CZ10699A3 - Polynukleotidová hovězí vakcina pro intradermální podávání - Google Patents

Polynukleotidová hovězí vakcina pro intradermální podávání Download PDF

Info

Publication number
CZ10699A3
CZ10699A3 CZ99106A CZ10699A CZ10699A3 CZ 10699 A3 CZ10699 A3 CZ 10699A3 CZ 99106 A CZ99106 A CZ 99106A CZ 10699 A CZ10699 A CZ 10699A CZ 10699 A3 CZ10699 A3 CZ 10699A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
vaccine formulation
plasmid
vaccine
immunogen
bovine
Prior art date
Application number
CZ99106A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ298216B6 (cs
Inventor
Franciscus Antonius Maria Rijsewijk
Remco Siebren Schrijver
Oirschot Johannes Theodorus Van
Original Assignee
Merial
Id-Dlo Institute Of Animal Science And Health
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merial, Id-Dlo Institute Of Animal Science And Health filed Critical Merial
Publication of CZ10699A3 publication Critical patent/CZ10699A3/cs
Publication of CZ298216B6 publication Critical patent/CZ298216B6/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/245—Herpetoviridae, e.g. herpes simplex virus
    • A61K39/265—Infectious rhinotracheitis virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/155—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5256—Virus expressing foreign proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • A61K2039/552—Veterinary vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
    • C12N2710/16734—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
    • C12N2710/16741—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2710/16743—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18511—Pneumovirus, e.g. human respiratory syncytial virus
    • C12N2760/18534—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18511—Pneumovirus, e.g. human respiratory syncytial virus
    • C12N2760/18541—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2760/18543—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Polynukleotidové hověií vakcina pro intra dermální podávání
Oblast techniky
Tento vynález se týká zdokonalení se zřetelem na vakcinování hovězího dobytka.
Dosavadní stav techniky
Imunizování a vakcinování přímým podáváním nukleotidových sekvencí, zakodovávajících proteinový imunogen (tzv. polynukleotidové vakcinování nebo vakcinování pomocí ADN) bylo popsáno v přihlášce W0-A-90 11092. Protein, zakódovaný vsunutou nukleotidovou sekvencí je schopný exprese do buněk a vyvolat imunitní odezvu. Tato přihláška uvažuje použití ADN jako takové, jakož i ADN, obsažené v liposomech. S výhodou se ADN zavádí do svalstva. ADN je možno také zavést do kůže, některých orgánů nebo do krve. Injikování může být provedeno různými způsoby, jako je cestou intradermální, transkutánní, intravenosní atd.
Práce, které sledovaly prvé popisy těchto způsobů, přivodily zájem použít pro injikování ADN bul cestu intramuskulární, nebo postup označovaný jako genové dělo, což záleží v přímém zanesení mikročásteček kovu, jako jsou mikročástečky zlata, obložené ADN, přímoSbuněčných povrchových vrstev kůže.
Ulmer J.B. a spol., Science 252,1745-1749 (1993),
Cox G.J.M. a spol., J.of Virology 67. 5664-5667 (1993), a Xiang 2.Q., Virology 199. 132-140 (1994) popsali způsoby vakcinování použitím ADN a intramuskulárního způsobu.
Právě tak bylo jasně dokázáno, že výsledky intramuskulární cesty jsou lepší ve srovnání s cestou intradermální, ale že, vezme-li se v úvahu genové dělo, je tato cesta nejslibnější, protože dávky, podávané tímto způsobem, jsou mnohem nižší, než jak je tomu při cestě intramuskulární
4 4 ·
4 4 4 •44 ·4· ·
44
-2• 44 4 4 • · • ·
4 · • · ·
4 <
Lze se odvolat na Pynan P. a spol. v P.N.A.S. USA 90, 11478-11482 (1993); WO-A-95/2O66O.
Právě tak Tang D. a spol., Nátuře 356. 152-154 (1992) poukázali na nepřítomnost imunitní odezvy po podání růstového lidského hormonu cestou intradermální za pomoci hypodermální jehličky. Autoři naopak poukázali na průkaz imunitní odezvy použitím postupu genové dělo.
Pouze Raz a spol., P.N.A.S. USA jto, 9519-9523 (1994) oznámili, že intradermální podávání může být spojeno se zvýšenými t^tr^ř antilátek.
Postup za použití genového děla je jako takový nevhodný z hlediska obtížnosti provedení, i jest nákladný, protože vyžaduje přípravu a použití částeček zlažá, potažených použitím ADN a další podávání pomocí speciálního závitového zařízení.
Autoři nyní vyvinuli jinou techniku, předpokládající použití přístroje kapaliny tryskou. Lze citovat Pirth-e P.A. a spol., Analytical Biocheraistry 205. 365-368 (1992), kteří popsali přístrojek, nazvaný Ped-o-jet, což je druh injekční stříkačky používané pro podávání lidských vakcin do svalových tkání, tedy i pro podávání vakcíny s ADN.
Autoři sdělují, že infekční stříkačka umožní průchod ADN kůží a dosáhnout k svalstvu, tukové tkáni i tkáním prsním žijících tvorů.
Mahlsing a spol., Journal of Immunological Methods 75. 11-22 (1994) popsali použití přístroje, pojmenovaného Med-E-Jet pro podávání jak transkutánní tak i intramuskulární.
Ještě lze citovat Jenkins-e a spol., Vaccine 13. 1658-1664 (1995), kteří popsali použití vakcinování stříkačkou do svalu.
Syncitiální dýchací hovězí virus ESSV je přítomný na celém světě a může způsobit těžká onemocnění dolních částí dýchacího traktu hovězího dobytka, přičemž tato nemoc je podobná onemocnění virem dýchacím syncy.tiálním HRSV u děíí.
• •ΦΦ • · • φ
Φ· φφ φ φ φ · φ φ · · • · φ · φ φ φ φ φ φ φφ
V průběhu jedné studie bylo nalezeno, že více než 95% telat stáří dvou roků je infikováno virem BRSV, viz Vaa der Poel a spol., Archives of Virology 133. 309-321 (1993).
Potřeba vakciny proti viru BRSV je silně pocitována, ale zatím se nedostává výsledků při:, vyvíjení účinných vakcin. Prvé pokusy vakcinování dětí vedly ke zjištění snazšího onemocnění po přírodní infekci, což vedlo k názoru, že vakcinování by mohlo být nebezpečné, viz Anderson a spol., Journal of Infectious Diseases, 171. 1-7 (1995). Mezitím se dospělo ke zjištění, že antilátky proti dvěma glykoproteinům se hromadí u povrchu s tím, že protein P (protein pevně vázaný) a protein G (napojený) by mohly hrát ochrannou úlohu, viz Kimman a Westenbrink, Archives of Viro lohy 112, 1-25 (1990). Mnoho prací bylo rovněž řízeno na zvířecí typy, jako jjsou myši, psi a fretky. Naopak testy vakcinování na hovgzím dobytku za použití čištěného proteinu P nevedly k výsledkům s uzávěrem, že situace, jak se vyvine u dětí vakcinovaných použitím HRSV, by mohla vést k vývoji antilátek neutralizujících a antilátek neneutralizujících, které by mohly rušit imunitní odezvu po následném infikování virem, viz Nelson L.D. a spol.,,Am.J.Vet. Res., 22, 1315-1321 (1992).
Podstata vynálezu
