diethylether, Hexamethylphosphortriamid, Dimethylsulf-oxid oder Benzol, durchgeführt. Die Reaktion erfolgt insbesondere bei einer Temperatur von etwa — 78 bis 65 °C binnen etwa 30 Minuten bis 24 Stunden. Vorzugsweise wird eine Temperatur von etwa 40 °C für die Difluormethylalky-lierungsstufe angewendet. Die alkylierten Sulfmylzwischen-produkte können durch Abschrecken mit einer Salzlösung und anschliessende Extraktion unter Verwendung von Diethylether, Dichlormethan oder Benzol isoliert werden. Die alkylierten Sulfinylzwischenprodukte werden im allgemeinen aus den kombinierten Extrakten gewonnen.

Die Hydrolyse der alkylierten Sulfinylderivate zum Ke-ton kann unter Verwendung einer wässrigen Mineralsäurelösung wie Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Perchlorsäure oder Schwefelsäure in einem Lösungsmittel wie Tetrahydrofuran, Acetonitril, Diethylether oder Benzol erfolgen. Die Hydrolyse erfolgt bevorzugt bei einer Temperatur von etwa — 20 bis 105 °C, vorzugsweise etwa 25 CC binnen etwa 30 Minuten bis 24 Stunden, vorzugsweise etwa 2 Stunden. Im allgemeinen wird eine Lösung von 0,3 Äquivalenten Mineralsäure in 1,5% Wasser verwendet. Die nachstehend beschriebenen spezifischen Beispiele erläutern bevorzugte Ausführungsformen für die Herstellung der Difluormethylketonderivate der Formel XII.

Die Verbindungen der Formel XIV und XV, worin Rj 5 und R16 Halogen sind, sind bekannt und lassen sich gewöhnlich aus einem entsprechenden Carbonsäurederivat der Formel

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Z4-COOH

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(XVI)

r,

worin Z4 Phthaloyl-N(i:H(CH2)2-, Benzoyl-NH(!:H(CH;

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y

Alkanoyl-NHÒH(CH2)2-, Alkoxycarbo-

Rl3 Rl3

nyl-NHÓH(CH2)2-, Benzyloxycarbonyl-NHÓH(CH2)-, Methylthiomethyl oder Benzylthiomethyl bedeutet, herstellen. Diese Säuren sind bekannt oder lassen sich nach bekannten Verfahren aus den entsprechenden nicht geschützten Aminosäuren herstellen. Die Verbindungen der Formeln XIV und XV, worin R15 und R16 Mesylat oder Tosylat bedeuten, lassen sich insbesondere durch Behandlung der entsprechenden Derivate, worin R15 und R16 Halogen bedeuten, mit einem Metallsalz von Methansulfonsäure oder p-Toluolsulfonsäure herstellen. Beispielsweise kann das Natriumsalz von Methansulfonsäure oder p-Toluolsulfonsäure verwendet werden.

Die Reduktion der Ketone der Formel XII zu den entsprechenden Alkoholen erfolgt bevorzugt auf chemischem Wege unter Verwendung von 1 bis 10 Äquivalenten eines Metallhydrids wie Lithiumborhydrid, Natriumborhydrid, Natriumcyanborhydrid oder Lithiumaluminiumhydrid. Ausserdem können die Ketone mit Boran oder Dimethyl-

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thioboran oder katalytisch unter Verwendung von beispielsweise Raney-Nickel, Rhodium, Palladium oder Tierkohle oder Platinoxid reduziert werden. Im allgemeinen beträgt die Reaktionszeit etwa 10 Minuten bis 24 Stunden und die Reaktionstemperatur von etwa —40 bis 100 °C in Abhängigkeit vom jeweils verwendeten Reduktionsmittel. Wenn z.B. die Hydrid- oder Boranreduktion angewendet wird, kann die Reaktion in einem geeigneten Lösungsmittel etwa 10 Minuten bis 24 Stunden bei Temperaturen von etwa —40 bis 65 °C erfolgen. Zu den geeigneten Lösungsmitteln, die sich zur Reduktion der Verbindungen der allgemeinen Formel XII verwenden lassen, gehören insbesondere niedere Alkohole wie Methanol oder Ethanol oder Ether wie Diethylether oder Tetrahydrofuran. Bei der katalytischen Reduktion beträgt die Reaktionszeit im allgemeinen von etwa 1 bis 24 Stunden, die Reaktionstemperatur von etwa 25 bis 100 °C und der Wasserstoffdruck von 1 bis 120 bar.

Die Hydrolyse zum Amin und die Entfernung jeglicher distaler Aminschutzgruppen kann unter Verwendung einer starken Mineralsäure wie Salzsäure, Bromwasserstoffsäure oder Schwefelsäure oder einer organischen Säure wie To-luolsulfonsäure oder Difluoressigsäure erfolgen. Die Hydrolyse erfolgt vorzugsweise in Wasser oder einem wässrigen Lösungsmittel bei Rückflusstemperatur etwa 4 bis 48 Stunden. Wahlweise können 1 bis 3 Äquivalente Hydrazin, Me-thylhydrazin oder Methylamin bei einer Temperatur von etwa 25 °C bis Rückflusstemperatur der Lösung etwa 1 bis 12 Stunden lang verwendet werden, wobei anschliessend gewöhnlich die Behandlung mit einer starken Mineralsäure oder organischen Säure wie vorstehend beschrieben erfolgt.

Verbindungen der Formel I, worin Z H2N-<^H(CH2)2;

CH3

Rj Hydroxy und Y CsCH oder wie nachstehend erläutert die Alkinylgruppe bedeuten, können durch Hydrolyse der alkylierten Verbindungen 5, wie vorstehend beschrieben, hergestellt werden. Das gewünschte zu verwendende Alkylierungsmittel R8X lässt sich nach bekannten Methoden herstellen. So lässt sich das Mittel PhHC=NCH2(CH2)2- z.B. durch Umsetzung von 3-Brom-n-propylaminhydrochlorid mit Benzaldehyd und einem organischen Trialkylamin wie Triethylamin in einem Lösungsmittel wie Diethylether, Tetrahydrofuran, Dioxan, Chloroform oder Dichlormethan

CH3

herstellen. Der Reaktionsteilnehmer PhHC = NCH(CH2)2 kann durch Umsetzung von 3-Aminobutylbromidhydrobro-mid mit Benzaldehyd und einem organischen Amin wie Triethylamin hergestellt werden. Die Verbindung 3-Aminobu-tylbromidhydrobromid ist eine bekannte Verbindung, die sich aus dem entsprechenden Alkanoyl durch Behandlung mit konzentrierter HBr bei einer Temperatur von 25 bis 110 °C binnen 1 bis 12 Stunden herstellen lässt. Das y-Ami-noalkanolderivat lässt sich erhalten durch Behandlung eines geeigneten ß-Keto-alkansäureesters der Formel

O O CH3C-CH2C-OCH2CH3

Der ß-Keto-alkansäureester wird vorzugsweise mit Hy-droxylamin unter Bildung des entsprechenden Oxims behandelt, das mit Lithiumaluminiumhydrid in Ether oder Tetrahydrofuran bei einer Temperatur von 25 bis 50 °C binnen 1 bis 12 Stunden reduziert wird. Bei der anschliessenden bevorzugten Hydrolyse des Esterrestes erhält man y-Aminoal-kanol.

