CZ111997A3

CZ111997A3 - Peptides exhibiting immunomodulating activity, process of their preparation, pharmaceutical compositions containing thereof and their use

Info

Publication number: CZ111997A3
Application number: CZ971119A
Authority: CZ
Inventors: Hakan Bergstrand; Tomas Eriksson; Kostas Karabelas; Magnus Lindvall; Bengt Sarnstrand
Original assignee: Astra Ab
Priority date: 1994-10-14
Filing date: 1995-10-06
Publication date: 1997-12-17
Also published as: EP0783519A1; SE9403526D0; TR199501255A2; BR9509345A; NO971625D0; WO1996011943A1; CA2201479A1; AU3713395A; IS4459A; US6228374B1; HUT77118A; IL115509A0; PL319631A1; AU705364B2; FI971499A0; EE9700087A; US6103697A; NO971625L; MX9702666A; FI971499A7

Description

Dosavadní stav techniky '

Dlouhou dobu existuje potřeba nových bezpečných imunomodulačních činidel pro léčení mnoha různých chorob včetně maligních onemocnění, autoimunitních onemocnění a astmatu a alergie. Současná imunomodulační činidla, jako je cyklosporin A a steroidy, jsou velmi účinnými imunosupresivními činidly, vykazují však rovněž vážné vedlejší účinky, v závislosti na podávané dávce. Nová imunomodulační činidla s vyšší specificitou pro imunitní systém, vykazující méně vedlejších účinků, mají velký význam pro léčení onemocnění, která zahrnují jako důležitou složku v průběhu onemocnění patologickou imunitní odpověď.

Signalizace mezi buňkami je ve velkém rozsahu zprostředkována oligo- nebo polypeptidovými látkami, včetně cytokinů, neuropeptidú a hormonů. Jeden z možných způsobů, jakým může být takový signál přenášen, může zahrnovat oxidoreduktasovou aktivitu zprostředkovanou interakcí thiol-disulfid cysteinových zbytků. Tento typ působení může indukovat konformační změny proteinů, které mohou nakonec předat signál buněčnému jádru. Tento oxidačně redukční systém (redoxní systém), Založený na oxidovaných a redukovaných cysteinech, hraje významné role v iniciací, udržování nebo/a snižování zánětlivých·-odpovědí. Redoxní systémy, které byly dosud charakterizovány, jsou systém thioredoxin (TR) / thio2 redoxin-reduktasa (TRR) (Holmgren akol., 1989, J. Biol.

Chem., 264, 13963} a podobné systémy jako glutaredoxin / glutathion-reduktasa (Bushweller a kol., 1992, Biochemistry, 31, 9288) a protein-disulfid-isomerasoxé (PDI-) systémy (Noiva a' Lennarz, 1992, J. Biol. Chem. 267, 3553). Systém TR / TRR a příbuzné redoxní systémy jsou účinnými regulátory různých známých imunologických a zánětlivých parametrů, jako je exprese a-řetězce IL-2R (Espinoz-Adelgado a kol., 1992, J. Immunol., 149, 2961), modulace exprese aktivity IFN-γ (Deiss a^—KimčhíT^rgBlj^Science, 252, 117), diferenciace a efektorová funkce lymfocytů (Yodoi a Uchiyama, 1992, Immunol. Today 13, 405 - 411), regulace eosinofilových efektorových funkcí (Balcewics a kol., 1991, J. Immunol., 147, 2170), aktivace receptorů glukokortikoidů (Grippo a kol., 1985, J. Biol. Chem. 260, 93 - 97) a modulace imunitní odpovědi během těhotenství (Clarke a kol., 1991, J. Reprod. Fert., 93, 525).

Aktivní centrum TR zahrnuje sekvenci s motivem -Cys-Gly-Pro-Cys-. Některé' virové proteiny, například genové produkty kódované X-oblastmi lidských virů leukemie T-buněk (Shimotohno a kol., 1985, P.N.A.S., 82, 302 - 306) a lidské imunoregulační proteiny mohou mít cystein obsahující sekvence, které jsou homologické s takovým motivem -Cys-Gly-Pro-Cys-. Bylo vzato v úvahu, že tyto proteiny mohou buď exprimovat oxidoreduktasovou aktivitu nebo mohou být substráty pro takovou aktivitu nebo možná mohou působit jako inhibitory takové aktivity.

V minulosti byly vyprodukovány peptidy založené na výše uvedené sekvenci aktivního centra TR bohaté na cystein, a bylo u nich prokázáno, že vykazují biologické účinnosti podobné nativnímu proteinu. Další cystein obsahující peptid s t' aktivitou podobnou thioredoxinu byl získán například')., z hFSH-β-(81-95) (Grasso a kol., 1991, Molecular and Cellular

Endocrinology 78, 163).

Analogy brzlíkového humorálního faktoru γ2 (THF-y2) pro

Cm použití jako imunotnodulační činidla prostředcích jsou popsány ve WO,A1, Uvedený dokument popisuje

Leu - Glu - Cys - Gly - Prq.-Cy s - Phe - Leu Leu-Cys-Ala-Gly-Pro-Cys-Phe-Leu ve farmaceutických 9501182 (12. 01. 1995) .

dva cyklické analogy, (SEQ ID c. 34) a (SEQ ID č. 35), které jsou vyloučeny z tohoto vynálezu. Uvedený dokument však neuvádí účinný význam cystein obsahujících sekvencí.

Nyní--byly připraveny peptidy 's cystein obsahujícími motivy, vybrané z virovýc.h_s.tr.ukt.urních—orote-i-nů-,—nap-ř-í-k-l-adretrovirového transmembránového proteinu pl5E, a lidských proteinu podílejících se na regulaci zánětů, například TGF-β. Peptidy byly poté modifikovány pro dosažení optimálních imunomodulačních vlastností.

Podstata vynálezu

Nyní byla s překvapením nalezena nová skupina peptidů, které výborně působí jako imunomodulátory. Peptidy podle ' vynálezu obsahují 4 až 15 aminokyselin a lze je popsat - t obecným vzorcem I

A-X-Y-Cys-Z-B (I) ve kterém

X je vybrán ze souboru zahrnujícího Gly, Ala, Ile, Asp,

Thr, Ser, Arg a Trp, · · ~ ·

Y je vybrán ze souboru zahrnujícího Pro, kyselinu pipekolovou (dále označovanou Pec) a Ile,

Z je vybrán ze souboru zahrnujícího Ile, Phe, Pro, Ala,

Tyr a Gly,

A představuje atom vodíku, chránící skupinu,, aminokyselinu buď v L- nebo D-formě popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci nebo/a N-koncovou chránící skupinou, nebo aminokyselinovou sekvenci popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích nebo/a N-koncovou chránící skupinou, a

B znamená hydroxylovou -skupinu, aminoskupinu, chrániči'^r ' skupinu, aminokyselinu buď v L- nebo D-formě popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo· chránící' skupinou, nebo aminokyselinovou sekvenci . popři p.a.dě_,,—s--chráněnými^-- funkčními skupinami v postranních řetězcích, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou,

S tím, že z rozsahu obecného vzorce I jsou vyloučeny následující sekvence:

Leu-Glu-Cys-Gly-Pro-Cys-Phe-Leu (SEQ ID č. 34),

Leu-Cys-Ala-Gly-Pro-Cys-Phe-Leu (SEQ ID Č. 35),

Tyr-Ile-Pro-Cys-Phe-Pro-Ser-Ser-Leu-Lys-Arg-Leu-Leu-Ile (SEQ ID č. 36) ,

Tyr-Ile-Pro-Cys-Phe-Pro-Ser-Ser-Leu-Lys-Arg-Leu-Ile (SEQ ID

Č. 37) ,

Ser-Gly-Pro-Cys-Pro-Lys-Asp-Gly-Gln-Pro-Ser (SEQ ID č. 38), a Thr-Pro-Pro-Thr-Pro-Cys-Pro-Ser (SEQ ID č. 39).

Délka zbytků A a B se může pohybovat v rozmezí, ve kterém jsou splněna kritéria pokud, jde ..o délku a- možné' aminokyseliny nebo jiné substituenty.

Aminokyselinami podle vynálezu mohou být jak 'přirozené aminokyseliny, tak nepřirozené syntetické aminokyseliny nebo analogy aminokyselin.

Mezi příklady chránících skupin ve významu symbolu A patří řada skupin tvořících karbamátová nebo amidová seskupení, přičemž výhodné jsou následující chránící skupiny: acetylová skupina (Ac), 9-flůórenylmethoxykarbonylová skupina (Fmoc), 1-methyl-l-(4-bifenylyl)ethoxykarbonylová skupina (Bpoc), tritylová skupina (Trt), allyloxykarbonylová skupina (Alloc) a terč.butoxykarbonylová skupina (Boc).

Zejména výhodnými chránícími' ' skupinami ve významu symbolu A jsou acetylová skupina (Ac), 9-fluorenylmethoxykarbonylová skupina (Fmoc) a terč.butoxykarbonylová skupina (Boc) .

Mezi příklady chránících skupin ve významu symbolu B patřř-^řa-ďá^škupiň tvořících) estery, jako jsou alkylové skupiny s l až 6 atomy uhlíku, allylová skupina, adamantylová skupina, benzylová skupina a terč.butylová skupina.

Do rozsahu vynálezu patří rovněž homodimery obecných vzorců IX, III a IV

A-X-Y-Cys-Z-B (II)

A-X-Y-Cys-Z-B

A-X-Y-Cys-Z-B (III)

I I

A-X-Y-Cys-Z-B

A-X-Y-Cys-Z-B (IV)

X

A-X-Y-Cys-Z-B

t.j. homodimery peptidů obecného vzorce I podle vynálezu.

Do rozsahu vynálezu spadají rovněž farmaceuticky přijatelné soli peptidů obecných vzorců I, II, III a IV.

Peptidy obecného vzorce I obsahující několik cysteinových zbytků se mohou vyskytovat jak v oxidované tak v redukované formě. Oxidovaná forma může obsahovat intramolekulární disulfidové vazby, které mají za následek vznik oxidovaných monomerů, nebo intermolekulární disulfidové vazby, které mají _Vrza následek vznik dimerů peptidů obecného vzorce I jak v orientaci hlava-hlava tak v orientaci hlava-pata.

Výhodnými peptidy podle vynálezu jsou peptidy obecných vzorců I, II, III a IV, ve kterých;

X X X X X	je je je je je	Gly, Gly, Ala, Ile, Ala,	Y Y Y Y Y	je je je je je	Pro a Z Pro a Z Pro a Z	je je je je je	Ile, Gly, Ala, Tyr, Tle,
Pro a	Z Z
Pro	a
X	je	Arg,	Y	je	Pro	a	Z	je	Ile,
X	je	Ile,	Y	je	Pro	a	z	je	Ile,
X	je	Asp,	Y	je	Pro	a	z	je	Ile,
X	je	Trp,	Y	je	Pro	a	z	je	Ile,
X	je	Trp,	Y	je	Pro	a	z'	je	Gly,
X	je	Gly,	Y	je	Ile	a	z	je	Ile,
X	je	Gly,	Y	je	Pec	a	z	je	Ile,
X	je	Thr,	Y	je	Pro	a	z	je	Tyr,
X	je	Thr,	Y	je	Pec	a	z	je	Phe,
X	je	Ala,	Y	je	Pro	a	z	je	Phe,
X	je	Ser,	Y	je	Pro	a	z	.je	Phe,
X	je	Gly,	Y	je	Pro	a	z	je	Pro,
X	je	Gly,	Y.	je	Pro	a	z	je	Tyr,

a symboly A a B mohou mít libovolné z významů definovaných výše, s tím, že z rozsahu obecných vzorců I, II, III a IV je vyloučena následující sekvence:

Ser^LGly-Pro-Cys-Pro-Lys-Asp-Gly-Gln-Pro-Ser (SEQ ID č. 38).