Cílem tohoto vynálezu je zdokohalení vakciny pro skot podáváním ADN, což by dovolovalo vakcinování při nejmenším tak účinné, jako je vakcinování cesíou intramuskulární nebo použitím postupu genové dělo, ale aby tento postup byl podstatně jednodušší a méně nákladný.
Dalším předmětem'tohoto vynálezu je zdokonalení v tom smyslu, aby se tím dosáhlo zvýšené neškodnosti, zvláště pokud se to týká zbytků po vakcinování, příto&ných v tkáních.
Dalším předmětem tohoto vynálezu, který se týká vakcinování zvířat, určených ke konzumování, je zajistit • 0
0 · • · !
• ♦ · · • · · ·« ♦· ·
0··0
• · 0 4 · ·
4takovou neškodnost, aby vakcinování se neprojevilo nežádoucími účinky na úseku předkládání masa·
Dalším předmětem vynálezu je nalézt prostředek pro hromadné vakcinování.
Specifickým předmětem tohoto vynálezu je pořídit takovou vakoinu, jež by zajišíovala ochranu skotu proti virům BRSV, IBR, BVD nebo PI-3.
Zjistili jsme, že je možné splnit tyto předměty podáváním vakcíny intradermální cestou za pomoci injektorů kapalin bez jehly, zajištujícím na pěti místech rozdělení vakciny hlavně epidermicky, dermicky a hypodermicky. Testy provedené námi na úseku vakcinování skotu proti syncitiálnímu dýchacímu viru skotu (Bovine Respirátory Syncitial Virus, BRSV) umožnily docílení imunizačních výsledků, vyšších tímto způsobem, než jak se to docílí cestou intramuskulární.
Tento vynález navrhuje poprvé vakcinování skotu polynukleotidickými vakcinami (nebo vakcinami ADN nebo dokonce plasmidickými vakcinami)k tomu určenými, a podávaeZ z nými intradermální cestou použitím injektorů bez jehly pro vytrysknutí kapaliny.
Předmětem tohoto vynálezu je tedy formulování polynukleotidické vakciny, obsahující účinné množství (intradermálním postupem) plasmidu associujícího sekvenci ADN kódující imunogen a promotor, umožňující expresi tohoto imunogenu in vivo do buněk kůže s tčm, že zmíněné formulování je uzpůsobeno pro intradermální podávání (zvláště se zřetelem na buňky epidermální, dermální a hypodermální^’ podávání předpokládá zvláště přítomnost antigenů, exprimovaných do Langerhans-ových dendritických buněk kůže, které se lokalizují v podstatě převážně v epidermu, použitím přístroje p/^p intradermální podávání vytrysknutím kapaliny, zvláště pak použitím přístroje pojmenovaného Pigjet (výroba a distribuce: Endoscopio, Laons, ···· ·· ·· • · · · • · · · ··· ··* • * • · · · * · ·;· ·· ·· ···
-5- 6—
Francie) nebo rovnocenného jiného přístroje, který vyskladňuje vakcinu zhlavím s pěti tryskami za podmínek rovných jako Pigjet. Obecně formulované přípravky vakciny dle tohoto vynálezu jsou vhodné pro podávání přístrojem s tryskáním kapaliny, která má 1 až 10 trysek, s výhodou 4 až 6, nejvýhodněji však 5 až 6, Provádí se to za použití vhodného vehikula, určeného pro intredermální podávání, jako je voda, některý pufr, fyziologický roztok, liposomy, kationtové kapaliny a obecně vehikula s malou viskozitou, obvykle rovnou či blízkou viskozitě vody a za použití dávkového objemu, který je užitečný a vhodný pro tuto cestu podávání.
Zvláště pak, ale nikoli výlučně se to provádí použitím přístroje s pěti nebo 6 tryskami a za vstřiku pěti nebo šesti totožných objemů s tím, že dávka výhodného objemu může činit od 0,1 ml do 0,9 ml, s výhodou mezi 0,2 až 0,6 ml, nejvýhodněji mezi 0,4 až 0,6 ml.
Formulace vakciny obsahuje ‘)účůnné množství $ntradermálního plasmidu, což odpovídá obecně lOng až 1 mg, s výhodou 100 ng až 500 nejvýhodněji od 0,5 |ig až do 50 pg plasmidu.
Typicky 8θ vynálezu podává ffirmulování
Ýakciny na více místech se zřetelem na optimalizování transfekce buněk plasmidy. To se děje s výhodou použitím ejekčního zhlaví s více otvory. To lze také prokombinvat pro multi-aplikování přístroje, to jest rozdělení vakcinované dávky na více než jedno využití přístroje v dávkách rozdílných. Podle zvláště výhodného postupu lze přístroj použít s pěti až šesti otvory při jedné či více aplikacích, s výhodou při dvou.
Typickým případem vynálezu je sekvence ADN, kódující imunogen viru· BRSV, zvláště gén G a/nebo F tohoto (na příklad, kmen 391-2, viz Lerch R. a spol., Virology 181 119-131 (1991)·
-7Jiným typickým příkladem dle tohoto vynálezu je sekvence ADN, kódující imunogen viru Shinotrachetidis skotu (infekční, tzv. IBR) a herpesviru Skotu (BHV, zvláště pak kódující gén gB a/nebo gén gD, viz například gén ST, viz Leung-Tack P. a spol., Virology 199. 409-421 (1994).
Dalším typickým příkladem dle tohoto vynálezu je sekvence ADN, kódující imunogen viru onemocnění sliznice (BVD), zvláště pak gén E2 a/nebo gén El, viz například kmen Osloss, Dr.Moerlooze I». a spol., J.Gen.Virol. 74. 1433-1438 (1993)· Rovněž lze připojit gény různých podtypů BVD, například severoamerický a evropský, viz Dekker A. a spol., Veterinary Microbiol. 47. 317-329 (1995).
Ještě jiným typem dle tohoto vynálezu je sekvence ADN, kódující imunogen viru parachřipky typu 3 (PI-3), zvláště pak gén HN a/nebo P, s výhodou HN (sekvence génu Pa HK deponoval Shifeuta H, 1987_ GenBank Y00115).
V případe kombinování dvou génů, například P a G z BRSV, HN a P z ©1-3 nebo gD a GB z OBR lze odpovídající sekvence vsunout do téhož plasmidu nebo do plasmidů různých.
V případě génu pathogenního Činidla se zahrnuje nejen kompletní géa, ale také jeho lišící se nukleotidové sekvence, Čítaje v to fragmefaty, zachovávající si schopnost indukovat ochrannou odezvu. Poznámka o genech se týká nukleotidových sekvencí rovnocenných těm, které byly přesně popsány v příkladech, tedy i sekvencí lišících se, ale kódujících stejný protein. Týká se rovněž nukleotidových sekvencí ρ v j-iných k^enů uvažovaného pathogénu, zajištujícího kombinovanou ochranu nebo specifickou ochranu s přihlédnutím ke kmenu nebo skupině kmenů· Týká se také ještě nukleotidových sekvencí, které byly modifikovány, aby se usnadnila exprese in vivo živočicha jako hostitele, ale kódující «φ v ·♦ ·· φ · φ φ φφ· φφφφ
Φ ΦΦΦ ΦΦΦΦ
Φ φ « · Λ b Φ ΦΦΦ ΦΦΦ
ΦΦΦ·!·· · · • ΦΦ «· ΦΦ ΦΦ· ®· ··
-8tentýž protein·
Rozumí se samozřejmě, že vynález je založen na adaptaci vakcin ADB předchozích typů pro intradermální podávání přístrojem pro tryskové vstřikování kaJsa^Lin. A pokud zahrnuje modifikace na úrovni vakciny a zvláště její viskozity, množství ADN a objemu dávky, který se má podat, je samozřejmé, že se vynálezu týká všech konstrukcí vakcin ADN popsaných na tomto úseku již dříve. Odborník je tedy odkazován na situaci na úseku vakcinování ADN, zvláště pak s odvoláním na zde již dříve uvedené podklady.
Přesněji dále řečeno, jednotky transkripce, použité pří formulování vakciny dle tohoto vynálezu, zahrnují silný eukaryotický promotor, jako je promotor hCMV IE.
Formulování vakciny dle tohoto vynálezu lze provést použitím zásobníku pro v£tší počet dávek, například 10 až 100 dávek, který je upraven k napojení na přístroj pro intradermální podávání použitím tryskající kapaliny, například jako je s výhodou Pigjet.
