CS230890B1 - Sposob produkcie enzýmu é-glukozidázy pomocou mikroskopických húb rodu Blastobotrys - Google Patents
Sposob produkcie enzýmu é-glukozidázy pomocou mikroskopických húb rodu Blastobotrys Download PDFInfo
- Publication number
- CS230890B1 CS230890B1 CS83151A CS15183A CS230890B1 CS 230890 B1 CS230890 B1 CS 230890B1 CS 83151 A CS83151 A CS 83151A CS 15183 A CS15183 A CS 15183A CS 230890 B1 CS230890 B1 CS 230890B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- blastobotrys
- genus
- glucosidase
- cellulose
- enzyme
- Prior art date
Links
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Sposob produkcie /J-glukozidázy pomocou mikroskopických húb rodu Blastobotrys. Vynález sa týká oboru mikrobiologie, chemie a biochémie sacharidov. Účelom vynálezu je popis produkcie enzýmu jS-iglukozidázy, a to ako jedného zástupců celulolytického komplexu, resp. v zmesi s /?-l,4-glukán glukánohydrolázou (celulóza Cx) a celobiohydrolázou (celulóza Ci). Uvedeného účelu sa dosiahne pomocou mikroskopických húb rodu Blastobotrys, a to Blastobotrys proliferans, Blastobotrys aristata a Blastobotris nivea jednotlivo alebo v ich zmesi na vhodných živných pódach. jS-glukohydrolázu možno získat o poměrně vysokej špecifickej aktivitě až 8 nkat/mg, a to aj za pomoci natívneho analoga celulózy polysacharidu tamarind ako potnohospodárskeho odpadu (Kuba, Karibská oblast). Vynález má široké využitie v mikrobiologii, chémii a biochémii sacharidov, ale a) v analytické] chémii a všade tam, kde ide o jednoduchá metodu spracovania dřevného a poínohospodárskeho odpadu.
Description
Vynález sa týká sposobu produkcie enzýmu (S-glukozid glukohydrolázy (i(3-glukozidázá, EC 3.2.1.21) pomocou mikroskopických húb rodu Blastobotrys kultivovaných na vhodných živných podach.
Pre priemyselnú produkciu ^-glukozidázy sa najčastejšie používajú následovně mikroorganizmy: Aspergillus oryzae, Merulius lachrymans (G. de Stevens v Methods in Enzymology, 1. diel, S. P. Collowick a N. O. Kaplan, Acad. Press. New York 1955, str. 173 až 178). Sú však aj iné mikroorganizmy, o ktorých nebolo doposial' známe, že majú schopnost produkovat enzým /3-glukozidázu. Pomocou gélovej metody (A.O. č. 183 169) sme zistili výraznú produkciu β-glukozidázy u 3 popisaných druhov rodu Blastobotrys, a to Blastobotrys aristata, Blastobotrys proliferans a Blastobotrys nivea.
Druh Blastobotrys proliferans je novopopisariý druh rodu Blastobotrys izolovaný z para orechov (Bertholletia excelsa) z poškodeného jadra, druh Blastobotrys aristata bol izolovaný zo vzorky plesnivěj omietky, dodanej pracovníkmi pamlatkovej starostlivosti. z hradu Bítov [oba nové druhy popisuje Marvanová L.: Two new Blastobotrys species. Transactions ot the British Mycological Society 66, 217 (1976)j. Druh Blastobotrys nivea izolovaný z kompostu popisal von Klopotek A.: Blastobotrys nivea gen. nov., sp. nov., Archiv tur Mikrobiologie 58, 92 (1967). Rod Blastobotrys klopotek patří do čeíade Moniliaceae, rodu Moniliales, triedy Denteromycetes. O produkcii hydroláz polysacharidov uvedenými druhmi rodu Blastobotrys nie je v literatuře nič známe.
Podstata vynálezu spočívá v tom, že kultiváciou nasledovných troch kmeňov rodu Blastobotrys:
Blastobotrys proliferans Blastobotrys aristata Blastobotrys nivea
CCMF — 493 CCMF — 410 CCMF — 433 jednotlivo alebo ich zmesi na živnej pode obsahujúcej celobiózu, celulózu alebo jej hydroxyetyl, hydroxypropyl, karboxymetyl deriváty alebo natívny derivát celulózy polysacharid tamarind pri teplote 25 až 37 °C a hodnotě pH 4,8 po dobu 72 až 120 hodin produkuje enzým ^-glukozidázu, ktorý sa získává v surovom stave odpařením rastovej půdy, připadne v čiastočne zušlachtenom stave zrážaním síranom amonným alebo organickými rozpúšťadlami, s výhodou etanolu a acetonu.