Die Alkylierung lässt sich in einem aprotischen Lösungsmittel wie beispielsweise Benzol, Toluol, Ether, Tetrahydrofuran, Dimethylsulfoxid oder Hexamethylphosphortriamid durchführen. Die Reaktionstemperatur beträgt im allgemeinen von etwa —100 bis 25 ~C, vorzugsweise etwa —70 °C, und die Reaktionszeit schwankt gewöhnlich zwischen etwa Vi und 24 Stunden.

Die Entfernung der Schutzgruppen, wie es im Reaktionsschema in der Stufe, die von den Verbindungen 5 zu den gewünschten Aminen führt, dargestellt wird, erfolgt vorzugsweise durch Behandlung mit wässriger Säure wie beispielsweise Salzsäure und anschliessend mit wässriger Base wie beispielsweise Natriumhydroxid oder Kaliumhydroxid oder Behandlung mit Phenylhydrazin, Hydroxylamin oder Hydrazin und anschliessend mit wässriger Base.

Die einzelnen optischen Isomeren der Verbindungen der Formel I, worin Rj Carboxy oder Wasserstoff bedeutet, können unter Verwendung von a (+) oder (—)-Binaph-thylphosphorsäuresalz nach dem Verfahren von R. Viterbo et al., Tetrahedron Letters 48,4617 (1971) aufgespalten werden. Andere Spaltmittel wie (+)-Kampfer-10-sulfonsäure können ebenfalls verwendet werden. Wahlweise kann die Aufspaltung, wenn Z H2N-^H-(CH2)2 oder H2N(CH2)n

CH3

bedeutet, über das Lactam dieser Verbindungen erfolgen. Die so aufgespaltenen Säuren und Amine lassen sich auf die gleiche Weise wie vorstehend für die racemischen Gemische beschrieben verwenden.

Die hier beschriebenen Verbindungen eignen sich zum Inhibieren des Wachstums von Protozoen in Tieren. Der Ausdruck «Tiere» umfasst u.a. Säugetiere wie Mäuse, Ratten, Meerschweinchen, Kaninchen, Frettchen, Hunde, Katzen, Kühe und Pferde. Ebenfalls durch den Ausdruck Tiere umfasst sind Fische und Vögel. Der Ausdruck «Vögel» umfasst männliche und weibliche Vögel jeglicher Art, einschliesslich Papageien und Kanarienvögel, umfasst jedoch in der Hauptsache Geflügel, insbesondere Geflügel das kommerziell für Eier oder Fleisch gezüchtet wird. So soll der Ausdruck «Geflügel» vor allem Hennen, Hähne, Hähnchen, Truthähne und Enten umfassen.

Der Ausdruck «Protozoen» umfasst die Glieder der Sub-phyla Sarcomastigophora und Sprozoa des Phylums Protozoen. Insbesondere umfasst der Ausdruck «Protozoen», wie er im vorstehenden verwendet wird, diejenige Gattung von Parasitenprotozoen, die für Menschen insofern wichtig sind, als sie von Haustieren auf ihn übertragen werden können. Diese Gattungen finden sich zum grössten Teil klassifiziert in der Oberklasse Mastigophora des Subphylums Sarcomastigophora und der Klasse Telesporea des Subphylums Spo-rozoa gemäss der Klassifizierung von Baker (1969). Zu den Beispielen von Gattungen dieser parasitischen Protozoen gehören Histomonas, Trypanosoma, Giardia, Trichomonas, Eimeria, Isopora, Toxoplasma und Plasmodium.

Ausgeschlossen von der Überklasse der Mastigophora ist der Genus Leishmania, von dem gewisse Species die Tropenkrankheit Leishmaniasis bei Menschen verursachen. Ausserdem sind insbesondere von der Gattung Trypanosoma gemäss der Erfindung die Species Trypanosoma cruzi ausgeschlossen, die die Chargas'-Krankheit im Menschen verursachen und die Species Trypanosoma lewisi. Die hier beschriebenen Verbindungen erwiesen sich als nicht besonders wirksam gegen diese Species.

Andererseits sind die Verbindungen der Formel I besonders geeignet zur Inhibierung des Wachstums von Trypanosoma brucei, der Erreger von Nagana oder der Tsetse-Flie-gen-Krankheit von Pferden und Rindvieh in Zentral-Afrika. Die hier beschriebenen Verbindungen sind ausserdem be5

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achtlich wirksam zur Inhibierung des Wachstums von Eimeria tenella, eine Species von Protozoen, die Coccidiose in Geflügel verursachen.

Eine bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ist somit ein Veterinär-Arzneimittel zur Inhibierung des Wachstums von Darmcoccidiose bei kommerziellem Geflügel. Die wirtschaftliche Bedeutung von Darmcoccidiose ist hochsignifikant. So betrug 1972 der geschätzte Verlust für die Geflügelindustrie in den USA aufgrund von Coccidiose-Infektionen etwa 47 Millionen Dollar. Aufgrund der rapiden Entwicklung von Arzneimittelresistenz der Coccidien und aufgrund der relativ hohen Toxizität einiger Arzneimittel, die zur Behandlung von Coccidiose verwendet werden, besteht ein Bedarf an wirksamen coccidiostatischen Mitteln, die nicht toxisch sind und gegenüber denen die Darmcoccidiose keine rapide Arzneimittelresistenz entwickelt.

U.a. sind die hier beschriebenen Verbindungen irreversible Inhibitoren von Ornithindecarboxylase und S-Adeno-xylmethionindecarboxylase. Als irreversible Inhibitoren dieser Enzyme inhibieren diese Verbindungen die Polyaminbil-dung, die für die Protozoen-Zellteilung erforderlich sein kann. In jedem Falle ist die Praxis der vorliegenden Erfindung nicht an irgendeine bestimmte Art oder Theorie der Wirkung gebunden, wodurch die in den erfindungsgemässen Mitteln enthaltenen Verbindungen in der Lage sind, das Wachstum von Protozoen wirkungsvoll zu inhibieren.

