CZ20033521A3 - Fluoropyrrolidines as dipeptidyl peptidase inhibitors - Google Patents

Fluoropyrrolidines as dipeptidyl peptidase inhibitors Download PDF

Info

Publication number
CZ20033521A3
CZ20033521A3 CZ20033521A CZ20033521A CZ20033521A3 CZ 20033521 A3 CZ20033521 A3 CZ 20033521A3 CZ 20033521 A CZ20033521 A CZ 20033521A CZ 20033521 A CZ20033521 A CZ 20033521A CZ 20033521 A3 CZ20033521 A3 CZ 20033521A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
amino
compound
fluoropyrrolidine
mmol
solution
Prior art date
Application number
CZ20033521A
Other languages
English (en)
Inventor
Hafnerácurtádale
Mccougaldádarrylálynn
Randhawaáamarjitásab
Reisterástevenámichael
Lenhardájamesámartin
Original Assignee
Smithklineábeechamácorporation
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Smithklineábeechamácorporation filed Critical Smithklineábeechamácorporation
Publication of CZ20033521A3 publication Critical patent/CZ20033521A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/26—2-Pyrrolidones
    • C07D207/273—2-Pyrrolidones with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to other ring carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/12—Antidiarrhoeals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/16—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with hetero atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/48—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/04—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/06—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D451/00—Heterocyclic compounds containing 8-azabicyclo [3.2.1] octane, 9-azabicyclo [3.3.1] nonane, or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane or granatane alkaloids, scopolamine; Cyclic acetals thereof
    • C07D451/02—Heterocyclic compounds containing 8-azabicyclo [3.2.1] octane, 9-azabicyclo [3.3.1] nonane, or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane or granatane alkaloids, scopolamine; Cyclic acetals thereof containing not further condensed 8-azabicyclo [3.2.1] octane or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane; Cyclic acetals thereof
    • C07D451/04—Heterocyclic compounds containing 8-azabicyclo [3.2.1] octane, 9-azabicyclo [3.3.1] nonane, or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane or granatane alkaloids, scopolamine; Cyclic acetals thereof containing not further condensed 8-azabicyclo [3.2.1] octane or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane; Cyclic acetals thereof with hetero atoms directly attached in position 3 of the 8-azabicyclo [3.2.1] octane or in position 7 of the 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring system

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Transplantation (AREA)

