CS262822B1 - Synthetic medium for the cultivation of myelomic cells - Google Patents

Synthetic medium for the cultivation of myelomic cells Download PDF

Info

Publication number
CS262822B1
CS262822B1 CS867158A CS715886A CS262822B1 CS 262822 B1 CS262822 B1 CS 262822B1 CS 867158 A CS867158 A CS 867158A CS 715886 A CS715886 A CS 715886A CS 262822 B1 CS262822 B1 CS 262822B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
concentration
cells
mol
culture medium
protein
Prior art date
Application number
CS867158A
Other languages
English (en)
Other versions
CS715886A1 (en
Inventor
Jan Rndr Csc Kovar
Frantisek Rndr Drsc Cle Franek
Original Assignee
Kovar Jan
Franek Frantisek
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kovar Jan, Franek Frantisek filed Critical Kovar Jan
Priority to CS867158A priority Critical patent/CS262822B1/cs
Priority to GB8722473A priority patent/GB2196348B/en
Priority to FR878713651A priority patent/FR2604727B1/fr
Priority to DE19873733453 priority patent/DE3733453A1/de
Publication of CS715886A1 publication Critical patent/CS715886A1/cs
Publication of CS262822B1 publication Critical patent/CS262822B1/cs

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10Cells modified by introduction of foreign genetic material
    • C12N5/12Fused cells, e.g. hybridomas
    • C12N5/16Animal cells
    • C12N5/163Animal cells one of the fusion partners being a B or a T lymphocyte
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/05Inorganic components
    • C12N2500/10Metals; Metal chelators
    • C12N2500/20Transition metals
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/05Inorganic components
    • C12N2500/10Metals; Metal chelators
    • C12N2500/20Transition metals
    • C12N2500/22Zinc; Zn chelators
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/05Inorganic components
    • C12N2500/10Metals; Metal chelators
    • C12N2500/20Transition metals
    • C12N2500/24Iron; Fe chelators; Transferrin
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/30Organic components
    • C12N2500/38Vitamins
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/90Serum-free medium, which may still contain naturally-sourced components
    • C12N2500/95Protein-free medium and culture conditions
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/30Hormones
    • C12N2501/38Hormones with nuclear receptors
    • C12N2501/39Steroid hormones