Die Wirkung der Verbindungen der allgemeinen Formel I auf das Wachstum von Protozoen und insbesondere auf das Wachstum von Coccidien lässt sich unter Verwendung von Eimeria tenella und zwei Wochen alten männlichen weissen Leghorn-Hähnchen als Testtiere demonstrieren. Die Tiere wurden in Batterien gehalten, und die infizierten und nicht infizierten Tiere wurden in getrennten Räumen untergebracht, um die Aufrechterhaltung von coccidienfreien Tieren sicherzustellen. Jedes experimentell infizierte Tier erhielt 100 000 sporylierte Oocysten über die Magensonde. Die Testverbindung wurde in der entsprechenden gewünschten Dosis durch das Trinkwasser verabreicht, und arzneimittelfreie Maische wurde ad libitum zugesetzt. Um die Wirkung des Wirkstoffs auf E. tenella Infektionen zu beurteilen, wurden die Hähnchen mit Kohlendioxid getötet, obduziert, im allgemeinen am 5. Tag der Studie, und die Zökumschädigun-gen beurteilt.

Die Inhibierung von Protozoen-Wachstum kann ausserdem unter Verwendung von Trypanosoma brucei brucei bestimmt werden, der der Erreger von Schweine-Trypanosomi-asis (Nagana) in Afrika ist. Die verwandten Species Trypanosoma brucei rhodesiense und Trypanosoma brucei gam-biense sind die Erreger für die afrikanische Schlafkrankheit bei Menschen.

Im allgemeinen wird die Arzneimittelwirksamkeit gegen bestehende Infektionen eines pleamorphen EATRO 110 Iso-lats von T.b. brucei bei Mäusen getestet. Die Testtiere werden 24 Stunden vor dem Testen mit 5 x 10s Parasiten infiziert. Die so infizierten Kontrolltiere sterben im allgemeinen 5 Tage nach der Inokulierung. Die zu testenden Verbindungen werden über das Trinkwasser in unterschiedlichen Mengen an die Testtiere verabreicht. Tiere, die von der Infektion geheilt wurden, bleiben über 30 Tage nach dem Tod der Kontrolltiere parasitenfrei, wie durch eine Untersuchung von Blutabstrichen festgestellt wurde.

Die hier beschriebenen Verbindungen werden in Mengen verwendet, die zur Inhibierung des Protozoenwachstums wirksam sind. Diese Mengen hängen natürlich von verschiedenen Faktoren ab, wie dem Typ und der Art der Protozoen-Infektion, der Wirksamkeit der spezifischen Verbindung, dem Alter, dem Geschlecht und der Species des zu behandelnden Tieres und davon, ob die Behandlung prophylaktisch oder therapeutisch erfolgen soll. Im allgemeinen lassen sich die hier beschriebenen Verbindungen oral oder parenteral in einer täglichen Dosis von 5 mg/kg bis 7 g/kg verabreichen. Vorzugsweise betragen die Dosen im Fall von Trypanosoma-Infektionen etwa 600 mg/kg bis 2 g/kg. Im Fall von Eimeria-Infektionen können die Dosen herabgesetzt werden und betragen von etwa 15 mg/kg bis etwa 1 g/ kg.

Aufgrund der geringen Toxizität der hier beschriebenen Verbindungen lassen sich die Verbindungen ad libitum über das Trinkwasser des Testtieres bei der Behandlung von Coccidiose bei Geflügel sicher verabreichen. Im allgemeinen kann man sagen, dass sich Konzentrationen an Wirkstoff von etwa 0,01 bis etwa 2% eignen, in erster Linie in Abhängigkeit von der Art der zu behandelnden Protozoen-Infektion, ob prophylaktisch oder therapeutisch, der Schwere der Infektion und der Zeitspanne der Behandlung.

So kann beispielsweise die Verbindung 2-Difluormethyl-2,5-diaminopentansäure wirksam an Hähnchen zur Behandlung von Coccidiose 1 Tag vor der Infektion als 2%ige Lösung verabreicht werden. Wahlweise kann eine prophylaktische Behandlung 8 Tage vor der Infektion angewandt werden unter Verwendung von Konzentrationen von nur 0,015% 2-Difluormethyl-2,5-diaminopentansäure im Trinkwasser von Hühnern. Vorzugsweise beträgt eine prophylaktische Konzentration von 0,06 bis 1,0%.

Diese prophylaktische Behandlung zur Inhibierung des Protozoen-Wachstums stellt einen der hauptsächlichsten Vorteile der Verwendung der hier beschriebenen Decarboxy-laseinhibitoren dar. So wächst im Fall von Coccidien-Infek-tionen bei Hühnern beispielsweise Eimeria tenella intrazellular in den Epithel-Zellen des Zökums als ein trophozoites Stadium. Anschliessend unterliegen diese Zellen einer Form von Mehrfach-Mitosis unter Bildung einer grossen Anzahl von Merozoiten. Diese Merozoiten werden freigesetzt, wenn die Wirtszelle lysiert und dienen der extensiven Infektion von frischen Zellen. Das Ergebnis ist, dass die Wand des Zökums schwer beschädigt wird, was zu ernstem Blut- und Flüssigkeitsverlust und schliesslich zum Tod führt. Ausserdem werden während des Lebenszyklus von E. tenella resistente Oocysten produziert, die sich in den Darm der Hühner entleeren. Da Hühner kotfressend sind, breitet sich die Krankheit rapide durch Verunreinigungen ihrer Nahrungsmittelzufuhr aus. Dementsprechend werden Coccidien-Infektionen in kommerziellen Scharen, wenn sie auftreten, epidemisch behandelt mit massiven Dosen von gegenwärtig verfügbaren chemotherapeutischen Mitteln, die vornehmlich abtötende Mittel sind. Folglich werden heutzutage in kommerziellen Scharen mit Medikamenten versetzte Nahrungsmittel routinemässig verwendet, so dass alles kommerzielle Geflügel heutzutage fast konstant Medikamente enthält, um das Ausbrechen von Coccidiose zu verhindern.

Die Tatsache, dass die hier beschriebenen Decarboxyla-seinhibitoren prophylaktisch verabreicht werden können, befähigt den Wirt, eine anschliessende natürlich oder künstlich induzierte Infektion enzymatisch zu überstehen mit Hilfe eines inhibierenden Mechanismus und nicht mit Hilfe einer abtötenden Wirkung. Somit ist im Falle einer E. tenella-Infektion die Infektion auf eine Weise beschränkt, die den Wirt befähigt, sich seinen eigenen Abwehrmechanismus zunutze zu machen. Die dabei entstehenden Antikörper, die mit Hilfe einer solchen gesteuerten Infektion produziert werden, dienen der weiteren permanenten Immunisierung des Wirtes gegenüber zukünftigen E. tenella-Infektionen.