Výhodnými peptidy podle vynálezu jsou:

H-Gly-Pro-Cys-Ile-OH	(SEQ	ID	v c.	1),
Fmoc-Gly-Pro-Cys-Ile-	•OH (SEQ	ID	Č. 1)
H-Gly-Pro-Cys-Gly-OH	(SEQ	ID	č.	2) ,
H-Ala-Pro-Cys-Ala-OH	(SEQ	ID	Č.	3) ,
H-Ile-Pro-Cys-Tyr-OH	(SEQ	ID	v c.	4) ,

Ί

H-Trp-Pro-Cys-Gly-OH (SEQ ID č. 32),

H-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 5),

H-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-NH₂ (SEQ ID č. 6), H-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-OH ..(SEQ ID č. 7), H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 8), H-Leu-Leu-D-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 8),

H-Leu-Leu-Phe-Ala-Pro-Cys-Ile-OH	(SEQ	ID	Č.	9) ,
H-Leu-Leu-Phe-Arg-Pro-Cys-Ile-OH	(SEQ	ID	v c.	10) ,
H-Leu-Leu-Phe-Ile-Pro-Cys-Ile-OH	(SEQ	ID	č.	11) ,
H-Leu-Leu-Phe-Asp-Pro-Cys-Ile-OH	(SEQ	ID	č.	12) ,
H-Leu-Leu-Phe-Trp-Pro-Cys-Ile-OH	(SEQ	ID	č.	13) ,
H-Leu-Leu-Phe-Gly-Ile-Cys-Ile-OH	(SEQ	ID	v c.	14) ,
H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pec-Cys-Ile-OH	(SEQ	ID	v 0 .	15) ,
H-Ala-Val-Trp-Thr-Pro-Cys-Tyr-OH	(SEQ	ID	č.	33) ,
H-Tyr-Phe-Tyr-Thr-Pec-Cys-Phe-OH	(SEQ	ID	v c.	16) ,
H-Phe-Val-Met-Ala-Pro-Cys-Phe-OH	(SEQ	ID	č.	17) ,
H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH	(SEQ	ID	č.	18) ,
H-Ile-Ser-Gly-Pro-Cys-Pro-Lys-OH	(SEQ	ID	c.	19) ,
H-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH	(SEQ	ID	v c.	20) ,
H-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-NH₂	(SEQ	ID	v c.	21) ,
H-Glu-Lys-Gly-Pro-Cys-Tyr-Arg-OH	(SEQ	ID	v c.	22) ,

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-OH (SEQ IDč. 23), H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-NH₂ (SEQ ID č. 24),

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Oallyl (SEQ ID č. 23), H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-NH₂ (SEQ ID č. 25), H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-OH (SEQ ID č. 26), H-Phe~Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-NH₂ (SEQ ID č. 27),

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys- Ile-Leu-Asn-Arg-Leu-Met-Glu-NHy,' (SEQ ID č. 28),

H-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-Leu-Met-Glu-NH₂(SEQ ID č. 29),

Fmoc-Phe-Leu-Phe~Gly-Pro-Cys-I-le-Leu-Asn-Arg-Leu-Met-Glu-NH₂ (SEQ ID č. 29),

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH- (SEQ ID č. 30),

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH	(SEQ ID č.	31) ,
H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ilé-OH 1
H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH	(homodimer	SEQ	ID	č.	8) ,
H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH
H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH	(homodimer	,ςρΩ — — -κ.	ID	Č -	1 fi ) — * i r

H-Gly-Pro-Cys-Ile-OH

H-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 1),

H-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-Leu-Met-Glu-NH₂

H-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-Leu-Met-Glu-NH₂(homodimer SEQ ID č. 28},

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH (homodimer SEQ ID č. 30 v> orientaci hlava-hlava), a

Η - P he - C.y££^eu-Gly-^££z£y ε - P r o - OH'

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH (homodimer SEQ ID č. 30 v orientaci hlava-pata).

Zejména výhodnými peptidy podle vynálezu jsou peptidy obecných vzorců I, II, III a IV, ve kterých:

X	je	Gly,	Y	je	Pro	a	z	je	Ile,
X	je	Ala,	Y	je	Pro	a	z	je	Ala,
X	je	Ala,	Y	je	Pro	a	z	je	Ile,
X	je	Asp,	Y	je	Pro	a	z	je	Ile,
X	je	Gly,	Y	je	Ile	a	z	je	Ile,
X	je	Gly,	Y	je	Pec	a	z	je	Ile,

X je Ser, Y je Pro a Z je Phe, nebo

X je Gly, Y je Pro a Z je Pro, a symboly A a B mohou mít libovolné z významů definovaných výše, s tím, že z rozsahu obecných vzorců I, II, III a IV je vyloučena následující sekvence:

Ser-Gly-Pro-Cys-Pro-Lys-Asp-Gly-Gln-Pro-Ser (SEQ ID č. 38).·

-Ze-jména—výhodnými—pept-i-dy-pod-i-e-vynáilezu.^sotrjpept idy:

H-GlyH-AlaH-PheH-LeuH-LeuH-LeuH-LeuH-LeuH-LeuH-LeuPro-Cys Pro-Cys Gly-Pro Leu-Phe Leu-Phe Leu-Phe Leu-Phe Leu-Phe Leu-Tyr Leu-Phe

č. 5)	t
(SEQ	ID	•v c.	8) ,
(SEQ	ID	č.	9) ,
(SEQ	ID	č.	12)
(SEQ	ID	Č.	14)
(SEQ	ID	č.	15)
(SEQ	ID	č.	18)

-Ile-OH (SEQ ID č. 1),

-Ala-OH (SEQ ID S. 3) ,

-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 5; -Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ -Ala-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ -Asp-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ -Gly-Ile-Cys-Ile-OH (SEQ -Gly-Pec-Cys-Ile-OH (SEQ -Ser-Pro-Cys-Phe-OH (SEQ -Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-OH (SEQ ID č. 23

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH

I

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 8),

H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH

I

H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH (homodimer SEQ ID č. 18),

H-Phe-Cýs-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH (SEQ ID č. 30),

I-1

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH (SEQ ID č. 31),

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys- Pro-OH

I I

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH (homodimer SEQ ID č. 30 v orientaci hlava-hlava), a H - Phe - (^g^eu-Gly-^£g^gys - Pro - OH

H-Phe-Cys-Leu-GIy-Pro-Cys-Pro-OH (homodimer SEQ· ID č. 30 v orientaci hlava-pata).

Nejvýhodnějšími peptidy podle vynálezu jsou peptidy obecných vzorců Γ, II, III a IV, ve kterých;

-X—je-GTy—Y—j-e^—Pro^-a^-Z~j^Ile,

X je Ala, Y je Pro a· Z je Ile,

X je Asp, Y je Pro a Z je Ilě,

X je Ser, Y je Pro a Z je Phe, nebo

X je Gly, Y je Pro a Z je Pro, a symboly A a B mohou mít libovolné z významů definovaných výše, s tím, že z rozsahu obecných vzorců I, II, III a IV je vyloučena následující sekvence;

Ser-Gly-Pro-Cys-Pro-Lys-Asp-Gly-Gln-Pro-Ser (SEQ ID č. 38).

Nejvýhodnějšími peptidy podle vynálezu jsou peptidy:

H-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 1),

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH	(SEQ	ID	č.	8) ,
H-Leu-Leu-Phe-Ala-Pro-Cys-Ilé-OH	(SEQ	ID	č.	9),
H-Leu-Leu-Phe-Asp-Pro-Cys-Ile-OH	(SEQ	ID	č.	12) ,
H-Leu - Leu r· Tyr -Ser- Pro - Cys - Phe - OH	(SEQ	ID	v c.	18) ,

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-OH (SEQ ID č. 23),

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH

I

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH^jChomodimer SEQ ID č. 8),

H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH

H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH (homodimer SEQ ID č. 18), a

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH (SEQ ID č. 31).

Nyní bylo s překvapením zjištěno, - že -peptidy, ^obecných vzorců I, II, III a IV jsou výbornými imunomodulátory, přičemž mají buď imunostimulační nebo imunoinhibiční účinek. Vynález tedy popisuje peptidy s výhodnými vlastnostmi pro léčení onemocnění, u kterých lze očekávat anergii imunitní v COů cwci cuit.ii uíij.

LOU obranu hostitele. Mezi taková onemocnění patří chronická bronchitida, u které bylo již dříve popsáno, že u ní dochází ke snížení úrovně exacerbace pomocí látek modifikujících imunitní odpověď, jako je Biostim (Radermecker, M. a kol.,· Int. J. Immunopharmac. 10, 913 - 917, 1988; Scheffer, J. a' kol., Arzneim Forsch/Drug Res. 41, 815 - 820, 1991),

Ribomunyl a BronchoVaxom (Paupe, J. Respiration 580, 150 - 154, 1991), jakož i pomocí N-acetylcysteinu (viz

Bergstrand, H. 119 - 127, 1986;

J. Free Radíc. Biol. Med. 2,

Mezi taková onemocnění patří rovněž některé formy maligních onemocnění. Početné výzkumné ústavy na celém světě se zaměřují na nalezení způsobů stimulace imunitní odpovědi u pacientů s různými formami maligních onemocnění a řada literárních prací se zabývá těmito přístupy (Stevenson, F.

K. , FASEB J 5: 2250 - 2257, 1991; Melíef, C. J. M., Advances in Cancer Research 58: 143 - 175, 1992; Chen, J. a kol., Immunology Today 14: 10, 483 - 486, 1993). Jako jeden příklad lze uvést, že pacienti s intrakraniálními tumory (gliomy) vykazují velké snížení imunity, asi v důsledku poruch sekrece IL-2, jakož . i i· exprese receptorů IL-2í--v T-buňkách těchto pacientů (Roszman, T. a kol., Immunology Today 12, 370 - 374, 1991). Kromě toho byl pro imuňostimulátor Levamisol zdokumentován podstatný účinek jako adjuvans při imunoterapii melanomu a karcinomu tlustého střeva (Van Wauwe, J. a Janssen, P. A. J.: Int. J. Immunopharmac. 13, 3-9, 1991) a bylo popsáno, že imunoterapie IL-2 in vivo nebo ošetření pacientových zabiječských buněk aktivovaných lymfokiny IL-2 ex vivo způsobovala ústup rakoviny u vybraných pacientů (Rosenberg, s. A., Immunology Today 9, 58 - 62, 1988). Mezi maligní onemocnění, u kterých lze očekávat, že na ně peptidy obecných vzorců I, II, III a IV budou mít výhodné účinky, patří tumory mesenchymálního původu, jako jsou sarkomy, například fibrosarkom, myxosarkom, liposarkom, chondrosarkom, osteogenní sarkom nebo chordosarkom, sarkomy jako angiosarkom, endotheliosarkom, lymfangiosarkom, synoviosarkom nebo mesotheliosarkom, leukemie a lymfomy jako je granulocytární leukemie, monocytická leukemie, lymfocytická leukemie, maligní lymfom, plasmocytom, retikulosarkom nebo Hodgkinsova nemocy sarkoma jako je leiomysarkom nebo rhabdosarkom, tumory epiteliálního původu (karcinomy), jako je karcinom dlaždicových buněk, bazocelularní karcinom, karcinom potních žláz, karcinom mazových žláz, adenokarcinom, papilární karcinom, papilární adenokarcinom, cystadenokarcinom, medulární karcinom, nediferencovaný karcinom, bronchogenní- karcinom, melanom, karcinom ledvinových buněk, hepatom - karcinom jaterních buněk, karcinom žlučovodu, cholangiokarcinom, papilární karcinom, karcinom přechodných buněk (transitional cell carcinoma), karcinom dlaždicových buněk, choriokarcinom, semonom nebo embryonální karcinom, a tumory centrálního nervového systému jako je gliom, meningom, medulloblastom, schwannom nebo ependymom.

Kromě toho peptidy podle vynálezu vykazují rovněž výhodné vlastnosti pro léčení chronických infekcí jako je opar, aftózní stomatitida a syndrom minimálních změn (minimal change syndrome), kde byla již dříve popsána; .·> klinická zlepšení při ošetření iraunostimulátory jako je Levamisol, jakož i jiných chronických zánětlivých onemocnění ’.y močovém traktu nebo uších, nosu nebo krku, na která příznivě působí ošetření imunostimulátory, jako je Biostim, Broncho-Vaxom a

Ribomunyl, nebo infekce HIV nebo AIDS.

Kromě toho se rovněž předpokládá, že k oslabení, poruše nebo nerovnováze imunitní odpovědi dochází u atopických onemocnění, jako je atopická dermatitida, rhinitida a astma (Katz, D, H., Immunology Rewiews 41, 77 - 108, 1977). Jelikož teoretické úvahy naznačují, že stimulace imunitní odpovědi může být nej lepší cestou vyléčení nerovnováhy a autoimunity (Varela, F. J. a Coutinho, A., Immunology Today 12, 159 až

-----1-6.6-,—1-9-9-1-)-, —1-ž e—rovněž—očeká-va-t-,- — ž e—peptid-y—podl e—vyná le z.u.

budou vykazovat výhodné vlastnosti při léčení astmatu, rhinitidy, atopické dermatitidy a autoimunitních chorob jako je neobézní diabetes, systémového lupus erythematosus, sklerodermie, Sjógrenova syndromu, dermatomyositidy nebo roztroušené sklerosy, revmatické artritidy a případně psoriasy.

Kromě toho mohou peptidy podle vynálezu· díky jejich imunomodulačním vlastnostem, vykazovat výhodné vlastností jako pomocné látky (adjuvanty) v různých formách vakcinových preparátů.· Vzhledem k jejich imunomodulačním vlastnostem lze. rovněž očekávat, že tyto peptidy budou vykazovat výhodné vlastnosti při inhibici odmítnutí orgánů a transplantátů.

Konečně lze očekávat, že peptidy podle vynálezu vykazují výhodné vlastnosti při léčení artheriosklerosy, ať už ovlivňují nebo neovlivňují zdánlivý zánětlivý proces u tohoto onemocnění (Hansson G. K. a kol., Proč. Nat. Acad. Sci. USA 88, 10530, 1991) .

Peptidy podle vynálezu jsou zejména vhodné pro léčení maligních onemocnění jako je melanom, karcinom prsu, gastrointestinální karcinom, gliom, karcinom močového měchýře a karcinom dlaždicových buněk oblasti krku a hlavy, infekcí jako je chronická bronchitida, hepatitida, poinfekční anergie a získané imunitní nedostatečnosti jako je AIDS, poúrazové imunologické anergie, a domnělých autoimunitních onemocnění, jako je revmatická artritida, roztroušená sklerosa, artheriosklerosa a psoriasa.