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

(54)
Syntetické medium pro kultivaci hybridomů a mye lordových buněk
Syntetické médium pro kultivaci hybridomů a myelomových buněk na bázi anorganických solí, monoaacharidů, aminokyselin, vitaminů a látek- tlumících změny pH, popřípadě joyrohroznanu sodného, antibiotik a indikátoru zi^ěny pH, obsahuje vodorozpustné sloučeniny zeleza v koncentraci 2 x 10“5 až 1 x 10-2 mol/1· Dále toto kultivační medium může obsahovat sloučeniny stopových biogenních prvků v koncentraci 0,002 až 2 mg/l> kyselinu askorbovou v koncentraci 1 až 100 mg/1, steroidní látky v koncentraci 0,0001 až 0,01 mg/1 a aminy v koncentraci 0,1 až 15 mg/1.
262 822
Vynález se týká syntetického media oro kultivaci hybridomů a myelomových buněk.
Hybridomy konstruované somatickou hybridisací myelomové buňky a lymfocytu syntetizujícího protilátku jsou průmyslově používány к výrobě monoklonálních protilátek. Myelomové buňky, do nichž je metodami genového inženýrství zaveden gen pro biologicky aktivní bílkovinu, například enzym, inhibitor enzymu, hormon, imunoregulátor, jsou též průmyslově používány pro výrobu těchto bílkovin. Vzrůstající potřeba různých monoklonálních protilátek, zejména pro účely léčebné a pro imunoafinitní chromatografii, kde jsou žádána kilogramová množství, stejně tak jako potřeba různých regulačních bílkovin pro léčebné použití, vede к vyhledávání efektivnějších a ekonomicky výhodnějších způsobů výroby těchto látek. Složení kultivačního media, standardní vlastnosti a cena jeho složek jsou zde nejdůležitějšími faktory.
Dosud se hybridomy a myelomové buňky kultivují tak, že se buňky nejprve namnoží v laboratorních nádobách, jako jsou plastikové misky a lahve, kultivace a produkce bílkoviny se dokončí v průmyslovém fermentoru. Monoklonální protilátka nebo jiná do kultivačního media vyloučená bílkovina se získává z kultivačního media po odstředění nebo odfiltrování buněk. Isolace produkované bílkoviny je tím obtížnější a nákladnější, čím více bílkovin původní kultivační medium obsahovalo. Koncentrace produkované bílkoviny, například monoklonální protilátky v kultivačním mediu, je poměrně nízká. Ekonomická výhodnost výroby je limitována cenou složek kultivačního media. Kultivační media pro hybridomy a myelomové buňky obsahují anorganické soli, například chlorid sodný a fosforečnan sodný, monosacharidy, například glukosu nebo galaktosu, aminokyseliny, například tryptofan, methionin, threonin a glutamin, vitaminy, například thiamin a nikotinamid, látky tlumící změny pH, například N-2-hydroxyethylpiperazin-N*-2-ethansulfonovou kyselinu, popřípadě pyrohroznan sodný, antibiotika a indikátor změny pH. Takto složená základní kultivační media jsou pro hybridomy a myelomové buňky, stejně tak jako pro jiné živočišné buňky sama o sobě nedostatečná, a proto jsou doplňována 10 objemovými
262 S22 procenty krevního séra, například hovězího, koňského nebo fetálního telecího séra. Krevní sérum vnáší do kultivačního media neznámé látky, z nichž některé růst buněk podporují, jiné mohou růst potlačovat. Krevní séra je proto nutné před použitím testovat a vybírat vhodné šarže. Tím vzrůstají náklady na výrobu kultivačního media. Protože vhodných/růst podporujících krevních sér byl nedostatek, byly vyvinuty receptury kultivačních medií, tak zvaných bezsérových, v nichž je krevní sérum nahraženo několika definovanými bílkovinami, nejčastěji transferinem, sérovým albuminem, insulinem a případně dalšími látkami, jako jsou nenasycené mastné kyseliny, aminy a nízkomolekulární hormony (Kovář J., Franěk F., Methods in Enzymology 121: 277, 1986). Bílkoviny přidávané do kultivačního media musí být čištěny do vysokého stupně, aby byly prosté toxických příměsí a jejich cena je proto poměrně vysoká. Další nevýhoda stávajících kultivačních medií spočívá v tom, že je obtížná isolace monoklonální protilátky, případně jiné bílkoviny vylučované buňkami během kultivace, která se musí provádět několikanásobným oddělováním žádané bílkoviny od ostatních bílkovin přítomných v mnohonásobném přebytku.
Nedostatky spočívající v nákladnosti krevního séra, bílkovin krevní sérum nahrazujících a v obtížnosti isolace vyráběné bílkoviny jsou odstraněny, použije-li se kultivační medium podle vynálezu, které kromě anorganických solí, monosacharidů, aminokyselin, vitaminů a látek tlumících změny pH, popřípadě pyrohroznanu sodného, antibiotik a indikátoru změny pH, obsahuje vodorozpustné sloučeniny železa, například citronan železitý, síran železnátý, chlorid železitý nebo ferikyanid
-5 -2 draselný, v koncentraci 2 x 10 až 1 x 10 mol/1.
Je výhodné, obsahuje-li toto kultivační medium sloučeniny stopových biogenních prvků, kyselinu askorbovou, steroidní látky a aminy.
V naší dřívější práci bylo ukázáno, že jedinou zcela nepostradatelnou bílkovinnou složkou bezsérového kultivačního media je transferin (Kovář J., Franěk F., Methods in Enzymology 121: 277, 1986). Jelikož transferin funguje jako přenašeč
262 622 železa z prostředí do buňky, byly v dalších pokusech přidávány do kultivačního media různé vodorozpustné sloučeniny železa, a to i v koncentracích vyšších než jaké kdy byly v kultivačních mediích použity. Řada autorů (například Phillips P.D., A Cristofalo V.J., Exp. Cell Res., 134: 297, 1981? Perez-Infante V., Mather J.P., Exp. Cell Res., 142: 325, 1982; Taetle R., Rhyner K., Castagnola J., To D., Mendelsohn J., J. Clin. Invest., 75: 1061, 1985) použila jako náhradu transferinu vodorozpustné sloučeniny železa v koncentracích 1 x 1θ”6 až •6 x 10 mol/1. Tyto koncentrace jsou však v případě hybridomů a myelomových buněk nedostatečné. Ukázalo se, že sloučeniny železa nejsou pro hybridomy a myelomové buňky toxické až do koncentrace 1 x 10 mol/1 a naopak koncentrace sloučenin —5 železa vyšší než 2 x 10 mol/1 umožňují růst hybridomů a myelomových buněk v kultivačním mediu, v němž není přítomna žádná bílkovina. Mezi sloučeniny železa schopné nahradit transferin patří například citronan železitý, síran železnatý, chlorid železitý a ferikyanid draselný. Účinné koncentrace se pohybu-5 -2 jí v rozmezí 2 x 10 až 1 x 10 mol/1.