Die Arzneimittel, die sich zur Prophylaxe oder Behandlung von Protozoen-Infektionen in Geflügel eignen, enthalten die vorstehend beschriebenen a-substituierten Amine oder die a-substituierten a-Aminosäuren in Kombination

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mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger. Vorzugsweise werden die Antiprotozoen-Mittel hergestellt durch Vermischen des Wirkstoffs mit einem inerten Trägermaterial. Zu den typischen Trägern gehören insbesondere Talk, Ton, Bimsstein, Kieselerde, Kreide, Diatomeenerde, Wal-nussschalenmehl und deren Äquivalente. Wahlweise können die Wirkstoffe mit einem kommerziellen Futter oder Vitamin- und Mineralvorgemisch, die speziell für Geflügel abgestellt sind, vermischt werden.

In den meisten Fällen wird eine konzentrierte wässrige Lösung des Wirkstoffs bei der Behandlung von Coccidiose bei Geflügel verwendet. Die beschriebenen Verbindungen sind in den meisten Fällen stark löslich, insbesondere in Form ihrer Salze. Derartige Lösungen können vorteilhafterweise Konservierungsmittel enthalten, wie Parabene, Ben-zylalkohol, Phenol oder Thimerosal. Zusätzlich lassen sich isotonische Mittel, Zucker, Stabilisierungs- oder Puffermittel verwenden.

Die Verbindungen der Formel I können zusammen mit anderen bekannten Arzneimitteln, die gegenwärtig für die Chemotherapie und Chemoprophylaxe von Krankheiten, die durch parasitäre Protozoen verursacht werden, verwendet werden. Im allgemeinen hat dies die Wirkung, dass die Menge an verabreichten Enzyminhibitoren herabgesetzt werden kann. Zu solchen bevorzugten Arzneimitteln gehören u.a. Chinapyramin, Berenil, Diminazenaceturat, Pent-amidinisethionat, Primachin, Tryparsamid, Amicarbalid, Amprolium, Amphotericin B, Chinin, Monensin Minocyclin, 7-Dimethylamino-6-demethyl-6-desoxytetracyclin, Clindamycin, 7-Desoxy-7(S)-chlorlincomycin, Buchinolat, Ro-benidin und Nicarbazin. In einigen Fällen erhöhen oder potenzieren die Verbindungen der Formel I tatsächlich die Wirkungen dieser Arzneimittel.

Von besonderem Interesse in dieser Hinsicht ist die Verbindung 2,5-Diamino-2-difluormethylpentansäure, die sich als synergistisch wirkendes Mittel mit den Antiprotozoen-mitteln Chinapyramin, Pentamidinisethionat und Amicarbalid erwies. Somit kann die 2,5-Diamino-2-difluormethyl-pentansäurekonzentration um etwa das 4fache verringert werden, wenn es in Kombination mit subcurativen Dosen (weniger als 1,0 mg/kg) dieser Arzneimittel verwendet wird.

Ausserdem können die Verbindungen der Formel I in Kombination mit anderen bekannten cytotoxischen Mitteln für die Chemotherapie und Chemoprophylaxe von parasitären Krankheiten insbesondere Trypanosomiasis verwendet werden. Zu derartigen cytotoxischen Mitteln gehört das an-tineoplastische antibiotische Bleomycin sowohl als andere wohlbekannte cytotoxische Mittel, wie beispielsweise Cyclo-phosphamid, Methotrexat, Prednison, 6-Mercaptopurin, Procarbozin, Daunorubicin, Vincristin, Vindesin, Vinbla-stin, Chlorambucil, Cytosinarabinosid, 6-Thioguanin, Thio-TEPA-5-Fluoruracil, 5-Fluor-2-desoxyuridin, 5-Azacytidin, Stickstoffsenf, 1,3-Bis-(2-chlorethyl)-1 -nitrosoharnstoff (BCNU), l-(2-Chlorethyl)-3-cyclohexyl-l-nitrosoharnstoff (CCNU), Busulfan oder Adriamycin.

Von besonderem Interesse bei der Behandlung von Trypanosomiasis im allgemeinen und insbesondere bei der Behandlung von Nagana bei Rindvieh, ist die Verwendung des Enzyminhibitors 2,5-Diamino-2-difluormethylpentansäure in Kombination mit dem Antitumor-Antibiotikum Bleomycin. Dieser besondere Enzyminhibitor scheint mit Bleomycin synergistisch zu wirken. So werden Mäuse, die mit Trypanosoma brucei infiziert worden sind, nach drei Tagen nach täglicher i.p.-Verabreichung von Bleomycin in einer Dosis von 7 mg/kg geheilt. Auf ähnliche Weise werden Trypanosom-Infektionen bei Mäusen durch die Verabreichung von einer l%igen Lösung 2,5-Diamino-2-difluormethylpentansäure im Trinkwasser 3 Tage lang geheilt.

Die Ergebnisse mehrerer Kombinationsversuche zeigen an, dass Heilungen konsequenterweise mit 0,5 mg/kg Bleomycin in Kombination mit 0,5% 2,5-Diamino-2-difluorme-thylpentansäure bei Verabreichung über das Trinkwasser erzielt werden. Wahlweise lassen sich Heilungen mit Konzentrationen von 0,25 mg/kg Bleomycin in Kombination mit nur 0,25% 2,5-Diamino-2-difluormethylpentansäure im Trinkwasser erzielen. Eine Kombination von 0,1 mg/kg Bleomycin und 0,1% 2,5-Diamino-2-difluormethylpentan-säure hat keine Wirkung. Die heilenden Dosierungskombinationen spiegeln eine Reduktion der Bleomycin-Dosierung um Vz bis Vie der heilenden Dosis des alleine verwendeten Arzneimittels wieder, wenn es in Kombination mit einer subcurativen Dosis von vz bis % der heilenden Dosis von 2,5-Diamino-2-difluormethylpentansäure verwendet wird.

Nachstehende Präparate und Beispiele sowie auch die Versuche dienen der weiteren Erläuterung der Erfindung.