Předmětem vynálezu je rovněž i instalování přenosného zařízení pro vakcinování skotu, jež ůbsahuje přístroj pro podávání s využitím tryskající kapaliny,a zásobníčku, uzpůbeného tak, aby obsahoval více dávek foripulováné vakciny, jak zde byla popsána s tím, že přístroj pro podávání je uzpůsoben pro p&dání dávky vakciny takto formulované intradermálněo
S výhodou obsahuje přístroj k podávání ejekční zhlaví vybavené jednou až deseti tryskami, zvláště čtyřmi až šesti, s výhodou pěti nebo šesti.
Přístroj, určený k podávání, může mít své různé charakteristické vlastnosti a typy, přesněji uvedené v popisu dále. Výhodnými přístroji pro podávání jsou ty, které zahrnují přístroj Pigjet.
• ♦ o · · V · ··· ·*·
Φ * · · · · · . · ré· ·· ♦·♦ · ·· ··
-9Předmětem tohoto vynálezu je rovněž plasmid, spojující sekvenci ADH, kódující imunogén pathogénu skotu a promotor, umožňující expresi tohoto typu imunogénu, to pro přípravu formulování pólynukleotidové vakciny dle různých uzpůsobení, zde výše popisovaných, vhodné k intradermálnímu podávání přístrojkem pro tryskovou aplikaci kapaliny.
Předmětem vynálezu je rovněž způsob vakcinování, při kterém se podává intradermální cestou za použití přístroje pro tryskové podávání kapaliny formulování polynuklqotidové vakciny, jak zde byla výše popsána. Podávání vakciny se může provádět jedním vypuštěním, nebo vícekráte opakovaným stanoveného objemu formulované dávky. Právě tak jest možné předem upravit podání jedné či více vakcinové formulace ve stanovených dávkách, časově rozložených.
Způsob vakcinování dle tohoto vynálezu může využít všech údajů, jak jsou zmiňovány zde výše,.zvláště pokud se to týká využití přístroje, určeného k podávání.
Podstata a -podrobný popis vynálezu
Vynález bude nyní detailněji popsán použitím realizačních způsobů využití bez jakéhokoli omezování s odkazem na zde připojená vyobrazení.
Vyobr. 1 popisuje plasmid, obsahující gén G viru BRSV pod kontrolou promotoru hCMV pro vakcinování skotu proti tomuto viru.
Vyobr.2 je grafickým vyjádřením účinnosti’ vakcinování proti viru BRSV intramuskulárně (IM, označení skotu 1349) a intradermálne (ID, označení skotu 1352 a 1353) s počtem dnů na úsečce a infekčním titrem na ppřadnici.
Příprava syntetického génu G BRSC
Syncyciální virus dýchacího ústrojí skotu je Pt^fceumovirus čeledi Paramyxovirus. Je to virus v obalu, který se replikuje v cytoplasmě a má ARH genomický jednoduchý řetěz v negativní orientaci^Génom BRSV kóduje dva hlavk trans« · • ·
10membránové glykoproteiny, pevně napojený protein F a napojený protein G.
Syntetická verze génu G byla realizována odtržením všech možných signálů propletení, viz Keil G., Pederal Research Centre for Virus Diseases of Animals, Friedrich Loffler Institute, D-17498, ostrov Riems, Německo).
Oblast kódující gén G byla stanovena, viz Lerch a spol., Journal of Virology 64. 5559-5569 (1990). Kódující oblast odpovídá počtu 257 aminokyselin a charakteristice transmembránováho glykoproteinu typu II. Má cytoplasmovou N-koncovou oblast o 40 aminokyselinách následovanou oblastí transmemhránovou o 25 aminokyselinách. Zbytek, tedy 192 koncových aminokyselin, tvoří extracelulární oblast proteinu G.Byla syntetizována sekvence ADN s jedním vazebným rámem otevřeným s kódováním pro přesně těchže 257 aminokyselin, které zjistil Lerch a spol.,, ale bez potenciálních episážních signálů. Byl realizován přenos inverzní sekvence 257 aminokyselin na všechny sekvence ADN s možným kódováním takové sekvence aminokyselin. Bylo to uskutečněno použitím inverzního přenosového programu sekvence proteinu RTRANS PCGene od Bairoch A., Univ., Ženeva, Švýcary (IntelliGenetics lne). Byla stanovena potenciální episážní místa za použití analyzy nukleových kyselin ”SighalM. Tento program se zakládá na způsobu rovnovážné matrice (viz Staden, Nucleio Acids Research 12, 505-519, 1984). Tento pfogram identifikuje místa potenciálních episážních dárců (vazby intron/exon) a místa potenciálního příjmu episáže (vazby exon/intronfc. Na základe těchto sekvenčních údajů lze mněnit celek episážních signálů silných, aniž by se modifikovala kapacita pro protein. Zvláště pak dinukleotiély GT, které mohou mít extremní 5 *intronu a dinukleotidy AG, které mohou mít extremní 3*intronu byly odstraněny, sec to bylo možno.
Pro syntetizování nukleotidové sekvence schopné feodo-111 ««· vat G byly syntetizovány oligonukleotidy asi 100 zbytků, kryjící oba dva provazce kompletní sekvence. Za použití syntetizování ADN (např. syntetizování ADR, Perkin, Blmer/Applied Biosystems 381A) lze právě tak využít obchodně dostupné oligonukleotidy. Komplementární oligonukleotidy se hybridizují za vzniku fragmentu se dvěma řetízky a jsou klonovány do prokaryotických vektorů, jako jsou pUC18 nebo pUC19o Za použití enzymově vhodných restriksních míst se naváže celek klonovaných fragmentů ADN v dobrém pořadí za použití klonovacího postupu, viz Sambrook a spol., Molebular Cloning: A laboratory Manual,
2.vyd., Cold Spring Harbor laboratory, Cold Spring Harbor,
New York 1989). Nukleotidová sekvence fragmentu ADN, která je výsledkem této činnosti, byla stanoveno použitím standartních sekvencovacích postupů (Sambrook a spol.) pro kontrolu, zda sekvence je správná.
KoHferuování eukaryotického expresního vektoru obsahujícího gén G za promotorem hCMV
Pro zajištění jeho extprese byl klonován syntetický gén G do jednoho vektoru. Při tomto předběžném pokusu byl byl použit připravený vektor bezprostředně v laboratoři, tedy přesně řečeno expresní eukaryotický vektor 175hCMV. Tento plasmidový vektor obsahuje dva fragmenty z viru BHVI, které jsou bočně na základu glykoproteinu E kmene BHVI (holandský), nazývaný Lam, viz Van Engelenburg a spol. Journal of General Virology 75. 2311-2318 (1994). Boční fragment vlevo (Cterm GI) počíná v místě Pstl, umístěném v otevřeném vazebném rámu glykoproteinu gl a končí v místě BstBI (nebo AsuII). 17 nukleotidů nad začátkem rámu je otevřeno pro vazbu génu gB. Tento fragment je označován jako Cterm gl. Fragment bočně vpravo začíná v místě EcoNI, situovaném na výšce konce otevřeného rámu vazby gE a končí se na výšce prvého místa Smál před opakujícím se koncovým fragmentem (TR). Tento fragment kóduje gén US9. Je označován jako US 9 a TR. Tyto dva fragmenty byly klonovány do místa Pstl a místa EcoRI (oba volně) na pUCl8, Mezí místem BstBI a místem EcoNI byl klonován • · • · · • · » • · · • · * · ·
-12··* ·· » · 4 · ·» « · ·· · ··· 4 4 • » 4 » fragment Asái (konec volný) o 720 pb, obsahující největší část promotoru Immediate Early lidského cytomegaloviru (hCMV-P) s polyvazebnou oblastí a končící polyadenylačním signálem (Póly A). Syntetický gén G byl klonován v označené orientaci na vnitřek místa Smál této polyvazebné oblastioZískaný plasmid byl pojmenován PR608, viz vyobr.l.
