CZ2003365A3

CZ2003365A3 - Způsob výroby 14 beta-hydroxy-1,14-karbonátdeacetyl-baccatinu III

Info

Publication number: CZ2003365A3
Application number: CZ2003365A
Authority: CZ
Inventors: Alessandro Pontiroli; Ezio Bombardelli
Original assignee: Indena S. P. A.
Priority date: 2000-08-10
Filing date: 2001-07-27
Publication date: 2003-06-18
Also published as: HK1055964A1; JP2004505961A; NO20030609D0; IT1318678B1; DK1307436T3; EP1307436A1; HK1088325A1; CN101130528A; ITMI20001869A1; CA2418829A1; NO20030609L; IL154330A; IL154330A0; SK1592003A3; AU8204001A; CZ302810B6; KR100853056B1; PL200868B1; PT1307436E; KR20030020454A

Description

Oblast techniky

Vynález se týká způsobu výroby 14β-hydroxy-1,14-karbonátdeacetylbaccatinu III a nových meziproduktů, využitelných při tomto postupu. Sloučeniny, získané způsobem podle vynálezu je možno využít při výrobě nových taxanových derivátů s protinádorovým účinkem.

Dosavadní stav techniky

Taxany jsou jednou z nej důležitějších skupin protinádorových látek, které byly vyvinuty v posledních letech. Paclitaxel je komplexní diterpen, který byl izolován kůry Taxus brevifolia a je jednou z hlavních látek pro léčení zhoubných nádorů. V poslední době se provádí rozsáhlý výzkum pro získání taxanových derivátů s vysokým farmakologickým účinkem a zlepšeným farmakokinetickým profilem. Jde zejména o různou modifikaci derivátů baccatinu III v jejich základní struktuře. Příkladem 14β-hydroxybaccatinových derivátů mohou být látky, popsané v dokumentech US 5705508, WO 97/43291 a WO 96/36622. V poslední době se připravují deriváty 14β-hydroxy-l, 14-karbonátdeacetylbaccatinu III tak, že se vychází z prekursoru, kterým je 14β-hydroxydeacetylbaccatin III. Jde o přírodní látku, kterou je možno v malém množství získat extrakcí listů Taxus wallichiana, jak je popsáno v EP 559019. Bylo by však zapotřebí nalézt nové meziprodukty nebo alternativní postupy, jimiž by bylo možno připravit deriváty

14p~hydroxy-l, 14-karbonátdeacetylbaccatinu III jednoduše a účinně.

Nyní bylo zjištěno, že 14β-hydroxy-1,14-karbonátdeacetylbaccatin III je možno připravit tak, že se jako výchozí látka užije 10-deacetylbaccatrn III, který může být na rozdíl od 14p-hydroxybaccatinu III snadno izolován ve velkém množství z listů Taxus baccata.

Podstata vynálezu

Podstatu vynálezu tvoří způsob výroby 14p-hydroxy-1,14-karbonátdeacetylbaccatinu III, který spočívá v tom že se

1. zavede ochranná skupina do poloh 7 a 10 v 10-deacetylbaccatinu III podle schématu

kde R a Ri se volí ze skupiny atom vodíku, Cl-C10alkyl nebo aryl, Cl-C10alkylkarbonyl nebo arylkarbonyl, trichloracetyl, Cl-C4trialkylsilyl, s výhodou znamenají symboly R a Ri v případě, že jsou stejné, trichloracetyl a v případě, že se od sebe liší, znamená R s výhodou trichloracetyl a R_x znamená acetyl nebo R znamená triethylsilyl nebo trimethylsilyl a Ri znamená acetyl,

2. uskuteční se dvoustupňová oxidace za získání derivátu oxidovaného v poloze 13 a hydroxyl ováného v poloze 14 podle schématu

3. uskuteční se karbonace sousedních hydroxylových skupin v polohách 1 a 14 za vzniku 1,14-karbonátového derivátu podle schématu

4. redukuje se karbonylová skupina v poloze 13 podle schématu

odstraní se ochranné skupiny v polohách a 10 podle schématu

Způsoby pro ochranu hydroxylových skupin v polohách 7 a 10 je možno nalézt v publikaci Holton a další, Tetrahedron Letters 39, 1998, 2883-2886. Selektivní ochrana hydroxylových skupin na výchozím deacetylbaccatinu III je možná vzhledem k odlišné reaktivitě těchto skupin. Zvláště bylo prokázáno, že reaktivita vzhledem k acylačním, alkylačním nebo silylačním.činidlům se mění v pořadí

C(7)-OH>C(10)-OH>C(13)-OH>C(1)-OH, takže skupiny v polohách 7 a 10 je možno selektivně chránit a přitom zachovat volné hydroxylové skupiny v polohách 1 a 13. Mimoto je možno změnou reakčních podmínek změnit pořadí reaktivity hydroxylových skupin v polohách 7 a 10, takže lze umožnit rozdílnou substituci obou těchto skupin.

