CZ20002927A3

CZ20002927A3 - E-2[4-(4-chlor-1,2-difenyl-but-1-enyl)fenoxy]etanol a farmaceutické přípravky, které ho obsahují

Info

Publication number: CZ20002927A3
Application number: CZ20002927A
Authority: CZ
Inventors: Marja-Liisa Södervall; Arja Kalapudas; Antti Viitanen; Eero Mäntylä
Original assignee: Orion Corporation
Priority date: 1998-02-19
Filing date: 1999-02-19
Publication date: 2000-12-13
Also published as: TR200002037T2; GEP20022794B; PT1056701E; NO325595B1; EP1056701A1; DE69912247D1; HUP0101354A3; ES2211038T3; EE04233B1; KR20010040985A; AR014961A1; AU755798B2; PL193315B1; YU51000A; ATE252531T1; HRP20000545A2; HUP0101354A2; IL137214A0; EA002919B1; SK12052000A3

Description

Ε-2-[4-(4-chlor-l,2-difenyl-but-l-enyl)fenoxy]etanol a farmaceutické přípravky, které ho. obsahují

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká E-2-[4-(4-chlor-l,2-difenylbut-l-enyl ) fenoxy] etanolu (I), který má schopnost snižovat sérový cholesterol a farmaceutických přípravků, které ho obsahují. Sloučenina (I) je užitečná při snižování sérových hladin cholesterolu a při léčbě aterosklerózy. Je také potenciálně použitelná v hormonální substituční léčbě (hormone replacement therapy - HRT).

Dosavadní stav techniky

Je dokázáno, že zvýšené sérové hladiny cholesterolu sdružené s lipoproteiny o nízké denzitě (LDL) jsou hlavní faktor přispívající k rozvoji a progresi aterosklerózy. Je tedy žádoucí zajistit způsob snižování sérových hladin cholesterolu u pacientů s hypercholesterolémií nebo u pacientů s rizikem vývoje hypercholesterolémie.

Mezinárodní patentová přihláška WO 97/32574 popisuje použití Z-2-[4-(4-chlor-l,2-difenyl-but-l-enyl)fenoxy]etanolu pro snižování sérového cholesterolu. Sloučenina nemá žádné významné estrogenní vedlejší účinky na tkáň dělohy, ale může blokovat nepříznivé účinky estrogenu na dělohu. Proto je tato sloučenina obzvláště užitečná pro snižování sérového cholesterolu. V této patentové přihlášce nebyl popsán odpovídající E-izomer.

Z-2-[4-(4-chlor-l,2-difenyl-but-l-enyl)fenoxy]etanol je metabolit známého antiestrogenu toremifenu. Toremifen, (Z—4— chlor-1,2-difenyl-l-[4-[2-(Ν,Ν-dimetylamino)etoxy] -fenyl] -1• · ···· · · ·· · · · · • · ··· ·· · β · · « ·· · • · · ···· ···· ·· ·· ·· ·· · · ·· '

buten) je v současnosti klinicky používán pro léčení rakoviny prsu pozitivní na estrogenový receptor.

Nyní bylo objeveno, že E-2-[4-(4-chlor-l,2-difenyl-but-lenyl) fenoxy] etanol (I) je významně účinnější ve snižování celkového sérového cholesterolu, ale při srovnání s odpovídajícím Z-izomerem působí na dělohu přibližně stejně. To bylo neočekávané, protože E-izomer toremifenu má na děložní tkáň čistě estrogenní účinek. Kromě toho bylo nalezeno, že E-izomer podle vynálezu může inhibovat biosyntézu cholesterolu přímo, zatímco odpovídající Z-izomer tento účinek nemá.

E-2-[4-(4-chlor-1,2-difenyl-but-1-enyl)fenoxy]etanol (I) je tedy použitelný zejména pro snižování sérového cholesterolu a pro prevenci nebo léčbu aterosklerózy. Sloučenina (I) je také potenciálně užitečná pro hormonální substituční léčbu (HRT).