Präparat 1 2-Difluormethyl-2,5-diaminopentansäure Unter Stickstoff wurde eine Lösung (500 ml) von 2M Bu-tyllithium in Hexan unter Rühren einer Lösung von 143,1 ml Diisopropylamin in 1,51 Tetrahydrofuran bei —78 °Czugesetzt, wonach 261 g (0,81 Mol) Ornithindibenzaldiminme-thylester in 1,51 Tetrahydrofuran zugesetzt wurden. Nach Beendigung der Zugabe erhöhte man die Reaktionstemperatur auf 40 °C und hielt sie 3 Stunden lang zwischen 40 und 50 °C und blies während dieser Zeit Chlordifluormethangas unter Rühren durch das Gemisch. Das Reaktionsgemisch wurde dann mit einer gesättigten Natriumchloridlösung behandelt. Das organische Material wurde mit Ether extrahiert und die Etherextrakte mehrere Male mit Natriumchloridlösungen gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt unter Bildung eines viskosen Öles. Das Öl wurde mit IN HCl (1,51) 3 Stunden lang gerührt, das Gemisch mehrere Male mit Chloroform extrahiert und die wässrige Lösung zur Trockne eingeengt. Der ölige Rückstand wurde mit 12N Salzsäure (1,51) 16 Stunden unter Rückfluss behandelt, die gekühlte Lösung durch Chloroformextraktion vorm Einengen geklärt, entfärbt (mit Holzkohle) und weiter auf etwa 750 ml eingeengt. Der pH-Wert der Lösung wurde durch Zugabe von Triethylamin auf 3,5 eingestellt, die Lösung nochmals mit Holzkohle vorm Einengen auf etwa 500 ml behandelt und mit 7 bis 81 Aceton verdünnt. Das ausgefallene Produkt wurde abfiltriert und mit Ethanol gewaschen. Das Rohprodukt wurde durch Lösen in etwa 150 ml heissem Wasser und Behandlung der Lösung mit heissem Ethanol (450 ml) umkristallisiert. Beim Abkühlen schieden sich Kristalle von 2-Difluormethyl-2,5-diaminopentansäure-hydrochloridmonohydrat ab, 71 g (37%), Schmelzpunkt 183 °C.

Präparat 2 a-Ethynyl-a,5-diaminovaleriansäure 11,8 g (0,048 M) N-(3-Trimethylsilylprop-2-ynyl)-benzol-carboximidat in 20 ml Tetrahydrofuran wurde Lithiumdiiso-propylamid zugesetzt, das aus 4,9 g (6,78 ml, 0,048M) Diiso-propylamid in 60 ml Tetrahydrofuran und 23,6 ml einer 2,05M Lösung n-Butyllithium bei — 70 °C hergestellt worden war, wonach 9,5 g (0,042 M) N-(3-Brompropyl)-benzylimin zugesetzt wurden und das Gemisch bei — 70 °C 5 'A Stunden gerührt wurde. Das Reaktionsgemisch wurde mit 23,6 ml einer 2,05M Lösung von n-Butyllithium und anschliessend mit 4,5 g (3,67 ml, 0,048 M) Methylchlorformiat versetzt. Nach 30 Minuten bei —78 °C wurde das Gemisch mit einer Salzlösung behandelt und das Reaktionsprodukt durch Etherex-traktion isoliert. Der Etherextrakt wurde eingedampft, und es wurden 300 ml 3N HCl zu dem dabei entstehenden Rück12

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stand gegebene und das Gemisch 7 Stunden lang unter Rückfluss gehalten. Beim Abkühlen wurde das Gemisch gut mit Methylenchlorid gewaschen, alkalisch gemacht und nochmal gewaschen. Die wässrige Lösung wurde angesäuert und zur Trockne eingeengt. Der Rückstand wurde mit Ethanol trituriert, abfiltriert und das Ethanol abgedampft. Der Rückstand wurde in Wasser gelöst, der pH-Wert auf 6 eingestellt und die Lösung auf eine mit Amberlit 120 H+ gefüllte Säule gegeben und mit IM NH4OH eluiert, wobei man nach Umkristallisation aus Ethanol/Wasser a-Ethynyl-a,8-diami-novaleriansäure erhielt, Schmelzpunkt 168 bis 169 °C (Zers.).

In vorstehendem Verfahren wird N-(3-Brompropyl)-benzylimin aus 3-Brompropylamin und Benzaldehyd nach allgemein bekannten Verfahren hergestellt.

Präparat 3

1 -Fluormethyl-1,4-butandiamin-dihydrochlorid

Eine Lösung von 40 mMol Diazomethan in 110 ml Ether, die auf 0 °C gekühlt und magnetisch gerührt wurde, wurde unter Stickstoff tropfenweise binnen 1 Stunde mit einer Lösung von 20 ml 4-Phthalimidobutyrylchlorid in 75 ml Ether versetzt.

Das Rühren wurde 1 Stunde lang bei 25 °C fortgesetzt, wonach das Reaktionsgemisch einer Lösung von 40 ml HF/ Pyridin, vorgekühlt auf 0 °C, zugesetzt wurde. Das dabei entstehende heterogene Gemisch wurde bei 25 °C 1 lA Stunden gerührt und dann auf Eiswasser gegossen. Die Ether-phase wurde abgetrennt, mit einer Bicarbonatlösung und dann mit einer Salzlösung gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Die Einengung des Lösungsmittels unter vermindertem Druck ergab einen Feststoff, der aus Diethyl-ether/Pentan umkristallisiert wurde und Fluormethyl-3-phthalimidopropylketon war, Schmelzpunkt 92 °C.

Eine Lösung von 550 g (2,2 mMol) Fluormethyl-3-phthalimidopropylketon in einem Gemisch von 5 ml Tetrahydrofuran und 5 ml Methanol, gekühlt auf — 20 °C, wurde mit einer Lösung von 0,8 mMol Natriumborhydrid in einem Gemisch aus 5 ml Tetrahydrofuran und 5 ml Methanol, vorgekühlt auf —20 °C, versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 15 Minuten lang bei —20 °C gerührt und dann mit 2M HCl auf einen pH-Wert von 1 neutralisiert. Die Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck abgedampft und der Rückstand zwischen Wasser und Chloroform geteilt. Die organische Phase wurde mit Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt unter Bildung eines Rückstands, der aus Tetrahydrofuran/Diethylether umkristallisiert wurde und l-Fluor-5-phthalimido-2-pentanol er-gag, Schmelzpunkt 85 °C. Ein Gemisch aus 264 mg (1,05 mMol) l-Fluor-5-phthalimido-2-pentanol, 170 mg (1,05 mMol) Phthalimid, 302 mg (1,05 mMol) Triphenylphosphin und 201 mg (1,15 mMol) Diethylazodicarboxylat in 8 ml Tetrahydrofuran wurde unter Stickstoff 2 Stunden lang bei 25 °C gerührt. Das Lösungsmittel wurde unter vermindertem Druck abgedampft und der Rückstand in Benzol aufgenommen. Das unlösliche Material wurde verworfen und der erhaltene Rückstand nach Einengung des Filtrats wurde aus Tetrahydrofuran/Diethylether umkristallisiert und ergab 1-Fluormethyl-1,4-butandiyl-bis-phthalimid, Schmelzpunkt 112°C. Eine Suspension aus 3,1 g 1-Fluormethyl-1,4-butan-diyl-bis-phthalimid in 140 ml konzentrierter HCl wurde 3 Tage lang auf Rückflusstemperatur erhitzt. Die beim Kühlen auf 4 °C ausfallende Phthalsäure wurde abfiltriert. Das Filtrat wurde auf 20 ml eingeengt und auf 4 °C gekühlt. Die sich abscheidende noch verbliebene Phthalsäure wurde ab-filtriert und das Filtrat unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wurde mit 40 ml siedendem Isopropylalkohol 3 x behandelt und dann aus absolutem Ethanol

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umkristallisiert, unter Bildung von 1-Fluormethyl-1,4-butandiamindihydrochlorid, Schmelzpunkt 154°C.