Hlavní výhodou bezbílkovinného kultivačního media je podstatné snížení ceny, která se promítá i do ceny buňkami vy·4· loučené bílkoviny, například monoklonální protilátky. Další předností kultivačního media podle vynálezu je snadná isolace buňkami vyloučené bílkoviny, například monoklonální protilátky, protože buňkami vylučovaná bílkovina je jedinou bílkovinou nacházející se po kultivaci v kultivačním mediu.
Příklad 1
Pro přípravu chemicky definovaného bezbílkovinného kultivačního media bylo použito základní kultivační medium, které vedle media RPMI 1640 obsahovalo navíc L-glutamin (300 jig/ml), pyrohroznan sodný (110 pg/ml), N-2-hydroxyethylpiperazin-N*-2-ethansulfonovou kyselinu (1,5 x 10 mol/1), penicilin
262 822 (100 jednotek/ml), streptomycin (100 pg/ml) a gentamycin (40 pg/ml)· Bezbílkovinné kultivační medium pak obsahovalo jako náhradu séra tyto přidané látky: ethanolamin (2 x io”5 mol/1), —5 —9 kyselinu askorbovou (2 x 10 mol/1), hydrokortison(5 x 10 mol/1), síran kademnatý (CdSO..8/3 Ho0, 5 x 1θ“θ mol/1), chlorid kobalnatý (СоС12»б H20, 1 x 10 mol/1), síran mědnatý (CuSO^.5 H20, 1 x 10~θ mol/1), molybdenan amonný ((NH4) gMo?024 • 4 H20, 5 x 1θ“10 mol/1), chlorid manganatý (MnCl2.4 H20, 5 x io“10 mol/1), síran nikelnatý (NiSO4«6 H20, 2.5 x 1010 mol/1), seleničitan sodný (Na2SeO3, 4 x 1θ“θ mol/1), křemičitan sodný (Na2SiO3, 2 x io”? ml/1), chlorid cínatý (SnCl2.2 H20,
2.5 x 10“ θ mol/1), vanadičnan amonný (NH4VO3, 2.5 x 1θ”^ mol/1), síran zinečnatý (ZnSO4»7 H20, 1 x ю** mol/1) a citronan železitý (5 x 10”4 mol/1).
Do 6 ml bezbílkovinného kultivačního media uvedeného složení v plastikové Petriho misce (průměr 6 cm) byly inokulovány buňky hybridomu PLV-01 v takovém množství, že densita buněk byla 50 x 10 buněk/ml. Po 4 dnech kultivace v termostatu ve vlhčené atmosféře 5 objemových % oxidu uhličitého ve vzduchu při teplotě 37°C namnožily se buňky do density 1,53 x 10θ buněk/ml. Počet buněk se tedy během čtyřdenní kultivace přibližně ztřicetinásobil.
V obdobném pokuse s buňkami hybridomu CMH-02 se namnožily
6 buňky z inokula 25 x 10 buněk/ml za 4 dny do density 1,36 x 10 buněk/ml. Počet buněk se v tomto pokuse během čtyřdenní kultivace přibližně zpadesátinásobil.
Buňky myelomu FO a hybridomů PLV-01, CMH-02 a T3-03 byly odděleně inokulovány do objemů 1 ml bezbílkovinného kultivačního media uvedeného složení umístěných v jamkách 24-jamkové plastikové kultivační destičky. Po jednom dnu kultivace za výše uvedených podmínek byl stanoven počet buněk v jamce a po dalších 24 hodinách byl počet buněk stanoven znovu. Tak byla stanovena pro každý hybridom nebo myelom střední doba zdvojení v exponenciální růstové fázi. Pro myelom FO byla nalezena střední doba zdvojení 15,6 h, pro hybridom PLV-01 14,8 h, pro hybridom CMH-02 14,6 h, a pro hybridom T3-O3 11,8 h.
- 5 282 822
Buňky hybridomu PLV-01 a hybridomu PGG-O5 byly inokulovány odděleně v počtu 60 x 10 buněk do objemů 1 ml bezbílkovinného kultivačního media uvedeného složení umístěného v jamkách 24-jamkové plastikové kultivační destičky. Pro srovnání byly inokulovány buňky těchže hybridomů do bezsérového kultivačního media obsahujícího transferin a insulin (SFH medium bez kyseliny linolové a albuminu, J. Kovář a F. Franěk, Methods in Enzymol. 121: 277, 1986). Po 4 dnech kultivace za výše uvedených podmínek byl stanoven počet buněk a koncentrace monoklonální protilátky v kultivačním mediu s použitím enzymoimunologického testu založeného na stanovení peroxidasové aktivity. Při nárůstu hybridomu PLV-01 v bezbílkovinném mediu z inokula 60 x 10 buněk na 819 x 10 buněk měla koncentrace monoklonální protilátky vyjádřená v relativních jednotkách absorbance hodnotu A49q« 0,298. Ve srovnávacím pokuse v SFH mediu byly dosaženy hodnoty 706 x 10^ buněk a 0,310. Při nárůstu hybridomu PGG-05 v bezbílkovinném kultivačním mediu na 675 x 10 buněk měla koncentrace monoklonální protilátky vyjádřená v relativních jednotkách absorbance hodnotu 1,32. Ve srovnávacím pokuse v SFH mediu byly dosaženy hodnoty 731 x 10^ buněk а А.пля 1,26.
490
Příklad 2
Buňky hybridomu PLV-01 byly inokulovány v počtu 10 x 10 buněk do 0,1 ml bezbílkovinného kultivačního media o složení uvedeném v příkladu 1 umístěného v jamkách 96-jamkové plastikové kultivační destičky. Pro srovnání byly analogicky inokulovány buňky tohoto hybridomu do bezbílkovinného kultivačního media, v němž citronan železitý byl nahražen chloridem želežitým (5 x 10 mol/1) nebo ferikyanidem draselným (5 x 10 mol/1). Po 3 dnech kultivace za podmínek jako v příkladu 1 se namnožily hybridomové buňky na 108 x 10 buněk v kultivač3 ním mediu s citronanem železitým, na 67 x 10 buněk v kulti_ 3 vačním mediu s chloridem železitým a na 51 x 10 buněk v kultivačním mediu s ferikyanidem draselným.
Příklad 3 262 822 о
Buňky hybridomu PLV-01 byly inokulovány v počtu 10 x 10 buněk do 0,1 ml bezbílkovinného kultivačního media o složení uvedeném v příkladu 1 umístěného v jamkách 96-jamkové plastikové kultivační destičky. Pro srovnání byly analogicky inokulovány buňky tohoto hybridomu do bezbílkovinného kultivačního media, které obsahovalo vedle základního media jako v příkladu 1 pouze citronan železitý (5 x io^ mol/1). Pó 3 dnech kultivace za podmínek jako v příkladu 1 se namnožily hybridomové buňky na 118 x 10 buněk v úplném bezbílkovinném kultivačním mediu a na 103 x 10 buněk v bezbílkovinném kultivačním mediu pouze s citronanem železitým.