Podstata vynálezu

Vynález poskytuje novou sloučeninu použitelnou pro snižování sérových hladin cholesterolu, tato sloučenina je E-2-[4-(4-chlor-l,2-difenyl-but-l-enyl)fenoxy]etanol a má strukturu dle vzorce (I)

(I) nebo její farmaceuticky přijatelný ester.

Farmaceuticky přijatelné estery zahrnují estery vytvořené s alifatickými karboxylovými kyselinami, výhodně kyselinami s jedním až šesti atomy uhlíku, jako je např. kyselina octová, ·· ·· ·· ·· ·· ·· • · · · · 9 · · » 9 9 9 ···· · · · · · * · · • · ··· ·· · · · · · · « « ·♦ · ···· · · · »

9· ·· ·· ·· « » ·· a s aromatickými karboxylovými kyselinami, např. kyselinami se sedmi až dvanácti atomy uhlíku, jako je kyselina benzoová. Alifatické a aromatické kyseliny mohou být volitelně substituovány např. jednou nebo více alkylovými skupinami s jedním až čtyřmi atomy uhlíku.

Vynález také poskytuje farmaceutický přípravek obsahující E-2-[4-(4-chlor-l,2-difenyl-but-l-enyl)fenoxy]etanol nebo jeho farmaceuticky přijatelný ester jako aktivní složku společně s farmaceuticky přijatelným nosičem.

Vynález také poskytuje způsob snižování sérových hladin cholesterolu, tento způsob zahrnuje podávání pacientovi, který tuto léčbu potřebuje, účinného množství E-2-[4-(4-chlor-l,2difenyl-but-l-enyl)fenoxy]etanolu nebo jeho farmaceuticky přijatelného esteru.

Vynález také poskytuje způsob prevence nebo léčby aterosklerózy, tento způsob zahrnuje podávání pacientovi, který tuto léčbu potřebuje, účinného množství E-2-[4-(4-chlor1,2-difenyl-but-l-enyl)fenoxy]etanolu nebo jeho farmaceuticky přijatelného esteru.

Vynález také poskytuje způsob hormonální substituční léčby (HRT), tento způsob zahrnuje podávání pacientovi, který tuto léčbu potřebuje, účinného množství E-2-[4-(4-chlor-l,2difenyl-but-l-enyl)fenoxy]etanolu nebo jeho farmaceuticky přijatelného esteru.

Sloučenina podle vynálezu může být podávána různými způsoby, včetně perorálního, parenterálního nebo transdermálního, při použití obvyklých forem přípravků, jako jsou tobolky, tablety, granulované přípravky, prášky, čípky, injekce, náplasti, suspenze a sirupy. Termín „účinné množství znamená množství sloučeniny podle vynálezu, které je schopné snížit sérové hladiny celkového cholesterolu nebo je schopné blokovat nežádoucí účinky estrogenů, zejména na dělohu nebo inhibovat menopauzální symptomy. Sloučenina podle vynálezu

·· ·· • * ·· může být podávána způsoby podle vynálezu jednou za měsíc, týden nebo den nebo několikrát denně, jak pacient potřebuje. Typická denní perorální dávka je v rozmezí přibližně 0,5 mg až přibližně 1000 mg, výhodně přibližně 10 mg až 800 mg aktivní sloučeniny, Ale dávkování může být upraveno a měněno v závislosti na věku, na tělesné hmotnosti a stavu pacienta, a také dle způsobu podávání. Sloučenina podle vynálezu může být podávána samotná nebo spolu s jinými aktivními sloučeninami.

Přípravky podle vynálezu mohou být připraveny způsoby v oboru obecně používanými. Kromě aktivní sloučeniny mohou přípravky obsahovat farmaceuticky přijatelná aditiva v oboru obecně používaná, jako jsou nosiče, pojivá, excipienty, lubrikanty, suspendující činidla a ředidla. Množství aktivní sloučeniny v přípravcích podle vynálezu je postačující pro vyvolání požadovaného terapeutického účinku, jde například o přibližně 0,5 až 1000 mg, výhodně přibližně 10 mg až 800 mg v jednotkové dávce jak pro perorální, tak parenterální podávání.