Příprava

Peptidy podle vynálezu lze připravit pomocí standardních postupů sekvenční kondenzace na pevné fázi za použití automatického syntetizéru peptidů (viz například: Jones, J. , ” The ^Chemical Synthesis oř Peptides,~str7 132 ”áž 156, první vydání, Oxford University Press, 1991; a R. Epton (editor) Innovation and Perspectives in Solid Phase Synthesis, SPCC (UK) Ltd., 1990). Příprava začíná od C-koncové aminokyseliny, kterou lze získat navázanou na methylbenzhydrylaminové, benzhydrylaminové nebo chlormethylované pryskyřici nebo jiném vhodném pevném nosiči. Ostatní aminokyseliny se navazují postupně, .poté co jsou jejich postranní řetězce opatřeny chránícími skupinami. V tomto kondenzačním postupu jsou α-aminoskupiny aminokyselin chráněny buď pomocí skupiny Fmoc (9-fluorenylmethoxykarbonylové skupiny) nebo t-Boc (terč.butoxykarbonylové skupiny). Chránící skupiny pro postranní řetězce aminokyselin jsou v oboru dobře známé. Celý chráněný peptid se uvolní buď z chlormethylované pryskyřice amoniolýzou za získání chráněného amidu, nebo z methylbenzhydrylaminových nebo benzhydrylaminových pryskyřic acidolýzou.

Peptidy podle vynálezu lze rovněž připravit pomocí způsobů syntézy v roztoku, buďto postupnou kondenzací nebo kondenzací fragmentu (viz například Jones, J., The Chemical Synthesis of Peptides, str. 115 - 131, první vydání, Oxford University Press, 1991). Aminokyselina s příslušně chráněnou a-aminoskupinou se podrobí reakci s aminokyselinou s příslušně chráněnou α-karboxylovou skupinou (přičemž takovéto chránění nemusí být nutné v závislosti na vybraném způsobu kondenzace) za použití diimidů, symetrických nebo nesymetrických anhydridů, nebo jiných kondenzačních činidel nebo postupů, které jsou odborníkovi známé. Tyto postupy mohou být buď chemické nebo enzymatické. Chránící skupiny α-aminoskupiny nebo/a._t.. a-karboxy lové skupiny se ods.traní a nakondenzuje se další vhodně chráněná aminokyselina nebo blok aminokyselin pro prodloužení rostoucího peptidu. V každé syntéze lze použít různé kombinace chránících skupin a chemických nebo/a enzymatických postupů a strategií sestavování

Dimery (peptidy obecných vzorců II, III a IV) a peptidy obsahující intramolekulární disulfidové vazby mezi cysteinovými zbytky lze připravit pomocí obecných oxidačních postupů, jak jsou popsány v pracích Andreu a kol. v Methods in Molecular Biology; Peptide Synthesis Protocols, svazek 35 (Humana Press lne..., Totowa, NJ, USA, 1994) a Ruiz-Gayo a kol., 1988, Tetrahedron Letters, 29, 3845 - 3848, jakož i v jiných referenčních pracích známých odborníkovi.

Nízkorozlišovací hmotová spektra a přesná stanovení hmotnosti byla stanovena na přístroji double focusing sector instrument Autospec-Q, Físons Analytical, vybaveném rozhraním LSIMS,

Vynález podrobněji ilustrují následující příklady, které však jeho rozsah v žádném směru neomezují.

Jsou používány následující zkratky:

Pec kyselina pipekolová

Ac acetyl

Fmoc 9-fluorenylmethoxykarbonyl

Bpoc 1-methyl-l-(4-bifenylyl)ethoxykarbonyl

Trt trityl (trifenylmethyl)

Alloc allyloxýkarbonyl

Boc terč.butoxykarbonyl

FAB ionizace rychlými neutrálními částicemi ('fast atom bombardment)

OXA 4-ethoxymethylen-3-fenyloxazolin-5-on

Acm acetamidomethyl

Příklady provedení vynálezu . _: Příklad 1

Syntéza H-Gly-Pro-Cys-Ile-OH {SEQ ID č. 1)

Pro syntézu bylo použito 0,37 g (0,22 miliekvivalentů na gram, 81 gmol) pryskyřice tvořené zesítěným polystyrénovým hlavním řetězcem s naroubovanými polyethylenglykolovými řetězci, funkcionalizované linkerem p-hydroxymethylfenoxyoctovou kyselinou (Sheppard a Williams, 1982, Int. J. Peptide· Protein Res., 20, 451 - 454) a Fmoc-Ile od firmy Rapp

Polymere (SRN). Aminokyseliny chráněné na α atomu dusíku skupinou Fmoc (ISP-Fmoc aminokyseliny) byly získány od firmy Bachem (Švýcarsko), a Cys byl chráněn tritylovou skupinou (Trt). Ν,Ν-dimethylformamid (DMF) byl před použitím předestilován.

Aminokyseliny chráněné na α atomu dusíku skupinou Fmoc (N“-Fmoc aminokyseliny) byly kondenzovány na komplex peptid-pryskyřice ve formě 7-aza-l-benzotriazolylesterů (esterů s HOAt) (Carpino, 1993, J. Am. Chem. Soc. 115, 4397 - 4398). Tyto estery byly připraveny in šitu v syntetizéru peptidů z 0,32 mmol příslušné N“-Fmoc aminokyseliny a 65 mg (0,48 mmol) HOAt přidáním 0,5 ml N, N-dimethylformamidu a 0,8 ml (0,312 mmol) 0,39M roztoku 1,3-diisopropylkarbodiimidu N,N-dimethylformamidu. Po 45 minutách bylo k 7-aza-l-benzotriazolylesteru přidáno 0,4 ml OylSmM roztoku bromfenolové modři (Flegel a Sheppard, 1990, J. Chem. Soc., Chem. Commun. 536 - 538) v N,N-dimethylformamidu a výsledný roztok byl recirkulovan kolonou. Acylace byla monitorována (Flegel a Sheppard, 1990, J. Chem. Soc., Chem. Commun. 536 - 538) pomocí absorbance bromfenolové modři při 600 nm a po úplném proběhnutí kondenzace byl komplex peptid-pryskyříce automaticky promyt N,N-dimethylformamidem. Kondenzační doby pro různé N-Fmoc aminokyseliny byly přibližně 30 minut. Odstranění chránící skupiny . Fmoc- na a. a,tomu .dusíku peptidu na pryskyřici bylo provedeno tak, že se kolonou nechal po dobu 12,5 minuty protékat 20% piperidin v N,N-dimethylformamidu. Tento proces byl monitorován (Dryland a Sheppard, 1986, J. Chem. Soc. Perkin Trans. I, 125 - 137) pomocí absorbance aduktu dibenzofulven-piperidin při 350 nm. Po úplném^- odstranění chránící skupiny Fmoď na~a atomu’ďusíku byl komplex peptid-pryskyřice znovu automaticky promyt N,N-dimethylformamidem.

Po dokončení syntézy a odštěpení N-koncové skupiny N“-Fmoc byla pryskyřice promyta pětkrát vždy 5 ml dichlormethanu a vysušena ve vakuu. Peptid (40 μωοΐ) byl poté odštěpen z 200 mg pryskyřice a z postranních řetězců aminokyselin byly odstraněny chránící skupiny tak,, že se na ně působilo po dobu 2 hodin 20 ml směsi kyseliny trifluoroctové, vody, thioanisolu a ethandithiolu v poměru 87,5 : 5 : 5 : 2,5 apoté se směs zfiltrovala. K filtrátu bylo přidáno 20 ml kyseliny octové, roztok byl zahuštěn, bylo přidáno znovu 20 ml kyseliny octové a roztok znovu zahuštěn. Zbytek byl rozpuštěn ve 25 ml směsi kyseliny octové a vody v poměru 4:1a roztok byl vysušen vymražením. Zbytek byl triturován s 10 ml etheru, čímž bylo po vysušení ve vakuu získáno 21 mg pevného surového peptidu.

Peptid byl analyzován vysoceúčinnou kapalinovou chromatografii systémem Beckman System Gold HPLC za použití kolony Kromasil C-8 (10'⁷ m, rozměr 4,6 x 250 mm) s lineárním gradientem 0 - 80 % B v A během 60 minut a průtokem 1,5 ml za minutu a . detekci při 214 nm (rozpouštědlový systém A: 0,1% vodná kyselina trifluoroctová a rozpouštědlový systém B: 0,1% kyselina trif luoroctová v acetonitrilu)· . Purifikace 21 mg surového peptidu byla provedena stejným systémem vysoceúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na koloně Kromasil C-8 o rozměrech 20 x 250 mm s průtokem ll ml za minutu, Čímž bylo získáno 8,5 mg (55 %) čistého produktu.

Hmotová spektrometrie (FAB): 389 (MH⁺)

Tato sloučenina je rovněž uvedena v tabulce 1.

Příklady 2-33

Peptidy podle příkladů 2 - 33 byly připraveny za použití stejného postupu jako v příkladu 1.

Tyto sloučeniny jsou uvedeny v tabulce 1.

Příklad 34

Syntéza H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 8)

Roztok monomeru v 50nM' fosfátovém pufru, pH = 7,2, o koncentraci 1,5 mg / ml, obsahující 5 ppm síranu měďnatého byl míchán při teplotě místnosti po dobu 20 hodin. Roztok byl lyofilizován a znovu rozpuštěn ve směsi vody a acetonitrilu v poměru 80 : 20 a zbytek vyčištěn vysoceúčinnou kapalinovou chromatografií (HPLC) s obráceným fázemi za použití kolony VYDAC C-18 (5 μτη, rozměry 4 x 250 mm) . Jako mobilní fáze byl použit vodný roztok obsahující 0,1 % kyseliny trifluoroctové a 5 % acetonitrilu. Koncentrace acetonitrilu byla v průběhu 25 minut lineárně zvyšována na 60 %. Průtok činil 1,5 ml za minutu a složky byly detekovány UV-světlem při 220 nm. Frakce byly manuálně odebrány a kontrolovány p.omocí hmotové spektrometrie (FAB). Produkty z opakovaných nástřiků byly smíchány a získaný roztok produktu byl lyofilizován.

Hmotová spektrometrie '(FAB) : 1521 (MH⁺)

Sloučenina je uvedena v tabulce 1.

Příklady 35-37 '

Peptidy podle příkladů 35 . - 37 byly připraveny za použití stejného postupu jako v příkladu 34.

Tyto sloučeniny jsou uvedeny v tabulce 1.

Příklad 38

Peptid podle příkladu 38 byl připraven za použití stejného postupu jako v příkladu l.

Tato sloučenina je uvedena v tabulce 1.

Příklad 39

Peptid podle příkladu 39 byl připraven za použití stejného postupu jako v příkladech 34-37.

Tato sloučenina je uvedena v tabulce 1.

Příklady 40 - 41

Peptidy podle příkladů 40 - 41 byly' připraveny za použití stejného postupu jako v příkladu 1.

Tyto sloučeniny jsou uvedeny v tabulce 1. i

Příklad 42

Syntéza H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH

I I

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH (homodimer SEQ ID č. 30 v orientaci hlava-hlava)

K přípravě paralelního homodimeru (homodimeru v orientaci hlava-hlava) byl za použití stejného postupu jako v příkladu 1 syntetizován jediný peptidový řetězec s acetamidomethylovou (Acm) chránící - skupinou..na^jednom z cysteinů a s druhým cysteinem nechráněným (H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys(Acm)-Pro-OH). Tento monomer byl dimerován pomocí oxidace volných cysteinů za použití stejného postupu jako v příkladu 2. Druhá disulfidová vazba byla vytvořena za použití postupu, který popsal Ruiz-Gayo (Ruiz-Gavo a kol., 1988, Tetrahedron. Letters, 29, 3845 - 3848), při kterém byl odstraněním chránící skupiny ž cysteinu chráněného acetamidomethylovou skupinou a jeho oxidací v jediné reakční nádobě za použití jodu v 80% vodné kyselině octové získán surový produkt, který byl purifikován pomocí vysoceúčinné kapalinové chromatografie (HPLC).

Tato sloučenina je uvedena v tabulce 1.

Příklad 43

Syntéza Η-Phe - Qyg^eu-Gly^££g^y s-Pro-OH

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH (homodimer SEQ ID č. 30 v orientaci hlava-pata)

K přípravě antiparalelního homodimeru (homodimeru v orientaci hlava-pata) byl použit obecný postup, který popsal Ruiz-Gayo (Ruiz-Gayo a kol.,'1988, Tetrahedron Letters, 29, 3845 - 3848). Za použití Stejného postupu jako v příkladu 1 bylý syntetizovány dva peptidové řetězce s acetamidomethylovou (Acm) chránící., skupinou na jednom z cysteinů a s.druhým cysteinem nechráněným (H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys(Acm)-. -iPro-OH a H-Phe-Cys (Acm) -Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH) . Nechráněné cysteiny na jednom z monomeru byly aktivovány dithiopyridinem za vzniku S-pyridylového derivátu H-Phe-Cys(SPyr)-Leu-Gly-Pro-Cys(Acm)-Pro-OH. Tento derivát byl podroben reakci s druhým peptidovým řetězcem za vzniku první disulfidové vazby. Druhá disulfidová vazba byla vytvořena pomocí stejného postupu jako v příkladu 42 za použití jodu v 80% vodné kyselině octové. Po., purifikaci pomocí vysoceúčínné kapalinové chromatografie (HPLC) byl získán výsledný produkt.

Tato sloučenina je uvedena v tabulce 1.

V následující tabulce 1 jsou uvedeny sloučeniny podle yynálezu._a__j_r_ej_i_ch._ide.n.t.i.f.ikace__pomocL·-hmotové—spek-fe-romet-r-i-e (FAB).