Kontrola exprese in vitro se zřetelem na G za vycházení z plasmidu PR608.
Byl proveden pokus přechodné exprese, aby se zjistilo, zda plasmid PR608 může exprimovat protein G. K tomuto účelu byl 1,5 pg čisté ADN plasmidu PR608 transfikován do monovrstvy embryonální průdušnice skotu (BBTr) v kultůře. Tyto buňky EBTr byly kultivovány na minimálním esenčním prostředí Earle s 10% foetálního séra skotu (Integro) a s antibiotiky: 125 jedn.penicilinu (Gist-Brocades) a 125 ytg streptomycinu (Biochemie) 37,5 jedn. nystatinu (Sigma),
37,5 ug kanamycinu (Sigma) na 1 mlo Transfikování bylo provedeno ve shodě se standardizovaný® postupem srážení fosforečnanu vápenatého dle Graham-a P»L. a ven der Eb-a A.J., Virology 52, 456-467 (1973). Po transfikování byla přenesena plasmidická ADN do prostředí transfikovaných buněk a kódované proteiny byly exprimovány dík mechanizmu hostitelské buňky. Normálně pouze 0,01% až 0,1% buněk z transfikované monovrstvy by zjistilo ADN a exprimovalo kódované geny.
Příprava ADN pro polynukleotidickou vakcinaci.
ADN plasmidu PR608 byla připravena přidáním 100 μΐ ze zásoby E.coli K12 v glycerolu, buněk DHSaplha P s obsahem plasmidu PR.608 do 2 litrů prostředí LB, což je standardizované prostředí pro růst bakterií. Tato kultura objemu dvou litrů byla inkubována 20 hodin při 37° C a amplifikované buňky byly sebrány za použití nádobek po 250 ml a odstředivky IEC Centra~8R o nejvyšší rychlosti.
-13• · · ·
19 ·· · · * • · a
9 9
9 19 9
9 • 9 11
ADM plasmidu PR608 byla izolována z buněk sraženiny za použití postupu alkalického lyžování, standardizovaného de Birnboim-em a Doly, jak to popsal Sambrook a spol., Molecular Cloning, a Press Laboratory Manual, 2.vyd. Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989). Z plasmidu izolovaná ADH byla pak rozpuštěna v 20 ml TE (10 mM Tris a 1 mM kyseliny ethylendiamintetraoctové, pH 7,4) a použitím ělektroforesy byla stanovena koncentrace ADH,, jakož i její kvalita. Při použití normální kultury objemu 2 litry lze izolovat 40 mg plasmidu; asi 60% plasmidu PR608 se nachází ve stavu uzavřeném nahoře a asi 30% je ve stavu cirkulárně uvolněném.
Přípravek plasmidů byl uskladněn za -20° C. Před použitím ADH z plasmidu PR608 byl roztok ADH zředěn na 0,5 mg/ml v 1 x PBS a TE. Tento pufrovaný roztok ADH byl pipetován do nádobek 10 ml, uzpůsobených pro přístrojek Pgjet za uskladnění při 4°C pro použití za hodinu až dvě. Přístrojek Pigjet pro podávání
Přístrojek pro administrování, tedy podávání,přenosného typu, a to typu Pigjet, obsahuje v pouzdru, vybaveném držadlem, zásobník kalibrovaný po 0,2 ml a píst, který je normálně v postavení vzdáleném v pouzdru, a to pod kontrolou pružiny uvedeného pístu.
Přístrojek je vybaven vně zhlavím s pěti tryskami či dýznami, určenými ke kalibrování vstřiku, i když tam může být vsunuta jedna tryska a filtrační zařízení, aby nedošlo ke znečistění injekce případnými nečistotami.
Trysky jsou od sebe mírně vzdáleny. Tlak výtrysku z vývodu trysky může být stanoven na 100 bar pro Pigjet s jednou tryskou. „
Působením vhodného zařízeni dojde ke stlačeni pružiny, tím se vyvolá pohyb pístu a důsledkem je nasati vhodné dávky vakciny ze zásobníčku nebo lahvičky, připojené na pouzdro.
• ·
-14• · · · » • » · * • · · · «·· 99 9
9 • 9 9 9
Uvolnění pružiny vyprovokuje vyprázdnění pístu a ejekci dávky otvorem či otvory pro trysknutí.
Testy vakcinování a další pokusy telata bez specifických pathogenních organizmů byla pořízena císařským řezem, zbavena kollostra a uchovávána v φζό-laci. Telata byla vakcinována šestkrát v intervalu jednoho týdne, a to od stáří 6 týdnů. Ze zvířátek byla dvě vakcinována intradermálně použitím Pigjet s jednou tryskou (Endoscopic, Laons, Francie), 2 ze zvířátek byla vakcinována intramuskulárně jehlou velikosti 25. Pigjet byl aplikován tak, že jeho zhlaví bylo v kontaktu s kůží kolmé na ni tak, aby tryska vakciny měla kolmý směr vůči kůži. Každá vakcinování sestávalorz 500 pg Adn Plasmidu v 1 ml fosfátového pufru PBS. Intradermálními vakcinami bylo 5 injekcí po 0,2 ml do kůže zadní tlapky a vakcinacemi intramuskulárními byla 1 injekce do gluteu svalu. Před vakcinováním byla kůže oholena.
Byly získány t^to titry antilátek, jak je to patrné z tabulky I ade dále:
vakcinování v týdnech: o, 1. 2, 3, 4 ·, 5,
zkouška v týdnu šestém
sledování titru antilátek v týdnech 0 až 8.
0 1 2 3 4 5 6 7 8
tele 1352 Pigjet <5 <5 45 80 640 1280 g40 1280 /5120
tele 1453 Pigjet 45 <5 45 40 1280 640 640 640 a
tele 1349 IM 2$ 45 45 45 45 <5 45 z? Z5
tele 1350 IM </5 <5 a
a: tato telátka byla usmrcena v důsledku problémů v souvislosti se zdravím, ve spojitosti s vakcinováním.
-15• · · · · • · · * · · • · · · · • « «· · ··· • · · • · · · · · ·
Jako důsledek injekcí ADN lze pozorovat projev antilátek na konci 3 týdnů u zvířat vakcinovaných intradermálne a vysoké titry od čtvrtého týdne se projeví na hladině.
Telata byla potom testována pomocí viru infekčního BRSV. Inokulování viru bylo provedeno 6 týdnů po prvním vakcinování intranasálním nakapáním 1 ml viru kmene Odijk (1<Ρ»θ TCDI^/ml) do každého z chřípí.
Pro zjištění účinnosti vakcinování byla sledována exkrece viru titrováním infekčního ΤΟΒΙ^θπιΙ až po 12 dnů po infikování, a to na výtěrech z nosu (sw) a v kapalině po promytí plic (Lav), viz vyobr.2,
Bylo možno dokázat, že plasmid, kódující protein G z BBSV, podávaný intradermálně trysknutím kapaliny chrání proti virulujícímu vývoji tohoto viru. Intradermální vakcinování použitím přístrojku pro podávání, majícího žhlaví s jednou tryskou způsobí rychle zvýšení tifrd antilátek proti proteinu G, což nebylo pozorováno při intramuslkulárním vakcinovánío I jinak titry infekčního viru BBSV v kapalinách po vymytí plic a na nosních výtěrech byly vyšší v případě telat vakcinovaných intramuskulárně a ve skutečnosti nestávaly u telat vakcinovaných intradermálně. Klinické signály byly lehké a nelišily se podstatněji mezi zvířaty.
Byla rovněž pozorována velmi dobrá inokulaoe při použití aparátku Pigjet, přieemž tento postup v žádném případě nevyžaduje předchozí zanícení kůže, jako je tomu
V v případě částeček zlata.
Kromě toho, a to je pozoruhodné, je současně doraženo ochrany proti proteinu G, který zpravidla není příliš imunogenní, viz Collins P.L., The Paramyxovirusses, 1991, vyd.Kingsbury D.E., Néew York, Pienum Press a zvýšený titr antilátky, dosažený po intradermálním vakcinování, je porovnatelný s tím, jehož se dosáhne po přírodním infikování nebo vakcinováním živou vakcinou, testovanou jinými.
Vynález se rovněž týká způsobu přípravy formulování vakciny, jak je to patrné z tohoto popisu.