Description

Předkládaný vynález se týká sloučenin inhibujících dipeptidylpeptidázy, jako je dipeptidylpeptidáza II (DPP-II) a IV (DPPIV), způsobů jejich výroby a jejich použití v lékařství.
Dosavadní stav techniky
Dipeptidylpeptidáza IV (DPP-IV) je serinová proteáza štěpící za prolinem/alaninem, která se nalézá v různých tkáních těla včetně ledvin, jater a střev. Předpokládá se, DPP-IV řídí aktivitu celé řady fyziologicky důležitých peptidů, včetně bez omezení GLP1, GIP, GLP2, GRP, vazoaktivního intestinálního peptidu, peptidu histidinmethioninu, PYY, látky P, beta-kasomorfinu, NPY, PACAP38, prolaktinu, choriového gonadotropinu, aprotininu, peptidu středního laloku podobného kortikotropinu, peptidu aktivujícího adenylcyklázu podvěsku mozkového, (Tyr)melanostatinu, LD78beta(3-70), RANTES, eotaxinprokolipázy, enterostatinu, vazostatinu 1, endomorfinu, morficeptinu, faktoru odvozeného od stromálních buněk, chemokinu odvozeného od makrofágů, chemotaktického proteinu-2 granulocytů, a GHRH/GRF. Jako příklady terapeutického účinku DPP-IV je možno uvést, že DPP-IV se účastní řady metabolických, gastrointestinálních, virových a zánětlivých onemocnění, včetně bez omezení onemocnění ze skupiny diabetes, obezita, hyperlipidemie, onemocnění kůže nebo slizniční membrány, lupénka, střevní onemocnění, zácpa, autoimunitní onemocnění jako je encefalomyelitida, onemocnění podmíněná komplementem jako je glomerulonefritida, lipodystrofie, poškození tkání, psychosomatická, depresivní a neuropsychiatrická onemocnění jako je úzkost, deprese, nespavost, schizofrenie, epilepsie, křeče a • · · · chronická bolest, infekce HIV, alergie, zánět, artritida, odmítání transplantátů, vysoký krevní tlak, městnavé selhání srdce, tumory a potraty indukované stresem, např. myší potraty působením cytokinů. Například DPP-IV, známý také jako CD26, zprostředkuje aktivaci Tbuněk a infekci HIV (Ohtsuki a další, 2000). U jedinců infikovaných HIV jsou přednostně infikovány a vyčerpávány T-buňky exprimující DPP-IV/CD26 (Ohtsuki a další, 2000). Ukázalo se, že inhibitory DPPIV mají protizánětlivé účinky ve zvířecích modelech artritidy (Tanaka a další, 1997). Navíc bylo ukázáno, že inhibice DPP-IV prodlužuje přežívání srdečních transplantátů (Korom a další, 1997). Studie in vitro ukazují, že exprese DPP-IV/CD26 je v korelaci s postupem tumoru u maligních melanomů kůže (Van den Oord, 1998). Navíc se předpokládá, že DPP-IV řídí metabolismus odštěpováním předposledního prolinu/alaninu na aminovém konci polypeptidů (Mentlein, 1999), jako jsou peptidy podobné glukagonu (GLP) a neuropeptid Y (NPY).
Konkrétněji napomáhají GLP metabolizaci glukózy a peptidy GLP by pravděpodobně byly prospěšné při léčení metabolických poruch jako je diabetes. Diabetes např. typu 2 (nazývaná také diabetes mellitus nezávislá na inzulínu (NIDDM)nebo diabetes nastupující v dospělosti), vede ke zvýšeným hladinám krevního cukru v důsledku absolutního nebo relativního nedostatku inzulínu. Diabetes typu 2 je běžnější forma diabetů, která se vyskytuje u 90 % případů nebo u přibližně 16 milionů Američanů. Většina diabetiků typu 2 produkuje různá, někdy normální množství inzulínu, ale mají abnormality v játrech a svalových buňkách, které způsobí rezistenci na jeho působení. Inzulín se naváže na buněčné receptory, ale glukóza neproniká dovnitř, což je podmínka známá jako rezistence na inzulín. Zdá se, že mnoho diabetiků typu 2 není schopno vylučovat dostatečné množství inzulínu, aby se předešlo rezistenci na inzulín. GLP-1 zvyšuje sekreci inzulínu. Regulace GLP- 1 tedy koreluje s regulací sekrece inzulínu. Navíc snižuje GLP-1 jaterní produkci glukózy, vyprazdňování • · · · · · • ·
žaludku a příjem potravy (Deacon a další, 1995). GLP-2 dále udržuje integritu střevního slizničního epitelu působením na pohyblivost žaludku, absorpci živin, proliferaci a apoptózu kryptických buněk a střevní permeabilitu (Drucker, 2001).
Inhibitory DPP-IV zachovávají funkci GLP-1 po delší dobu (Balka, 1999). Inhibitory DPP-IV mohou podporovat přesycenost, úbytek hmotnosti a antidiabetické účinky GLP-1 (Deacon a další, 1995; Holst a Deacon, 1998). Například inhibice DPP-IV známou sloučeninou NVP-DPP728 zvyšuje plasmatické koncentrace GLP-1 (2 36 amid) a zlšpeuje orální toleranci glukózy u obézních Zuckerových krys, viz Diabetologia 42: 1324 - 1331. Subkutánně i intravenózně podaný GLP-1 podléhá rychlé degradaci od NH2-konce u diabetických pacientů typu II i u zdravých osob, viz Diabetes 44: 1126, 1995.
Inhibitory DPP-IV navíc zachovávají působení GLP-2 po delší dobu a mohou být tedy použitelné pro léčení střevní nedostatečnosti a onemocnění slizniční membrány (Hartmann B. a další, 2000).
Zatímco DPP-IV je proteáza převážně regulující biochemický obrat GLP, podobná substrátová nebo inhibiční specificita může být pozorována i u příbuzných proteáz. Příbuzné serinové proteázy zahrnují bez omezení proteázy ze skupiny dipeptidylpeptidáza-ll (DPPII), dipeptidylpeptidáza IV beta, dipeptidylpeptidáza 8, dipeptidylpeptidáza 9, aminopeptidáza P, protein alfa aktivující fibroblasty (sepráza), prolyltripeptidylpeptidáza, prolyloligopeptidáza (endoproteináza Pro-C), atraktin (rozpustná dipeptidylaminopeptidáza), acylaminoacylpeptidáza (N-acylpeptidhydroláza; fMet aminopeptidáza) a lysozomální Pro-X karboxypeptidáza (angiotensináza C, prolylkarboxypeptidáza). Metalopeptidázy štěpící prolin mohou mít podobné substrátové nebo inhibiční specificity jako DPP-IV včetně membránové Pro-X karboxypeptidázy (karboxypeptidáza P), enzymu konvertujícího angiotensin (peptidyldipeptidáza A multipeptidáza], kolagenázy 1 • φ φ φ
(intersticiální kolagenáza; matricová metaloproteináza 1; MMP-1; Mcol-A), ADAM 10 (alfa-sekretáza, desintegrinová metaloproteináza asociovaná s myelinem), neprilysinu (atriopeptidáza; CALLA; CD10; endopeptidáza 24.11; enkefalináza), makrofágové elastázy (metaloelastáza; matricová metaloproteináza 12; MMP-12], matrilysinu (matricová metaloproteináza 7; MMP-7), a neurolysinu (endopeptidáza 24.16; mikrozomální endopeptidáza; mitochondriální oligopeptidáza). Další odkazy viz http://merops.iapc. bbsrc. ac.uk/.
Kromě savčích serinových peptidáz a metalopeptidáz štěpících prolin, mohou podobnou substrátovou nebo inhibiční specificitu jako DPP-IV sdílet i další jiné než savčí proteázy. Neomezující příklady těchto jiných než savčích serinových proteáz jsou: prolylaminopeptidáza (prolyliminopeptidáza), lgA1-specifická prolylendopeptidáza serinového typu (IgA proteáza, Neisseria, Haemophilus), dipeptidylaminopeptidáza A (STE13) (Saccharomyces cerevisiae), dipeptidylaminopeptidáza B (houby), homolog prolyloligopeptidázy (Pyrococcus sp.), oligopeptidáza B (Escherichia coli alkalická proteináza II; proteáza II), dipeptidylaminopeptidáza B1 (Pseudomonas sp.), dipeptidylpeptidáza IV (bakterie), dipeptidylaminopeptidáza (Aureobacterium), dipeptidylpeptidáza IV (hmyz), dipeptidylpeptidáza V, alergen Tri t 4 (Trichophyton tonsurans), sekrenovaná alanyl DPP (Aspergillus oryzae), peptidáza IImes (Prosopis velutina), bambusová serinová proteináza (Pleioblastus hindsii). Neomezující příklady takových jiných než savčích metalopeptidáz štěpících prolin zahrnují penicilolysin (houbová kyselá metaloendopeptidáza), prolin-specifická peptidyldipeptidáza (Streptomyces), coccolysin (gelatináza, Enterococcus faecalis), aminopeptidáza Ey, (žloutku slepic) (apdE g.p.; Gallus galius domesticus), gametolysin (proteáza degradující buněčné stěny Chlamydomonas), a metaloproteázy štěpící prolin hadího jedu, viz http://merops. iapc. bbsrc. ac. uk/, kde je možno najít další odkazy.
• · · • ·
- 5 • · · · · · • · · «
Dipeptidylpeptidáza II (DPP II) je serinová proteáza lokalizovaná v lysosomech v buňkách, a předpokládá se, že se účastní lysosomální degradace a metabolismu proteinů. Pořadí míry exprese DPP-II je ledvina > > varle > nebo = srdce > mozek > nebo = plíce > slezina > kosterní svalstvo > nebo = játra (Araki H a další, J. Biochem. (Tokio) 2001, 129: 279 - 88). Tato exprese ukazuje na možné využití při onemocnění souvisejících s ledvinami nebo lysosomy. Studie substrátové specificity ukázaly, že čištěná DPP-II hydrolyzuje specificky alaninové nebo prolinové zbytky při kyselém pH (4,5 - 5,5). DPP-II má významnou sekvenční homologii a substrátovou specificitu jako prolindipeptidáza klidových buněk a proiylkarboxypeptidáza, což ukazuje na možné překrývání funkcí mezi těmito proteázami (Araki H. a další, J. Biochem. (Tokio) 2001, 129: 279 - 88).
Předkládaný vynález zahrnuje nové inhibitory DPP-II a/nebo DPP-IV, stejně jako způsoby jejich terapeutického využití a způsoby jejich přípravy. Aniž by si autoři přáli být následujícím seznamem omezeni, předpokládá se, že sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou použitelné pro léčení řady metabolických, gastrointestinálních, virových a zánětlivých onemocnění, včetně bez omezení onemocnění jako diabetes, obezita, hyperlipidemie, onemocnění kůže nebo slizničních membrán, lupénka, střevní onemocnění, zácpa, autoimunitní onemocnění jako je encefalomyelitida, onemocnění podmíněná komplementem jako je glomerulonefritida, lipodystrofie, a poškození tkání, psychosomatická, depresivní, a neuropsychiatrická onemocnění jako je úzkost, deprese, nespavost, schizofrenie, epilepsie, křeče a chronická bolest, infekce HIV, alergie, zánět, artritida, odmítání transplantátů, vysoký krevní tlak, městnavé selhání srdce, tumory a potraty indukované stresem, např. potraty myší indukované cytokiny.
Ve srovnání s jinými inhibitory dipeptidyipeptidáz poskytují sloučeniny podle předkládaného vynálezu zlepšenou stabilitu, účinnost, délku působení a/nebo zlepšené profily bezpečnosti/toxicity.
• « · · · ·
- 6 • · ·
Podstata vynálezu
Předkládaný vynález zahrnuje sloučeniny vzorce (I):
X
F
včetně jejich soli, solvátů a farmaceuticky funkčních derivátů, kde X je F nebo H; každá R1 a R2 jsou buď atom vodíku; alkyl; popřípadě substituovaný aryl nebo heteroaryl; nebo jsou kombinovány za vytvoření 3 až 14-členného kruhového systému, popřípadě obsahujícího jeden nebo více heteroatomů, a popřípadě obsahujícího jeden nebo více stupňů nenasycení. Jestliže R a R jsou popřípadě substituovaný aryl nebo heteroaryl, potom R3 je H nebo alkyl. Jinak je skupina R3 kde n je 0 - 5; m je 0 - 12; Y je S(O)P, O, alkylen, alkenylen, alkinylen, nebo vazba; p je 0 - 2; R4 je R5, jestliže Y je S, O, alkylen, alkenylen, alkinylen nebo vazba, kde R5 je popřípadě substituovaný alkyl, alkenyl, alkinyl, aryl, cykloalkyl, heteroaryl, nebo heterocyklyl; a R4 je R6, jestliže Y je S(O) nebo S(O)2, kde R6 je popřípadě substituovaný alkyl, aryl, cykloalkyl, heteroaryl, amino, alkylamino, arylamino, heteroarylamino, cykloalkylamino nebo hydroxy.
• · · · · ·
Výhodné případné substitutenty zahrnují bez omezení jednu nebo více skupin alkyl, alkoxy, aryloxy, halogen, haíoalkyí, kyano, alkylsulfonyl nebo aryl. Výhodněji zahrnují případné skupiny jednu nebo více skupin Ci-C6 alkyl, Ci-C6 alkoxy, fenoxy, benzoxy, fluor, chlor, (N-C6 haloalkyl, kyano, Ci-C6 alkylsulfonyl, fenyl nebo benzyl.
V jednom provedení jsou každá skupina R1 a R2 aryl, a R3 je H. S výhodou každý aryl je fenyl. Výhodněji každý fenyl je substituovaný atomem halogenu. Výhodněji každý halogen je atom fluoru, výhodněji 4-fluor.
V dalším provedení skupiny R1 a R2 jsou vždy alkyl a R3 je
S výhodou každá skupina alkyl je Ci-Ce alkyl. Výhodněji každá skupina alkyl je methyl. S výhodou n je 0, m je 1, a Y je S(O)P. V jednom výhodném provedení p je 0, R4 je R5, a R5 je popřípadě substituovaný aryl. S výhodou R5 je fenyl substituovaný skupinou alkoxy. Výhodněji skupina alkoxy je methoxy. V dalším výhodném provedení p je 1 nebo 2, R4 je R5, a R6 je popřípadě substituovaný aryl. S výhodou Rs je fenyl substituovaný skupinou alkoxy. Výhodněji skupina alkoxy je methoxy. Výhodněji p je 2.
V jednom provedení je znázorněná skupina NH2 s výhodou v konfiguraci cis vzhledem k nitrilové účinné skupině (warhead). V dalším provedení je s výhodou znázorněná skupina NH2 v konfiguraci trans vzhledem k nitrilové účinné skupině.
S výhodou A je H. S výhodou je znázorněná skupina F v konfiguraci cis vzhledem k zobrazené nitrilové skupině.
Zvláště výhodné sloučeniny podle předkládaného vynálezu zahrnují sloučeniny vzorce (I):
• · · · · · • · • ·
včetně solí, solvátů a a farmaceuticky funkčních derivátů, kde X je F nebo H; každá skupina R1 a R2 je popřípadě substituovaný aryi nebo heteroaryl; a R3 je H nebo alkyl.
Zvláště výhodné sloučeniny podle předkládaného vynálezu zahrnují sloučeniny vzorce (I):
včetně solí, solvátů a farmaceuticy funkčních derivátů, kde X je
F nebo H; každá skupina R1 a R2 je buď (i) alkyl; nebo (ii) jsou tyto skupiny kombinovány za vytvoření 3 až 14-členného kruhového systému, popřípadě obsahujícího jeden nebo více heteroatomů, a popřípadě obsahujícího jeden nebo více stupňů nenasycenosti;
R3 je
• · · · · · ·· ·· ·« · • · · · · · · · * ·
9·· · · · · · · ·
- · 9 9 9 9 9 9 9 9 999
9 9 9 9 9 9 9 9
9999 99 99 9999 99 9 kde n je O až 5; m je O až 12; Y je S(O)P, O, alkylen, alkenylen, nebo alkinylen; p je 0 až 2; R4 je R5, jestliže Y je S, O, alkylen, alkenylen, nebo alkinylen, kde R5 je popřípadě substituovaný alkyl, alkenyl, alkinyl, aryl, cykloalkyl, heteroaryl, nebo heterocyklyl; a R4 je R6, jestliže Y je S(O) nebo S(O)2, kde R6 je popřípadě substituovaný alkyl, aryl, cykloalkyl, heteroaryl, amino, alkylamino, arylamino, heteroarylamino, cykloalkylamino nebo hydroxy.
S výhodou p je 1 nebo 2. Výhodněji p je 2. S výhodou jsou každá R1 a R2 alkyl. Výhodněji jsou každá R1 a R2 Ci-C6 alkyl. Výhodněji jsou každá R1 a R2 methyl.
Zvláště výhodné sloučeniny podle zahrnují:
předkládaného vynálezu
Zvláště výhodné sloučeniny jsou zvoleny ze skupiny:
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-3,3-difenylpropanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonítril hydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-3,5-bis(4-fluorfenyl)propanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
•« ·9 9·
- 10 •999 99 (25.45) -1-[(2S)-2-amino-5-(4-fluorfenyl)-3,3-dimethylpentanoyl]-4-ffuor-2-pyrrolidinkarbonitril hydrochlorid;
(2S,4R)-1-[(2S)-2-amino-4-(4-fluorfenyl)-3,3-dimethylbutanoyl]-4-fluorpyrrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-[(4-methoxybenzyl)thio]-3-methylbutanoyl} -4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(3-fenylpropyl)thio]butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(2-fenylethyl)thio]butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-((2R)-2-amino-3-{[3-(4-fluorfenyl)propyl]thio}-3-methylbutanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-[(4-methoxybenzyl)sulfonyl]-3-methylbutanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-[(4-methoxybenzyl)sulfinyl]-3-methylbutanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-((2R)-2-amino-3-methyl-3-{[4-(trifluormethyl)benzyl]thio}-butanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-2-(1-vinylcyklopentyl)ethanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-5-(4-methoxyfenyl)-3,3-dimethylpentanoyl]-4 -fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(3-fenylpropyl)sulfonyl]butanoyl} -4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(4-methylbenzyl)sulfonyI]-butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril;
(25.45) -1-((2R)-2-amino-3-{[4-(benzyloxy)benzyl]sulfonyl}-3-methylbutanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril;
• φ φφφφ (25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-[(4-kyanobenzyi)sulfonyl]-3-methylbutanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril;
(25.45) -1-((2R)-2-amino-3-methyl-3-{[4-(methylsulfonyl)benzyl]-sulfonyl}butanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril;
(25.45) -1-{(2S)-2-amino-2-[1-(4-fluorbenzyl)cyklopentyl]ethanoyI}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-((2S)-2-amino-2-{1-[4-(trifluormethyl)fenyl}cyklopentyl}-ethanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2S)-2-amino-2-[1-(4-fluorbenzyl)cyklopropyl]ethanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-[(2R)-2-amino-3-(benzylsulfonyl)-3-methylbutanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-[(3-methoxybenzyl)sulfonyl]-3-methylbutanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-[(1,1’-bifenyl-4-ylmethyl)sulfonyl]-3-methylbutanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-[(2-methoxybenzyl)sulfonyl]-3-methylbutanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(pyridin-3-ylmethyl)thio]butanoyl} -4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(pyridin-2-ylmethyl)thio]butanoyl} -fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(pyridin-4-ylmethyl)thio]butanoyl} -fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-[(4-fluorbenzyl)sulfonyl]-3-methylbutanoyl}-4-fiuorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(3-fenoxybenzyl)sulfonyl]-butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
• · ····
- 12 9 9 9 9
9 9-9 9
9 9 9 9 9
9 9 9 9 9
99 99 99 9999 • ·
9 9
9999 (25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(3-fenoxybenzyl)thio]butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-((2R)-2-amino-3-{[(5-chlor-1,1-dioxido-1-benzothien-3-yl)-methyl]sulfonyl}-3-methylbutanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-[(2,1,3-benzoxadiazol-5-ylmethyl)thio]-3-methylbutanoyl-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(pyridin-4-ylmethyl)sulfonyl]-butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-3-pyridin-4-ylpropanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-3-pyridin-3-ylpropanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-3-piperidin-4-ylpropanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril dihydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-3-piperidin-3-ylpropanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril dihydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-3-piperidin-2-ylpropanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril dihydrochlorid;
(25.45) -1-{(2S)-2-amino-3~[1-(isopropylsulfonyl)piperidin-4-yl]-propanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2S)-2-amino-3-[1-(4-methylfenylsulfonyl)piperidin-4-yl]-propanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2S)-2-amino-3-[1-(isopropylsulfonyl)piperidin-3-ylj-propanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2S)-2-amino-3-[1-(4-methylfenylsulfonyl)piperidin-3-yl]-propanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
φφ φφφ φφ φ
- 13 φ φ φφφφ φ φ φ φφφ φφφφ φφ φ (25.45) -1-[(2S)-2-amino-3-(1-benzothien-3-yl)propanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2S)-2-amino-3-methyl-3-[4-(trifluormethyl)fenyl]butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid; a (3R)-3-amino-4-[(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpyrrolidin-1-yl]-2-methyl-4-oxobutan-2-sulfonová kyselina.
Další provedení předkládaného vynálezu zahrnuje farmaceutické prostředky obsahující sloučeninu podle předkládaného vynálezu. Farmaceutický prostředek dále s výhodou obsahuje farmaceuticky přijatelný nosič.
Další provedení předkládaného vynálezu zahrnuje způsob inhibice proteázy s místem štěpení za prolinem/alaninem podáváním sloučeniny podle předkládaného vynálezu. Proteáza s místem štěpení za prolinem/alaninem je s výhodou serinová proteáza. Výhodněji je serinovou proteázou dipeptidylpeptidáza. Výhodněji je dipeptidylpeptidázou DPP-II nebo DPP-IV.
V dalším provedení předkládaného vynálezu zahrnuje způsob léčení nebo prevence metabolických onemocnění, gastrointestinálních poruch, virových onemocnění, zánětlivých onemocnění, diabetů, obezity, hyperlipidemie, onemocnění kůže nebo slizničních membrán, lupénky, onemocnění střev, zácpy, autoimunitních onemocnění, encefalomyelitidy, onemocnění podmíněných komplementem, glomerulonefritidy, lipodystrofie, poškození tkání, psychosomatických, depresivních a neuropsychiatrických poruch, infekce HIV, alergií, zánětu, artritidy, odmítnutí transplantátů, vysokého krevního tlaku, městnavého selhání srdce, tumorů a potratů indukovaných stresem podáváním sloučeniny podle předkládaného vynálezu. Sloučeniny podle vynálezu se s výhodou podávají pro léčení nebo prevenci diabetů.
·· 999
- 14 • 9
9999
9 9
9999
Další provedení předkládaného vynálezu zahrnuje použití sloučeniny podle předkládaného vynálezu při výrobě léčiva pro inhibici proteázy s místem štěpení za prolinem/alaninem. Proteázou s místem štěpení za prolinem/alaninem je s výhodou serinová proteáza. Serinovou proteázou je s výhodou dipeptidylpeptidáza. Výhodněji je dipeptidylpeptidázou DPP-II nebo DPP-IV.
Další provedení předkládaného vynálezu zahrnuje použití sloučeniny podle předkládaného vynálezu pro výrobu léčiva pro léčení nebo prevenci metabolických onemocnění, gastrointestinálních poruch, virových onemocnění, zánětlivých onemocnění, diabetů, obezity, hyperlipidemie, onemocnění kůže nebo slizničních membrán, lupénky, onemocnění střev, zácpy, autoimunitních onemocnění, encefalomyelitidy, onemocnění podmíněných komplementem, glomerulonefritidy, lipodystrofie, poškození tkání, psychosomatických, depresivních a neuropsychiatrických poruch, infekce HIV, alergií, zánětu, artritidy, odmítnutí transplantátů, vysokého krevního tlaku, městnavého selhání srdce, tumorů a potratů indukovaných stresem.
Další provedení předkládaného vynálezu zahrnuje sloučeninu podle předkládaného vynálezu pro použití jako aktivní léčebné látky. Sloučenina podle předkládaného vynálezu může být navíc použita při výrobě léčiva pro inhibici serinové proteázy. Toto použití je s výhodou pro výrobu léčiva pro léčení nebo prevenci metabolických onemocnění, gastrointestinálních poruch, virových onemocnění, zánětlivých onemocnění, diabetů, obezity, hyperlipidemie, onemocnění kůže nebo slizničních membrán, lupénky, onemocnění střev, zácpy, autoimunitních onemocnění, encefalomyelitidy, onemocnění podmíněných komplementem, glomerulonefritidy, lipodystrofie, poškození tkání, psychosomatických, depresivních a neuropsychiatrických poruch, infekce HIV, alergií, zánětu, artritidy, odmítnutí transplantátů, vysokého krevního tlaku, městnavého selhání srdce, tumorů a potratů indukovaných stresem.
- 15 •Φ φφφ·
ΦΦ ΦΦ ·· ·
ΦΦ φ ΦΦΦΦ ΦΦΦ
ΦΦ ΦΦ · ΦΦΦΦ φ ΦΦΦ φ φ ΦΦ φφφφφ φφφ ΦΦΦ ΦΦΦ
ΦΦΦΦ ΦΦ ΦΦ ΦΦΦΦ ΦΦ ·
Podrobný popis výhodného provedení
Termín „alkyl“ znamená přímý nebo rozvětvený řetězec nasyceného alifatického uhlovodíku, který může být popřípadě substituovaný, přičemž je možná vícenásobná substituce. Příklady skupiny „alkyl“ zahrnují bez omezení methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, t-butyl, n-pentyl, isobutyl, apod.
Jak se v této přihlášce používá, výhodný počet atomů uhlíku bude vyjádřen například výrazem „Cx-Cy alkyl“, který označuje alkylovou skupinu, jak je zde definována, obsahující uvedený počet atomů uhlíku. Podobná terminologie bude platit i pro další výhodná rozmezí.
Termín „alkylen“ označuje dvojvazný alifatický uhlovodíkový radikál s přímým nebo rozvětveným řetězcem, který může být popřípadě substituovaný, přičemž je možná vícenásobná substituce. Příklad skupiny „alkylen“ zahrnuje, bez omezení, methylen, zejména -CH2-.
Termín „alkenyl“ označuje přímý nebo rozvětvený alifatický uhlovodík, obsahující jednu nebo více dvojných vazeb uhlík-uhlík, který může být popřípadě substituovaný, přičemž je možná vícenásobná substituce. Příklady zahrnují bez omezení vinyl apod.
Jak se zde používá, termín „alkenylen“ označuje dvojvazný alifatický uhlovodíkový radikál s přímým nebo rozvětveným řetězcem, obsahující jednu nebo více dvojných vazeb uhlík-uhlík, který může být popřípadě substituovaný, přičemž je možná vícenásobná substituce. Příklad skupiny „alkenylen“ zahrnuje, bez omezení, vinylen, zejména -CH=CH-.
Jak se zde používá, termín „alkinyl“ označuje přímý nebo rozvětvený alifatický uhlovodík obsahující jednu nebo více trojných vazeb, které mohou být popřípadě substituovány, přičemž je možná
- 16 φφ φφφφ • φ φ φ • φ Φ «ΦΦΦ φ φ φ Φ φ • φφφφ φ φφφ φφφ φφφφ · φ φφ φφφφ φ φ φ φ φφφ φ ΦΦΦΦ· φφφ φφ φ vícenásobná substituce. Příklady skupiny „alkinyl“, jak se zde používá, zahrnují bez omezení ethinyl apod.
Jak se zde používá, termín „alkinylen“ označuje dvojvazný alifatický uhlovodíkový radikál s přímým nebo rozvětveným řetězcem, obsahující alespoň jednu trojnou vazbu uhlík-uhlík, který může být dále substituovaný, přičemž je možná vícenásobná substituce. Příklad skupiny „alkinylen“ zahrnuje bez omezení ethinylen, zejména -Q=C-.
Termín „aryl“ označuje aromatický kruhový systém, jako je popřípadě substituovaný benzenový kruhový systém, jako je fenyl. Tento termín zahrnuje fúzované systémy, kde jeden nebo více popřípadě substituovaných benzenových kruhů tvoří například anthracenové, fenanthrenové, nebo naftalenové kruhové systémy. Termín zahrnuje kruh nebo kruhy popřípadě substituované, přičemž je možná vícenásobná substituce, a také zahrnuje případnou alkylenovou propojovací skupinu, jako je Ci-C6 alkylen, prostřednictvím které může být arylová skupina navázána. Příklady skupiny „aryl“ zahrnují bez omezení fenyl, benzyl, 2-naftyl, 1-naftyl, bifenyl stejně jako jejich substituované deriváty.
Termín „heteroaryl“ označuje monocyklický aromatický kruhový systém, nebo fúzovaný bicyklický aromatický kruhový systém obsahující dva nebo více aromatických kruhů. Tyto heteroarylové kruhy obsahují jeden nebo více atomů dusíku, síry, a/nebo atomů kyslíku, kde přípustnými substituenty heteroatomů mohou být N-oxidy, oxidy a dioxidy síry, přičemž je možná vícenásobná substituce. Tento termín zahrnuje kruh nebo kruhy, které mohou být popřípadě substituované, přičemž je možná vícenásobná substituce, a také zahrnuje případnou alkylenovou propojovací skupinu, jako je Ci-C6 alkylen, prostřednictvím které může být heteroarylová skupina navázána. Příklady skupiny „heteroaryl“, které se zde používají, zahrnují furan, thiofen, pyrrol, imidazol, pyrazol, triazol, tetrazol, thiazol, oxazol, isoxazol, oxadiazol, thiadiazol, isothiazol, pyridin, ·· ····
- 17 • · · · · ···· pyridazin, pyrazin, pyrimidin, chinolin, isochinolin, benzofuran, benzothiofen, indol, indazol, a jejich substituované varianty.
Jak se zde používá, termín „cykloalkyl“ označuje mono- nebo bicyklický uhlovodíkový kruhový systém, který může být dále substituovaný, přičemž je možná vícenásobná substituce, a který popřípadě zahrnuje alkylenovou propojovací skupinu, prostřednictvím které může být cykloalkylová skupina navázána. Příklady skupin „cykloalkyl“ zahrnují bez omezení cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl a cykloheptyl. Jestliže jsou přítomny substituenty, jedním výhodným místem substituentu cykloalkylových skupin podle předkládaného vynálezu je poloha „1“. Pro ilustraci a bez omezení je výhodné umístění substituentu dále reprezentováno substituentem označeným jako „R“:
R nebo obecněji
Termín „cykloalkyl“ zahrnuje přemostěné nebo fúzované kruhové systémy jako je hydrindan, dekaiin, nebo adamantyi. Pro usnadnění odkazů zahrnuje tento termín také fúzované systémy cykíoalkyl/aryl, kde je například cykloalkyl, jako je cyklohexyl, fúzovaný s aromatickým kruhem jako je benzenový kruh, za vytvoření skupin jako je ·· ···· • · · · · · · ··· ·· · · · · · · · « ···· ·······«
-1Η- · ·· ··· ·· · 1 ··♦· ·· ·· ···· ·· ·
Jak se zde používá, termín „heterocyklický“ nebo termín „heterocyklyl“ označuje heterocyklický kruh, s výhodou 3 až 12-členný, který je buď nasycený nebo má jeden nebo více stupňů nenasycenosti. Tyto heterocyklické kruhy obsahují jeden nebo více heteroatomů, jako je atom dusíku, síry, a/nebo kyslíku, kde přípustné substituenty heteroatomů jsou N-oxidy, oxidy síry a dioxidy síry. Jak se zde používá, heterocyklické skupiny mohou být popřípadě substituované, přičemž je možná vícenásobná substituce, a také zahrnují případnou alkylenovou propojovací skupinu jako je C1-C6 alkylen, prostřednictvím které může být skupina heterocyklyl navázána. Tento kruh může být popřípadě fúzovaný s jedním nebo více dalšími „heterocyklickými“ kruhy, jedním nebo více arylovými kruhy nebo jedním nebo více cykloalkylovými kruhy. Příklady skupiny „heterocykl“ zahrnují bez omezení tetrahydrofuran, pyran, 1,4-dioxan, 1,3-dioxan, piperidin, pyrrolidin, morfolin, tetrahydrothiopyran, tetrahydrothiofen, apod.
Termín „halogen“ označuje fluor, chlor, brom, nebo jod.
Termín „haloalkyl“ označuje alkylovou skupinu, jak je zde definována, která je substituovaná alespoň jedním atomem halogenu. Neomezující příklady skupiny „haloalkyl“ zahrnují methyl, ethyl, propyl, isopropyl, n-butyl a t-butyl substituovaný nezávisle jedním nebo více atomy halogenu, jako např. fluor, chlor, brom, a/nebo jod. Termín „haloalkyl“ by měl být interpretován tak, aby zahrnoval i takové substituenty jako perfluoralkyl, například trifluormethyl, CF3, apod.
Jak se zde používá, termín „haloalkoxy“ označuje skupinu -ORa, kde Ra je haloalkyl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „alkoxy“ označuje skupinu -ORa, kde Ra je alkyl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „aryloxy“ označuje skupinu -ORb, kde Rb je aryl, jak je zde definováno.
Jako příklad platný v rámci celého popisu, protože termín „aryl“ ·« ·«·· • · ·· · «« · · · · · ··· • · ·· · ···· • *··········· ή Q ~ ··« *·· · · · • ···· ·· ·· ···· ·· · zahrnuje popřípadě substituované arylové skupiny, termín „aryloxy“ zahrnuje popřípadě substituované skupiny aryloxy. Případná substituce platí pro všechny zde definované výrazy, kde je substituce možná. Dále, jak definováno výše, termín „aryl“ zahrnuje arylové skupiny navázané přes alkylenovou skupinu. Termíny jako „aryloxy“ apod. by tedy měly zahrnovat arylové skupiny navázané přes alkylen. Jako příklad, který však nemá být omezující, je možno uvést jako skupinu aryloxy skupinu -ORb, kde Rb je benzyl.
Jak se zde používá, termín „heteroaryloxy“ označuje skupinu -ORb, kde Rb je heteroaryl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „alkoxykarbonyl“ označuje skupinu -C(O)ORa, kde Ra je alkyl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „aryloxykarbonyl“ označuje skupinu -C(O)ORa, kde Ra je aryl jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „heteroaryloxykarbonyl“ označuje skupinu -C(O)ORa, kde Ra je heteroaryl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „alkoxythiokarbonyl“ označuje skupinu -C(S)ORa, kde Ra je alkyl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „aryloxythiokarbonyl“ označuje skupinu -C(S)ORa, kde Ra je aryl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „heteroaryioxythiokarbonyl“ označuje skupinu C(S)ORa, kde Ra je heteroaryl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „oxo“ označuje skupinu =0.
Jak se zde používá, termín „merkapto“ označuje skupinu -SH.
Jak se zde používá, termín „thio“ označuje skupinu -S-.
Jak se zde používá, termín „sulfinyl“ označuje skupinu -S(0)-.
Jak se zde používá, termín „sulfonyl“ označuje skupinu -S(0)2-. Jak se zde používá, termín „alkylthio“ označuje skupinu -SRa, ·« ···· • ·
- 20 • ♦ · • · • · · • · · ···· ·· kde Ra je alkyl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „arylthio“ označuje skupinu -SRb, kde Rb je aryl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „heteroarylthio“ označuje skupinu -SRb, kde Rb je heteroaryl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „alkylsuIfinyl“ označuje skupinu -S(O)Ra, kde Ra je alkyl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „arylsulfinyl“ označuje skupinu -S(O)Rb, kde Rb je aryl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „heteroarylsulfinyl“ označuje skupinu -S(O)Rb, kde Rb je heteroaryl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „alkylsulfonyl“ označuje skupinu -S(O)2Ra, kde Ra je alkyl jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „cykloalkylsulfonyl“ označuje skupinu -S(O)2Ra, kde Ra je cykloalkyl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „arylsulfonyl“ označuje skupinu -S(O)2Rb, kde Rb je aryl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „heteroarylsulfonyl“ označuje skupinu -S(O)2Rb, kde Rb je heteroaryl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „aminosulfonyl“ označuje skupinu -S(O)2NH2.
Jak se zde používá, termín „kyano“ označuje skupinu -CN.
Jak se zde používá, termín „kyanoalkyl“ označuje skupinu -RaCN, kde Ra znamená alkylen, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „karboxy“ označuje skupinu -COOH.
Jak se zde používá, termín „karbamoyl“ označuje skupinu -C(O)NH2.
Jak se zde používá, termín „alkylkarbamoyl“ označuje skupinu ·· ···· ·· · ·· ·· • « · ··«· · · · • · 9 9 9 9 · · ·
- . · · · · · «······· _ 21 - ······ ··· ···· ·· ·· ···· ·· ·
-C(0)N(Ra)2, kde jedna skupina Ra je alkyl a další Ra je nezávisle H nebo alkyl.
Jak se zde používá, termín „arylkarbamoyl“ označuje skupinu -C(O)N(Ra)2, kde jedna skupina Ra je aryl a druhá Ra je nezávisle H nebo aryl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „heteroarylkarbamoyl“ označuje skupinu -C(O)N(Ra)2, kde jedna skupina Ra je heteroaryl a druhá Ra je nezávisle H nebo heteroaryl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „thiokarbamoyl“ označuje skupinu -C(S)NH2.
Jak se zde používá, termín „alkylthiokarbamoyl“ označuje skupinu -C(S)N(Ra)2, kde jedna skupina Ra je alkyl a další Ra je nezávisle H nebo alkyl.
Jak se zde používá, termín „arylthiokarbamoyl“ označuje skupinu -C(S)N(Ra)2, kde jedna skupina Ra je aryl a druhá Ra je nezávisle H nebo aryl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „heteroarylthiokarbamoyl“ označuje skupinu -C(S)N(Ra)2, kde jedna skupina Ra je heteroaryl a druhá Ra je nezávisle H nebo heteroaryl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „amino“ označuje skupinu -NH2.
Jak se zde používá, termín „alkylamino“ označuje skupinu -N(Ra)2, kde jedna skupina Ra je alkyl a další Ra je nezávisle H nebo alkyl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „cykloalkylamino“ označuje skupinu -N(Ra)2, kde jedna skupina Ra je cykloalkyl a druhá Ra je nezávisle H nebo cykloalkyl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „arylamino“ označuje skupinu -N(Ra)2, kde jedna skupina Ra je aryl a druhá Ra je nezávisle H nebo aryl, jak je zde definováno.
•0 0·»·
0 0000 »00 • 0 · 0 0 0000 0 0000 0000 000« _ 99 _ 000000 0»0
0000 00 00 0000 00 0
Jak se zde používá, termín „heteroarylamino“ označuje skupinu -N(Ra)2, kde jedna skupina Ra je heteroaryl a druhá Ra je nezávisle H nebo heteroaryl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „acyi“ označuje skupinu -C(O)Ra, kde Ra je alkyl, aryl, heteroaryl, cykloalkyl, nebo heterocyclyl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „thioacyl“ označuje skupinu -C(S)Ra, kde Ra je alkyl, aryl, heteroaryl, cykloalkyl, orheterocyclyl, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, termín „hydroxy“ označuje skupinu -OH.
Jak se zde používá, termín „hydroxyalkyl“ označuje skupinu -RaOH, kde Ra znamená alkylen, jak je zde definováno.
Jak se zde používá, výraz „popřípadě substituovaný“ znamená případnou substituci, která může být jednoduchá nebo vícenásobná, přičemž jako termíny jsou zde definovány skupiny acyl; alkyl; alkenyl; alkinyl; alkylsulfonyl; alkoxy; kyano; halogen; haloalkyl; hydroxy; nitro; aryl, který může být dále substituovaný skupinou acyl, alkoxy, alkyl, alkenyl, alkinyl, alkylsulfonyl, kyano, halogen, haloalkyl, hydroxy, nebo nitro; heteroaryl, který může být dále substituovaný skupinou acyl, alkoxy, alkyl, alkenyl, alkinyl, alkylsulfonyl, kyano, halogen, haloalkyl, hydroxy, nebo nitro; arylsulfonyl, který může být dále substituovaný skupinou acyl, alkoxy, alkyl, alkenyl, alkinyl, alkylsulfonyl, kyano, halogen, haloalkyl, hydroxy, nebo nitro; heteroarylsulfonyl, který může být dále substituovaný skupinou acyl, alkoxy, alkyl, alkenyl, alkinyl, alkylsulfonyl, kyano, halogen, haloalkyl, hydroxy, nebo nitro; aryloxy, který může být dále substituovaný skupinou acyl, alkoxy, alkyl, alkenyl, alkinyl, alkylsulfonyl, kyano, halogen, haloalkyl, hydroxy, nebo nitro; heteroaryloxy, který může být dále substituovaný skupinou acyl, alkoxy, alkyl, alkenyl, alkinyl, alkylsulfonyl, kyano, halogen, haloalkyl, hydroxy, nebo nitro; -R’OR'R4; nebo -NR4R5; kde při každém výskytu skupina R’ je alkylen, alkenylen, nebo alkinylen, a R4 a R5 jsou vždy ·· 9999
- 23 9 9 9
9 • 9
9 9
9999 99
9 9 9
9 9
9«9 9
9 9
9999
9 « 9 9
9 9 9
9 9 9999
9 9
9 nezávisle zvoleny ze skupiny H, alkyl, alkenyl, alkinyl, cykloalkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, alkylsulfonyl, arylsulfonyl, nebo heteroarylsulfonyl, kde při každém výskytu může být tato skupina aryl nebo heteroaryl substituována jednou nebo více skupinami acyl, alkoxy, alkyl, alkenyl, alkylsulfonyl, kyano, halogen, haloalkyl, hydroxy, nebo nitro, nebo R4 a R5 mohou být spojeny za vytvoření kruhu, popřípadě obsahujícího další heteroatomy, popřípadě obsahujícího jeden nebo více stupňů nenasycenosti, a popřípadě nesoucího další substituenty skupiny acyl, alkoxy, alkyl, alkenyl, alkinyl, alkylsulfonyl, kyano, halogen, haloalkyl, hydroxy, nebo nitro.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou krystalizovat ve více než jedné formě, což je vlastnost známá jako polymorfismus. Všechny polymorfní formy („polymorfy“) spadají do rámce předkládaného vynálezu. Polymorfismus může nastat obecně jako odpověď na změny teploty nebo tlaku nebo obou, a může být také důsledkem změn při postupu krystalizace. Polymorfy mohou být rozlišovány na základě různých fyzikálních vlastností, které jsou známé v oboru, jako jsou rozložení vrcholů rentgenové difrakce, rozpustnost a teplota tání.
Některé zde popisované sloučeniny obsahují jedno nebo více center chirality, nebo mohou být jinak schopny existovat jako větší počet stereoisomerů. Předkládaný vynález zahrnuje čisté stereoisomery stejně jako směsi stereoisomerů, jako jsou vyčištěné enantiomery/diasteromery nebo enantiomerně/diastereomerně obohacené směsi. V rámci vynálezu jsou také zahrnuty jednotlivé isomery sloučenin jako takové, stejně jako jejich úplně nebo částečně rovnovážné směsi. Předkládaný vynález zahrnuje jednotlivé isomery sloučenin výše uvedených vzorců jako směsi s isomery, ve kterých je převráceno jedno nebo více center chirality.
Jak bylo uvedeno výše, předkládaný vynález zahrnuje soli, solváty a farmaceuticky funkční deriváty sloučenin podle • · • · · · · ·
- 24 • · · · · · předkládaného vynálezu. Soli zahrnují adiční soli, kovové soli, nebo popřípadě alkylované amoniové soli. Příklady těchto solí zahrnují soli s kyselinou chlorovodíkovou, bromovodíkovou, jodovodíkovou, fosforečnou, sírovou, trifluoroctovou, trichloroctovou, šťavelovou, maleinovou, pyrohroznovou, malonovou, jantarovou, citrónovou, mandlovou, benzoovou, skořicovou, methansulfonovou, ethansulfonovou, pikrovou apod.
Další soli zahrnují soli s lithiem, sodíkem, draslíkem, hořčíkem, apod. Ještě další soli zahrnují acetát, benzensulfonát, benzoát, bikarbonát, bisulfát, bitartrát, borát, bromid, kalciumedetát, kamsylát, karbonát, chlorid, klavulanát, citrát, dihydrochlorid, edetát, edisylát, estolát, esylát, fumarát, gluceptát, glukonát, glutamát, glykolylarsanilát, hexylresorcinát, hydrabamin, hydroxynaftoát, isethionát, laktát, laktobionát, laurát, malát, mandlát, mesylát, methylbromid, methylnitrát, methylsulfát, maleát monodraselný, mukát, napsylát, nitrát, methylglukamin, pamoát (embonát), palmitát, pantothenát, fosfát/difosfát, polygalakturonát, draselná sůl, salicylát, sodná sůl, stearát, subacetát, tannát, tartrát, teoklát, tosylát, triethjodid, trimethylamonium a valerát. Je také možné odkázat na časopis Journal of Pharmaceutical Science, 1997, 66, 2, který je zde zařazen odkazem, a ve kterém se popisují různé soli.
Jak se zde používá, termín „solvát“ označuje komplex s proměnnou stechiometrií, vytvořený rozpuštěnou látkou nebo solí nebo farmaceuticky funkčním derivátem a rozpouštědlem. Tato rozpouštědla by pro účely vynálezu neměla interfererovat s biologickou aktivitou rozpuštěné látky. Příklady rozpouštědel zahrnují bez omezení vodu, methanol, ethanol a kyselinu octovou. Použité rozpouštědlo je s výhodou farmaceuticky přijatelné rozpouštědlo. Příklady farmaceuticky přijatelných rozpouštědel zahrnují vodu, ethanol a kyselinu octovou.
Termín „farmaceuticky funkční derivát“ znamená farmaceuticky
- 25 ··· · ·· přijatelný derivát sloučeniny podle předkládaného vynálezu, např. ester nebo amid, který je po podání savci schopen poskytnout (přímo nebo nepřímo) sloučeninu podle předkládaného vynálezu, nebo její aktivní metabolit. Tyto deriváty jsou známé odborníkům v oboru, aniž by bylo potřeba provádět další experimenty. Odkázat je však možno na publikaci Burger’s Medicinal Chemistry and Drug Discovery, 5. vydání, díl 1: Principles and Practice, která se zařazuje odkazem, z hlediska znalostí o farmaceuticky funkčních derivátech.
I když se sloučeniny podle předkládaného vynálehzu mohou podávat jako samostatné chemikálie, tyto sloučeniny se s výhodou předkládají jako účinná složka obsažená ve farmaceutické formulaci, jak je v oboru známo. Předkládaný vynález tedy dále zahrnuje farmaceutickou formulaci obsahující sloučeninu podle předkládaného vynálezu, enbo její sůl, solvát nebo farmaceuticky funkční derivát, spolu s jedním nebo více farmaceuticky přijatelnými nosiči. V případě potřeby mohou být ve farmaceutické formulaci zahrnuty také další terapeutické a/nebo preventivní („účinné“) složky. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být například kombinovány s jinými antidiabeticky účinnými látkami, jako je jeden nebo více z následujících prostředků: inzulín, inhibitory α-glukosidázy, biguanidy, látky podporující sekreci inzulínu nebo látky zvyšující citlivost na inzulín. Neomezující příklady inhibitorů α-glukosidázy zahrnují akarbózu, emiglitát, miglitol a voglibózu. Neomezující příklady biguanidů zahrnují metformin, buformin a fenformin. Neomezující příklady látek podporujících sekreci inzulínu zahrnují sulfonylmočoviny. Neomezující příklady látek zvyšujících citlivost na inzulín zahrnují ligandy receptoru aktivovaného peroxisomovým proliferátorem (PPAR), jako jsou agonisté PPAR-γ, např. prostředky Actos™ a Avandia™.
Mezi formulace podle předkládaného vynálezu patří prostředky, které jsou zvláště formulovány pro orální, bukální, parenterální, transdermální, inhalační, intranazální, transmukosální, implantační • ·
- 26 • · · ····· • · · · • · · · · 9 nebo rektální podávání. Mezi různými způsoby podávání je typicky výhodné orální podávání. Pro orální podávání mohou tablety, kapsle a kapsle ve tvaru tablet obsahovat běžné pomocné látky jako jsou pojivá, kluzné látky, rozvolňovadla a/nebo smáčedla. Neomezující příklady pojiv zahrnují sirup, akácii, želatinu, sorbitol, tragakant, sfiz nebo škrob, nebo polyvinylpyrrolidon (PVP). Neomezující příklady plniv zahrnují např. laktózu, cukr, mikrokrystalickou celulózu, kukuřičný škrob, fosforečnan vápenatý nebo sorbitol. Neomezující příklady kluzných látek zahrnují např. stearan hořečnatý, kyselinu stearovou, talek, polyethylenglykol nebo oxid křemičitý. Neomezující příklady rozvolňovadel zahrnují např. bramborový škrob nebo sodnou sůl glykolátu škrobu. Neomezující příklady smáčedel zahrnují iauryisulfát sodný. Tablety mohou být navíc potahovány způsoby známými v oboru.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být alternativně součástí orálních kapalných prostředků jako jsou vodné nebo olejové suspenze, roztoky, emulze, sirupy nebo elixíry. Navíc mohou být formulace obsahující tyto sloučeniny předkládány ve formě suchého produktu určeného pro rekonstituci vodou nebo jiným vhodným vehikulem před použitím. Kapalné preparáty mohou obsahovat běžná aditiva. Neomezující příklady těchto aditiv zahrnují suspendující prostředky jako je sorbitolový sirup, methylcelulóza, sirup glukóza/cukr, želatina, hydroxyethylcelulóza, karboxymethylcelulóza, gel stearanu hlinitého nebo hydrogenované jedlé tuky. Dále mohou být přidány emulgátory jako je lecitin, sorbitolmonooleát nebo akácie, nevodná vehikula (která mohou zahrnovat jedlé oleje) jako je mandlový olej, frakcionovaný kokosový olej, estery olejů, propylenglykol nebo ethylalkohol. Do prostředku mohou být také přidány ochranné látky jako jsou methyl- nebo propyl-phydroxybenzoáty nebo kyselina sorbová. Tyto preparáty mohou být také formulovány jako čípky, které např. obsahují běžné čípkové základy jako kakaové máslo nebo jiné glyceridy.
• ·
- 27 Formulace podle předkládaného vynálezu mohou být sestaveny tak, aby byly vhodné pro parenterální podávání injekcí nebo kontinuální infuzí. Formulace pro injekce mohou mít formu čípků, roztoků nebo emulzí v olejových nebo vodných nosičích, a mohou obsahovat formulační pomocné látky jako jsou suspendující, stabilizační a/nebo dispergační látky. Účinná složka může být alternativně v práčkové formě pro rekonstituci vhodným vehikulem, např. sterilní apyrogenní vodou, před použitím.
Prostředky podle vynálezu mohou být také formulovány jako depotní preparáty. Tyto dlouhodobě působící formulace se mohou podávat implantací, např. subkutánně nebo intramuskulárně, nebo intramuskulární injekcí. Sloučeniny podle vynálezu mohou být tedy formulovány s vhodnými polymerními nebo hydrofobními materiály, jako je emulze v přijatelném oleji, iontoměničové pryskyřice nebo omezeně rozpustné deriváty, jako je omezeně rozpustná sůl.
Farmaceutické prostředky mohou být předkládány v jednotkových dávkových formách, které obsahují předem určené množství účinné složky v jednotkové dávce. Taková jednotka může obsahovat určité množství sloučeniny podle předkládaného vynálezu v závislosti na léčeném stavu, způsobu podávání a věku, hmotnosti a stavu pacienta. Příklady těchto množství mohou být formulace obsahující přibližně 0,1 až přibližně 99,9 % účinné složky. Výhodné jednotkové dávkové formulace jsou formulace obsahující předem určenou dávku, jako je denní dávka, nebo její vhodnou část, účinné složky. Tyto farmaceutické formulace mohou být připraveny kterýmkoli způsobem dobře známým ve farmacii.
Jak se zde používá, termín „účinné množství“ znamená množství léčiva nebo farmaceutického prostředku, které vyvolá biologickou nebo léčebnou reakci tkáně, systému, zvířete nebo člověka, která je požadována např. výzkumným pracovníkem nebo klinikem. Termín „terapeuticky účinné množství“ dále znamená jakékoli množství, které • · · ·
- 28 • · · ···· · · · • · · · · · · · · • · · * · · · · ····· ·«· ··· · · · ···» ·· ·· ···· ·· · vede ve srovnání se subjektem, který tímto množstvím není léčen, ke zlepšenému léčení, hojení, prevenci nebo odstranění onemocnění, poruchy nebo vedlejšího účinku, nebo snížení rychlosti postupu onemocnění nebo stavu. Tento termín také ve svém rámci zahrnuje množství účinná pro posílení normální fyziologické funkce.
Terapeuticky účinné množství sloučeniny podle předkládaného vynálezu bude záviset na řadě faktorů, včetně např. věku a hmotnosti živočicha, přesného stavu vyžadujícího léčení a jeho vážnosti, povaze formulace a způsobu podávání. Požadovanou terapeutickou účinnost vždy nakonec určí ošetřující lékař nebo veterinární lékař. Účinné množství soli nebo solvátu, nebo farmaceuticky funkčního derivátu může být určeno jako podíl účinného množství sloučeniny podle předkládaného vynálezu jako takové. Dávkování se může lišit v závislosti na příslušné inhibici DPP-IV pro účely léčení nebo prevence řady metabolických, gastrointestinálních, virových a zánětlivých onemocnění, včetně bez omezení diabetů, obezity, hyperlipidemie, onemocnění kůže nebo slizniční membrány, lupénky, střevních onemocnění, zácpy, autoimunitních onemocnění jako je encefalomyelitida, onemocnění podmíněných komplementem jako je glomerulonefritida, lipodystrofie a poškození tkání, psychosomatických, depresivních a neuropsychiatrických onemocnění, infekce HIV, alergií, zánětu, artritidy, odmítnutí transplantátu, vysokého krevního tlaku, městnavého selhání srdce, tumorů a potratů indukovaných stresem, např. potratů myší indukovaných cytokiny.
Pokud se sloučenina podle předkládaného vynálezu podává ve výše uvedeném rozmezí dávek, nejsou indikovány/očekávány žádné toxikologické účinky.
Následující příklady ilustrují některá provedení předkládaného vynálezu, ale neměly by být považovány za omezující. Jak se zde používá, symboly a konvence používané v těchto způsobech, schématech a příkladech, jsou v souladu s konvencemi používanými
- 29 • · · · · · · · • · · · · · · ····· • · · ♦ · · · • · · · · · · * ·>· » v současné vědecké literatuře, jako je např. Journal of the American Chemical Society nebo Journal of Biological Chemistry. Pokud není uvedeno jinak, všechny výchozí látky byly získány od komerčních dodavatelů a použity bez dalšího čištění.
Spektra 1H NMR byla zaznamenávána na přístroji Varian VXR300, Varian Unity-300, Varian Unity-400 nebo General Electric QE300. Chemické posuvy jsou vyjádřeny jako části v milionu (ppm, jednotky δ). Vazebné konstanty jsou v jednotkách Hertz (Hz). Rozštěpení vrcholů popisuje zdánlivé multiplicity a označuje se jako s (singlet), d (dublet), t (triplet), q (kvartet), m (multiplet), br (široký).
Hmotnostní spektra s nízkým rozlišením (MS) byla zaznamenávána na spektrometru JOEL JMS-AX505HA, JOEL SX-102, nebo SCIEX-APliii; hmotnostní spektra s vysokým rozlišením byla získána na spektrometru JOEL SX-102. Všechna hmotnostní spektra byla prováděna použitím metod elektrorozprašovací ionizace (ESI), chemické ionizace (Cl), nárazy elektronů (El) nebo nárazy rychlých atomů (FAB). Infračervená (IR) spektra byla získána na spektrometru Nicolet 510 FT-IR s použitím 1 mm kyvety NaCI. Všechny reakce byly monitorovány chromatografií na tenké vrstvě, na deskách 0,25 mm E. Merck silica gel plates (60F-254), přičemž vizualizace byla prováděna UV zářením, 5% ethanolovým roztokem kyseliny fosfomolybdenové nebo roztokem p-anisaldehydu. Blesková chromatografie na koloně byla prováděna na silikagelu (230 - 400 mesh, Merck). Optické rotace byly zjišťovány na polarimetru Perkin Elmer Model 241 Polarimeter. Teploty tání byly zjišťovány na zařízení Mel-Temp II a jsou nekorigované.
Zařazeny jsou názvy IUPAC pro další identifikaci konkrétních sloučenin podle předkládaného vynálezu. Zde uvedené názvy IUPAC by v žádném případě neměly omezovat rozsah předkládaného vynálezu.
»» «φφφ • ♦ * · • ·
- 30 φ φ·· φ φ · · φ « · φ φ • · · · φ φ · · φ φφφφ φφ «φ φφφ» «φ ·
Příklady provedení vynálezu
Experimentální část
V souladu s předkládaným vynálezem a jak se uvádí dále, může být provedení sloučenin podle předkládaného vynálezu připraveno reakcí sloučeniny vzorce II s a- nebo β-aminokarboxylátem nebo s ccnebo β-aminoaktivovaným karboxyiátem, kde obě tyto skupiny sloučenin se zde budou obecně označovat jako aminokarboxyláty, za standardních vazebných podmínek, např. s HATU, DMF, Hunigovou bází.
1) chráněný aminokarboxylát F vazebná činidla
->
2) činidla odstraňující ochranné skupiny
CN
CN vzorec vzorec
Konkrétněji může sloučenina vzorce II reagovat s aminokarboxylátem, kde aminokarboxylát je vhodně chráněný, například na α-dusíku, vhodnou ochrannou skupinou jako je například tbutylkarboxylová ochranná skupina.
V jiném provedení sloučenina vzorce II může být ponechána reagovat s aminoaktivovaným karboxyiátem, jako je například ester Nhydroxysukcinimidu nebo chlorid kyseliny, kde amínoaktivovaný karboxylát je vhodně chráněný, například na α-dusíku, vhodnou ochrannou skupinou, jako je například t-butylkarboxylová ochranná skupina. Odstranění ochranné skupiny za vhodných podmínek, jako je například kyselina trifluoroctová pro odstranění skupiny t-butylkarboxy, poskytne sloučeniny vzorce (I).
Odkazy na další podrobnosti týkající se přípravy aminokarboxylátů pro použití při výrobě sloučenin podle • ·
- 31 • ·· · « · · · ··· · · ·· · · 9 · · ··· * · ♦ ··· ··»· «· ···· «· · předkládaného vynálezu, je možno nalézt v dokumentech WO 95/15309 a WO 98/19998, které se zařazují co se týče přípravy těchto reaktantů odkazem.
Příklad meziproduktu 1
CN pTsOH (2S,4S)-4-Fluor-2-pvrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát
A. Methyl-(2S,4R)-4-hvdroxv-2-pvrrolidinkarboxylát hydrochlorid
K MeOH roztoku (420 ml) obsahujícímu L-hydroxyprolin (62,67 g, 478 mmol) ochlazenému v lázni ledové vody byl po kapkách přidán thionylchiorid (58,6 g, 492,3 mmol). Po ukončení přidávání byla suspenze míchána při teplotě laboratoře po dobu 2 h. Směs byla potom zahřívána pod zpětným chladičem 6 h a potom byla ochlazena na laboratorní teplotu a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Zbylá pevná látka byla evakuována na vysoké vakuum, za získání 86,03 g (474 mmol, 99% výtěžek) sloučeniny A jako bílé pevné látky.
1H NMR (d4~MeOH) 400 MHz δ 4,62 - 4,57 (m, 2H), 3,85 (s, 3H), 3,43 (dd, 1H, J = 12,2, 3,7 Hz), 3,30 (m,1H), 2,41 (dd, 1H, J = 13,6,
7,6 Hz), 2,19 (m, 1H) ppm.
B. 1-Terc-butyl-2-methyl-(2S,4R)-4-hydroxy-t ,2-pyrrolidindikarboxylát
K roztoku CH2CI2 (1,4 I) obsahujícímu sloučeninu A (88,67 g, 0,49 mol) a di-tbutyldikarbonát (109,8 g, 0,50 mol) byl přidáván při 0 °C po kapkách tríethylamin (123,6 g, 1,22 mol) v průběhu 1,5 h. Získaný roztok byl potom ponechán pomalu ohřát na laboratorní
- 32 • 0 00 0 000«
0 · * 0 0 00 00000 • 00 000 000 «000 00 00 000« 00 « teplotu přes noc. Rozpouštědlo bylo potom odstraněno ve vakuu a ke zbylé pevné látce byl přidán Et2O. Pevná látka byla oddělena vakuovou filtrací a promyta důkladně Et2O. Z filtrátu bylo potom rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a byl rozpuštěn v CH2CI2. Organické podíly byly promyty nasyceným NaCI a nasyceným roztokem NaHCO3 a potom sušeny nad MgSO4. Filtrace a odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytly světlý žlutý olej, který po evakuování ve vysokém vakuu -15 min ztuhl. K získané pevné látce bylo přidáno 500 ml hexanů a byla míchána přes noc. Pevná látka byla oddělena vakuovou filtrací a evakuována ve vysokém vakuu za získání 104,5 g (0,43 mol, 87% výtěžek) sloučeniny B jako bílé pevné látky.
1H NMR(d4-MeOH) 400 MHz δ 4,37 - 4,32 (m, 2H), 3,72 - 3,71 (m, 3H), 3,51 (m, 1H), 3,43 (m, 1H), 2,23 (m, 1H), 2,02 (m, 1H), 1,42 (m, 9H) ppm.
C. 1 -Terc-butyl-2-methyl-(2S,4S)-4-fluor-1,2-pyrrolidindikarboxylát
Do 2 I baňky obsahující sloučeninu B (124,25 g, 0,51 mol) v 1,25 I 1,2-dichlorethanu, ochlazené na -30 °C, byl přidán čistý DAST (125 g, 0,78 mol). Reakční směs byla pomalu zahřívána na -10 °C v průběhu 1 h a potom byla chladná lázeň odstraněna. Míchání pokračovalo při teplotě laboratoře po dobu 24 h, kdy byl tmavý roztok vlit do dvou 2 I baněk, které obsahovaly rozdrcený led a pevný NaHCO3. Baňky byly periodicky převrazeny a míchány, až do ukončení vývoje CO2 (pozn.: periodicky byl přidáván další pevný NaHCO3). Organická vrstva byla oddělena a vodná vrstva byla extrahována CH2CI2. Po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbylý tmavý olej byl rozpuštěn ve 200 ml EtOAc a potom bylo přidáno 800 ml hexanu. K tomuto roztoku bylo přidáno 100 g SiO2. Po míchání po dobu 30 min byl roztok zfiltrován a SiO2 byl promyt směsí hexany/EtOAe (4:1, -500 ml). Odstranění rozpouštědla ve vakuu a evakuace ve vysokém vakuu přes noc poskytly 121,81 g (0,40 mol,
9 ···· • · ·· « · · 9 9 9 9
QQ ♦ ··♦· 9 9 9 9 9999
- OO - 9 9 9 9 9 9 · 9 9
9999 99 9 · ···» 99 9
97% výtěžek) sloučeniny C jako tmavého oleje.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 5,18 (d (br), 1H, J = 53 Hz), 4,53 (d, 1/2H, J = 9,7 Hz), 4,40 (d, 1/2H, J = 9,4 Hz), 3,87 - 3,59 (m, 2H), 3,73 (s, 3H), 2,51 - 2,28 (m, 2H), 1,46 (s, 3H, rotomer), 1,41 (s, 6H, rotomer) ppm.
D, Kyselina (2S,4S)-1-(terc-butoxvkarbonvl)-4-fluor-2-pyrrolidinkarboxylová
Do 2 I baňky obsahující sloučeninu C (121,8 g, 0,49 mol) v 1,1 I dioxanu bylo přidáno 380 ml H2O, potom hydrát hydroxidu lithného (103,6 g, 2,46 mol) při teplotě laboratoře. Získaný roztok byl míchán po dobu 23 h (pozn.: na základě TLC se reakce jevila ukončená po 5 h) a potom byla největší část dioxanu odstraněna ve vakuu. Zbylý materiál byl rozpuštěn v další H2O a potom bylo přidáno aktivní uhlí. Po 15 min míchání byl roztok zfiltrován přes lože celitu. K filtrátu byl přidán pevný NaCI, dokud se již další nerozpouštěl. Směs byla potom ochlazena v lázni ledové vody a byla okyselena koncentrovaným HCl na pH 3, zatímto teplota roztoku byla udržována mezi 5 až 10 °C. Produkt se začal srážet při pH 4 a po dosažení pH 3 byla světlehnědá pevná látka oddělena vakuovou filtrací. Po evakuování ve vysokém vakuu přes noc byla pevná látka rozpuštěna v CH3CN (1,5 I) a usušena nad MgSO4. Odstranění rozpouštědla ve vakuu a sušení ve vysokém vakuu poskytlo 92,7 g (0,40 mol, 81% výtěžek) sloučeniny jako světlehnědé pevné látky.
1H NMR(d6-DMSO) 400 MHz δ 12,5 (s (br), 1H), 5,22 (d (br), 1H, J = 54 Hz), 4,25 (m, 1H), 3,60 - 3,43 (m, 2H), 2,45 (m, 1H), 2,20 (m, 1H), 1,33 (m, 9H) ppm.
E. Terc-butvl-(2S,4S)-2-(aminokarbonyl)-4-fluor-1-pvrrolidinkarboxylát