Tabulka 1

příklad č.	peptid	ΓΦΓ (m/z)
1	H-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 1)	389
2	Fmoc-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 1)	611
3	H-Gly-Pro-Cys-Gly-OH (SEQ ID č. 2)	333
4	H-Ala-Pro-Cys-Ala-OH (SEQ ID č. 3)	361
5	H-Ile-Pro-Cys-Tyr-OH (SEQ ID č. 4)	495
6	H-Trp-Pro-Cys-Gly-OH (SEQ ID č. 32)	462
7	H-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 5)	537
8	H-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-NH₂ (SEQ ID č. 6)	vypočteno: 615,329 (přesná hmotnost) nalezeno: 615,329
9	H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 8)	vypočteno: 762,422 (přesná hmotnost) nalezeno: 762,419

Pokračování tabulky 1

příklad v c.	peptid	MH (m/z)
10	H-Leu-Leu-D-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 8)	762
11	H-Leu-Leu-Phe-Ala-Pro-Cys-Ile-OH	vypočteno: 776,438

íSEQ._w_č_.^_9)_______;____________(přesná-hmotnost-)——<

		nalezeno: 776,438
12	H-Leu-Leu-Phe - Arg-Pro-Cys-1le-OH (SEQ ID č. 10)	861
13	H-Leu-Leu-Phe-Ile-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 11)	808
14	H-Leu-Leu-Phe-Asp-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 12)	819
15	H-Leu-Leu-Phe-Trp-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č.' 13)	891
16	H-Leu-Leu-Phe-Gly-Ile-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 14)	778
17	H-Leu - Leu - Phe - Gly-Pec - Cys -1 le - OH (SEQ ID č. 15)	vypočteno: 776,438 (přesná hmotnost) nalezeno: 776,439
18	H-Ala-Val-Trp-Thr-Pro-Cys-Tyr-OH (SEQ ID č. 33)	839
19	H-Tyr-Phe-Tyr-Thr-Pec-Cys-Phe-OH (SEQ ID č, 16}	954
20	H-Phe- Val-Met-Ala-Pro-Cys-Phe-OH (SEQ ID č. 17}	814

I

- 23 Pokračování tabulky 1 příklad

č.

peptid

MH* (m/z)

H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH (SEQ ID č. 18)

H-Ile-Ser-Gly-Pro-Cys-Pro-Lys-OH (SEQ ID č. 19)

842 vypočteno: 701,384 (přesná hmotnost)

H-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 20)

H-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-NH₂ (SEQ ID č. 21}

H-Glu-Lys-Gly-Pro-Cys-Tyr-Arg-OH (SEQ ID č. 22)

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-OH (SEQ ID č. 23)

7 H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-NH₂ (SEQ ID č. 24)

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Oallyl (SEQ ID č. 23)

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-NH₂ (SEQ ID č. 25)

H-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-NH₂ (SEQ ID č. 27)

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-Leu-Met-Glu-NH₂ (SEQ ID č. 28) nalezeno: 701,386

796 vypočteno: 761,43.8 (přesná hmotnost) nalezeno: 761,437

852

875

878

915,5

988 vypočteno: 1022,550 (přesná hmotnost) nalezeno: 1022,551

1517

Pokračování tabulky 1

příklad č.	peptid	MH* (m/z)
32	H-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-	1552
33	-Arg-Leu-Met-Glu-NH₂ (SEQ ID č. 29) Fmoc-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-	1776
34	-Leu-Asn-Arg-Leu-Met-Glu-NH_; (ŠĚQ ID č. 29) H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH 1	1521
35	H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-I1e-OH (homodimer SEQ ID č. 8) H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH	1682
36	( H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH (homodimer SEQ ID č. 18) . H-Gly-Pro-Cys-Ile-OH 1	775
37	H-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 1) H-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu- t	3101
38	H-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu- -Asn-Arg-Leu-Met-Glu-NH₂ -Asn-Arg-Leu-Met-Glu-NH₂ (homodimer SEQ ID č. 29) H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH	736
39	(SEQ ID č. 30) 1 1 H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH (SEQ ID č. 31)	734

Pokračování tabulky 1

příklad č.	peptid	ΜΗ* (m/z)
40	H-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-OH (SEQ ID č. 7)	772
41	H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile- -Leu-Asn-Arg-OH (SEO ID č. 26)	1146
42	H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH 1 1 H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH (homodimer SEQ ID č. 30 v orientaci hlava-hlava)	1467,7
4-3	H - Phe - (^^^eu-Gly-gg^Cys - Pro - OH H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH (homodimer SEQ ID č. 30 v orientaci	1468

hlava-pata)

Farmaceutické přípravky

Peptidy podle vynálezu lze podávat orálně, nasálně, rektálně, intravenózně nebo inhalací.

Dávka závisí na způsobu podání, závažnosti onemocnění, věku a hmotnosti pacienta a dalších faktorech, které normálně bere v úvahu ošetřující lékař při stanovení individuálního režimu a dávkování nejvhodnějšího pro konkrétního pacienta.

Farmaceutické přípravky obsahující peptidy podle vynálezu mohou být účelně ve formě tablet, pilulek, kapslí, syrupů, prášků nebo granulí pro orální podání, sterilních parenterá-lních roztoků nebo suspenzí pro parenterální podání nebo čípků pro rektální podání.

Pro přípravu farmaceutických přípravků obsahujících peptid podle vynálezu ve formě dávkovačích jednotek pro orální podání lze účinný peptid smíchat s pomocnou látkou nebo nosičem, například laktosou, sačharosou, sorbitolem, manitolem, škroby j akoj e.. bramborový škrob, kukuřičný škrob nebo amylopektin, deriváty celulosy, pojidlem jako je želatina nebo polyvinylpyrrolidon a lubrikantem jako je stearát hořečnatý, stearát vápenatý, polyethylenglykol, vosky, parafin a podobně, a poté z tohoto materiálu mohou být vylisovány tablety. Pokud jsou požadovány potahované tablety, ___ lze jádra, připravená jak je popsáno výše, potáhnout koncentrovaným cukerným roztokem, který může obsahovat například arabskou gumu, želatinu, mastek oxid¹ titaničitý a podobně. Alternativně lze tabletu potahovat polymerem, který je odborníkovi znám, rozpuštěným ve snadno těkavém organickémrozpouštědle nebo směsi organických rozpouštědel. K těmto povlakům lze přidávat barviva pro snadné rozlišení tablet obsahujících různé účinné látky nebo různá množství účinných peptidů.

Pro přípravu měkkých želatinových kapslí lze účinnou látku smíchat například s rostlinným olejem nebo polyethylenglykolem. Tvrdé želatinové kapsle mohou obsahovat granule účinné látky, pro jejichž přípravu se použijí kterékoli z pomocných látek uvedených výše pro tablety, například laktosa, sacharosa, sorbitol, manitol, škroby (například bramborový škrob, kukuřičný škrob nebo amylopektin), deriváty celulosy nebo želatina. Do tvrdých želatinových kapslí lze rovněž plnit kapalné nebo polotuhé formulace léčiva.

Dávkovacími jednotkami pro rektální aplikaci mohou být roztoky nebo suspenze, nebo je lze připravit ve formě čípků obsahujících účinnou látku ve směsi s neutrální tukovou bází, nebo želatinových rektálních kapsli obsahujícíchK účinnou látku ve směsi s rostlinným olejem nebo parafinovým olejem.

Kapalné přípravky pro orální podání mohou být ve formě syrupů nebo suspenzí, například roztoků obsahujících peptid, ί

- 27 jak je zde popsán, jako účinnou látku, jejichž zbytek tvoří cukr a směs ethanolu, vody, glycerolu a propylenglykolu. Takové kapalné přípravky mohou popřípadě obsahovat bárviva, — činidla upravující chut, sacharin a karboxymethylcelulo.su jako zahuštovadla nebo jiné pomocné látky, které jsou odborníkovi známé.

Roztoky pro parenterální aplikaci injekcí lze připravit jako vodné roztoky ve vodě rozpustné farmaceuticky přijatelné __soli úči nné_1 á.t ky.._Ty.t o-—ro ztoky-—mohou—-rov-něž—obsahovatstabilizační činidla nebo/a pufrovací činidla a je v nich. možné použít povrchově aktivní činidla pro zlepšení rozpustnosti. Lze je účelně dodávat v ampulích obsahujících různé dávkovači jednotky.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být formulovány do tlakových dávkujících inhalátorů nebo .inhalátorů suchých prášků pro orální nebo nasální inhalaci nebo do kapalných formulací pro rozprašování. Účinná látka se mikronizuje nebo jinak zpracuje na velikost částic vhodnou pro inhalační terapii (střední průměr menší nebo 4 gm) .

V případě tlakových dávkujících inhalátorů může být mikronizovaná látka suspendována ve zkapalněném hnacím plynu nebo ve směsi zkapalněných hnacích plynů, které mohou rovněž působit jako rozpouštědla, a naplněna do nádoby vybavené dávkovacím ventilem.

Jako hnací plyny lze použít hydrofluoralkany (HFA) nebojiné látky. Nej častěji používanými HFA jsou tetrafluorethan (propellant 134a) a heptafluorpropan (propellant 227). 'v

Pro- zlepšení fyzikální,.,stability přípravku lze ...použít nízké koncentrace povrchově aktivních látek, jako je sorbitan-trioleát, lečithin,„kyselina olejové a jiné vhodné látky. Pro zvýšení rozpustnosti látek v hnacích plynech lze použít ethanol nebo jiná rozpouštědla.

Účinnou látku lze podávat rovněž pomocí přenosných inhalačních zařízení vhodných pro inhalaci suchého prášku. Účinnou látku lze použít samotnou nebo v kombinaci s vhodnou nosnou látkou jkako je laktosa, manitol..„.nebo glukosa. Do práškové formulace lze z různých důvodů přidávat rovněž jiná aditiva, například pro zvýšení stability. Inhalátorem může být inhalátor jediné dávky s předem stanovenou dávkou nebo vícedávkový inhalátor, ve kterém se dávka určí měřící jednotkou v inhalátoru nebo se podává ze zásobníku předem stanovených dávek.

Biologické studie

Schopnost peptidů podle vynálezu modulovat imunitní odpovědi lze ilustrovat jejich účinkem v testu na hypersenzitivitě zpožděného typu (delayed type hypersensitivity, DTH) na myších.

Byli používáni jak samci tak samice myší Balb/c, získaní od firmy Bomholtsgaard (Dánsko), o hmotnosti 18 až 20 g.

Jako antigen v byl tomto testu používán 4-ethoxymethylen-2-fenyloxazolin-5-on (OXA) (Velká Británie).

Myši byly senzitizovány ve dni 0 epikutánní aplikací 150 μΐ směsi absolutního ethanolu a acetonu v poměru 3 : 1 obsahující 3 % OXA na vyholené břicho. Ošetřování peptidem nebo nosnou látkou (kterou byl 0,9% roztok chloridu sodného) bylo započato orálním podáním okamžitě po senzitizaci a bylo v něm pokračovnáno jednou denně až do dne 6. Sedm dnů (den 6) po senzitizaci bylo na obě uši všech myší na obou stranách místně aplikováno 20 μΐ 1% OXA rozpuštěného v podzemnicovém olej i.^Tlouštka usí byla měřena před aplikací OXA a 24 hodin nebo 48 hodin po ní za použití pružinového kaliperu (Oditest)'. Aplikace OXA a měření byla prováděna v mírné pentobarbitalové anestezii.

Intenzita DTH-reakce byla vyjádřena podle vzorce T_t24/4B - T_t0 μπι jednotek, kde tO, t24 a t48 představují tloušťku ucha v před 'aplikací OXA a 24 hodin respektive 48 hodin po ní, v jednotlivých testech (T) . Výsledky byly vyjádřeny jako průměr +/- standardní odchylka průměru. Hladina významnosti mezi průměry skupin byla zjištěna pomocí Studentova dvoustranného t-testu. Imunomodulační účinek _____.,..ΡθΡ.Ρ.4du__se__. odráží_v ... pods.ta.tném__r.ozdí.lu—ve--_z-vý-šen-í-—neb© snížení tloušťky ucha ve srovnání s kontrolou.

Průmyslová využitelnost

Vynález popisuje peptidy, o kterých lze očekávat, že budou mít příznivé účinky pří léčení různých onemocnění která ovlivňují imunitní systém, včetně onemocnění, u kterých lze předpokládat anergii imunitní odpovědi, aberantní imunitní odpověď nebo periferní toleranci vůči patogenům nebo neúčinnou obranu hostitele z jiných důvodů. Tento typ léčiv je na trhu naléhavě potřeba, aby nahradil nebo doplnil současné toxičtější léčiva, pro léčení mnoha onemocnění.

Zobrazení sekvencí

Informace o sekvenci SEQ ID č. 1:

(i)	charakteristiky sekvence: (A) délka: 4 aminokyseliny (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců: (D) topologie: lineární
(ii)	typ molekuly: peptid
(iii)	hypotetická: neiií
(iv)	anti-sense: není
(ix)	vlastnost: (A) jméno / klíč: peptid (B) lokace : 1..4
(xi)	znázornění sekvence SEQ ID č. Gly Pro Cys Ile 1
Informace o	sekvenci SEQ ID č. 2:
(i)	charakteristiky sekvence: (A) délka: 4 aminokyseliny (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců: (D) topologie: lineární
(ix)	vlastnost: (A) jméno / klíč: peptid (B) lokace: 1..4
(xi)	znázornění sekvence SEQ ID č.