Příklady reakčních složek a reakčních podmínek, použitelných pro ochranu hydroxylových skupin ^polohách 10 a 7 jsou podrobně rozebrány ve svrchu uvedene publikaci.

Oxidaci hydroxylové skupiny v poloze 13 je možno uskutečnit působením oxidu manganičitého nebo oxidu vizmutičitého v rozpouštědle ze skupiny acetonitril, aceton nebo směs ethylacetátu a methylenchloridu v poměru 9:1, oxidace se provádí za energického míchání, s výhodou se užije oxid manganičitý v acetonitrilu nebo acetonu. Reakce probíhá velmi rychle za vzniku oxidovaného derivátu v poloze 13, tento derivát je možno izolovat z reakční směsi, při delším průběhu reakce se získalí deriváty, oxidované v poloze 13 a hydroxylované v poloze 14 .

Následná karbonace hydroxylových skupin v polohách 1 a 14 se obvykle uskuteční působením fosgenu nebo trifosgenu ve směsi methylenchloridu a toluenu v přítomnosti pyridinu. Pak je možno výsledný 1,14-karbonátový derivát snadno redukovat v poloze vzniku odpovídajícího 13-hydroxyderivátu. Tato redukce probíhá regioselektivně na karbonylové skupině v^poloze 13, kdežto karbonylová skupina v poloze 9 zůstává beze změny a současně probíhá reakce stereoselektivně, takže se téměř výlučně získá 13α-isomer. Reakce se obvykle provádí působením hydroborátu sodného v methanolu, pri reakci je možno získat vysoký výtěžek. Poslední reakční stupeň spočívá v odstranění ochranných skupin na hydroxylových skupinách v polohách 7 a 10, čímž se získá výsledný 14β-hydroxy-1,14-karbonátdeacetylbaccatin III. Podmínky a reakční složky, které je možno použít pro

selektivní odstranění ochranných skupin na hydroxylových skupinách v polohách 7 a 10 jsou popsány v publikacích Zheng a další, Tetrahedron lett., 1995, 36, 2001 a Datta a další, J. Org. Chem., 1995, 60, 761. Výsledný produkt je vynikajícím meziproduktem pro syntézu celé řady taxanových derivátů. Jak již bylo svrchu uvedeno, tento meziprodukt byl až dosud připravován tak, že jako výchozí látka byl použit 14p-hydroxybaccatin III, extrahovaný v malém množství z listů Taxus wallichiana. Způsob podle vynálezu umožňuje připravit tentýž meziprodukt ve vysokém výtěžku tak, že se vychází ze sloučeniny, kterou je možno získat ve velkém množství. Příklady sloučenin s protinádorovým účinkem, které je možno připravit z

14β-hydroxy-1,14-karbonátdeacetylbaccatinu III jako meziproduktu jsou uvedeny v dokumentech US 5705508, WO 97/43291 a WO 96/36622.

Podle výhodného provedení způsobu podle vynálezu se deacetylbaccatin III nechá reagovat s trichloracetylchloridem v methylenchloridu v přítomnosti triethylaminu a při použití N,N-dimethylaminopyridinu DMAP v katalytických množstvích. Bylo prokázáno, že použití trichloracetátové skupiny jako ochranné skupiny je pro oxidaci velmi výhodné, což platí i pro karbonačni a redukční stupeň způsobu podle vynálezu.

7,10- bistrichloracetátový derivát, který se získá v kvantitativním výtěžku z výchozí látky se po oxidaci a karbonaci snadno redukuje v poloze 13 za současného odštěpení zbytku kyseliny trichloroctové, čímž se získá 14β-hydroxy-1,14-karbonátdeacetylbaccatin III. Použití DMAP v katalytickém množství má zřetelné výhody, pokud jde o provedení v průmyslovém měřítku a pokud jde o ohled na životní prostředí, protože až dosud byla acylace substrátu prováděna v pyridinu, což znamenalo podstatné problémy s odstraňováním odpadních produktu.

Součást podstaty meziprodukty, získané vynálezu tvoří také následující podle výhodného provedení způsobu podle vynálezu.

Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následujícími příklady, které však nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1 , ttt

Příprava 7, 10-bistrichloracetyl-lO-deacetylbaccatinu

První alternativa:

77 ml, 42,32 mmol anhydridu kyseliny trichlóroctové se po kapkách přidá k roztoku 10 g, 18,4 mmol io-deacetylbaccatinu ΙΠ ve 125 ml bezvodeho methylenchloridu a 42 ml pyridinu. Reakční směs se 3 hodiny nebo až do ukončení reakce, která se sleduje pomocí TLC na silikagelu, jako eluční činidlo se uzi₃e směs n-hexanu a ethylacetátu 1:1. Po ukončení reakce přidá 5 ml methanolu k rozrušení přebytku anhydridu kyseliny trichloroctové a pak se přidá voda. Organická fáze se důkladně promyje vodou, okyselenou kyselinou chlorovodíkovou k odstranění pyridinu, pak se organická fáze vysuší síranem horečnatým a odpaří ve vakuu do sucha, čímž se získá 17 g bledě žluté pevné látky, která sg nechá krystalizovat z chloroformu.

[a]_D -34° (CH₂C1₂ C5,8) IR (KBr) 3517, 1771, 1728, 1240, 981, 819, 787, 675 cm¹;

‘H-NMR (200MH): δ 8,11 (Bz C), 7,46 (Bz, BB’), 6,50 (s, H-10), 5,72 (m, H-7 H-29, 5,02 (d, J = 8 Hz, H-5), 4,95 8m, H-13), 4,37 (d, J = 8 Hz, H-20a), 4,18 (d, J = 8 Hz, H-20b), 4,02 (d, I = 6 Hz, H-3), 2,32 (s, 4-Ac), 2,22 (s, H-1.8), 1,91 (s, H-19), 1,25 a ' 1,11 (s, H-16, H-17), 1,94 (m, Η 14α), 1,89 (m,

Η14β).

Druhá alternativa:

g, 18,38 mmol 10-deacetylbaccatinu III se uvede do suspenze ve 120 ml methylenchloridu, přidá se 220 mg, 1,4 mmol, 0,1 ekvivalentu DMAP, směs se zchladí na 0 °C na ledové lázni a přidá se 10,26 ml, 73,6 mmol, 4 ekvivalenty Et₃N a bezprostředně potom ještě 4,12 ml, 36,8 mmol, 2 ekvivalenty C1₃CCOC1 pod dusíkem v průběhu 5 minut, přičemž teplota se udržuje na hodnotě mzsi nez 10 °C. Po skončeném přidávání se směs ještě 15 minut míchá v ledové lázni, pak se lázeň odstraní a reakční směs se míchá ještě 1 hodinu při teplotě místnosti. Po této době se reakční směs analyzuje pomocí TLC při použití směsi ethylacetátu a n-hexanu v poměru 2:3, Rf pro 10-DAB III = 0,005, Rf pro 7,10-bistrichloracetyl-10-DAB III = 0,26. Pak se ke směsi přidá 1 ml, 0,5 ekvivalentu C1₃CCOC1. Směs se ještě 10 minut míchá pri teplotě místnosti, pak se vlije do nádoby, obsahující • · · 9·· ·····»· « *

·..· : ·..··.,·

160 g drceného ledu a míchá se až do dosažení rovnovážného stavu, přibližné 1 hodinu pri teplote místnosti. Vodná fáze se oddělí a extrahuje se 3 x 40 ml methylenchloridu. Organické fáze se spojí, promyjí se 20 ml IN HC1, pak 20 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, vysuší se síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří. Získá se 16,5 g surového produktu. Po krystalizaci z chloroformu jsou hodnoty, získané v IR spektru, ¹H-NMR i optická otáčivost v souladu s hodnotami, které byly naměřeny pro sloučeninu, získanou při použití pyridinu a anhydridu kyseliny trichloroctové.

Příklad 2

Oxidace 7,10-bistrichloracetát-10-deacetylbaccatinu III v poloze 13 a jeho hydroxylace v poloze 14

0 g aktivovaného Mn02 se přidá k roztoku 3 g 10-deacetylbaccatinu III ve formě 7,10-bistrichloracetátu ve 40 ml acetonitrilu, suspenze se míchá při teplotě místnosti magnetickým míchadlem a průběh reakce se sleduje pomocí TLC při použití směsi petroletheru a ethylacetátu 5:5, Rf výchozí látky je přibližně 0,31. Po 1 hodině je tvorba 13-dehydroderivátu ukončena podle analýzy TLC, Rf 13-dehydroderivátu je přibližně 0,50. Pak se směs míchá ještě 72 hodin, v průběhu této doby 13-dehydroderivát pomalu oxiduje na odpovídající 14p-hydroxyderivát, jehož Rf je přibližně 0,36. Reakční směs se zfiltruje přes vrstvu celitu a filtrační koláč se opakovaně promyje ethylacetátem. Rozpouštědlo se odpaří a odparek se čistí chromatotrafií na sloupci silikagelu, užije se 100 ml silikagelu a jako eluční činidlo se užije směs petroletheru a ethylacetátu 7:3. Tímto způsobem se získá 170 mg 13-dehydroderivátu a 2,3 8 g 14p-hydroxy-13-dehydroderivátu.