K ďalšej purlflkácii surového enzýmu β-glukozidázy po dialýze možno použiť například adsorpciu ,6-glukO'Zidázy zo zmesi bielkovín na metahydroxyd hlinitý a následovně uvofnenie enzýmu pomocou NažCOs tak, ako uvádza G. de Stevens v hoře uvedenej citácii. Výhodou uvedeného postupu je predovšetkým to, že příprava (S-glukozidázy je vel'mi jednoduchá a ako súčasf kultivačnej půdy možno použiť aj neprečistené nativně substráty l'ahko dostupné ako rožne druhy pofnohospodarskeho odpadu. V případe, že surový enzýmový preparát má obsahovat celý komplex celulolytických enzýmov, výhodné sú kombinácie za účasti Blastobotrys proliferans, nakolko uvedený kmeň produkuje popři /J-glukozidázovej aktivitě aj celulázy Cx a G| (/3-1,4-glukán glukánohydroláza EC 3.2.1.4 a celobiohydroláza EC 3.2.1.-).
Ďalšou výhodou je vysoký výťažok /Ž-glukozidázovej aktivity. Na druhej straně, pokial' je požiadavka na čistú /3-glukozidázovú enzýmovú aktivitu bez sprievodných celulolytických enzýmov, možno uvedený preparát získat' jednoducho a bez sprievodných celulolytických enzýmov, navrhovaným novým postupom pomocou kmeňov Blastobotrya aristata a Blastobotrys nivea jednotlivo alebo v ich zmesi. Nakofko uvedené kmene rodu Blastobotrys produkujú popři ,β-glukozidázovej aktivitě aj enzýmy schopné odštěpovat xylczu, nový enzýmový preparát získaný zahuštěním kultivačnej půdy po kultivácii uvedených zástupcov rodu Blastobotrys možno použiť aj k sacharifikácii polysacharidu tamarind (Tamarindus indica).
Příklad 1
Blastobotrys proliferans CCMF-493, Blastobotrys nivea CCMF-433 a Blastobotrys aristata CCMF-410 sa pomnožia na rastovej půdě obsahujúcej 2 g gélu (připraveného sieťovaním hydroxyetylcelulózy podl'a A. O. číslo 183 169) ponořeného do polovice výšky v 20 mililitroch Yaest Nitrogen Base rastovej půdě (0,6 g/100 ml] o pH 4,8 a kultivuje sa na povrchu po dobu 3 dní pri teplote 30 °C, kedy dochádza k steknuteniu gélu. Nahromaděná biomasa druhov Blastobotrys sa použije ako zmesné inokulum půdy obsahujúcej 20 g kukuřičného výluhu, 5 g karboxymetylcelulózy (pH 4,8j na 1 1 vody a kultivácia prebieha po dobu dalších 2 dní. Potom sa biomasa Blastobotrys odfiltruje a surový enzým /f-glukozidáza sa získá odpařením kultivačnej půdy na vakuovej odparke (celková aktivita 33 U, t. j. 0,55 ,tíkat., špeclfická aktivita 12 nkat/mg proteinu.
Příklad 2
Ako inokulum sa použije kmeň Blastobotrys aristata CCMF-410 a Blastobotrys nivea CCMF-433, ktoré sa pomnožia na půdě obsahujúcej 2 g síranu amonného, 1 g KH2PO4 a 5 g celobiózy na 1 1 (pH 4,8). Po 120 hodinách kultivácie (25 °C) sa biomasa odfiltruje a zvyšná kultivačná půda sa prezráža etanolom (2 objem, diely etanolu na 1 objem, diel kultivačnej půdy).
V sedimente vypadne /3-glukozidáza 0,6 <ukat o špecifickej aktivitě 2,0 nkat/mg, pričom tento preparát neobsahuje celulolytickú aktivitu ((3-1,4-glukán glukánohydroláza a celobiohydroláza).
Příklad 3
Tak ako je uvedené v příklade 1 s tým rozdielom, že namiesto hydroxyetyl- a karboxymetylcelulózy sa použije polysacharid tamarind a ako inokulum čistá kultúra Blastobotrys proliferans CCMF-493. Kultivácia prebieha pri teplote 37 °C po dobu 3 dní. Surový zahuštěný enzýmový preparát ,β-gluVynález má použitie v základnom mikrokozidázy obsahuje 0,48 ^kat a specifická aktivita 8/ikat/mg obsahuje 0,25 ^íkat jS-l,4-glukán glukánohydrolázovej aktivity a 3 nkat celoblohydrolázovej aktivity.
Vynález má použitie v základnom mikrobiologickom biochemickom výskume a pri produkcii β-glukozidázy ako jedného z dóležitých enzýmov pri sacharifikácii polysacharidov róznych dřevných a polnohospodarskych odpadov.