Gly Pro Cys Gly

Informace (i) (ix) (xi)

Informace (i) sekvenci SEQ ID č. 3:

charakteristiky sekvence:

(A) délka: 4 aminokyseliny (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace: 1..4 znázornění sekvence SEQ ID č.

Ala Pro Cys Ala (ix) (xi)

Informace .(i) sekvenci SEQ ID č. 4:

charakteristiky sekvence:

(A) délka: 4 aminokyseliny (B) typ: aminokyselinová (C) počet- řetězců:

(D) topologie: lineární vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace: 1. .4 znázornění sekvence SEQ ID č.

Ile Pro Cys Tyr sekvenci SEQ ID č.'5:

charakteristiky sekvence:

(A) délka: 5 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární (ix) vlastnost:

(A) jméno /klíč: peptid (B) lokace: 1..5 (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 5:

Phe Gly Pro Cys Ile 1 5 (ix) vlastnost:

(A) jméno / (B) lokace:

(ix) vlastnost:

(A) jméno / (B) lokace:

Informace o sekvenci SEQ ID.č. 6:

(i) charakteristiky sekvence:

(A) délka·. 6 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární klíč: peptid

1. .6 klíč: modifikované místo 6 (D) jiná informace: produkt = jiný, poznámka = Asn-NH₂ (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 6 :·

Gly Pro Cys Ile Leu Xaa 1 5

Informace o sekvenci SEQ ID č . 7 : .> (i) charakteristiky sekvence: y (A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární (ix) vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace : 1. . 7 (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 7:

Gly Pro Cys Ile Leu Asn Arg 1 5

Informace o	sekvenci SEQ ID č. 8:
(i)	charakteristiky sekvence: (A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců: (D) topologie: lineární
(ix)	vlastnost: (A) jméno / klíč: peptid (B) lokace: 1;.7
(xi)	znázornění sekvence SEQ ID < Leu Leu Phe Gly Pro Cys Ile 1 5
Informace o	sekvenci SEQ ID č. 9:
(i)	charakteristiky sekvence: (A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců: (D) topologie: lineární
(ix)	vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace: I..7 (xi)

Informace (i) (ix) (xi)

Informace (i) (ix) (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 9:

Leu Leu Phe Ala Pro Cys Ile 1 5 sekvenci SEQ ID č. 10:

charakteristiky sekvence:

(A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace: 1..7 znázornění sekvence SEQ ID č. 10

Leu Leu Phe Arg Pro Cys Ile 1 5 sekvenci SEQ ID č. 11:

charakteristiky sekvence:

(A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace: 1..7 znázornění sekvence SEQ ID č. 11

Leu Leu Phe Ile Pro Cys Ile

Informace (i) (ix) (xi)

Informace' (i) (ix) (xi)

Informace (i) sekvenci SEQ ID č. 12:

charakteristiky sekvence:

(A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid '(B) lokace: 1. . 7 znázornění sekvence SEQ ID č.

Leu Leu Phe Asp Pro Cys Ile 1 5 sekvenci SEQ ID č. 13:

charakteristiky sekvence:

(A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet· řetězců:

(D) topologie: lineární vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace:1..7 znázornění sekvence SEQ ID č.

Leu Leu Phe Trp Pro Cys Ile 1 5 sekvenci SEQ ID č. 14:

charakteristiky sekvence:

(A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární (ix) vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace : 1. . 7 (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 14:

Leu Leu Phe Gly Ile Cys Ile 1 5

Informace o sekvenci SEQ ID č. 15:

(i) charakteristiky sekvence:

(A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární (ix) vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace : 1. . 7 (ix) vlastnost:

(A) jméno / klíč: modifikované místo (B) lokace: 5 (D) jiná informace: produkt = jiný, poznámka = kyselina pipekolová (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 15:

Leu Leu Phe Gly Xaa Cys Ile 1 5

Informace o sekvenci SEQ ID č. 16:

(i) charakteristiky sekvence:

(A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(ix) (ix) (xi)

Informace (i) (ix) (xi)

Informace o (i) (D) topologie: lineární vlastnost;

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace: 1..7 vlastnost:

(A) jméno / klíč: modifikované místo (B) lokace: 5 (D) jiná informace: produkt = jiný”, poznámka = kyselina pipekolová znázornění sekvence SEQ ID č. 16:

Tyr Phe Tyr Thr Xaa Cys Phe

5 sekvenci SEQ ID č. 17:

charakteristiky sekvence:

(A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace: l. . 7 znázornění sekvence SEQ ID č. 17:

Phe Val Met Ala Pro Cys Phe

5 sekvenci SEQ ID č. 18:

charakteristiky sekvence:

(A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(ix) (xi)

Informace (i) (ix) (xi)

Informace o (i) (D) topologie: lineární vlastnost:

(A) jméno / klič: peptid (B) lokace: 1. . 7 znázornění sekvence SEQ ID č

Leu Leu Tyr Ser Pro Cys Phe 1 5 sekvenci SEQ ID č. 19:

charakteristiky sekvence:

(A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace :1..7 znázornění sekvence SEQ ID č

Ile Ser Gly Pro Cys Pro Lys 1 5 sekvenci SEQ ID č. 20:

charakteristiky sekvence:

(A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární vlastnost: c (A) jméno / klíč: peptid (B) lokace: 1..7 (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 20:

Phe Leu Phe Gly Pro Cys Ile 1 5

Informace o sekvenci SEQ ID č. 21:

(i) charakteristiky sekvence:

(A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová , {qj p_Oč_et řetězců:

(D) topologie: lineární (ix) vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B} lokace: 1..7 (ix) vlastnost:

(A) jméno / klíč: modifikované místo (B) lokace7 (D) jiná informace: produkt = jiný, poznámka = Leu-NH₂ (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 21:·

Leu Phe Gly Pro Cys Ile Xaa 1 5

Informace o sekvenci SEQ ID č. 22:

(i) charakteristiky sekvence:

(A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární (ix) vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace: 1..7 (ix) (xi) (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 22:

Gly Lys Gly Pro Cys Tyr Arg 1 5

Informace o sekvenci SEQ ID č. 23:

(i) charakteristiky sekvence:

(A) délka: 8 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace :1..8 znázornění sekvence SEQ ID č. 23:

Leu Leu Phe Gly Pro Cys Ile Leu 1 5

Informace o sekvenci SEQ ID Č. 24:

(i) charakteristiky sekvence:

(A) délka: 8 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární (ix) vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace: 1,.8 (ix) vlastnost:

(A) jméno i klíč: modifikované místo(B) lokace: 8 (D) jiná informace: produkt = jiný, poznámka = Leu-NH₂ (xi)

Informace (i) (ix) (ix) (xi)

Informace (i) znázornění sekvence SEQ ID č. 24:

Leu Leu Phe Gly Pro Cys Ile Xaa 1 5 sekvencí SEQ ID č. 25:

charakteristiky sekvence:

(A) délka: 9 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová ^VCj počet řetězců:

(D) topologie: lineární vlastnost:

(A) jméno / klíč·.· peptid (B) lokace : 1. . 9 vlastnost (A) jméno / klíč:modifikované místo (B) lokace: 9 (D) jiná informace: produkt = jiný, poznámka = Asn-NH₂ znázornění sekvence SEQ ID č. 25:

Leu Leu Phe Gly Pro Cys Ile Leu Xaa 1 5 sekvenci SEQ ID č. 26:

charakteristiky sekvence·.

(A) délka: 10· aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:.

(D) topologie: lineární vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid .

(B) lokace: 1..10 (ix) (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 26:

Leu Leu Phe Gly Pro Cys Ile Leu Asn Arg 15 10

Informace o sekvenci SEQ ID č. 27:

(i) charakteristiky sekvence:

(A) délka: 9 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová ÍC) počet řetězců:

(D) topologie: lineární (ix) vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace: 1..9 (ix) vlastnost:

(A) jméno / klíč: modifikované místo (B) lokace: 9 (D) jiná informace: produkt = jiný, poznámka = Asn-NH₂ (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 27:

Phe Leu Phe Gly Pro Cys Ile Leu Xaa 1 5

Informace o sekvenci SEQ ID č. 28:

(i) charakteristiky sekvence:

(A) délka: 13 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární (ix) vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace: 1..13 i;

(ix) vlastnost:

(A) jméno / klíč: modifikované místo (B) lokace: 13 (D) jiná informace: produkt = jiný, poznámka = Glu-NH₂ (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 28:

Leu Leu Phe Gly Pro Cys Ile Leu Asn Arg. Leu Met Xaa 1 5 10

Informace o sekvenci SEQ ID č. 29:

(i) charakteristiky sekvence:

(A) délka: 13 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární (ix) vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace: 1..13 (ix) vlastnost:

(A) jméno / klíč: modifikované místo (B) lokace: 13 (D) jiná informace: produkt = jiný, poznámka = Glu-NH₂ (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 29:

Phe Leu Phe Gly Pro Cys Ile Leu Asn Arg Leu Met Xaa 15 10

Informace o sekvenci SEQ ID č, 30:

(i) charakteristiky sekvence:

(A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (ix) (xi)

Informace (i) (ix) (ix) ? (xi) v' i

Informace o (i) (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace: 1..7 znázornění sekvence SEQ ID č. 30:

Phe Cys Leu Gly Pro Cys Pro sekvenci SEQ ID č. 31:

charakteristiky sekvence:

(A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: cirkulární vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace: 1. . 7 vlastnost:

(A) jméno / klíč: disulfidová vazba (B) lokace: 2..6 znázornění sekvence SEQ ID č. 31:

Phe Cys Leu Gly Pro Cys Pro

5 sekvenci SEQ ID č. 32:

charakteristiky sekvence:

(A) délka: 4 aminokyseliny (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců: .

(D) topologie: lineární (ii) typ molekuly: peptid (ix) vlastnost:

(A) jméno / klíč: peptid (B) lokace :1..4 (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 32:

Trp Pro Cys Gly

Informace o	sekvenci SEQ ID č. 33:
(i)	charakteristiky sekvence: (A) délka: 7 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců: (D) topologie: lineární
(ii)	typ molekuly: peptid
(ix)	vlastnost: (A) jméno / klíč: peptid (B) lokace :1..7
(xi)	znázornění sekvence SEQ ID č Ala Val Trp Thr Pro Cys Tyr 1 5
Informace o	sekvenci SEQ ID č. 34:
(i)	charakteristiky sekvence·. (A) délka: 8 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců: (D) topologie: cirkulární
(ii)	typ molekuly: peptid

(xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 34:

Leu Glu Cys Gly Pro Cys Phe Leu 1 5

Informace o sekvenci SEQ ID č. 35:

(i) charakteristiky sekvence·.

(A) délka: 8 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová

TC) početT?etězců: ” ” (D) topologie: cirkulární (ii) typ molekuly: peptid (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 35:

Leu Cys Ala Gly Pro Cys Phe Leu 1 5

Informace o sekvenci SEQ ID č. 36:

(i) charakteristiky sekvence:

(A) délka: 14 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie:, lineární

(ii)	typ molekuly: peptid
(xi)	znázornění sekvence SEQ ID č.	36:
Tyr	Ile Pro Cys Phe Pro Ser Ser Leu	Lys Arg Leu Leu Ile
1	5	10

Informace o sekvenci SEQ ID č. 37:

(i) charakteristiky sekvence:

(A) délka: 13 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární (ii) typ molekuly: peptid (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 37:

Tyr Ile Pro Cys Phe Pro Ser Ser Leu Lys Arg Leu Ile 1 5 10

I nformac e o sekvenc i._S EQ„I D_ „č_._ 3,8.:___„_________________ (i) charakteristiky sekvence:

(A) délka: 11 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární (ii) typ molekuly: peptid (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 38:

Ser Gly Pro Cys Pro Lys Asp Gly Gin Pro Ser i 5. 10

Informace o sekvenci SEQ ID č. 39:

(i) charakteristiky sekvence:

(A) délka:, 8 aminokyselin (B) typ: aminokyselinová (C) počet řetězců:

(D) topologie: lineární.

(ii) typ molekuly: peptid (xi) znázornění sekvence SEQ ID č. 39: ν'Thr Pro Pro Thr Pro Cys Pro Ser ri/ w 7-//-

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Homodimer peptidů obsahujícího 4-15 aminokyselin, obecného vzorce XI, III nebo IV

A-X-Y-Cys-Z-B (II)

A-X-Y-Cys-Z-B

A-X-Y-Cys-Z-B (III)

A-X-Y-Cys-Z-B

ΑζΧ-Y^Cys-Z-B (IV).

A-X-Y^tys-Z-B ve kterých

X je vybrán ze souboru zahrnujícího Gly, Ala, Ile, Asp, Thr, Ser, Arg a Trp,

Y je vybrán ze souboru zahrnujícího Pro, Pec a Ile, f

Z je vybrán ze souboru zahrnujícího Ile, Phe, Pro, Ala,

Tyr a Gly,

A představuje atom vodíku, chránící skupinu, aminokyselinu bud' v L- nebo D-formě popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci nebo/a N-koncovou chránící skupinou, nebo aminokyselinovou sekvenci popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích nebo/a N-koncovou chránící skupinou, a

B_;, znamená hydroxylovou skupinu, aminoskupinu, chránící^, skupinu, aminokyselinu buď v L- nebo D-formě popřípadě.