Claims (15)

  1. PATENTOVÍ NÁROKY
    1· Formulování polynukleotidické vakciny, určené pro skot, obsahující účinné množství(při podávání intradermálním)plasmidu, spojujícího sekvenci ADN, kódující imunogén pethogenního činidla skotu, a promotor, dovolující expresi tohoto imunogénu in vivo do buněk kůže, vyznačující se tím, že toto formulování je upraveno pro intradermální podávání pomocí přístroje pro tryskové vstříknutí kapaliny.
  2. 2. Formulování vakciny podle nároku 1, vyznačující se tím, že plasmid je přítomný ve vehikulu vhodném pro intradermální podávání objemu dávky mezi 0,1 a 0,9 ml, s výhodou mezi 0,2 a 0,6 ml, nejvýhodněji mezi 0,4 až 0,5 ml, to za podávání tryskovým vstříknutím kapaliny do intradermální vrstvy·
  3. 3· Formulování vakciny podle nároků 1 nebo 2, vyznačující se tím, že plasmid je obsažen ve formulování vakciny v intraderraálním účinném množství od 10 ng doil mg, s výhodou od 100 ng do 500 jig, nejvýhodněji od 0,5 ug do 50 pg.
  4. 4· Formulování vakciny podle nároku 3, vyznačující se tím, že sekvence ADN, kódující imunogén pathogenního Činidla je zvolena ze skupiny, kterou tvoří vir BRSV, vir IBR,.vir BVD a vir PI3.
  5. 5· Formulování vakciny podle nároku 4, vyznačující se tím, že sekvence ADN kóduje gén gB a/nebo gén gD viru IBR.
  6. 6, Formulování vakciny podle nároku 4, vyznačující se tím, že sekvence ADN kóduje gén G a/nebo gén F viru BRSV.
  7. 7o Formulování vakciny podle nároku 4, vyznačující se tím, že sekvence ADN kóduje E2 a/nebo B1 viru BVD,
    -194 4
    4 9
    4 4 · 4 > 4 4 · » 4 · · •44 444
  8. 8. Formulování vakciny podle nároku 4, vyznačující se tím, že sekvence ADN kóduje HN a/nebo F viru PI 3,
  9. 9o Formulování vakciny podle kteréhokoli z nároků 1 až 8, vyznačující se tím, že promotorem jest eukaryotick^ siiný promotor, jako je promotor hCMV IE.
  10. 10 o Formulování vakciny podle kteréhokoli z nároků 1 až 9, vyznačující se tím, že je vneseno do nádobky pro větší počet dávek, vybavené přístrojkem pro intradermální podávání tryskovým vstříknutím kapaliny, s výhodou přístrojkem Pigjet.
  11. 11« Přenosné zařízení pro vakcinování skotu, obsahující přístrojek pro podávání tryskovým vstřikováním kapaliny a nádobku, uzpůsobenou k obsahu většího počtu dávek formulování vakciny podle kteréhokoli z nároků 1 až 10.
  12. 12. Zařízení podle nároku 11, vyznačující se tím, že přístrojek obsahuje ejekční zhlaví s jednou až deseti tryskami, zvláště čtyřmi až šesti, obzvláště pěti nebo šesti.
  13. 13. Použití plasmidu, spojujícího sekvenci ADN, kódující imunogen skotu a promotor dovolující expresi tohoto imunogénu, to pro přípravu formulování polynukleotidové vakciny upravené pro intradermální podávání přístrojkem pro tryskový vstřik kapaliny.
  14. 14. Použití plasmidu podle nároku 13, vyznačující se tím, že obsahuje mezi 10 ng až 1 mg ADN, s výhodou mezi 100 ng a 500 pg, ještě výhodněji mezi 0,5 pg a 50 pg v objemu dávky mezi 0,1 až 0,9 ml s výhodou mezi 0,2 až 0,6 ml nejvýhodněji mezi 0,4 až 0,5 ml.
  15. 15. Použití plasmidu podle nároku 12, vyznačující se tím, že sekvence ADN kóduje imunogén pathogenního činidla ze skupiny: vir BRSV, IBR, BVD a PI 3.
CZ0010699A 1996-07-19 1997-07-16 Polynukleotidová vakcína, intradermální prístroj tuto vakcínu obsahující a pouzití plazmidu pro prípravu této vakcíny CZ298216B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9609402A FR2751228B1 (fr) 1996-07-19 1996-07-19 Vaccin polynucleotidique bovin pour voie intradermique