13-dehydro-14p-hydroxy-10-deacetylbaccatin III ve formě 7,10-bistrichloracetátu je bílý prášek s teplotou tání 97 °C, IR spektrum (KBr kotouč):

3440, 1780, 1767, 1736, 1686, 1267, 1232, 1103, 1010, 854 cm' I ’H-NMR (200MHz, CDC1₃): δ 8,07 (Bz AA'), 7,60 (Bz, C), 7,49 (Bz, BB'), 6,52 (s, H-10), 5,92 (d, J = 6,7 Hz, H-2), 5,70 (br t, I = 8,0 Hz, H-7), 4,95 (br d,' J = 8,2 Hz, H-5), 4,37 (d, I = 8,2 Hz, H-20a), 4,31 (d, 1 = 8,2 Hz, H-20b), 4,17 (s, H14), 4,02 (d, J = 6,7 Hz, H-3), 2,71 (m, H-6), 2,29 (s, OAc), 2,17 (s, OAc), l_f96 (s, H-18), 1,27,1,01 (s, H-16, H-17 a H-19).

Příklad 3

Oxidace/hydroxylace 7-triethylsilylbaccatinu III g aktivovaného MnO₂ se přidá k roztoku 1,0 g 7-triethylsilylbaccatinu III v 10 ml acetonitrilu, suspenze se míchá při teplotě místnosti magnetickým míchadlem a průběh reakce se sleduje pomocí TLC pri použití směsi petroletheru a ethylacetátu 6:4, Rf výchozí látky je přibližně 0,25. Po přibližně 2 hodinách je tvorba 13-dehydroderivátu ukončena, při analýze TLC je Rf pro 13-dehydroderivát přibližně 0,45. Míchání pak pokračuje přibližně 188 hodin, v průběhu této doby se přidá ještě 10 g MnO₂. 13-dehydroderivát je pomalu oxidován na odpovídající 14p-hydroxyderivát, jehož Rf je přibližně 0,38. Reakční směs se zfiltruje přes cellit a filtrační koláč se promyje ethylacetátem. Rozpouštědlo se odpaří a odparek se čistí chromatografíí na sloupci ii : J ·: : ··:* *: :.

silikagelu, užije se 40 ml silikagelu a jako eluční činidlo směs petroletheru a ethylacetátu 7:3, čímž se získá 126 mg 13-dehydroderivátu, ve výtěžku 46 % se získá 479 mg 14p-hydroxy-13-dehydroderivátu a 189 mg směsi obou látek.

13-dehydro-7-triethylsilylbaccatin III je bílý prášek s teplotou tání 168 °C. [a]c²⁵ - 35 (CH₂C1₂, C 0,67) IR (KBr) 3488, 1726, 1711, 1676, 1373, 1269, 1244, 1230, 1105 cm'¹; ^-NMR (200MH CDC1₃): δ 8,07 (Bz AA’), 7,60 (Bz, C), 7,49 (Bz, BB’), 6,59 (s, H-10), 5,69 (d, J = 6,9 Hz, H-2), 4,92 (d, J = 8,2 Hz, H-5), 4,48 (dd, J = 10,6 Hz, H-7), 4,33 (d, J = 8,0 Hz, H-20a), 4,12 (d, 3 = 8,0 Hz, H-20b), 3,91, (d, J = 6,9 Hz,-H-3), 2,96 (d, J = 20 Hz, H-14a), 2,65 (d, J = 20 Hz, H20b), 2,50 (m, H-6a), 2,23 (s, OAc), 2,19 (s, OAc + H-18), 1,67, 1,28, 1,19 (s, H-16,H-17a H-19), 0,19 (m, TES).

13-dehydro-14β-hydroxy-10-deacetylbaccatin III ve formě 7,10-bistrichloracetátu je bílý prášek s teplotou tání 153 °C. [ech²⁵ + 20 (CH₂C1₂, C 0,75) IR (KBr) 3431 1723, 1692, 1371, 1269, 1242, 1223, 1096 cm’ ; H-NMRJ00MH C , (Bz AA’), 7,60 (Bz, C), 7,48 (Bz, BB’), 6,51 (s, H-10), 5,88 (d, I 6 9 Hz 2), 4,90 (d, J = 8,2 Hz, H-5), 4,47 (dd, I = 10,6 7 Hz, H-7), 4,30 (d, J Hz, H-20a), 4,28 (d, J = 8,2 Hz, H-20b), 4,13 (br d, I = 2 Hz, H-14), 3,84 (d, J = 6,9 Hz, H-3), 3,69 (br d, J = 2 Hz, 14-OH), 3,62 (s, 1-OH), 2,52 (m. H-6a), 2,24 (s, OAc), 2,21 (s, OAc), 2,11 (s, H-18), 1,92 (m, Η-6β), 1,74, 1,56, 1,28 (s, W, H-17 a H-19), 0,94 (m, TES), 0,59 (m, TES). HRNS: 714,3092 (vypočteno proC37HsoOi₂Si 714,3092).