) s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci,ti . která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou, nebo -^;·I CT ΤΡΟ/Τ'Τ'ΤΤΓΤί? QURRT aminokyselinovou sekvenci popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou, přičemž délka zbytků A a B se může pohybovat v rozmezí, ve kterém jsou splněna kritéria pokud jde o délku a možné aminokyseliny, jakož i farmaceuticky přijatelné soli homodimerů obecných vzorců ΪΙ, ΪΙΪ a IV, pro použití k léčení.

2#, ve kterém

A představuje atom vodíku, chránící skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9+fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l-(4-bifenylyl)ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terč.butoxykarbonylovou skupinu, aminokyselinu bud' v L- nebo D-formě vybranou ze souboru zahrnujícího Phe, Leu, Mety* Ser, Lys a Tyr, popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci nebo/a N-koncovou chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l-(4-bifenylyl)ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terč.butoxykarbonylovou

I SUBSTITUTE SHEET

66 - 70 skupinu, nebo aminokyselinovou sekvenci, která začíná na své C-koncové straně Phe, Leu, Met, Ser, Lys nebo Tyr, popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích nebo/a N-koncovou chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-1-(4-bifenylyl)ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terc.butoxykarbonylovou skupinu, a znamená hydroxylovou skupinu, aminoskupinu, chránící skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terc.butylovou skupinu, aminokyselinu buď v L- nebo D-formě vybranou ze souboru zahrnujícího Leu, Lys a Arg, popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terč,butylovou skupinu, nebo aminokyselinovou sekvenci začínající na své N-koncové straně Leu, Lys nebo Arg, popřípadě s“ chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terč.butylovou skupinu, pro výrobu léčiva pro orální podání.

tyfy/' íj· yí. Homodimer peptidu obsahujícího 4 obecného vzorce II, III nebo IV

15 aminokyselin,

A-X-Y-Cys-Z-B (II)

I

A-X-Y-Cys-Z-B

I

A-X-Y-Cys-Z-B (III) ve kterých

A-X-Y-Cys-Z-B

A-X-Y-Cys-Z-B (IV)

X je vybrán ze souboru zahrnujícího Gly, Ala, Ile, Asp, Thr, Ser, Arg a Trp,

Y je vybrán ze souboru zahrnujícího Pro, Pec a Ile,

Z je vybrán ze souboru zahrnujícího Ile, Phe, Pro, Ala, Tyr a Gly,

A představuje atom vodíku, chránící skupinu, aminokyselinu buď v L- nebo D-formě popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci nebo/a N-koncovou chránící skupinou, nebo aminokyselinovou sekvenci popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích nebo/a N-koncovou chránící skupinou, a

B znamená hydroxylovou skupinu, aminoskupinu, chránící skupinu, aminokyselinu buď v L- nebo D-formě popřípadě s chráněnou funkční-> skupinou v postranním,:.· řetězci, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou, nebo aminokyselinovou sekvenci popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích, která

Ct ΤΤΊ o nnTrr^T τγττι-ι končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou, přičemž délka zbytků A a B se může pohybovat v rozmezí, ve kterém jsou splněna kritéria pokud jde^: o délku a možné aminokyseliny, jakož i farmaceuticky přijatelné soli homodimerů obecných vzorců II, III a IV, s výjimkou homodimerů

H-Gly-Ile-Cys-Pro-Leu-Cys(Acm)-Met(X)-OH

H-Gly-Ile-Cys-Pro-Leu-Cys(Acm)-Met(X)-OH,

H-Gly-Ile-Cys-Pro-Leu-Cys-Met(X)-OH

H-Gly-Ile-Cys-Pro-Leu-Cys-Met(X)-OH, a

H-Gly-Ile-Cys-Pro-Leuj£ys-Met(X)-OH

H-Gly-Ile-Cys-Pro-LeuTčys-Met(X)-OH, kde Acm představuje acetamidomethylovou skupinu a (X) znamená atom kyslíku nebo je tento substituent nepřítomný.

lé 3-C yX. Homodimer podle nároku yt, ve kterém

X je Gly, Y je Pro a Z je Ile, X je Gly, Y je Pro a Z je Gly, X je Ala, Y je Pro a Z je Ala, X je He, Y je Pro a Z je Tyr, X je Ala, Y je Pro a Z je Ile, X je Arg, Y je Pro a Z je Ile, X je Ile, Y je Pro a z je Ile, X je Asp, Y je Pro a z je Ile, X je Trp, Y je Pro. a z je Ile, X je Trp, Y je Pro a z je Gly,

STIRSTTTTTTR SHEET

X je- Gly, Y je Ile a Z je Ile, X ΐθ Gly, Y je Pec a Z je Ile, X je Thr, Y je Pro a Z je Tyr, X í^e Thr, Y je Pec a Z je Phe, X je Ala, Y je Pro a Z je Phe, X je Ser, Y je Pro a Z je Phe, X je Gly, Y je Pro a Z je Pro, nebo X je Gly, Y je Pro a Z je Tyr, X Homodimer podle nároku y, X je Gly, Y je Pro a Z je Ile, X je Ala, Y je Pro a Z je Ile, X je Arg, Y je Pro a Z je Ile, X je Asp, Y je Pro a Z je Ile, X je Trp, Y je Pro a Z je Ile, X je Ser, Y je Pro a Z je Phe, nebo X je Gly, Y je Pro a Z je Pro.

X λτ « i/

y. Homodimer podle libovolného z nároků y, y a y, ve kterém ' '

A představuje atom vodíku, chránící skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l-(4-bifénylyl)ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terč.butoxykarbonylovou skupinu, aminokyselinu buď v L- nebo D-formě vybranou ze souboru zahrnujícího Phe, Leu, Met, Ser, Lys a Tyr, popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci nebo/a N-koncovou chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, -9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l-(4-bifenylyl)ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terč.butoxykarbonylovou skupinu, nebo aminokyselinovou sekvenci, která začíná

CT TDCTumT imi? ωττγ na své C-koncové straně Phe, Leu, Met, Ser, Lys nebo Tyr, popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích nebo/a N-koncovou chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího acety-lovou skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l-(4-bifenylyl)ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terc.butoxykarbonylovou skupinu, a znamená hydroxylovou skupinu, aminoskupinu, chránící skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terč.butylovou skupinu, aminokyselinu bud' v L- nebo D-formě vybranou ze souboru zahrnujícího Leu, Lys a Arg, popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s l až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terč.butylovou skupinu, nebo aminokyselinovou . sekvenci začínající na své N-koncové straně Leu, Lys nebo Arg, popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terč.butylovou skupinu.

Homodimer podle nároku kterým je H-Gly-Pro-Cys-Ile-OH

H-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ.ID č. 1) ,

SUBSTITUTE SHF.F.tI

Fmoc-Gly-Pro-Cys-Ile-OH

I

Fmoc-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 1),

H-Gly-Pro-Cys-Gly-OH

H-Gly-Pro-Cys-Gly-OH (homodimer SEQ ID č. 2),

H-Ala-Pro-Cys-Ala-OH

H-Ala-Pro-Cys-Ala-OH (homodimer SEQ ID č. 3),

H-Ile-Pro-Cys-Tyr-OH

H-Ile-Pro-Cys-Tyr-OH (homodimer SEQ ID č. 4),

H-Trp-Pro-Cys-Gly-OH

H-Trp-Pro-Cys-Gly-OH (homodimer SEQ ID č. 32),

H-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH

I

H-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 5),

H-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-NH₂

H-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-NH₂ (homodimer SEQ ID č. 6),

H-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-OH

I

H-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-OH (homodimer SEQ ID č. 7),

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 8), H-Leu-Leu-D-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH

H-Leu-Leu-D-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 8),

H-Leu-Leu-Phe-Ala-Pro-Cys-Ile-OH

I

H-Leu-Leu-Phe-Ala-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 9),

H-Leu-Leu-Phe-Arg-Pro-Cys-Ile-OH

I

H-Leu-Leu-Phe-Arg-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 10),

SUBSTTTTJTF SWF.F.T

H-Leu-Leu-Phe-Ile-Pro-Cys-Ile-OH

I

H-Leu-Leu-Phe-Ile-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 11), H-Leu-Leu-Phe-Asp-Pro-Cys-Ile-OH

H-Leu-Leu-Phe-Asp-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 12),

H-Leu-Leu-Phe-Trp-Pro-Cys-Ile-OH

I

H-Leu-Leu-Phe-Trp-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 13),

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Ile-Cys-Ile-OH

I

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Ile-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 14),

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pec-Cys-Ile-OH

I

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pec-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 15), H-Ala-Val-Trp-Thr-Pro-Cys-Tyr-OH

H-Ala-Val-Trp-Thr-Pro-Cys-Tyr-OH (homodimer SEQ ID č. 33), H-Tyr-Phe-Tyr-Thr-Pec-Cys-Phe-OH

H-Tyr-Phe-.Tyr-Thr-Pec-Cys-Phe-OH (homodimer SEQ ID č. 16),

H-Phe-Val-Met-Ala-Pro-Cys-Phe-OH

I

H-Phe-Val-Met-Ala-Pro-Cys-Phe-OH (homodimer SEQ ID č. 17),

H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH

I

H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH (homodimer SEQ ID č. 18),

H-Ile-Ser-Gly-Pro-Cys-Pro-Lys-OH

H-Ile-Ser-Gly-Pro-Cys-Pro-Lys-OH (homodimer SEQ ID č. 19),

H-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH

H-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 20).:,

H-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-NH₂

H-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-NH₂ (homodimer SEQ ID č. 21),

I SUBSTITUTE SHEETI

- 78 Fmoc-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-Leu-Met-Glu-NHj

Fmoc-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-Leu-Met-Glu-NH₂(homodimer SEQ ID č. 29) nebo

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH (homodimer SEQ ID č. 30).

Η x

Homodimer podle nároku kterým je

H-Gly-Pro-Cys-Ile-OH

H-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 1),

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 8),

H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH

I

H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH (homodimer SEQ ID č. 18),

H-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-Leu-Met-Glu-NH₂

H-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-Leu-Met-Glu-NH₂(homodimer SEQ ID č. 28),

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH

I I

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH (homodimer SEQ ID č. 30 v orientaci hlava-hlava) nebo

H- Phe - Qyg^eu^-Gly-^£2^Qys - Pro - OH

Ψ íf

7n. Homodimer podle nároku kterým je

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH

H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (homodimer SEQ ID č. 8),

SUBSTITUTE SHEET

H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH

H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH (homodimer SEQ ID č

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH

I I

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pró-Cys-Pro-OH {homodimer SEQ ID orientaci hlava-hlava) nebo

H - Phe - Cyg^eu - Gly-^£2^Qy s - P r o - OH

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH (homodimer SEQ ID orientaci hlava-pata).

Peptid obsahující 4 až 15 aminokyselin, vzorce I

A-X-Y-Cys-Z-B ve kterém . 18) ,

č. 30 v

č. 30 v obecného (I)

x je Gly, Y je Pro a Z je Ile, X je Gly, Y je Pro a Z je Gly, X je Ala, Y je Pro a Z je Ala, X je Ile, Y je Pro a Z je Tyr, X je Ala, Y je Pro a Z je Ile, X je Arg, Y je Pro a Z je ne, X je Ile, Y je Pro a Z je Ile, X je Asp, Y je Pro a Z je Ile, X je Trp, Y je Pro a Z je Ile, X je Trp, Y je Pro a Z je Gly, X je Gly, Y je Ile a Z je· Ile, X je Gly, Y je Pec a Z je Ile, X je Thr, Y je Pro a Z je Tyr, X je Thr, Y je Pec a Z je Phe, X je Ala, Y je Pro a Z je Phe, X je Ser, Y je Pro a Z je Phe, X je Gly, Y je Pro a Z je Pro, X je Gly, Y je Pro a Z je Tyr,

SUBSTITUTE SHEET

A představuje atom vodíku, chránící skupinu, aminokyselinu bud' v L- nebo D-formě popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci nebo/a N-koncovou .chránící skupinou, nebo aminokyselinovou sekvenci popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích nebo/a N-koncovou chránící g skupinou, a

B znamená hydroxylovou skupinu, aminoskupinu, chránící $

skupinu, aminokyselinu buď v L- nebo D-formě popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou, nebo aminokyselinovou sekvenci popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou, s tím, že z rozsahu obecného vzorce I jsou· vyloučeny sekvence Asp-Pro-Cys-Ile-Ile,

Ί

Cys-Gly-Gly-Ile-Cys-Ile-Ala-Arg, Ser-Gly-Pro-Cys-Pro-Lys-Asp-Gly-Gln-Pro-Ser a

I-1

Gly-Pro-Cys-Tyr-Phe-Gin-Asn-Cys-Pro-Lys-Gly-NHj, přičemž délka zbytků A a B se může pohybovat v rozmezí, ve kterém jsou splněna kritéria pokud jde o délku a možné aminokyseliny, jakož i jeho farmaceuticky přijatelné soli.

W

Peptid podle nároku ve kterém

X je Gly, Y je Pro a Z je Ile,

X je Ala, Y je Pro a Z je Ile,

X je Arg, Y je Pro a Z je Ile,

I SUBSTITUTE SHEET

X je' Asp, Y je Pro a Z je Ile, X je Trp, Y je Pro a z je Ile, X je Ser, Y je Pro a z je Phe, nebo X je Gly, Y je Pro a z je Pro.