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ10699A3 true CZ10699A3 (cs) 1999-04-14
CZ298216B6 CZ298216B6 (cs) 2007-07-25

Family

ID=9494496

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ0010699A CZ298216B6 (cs) 1996-07-19 1997-07-16 Polynukleotidová vakcína, intradermální prístroj tuto vakcínu obsahující a pouzití plazmidu pro prípravu této vakcíny

Country Status (23)

Country Link
US (2) US6451770B1 (cs)
EP (1) EP0918540B1 (cs)
JP (1) JP2000515522A (cs)
AP (1) AP9701045A0 (cs)
AR (1) AR007863A1 (cs)
AT (1) ATE224732T1 (cs)
AU (1) AU722878B2 (cs)
BR (1) BR9710498A (cs)
CA (1) CA2261334C (cs)
CO (1) CO4700344A1 (cs)
CZ (1) CZ298216B6 (cs)
DE (1) DE69715879T2 (cs)
ES (1) ES2184122T3 (cs)
FR (1) FR2751228B1 (cs)
HU (1) HU224833B1 (cs)
ID (1) ID19427A (cs)
IL (1) IL127914A (cs)
MA (1) MA24271A1 (cs)
MX (1) MXPA99000684A (cs)
NZ (1) NZ333752A (cs)
PL (1) PL189184B1 (cs)
WO (1) WO1998003196A1 (cs)
ZA (1) ZA976285B (cs)