Claims (2)

  1. PŘEOMÉT VYNALEZU
    Syntetické medium pro kultivaci hybridomu a myelomových buněk obsahující vodorozpustné sloučeniny, železa, anorganické soli v koncentraci 5000 až 12000 mg/ l, monosacharidy v koncentraci 300 až 5000 mg/l, aminokyseliny v koncentraci 200 až 5000 mg/l, vitaminy v koncentraci 2 až 100 mg/l, látky tlumici zrniny pH v koncentraci 200 až 20000 mg/l, popřípadě pyrohroznan sodný, antibiotika a indikátor změny pHzvyznačuj ici se tim, že obsahuje vodorozpustné sloučeniny železa v koncentraci 2 x ΙΟ*’ až 1 x 10*2 mol/l, například síran železnatý, citronan železitý, chlorid železitý, feri^ kyanid draselný.
  2. 2. Syntetické medium podle bodu 1Zvyznačuj ici se tim, že obsahuje sloučeniny stopových biogenních prvků, například selenu, zinku, v koncentraci 0,002 až 2 mg/l, kyselinu askorbovou v koncentraci 1 až 100 mg/l, steroidni látky, například hydrokortison, v koncentraci 0,0001 až 0,01 mg/l a aminy, například ethanolamin, v koncentraci 0,1 až 15 mg/l.
CS867158A 1986-10-03 1986-10-03 Synthetic medium for the cultivation of myelomic cells CS262822B1 (en)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS867158A CS262822B1 (en) 1986-10-03 1986-10-03 Synthetic medium for the cultivation of myelomic cells
GB8722473A GB2196348B (en) 1986-10-03 1987-09-24 Synthetic medium for hybridoma and myeloma cell cultivation.
FR878713651A FR2604727B1 (fr) 1986-10-03 1987-10-02 Milieu synthetique pour la culture d'hybridomes et de cellules de myelome
DE19873733453 DE3733453A1 (de) 1986-10-03 1987-10-02 Verfahren und kultivierungsmedium zur kultivierung von hybridom- und myelomzellen