3V &

ýs. Peptid podle libovolného z nároků a ve kterém

A představuje atom vodíku, chránící skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l-(4-bifenylyl)ethoxykarbonylovou Skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terč.butoxykarbonylovou skupinu, aminokyselinu bud' v L- nebo D-formě vybranou ze souboru zahrnujícího Phe, Leu, Met, Ser, Lys a Tyr, popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci nebo/a N-koncovou chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l-(4-bifenylyl)ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terč.butoxykarbonylovou skupinu, nebo aminokyselinovou sekvenci, která začíná na své C-koncové straně Phe, Leu, Met, Ser, Lys nebo Tyr, popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích nebo/a N-koncovou chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l- (4-bifenylyl) ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terč.butoxykarbonylovou skupinu, a

B znamená hydroxylovou skupinu, aminoskupinu, chránící skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terc.butylovou skupinu, aminokyselinu buď v L- nebo D-formě

SUBSTITUTE SHEET vybranou ze souboru zahrnujícího Leu, Lys a Arg, popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou, vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terč.butylovou skupinu, nebo aminokyselinovou sekvenci začínající na své N-koncové straně Leu, Lys nebo Arg, popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terč.butylovou skupinu.

.

fKÍ. Peptid podle nároku kterým je

H-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č, 1),

Fmoc-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 1),

H-Gly-Pro-Cys-Gly-OH (SEQ IDč. 2),

H-Ala-Pro-Cys-Ala-OH (SEQ ID č. 3),

H-Ile-Pro-Cys-Tyr-OH (SEQ ID č. 4),

H-Trp-Pro-Cys-Gly-OH (SEQ ID č. 32),

H-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 5),

H-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-NH₂ (SEQ ID č. 6), H-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-OH (SEQ ID č. 7), H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID Č. 8), H-Leu-Leu-D-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 8),

H-Leu-Leu-Phe-Ala-Pro-Cys-Ile-OH H-Leu-Leu-Phe-Arg-Pro-C-ys-Ile-OH H-Leu-Leu-Phe-lle-Pro-Cys-Ile-OH H-Leu-Leu-Phe-Asp-Pro-Cys-Ile-OH H-Leu-Leu-Phe-Trp-Pro-Cys-Ile-OH H-Leu-Leu-Phe-Gly-Ile-Cys-Ile-OH H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pec-Cys-Ile-OH

(SEQ ID v c. 9) , (SEQ ID c. 10) (SEQ ID v c. 11) (SEQ ID w c. 12) (SEQ ID v c. 13) (SEQ ID v c. 14) (SEQ ID v c. 15)

SUBSTITUTE SHEET

H-Ala-Val-Trp-Thr-Pro-Cys-Tyr-OH (SEQ ID č. 33),

H-Tyr-Phe-Tyr-Thr-Pec-Cys-Phe-OH (SEQ ID č. 15),

H-Phe-Val-Met-Ala-Pro-Cys-Phe-OH (SEQ ID č: 17),

H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH .(SEQ ID č. 18),

H-Ile-Ser-Gly-Pro-Cys-Pro-Lys-OH (SEQ ID č. 19),

H-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 20),

H-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-NH₂ (SEQ ID č. 21), H-Glu-Lys-Gly-Pro-Cys-Tyr-Arg-OH (SEQ ID č. 22), H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-OH (SEQ ID č. 23), H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-NH₂ (SEQ ID č. 24), H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Oallyl (SEQ ID č. 23), H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-NH₂ (SEQ ID č. 25), H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-OH (SEQ ID č. 26), H-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-NH₂ (SEQ ID č. 27), H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-Leu-Met-Glu-NH₂ (SEQ ID č. 28) ,

H-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-Leu-Met-Glu-NH₂ (SEQ ID č. 29),

Fmoc-Phe-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-Asn-Arg-Leu-Met-Glu-NH₂. (SEQ- ID č. 29) nebo

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH (SEQ ID č. 30).

Ή

Peptid podle nároku 3íf, kterým je

H-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 1),

H-Ala-Pro-Cys-Ala-OH (SEQ ID č. 3),

H-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. 5) H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-OH (SEQ ID č. H-Leu-Leu-Phe-Ala-Pro-Cys-Ile-OH {SEQ ID č H-Leu-Leu-Phe-Asp-Pro-Cys-IÍe-OH (SEQ ID č. H-Leu-Leu-Phe-Gly-Ile-Cys-Ile-OH (SEQ ID č, H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pec-Cys-Ile-OH (SEQ ID č, H-Leu-Leu-Tyr-Ser-Pro-Cys-Phe-OH (SEQ ID č, H-Leu-Leu-Phe-Gly-Pro-Cys-Ile-Leu-OH (SEQ ID č. 23), H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH (SEQ ID č. 30) nebo

č. 5) / (SEQ ID ν' c. 8) , (SEQ ID v c. 9) , (SEQ ID v c. 12) (SEQ ID v c. 14) (SEQ ID č. 15) (SEQ ID č. 18)

Ϊ Γ,ττ-nprrTrrTTTD QLíRRT vyznačuj i c i 'ϊ <

r>

H-Phe-Cys-Leu-Gly-Pro-Cys-Pro-OH (SEQ ID č. 31’

4/6. Farmaceutický přípravek, s e t^í. m , že obsahuje jako účinnou látku homodimer podle nároku spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem.

. ir ýA.. Způsob přípravy homodimeru podle nároku βτΐ, vyznačující se tím , že se aminokyseliny postupně spojují na pevné fázi za použití automatického syntetizéru nebo se aminokyseliny postupně spojují v roztoku za použití příslušně derivatizovaných aminokyselin.

ýsS. Farmaceutický přípravek, vyznačuj ící s e t í m , že obsahuje jako účinnou látku peptid podle nároku spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem.

Ve

2. Homodimer podle nároku 1, ve kterém

X je Gly, Y je Pro a Z je Ile, X je Gly, Y je Pro a Z je Gly, X je Ala, Y je Pro a Z je Ala, X je Ile, Y je Pro a Z je Tyr, X je Ala, Y je Pro a Z je Ile, X je Arg, Y je Pro a Z je Ile, X je Ile, Y je Pro a Z je Ile, X je Asp, Y je Pro a Z je Ile, X je Trp, Y je Pro a Z je Ile, X je Trp, Y je Pro a Z je Gly, X je Gly, Y je Ile a Z je Ile, X je Gly, Y je Pec a Z je Ile, X je Thr, Y je Pro a Z j e Tyr, X je Thr, Y je Pec a Z je Phe, X je Ala, Y je Pro a Z je Phe, X je Ser, Y je Pro a Z je Phe, X je Gly, Y je Pro a Z je Pro, nebo X je Gly, γ je Pro a Z je Tyr,

pro použití k léčení.

qttpsttttttf, SHEET

3 a 4 pro výrobu léčiva pro orální podání.

8. Peptid obsahující 4 až 15 aminokyselin, obecného vzorce I

A-X-Y-Cys-Z-B (I) ve kterém

X je Gly, Y je- Pro a Z je Ile, X je Gly, Y je Pro a z je Gly, X je Ala, Y je Pro a z je Ala, x- -j-e Tle‘7 -_Y- je“ Pro'· ' a 'z “je Tyr, X je Ala, Y je Pro a z je Ile, X je Arg, Y je Pro a z je Ile, X je Ile, Y je Pro a z je Ile, X je Asp, Y je Pro a z je Ile, X je Trp, Y je Pro a z je Ile, X je Trp, Y je Pro a z je Gly, X je Gly, Y je Ile a z je Ile, X je Gly, Y je Pec a z je Ile, X je Thr, Y je Pro a z je Tyr, X je Thr, Y je Pec a z je Phe,

X je Ala, Y je Pro a Z je Phe, X je Ser, Y je Pro a z je Phe, X je Gly, Y je Pro a z je Pro, nebo X je Gly, Y je Pro a z je Tyr,

ζ A představuje atom vodíku, chránící skupinu, aminokyselinu buď v L- nebo D-formě popřípadě s chráněnou e funkční skupinou v postranním řetězci nebo/a N-koncovou chránící skupinou, nebo aminokyselinovou sekvenci popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích nebo/a N-koncovou chránící.

skupinou, a

B znamená hydroxylovou skupinu, aminoskupinu, chránící skupinu, aminokyselinu buď v L- nebo D-formě popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou,., nebo aminokyselinovou sekvenci popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích, která končí C-koncovou amidovou skupinou,' volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou, přičemž....délka., zbytků...A._Ta...B „se. může pohybovat, .v..rozmezí,.-ve-----kterém jsou splněna kritéria pokud jde o délku a možné aminokyseliny, a přičemž peptidy obecného vzorce I obsahující několik cysteinových zbytků se mohou vyskytovat jak v oxidované tak v redukované formě, kde oxidovaná forma může obsahovat intramolekulární disulfidové vazby dávající vznik oxidovaným monomerům, jakož i jeho farmaceuticky přijatelné soli, s tím, že z rozsahu obecného vzorce I jsou vyloučeny sekvence.

Asp-Pro-Cys-Ile-Ile,

Cys-Gly-Gly-Ile-Cys-Ile-Ala-Arg, a i-1

Gly-Pro-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Cys-Pro-Lys-Gly-NH₂, pro použití k léčení.

ýv. Peptid podle nároku /9, ve kterém obecného vzorce I vyloučena sekvence je z rozsahu

Ser-Gly-Pro-Cys-Pro-Lys-Asp-Gly-Gln-Pro-Ser, pro použití k léčení.

ř-i -v tt-í τγπΤΊ

Γ'ΤΤΤΓ'Τ?^

X je Gly, Y je Pro a Z je Ile, X je Ala, Y je Pro a Z je Ile, X je Arg, Y je Pro a Z je Ile, X je Asp, Y je Pro a Z je He, X je Trp, Y je Pro a Z je Ile, X je Ser, Y je Pro a Z je Phe, nebo X je Gly, Y je Pro a Z je Pro,

pro použití k léčení.

................/<................... .......:.........-................. .fy t......*......yi. Peptid. podle libovolného z nároků p, y a y., ve kterém

A představuje atom vodíku, chránící skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l-(4-bifenylyl)ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu á' terč.butoxykarbonylovou skupinu, aminokyselinu buď v L- nebo D-formě vybranou ze souboru zahrnujícího Phe, Leu, Met, Ser, Lys a Tyr, popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci nebo/a N-koncovou chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l-(4-bifenylyl)ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terč.butoxykarbonylovou skupinu, nebo aminokyselinovou sekvenci, která začíná na své C-koncové straně Phe, Leu, Met, Ser, Lys nebo Tyr, popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích nebo/a N-koncovou chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou ⁷ skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-tnetT; hyl-l-(4-bifenylyl)ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terč.butoxykarbonylovou skupinu, a

B znamená hydroxylovou skupinu, aminoskupinu, chránící

SUBSTITUTE SHEET skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terc.butylovou skupinu,- aminokyselinu bud' v L- nebo D-formě vybranou ze souboru zahrnujícího Leu, Lys a Arg, popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 áž” 6” atomy ’ uhlíku, állyíovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terč.butylovou skupinu, nebo aminokyselinovou sekvenci začínající na své N-koncové straně Leu, Lys nebo Arg, popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích, která konči C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou' skupinou nebo chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terč.butylovou skupinu, pro použití k léčení.

«/.

ES. Peptid obsahující 4 až 15 aminokyselin, obecného vzorce I

A-X-Y-Cys-Z-B (I) ve kterém

X je Gly, Y je Pro a Z je Ile, X je Gly, Y je Pro a Z je Gly, X je Ala, Y je Pro a Z je Ala, X je Ile, Y je Pro a Z je Tyr, X je Ala, Y je Pro a Z je Ile, X je Arg, Y je Pro a Z je Ile, X je Ile, Y je Pro a Z je Ile, X je Asp, Y je Pro a Z je Ile,

CTTncmTnnTTTC CUrfT •ϊ:

X je Trp, Y je Pro a Z je Ile, X je Trp, Y je Pro a Z je Gly, X je Gly, Y je Ile a Z je Ile, X je Gly, Y je Pec a z je Ile, X je Thr, Y je Pro a z je Tyr, X je Thr, Y je Pec a z je Phe, X je Ala, Y je Pro a z je Phe, X je Ser, Y je Pro a z je Phe, X je Gly, Y je Pro a z je Pro, nebo X- je- Gly₇ ,γ. je- Pro a· z- je Tyr,.......

f.

A představuje atom vodíku, chránící skupinu, aminokyselinu bud' v L- nebo D-formě popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci nebo/a N-koncovou chránící skupinou, nebo aminokyselinovou sekvenci popřípadě s chráněnými funkčními Skupinami v . postranních řetězcích nebo/a N-koncovou chránící skupinou, a

B znamená hydroxylovou skupinu, aminoskupinu, chránící skupinu, aminokyselinu bud' v L- nebo D-formě popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou, nebo aminokyselinovou sekvenci popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou, přičemž délka zbytků A a B se může pohybovat v rozmezí, ve kterém jsou splněna kritéria pokud jde o délku a možné aminokyseliny, a přičemž peptidy obecného vzorce I obsahující několik cysteinových zbytků se mohou vyskytovat, jak v oxidované tak v redukované formě, kde oxidovaná forma může obsahovat intramolekulární disulfidové vazby dávající vznik oxidovaným

SUBSTITUTE SHEETI monomerům, jakož i jeho farmaceuticky přijatelné soli, pro použití jako imunomodulační činidlo.