Do 2 I trojhrdlé baňky opatřené vzduchem poháněným míchadlem byla přidána sloučenina D (92,7 g, 0,40 mol), CH3CN (1,1 I), di-t-butyldikarbonát (130 g, 0,60 mol) a pyridin (32,4 g, 0,41 mol) při laboratorní teplotě. Po míchání po dobu 20 min byl přidán hydrogenuhličitan amonný (47,2 g, 0,60 mol). Reakční směs byla míchána po dobu 23 h a potom byla většina CH3CN odstraněna ve vakuu. Zbytek byl potom rozpuštěn v CH2CI2 a promyt směsí 1 : 1 1M HCI/nasycený roztok NaCl. Vodná vrstva byla potom extrahována 2 x CH2CI2. Spojené organické vrstvy byly sušeny (MgSO4) a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Světlehnědá pevná látka byla smísena s hexany (~0,5 I) a oddělena vakuovou filtrací. Po evakuování ve vysokém vakuu bylo získáno 68,75 g (0,30 mol, 74% výtěžek) sloučeniny E jako světlehnědé pevné látky. Filtrát po odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytl tmavý olej, který se při analýze 1H NMR jevil jako obsahující další produkt.
1H NMR(de-DMSO) 400 MHz δ 7,21 (s (br), 1/2H), 7,14 (s (br), 1/2H), 6,94 (s (br), 1H), 5,19 (d (br),1 H, J = 54 Hz), 4,11 (m,1H), 3,63 - 3,47 (m, 2H), 2,38 (m, 1H), 2,11 (m,1H), 1,39 (s, 3H, rotomer), 1,34 (s, 6H, rotomer) ppm.
F, Terc-butyl-(2S,4S)-2-kvano-4-fluor-1-pvrrolidinkarboxylát
Do baňky obsahující imidazol (2,93 g, 43,1 mmol) byl přidán pyridin (75 g, 0,9 mol, 15 objemů, vztaženo na hmotnost amidu). Roztok byl potom ochlazen na 0 °C a po míchání po dobu 10 min byl njednou přidán BOC-4-fluorprolinkarboxamid (5,0 g, 21,6 mmol). Roztok byl potom ochlazen na -30 °C (pozn.: pokles teploty pod tuto hodnotu může vést k vytvoření heterogenního roztoku) a v průběhu 5 min byl po kapkách přidán POCI3 (13,2 g, 86,4 mmol). Po ukončení přidávání byla nahrazena lázeň suchý led-aceton lázní s ledovou vodou a míchání pokračovalo při 0 °C 1 h a potom byla směs vlita na • ♦
- 35 ft · «ftftft · • · ftft ft · • ftft • ftftftft ftftftft ft · směs rozdrceného ledu, pevného NaCI a EtOAc. Organická vrstva byla oddělena a vodná vrstva byla extrahována EtOAc (2 x). Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu (pozn.: lázeň rotační odparky byla udržována na <35 °C) a zbytek byl rozpuštěn v EtOAc. Organické podíly byly promyty nasyceným roztokem NaCI a 1M HCI (2 x). Po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu za získání 4,0 g (18,6 mmol, 86% výtěžek) sloučeniny F jako světlehnědé pevné látky.
1H NMR(d4-MeOH) 400 MHz δ 5,32 (d (br), 1H, J = 52 Hz), 4,78 (m, 1H), 3,74 - 3,48 (m, 2H), 2,55 - 2,40 (m, 2H), 1,52 - 1,43 (m, 9H) ppm.
G. (2S,4S)-4-Fluor-2-pyrrolidinkarbonitril 4-methylbenzensulfonát
K roztoku CH3CN (1 I) obsahujícímu sloučeninu F (56,62 g, 0,26 mol) byl přidán hydrát kyseliny p-toluensulfonové (75,4 g, 0,40 mol) při teplotě laboratoře. Po 24 h byl CH3CN odstraněn ve vakuu a potom byl zbylý hnědý olej rozpuštěn v 500 ml EtOAc. V průběhu 1 min se vysrážela pevná látka a roztok byl ochlazen v lázni led-voda a po míchání po dobu 1 h byla pevná látka oddělena vakuovou filtrací. Oddělená pevná látka byla opláchnuta chladným (-20 °C) EtOAc (~500 ml) a potom evakuována ve vysokém vakuu přes noc za získání 60,94 g (0,21 mol, 82% výtěžek) sloučeniny G jako světlehnědé pevné látky.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7,69 (d, 2H, J = 8,1 Hz), 7,23 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 5,52 (dd, 1H, J = 51, 3,4 Hz), 4,96 (dd, 1H, J = 9,8,
3,6 Hz), 3,78 (m, 1H), 3,55 (m, 1H), 2,84 - 2,63 (m, 2H), 2,36 (s, 3H) PPm.
- 36 • # ··♦· * · · * · ♦ · • · · 9 9 9 1 • · · ·· · · · · • * «·99 ·9 ·
Alternativní způsob přípravy pro příklad meziproduktu 1
F. -TsOH
ON (2S,4S)-4-Fluor-2-pvrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát
Terc-butyl (2S,4R)-2-(aminokarbonvl)-4-hydroxvpyrrolidin-1-karboxvlát
K THF roztoku (420 ml) obsahujícímu BOC-L-hydroxyprolin (30,0 g, 129 mmol) a triethylamin (14,4 g, 141,9 mmol), ochlazenému na -15 °C byl po kapkách přidán ethylchloroformát (15,4 g,
141,9 mmol). Získaný roztok byl míchán 10 min, potom bylo přidáno 80 ml 28% NH4OH. Reakce byla ponechána pomalu ohřát na 5 °C v průběhu 2 h a byl přidáván nasycený roztok NH4CI, dokud nezmizela přítomná bílá pevná látka. THF byl oddělen a vodná vrstva extrahována THF. Spojené organické vrstvy byly sušeny (MgSO4) a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Zbylý olej byl smísen s Et2O a a malým množstvím CH2CI2 a MeOH. Po uchování v mrazicím boxu 1 h byla získaná bílá pevná látka oddělena vakuovou filtrací za získání 22,0 g (95,6 mmoi, 74% výtěžek) sloučeniny A.
1H NMR(ds-DMSO) 400 MHz δ 7,33 - 7,29 (d (br), 1H, rotomery),
6,88 - 6,80 (d (br), 1H, rotomery), 4,94 (s (br), 1H), 4,18 (s (br), 1H), 4,04 (m, 1H), 3,35 (m, 1H), 3,21 (m, 1H), 1,99 (m,1H), 1,77 (m, 1H),
1,36 - 1,31 (d, 9H, rotomery) ppm.
B, Terc-butvl-(2S.4R)-2-kyano-4-hvdroxypvrrolidin-1-karboxvlát
K roztoku pyridinu (180 ml) obsahujícímu sloučeninu A (17,89 g,
77,8 mmol) ochlazenému na 20 °C byl po kapkách přidán anhydrid kyseliny trifluoroctové (40,8 g, 194,4 mmol). Po ukončení přidávání « · · · · « ♦ * · · · * * • « * ♦ ♦ ♦ « · · · • t · · · ····
Λ-7 · «··· *······*
- Ο / - ·····♦ « · « ··*· ♦ » ·» ···· ·· · byla reakční směs ponechána ohřát na teplotu laboratoře. Po 6 h byla reakce ukončena H2O a směs byla vlita do EtOAc (přibližně 500 ml). Organické podíly byly promyty nasyceným roztokem NaCl, 1,0M HCI a 2,0 M NaOH, následovalo sušení nad MgSO4. K filtrátu bylo přidáno uhlí a po 10 min míchání byl roztok zfiltrován přes lože celitu. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu (teplota lázně rotační odparky ~34 °C), za získání 13,21 g (62,3 mmol, 80% výtěžek) sloučeniny B jako oranžového oleje.
1H NMR(d4-MeOH) 400 MHz δ 4,60 (m, 1H), 4,40 (s (br), 1H), 3,49 - 3,41 (m, 2H), 2,36 - 2,34 (m, 2H), 1,51 - 1,48 (m, 9H, rotomery).
C. Terc-butyl-(2S,4S)-2-kvano-4-fluor-1-pvrrolidinkarboxylát
K roztoku 1,2-dichlorethanu (300 ml) obsahujícímu sloučeninu B (13,21 g, 62,3 mmol), ochlazenému na -30 °C, byl přidán DAST (15,1 g, 93,4 mmol). Po 30 min byla chladná lázeň odstraněna a míchání pokračovalo 24 h a potom byla reakce opatrně ukončena nasyceným NaHCO3. Roztok byl potom vlit na rozdrcený led a organické podíly extrahovány CH2CI2 (2 x). Po závěrečném promytí nasyceným NaHSO4 byly organické podíly sušeny (MgSO4) a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu, za získání 10,86 g (50,7 mmol, 81% výtěžek) sloučeniny C jako hnědé polotuhé látky.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 5,32 (d (br), 1H, J = 52 Hz), 4,78 (m, 1H), 3,74 - 3,48 (m, 2H), 2,55 - 2,40 (m, 2H), 1,52 - 1,43 (m, 9H) ppm.
D. (2S,4S)-4-Fluor-2-pvrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát
K roztoku CH3CN (200 ml) obsahujícímu sloučeninu C (10,86 g, 50,7 mmol) byla přidána kyselina p-toluensulfonová (14,8 g, 78 mmol) při laboratorní teplotě. Získaný roztok byl míchán 24 h a potom byl CH3CN odstraněn ve vakuu. Zbylý hnědý olej byl rozpuštěn v EtOAc • · · · · ·
- 38 * · • · · φ ···· (300 ml) a v průběhu 1 min se vysrážela pevná látka. Roztok byl chlazen v lázni led-voda 2 h a potom byla pevná látka oddělena vakuovou filtrací. Byla promyta 300 ml chladného (-20 °C) EtOAc, za získání 10,07 g (35,2 mmol, 69% výtěžek) sloučeniny D.
1H NMR(d4-MeOH) 400 MHz δ 7,69 (d, 2H, J = 8,1 Hz), 7,23 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 5,52 (dd, 1H, J = 51, 3,4 Hz), 4,96 (dd, 1H, J = 9,8,
3,6 Hz), 3,78 (m, 1H), 3,55 (m, 1H), 2,84 - 2,63 (m, 2H), 2,36 (s, 3H) ppm.
Příklad meziproduktu 2
F -pTsOH
FΌΝ
H (2S)-4,4-Difluor-2-pyrrolidinkarbonítril-4-methylbenzensulfonát
A. Terc-butvl-(2S,4S)-2-(aminokarbonvl)-4-hvdroxy-1-pyrrolidinkarboxylát
K THF roztoku (420 ml) obsahujícímu BOC-L-hydroxyprolin (30,0 g, 129 mmol) a EtsN (14,4 g, 141,9 mmol), ochlazenému na -15 °C, byl po kapkách přidán ethylchlorformát (15,4 g, 141,9 mmol). Získaný bílý roztok byl míchán -15 °C po dobu 30 min, potom bylo přidáno stříkačkou 80 ml 28% roztoku NH4OH. Po ukončení přidávání byla chladná lázeň odstraněna a míchání pokračovalo 19 h. Homogenní roztok byl vlit do nasyceného roztoku NH4CI a organická vrstva byla oddělena. Vodná vrstva byla extrahována THF a spojené organické vrstvy sušeny (MgSO4). Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a pevná látka byla evakuována ve vysokém vakuu po dobu 2 h. Získaná bílá pevná látka byla oddělena vakuovou filtrací s Et2O, za «· «···
9
- 39 9 9 t • 9
9
9 9
9999 99
9
9
9 9
9999
9 9 9
9 999
9 9
9 získání 15,86 g (68,9 mmol, 53% výtěžek) sloučeniny A.
1H NMR (de-DMSO) 400 MHz δ 7,34 (s (br), 1H, rotomer), 7,31 (s (br), 1H, rotomer), 6,90 (s (br), 1H, rotomer), 6,82 (s (br), 1H, rotomer), 4,95 (d, 1H, J = 3,1 Hz), 4,05 (m, 1H), 3,36 (m, 1H), 3,22 (m, 1H), 2,03 (m, 1H), 1,78 (m, 1H), 1,37 (s, 3H, rotomer), 1,32 (s, 6H, rotomer) ppm.
B. Terc-butyl (2S)-2-(aminokarbonvl)-4-oxo-1-pvrrolidinkarboxylát
K roztoku CH2OI2 (12 ml) obsahujícímu oxalylchiorid (607 mg, 4,78 mmol), ochlazenému na -78 °C, byl přidán roztok CH2CI2 (3 ml) obsahující DMSO. Po 5 min byl přidán pokapkách terc-butyl-(2S,4S)-2-(aminokarbonyl)-4-hydroxy-1-pyrrolidinkarboxylát (1,0 g, 4,35 mmol, jak je popsáno v kroku E výše) v roztoku CH2CI2/THF (20 ml/15 ml). Po ukončení přidávání byla reakční směs míchána 20 min a bylo přidáno Et3N (2,20 g, 21,7 mmol). Po 10 min byla chladná lázeň odstraněna a míchání pokračovalo 1 h. Roztok byl vlit do nasyceného roztoku NaHCO3 a organické podíly byly extrahovány CH2CI2. Po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbylý žlutý olej čištěn chromatografii na koloně (CH2CI2/MeOH (15 : 1)), za získání 560 mg (2,45 mmol, 56% výtěžek) sloučeniny B jako bílé pevné látky.
1H NMR(d6-DMSO) 400 MHz δ 7,58 (s (br), 1H), 7,15 (s (br), 1H, rotomer), 7,09 (s (br), 1H, rotomer), 4,51 (d, 1H, J = 9,7 Hz, rotomer),
4,46 (d, 1H, J = 8,8 Hz, rotomer), 3,76 - 3,64 (m, 2H), 3,02 (m, 1H),
2,28 (m, 1H), 1,39 (s, 3H, rotomer), 1,37 (s, 6H, rotomer) ppm.
C. Terc-butvl-(2S)-2-(aminokarbonvl)-4,4-difluor-1-pyrrolidinkarboxvlát
K roztoku CH2CI2 (10 ml) obsahujícímu sloučeninu B (423 mg, 1,85 mmol) ochlazenému na -70 °C byl přidán DAST (889 mg, 5,50 mmol). Získaný roztok byl míchán při -70 °C po dobu 30 min a potom při teplotě laboratoře 2 h. Reakce byla ukončena nasyceným φφ «φφφ
NaHCCb a organické podíly extrahovány CH2CI2. Po usušení nad MgSO4 byla získaná žlutá pevná látka čištěna chromatografií na koloně (ChbCh/MeOH (15 : 1)) za získání 211 mg (0,84 mmol, 46% výtěžek) sloučeniny C.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 4,38 (m, 1H), 3,84 - 3,75 (m, 2H), 2,76 (m, 1H), 2,41 (m, 1H), 1,44 (s (br), 9H) ppm.
D. Terc-butyl-(2S)-2-kvano-4,4-difluor-1-pyrrolidinkarboxylát
K roztoku pyridinu (20 ml) obsahujícímu sloučeninu C (658 mg, 2,63 mmol) a imidazol (358 mg, 5,26 mmol), ochlazenému na -35 °C, byl přidán POCI3 (1,61 g, 10,5 mmol). Získaná kaše byla míchána
1,5 h a v průběhu této doby byla ochlazena na 10 °C. Roztok byl zředěn EtOAc a potom promyt 3 x 1M HCI. Po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu za získání 610 mg (2,63 mmol, 100% výtěžek) sloučeniny D, která byla přímo převedena do stupně E (níže).
1H NMR(d4-MeOH) 400 MHz δ 4,88 (s (br), 1H), 3,79 - 3,72 (m, 2H), 2,87 (m,1H), 2,69 (m, 1H), 1,50 (s, 9H) ppm.
E. (2S)-4,4-Difluor-2-pvrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát
K roztoku CH3CN (15 ml) obsahujícímu sloučeninu D (512 mg,
2,21 mmol) byl přidán hydrát kyseliny p-toluensulfonové (839 mg, 4,42 mmol) při laboratorní teplotě. Získaný roztok byl míchán 2 h a potom byl CH3CN odstraněn ve vakuu. Ke zbylému oleji byl přidán EtOAc (~10 ml) a byl potom odstraněn ve vakuu. Získaná pevná látka byla smísena s EÍ2O a byl přidán EtOAc. Pevná látka byla oddělena vakuovou filtrací za získání 375 mg (1,23 mmol, 56% výtěžek) sloučeniny E jako bílé pevné látky.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7,70 (d, 2H, J = 8,2 Hz), 7,23 (d, •0 ····
- 41 2H, J = 7,9 Hz), 5,12 (t, 1H, J = 7,9 Hz), 3,91 - 3,78 (m, 2H), 3,08 2,89 (m, 2H), 2,89 (s, 3H), 2,36 (s, 9H) ppm.
Příklad 1
(2S,4S)-1-r(2S)-2-Amino-3,3-difenylpropanovl]-4-fluorpvrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. (2S,4S)-1-F(2S)-2-Amino-3,3-difenylpropanovn-4-fluorpyrrolidin-2karbonitril hydrochlorid
K suchému DMF (25 ml) byla přidána kyselina (2S)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3,3-difenylpropanová (1,96 g, 6,0 mmol), HATU (2,28 g, 6,0 mmol) a N,N-diisopropylethylamin (1,05 ml, 6,0 mmol). Po míchání při laboratorní teplotě 30 min byly přidány (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát (1,31 g,
4,5 mmol) a další Ν,Ν-diisopropylethylamin (0,783 ml, 4,5 mmol). Roztok byl ponechán míchat při laboratorní teplotě 12 h a potom byl přidán nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného (110 ml). Směs byla extrahována ethylacetátem (2 x 100 ml) a organické podíly byly promyty nasyceným NaCI (100 ml), sušeny nad MgSCU a zakoncentrovány do sucha, za získání surové pevné látky. Pevná látka byla čištěna chromatografii (silikagel, hexany/EtOAc 4 : 1) za poskytnutí pevné látky, která byla míchána v roztoku směsi dioxan-HCI (4,0 M, 20 ml) 2 h a potom byl přidán diethylether (100 ml). Získaná •9 «·«« • · ··
-42 sraženina byla oddělena filtrací a sušena ve vysokém vakuu, za získání 1,36 g (3,64 mmol, 81% výtěžek) sloučeniny A jako bílé pevné látky.
1H NMR(d6-DMSO) 400 MHz δ 8,45 - 8,41 (s (br), 3H), 7,70 (m, 2H), 7,38 - 7,36 (m, 2H), 7,29 - 7,26 (m, 3H), 7,24 - 7,18 (m, 3H), 5,39 (d, 1H, J = 51 Hz), 4,89 - 4,85 (m, 2H), 4,38 (d, 1H, J = 11,3 Hz), 3,98 (ddd, 1H, J = 38,8, 12,4 Et 3,1 Hz), 3,39 - 3,33 (m, 1H), 2,30 - 2,18 (m, 2H) ppm.
Příklad 2
(2S,4S)-1-f(2S)-2-Amino-3,3-bis(4-fluorfenyl)propanoyn-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. Kyselina 3,3-bis(4-fluorfenyl)-3-hvdroxvpropanová
K bezvodému THF (80 ml) roztoku n-butyllithia (46 ml 2,5M, 115 mmol) byl při 0 °C přidán po kapkách diisopropylamin (11,13 g, 115 mmol) a roztok byl míchán 10 min. Za udržování teploty na 0 °C byla k roztoku po kapkách přidána kyselina octová (2,64 g, 44 mmol) a směs byla míchána 10 min a potom byla zahřáta na 50 °C. Po 30 min se utvořila těžká sraženina a roztok byl ponechán ochladit. Byl přidán roztok 4,4’-diflurobenzofenonu (9,6 g, 0,044 mol) v THF (50 ml, bezvodý) při 0 °C, a roztok byl míchán při teplotě laboratoře přes noc. Byly přidány voda (100 ml) a diethylether (100 ml) a vodná vrstva byla oddělena a okyselena 1M HCI na pH 3. Organické podíly byly «9 9999 extrahovány ethylacetátem (3 x 200 ml) a usušeny nad MgSO4. Zfiltrování a odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytlo surovou bílou pevnou látku, která mohla být promyta chladným CHCI3 pro odstranění stopových množství benzofenonu. Pevná látka byla sušena ve vysokém vakuu za získání 5,63 g (20,2 mmol, 46% výtěžek) sloučeniny A jako bílé pevné látky.
1H NMR(de-DMSO) 400 MHz δ 12,4 (s (br), 1H), 7,48 - 7,39 (m, 4H), 7,19 - 7,02 (m, 4H), 5,91 (s (br), 1H), 3,25 (s, 2H) ppm.
B. Kyselina 3,3-bis(4-fluorfenvl)akrylová
K 20% roztoku kyseliny sírové v kyselině octové (50 ml, obj./obj.) byla přidána sloučenina A (5,6 g, 20,2 mmol) a směs byla míchána 30 min při laboratorní teplotě. K tomuto roztoku byl přidán H2O (500 ml) a organické podíly byly extrahovány ethylacetátem (3 x 150 ml), potom sušeny MgSO4. Zfiltrování a odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytlo bílou pevnou látku. Látka byla sušena ve vysokém vakuu za získání 4,97 g (19,1 mmol, 95% výtěžek) sloučeniny B jako bílé pevné látky.
1H NMR (CDCI3) 400 MHz δ 7,27 - 7,21 (m, 2H), 7,19 - 7,13 (m, 2H), 7,10 - 6,95 (m, 4H), 6,26 (s, 1H) ppm.
C. Kyselina 3,3-bis(4-fluorfenyl)propanová
K roztoku sloučeniny B (2,5 g, 9,61 mmol) v ethylacetátu (250 ml) bylo přidáno 10% paladium na uhlí (50% hmotn./hmotn.) a směs byla hydrogenována při tlaku vodíku 0,1 MPa 12 hod. Heterogenní roztok byl zfiltrován přes celit a zakoncentrován ve vakuu za poskytnutí žlutého oleje. Olej byl sušen ve vysokém vakuu za získání 2,40 g (9,16 mmol, 95 % výtěžek) sloučeniny C jako žlutého oleje.
φ φ · φ · ·
- 44 φ φ φφφ φφφφ φφ φ φφφφ φ φ φ φ φ φ φ φ φφφφ φφφ φφφ φφφ φφφ φφφφ φφ φφ φφφφ φφ φ 1Η NMR (de-DMSO) 400 MHz δ 12,08 (brs, 1 Η), 7,40 - 7,30 (m, 4Η), 7,15 - 7,05 (m, 4Η), 4,45 (t, 1H, J = 8,1 Hz), 3,05 (d, 2H, J = 8,1 Hz) ppm.
D. (4S,5R)-3-r3,3-Bis(4-fluorfenvl)propanovH-4-methyl-5-fenvl-1,3-oxazolidin-2-on
K THF (50 ml, bezvodý) obsahujícímu sloučeninu C (2,0 g, 7,63 mmol) byl přidán N,N-diisopropylethylamin (1,18 g, 9,16 mmol) a potom byl roztok ochlazen na -78 °C. K tomuto roztoku byl přidán trimethylacetylchlorid (0,97 g, 8,01 mmol) a roztok byl zahřát na 0 °C v průběhu 1 hod. Kalná směs byla zfiltrována a filtrát byl pomalu v průběhu 10 min přidán k lithiovanému (4S,5R)-(-)-4-methyl-5-fenyl-2-oxazolidinonu při -78 °C, přičemž tato látka byla připravena přikapáváním n-butyllithia (3,0 ml 2,5M, 7,63 mmol) k THF (50 ml) roztoku (4S,5R)-(-)-4-methyl-5-fenyl-2-oxazolidinonu (1,35 g, 7,63 mmol) při -78 °C, roztok byl míchán 10 min, za získání lithiovaného (4S,5R)-(-)-4-methyl-5-fenyl-2-oxazolidinonu. Žlutá směs byla ohřátá na 0 °C a reakce byla ukončena H2O (50 ml) a extrahována diethyletherem (3 x 250 ml), následovalo sušení MgSO4. Filtrace a odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytlo pevnou látku. Blesková chromatografie (silikagel, 20 % ethylacetát/hexany) poskytla sloučeninu D. Bílá pevná látka byla sušena ve vysokém vakuu za získání 2,31 g (5,49 mmol, 72% výtěžek) jako bílou pevnou látku.
1H NMR(d6-DMSO) 400 MHz δ 7,40 - 7,25 (m, 9H), 7,18 - 7,02 (m, 4H), 5,76 (d, 1H, J = 7,6 Hz), 4,65 (m, 1H), 4,58 (t, 1H, J =
7,6 Hz), 3,72 (dd, 1H, J = 16,8, 7,0 Hz) 3,57 (dd, 1H, J= 16,8, 7,0 Hz), 0,58 (d, 3H, J = 6,7 Hz) ppm.
• ft ftft • · · ftftftft • · ftft ft • ftftftft ft • · · ftftft •ftftft ·· ftft ftftftft
- 45 ·· ···· • ft · • · • ft • ·
E. (4S15R)-3-í(2S)-2-Azido-3,3-bis(4-fluorfenyl)propanovn-4-methvl-5-[(1 E,3Z)-1-methylhexa-1,3,5-trienvU-1,3-oxazolidin-2-on
K THF (50 ml, bezvodý) roztoku obsahujícímu sloučeninu D (2,0 g, 4,75 mmol) byl při -78 °C po kapkách přidán bis(trimethylsilyl)amid draselný (10,0 ml 0,5M roztok toluenu, 4,98 mmol). Po 10 min míchání byl naráz přidán 2,4,6-triisopropylbenzensulfonylazid (trisylazid) (1,84 g, 5,94 mmol) v THF (10 ml, bezvodý). Po 3 min byla přidána kyselina octová (1,31 g, 21,8 mmol) při -78 °C a potom byla reakční směs rychle ohřátá na 30 °C a míchána 1 h, za vytvoření světležlutého roztoku. K tomuto roztoku byla přidána H2O (100 ml) a organické podíly byly extrahovány ethylacetátem (500 ml). Po promytí nasyceným NaHCO3 (100 ml) a sušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu, za získání žlutého oleje. Chromatografie na koloně (ethylacetát/hexany 1 : 9) poskytla sloučeninu E jako bílou pevnou látku. HPLC ukázala jediný diastereoisomer. Bílá pevná látka byla sušena ve vysokém vakuu za získání 1,71 g (3,70 mmol, 78% výtěžek) jako bílé pevné látky.
1H NMR(CDCI3) 400 MHz δ 7,42 - 7,35 (m, H), 7,25 - 7,18 (m, H), 7,10 - 7,06 (m, 2H), 7,05 - 6,92 (m, 2H), 5,95 (d, 1H, J = 10,8 Hz), 5,05 (d, 1H, J = 7,1 Hz), 4,60 (d, 1H, J = 10,8 Hz), 4,38 (m, 1H), 0,95 (d, 3H, J = 6,8 Hz) ppm.
F. Kyselina (2S)-2-azido-3,3-bis(4-fluorfenyl)propanová
K THF/H2O (4 : 1,50 ml) roztoku sloučeniny E (1,5 g, 3,25 mmol) byl při 0 °C přidán roztok hydroxidu lithného (0,272 g, 6,49 mmol) v peroxidu vodíku (1,50 ml 30% roztok v H2O, 48,75 mmol). Směs byla míchána při 0 °C 1 h a potom byla reakce ukončena Na2SO4 (6,3 g, 50 ml 1,0M roztok v H2O). THF byl odstraněn ve vakuu a roztok byl okyselen na pH 1 6,0M HCI při 0 °C. Organické podíly byly extrahovány ethylacetátem (2 x 200 ml) a sušeny nad MgSO4. Filtrace a odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytly čirý olej. Chromatografie
- 46 • 0 0000 ·· 00 04 0
0 0000 000 0 0 00 0 0000 0 000 0 0 00 0 0000 000 000 000 0000 00 00 0000 00 0 na koloně (EtOAc/hexany/kyselina octová 50 : 50 : 1) poskytla sloučeninu F jako bílou pevnou látku. Pevná látka byla sušena ve vysokém vakuu za získání 0,78 g (2,60 mmol, 80% výtěžek) jako bílou pevnou látku.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 9,60 (s (br), 1H), 7,25 - 7,10 (m, 4H), 7,10 - 6,95 (m, 4H), 4,50 (d, 2H, J = 8,6 Hz) ppm.
G. Kyselina (2S)-2-amino-3,3-bis(4-fluorfenyl)propanová
K ethylacetátovému roztoku (250 ml) sloučeniny F (1,5 g, 4,95 mmol) bylo přidáno 10% paladium na uhlí (10% hmotn./hmotn.) a směs byla hydrogenována při tlaku vodíku 0,1 MPa 12 h. Heterogenní roztok byl zfiltrován přes celit (1 g) a filtrát byl zakoncentrován ve vakuu za získání čirého oleje. Olej byl sušen ve vysokém vakuu za poskytnutí 1,30 g (4,70 mmol, 95% výtěžek) sloučeniny G jako bílé pevné látky.
1H NMR (dg-DMSO) 400 MHz δ 10,2 (s (br), 1H), 7,38 - 7,27 (m, 4H), 7,08 - 6,98 (m, 4H), 4,25 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 3,95 (d, 1H, J =
8,3 Hz) ppm.
H. Kyselina (2S)-2-f(terc-butoxykarbonvl)aminoj-3,3-bis(4-fluorfenvl)-propanová
K CH2CI2 roztoku(150 ml) obsahujícímu sloučeninu G (1,30 g, 4,69 mmol) byly přidány triethylamin (2,37 g, 23,4 mmol) a di-terc-butyldikarbonát (1,23 g, 5,63 mmol). Po 12 h míchání byly přidány H2O (50 ml) a CH2CI2 (300 ml) a roztok byl okyselen na pH 3 1,0M HCI. Oddělení ethylacetátové vrstvy následované sušením nad MgSO4 a odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytlo čirý olej. Olej byl sušen ve vysokém vakuu za získání 1,68 g (4,4 mmol, 95% výtěžek) sloučeniny H jako bílé pevné látky.
·· ·«·· • · · · · · · • · · · · • · · · · * • · · · · · ·· ·· · · ·· ♦···
- 47 ·· · • · * • · · · • ····· • · · »· · 1H NMR (de-DMSO) 400 MHz δ 12,4 (s (br), 1H), 7,35 - 7,22 (m,
4H), 7,15 - 6,95 (m, 4H), 4,78 (t, 1H, J = 8,9 Hz), 4,25 (d, 1H, J = 8,9 Hz), 3,05 (m, 1H), 1,20 (s, 3H), 1,15 (s, 6H) ppm.
I. (2S,4S)-1-f(2S)-2-(terc-Butoxvkarbonvl)amino-3,3-bis(4-fluorfenyl)-propanovn-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
K DMF roztoku(25 ml, bezvodý) byly přidány sloučenina H (1,0 g, 2,65 mmol) a HATU (1,0 g, 2,65 mmol). K tomuto roztoku byl přidán N,N-diisopropylethylamin (0,462 ml, 2,65 mmol) a po 30 min (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitrilmethylbenzensulfonát (0,619 g,
2,12 mmol) a další Ν,Ν-diisopropylethylamin (0,37 ml, 2,12 mmol). Roztok byl ponechán míchat při teplotě laboratoře 12 h a potom byl přidán nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného (100 ml). Získaná gumovitá směs byla extrahována ethylacetátem (3 x 100 ml) a organické podíly byly promyty nasyceným NaCI (50 ml) a sušeny nad MgSO4. Filtrace a odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytly čirý olej. Olej byl čištěn chromatografií na silikagelu (hexany/EtOAc 4 : 1) za získání bílé pevné látky. Pevná látka byla sušena ve vysokém vakuu za získání 815 mg (1,72 mmol, 65% výtěžek) sloučeniny I jako bílé pevné látky.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,38 - 7,32 (m, 2H), 7,21 - 7,15 (m, 2H), 7,12 - 6,98 (m, 4H), 5,15 (d, 1H, J = 51 Hz), 5,03 (d, 1H, J =
8,9 Hz, 4,89 (d, 1H, J = 11,2 Hz), 4,86 (d, 1H, J = 8,9 Hz), 4,40 (d, 1H, J = 11,2 Hz), 3,83 (ddd, 1H, J = 36,8, 12,1, 3,7 Hz), 3,05 (d, 1H, J = 12,2 Hz), 2,62 (t, 1H, J= 15,3 Hz), 225 (m, 1H), 1,38 (s, 9H) ppm.
J. (2S,4S)-1-[[2S)-2-Amíno-3,3-bis(4-fluorfenvl)propanoyl1-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
Ke sloučenině I (0,5 g, 1,05 mmol) byly přidány 4,ON HCl v 1,4-dioxanu (10 ml, 40 mmol) a po 3 h diethylether (100 ml). Získaná
-48 ·· ΦΦ·« sraženina byla oddělena filtrací a po sušení ve vysokém vakuu bylo získáno 0,41 g (1,0 mmol, 95% výtěžek) sloučeniny A jako bílé pevné látky.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 8,42 (s (br), 3H), 7,72 - 7,66 (m, 2H), 7,38 - 7,32 (m, 2H), 7,25 - 7,19 (m, 2N), 7,06 - 7,0 (m, 2H), 5,38 (d, 1H, J = 51 Hz), 4,91 (d, 2H, J= 8,8 Hz), 4,82 (d, 1H, J = 11,3 Hz),
4,41 (d, 1H, J = 11,3 Hz), 3,86 (ddd, 1H, J = 39,2, 12,4, 3,1 Hz), 3,45 (q, 1H, J = 12,4 Hz), 2,38 - 2,20 (m, 2H) ppm.
Příklad 3
(2S,4S)-1-f(2S)-2-Amino-5-(4-fluorfenvl)-3,3-dimethyletanoyl)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril hydrochlorid
A. 4-(4-Fluorfenyl)-2,2-dimethylbutanal
Do baňky obsahující 4-(4-f!uorfenyl)-2,2-dimethylbutannitril (viz Org. Lett. 2000, 2, 3285; Knochel, P. a další, pro přípravu této sloučeniny) (13,4 g, 702 mmol) v 300 ml toluenu, ochlazený na -78 °C, bylo přidáno 70,2 ml 1,5M toluenového roztoku DIBAL (105,3 mmol). Po 2,5 h byl postupně přidán roztok H2O/THF (250 ml/50 ml) obsahující 17,9 g octanu sodného a 17,9 ml kyseliny octové. Po ukončení přidávání byly přidány celit a Et2O a baňka byla ponechána ohřát na laboratorní teplotu. Po míchání 1 h byl heterogenní roztok zfiltrován přes lože celitu. Celit byl opláchnut Et2O a potom byl filtrát promyt H2O. Po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve φφ φφφφ • φφφφ φφφφ φφφφ
AQ φφφ φφφ φφφ ’ 'V “ ΦΦΦΦ φφ φφ φφφφ φφ φ vakuu a zbylý olej byl čištěn chromatografií na koloně (5% EtOAc/hexany), za získání 11,3 g (58,2 mmol, 83% výtěžek) sloučeniny A.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 9,47 (s, 1H), 7,12 - 7,10 (m, 2H), 7,09 - 6,93 (m, 2N), 2,51 - 2,47 (m, 2H), 1,77 - 1,72 (m, 2H), 1,12 (s, 6H) ppm.
B. 5-(4-Fluorfenvl)-3,3-dimethvl-2-({(1R)-1-fenvl-2-f(trimethvlsilyl)-oxy1ethyl}amino)pentannitril
K CH2CI2 roztoku (250 ml) obsahujícímu sloučeninu A (9,07 g,
46.8 mmol) byl přidán (R)-fenylglycinol (6,41 g, 46,8 mmol) při laboratorní teplotě. Získaný roztok byl míchán 1,5 h a potom byl ochlazen na 0 °C a byl přidán trimethylsilylkyanid (928 g, 93,5 mmol). Žlutý roztok byi ponechán pomalu ohřát na laboratorní teplotu přes noc. Reakce byla ukončena nasyceným roztokem NaHSO4 a organická vrstva byla oddělena. Organické podíly byly promyty H2O, sušeny (MgSO4) a odbarveny aktivním uhlím. Po zfiltrován! přes celit byl žlutý olej čištěn chromatografií na koloně (hexany/EtOAc (9 : 1)) za získání
11.9 g (28,9 mmol, 62% výtěžek) sloučeniny B jako 6 : 1 směsi diastereomerů.
Hlavní diastereomer: 1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,38 - 7,29 (m, 5H), 7,11 - 7,07 (m, 2H), 6,98 - 6,93 (m, 2H), 4,03 (dd, 1H, J = 9,95, 3,8 Hz), 3,68 (m, 1H), 3,52 (t, 1N, J = 10,2 Hz), 3,06 (d, 1H), J = 13,4 Hz), 2,44 - 2,34 (m, 3H), 1,73 - 1,65 (m, 2H), 1,11 (s, 3H), 1,09 (s, 3H), 0,14 (s, 9H) ppm.
C. 5-(4-Fluorfenvl)-2-{[(1R)-2-hvdroxy-1-fenylethvl1amino)-3,3-dimethylpentannitril
K MeOH roztoku (300 ml) obsahujícímu sloučeninu B (11,85 g, 28,8 mmol) byl přidán fluorid draselný (16,7 g, 287,6 mmol) při teplotě • 99
- 50 9· 99 laboratoře. Roztok byl míchán 1,5 h a potom byla většina MeOH odstraněna ve vakuu. Byly přidány CH2CI2 a H2O a organická vrstva byla oddělena. Po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a získaný olej byl čištěn chromatografií na koloně (hexany/EtOAc (4 : 1)) za získání 8,86 g (26,1 mmol, 90% výtěžek) sloučeniny C jako 6 : 1 směsi diastereomerů.
Hlavní diastereomer: 1H NMR (CDCI3) 400 MHz δ 7,38 - 7,30 (m, 5H), 7,10 - 7,06 (m, 2H), 6,97 - 6,92 (m, 2H), 4,06 (dd, 1H, J = 9,5, 4,0 Hz), 3,79 (m, 1H), 3,58 (m, 1H), 3,07 (d, 1H, J = 12,5 Hz), 2,43 2,30 (m, 3H), 1,95 (dd, 1H, J = 7,8, 4,1 Hz), 1,74 -1,64 (m, 2H), 1,11 (s, 3H), 1,09 (s, 3H) ppm.
D. 5-(4-Fluorfenvl)-313-dimethyl-2-(f(E)-fenvlmethvliden)amino)pentannitril
K CH2CI2 roztoku (10 ml)/MeOH (4 ml) obsaujícímu sloučeninu C (494 mg, 1,45 mmol), ochlazenému na 0 °C, byl přidán octan olovičitý (838 mg, 1,89 mmol). Získaný roztok byl míchán přes noc a potom byl ohřát na laboratorní teplotu. K tomuto roztoku bylo přidáno 20 ml fosfátového pufru pH 7,2. Po 30 min byl kalný roztok zfiltrován přes lože celitu, přičemž celit byl důkladně promyt CH2CI2. K filtrátu byla přidána H2O a organická vrstva byla oddělena. Vodná vrstva byla extrahována CH2CI2 a potom byly spojené organické vrstvy sušeny (MgSO4). Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a olej čištěn chromatografií na koloně (hexany/EtOAc (9 : 1)) za získání 270 mg (0,88 mmol, 60% výtěžek) sloučeniny D.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 8,50 (d, 1H, J = 1,4 Hz), 7,81 - 7,80 (d, 2H, J = 6,6 Hz), 7,54 - 7,43 (m, 3H), 7,17 - 7,13 (m, 3H), 6,99 6,94 (m, 2H), 4,48 (s, 1H), 2,68 - 2,64 (m, 2H), 1,81 - 1,74 (m, 2H),
1,19 (s, 3H), 1,15 (s, 3H) ppm.
• · · · · · • · • · ·· · ···· • · · · · · ·· ·····
Cd ······ ··· ~ □ I ~ ···· ·· ·· ···· ·· ·
E. 5-(4-Fluorfenvl)-3,3-dimethylnorvailin hydrochlorid
Do baňky obsahující sloučeninu D (268 mg, 0,87 mmol) bylo přidáno 7 ml koncentrované HCI. Roztok byl vařen pod zpětným chladičem 18 h a potom byl ochlazen extrahován Et2O. Rozpouštědlo bylo z vodné vrstvy odstraněno ve vakuu a zbylá olejovitá látka byla rozpuštěna v Et2O/MeOH a byla odbarvena aktivním uhlím. Po zfiltrování a odstranění rozpouštědla ve vakuu byl zbytek smísen s Et2O a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu za získání 180 mg (0,65 mmol, 75% výtěžek) sloučeniny E jako olejové látky, která byla dále použita v surovém stavu.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7,25 - 7,20 (m, 2H), 7,01 - 6,95 (m, 2H), 4,45 (s (br), 1H), 2,67 - 2,63 (m, 2H), 1,76 - 1,72 (m, 2H),
1,22 - 1,13 (m, 6H).
F. N-Terc-butoxvkarbonyl)-5-(4-fluorfenvl)-3,3-dimethvlnorvalin
K dioxanovému roztoku(5 ml) obsahujícímu sloučeninu E (180 mg, 0,65 mmol) bylo přidáno 2,5 ml 2M roztoku NaOH při laboratorní teplotě. K získanému roztoku byl potom přidán di-t-butyldikarbonát (284 mg, 1,34 mmol). Po míchání přes noc byl roztok okyselen 1,0M HCI. Organické podíly byly extrahovány EtOAc (2 x), sušeny (MgSO4) a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Zbylý olej byl čištěn chromatografií na koloně (5% MeOH/CH2CI2), za získání 76 mg (0,22 mmol, 34% výtěžek) sloučeniny F.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7,18 - 7,15 (m, 2H), 6,96 - 6,92 (m, 2H), 6,62 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 4,18 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 2,65 - 2,58 (m, 2H), 1,62 - 1,53 (m, 2H), 1,44 (s, 9H), 1,05 (s, 3H), 1,01 (s, 3H) ppm.
- 52 • · · · · · • · • · »
G. Terc-butvl(1S)-1-{í(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpyrrolidinvl)karbonvl}-4-(4-fluorfenyl)-2,2-dimethvlbutylkarbamát
K DMF roztoku (4 ml) obsahujícímu sloučeninu F (172 mg, 0,51 mmol) byl přidán diisopropylethylamin (98 mg, 0,76 mmol), potom HATU (213 mg, 0,56 mmol) při laboratorní teplotě. Po 15 min byly přidány (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát (153 mg, 0,53 mmol) a diisopropylethylamin (68 mg, 0,53 mmol) ve 2 ml DMF. Reakční směs byla míchána přes noc a potom byla vlita do EtOAc. Organické podíly byly promyty H2O (2 x), nasyceným roztokem NaHCOs a nasyceným roztokem NaHSO4. Po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbylý žlutý olej byl čištěn chromatografií na koloně (2% MeOH)CH2CI2) za získání 147 mg sloučeniny G, která byla dále čištěna semipreparativní HPLC za získání 80 mg sloučeniny G.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,15 - 7,12 (m, 2H), 6,96 - 6,92 (m, 2H), 5,40 (d (br), 1H, J = 52,0 Hz), 5,18 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 5,04 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 4,31 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4,11 (s, 1H), 4,03 (m, 1H),
2,70 - 2,52 (m, 3H), 2,33 (m, 1H), 1,64 -1,60 (m, 2H),1,41 (s, 9H), 1,11 (s, 3H), 1,09 (s, 3H) ppm.
H. (2S,4S)-1-f(2S)-2-Amino-5-(4-fluorfenyl)-3l3-dimethvlpentanovl)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril hydrochlorid
K CH2CI2 roztoku (4 ml) obsahujícímu sloučeninu G (80 mg, 0,18 mmol) bylo přidáno 71 pí TFA (5 ekv.). Po 30 min bylo přidáno dalších 5 ekv. TFA a následovalo přidání 10 ekv. po 1 h. Po míchání po dobu celkově 3,5 h bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbytek rozpuštěn v EtOAc. Organické podíly byly promyty nasyceným roztokem NaHCO3, sušeny (MgSO4) a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Ke zbylému oleji bylo přidáno 1,5 ml dioxanu, potom 2,0 ml 4,0M dioxanového roztoku HCI. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a byl přidán Et2O. Vysrážená pevná látka byla oddělena • · · · · · ·· · ·
vakuovou filtrací za získání 40 mg (0,11 mmol, 60% výtěžek) sloučeniny H.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7,25 - 7,22 (m, 2H), 7,00 - 6,95 (m, 2H), 5,46 (d (br), 1H, J = 51,1 Hz), 5,09 (d, 1H, J = 9,4 Hz), 4,12 (m, 1H), 4,03 (s, 1H), 3,90 (ddd, 1H, J = 37,6, 12,7, 3,0 Hz), 2,68 2,44 (m, 4H), 1,78 - 1,73 (m, 2H), 1,21 (s, 6H) ppm.
Příklad 4
(2S,4R)-1-r(2S)-2-Amino-4-(4-fluorfenvl)-3,3-dimethvlbutanoyl1-4-fluorpyrrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. 3-(4-Fluorfenyl)-2,2-dimethylpropannitril
K toluenovému roztoku (60 ml) obsahujícímu isobutyronitril (5,0 g, 72,3 mmol), ochlazenému na 0 °C, bylo přidáno 152 ml 0,5M toluenového roztoku KNMDS (76,0 mmol). Po 15 min byl přidán 4-fluorbenzylbromid (14,4 g, 76,0 mmol). Roztok byl pomalu zahříván na laboratorní teplotu přes noc a potom byla reakce ukončena H2O. Organické podíly byly extrahovány EtOAc a promyty nasyceným roztokem NaHSO4. Po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbylý žlutý olej byl čištěn chromatografii na koloně (5% EtOAc/hexany) za získání 10,05 g (56,8 mmol, 79% výtěžek) sloučeniny A.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,25 - 7,22 (m, 2H), 7,05 - 7,00 (m,
- 54 • · · · 0 ·
2H), 2,78 (s, 2H),1,34 (s, 6H) ppm.
B, 3-(4-Fluorfenvl)-2,2-dimethylpropanol
K toluenovému roztoku (100 ml) obsahujícímu sloučeninu A (10,0 g, 56,5 mmol), ochlazenému na -78 °C, bylo přidáno 56,5 ml 1,5M toluenového roztoku DIBAL (84,7 mmol). Po 2,5 h byly přidány roztok H2O/THF (160 ml/40 ml) obsahující octan sodný (14,3 g) a kyselinu octovou {14,3 ml), potom byl přidán celit. Roztok byl míchán 1 h a potom byl přidán Et2O. Roztok byl zfiltrován přes celit, přičemž celit byl důkladně promyt Et2O. Filtrát byl promyt H2O (2 x) a potom nasyceným roztokem NaHCOs. Po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbylý olej čištěn chromatografii na koloně (5% EtOAc/hexany) za získání 923 g (51,3 mmol, 91% výtěžek) sloučeniny B.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 9,56 (s, 1H), 7,06 - 7,03 (m, 2H), 6,97 - 6,93 (m, 2H), 2,75 (s, 2H), 1,04 (s, 6H) ppm.
C. 2-Amino-4-(4-fluorfenvl)-3,3-dimethylbutannitril
K MeOH roztoku (32 ml) obsahujícímu sloučeninu B (5,0 g, 27,8 mmol) bylo přidáno 3,8 ml 30% NH4OH, kyanid draselný (1,9 g, 29,2 mmol) a 15 ml H2O. Do tohoto roztoku byl přidán chlorid amonný (1,64 g, 30,6 mmol) při laboratorní teplotě. Získaný roztok byl míchán přes noc a potom byl zahříván na 70 °C. Po 5 h byl roztok ochlazen, zředěn EtOAc a potom promyt H2O (2 x) a nasyceným roztokem NaHCOs. Po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a získaný žlutý olej byl čištěn chromatografii na koloně (hexany/EtOAc (1 : 1)) za získání 3,69 g (17,9 mmol, 64% výtěžek) sloučeniny C.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,17 - 7,13 (m, 2N), 7,00 - 6,95 (m, 2H), 3,33 (t, 1H, J = 8,5 Hz), 2,80 (d, 1H, J = 13,4 Hz), 2,61 (d, 1H, J = • · · φ · ···· • · · · · · · · · · · · cc ······ · · · \J\J ···· ·· ·· ···· ·· ·
13,4 Hz),1,58 - 1,57 (m, 2H), 1,03 (s, 3H), 1,02 (s, 3H) ppm.
D. Kyselina 2-amino-4-(4-fluorfenyl)-3,3-dimethylbutanová
Do baňky obsahující sloučeninu C (3,69 g, 17,9 mmol) bylo přidáno 80 ml koncentrované HCI. Roztok byl potom zahříván pod zpětným chladičem 24 h. Heterogenní roztok byl potom ochlazen v ledové lázni a vakuovou filtrací byla oddělena bílá pevná látka. Po evakuování ve vysokém vakuu bylo získáno 4,06 g bílého prášku. Tento materiál byl dále použit surový.
E. Kyselina 2-[(terc-butoxvkarbonyl)amino1-4-[4-fluorfenvl)-3,3-dimethylbutanová
K dioxanovému roztoku (20 ml) obsahujícímu sloučeninu D (2,0 g, 7,66 mmol) bylo přidáno 5 ml H2O a 9,6 ml 2,0M vodného roztoku NaOH. K tomuto roztoku byl při laboratorní teplotě přidán di-t-butyl dikarbonát (2,34 g, 10,7 mmol). Po míchání přes noc byl heterogenní roztok vlit do nasyceného roztoku NaHCO3 a promyt Et2O. Vrstva Et2O byla promyta nasyceným roztokem NaHCO3 a potom byly spojené vodné vrstvy okyseleny 1,0M HCI a extrahovány EtOAc (2 x). Po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu za získání 928 mg (2,86 mmol, 37% výtěžek) sloučeniny E.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 721 - 7,18 (m, 2H), 7,00 - 6,95 (m, 2H), 6,74 (d, 1N, J = 9,0 Hz), 3,98 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 2,68 (d, 1N, J = 13,4 Hz), 2,62 (d, 1H, J = 13,3 Hz), 1,45 (s (br), 9H), 0,93 (s, 3H), 0,92 (s, 3H) ppm.
F. Terc-butyl(1S)-1-([(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpvrrolidin-1-vl1karbonyl)-3-(4-fluorfenvl)-2,2-dimethvlpropylkarbamát
K DMF roztoku (20 ml) obsahujícímu sloučeninu E (928 mg,
- 56 ·· · • · « · · · · · · + ·«· · · · · ···· ···· «* * ·· ·«·· t· ·
2,86 mmol) byl přidán diisopropylethylamin (406 mg, 3,14 mmol), potom HATU (1,14 g, 3,00 mmol) při teplotě laboratoře. Po 30 min byly přidány (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát (857 mg, 3,00 mmol) a diisopropylethylamin (388 mg, 3,00 mmol) ve 13 ml DMF. Po míchání přes noc byl roztok vlit do EtOAc a promyt H2O (2 x), nasyceným roztokem NaHCO3 a 1,0M HCI. Po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Zbylý olej byl čištěn chromatografii na koloně (hexany/EtOAc/CH2CI2 (5:4: 1)) za získání 273 mg (0,65 mmol, materiál s nízkým Rf) (S)-diastereromeru při měření vibračním cirkulárním dichroismem a 226 mg směsi (R)díastereomeru spolu s neznámou nečistotou. Dále byl použit (S)diastereomer.
1H NMR (CDCI3) 400 MHz δ 7,15 - 7,11 (m, 2H), 7,01 - 6,96 (m, 2H), 5,32 (dt, 1H, J = 51,3, 3,3 Hz), 5,20 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 5,01 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 4,16 (d, 1H, J = 10,1 Hz), 3,91 (m, 1H), 3,68 (dd, 1H, J = 23,6, 12,1 Hz), 2,72 - 2,56 (m, 2H), 2,30 (m, 1 H),1,43 (s, 9H),1,08 (s, 3H), 0,95 (s, 3H) ppm.
G, (2S,4R)-1-[(2S)-2-Amino-4-(4-fluorfenyl)-3,3-dimethylbutanoyl1-4fluorpyrrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K CH2CI2 roztoku (7 ml) obsahujícímu sloučeninu F (242 mg, 0,58 mmol) bylo přidáno 443 pl (10 ekv.) TFA při teplotě laboratoře. Po 30 min bylo přidáno 10 ekv. TFA a po celkově 3 h byla reakční směs vlita do nasyceného roztoku NaHCCb. Organické podíly byly extrahovány EtOAc, sušeny (MgSO4) a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Zbylý olej byl rozpuštěn v dioxanu (4 ml) a potom byly přidány 4,0 ml 4,0M roztioku HCI v dioxanu. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek byl rozetřen s Et2O. Získaná pevná látka byla oddělena vakuovou filtrací za poskytnutí 175 mg (0,46 mmol, 79% výtěžek) soli G.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7,22 - 7,19 (m, 2H), 7,08 - 7,04 (m, 2H), 5,43 (d (br), 1H, J = 51,1 Hz), 5,09 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 4,05 (s, 1H), 3,97 - 3,74 (m, 2H), 2,82 (d, 1H, J = 13,4 Hz), 2,72 (d, 1H, J = 13,2 Hz), 2,64 - 2,39 (m, 2H), 1,07 (s, 3H), 1,00 (s, 3H) ppm.
Příklad 5 ' F
(2S,4S)-1-(2R)-2-Amino-3-[(4-methoxybenzvl)thio1-3-methvlbutanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. Terc-buty)(1R)-1-{f(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpyrrolidin-1-yí1karbonyl)-2-f(4-methoxvbenzyl)thio]-2-methylpropvlkarbamát
K DMF roztoku (35 ml) obsahujícímu kyselinu (2R)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino)-3-[(4-methoxybenzyl)thio)-3-methylbutanovou (2,0 g, 5,41 mmol,1,2 ekv.) byl přidán N,N-diisopropylethylamin (1,06 ml, 6,09 mmol,1,35 ekv.), potom HATU (2,9 g, 7,67 mmol,
1,7 ekv.). Získaný jantarový roztok byl míchán při teplotě laboratoře po dobu 20 min. K tomuto míchanému roztoku byl přidán roztok (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátu (1,29 g, 4,51 mmol, 1,0 ekv.) a N,N-diisopropylethylamin (864 μΙ, 4,96 mmol, 1,1 ekv.) v DMF (12 ml). Získaný roztok byl míchán při teplotě laboratoře po dobu 18 h a potom byla reakce byla ukončena nasyceným roztokem roztokem NaHCO3 (přibližně 50 ml). Kalný roztok byl potom vlit do H2O (přibližně 100 ml) a extrahován EtOAc (3 x 50 ml). Spojené organické extrakty byly promyty H2O (2 x) a roztokem soli (1 x), sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaný světlehnědý olej byl čištěn bleskovou chromatografii s použitím směsi 1 : 1 hexany/EtOAc jako mobilní fáze. Bylo izolováno 1,96 g (4,23 mmol, 78% výtěžek) sloučeniny A jako bílé pěny.
1H NMR (CDCh) 400 MHz δ 729 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 6,83 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 5,48 (d, 1H, J = 51,4 Hz), 5,43 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 5,04 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 4,38 (d, 1H, J = 8,9 Hz), 4,27 (m, 1H), 4,04 (m, 1H),
3,80 (s, 2H), 3,77 (s, 3H), 2,72 (t, 1H, 15,5 Hz), 2,37 (m, 1H),1,47 1,41 (m,14H) ppm.
B. (2S,4S)-1 -{(2R)-2-Amino-3-[(4-methoxvbenzvl)thio1-3-methylbutanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K CH2CI2 roztoku (60 ml) obsahujícímu kyselinu trifluoroctovou (8 ml) byla přidána sloučenina A (1,2 g, 2,58 mmol, 1,0 ekv.). Získaný bleděžlutý roztok byl míchán při teplotě laboratoře po dobu 2 h a potom bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Získaná sůl TFA byla převedena na volnou bázi přidáním nasyceného roztoku NaHCO3 a extrahováním vodné vrstvy (2 x) EtOAc. Spojené organické extrakty byly sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná bělavá pěna byla čištěna bleskovou chromatografii s použitím 5% MeOH (s 0,1% NH3) v CH2CI2 jako mobilní fáze, za poskytnutí 897 mg (2,45 mmol, 95% výtěžek) bílé pěny. Pro vytvoření HCI soli byla volná báze převedena do Et2O a byl přidáván aceton, dokud všechny pevné látky nepřešly do roztoku. Po kapkách byl přidáván 2,0M HCI v etheru, dokud se již netvořila další sraženina. Sraženina byla potom zfiltrována a několikrát promyta Et2O. Získaná sůl byla sušena ve vysokém vakuu.
1H NMR (D20)400 MHz δ 7,31 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 6,88 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 5,49 (d, 1H, J = 50,5 Hz), 5,00 (d, 1H, J = 9,8 Hz), 4,02 3,52 (m, 8H), 2,65 (t, 1H, J = 15,7 Hz), 2,40 (m, 1H), 1,44 (s, 3H), 1,31 (s, 3H) ppm.
- 59 • ♦ 0 4 »4 4 » 44 ·· · · 0 0000 * ·*· · · »0 0 » 0 0 4 4 4 404 44«
0··000 000000 00 *
Příklad 6
CN (2S,4S)-1-{(2R)-2-Amino-3-methvl-3-í(3-fenylpropyl)thio1butanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. Methyl(2R)-2-amino-3-merkapto-3-methylbutanoát
K methanolovému roztoku (18 ml, 1,14 M) obsahujícímu Lpenicilamin (3,0 g, 20,11 mmol, 1,0 ekv.) byl přidán thionylchlorid (1,5 ml, 20,7 mmol, 1,03 ekv.). Získaná směs byla zahřívána pod zpětným chladičem 18 h a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Získaná čirá polotuhá látka byla použita v dalším kroku bez dalšího čištění. Bylo izolováno 328 g (20,1 mmol,100% výtěžek).
B. Methvl(2R)-2-r(terc-butoxykarbonyl)aminoj-3-merkapto-3-methylbutanoát
K CH2CI2 (60 ml) obsahujícímu sloučeninu A (3,28 g, 20,1 mmol, 1,0 ekv.) byl přidán di-terc-butyldikarbonát (4,48 g, 20,5 mmol, 1,02 ekv.) a triethylamin (7,0 ml, 50,3 mmol, 2,5 ekv.). Získaná směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 18 h. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek vložen do Et2O. Nerozpuštěná bílá pevná látka byla zfiltrována a filtrát promyt roztokem soli, sušen nad MgSO4 a zakoncentrován ve vakuu. Získaná bílá pevná látka byla použita v příštím kroku bez dalšího čištění. Bylo • · · · · · · · · • · « · · · · · · · · · · · · · · · · ·♦·
UU ” ···· ·· ·· ··♦· ·· · izolováno 5,01 g (19,02 mmol, 95% výtěžek).
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 4,26 (m, 1H), 3,72 (s, 3H), 1,44 1,42 (m,15H) ppm.
C. Methvl-(2R)-2-r(terc-butoxvkarbonvl)amino1-3-methvl-3-f(3-fenylpropyPthiolbutanoát
K CH3CN roztoku (20 ml) obsahujícímu sloučeninu B (346 mg, 1,31 mmol,1,0 ekv.) byl přidán terc-butoxid sodný (138 mg, 1,44 mmol, 1,1 ekv.). Získaná bleděžlutá směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 10 min a potom byl přidán 1-brom-3-fenylpropan (219 μΙ, 1,44 mmol, 1,1 ekv.). Získaný roztok byl ponechán míchat při teplotě laboratoře po dobu 18 h. Reakce byla potom ukončena nasyceným roztokem NH4CI, vlita do H2O a extrahována (2 x) EtOAc. Spojené extrakty byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Čištění bleskovou chromatografií s použitím směsi 2 : 1 hexan/EtOAc jako mobilní fáze. Izolováno 376 mg (0,988 mmol, 76% výtěžek).
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,30 - 7,16 (m, 5H), 5,38 (d, 1H, J =
8,8 Hz), 4,29 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 3,71 (s, 3H), 2,72 (t, 2H, J = 7,4 Hz), 2,58 - 2,51 (m, 2H), 1,89 - 1,82 (m, 2H), 1,44 (s, 9H), 1,36 (d, 6H, J =
8,8 Hz) ppm.
D. Kyselina (2R)-2-[(terc-butoxvkarbonvl)amino1-3-methvl-3-r(3-fenylpropyl)thio1butanová
K dioxanovému roztoku (7,5 ml)/H2O (2,5 ml) obsahujícímu sloučeninu C (376 mg, 0,988 mmol, 1,0 ekv.) byl přidán monohydrát hydroxidu lithného (207 mg, 4,94 mmol, 5,0 ekv.). Získaná heterogenní směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 18 h. Reakce byla potom ukončena nasyceným roztokem NH4CI, vlita do H2O a extrahována (2 x) EtOAc. Spojené extrakty byly sušeny
- 61 • · · · 9 9 9 9999
9 9 9 9 9 9
9 99 9 9 99 9 nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Pro čištění byla použita blesková chromatografie s použitím směsi 1 : 1 hexany/EtOAc (s 0,1% AcOH) jako mobilní fáze. Bylo izolováno 230 mg (0,626 mmol, 64% výtěžek).
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,31 - 7,16 (m, 5H), 5,51 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 4,33 (d, 1H, 9,5 Hz), 3,41 (t, 2H, J = 6,8 Hz), 2,79 (t, 2H, J = 7,3 Hz), 2,20 - 2,13 (m, 2H), 1,47 - 1,44 (m, 15 H) ppm.
E. Terc-butvl-(1R)-1-fí(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1-vl)karbonvll·-2-methvl-2f(3-fenvlpropvl)thio1propvlkarbamát
K DMF roztoku (5 ml) obsahujícímu sloučeninu D (230 mg, 0,626 mmol, 1,2 ekv.) byl přidán N,N-diisopropylethylamin (123 pl, 0,705 mmol, 1,35 ekv.), potom HATU (337 mg, 0,887 mmol, 1,7 ekv.). Získaný jantarový roztok byl míchán při teplotě laboratoře po dobu 20 min. K tomuto míchanému roztoku byl přidán roztok (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátu (149 mg, 0,522 mmol, 1,0 ekv.) a N,N-diiopropylethylamin (100 pl, 0,574 mmol, 1,1 ekv.) v DMF (2 ml). Získaný roztok byl míchán při teplotě laboratoře po dobu 18 h a reakce byla ukončena nasyceným roztokem NaHCO3 (přibližně 5 ml). Kalný roztok byl potom vlit do H2O (přibližně 20 ml) a extrahován EtOAc (3 x 10 ml). Spojené organické extrakty byly promyty H2O (2 x) a roztokem soli (1 x), sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaný světlehnědý olej byl čištěn bleskovou chromatografií s použitím směsi 1 : 1 hexany/EtOAc jako mobilní fáze. Bylo izolováno 190 mg (0,411 mmol, 79% výtěžek) sloučeniny E jako bílé pěny.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,28 - 7,17 (m, 5H), 5,46 (d, 1H, J =
51,4 Hz), 5,37 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 5,00 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 4,38 - 4,29 (m, 2H), 4,01 (m, 1H), 2,77 - 2,58 (m, 5H), 2,35 (m, 1 H),1,92 - 1,80 (m, 2H),1,44 - 1,34 (m,15H) ppm.
- 62 ΦΦ φφφφ • Φ φ φ φ · φ φ φ φ φ φ φ φ φ φφφφ φ · · • ΦΦΦΦΦ φ φφφφ φφ φφ φφφφ
F. (2S,4S)-1-{(2R)-2-Amino-3-methvl-3-í(3-fenvlpropvl)thio1butanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
Κ CH2CI2 roztoku (10 ml) obsahujícímu kyselinu trifluoroctovou (1 ml) byla přidána sloučenina E (190 mg, 0,411 mmol,1,0 ekv.). Získaný bleděžlutý roztok byl míchán při teplotě laboratoře 2 hod a potom bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Získaná sůl TFA byla převedena na volnou bázi přidáním nasyceného roztoku NaHCO3 a extrakcí vodné vrstvy (2 x) EtOAc. Spojené organické extrakty byly sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná bělavá pěna byla čištěna bleskovou chromatografií s použitím směsi 5% MeOH (s 0,1% NH3) v CH2CI2 jako mobilní fáze, za poskytnutí 134 mg (0,389 mmol, 94% výtěžek) bílé pěny. Pro vytvoření HCI soli byla volná báze převedena do Et2O a byl přidáván aceton, dokud všechny pevné látky nepřešly do roztoku. Po kapkách byl přidáván 2,0M HCI v etheru, dokud se již netvořila další sraženina. Sraženina byla potom zfiltrována a několikrát promyta Et2O. Získaná sůl byla sušena ve vysokém vakuu.
1H NMR (D2O) 400 MHz δ 7,23 - 7,11 (m, 5H), 5,46 (d, 1H, J =
50,4 Hz), 4,98 (d, 1H, J = 9,1 Hz), 4,04 - 3,96 (m, 2H), 3,68 (m, 1H), 2,62 - 2,30 (m,6H), 1,78-1,71 (m, 2H), 1,29 (d, 6H, J = 9,7 Hz) ppm.
Příklad 7
NH,
CN
4444
-63 44 44 44 4
4 4 «444 444
4 4· « 4444 • 444 4 4 44 44444
4 4 444 44 4
4444 44 44 4444 44 4 (2S,4S)-1-{(2R)-2-Amino-3-methvl-3-r(2-fenvlethvl)thio1butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. Methyl-(2R)-2-[(tercbutoxvkarbonvl)aminol-3-methvl-3-f(2-fenylethyDthiolbutanoát
K CH3CN roztoku (50 ml) obsahujícímu methyl(2R)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-merkapto-3-methylbutanoát (jak bylo uvedeno výše) (1,26 g, 4,78 mmol, 1,0 ekv.) byl přidán terc-butoxid sodný (597 mg, 6,21 mmol, 1,3 ekv.). Získaná bleděžlutá směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 10 min a potom byl přidán (2-bromethyl)benzen (718 μΙ, 5,26 mmol, 1,1 ekv.). Získaný roztok byl ponechán míchat při teplotě laboratoře po dobu 18 h. Reakce byla potom ukončena nasyceným roztokem NH4CI, vlita do H2O a extrahována (2 x) EtOAc. Spojené extrakty byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Pro čištění byla použita blesková chromatografie s použitím směsi 5 : 1 hexany/EtOAc jako mobilní fáze. Bylo izolováno 761 mg (2,07 mmol, 45% výtěžek).
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,31 - 7,19 (m, 5H), 5,36 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 4,33 (d, 1H, J = 9,1 Hz), 3,71 (s, 3H), 2,83 - 2,78 (m, 4H),
1,44 (s, 9H), 1,36 (d, 6H, J = 7,5 Hz) ppm.
B. Kyselina (2R)-2-[(terc-butoxykarbonvl)aminoj-3-methvl-3-[(2-fenvlethyl)thio)butanová
K dioxanovému roztoku (20 ml)/H2O (7 ml) obsahujícímu sloučeninu A (761 mg, 2,07 mmol, 1,0 ekv.) byl přidán monohydrát hydroxidu lithného (434 mg, 10,35 mmol, 5,0 ekv.). Získaná heterogenní směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře 18 h. Reakce byla potom ukončena nasyceným roztokem NH4CI, vlita do H2O a extrahována (2 x) EtOAc. Spojené extrakty byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Pro čištění byla použita blesková
- 64 • 0 0000
00 00 · • 0 · · 0 · · 0 0 0 • 0 00 0 0000 0 000 0 0 00 00000 000 000 000 0000 00 00 0000 00 0 chromatografie s použitím směsi 1 : 1 hexany/EtOAc (s 0,1% AcOH) jako mobilní fáze. Bylo izolováno 502 mg (1,42 mmol, 69% výtěžek).
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,31 - 7,18 (m, 5H), 5,42 (d, 1H, J =
8,3 Hz), 4,32 (s (br), 1H), 2,87 - 2,81 (m, 4H), 1,44 (s, 9H), 1,40 (s, 3H), 1,36 (s, 3H) ppm.
C. Terc-butvl(1R)-1~ff(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpvrrolidin-1-vHkarbonyl}-2-methvl-2f(2-fenvlethvl)thiojpropylkarbamát
K DMF roztoku (10 ml) obsahujícímu sloučeninu B (502 mg,
1,42 mmol, 1,2 ekv.) byl přidán Ν,Ν-diisopropylethylamin (278 pl, 1,59 mmol, 1,35 ekv.), potom HATU (764 mg, 2,01 mmol, 1,7 ekv.). Získaný jantarový roztok byl míchán při teplotě laboratoře 20 min. K tomuto míchanému roztoku byl přidán roztok (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátu (338 mg, 1,18 mmol, 1,0 ekv.) a Ν,Ν-diisopropylethylamin (226 pl, 1,3 mmol, 1,1 ekv.) v DMF (5 ml). Získaný roztok byl míchán při teplotě laboratoře po dobu 18 h a reakce byla ukončena nasyceným roztokem NaHCO3 (přibližně 5 ml). Kalný roztok byl potom vlit do H2O (přibližně 20 ml) a extrahován EtOAc (3 x 10 ml). Spojené organické extrakty byly promyty H2O (2 x) a roztokem soli (1 x), sušeny nad MgSOa a zakoncentrovány ve vakuu. Získaný světlehnědý olej byl čištěn bleskovou chromatografii s použitím směsi 1 : 1 hexany/EtOAc jako mobilní fáze. Bylo izolováno 361 mg (0,803 mmo), 80% výtěžek) sloučeniny C jako bílé pěny.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,30 - 7,20 (m, 5H), 5,46 (d, 1H, J = 51,0 Hz), 5,38 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 5,01 (d, 1H, J = 9,4 Hz), 4,36 - 4,25 (m, 2H), 4,06 (m, 1H), 2,87 - 2,84 (m, 4H), 2,70 (t, 1H, J = 15,0 Hz), 2,35 (m, 1H), 1,41 - 1,37 (m, 15H) ppm.
• ft ftftftft • ·
-65 • · ·· · ft··· • ftftft · · ftft ·«··· • ftft ftftft ftftft ftftftft ftft ftft ftftftft ftft ·
D. (2S,4S)-1-f(2R)-2-Amino-3-methyl-3-f(2-fenvlethvl)thio)butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
K CH2CI2 roztoku (20 ml) obsahujícímu kyselinu trifluoroctovou (2 ml) byla přidána sloučenina C (361 mg, 0,803 mmol, 1,0 ekv.). Získaný bleděžlutý roztok byl míchán při teplotě laboratoře po dobu 2 h a potom bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Získaná TFA sůl byla převedena na volnou bázi přidáním nasyceného roztoku NaHCO3 a extrakcí vodné vrstvy (2 x) EtOAc. Spojené organické extrakty byly sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná bělavá pěna byla čištěna bleskovou chromatografii s použitím směsi 5% MeOH (s 0,1% NH3) v CH2CI2 jako mobilní fáze, za poskytnutí 223 mg (0,638 mmol, 80% výtěžek) bílé pěny. Pro vytvoření HCI soli byla volná báze převedena do Et2O a byl přidáván aceton, dokud veškerá pevná látka nepřešla do roztoku. Po kapkách byl přidáván 2,0M HCI v etheru, dokud se již netvořila další sraženina. Sraženina byla potom zfiltrována a několikrát promyta Et2O. Získaná sůl byla sušena ve vysokém vakuu.
1H NMR (D2O) 400 MHz δ 720 - 7,09 (m, 5H), 5,43 (d, 1H, J =
50,5 Hz), 4,94 (d, 1N, J = 9,5 Hz), 4,13 (m, 1H), 3,89 (s, 1N), 3,71 (m,
1H), 2,84 - 2,70 (m, 4H), 2,59 (t, 1H, J = 15,7 Hz), 2,37 (m, 1H), 128 (s, 3H), 1,22 (s, 3H) ppm,
Příklad 8
F
CN
- 66 φφ φφφφ
Φ Φ φ φ φ φ φ φ φφφ φφφφ φφφφ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φφφ φ φφφφ φ φ · φφ φ (2S,4S)-1-((2R)-2-Amino-3-[3-(4-fluorfenvl)propyl1thio)-3-methylbutanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. 3-(4-Fluorfenyl)propan-1-ol
K THF roztoku (200 ml) obsahujícímu kyselinu 3-(4-fluorfenyl)propanovou (33,6 g, 0,2 mol) byl přidán 1,0M roztok LiAIH4 v Et2O (200 ml, 0,2 mol) v průběhu 0,5 h. Získaná směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře 18 h. Reakce byla pomalu ukončena H2O a vodná vrstva byla extrahována (1 x) Et2O. Spojené organické extrakty byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaný olej byl použit v dalším kroku bez dalšího čištění. Bylo izolováno 31,4 g (02 mol, 100% výtěžek).
B. 1-(3-Chlorpropyl)-4-fluorbenzen
K CH2Cl2 roztoku (300 ml) obsahujícímu sloučeninu A (31,4 g, 0,2 mol) byl přidán dichlortrifenylfosforan (110 g, 0,33 mol). Získaná směs byla míchána při teplotě laboratoře 20 min a potom zakoncentrována ve vakuu. Ke zbytku byly přidány hexany (přibližně 200 ml) a získaná heterogenní směs byla míchána při teplotě laboratoře po dobu 30 min. Nerozpuštěné pevné podíly byly zfiltrovány a promyty hexany. Filtrát byl zakoncentrován ve vakuu a získaný olej byl použit v dalším kroku bez dalšího čištění. Bylo izolováno 33,3 g (0,193 mol, 96% výtěžek).
C. Methvl-(2R)-2-[(terc-butoxvkarbonyl)amino1-3-{[3-(4-fluorfenyl)-propyl]thio)-3-methvlbutanoát
K CH3CN roztoku (60 ml) obsahujícímu methyl-(2R)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-merkapto-3-methylbutanoát (jak bylo uvedeno výše) (1,51 g, 5,73 mmol, 1,0 ekv.) byl přidán terc-butoxid sodný (716 mg, 7,45 mmol, 1,3 ekv.). Získaná bleděžlutá směs byla
- 67 ·«*· ·· ·· ·· · • · · · • 9 · 9 * · · ·· · · ® · · ·· · • · · 9 9 ·
9999 99 9 ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 10 min a potom byl přidán 1-(3-chlorpropyl)-4-fluorbenzen (jak bylo uvedeno výše) (1,09 g,
6,3 mmol, 1,1 ekv.). Získaný roztok byl ponechán míchat při teplotě laboratoře po dobu 18 h. Reakce byla potom ukončena nasyceným roztokem NH4CI, vlita do H2O a extrahována (2 x) EtOAc. Spojené extrakty byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu a potom čištěny bleskovou chromatografii s použitím směsi 5 : 1 hexany/EtOAc jako mobilní fáze. Bylo izolováno 700 mg (1,75 mmol, 31% výtěžek).
1H NMR (CDCI3) 400 MHz δ 7,14 - 7,10 (m, 2H), 6,98 - 6,93 (m, 2H), 5,36 (d, 1H, J = 9,1 Hz), 4,29 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 3,71 (s, 3H), 2,68 (t, 2H, J = 7,4 Hz), 2,56 - 2,49 (m, 2H), 1,86 - 1,79 (m, 2H), 1,43 (s, 9H), 1,35 (d, 6H, J = 6,8 Hz) ppm.
D. Kyselina (2R)-2-f(terc-butoxvkarbonvl)amino1-3-{[3-(4-fluorfenyl)-propyl1thio)-3-methvlbutanová
K dioxanovému roztoku (20 ml)/H20 (7 ml) obsahujícímu sloučeninu A (700 mg, 1,75 mmol, 1,0 ekv.) byl přidán monohydrát hydroxidu lithného (367 mg, 8,75 mmol, 5,0 ekv.). Získaná heterogenní směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře 18 h. Reakce byla potom ukončena nasyceným roztokem NH4CI, vlita do H2O a extrahována (2 x) EtOAc. Spojené extrakty byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Pro čištění byla použita blesková chromatografie s použitím směsí 1 : 1 hexany/EtOAc (s 0,1% AcOH) jako mobilní fáze. Bylo izolováno 512 mg (1,33 mmol, 76% výtěžek).