Präparat 4

1 -Fluormethyl-4-methyl-1,4-butandiamin-dihydrochlorid Eine Lösung von 40 mMol Diazomethan in 110 ml Ether auf 0 °C gekühlt und magnetisch gerührt wurde unter Stickstoff tropfenweise binnen 1 Stunde mit einer Lösung von 20 ml 4-Phthalimido-4-methylbutyrylchlorid in 75 ml Ether zersetzt. Das Rühren wurde 1 Stunde lang bei 25 °C fortgesetzt, wonach das Reaktionsgemisch einer Lösung von 40 ml HF/ Pyridin, vorgekühlt auf 0 °C, zugesetzt wurde. Das dabei entstehende heterogene Gemisch wurde bei 25 °C 1 lA Stunden lang gerührt und dann auf Eiswasser gegossen. Die Etherphase wurde abgetrennt, mit einer Bicarbonatlösung und dann mit Salzlösung gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Einengen des Lösungsmittels unter vermindertem Druck ergab einen Feststoff, der aus Diethyl-ether/Pentan umkristallisiert wurde und Fluormethyl-3-phthalimido-3-methylpropylketon ergab.

Eine Lösung aus 550 mg (2,2 mMol) Fluormethyl-3-phthalimido-3-methylpropylketon in einem Gemisch aus 5 ml Tetrahydrofuran und 5 ml Methanol, gekühlt auf —20 °C, wurde mit einer Lösung von 0,8 mMol Natriumborhydrid in einem Gemisch aus 5 ml Tetrahydrofuran und 5 ml Methanol, vorgekühlt auf — 20 °C, versetzt. Das Reaktionsgemisch wurde 15 Minuten lang bei —20 °C gerührt und dann mit 2M HCl auf einen pH-Wert von 1 neutralisiert. Die Lösungsmittel wurden unter vermindertem Druck abgedampft und der Rückstand zwischen Wasser und Chloroform aufgeteilt. Die organische Phase wurde mit Salzlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt unter Bildung eines Rückstands, der aus Tetrahydrofuran/Diethylether umkristallisiert wurde und l-Fluor-5-phthalimido-5-methyl-2-pentanol ergab. Ein Gemisch aus 264 mg (1,05 mMol) l-Fluor-5-phthalimido-5-methylpenta-nol, 170 mg (1,05 mMol) Phthalimid, 302 mg (1,05 mMol) Triphenylphosphin und 201 mg (1,15 mMol) Diethylazodicarboxylat in 8 ml Tetrahydrofuran wurde unter Stickstoff 2 Stunden lang bei 25 °C gerührt, das Lösungsmittel unter vermindertem Druck verdampft und der Rückstand in Benzol aufgenommen. Das unlösliche Material wurde verworfen und der erhaltene Rückstand nach Einengen des Filtrats aus Tetrahydrofuran/Diethylether umkristallisiert, wobei man 1-Fluormethyl-4-methyl-1,4-butandiyl-bis-phthalimid erhielt. Eine Suspension von 3,1 g l-Fluormethyl-4-methyl-l,4-butandiyl-bis-phthalimid in 140 ml konzentrierter HCl wurde 3 Stunden lang auf Rückflusstemperatur erhitzt. Die beim Kühlen auf 4 °C ausfallende Phthalsäure wurde abfiltriert. Das Filtrat wurde auf etwa 20 ml eingeengt und auf 4 °C gekühlt. Die sich abscheidende rückständige Phthalsäure wurde abfiltriert und das Filtrat unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wurde mit 40 ml siedendem Isopropylalkohol 3 x behandelt und dann aus absolutem Ethanol umkristallisiert, und ergab l-Fluormethyl-4-methyl-l,4-butandiamin-dihydrochlorid.

Präparat 5 1 -Ethynyl-4-methyl-1,4.-butandiamin 10,8 g (0,05 M) 3-Trimethylsilylprop-2-ynyl-l-iminoben-zyl in 500 ml Tetrahydrofuran wurden unter einer Stickstoffatmosphäre bei — 78 °C mit n-Butyllithium (0,05 M) versetzt. Nach 10 Minuten wurde das dunkelrote Carbanion mit 11,3 g (0,05 M) 4-Brom-2-iminobenzylbutan in 20 ml Tetrahydrofuran behandelt. Nach 3 Stunden bei —78 °C wurden 50 ml Wasser zugesetzt und das Tetrahydrofuran abgedampft unter Hinterlassung eines Rückstands, der unter Stickstoffatmosphäre 48 Stunden lang mit 100 ml 6N Salz-

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14

säure auf Rückflusstemperatur erhitzt wurde. Nach dem Kühlen wurde die wässrige Lösung mit Methylenchlorid gewaschen, mit wässrigem Natriumhydroxid alkalisch gemacht und mit Methylenchlorid nochmals extrahiert. Der Methylenchloridextrakt wurde über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert, eingeengt und destilliert unter Bildung von 1-Ethynyl-4-methyl-1,4-butandiamin.