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS867158A CS262822B1 (en) 1986-10-03 1986-10-03 Synthetic medium for the cultivation of myelomic cells

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS715886A1 CS715886A1 (en) 1988-08-16
CS262822B1 true CS262822B1 (en) 1989-04-14

Family

ID=5420193

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS867158A CS262822B1 (en) 1986-10-03 1986-10-03 Synthetic medium for the cultivation of myelomic cells

Country Status (4)

Country Link
CS (1) CS262822B1 (cs)
DE (1) DE3733453A1 (cs)
FR (1) FR2604727B1 (cs)
GB (1) GB2196348B (cs)

Families Citing this family (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3717029A1 (de) * 1987-05-21 1988-12-15 Behringwerke Ag Verfahren zum herstellen eines animalen serums mit verringerter protease- und inhibitoraktivitaet, animales serum, sowie verwendung dieses serums als zusatz zu kulturmedien
US6048728A (en) * 1988-09-23 2000-04-11 Chiron Corporation Cell culture medium for enhanced cell growth, culture longevity, and product expression
ATE135397T1 (de) * 1988-09-23 1996-03-15 Cetus Oncology Corp Zellenzuchtmedium für erhöhtes zellenwachstum, zur erhöhung der langlebigkeit und expression der produkte
JPH03180175A (ja) * 1989-12-07 1991-08-06 Snow Brand Milk Prod Co Ltd 無血清培地
GB9022545D0 (en) 1990-10-17 1990-11-28 Wellcome Found Culture medium
JPH04228066A (ja) * 1990-10-23 1992-08-18 Rikagaku Kenkyusho 外来遺伝子発現用培養細胞
KR930006117B1 (ko) * 1990-12-28 1993-07-07 재단법인 목암생명공학연구소 동물세포 배양용 고농도 배지 및 배양공정
US5646190A (en) * 1991-03-01 1997-07-08 Warner-Lambert Company Acne treating-wound healing compositions and methods for preparing and using same
US5641814A (en) * 1991-03-01 1997-06-24 Warner-Lambert Company Antikeratolytic-wound healing compositions and methods for preparing and using same
US5692302A (en) * 1991-03-01 1997-12-02 Warner-Lambert Company Razor cartridges comprising wound healing compositions and methods for preparing and using same
US5648380A (en) * 1991-03-01 1997-07-15 Warner-Lambert Company Anti-inflammatory wound healing compositions and methods for preparing and using same
US5663208A (en) * 1991-03-01 1997-09-02 Warner-Lambert Company Antifungal wound healing compositions and methods for preparing and using same
US5863938A (en) * 1991-03-01 1999-01-26 Warner Lambert Company Antibacterial-wound healing compositions and methods for preparing and using same
US5856364A (en) * 1991-03-01 1999-01-05 Warner Lambert Company Therapeutic antiviral-wound healing compositions and methods for preparing and using same
US5633285A (en) * 1991-03-01 1997-05-27 Warner-Lambert Company Cytoprotective wound healing compositions and methods for preparing and using same
US5674912A (en) * 1991-03-01 1997-10-07 Warner-Lambert Company Sunscreen-wound healing compositions and methods for preparing and using same
US5652274A (en) * 1991-03-01 1997-07-29 Martin; Alain Therapeutic-wound healing compositions and methods for preparing and using same
US5602183A (en) * 1991-03-01 1997-02-11 Warner-Lambert Company Dermatological wound healing compositions and methods for preparing and using same
US5658956A (en) * 1991-03-01 1997-08-19 Warner-Lambert Company Bioadhesive-wound healing compositions and methods for preparing and using same
US5658957A (en) * 1991-03-01 1997-08-19 Warner Lambert Company Immunostimulating wound healing compositions and method for preparing and using same
US5614561A (en) * 1991-03-01 1997-03-25 Warner-Lambert Company Antihistamine-wound healing compositions and methods for preparing and using same
WO1993000423A1 (en) * 1991-06-21 1993-01-07 Novo Nordisk A/S Iron chelate culture medium additive
AU2882992A (en) * 1991-11-06 1993-06-07 Arthur A. Axelrad Cell culture medium
US5512477A (en) * 1994-04-21 1996-04-30 Genzyme Corporation Serum-free medium supplement
AU4330597A (en) 1996-08-30 1998-03-19 Life Technologies, Inc. Serum-free mammalian cell culture medium, and uses thereof
EP1360314B1 (en) * 2001-02-15 2009-01-14 Centocor, Inc. Chemically defined medium for cultured mammalian cells
DE10247873B4 (de) * 2002-10-14 2005-11-17 Tracto-Technik Gmbh Vorrichtung zum Zerlegen von Rohrleitungen
GB2404665B (en) 2003-08-08 2005-07-06 Cambridge Antibody Tech Cell culture
ES2361559T3 (es) 2004-11-02 2011-06-20 Ares Trading S.A. Medio de cultivo de células exento de suero para mamíferos.
BRPI0517942B8 (pt) * 2004-11-02 2021-05-25 Ares Trading Sa processo para a produção do hormônio de crescimento humano recombinante (rhgh) e usos de um meio de cultura de células isento de soro
US8273553B2 (en) 2004-11-02 2012-09-25 Ares Trading S.A. Production of growth hormone in serum-free cell culture medium for mammalian cells