1H NMR (CDCI3) 400 MHz δ 7,13 - 7,10 (m, 2H), 6,99 - 6,93 (m, 2H), 5,41 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 4,29 (s (br), 1H), 2,68 - 2,55 (m, 4H), 1,88 - 1,80 (m, 2H), 1,43 (s, 9H), 1,39 (s, 3H), 1,36 (s, 3H) ppm.
- 68 ·* · • · · • · · · • · · · · • · · *· ·
E. Terc-butvl-(1R)-1-{[(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpyrrolidin-1-vnkarbonvl}-2-{[3-(4-fluorfenvl)propvl)thio)-2-methvlpropylkarbamát
K DMF roztoku (15 ml) obsahujícímu sloučeninu B (512 mg,
1,33 mmol, 1,2 ekv.) byl přidán Ν,Ν-diisopropylethylamin (261 pl,
1,5 mmol, 1,35 ekv.), potom HATU (717 mg, 1,89 mmol, 1,7 ekv.). Získaný jantarový roztok byl míchán při teplotě laboratoře po dobu 20 min. K tomuto míchanému roztoku byl přidán roztok (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátu (317 mg, 1,11 mmol, 1,0 ekv.) a Ν,Ν-diisopropylethylamin (213 μί, 1,22 mmol, 1,1 ekv.) v DMF (10 ml). Získaný roztok byl míchán při teplotě laboratoře 18 h a reakce byla ukončena nasyceným roztokem NaHCO3 (přibližně 5 ml). Kalný roztok byl potom vlit do H2O (přibližně 20 ml) a extrahován EtOAc (3x10 ml). Spojené organické extrakty byly promyty H2O (2 x) a roztokem soli (1 x), sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaný jantarový olej byl čištěn bleskovou chromatografií s použitím směsi 1 : 1 hexan/EtOAc jako mobilní fáze. Bylo izolováno 420 mg (0,872 mmol, 79% výtěžek) sloučeniny C jako bílé pěny.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,14 - 7,11 (m, 2H), 6,97 - 6,92 (m, 2H), 5,47 (d, 1H, J= 50,9 Hz), 5,36 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 5,00 (d,1H, J =
9,3 Hz), 4,42 - 4,32 (m, 2H), 4,01 (m, 1H), 2,74 - 2,57 (m, 5H), 2,36 (m, 1H), 1,89 - 1,76 (m, 2H), 1,41 - 1,37 (m, 15H) ppm.
F. (2S,4S)-1-((2R)-2-Amino-3~fr3-(4-fluorfenyl)propvl)thio)-3-methvlbutanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
K CH2CI2 roztoku (30 ml) obsahujícímu kyselinu trifluoroctovou (3 ml) byla přidána sloučenina C (420 mg, 0,872 mmol, 1,0 ekv.). Získaný bleděžlutý roztok byl míchán při teplotě laboratoře 2 h a potom bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Získaná TFA sůl byla převedena na volnou bázi přidáním nasyceného roztoku NaHCO3 a extrakcí vodné vrstvy (2 x) EtOAc. Spojené organické extrakty byly sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná bělavá
9
9
9 9
9999 • * ·· ·
-69 ·· ·*·· ·· 99
9 9
9
9 9
9999 99
9 9
9 9
9999 pěna byla čištěna bleskovou chromatografii s použitím směsi 5% MeOH (s 0,1% NH3) v CH2CI2 jako mobilní fáze, za poskytnutí 275 mg (0,721 mmol, 83% výtěžek) bílé pěny. Pro vytvoření HCI soli byla volná báze převedena do Et2O a byl přidáván aceton, dokud všechny pevné podíly nepřešly do roztoku. Po kapkách byl přidáván 2,0M HCI v etheru, dokud se již netvořila další sraženina. Sraženina byla potom zfiltrována a několikrát promyta Et2O. Získaná sůl byla sušena ve vysokém vakuu.
1H NMR (D2O) 400 MHz δ 7,15 - 7,10 (m, 2H), 6,96 - 6,90 (m, 2H), 5,48 (d, 1H, J = 50,9 Hz), 4,99 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,07 - 3,98 (m, 2H), 3,74 (m, 1H), 2,64 - 2,32 (m, 6H), 1,80 - 1,68 (m, 2H), 1,30 (d, 6H, J = 6,6 Hz) ppm.
Příklad 9
F
(2S,4S)-1-f(2R)-2-Amino-3-r(4-methoxvbenzvl)sulfonvH-3-methylbutanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. Terc-butvl(1R)-1-{f(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1-vl)karbonyl)-2-[(4-methoxvbenzvl)sulfonyll-2-methylpropvlkarbamát
K CHCI3 roztoku (25 ml) obsahujícímu terc-butyl(1 R)-1-{[(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpyrrolidin-1-yl]karbonyl}-2-[(4-methoxybenzyl)thio]-2-methylpropylkarbamát (jak bylo uvedeno výše) (473 mg, 1,017 mmol, 1,0 ekv.) byla přidána kyselina 3-chlorperoxybenzoová (1,76 g, 10,18 mmol, 10 ekv.). Získaná směs byla míchána při teplotě ·· ···· laboratoře 18 h. Reakce byla potom ukončena 1,0N NaOH (přibližně 5 ml) a vrstvy byly odděleny. Organická vrstva byla sušena nad MgSO4 a zakoncentrována ve vakuu. Získaná bílá lehká pevná látka byla použita v dalším kroku bez dalšího čištění. Bylo izolováno 400 mg (0,805 mmol, 80% výtěžek).
1H NMR (CDCI3) 400 MHz δ 7,35 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 6,92 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 5,48 (d, 1H, J = 51,0 Hz), 5,04 (d, 1H, J = 9,1 Hz),
4,99 (d, 1H, J = 9,4 Hz), 4,34 - 3,98 (m, 4H), 3,81 (s, 3H), 2,73 (t, 1N, J = 15,0 Hz), 2,39 (m, 1H), 1,58 (s, 3H), 1,53 (s, 3H), 1,42 (s, 9H) ppm.
B. (2S,4S)-1-{(2R)-2-Amino-3-[(4-methoxybenzvl)sulfonvn-3-methvlbutanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
K CH2CI2 roztoku (40 ml) obsahujícímu kyselinu trifluoroctovou (4 ml) byla přidána sloučenina A (400 mg, 0,805 mmol, 1,0 ekv.). Získaný bleděžlutý roztok byl míchán při teplotě laboratoře 2 h a potom bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Získaná TFA sůl byla převedena na volnou bázi přidáním nasyceného roztoku NaHCO3 a extrahováním vodné vrstvy (2 x) EtOAc. Spojené organické extrakty byly sušeny nad Na2SO4 a koncentrovány ve vakuu. Získaná bělavá pěna byla čištěna bleskovou chromatografií s použitím směsi 5% MeOH (s 0,1% NH3) v CH2CI2 jako mobilní fáze, za poskytnutí 296 mg (0,745 mmol, 93% výtěžek) bílé pěny. Pro vytvoření HCI soli byla volná báze převedena do Et2O a byl přidáván aceton, dokud všechny pevné podíly nepřešly do roztoku. Po kapkách byl přidáván 2,0M HCI v etheru, dokud se již netvořila další sraženina. Sraženina byla potom zfiltrována a několikrát promyta Et2O. Získaná sůl byla sušena ve vysokém vakuu.
1H NMR (D2O) 400 MHz δ 7,28 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 6,92 (d, 2N, J = 8,8 Hz), 5,47 (d, 1H, J = 50,6 Hz), 5,00 (d, 1H, J = 10,0 Hz), 4,66 (s, 1H), 4,51 (s, 2H), 4,05 (m, 1N), 3,81 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 2,64 (t, 1H,
- 71 J = 15,7 Hz), 2,42 (m, 1H), 1,62 (s, 3H), 1,48 (s, 3H) ppm.
Příklad 10
F
(2S,4S)-1-f(2R)-2-Amino-3-f(4-methoxvbenzvl)sulfinvl1-3-methylbutanoyl)-4-fluorpvrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. Terc-butvl(1 R)-1-{f(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpvrrolidin-1-vnkarbonyl)-2-|'(4-methoxybenzyl)sulfinyll-2-methylpropvlkarbamát
K methanolovému roztoku (10 ml) obsahujícímu terc-butyl(1 R)1—{[(2S,4S)-2-kyano--4-fluorpyrrolidin-1-yl]karbonyl}-2-[(4-methoxybenzyl)thio]-2-methylpropylkarbamát (jak bylo uvedeno výše) (660 mg,
1,42 mmol, 1,0 ekv.) byl přidán roztok NalO4 (334 mg, 1,56 mmol, 1,1 ekv.) v H2O (10 ml). Získaná směs byla míchána při teplotě laboratoře 18 h. Získaná heterogenní směs byla rozdělena mezi CH2CI2 a H2O. Organická vrstva byla sušena nad MgSO4 a zakoncentrována ve vakuu. Získaná bílá lehká pevná látka byla použita v příštím kroku bez dalšího čištění. Bylo izolováno 600 mg (1,25 mmol, 87% výtěžek) ve formě směsi diastereomerů.
1H NMR (CDCI3) 400 MHz δ 7,27 - 7,25 (m, 2H), 6,90 - 6,88 (m, 2H), 5,87 (s (br), 1H), 5,40 (m, 1H), 5,03 - 4,95 (m, 2H), 4,19 - 3,66 (m, 7H), 2,65 (m, 1H), 2,36 (m, 1H), 1,49 - 1,38 (m, 15H) ppm.
- 72 • · · · · · • · · · ····· • · · · · ···· ·· ·
B. (2S,4S)-1-f(2R)-2-Amino-3-f(4-methoxvbenzvl)sulfinvl)-3-methylbutanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
K CH2CI2 roztoku (50 ml) obsahujícímu kyselinu trifluoroctovou (5 ml) byla přidána sloučenina A (600 mg, 1,25 mmol, 1,0 ekv.). Získaný bleděžlutý roztok byl míchán při teplotě laboratoře 2 h a potom bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Získaná TFA sůl byla převedena na volnou bázi přidáním nasyceného roztoku NaHCCh a extrakcí vodné vrstvy (2 x) EtOAc. Spojené organické extrakty byly sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná bělavá pěna byla čištěna bleskovou chromatografii s použitím směsi 5% MeOH (s 0,1% NH3) v CH2CI2 jako mobilní fáze, za poskytnutí 368 mg (0,965 mmol, 77% výtěžek) bílé pěny. Pro vytvoření HCI soli byla volná báze převedena do Et2O a byl přidáván aceton, dokud všechny pevné podíly nepřešly do roztoku. Po kapkách byl přidáván 2,0M HCI v etheru, dokud se již netvořila další sraženina. Sraženina byla potom zfiltrována a několikrát promyta Et2O. Získaná sůl byla sušena ve vysokém vakuu.
1H NMR (D2O) 400 MHz δ 7,25 - 7,21 (m, 2H), 6,93 - 6,90 m, 2N), 5,42 (m, 1H), 5,02 (m, 1H), 4,48 (m, 1H), 4,24 - 3,70 (m, 7H), 2,68 - 2,31 (m, 2H), 1,52 - 1,32 (m, 6H) ppm.
Příklad 11
F
CN
- 73 (2S,4S)-1-((2R)-2-Amino-3-methyl-3-f4-(trifluormethyl)benzyl]thio}-butanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. Kyselina (2R)-2-F(Terc-butoxykarbonvl)amino1-3-merkapto-3-methylbutanová
K THF roztoku (300 ml) obsahujícímu L-penicilamin (5,0 g, 33,51 mmol, 1,0 ekv.) byl přidán hydroxid draselný (1,88 g, 33,51 mmol, 1,0 ekv.). Směs byla potom ochlazena na 0 °C a byl přidán di-terc-butyldikarbonát (7,31 g, 33,51 mmol, 1,0 ekv.). Získaná míchaná směs byla ponechána ohřát na teplotu laboratoře přes noc. Reakční směs byla potom vlita do H2O (přibližně 300 ml) a extrahována (2 x) EtOAc. Spojené organické extrakty byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná bílá pevná látka byla použita v dalším kroku bez dalšího čištění. Bylo izolováno 7,68 g (30,80 mmol, 92% výtěžek).
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 5,51 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,33 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 1,55 (s, 3N), 1,45 (s, 9H), 1,41 (s, 3H) ppm.
B. Kyselina (2R)-2-[(Terc-butoxvkarbonvl)amino1-3-methyl-3-fí4-(trifluormethvl)benzyl)thio)butanová
K CH3CN roztoku (40 ml) obsahujícímu sloučeninu A (1,0 g, 4,011 mmol, 1,0 ekv.) byl přidán terc-butoxid sodný (810 mg,
8,42 mmol, 2,1 ekv.). Získaný bleděžlutý roztok byl ponechán míchat po dobu 10 min a potom byl přidán 4-(trifluormethyl)benzylbromid (1,05 g, 4,41 mmol, 1,1 ekv.). Získaná směs byla zahřívána na 50 °C a ponechána míchat 18 h. Reakční směs byla potom vlita do H2O (přibližně 50 ml) a extrahována (2 x) EtOAc. Spojené extrakty byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná pevná látka byl použita v dalším kroku bez dalšího čištění. Bylo izolováno 1,45 g (3,55 mmol, 89% výtěžek).
- 74 • · • · · t tttt 1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,55 (d, 2H, J = 8,1 Hz), 7,44 (d, 2H, J = 8,1 Hz), 5,39 (s (br), 1H), 4,44 (s (br), 1H), 3,85 (s, 2H), 1,45 1,43 (m, 15H) ppm.
C. Terc-butyl(1 R)-1-{f(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1-yl1karbonvl)-2-methyl-2-fí4-ftrifluormethvl)benzvl)thio)propylkarbamát
K DMF roztoku (30 ml) obsahujícímu sloučeninu B (1,45 mg, 3,55 mmol, 12 ekv.) byl přidán Ν,Ν-diisopropylethylamin (698 pl, 4,01 mmol, 1,35 ekv.), potom HATU (1,92 g, 5,05 mmol, 1,7 ekv.). Získaný jantarový roztok byl míchán při teplotě laboratoře po dobu 20 min. K tomuto míchanému roztoku byl přidán roztok (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátu (849 mg, 2,97 mmol, 1,0 ekv.) a N,N-diisopropylethylaminu (569 μΙ, 3,27 mmol, 1,1 ekv.) v DMF (25 ml). Získaný roztok byl míchán při teplotě laboratoře 18 h a potom byla reakce ukončena nasyceným roztokem NaHCCU (přibližně 5 ml). Kalný roztok byl potom vlit do H2O (přibližně 20 ml) a extrahován EtOAc (3 x 10 ml). Spojené organické extrakty byly promyty H2O (2 x) a roztokem soli (1 x), sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaný světlehnědý olej byl čištěn bleskovou chromatografií s použitím směsi 1 : 1 hexany/EtOAc jako mobilní fáze. Bylo izolováno 682 mg (1,35 mmol, 45% výtěžek) sloučeniny C jako bílé pěny.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,55 (d, 2H, J = 8,1 Hz), 7,50 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 5,49 (d, 1H, J = 50,8 Hz), 5,42 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 5,03 (d, 1H, J = 10,0 Hz), 4,40 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 4,32 (m, 1H), 4,04 (m, 1H), 3,88 (s, 2H), 2,74 (t, 1H, J = 15,1 Hz), 2,38 (m, 1H), 1,47 (s, 3H), 1,42 (s, 9H), 1,41 (s, 3H) ppm.
- 75 D. (2S,4S)-1-((2R)-2-Amino-3-methyl-3-{f4-(trifluormethvl)benzvn-thio)butanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
K CH2CI2 roztoku (70 ml) obsahujícímu kyselinu trifluoroctovou (7 ml) byla přidána sloučenina A (682 mg, 1,35 mmol, 1,0 ekv.). Získaný bleděžlutý roztok byl míchán při teplotě laboratoře po dobu 2 h a potom bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Získaná TFA sůl byla převedena na volnou bázi přidáním nasyceného roztoku NaHCO3 a extrakcí vodné vrstvy (2 x) EtOAc. Spojené organické extrakty byly sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná bělavá pěna byla čištěna bleskovou chromatografií s použitím směsi 5% MeON (s 0,1% NH3) v CN2CI2 jako mobilní fáze, za poskytnutí 390 mg (0,967 mmol, 72% výtěžek) bílé pěny. Pro vytvoření HCI soli byla volná báze převedena do Et2O a byl přidáván aceton, dokud všechny pevné podíly nepřešly do roztoku. Po kapkách byl přidáván 2,0M HCI v etheru, dokud se již netvořila další sraženina. Sraženina byla potom zfiltrována a několikrát promyta Et2O. Získaná sůl byla sušena ve vysokém vakuu.
1H NMR (D2O) 400 MHz δ 7,57 (d, 2H, J = 8,1 Hz), 7,49 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 5,46 (d, 1H, J = 51,4 Hz), 4,98 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 4,05 3,53 (m, 5H), 2,62 - 2,28 (m, 2H), 1,40 (s, 3H), 1,31 (s, 3H) ppm.
Příklad 12
ΌΝ
NH2
O
- 76 (2S,4S)-1-[(2S)-2-Amino-2-(1-vinvlcvklopentvl)ethanoylj-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A, Terc-butvl(1S)-2-[(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1-yl1-2-oxo-1-(1-vinylcyklopentyDethylkarbamát
K DMF roztoku (25 ml) obsahujícímu racemickou kyselinu [(terc-butoxykarbony)aminoj(1-vinylcyklopentyl)octovou (jak je popsáno v Robi, Jeffrey A.; Sulsky, Richard B.; Augeri, David J.; Magnin, David R.; Hamann, Lawrence G.; Betebenner, David A.: Preparation of fused cyklopropylpyrrolidine-based inhibitors of dipeptidyl peptidase IV, WO 200168603A2) (1,07 g, 3,97 mmol) byly přidány Hunigova báze (0,835 ml, 4,37 mmol) a HATU (1,66 g, 4,37 mmol). Získaný roztok byl míchán po dobu 15 min při teplotě laboratoře, potom byl po kapkách, v průběhu 2 až 3 min přidán (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát (1,14 g, 3,97 mmol) a Hunigova báze (0,835 ml, 4,37 mmol) v 10 ml DMF. Získaný roztok byl míchán při teplotě laboratoře po dobu 18 h, byla reakce ukončena H2O. Roztok byl vlit do H2O a organické podíly extrahovány EtOAc (2 x). Po promytí nasyceným roztokem NaCI a 1,0N HCI byly organické podíly sušeny (MgSO4) a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu, za získání tmavého oleje, který byl čištěn na silikagelu s použitím systému Biotage FlashElute System, a s elucí gradientovým způsobem s hexany/EtOAc 3 : 1 až 1 : 1 za poskytnutí dvou produktů, diastereomerních, v poloze alfa-amino (C1), v poměru přibližně 1 : 1 (582 mg diastereomerů 1, 628 mg diastereomerů 2, 83% celkový výtěžek). Na základě analýzy vibračním cirkulárním dichroismem hotového produktu bylo zjištěno, že pomaleji se eluující diastereomer má absolutní stereochemickou konfiguraci (S).
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 5,92 (dd, 1H, J = 10,8, 17,3 Hz), 5,38 (m, 1H), 5,22 (dd, 2H, J = 10,8, 27,4 Hz), 5,02 (d, 1H, J =
10,3 Hz), 4,23 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 4,06 (m, 2H), 2,63 (t, 1H, J = • · · · · • · » · ·
- 77 15,5 Hz), 2,40 - 2,23 (m, 2H), 1,85 (m, 1H), 1,75 - 1,52 (m, 6H), 1,43 (m, 1H), 1,37 (s, 9H) ppm.
B. (2S,4S)-1-í(2S)-2-Amino-2-(1-vinvlcvklopentyl)ethanovn-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
Do baňky obsahující terc-butyl(1S)-2-[(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpyrrolidin-1-ylj-2-oxo1-(1-vinylcyklopentyl)ethylkarbamát (70 mg, 0,19 mmol) v 1 ml 1,4-dioxanu byly přidány 2 ml 4N HCI v 1,4-dioxanu, potom 1 ml 2N HCI v Et2O. Získaný roztok byl míchán při teplotě laboratoře po dobu 3 h, během kterých byl výchozí materiál spotřebován, jak bylo zjištěno pomocí TLC. K reakční směsi byly přidány 3 ml Et2O, potom 3 ml hexanů. Získaná světlehnědá sraženina byla zfiltrována, smísena s Et2O, oddělena vakuovou filtrací a sušena ve vakuu, za poskytnutí sloučeniny B jako krémové pevné látky (35 mg, 70% výtěžek).
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 5,83 (dd, 1H, J =10,7, 17,6 Hz),
5,36 (dd, 2H, J = 10,7, 27,7 Hz), 5,07 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 4,16 (m, 2H), 3,79 (m, 1H), 2,63 (t, 1H, J = 16,2 Hz), 2,45 (m, 1H),1,86 - 1,58 (m, 7H), 1,36 (Μ, 3H) ppm.
Příklad 13
OMe ·« ···· • ·
- 78 • · · • ···· (2S,4S)-1-[(2S)-2-Amino-5-(4-methoxvfenvl)-3,3-dimethvlpentanoyl1-4-fluorpvrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. 4-(4-Methoxyfenvl)-2,2-dimethylbutanal
K toluenovému roztoku (80 ml) obsahujícímu 4-(4-methoxyfenyl)-2,2-dimethylbutannitril (3,65 g, 18,0 mmol; viz Knochel, P. a další, Org. Letí. 2000, 2, 3285, pro přípravu této sloučeniny) ochlazenému na -78 °C, bylo přidáno 18,0 ml 1,5M toluenového roztoku DIBAL (27,0 mmol). Po 3 h při -78 °C byla reakce byla ukončena roztokem H2O/THF (75 ml/15 ml) obsahujícím octan sodný (4,6 g) a kyselinu octovou (4,6 ml) při -78 °C. K tomuto roztoku byl přidán celit, potom Et2O. Roztok byl ponechán ohřát na laboratorní teplotu a potom byl zfiltrován přes lože celitu. Celit byl důkladně opláchnut Et2O a potom byl filtrát promyt H2O. Po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbytek byl čištěn chromatografií na koloně (hexany/EtOAc (9 : 1)) za získání 3,55 g (172 mmol, 96% výtěžek) sloučeniny A.
1H NMR (CDCI3) 400 MHz δ 9,47 (s, 1N), 7,07 (d, 2N, J =
8,6 Hz), 6,81 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 3,78 (s, 3H), 2,48 - 2,44 (m, 2H), 1,77 - 1,73 (m, 2H), 1,11 (s, 6H) ppm.
B. 1,1,1-Trichlor-5-(4-methoxvfenvl)-3,3-dimethylpentan-2-ol
K THF roztoku (10 ml) obsahujícímu sloučeninu A (511 mg, 2,48 mmol) a bezvodý chloroform (311 mg, 2,60 mmol), ochlazenému na -78 °C, bylo po kapkách přidáno 2,6 ml 1,0M TNF roztoku LiHMDS (2,60 mmol) v průběhu 5 min. Získaný roztok byl míchán při -78 °C 30 min a potom byla reakce ukončena H2O. Po ohřátí byly organické podíly extrahovány EtOAc a po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Zbylý olej byl čištěn chromatografií na koloně (10% EtOAc/hexany) za získání 588 mg (1,81 mmol, 73% výtěžek) ·· ·«··
- 79 • · · · · • · · · · ♦ • · · · · · ···· · · ·· ···· sloučeniny B jako bílé pevné látky.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,10 (d, 2H, J = 8,7 Hz), 6,82 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 4,05 (d, 1H, J = 5,7 Hz), 3,78 (s, 3H), 2,95 (d, 1H, J =
5,7 Hz), 2,64 - 2,59 (m, 2H), 1,95 (m, 1H), 1,73 (m, 1H), 1,32 (s, 3H), 1,25 (s, 3N) ppm.
C. Kyselina 2-azido-5-(4-methoxvfenvl)-3,3-dimethylpentanová
K DME roztoku (4 ml) obsahujícímu sloučeninu B (581 mg, 1,79 mmol) bylo přidáno 7 ml vodného roztoku obsahujícího azid sodný (232 mg, 3,58 mmol) a hydroxid sodný (286 mg, 7,15 mmol) při laboratorní teplotě. Po míchání přes noc byl roztok vlit do 2,0M NaOH a organické podíly extrahovány Et2O. Vodná vrstva byla extrahována nasyceným roztokem NaHSO4 a organické podíly extrahovány EtOAc (2 x). Po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbylý olej čištěn chromatografii na koloně (5% MeOH/CH2CI2) za získání 186 mg (0,67 mmol, 37% výtěžek) sloučeniny C.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,09 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 6,82 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 3,91 (s, 1H), 3,78 (s, 3H), 2,58 - 2,52 (m, 2H), 1,71 1,61 (m, 2H), 1,10 (s, 6H) ppm.
D. (2S,4S)-1-f2-Azido-5-(4-methoxvfenyl)-3,3-dimethvlpentanovl1-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
K DMF roztoku (15 ml) obsahujícímu sloučeninu C (696 mg, 2,52 mmol) a N,N-diisopropylethylamin (358 mg, 2,77 mmol) byl přidán HATU (1,05 g, 2,77 mmol) při laboratorní teplotě. Po 20 min byly přidány roztok DMF (8 ml) obsahující (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát (755 mg, 2,64 mmol) a N,N-diisopropylethylamin (341 mg, 2,64 mmol). Roztok byl míchán přes noc a potom byl zředěn EtOAc a promyt H2O (3 x), nasyceným roztokem NaHCO3 a 2,0M HCI. Po usušení nad MgSO4 bylo
- 80 ·· ···· ·♦ · ··· · · · · · · ···· ·· ·· ···· ·· ♦ rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Zbylý žlutý olej byl čištěn chromatografii na koloně (na počátku hexany/EtOAc/CH2CI2 (6:3:1), potom hexany/EtOAc/CH2CI2 (3:1: 1)) za získání 605 mg (1,62 mmol, 64% výtěžek) sloučeniny D jako bílé pevné látky, která byla na základě analýzy 1H NMR určena jako směs diastereomerů 3 2.
Diastereomerní směs byla použita v dalším kroku.
E. (2S,4S)-1-f(2S)-2-Amino-5-(4-methoxyfenyl)-3,3-dimethylpentanoyi1-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K EtOH roztoku (8 ml) obsahujícímu 10% Pd/C (200 mg) byl přidán roztok 1 : 1 THF/EtOH (10 ml) obsahující sloučeninu D (593 mg, 1,59 mmol). Roztok byl 4 x odplyněn a potom umístěn pod balonem vodíku. Po 6,5 h byl roztok zfiltrován přes lože celitu, přičemž celit byl důkladně propláchnut CH2CI2. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbylá pevná látka byla čištěna chromatografii na koloně (5% methanolický NH3/CH2CI2), za získání 251 mg (0,72 mmol) sloučeniny E jako volné báze. Tento materiál byl potom rozpuštěn ve 2 ml CH2CI2 a byly přidány 3,0 ml 4,0M dioxanového roztoku HCI. Rozpouštědlo bylo potom ihned odstraněno ve vakuu a zbylý olej rozetřen s Et2O. Získaná pevná látka byla oddělena vakuovou filtrací za získání 231 mg (0,60 mmol) sloučeniny E jako hydrochloridové soli.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7,13 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 6,81 (d, 2H, 7= 8,7 Hz), 5,31 (d (br), 1H, J= 51,1 Hz), 5,09 (d, 1H, J= 9,5 Hz),
4,10 (m, 1H), 4,01 (s, 1H), 3,86 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 2,65 - 2,42 (m, 4H), 1,76 - 1,72 (m, 2H), 1,20 (s, 6H) ppm.
Příklad 14
• · · · • · · · · • · · · • ·· ····
- 81 ·· «·»· ·« ·· «« * • · · « · · · • · ·♦·· • · · ·· · (2S,4S)-1-{(2R)-2-Amino-3-methvl-3-[(3-fenvlpropvl)sulfonvnbutanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
A. Terc-butvl(1 R)-1-f[(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1-vl1karbonvl)-2-methvl-2-f(3-fenvlpropvl)sulfonvUpropylkarbamát
K CHCI3 roztoku (50 ml) obsahujícímu terc-butyl(1R)-1-{[(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpyrrolidin-1-yl]karbonyl}-2-methyl-2-[(3-fenylpropyl)thio]propylkarbamát (jak bylo uvedeno výše) (830 mg, 1,79 mmol, 1,0 ekv.) byla přidána kyselina 3-chlorperoxybenzoová (3,09 g, 17,9 mmol, 10 ekv.). Získaná směs byla míchána při teplotě laboratoře 18 h. Reakce byla ukončena 1,0N NaOH (přibližně 10 ml) a vrstvy odděleny. Organická vrstva byla sušena nad MgSO4 a zakoncentrována ve vakuu. Získaná bílá lehká pevná látka byla použita v dalším kroku bez dalšího čištění. Bylo izolováno 800 mg sloučeniny A (1,62 mmol, 91 % výtěžek).
B. (2S,4S)-1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(3-fenvlpropvl)sulfonvl1-butanoyl)-4-fluorpvrrolidin-2-karbonitril
K CH2CI2 roztoku (50 ml) obsahujícímu kyselinu trifluoroctovou (5 ml) byla přidána sloučenina A (800 mg, 1,62 mmol, 1,0 ekv.). Získaný bieděžlutý roztok byl míchán při teplotě laboratoře po dobu 2 h a potom bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Získaná TFA sůl byla převedena na volnou bázi přidáním nasyceného roztoku NaHCO3 a extrakcí vodné vrstvy (2 x) EtOAc. Spojené organické extrakty byly sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná bělavá pěna byla čištěna bleskovou chromatografií s použitím 5% MeOH (s 0,1 % NH3) v CH2CI2 jako mobilní fáze, za poskytnutí 532 mg sloučeniny B jako volné báze (1,35 mmol, 83% výtěžek). Pro vytvoření HCI soli byla volná báze převedena do Et2O a byl přidáván aceton,
ΦΦ φφφφ
- 82 φφ φφ φφφ ·· φ φφφφ φφφ * φ φ φ φ φφφφ * φφφφ φφφφ φφφφ • · · ·· · · · · ··«· «· ·· »··· »· · dokud všechny pevné podíly nepřešly do roztoku. Po kapkách byl přidáván 2,0M HCI v etheru, dokud se již netvořila další sraženina. Sraženina byla potom zfiltrována a několikrát promyta Et2O. Získaná sůl byla sušena ve vysokém vakuu.
1H NMR (D2O) 400 MHz δ 7,26 - 7,13 (m, 5H), 5,48 (d, 1H, J =
50,7 Hz), 5,00 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 4,63 (s, 1H), 4,02 (m, 1H), 3,81 (m, 1H), 3,20 - 3,15 (m, 2H), 2,71 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 2,65 - 2,33 (m, 2H), 2,09 - 2,01 (m, 2H), 1,50 (s, 3H), 1,35 (s, 3H) ppm.
Příklad 15
(2S,4S)-1-f(2R)-2-Amino-3-methyl-3-lY4-methylbenzvl)sulfonyl1-butanovl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
A. Kyselina (2R)-2-f(terc-butoxykarbonvl)aminol-3-methvl-3-f(4-methylbenzyl)thio1butanová
K roztoku 1,0N NaOH (50 ml) obsahujícímu kyselinu (2R)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-merkapto-3-methylbutanovou (jak bylo uvedeno výše) (1,0 g, 4,01 mmol, 1,0 ekv.) byl přidán 4-methylbenzylchlorid (584 pl, 4,41 mmol, 1,1 ekv.). Získaná směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře 18 h. Reakční směs byia potom vlita do dělicí nálevky a promyta Et2O (1 x) pro odstranění případného nezreagovaného chloridu. K vodné vrstvě byla přidávána koncentrovaná HCI, dokud vodná vrstva nedosáhla pH 2 až 3. Vodná vrstva byla potom extrahována Et2O (2 x). Spojené organické extrakty ·· ···· byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná bílá lehká látka byla použita v příštím kroku bez dalšího čištění. Bylo izolováno 1,29 g sloučeniny A (3,65 mmol, 91% výtěžek).
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,21 (d, 2H, J = 7,9 Hz), 7,11 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 5,46 (d (br), 1H, J = 8,5 Hz), 4,40 (s (br), 1H), 3,83 (q, 2H, J= 11,7 Hz), 2,31 (s, 3H), 1,48 - 1,42 (m,15H) ppm.
B. Terc-butyl(1 R)-1-{[(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1-vl1karbonvl)-2-methyl-2-f(4-methvlbenzvl)thio1propylkarbamát
K DMF roztoku (25 ml) obsahujícímu sloučeninu A (1,29 g,
3,65 mmol, 1,2 ekv.) byl přidán N,N-diisopropylethylamin (715 pl, 4,1 mmol, 1,35 ekv.), potom HATU (1,96 g, 5,17 mmol, 1,7 ekv.). Získaný jantarový roztok byl míchán při teplotě laboratoře 20 min. K tomuto míchanému roztoku byl přidán roztok (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátu (869 mg, 3,04 mmol, 1,0 ekv.) a N,N-diisopropylethylamin (582 μΙ, 3,34 mmol, 1,1 ekv.) v DMF (15 ml). Získaný roztok byl míchán při teplotě laboratoře 18 h a reakce byla ukončena nasyceným roztokem NaHCCb (přibližně 5 ml). Kalný roztok byl potom vlit do H2O (přibližně 20 ml) a extrahován EtOAc (3x10 ml). Spojené organické extrakty byly promyty H2O (2 x) a roztokem soli (1 x), sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaný světlehnědý olej byl čištěn bleskovou chromatografii s použitím směsi 1 : 1 hexany/EtOAc jako mobilní fáze.Bylo izolováno 1,14 g (2,54 mmol, 84% výtěžek) sloučeniny B jako bílé pěny.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,26 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,10 (d, 2H, J = 7,8 Hz), 5,48 (d, 1H, J = 51,9 Hz), 5,44 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 5,04 (d, 1H, J = 9,2 Mz), 4,37 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 4,25 (m, 1H), 4,04 (m, 1H), 3,81 (s, 2H), 2,72 (t, 1H, J = 15,2 Hz), 2,45 - 2,28 (m, 4H),
1,47 - 1,41 (m, 15H) ppm.
• · • ·
- 84 • · · ·
C, Terc-butyl(1 R)-1-{í(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpyrrolidin-1-vnkarbonvl)-2-methvl-2[(4-methylbenzvl)sulfonvllpropvlkarbamát
K CHCI3 roztoku (75 ml) obsahujícímu sloučeninu B (1,14 g, 2,54 mmol, 1,0 ekv.) byla přidána kyselina 3-chlorperoxybenzoová (3,09 g, 17,9 mmol, 10 ekv.). Získaná směs byla míchána při teplotě laboratoře 18 h. Reakce byla potom ukončena 1,0N NaOH (přibližně 15 ml) a vrstvy byly odděleny. Organická vrstva byla sušena nad MgSO4 a zakoncentrována ve vakuu. Získaná bílá lehká pevná látka byla použita v dalším kroku bez dalšího čištění. Bylo izolováno 1,03 g sloučeniny C (2,14 mmol, 84% výtěžek).
1H NMR (CDCI3) 400 MHz δ 7,32 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 7,19 (d, 2H, J = 7,9 Hz), 5,51 (m, 1H), 5,48 (d, 1H, J = 50,7 Hz), 5,04 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 4,99 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 4,32 - 3,97 (m, 4H), 2,72 (t, 1H, J =
15,7 Hz), 2,46 - 2,29 (m, 4H), 1,58 (s, 3H), 1,52 (s, 3H), 1,41 (s, 9H) PPm.
D. (2S,4S)-1-{(2R)-2-Amino-3-methvl-3-[(4-methvlbenzyl)sulfonvH-butanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
K CH2CI2 roztoku (100 ml) obsahujícímu kyselinu trifluoroctovou (10 ml) byla přidána sloučenina C (1,03 g, 2,14 mmol, 1,0 ekv.). Získaný bleděžlutý roztok byl míchán při teplotě laboratoře 2 h a potom bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Získaná TFA sůl byla převedena na volnou bázi přidáním nasyceného roztoku NaHCO3 a extrakcí vodné vrstvy (2 x) EtOAc. Spojené organické extrakty byly sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná bělavá pěna byla čištěna bleskovou chromatografií s použitím směsi 5% MeOH (s 0,1% NH3) v CH2CI2 jako mobilní fáze, za poskytnutí 577 mg (1,51 mmol, 71% výtěžek) volné báze sloučeniny D jako bílé pěny. Pro vytvoření HCI soli byla volná báze převedena do Et2O a byl přidáván aceton, dokud všechny pevné podíly nepřešly do roztoku. Po kapkách byl přidáván 2,0M HCI v etheru, dokud se již netvořila další sraženina.
- 85 Sraženina byla potom zfiltrována a několikrát promyta Et2O. Získaná sůl byla sušena ve vysokém vakuu.
1H NMR (cL-MeOH) 400 MHz δ 7,38 (d, 2H, J = 8,1 Hz), 724 (d, 2H, J = 7,7 Hz), 5,56 (d, 1H, J = 50,7 Hz), 5,12 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 4,74 (s, 1H), 4,64 (ABq, 2H, J =19,7, 13,3 Hz), 4,12 (m, 1H), 3,94 (m, 1H), 2,70 - 2,43 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 1,76 (s, 3H), 1,58 (s, 3H) ppm.
Příklad 16
(2S,4S)-1-((2R)-2-amino-3-{í4-(benzyloxv)benzvl]sulfonyl)-3-methyl-butanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
A. Kyselina (2R)-3-ff4-(benzyloxv)benzynthio)-2-f(terc-butoxykarbonyl)amino1-3-methylbutanová
K 1,0N roztoku NaOH (25 ml) obsahujícímu (2R)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-merkapto-3-methylbutanovou (jak bylo uvedeno výše) (500 mg, 2,01 mmol, 1,0 ekv.) byl přidán 4-benzyloxybenzylchlorid (515 mg, 221 mmol, 1,1 ekv.). Získaná směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře 18 h. Reakční směs byla potom vlita do dělicí nálevky a promyta Et2O (1 x) pro odstranění případného nezreagovaného chloridu. K vodné vrstvě byl přidáván koncentrovaný HCI, dokud pH nedosáhlo 2 až 3. Vodná vrstva byla potom extrahována Et2O (2 x). Spojené organické extrakty byly sušeny • · • ·
- 86 ·· ·· · · ·· · nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná bílá lehká pevná látka byla použita v dalším kroku bez dalšího čištění. Bylo izolováno 700 mg sloučeniny A (1,57 mmol, 78% výtěžek).
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,42 - 7,31 (m, 5H), 7,24 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 6,90 (d, 2H, J= 8,6 Hz), 5,46 (s (br), 1H), 5,03 (s, 2H), 4,39 (s (br), 1H), 3,81 (q, 2H, J= 11,5 Hz), 1,47 - 1,41 (m,15H) ppm.
B. Terc-butyl(1 R)-2-([4-(benzvloxv)benzvl)thio)-1-{f(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpyrrolidin-1-vllkarbonvl)-2-methvlpropvlkarbamát
K DMF roztoku (20 ml) obsahujícímu sloučeninu A (700 mg,
1,57 mmol, 1,2 ekv.) byl přidán N,N-diisopropylethylamin (308 pl, 1,77 mmol, 1,35 ekv.), potom HATU (847 mg, 2,23 mmol, 1,7 ekv.). Získaný jantarový roztok byl míchán při teplotě laboratoře po dobu 20 min. K tomuto míchanému roztoku byl přidán roztok (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitríl-4-methylbenzensulfonátu (375 mg, 1,31 mmol, 1,0 ekv.) a N,N-diisopropylethylaminu (251 μΙ, 1,44 mmol, 1,1 ekv.) v DMF (10 ml). Získaný roztok byl míchán při teplotě laboratoře 18 h a reakce byla ukončena nasyceným roztokem NaHCCb (přibližně 5 ml). Kalný roztok byl potom vlit do H2O (přibližně 20 ml) a extrahován EtOAc (3x10 ml). Spojené organické extrakty byly promyty H2O (2 x) a roztokem soli (1 x), sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaný jantarový olej byl čištěn bleskovou chromatografií s použitím směsi 1 ; 1 hexany/EtOAc jako mobilní fáze. Bylo izolováno 340 mg (0,628 mmol, 48% výtěžek) sloučeniny B jako bílé pěny.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,42 - 7,27 (m, 7H), 6,91 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 5,46 (d, 1H, J = 50,9 Hz), 5,43 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 5,05 - 5,01 (m, 3H), 4,37 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 426 (m, 1H), 4,03 (m, 1H), 3,80 (s, 2H), 2,71 (t, 1H, J = 15,2 Hz), 2,36 (m, 1H), 1,47 - 1,41 (m,15H) ppm.
• · · · • · • ·
C. Terc-butvl(1 R)-2-{[4-(benzvloxv)benzvl1sulfonyl}-1-{í(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1-vllkarbonvl)-2-methvlpropvlkarbamát
K CHCb roztoku (30 ml) obsahujícímu sloučeninu B (340 mg, 0,628 mmol, 1,0 ekv.) byla přidána kyselina 3-chlorperoxybenzoová (1,08 g, 6,28 mmol, 10 ekv.). Získaná směs byla míchána při teplotě laboratoře 18 h. Reakce byla potom ukončena 1,0N NaOH (přibližně 5 ml) a vrstvy odděleny. Organická vrstva byla sušena nad MgSO4 a zakoncentrována ve vakuu. Získaná bílá lehká pevná látka byla použita v dalším kroku bez dalšího čištění. Bylo izolováno 280 mg sloučeniny C (0,488 mmol, 78% výtěžek).
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,43 - 7,32 (m, 7H), 7,00 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 5,51 (s (br), 1H), 5,48 (d, 1H, J = 50,7 Hz), 5,06 - 4,97 (m, 4H), 4,34 - 3,99 (m, 4H), 2,73 (t, 1H, J = 15,2 Hz), 2,38 (m, 1H), 1,59 (s, 3H), 1,53 (s, 3H), 1,42 (s, 9H) ppm.
D, (2S,4S)-1-((2R)-2-Amino-3-{í4-(benzvloxv)benzyllsulfonyl}-3-methylbutanovl)-4-fluorpvrrolidin-2-karbonitril
K CH2CI2 roztoku (27 ml) obsahujícímu kyselinu trifluoroctovou (3 ml) byla přidána sloučenina C (280 mg, 0,488 mmol, 1,0 ekv.). Získaný bleděžlutý roztok byl míchán při teplotě laboratoře 2 h a potom bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Získaná TFA sůl byla převedena na volnou bázi přidáním nasyceného roztoku NaHCO3 a extrakcí vodné vrstvy (2 x) EtOAc. Spojené organické extrakty byly sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná bělavá pěna byla čištěna bleskovou chromatografií s použitím směsi 5% MeOH (s 0,1% NH3) v CH2CI2 jako mobilní fáze, za poskytnutí 182 mg (0,385 mmol, 79% výtěžek) volné báze sloučeniny D jako bílé pěny. Pro vytvoření HCI soli byla volná báze převedena do Et2O a byl přidáván aceton, dokud všechny pevné podíly nepřešly do roztoku. Po kapkách byl přidáván 2,0M HCI v etheru, dokud se již netvořila další sraženina. Sraženina byla potom zfiltrována a několikrát promyta Et2O.
- 88 ·· ···· ·· ·
Získaná sůl byla sušena ve vysokém vakuu.
1H NMR (d4-MeON) 400 MHz δ 7,44 - 7,29 (m, 7H), 7,05 (d, 2H, J = 8,8 Hz), 5,56 (d, 1H, J = 50,0 Hz), 5,11 - 5,09 (m, 3H), 4,72 (s, 1H), 4,61 (AB, q, 2H, J = 18,1, 13,5 Hz), 4,13 (m, 1H), 3,91 (m, 1H),
2,70 - 2,42 (m, 2H), 1,75 (s, 3H), 1,58 (s, 3H) ppm.
Příklad 17
(2S,4S)-1~f(2R)-2-amino-3-r(4-kyanobenzyl)sulfonylj-3-methylbutanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
A. Kyselina (2R)-2-f(terc-butoxykarbonyl)amino1-3F(4-kyanobenzvl)-thiol-3-methylbutanová
K roztoku 1,0N NaOH (25 ml) obsahujícímu kyselinu (2R)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-merkapto-3-methylbutanovou (jak bylo uvedeno výše) (500 mg, 2,01 mmol, 1,0 ekv.) byl přidán 4-kyanobenzylbromid (433 mg, 221 mmol, 1,1 ekv.). Získaná směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře 18 h. Reakční směs byla potom vlita do dělicí nálevky a promyta EÍ2O (1 x) pro odstranění případného nezreagovaného chloridu. K vodné vrstvě byla přidávána koncentrovaná HCI, dokud vodná vrstva nedosáhla pH 2 až 3. Vodná vrstva byla potom extrahována Et20 (2 x). Spojené organické extrakty byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná bílá lehká pevná látka byla použita v dalším kroku bez dalšího čištění.Bylo izolováno 792 mg sloučeniny A (1,72 mmol, 86% výtěžek).
- 89 B. Terc-butyl(1 R)-2-[(4-kyanobenzyl)thioj-1-{[(2S,4S)-2-kyano-4-fluorPVrrolidin-1-vnkarbonvl}-2-methvlpropylkarbamát
K DMF roztoku (25 ml) obsahujícímu sloučeninu A (792 mg, 1,72 mmol, 1,2 ekv.) byl přidán Ν,Ν-diisopropylethylamin (337 μΙ, 1,93 mmol, 1,35 ekv.), potom HATU (924 mg, 2,43 mmol, 1,7 ekv.). Získaný jantarový roztok byl míchán při teplotě laboratoře 20 min. K tomuto míchanému roztoku byl přidán roztok (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátu (409 mg, 1,43 mmol, 1,0 ekv.) a N,N-diisopropylethylaminu (274 μΙ, 1,57 mmol, 1,1 ekv.) v DMF (10 ml). Získaný roztok byl míchán při teplotě laboratoře 18 h a reakce byla ukončena nasyceným roztokem NaHCO3 (přibližně 5 ml). Kalný roztok byl potom vlit do H2O (přibližně 20 ml) a extrahován EtOAc (3x10 ml). Spojené organické extrakty byly promyty H2O (2 x) a roztokem soli (1 x), sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaný světlehnědý olej byl čištěn bleskovou chromatografií s použitím směsi 1 : 1 hexany/EtOAc jako mobilní fáze. Bylo izolováno 572 mg (1,24 mmol, 87% výtěžek) sloučeniny B jako bílé pěny.
1H NMR (CDCI3) 400 MHz δ 7,59 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,50 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 5,50 (d, 1H, J = 50,5 Hz), 5,42 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 5,03 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 4,41 - 4,30 (m, 2H), 4,04 (m, 1H), 3,88 (s, 2H), 2,75 (t, 1H, J =15,7 Hz), 2,39 (m, 1 H), 1,46 - 1,41 (m, 15H) ppm.
C. Terc-butvl(1R)-2-f(4-kvanobenzvl)sulfonvl)-1-(í(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpyrrolidin-1-vnkarbonvl)-2-methvlpropvlkarbamát
K CHCI3 roztoku (50 ml) obsahujícímu sloučeninu B (572 mg, 1,24 mmol, 1,0 ekv.) byla přidána kyselina 3-chlorperoxybenzoová (2,14 g, 12,4 mmol, 10 ekv.). Získaná směs byla míchána při teplotě laboratoře 18 h. Reakce byla potom ukončena 1,0N NaOH (přibližně 5 ml) a vrstvy byly odděleny. Organická vrstva byla sušena nad MgSO4 • · · · • · a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná bílá lehká pevná látka byla použita v dalším kroku bez dalšího čištění. Bylo izolováno 487 mg sloučeniny C (0,989 mmol, 80% výtěžek).
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,70 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 7,57 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 5,53 (s (br), 1H), 5,51 (d, 1H, J = 50,7 Hz), 5,04 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4,99 (d, 1H, J = 9,8 Hz), 4,43 - 4,29 (m, 3H), 4,04 (m, 1H), 2,77 (t, 1H, J = 15,0 Hz), 2,42 (m, 1H), 1,61 (d, 6H, J = 5,8 Hz),
1,44 (s, 9H) ppm.
D. (2S,4S)-1-{(2R)-2-Amino-3-[(4-kvanobenzvl)sulfonvH-3-methylbutanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
K CH2CI2 roztoku (54 ml) obsahujícímu kyselinu trifluoroctovou (6 ml) byla přidána sloučenina C (487 mg, 0,989 mmol, 1,0 ekv.). Získaný bleděžlutý roztok byl míchán při teplotě laboratoře 2 h a potom bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Získaná TFA sůl byla převedena na volnou bázi přidáním nasyceného roztoku NaHCO3 a extrakcí vodné vrstvy (2 x) EtOAc. Spojené organické extrakty byly sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná bělavá pěna byla čištěna bleskovou chromatografií s použitím směsi 5% MeON (s 0,1% NH3) v CN2CI2 jako mobilní fáze, za poskytnutí 285 mg (0,726 mmol, 73% výtěžek) volné báze sloučeniny D jako bílé pěny. Pro vytvoření HCI soli byla volná báze převedena do Et2O a byl přidáván aceton, dokud všechny pevné podíly nepřešly do roztoku. Po kapkách byl přidáván 2,0M HCI v etheru, dokud se již netvořila další sraženina. Sraženina byla potom zfiltrována a několikrát promyta Et2O. Získaná sůl byla sušena ve vysokém vakuu.
1H NMR (D2O) 400 MHz δ 7,72 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 7,51 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 5,49 (d, 1H, / = 50,6 Hz), 5,02 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 4,72 4,67 (m, 3H), 4,08 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 2,66 - 2,35 (m, 2H), 1,66 (s, 3H), 1,51 (s, 3H) ppm.
· 0 0 0 0 ·
- 91 0 0 » 00 0000 • 0 0 0 0 0
0000 00 «
Příklad 18
(2S,4S)-1-((2R)-2-Amino-3-methyl-3-{[4-(methylsulfonvl)benzylj-sulfonyl)butanovl)-4-fluorpvrrolidin-2-karbonitril
A. Kyselina (2R)-2-[(terc-butoxvkarbonyl)aminoj-3-methyl-3-([4-(methvIsulfonvDbenzvnthiojbutanová
K roztoku 1,0N NaOH (25 ml) obsahujícímu kyselinu (2R)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-merkapto-3-methylbutanovou (jak bylo uvedeno výše) (500 mg, 2,01 mmol, 1,0 ekv.) byl přidán 4-methyfsulfonylbenzylchlorid (452 mg, 2,21 mmol, 1,1 ekv.). Získaná směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře 18 h. Reakční směs byla potom vlita do dělicí nálevky a promyta Et2O (1 x) pro odstranění případného nezreagovaného chloridu. K vodné fázi byla přidávána koncentrovaná HCI, dokud pH nedosáhlo 2 až 3. Vodná vrstva byla potom extrahována Et2O (2 x). Spojené organické extrakty byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná bílá lehká pevná látka byla použita v dalším kroku bez dalšího čištění. Bylo izolováno 768 mg sloučeniny A (1,84 mmol, 92% výtěžek).
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,87 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 7,54 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 5,39 (s (br), 1H), 4,44 (s (br), 1H), 3,88 (s, 2H), 3,03 (s, 3H), 1,46 - 1,43 (m, 15H) ppm.
- 92 ···· ·· ·· • · · · · · »
9 9 · · ·· · ·· · 9
9 9 9 9 9 9
9 9999 99 ·
B. Terc-butvl(1 R)-1 -{F(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1 -yllkarbonyl)-2-methvl-(f4-(methvlsulfonyl)benzvnthio)propylkarbamát
K DMF roztoku (25 ml) obsahujícímu sloučeninu A (768 mg, 1,84 mmol, 1,2 ekv.) byl přidán Ν,Ν-diisopropylethylamin (361 pl, 2,07 mmol, 1,35 ekv.), potom HATU (989 mg, 2,60 mmol, 1,7 ekv.). Získaný jantarový roztok byl míchán při teplotě laboratoře 20 min. K tomuto míchanému roztoku byl přidán roztok (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátu (438 mg, 1,53 mmol, 1,0 ekv.) a N,N-diisopropylethylaminu (293 μΙ, 1,68 mmol, 1,1 ekv.) v DMF (10 ml). Získaný roztok byl míchán při teplotě laboratoře 18 h a reakce byla ukončena nasyceným roztokem NaHCCb (přibližně 5 ml). Kalný roztok byl potom vlit do H2O (přibližně 20 ml) a extrahován EtOAc (3x10 ml). Spojené organické extrakty byly promyty H2O (2 x) a roztokem soli (1 x), sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaný světlehnědý olej byl čištěn bleskovou chromatografií s použitím směsi 1 : 1 hexany/EtOAc jako mobilní fáze. Bylo izolováno 683 mg (1,33 mmol, 87% výtěžek) sloučeniny B jako bílé pěny.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,86 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 7,58 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 5,50 (d, 1H, J = 50,9 Hz), 5,43 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 4,43 - 4,30 (m, 2H), 4,03 (m, 1H), 3,90 (s, 2H), 3,02 (s, 3H), 2,74 (t, 1H, J = 15,6 Hz), 2,39 (m, 1H), 1,47 - 1,41 (m, 15H) ppm.
C. Terc-butvl(1R)-1-{í(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpyrrolidin-1-vl1karbonvl)-2-methyl-2-{f4-(methvlsulfonvl)benzyllsulfonvl)propvlkarbamát
K CHCb roztoku (50 ml) obsahujícímu sloučeninu B (683 mg,
1,33 mmol, 1,0 ekv.) byla přidána kyselina 3-chlorperoxybenzoová (2,30 g, 13,3 mmol, 10 ekv.). Získaná směs byla míchána při teplotě laboratoře 18 h. Reakce byla potom ukončena 1,0N NaON (přibližně 5 ml) a vrstvy byly odděleny. Organická vrstva byla sušena nad MgSO4 a zakoncentrována ve vakuu. Získaná bílá lehká pevná látka byla použita v dalším kroku bez dalšího čištění. Bylo izolováno 581 mg • · · ··«· « · · • · ·· · · · · · • · · · · · · « ····· no ·♦· · · · · · ·
- yo - ♦··· ·· ·· ···· ·· · sloučeniny C (1,06 mmol, 80% výtěžek).
1H NMR (CDCI3) 400 MHz δ 7,98 (d, 2H, J = 8,6 Hz), 7,66 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 5,53 (s, 1H), 5,51 (d, 1H, J = 50,5 Hz), 5,08 (d, 1H, J = 10,0 Hz), 4,99 (d, 1H, J = 9,5 Hz), 4,44 - 4,32 (m, 2H), 4,03 (m, 1H), 3,06 (s, 3H), 2,77 (t, 1H, J = 16,0 Hz), 2,41 (m, 1H), 1,63 (s, 3H), 1,60 (s, 3H), 1,43 (s, 9H) ppm.
D. (2S,4S)-1-((2R)-2-Amino-3-methvl-3-{f4-(methvlsulfonvl)benzyll-sulfonyl)butanoyl)4-fluorpvrrolidin-2-karbonitril
K CH2Cb roztoku (63 ml) obsahujícímu kyselinu trifluoroctovou (7 ml) byla přidána sloučenina C (581 mg, 1,06 mmol, 1,0 ekv.). Získaný bleděžlutý roztok byl míchán při teplotě laboratoře 2 h a potom bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Získaná TFA sůl byla převedena na volnou bázi přidáním nasyceného roztoku NaHCO3 a extrakcí vodné vrstvy (2 x) EtOAc. Spojené organické extrakty byly sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány ve vakuu. Získaná běiavá pěna byla čištěna bleskovou chromatografií s použitím 5% MeOH (s 0,1% NH3) v CH2CI2 jako mobilní fáze, za poskytnutí 296 mg (0,664 mmol, 63% výtěžek) volné báze sloučeniny D jako bílé pěny. Pro vytvoření HCI soli byla volná báze převedena do Et2O a byl přidáván aceton, dokud všechny pevné podíly nepřešly do roztoku. Po kapkách byl přidáván 2,0M HCI v etheru, dokud se již netvořila další sraženina. Sraženina byla potom zfiltrována a několikrát promyta Et2O. Získaná sůl byla sušena ve vysokém vakuu.
1H NMR (D2O) 400 MHz δ 7,91 (d, 2H, J = 8,1 Hz), 7,63 (d, 2H, J = 82 Hz), 5,49 (d, 1H, J = 50,3 Hz), 5,02 (d, 1H, J = 9,7 Hz), 4,77 4,68 (m, 3H), 4,09 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 3,14 (s, 3H), 2,66 - 2,36 (m, 2H), 1,67 (s, 3H), 1,53 (s, 3H) ppm.
·« ···· • 9
- 94 9 9 9 9
9 9
9 9 9
9 9 9
9999 9 9
99 9
9 9 9
9 9 9 9
999 9 999
9 9 9
9999 99 9
Příklad 19
(2S,4S)-1-{(2S)-2-Amino-2-f1-(4-fluorbenzvl)cvklopentvHethanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. 1-(4-Fluorbenzyl)cyklopentankarbonitril
K míchanému roztoku 4-fluorbenzylbromidu (10,0 g, 52,9 mmol) v toluenu (100 ml) byl přidán cyklopentankarbonitril (6,1 ml, 58,2 mmol). Směs byla důkladně míchána a ochlazena na 0 °C. Přidávací nálevkou byl pomalu přidán roztok 0,5M KNMDS v toluenu (159 ml, 79,35 mmol), reakční směs byla potom ohřátá na teplotu laboratoře a míchána 14 hod. Reakce byla potom ukončena 1,0M HCI přidávané až do dosažení pH <7. Vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla reextrahována EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty nasyceným NaHCO3, vodou, roztokem soli, sušeny nad MgSO4, zfiltrovány a zakoncentrovány ve vakuu. Čištění chromatografií na silikagelu (10:1 hexany : EtOAc) poskytlo 8,61 g (80% výtěžek) sloučeniny A jako žluté kapaliny.
1H NMR (CDCI3) 400 MHz δ 7,28 - 724 (m, 2H), 7,01 (t, J =
8,7 Hz, 2H), 2,84 (s, 2N), 2,07-2,01 (m, 2H), 1,89 - 1,66 (m, 6H) ppm.
B. i-(4-Fluorbenzyl)cyklopentankarbaldehyd
Míchaný roztok sloučeniny A (8,61 g, 42,36 mmol) v toluenu (150 ml) byl ochlazen na -78 °C. Po kapkách byl stříkačkou přidán ·<··
0
- 95 • 0 0
0 0 0
0 0000 •000 00 »0 0000 čistý diisobutylaluminumhydrid (DIBAL, 11,3 ml, 63,54 mmol) a reakční směs byla míchána při -78 °C 2 hod. Opatrně byly přidány THF (100 ml), voda (30 ml), kyselina octová (8 ml) a octan sodný (7 g) a reakční směs byla ohřátá na teplotu laboratoře a míchána další hodinu. Po přidání Et2O byla dvojfázová směs vakuově zfiltrována přes lože celitu, vlita do dělicí nálevky a vodná vrstva byla odtažena. Organická vrstva byla promyta nasyceným NaHCO3, vodou, roztokem soli, sušena nad MgSO4, zfiltrována a zakoncentrována ve vakuu. Čištění chromatografii na silikagelu (10:1 hexany : EtOAc) poskytlo 6,55 g (75% výtěžek) sloučeniny B jako bezbarvé kapaliny.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 9,53 (s, 1H), 7,07 (dd, J = 8,4,
5,5 Hz, 2H), 6,93 (t, J = 8,7 Hz, 2H), 2,88 (s, 2H), 1,93 - 1,87 (m, 2H), 1,67 - 1,48 (m, 6H) ppm.
C. Amino[1-(4-fluorbenzyl)cvklopentvnacetonitril
K míchanému roztoku sloučeniny B (6,55 g, 31,76 mmol) v methanolu (30 ml) a vodě (18 ml) byl přidán NH4OH (-30% amoniak, 4,4 ml, 33,35 mmol), KCN (2,17 g, 33,35 mmol) a NH4CI (1,87 g,
34,94 mmol). Kalná reakční směs byla zahřívána na 70 °C 14 hod. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs zředěna EtOAc a promyta nasyceným NaHCO3, vodou, roztokem soli, sušena nad MgSO4, zfiltrována a zakoncentrována ve vakuu. Blesková chromatografie na silikagelu (4 : 1 hexany : EtOAc) poskytla 5,99 g (81% výtěžek) sloučeniny C jako bezbarvého viskózního oleje.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,23 - 7,19 (m, 2H), 6,98 (t, J =
8,7 Hz, 2H), 3,54 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 2,97 (d, J = 13,6 Hz, 1H), 2,63 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 2,08 (brs, 2H), 1,75 - 1,57 (m, 8H) ppm.
ftft ftftftft
- 96 • ft · ftftftft ftftft • ft ftft ft ftftftft ft ftftftft ftftftft ftftft • ftft ftftft ftftft • ftftft ftft ftft ftftftft ftft ft
D. Hydrochlorid kyseliny aminof1-(4-fluorbenzvl)cyklopentvl1octové
K míchanému roztoku sloučeniny C (5,99 g, 25,79 mmol) v ledové kyselině octové (20 ml) byla přidána koncentrovaná HCI (100 ml). Reakční směs byla zahřívána k mírnému varu pod zpětným chladičem (130 °C) 16 hod. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs zakoncentrována ve vakuu do sucha, za získání bílé pevné látky. Pevná látka byla promyta Et2O na skleněné fritě s vakuovou filtrací a sušena ve vysokém vakuu za poskytnutí 6,33 g (85% výtěžek) sloučeniny D jako bílé pevné látky.
1H NMR (CD3OD) 400 MHz δ 7,30 (dd, J = 8,7, 5,4 Hz, 2H), 7,04 (t, J = 8,8 Hz, 2H), 3,89 (s, 1H), 2,85 - 2,76 (m, 2H), 1,79 - 1,43 (m, 8H)ppm.
E. Kyselina í(terc-butoxvkarbonvl)aminoj[1-(4-fluorbenzvl)cvklopentyl]-octová
K míchanému roztoku sloučeniny D (6,33 g, 21,99 mmol) v 1,4-dioxanu (100 ml) byl přidán roztok 1,0M NaOH ve vodě (76 ml,
75,57 mmol), potom voda (24 ml). Reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře několik minut, dokud se výchozí materiál úplně nerozpustil. Byl přidán pevný di-terc-butyldikarbonát (BOC2O, 825 g, 37,78 mmol) a reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře 14 h. Pomalu byla přidávána koncentrovaná HCI, dokud pH nedosáhlo <7, následovalo zředění EtOAc. Vodná vrstva byla oddělena a potom reextrahována dvěma díly EtOAc. Spojené organické vrstvy byly sušeny nad MgSO4, zfiltrovány a zakoncentrovány ve vakuu za poskytnutí 7,95 g (90% výtěžek) sloučeniny E jako bílé pěny.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,20 (dd, J = 8,6, 5,5 Hz, 2H), 6,96 (t, J = 8,7 Hz, 2H), 5,00 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 4,28 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 2,72 - 2,64 (m, 2H), 1,63 - 1,35 (m, 8H), 1,45 (s, 9H) ppm.
·· ·«··
- 97 ti 99 ·· · * · · ··«« « · · • · ·· · · · · · * ««·· · » · « 9999
9 9 9 9 9 9 9 9
9999 99 99 9999 99 9
F. Terc-butvl(1 S)-2-f(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1-yll-1-f 1-(4-fluorbenzyl)cvklopentvn-2-oxoethvlkarbamát
K míchanému roztoku sloučeniny E (1,90 g, 5,41 mmol) v DMF (54 ml) byly přidány (2S,4S)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril-4-methylbenzensulfonát (1,55 g, 5,41 mmol), HATU (2,06 g, 5,41 mmol) a diisopropylethylamin (2,83 ml, 16,23 mmol). Reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře 16 hod. Po přidání vody (50 ml) byla reakční směs extrahována pěti podíly EtOAc. Spojené extrakty byly promyty vodou, nasyceným NH4CI, nasyceným NaHCO3, roztokem soli, sušeny nad MgSO4, zfiltrovány a zakoncentrovány ve vakuu. Dva diastereomery byly odděleny bleskovou chromatografii na silikagelu (2 : 1 hexany EtOAc), za poskytnutí 586 mg (25% výtěžek požadovaného diastereomeru) sloučeniny F jako bezbarvého oleje. Sloučenina F byla polárnější (nižší Rf) z uvedených dvou diastereomerů.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,20 - 7,16 (m, 2H), 7,00 (t, J = 8,7, 2H), 522 (br d, J = 51,1 Hz, 1H), 5,15 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 4,93 (d, J =
9,3 Hz, 1H), 4,26 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 3,77 - 3,63 (m, 1H), 3,28 - 3,19 (m, 1H), 2,78 - 2,52 (m, 4H), 2,32 - 2,11 (m, 2H), 1,73 - 1,52 (m, 6H), 1,42 (s, 9H) ppm.
G. (2S,4S)-1-{(2S)-2-Amino-2-í1-(4-fluorbenzvl)cyklopentvHethanovl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
K míchanému roztoku sloučeniny F (586 mg, 1,31 mmol) v CH2CI2 (13 ml) byla přidána TFA (1,00 ml, 13,1 mmol). Reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře 14 hod. Po zakoncentrování ve vakuu byla reakční směs znovu rozpuštěna v EtOAc a promyta nasyceným NaHCO3, sušena nad MgSO4, zfiltrována a zakoncentrována ve vakuu. Čištění bleskovou chromatografii na silikagelu (5% MeOH (s 2% NH3) v CH2CI2) poskytlo 160 mg (35% výtěžek) sloučeniny G jako bílé pevné látky.
·· ·«··
- 98 • · · · · · · · · • · · · · · · · · • · · · · · ·· ····· • · ··· · · · ·· · · ······ ·· · 1H NMR (CDCI3) 400 MHz δ 721 - 7,17 (m, 2H), 6,99 (t, J = 8,6 Hz, 2H), 5,24 (br d, J = 51,1 Hz, 1H), 4,93 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 3,53 3,40 (m, 1H), 3,34 (s, 1H), 3,29 - 3,20 (m, 1H), 2,92 (d, J = 13,6 Hz, 1H), 2,66 (d, J= 13,7 Hz, 1H), 2,63 - 2,49 (m, 2H), 2,31 - 1,32 (m, 8H) PPm.
H. (2S,4S)-1-{(2S)-2-Amino-2-[1-(4-fluorbenzvl)cvklopentyl1ethanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K míchanému roztoku sloučeniny G (160 mg, 0,460 mmol) v Et2O (5 ml) byl přidán roztok 2,0M HCI v Et2O (1,0 ml). Reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře po dobu 5 min, během kterých se vysrážela bílá pevná látka. Pevná látka byla oddělena vakuovou filtrací na skleněné fritě a sušena přes noc ve vysokém vakuu za získání 139 mg (79% výtěžek) sloučeniny H jako bílé pevné látky.
1H NMR (CD3OD) 400 MHz δ 7,31 - 7,27 (m, 2H), 7,13 (t, J =
8,8 Hz, 2H), 5,30 (br d, J = 51,1, 1 H), 5,01 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,04 (s, 1H), 3,56 - 3,43 (m, 1H), 3,20 - 3,11 (m, 1H), 2,90 (d, J = 13,9 Hz, 1H), 2,73 (d, J= 14,0 Hz, 1H), 2,60 - 2,30 (m, 2H), 2,14 - 1,37 (m, 8H) ppm.
Příklad 20 ’CN ,NH2 • Φ φφφφ
- 99 ·· φφ ·· φ • φ · · φ · · φφφ • φ φ · φ φφφφ φ φφφφ φφφφ φφφ φφφ φφφ φφφ φφφφ φφ φφ φφφφ φφ φ (2S,4S)-1-((2S)-2-Amino-2-{1-[4-(trifluormethvl)fenvl1cvklopentvl)-ethanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. 1 -f4-(T rifluormethyQfenyncyklopentankarbonitril
K míchanému roztoku 4-fluorbenztrifluoridu (5,0 g, 30,47 mmol) v toluenu (40 ml) byl přidán cyklopentankarbonitril (10,5 ml, 100,55 mmol), potom roztok 0,5M KHMDS v toluenu (92 ml, 45,71 mmol). Reakční směs byla zahřívána na 70 °C a míchána 14 hod. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakce ukončena 1M HCI, přidávanou až do dosažení pH <7. Vrstvy byly odděleny a organická vrstva byla promyta nasyceným NaHCOs, vodou, roztokem soli, sušena nad MgSO4, zfiltrována a zakoncentrována ve vakuu. Čištění chromatografií na silikagelu (6 : 1 hexany : EtOAc) poskytlo 7,53 g směs sloučeniny A a zbylý cyklopentankarbonitril. Protože tyto dvě sloučeniny bylo obtížné dělit chromatografií, směs byla převedena přímo do dalšího kroku.
B. 1-í4-(Trifluormethvl)fenvl1cvklopentankarbaldehyd
Míchaný roztok sloučeniny A (7,53 g, jak bylo uvedeno výše) v toluenu (100 ml) byl ochlazen na -78 °C. Pomalu byl stříkačkou přidáván roztok 1,5M diisobutylaluminumhydridu v toluenu (DIBAL, 32,0 ml, 47,21 mmol) a reakční směs byla míchána při -78 °C 2 hod. Opatrně byl přidán roztok THF (100 ml), vody (20 ml), kyseliny octové (6 ml) a octanu sodného (6,6 g) a reakční směs byla ohřátá na teplotu laboratoře a míchána další hodinu. Po přidání Et2O byla dvojfázová směs vakuově zfiltrována přes lože celitu, vlita do dělicí nálevky a vodná vrstva byla odtažena. Organická vrstva byla promyta nasyceným NaHCO3, vodou, roztokem soli, sušena nad MgSO4, zfiltrována a zakoncentrována ve vakuu. Čištění chromatografií na silikagelu (10 : 1 hexany : EtOAc) poskytlo 3,91 g (53% výtěžek ·· 4444
- 100 •4 ·· 44 4 • 4 4 4 4·· 4 · 4 • · · 4 4 4444
444 4 444 4444
444 444 444
4444 44 44 4444 44 4 počítaný na dva poslední kroky) sloučeniny B jako bezbarvé kapaliny.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 9,41 (s, 1H), 7,61 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,38 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 2,58 - 2,52 (m, 2H),1,93 - 1,65 (m, 6H) ppm.
C. Amino{1-[4-(trifluormethvl)fenyl1cvklopentvl}acetonitril
K míchanému roztoku sloučeniny B (3,91 g, 16,14 mmol) v methanolu (20 ml) a vodě (12 ml) byl přidán NH4OH (-30% obsah amoniaku, 2,20 ml, 16,95 mmol), KCN (1,11 g, 16,95 mmol) a NH4CI (950 mg, 17,76 mmol). Kalná reakční směs byla zahřívána na 70 °C po dobu 6 hod. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs zředěna EtOAc a promyta nasyceným NaHCO3, vodou, roztokem soli, sušena nad MgSO4, zfiltrována a zakoncentrována ve vakuu. Blesková chromatografie na silikagelu (2 : 1 hexany : EtOAc) poskytla 2,16 g (50% výtěžek) sloučeniny C jako bílé pevné látky.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,63 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,54 (d, J =
8,4 Hz, 2H), 3,74 (s, 1H), 2,43 - 2,36 (m, 1H), 2,32 - 2,25 (m, 1H),
2,15 - 2,08 (m, 1N), 2,01 - 1,93 (m, 1H), 1,85 - 1,72 (m, 4H), 1,54 (br s, 2H) ppm.
D. Hydrochlorid kyseliny amino{1-[4-(trifluormethvl)fenvl1cvklopentylb
-octové