Beispiel 1

Granulate, die zur Zugabe zum Trinkwasser von Geflügel geeignet sind, wurden wie folgt hergestellt:

Gew.-%

2-Difluormethyl-2,5-diaminopentansäure

Maisstärke

Lactose

Zinkstearat

Gramm

33,0 18,5 48,2 0,3

100,0

Gew.-%

Gemahlener gelber Mais

Sojabohnenölmehl

Alfalfablättermehl

Dicalciumphosphat

Calciumcarbonat iodhaltiges Salz

2-Difluormethyl-2,5-diaminopentansäure antibiotisches Vitamin-Mineral-Aminosäure-Gemisch aus folgenden Bestandteilen auf je 0,454 kg Futter: Oxytetracyclin Penicillin (als Procainsalz) Mangansulfat DL-Methionin Riboflavin

60,3 33,0 1,0 3,0 1,0 0,2 0,33

0,5 g 0,25 g 8g 22,7 g 130 mg

10

15

Die 2-Difluormethyl-2,5-diaminopentansäure wurde mit etwa 6 bis 9 g Lactose vermischt und durch eine Strahlmühle oder Micronizer-Mühle geführt, um eine Teilchengrösse von 1 bis 25 um zu erzielen. 35 ml Wasser wurden zu etwa 2,5 g Maisstärke zugesetzt und vermischt, um eine 5%ige Stärkepaste zu erzielen. Das mikronisierte 2-Difluormethyl-2,5-diaminopentansäure-Lactosepulver, die restliche Lactose und die restliche Maisstärke wurden gut vermischt. Die Stärkepaste wurde zugesetzt und vermischt und das dabei entstehende Gemisch durch ein Sieb mit einer lichten Maschenweite von 1,41 mm gegeben. Die dabei entstehenden Granulate wurden bei 38 °C auf einen Feuchtigkeitsgehalt von etwa 3% getrocknet, durch ein Sieb mit einer lichten Maschenweite von 1,41 mm gegeben und durch Vermischen mit 0,3 g Zinkstearat gleitend gemacht.

Beispiel 2

Eine 10%ige Vorratslösung zur Verwendung bei der Behandlung von Coccidiose wurde hergestellt durch Lösen von 37,5 g 2-Difluormethyl-2,5-diaminopentansäure in 3,791 Wasser bei Raumtemperatur. Ein Teil dieser Vorratslösung, die mit 9 Teilen Wasser verdünnt war, ergab eine 1 %ige medizinische Trinkwasserlösung für Geflügel, die zur Vorbeugung gegenüber Coccidiose bei Geflügel geeignet ist.

Beispiel 3

Ein medizinisches Tierfutter für Geflügel wurde hergestellt unter Verwendung der folgenden Bestandteile. Die Tiere wurden mit dem medizinischen Futter ad libitum gefüttert.

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DL-Calciumpantothenat

Niacin

Pyridoxin

Vitamin B12

Cholinchlorid

Vitamin A

Vitamin D3

930 mg 1400 mg 130 mg 1mg 22,7 g 300 000 Einheiten 25 000 Einheiten

Versuch 1

Im nachstehenden wird die Wirkung von 2-Difluorme-thyl-2,5-diaminopentansäure auf Trypanosoma brucei brucei Infektionen bei Mäusen erläutert.

Gruppen von 5 Mäusen mit einem Gewicht von 20 bis 25 g wurden mit T.b. brucei (EARTO 110 Isolât; 5 x IO5 Organismen/Maus) inokuliert. Die Verbindung wurde über das Trinkwasser ad libitum 24 Stunden nach der Infektion verabreicht. Die Ergebnisse werden als mittlere Überlebenszeit (in Tagen) über den Tod der Kontrolltiere ausgedrückt auf der Basis einer mittleren Überlebenszeit der Kontrolltiere von 5 Tagen. Berenil (Diminazenaceturat) wurde als Kon-trolltrypanosid zugesetzt. Die Ergebnisse werden in nachstehender Tabelle I wiedergegeben.

Tabelle I

30

40

45

Arznei- Behandlungsdiät

Gesamt durchschnitt mittel dosis liche Überle

(mg)

benszeit

(Tage)

keines

0

2-Difluormethyl-2,5-diaminopentansäure

2% in Trinkwasser, 6 Tage

600a

>30b

2% in Trinkwasser, 3 Tage

300a

>30b

1% in Trinkwasser, 6 Tage

300a

>30b

1 % in Trinkwasser, 3 Tage

150a

>30b

0,5% in Trinkwasser, 3 Tage

75a

28,6

0,1% in Trinkwasser, 3 Tage

15a

2

300 mg/kg p.o., täglich 3 Tage

22,5

26,3

150 mg/kg p.o., täglich 3 Tage

11,3

22,8

75 mg/kg p.o., täglich 3 Tage

5,6

19,2

50 mg/kg p.o., täglich 3 Tage

3,8

0

2-Methyl-2,5-diaminopentansäure

2% in Trinkwasser 3 Tage o o m

0

Diminazenaceturat

2,5 mg/kg i.p., täglich 3 Tage

0,2

>30

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60

65

a bezogen auf eine tägliche Aufnahme von 5 ml Wasser/25 g Maus/Tag b als heilend bewertet. Die Tiere überlebten die Kontrolltiere mehr als 1 Monat; die Blutabstriche waren nach 1 Monat bezüglich Parasiten negativ. Versuche von Subinokulierung von Gehirnsuspensionen in nicht infizierte Tiere blieben nach mehr als 30 Tagen negativ.

Versuch 2

Der nachstehende Versuch erläutert die Wirkung einer 2%igen Lösung von 2-Difluormethyl-2,5-diaminopentan-säure im Trinkwasser von Hühnern, die mit Oocyten von Eimeria tenella infiziert worden waren.

20 Hühner wurden per os am ersten Tag mit 100 000 Oocysten von E. tenella infiziert. 10 dieser Tiere wurde Trinkwasser verabreicht, das eine 2%ige Lösung 2-Difluormethyl-

15

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2,5-diaminopentansäure enthielt. Die restlichen Tiere dienten als Kontrolltiere. Am 3. Tag zeigten alle Kontrolltiere Anzeichen von Krankheit. Am 7. Tag wurden alle Tiere getötet, die Zökumschädigungen wurden makroskopisch geprüft und wie folgt bewertet:

0 = keine feststellbaren makroskopischen Schädigungen +1 = einige vereinzelte Petechien in der Zökumwand, keine Verdickung der Wand und normale Zökumgehalte vorhanden,

+2 = Schädigungen sind zahlreich mit merklichem Verlust der Zökumgehalte, Zökumwand leicht verdickt, +3 = grosse Mengen an Blut und Gewebetrümmer vorhanden, d.h. Zökumeiterpfropfen; Zökumwand stark verdickt, geringer, wenn überhaupt, normaler Zö-kumgehalt vorhanden,

4-4 = Zökumwand stark aufgetrieben mit viel vorhandenem Blut oder Zökumeiterpfropfen. Zökumtrümmer fehlen oder sind in Eiterpfropfen eingebettet (tote Tiere werden ebenfalls mit der Note +4 bewertet)