Příklad 4

Oxidace/hydroxylace 7-triethylsilylbaccatinu III g aktivovaného MnO₂ se přidá k roztoku. 1,0 g 7-triethylsilylbaccatinu III v 10 ml acetonitrilu za míchání při teplotě místnosti a průběh reakce se sleduje pomocí TLC při použití směsi petroletheru a ethylacetatu 6:4, Rf výchozí látky je přibližně 0,25. Po přibližné 2 hodinách je tvorba 13-dehydroderivátu ukončena podle analýzy TLC, Rf pro 13-dehydroderivát je přibližně 0,45. Pak se směs míchá ještě přibližně 188 hodin, v průběhu této doby se přidá ještě 10 g MnO₂. 13-dehydroderivát je pomalu oxidován na odpovídající 14β-hydroxyderivát, jehož Rf je přibližně 0,38. Reakční směs se zfiltruje pres cellit a filtrační koláč se promyje ethylacetátem. Rozpouštědlo se odpaří a odparek se čistí chromatografií na sloupci silikagelu, užije se 40 ml silikagelu a jako eluční činidlo směs petroletheru a ethylacetátu 7:3, čimz se získá 126 mg 13-dehydroderivátu, ve výtěžku 46 % se získá 479 mg 14β-hydroxy-13-dehydroderivátu a 189 mg směsi obou látek.

je bílý

1240, 1071, 1026

13-dehydro-7-triethylsilylbaccatin III _{Γ Ί} 25 _ 42 prášek s teplotou tání 210 °C. L^aJD (CH2CI2, C 0r50) IR. (KBr) 3478, 1728, 1676, 1373, 1271, cm'¹; ‘H-NMR (200ΜΞ CDC13): δ 8,07 (Bz AA'), 7,64 (Bz, C), 7,50 (Bz, BB'), 6,46 (_S) H-10), 5,70 (d, J = 6,9 Hz, H-2), 4,95 (d, J= 8,2 Hz, H-5), 4,51 (dd, J = 10,7 Hz, H-7), 4,32 (d, I = 8,4 Hz, H-20a), 4,14 (d, J = 8,4 Hz, H-20b), 3,92, (d, I = 6,9 Hz, H-3), 2,99 (d, J = 20 Hz, H-14a), 2,68 (1 J - 20 Hz, H-14b), 2 56 (m H-6al 2,29 (s, OAc), 2,18 (s, OAc), 2,08 (s, H-18), 1,68, 1,29, 1,20 (^-16^-17 3-^-19),0,19.

13-dehydro-14β-hydroxy-7-triethylsilylbaccatln III je bílý prášek s teplotou tání 220 °C.

₊ 19 (CHA C 0(42) IR (KBr) 3568, 1710, 1719, 1686, 1372, 1282, l 1240 1719 1073 cm¹; ’H-NMR (200MH CDC1₃): δ 8,09 (Bz AA'), 7,60jBz, Q, 7,51 (Bz, BB'), 6,39 (s, H-10), 5,89 (d, J - 6,9 Hz, H-2), 4,94 (d, I - 8 2 ) _H.₅₎, 4,47 (dd, 1 = 10,7 Hz, H-7), 4,31 (br s, -H-20a ₊ H-20b), 4 15 (s

14) 3 69 (d, J = 6,9 Hz, H-3), 2,29 (s, OAc), 2,16 (s, H-18), 2,14 (s, 1,74, 1,21, 1,10 (s, H-16, H-17 a^d H-19), HRMS: 600,6112 0,19 (vypočteno pro C₃iHsóO 12S1600,6103).

Příklad 5

Příprava 1,14-karbonát-13-dehydro-7-triethylsilylbaccatinu III

Roztok 124 mg, 1,17 mmol 13-dehydro-14β-hydroxy-7-triethylsilylbaccatinu III v 1 ml methylenchloridu a 0,56 ml, 6,8 mmol, 2 0 molárních ekvivalentů pyridinu se po kapkách přidá v průběhu 5 minut k roztoku fosgenu (1,8 ml 20% roztoku v toluenu, 3,4 mmol, 20 molárních ekvivalentů) ve 2 ml methylenchloridu. Směs se mícha 1 hodinu při teplotě místnosti, pak se přebytek fosgenu neutralizuje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a směs se extrahuje methylenchloridem. Organická fáze se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, nasyceným roztokem chloridu sodného a pak se vysuší síranem sodným. Rozpouštědlo se odpaří, čímž se získá černevavý odparek, který se čistí na malém sloupci s obsahem přibližně 5 ml silikagelu, jako eluční činidlo se užije směs hexanu a ethylacetátu 8:2, čímž se ve výtěžku 92 % získá 118 mg karbonátu. V případě, ze se reakce uskuteční s triethylaminem jako baží, získá se směs 1,14-karbonátu a 2-debenzoyl-l,2-karbonát-14-benzoátu v poměru přibližně 1:15.