K míchanému roztoku sloučeniny C (2,16 g, 8,05 mmol) v ledové kyselině octové (10 ml) byl přidán koncentrovaný HCI (50 ml). Reakční směs byla zahřívána k mírnému varu pod zpětným chladičem (130 °C) 16 hod. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs zakoncentrována ve vakuu do sucha, za poskytnutí bílé pevné látky. Pevná látka byla sušena ve vysokém vakuu za získání 2,61 g (100% výtěžek) sloučeniny D jako bílé pevné látky.
φφ φφφφ ··
- 101 ·» • φ φφφ φ φ · φ φ φφφφ φφφ φ φ φφφφ ·Φ φφ ·· φ φ φ φφφ • φ φφφ φ φ φ φφφφφ φ φφφ φφφφ φφ φ 1Η NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7,69 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,60 (d, J = 8,4 Hz, 2N), 4,20 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 2,42 - 2,34 (m, 2H), 2,27 2,19 (m, 1H), 2,14 - 2,07 (m, 1H), 1,86 - 1,79 (m, 2H), 1,61 - 1,51 (m, 2H)ppm.
E. Kyselina [(terc-butoxvkarbonyl)amino1(1-[4-(trifluormethvl)fenvl1-cyklopentyljoctová
K míchanému roztoku sloučeniny D (2,61 g, 8,05 mmol) v 1,4-dioxanu (20 ml) a vodě (20 ml) byl přidán pevný NaOH (1,08 g, 27,06 mmol). Po několika minutách míchání při teplotě laboratoře byl přidán pevný di-terc-butyldikarbonát (BOC2O, 3,94 g, 18,04 mmol) a reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře 14 h. Potom byla pomalu přidávána koncentrovaná HCI, dokud pH nedosáhlo hodnoty <7, následovalo zředění EtOAc. Vodná vrstva byla oddělena, nasycena NaCI, a potom reextrahována dvěma díly EtOAc. Spojené organické vrstvy byly sušeny nad MgSO4, zfiltrovány a zakoncentrovány ve vakuu, za získání 3,01 g (86% výtěžek) sloučeniny E jako bezbarvého viskózního oleje.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,55 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,40 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 4,85 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,55 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 2,43 1,59 (m, 8H), 1,42 (s, 9H) ppm.
F. Terc-butvl(1S)-2-[(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpvrrolidin-1-vn-2-oxo-1-{1-F4-(trifluormethvl)fenvncvklopentvl)ethylkarbamát
K míchanému roztoku sloučeniny E (1,01 g, 2,61 mmol) v DMF (26 ml) byly přidány (2S,4S)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril-4-methylbenzensulfonát (747 mg, 2,61 mmol), HATU (993 mg, 2,61 mmol) a diisopropylethylamin (1,40 ml, 7,83 mmol). Reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře 16 hod. Po přidání vody (20 ml) byla reakční směs extrahována pěti díly EtOAc. Spojené extrakty byly ·· φφφφ * φ φ φφφφ φφφ φφ φφ φ φφφφ φ φφφφ φφφφ φφφφ ή no φφφ φφφ φφφ
- I “ φφφφ φφ φφ φφφφ ΦΦ φ promyty vodou, 1,0Μ NaHSO4, nasyceným NaHCCh, roztokem soli, sušeny nad MgSO4, zfiltrovány a zakoncentrovány ve vakuu. Čištění chromatografii na silikagelu (1 : 1 hexany : EtOAc) poskytlo 442 mg (35% výtěžek) produktu jako směsi diastereomerů. Další chromatografie na silikagelu (2 : 1 hexany : EtOAc) oddělila diastereomery a poskytla 145 mg sloučeniny F jako bílé pěny. Sloučenina F byla polárnější (nižší Rf) z obou diastereomerů.
1H NMR (CDCh) 400 MHz δ 7,63 (d, J = 8,4 Hz, 2N), 7,56 (d, J =
8,6 Hz, 2H), 5,27 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 5,08 (br d, J = 50,9 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 4,49 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 3,63 - 3,50 (m, 1H), 2,77 (dd, J = 23,6, 12,0 Hz, 1H), 2,48 (t, J = 15,5 Hz, 1H), 2,25 - 2,20 (m, 2H), 2,10 - 2,03 (m, 2H), 1,77 - 1,71 (m, 2H), 1,52 - 1,48 (m, 2H), 1,41 (s, 9H) ppm.
G. (2S,4S)-1-((2S)-2-Amino-2-{1-[4-(trifluormethyl)fenyl1cvklopentyl)-ethanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
K míchanému roztoku sloučeniny F (145 mg, 0,30 mmol) v CH2CI2 (3 ml) byla přidána TFA (0,116 ml, 1,50 mmol). Reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře 14 hod. Po zakoncentrování ve vakuu byla reakční směs znovu rozpuštěna v EtOAc a promyta nasyceným NaHCO3, sušena nad MgSO4, zfiltrována a zakoncentrována ve vakuu. Čištění bleskovou chromatografii na silikagelu (5% MeOH s 2% NH3 v CH2CI2) poskytlo 62 mg (54% výtěžek) sloučeniny G jako bílou pevnou látku.
1H NMR (CDCh) 400 MHz δ 7,62 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,54 (d, J =
8,6 Hz, 2H), 5,12 (br d, J = 51,1 Hz, 1H), 4,86 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 3,57 (s, 1H), 3,55 - 3,42 (m, 1H), 2,97 - 2,88 (m, 1H), 2,50 (t, J = 15,2 Hz, 1H), 2,24 - 2,10 (m, 5H), 1,99 (br s, 2H), 1,76 - 1,71 (m, 2H), 1,54 1,41 (m, 2H) ppm.
• 0 0000
- 103 00 ·· 00 0 0 0 · 0 0 0 0 0 0 0 ♦ · ·· 0 0 0 0 0 0 0000 0000«00 000 000 0 0 0 0000 00 00 0000 00 0
Η. (2S,4S)-1-((2S)-2-Amino-2-{1-f4-(trifluormethvl)fenvncvklopentyl}-ethanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid Diethylether (3 ml) byl přidán do baňky obsahující sloučeninu G (51 mg, 0,133 mmol). Bylo přidáno několik kapek acetonu, a roztok byl ponechán přejít do homogenního stavu. Byl přidán roztok 2,0M HCI v Et2O (1,0 ml) a reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře 5 min. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a získaná pevná látka byla sušena přes noc ve vysokém vakuu, za poskytnutí 55 mg (98% výtěžek) sloučeniny H, jako bílé pevné látky.
1H NMR (D2O) 400 MHz δ 7,62 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,58 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 5,13 (brd, J= 51,1 Hz, 1H), 4,86 (d, J= 9,5 Hz, 1H), 4,37 (s, 1H), 3,54 - 3,40 (m, 1H), 2,95 - 2,86 (m, 1H), 2,44 - 2,18 (m, 4H), 1,92 - 1,84 (m, 2H), 1,64 - 1,58 (m, 2H), 1,33 - 1,25 (m, 2H) ppm.
Příklad 21
(2S,48)-1-{(2S)-2-Amino-2-[1-(4-fluorbenzvl)cvklopropyl1ethanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. 1-(4-Fluorbenzyl)cvklopropankarbonitril
Míchaný roztok cyklopropankarbonitrilu (4,3 ml, 58,2 mmol) v toluenu (100 ml) byl ochlazen na 0 °C. Přidávací nálevkou byl pomalu přidáván 0,5M KHMDS v toluenu (159 ml, 79,35 mmol) a reakční směs byla míchána při 0 °C 30 min. Potom byl po kapkách • · • · přidán roztok 4-fiuorbenzylbromidu (10,0 g, 52,9 mmol) v toluenu (20 ml) při 0 °C. Reakční směs byla ohřátá na teplotu laboratoře a byla míchána 3 hod. Reakce byla potom ukončena přidáváním 1,0M HCI až do dosažení pH <7. Vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla reextrahována EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty nasyceným NaHCO3, vodou, roztokem soli, sušeny nad MgSO4, zfiltrovány a zakoncentrovány ve vakuu. Čištění chromatografií na silikagelu (5% EtOAc v hexanech) poskytlo 7,76 g (84% výtěžek) sloučeniny A jako žluté kapaliny.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,25 - 7,22 (m, 2H), 7,03 (t, J =
8,7 Hz, 2H), 2,77 (s, 2H), 1,28 (dd, J = 7,1, 5,1 Hz, 2H), 0,94 (dd, J = 7,1, 5,1 Hz, 2H) ppm.
B. 1-(4-Fluorbenzyl)cyklopropankarbaldehyd
Míchaný roztok sloučeniny A (7,76 g, 44,29 mmol) v toluenu (150 ml) byl ochlazen na -78 °C. Stříkačkou byl po kapkách přidán čistý diisobutylaluminumhydrid (DIBAL, 11,8 ml, 66,43 mmol) a reakční směs byla míchána při -78 °C 2 hod. Opatrně byl přidán roztok THF (100 ml), vody (40 ml), kyseliny octové (8 ml) a octanu sodného (7,5 g) a reakční směs byla ohřátá na laboratorní teplotu a míchána další hodinu. Po přidání Et2O byla dvojfázová směs vakuově zfiltrována přes lože celitu, vlita do dělicí nálevky a vodná vrstva byla odtažena. Organická vrstva byla promyta nasyceným NaHCO3, vodou, roztokem soli, sušena nad MgSO4, zfiltrována a zakoncentrována ve vakuu. Čištění chromatografií na silikagelu (5% EtOAc v hexanech) poskytlo
7,20 g (91% výtěžek) sloučeniny B jako bezbarvé kapaliny.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 8,71 (s, 1H), 7,16 - 7,13 (m, 2H),
6,94 (t, J = 8,8 Hz, 2H), 2,96 (s, 2N), 1,20 - 1,17 (m, 2H), 1,00 - 0,97 (m, 2H) ppm.
• · • · · • ·
- 105 - ····
C. Amino[1-(4-fluorbenzvl)cvklopropvl1acetonitril
K míchanému roztoku sloučeniny B (7,20 g, 40,40 mmol) v methanolu (40 ml) a vodě (25 ml) byly přidány NH4OH (~30% obsah amoniaku, 5,51 ml, 42,42 mmol), KCN (2,76 g, 42,42 mmol) a NH4CI (2,38 g, 44,44 mmol). Kalná reakční směs byla zahřívána na 70 °C 14 hod. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs zředěna EtOAc a promyta nasyceným NaHCO3, vodou, roztokem soli, sušena nad MgSO4, zfiltrována a zakoncentrována ve vakuu. Blesková chromatografie na silikagelu (20% EtOAc v hexanech) poskytla 2,21 g (27% výtěžek) sloučeniny C jako bezbarvého viskózního oleje.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,22 - 7,19 (m, 2H), 6,98 (t, J = 8,6 Hz, 2H), 3,62 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 3,12 (d, J = 14,3 Hz, 1H), 2,56 (d, J = 14,3 Hz, 1H), 1,93 (br s, 1H), 1,82 (br s, 1H), 0,78 - 0,76 (m, 2H), 0,67 - 0,64 (m, 1H), 0,54 - 0,51 (m, 1H) ppm.
D. Hydrochlorid kyseliny amino[1-(4-fluorbenzvl)cvklopropyl1octové
K míchanému roztoku sloučeniny C (221 g, 10,82 mmol) v ledové kyselině octové (10 ml) byla přidána koncentrovaná HCI (50 ml). Reakční směs byla zahřívána k mírnému varu pod zpětným chladičem (130 °C) 16 hod. Po ochlazení na laboratorní teplotu byla reakční směs zakoncentrována ve vakuu do sucha za poskytnutí bílé pevné látky. Pevná látka byla promyta Et2O na skledněné fritě vakuovou filtrací a sušena ve vysokém vakuu za poskytnutí 2,81 g (100% výtěžek) sloučeniny D jako bílé pevné látky.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7,18 (dd, J = 8,8, 5,5 Hz, 2H), 7,01 (t, J = 8,8 Hz, 2H), 3,54 (s, 1H), 2,84 (d, J = 4,9 Hz, 2H), 0,89 0,84 (m, 1H), 0,70 - 0,59 (m, 2H), 0,51 - 0,47 (m, 1H) ppm.
E. Kyselina f(terc-butoxvkarbonvl)aminoiri-(4-fluorbenzvl)cvklopropyl1-octová
K míchanému roztoku sloučeniny D (2,81 g, 10,85 mmol) v 1,4-dioxanu (50 ml) byl přidán roztok 1,0M NaOH ve vodě (33 ml, 33,03 mmol), potom voda (17 ml). Reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře po dobu několika minut, dokud nebyl všechen výchozí materiál úplně rozpuštěn. Byl přidán di-terc-butyldikarbonát (BOC2O, 3,50 g, 16,52 mmol) a reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře po dobu 14 hod. Potom byla pomalu přidávána koncentrovaná HCI, dokud nebylo dosaženo pH <7 a následovalo zředění EtOAc. Vodná vrstva byla oddělena a potom reextrahována dvěma podíly EtOAc. Spojené organické vrstvy byly sušeny nad MgSO4, zfiltrovány a zakoncentrovány ve vakuu za poskytnutí 4,06 g (112% výtěžek) sloučeniny E jako viskózního světležlutého oleje.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,19 - 7,15 (m, 2H), 6,95 (t, J =
8,7 Hz, 2H), 4,98 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 3,98 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 2,85 (d, J = 14,5 Hz, 1H), 2,60 (d, J = 14,2 Hz, 1H), 1,45 (s, 9H), 0,79 - 0,72 (m, 2H), 0,51 - 0,47 (m, 2H) ppm.
F. Terc-butvl(1 S)-2-í(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1-vl1-1-[1-(4-fluorbenzvl)cvklopropvH-2-oxoethylkarbamát
K míchanému roztoku sloučeniny E (4,06 g, 12,56 mmol) v DMF (125 ml) byly přidány (2S,4S)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril-4-methylbenzensulfonát (3,60 g, 12,56 mmol), HATU (4,78 g, 12,56 mmol) a diisopropylethylamin (6,60 ml, 37,68 mmol). Reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře 16 hod. Po přidání vody (125 ml) byla reakční směs extrahována čtyřmi podíly EtOAc. Spojené extrakty byly promyty nasyceným NH4CI, nasyceným NaHCO3, vodou, roztokem soli, sušeny nad MgSO4, zfiltrovány a zakoncentrovány ve vakuu. Čištění bleskovou chromatografií na koloně silikagelu (1 : 1 hexany : EtOAc) poskytlo 1,29 g (25% výtěžek) produktu ve formě směsi
- 107 diastereomerů. Další blesková chromatografíe na silikagelu (2 : 1 hexany : EtOAc) oddělila diastereomery a poskytla 853 mg sloučeniny F jako bílé pěny. Sloučenina F byla polárnější (nižší Rf) z obou diastereomerů.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,29 (dd, J = 8,6, 5,5 Hz, 2H), 7,03 (t, J = 8,7 Hz, 2H), 5,15 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 5,14 (br d, J = 51,1 Hz,
1H), 4,76 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 4,42 (d, J = 9,3 Hz, 1N), 3,29 - 3,16 (m,
1H), 3,15 - 3,11 (m, 1H), 3,07 - 2,98 (m, 1H), 2,52 (t, J = 15,2 Hz, 1H),
2,24 - 2,17 (m, 1H), 2,14 - 2,07 (m, 1H), 1,44 (s, 9H), 0,86 - 0,76 (m,
2H), 0,56 - 0,45 (m, 2H) ppm.
G. (2S,4S)-1-{(2S)-2-Amino-2-f1-(4-fluorbenzvl)cyklopropyllethanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
K míchanému roztoku sloučeniny F (853 mg, 2,03 mmol) v CN2CI2 (20 ml) byla přidána TFA (1,56 ml, 20,4 mmol). Reakční směs byla míchána při teplotě laboratoře 18 hod. Po zakoncentrování ve vakuu byla reakční směs znovu rozpuštěna v EtOAc a promyta nasyceným NaHCO3, sušena nad MgSO4, zfiltrována a zakoncentrována ve vakuu. Čištění bleskovou chromatografií na silikagelu (5% MeOH s 2% NH3 v CH2CI2) poskytlo 401 mg (62% výtěžek) sloučeniny G jako bílé pevné látky.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,27 - 7,24 (m, 2H), 7,00 (t, J = 8,6 Hz, 2H), 5,17 (br d, J = 51,3 Hz, 1H), 4,76 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 3,48 (s, 1H), 3,32 - 3,01 (m, 3H), 2,54 (t, J = 15,0 Hz, 1H), 2,22 - 2,05 (m, 2H), 1,74 (br s, 2H), 0,79 - 0,71 (m, 2H), 0,53 - 0,39 (m, 2H) ppm.
H. (2S,4S)-1-{(2S)-2-Amino-2-f1-(4-fluorbenzvl)cvklopropyl1ethanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
Diethylether (8 ml) byl přidán do baňky obsahující sloučeninu G (401 mg, 126 mmol). Byl přidán přibližně 1 ml acetonu pro převedení • · · · · ·
- 108 roztoku do homogenního stavu. Byl přidán roztok 2,0M HCI v Et2O (6,0 ml) a reakční směs byla míchána 5 min. Odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytlo bílou pevnou látku, která byla smísena s částí roztoku HCI/Et2O. Pevná látka byla oddělena vakuovou filtrací na skleněné fritě, promyta několika díly Et2O a sušena přes noc ve vysokém vakuu, za získání 376 mg (84% výtěžek) sloučeniny H jako bílé pevné látky.
1H NMR (D2O) 400 MHz δ 729 - 7,23 (m, 2H), 7,07 - 7,01 (m, 2H), 5,22 (br d, J = 50,6 Hz, 1H), 4,82 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 4,10 (s, 1H), 3,25 - 2,92 (m, 3H), 2,28 (t, J= 16,0 Hz, 1H), 2,32 - 2,21 (m, 2H), 1,16- 0,43 (m, 4H) ppm.
Příklad 22
(2S,4S)-1-f(2R)-2-Amino-3-(benzvlsulfonyl)-3-methylbutanoyl1-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitrií hydrochlorid
A. Kyselina (2R)-3-(benzylthio)-2-í(terc-butoxvkarbonyl)amino1-3-methylbutanová
K 1,0N roztoku KOH (50 ml) obsahujícímu kyselinu (2R)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-merkapto-3-methylbutanovou (1 g,
0,00401 mol) byl přidán benzylbromid (755 mg, 0,00441 mol) při teplotě laboratoře. Po 17,0 h byl reakční směs zředěna vodou a promyta diethyletherem. Organické podíly byly odlity a vodná vrstva byla ochlazena na 0 až 5 °C. Vodný roztok byl okyselen (pH 3,5) • · · · • ·
4« 44 4 4444
s použitím koncentrované HCI a produkt byl extrahován do EtOAc. Organické podíly byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za získání celkově 1,1 g (81 %) sloučeniny A jako čisté olejovité pevné látky.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,32 - 7,20 (m, 5H), 5,44 (d (br), 1H, J = 7,2 Hz), 4,38 (d (br), 1H, J = 8,0 Hz), 3,80 (m, 2H), 1,45 - 1,43 (m, 15H) ppm.
B. Terc-butvl(1 R)-2-(benzvlthio)-1-{í(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpvrrolidin-1-yl1karbonvl)-2-methvlpropylkarbamátu
K DMF roztoku (20 ml) obsahujícímu sloučeninu A (1,1 g, 0,0032 mol) a N,N-diisopropylethylamin (1,4 g, 0,0107 mol) byl přidán HATU (1,85 g, 0,0049 mol) při teplotě laboratoře. Po 30 min byla reakční směs smíchána s (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátem (1,0 g, 0,0035 mol). Po míchání přes noc byla reakce ukončena NaHCOs a organické podíly extrahovány EtOAc (2 x). Organické podíly byly promyty nasyceným roztokem NaCI a sušeny nad MgSO4. Odstranění rozpouštědla ve vakuu a čištění chromatografii na koloně (1/1 hexany/EtOAc) poskytlo 445 mg (32 %) sloučeniny B.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,36 - 7,18 (m, 5H), 5,37 (d (br), 1H), 5,45 (d (br), 1H, J = 51,6 Hz), 5,00 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 4,35 (d, 1H, J = 8,8), 4,27 - 3,92 (m, 4H), 2,67 - 2,59 (m, 1H), 2,40 - 2,23 (m, 1H), 1,46 - 1,36 (m, 15H) ppm.
C. Terc-butvl(1R)-2-(benzvlsulfonyl)-1-{[(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1-vl1karbonvl)-2-methvlpropylkarbamát
K CH2CI2 roztoku (75 ml) obsahujícímu sloučeninu B (445 mg, 0,00102 mol) byla přidána kyselina 3-chlorperoxybenzoová (57 až 86%) (1,8 g 0,0102 mol).Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře 16,0 h, potom neutralizována 2,ON KOH. Organické podíly byly odděleny, sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí 421 mg surové sloučeniny C (88 %). Získaná světlehnědá pevná látka byla použita bez dalšího čištění.
• ·
Η4Π ·· · ···· ···
-ΊΊυ- · · ·· · ···· • · · · · · · · ····· • · · · · · · · · ···· ·· ·· ···· ·· ·
D. (2S,4S)-1-[(2R)-2-Amino-3-(benzvlsulfonyl)-3-methvlbutanovl1-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K CH2CI2 roztoku (45 ml) obsahujícímu sloučeninu C (421 mg, 0,00102 mol) byla přidána TFA (5 ml). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 16,0 h, potom byla neutralizována nasyceným roztokem NaHCO3. Organické podíly byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí surové pevné látky. Získaná pevná látka byla čištěna chromatografii na silikagelu (99% CH2CI2/1% MeOH s 2,0M NH3). Čistá světlehnědá pevná látka byla rozpuštěna ve směsi aceton/ether (1/1) a vysrážená s použitím 2,ON HCI v etheru. Získaná pevná látka byla zfiltrována ve vakuu a promyta etherem. Po sušení ve vysokém vakuu reakce poskytla celkově 96 mg sloučeniny D.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7,49 - 7,35 (m, 5H), 5,47 (d (br), 1H, J = 50,8 Hz), 5,10 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 4,92 - 4,59 (m, 3H), 4,15 3,91 (m, 2H), 2,71 - 2,43 (m, 2H), 1,77 (s, 3H), 1,60 (s, 3H) ppm.
Příklad 23 ,F h2n
SO2 CN .0.
Φ· ··*· • · ····
-111 (2S,4S)-1-{(2R)-2-Amino-3-[(3-methoxvbenzvl)sulfonvl1-3-methylbutanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. Kyselina (2R)-2-[(terc-butoxvkarbonvl)aminol-3-[(3-methoxybenzvl)-thiol-3-methylbutanová
K 1,0N roztoku KOH (50 ml) obsahujícímu kyselinu (2R)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-merkapto-3-methylbutanovou (1 g, 0,00401 mol) byl přidán 3-methoxybenzylchlorid (691 mg, 0,00441 mol) při laboratorní teplotě. Po 17,0 h byla reakční směs zředěna vodou (50 ml) a promyta diethyletherem. Organické podíly byly odlity a vodná vrstva byla ochlazena na 0 až 5 °C. Vodná vrstva byla okyselena (pH 3,5) s použitím koncentrované HCI a extrahována do EtOAc. Organické podíly byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za získání celkově 1,35 g (91 %) sloučeniny A.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,19 (dd, 1H, J = 7,8 Hz), 6,90 (d, 1H, J = 7,2 Hz), 6,86 (s, 1H), 6,76 (dd, 1H, J = 8,4 Hz), 5,43 (d (br), 1H, J = 6,4 Hz), 4,39 (d (br), 1H, J = 6,8 Hz), 3,82 - 3,74 (m, 5H), 1,45 - 1,35 (m, 15H) ppm.
B. Terc-butyl(1R)-1-{[(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1-vl1karbonvl}-2-f(3-methoxvbenzyl)thioj-2-methvlpropylkarbamát
K DMF roztoku (25 ml) obsahujícímu sloučeninu A (1,3 g, 0,0035 mol) a N,N-diisopropylethylamin (1,36 g, 0,0106 mol) byl přidán HATU (2,0 g, 0,0053 mol) při teplotě laboratoře. Po 30 min byla reakční směs smísena s (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátem (1,1 g, 0,0038 mol). Po míchání přes noc byla reakce ukončena NaHCOs a organické podíly extrahovány EtOAc (2 x). Organické podíly byly promyty nasyceným roztokem NaCl a sušeny nad MgSO4. Odstranění rozpouštědla ve vakuu a čištění chromatografií na koloně (1/1 hexany/EtOAc) poskytly 617 mg (38 %) • * · 0 0 ·
0 0 0 0
sloučeniny Β.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,18 (dd, 1H, J = 7,8 Hz), 6,95 (s, 1H), 6,92 (d (br), 1H, J = 2,8), 6,74 (dd, 1H, J = 8,2 Hz), 5,41 (d (br), 1H, J = 8,8 Hz), 5,39 (d (br), 1H, J = 5,12), 5,00 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,35 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 4,28 - 3,78 (m, 7H), 2,71 - 2,52 (m, 1H), 2,46 - 2,27 (m, 1H), 1,62 - 1,39 (m,15H) ppm.
C. Terc-butyl(1 R)-1-{[(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1-yl1karbonyl}-2-[(3-methoxvbenzvl)sulfonvl1-2-methylpropylkarbamát
K CH2CI2 roztoku (100 ml) obsahujícímu sloučeninu B (617 mg, 0,0013 mol) byla přidána kyselina 3-chforperoxybenzoová (57 až 86%) (2,3 g, 0,013 mol). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 16,0 h, potom byla neutralizována 2,ON KOH. Organické podíly byly sušeny nad MgSO4 a koncentrovány do sucha za poskytnutí 647 mg surové pevné látky (98 %). Získaná bělavá pevná látka byla použita bez dalšího čištění.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,30 - 7,25 (m, 1H), 7,01 - 6,98 (m, 2H,), 6,92 - 6,88 (m, 1H), 5,49 (d (br), 1H, J = 8,4 Hz), 5,39 (d (br), 1H, J = 50,8 Mz), 5,03 (d (br), 1H, J = 9,2), 4,96 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 4,32 - 3,80 (m, 4H), 3,79 (s, 3H), 2,71 - 2,54 (m, 1H), 2,46 - 2,24 (m, 1H), 1,59 - 1,39 (m, 15H) ppm.
D. (2S,4S)-1-{(2R)-2-Amino-3-[(3-methoxybenzvl)sulfonyl1-3-methylbutanoyl)-4-fluorpvrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K CH2Cb roztoku (45 ml) obsahujícímu sloučeninu C (647 mg, 0,0013 mol) byla přidána TFA (5 ml). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 16,0 h, potom byla neutralizována nasyceným roztokem NaHCO3. Organické podíly byly odděleny, sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí surové pevné látky. Získaná pevná látka byla čištěna
- 113 ·· 1·1· tt ·» • · · · • · · • · · s použitím chromatografie na silikagelu (99% CH2CÍ2/1% MeOH s 2,0M NH3). Čistá pevná látka byla rozpuštěna do směsi aceton/ether (1/1) a vysrážena s použitím 2,ON HCI v etheru. Získaná pevná látka byla zfiltrována ve vakuu a promyta etherem. Po usušení ve vysokém vakuu reakce poskytla celkově 221 mg sloučeniny D.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7,31 (dd, 1H, J = 8,0 Hz), 7,18 7,06 (m, 2H), 6,98 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 5,49 (d (br), 1H, J = 50,8 Hz),
5,10 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 4,72 - 4,58 (m, 3H), 4,15 - 3,88 (m, 2H), 3,81 (s, 3N), 2,69 - 2,44 (m, 2H), 1,75 (s, 3H), 1,59 (s, 3H) ppm.
Příklad 24
(2S,4S)-1-{(2R}-2-Amino-3-r(1,T-bifenvl-4-vlmethvl)sulfonvll-3-methylbutanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A, Kyselina (2R)-3-[(1,1,-bifenyl-4-ylmethyl)thio1-2-r(terc-butoxykarbonyl)amino1-3-methvlbutanová
K roztoku 1,0N KOH (50 ml) obsahujícímu 1,4-dioxan (10 ml), a kyselinu (2R)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-merkapto-3-methylbutanovou (1 g, 0,00401 mol) byl přidán 4-fenylbenzylchlorid (894 mg, 0,00441 mol) při laboratorní teplotě. Po 17,0 h byla reakční směs zředěna vodou a promyta diethyletherem. Organické podíly byly odlity a vodná vrstva byla ochlazena na 0 až 5 °C. Vodný roztok byl okyselen ·· ·»·· • · • · ·
9999 (pH 3,5) použitím koncentrované HCI a produkt byl extrahován do etheru. Organické podíly byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za získání celkově 1,4 g (82 %) sloučeniny A jako bílé pevné látky.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,59 - 7,31 (m, 9H), 5,49 (m, 1H), 4,32 (d (br), 1H, J = 9,6 Hz), 3,88 - 3,71 (m, 2H), 1,57 - 1,40 (m, 15H) ppm.
B. Terc-butvl(1R)-2-[(1,1’-bifenyl-4-vlmethyl)thioj-1-{f(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpvrrolidin-1-vl1karbonyl)-2-methvlpropvlkarbamát
K DMF roztoku (25 ml) obsahujícímu sloučeninu A (1,4 g, 0,0034 mol) a Ν,Ν-diisopropylethylamin (1,3 g, 0,0101 mol) byl přidán HATU (1,9 g, 0,0051 mol) při teplotě laboratoře. Po 30 min byla reakční směs smísena s (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátem (1,1 g, 0,0037 mol). Po míchání přes noc byla reakce ukončena NaHCO3 a organické podíly extrahovány EtOAc (2 x). Organické podíly byly promyty nasyceným roztokem NaCl a sušeny nad MgSO4. Odstranění rozpouštědla ve vakuu a čištění chromatografií na koloně (1/1 hexany/EtOAc) poskytlo 828 mg (48% výtěžek) mimořádně čistého produktu.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,57 - 7,30 (m, 9H), 5,47 - 5,33 (m, 2H), 5,03 (d (br), 1H, J = 9,6), 4,39 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 4,31 - 3,97 (m, 2H), 3,89 (s, 2H), 2,68 (dd, 1H, J = 15,6 Hz), 2,44 - 228 (m, 1 H),1,58 1,41 (m, 15H) ppm.
C. Terc-butvl(1R)-2-r(1,T-bifenvl-4-ylmethvl)sulfonvn-1-{r(2S,4S)-2-kvano-4-fiuorpyrrolidin-1-yl1karbonyl}-2-methylpropvlkarbamát
K roztoku CH2Cb (100 ml) obsahujícímu sloučeninu B (828 mg, 0,0016 mol) byla přidána 3-chlorperoxybenzoová kyselina (57 až 86%) (2,8 g, 0,0162 mol). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě ·· ···· laboratoře po dobu 16,0 h, potom byla neutralizována 2,ON KOH. Organické podíly byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí 867 mg sloučeniny C (99% výtěžek). Získaná bílá pevná látka byla použita bez dalšího Čištění.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,63 - 7,33 (m, 9H), 5,53 (d (br), 1H, J = 8,4 Hz), 5,42 (d (br), 1H, J = 50,8 Hz), 5,07 (d (br), 1H, J = 9,2),
4,99 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 4,39 - 4,00 (m, 4H), 2,70 (dd, 1H, J = 15,2 Hz), 2,47 - 2,34 (m, 1 H),1,62 - 1,40 (m, 15H) ppm.
D. (2S,4S)-1-((2R)-2-Amino-3-[(1,1’-bifenvl-4-vlmethvl)sulfonyl1-3-methvlbutanovl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K CH2CI2 roztoku (45 ml) obsahujícímu sloučeninu C (867 mg, 0,0016 mol) byla přidána TFA (5 ml). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 16,0 h, potom byla neutralizována nasyceným roztokem NaHCOs. Organické podíly byly odděleny, sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí surové pevné látky. Získaná látka byla čištěna chromatografií na silikagelu (99% CH2CI2/1% MeOH s 2,0M NH3). Čistá pevná látka byla rozpuštěna do směsi aceton/ether (1/1) a vysrážená s použitím 2,ON HCI v etheru. Získaná pevná látka byla zfiltrována ve vakuu a promyta etherem. Po usušení ve vysokém vakuu reakce poskytla celkově 307 mg sloučeniny D.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7,66 - 7,32 (m, 9H), 5,48 (d (br), 1H, J = 50,4 Hz), 5,10 (d, 1H, J = 8,0), 4,86 - 4,64 (m, 3H), 4,19 - 3,86 (m, 2H), 2,70 - 2,41 (m, 2H), 1,78 (s, 3H), 1,63 (s, 3H) ppm.
Příklad 25
- 116 -
·· ···· ·· ·· • · · I • · « (2S,4S)-1-{(2R)-2-Amino-3-f(2-methoxvbenzvl)sulfonvn-3-methylbutanovl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. Kyselina (2R)-2-[(terc-butoxvkarbonyl)amino1-3-F(2-methoxvbenzyl)thio1-3-methylbutanová
K 1,0N roztoku KOH (50 ml) obsahujícímu kyselinu (2R)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-merkapto-3-methylbutanovou (1 g, 0,00401 mol) byl přidán 2-methoxybenzylchlorid (691mg, 0,00441 mol) při teplotě laboratoře. Po 17,0 h byla reakční směs zředěna vodou a promyta diethyletherem. Organické podíly byly odlity a vodná vrstva byla ochlazena na 0 až 5 °C. Vodný roztok byl okyselen (pH 3,5) s použitím koncentrované HCI a produkt byl extrahován do EtOAc. Organické podíly byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za získání celkově 1,1 g (74 %) sloučeniny A.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,25 - 7,21 (m, 2H), 6,90 - 6,85 (m, 2H), 5,63 - 5,55 (m, 1H), 4,31 (d (br), 1H, J = 9,2 Hz), 3,88 - 3,79 (m, 5H), 1,58 - 1,33 (m, 15H) ppm.
B. Terc-butvl(1 R)-1-f[(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1-vl1karbonvl)-2-í(2-methoxvbenzvl)thio1-2-methylpropvlkarbamát
K DMF roztoku (25 ml) obsahujícímu sloučeninu A (1,0 g, 0,0027 mol) a N,N-diisopropylethylamin (1,05 g, 0,0081 mol) byl přidán HATU (1,5 g, 0,00405 mol) při teplotě laboratoře. Po 30 min byla směs smísena s (2S,4S)-4-fiuor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzen99 99 9
9 9 9
9 9 9 9
9 9 9 9999
9 9 9
9999 99 9
- 117 ·· ···· 99
9 9 9 9
9 · · • · · · ·
9 9 9 9
9999 99 99 sulfonátem (851 mg, 0,003 mol). Po míchání přes noc byla reakce ukončena NaHCOs θ organické podíly extrahovány EtOAc (2 x). Organické podíly byly promyty nasyceným roztokem NaCI a sušeny nad MgSO4. Odstranění rozpouštědla ve vakuu a čištění chromatografií na koloně (1/1 hexany/EtOAc) poskytlo 668 mg (53% výtěžek) sloučeniny B.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,31 (dd, 1H, J = 7,6 Hz), 7,19 (dd, 1H, J = 8,0 Hz), 6,92 - 6,83 (m, 2H), 5,47 - 5,31 (m, 2H), 5,03 (d (br), 1H, J = 92), 4,34 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 4,26 - 3,66 (m, 7H), 2,68 (dd, 1H, J = 15,2 Hz), 2,43 - 2,26 (m, 1H), 1,57 - 1,37 (m, 15H) ppm.
C. Terc-butvK 1 R)-1 -f[(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpyrrolidin-1 -yljkarbonyl}-2-[(2-methoxybenzvl)sulfonvl1-2-methvlpropvlkarbamát
K CH2CI2 roztoku (75 ml) obsahujícímu sloučeninu B (668 mg, 0,0014 mol) byla přidána kyselina 3-chlorperoxybenzoová (57 až 86%) (2,5 g, 0,0140 mol). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 16,0 h, potom byla neutralizována 2,ON KOH. Organické podíly byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí 678 mg sloučeniny C (95 %). Získaná bílá pevná látka byla použita bez dalšího čištění.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,44 (dd, 1H, J = 7,6 Hz), 7,34 (m, 1H), 6,99 - 6,91 (m, 2H), 5,61 - 5,57 (m, 1H), 5,40 (d (br), 1H, J = 51,2 Hz), 5,00 - 4,95 (m, 2H), 4,49 - 3,85 (m, 7H), 2,65 (dd, 1H, J =
15,6 Hz), 2,45 - 2,28 (m, 1H), 1,62 - 1,37 (m, 15H) ppm.
D, (2S,4S)-1-{(2R)-2-Amino-3-[(2-methoxvbenzvl)sulfonvl1-3-methylbutanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K CH2CI2 roztoku (45 ml) obsahujícímu sloučeninu C (678 mg, 0,00136 mol) byla přidána TFA (5 ml). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 16,0 h, potom byla
- 118 neutralizována nasyceným roztokem NaHCCb. Organické podíly byly odděleny, sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí surové pevné látky. Získaná pevná látka byla čištěna chromatografií na silikagelu (99% CH2CI2/1 % MeOH 2,0M NH3). Čistá pevná látka byla rozpuštěna do směsi aceton/ether (1/1) a vysrážena s použitím 2,ON HCl v etheru. Získaná pevná látka byla zfiltrována ve vakuu a promyta etherem. Po usušení ve vysokém vakuu reakce poskytla celkově 313 mg sloučeniny D.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7,45 - 7,38 (m, 2H), 7,06 (d, 1H, J= 8,4 Hz), 6,99 - 6,99 (dd, 1H, J= 7,2 Hz), 5,49 (d (br), 1H, J = 50,8 Hz), 5,09 (m, 1H, J = 9,2), 4,13 - 3,84 (m, 6H), 2,67 - 2,44 (m, 2H), 1,74 (s, 3H), 1,58 (s, 3H) ppm.
Příklad 26
(2S,4S)-1-((2R)-2-Amino-3-methyl-3-f(pyridin-3-vlmethyl)thio1-butanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril
A, Kyselina (2R)-2-f(terc-butoxykarbonyl)amino1-3-methvl-3-F(pyridin-3-ylmethyDthiolbutanová
K roztoku 1,0N KOH (50 ml) obsahujícímu kyselinu (2R)-2-[[terc-butoxykarbonyl)amino]-3-merkapto-3-methylbutanovou (1 g, 0,00401 mol) byl přidán 3-(brommethyl)pyridinhydrobromid (1,1 g, 0,00441 mol) při laboratorní teplotě. Po 17,0 h byla reakční směs zředěna vodou a promyta diethyletherem. Organické podíly byly odlity a vodná vrstva
- 119 byla ochlazena na 0 až 5 °C. Vodný roztok byl okyselen (pH 4,0) s použitím koncentrovaného HCI a produkt byl extrahován do EtOAc. Organické podíly byly sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány do sucha za získání 403 mg (30 %) sloučeniny A jako čisté olejovité pevné látky.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 8,77 (s, 1H), 8,56 (d, 1H, J =
5.6 Hz), 7,80 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,37 (dd, 1H, J = 8,0 Hz), 5,47 (d (br), 1H, J = 9,6 Hz), 4,53 (d (br), 1H, J = 9,6 Hz), 3,95 (dd, 2H, J =
69.6 Hz), 1,60 - 1,35 (m, 15H) ppm.
B. Terc-butyl(1 R)-1-{[(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1-vl1karbonvl)-2-methyl-2-[(pvridin-3-vlmethvl)thiojpropylkarbamát
K DMF roztoku (20 ml) obsahujícímu sloučeninu A (400 mg, 0,0012 mol) a N,N-diisopropylethylamin (456 mg, 0,0035 mol) byl přidán HATU (670 mg, 0,0018 mol) při laboratorní teplotě. Po 30 min byla reakční směs smísena s (25,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátem (370 mg, 0,0013 mol). Po míchání přes noc byla rekce ukončena NaHCO3 a organické podíly extrahovány EtOAc (2 x). Organické podíly byly promyty nasyceným roztokem NaCI a sušeny nad Na2SO4. Odstranění rozpouštědla ve vakuu a čištění chromatografii na koloně (1/1 hexany/EtOAc) poskytlo 314 mg (61 %) sloučeniny B.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 8,58 [s, 1H), 8,46 (d, 1H, J = 4,8 Hz), 7,71 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,21 (dd, 1H, J = 8,0 Hz), 5,45 (d (br), 1H, J = 9,2 Hz), 5,43 (d (br), 1H, J= 51,2 Hz), 5,02 (d, 1H, J = 9,2 Hz),
4,41 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,37 - 3,79 (m, 4H), 2,70 (dd, 1H, J = 15,6 Hz), 2,46 - 2,29 (m, 1 H),1,55 - 1,39 (m, 15N) ppm.
- 120 C. (2S,4S)-1-f(2R)-2-Amino-3-methvl-3-F(pyridin-3-vlmethvl)thio1-butanovl}-4-fluorpvrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K CH2CI2 roztoku (22 ml) obsahujícímu sloučeninu B (314 mg, 0,720 mmol) byla přidána TFA (3 ml). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 16,0 h, potom byla neutralizována nasyceným roztokem NaHCO3. Organické podíly byly odděleny, sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí surové pevné látky. Získaná pevná látka byla čištěna chromatografii na silikagelu (99% CH2CI2/1% MeOH 2,0M NH3). Čistá pevná látka byla rozpuštěna do směsi aceton/ether (1/1) a vysrážená s použitím 2,ON HCI v etheru. Získaná pevná látka byla zfiltrována ve vakuu a promyta etherem. Po usušení ve vysokém vakuu reakce poskytla celkově 69 mg sloučeniny C.
1H NMR (CDCI3) 400 MHz δ 8,57 (s, 1H), 8,46 (d, 1H, J = 5,2 Hz), 7,71 (d, 1H, J = 6,4 Hz), 7,23 (dd, 1H, J = 8,0 Hz), 5,44 (d (br), 1H, J = 51,2 Hz), 4,97 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,20 - 3,58 (m, 5H),
2,66 (dd, 1H, J = 15,2 Hz), 2,39 - 2,22 (m, 1H), 1,78 (s (br), 2H), 1,48 (s, 3H), 1,39 (s, 3H) ppm.
Příklad 27
(2S,4S)-1-{(2R)-2-Amino-3-methyl-3-í(pyridin-2-vlmethyl)thio1-butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A, Kyselina (2R)-2-[(terc-butoxvkarbonyl)amino1-3-methvl-3-[(pyridin-2-yimethyl)thiojbutanová
K 1,0N roztoku KOH (50 ml) obsahujícímu kyselinu (2R)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-merkapto-3-methylbutanovou (1 g, 0,00401 mol) byl přidán 2-(brommethyl)pyridinhydrobromid (1,1 g, 0,00441 mol) při laboratorní teplotě. Po 17,0 h byla reakční směs zředěna vodou a promyta diethyletherem. Organické podíly byly odlity a vodná vrstva byla ochlazena na 0 až 5 °C. Vodný roztok byl okyselen (pH 4,0) s použitím koncentrovaného HCI a produkt byl extrahován do EtoAc. Organické podíly byly sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány do sucha za získání celkově 557 mg (41 %) sloučeniny A jako bílé pevné látky.
1H NMR (CDCI3) 400 MHz δ 8,53 (d, 1N, J = 4,8 Hz), 7,75 (dd, 1H, J= 7,6 Hz), 7,34 - 7,30 (m, 2H), 5,73 (d (br), 1H, J= 8,8 Hz), 4,47 (d, 1H, J= 8,8 Hz), 4,41 -4,01 (m, 2H) 1,55 (m,15N) ppm.
B, Terc-butyl(1 R)-1-i7(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpvrrolidin-1-vl)karbonyl)-2-methyl-2-f(pyridin-2-ylmethyí)thio]propylkarbamát
K DMF roztoku (20 ml) obsahujícímu sloučeninu A (557 mg, 0,0016 mol) a Ν,Ν-diisopropylethylamin (635 mg, 0,0049 mol) byl přidán HATU (912 mg, 0,0024 mol) při teplotě laboratoře. Po 30 min byla reakční směs smísena s (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátem (504 mg, 0,00176 mol). Po míchání přes noc byla reakce ukončena NaHCO3 a organické podíly extrahovány EtOAc (2 x). Organické podíly byly promyty nasyceným roztokem NaCl a sušeny nad Na2SO4. Odstranění rozpouštědla ve vakuu a čištění chromatografií na koloně (1/1 hexany/EtOAc) poskytlo 466 mg (65 %) sloučeniny B.
1H NMR (de-aceton) 400 MHz δ 8,46 (d, 1H, J = 4,4 Hz), 7,71 (dd, 1H, J = 7,6 Hz), 7,48 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,21 (dd, 1H, J = 7,6 • *
- 122 • · · · · · · • · · · · · ·· ···· ··· ··· · · φ ···· ·· Φ· ···« · > φ
Ηζ), 6,25 (d (br), 1 Η, J = 8,4 Hz), 5,60 (d (br), 1H, J = 50,8 Hz), 5,05 (m, 1N), 4,61 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 4,43 - 3,83 (m, 4H), 2,83 - 2,52 (m, 2H), 1,50 - 1,35 (m, 15H) ppm.
C. (2S,4S)-1-((2R)-2-Amino-3-methvl-3-f(pyridin-2-ylmethvl)thio?-butanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K CH2CI2 roztoku (45 ml) obsahujícímu sloučeninu B (314 mg, 0,00107 mol) byla přidána TFA (5 ml). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 16,0 h, potom byla neutralizována nasyceným roztokem NaHCO3. Organické podíly byly odděleny, sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí surové pevné látky. Získaná pevná látka byla čištěna s použitím chromatografie na silikagelu (99% CH2CI2/1% MeOH 2,0M NH3). Čistá pevná látka byla rozpuštěna do směsi aceton/ether (1/1) a vysrážená s použitím 2,ON HCI v etheru. Získaná pevná iátka byla zfiltrována ve vakuu a promyta etherem. Po usušení ve vysokém vakuu reakce poskytla celkově 127 mg sloučeniny C.
1H NMR (D2O) 400 MHz δ 8,54 (d, 1H, J = 5,6 Hz), 8,34 (dd, 1H,
J= 8,0 Hz), 7,92 (d, 1H, J= 8,4 Hz), 7,21 (dd, 1H, J = 6,4 Hz), 5,44 (d (br), 1H, J = 50,4 Hz), 5,02 (d, 1H, J = 10 Hz), 4,60 (m, 5H), 2,62 (dd,
1H, J= 15,6 Hz), 2,54 - 2,34 (m, 1H), 1,40 (s, 6H) ppm.
Příklad 28
F • · · · · » • · · · · · e· · · * ·
- 123 ? · · · · · · · • · · • · · (2S,4S)-1-{(2R)-2-Amino-3-methyl-3-f(pvridin-4-vlmethvl)thio1-butanovl)-4-fluorpyrroíidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. Kyselina (2R)-2-f(terc-butoxvkarbonvl)aminol-3-methvl-3-r(pyridin-4-ylmethyl)thiojbutanová
K 1,0N roztoku KOH (50 ml) s obsahem kyseliny (2R)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-merkapto-3-methylbutanové (1 g, 0,00401 mol) byl přidán 4-(brommethyl)pyridinhydrobromíd (1,1 g, 0,00441 mol) při laboratorní teplotě. Po 17,0 h byla reakční směs zředěna vodou a promyta diethyletherem. Organické podíly byly odlity a vodná vrstva byla ochlazena na 0 až 5 °C. Vodný roztok byl okyselen (pH 4,0) koncentrovanou HCI a produkt byl extrahován do EtOAc. Organické podíly byly sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány do sucha za získáni 482 mg (35 %) sloučeniny A jako bílé pevné látky.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 8,48 (d, 2H, J = 6,0 Hz), 7,40 (d, 2H, J = 5,6 Hz), 5,48 (d (br), 1H, J = 9,2 Hz), 4,41 (d, 1H, J = 9,2 Hz),
3,82 (s, 2H) 1,52 - 1,38 (m, 15H) ppm.
B. Terc-butyl(1 R)-1-{[(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpvrrolidin-1-vl1karbonyl}-2-methvl-2f(pyridin-4-vlmethvl)thiojpropvlkarbamát
K DMF roztoku (20 ml) obsahujícímu sloučeninu A (482 mg, 0,00142 mol) a N,N-diisopropylethylamin (549 mg, 0,0042 mol) byl přidán HATU (810 mg, 0,00213 mol) při teplotě laboratoře. Po 30 min byla reakční směs smísena s (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátem (447 mg, 0,00156 mol). Po míchání přes noc byla reakce ukončena NaHCO3 a organické podíly extrahovány EtOAc (2 x). Organické podíly byly promyty nasyceným roztokem NaCI a sušeny nad Na2SO4. Odstranění rozpouštědla ve vakuu a čištění chromatografií na koloně (1/1 hexany/EtOAc) poskytlo 476 mg (77 %) sloučeniny B.
·· · 9 9 9 9 · · · • · 9 9 · · 9 · 9 • · · · 9 9 99 9999 • •9 999 99 9
999999 999999 99 9
- 124 ·· 1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 8,51 (d, 2H, J = 4,4 Hz), 7,31 (d, 2H, J = 6,4 Hz), 5,43 (d (br), 7H, J = 9,6 Hz), 5,43 (d (br), 1H, J = 51,2 Hz), 5,01 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,39 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,35 - 3,96 (m, 2H), 3,80 (s, 2H), 2,70 (dd, 1H, J = 15,4), 2,46 - 2,29 (m, 1 H),1,45 1,41 (m, 15H) ppm.
C. (2S,4S)-1-f(2R)-2-Amino-3-methvl-3-[(pyridin-4-vlmethvl)thio1-butanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonítríl hydrochlorid
K CH2CI2 roztoku (45 ml) obsahujícímu sloučeninu B (476 mg, 0,00109 mol) byla přidána TFA (5 ml). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře 16,0 h, potom byla neutralizována nasyceným roztokem NaHCO4. Organické podíly byly odděleny, sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí surové pevné látky. Získaná pevná látka byla čištěna chromatografií na silikagelu (99% CH2CI2/1 % MeOH s 2,0M NH3). Čistá pevná látka byla rozpuštěna do směsi aceton/ether (1/1) a vysrážena s použitím 2,ON HCI v etheru. Získaná pevná látka byla zfiltrována ve vakuu a promyta etherem. Po usušení ve vysokém vakuu reakce poskytla celkově 107 mg sloučeniny C.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 8,81 (d, 2H, J = 4,8 Hz), 8,08 (d, 2H, J = 6,4 Hz), 5,51 (d (br), 1H, J = 51,2 Hz), 5,10 (d, 1H, J = 92 Hz), 4,35 - 3,96 (m, 4H), 2,65 - 2,43 (m, 2H), 1,62 - 1,42 (m, 6H) ppm.
Příklad 29
F • ·· · · · ·· • 0 0 0 0 0
0 0 0 0
- 125 (2S,4S)-1-{(2R)-2-Amino-3-í(4-fluorbenzvl)sulfonvH-3-methvlbutanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. Kyselina (2R)-2-[(terc-butoxvkarbonvl)amino)-3-f(4-fluorbenzyl)thio1-3-methylbutanová
K 1,0N roztoku KOH (50 ml) obsahujícímu kyselinu (2R)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-merkapto-3-methylbutanovou (1,0 g, 0,00401 mol) byl přidán 1-(brommethyl)-4-fluorbenzen (834 mg, 0,00441 mol) při teplotě laboratoře. Po 17,0 h byla reakční směs zředěna vodou a promyta etherem. Organické podíly byly odlity a vodná vrstva byla ochlazena na 0 až 5 °C. Vodný roztok byl okyselen (pH 3,5) koncentrovanou HCI a produkt byl extrahován do EtOAc. Organické podíly byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za získání celkově 1,2 g (86 %) sloučeniny A jako oleje.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,29 - 7,26 (m, 2H), 6,99 - 6,94 (m, 2H), 5,40 (d (br), 1H, J = 8,0 Hz), 4,40 (d (br), 1H, J = 8,0 Hz), 3,80 3,74 (m, 2H) 1,50 - 1,40 (m, 15H) ppm.
B. Terc-butvl(1 R)-1-fí(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpvrrolidin-1-vnkarbonyl)-2-í(4-fluorbenzvl)thiol-2-methvlpropylkarbamát
K DMF roztoku (25 ml) obsahujícímu sloučeninu A (1,2 g, 0,0034 mol) a Ν,Ν-diisopropylethylamin (1,3 g, 0,0107 mol) byl přidán HATU (1,9 g, 0,0051 mol) při laboratorní teplotě. Po 30 min byla reakční směs smísena s (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátem (1,1 g, 0,0037 mol). Po míchání přes noc byla reakce ukončena NaHCO3 a organické podíly extrahovány EtOAc (2 x). Organické podíly byly promyty nasyceným roztokem NaCI a sušeny nad Na2SO4. Odstranění rozpouštědla ve vakuu a čištění chromatografii na koloně (1/1 hexany/EtOAc) poskytlo 929 mg (61 %výtěžek) sloučeniny B.
• · · · · · · · · • · · · · · ·· · · · · • · * 9 · · ··· • · ·· · 9 9 9 9 9 9·' 9 9 9
- 126 1H NMR (CDCb) 400 MNz δ 7,33 (dd, 2H, J = 8,4 Hz), 6,96 (dd, 2H, J = 8,8 Hz), 5,42 (d (br), 1H, J = 9,2 Hz), 5,43 (d (br), 1H, J = 51,6 Hz), 5,02 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,38 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 4,34 - 3,97 (m, 2H), 3,82 (s, 2H), 2,69 (dd, 1H, J = 15,4 Hz), 2,46 - 2,28 (m, 1H),
1,45 - 1,41 (m, 15H) ppm.
C. Terc-butyl(1 R)-1-([(2S,4S)-2-kvano-4-IΊuorpvrrolidin-1-vΠkarbonvl}~2-í(4-fluorbenzvl)sulfonvl1-2-methvlpropvlkarbamát
K CH2CI2 roztoku (100 ml) obsahujícímu sloučeninu B (929 mg, 0,0019 mol) byla přidána kyselina 3-chlorperoxybenzoová (57 až 86%) (3,3 g, 0,0191 mol). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře 16,0 h, potom byla neutralizována 2,ON KOH. Organické podíly byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí 678 mg sloučeniny C (97% výtěžek).Získaná bělavá pevná látka byla použita bez dalšího čištění.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,40 (dd, 2H, J = 8,8 Hz), 7,07 (dd, 2H, J = 8,6 Hz), 5,52 (d (br), 1H, J = 9,2 Hz), 5,43 (d (br), 1H, J = 51,2 Hz), 5,03 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,97 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,36 - 3,74 (m, 4H), 2,70 (dd, 1H, J = 15,2 Hz), 2,47 - 2,28 (m, 1 H),1,72 - 1,35 (m, 15H)ppm.
D. (2S,4S)-1-f(2R)-2-Amino-3-[(4-fluorbenzyl)sulfonyn-3-methyibutanoyl)-4-fluorpvrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K CH2Cl2 roztoku (45 ml) obsahujícímu sloučeninu C (678 mg, 0,00140 mol) byla přidána TFA (5 ml). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře 16,0 h, potom byla neutralizována nasyceným roztokem NaHCOs. Organické podíly byly odděleny, sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí surové pevné látky. Získaná pevná látka byla čištěna chromatografii na silikagelu (99% CH2CI2/1 % MeOH s 2,0M NH3). Čistá pevná látka byla
- 127 ·· ··« · ·· ·· ·· · • · · 9 9 · • · 9 9 9 9
9 9 9 9999
9 9 9 9
9 9 99 99 9 rozpuštěna do směsi aceton/ether (1/1) a vysrážena s použitím 2,0N HCI v etheru. Získaná pevná látka byla zfiltrována ve vakuu a promyta etherem. Po usušení ve vysokém vakuu reakce poskytla celkově 254 mg sloučeniny D jako bílé pevné látky.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,39 (dd, 2H, J = 8,4 Hz), 7,08 (dd, 2H, J = 8,6 Hz), 5,41 (d (br), 1H, J= 50,8 Hz), 4,94 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,63 (d, 1H, J = 13,2 Hz), 4,35 - 3,55 (m, 4H), 2,70 (dd, 1H, J =
15,4 Hz), 2,43 - 2,26 (m, 1H), 1,80 - 1,39 (m, 8H) ppm.
Příklad 30
(2S,4S)-1-{(2R)-2-Amino-3-methvl-3-[(3-fenoxvbenzyl)sulfonvn-butanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. Kyselina (2R)-2-f(terc-butoxykarbonyl)aminoj-3-methyl-3-f(3-fenoxybenzvDthiolbutanová
K 1,0N roztoku KOH (50 ml) obsahujícímu kyselinu (2R)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino)-3-merkapto-3-methylbutanovou (1 g, 0,00401 mol) byl přidán 1-(chlormethyl)-3-fenoxybenzen (964 mg, 0,00441 mol) a 1,4-dioxan (15 ml) při teplotě laboratoře. Po 17,0 h byla reakční směs zředěna vodou a promyta diethyletherem. Organické podíly byly odlity a vodná vrstva byla ochlazena na 0 až 5 °C. Vodný roztok byl okyselen (pH 3,5) koncentrovanou HCI a produkt byl extrahován do etheru. Organické podíly byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí celkově 1,4 g (82 %) sloučeniny A jako bílé ·· 99 • 9 9 9 9 9 9 9 9
9 99 9 9999
999 9 9 99 9999
999 999
999 999999 99 9
- 128 9« 9 pevné látky.
1H NMR (CDCI3) 400 MHz δ 7,34 - 6,98 (m, 8H), 6,85 (dd, 1N, J = 8,0 Hz), 5,44 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 3,80 (m, 2H), 1,50 - 1,40 (m, 15H)ppm.
B. Terc-butyl(1 R)-1-{f(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpvrrolidin-1-vΠkarbonyl}-2-methvl-2Γ(3-fenoxvbenzvl)thio^propvlkarbamáť
K DMF roztoku (20 ml) obsahujícímu sloučeninu A (1,4 g, 0,0032 mol) a N,N-diisopropylethylamin (1,3 g, 0,0100 mol) byl přidán HATU (1,8 g, 0,0048 mol) při teplotě laboratoře. Po 30 min byla reakční směs smísena s (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátem (1,0 g, 0,0035 mol). Po míchání přes noc byla reakce ukončena NaHCCb a organické podíly extrahovány EtOAc (2 x). Organické podíly byly promyty nasyceným roztokem NaCl a sušeny nad MgSO4. Odstranění rozpouštědla ve vakuu a čištění chromatografií na koloně (1/1 hexany/EtOAc) poskytlo 1,1 g (65 %) sloučeniny B.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,34 - 6,97 (m, 8H), 6,84 (dd, 1H, J = 8,0 Hz), 5,44 (d (br), 1H, J = 9,2 Hz), 5,39 (d (br), 1H, J = 51,2 Hz), 5,01 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,36 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 4,29 - 3,90 (m, 2H),
3,80 (s, 2H), 2,66 (dd, 1H, J = 15,4 Hz), 2,43 - 2,26 (m, 1 H),1,52 1,38 (m, 15H) ppm.
C. Terc-butyl(1 R)-1-{[(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpvrrolidin-1-vl1karbonyl)-2-methyl-2-[(3-fenoxybenzyl)sulfonynpropylkarbamát
K CH2CI2 roztoku (50 ml) obsahujícímu sloučeninu B (600 mg, 0,0011 mol) byla přidána kyselina 3-chlorperoxybenzoová (57 až 86%) (2,0 g, 0,011 mol). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 16,0 h, potom byla neutralizována 2,ON KOH. Organické podíly byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha ft ftftftft ftft ftft ftft · *· ft ftftftft ftftft • ft ftft ft ftftftft • ftftft ft · ftft ftftftft
-19Q- ··· ··· «·.·
I £-W ftftftft ftft ftft ftftftft ftft · za poskytnutí 594 mg sloučeniny C (93% výtěžek). Získaná bělavá pevná látka byla použita bez dalšího čištění.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,34 - 7,00 (m, 9H), 5,40 (d (br), 1H,
J = 51,2 Hz), 5,27 (d (br), 1H, J = 8,8 Hz), 4,93 (d, 1H, J = 9,6 Hz),
4,62 (d, 1H, J = 13,2 Hz), 4,46 - 3,55 (m, 4H), 2,69 (dd, 1H, J =
15,4 Hz), 2,42 - 2,25 (m, 1 H),1,62 - 1,43 (m, 15H) ppm.
D. (2S,4S)-1-{(2R)-2-Amino-3-methyl-3-f(3-fenoxybenzyl)sulfonylj-butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K CH2CI2 roztoku (45 ml) obsahujícímu sloučeninu C (678 mg, 0,00106 mol) byla přidána TFA (5 ml). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 16,0 h, potom byla neutralizována nasyceným roztokem NaHCO3. Organické podíly byly odděleny, sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí surové pevné látky. Získaná pevná látka byla čištěna chromatografii na silikagelu (99% CH2CI2/1% MeOH s 2,0M NH3). Čistá pevná látka byla rozpuštěna do směsi aceton/ether (1/1) a vysrážená s použitím 2,ON HCI v etheru. Získaná pevná látka byla zfiltrována ve vakuu a promyta etherem. Po usušení ve vysokém vakuu reakce poskytla celkově 268 mg sloučeniny D jako bílé pevné látky.
1H NMR (de-DMSO) 400 MHz δ 7,42 - 6,99 (m, 9H), 5,54 (d (br), 1H, J = 51,2 Hz), 5,04 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 4,70 (m, 2H), 4,46 (m, 1H),
4,16 - 3,79 (m, 2H), 2,55 - 2,30 (m, 2H), 1,55 (s, 3H), 1,47 (s, 3H) ppm.
Příklad 31
Φ · Φ
Φ Φ
Φ Φ
- 130 ΦΦ ··« φ • 9 · · φ « φ 9 9 9 9
ΦΦΦΦ
9999 99
Φ Φ Φ
Φ ΦΦΦ • ΦΦΦΦΦ
ΦΦ Φ
(2S,4S)-1-f(2R)-2-Amino-3-methvl-3-í(3-fenoxvbenzyl)thiojbutanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
Κ CH2CI2 roztoku (45 ml) obsahujícímu terc-butyl(1 R)-1 -{[(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpyrrolidin-1-yl]karbonyl}-2-methyl-2-[(3-fenoxybenzyl)thio]propylkarbamát (500 mg, 0,0010 mol) byla přidána TFA (5 ml). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 16,0 h, potom byla neutralizována nasyceným roztokem NaHCO3. Organické podíly byly odděleny, sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí surové pevné látky. Získaná pevná látka byla čištěna chromatografií na silikagelu (99% CH2CI2/1% MeOH s 2,0M NH3). Čistá pevná látka byla rozpuštěna do směsi aceton/ether (1/1) a vysrážena s použitím 2,ON HCI v etheru. Získaná pevná látka byla zfiltrována ve vakuu a promyta etherem. Po sušení ve vysokém vakuu reakce poskytla celkově 132 mg v názvu uvedené sloučeniny.
1H NMR (D2O) 400 MHz δ 7,17 - 6,71 (m, 9H), 5,38 (d (br), 1H, J = 50,4 Hz), 5,00 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,16 - 3,60 (m, 4H), 2,62 - 2,30 (m, 2H), 1,38 - 1,29 (s, 6H) ppm.
Příklad 32
,ci * ·
- 131 • · · φ φ · · · φ φ φ · φ φ φφφφ φφφ • ΦΦ φφφ φφφ φφφφ φφ φφ φφφφ φφ φ (2S,4S)-1-((2R)-2-Amino-3-([(5-chlor-1,1“dioxido-1-benzothien-3-yl)-methvl1sulfonvl)-3-methvlbutanoyl)-4-fluorpvrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. Kyselina (2R)-2-[(terc-butoxvkarbonyl)aminoj-3-{[(5-chlor-1-benzothien-3-vl)methyl)thio}-3-methylbutanová
K 1,0N roztoku KOH (50 ml) obsahujícímu kyselinu (2R)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-merkapto-3-methylbutanovou (7 g, 0,00401 mol) byly přidány 3-(brommethyl)-5-chlor-1-benzothiofen (1,2 g, 0,00441 mol) a 1,4-dioxan (10 ml) při teplotě laboratoře. Po 17,0 h byla reakční směs zředěna vodou a promyta diethyletherem. Organické podíly byly odlity a vodná vrstva byla ochlazena na 0 až 5 °C. Vodný roztok byl okyselen (pH 3,5) s použitím koncentrovaného HCI a produkt byl extrahován do etheru. Organické podíly byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za získání celkově 1,0 g (59 %) sloučeniny A jako světlehnědé pevné látky.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,84 (s, 1H), 7,72 (d, 1H, J =
8,4 Hz), 7,39 (s, 1H), 7,30 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 5,44 (m, 1H), 4,45 (m, 1H, J = 7,6 Hz), 4,07 - 4,00 (m, 2H), 1,55 - 1,40 (m, 15H) ppm.
B. Terc-butyl(1R)-2-{[(5-chlor-1-benzothien-3-vl)methvl1thio)-1-{[(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpvrrolidin-1-yl1karbonvl}-2-methylpropvlkarbamát
K DMF roztoku (20 ml) obsahujícímu sloučeninu A (1,0 g, 0,0023 mol) a Ν,Ν-diisopropylethylamin (902 mg, 0,007 mol) byl přidán HATU (1,3 g, 0,00345 mol) při teplotě laboratoře. Po 30 min byla reakční směs smísena s (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátem (725 mg, 0,0025 mol). Po míchání přes noc byla reakce ukončena NaHCO3 a organické podíly extrahovány EtOAc
- 132 99 9999 · » • ···· (2 x). Organické podíly byly promyty nasyceným roztokem NaCI a sušeny nad MgSO4. Odstranění rozpouštědla ve vakuu a čištění chromatografií na silikagelu (1/1 hexany/EtOAe) poskytlo 738 mg (60 %) sloučeniny B.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,91 (s, 1N), 7,72 (d, 1H, J =
8,8 Hz), 7,47 (s, 1H), 7,30 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 5,49 - 5,35 (m, 2H), 5,04 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,41 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 4,35 - 3,98 (m, 4H), 2,69 (dd, 1H, J = 15,2 Hz), 2,46 - 2,29 (m, 1H),1,47 - 1,40 (m,15H) ppm.
C. Terc-butyl(1R)-2-{f(5-chlor-1,1-dioxido-1-benzothien-3-vl)methvn-sulfonyl}-1-{[(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1-ynkarbonvl)-2-methylpropylkarbamát
K CH2Cb roztoku (100 ml) obsahujícímu sloučeninu B (738 mg, 0,0014 mol) byla přidána kyselina 3-chlorperoxybenzoová (57 až 86%) (4,8 g, 0,028 mol). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 16,0 h, potom byla neutralizována 2,ON KOH. Organické podíly byly sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí 803 mg sloučeniny C (97% výtěžek). Získaná bělavá pevná látka byla použita bez dalšího čištění.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 8,05 (s, 1H), 7,96 (d, 1H, J =
7,6 Hz), 7,48 (m, 3H), 5,45 (d (br), 1H J = 10 Hz), 5,44 (d (br), 1H, J =
50,8 Hz), 5,02 (d, 1H, J = 10 Hz), 4,95 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,77 - 3,96 (m, 4H), 2,70 (dd, 1H, J = 14,8 Hz), 2,46 - 2,30 (m, 1H), 1,70 - 1,37 (m,15H) ppm.
- 133 D. (2S,4S)-1-((2R)-2-Amino-3-fT(5-chlor-1,1-dioxido-1-benzothien-3-vl)-methvnsulfonyl)-3-methylbutanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K CH2CI2 roztoku (45 ml) obsahujícímu sloučeninu C (500 mg, 0,0010 mol) byla přidána TFA (5 ml). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře 16,0 h, potom byla neutralizována nasyceným roztokem NaHCO3. Organické podíly byly odděleny, sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí surové pevné látky. Získaná látka byla čištěna chromatografii na silikagelu (99% CH2CI2/1% MeOH s 2,0M NH3). Čistá pevná látka byla rozpuštěna do směsi aceton/ether (1/1) a vysrážená s použitím 2,ON HCI v etheru. Získaná pevná látka byla zfiltrována ve vakuu a promyta etherem. Po usušení ve vysokém vakuu reakce poskytla celkově 132 mg sloučeniny D.
1H NMR (D2O) 400 MHz δ 7,99 (s, 1H), 7,81 - 7,56 (m, 3H), 5,44 (d (br), 1H, J = 50,4 Hz), 5,01 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,19 - 3,80 (m, 4H),
2,66 - 2,22 (m, 2H), 1,58 (s, 3H), 1,43 (s, 3H) ppm.
Příklad 33
(2S,4S)-1-f(2R)-2-Amino-3-[(2,1,3-benzoxadiazol-5-ylmethyl)thio1-3-methvlbutanovl)-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid φφφφφφ «· ·· «φφ • · · φ φ φ φ φ φ φ φ · φφ φ φφφφ φ φ φ « «φφ φ φ φφφφ
0/1 φφφ ΦΦΦ ΦΦΦ
- I Ό*+ «φφφ φφ φφ φφ·φ φφ φ
A. Kyselina (2R)-3-í(2,1,3-benzoxadiazol-5-vlmethvl)thio1-2-í(terc-butoxvkarbonyl)amino1-3-methylbutanová
K 1,0N roztoku KOH (50 ml) obsahujícímu kyselinu (2R)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-merkapto-3-methylbutanovou (1 g, 0,00401 mol) byly přidány 5-(brommethyl)-2,1,3-benzoxadiazol (940 mg, 0,00441 mol) a 1,4-dioxan (5 ml) při teplotě laboratoře. Po 17,0 h byla reakční směs zředěna vodou a promyta diethyletherem. Organické podíly byly odlity a vodná vrstva byla ochlazena na 0 až 5 °C. Vodný roztok byl okyselen (pH 4,0) koncentrovanou HCI a produkt byl extrahován do EtOAc. Organické podíly byly sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány do sucha za získání celkově 622 mg (41 %) sloučeniny A jako hnědé pevné látky.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,76 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 7,72 (s, 1H), 7,44 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 5,40 (d (br), 1H, J = 8,0 Hz), 4,46 (d (br), 1H, J= 8,4 Hz), 3,89 (s, 2H) 1,47 - 1,40 (m, 15H) ppm.
B. Terc-butvK 1 R)-2-f(2,1,3-benzoxadiazol-5-ylmethyl)thioj-1 -{[(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpvrrolidin-1-vl1karbonvl)-2-methvlpropylkarbamát
K DMF roztoku (20 ml) obsahujícímu sloučeninu A (622 mg, 0,00163 mol) a N,N-diisopropylethylamin (632 mg, 0,0049 mol) byl přidán HATU (930 mg, 0,00244 mol) při teplotě laboratoře. Po 30 min byla reakční směs smísena s (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonátem (514 mg, 0,00180 mol). Po míchání přes noc byla reakce ukončena NaHCOs θ organické podíly extrahovány EtOAc (2 x). Organické podíly byly promyty nasyceným roztokem NaCI a sušeny nad Na2SO4. Odstranění rozpouštědla ve vakuu a čištění chromatografií na koloně (1/1 hexany/EtOAc) poskytlo 444 mg (45 % výtěžek) sloučeniny B.