Families Citing this family (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2751228B1 (fr) * 1996-07-19 1998-11-20 Rhone Merieux Vaccin polynucleotidique bovin pour voie intradermique
US7294338B2 (en) * 1996-07-19 2007-11-13 Merial Polynucleotide vaccine formula against canine pathologies, in particular respiratory and digestive pathologies
US6852705B2 (en) 2000-01-21 2005-02-08 Merial DNA vaccines for farm animals, in particular bovines and porcines
FR2804028B1 (fr) * 2000-01-21 2004-06-04 Merial Sas Vaccins adn ameliores pour animaux de rente
US7078388B2 (en) * 2000-01-21 2006-07-18 Merial DNA vaccines for farm animals, in particular bovines and porcines
CN1253220C (zh) 2001-06-29 2006-04-26 贝克顿迪肯森公司 通过微管在真皮内输入疫苗和基因治疗剂
US7906311B2 (en) 2002-03-20 2011-03-15 Merial Limited Cotton rat lung cells for virus culture
EP2390352A1 (en) 2003-03-18 2011-11-30 Quantum Genetics Ireland Limited Systems and methods for improving protein and milk production of dairy herds
US7468273B2 (en) 2003-05-01 2008-12-23 Meial Limited Canine GHRH gene, polypeptides and methods of use
MXPA06005424A (es) 2003-11-13 2007-01-25 Univ Georgia Res Found Metodos para caracterizar virus de enfermedad bursal infecciosa.
CA2556911C (en) 2004-02-19 2013-07-30 The Governors Of The University Of Alberta Leptin promoter polymorphisms and uses thereof
US7582302B2 (en) * 2004-06-04 2009-09-01 Merial Limited Needle-free administration of FeLV vaccines
ES2343270T3 (es) 2005-04-25 2010-07-27 Merial Ltd. Vacunas contra el virus nipah.
US8591457B2 (en) 2005-08-10 2013-11-26 Alza Corporation Method for making a needle-free jet injection drug delivery device
US20080241184A1 (en) 2005-08-25 2008-10-02 Jules Maarten Minke Canine influenza vaccines
US7771995B2 (en) 2005-11-14 2010-08-10 Merial Limited Plasmid encoding human BMP-7
EP1951751B1 (en) 2005-11-14 2017-11-01 Merial, Inc. Gene therapy for renal failure
US7862821B2 (en) 2006-06-01 2011-01-04 Merial Limited Recombinant vaccine against bluetongue virus
UA100692C2 (ru) 2007-05-02 2013-01-25 Мериал Лимитед Днк-плазмиды, имеющие повышенную экспрессию и стабильность
US20080274137A1 (en) * 2007-05-02 2008-11-06 Jean Christophe Francis Audonnet DNA plasmids having improved expression and stability
MX2011005604A (es) 2008-11-28 2011-09-01 Merial Ltd Vacuna recombinante para influenza aviar y sus usos.
US8871220B2 (en) 2009-04-03 2014-10-28 Merial Limited Newcastle disease virus vectored avian vaccines
EP3213766A1 (en) 2009-12-28 2017-09-06 Merial Ltd. Recombinant ndv antigen and uses thereof
US20130197612A1 (en) 2010-02-26 2013-08-01 Jack W. Lasersohn Electromagnetic Radiation Therapy
WO2011112945A2 (en) 2010-03-12 2011-09-15 Merial Limited Foot and mouth disease virus recombinant vaccines and uses thereof
US8986706B2 (en) 2010-08-31 2015-03-24 Merial, Inc. Newcastle disease virus vectored herpesvirus vaccines
WO2012090073A2 (en) 2010-12-30 2012-07-05 The Netherlands Cancer Institute Methods and compositions for predicting chemotherapy sensitivity
US20140296248A1 (en) 2011-04-04 2014-10-02 Stichting het Nederlands Kanker Instiuut-Antoni van Leeuwenhoek ziekenhuis Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment
WO2012138789A2 (en) 2011-04-04 2012-10-11 Netherlands Cancer Institute Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment
US9216213B2 (en) 2011-04-20 2015-12-22 Merial, Inc. Adjuvanted rabies vaccine with improved viscosity profile
JP6407714B2 (ja) 2011-04-25 2018-10-17 アドヴァンスド バイオサイエンス ラボラトリーズ インコーポレイテッド 短縮型ｈｉｖエンベロープタンパク質（ｅｎｖ）、前記に関連する方法及び組成物
NZ618125A (en) 2011-05-27 2016-03-31 Merial Ltd Genetic vaccines against hendra virus and nipah virus
ES2674439T3 (es) 2011-06-01 2018-06-29 Merial, Inc. Administración sin aguja de vacunas contra el VSRRP
CA2844927C (en) 2011-08-12 2017-10-31 Merial Limited Vacuum-assisted preservation of biological products, in particular of vaccines
WO2013093629A2 (en) 2011-12-20 2013-06-27 Netherlands Cancer Institute Modular vaccines, methods and compositions related thereto
HUE033858T2 (en) 2012-02-14 2018-01-29 Merial Inc Rotavirus unit vaccines and method for their preparation and use
EA032389B1 (ru) 2012-02-14 2019-05-31 Мериал, Инк. Рекомбинантные поксвирусные векторы, кодирующие и экспрессирующие гликопротеин g вируса бешенства и полипептид oxl, и вакцины, созданные на их основе, используемые в способе вакцинации животных против бешенства
WO2013138776A1 (en) 2012-03-16 2013-09-19 Merial Limited Novel methods for providing long-term protective immunity against rabies in animals, based upon administration of replication-deficient flavivirus expressing rabies g
NZ703297A (en) 2012-06-13 2016-04-29 Merial Ltd Reassortant btv and ahsv vaccines
US9556419B2 (en) 2013-03-12 2017-01-31 Merial Inc. Reverse genetics Schmallenberg virus vaccine compositions, and methods of use thereof
US10010605B2 (en) 2014-09-23 2018-07-03 Merial, Inc. FMDV recombinant vaccines and uses thereof
AU2015343369B2 (en) 2014-11-03 2018-11-22 Georgia Tech Research Corporation Methods of using microneedle vaccine formulations to elicit in animals protective immunity against rabies virus
PH12017502380B1 (en) 2015-06-23 2022-10-26 Merial Inc Prrsv minor protein-containing recombinant viral vectors and methods of making and use thereof
PH12018500372B1 (en) 2015-08-20 2023-03-15 Merial Inc Fcv recombinant vaccines and uses thereof
AR106026A1 (es) 2015-09-29 2017-12-06 Merial Inc Vacunas de partículas tipo virus (vlp) contra el parvovirus canino (cpv) y sus usos
JP6797206B2 (ja) 2015-11-23 2020-12-09 ベーリンガー インゲルハイム アニマル ヘルス ユーエスエイ インコーポレイテッド Ｆｍｄｖ及びｅ２融合タンパク質並びにその使用
TWI760322B (zh) 2016-01-29 2022-04-11 美商百靈佳殷格翰動物保健美國有限公司 重組腺病毒載體裝載之fmdv疫苗及其用途