13-dehydro-14p-hydroxy-7-triethylsilylbaccatin III, 1_z14-karbonát je bily prášek s teplotou tání 153 C.

Wd²⁵ + ²³ (CH₂C1₂, C 0,75) IR (KBr) číslo pásu OH 1834, 1734, 1709, 1373, 1242, 1225, 1088, 1057 cm'; 'H-NMR (200MH CDC1₃): δ 7,99 (Bz AA'), 7,60 (Bz, C), 7,48 (Bz, BB'), 6,51 (s, H-10), 6,12 (d, J = 6,9 Hz, H-2), 4,90 (d, J = 8,2 Hz, H-5), 4,78 (s, H-14), 4,44 (dd, J = 10,7 Hz, H-7), 4,34 (d, I = 8 Hz, H-20a), 4,19 (d, J = 8,2 Hz, H-20b), 3,80 (d, J 6 9 Hz, H-3), 2,50 (m, H-6a), 2,23 (s, OAc), 2,22 (s, O Ac), 2,19 (s,H-18), 1,92 (m, Η-6β), 1,72, 1,39,1,26 (s, -H-16_;H-17 a H-19), 0,90 (m, TES), 0,56 (m, TES). HRNS: 740,2851 (rypočtenovbssHwOuSi 740,2864).

13-dehydro-14p-hydroxybaccatin III, 1,14-karbonát je bílý prášek s teplotou tání 240 °C.

Md²⁵ - 2,5 (CH2C12, C 0,4) IR (KBr) 3539, 1831, 1736, 1240, 1088, 1068, 1057, 1024 cm-¹; Ή-NMR (200MH CDC13): δ 7,.98 (Bz AA'), 7,61 (Bz, C), 7,50 (Bz, BB'), 6,39 (s, H-10), 6,14 (d, J = 6,9 Hz, H-2), 4,98 (d, J = 8,2 Hz, H₅J, 4,80 (s, H-14), 4,43 (dd, J = 10,7 Hz, H-7), 4,35 (d, J = 8 Hz, H-20a),4,24 (d, I = 8,2 Hz, H-20b), 3,80 (d, J = 6,9 Hz, H-3), 2,50 (m, H-6a), 2,30 (s, OAc), 2,20 (s, OAc), 2,15 (s, H-18), 1,90 (m, Η-6β), 1,74, 1,34, 1,25 (s, H-16, H-17 a H-19), HRMS; 626,2005 (»ypočteno-Vc₃₃H₃4Oi 626,1999).

Příklad 6

Příprava 1,14-karbonát-7-0-triethylsilylbaccatinu III

Přebytek přibližně 20 mg hydroborátu sodného se přidá po malých podílech k roztoku 50 mg 13-dehydro-14β-hydroxy-7-triethylsilylbaccatin III, 1,14-karbonátu v 5 ml methanolu. Po 3 minutách se k reakční směsi prida nasycený chlorid amonný, směs se extrahuje ethylacetátem, promyje se nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem sodným a rozpouštědlo se odpaří, čímž se získá odparek, který se čistí chromatografií na sloupci přibližně 5 ml silikagelu, jako eluční činidlo se užije směs hexanu a ethylacetátu 8:2, čímž se získá 35 mg 13a-hydroxyderivátu a 9 mg 13β-hydroxyderivátu.

14_ř-Hydroxy-7-triethylsilylbacoatin ΙΠ 1,14-karbonit [a]_D ²⁵ -35 (CH2C12, C 0 60) IR (KBr) 3054, 1819, 1736, 1603, 1371, 1261, 1238, 1090, 1069, cm ; ‘H-NMR (200MH CD Cl,): δ 8,06 (Bz AA'), 7,65 (Bz, C), 7,50 (Bz, BB'), 6,47 (s H-10), 6,12 (d, J = 6,9 Hz, H-2), 5,05 (br d, J = 5,5 Hz, H-13), 4,98 (br d, J = 9 Hz, H-5), 4,83 (d, J = 5 Hz, H-14), 4,50 (dd, J - 10,7 Hz, H-7), 4,34 (d, J = 8 Hz, H-20a), 4,23 (d, I = 8 Hz, H-20b), 3,75 (d, I = 6,9 Hz, H-3), 2,56 (m, H6α), 2,34 (s, OAc), 2,22 (s, OAc), 1,78 (m, Η-6β), 1,35 (s, H-18), 1,75, 1,18, 0 95 (s, -H-16, H-17 a H-19), 0,90 (m, TES), 0,62 (m, TES)., 14p-Hydroxy-7-triethylsilyl-13-epibaccatm ΙΠ 1,14-ferboMt,.amorfní [a]D« . 13 (CH2C12, C 0,60) IR (KBr) 3630, 1825, 1734, 1603, 1375, 1262, 1091, 1071, 1049 cm'¹; Ή-NMR (200MH CDC13): δ 8,01 (Bz AA'), 7,63 (Bz, C) 7 48 (Bz, BB'), 6,44 (s, H-10), 6,12 (d, I = 7,2 Hz, H-2), 4,90 (br d, I Hz H-5), 4,81 (d, J = 8 Hz, H-14), 4,48 (br, I - 8, H-13), 4,50 (dd, J = 10, 7 Hz H-7), 4,41 (d, I = 8 Hz, H-20a), 4,31 (d, I = 8 Hz, H-20b), 3,68 (d, I - 7,2 Hz H-3), 2,60 (m, H-6a), 2,32 (s, OAo), 2,26 (s, H-18), 2,21 (s, OAc), 1,80 _(m, Η-6β), 1,72,1,43,1,27 (s, -H-16, H-17 a H-19), 0,93 (m, TES), 0,61 (m,