1H NMR (CDCIs) 400 MHz δ 7,78 (s, 1H), 7,76 (d, 1H, J =
9,2 Hz), 7,48 (d, 1H, J = 9,2 Hz), 5,43 (d (br), 1H, J = 9,6 Hz), 5,45 (d »· ··
9 · 9 9 9 9
9 9 9 9
9 9 9 9 9
9 9 9 9 9
9999 99 99 9999
- 135 ·· ·*··
9
9 9 9 9
9999
9 9
9 (br), 1H, J = 50,8 Hz), 5,02 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,44 (d, 1H, J =
9,6 Hz), 4,39 - 3,89 (m, 4H), 2,72 (dd, 1H, J = 15,2), 2,48 - 2,32 (m, 1H), 1,60 - 1,40 (m, 15H) ppm.
C. (2S,4S)-1-f(2R)-2-Amino-3-f(2,1,3-benzoxadiazol-5-ylmethyl)thioj-3-methvlbutanoyl)-4-fluorpvrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K CH2CI2 roztoku (45 ml) obsahujícímu sloučeninu B (444 mg, 0,770 mmol) byla přidána TFA (5 ml). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 16,0 h, potom byla neutralizována nasyceným roztokem NaHCO3. Organické podíly byly odděleny, sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí surové pevné látky. Získaná pevná látka byla čištěna chromatografií na silikagelu (99% CH2CI2/1% MeOH s 2,0M NH3). Čistá pevná látka byla rozpuštěna do směsi aceton/ether (1/1) a vysrážena s použitím 2,ON HCl v etheru. Získaná pevná látka byla zfiltrována ve vakuu a promyta etherem. Po usušení ve vysokém vakuu reakce poskytla celkově 105 mg sloučeniny C.
1H NMR (de-DMSO) 400 MHz δ 8,02 - 7,99 (m, 2H), 7,63 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 5,55 (d (br), 1H, J = 51,2 Hz), 5,07 (d, 1H, J = 9,2 Hz),
4,22 - 3,98 (m, 5H), 2,58 - 2,32 (m, 2H), 1,48 (s, 3H), 1,40 (s, 3H) ppm.
Příklad 34
F
-136·· 99 99
9
9 · 9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9
999 9 9 99 99999
9 9 9 9 9 9 9 9
9999 99 99 9999 99 9 (2S,4S)-1-f (2R)-2-Amino-3-methyl-3-[(pyridin-4-vl methyl jsulfonyll-butanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K CH2CI2 roztoku (90 ml) obsahujícímu terc-butyl(1 R)-1-{[(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpyrrolidin-1-yi]karbonyl}-2-methyl-2-[(pyridin-4-ylmethyl)thio]propylkarbamát (500 mg, 0,0011 mol) byla přidána TFA (10 ml). Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě laboratoře po dobu 16,0 h a potom byla přidána kyselina 3-chlorperoxybenzoová (2,0 g, 0,0114 mol). Reakční směs byla míchána 4,0 h, potom byla neutralizována 2,ON NaOH. Organické podíly byly odděleny, sušeny nad Na2SO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí surové pevné látky. Získaná pevná látka byla čištěna chromatografii na silikagelu (99% CH2CÍ2/1% MeOH s 2,0M NH3). Čistá látka byla rozpuštěna do směsi aceton/ether (1/1) a vysrážena s použitím 2,ON HCI v etheru. Získaná pevná látka byla zfiltrována ve vakuu a promyta etherem. Po usušení ve vysokém vakuu reakce poskytla celkově 22 mg sloučeniny uvedené v názvu.
1H NMR (d4-CDCI3) 400 MHz δ 8,64 (d, 2H, J = 5,6 Hz), 7,37 (d,
2H, J= 5,6 Hz), 5,42 (d (br), 1H, J= 51,2 Hz), 4,94 (d, 1H, J = 9,6 Hz), 4,77 (d, 1H, J = 13,2 Hz), 4,39 - 3,75 (m, 4H), 2,71 (dd, 1H, J =
15,6 Hz), 2,43 - 2,29 (m, 1H), 2,06 - 1,86 (s (br), 2H), 1,62 (s, 3H),
1,46 (s, 3H) ppm.
Příklad 35
•HCI
9·«9 99 99
9 9 9 9 9 ·
9 9 9 9
9 9 9 9 9 · 9 9 9 9
9999 99 ·· 9999
- 137 (2S,4S)-1-í(2S)-2-Amino-3-pyridin-4-vlpropanovl]-4“fluorpvrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. (2Sl4S)-1-[(2,S)-2-amino-3-pvridin-4-vlpropanoyl1-4-fluorpvrrolidin2-karbonitril hydrochlorid
K suchému DMF (25 ml) byla přidána kyselina (2S)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino)-3-pyridin-4-ylpropanová (705 mg, 2,65 mmol), HATU (1,0 g, 2,65 mmol) a N,N-diisopropylethylamin (0,46 ml, 2,65 mmol). Po míchání při teplotě laboratoře 30 min byly přidány (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát (581 mg, 1,99 mmol) a další N,N-diisopropylethylamin (0,35 ml,
1,99 mmol). Tento roztok byl ponechán míchat při teplotě laboratoře 12 hod. Potom byl přidán nasycený roztok hydrogenuhličitanů sodného (100 ml) a směs byla extrahována ethylacetátem (2 x 100 ml) a organické podíly byly promyty nasyceným NaCI (100 ml) a sušena nad MgSO4 a zakoncentrována do sucha, za poskytnutí surové pevné látky. Pevná látka byla čištěna chromagografií na koloně (silikagel, hexany/EtOAc 4 : 1), za poskytnutí pevné látky, která byla míchána v roztoku dioxanu obsahujícím HCI (4,0M, 20 ml) 2 h, a potom byl přidán diethylether (100 ml). Vysrážená pevná látka byla oddělena filtrací a sušena ve vysokém vakuu za získání 388 mg (1,3 mmol, 65 % výtěžek) sloučeniny A jako bílé pevné látky.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 8,92 (s (br), 3H), 8,84 (d, 2H, J =
6,2 Hz), 7,96 (d, 2H, J = 6,2 Hz), 5,45 (d, 1H, J = 51 Hz), 5,00 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 4,47 (m (br), 1H), 4,05 - 3,78 (m, 2H), 3,41 - 3,36 (m, 2H),
2,42 - 2,25 (m, 2H) ppm.
Příklad 36
- 138 ·· · • · ·· ««<· ·· · · ·· · · · · · « ·· · · · 9 · · · • *·· · · · · φ ··* ··· · · · · φ « ···· 99 99 9999 99 9
(2S,4S)-1-f(2S)-2-Amino-3-pvridin-3-vlpropanovl1-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. (2S,4S)-1-í(2,S)-2-Amino-3-pyridin-3-vlpropanovll-4-fluorpvrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K suchému DMF (25 ml) byla přidána kyselina (2S)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-pyridin-3-ylpropanová (534 mg, 2,0 mmol), HATU (0,76 g, 2,0 mmol) a N,N-diisopropylethylamin (0,35 ml, 2,0 mmol). Po míchání při teplotě laboratoře po dobu 30 min byly přidány (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát (438 mg, 1,5 mmol) a další N,N-diisopropylethylamin (0,26 ml,
1,5 mmol). Tento roztok byl ponechán míchat při teplotě laboratoře celkem 12 h a potom byl přidán nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného (150 ml). Směs byla extrahována ethylacetátem (3 x 100 ml) a organické podíly byly promyty nasyceným NaCI (100 ml), sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za poskytnutí surové pevné látky. Pevná látka byla čištěna chromatografii (silikagel, hexany/EtOAc 4 : 1) za získání pevné látky, která byla míchána v roztoku dioxan-HC! (4,0M, 25 ml) 2 h a potom byl přidán diethylether (200 ml). Vysrážená pevná látka byla oddělena filtrací a sušena ve vysokém vakuu za získání 266 mg (0,89 mmol, 59% výtěžek) sloučeniny A jako bílé pevné látky.
1H NMR (ds-DMSO) 400 MHz δ 8,88 (s, 1H), 5,51 (d, 1H, J = 51 Hz), 5,01 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 4,45 - 4,38 (m( br), 1H), 4,00 - 3,86 (m, 2H), 3,38 - 3,27 (m, 2H), 2,42 - 2,30 (m, 3H) ppm.
·· ··
9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9
999 · · 99 9 9999
9 9 9 9 9 9 9 9
9999 99 99 99 99 99 9
- 139 -
·« ···· ·· <·
Příklad 37 (2S,4S)-1-F(2S)-2-Amino-3-piperidin-4-vlpropanovlj-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril dihydrochlorid
A. Acetátová sůl kyseliny (2S)-2-F(terc-butoxykarbonyl)aminoj-3-piperidin-4-ylpropanové
Ke kyselině octové (ledová, 50 ml) byl přidán roztok kyseliny (2S)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-pyridin-4-ylpropanové (0,69 g, 2,58 mmol), bylo přidáno 10% Pd/C (50 % hmotn./hmotn., 0,35 g) a směs byla hydrogenována při 60 psi (414 kPa) v atmosféře vodíku. Roztok byl zfiltrován přes celit a zakoncentrován za poskytnutí bílé pevné látky. Ta byla sušena ve vysokém vakuu za získání 822 mg (2,48 mmol, 96% výtěžek) sloučeniny A jako acetátové soli.
1H NMR (ds-DMSO) 400 MHz δ 10,5 (s (br), 1H), 6,21 - 6,19 (m (br), 1H), 3,69 - 3,62 (m, 1H), 3,19 - 3,06 (m, 2H), 2,75 - 2,65 (m, 2H),
1,92 (s, 3H), 1,80 - 1,45 (m, 6H), 1,35 (s, 9H), 1,21 - 1,05 (m, 1H) ppm.
B. Kyselina (2S)-2-F(terc-butoxvkarbonyl)amino1-3-F1-(terc-butoxvkarbonyl)piperidin-4-vnpropanová
K CH2CI2 roztoku (150 ml) acetátové soli kyseliny (2S)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-piperidin-4-yipropanové (1,0 g, 3,00 mmol) ·· ···· ·· ·· ·♦ · ·· · · · · · · · · • · ·· · 9 9 9 · • 9 9·· 99·· ··· . . _ «··♦·· · · · - 140 - .............. * byl přidán triethylamin (1,52 g, 15 mmol) a di-terc-butyldikarbonát (786 mg, 3,6 mmol) a směs byla míchána 12 h. Potom byly přidány H2O (50 ml) a CH2CI2 (300 ml), směs byla okyselena na pH 4 1,0M HCI. Oddělení ethylacetátové vrstvy, sušení nad MgSO4 a zfiltrování rozpouštědla ve vakuu poskytly čirý olej. Olej byl sušen ve vysokém vakuu za získání 1,06 g (2,86 mmol, 95% výtěžek) sloučeniny B jako bílé pevné látky.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 12,4 (s (br), 1H), 7,08 (d, 1H, J =
8,3 Hz), 3,98 - 3,81 (m (br), 3H), 2,78 - 2,59 (m (br), 2H), 1,68 - 1,42 (m, 6H), 1,39 (s, 16H), 1,02 - 0,89 (m, 2H) ppm.
C. (2S,4S)-1-[(2S)-2-Amino-3-piperidin-4-ylpropanoyl1-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K suchému DMF (25 ml) byla přidána kyselina (2S)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-[1-(terc-butoxykarbonyl)piperidin-4-ylj-propanová (0,85 g, 2,28 mmol), HATU (0,87 g, 2,28 mmol) a N,N-diisopropylethylamin (0,40 ml, 2,28 mmol). Po míchání při teplotě laboratoře 30 min byly přidány (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát (500 mg, 1,71 mmol) a další N,N-diisopropylethylamin (0,30 ml, 1,71 mmol). Tento roztok byl ponechán míchat při teplotě laboratoře 12 h a potom byl přidán nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného (100 ml). Směs byla extrahována ethylacetátem (2 x 100 ml) a organické podíly byly promyty nasyceným NaCl (50 ml), a sušeny nad MgSO4. Odpaření ve vakuu poskytlo surovou pevnou látku, která byla čištěna chromatografií (silikagel, hexany/EtOAc 4 : 1), za poskytnutí pevné látky, která byla míchána v roztoku dioxan-HCI (4,0M, 20 ml) 2 h a byl přidán další diethylether (100 ml). Získaná sraženina byla oddělena filtrací a sušena ve vysokém vakuu, za získání 432 mg (1,26 mmol, 74% výtěžek) sloučeniny C jako bílé pevné látky.
1H NMR (de-DMSO) 400 MHz δ 9,0 - 8,83 (s (br), 2H), 8,80 8,60 (s (br), 3H), 5,52 (d, 1H, J = 51 Hz), 5,06 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 4,07
- 4,01 (m (br), 1H), 3,94 - 3,81 (m, 2H), 3,23 - 3,20 (m, 2H), 2,87 (s, 1H), 2,74 - 2,66 (m, 3H), 2,46 - 2,37 (m, 2H), 1,95 - 1,91 (m, 1H), 1,77
- 1,58 (m, 3H), 1,42 - 1,31 (m, 1H) ppm.
Příklad 38
(2S,4S)-1-í(2S)-2-Amino-3-piperidin-3-vlpropanovl1-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril dihydrochlorid
A. Kyselina (2,S)-2-í(terc-butoxykarbonyl)aminoj-3-piperidin-3-vlpropanová
K roztoku kyseliny (2S)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-pyridin-3-ylpropanové (0,8 g, 3,0 mmol) v kyselině octové (ledová, 50 ml) bylo přidáno 10% Pd/C (50 % hmotn./hmotn., 0,40 g) a směs byla hydrogenována při 60 psi (414 kPa) v atmosféře vodíku. Roztok byl zfiltrován přes celit, zakoncentrován a potom sušen ve vysokém vakuu za získání 946 mg (2,85 mmol, 95% výtěžek) sloučeniny A jako acetátové soli.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 10,2 (s (br), 1H), 6,15 - 6,05 (m, 1H), 3,69 - 2,64 (m, 1H), 3,21 - 3,07 (m, 2H), 2,67 - 2,61 (m, 1H), 2,39
- 2,31 (m (br), 1H), 1,95 (s, 3H), 1,91 - 1,41 (m, 6H), 1,91 (s, 9H), 1,08
- 1,01 (m, 1H) ppm.
- 142 • ft ···· ·· ·· ·· * • ft · · · · ft ftftft • · ·· · ···· • « · · · ········ ftftft ftftft ftftft • ftftft ftft ftft ftftftft ·· ·
B. Kyselina (2S)-2-[(terc-butoxvkarbonyl)amino1-3-[1-(terc-butoxvkarbonyl)piperidin-3-ynpropanová
K CH2CI2 roztoku (150 ml) obsahujícímu sloučeninu A (1,0 g, 3,00 mmol) byl přidán triethylamin (1,52 g, 15 mmol) a dí-terc-butyldikarbonát (786 mg, 3,6 mmol), a směs byla míchána 12 h. Reakce byla potom ukončena H2O (50 ml) a byl přidán CH2CI2 (300 ml). Organická vrstva byla oddělena a vodná vrstva byla okyselena na pH 4 1,0M HCI, potom byla extrahována EtOAc. Spojené organické vrstvy byly sušeny nad MgSO4 a rozpouštědlo bylo odpařeno ve vakuu za získání čirého oleje. Olej byl potom sušen ve vysokém vakuu za získání 1,07 g (2,87 mmol, 95% výtěžek) sloučeniny B jako bílé pevné látky.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 12,15 (s (br), 1H), 7,17 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 3,95 - 3,87 (m (br), 3H), 2,61 - 2,45 (m (br), 2H), 1,73 - 1,40 (m, 6H), 1,35 (s, 16H), 1,2 - 0,89 (m, 2H) ppm.
C. (2S,4S)-1-f(2S)-2-Amino-3-piperidin-3-vlpropanovn-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril dihydrochlorid
K suchému DMF (25 ml) byly přidány sloučenina B (0,85 g,
2,28 mmol), HATU (0,87 g, 2,28 mmol) a N,N-diisopropylethylamin (0,40 ml, 2,28 mmol). Po míchání při teplotě laboratoře 30 min byly přidány (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát (500 mg, 1,71 mmol) a další N,N-diisopropylethylamin (0,30 ml,
1,71 mmol). Tento roztok byl ponechán míchat při teplotě laboratoře celkově 12 h a byl přidán nasycený hydrogenuhličitan sodný (100 ml). Směs byla extrahována ethylacetátem (2 x 100 ml) a organické podíly byly promyty nasyceným NaCI (50 ml) a sušeny nad MgSO4. Odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytlo surovou pevnou látku. Pevná látka byla čištěna chromatografii (silikagel, hexany/EtOAc 4 : 1) za získání pevné látky, která byla míchána v roztoku dioxan-HCI (4,0M, 20 ml) po dobu 2 h a potom byl přidán diethylether (100 ml).
• · · · · ·
Získaná sraženina byla oddělena filtrací a sušena ve vysokém vakuu za získání 419 mg (1,23 mmol, 72% výtěžek) sloučeniny C jako bílé pevné látky.
1H NMR (de-DMSO) 400 MHz δ 9,0 - 8,83 (s (br), 2H), 8,60 8,50 (s (br), 3H), 5,52 (d, 1H, J= 51 Hz), 5,02 (d, 1H, J= 8,8 Hz), 4,13 - 4,08 (m (br), 1H), 3,99 - 3,87 (m, 2H), 3,37 - 3,31 (m, 2H), 3,05 3,01 (m, 1H), 2,87 (m, 2H), 2,46 - 2,37 (m, 2H), 1,95 - 1,91 (m, 5H),
1,22 - 1,11 (m, 1H) ppm.
Příklad 39
(2S,4S)-1-f(2S)-2-Amino-3-piperidin-2-ylpropanoyi|-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril dihydrochlorid
A, Kyselina (2S)-2-f(terc-butoxykarbonyl)aminoj-3-piperidin-2-ylpropanová
K roztoku kyseliny (2S)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]-3-pyridin-2-ylpropanové (1,6 g, 6,0 mmol) v kyselině octové (ledová, 50 ml) bylo přidáno 10% Pd/C (50 % hmotn./hmotn., 0,80 g) a směs byla hydrogenována při 60 psi (414 kPa) v atmosféře vodíku. Roztok byl zfiltrován přes celit a zakoncentrován a potom sušen ve vysokém vakuu za získání 951 mg (2,85 mmol, 95% výtěžek) sloučeniny A jako acetátové soli.
1H NMR (ds-DMSO) 400 MHz δ 10,15 (s (br), 1H), 6,21 - 6,19 • · φ φ φ ΦΦΦΦ φ φφφ φ φ ΦΦ ΦΦΦΦ
-144- ·ί··*··* ·..· :
(m, 1 Η), 3,69 - 2,64 (m, 1 Η), 3,61 - 3,56 (m, 2Η), 3,27 - 3,12 (m, 2Η),
2,72 - 2,65 (m, 1 Η), 1,89 (s, 3Η), 1,81 - 1,63 (m, 5H), 1,52 - 2,42 (m, 1H), 1,91 (s, 9H) ppm.
B, Kyselina (2S)-2-[(terc-butoxvkarbonvl)amino1-3-f1-(terc-butoxvkarbonyl)piperidin-2-vllpropanová
K CH2CI2 (150 ml) roztoku sloučeniny A (1,5 g, 4,50 mmol) byl přidán tríethylamin (2,27 g, 23 mmol) a di-terc-butyldikarbonát (1,18 g,
5,4 mmol). Po míchání 12 h byly přidány H2O (50 ml) a CH2CI2 (300 ml), směs byla okyselena na pH 3 1,0M HCI. Oddělení organické vrstvy, sušení nad MgSO4 a odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytlo čirý olej. Olej byl sušen ve vysokém vakuu za získání 1,68 g (4,45 mmol, 95% výtěžek) sloučeniny B jako bílé pevné látky.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 12,2 (s (br), 1H), 7,15 (d, 1H, J =
8,3 Hz), 4,25 - 3,99 (m (br), 3H), 3,89 - 3,78 (m (br), 2H), 2,68 - 2,58 (m, 1H) 1,79 - 1,40 (m, 5H), 1,35 (s, 16H), 1,2 - 1,14 (m, 2H) ppm.
C, (2S,4S)-1-f(2S)-2-Amino-3-piperidin-2-vlpropanovl1-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril dihydrochlorid
K suchému DMF (25 ml) byly přidány sloučenina B (850 mg,
2,28 mmol), HATU (869 mg, 2,28 mmol) a N,N-diisopropylethylamin (0,40 ml, 2,28 mmol). Po míchání při teplotě laboratoře po dobu 30 min byly přidány (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát (500 mg, 1,71 mmol) a další N,N-diisopropylethylamin (0,30 ml, 1,71 mmol). Tento roztok byl ponechán míchat při teplotě laboratoře 12 h a potom byl přidán nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného (110 ml). Směs byla extrahována ethylacetátem (2 x 100 ml) a organické podíly byly promyty nasyceným NaCI (50 ml) a sušeny nad MgSO4. Odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytlo surovou pevnou látku. Pevná látka byla čištěna chromatografií (silikagel, hexany/EtOAc
- 145 4 : 1) za poskytnutí pevné látky, která byla míchána v roztoku dioxanHCI (4,0M, 20 ml) 2 h a potom byl přidán diethylether (100 ml). Získaná sraženina byla oddělena filtrací a sušena ve vysokém vakuu za získání 365 mg (1,07 mmol, 63% výtěžek) sloučeniny C jako bílé pevné látky.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 9,32 - 9,10 (s (br), 2H), 8,79 8,53 (s (br), 3H), 5,51 (d, 1H, J= 51 Hz), 5,04 (d, 1H, J= 8,8 Hz), 4,25 - 4,21 (m (br), 1H), 4,19 - 3,88 (m, 2H), 3,58 - 3,46 (m, 1H), 3,42 3,32 (m, 2H), 2,85 (s, 1H), 2,71 - 2,63 (m, 2H), 2,27 - 2,14 (m, 1H), 2,05 - 1,97 (m, 1H), 1,81 - 1,40 (m, 5H) ppm.
Příklad 40
(2S,4S)-1-(2S)-2-Amino-3-í1-(isopropvlsulfonvl)piperidin-4-yl1-propanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. Kyselina (2S)-2-f(terc-butoxykarbonyl)amino1-3-F1-(isopropylsulfonyl)piperidin-4-vnpropanová
K CH3CN roztoku(150 ml) sloučeniny A z příkladu 12 (1,0 g, 3,00 mmol) byl přidán triethylamin (1,52 g, 15 mmol) a isopropylsulfonylchlorid (513 mg, 3,6 mmol). Po míchání 6 h byl acetonitri! odstraněn ve vakuu a byly přidány H2O (50 ml) a ethylacetát (300 ml). Oddělení ethylacetátové vrstvy, sušení nad MgSO4 a •· · · · · ·· tt ·· · • · 9 9 9 9 9 9 9 9 odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytlo pevnou látku, která byla promyta etherem a sušena ve vysokém vakuu za získání 860 mg (2,26 mmol, 75% výtěžek) sloučeniny A jako bílé pevné látky.
1H NMR (de-DMSO) 400 MHz δ 12,4 (s (br), 1H), 7,15 (d, 1H, J =
8,3 Hz), 4,37 - 429 (m, 1H), 3,99 - 3,95 (m (br), 1H), 3,85 - 3,80 (m, 1H), 3,62 - 3,58 (m, 1H), 2,97 - 2,92 (m, 1H), 2,42 - 2,37 (m, 1H), 1,91 - 1,89 (m, 1H) 1,87 - 1,46 (m, 7H), 1,37 (s, 9H), 1,19 - 0,89 (d, 4H) ppm.
B. (2S,4S)-1-{(2S)-2-Amino-3-[1-(isopropylsulfonvl)piperidin-4-yll-propanoyl)-4-fluorpvrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K suchému DMF (25 ml) byly přidány sloučenina A (1,75 g,
4,62 mmol), HATU (1,76 g, 4,62 mmol) a Ν,Ν-diisopropylethylamin (0,80 ml, 4,62 mmol). Po míchání při teplotě laboratoře 30 min byly přidány (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát (1,0 g, 3,47 mmol) a další Ν,Ν-diisopropylethylamin (0,60 ml,
3,47 mmol). Tento roztok byl ponechán míchat při teplotě laboratoře 12 h a potom byl přidán nasycený hydrogenuhličitan sodný (110 ml). Směs byla extrahována ethylacetátem (2 x 100 ml) a organické podíly byly promyty nasyceným NaCl (50 ml) a sušeny nad MgSO4. Odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytlo surovou pevnou látku. Pevná látka byla čištěna chromatografií (silikagel, hexany/EtOAc 4 : 1) za získání pevné látky, která byla míchána v roztoku dioxan-HCI (4,0M, 20 ml) 2 h a potom byl přidán diethylether (100 ml). Sraženina byla oddělena filtrací a sušena ve vysokém vakuu za získání 969 mg (2,35 mmol, 68% výtěžek) sloučeniny B jako bílé pevné látky.
1H NMR (de-DMSO) 400 MHz δ 8,51 - 8,44 (s (br), 3H), 5,15 (d, 1H, J = 51 Hz), 5,06 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 4,04 - 4,01 (s (br), 1H), 3,96 3,84 (m, 2H), 3,72 - 3,61 (m, 2H), 3,51 - 3,37 (m (br), 2H), 3,35 - 3,27 (m, 1H), 2,79 - 2,76 (m, 2H), 1,82 - 1,69 (m, 5H), 1,17 (m, 8H) ppm.
- 147 Příklad 41
(2S,4S)-1-f(2S)-2-Amino-3-f1-(4-methvlfenvlsulfonvl)piperidin-4-vH-propanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. Kyselina (2S)-2-[(terc-butoxykarbonyl)aminoj-3-f1-(4-methylfenylsulfonyl)piperidin-4-yHpropanová
K CH3CN roztoku (150 ml) sloučeniny A z příkladu 12 (1,0 g, 3,00 mmol) byl přidán triethylamin (1,52 g, 15 mmol) a toluensulfonylchlorid (686 mg, 3,6 mmol). Po míchání 6 h byl acetonitril odstraněn ve vakuu a byly přidány H2O (50 ml) a ethylacetát (300 ml). Oddělení ethylacetátové vrstvy následované sušením nad MgSO4 a odstraněním rozpouštědla ve vakuu poskytlo pevnou látku, která byla promyta etherem a sušena ve vysokém vakuu za získání 1,09 g (2,56 mmol, 85% výtěžek) sloučeniny A jako bílé pevné látky, 1H NMR (ds-DMSO) 400 MHz δ 12,4 (s (br), 1H), 7,61 (d, 2H, J =
8,2 Hz), 7,42 (d, 2H, J = 8,2 Hz), 7,13 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 4,27 - 4,21 (m, 1H), 3,98 - 3,95 (m, 1H), 3,58 - 3,52 (m, 1H), 2,98 - 2,91 (m, 1H),
2,42 (s, 3H), 2,21 - 220 (m, 1H), 1,81 - 1,50 (m, 6H), 1,39 (s, 9H), 1,21 - 1,08 (m, 1H) ppm.
• · · · • ·
- 148 • · · • 999
9999 99 99 9999 99 ·
B. (2S,4S)-1-{(2S)-2-Amino-3-f1-(4-methvlfenylsulfonvl)piperidin-4-vl1-propanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K suchému DMF (25 ml) byly přidány sloučenina A (2,13 g, 5,0 mmol), HATU (1,90 g, 5,00 mmol) a Ν,Ν-diisopropylethylamin (0,87 ml, 5,0 mmol). Po míchání při teplotě laboratoře 30 min byly přidány (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methyIbenzensulfonát (1,1 g, 3,75 mmol) a další Ν,Ν-diisopropylethylamin (0,65 ml, 3,75 mmol). Tento roztok byl ponechán míchat při teplotě laboratoře 12 h a potom byl přidán nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného (110 ml). Směs byla extrahována ethylacetátem (2 x 100 ml) a organické podíly byly promyty nasyceným NaCI (50 ml) a sušeny nad MgSO4. Odstranění rozpouštědla ve vysokém vakuu poskytlo surovou pevnou látku, která byla čištěna chromatografii (silikagel, hexany/EtOAc 4 : 1) za poskytnutí pevné látky, která byla míchána v roztoku dioxan-HCI (4,0M, 20 ml) 2 h a potom byl přidán diethylether (100 ml). Získaná sraženina byla oddělena filtrací a sušena ve vysokém vakuu za získání 1,10 g (2,4 mmol, 64% výtěžek) sloučeniny B jako bílé pevné látky.
1H NMR (ds-DMSO) 400 MHz δ 8,21 - 9,05 (s (br), 3H), 7,60 (d, 2H, J = 7,9 Hz), 7,43 (d, 2H, J = 7,9 Hz), 3,91 - 3,88 (m, 2H), 3,07 2,99 (m, 1H), 2,43 (s, 3H), 2,09 - 2,03 (m, 1 H),1,94 - 1,29 (m, 8H),
1,12 - 1,02 (m, 1H) ppm.
Příklad 42
•HCI
-149- ·..· (2S,4S)-1-((2S)-2-Amino-3-ri-(isopropylsulfonvl)piperidin-3-vl)-propanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. Kyselina (2S)-2-í(terc-butoxvkarbonvl)amino]-3-ri-(isopropylsuifonyl)piperidin-3-ynpropanová
K CH3CN roztoku (150 ml) sloučeniny A z příkladu 13 (1,0 g, 3,00 mmol) byl přidán triethylamin (1,52 g, 15 mmol) a isopropylsulfonylchlorid (513 mg, 3,6 mmol). Po míchání 6 h byl acetonitril odstraněn ve vakuu a potom byly přidány H2O (50 ml) a ethylacetát (300 ml). Oddělení ethylacetátové vrstvy, usušení nad MgSO4 a odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytlo pevnou látku, která byla promyta etherem a sušena ve vysokém vakuu za získání 926 mg (2,43 mmol, 81% výtěžek) sloučeniny A jako bílé pevné látky.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 122 (s (br), 1H), 7,18 (d, 1H, J =
8,3 Hz), 3,94 - 3,89 (m, 1H), 3,55 - 3,49 (m (br), 2H), 3,35 - 3,30 (m, 2H), 2,89 - 2,85 (m, 1H), 2,62 - 2,57 (m, 1H), 1,91 - 1,42 (m, 5H), 1,39 (s, 9H), 1,19 (d, 6H) ppm.
B. (2S,4S)-1-{(2S)-2-Amino-3-[1-(isopropvlsulfonvl)piperidin-3-vl1-propanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K suchému DMF (25 ml) byly přidány sloučenina A (1,75 g,
4,62 mmol), HATU (1,76 g, 4,62 mmol) a N,N-diisopropylethylamin (0,80 ml, 4,62 mmol). Po míchání při teplotě laboratoře 30 min byly přidány (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát (1,0 g, 3,47 mmol) a další N,N-diisopropylethylamin (0,60 ml,
3,47 mmol). Tento roztok byl ponechán míchat při teplotě laboratoře 12 h a potom byl přidán nasycený hydrogenuhličitan sodný (110 ml). Směs byla extrahována ethylacetátem (2 x 100 ml) a organické podíly byly promyty nasyceným NaCl (50 ml) a sušena nad MgSO4. Odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytlo surovou pevnou látku.
·· φ
- 150 • · · · · · · · · · • φ φφφ φφφφ φ φφφφ φ · φ φφφφ· φφφ Φ·· φ · · φφφφ φφ φφ φφφφ ·Φ φ
Tato látka byla čištěna chromatografií (silikagel, hexany/EtOAc 4:1) za poskytnutí pevné látky, která byla míchána v roztoku dioxan-HCI (4,0 M, 20 ml) 2 h a potom byl přidán diethylether (100 ml). Získaná sraženina byla oddělena filtrací a sušena ve vysokém vakuu za získání 1,01 g (2,46 mmol, 71% výtěžek) sloučeniny B jako bílé pevné látky.
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 8,42 - 8,39 (s (br), 3H), 5,51 (d, 1H, J =51 Hz), 5,06 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 4,07 - 4,01 (s (br), 1H), 3,98 3,84 (m, 2H), 3,52 - 3,49 (m, 1H), 3,41 - 3,27 (m (br), 4H), 3,09 - 3,02 (m, 1H), 2,98 - 2,80 (m, 1H), 2,65 - 2,61 (m, 1H), 1,77 - 1,63 (m, 6H), 1,18 (m, 8H) ppm.
Příklad 43
(2S,4S)-1~f(2S)-2-Amino-3-f1-(4-methylfenylsulfonyl)piperidin-3-yn-propanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. Kyselina (2S)-2-r(terc-butoxvkarbonvl)aminoj-3-f1-(4-methvlfenylsulfonvl)piperidin-3-yllpropanová
K CH3CN roztoku (150 ml) sloučeniny A z příkladu 13 (1,0 g, 3,00 mmol) byly přidány triethylamin (1,52 g, 15 mmol) a toluensulfonylchlorid (686 mg, 9,6 mmol). Po míchání 6 h byl acetonitril odstraněn ve vakuu a potom byly přidány H2O (50 ml) a ethylacetát (300 ml). Oddělení ethylacetátové vrstvy, sušení nad MgSO4 a odstranění rozpouštědla ve vakuu poskytlo pevnou látku, která byla promyta etherem a sušena ve vysokém vakuu za získání 946 mg • · · · · · (2,22 mmol, 74% výtěžek) sloučeniny A jako bílé pevné látky.
1H NMR (dg-DMSO) 400 MHz δ 12,4 (s (br), 1H), 7,61 (d, 2H, J =
8,2 Hz), 7,41 (d, 2H, J = 8,2 Hz), 7,15 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 3,98 - 3,91 (m, 1H), 3,45 - 3,41 (m, 2H), 2,42 (s, 3H), 2,21 - 2,20 (m, 1H), 2,05 1,95 (m, 1H), 1,87 - 1,45 (m, 6H), 1,42 (s, 9H), 1,21 - 1,08 (m, 1H) ppm.
B. (2S,4S)-1-{(2S)-2-Amino-3-[1-(4-methvlfenylsulfonyl)piperidin-3-yn-propanovl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K suchému DMF (25 ml) byly přidány sloučenina A (2,13 g, 5,0 mmol), HATU (1,90 g, 5,00 mmol) a N,N-diisopropylethylamin (0,87 ml, 5,0 mmol). Po míchání při teplotě laboratoře 30 min byly přidány (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát (1,1 g, 3,75 mmol) a další N,N-diisopropylethyiamin (0,65 ml, 3,75 mmol). Tento roztok byl ponechán míchat při teplotě laboratoře celkově 12 h a potom byl přidán nasycený roztok hydrogenuhličitanu sodného (110 ml). Směs byla extrahována ethylacetátem (2 x 100 ml) a organické podíly byly promyty nasyceným NaCI (50 ml), sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za získání surové pevné látky. Pevná látka byla čištěna chromatografií (silikagel, hexany/EtOAe 4 :1) za poskytnutí pevné látky, která byla míchána v roztoku dioxan-HCI (4,0M, 20 ml) 2 h a potom byl přidán diethylether (100 ml). Získaná sraženina byla oddělena filtrací a sušena ve vysokém vakuu za získání
1,17 g (2,55 mmol, 51% výtěžek) sloučeniny B jako bílé pevné látky.
1H NMR (de-DMSO) 400 MHz δ 8,50 - 8,43 (s (br), 3H), 7,61 (d, 2H, J = 7,9 Hz), 7,43 (d, 2H, J = 7,9 Hz), 5,51 (d, 1H, J = 51 Hz), 5,07 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 4,07 - 4,01 (br m, 1H), 3,91 - 3,83 (m, 1H), 3,48 3,40 (m, 2H), 3,17 - 3,05 (m, 2H), 2,57 - 2,51 (m, 1H), 2,38 (s, 3H),
1,84 - 1,23 (m, 8H), 1,07 - 1,05 (m, 1H) ppm.
9 ····
- 152 • · 9 9999 999 • · 99 9 9999
999 9 9 99 99999
999 999 999
9999 99 99 9999 99 9
Příklad 44
(2S,4S)-1-í(2S)-2-Amino-3-(1-benzothien-3-vl)propanoyl1-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. (2S,4S)-1-f(2S)-2-Amino-3-(1-benzothien-3-yl)propanovn-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K suchému DMF (25 ml) byly přidány (2S)-3-(1-benzothien-3-yl)-2-[(terc-butoxykarbonyl)amino]propanová (1,92 g, 6,0 mmol), HATU (2,28 g, 6,0 mmol) a Ν,Ν-diisopropylethylamin (1,05 ml, 6,0 mmol). Po míchání při teplotě laboratoře 30 min byly přidány (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonítril-4-methylbenzensulfonát (1,31 g, 4,5 mmol) a další Ν,Ν-diisopropylethylamin (0,78 ml, 4,5 mmol). Tento roztok byl ponechán míchat při teplotě laboratoře 12 h a potom byl přidán nasycený roztok hydrogenuhličitanů sodného (110 ml). Směs byía extrahována ethylacetátem (2 x 100 ml) a organické podíly byly promyty nasyceným NaCI (50 ml), sušeny nad MgSO4 a zakoncentrovány do sucha za získání surové pevné látky. Pevná látka byla čištěna chromatografií (silikagel, hexany/EtOAc 4 : 1) za poskytnutí pevné látky, která byla míchána v roztoku dioxan-HCI (4,0M, 20 ml) 2 h a potom byl přidán diethylether (100 ml). Sraženina byla oddělena filtrací a sušena ve vysokém vakuu za získání 1,0 g (2,84 mmol, 63% výtěžek) sloučeniny A jako bílé pevné látky.
1H NMR (ds-DMSO) 400 MHz δ 8,70 - 8,61 (s (br), 3H), 8,05 ·· ··»·
- 153 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 • · ·· · · 9 · · • · · 9 9 9999 999
9 9 9 9 9 9 9 9
9999 99 99 9999 99 9
8,00 (m, 2H), 7,45 - 7,36 (m, 3H), 5,21 (d, 1H, J = 51 Hz), 5,01 (d, 1H, J= 8,8 Hz), 4,23 -4,20 (m, 1H), 3,71 (ddd, 1H, J = 41,1, 12,3, 3,2 Hz), 3,55 - 3,51 (m, 1H), 3,30 - 3,24 (m, 1H), 2,73 (q, 1H, J = 12,1 Hz), 2,39 - 2,14 (m, 2H) ppm.
Příklad 45
(2S,4S)-1-{(2S)-2-Amino-3-methyl-3-f4-(trifluormethvl)fenvnbutanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
A. 2-Methyl-2-[4-(trifluormethvl)fenyl1propanal
K toluenovému roztoku (90 ml) obsahujícímu 2-methyl-2-[4(trifluormethyl)fenyljpropannitril (viz J. Am. Chem. Soc. 2000, 122, 712, Caron, S. a další, pro přípravu této sloučeniny) (5,54 g, 26,0 mmol) ochlazenému na -78 °C bylo přidáno 26,0 ml 1,5M toluenového roztoku DIBAL (39,0 mmol). Získaný roztok byl míchán při -78 °C
2,5 h, potom byla reakce ukončena vodným roztokem THF (105 ml/20 ml) obsahujícím octan sodný (6,6 g) a kyselinu octovou (6,6 ml). Po 5 min byla chladná lázeň odstraněna a míchání pokračovalo 20 min při teplotě laboratoře, a potom byly přidány celit a Et2O. Po míchání dalších 30 min byl heterogenní roztok zfíltrován přes lože celitu. Celit byl důkladně propláchnut Et2O a potom byla vodná vrstva oddělena. Organické podíly byly promyty H2O, sušeny (MgSO4) a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Zbylý olej byl čištěn chromatografii na koloně (5% EtOAc/hexany) za získání 4,22 g (19,5 mmol, 75% ·· ····
- 154 ♦ · 9 9
9 9 9
9 9 9 9
9 9 9 9
99 9 9 99
9 99 9
9 9 9
9 9 9 9
99 9999
9 9 9
9999 99 9 výtěžek) sloučeniny A jako čirého oleje.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 9,52 (s, 1H), 7,63 (d, 2H, J = 8,2 Hz), 7,39 (d, 2N, J = 8,2 Hz), 1,49 (s, 3H) ppm.
B. 2-Amino-3-methvl-3-[4-(trifluormethyl)fenvnbutannitril
K MeOH roztoku (10 ml) obsahujícímu sloučeninu A (1,87 g,
8,66 mmol) byly přidány 1,2 ml 30% NH4OH, H2O (6 ml) a kyanid draselný (592 mg, 9,09 mmol). K tomuto roztoku byl přidán chlorid amonný (510 mg, 9,53 mmol) při teplotě laboratoře. Po 1 h byl roztok zahříván na 70 °C po dobu 6 h. Po ochlazení byla reakční směs zředěna EtOAc a potom promyta nasyceným roztokem NaHCO3 a H2O. Po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbytek čištěn chromatografií na koloně (EtOAc/hexany (3 ; 2)) za získání 1,52 g (6,27 mmol, 72% výtěžek) sloučeniny B.
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,63 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,55 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 3,80 [t, 1H, J = 7,9 Hz), 1,56 (s, 3H), 1,53 (s, 3H),
1,40 (d (br), 2H, J = 6,9 Hz) ppm.
C. Hydrochlorid kyseliny 2-amino-3-methvl-3-[4-(trifluormethyl)fenyl1-butanové
Do baňky obsahující sloučeninu B (2,96 g, 12,2 mmol) bylo přidáno 10 ml kyseliny octové, a potom 60 ml koncentrované HCI. Roztok byl potom zahříván pod zpětným chladičem přes noc a po ochlazení byla většina rozpouštědla odstraněna ve vakuu. Získaná bílá pevná látka byla smísena s roztokem Et2/hexany (2 : 1) a oddělena vakuovou filtrací. Po evakuování na vysoké vakuum bylo získáno
3,13 g (10,5 mmol, 86% výtěžek) sloučeniny C jako bílé pevné látky.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7,69 - 7,68 (m, 4H), 4,33 (s, 1H),
1,57 (s, 3H), 1,53 (s, 3H) ppm.
•· 99 9 9
- 155 99 99 999
9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 9 9
9999 9999 999
9 9 9 9 9 9 9 9
9999 99 99 9999 99 9
D. Kyselina 2-[(terc-butoxvkarbonvl)aminoj-3-methyl-3-[4-(trifluormethyljfenyllbutanová
K dioxanovému roztoku (30 ml)/H20 (7 ml) obsahujícímu sloučeninu C (3,05 g, 102 mmol) bylo přidáno 12,8 ml 2,0M roztoku NaOH (25,6 mmol), potom di-t-butyldikarbonát (3,13 g, 14,4 mmol) při teplotě laboratoře. Roztok byl míchán přes noc a potom byl vlit do nasyceného roztoku NaHCO3 a promyt Et2O. Vrstva Et2O byla promyta nasyceným roztokem NaHCO3 a potom byly vodné vrstvy spojeny. Po okyselení 1,0M HCI byly organické podíly extrahovány EtOAc (2 x). Po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu za získání
3,58 g (9,92 mmol, 97% výtěžek) sloučeniny D jako bílé pevné látky.
1H NMR (CDCI3) 400 MHz δ 7,57 (d, 2H, J = 8,2 Hz), 7,49 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 4,99 (d (br), 1H, J = 9,2 Hz), 4,63 (d (br), 1H, J =
9,3 Hz), 1,45 (s, 3H), 1,44 (s, 3H), 1,36 (s, 9H) ppm.
E. Terc-butvl(1S)-1-{f(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpyrrolidin-1-vl1karbonyl)-2-methyl-2-{4-(trifluormethvl)fenvljpropylkarbamát
K DMF roztoku (45 ml) obsahujícímu sloučeninu D (2,0 g, 5,54 mmol) byl přidán N,N-diisopropylethylamin (788 mg, 6,09 mmol), potom HATU (2,21 g, 5,82 mmol) při teplotě laboratoře. Získaný roztok byl míchán 30 min, potom byl přidán roztok DMF (27 ml) obsahující (2S,4S)-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril-4-methylbenzensulfonát (1,66 g,
5,82 mmol) a N,N-diisopropylethylamin (752 mg, 5,82 mmol). Po míchání přes noc byl roztok zředěn EtOAc a promyt H2O (3 x), nasyceným roztokem NaHCO3 a 1,0M HCI. Po usušení nad MgSO4 bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbylý tmavý olej byl čištěn chromatografii na koloně (hexany/EtOAc/CH2CI2 (5:4: 1)). Byl získán materiál s nízkým Rf (610 mg, 1,37 mmoí), kterým byl jediný stereoisomer zjištěný 1H NMR a LC plus 335 mg materiálu s vysokým ·· · ··♦· ··· • · ·· · * · · · • · · · · ····«·· ή Cfí ··· ··· · · ·
- IJu - ···· ·· ·· ···· ·· ·
Rf, který obsahoval požadovaný produkt, ale byl kontaminován další sloučeninou. Testováním in vitro se ukázalo, že materiál s nízkým Rf je (S)-diastereomer.
Diasteraomer s nízkým Rf:
1H NMR (CDCb) 400 MHz δ 7,65 - 7,60 (m, 2H), 7,59 - 7,55 (m, 2H), 5,29 (d, 1N, J = 9,9 Hz), 5,06 (dt, 1H, J = 51,1, 3,3 Hz), 4,85 (d, 1H, J = 9,4 Hz), 4,34 (d, 1H, J = 9,9 Hz), 3,55 (ddd, 1H, J = 3,4, 12,1, 36,2 Hz), 2,70 (dd, 1H, J = 12,3, 17,8 Hz), 2,48 (t, 1H, J = 15,4 Hz),
2,15 (m, 1H), 1,53 (s, 3H), 1,51 (s, 3H), 1,40 (s, 9H) ppm.
F. (2S,4S)-1-((2S)-2-Amino-3-methyl-3-f4-(trifluormethyl)fenvn-butanoyl)-4-fluorpvrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K CH2CI2 roztoku (10 ml) obsahujícímu sloučeninu E (643 mg,
1,44 mmol, isomer s nízkým Rf) byla přidána TFA (1,65 g, 14,4 mmol) při teplotě laboratoře. Po 1 h bylo přidáno dalších 5 ekv. TFA a po celkově 2 h bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbylý olej rozpuštěn v 5 ml dioxanu. K roztoku bylo přidáno 10 ml 4,0M dioxanového roztoku HCI. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a potom byl přidán CH2CI2 a Et2O. Postup byl opakován 3 x, dokud se tvořila pevná látka. Pevná látka byla oddělena vakuovou filtrací za získání 406 mg (1,03 mmol, 72% výtěžek) sloučeniny F.
1H NMR (d4-MeOH) 400 MHz δ 7,74 - 7,66 (m, 4H), 5,13 (d (br), 1H, J = 51,3 Hz), 4,97 (d, 1H, J = 9,3 Hz), 4,25 (s, 1H), 3,52 (m, 1H), 2,74 (dd, 1H, J = 22,0, 11,9 Hz), 2,47 - 2,22 (m, 2H), 1,67 (s, 3H), 1,60 (s, 3H) ppm.
Příklad 46
ΦΦ φφφφ
- 157 φ» ·» φφφ • « · φφφφ φφφ φ φφφ · φ · · · φ φφφ φ φ φφ φ φφφφ φφφ φφφ φφφ φφφφ φφ φφ φφφφ φφ φ
Kyselina (3R)-3-amino-4-r(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpvrrolidín-1-yn-2-methyl-4-oxobutan-2-sulfonová
A. Kyselina (4R)-2,2,5,5-tetramethyl-1,3-thiazolidin-4-karboxylová
K suspenzi L-penicilaminu (0,300 g, 2,01 mmol) v methanolu (2 ml) byl přidán aceton (4 ml, 54,5 mmol). Roztok se vyčeřil a byl míchán přibližně 3 hod, po kterých se znovu zakalil. Roztok byl zakoncentrován za poskytnutí 0,377 g sloučeniny A jako bílé pevné látky (99% výtěžek).
1H NMR (de-DMSO) 400 MHz δ 3,74 (s, 1H), 2,48 (m, 2H), 1,54 (m, 6H), 1,43 (s, 3H), 1,18 (s, 3H) ppm.
B. (2S,4S)-4-Fluor-1-{r(4R)-2,2,5,5-tetramethyl-1,3-thiazolidin-4-ylj-karbonyl)-pyrrolidin-2-karbonitril
Roztok sloučeniny A (0256 g, 1,35 mmol), (25,4S)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitriltosylátu (0,387 g, 1,35 mmol), 1-hydroxybenzotriazolhydrátu (0,182 g, 1,35 mmol) a Ν,Ν’-dicykiohexylkarbodiimidu (0,279 g, 1,35 mmol) a N,N’-diisopropylethylaminu (0280 ml,
1,63 mmol) v tetrahydrofuranu (13 ml) byl míchán přibližně 48 hod a potom zakoncentrován. Zbytek byl vložen do ethylacetátu a zfiltrován. Filtrát byl promyt vodným NaHCOs a roztokem soli. Organická vrstva byla sušena nad MgSO4 a zakoncentrována. Surová směs byla čištěna chromatografii na silikagelu (5% MeOH/95% CHCh) za poskytnutí 0,171 g sloučeniny B jako bílé pevné látky (44% výtěžek).
• · φφφφ • φ · φ φφφ • φ · φ φ φ φ φφφ • φ φ · · φφφφ
Φ Φ · · Φ · 99 9 9999
4CQ φφφ φφφ φφφ
- ΊΟΟ “ ···« ·· ·· ♦··· ·· · 1Η NMR (de-DMSO) 400 MHz δ 5,48 (d, J = 50 Hz, 1H), 5,02 (m,
1H), 4,05 - 3,85 (m, 3H), 3,48 (m, 1H), 2,42 (m, 1H), 1,54 (m, 5H),
1,47 (s, 3H), 1,22 (s, 3H) ppm.
C. (2S,4S)-1-í(2R)-2-Amino-3-merkapto-3-methylbutanovl1-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid
K roztoku sloučeniny B (0,143 g, 0,501 mmol) v 50% obj./obj. voda/methanol (20 ml) byla přidána 1,0N HCI (0,550 ml, 0,550 mmol). Roztok byl míchán při přibližně 500 mbar (50 kPa) při přibližně 35 °C přibližně 1 h. Roztok byl zakoncentrován, vložen do tetrahydrofuranu, sušen nad MgSO4 a znovu zakoncentrován, za poskytnutí 0,163 g sloučeniny C jako bělavé pevné látky (100% výtěžek).
1H NMR (de-DMSO) 400 MHz δ 8,61 (s, 1N), 5,54 (d, J = 52 Hz, 1H), 5,05 (d, J = 9 Hz, 1H), 4,28 - 3,89 (m, 4H), 2,47 (m, překrytí DMSO, 1H), 1,74 (m, 3H), 1,43 (m, 6H), 1,33 (s, 3H) ppm.
D. Terc-butyl(1 R)-1-{[(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1-vl1karbonvl)-2-merkapto-2-methylpropylkarbamát
K roztoku sloučeniny C (0,141 g, 0,501 mmol) a N,N-diisopropylethylaminu (0,090 ml, 0,526 mmol) v dichlormethanu (3 ml) byl přidán di(terc-butyl)dikarbonát (0,120 g, 0,551 mmol), potom další N,Ndiisopropylethylamin (0,100 ml, 0,584 mmol). Roztok byl míchán přibližně 2 h a potom byl zakoncentrován. Surový materiál byl čištěn chromatografií na silikagelu (2% MeOH/98% CHCI3) za poskytnutí 0,088 g sloučeniny D jako oleje, který krystalizoval na pevnou bílou látku (51% výtěžek).
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 6,99 (d, J = 9 Hz, 1H), 5,53 (d, J = 51 Hz, 1H), 4,97 (d, J = 7 Hz, 1H), 4,37 - 3,74 (m, 3H), 2,95 (s, 1H),
2,40 (m, 1H), 1,35 (m, 15H) ppm.
·· Φ· φ- · · · · · · • · · · · • φφφφ φ • φ φ · · φ φφφφ φφ «· φφφφ
- 159 '·· ···· ·· · * 9 Φ • · · ·
9 9 9999
9 9 *»
Ε. Kyselina (3R)-3-amino-4-f(2S,4S)-2-kvano-4-fluorpyrrolidin-1-vn-2-methyl-4-oxobutan-2-sulfonová
Κ roztoku sloučeniny D (4,412 g, 12,8 mmol) v methanolu (18 ml) byl přidán 30% vodný peroxid vodíku (5,9 ml). Roztok byl míchán přibližně 30 h, zakoncentrován, lyofilizován a sušen nad P2O5 při přibližně 40 °C po dobu alespoň 12 h. Surová směs byla vložena do roztoku 20% methanol/80% chloroform/kyselina octová a vysrážela se pevná látka. Suspenze byla zfiltrována za poskytnutí 0,607 g sloučeniny E jako růžové pevné látky (16% výtěžek).
1H NMR (d6-DMSO) 400 MHz δ 8,12 (s, 3H), 5,50 (d, J = 50 Hz, 1H), 5,07 (d, J = 9 Hz, 1H), 4,27 - 3,30 (m, 6H), 2,30 (m, překrytí DMSO, 1H), 1,26 (s, 3H), 1,15 (s, 3H) ppm.
Biologické údaje
Materiály
H-Ala-Pro-pNA.HCI byl získán od firmy BACHEM Bioscience lne. (produkt no. L-1115). Byl připraven 500 mM zásobní roztok s dimethylsulfoxidem, který byl skladován při -20 °C. Gly-Pro-AMC byl získán od firmy Enzyme System Products (produkt no. AMC-39) a uchováván při -20 °C ve formě 10 mM zásobního roztoku v dimethylsulfoxidu. Testované sloučeniny byly rozpuštěny na koncentraci 10 mM v dimethylsulfoxidu a takto získaný roztok byl používán jako zásobní roztok pro titrační analýzy DPP-IV. Čištěný lidský DPP-IV byl připraven firmou Athens Research and Technology, lne. Materiál byl izolován z lidských prostasomů použitím metody autorů DeMeester a další, J. Immunol. Methods 189, 99 - 105 (1996).
.. .··· ·· .··. .··. *, .· ·.. ; .· ·: :··:·
-160- .........
Test aktivity DPP-IV
Dvojnásobná sériová ředění testovaných sloučenin ve 100% dimethylsulfoxidu byla prováděna v 96-jamkových polystyrénových destičkách s plochým dnem (Costar, #9017). Pro výpočet procenta inhibice byla jako kontrolní hodnota používána průměrná enzymatická aktivita změřená pro jamky obsahující dimethylsulfoxid, ale neobsahující testovanou sloučeninu. DPP-IV (20 ng/ml) byla smíchána v mikrotitračních destičkách s testovanými sloučeninami, substrátem a testovacím pufrem za získání roztoku s koncentracemi 100 μΜ H-Ala-Pro-pNA.HCI v 25 mM Tris, pH 7,5, 10 mM KCI, 140 mM NaCl. Intaktní peptid obsahuje p-nitrofenylanilid, který hydrolýzou DPP-IV uvolňuje absorbující p-nitrofenylanilin.Absorbance byla monitorována ve 20 min intervalech při vlnové délce 387 nm s použitím odečítacího zařízení pro destičky Molecular Devices SpectraMax 250 absorbency plate reader. Enzymatická aktivita byla určena odhadem nejlepšího lineárního proložení získaných dat. Hodnoty pro enzymatickou aktivitu byly získány přímo z lineárního proložení provedeného softwarem na odečítacím zařízení pro destičky.
Analýza dat
Enzymatická aktivita byla určena odhadem nejlepšího lineárního proložení dat. Úprava dat byla provedena programem Microsoft Excel RoboSage.
Hodnoty IC50 byly zjišťovány následujícím způsobem: enzymatická aktivita byla vynesena proti koncentraci testované sloučeniny, včetně [I] = 0, a hodnota IC50 byla určena proložením údajů použitím rovnice 2 rychlost = Vmax/(1 + ([l]/IC50)) (2) kde • ·
- 161 Vmax je odhad nejlepšího proložení maximální enzymatické aktivity.
Určení hodnot K,: hodnoty Kj byly vypočteny z hodnot IC50 použitím rovnice 3 za předpokladu kompetitivního modelu.
Xř = íC50*[l----] (S + KmÝ (3)
Pro každý příklad byly zdánlivé hodnoty pK, >5,0.
Test aktivity DPP-II
Přípravná destička obsahovala 5,3 μΙ testované sloučeniny ve dvojnásobných sériových ředěních připravených na destičce. Do každé jamky přípravné destičky bylo přidáno 209 μΙ pufru (100 mM octan sodný pH 5,5) s obsahem substrátu (H-Lys-Ala-pNA.HCI; produkt no. L-2085; BACHEM Bioscience, lne.) a obsah destičky byl promíchán. Reakce byla zahájena přenesením 180 μΙ roztoku substrátu/testované sloučeniny do testovací destičky obsahující 20 μΙ enzymu. Konečné koncentrace v testovací destičce byly 100 nM enzymu a 1000 mM substrátu ve 100 mM NaOAc, pH 5,5, 2,5% DMSO v konečném objemu 200 μΙ. Absorbance byla monitorována každých 20 min po dobu 5 hod při 387 nm s použitím odečítacího zařízení pro destičky Molecular Devices SpectraMax 250 absorbance plate reader.
Analýza dat
Enzymatická aktivita byla určena odhadem nejlepšího lineárního proložení dat. Zpracování dat bylo prováděno v programu Microsoft Excel RoboSage.
·· ····
- 162 Určení hodnot IC50 bylo prováděno následujícím způsobem: enzymatická aktivita byla vynesena proti koncentraci testované sloučeniny včetně bodu [I] = 0, a hodnota IC50 byla určena proložením dat rovnicí 2 rychlost = Vmax/(1 + ([l]/IC50)) (2) kde
Vmax je nejlepší odhad proložení maximální enzymatické aktivity.
Určení hodnot K,: hodnoty K, byly vypočteny z hodnot IC50 použitím rovnice 3 za předpokladu kompetitivního modelu.
K;=IC*[}.----] (3) (S + KmÝ 1 }
Některé sloučeniny podle předkládaného vynálezu měly aktivitu pro DPP-II, například hodnoty pK, >6,0, zatímco jiné sloučeniny měly selektivní účinek na DPP-IV diskutovaný výše.
Studie in vivo
Samci myší CD1 shodného věku a hmotnosti byly umístěni jednotlivě při teplotě 22 °C a 50% relativní vlhkosti s 12 h cyklem světlo/tma. Zvířatům byla podávána orální sondou v množství 10 ml/kg vehikulum (0,5% methylcelulóza (HPMC) s 0,1% Tween 80) nebo testovaná sloučenina ve vehikulu s koncentrací 1 mg/kg. Zvířata byla anestetizována isofluoranem a v určených časech (0 až 6 h) byly odebírány vzorky krve. Aktivita DPP-IV v plasmě byla měřena použitím fluorogenního substrátu Gly-Pro-AMC (50 μΜ) podle specifikací výrobce (Enzyme System Products, Livermore CA). Substrát byl
* · · • ···
- 163 smísen s 50 mM Tris, pH 7,8 a 20% plasmy. Vzorky byly inkubovány 20 min při 30 °C a fluorescence byla měřena na přístroji cytofluor spektrofluoremeter s filtry nastavenými na 360 nm excitace a 460 nm emise.
Srovnávací příklady
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mají řadu výhodných vlastností. Aniž by si autoři přáli být omezeni teorií, předpokládá se, že výhodné vlastnosti sloučenin podle předkládaného vynálezu jsou způsobeny neočekávaným prospěšným vlivem dosaženým manipulací s rozložením substituentů u sloučenin vzorce (I). Výsledky srovnávacího testování ukazují několik překvapujících a neočekávaných výhodných vlastností. Srovnávací testy konkrétněji ukazují, že sloučeniny podle předkládaného vynálezu mají:
(i) zvýšenou účinnost, jak je charakterizována inhibici aktivity DPP-IV, měřenou v plasmě; (ii) zvýšenou selektivitu; (iii) prodlouženou dobu účinku; a/nebo (iv) zlepšený bezpečnostní profil.
Srovnávací příklady
Srovnávací příklad 1
Srovnávací příklad 2
Srovnávací příklad 3
ŇH2
β-uhlík
- 164 • · · • ···
Srovnávací příklad 4
Srovnávací příklad 5
Srovnávací příklad 6
Srovnávací experiment I - Účinnost/doba působení
Co se týče inhibice dipeptidylpeptidáz, zvláště DPP-IV, bylo překvapivě zjištěno, že sloučeniny s vysokou afinitou k enzymu (tj. účinné sloučeniny) nemají nutně dobu účinku požadovanou pro dosažení léčebné účinnosti. Trvání účinku, jak se zde popisuje, zahrnuje schopnost sloučeniny zachovat si účinnost, zvláště terapeutickou účinnost, po delší dobu. Sloučenina s výhodnou dobou účinku poskytuje terapeutickou účinnost při podávání jednou denně. Režim s podáváním jednou denně, jak je ve farmacii všeobecně přijímáno, může být výhodný proti režimům s podáváním několikrát denně z důvodů ochoty pacienta spolupracovat a jeho pohodlí. Výhodné sloučeniny by měly tedy mít nejen dostatečnou účinnost, ale měly by také mít požadovanou délku působení.
• · • · · · • ·
- 165 Jak je však odborníkům v oboru známo, neexistuje korelace mezi účinností a délkou působení. Jinými slovy, i když sloučenina má vysokou afinitu pro enzym DPP-IV, tato sloučenina nemusí být nutně vhodnou dobu působení pro možné výhodné použití pro dávkování jedenkrát denně. Následující část ilustruje skutečnost, že není korelace mezi účinností a délkou působení. Následující údaje ilustrují vynález, ale neměly by být interpretovány jako omezující rozsah vynálezu.
Samci krys CD shodného věku a hmotnosti byli umístěni jednotlivě při teplotě 22 °C a 50% relativní vlhkosti s 12 h cyklem světlo/tma. Zvířatům byly orální sondou podávány vehikulum (10 mM kyselina octová) nebo 1 mg/kg testované sloučeniny ve vehikulu. Po 6 h podávání byly krysy anestetizovány isofluoranem a byly jim odebírány vzorky krve ze srdce. Aktivita DPP-IV v séru byla měřena použitím fluorogenního substrátu Gly-Pro-AMC (50 mM) podle specifikace výrobce (Enzyme System Products, Livermore CA). Substrát byl smísen s 50 mM Tris, pH 7,8, v plasmě (20% finální koncentrace obj./obj.) a vzorky byly inkubovány po dobu 5 až 20 min při 30 °C. Aktivita DPP-IV byla určována měřením fluorescence použitím přístroje cytofluor spektrofluoremeter s filtry nastavenými na 360 nm excitace a 460 nm emise. Průměrné hodnoty a standardní odchylky pro každou skupinu (n = 3) byly vypočteny použitím Studentova t-testu a porovnány s krysami, kterým bylo podáno vehikulum, čímž bylo zjištěno procento inhibice, jak je ukázáno v tabulce I.
- 166 ·· ·
Tabulka I
IC50 (nM) lidská DPP-IV Procento inhibice DPP-IV v čase 6 h u krys
Srovnávací příklad 1 1,3 32 ± 3
Srovnávací příklad 2 3 32 ± 3
Srovnávací příklad 4 5,6 2,8 ± 0,1
Srovnávací příklad 5 3 71 ± 13
Příklad 2 22 68 ± 4
Příklad 9 9 64 ± 12
Jak je z tabulky zřejmé, sloučeniny ze srovnávacích příkladů 1, 2 a 4 mají vysokou účinnost, přičemž každá sloučenina má hodnotu IC50 <5,6 nM. Sloučeniny ilustrující předkládaný vynález, příklad 2 a příklad 9, mají odpovídající účinnost, tedy hodnoty IC50 22 a 72. Když byly srovnávací příklady 1, 2 a 4 testovány na délku působení, ve všech případech byla zjištěna nedostatečná délka působení. I když mají sloučeniny podle předkládaného vynálezu nižší účinnost, jejich délka působení je výhodná pro terapeutický profil jako celek.
Srovnávací příklad 5 byl zařazen, aby bylo možno dále ukázat, že není možno předpovídat vztah mezi účinností a délkou působení. Srovnávací příklad 5 konkrétněji ilustruje jednu sloučeninu, která má jak vysokou vazebnou afinitu, tak i délku působení. Vztah účinnosti a délky působení tedy nemůže být charakterizován přísně jako bud’ paralelní nebo inverzní vztah. Tento vztah spíše nelze předpovědět. Nedostatečná korelace mezi účinností a délkou působení způsobuje, že nelze předvídat tyto parametry u inhibitorů dipeptidylpeptidáz, konkrétně DPP-IV. Tento je dosud nebyl pozorován. Jak je ukázáno výše, samostatná data týkající se vazby mohou nebo nemusí být dostatečná pro zjištění terapeutické použitelnosti těchto sloučenin. Navíc k jiným zde diskutovaným vlastnostem mají sloučeniny podle • ·
- 167 předkládaného vynálezu v požadované míře jak účinnost, tak i dobu působení.
Srovnávací experiment II β-substituce a cyklizace
Jak se zde popisuje, sloučeniny podle předkládaného vynálezu mají alespoň dvě identické β-substituce, tedy skupiny R1 a R2 jsou stejné. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou tedy di-βsubstituované, jak je ukázáno na příkladech 1, popř. 10:
β-uhlík (příklad 1) β-uhlík (příklad 10)
Jestliže se tedy jako příklad použije sloučenina z příkladu 10, je zde popsáno jedno výhodné provedení, kde skupiny R1 a R2 jsou vždy alkyl, výhodněji C1-C6 alkyl, výhodněji methyl. Další výhodné provedení je ilustrováno příkladem 1, totiž sloučeninou, kde R1 a R2 jsou vždy aryl, výhodněji fenyl, a jak je ukázáno v příkladu 2, výhodněji fenyl substituovaný atomem halogenu, s výhodou fluoru. Di-βsubstituované sloučeniny, jako jsou sloučeniny podle předkládaného vynálezu, obecně nemají sklon k cyklizaci s nitrilovou účinnou skupinou za vytvoření cyklického amidinu, a jsou proto stabilní.
Na druhé straně, ηΊοηο-β-substituované sloučeniny, například sloučeniny ze srovnávacích příkladů 3 a 4 uvedených výše, ve kterých β-uhlík nemá dva identické substituenty, mají sklon k cyklizaci, a proto • ·
- 168 • · · · · · mají relativně krátké poločasy stability měřené jako tv2.
Zvýšenou selektivitu také obecně mají sloučeniny s geminálním uspořádáním substituce na β-uhlíku („gem-substitution pattern“).
Studie stability sloučenin DPP-IV
Při typickém uspořádání se 0,2 - 0,5 mg sloučeniny rozpustí v 1 ml fyziologického roztoku s fosfátovým pufrem (PBS) v nádobce na vzorky pro HPLC a umístí se do autosampleru s termostatickým řízením teploty na 37 °C. Získá se chromatogram HPLC v počátečním čase a dále se získají chromatogramy HPLC v časech 24, 48, 72 atd. hodin.
Použitá metoda HPLC
Kolona: Phenomenex Luna C18(2), 3μ, 100 x 4,6 mm, termostatována na 40 °C
Mobilní fáze A: 95 : 5 : 0,2% voda : acetonitril : trifluoroctová kyselina Mobilní fáze B: 5 : 95 : 0,2% voda : acetonitril : trifluoroctová kyselina
Průtok: 1 ml/min
Gradient: 0 - 100 % B v průběhu 15 min
Vlnová délka UV detekce: 215 nm
Plocha pod vrcholem léčivé látky se porovná s počáteční plochou každého chromatogramu a výsledky se vynesou jako procenta zbývající látky vzhledem k počátečnímu času (t0).
Porovnání poločasů (ti/2) cyklizační/degradační reakce u sloučenin ukazuje zvýšenou stabilitu pro di-p-substituované sloučeniny, jako jsou sloučeniny z příkladů 2 a 9. Zvýšený poločas t-i/2 je přímo úměrný zvýšené stabilitě sloučeniny.
«· ···· • ·
- 169 Tabulka 2
Sloučenina t1/2 při 37 °C
Příklad 9 1733 h
Příklad 2 266 h
Srovnávací příklad 4 33,5 h
Srovnávací příklad 3 23 h (vypočteno)* 47 h při 23 °C
*Pozn.: Pro srovnávací příklad 3 nebylo použito výše popsané nastavení teploty autosampleru, ale autosampler byl ponechán při laboratorní teplotě. Typicky způsobí zvýšení o 10 °C zdvojnásobení rychlosti reakce, takže dojde ke dvojnásobnému snížení ti/2. Jak bude odborníkům v oboru zřejmé, touto úvahou vypočtený t-i/2 pro srovnávací příklad 3 by byl 1/2 (nebo méně) hodnoty změřené při teplotě laboratoře (23 °C).
Navíc k účinnosti a délce působení mají tedy sloučeniny podle předkládaného vynálezu také požadovanou stabilitu.
Srovnávací experiment lil - Bezpečnostní profil
Pro splnění zákonných požadavků na bezpečnost se běžně používá jako druh odlišný od hlodavce pes. Pro zjištění bezpečnosti sloučenin podle předkládaného vynálezu byl použit pes bígl z důvodů obecných znalostí patologických stavů a reakcí na širokou řadu léčiv u tohoto kmene. Psi (Marshall Farms lne., North Rose, NY, USA) stáří od 9 do 12 měsíců (5 až 12 kg) dostávali orální sondou 10 ml/kg/den vehikula (10 mM kyselina octová, pH 3,3) testované sloučeniny ve vehikulu. Po každé dávce následoval výplach přibližně 10 ml vody, jednou denně, 24 až 48 h mezi každou následující dávkou. Jestliže nebyla pozorována omezující gastrointestinální toxicita, dávka byla
- 170 ·· ···· ·· · • · · • · · · • · ···· • · · ·· * trojnásobně zvýšena, ne dříve než přibližně 24 h po předcházející dávce. Omezující gastrointestinální toxicita zahrnoval průjem, řídkou nebo mukózní stolici, krev ve stolici a odlupování střevního epitelu. Klinická pozorování byla prováděna alespoň třikrát denně v průběhu ošetřování (jednou před podáním dávky, přibližně 1 h po podání a jednou v souvislosti s viabilitou pm). Aktivita DPP-IV v séru byla měřena pomocí fluorogenního substrátu Gly-Pro-AMC (50 mM) podle specifikací výrobce (Enzyme System Products, Livermore CA). Substrát byl smísen s 50 mM Tris, pH 7,8, v séru (20% konečná koncentrace obj./obj.) a vzorky byly inkubovány po dobu 5 až 20 min při 30 °C. Aktivita DPP-IV byla zjišťována měřením fluorescence použitím přístroje cytofluor spectrofluoremeter s filtry nastavenými na 360 nm excitaci a 460 nm emisi.
Sloučenina ilustrovaná výše jako srovnávací příklad 5 obsahuje relativně malou část P2 při zjištění pomocí molekulové hmotnosti. Popisovanou studií se zvyšováním dávky byly tedy testovány sloučeniny ze srovnávacího příkladu 5 a sloučeniny podle předkládaného vynálezu, které se zde popisují jako sloučeniny s velkou částí P2, tedy sloučeniny z příkladů 2 a 9.
Na základě studií se zvyšováním dávky u psů bylo zjištěno, že 0,3 mg/kg sloučeniny ze srovnávacího příkladu 5 způsobuje řídkou/mukoidní stolici se stopami krve, zatímco 1 mg/kg sloučeniny podle předkládaného vynálezu z příkladu 9 nezpůsobil žádné vedlejší nepříznivé účinky. Po zvýšení dávky na 3 mg/kg však sloučenina z příkladu 9 způsobila řídkou/mukoidní stolici se stopami krve.
Dvanáct hodin po orálním podání 0,2 mg/kg sloučeniny z příkladu 5 byla dosažená inhibice DPP-IV 2 %. Překvapivě bylo zjištěno, že 0,2 mg/kg sloučeniny z příkladu 9 inhibovalo DPP-IV o 76 %, což ukazuje, že sloučenina z příkladu 9 má významný inhibiční účinek na aktivitu DPP-IV v séru.
U dalších sloučenin podle předkládaného vynálezu nemělo
- 171 ·· 444· • 4 • 4 ·
4444 podobně 10 mg/kg sloučeniny z příkladu 2 žádné nepříznivé účinky z hlediska gastrointestinální toxicity, přičemž 0,5 mg/kg sloučeniny z příkladu 2 inhibovalo DPP-IV po 12 hodinách po orálním podávání o 45 %.
Na základě popsaných studií se zvyšováním dávky u psů jsou výhodné sloučeniny podle předkládaného vynálezu ilustrované sloučeninami z příkladů 2 a 9, které mají část P2 s větší molekulovou hmotností.
Srovnávací experiment IV - Fluorované sloučeniny proti nefluorovanym
Při testování sloučenin podle předkládaného vynálezu in vivo v časových intervalech od 0 do 10 h byla ukázána u fluorovaných sloučenin podle předkládaného vynálezu významně zvýšená inhibice DPP-IV ve srovnání s jejich nefluorovanými protějšky. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu tedy mají neočekávanou účinnost, která dosud nebyla předpokládána. Například sloučenina z příkladu 2 a její nefluorovaná verze, sloučenina ze srovnávacího příkladu 6, byly porovnávány pro zjištění prospěšného vlivu substituentu 4-fluor. Překvapivě bylo zjištěno, že substituent 4-fluor dramaticky prodlužuje trvání komplexu enzym-inhibitor a poskytuje také významné zvýšení účinnosti. Tyto výhodné vlastnosti dosud nebyly zjištěny.
Tabulka 3
IC5o (nM) lidská DPP-IV % inhibice DPP-IV v 6 h u krys
Příklad 2 22 68 ± 4
Srovnávací příklad 6 151 15 ± 1
Všechny prováděné testy byly prováděny v souladu s principy
- 172 ·· ···· zacházejí s laboratorními zvířaty (publikace NIH No. 85 - 23, revize 1985) a politikou používání zvířat firmy GlaxoSmithKline.
Ačkoli byla podrobně ilustrována a popsána některá konkrétní provedení předkládaného vynálezu, vynález není na tato provedení omezen. Uvedený popis výhodných provedení se poskytuje pouze jako příklad a neměl by být považován za jakkoli omezující vynález. Odborníkům v oboru budou zřejmé různé modifikace, přičemž všechny modifikace, které se neodchylují od myšlenky vynálezu, jsou považovány za zahrnuté do rámce přiložených nároků.