Xt

Peptid podle nároku X ve kterém je z rozsahu obecného vzorce I vyloučena sekvence

Asp-Pro-Cys-Ile-Ile, pro--použití -j-ako imunomodulační—činidlo. .........................

$ , ve

L8L Peptid podle libovolného z nároků a kterém

X je Gly, Y je Pro a Z je Ile, X je Ala, Y je Pro a Z je Ile, X je Arg, Y je Pro a Z je Ile, X je Asp, Y je Pro a z je Ile, X je Trp, Y je Pro a z je Ile, X je Ser, Y je Pro a z je Phe, X je Gly, Y je Pro a z je Pro,

pro použití jako imunomodulační činidlo.

t? b H /· Peptid podle libovolného z nároků yť a

V ve kterém

A představuje atom vodíku, chránící skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l-(4-bifenylyl)ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terč.butoxykarbonylovou skupinu, aminokyselinu bud' v L- nebo D-formě vybranou ze souboru zahrnujícího Phe, Leu, Met, Ser, Lys-..a Tyr, popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci nebo/a N-koncovou chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9-fluorenylI cttrcttttttp.

methoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l-(4-bifenylyl)ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terč.butoxykarbonylovou skupinu, nebo aminokyselinovou sekvenci, která začíná. na své C-koncové straně Phe, Leu, Met, Ser, Lys nebo Tyr, popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích nebo/a N-koncovou chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-met- hyl-l- (4-bifeny-lyl-) et-hoxykarbónylOvou“ skupinu', tritvlo- '' vou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terč.butoxykarbonylovou skupinu, a chránící alkylové skupinu,

B znamená hydroxylovou skupinu, aminoskupinu, skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího skupiny s l až 6 atomy uhlíku, allylovou adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terc.butylovou skupinu, aminokyselinu buď v L- nebo D-formě vybranou ze souboru zahrnujícího Leu, Lys a Arg, popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci, která .končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terč.butylovou skupinu, nebo aminokyselinovou sekvenci začínající na své N-koncové straně Leu, Lys nebo Arg, popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terč;butylovou skupinu, pro použití jako imunomodulační činidlo.

' yí. Použití peptidů obsahujícího 4-15 aminokyselin, obecného vzorce I

A-X-Y-Cys-Z-B ve kterém

X je vybrán ze souboru zahrnujícího Gly, Ala, Ile, Asp,

Thr,. Ser, Arg a Trp,

Y je vybrán ze souboru zahrnujícího Pro, Pec a Ile,

Z..... jě' 'vybrán ze souboru zahrnujícího Ile, Phe, Pro, Ala,

Tyr a Gly,

B znamená hydroxylovou skupinu, aminoskupinu, chránící skupinu, aminokyselinu buď v L- nebo D-formě popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou, nebo aminokyselinovou sekvenci popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou, s tím, že z rozsahu obecného vzorce I jsou vyloučeny sekvence

Leu-Glu-Cys-Gly-Pro-Cys-Phe-Leu (SEQ ID č. 34),

Leu-Cys-Ala-Gly-Pro-Cys-Phe-Leu (SEQ ID č. 35),

Tyr-Ile-Pro-Cys-Phe-Pro-Ser-Ser-Leu-Lys-Arg-Leu-Leu-Ile (SEQ ID č. 36),

Tyr-Ile-Pro-Cys-Phe-Pro-Ser-Ser-Leu-Lys-Arg-Leu-Ile (SEQ ID πτ τηηπΓΤΓττ Tmo OTTPCT f

č. 37) ,

Ser-Gly-Pro-Cys-Pro-Lys-Asp-Gly-Gln-Pro-Ser (SEQ ID č. 38), a Thr-Pro-Pro-Thr-Pro-Cys-Pro-Ser (SEQ ID č. 39), přičemž délka zbytků \&--a B se může pohybovat v rozmezí, ve kterém jsou splněna kritéria pokud jde o délku a možné aminokyseliny, a přičemž peptidy obecného vzorce I obsahující několik cysteinových zbytků se mohou vyskytovat jak v oxidované tak v redukované formě, kde oxidovaná forma může obsahovat intramolekulární disulfidové vazby dávající vznik oxidovaným monomerům nebo intermolekulární disulfidové vazby dávající vznik dimerům peptidů obecného vzorce I jak v orientaci hlava-hlava tak v orientaci hlava-pata, jakož i jeho farmaceuticky přijatelných solí, pro výrobu léčiva s imunomodulačním účinkem.

fa

Použití peptidu podle nároku yť, ve kterém je z rozsahu obecného vzorce I vyloučena sekvence

Asp-Pro-Cys-Ile-Ile, pro výrobu léčiva s imunomodulačním účinkem.

yí. Použití peptidu podle libovolného z nároků l^a yst ve kterém

X je Gly, Y je Pro a Z j e ne, X je Gly, Y je Pro a Z je Gly, X je Ala, Y je Pro a Z je Ala, X je Ile, Y je Pro a z je Tyr, X je Ala, Y je Pro a z je Ile, X je Arg, Y je Pro a z je Ile, X je Ile, Y je Pro a z je Ile, X je Asp, Y je Pro a z je Ile, X je Trp, Y je Pro a z je Ile,

X je- Trp, Y je Pro a Z je Gly, X je Gly, Y je Ile a Z je Ile, X je Gly, Y je Pec a Z je Ile, X je Thr, Y je Pro a z je Tyr, X je Thr, Y je Pec a z je Phe, X je Ala, Y je Pro a z je Phe, X je Ser, Y je Pro a z je Phe, X je Gly, Y je Pro a z je Pro, nebo X je Gly, Y je Pro a z je Tyr,

pro výrobu léčiva ε imunomodulačním účinkem.

Λ t*

Ig Jp. Použití peptidů podle libovolného z nároků JX, jL# a IX ve kterém

pro výrobu léčiva s imunomodulačním účinkem.

46 //

Použití peptidů podle libovolného z nároků 3Q7/ ýx8, ve kterém představuje atom vodíku, chránící skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l-(4-bifenylyl)ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terc.butoxykarbonylovou skupinu, aminokyselinu ;buď v L- nebo D-formě vybranou ze souboru zahrnujícího Phe, Leu, Met, Ser, Lys a Tyr, popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci nebo/a N-koncovou chránící skupinou vybranou ze

SUBSTITUTE SHEET ί!' souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l-(4-bifenylyl)ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terč.butoxykarbonylovou skupinu, nebo aminokyselinovou sekvenci, která začíná na své C-koncové straně Phe, Leu, Met, Ser, Lys nebo Tyr, popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích nebo/a N-koncovou chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l- (4-bifenylyl) ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terč.butoxy karbony lovou skupinu, a

B znamená hydroxylovou skupinu, aminoskupinu, chránící skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terc.butylovou skupinu, aminokyselinu buď v L- nebo D-formě vybranou ze souboru zahrnujícího Leu, Lys a Arg, popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terč.butylovou skupinu, nebo aminokyselinovou sekvenci začínající na své N-koncové straně Leu, Lys nebo Arg, popřípadě s chráněnými funkčními skupinami:v postranních řetězcích, která končí C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo ..chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1. až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terč.butylovou skupinu, pro výrobu léčiva s imunomódulačním účinkem.

SUBSTITUTE SHEET

Použití peptidu obsahujícího 4-15 aminokyselin, obecného vzorce I

A-X-Y-Cys-Z-B (I) ve kterém

X je vybrán ze souboru zahrnujícího Gly, Ala, Ile, Asp, i

Thr, Ser, Arg a Trp, s' Y

Z je vybrán ze souboru zahrnujícího Pro, Pec a Ile, je vybrán ze souboru zahrnujícího Ile, Phe, Pro, Ala, Tyr a Gly,

Leu-Glu-Cys-Gly-Pro-Cys-Phe-Leu (SEQ ID č. 34),

Leu-Cys-Ala-Gly-Pro-Cys-Phe-Leu (SEQ ID č. 35),

Tyr-Ile-Pro-Cys-Phe-Pro-Ser-Ser-Leu-Lys-Arg-Leu-Leu-Ile (SEQ ID č. 36),

Tyr-Ile-Pro~Cys-Phe-Pro-Ser-Ser-Leu-Lys-Arg-Leu-Ile (SEQ ID

Icttrsttttite SHEET

č. 37),

Ser-Gly-Pro-Cys-Pro-Lys-Ásp-Gly-Gln-Pro-Ser (SEQ ID č. 38), a Thr-Pro-Pro-Thr-Pro-Cys-Pro-Ser (SEQ ID č. 39), a s tím, že pokud X je Arg nebo Ala a'Y je Ile, Z není Phě, Pro, Ile nebo Gly, přičemž délka zbytku A a B se muže pohybovat v rozmezí, ve kterém jsou splněna kritéria pokud jde o délku a možné aminokyseliny, a přičemž peptidy obecného vzorce I obsahující několik cysteinových zbytků se mohou vyskytovat jak v oxidované tak v redukované formě, kde oxidovaná forma může obsahovat intramolekulšrní disulfidové vazby dávající vznik oxidovaným monomerům nebo intermolekulární disulfidové vazby dávající vznik dimerům peptidu obecného vzorce I jak v orientaci hlava-hlava tak v orientaci hlava-pata, jakož i farmaceuticky přijatelných solí peptidu obecného vzorce I, pro výrobu' léčiva pro orální podání.

. Použití peptidu podle nároku 22, ve kterém

X je Gly, Y je Pro a Z je Ile, X je Gly, Y je Pro a Z je Gly, X je Ala, Y je Pro a Z je Ala, X je Ile, Y je Pro a Z je Tyr, X je Ala, Y je Pro a Z je Ile, .X je Arg, Y je Pro a Z je Ile, X je Ile, Y je Pro a Z je Ile, X je Asp, Y je Pro a Z je Ile, X je Trp, Y je Pro a Z je Ile, X je Trp, Y je Pro a z je Gly, X je Gly, Y je Ile a z je Ile, X je Gly, Y je Pec a z je Ile,

SUBSTITUTE SHE

X je Thr, Y je Pro a Z je Tyr, X je Thr, Y je Pec a Z je Phe, X je Ala, Y je Pro a Z je Phe, X je Ser, Y je Pro a Z je Phe·, X je Gly, Y je Pro a Z je Pro, nebo X je Gly, Y je Pro a Z je Tyr,

ϊ.

pro výrobu léčiva pro orální podání.

to μ £4. Použití peptidu podle nároku ^2, ve kterém

pro výrobu léčiva pro orální podání.

7. Použití peptidu podle libovolného z nároků ^7, φ a z

3 a 4 pro výrobu léčiva s imunomodulačním účinkem.

7. Použití homodimeru podle libovolného z nároků 1, 2,

3. Homodimer podle nároku 1, ve kterém

X je Gly, Y je Pro a Z je Ile, X je Ala, Y je Pro a Z 'je Ile, X je Arg, Y je Pro a' z je- Ile, X je Asp, Y je Pro a z je Ile, X je Trp, Y je Pro a z je Ile, X je Ser, Y je Pro a z je Phe, nebo X je Gly, Y je Pro a z je Pro,

- - pro- použit x' k‘ 1'é'čeňí.

4. Homodimer podle libovolného z nároku 1, 2. a. 3, ve kterém

A představuje atom vodíku, chránící .skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l-(4-bifenylyl)ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou . skupinu a terč.butoxykarbonylovou skupinu, aminokyselinu buď v L- nebo D-formě vybranou ze souboru zahrnujícího Phe, Leu, Met, Ser, Lys a Týr, popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním řetězci nebo/a N-koncovou chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l-(4-bifenylyl)«! · ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terč.butoxykarbonylovou skupinu, nebo aminokyselinovou sekvenci, která začíná na své C-koncové straně Phe, Leu, Met’,G Ser, Lys nebo Tyr, popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích nebo/a N-koncovou chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího acetylovou skupinu, 9-fluorenylmethoxykarbonylovou skupinu, 1-methyl-l- (4-bifenylyl.) ethoxykarbonylovou skupinu, tritylovou skupinu, allyloxykarbonylovou skupinu a terc.buI ottucttttito QT4RRT toxykarbonylovou skupinu, a

4 cj ^; d oc o

o o·* znamená hydroxylovou skupinu, aminoskupinu skupinu vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 aš 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terč.butylovou skupinu, aminokyselinu buď v L- nebo D-formě vybranou ze souboru zahrnujícího Leu, Lys a Arg, popřípadě s chráněnou funkční skupinou v postranním

..........řetězci, která _končí. ...C-koncovou . amidovou, skupinou,, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terč.butylovou skupinu, nebo aminokyselinovou sekvenci začínající na své N-koncové straně Leu, Lys nebo Arg, popřípadě s chráněnými funkčními skupinami v postranních řetězcích, která konči C-koncovou amidovou skupinou, volnou karboxylovou skupinou nebo chránící skupinou vybranou ze souboru zahrnujícího alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku, allylovou skupinu, adamantylovou skupinu, benzylovou skupinu a terč.butylovou skupinu, pro použití k léčení.

5. Homodimer podle libovolného z nároků 1, 2, 3 a 4 pro použití jako imunomodulační činidlo.

6. Použití homodimeru podle libovolného z nároků 1, 2,

4/ť. Způsob přípravy peptidů podle nároku 38, vyznačující se tím , že se aminokyseliny postupně spojují na pevné fázi -za použití automatického syntetizéru nebo se aminokyseliny postupně spojují v roztoku za použití příslušně derivatizovaných aminokyselin.