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5863385A (ja) * 1981-10-02 1983-04-15 ハナ・バイオロジツクス・インコ−ポレ−テツド 免疫系由来の細胞用培地

Also Published As

Publication number Publication date
GB8722473D0 (en) 1987-10-28
GB2196348A (en) 1988-04-27
FR2604727A1 (fr) 1988-04-08
CS715886A1 (en) 1988-08-16
FR2604727B1 (fr) 1990-05-18
GB2196348B (en) 1990-07-04
DE3733453A1 (de) 1988-04-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CS262822B1 (en) Synthetic medium for the cultivation of myelomic cells
US6048728A (en) Cell culture medium for enhanced cell growth, culture longevity, and product expression
Miller et al. Effects of dissolved oxygen concentration on hybridoma growth and metabolism in continuous culture
JP3221681B2 (ja) 動物細胞培養
Zhang et al. A novel function for selenium in biological system: selenite as a highly effective iron carrier for Chinese hamster ovary cell growth and monoclonal antibody production
US4560655A (en) Serum-free cell culture medium and process for making same
US5045467A (en) Serum-free growth medium and use thereof
Gatmaitan et al. Regulation of growth and differentiation of a rat hepatoma cell line by the synergistic interactions of hormones and collagenous substrata.
US20030096402A1 (en) Chemically defined medium for cultured mammalian cells
EP0283942A2 (en) Basal nutrient medium for cell culture
EP0076647A2 (en) Culture media for cells originating from the immune system
EP0659880B1 (en) Medium for culturing animal cells or antibody-producing cells
US5871999A (en) Cell culture process and medium for the growth of adherent animal cells
AU662491B2 (en) Medium for culture of mammalian cells
RU2018532C1 (ru) Питательная среда для культивирования человек/человеческой гибридомы (ее варианты)
Shirai et al. Growth kinetics of hybridoma cells in high density culture
CS262264B1 (cs) Způsob kultivace hybridomů a myelomových buněk
Hokama et al. Cross‐reactivity of ciguatoxin, okadaic acid, and polyethers with monoclonal antibodies
KR101050176B1 (ko) 트랜스페린 무함유 및 저농도의 철 함유 배지 중에서의골수종 세포 배양
CN114480294B (zh) 一种适合杂交瘤细胞贴壁生长的无血清培养基
US5409827A (en) Blended bovine sera cellular growth media and their methods of production and use
EP0103081B1 (en) Method of growing cells in vitro
Argentova et al. Effects of succinic acid supplementation on stable cell line growth, aggregation, and IgG and IgA production
CS260806B1 (cs) Suplement kultivačních medií hybridomů a myelomových buněk
US11254964B1 (en) Cell culture methods for increased cell viability