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2348709A1 (fr) * 1976-04-23 1977-11-18 Pistor Michel Procede de traitement mesotherapique et dispositif d'injection,formant micro-injecteur automatique,en comportant application
FR2652257B1 (fr) * 1989-09-26 1992-11-27 Rhone Merieux Installation portative de vaccination porcine.
HUT67362A (en) * 1990-07-24 1995-03-28 Uab Research Foundation Methods of use of bovine respiratory syncytial virus recombinant dna, proteins, vaccines, antibodies and transformed cells
GB9118204D0 (en) * 1991-08-23 1991-10-09 Weston Terence E Needle-less injector
US5643578A (en) * 1992-03-23 1997-07-01 University Of Massachusetts Medical Center Immunization by inoculation of DNA transcription unit
ATE254939T1 (de) * 1993-07-31 2003-12-15 Aradigm Corp Nadelloser injektor
ATE475668T1 (de) * 1994-01-27 2010-08-15 Univ Massachusetts Medical Immunisierung durch impfung von dns transkriptionseinheit
US5736524A (en) * 1994-11-14 1998-04-07 Merck & Co.,. Inc. Polynucleotide tuberculosis vaccine
FR2751228B1 (fr) * 1996-07-19 1998-11-20 Rhone Merieux Vaccin polynucleotidique bovin pour voie intradermique

Also Published As

Publication number Publication date
CA2261334C (en) 2010-11-16
DE69715879T2 (de) 2003-01-23
IL127914A (en) 2001-05-20
AU722878B2 (en) 2000-08-10
CZ298216B6 (cs) 2007-07-25
AP9701045A0 (en) 1997-07-31
HU224833B1 (en) 2006-03-28
IL127914A0 (en) 1999-11-30
ZA976285B (en) 1999-01-19
MXPA99000684A (es) 2006-02-10
ATE224732T1 (de) 2002-10-15
PL189184B1 (pl) 2005-07-29
CA2261334A1 (en) 1998-01-29
PL331237A1 (en) 1999-07-05
WO1998003196A1 (fr) 1998-01-29
AR007863A1 (es) 1999-11-24
FR2751228B1 (fr) 1998-11-20
US6803361B2 (en) 2004-10-12
EP0918540B1 (fr) 2002-09-25
MA24271A1 (fr) 1998-04-01
US6451770B1 (en) 2002-09-17
JP2000515522A (ja) 2000-11-21
HUP9902792A2 (hu) 1999-12-28
ID19427A (id) 1998-07-09
US20020137716A1 (en) 2002-09-26
NZ333752A (en) 2000-06-23
BR9710498A (pt) 2000-01-18
FR2751228A1 (fr) 1998-01-23
ES2184122T3 (es) 2003-04-01
AU3773297A (en) 1998-02-10
CO4700344A1 (es) 1998-12-29
EP0918540A1 (fr) 1999-06-02
HUP9902792A3 (en) 2000-03-28
DE69715879D1 (de) 2002-10-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6451770B1 (en) Bovine polynucletide vaccine for the intradermal route
PL188409B1 (pl) Szczepionki do leczenia koni, zastosowanie plazmidu do wytwarzania szczepionki i zestaw do szczepienia koni
PL190122B1 (pl) Kompozycja szczepionki przeciwko patologii układuoddechowego bydła, zastosowanie jednego albo wielu plazmidów, zestaw do szczepienia oraz szczepioniki dla bydła
PL190615B1 (pl) Kompozycja szczepionki dla świń, zastosowanie kompozycji szczepionki, zestaw do szczepienia, szczepionka dla świń i zastosowanie plazmidu
PL190150B1 (pl) Kompozycja szczepionki przeciwko patogenom psów, zastosowanie jednego albo wielu plazmidów, zestaw do szczepienia, szczepionki dla psów, zastosowanieplazmidu oraz sposób szczepienia
TW201026850A (en) PCV 2-based methods and compositions for the treatment of pigs
Gerdts et al. Recent advances in the use of DNA vaccines for the treatment of diseases of farmed animals
US6462027B2 (en) Delivery of nucleic acid into aquatic animals
MX2014015649A (es) Vectores de vacuna recombinante de herpesvirus bovino 1 (bohv-1) con baja virulencia.
Barfoed et al. Influence of routes and administration parameters on antibody response of pigs following DNA vaccination
DeMartini et al. Raccoon poxvirus rabies virus glycoprotein recombinant vaccine in sheep
EP2714077B1 (en) Needle-free administration of prrsv vaccines
DE60222528T2 (de) Impfstoff gegen Pferdearteritisvirus
US20040002472A1 (en) Vaccination or immunization using a prime-boost regimen
EP1594537B1 (en) Vaccination or immunization using a prime-boost regimen against brsv, bhv-1, bvdv, bpi-3
AU2020260415B2 (en) Vaccine against Bovine Viral Diarrhea Virus
CN104640991B (zh) 重组低毒力1型牛疱疹病毒(BoHV‑1)疫苗载体
Willson Novel vaccine delivery technology.
NZ750583B2 (en) Vaccine against bovine viral diarrhea virus
Rompato Modulation of a PRRSV ORF7 DNA vaccine induced immune response in swine by co-delivery of cytokines
PL215173B1 (pl) Zestaw do przeprowadzania szczepienia przeciwko patogenowi bydła, zastosowanie czynnika patogennego bydła (BRSV) do wytwarzania szczepionki, szczepienie oraz inaktywowana szczepionka
HK1049623A1 (en) Noninvasive genetic immunization, expression products therefrom and uses thereof

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MK4A Patent expired

Effective date: 20170716