Tabelle II

Kontroll- Schädigungsbewertung tiere für einzelne Tiere

Behandlung

Tabelle III

Anzahl Behand-

an Hühnern lungstage

Kontrolle

2%ige DFMO-

Lösung

0,120%ige

Amprolium-

lösung

10 6

10

3,70 0

0,3

10

15

Durchschnittliche Schädigungsbewertung für die 25 Gruppe

(N = 10) +4+3+4+4+4+4+2

+4 +4 +4 3,6

Mit 2-Difluormethyl-2,5-diaminopentansäure behandelt (N = 10) +1+1+0+1+1+3+4

+4+1+1 17

Versuch 3

Nach im wesentlichen der gleichen Methode wie im vorstehenden Versuch wurde an 6 Hühner eine 2%ige Lösung 2-Difluormethyl-2,5-diaminopentansäure (DFMO) in deren Trinkwasser 3 Tage lang verabreicht. Am Tag 1 wurde diese Gruppe von 6 Hühnern zusätzlich zu 2 Gruppen von je 10 Hühnern per os mit 100 000 Oocysten von E. tenella je Huhn infiziert. Eine Gruppe von 10 Hühnern diente als Kontroll-gruppe, die andere Gruppe von 10 Hühnern erhielt eine Standarddosis Amprolium im Trinkwasser für die nächsten 5 Tage. Zur Zeit ist Amprolium das coccidiostatische Mittel der Wahl. Am 5. Tag wurden alle Tiere getötet und auf Anzeichen von Krankheit untersucht, unter Anwendung des Schädigungsbewertungsindex, wie er in vorstehendem Beispiel beschrieben ist. Es wurden folgende Ergebnisse erzielt.

mittlere Schädigungsbewertung 55

Versuch 4

Der nachstehende Versuch erläutert die Wirkung von unterschiedlichen Dosen an 2-Difluormethyl-2,5-diaminopen-tansäure auf Eimeria tenella-Infektionen bei Hühnern.

Nach im wesentlichen der gleichen Methode wie in Versuch 2 wurde die Dosis an 2-Difluormethyl-2,5-diaminopen-tansäure (DFMO) wie in nachstehender Tabelle IV gezeigt verändert. Die Behandlung mit DFMO wurde am Tag — 1 begonnen. Die Hühner wurden per os am Tag 0 infiziert und die Behandlung wurde 5 weitere Tage oder insgesamt 6 Tage fortgesetzt. Die Tiere wurden am Tag 5 getötet und auf Anzeichen von Krankheit untersucht unter Anwendung des Schädigungsbewertungsindexes, wie er im Beispiel 10 beschrieben wird.

Tabelle IV

Behandlung-

Kontrolle 2% DFMO 1,0% DFMO 0,5% DFMO

Anzahl Behand- mittlere Schädi-

an Hühnern lungstage gungsbewertung

3,29 0

0,5 1,00

30

35

40

45

50

Versuch 5

Der nachstehende Versuch erläutert die Wirksamkeit einer geringen prophylaktischen Dosis auf Eimeria tenella Schädigungen bei Hühnern.

Nach im wesentlichen der gleichen Methode wie in Versuch 2, jedoch mit unterschiedlichen verabreichten Dosen von 2-Difluormethyl-2,5-diaminopentansäure (DFMO) und unterschiedlichen Verabreichungszeitspannen wurden folgende Ergebnisse erzielt.

Behandlung

Anzahl

Behand mittlere Schädi

an Hühnern lungstage gungsbewertung

Kontrolle

9

—

3,33

2% DFMO

9

— 1 bis + 5

0

1% DFMO

9

— 1 bis + 5

0

0,5% DFMO

9

— 1 bis + 5

0

0,25% DFMO

9

— 8 bis +5

0,44

0,125% DFMO

9

— 8 bis + 5

0

0,0625% DFMO

9

—8 bis +5

0,66

60

Versuch 6

Der nachstehende Versuch erläutert die Erwerbung einer permanenten Immunität gegenüber Eimeria tenella-Infektionen bei Hühnern.

Tiere, die vorher mit 2-Difluormethyl-2,5-diaminopen-tansäure bei Konzentrationen von nur 0,5% am Tag —8 bis zum Tag +.5, bezogen auf die Infektion, behandelt worden waren, wurden 1 Woche nach Beendigung der Therapie wie in nachstehender Tabelle VI angegeben bewertet. Diese Ergebnisse zeigen an, dass die prophylaktische Therapie bei niedrigen Dosen eine adequate Entwicklung von Parasiten gestattet in Abwesenheit eines Krankheitsstatus und dadurch die Entwicklung einer Immunität gegenüber anschliessenden E. tenella-Infektionen ermöglicht.

Tabelle VI

Behandlung Anzahl Behand-an Hüh- lungstage nern mittlere mittlere Schä-

Schädi- digungsendbe-

gungsbe- Wertung Wertung

Kontrolle 9 1,0% DFMO 9 0,5% DFMO 9

0 2,50

— 8 bis+5 0,33 0

— 8 bis + 5 0 0

s

Claims

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2

PATENTANSPRÜCHE 1. Veterinär-Arzneimittel zur Prophylaxe oder Behandlung von Protozoen-Infektionen, dadurch gekennzeichnet, dass es a) als Wirkstoffkomponente mindestens eine a-substituierte Aminosäure oder ein a-substituiertes Amin der allgemeinen Formel

Y

Z-Ç-R (I)

« «

nh2

worin Rx Wasserstoff oder Carboxy, Y CH2F, CHF2, CF3 oder CsCH und Z H2N-(CH2)3, H2N-CH-(CH2)2 oder H2N-CH2CH = CH I

bedeuten, wobei, wenn Rt Wasserstoff bedeutet, Y nicht CF3sein kann und Z H2N-CH-(CH2)2 sein muss

CH3

oder deren Salze sowie b) ein pharmazeutisch verträgliches Trägermaterial enthält.
2. Veterinär-Arzneimittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass in den Verbindungen der Formel I Rx Wasserstoff bedeutet.
3. Veterinär-Arzneimittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass in den Verbindungen der Formel I Ri Carboxy bedeutet.
4. Veterinär-Arzneimittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass in den Verbindungen der Formel I

ZH2N-CH-(CH2)2 oder H2N-(CH2)3

CH3

bedeutet.
5. Veterinär-Arzneimittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass in den Verbindungen der Formel I

Y-CHF2 bedeutet.
6. Veterinär-Arzneimittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass die a-substituierte Aminosäure 2,5-Di-amino-2-difluormethylpentansäureist.
7. Veterinär-Arzneimittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das Trägermaterial Wasser ist und die a-substituierte Aminosäure 2,5-Diamino-2- difluormethyl-pentansäure darstellt, welche in einer Konzentration von 0,01 bis 2% vorhanden ist.
8. Veterinär-Arzneimittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass als Wirkstoffkomponenten 2,5-Diamino-2-difluormethylpentansäure in Kombination mit einer synergistisch wirksamen Menge eines Antiprotozoenmittels, nämlich Chinapyramin, Pentamidin, Amicarbalid oder Bleomy-cin vorhanden sind.