Claims (1)
- Spósob produkcie enzýmu ^-glukozidázy pomocou mikroskopických húb rodu Blastobotrys, vyznačený tým, že sa kultivujú následovně kmene rodu Blastobotrys:Blastobotrys proliferans Blastobotrys aristata Blastobotrys nivea jednotlivo, alebo ich zmesiCCMF — 493 CCMF — 410 CCMF — 433 na živnej pode obsahujúcej celobiózu, celulózu alebo jej hydroxyetyl, hydroxypropyl, karboxymetyl deriváty, alebo natívny derivát celulózy polysacharid tamarind pri teplote 25 až 37 °C, a hodnotě pH 4,8 po dobu 72 až 120 hodin a enzým jž-glukozidázu sa získá v surovom stave odpařením rastovej pódy, připadne v čiastočne zušlachtilom stave zrážanim síranom amonným alebo organickým rozpúšťadlom, s výhodou etanolom alebo acetónom.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS83151A CS230890B1 (sk) | 1983-01-10 | 1983-01-10 | Sposob produkcie enzýmu é-glukozidázy pomocou mikroskopických húb rodu Blastobotrys |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS83151A CS230890B1 (sk) | 1983-01-10 | 1983-01-10 | Sposob produkcie enzýmu é-glukozidázy pomocou mikroskopických húb rodu Blastobotrys |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS15183A1 CS15183A1 (en) | 1984-01-16 |
| CS230890B1 true CS230890B1 (sk) | 1984-08-13 |
Family
ID=5333169
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS83151A CS230890B1 (sk) | 1983-01-10 | 1983-01-10 | Sposob produkcie enzýmu é-glukozidázy pomocou mikroskopických húb rodu Blastobotrys |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS230890B1 (sk) |
-
1983
- 1983-01-10 CS CS83151A patent/CS230890B1/sk unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS15183A1 (en) | 1984-01-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0494207B1 (en) | Thermostable purified cellulase from thermophilic bacterium acidothermus cellulolyticus | |
| Cadmus et al. | Biodegradation of xanthan gum by Bacillus sp | |
| JPS60500891A (ja) | セルラ−ゼを大量生成する微生物 | |
| US4628029A (en) | Method for the conversion of a cellulosic substrate to glucose using Microbispora bispora, strain Rutgers P&W | |
| JPH01256394A (ja) | セロオリゴ糖の酵素的製造方法 | |
| Augustin et al. | Production of α-amylase by yeasts and yeast-like organisms | |
| Olutiola et al. | A cellulase complex in culture filtrates of Rhynchosporium secalis (barley leaf blotch) | |
| CS230890B1 (sk) | Sposob produkcie enzýmu é-glukozidázy pomocou mikroskopických húb rodu Blastobotrys | |
| JPS59166081A (ja) | セルラ−ゼの製造法 | |
| JPS61221201A (ja) | セルロ−ス性微細結晶の製造方法 | |
| Ali et al. | Induction of glucoamylase production by non-starchy carbohydrates in Aspergillus terreus | |
| US4496656A (en) | Process for production of cellulase | |
| CS230887B1 (sk) | Sposob produkcie ^-1,4-glukánohydrolázy pomocou mikroskopickej huby Blastobotrys proliferans | |
| Woodward et al. | Immobilization of β‐glucosidase from different sources on nylon tube | |
| Hon-Nami et al. | The time course of production of the yellow affinity substance and of the bound and free cellulase complexes by Clostridium thermocellum JW20 | |
| JP3508937B2 (ja) | 新規エンド型中性セルラーゼおよびその製造法 | |
| AU634148B2 (en) | Use of cellulase preparations in the cultivation and use of cellulose-producing microorganisms | |
| CS230889B1 (sk) | Sposob produkcie enzýmu alfa amylázy | |
| Boeck et al. | A32390A, A NEW BIOLOGICALLY ACTIVE METABOLITE I. DISCOVERY AND FERMENTATION STUDIES | |
| CS230888B1 (sk) | Sposob produkcie 3-mananázy pomocou mikroskopických húb rodu Lemonniera | |
| JPS6225358B2 (sk) | ||
| SU1112054A1 (ru) | Штамм @ @ @ -40-продуцент биомассы на неинвертированных предгидролизатах сульфатцеллюлозного производства | |
| Panajotov et al. | A cellulase enzymic product: Industrial processing and possible applications | |
| JPS6251117B2 (sk) | ||
| CS195021B1 (sk) | Sposob produkci® /3 -glukáň glukánohydrolázy pomocóu baktérií Streptomyces SPP |