Claims (51)

1. Sloučenina vzorce (I):
X včetně jejích solí, solvátů a farmaceuticky funkčních derivátů, ve které
X je F nebo H;
R1 a R2 jsou každá buď (i) H;
(ii) alkyl;
(iii) popřípadě substituovaný aryl nebo heteroaryl; nebo (iv) jsou spojeny za vytvoření 3 až 14-členného kruhového systému, popřípadě obsahujícího jeden nebo více heteroatomů, a popřípadě obsahujícího jeden nebo více stupňů nenasycenosti;
jestliže R1 a R2 mají význam (iii), potom R3 je H nebo alkyl; jestliže R1 a R2 mají význam (i), (ii) nebo (iv), potom R3 je ·« ···· kde n je O až 5; m je 0 až 12;
Y je S(O)P, O, alkylen, alkenylen, alkinylen nebo vazba; p je 0 až 2;
R4 je R5, jestliže Y je S, O, alkylen, alkenylen, alkinylen, nebo vazba, kde R5 je popřípadě substituovaný alkyl, alkenyl, alkinyl, aryl, cykloalkyl, heteroaryl nebo heterocyklyl;
R4 je R6, jestliže Y je S(O) nebo S(O)2, kde R6 je popřípadě substituovaný alkyl, aryl, cykloalkyl, heteroaryl, amino, alkylamino, arylamino, heteroarylamino, cykloalkylamino nebo hydroxy.
2. Sloučenina podle nároku 1, kde případný substituent je jedna nebo více skupin alkyl, alkoxy, aryloxy, halogen, haloalkyl, kyano, alkylsulfonyl nebo aryl.
3. Sloučenina podle nároku 2, kde případný substituent je jedna nebo více skupin Ci-C6 alkyl, Ci-C6 alkoxy, fenoxy, benzoxy, fluor, chlor, C-i-Cg haloalkyl, kyano, C1-C6 alkylsulfonyl, fenyl nebo benzyl.
4. Sloučenina podle nároku 1, kde R1 a R2 jsou každá aryl, a R3 je H.
5. Sloučenina podle nároku 4, kde každá ze skupin aryl je fenyl.
6. Sloučenina podle nároku 5, kde každá ze skupin fenyl je substituovaná atomem halogenu.
- 175 ·· ···>
7. Sloučenina podle nároku 6, kde každý z atomů halogenu je fluor.
8. Sloučenina podle nároku 1, kde R1 a R2 jsou každá alkyl a R3 je
9. Sloučenina podle nároku 8, kde každá skupina alkyl je C1-C6 alkyl.
10. Sloučenina podle nároku 9, kde každá skupina alkyl je methyl.
11. Sloučenina podle nároku 10, kde n je 0, m je 1 a Y je S(O)P.
12. Sloučenina podle nároku 11, kde p je 0, R4 je R5 a R5 je popřípadě substituovaný aryl.
13. Sloučenina podle nároku 12, kde R5 je fenyl substituovaný skupinou alkoxy.
14. Sloučenina podle nároku 13, kde skupina alkoxy je methoxy.
- 176 -
15. Sloučenina podle nároku 11, kde p je 1 nebo 2, R4 je R6, a R5 je popřípadě substituovaný aryl.
16. Sloučenina podle nároku 15, kde R6 je fenyl substituovaný skupinou alkoxy.
17. Sloučenina podle nároku 16, kde skupina alkoxy je methoxy.
18. Sloučenina podle nároku 17, kde pje 1.
19. Sloučenina podle nároku 17, kde p je 2.
20. Sloučenina podle nároku 1, kde zobrazená skupina NH2 je v konfiguraci cis vzhledem k zobrazené nitrilové účinné skupině.
21. Sloučenina podle nároku 1, zobrazená skupina NH2 je v konfiguraci trans vzhledem k zobrazené nitrilové účinné skupině.
22. Sloučenina podle nároku 1, kde A je H.
23. Sloučenina podle nároku 1, kde zobrazená skupina F je v konfiguraci cis vzhledem k zobrazené nitrilové skupině.
24. Sloučenina vzorce (I):
• ·
- 177 • ·· · · · · · ··· · · ·· ····· • · · · · · · včetně solí, solvátů a farmaceuticky funkčních derivátů, kde X je F nebo H;
R1 a R2 jsou každá popřípadě substituovaný aryl nebo heteroaryl; a R3 je H nebo alkyl.
25. Sloučenina vzorce (I):
včetně solí, solvátů a farmaceuticky funkčních derivátů, kde X je F nebo H;
R1 a R2 jsou každá buď (iii) alkyl; nebo (iv) jsou spojeny za vytvoření 3 až 14-členného kruhového systému popřípadě obsahujícího jeden nebo více heteroatomů, a popřípadě obsahujícího jeden nebo více stupňů nenasycenosti;
R3 je
- 178 • · • · · • · · ·
R4 kde n je O až 5;
m je O až 12;
Y je S(O)P, O, alkylen, alkenylen nebo alkinylen;
p je 0 až 2;
R4 je R5, jestliže Y je S, O, alkylen, alkenylen nebo alkinylen, kde R5 je popřípadě substituovaný alkyl, alkenyl, alkinyl, aryl, cykloalkyl, heteroaryl nebo heterocyklyl;
R4 je R6, jestliže Y je S(O) nebo S(O)2, kde R6 je popřípadě substituovaný alkyl, aryl, cykloalkyl, heteroaryl, amino, alkylamino, arylamino, heteroarylamino, cykloalkylamino nebo hydroxy.
26. Sloučenina podle nároku 25, kde p je 1 nebo 2.
27. Sloučenina podle nároku 26, kde p je 2.
28. Sloučenina podle nároku 25, kde R1 a R2 jsou každá alkyl.
29. Sloučenina podle nároku 28, kde R1 a R2 jsou každá C1-C6 alkyl.
30. Sloučenina podle nároku 29, kde R1 a R2 jsou každá methyl.
• ·
- 179 •••ft ·· ··
31. Sloučenina zvolená z:
32. Sloučenina zvolená z:
F
33. Sloučenina zvolená ze skupiny:
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-3,3-difenylpropanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-3,5-bis(4-fluorfenyl)propanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-5-(4-fluorfenyl)-3,3-dimethylpentanoyl]-4-fluor-2-pyrrolidinkarbonitril hydrochlorid;
(2S,4R)-1-[(2S)-2-amino-4-(4-fluorfenyl)-3,3-dimethylbutanoyl]-4-fiuorpyrrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
- 180 (25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-[(4-methoxybenzyl)thio]-3-methylbutanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(3-fenylpropyl)thio]-butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(2-fenylethyl)thio]butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitrii hydrochlorid;
(25.45) -1-((2R)-2-amino-3-{[3-(4-fluorfenyl)propyl]thio}-3-methylbutanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;.
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-[(4-methoxybenzyl)sulfonyl]-3-methylbutanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-[(4-methoxybenzyl)sulfinyl]-3-methylbutanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-((2R)-2-amino-3-methyl-3-{[4-(trifluormethyl)benzyl]-thio}-butanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-2-(1-vinylcyklopentyl)ethanoyl]-4-fluorpyrrolidín-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-5-(4-methoxyfenyl)-3,3-dimethylpentanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonítril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(3-fenylpropyl)sulfonyl]-butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(4-methylbenzyi)sulfonyl]-butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril;
(25.45) -1-((2R)-2-amino-3-{[4-(benzyloxy)benzyl]sulfonyl}-3-methylbutanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-[(4-kyanobenzyl)sulfonyl]-3-methylbutanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril;
(25.45) -1-((2R)-2-amino-3-methyl-3-{[4-(methylsulfonyl)benzyl]-sulfonyl}butanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril;
• ·
- 181 (25.45) -1-{(2S)-2-amino-2-[1-(4-fluorbenzyl)cyklopentyl]-ethanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-((2S)-2-amino-2-{1-[4-(trifluormethyl)fenyl}cyklopentyl}-ethanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2S)-2-amino-2-[1-(4-fluorbenzyl)cyklopropyl]-ethanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-[(2R)-2-amino-3-(benzylsulfonyl)-3-methylbutanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-[(3-methoxybenzyl)sulfonyl]-3-methylbutanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-[(1,1’-bifenyl-4-ylmethyl)sulfonyl]-3-methylbutanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-[(2-methoxybenzyl)sulfonyl]-3-methylbutanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(pyridin-3-ylmethyl)thio]-butanoy l}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(pyridin-2-ylmethyl)thio]-butanoyl}-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(pyridin-4-ylmethyl)thio]-butanoyi}-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1’{(2R)-2-amino-3-[(4-fluorbenzyl)sulfonyl]-3-methyibutanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(3-fenoxybenzyl)sulfonyl]-butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(3-fenoxybenzyl)thio]-butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
·· φφφφ • · φ · · φ ·· · · · ·
-182- ·..· :
(25.45) -1 -((2R)-2-amino-3-{[(5-chlor-1,1 -dioxido-1 -benzothien-3-yl)-methyl]sulfonyl}-3-methylbutanoyl)-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-[(2,1,3-benzoxadiazol-5-ylmethyl)-thio]-3-methylbutanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2R)-2-amino-3-methyl-3-[(pyridin-4-ylmethyl)-sulfonyl]-butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-3-pyridin-4-ylpropanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-3-pyridin-3-ylpropanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-3-piperidin-4-ylpropanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril dihydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-3-piperidin-3-ylpropanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril dihydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-3-piperidin-2-ylpropanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril dihydrochlorid;
(25.45) -1-{(2S)-2-amino-3-[1-(isopropylsulfonyl)piperidin-4-yl]-propanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2S)-2-amino-3-[1-(4-methylfenylsulfonyl)piperidin-4-yl]-propanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2S)-2-amino-3-[1-(isopropylsulfonyl)piperidin-3-yl]-propanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-{(2S)-2-amino-3-[1-(4-methylfenylsulfonyl)piperidin-3-yl]-propanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid;
(25.45) -1-[(2S)-2-amino-3-(1-benzothien-3-yl)propanoyl]-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitrii hydrochlorid;
φφ φφφφ • φ
- 183 φφ • · · φ φφφ • · · φφφφ • · φφφφ φφφ • φ φ φφφ ·· φφφφ φφ φ (2S,4S)-1-{(2S)-2-amino-3-methyl-3-[4-(trifluormethyl)fenylj-butanoyl}-4-fluorpyrrolidin-2-karbonitril hydrochlorid; a (3R)-3-amino-4-[(2S,4S)-2-kyano-4-fluorpyrroIidin-1-yl]-2-methyl-4-oxobutan-2-sulfonová kyselina.
34. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, ž e obsahuje sloučeninu podle nároků 1 až 33.
35. Farmaceutický prostředek podle nároku 34, vyznačující se tím, že dále obsahuje farmaceuticky přijatelný nosič.
36. Způsob inhibice proteázy štěpící za prolinem/alaninem, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání sloučeniny podle nároků 1 až 33.
37. Způsob podle nároku 36, vyznačující se tím, ž e proteáza štěpící za prolinem/alaninem je serinová proteáza.
38. Způsob podle nároku 37, vyznačující se tím, ž e serinová proteáza je dipeptidylpeptidáza.
39. Způsob podle nároku 38, vyznačující že dipeptidylpeptidáza je DPP-II.
se tím,
40. Způsob podle nároku 38, vyznačující se tím, ž e dipeptidylpeptidáza je DPP-IV.
·· ···· • · · · · · · ··· ·· ·· · · · · · • ·*· · · ·· · · · · d o/ ····♦♦ ···
- Ί o4 - ···· ·· ·· ··«· ·« ·
41. Způsob léčení nebo prevence metabolických poruch, gastrointestinálních poruch, virových onemocnění, zánětlivých onemocnění, diabetů, obezity, hyperlipidemie, poruch kůže nebo slizničních membrán, lupénky, onemocnění střev, zácpy, autoimunitních onemocnění, encefalomyelitidy, onemocnění podmíněných komplementem, glomerulonefritidy, lipodystrofie, poškození tkání, psychosomatických, depresivních a neuropsychiatrických poruch, infekce HIV, alergií, zánětu, artritidy, odmítnutí transplantátu, vysokého krevního tlaku, městnavého selhání srdce, tumorů a potratů indukovaných stresem, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání sloučeniny podle nároků 1 až 33.
42. Způsob podle nároku 41, vyznačující se tím, ž e sloučenina podle nároků 1 až 33 se podává pro léčení nebo prevenci diabetů.
43. Použití sloučeniny podle nároků 1 až 33 při výrobě farmaceutického prostředku pro inhibici proteázy štěpící za prolinem/alaninem.
44. Použití podle nároku 43, kde proteáza štěpící za prolinem/alaninem je serinová proteáza.
45. Použití podle nároku 44, kde serinová proteáza je dipeptidylpeptidáza.
46. Použití podle nároku 45, kde dipeptidylpeptidáza je DPP-II.
·· ·«··
- 185 • 9 9 9
9 9 9 9
9 9 9 9
9 99 9 9 • · · · • · · · 9 • 9 9999
9 9 9 • ·· ·
47. Použití podle nároku 45, kde dipeptidylpeptidáza je DPP-IV.
48. Použití sloučeniny podle nároků 1 až 33 při výrobě farmaceutického prostředku pro léčení nebo prevenci metabolických poruch, gastrointestinálních poruch, virových onemocnění, zánětlivých onemocnění, diabetů, obezity, hyperlipidemie, poruch kůže nebo slizničních membrán, lupénky, onemocnění střev, zácpy, autoimunitních onemocnění, encefalomyelitidy, onemocnění podmíněných komplementem, glomerulonefritidy, lipodystrofie, poškození tkání, psychosomatických, depresivních a neuropsychiatrických poruch, infekce HIV, alergií, zánětu, artritidy, odmítnutí transplantátu, vysokého krevního tlaku, městnavého selhání srdce, tumorů a potratů indukovaných stresem.
49. Sloučenina podle nároků 1 až 33 pro použití jako účinná léčivá látka.
50. Sloučenina podle nároků 1 až 33 pro použití při výrobě farmaceutického prostředku pro inhibici serinové proteázy.
51. Sloučenina podle nároků 1 až 33 pro použití pro použití při výrobě farmaceutického prostředku pro léčení nebo prevenci metabolických poruch, gastrointestinálních poruch, virových onemocnění, zánětlivých onemocnění, diabetů, obezity, hyperlipidemie, poruch kůže nebo slizničních membrán, lupénky, onemocnění střev, zácpy, autoimunitních onemocnění, encefalomyelitidy, onemocnění podmíněných komplementem, glomerulonefritidy, lipodystrofie, poškození ·· ····
- 186 • · * ···· ·· ·· ·♦ • · · · • · · • · · · • · · ·· ···· tkání, psychosomatických, depresivních a neuropsychiatrických poruch, infekce HIV, alergií, zánětu, artritidy, odmítnutí transplantátu, vysokého krevního tlaku, městnavého selhání srdce, tumorů a potratů indukovaných stresem.
CZ20033521A 2001-06-27 2002-06-26 Fluoropyrrolidines as dipeptidyl peptidase inhibitors CZ20033521A3 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US30133301P 2001-06-27 2001-06-27
US37601502P 2002-04-26 2002-04-26