Následující příklady ilustrují syntézu sloučeniny podle vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Příprava E-2-[4-(4-chlor-l,2-difenyl-but-l-enyl)fenoxy]etanoiu

a) E-4- [4- (2-benzyloxyet.oxy) fenyl] -3, 4-difeny.l-but-3-en-l-ol

Alkylace výchozího fenolu benzyl-(2-bromoetyl)éterem se prováděla tak, jak je popsáno v příkladu 1 Mezinárodní patentové přihlášky WO 96/07402 s tou výjimkou, že nyní byl ·· 9· ·· • · 9 · 9 ·

9 9 · 99

9 ·«· « « » • 9 · · ·

99 ·· ·· 9* «·

9 « · « · •9 9 · · ·

9 9 9 9 · · • 9 9 · · « • * 9 · · · výchozí sloučeninou jiný geometrický izomer, E-4-(4-hydroxy1,2-difenyl-but-l-enyl)fenol, který byl připraven pomocí metody popsané v patentu Spojených Států č. 4 996 225. Produkt byl extrahován toluenem. Toluenové fáze byly spojeny, promyty vodou, usušeny a odpařeny do sucha. Zbytek byl rekrystalizován z menšího množství toluenu a precipitovaný produkt byl použit v příštím kroku bez další purifikace.

^ΧΗ NMR (300 MHz, CDC1₃) : 2,8 (2H, t, CH₂-O) , 3,6 (2H, dt, CHzOH) , 3,8 (2H, t, CH₂OBn) , 4,2 (2H, t, CH₂OPh) , 4,6 (2H, s, OCH₂Ph), 6,8-7,4 (19H, m).

b) E-l- [4-(2-benzyloxyetoxy)fenyl]-4-chloro-l,2-difenyl-but-1en

Halogenace E-4-[4-(2-benzyloxyetoxy)fenyl]-3, 4-difenylbut-3-en-l-olu byla prováděna tak, jak je popsáno v příkladu 2 Mezinárodní patentové přihlášky WO 96/07402, ale s použitím E-4-[4-(2-benzyloxyetoxy)fenyl]-3,4-difenyl-but-3-en-l-olu jako výchozí sloučeniny.

^ΧΗ NMR (300 MHz, CDC1₃) : 3,0 (2H, t), 3,4 (2H, t) , 3,8 (2H, t), 4,2 (2H, t), 4,6 (2H, s), 6,9-7,4 (19H, m).

c) E-2-[4-(4-chlor-l,2-difenyl-but-l-enyl)fenoxy]etanol

6,9 g E-l-[4-(2-benzyloxyetoxy)fenyl]-4-chlor-l, 2-difenylbut-l-enu bylo rozpuštěno ve směsi 60 ml etyiacetátu a 60 ml etanolu. Bylo přidáno palladium na uhlíku (5%, 0,7 g) a roztok byl důkladně míchán ve vodíkové atmosféře při teplotě místnosti do vymizení výchozí sloučeniny (chromatografie na tenké vrstvě). Palladium na uhlíku bylo odstraněno filtrací přes křemičitanovou zeminu a filtrát byl odpařen do sucha. Zbytek byl několikrát krystalizován ze směsi etanolu a vody.

^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) : 3,0 (2H, t), 3,4 (2H, t), 4,0 (2H, m), 4,1 (2H, t), 6,8-7,3 (14H, m).

MS spektrum (+EI, 70 eV, přímý vstup): 378 (100%), 342 (8%), 329 (43%), 285 (23%), 284 (28%), 207 (32%), 191 (30%).

Experimenty

Metody

Estrogenní/antiestrogenní aktivita studovaného léčiva byla testována pomocí měření vlivu na hmotnost dělohy u nedospělých (18 dnů starých) samic laboratorního potkana kmene SpragueDawley. Sloučenina byla podávána p.o. v roztoku PEG po 3 dny (n=5 ve skupině). Současně byla sledována schopnost studovaného léčiva inhibovat estrogenem indukovaný vzestup hmotnosti dělohy u potkanů, kterým byl podáván estradiol v dávce 50 pg/kg s.c. Bylo prováděno srovnání s odpovídajícím Z-izomerem.