TES).

Příklad 7

Příprava 13-dehydro-14β-hydroxy-Ί, 10 -bistrichloracetyl baccatin III, 1,14-karbonátu

K roztoku 200 mg 13-dehydro-14β-hydroxy-7,10-bistrichloracetylbaccatinu III ve smesi 2 ml methylenchloridu a 1,12 ml, 20 ekvivalentech pyridinu se přidá v průběhu 5 minut roztok 2 ml fosgenu (20% roztok v toluenu, 3,6 ml, 20 ekvivalentů) v methylenchloridu. Směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti, pak se přebytek fosgenu neutralizuje přidáním 3 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Pak se směs extrahuje methylenchloridem, organická fáze se promyje nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, pak nasyceným roztokem chloridu sodného, načež se vysuší síranem sodným. Po odpaření rozpouštědla se odparek čistí chromatografií na sloupci silikagelu při použití směsi hexanu a ethylacetátu 9:1, čímž se ve výtěžku 89 % získá 175 mg karbonátu.

33- dehydro -14 β - hydroxy - 7,10 - bis trichlorace tyl baccatin III, 1,14-karbonát je amorfní bílá pevná látka.

IR (KBr) 1834, 1771, 1735, 1709, 1232, 1103, 1010, 854 cm¹.

Ή NMR (200 MHz, CDC1₃): δ = 8,03 (Bz AA'), 7,60 (Bz, C), 7,50 (Bz, BB'), 6,52 (s, H-10), 5,92 (d, J = 6,7 Hz, H-2), 5,70 (br t, J = 8,0 Hz, H-7), 4,95 (br d, J = 8,2 Hz, H-20b), 4,77 (s, H-14), 4,02 (d, J = 6,7 Hz, H-3), 2,71 (m, H-6), 2.29 (s, OAc), 1,96 (s, H-18), 1,27 - 1,01 (m, H-16, H-17, H-19).

1.7

Příklad 8

Příprava 14β-hydroxy-10-deacetylbaccatin III, 1,14-karbonátu.

Roztok 500 mg 13 - dehydro-14 β-hydroxy-7,10 -bistrichloracetylbaccatin III, 1,14-karbonátu v 8 ml methanolu se zchladí na ledové lázni na 0 °C a pak se v průběhu 5 minut přidá 44 mg pevného hydroborátu sodného. Směs se míchá 1 hodinu při teplotě místnosti a pak se zchladí na 0 °C. Přidají se 2 ml acetonu v průběhu 5 minut, směs se odpaří, přidá se 10 ml ethylacetátu a směs se zfiltruje přes vrstvu celitu. Čirý roztok se promyje nasyceným vodným roztokem chloridu sodného a vysuší se síranem sodným. Pak se rozpouštědlo odpaří, čímž se získá odparek, obsahující směs C13-epimerů v poměru 4,5:1. Tato směs se čistí chromatografii na sloupci silikagelu, jako eluční činidlo se užije směs hexanu a ethylacetátu 1:1, čímž se získá 251 mg ^-epimeru a 55 mg 13a-epimeru karbonátu, zbaveného ochranné skupiny. Celkový výtěžek je 88 % .

13α-14β-hydroxy-10-deacetylbaccatin III, 1,14karbonát je amorfní bila pevná látka.

IR(KBr): 3520 (OH), 1834, 1709,1232,1103,1010, 854 cm' .