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ20033521A3 true CZ20033521A3 (en) 2004-05-12

Family

ID=26972302

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20033521A CZ20033521A3 (en) 2001-06-27 2002-06-26 Fluoropyrrolidines as dipeptidyl peptidase inhibitors

Country Status (20)

Country Link
US (1) US7132443B2 (cs)
EP (2) EP1406873B1 (cs)
JP (3) JP3909056B2 (cs)
KR (1) KR20040015298A (cs)
CN (3) CN1723196A (cs)
AT (2) ATE374181T1 (cs)
AU (1) AU2002322344C1 (cs)
BR (1) BR0210644A (cs)
CA (1) CA2450722A1 (cs)
CO (1) CO5600998A2 (cs)
CZ (1) CZ20033521A3 (cs)
DE (2) DE60235212D1 (cs)
ES (2) ES2296979T3 (cs)
HU (1) HUP0400321A2 (cs)
IL (1) IL158923A0 (cs)
MX (1) MXPA03011907A (cs)
NO (1) NO20035603D0 (cs)
NZ (1) NZ529973A (cs)
PL (1) PL367527A1 (cs)
WO (1) WO2003002531A2 (cs)

Families Citing this family (193)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0010188D0 (en) * 2000-04-26 2000-06-14 Ferring Bv Inhibitors of dipeptidyl peptidase IV
TWI243162B (en) * 2000-11-10 2005-11-11 Taisho Pharmaceutical Co Ltd Cyanopyrrolidine derivatives
ATE395912T1 (de) 2001-03-27 2008-06-15 Merck & Co Inc Dipeptidylpeptidase-hemmer für die behandlung oder prävention von diabetes
HUP0200849A2 (hu) * 2002-03-06 2004-08-30 Sanofi-Synthelabo N-aminoacetil-2-ciano-pirrolidin-származékok, e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények és eljárás előállításukra
AU2003235913A1 (en) * 2002-05-09 2003-11-11 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. Cyanopyrrolidine derivatives
US7105526B2 (en) 2002-06-28 2006-09-12 Banyu Pharmaceuticals Co., Ltd. Benzimidazole derivatives
US7407955B2 (en) 2002-08-21 2008-08-05 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co., Kg 8-[3-amino-piperidin-1-yl]-xanthines, the preparation thereof and their use as pharmaceutical compositions
US7772188B2 (en) 2003-01-28 2010-08-10 Ironwood Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for the treatment of gastrointestinal disorders
US7550590B2 (en) 2003-03-25 2009-06-23 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
WO2004092128A1 (en) * 2003-04-10 2004-10-28 Smithkline Beecham Corporation Anhydrous crystalline forms of (2s, 4s)-1-{(2r)-2-amino-3-‘4-methoxybenzyl)sulfonyl!-3-methylbutanoyl}-4-fluoropyrrolindine-2-carbonitrile
JP5690463B2 (ja) 2003-05-05 2015-03-25 プロビオドルグ エージー グルタミニル、及びグルタミン酸シクラーゼのエフェクターの使用
JP4806628B2 (ja) 2003-05-05 2011-11-02 プロビオドルグ エージー グルタミニルシクラーゼ阻害剤
KR20110059664A (ko) 2003-05-05 2011-06-02 프로비오드룩 아게 글루타미닐 및 글루타메이트 사이클라제의 이펙터의 용도
WO2004103993A1 (en) 2003-05-14 2004-12-02 Syrrx, Inc. Dipeptidyl peptidase inhibitors
AU2004259741A1 (en) 2003-07-21 2005-02-03 Smithkline Beecham Corporation (2S,4S)-4-fluoro-1-[4-fluoro-beta-(4-fluorophenyl)-L-phenylalanyl]-2-pyrrolidinecarbonitrile p-toluenesulfonic acid salt and anhydrous crystalline forms thereof
US6995183B2 (en) 2003-08-01 2006-02-07 Bristol Myers Squibb Company Adamantylglycine-based inhibitors of dipeptidyl peptidase IV and methods
US7678909B1 (en) 2003-08-13 2010-03-16 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
US7169926B1 (en) 2003-08-13 2007-01-30 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
KR20060041309A (ko) 2003-08-13 2006-05-11 다케다 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 ４-피리미돈 유도체 및 펩티딜 펩티다제 저해제로서의 그의용도
HU227684B1 (en) * 2003-08-29 2011-11-28 Sanofi Aventis Adamantane and azabicyclo-octane and nonane derivatives and their use as dpp-iv inhibitors
US7790734B2 (en) 2003-09-08 2010-09-07 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
AU2004274309B2 (en) 2003-09-22 2010-04-08 Msd K.K. Novel piperidine derivative
BRPI0415409A (pt) 2003-10-15 2006-12-05 Probiodrug Ag uso de efetuadores de ciclases de glutaminila e glutamato
EP2338490A3 (en) 2003-11-03 2012-06-06 Probiodrug AG Combinations useful for the treatment of neuronal disorders
KR20120008093A (ko) 2003-11-17 2012-01-25 노파르티스 아게 디펩티딜 펩티다제 ⅳ 억제제의 용도
US7504423B2 (en) * 2003-12-11 2009-03-17 Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation α-amino acid derivatives and use thereof as medicines
WO2005058849A1 (en) * 2003-12-15 2005-06-30 Glenmark Pharmaceuticals Ltd. New dipeptidyl peptidase in inhibitors; process for their preparation and compositions containing them
DK1715893T3 (da) 2004-01-20 2009-11-09 Novartis Pharma Ag Direkte kompressionsformulering og fremgangsmåde
JP2005213165A (ja) * 2004-01-28 2005-08-11 Mitsui Chemicals Inc フルオロプロリン類の製造方法
US7304086B2 (en) 2004-02-05 2007-12-04 Probiodrug Ag Inhibitors of glutaminyl cyclase
PL1712547T3 (pl) * 2004-02-05 2012-04-30 Kyorin Seiyaku Kk Pochodna bicykloestrowa
US7501426B2 (en) 2004-02-18 2009-03-10 Boehringer Ingelheim International Gmbh 8-[3-amino-piperidin-1-yl]-xanthines, their preparation and their use as pharmaceutical compositions
WO2005077900A1 (ja) * 2004-02-18 2005-08-25 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. ビシクロアミド誘導体
CA2557275C (en) * 2004-02-27 2012-06-05 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. Bicyclo derivative
US7732446B1 (en) 2004-03-11 2010-06-08 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
CN102127057A (zh) 2004-03-15 2011-07-20 武田药品工业株式会社 二肽基肽酶抑制剂
AU2005230864A1 (en) 2004-03-29 2005-10-20 Merck Sharp & Dohme Corp. Diaryltriazoles as inhibitors of 11-beta-hydroxysteroid dehydrogenase-1
US20080125403A1 (en) 2004-04-02 2008-05-29 Merck & Co., Inc. Method of Treating Men with Metabolic and Anthropometric Disorders
EP1586559A1 (en) * 2004-04-13 2005-10-19 Cephalon, Inc. Biaryl-methanethio-, -sulphinyl- and sulphonyl derivatives
EP1589016A1 (en) * 2004-04-13 2005-10-26 Cephalon France Thio-substituted tricyclic and bicyclic aromatic methanesulfinyl derivatives
US7449481B2 (en) * 2004-04-13 2008-11-11 Cephalon, Inc. Thio-substituted biaryl-methanesulfinyl derivatives
US7297817B2 (en) * 2004-04-13 2007-11-20 Cephalon France Thio-substituted arylmethanesulfinyl derivatives
US7119214B2 (en) 2004-04-13 2006-10-10 Cephalon France Thio-substituted tricyclic and bicyclic aromatic methanesulfinyl derivatives
KR100869616B1 (ko) 2004-05-12 2008-11-21 화이자 프로덕츠 인코포레이티드 프롤린 유도체 및 그의 다이펩티딜 펩티다제－ｉｖ저해제로서의 용도
JP2008501714A (ja) 2004-06-04 2008-01-24 武田薬品工業株式会社 ジペプチジルペプチダーゼインヒビター
WO2006019965A2 (en) 2004-07-16 2006-02-23 Takeda San Diego, Inc. Dipeptidyl peptidase inhibitors
ATE553077T1 (de) * 2004-07-23 2012-04-15 Nuada Llc Peptidaseinhibitoren
CN1993320A (zh) 2004-08-06 2007-07-04 默克公司 作为11－β－羟基类固醇脱氢酶－1的抑制剂的磺酰化合物
BRPI0516340A (pt) 2004-10-12 2008-09-16 Glenmark Pharmaceuticals Sa composto, composição farmacêutica, método para tratar uma condição que é regulada ou normalizada via inibição de dpp-iv, método para tratar um distúrbio metabólico, método para tratar diabete tipo ii, método para diminuir glicose no sangue, método para tratamento e profilaxia de uma doença, método para tratar toleráncia não prejudicada a glicose insulino-resistente, método para a manufatura de uma composição farmacêutica e processo para a preparação de compostos
TW200630337A (en) * 2004-10-14 2006-09-01 Euro Celtique Sa Piperidinyl compounds and the use thereof
DE102004054054A1 (de) 2004-11-05 2006-05-11 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Verfahren zur Herstellung chiraler 8-(3-Amino-piperidin-1-yl)-xanthine
WO2006068978A2 (en) 2004-12-21 2006-06-29 Takeda Pharmaceutial Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
DOP2006000008A (es) 2005-01-10 2006-08-31 Arena Pharm Inc Terapia combinada para el tratamiento de la diabetes y afecciones relacionadas y para el tratamiento de afecciones que mejoran mediante un incremento de la concentración sanguínea de glp-1
US20070032420A1 (en) * 2005-02-09 2007-02-08 Entelos, Inc. Treating diabetes with glucagon-like peptide-1 secretagogues
AU2006239929B2 (en) 2005-04-22 2011-11-03 Alantos Pharmaceuticals Holding, Inc. Dipeptidyl peptidase-IV inhibitors
EP1724253A3 (en) * 2005-05-10 2009-11-04 Ajinomoto Co., Inc. Production method of optically active diphenylalanine compounds
CA2609388C (en) 2005-05-30 2013-08-06 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Novel piperidine derivative
MY152185A (en) 2005-06-10 2014-08-29 Novartis Ag Modified release 1-[(3-hydroxy-adamant-1-ylamino)-acetyl]-pyrrolidine-2(s)-carbonitrile formulation
DE102005035891A1 (de) 2005-07-30 2007-02-08 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg 8-(3-Amino-piperidin-1-yl)-xanthine, deren Herstellung und deren Verwendung als Arzneimittel
EP1749816A1 (en) 2005-08-04 2007-02-07 Ajinomoto Co., Ltd. Production method of optically active diphenylalanine compounds
JPWO2007018248A1 (ja) 2005-08-10 2009-02-19 萬有製薬株式会社 ピリドン化合物
EP1921065B1 (en) 2005-08-24 2010-10-20 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Phenylpyridone derivative
WO2007029847A1 (ja) 2005-09-07 2007-03-15 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. 二環性芳香族置換ピリドン誘導体
GEP20135838B (en) 2005-09-14 2013-06-10 Takeda Pharmaceutical Dipeptidyl peptidase inhibitors usage at diabetes treatment
CN101360723A (zh) 2005-09-16 2009-02-04 武田药品工业株式会社 制备嘧啶二酮衍生物的方法
BRPI0616463A2 (pt) 2005-09-29 2011-06-21 Merck & Co Inc composto, composição farmacêutica, e, uso de um composto
AU2006307046A1 (en) 2005-10-27 2007-05-03 Msd K.K. Novel benzoxathiin derivative
US8158791B2 (en) 2005-11-10 2012-04-17 Msd K.K. Aza-substituted spiro derivatives
WO2007063928A1 (ja) * 2005-11-30 2007-06-07 Toray Industries, Inc. 新規な非環状アミンカルボキシアミド誘導体及びその塩
EP1801098A1 (en) 2005-12-16 2007-06-27 Merck Sante 2-Adamantylurea derivatives as selective 11B-HSD1 inhibitors
GB0526291D0 (en) 2005-12-23 2006-02-01 Prosidion Ltd Therapeutic method
US20070203111A1 (en) * 2006-01-06 2007-08-30 Sepracor Inc. Cycloalkylamines as monoamine reuptake inhibitors
EP1995237A4 (en) * 2006-03-08 2011-07-06 Kyorin Seiyaku Kk PROCESS FOR PREPARING AN AMINOACETYLPYRROLIDINCARBONITRILE DERIVATIVE AND PRODUCTION PRODUCT THEREOF
WO2007112347A1 (en) 2006-03-28 2007-10-04 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
WO2007110449A1 (en) 2006-03-29 2007-10-04 Euro-Celtique S.A. Benzenesulfonamide compounds and their use
PE20071221A1 (es) 2006-04-11 2007-12-14 Arena Pharm Inc Agonistas del receptor gpr119 en metodos para aumentar la masa osea y para tratar la osteoporosis y otras afecciones caracterizadas por masa osea baja, y la terapia combinada relacionada a estos agonistas
AU2007235876A1 (en) 2006-04-12 2007-10-18 Probiodrug Ag Enzyme inhibitors
US8937181B2 (en) 2006-04-13 2015-01-20 Purdue Pharma L.P. Benzenesulfonamide compounds and the use thereof
TW200815353A (en) 2006-04-13 2008-04-01 Euro Celtique Sa Benzenesulfonamide compounds and their use
EP1852108A1 (en) 2006-05-04 2007-11-07 Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co.KG DPP IV inhibitor formulations
KR101452915B1 (ko) 2006-05-04 2014-10-21 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 다형태
PE20110235A1 (es) 2006-05-04 2011-04-14 Boehringer Ingelheim Int Combinaciones farmaceuticas que comprenden linagliptina y metmorfina
JP2010502670A (ja) 2006-09-07 2010-01-28 ニコメッド ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 真性糖尿病のための組合せ治療
US8324383B2 (en) 2006-09-13 2012-12-04 Takeda Pharmaceutical Company Limited Methods of making polymorphs of benzoate salt of 2-[[6-[(3R)-3-amino-1-piperidinyl]-3,4-dihydro-3-methyl-2,4-dioxo-1(2H)-pyrimidinyl]methyl]-benzonitrile
JP5489333B2 (ja) 2006-09-22 2014-05-14 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション 脂肪酸合成阻害剤を用いた治療の方法
AU2007301126A1 (en) 2006-09-28 2008-04-03 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Diaryl ketimine derivative
JP2008115178A (ja) 2006-11-03 2008-05-22 Ajinomoto Co Inc ジフェニルアラニン−Ｎｉ（ＩＩ）錯体の製造方法
EP2089383B1 (en) 2006-11-09 2015-09-16 Probiodrug AG 3-hydr0xy-1,5-dihydr0-pyrr0l-2-one derivatives as inhibitors of glutaminyl cyclase for the treatment of ulcer, cancer and other diseases
TW200838536A (en) 2006-11-29 2008-10-01 Takeda Pharmaceutical Polymorphs of succinate salt of 2-[6-(3-amino-piperidin-1-yl)-3-methyl-2,4-dioxo-3,4-dihydro-2H-pyrimidin-1-ylmethy]-4-fluor-benzonitrile and methods of use therefor
US9126987B2 (en) 2006-11-30 2015-09-08 Probiodrug Ag Inhibitors of glutaminyl cyclase
EP1935420A1 (en) 2006-12-21 2008-06-25 Merck Sante 2-Adamantyl-butyramide derivatives as selective 11beta-HSD1 inhibitors
US8093236B2 (en) 2007-03-13 2012-01-10 Takeda Pharmaceuticals Company Limited Weekly administration of dipeptidyl peptidase inhibitors
US8143427B2 (en) * 2007-03-22 2012-03-27 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. Method for producing aminoacetylpyrrolidinecarbonitrile derivative
CA2682727C (en) 2007-04-02 2016-03-22 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Indoledione derivative
KR20120030570A (ko) 2007-04-03 2012-03-28 미쓰비시 타나베 파마 코퍼레이션 디펩티딜 펩티다아제 4 저해 화합물과 감미료와의 병용
US8399486B2 (en) * 2007-04-09 2013-03-19 Purdue Pharma L.P. Benzenesulfonyl compounds and the use thereof
JP5667440B2 (ja) 2007-04-18 2015-02-12 プロビオドルグ エージー グルタミニルシクラーゼ阻害剤としてのチオ尿素誘導体
US8338458B2 (en) 2007-05-07 2012-12-25 Merck Sharp & Dohme Corp. Method of treatment using fused aromatic compounds having anti-diabetic activity
EP2527360B1 (en) 2007-06-04 2015-10-28 Synergy Pharmaceuticals Inc. Agonists of guanylate cyclase useful for the treatment of gastrointestinal disorders, inflammation, cancer and other disorders
US8969514B2 (en) 2007-06-04 2015-03-03 Synergy Pharmaceuticals, Inc. Agonists of guanylate cyclase useful for the treatment of hypercholesterolemia, atherosclerosis, coronary heart disease, gallstone, obesity and other cardiovascular diseases
ES2465216T3 (es) 2007-06-04 2014-06-05 Ben Gurion University Of The Negev Research And Development Authority Compuestos de triarilo y composiciones que comprenden los mismos
CN101318922B (zh) * 2007-06-08 2010-11-10 上海阳帆医药科技有限公司 一类二肽基肽酶抑制剂、合成方法和用途
PE20090938A1 (es) * 2007-08-16 2009-08-08 Boehringer Ingelheim Int Composicion farmaceutica que comprende un derivado de benceno sustituido con glucopiranosilo
US8338450B2 (en) * 2007-09-21 2012-12-25 Lupin Limited Compounds as dipeptidyl peptidase IV (DPP IV) inhibitors
US8765736B2 (en) 2007-09-28 2014-07-01 Purdue Pharma L.P. Benzenesulfonamide compounds and the use thereof
WO2009074829A1 (en) 2007-12-12 2009-06-18 Astrazeneca Ab Peptidyl nitriles and use thereof as dipeptidyl peptidase i inhibitors
CL2008003653A1 (es) 2008-01-17 2010-03-05 Mitsubishi Tanabe Pharma Corp Uso de un inhibidor de sglt derivado de glucopiranosilo y un inhibidor de dppiv seleccionado para tratar la diabetes; y composicion farmaceutica.
US20110015181A1 (en) 2008-03-06 2011-01-20 Makoto Ando Alkylaminopyridine derivative
EP2272841A1 (en) 2008-03-28 2011-01-12 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Diarylmethylamide derivative having antagonistic activity on melanin-concentrating hormone receptor
PE20091730A1 (es) 2008-04-03 2009-12-10 Boehringer Ingelheim Int Formulaciones que comprenden un inhibidor de dpp4
EP2108960A1 (en) 2008-04-07 2009-10-14 Arena Pharmaceuticals, Inc. Methods of using A G protein-coupled receptor to identify peptide YY (PYY) secretagogues and compounds useful in the treatment of conditons modulated by PYY
EP2110374A1 (en) 2008-04-18 2009-10-21 Merck Sante Benzofurane, benzothiophene, benzothiazol derivatives as FXR modulators
EP2810951B1 (en) 2008-06-04 2017-03-15 Synergy Pharmaceuticals Inc. Agonists of guanylate cyclase useful for the treatment of gastrointestinal disorders, inflammation, cancer and other disorders
AU2009261248A1 (en) 2008-06-19 2009-12-23 Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. Spirodiamine-diarylketoxime derivative
EP3241839B1 (en) 2008-07-16 2019-09-04 Bausch Health Ireland Limited Agonists of guanylate cyclase useful for the treatment of gastrointestinal, inflammation, cancer and other disorders
WO2010013595A1 (ja) 2008-07-30 2010-02-04 萬有製薬株式会社 ５員－５員又は５員－６員縮環シクロアルキルアミン誘導体
KR20190016601A (ko) 2008-08-06 2019-02-18 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 메트포르민 요법이 부적합한 환자에서의 당뇨병 치료
UY32030A (es) 2008-08-06 2010-03-26 Boehringer Ingelheim Int "tratamiento para diabetes en pacientes inapropiados para terapia con metformina"
CA2732984A1 (en) * 2008-08-07 2010-02-11 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. Process for production of bicyclo[2.2.2]octylamine derivative
CN102186474A (zh) * 2008-08-14 2011-09-14 杏林制药株式会社 稳定的医药组合物
CA2736421A1 (en) 2008-09-10 2010-03-18 Boehringer Ingelheim International Gmbh Combination therapy for the treatment of diabetes and related conditions
US20200155558A1 (en) 2018-11-20 2020-05-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh Treatment for diabetes in patients with insufficient glycemic control despite therapy with an oral antidiabetic drug
WO2010047982A1 (en) 2008-10-22 2010-04-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel cyclic benzimidazole derivatives useful anti-diabetic agents
JP5635991B2 (ja) 2008-10-30 2014-12-03 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーションＭｅｒｃｋ Ｓｈａｒｐ ＆ Ｄｏｈｍｅ Ｃｏｒｐ． イソニコチンアミドオレキシン受容体アンタゴニスト
JP5557845B2 (ja) 2008-10-31 2014-07-23 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション 糖尿病用剤として有用な新規環状ベンゾイミダゾール誘導体
JP5514831B2 (ja) 2008-11-17 2014-06-04 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション 糖尿病の治療のための置換二環式アミン
JP2012512848A (ja) 2008-12-23 2012-06-07 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 有機化合物の塩の形態
TW201036975A (en) 2009-01-07 2010-10-16 Boehringer Ingelheim Int Treatment for diabetes in patients with inadequate glycemic control despite metformin therapy
BRPI1008560B1 (pt) 2009-02-13 2021-08-31 Boehringer Ingelheim International Gmbh Composição farmacêutica compreendendo um inibidor de sglt2, um inibidor de dpp-iv e opcionalmente um outro agente antidiabético e usos dos mesmos
CN102574830A (zh) 2009-05-07 2012-07-11 阿斯利康(瑞典)有限公司 取代的1-氰基乙基杂环基甲酰胺化合物750
US8748457B2 (en) 2009-06-18 2014-06-10 Lupin Limited 2-amino-2- [8-(dimethyl carbamoyl)- 8-aza- bicyclo [3.2.1] oct-3-yl]-exo- ethanoyl derivatives as potent DPP-IV inhibitors
AR077642A1 (es) 2009-07-09 2011-09-14 Arena Pharm Inc Moduladores del metabolismo y el tratamiento de trastornos relacionados con el mismo
CA2768577A1 (en) 2009-07-23 2011-01-27 Schering Corporation Benzo-fused oxazepine compounds as stearoyl-coenzyme a delta-9 desaturase inhibitors
WO2011011506A1 (en) 2009-07-23 2011-01-27 Schering Corporation Spirocyclic oxazepine compounds as stearoyl-coenzyme a delta-9 desaturase inhibitors
JP5934645B2 (ja) 2009-09-11 2016-06-15 プロビオドルグ エージー グルタミニルシクラーゼ阻害剤としてのヘテロ環式誘導体
AU2010317842A1 (en) 2009-11-16 2012-07-12 Mellitech [1,5]-diazocin derivatives
KR20240090632A (ko) 2009-11-27 2024-06-21 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 리나글립틴과 같은 ｄｐｐ－ｉｖ 억제제를 사용한 유전자형 검사된 당뇨병 환자의 치료
CN103664873B (zh) 2009-12-30 2016-06-15 深圳信立泰药业股份有限公司 作为二肽基肽酶iv(dpp-iv)抑制剂的3-(3-氨基哌啶-1-基)-5-氧代-1,2,4-三嗪衍生物
US8895596B2 (en) 2010-02-25 2014-11-25 Merck Sharp & Dohme Corp Cyclic benzimidazole derivatives useful as anti-diabetic agents
WO2011107530A2 (en) 2010-03-03 2011-09-09 Probiodrug Ag Novel inhibitors
KR101040187B1 (ko) * 2010-03-08 2011-06-09 주식회사 진우씨스템 벽부형 등기구 장치
JP5688745B2 (ja) 2010-03-10 2015-03-25 プロビオドルグ エージー グルタミニルシクラーゼ（ｑｃ、ｅｃ２．３．２．５）の複素環阻害剤
AU2011237775A1 (en) 2010-04-06 2012-11-22 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the GPR119 receptor and the treatment of disorders related thereto
WO2011131748A2 (en) 2010-04-21 2011-10-27 Probiodrug Ag Novel inhibitors
CA3070513C (en) 2010-05-05 2023-01-03 Boehringer Ingelheim International Gmbh A dpp-4 inhibitor for use in treatment of skin-alterations or necrosis
CN102260265B (zh) 2010-05-24 2015-09-02 上海阳帆医药科技有限公司 六氢吡咯[3,4-b]吡咯衍生物、其制备方法及其用途
KR20130093012A (ko) 2010-06-24 2013-08-21 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 당뇨병 요법
US20130156720A1 (en) 2010-08-27 2013-06-20 Ironwood Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treating or preventing metabolic syndrome and related diseases and disorders
US9616097B2 (en) 2010-09-15 2017-04-11 Synergy Pharmaceuticals, Inc. Formulations of guanylate cyclase C agonists and methods of use
PH12013500547A1 (en) 2010-09-22 2013-06-10 Arena Pharm Inc Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
AR083878A1 (es) 2010-11-15 2013-03-27 Boehringer Ingelheim Int Terapia antidiabetica vasoprotectora y cardioprotectora, linagliptina, metodo de tratamiento
BR112013021236B1 (pt) 2011-02-25 2021-05-25 Merck Sharp & Dohme Corp composto derivado de benzimidazol, e, composição
ES2664873T3 (es) 2011-03-01 2018-04-23 Synergy Pharmaceuticals Inc. Proceso de preparación de agonistas de guanilato ciclasa C
AR085689A1 (es) 2011-03-07 2013-10-23 Boehringer Ingelheim Int Composiciones farmaceuticas de metformina, linagliptina y un inhibidor de sglt-2
EP2686313B1 (en) 2011-03-16 2016-02-03 Probiodrug AG Benzimidazole derivatives as inhibitors of glutaminyl cyclase
US20140018371A1 (en) 2011-04-01 2014-01-16 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators Of The GPR119 Receptor And The Treatment Of Disorders Related Thereto
US20140066369A1 (en) 2011-04-19 2014-03-06 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators Of The GPR119 Receptor And The Treatment Of Disorders Related Thereto
WO2012145604A1 (en) 2011-04-22 2012-10-26 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
US20140038889A1 (en) 2011-04-22 2014-02-06 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators Of The GPR119 Receptor And The Treatment Of Disorders Related Thereto
WO2012170702A1 (en) 2011-06-08 2012-12-13 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
DK2731947T3 (en) 2011-07-15 2019-04-23 Boehringer Ingelheim Int SUBSTITUTED DIMERIC QUINAZOLINE DERIVATIVE, PREPARATION AND USE thereof IN PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS FOR TREATMENT OF TYPE I AND TYPE II DIABETES
WO2013055910A1 (en) 2011-10-12 2013-04-18 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the gpr119 receptor and the treatment of disorders related thereto
AR088352A1 (es) 2011-10-19 2014-05-28 Merck Sharp & Dohme Antagonistas del receptor de 2-piridiloxi-4-nitrilo orexina
US9555001B2 (en) 2012-03-07 2017-01-31 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical composition and uses thereof
WO2013171166A1 (en) 2012-05-14 2013-11-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh A xanthine derivative as dpp-4 inhibitor for use in the treatment of sirs and/or sepsis
WO2013171167A1 (en) 2012-05-14 2013-11-21 Boehringer Ingelheim International Gmbh A xanthine derivative as dpp -4 inhibitor for use in the treatment of podocytes related disorders and/or nephrotic syndrome
WO2013174767A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 Boehringer Ingelheim International Gmbh A xanthine derivative as dpp -4 inhibitor for use in modifying food intake and regulating food preference
US9527875B2 (en) 2012-08-02 2016-12-27 Merck Sharp & Dohme Corp. Antidiabetic tricyclic compounds
WO2014074668A1 (en) 2012-11-08 2014-05-15 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of gpr119 and the treatment of disorders related thereto
RU2015140066A (ru) 2013-02-22 2017-03-30 Мерк Шарп И Доум Корп. Противодиабетические бициклические соединения
WO2014139388A1 (en) 2013-03-14 2014-09-18 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel indole derivatives useful as anti-diabetic agents
CA2905435A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Synergy Pharmaceuticals Inc. Compositions useful for the treatment of gastrointestinal disorders
CA2905438A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Synergy Pharmaceuticals Inc. Agonists of guanylate cyclase and their uses
SI3004138T1 (sl) 2013-06-05 2024-07-31 Bausch Health Ireland Limited Ultra čisti agonisti gvanilat ciklaze C, postopek za njihovo pripravo in uporabo
WO2015051496A1 (en) 2013-10-08 2015-04-16 Merck Sharp & Dohme Corp. Antidiabetic tricyclic compounds
CR20160207A (es) 2013-11-05 2016-08-10 Ben Gurion Univ Of The Negev Res And Dev Authority Compuestos para el tratamiento de la diabetes y las complicaciones que surgen de la misma enfermedad
EP3110449B1 (en) 2014-02-28 2023-06-28 Boehringer Ingelheim International GmbH Medical use of a dpp-4 inhibitor
KR102431436B1 (ko) 2014-08-29 2022-08-10 테스 파마 에스.알.엘. α-아미노-β-카복시뮤콘산 세미알데히드 데카복실라제의 억제제
GB201415598D0 (en) 2014-09-03 2014-10-15 Univ Birmingham Elavated Itercranial Pressure Treatment
EA201791982A1 (ru) 2015-03-09 2020-02-17 Интекрин Терапьютикс, Инк. Способы лечения неалкогольной жировой болезни печени и/или липодистрофии
CN105085278A (zh) * 2015-08-07 2015-11-25 常州大学 一种2-甲基-1-取代苯基-2-丙胺类化合物的制备方法
EP4233840A3 (en) 2016-06-10 2023-10-18 Boehringer Ingelheim International GmbH Combinations of linagliptin and metformin
AR109950A1 (es) 2016-10-14 2019-02-06 Tes Pharma S R L INHIBIDORES DE LA ÁCIDO a-AMINO-b-CARBOXIMUCÓNICO SEMIALDEHÍDO DESCARBOXILASA
US11072602B2 (en) 2016-12-06 2021-07-27 Merck Sharp & Dohme Corp. Antidiabetic heterocyclic compounds
WO2018118670A1 (en) 2016-12-20 2018-06-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Antidiabetic spirochroman compounds
AU2018249822A1 (en) 2017-04-03 2019-10-31 Coherus Biosciences Inc. PPArgamma agonist for treatment of progressive supranuclear palsy
ES2812698T3 (es) 2017-09-29 2021-03-18 Probiodrug Ag Inhibidores de glutaminil ciclasa
AR117122A1 (es) 2018-11-20 2021-07-14 Tes Pharma S R L INHIBIDORES DE LA ÁCIDO a-AMINO-b-CARBOXIMUCÓNICO SEMIALDEHÍDO DESCARBOXILASA
US11098029B2 (en) 2019-02-13 2021-08-24 Merck Sharp & Dohme Corp. 5-alkyl pyrrolidine orexin receptor agonists
WO2020167701A1 (en) 2019-02-13 2020-08-20 Merck Sharp & Dohme Corp. Pyrrolidine orexin receptor agonists
US12312332B2 (en) 2019-08-08 2025-05-27 Merck Sharp & Dohme Llc Heteroaryl pyrrolidine and piperidine orexin receptor agonists
CN113045484B (zh) * 2019-12-27 2024-01-26 南京药石科技股份有限公司 一种2-氨基-2-(1-甲基-4-哌啶基)丙烷-1-醇的制备方法
BR112023002957A2 (pt) 2020-08-18 2023-04-04 Merck Sharp & Dohme Llc Composto, composição farmacêutica, e, métodos para tratar narcolepsia e para tratar hipersonia em um sujeito mamífero

Family Cites Families (129)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3406129C1 (de) 1984-02-21 1985-07-25 Maschinenfabrik Sulzer-Rüti AG, Rüti, Zürich Webrotor fuer Reihenfachwebmaschinen
US4766109A (en) 1986-10-17 1988-08-23 Schering Corporation Hydrophobic peptides
ES2153831T3 (es) 1991-10-22 2001-03-16 New England Medical Center Inc Inhibidores de dipeptidil-aminopeptidasa de tipo iv.
US5198548A (en) 1992-01-30 1993-03-30 Warner-Lambert Company Process for the preparation of D(-) and L(+)-3,3-diphenylalanine and D(-) and L(+)-substituted 3,3-diphenylalanines and derivatives thereof
US5554753A (en) 1993-08-25 1996-09-10 Indiana University Foundation Catalytic enantioselective synthesis of α-amino acid derivatives by phase-transfer catalysis
IL111785A0 (en) * 1993-12-03 1995-01-24 Ferring Bv Dp-iv inhibitors and pharmaceutical compositions containing them
FR2719049B1 (fr) 1994-04-22 1996-06-14 Pasteur Institut Multireprésentation d'un analogue peptidique du substrat de la DPPIV, notamment de type KPR, afin d'inhiber l'entrée du HIV dans les cellules.
US5543396A (en) 1994-04-28 1996-08-06 Georgia Tech Research Corp. Proline phosphonate derivatives
EP0764151A2 (en) 1994-06-10 1997-03-26 Universitaire Instelling Antwerpen Purification of serine protease and synthetic inhibitors thereof
US5623087A (en) 1995-03-10 1997-04-22 Ndsu-Research Foundation Method for preparation of optically active diarylalanines
US20020006899A1 (en) 1998-10-06 2002-01-17 Pospisilik Andrew J. Use of dipeptidyl peptidase IV effectors for lowering blood pressure in mammals
DE19616486C5 (de) 1996-04-25 2016-06-30 Royalty Pharma Collection Trust Verfahren zur Senkung des Blutglukosespiegels in Säugern
US6011155A (en) 1996-11-07 2000-01-04 Novartis Ag N-(substituted glycyl)-2-cyanopyrrolidines, pharmaceutical compositions containing them and their use in inhibiting dipeptidyl peptidase-IV
TW492957B (en) 1996-11-07 2002-07-01 Novartis Ag N-substituted 2-cyanopyrrolidnes
GB2332566B (en) 1997-12-19 2001-09-19 Rolls Royce Power Eng Electrical circuit breaker
AU766219B2 (en) 1998-02-02 2003-10-09 1149336 Ontario Inc. Method of regulating glucose metabolism, and reagents related thereto
DE19823831A1 (de) 1998-05-28 1999-12-02 Probiodrug Ges Fuer Arzneim Neue pharmazeutische Verwendung von Isoleucyl Thiazolidid und seinen Salzen
DE19828113A1 (de) 1998-06-24 2000-01-05 Probiodrug Ges Fuer Arzneim Prodrugs von Inhibitoren der Dipeptidyl Peptidase IV
DE19828114A1 (de) 1998-06-24 2000-01-27 Probiodrug Ges Fuer Arzneim Produgs instabiler Inhibitoren der Dipeptidyl Peptidase IV
US20030176357A1 (en) 1998-10-06 2003-09-18 Pospisilik Andrew J. Dipeptidyl peptidase IV inhibitors and their uses for lowering blood pressure levels
CO5150173A1 (es) 1998-12-10 2002-04-29 Novartis Ag Compuestos n-(glicilo sustituido)-2-cianopirrolidinas inhibidores de peptidasa de dipeptidilo-iv (dpp-iv) los cuales son efectivos en el tratamiento de condiciones mediadas por la inhibicion de dpp-iv
GB9906714D0 (en) 1999-03-23 1999-05-19 Ferring Bv Compositions for improving fertility
JP4121215B2 (ja) 1999-05-17 2008-07-23 財団法人微生物化学研究会 スルフォスチン類縁体、並びにスルフォスチン及びその類縁体の製造方法
US6107317A (en) 1999-06-24 2000-08-22 Novartis Ag N-(substituted glycyl)-thiazolidines, pharmaceutical compositions containing them and their use in inhibiting dipeptidyl peptidase-IV
US6172081B1 (en) 1999-06-24 2001-01-09 Novartis Ag Tetrahydroisoquinoline 3-carboxamide derivatives
US6110949A (en) 1999-06-24 2000-08-29 Novartis Ag N-(substituted glycyl)-4-cyanothiazolidines, pharmaceutical compositions containing them and their use in inhibiting dipeptidyl peptidase-IV
BR0012068A (pt) 1999-06-30 2002-05-14 Daiichi Seiyaku Co Compostos inibidores de vla-4
DE19940130A1 (de) 1999-08-24 2001-03-01 Probiodrug Ges Fuer Arzneim Neue Effektoren der Dipeptidyl Peptidase IV zur topischen Anwendung
ES2269178T3 (es) 1999-09-10 2007-04-01 The University Of Sydney Dipeptidil peptidasas.
EP1228061A4 (en) 1999-11-12 2004-12-15 Guilford Pharm Inc DIPEPTIDYL PEPTIDASE IV INHIBITORS; METHODS OF MANUFACTURE AND USE OF SAID INHIBITORS
GB9928330D0 (en) 1999-11-30 2000-01-26 Ferring Bv Novel antidiabetic agents
PT1741446E (pt) 2000-01-21 2008-05-09 Novartis Pharma Ag Combinações incluindo inibidores da dipeptidilpeptidase-iv e agentes anti-diabéticos
AU2001228309A1 (en) 2000-01-24 2001-08-07 Novo-Nordisk A/S N-substituted 2-cyanopyroles and -pyrrolines which are inhibitors of the enzyme dpp-iv
WO2001062266A2 (en) 2000-02-25 2001-08-30 Novo Nordisk A/S Use of dpp-iv inhibitors for the treatment of diabetes
US6395767B2 (en) 2000-03-10 2002-05-28 Bristol-Myers Squibb Company Cyclopropyl-fused pyrrolidine-based inhibitors of dipeptidyl peptidase IV and method
HU229042B1 (en) 2000-03-31 2013-07-29 Prosidion Ltd Method for the improvement of islet signaling in diabetes mellitus and for its prevention
GB0010188D0 (en) 2000-04-26 2000-06-14 Ferring Bv Inhibitors of dipeptidyl peptidase IV
GB0010183D0 (en) 2000-04-26 2000-06-14 Ferring Bv Inhibitors of dipeptidyl peptidase IV
US6432969B1 (en) 2000-06-13 2002-08-13 Novartis Ag N-(substituted glycyl)-2 cyanopyrrolidines, pharmaceutical compositions containing them and their use in inhibiting dipeptidyl peptidase-IV
TW583185B (en) 2000-06-13 2004-04-11 Novartis Ag N-(substituted glycyl)-2-cyanopyrrolidines and pharmaceutical composition for inhibiting dipeptidyl peptidase-IV (DPP-IV) or for the prevention or treatment of diseases or conditions associated with elevated levels of DPP-IV comprising the same
GB0014969D0 (en) 2000-06-19 2000-08-09 Smithkline Beecham Plc Novel method of treatment
GB2363982A (en) 2000-06-26 2002-01-16 Mw Encap Ltd Tamper-proof capsules
WO2002002560A2 (en) 2000-07-04 2002-01-10 Novo Nordisk A/S Purine-2,6-diones which are inhibitors of the enzyme dipeptidyl peptidase iv (dpp-iv)
US7138397B2 (en) 2000-10-06 2006-11-21 Tanabe Seiyaku Co., Ltd. Nitrogenous 5-membered ring compounds
KR20030096227A (ko) 2000-10-27 2003-12-24 프로비오드룩 아게 신경 및 신경정신 질환의 치료방법
TWI243162B (en) 2000-11-10 2005-11-11 Taisho Pharmaceutical Co Ltd Cyanopyrrolidine derivatives
WO2002051836A1 (en) 2000-12-27 2002-07-04 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Dipeptidyl peptidase iv inhibitor
CN1500080A (zh) 2001-02-02 2004-05-26 ����ҩƷ��ҵ��ʽ���� 稠合杂环化合物
JP2002265439A (ja) 2001-03-08 2002-09-18 Mitsubishi Pharma Corp シアノピロリジン誘導体およびその医薬用途
ATE395912T1 (de) 2001-03-27 2008-06-15 Merck & Co Inc Dipeptidylpeptidase-hemmer für die behandlung oder prävention von diabetes
FR2822826B1 (fr) 2001-03-28 2003-05-09 Servier Lab Nouveaux derives sulfonyles d'alpha-amino-acides, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
GB0109146D0 (en) 2001-04-11 2001-05-30 Ferring Bv Treatment of type 2 diabetes
US6573287B2 (en) 2001-04-12 2003-06-03 Bristo-Myers Squibb Company 2,1-oxazoline and 1,2-pyrazoline-based inhibitors of dipeptidyl peptidase IV and method
US20030060494A1 (en) 2001-05-18 2003-03-27 Nobuyuki Yasuda Pharmaceutical use of N-carbamoylazole derivatives
EP1406872B1 (en) 2001-06-20 2007-12-19 Merck & Co., Inc. Dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment of diabetes
ES2257555T3 (es) 2001-06-20 2006-08-01 MERCK &amp; CO., INC. Inhibidores de dipeptidilpeptidasa para el tratamiento de la diabetes.
GB0115517D0 (en) * 2001-06-25 2001-08-15 Ferring Bv Novel antidiabetic agents
JP4300108B2 (ja) * 2001-06-27 2009-07-22 スミスクライン ビーチャム コーポレーション ジペプチジルペプチダーゼ阻害剤としてのピロリジン類
CA2418543A1 (en) 2001-06-27 2003-01-09 Probiodrug Ag New dipeptidyl peptidase iv inhibitors and their uses as anti-cancer agents
WO2003004496A1 (en) 2001-07-03 2003-01-16 Novo Nordisk A/S Dpp-iv-inhibiting purine derivatives for the treatment of diabetes
UA74912C2 (en) 2001-07-06 2006-02-15 Merck & Co Inc Beta-aminotetrahydroimidazo-(1,2-a)-pyrazines and tetratriazolo-(4,3-a)-pyrazines as inhibitors of dipeptylpeptidase for the treatment or prevention of diabetes
WO2003024942A1 (en) 2001-09-14 2003-03-27 Mitsubishi Pharma Corporation Thiazolidine derivative and medicinal use thereof
EP1463727A2 (en) 2001-09-19 2004-10-06 Novo Nordisk A/S Heterocyclic compounds that are inhibitors of the enzyme dpp-iv
DE10152351B4 (de) 2001-10-18 2005-09-22 Schering Ag Feste Arzneimittelformulierung für ein Piperazinharnstoffderivat
GB0125446D0 (en) 2001-10-23 2001-12-12 Ferring Bv Novel anti-diabetic agents
US6861440B2 (en) 2001-10-26 2005-03-01 Hoffmann-La Roche Inc. DPP IV inhibitors
AU2002360732A1 (en) 2001-12-26 2003-07-24 Guilford Pharmaceuticals Change inhibitors of dipeptidyl peptidase iv
ES2252656T3 (es) 2002-02-13 2006-05-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Nuevos derivados de piridina y quinolina.
KR100608414B1 (ko) 2002-02-13 2006-08-02 에프. 호프만-라 로슈 아게 신규한 피리딘- 및 피리미딘-유도체
DE60304911D1 (de) 2002-02-25 2006-06-08 Eisai Co Ltd Xanthin-Derivate als DPP-IV-Inhibitoren
AU2003235913A1 (en) 2002-05-09 2003-11-11 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. Cyanopyrrolidine derivatives
JP2004026820A (ja) 2002-05-09 2004-01-29 Taisho Pharmaceut Co Ltd ジペプチジルペプチダーゼｉｖ阻害剤
JP2005533771A (ja) 2002-06-04 2005-11-10 ファイザー・プロダクツ・インク ジペプチジルペプチダーゼｉｖ阻害剤としてのフッ素化環式アミド
HUP0202001A2 (hu) 2002-06-14 2005-08-29 Sanofi-Aventis DDP-IV gátló hatású azabiciklooktán- és nonánszármazékok
WO2004007446A1 (ja) 2002-07-10 2004-01-22 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. 新規なアゼチジン誘導体又はその塩
US7208498B2 (en) 2002-07-15 2007-04-24 Merck & Co., Inc. Piperidino pyrimidine dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment of diabetes
TW200401635A (en) 2002-07-23 2004-02-01 Yamanouchi Pharma Co Ltd 2-Cyano-4-fluoropyrrolidine derivative or salt thereof
AU2003254852A1 (en) 2002-08-08 2004-02-25 Takeda Pharmaceutical Company Limited Fused heterocyclic compounds as peptidase inhibitors
EP1528931B1 (en) 2002-08-09 2008-05-07 Prosidion Ltd. Dipeptidyl peptidase iv inhibitors for decreasing the rate of chronic weight gain
ZA200501418B (en) 2002-08-29 2006-10-25 Taisho Pharmaceutical Co Ltd Benzenesulfonate salts of 4-fluoro-2-cyanopyrrolidine derivatives
US20040058876A1 (en) 2002-09-18 2004-03-25 Torsten Hoffmann Secondary binding site of dipeptidyl peptidase IV (DP IV)
US7262207B2 (en) 2002-09-19 2007-08-28 Abbott Laboratories Pharmaceutical compositions as inhibitors of dipeptidyl peptidase-IV (DPP-IV)
ATE370141T1 (de) 2002-10-07 2007-09-15 Merck & Co Inc Antidiabetische heterocyclische beta- aminoverbindungen als inhibitoren von dipeptidylpeptidase
US6870067B2 (en) 2002-10-08 2005-03-22 Merck & Co., Inc. Process for the synthesis of trifluorophenylacetic acids
KR20050067418A (ko) 2002-10-18 2005-07-01 머크 앤드 캄파니 인코포레이티드 당뇨병을 치료 또는 예방하기 위한 베타-아미노헤테로사이클릭 디펩티딜 펩티다제 억제제
DE60332856D1 (de) 2002-10-23 2010-07-15 Bristol Myers Squibb Co Auf glycinnitril basierende hemmer der dipeptidylpeptidase iv
EP1562925B1 (en) 2002-11-07 2007-01-03 Merck & Co., Inc. Phenylalanine derivatives as dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment or prevention of diabetes
EP1422293A1 (en) 2002-11-25 2004-05-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Crystal structure of dipeptidyl peptidase IV
AU2003297564A1 (en) 2002-12-04 2004-06-23 Merck & Co., Inc. Phenylalanine derivatives as dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment or prevention of diabetes
US7420079B2 (en) 2002-12-09 2008-09-02 Bristol-Myers Squibb Company Methods and compounds for producing dipeptidyl peptidase IV inhibitors and intermediates thereof
ES2311117T3 (es) 2002-12-10 2009-02-01 Novartis Ag Combinacion de un inhibidor de dpp-iv y un compuesto ppar-alfa.
WO2004058266A1 (en) 2002-12-20 2004-07-15 Merck & Co., Inc. 3-amino-4-phenylbutanoic acid derivatives as dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment or prevention of diabetes
WO2004064778A2 (en) 2003-01-17 2004-08-05 Merck & Co. Inc. 3-amino-4-phenylbutanoic acid derivatives as dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment or prevention of diabetes
DE10309005A1 (de) 2003-03-01 2004-09-09 Morphochem Aktiengesellschaft für kombinatorische Chemie Neue Verbindungen, die Dipetidyl Peptidase (DPPIV) und Neurale Endopeptidase (NEP) inhibieren
AR043443A1 (es) 2003-03-07 2005-07-27 Merck & Co Inc Procedimiento de preparacion de tetrahidrotriazolopirazinas y productos intermedios
AR043505A1 (es) 2003-03-18 2005-08-03 Merck & Co Inc Preparacion de beta-cetoamidas e intermediarios de reaccion
WO2004085661A2 (en) 2003-03-24 2004-10-07 Merck & Co., Inc Process to chiral beta-amino acid derivatives
US7550590B2 (en) 2003-03-25 2009-06-23 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
WO2004087650A2 (en) 2003-03-27 2004-10-14 Merck & Co. Inc. Process and intermediates for the preparation of beta-amino acid amide dipeptidyl peptidase-iv inhibitors
WO2004089362A1 (en) 2003-04-11 2004-10-21 Novo Nordisk A/S 2-cyanopyrroles and their analogues as ddp-iv inhibitors
US20040229848A1 (en) 2003-05-05 2004-11-18 Hans-Ulrich Demuth Glutaminyl based DP IV-inhibitors
AU2003902260A0 (en) 2003-05-09 2003-05-29 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Dpp-iv inhibitor
WO2004103276A2 (en) 2003-05-14 2004-12-02 Merck & Co., Inc. 3-amino-4-phenylbutanoic acid derivatives as dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment or prevention of diabetes
WO2004103993A1 (en) 2003-05-14 2004-12-02 Syrrx, Inc. Dipeptidyl peptidase inhibitors
EP1627870A1 (en) 2003-05-15 2006-02-22 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd Cyanofluoropyrrolidine derivative
AU2003902828A0 (en) 2003-06-05 2003-06-26 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Dpp-iv inhibitor
WO2004110436A1 (en) 2003-06-06 2004-12-23 Merck & Co., Inc. Fused indoles as dipeptidyl peptidase inhibitors for the treatment or prevention of diabetes
AU2003902946A0 (en) 2003-06-12 2003-06-26 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Dpp-iv inhibitor
CN1809544A (zh) 2003-06-17 2006-07-26 麦克公司 作为二肽基肽酶抑制剂用于治疗或预防糖尿病的环己基甘氨酸衍生物
DE10327439A1 (de) 2003-06-18 2005-01-05 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Neue Imidazopyridazinon- und Imidazopyridonderivate, deren Herstellung und deren Verwendung als Arzneimittel
ES2355105T3 (es) 2003-06-20 2011-03-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Pirido(2,1-a)isoquinolina como inhibidores de la dpp-iv.
RU2339636C2 (ru) 2003-06-20 2008-11-27 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Гексагидропиридоизохинолины в качестве ингибиторов дипептидилпептидазы iv (dpp-iv)
JO2625B1 (en) 2003-06-24 2011-11-01 ميرك شارب اند دوم كوربوريشن Phosphoric acid salts of dipeptidyl betidase inhibitor 4
DE10333935A1 (de) 2003-07-25 2005-02-24 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Neue bicyclische Cyanoheterocyclen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
AU2004261186A1 (en) 2003-07-31 2005-02-10 Merck & Co., Inc. Hexahydrodiazepinones as dipeptidyl peptidase-IV inhibitors for the treatment or prevention of diabetes
KR20060041309A (ko) 2003-08-13 2006-05-11 다케다 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 ４-피리미돈 유도체 및 펩티딜 펩티다제 저해제로서의 그의용도
WO2005019168A2 (en) 2003-08-20 2005-03-03 Pfizer Products Inc. Fluorinated lysine derivatives as dipeptidyl peptidase iv inhibitors
EP1659123A1 (en) 2003-08-29 2006-05-24 Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. Bicyclic pyrazole derivative
HU227684B1 (en) 2003-08-29 2011-11-28 Sanofi Aventis Adamantane and azabicyclo-octane and nonane derivatives and their use as dpp-iv inhibitors
WO2005023762A1 (en) 2003-09-04 2005-03-17 Abbott Laboratories Pyrrolidine-2-carbonitrile derivatives and their use as inhibitors of dipeptidyl peptidase-iv (dpp-iv)
WO2005030751A2 (en) 2003-09-08 2005-04-07 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
US7790734B2 (en) 2003-09-08 2010-09-07 Takeda Pharmaceutical Company Limited Dipeptidyl peptidase inhibitors
AR046330A1 (es) 2003-09-09 2005-12-07 Japan Tobacco Inc Inhibidor de dipeptidilpeptidasa iv
WO2005033099A2 (en) 2003-10-03 2005-04-14 Glenmark Pharmaceuticals Ltd. Novel dipeptidyl peptidase iv inhibitors; processes for their preparation and compositions thereof
US20070072810A1 (en) 2003-10-03 2007-03-29 Takeda Pharmaceutical Company, Limited Agent for treating diabetes
PL380189A3 (pl) 2003-10-06 2007-01-08 Torrent Pharmaceuticals Limited Azolidynokarbonitryle i ich zastosowanie jako inhibitory DPP-IV
DE10348044A1 (de) 2003-10-15 2005-05-19 Imtm Gmbh Duale Alanyl-Aminopeptidase- und Dipeptidylpeptidase IV-Inhibitoren zur funktionellen Beeinflussung unterschiedlicher Zellen und zur Behandlung immunologischer, entzündlicher, neuronaler und anderer Erkrankungen
JP2005139107A (ja) 2003-11-05 2005-06-02 Taisho Pharmaceut Co Ltd ジペプチジルペプチダーゼｉｖ阻害剤
EP1541143A1 (en) 2003-12-09 2005-06-15 Graffinity Pharmaceuticals Aktiengesellschaft Dpp-iv inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
DE60222667D1 (de) 2007-11-08
JP2006306886A (ja) 2006-11-09
NZ529973A (en) 2006-01-27
AU2002322344C1 (en) 2006-02-16
NO20035603D0 (no) 2003-12-16
MXPA03011907A (es) 2004-03-26
BR0210644A (pt) 2004-07-20
JP2004535445A (ja) 2004-11-25
EP1406873B1 (en) 2007-09-26
KR20040015298A (ko) 2004-02-18
DE60235212D1 (de) 2010-03-11
EP1862457A2 (en) 2007-12-05
AU2002322344B2 (en) 2005-08-11
CA2450722A1 (en) 2003-01-09
CN1990468A (zh) 2007-07-04
CN1990469A (zh) 2007-07-04
HUP0400321A2 (hu) 2004-08-30
CO5600998A2 (es) 2006-01-31
US20040171848A1 (en) 2004-09-02
PL367527A1 (en) 2005-02-21
ATE455759T1 (de) 2010-02-15
CN1723196A (zh) 2006-01-18
ES2296979T3 (es) 2008-05-01
EP1862457B1 (en) 2010-01-20
DE60222667T2 (de) 2008-07-17
JP2007063286A (ja) 2007-03-15
EP1862457A3 (en) 2008-02-20
ATE374181T1 (de) 2007-10-15
IL158923A0 (en) 2004-05-12
JP3909056B2 (ja) 2007-04-25
WO2003002531A3 (en) 2003-04-03
WO2003002531A2 (en) 2003-01-09
US7132443B2 (en) 2006-11-07
ES2339813T3 (es) 2010-05-25
EP1406873A2 (en) 2004-04-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1406873B1 (en) Fluoropyrrolidines as dipeptidyl peptidase inhibitors
AU2002322344A1 (en) Fluoropyrrolidines as dipeptidyl peptidase inhibitors
JP4357293B2 (ja) ジペプチジルペプチダーゼ阻害剤としてのフルオロピロリジン類
JP4300108B2 (ja) ジペプチジルペプチダーゼ阻害剤としてのピロリジン類
KR100848491B1 (ko) 베타아미노기를 갖는 2-싸이아졸리딘 유도체, 이의약학적으로 허용 가능한 염 및 이의 제조 방법
JP2005532283A (ja) チアゾリジン−４−カルボニトリル及び類似物ならびにジペプチジル−ペプチダーゼ阻害剤としてのそれらの使用
WO2018217809A1 (en) Pyrazole magl inhibitors
KR20080071476A (ko) 신규한 디펩티딜 펩티데이즈 ｉｖ(ｄｐｐ-ｉｖ) 저해제
HK1111419A (en) Fluoropyrrolidines as dipeptidyl peptidase inhibitors
US20250388536A1 (en) 3-alkynyl carboxamides as aep modulators