Vliv na biosyntézu cholesterolu byl studován in vitro na kulturách buněk HepG2 při použití ¹⁴C-acetátu jako prekurzoru cholesterolu. Do kultivačního média byla přidávána testovaná sloučenina v koncentracích od 0,01 do 10 pmol. Po 2 hodinách byla kultura zastavena a nově syntetizovaný cholesterol byl kvantifikován pomocí chromatografie na tenké vrstvě. Bylo prováděno srovnání se Z-izomerem.

Vliv na hmotnost dělohy a na sérové hladiny cholesterolu byl studován na dospělých samicích laboratorního potkana kmene Sprague-Dawley, netknutých a s provedenou ovariektomií. Neoperovaným potkanům bylo studované léčivo podáváno p.o. v denní dávce 3,17 mg/kg po dva týdny a bylo prováděno srovnání s ekvi.mol árními dávkami 7,-izomeru, E-izomeru toremifenu, raloxifenu nebo estradiolu. Ve studii s ovariektomií bylo studované léčivo podáváno p.o. v denní dávce 0,1, 1 nebo 10 mg/kg po čtyři týdny a bylo prováděno srovnání s odpovídajícím Z-izomerem a estradiolem (100 pg/kg). Obsah sérového cholesterolu se určoval enzymatickou metodou. Ve studii s ovariektomií byl obsah sérového cholesterolu a molekuly prekurzoru cholesterolu určován pomocí plynové rozdělovači chromatografie.

Výsledky

V testu hmotnosti dělohy prováděný na nedospělých potkanech vykázal E-izomer podle vynálezu při srovnání s odpovídajícím Z-izomerem přibližně stejný estrogenní a antiestrogenní účinek. Výsledky jsou ukázány v tabulce 1, kde 1271b(E) znamená E-izomer podle vynálezu, 1271a(Z) znamená odpovídající Z-izomer a E2 znamená estradiol.

Tabulka 1

Dávka léčiva	Průměrná hmotnost dělohy (hmotnost samotným E2 byla brána jako 1,00)	po ošetření
(mg/kg)	1271a(Z)	1271a(Z)+E2	1271b(E)	1271b(E)+E2
0	0,25	1,00	0,33	1,00
0,1	0,27	1,18	0,37	0, 81
0,5	0,43	1, 11	0,45	0,82
1	0,53	0, 91	0,44	0,57
10	0,75	0, 91	0,75	0, 83

V použitém in vitro systému buněčné kultury E-izomer podle vynálezu mírně inhiboval biosyntézu cholesterolu, ale Z-izomer měl opačný účinek, jak je ukázáno v tabulce 2.

♦ · » · * tttt · tt tttt tt tt · tttttt · tttt · • tt tttt tt · • · • tt • · • tt tttt • tttt • tttttt » tttt • tttt tttt ··

Tabulka 2

Koncentrace	Hladina biosynté-zy cholesterolu
léčiva	(% kontroly)
(μΜ)	1271a(Z)	1271b (E)
0,01	143	89
0,1	127	90
1	129	89
10	132	84

U dospělých samic potkana snižovaly 1271b(E), 1271a (Z.) a raloxifen relativní hmotnost dělohy přibližně stejnou měrou. Estradiol a E-izomer toremifenu hmotnost spíše zvyšovaly. Z léčiv sérovou hladinu cholesterolu snižovaly 1271b(E), E-izomer toremifenu, raloxifen a estradiol s přibližně stejnou účinností (kolem 50-60 %). Molekula 1271a(Z) byla méně účinná. Výsledky jsou ukázány v tabulce 3.