>H NMR (200 MHz, CDCls): δ = 8,03 (Bz AA), 7,60 (Bz, C), 7,50 (Bz, BB'), 6,27 (s, H-10), 5,92 (d, J = 6,7 Hz, H-2), 4,95 (br d, I = 8,2 Hz, H-20b), 4,85 (m, H-13), 4,77 (s, H-14), 4,42 (br t, I = 8,0 Hz, H-7), 4,02 (d, J - 6,7 Hz, H· 3) ’2 71 (m, H-6), 2,29 (s, OAc), 1,96 (s, H-18), 1,27 - 1,01 (m, H-16, H-17, H

19)· *·* · · · ·*« · ··· ·»»· · ·* • · · · · * · ·««· · « ·« * ··· *· * ·· * · ·· ♦· ·· » ··♦·

13a-14p-hydroxy-10-deacetylbaccatin III, 1,14karbonát je amorfní bílá pevná látka.

IR (KBr): 3520 (OH), 1834, 1709,1232,1103, 1010, 854 cm’¹.

'η NMR (200 MHz, CDClj): δ = 8,03 (Bz AA'), 7,60 (Bz, C), 7,50 (Bz, BB'), 6,27 (s, H-10), 5,92 (d, J = 6,7 Hz, H-2), 4,95 (br d, J = 8,2 Hz, H-20b), 4,80 (m, H-13), 4,77 (s, H-14), 4,42 (br t, I = 8,0 Hz, H-7), 4,02 (d, J = 6,7 Hz, H3), 2,71 (m, H-6), 2,29 (s, OAc), 1,96 (s, H-18), 1,27-1,01 (m, H-16, H-17, H19).

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Způsob výroby I4p-hydroxy-l, 14-karbonátdeacetylbaccatinu III, vyznačující se t i m, ze se

a) zavede ochranná skupina do poloh 7 a 10 v 10-deacetylbaccatinu III podle schématu

kde R a Ri se volí ze skupiny atom vodíku, Cl-C10alkyl nebo aryl, Cl-C10alkylkarbonyl nebo arylkarbonyl, trichloracetyl, Cl-C4trialkylsilyl, s výhodou znamenají symboly R a Ri v případě, že jsou stejné, trichloracetyl a v případě, že se od sebe liší, znamená R s výhodou trichloracetyl a Ri znamená acetyl nebo R znamena triethylsilyl nebo trimethylsilyl a R_x znamená acetyl,

b) uskuteční se dvoustupňová oxidace za získání derivátu oxidovaného v poloze 13 a hydroxyl ováného v poloze 14 podle schématu

• · · * · · ·

20 ·· ··

c) uskuteční se karbonace sousedních hydroxylových skupin v polohách 1 a 14 za vzniku 1,14-karbonátového derivátu podle schématu

d) redukuje se karbonylová skupina v poloze 13 podle schématu ^0R1 V; / TS ^0R / 0=/ 7^/__^HO-i 0 /acO >-q O /W^O » O M e) odstraní se ochranné skupiny v schématu °^R’ / TS ^cr HO'-/ --* ^H0 Ο θ ·$ / V P O í OR, L>* ^OR O /AcO —o ^0 polohách 7 a 10 podle OH Lx ^OH Q /AcO---Q
2. Způsob podle nároku 1,vyznačující se tím, že R a Ri jsou stejné a znamenají trichloracetyl nebo jsou odlišné a pak R znamená trichloracetyl a Ri znamená acetyl nebo R znamená triethylsilyl nebo trimethylsilyl a Ri znamená acetyl.
3. Způsob podle nároku 2,vyznačující se tím, že R i Ri znamenají trichloracetyl.
4. Způsob podle nároku 3,vyznačující se tím, že se ochrana hydroxylových skupin v polohách 7 a 10 uskuteční působením trichloracetylchloridu v methylenchloridu v přítomnosti triethylaminu a katalytického množství N,N-dimethylaminopyridinu.
5. Způsob podle některého z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že se oxidace hydroxylové skupiny v poloze 13 a hydroxylace v poloze 14 uskuteční působením oxidu manganičitého nebo oxidu vizmutičitého v rozpouštědle ze skupiny acetonitril, aceton nebo směs ethylacetátu a methylenchloridu.
6. Způsob podle některého z nároků 1 až 5, vyznačující se tím, že se karbonační stupeň pro hydroxylové skupiny v poloze 1 a 14 uskuteční působením fosgenu ve směsi methylenchloridu a toluenu v přítomnosti pyridinu.
7. Způsob podle některého vyznačující se 13-hydroxyskupiny uskuteční v methanolu.

z nároků 1 až 6, tím, že se redukce působením hydroborátu sodíku
8. Reakční meziprodukty ze skupiny:

13-dehydro-14β-hydroxy-10-deacetylbaccatin III, 1,14-karbonát -13 -dehydro- 7 -1 iethy1silylbaccat in 111, 13-dehydro-14p-hydroxy-7,10-bistrichloracetylbaccatin III, 1,14-karbonát.