Tabulka 3

Molekula léčiva

Relativní hmotnost dělohy a obsah sérového cholesterolu (kontrolní hladina byla brána, jako 1,00, průměr + SD, n=3) Děloha Cholesterol

1271b(E)	0,85	±	0,07	0,43	±	0,05
1271a(Z)	0,75	+	0,06	0, 65	i	0,10
Toremifen(E)	1,09	+	0,10	0,40	±	0,18
Raloxifen	0,77	±	0,21	0,48	+	0,09
Estradiol	1,29	i	0,06	0,48	±	0,09

• «9

9 9

9 ·

J • 9 *

999

9 9

9 • 9 9 9

9 9

Ve studii s ovariektomií 1271b(E) zvyšoval mírně (1,5 krát) relativní hmotnost dělohy, ne více než odpovídající Z-izomer. Estradiol zvyšoval hmotnost 3,3 krát. 1271b(E) snižoval sérovou hladinu cholesterolu velmi účinně (až o 77 %), 1271a (Z) byl zřetelně méně účinný (snížení bylo o 34 %) . Výsledky jsou ukázány v tabulce 4.

Tabulka 4

Dávka	Relativní hmotnost dělohy a obsah sérového
léčiva	cholesterolu	(kontrolní	hladina byla	brána jako
(mg/kg)	1,00) 1271b(E) Děloha	Cholesterol	1271a(Z) Děloha	Cholesterol
0,1	1,54	0, 92	1,22	-
0,5	-	-	-	0,90
1	1,50	0, 62	1,78	0, 96
5	-	-	-	0,89
10	1,53	0,23	2,04	0, 66

Dále bylo ve studii s ovariektomií pozorováno, že 1271b(E), ale už ne 1271a(Z), mírně zvyšoval sérovou hladinu molekuly prekurzoru cholesterolu, což svědčí pro přímou inhibici biosyntézy cholesterolu prostřednictvím 1271b(E).

Diskuse

Výše uvedená data ukazují, že oba 1271a(Z) a 1271b(E) jsou totožné, co se týče antiestrogenního působení na dělohu potkana. Tím se odlišují od toremifenu, protože E-izomer toremifenu má na dělohu potkana čistě estrogenní účinek a Z-izomer antiestrogenní. 1271b(E) je jako hypolipidemikum účinnější než odpovídající Z-izomer. To je alespoň částečně **

9 9 9

9 99 • 9 9 9

9 9 9

99

9 9 9

9 9 9 • 9 9 9 9

9 9 9

9 9 9 • 9 9« • 9 9 9

9 9 9 • · 9«· 9

9 9

99 vysvětleno schopností 1271b(E) inhibovat přímo biosyntézu cholesterolu. Souhrnem, testovaná sloučenina 1271b(E) je ahtiestrogénní léčivo, které má také blahodárnou a silnou hypolipidemické schopnost.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. E-2-[4-(4-chlor-l,2-difenyl-but-l-enyl)fenoxy]etanol nebo jeho farmaceuticky přijatelný ester.
2. Farmaceutický přípravek vyznačující se tím, že obsahuje E-2-[4-(4-chlor-l,2-difenyl-but-l-enyl)fenoxy] etanol nebo jeho farmaceuticky přijatelný ester jako aktivní složku společně s farmaceuticky přijatelným nosičem.
3. Způsob snižování sérových hladin cholesterolu vyznačující se tím, že zahrnuje podávání pacientovi, který tuto léčbu potřebuje, účinného množství E-2-[
4-(4-chlor-l, 2-difenyl-but-l-enyl)fenoxy]etanolu nebo jeho farmaceuticky přijatelného esteru.

aterosklerózy

Způsob prevence vyznačuj ící nebo léčby se tím, že zahrnuje podávání pacientovi, který tuto léčbu potřebuje, účinného množství E-2-[4-(4-chlor-l,2-difenyl-but-l-enyl)fenoxy]etanolu nebo jeho farmaceuticky přijatelného esteru.
5. Způsob hormonální substituční léčby vyznačuj ící se tím, že zahrnuje podávání pacientovi, který tuto léčbu potřebuje, účinného množství E-2-[4-(4-chlor-l,2difenyl-but-l-enyl)fenoxy]etanolu nebo jeho farmaceuticky přijatelného esteru.