CZ285155B6 - Peptidy s organoprotektivním účinkem, způsob jejich výroby a farmaceutické prostředky s jejich obsahem - Google Patents
Peptidy s organoprotektivním účinkem, způsob jejich výroby a farmaceutické prostředky s jejich obsahem Download PDFInfo
- Publication number
- CZ285155B6 CZ285155B6 CZ941622A CZ162294A CZ285155B6 CZ 285155 B6 CZ285155 B6 CZ 285155B6 CZ 941622 A CZ941622 A CZ 941622A CZ 162294 A CZ162294 A CZ 162294A CZ 285155 B6 CZ285155 B6 CZ 285155B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- pro
- peptide
- peptides
- leu
- gly
- Prior art date
Links
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 136
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title claims abstract description 91
- 230000000694 effects Effects 0.000 title abstract description 28
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 title 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 13
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 28
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 17
- APKRGYLBSCWJJP-FXQIFTODSA-N Pro-Ala-Asp Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O APKRGYLBSCWJJP-FXQIFTODSA-N 0.000 claims description 16
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 14
- MRYUJHGPZQNOAD-IHRRRGAJSA-N Pro-Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 MRYUJHGPZQNOAD-IHRRRGAJSA-N 0.000 claims description 11
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 11
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 10
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims description 10
- 108010065920 Insulin Lispro Proteins 0.000 claims description 8
- OGUUKPXUTHOIAV-SDDRHHMPSA-N Leu-Glu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N OGUUKPXUTHOIAV-SDDRHHMPSA-N 0.000 claims description 8
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 claims description 8
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 7
- MNZHHDPWDWQJCQ-YUMQZZPRSA-N Ala-Leu-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O MNZHHDPWDWQJCQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims description 6
- KKBWDNZXYLGJEY-UHFFFAOYSA-N Gly-Arg-Pro Natural products NCC(=O)NC(CCNC(=N)N)C(=O)N1CCCC1C(=O)O KKBWDNZXYLGJEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 claims description 6
- 108010090333 leucyl-lysyl-proline Proteins 0.000 claims description 6
- 108010077112 prolyl-proline Proteins 0.000 claims description 6
- DCBSZJJHOTXMHY-DCAQKATOSA-N Glu-Pro-Pro Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 DCBSZJJHOTXMHY-DCAQKATOSA-N 0.000 claims description 5
- 208000016222 Pancreatic disease Diseases 0.000 claims description 4
- 244000191761 Sida cordifolia Species 0.000 claims description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 4
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 claims description 4
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 claims description 4
- VXKCPBPQEKKERH-IUCAKERBSA-N Gly-Arg-Pro Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O VXKCPBPQEKKERH-IUCAKERBSA-N 0.000 claims description 3
- BEQGFMIBZFNROK-JGVFFNPUSA-N Gly-Glu-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)CN)C(=O)O BEQGFMIBZFNROK-JGVFFNPUSA-N 0.000 claims description 3
- DMKWYMWNEKIPFC-IUCAKERBSA-N Pro-Gly-Arg Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O DMKWYMWNEKIPFC-IUCAKERBSA-N 0.000 claims description 3
- UIMCLYYSUCIUJM-UWVGGRQHSA-N Pro-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1 UIMCLYYSUCIUJM-UWVGGRQHSA-N 0.000 claims description 3
- 208000034712 Rickettsia Infections Diseases 0.000 claims description 3
- 206010061495 Rickettsiosis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010043298 Testicular atrophy Diseases 0.000 claims description 3
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 3
- 108010029539 arginyl-prolyl-proline Proteins 0.000 claims description 3
- 201000010788 atrophy of testis Diseases 0.000 claims description 3
- 210000000777 hematopoietic system Anatomy 0.000 claims description 3
- 208000021267 infertility disease Diseases 0.000 claims description 3
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 3
- 108010087846 prolyl-prolyl-glycine Proteins 0.000 claims description 3
- 208000020016 psychiatric disease Diseases 0.000 claims description 3
- 230000019100 sperm motility Effects 0.000 claims description 3
- 231100001044 testicular atrophy Toxicity 0.000 claims description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 claims description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 claims description 3
- WXERCAHAIKMTKX-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asp-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O WXERCAHAIKMTKX-ZLUOBGJFSA-N 0.000 claims description 2
- PCIFXPRIFWKWLK-YUMQZZPRSA-N Ala-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N PCIFXPRIFWKWLK-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims description 2
- PBVLJOIPOGUQQP-CIUDSAMLSA-N Asp-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O PBVLJOIPOGUQQP-CIUDSAMLSA-N 0.000 claims description 2
- BKOIIURTQAJHAT-GUBZILKMSA-N Asp-Pro-Pro Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 BKOIIURTQAJHAT-GUBZILKMSA-N 0.000 claims description 2
- WDEHMRNSGHVNOH-VHSXEESVSA-N Gly-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)CN)C(=O)O WDEHMRNSGHVNOH-VHSXEESVSA-N 0.000 claims description 2
- DMHGKBGOUAJRHU-UHFFFAOYSA-N Ile-Arg-Pro Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)N1CCCC1C(O)=O DMHGKBGOUAJRHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- SOACYAXADBWDDT-CYDGBPFRSA-N Pro-Ile-Arg Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O SOACYAXADBWDDT-CYDGBPFRSA-N 0.000 claims description 2
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 claims description 2
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 claims description 2
- 230000009245 menopause Effects 0.000 claims description 2
- 108010020432 prolyl-prolylisoleucine Proteins 0.000 claims description 2
- 108010029020 prolylglycine Proteins 0.000 claims description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 claims description 2
- 102100021277 Beta-secretase 2 Human genes 0.000 claims 2
- 101710150190 Beta-secretase 2 Proteins 0.000 claims 2
- SCAKQYSGEIHPLV-IUCAKERBSA-N (4S)-4-[(2-aminoacetyl)amino]-5-[(2S)-2-(carboxymethylcarbamoyl)pyrrolidin-1-yl]-5-oxopentanoic acid Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O SCAKQYSGEIHPLV-IUCAKERBSA-N 0.000 claims 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims 1
- FANQWNCPNFEPGZ-WHFBIAKZSA-N Asp-Asp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O FANQWNCPNFEPGZ-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims 1
- BOJYMMBYBNOOGG-DCAQKATOSA-N Lys-Pro-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O BOJYMMBYBNOOGG-DCAQKATOSA-N 0.000 claims 1
- DBALDZKOTNSBFM-FXQIFTODSA-N Pro-Ala-Asn Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O DBALDZKOTNSBFM-FXQIFTODSA-N 0.000 claims 1
- 108010041407 alanylaspartic acid Proteins 0.000 claims 1
- 238000003975 animal breeding Methods 0.000 claims 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 10
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract description 6
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 abstract 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 32
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 20
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 17
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 15
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 12
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 11
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 10
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 10
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 9
- PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N Aniline Chemical compound NC1=CC=CC=C1 PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 description 8
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 description 8
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000001919 adrenal effect Effects 0.000 description 7
- -1 aliphatic amino acid Chemical class 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 6
- JUQLUIFNNFIIKC-YFKPBYRVSA-N L-2-aminopimelic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCCC(O)=O JUQLUIFNNFIIKC-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 5
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 5
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 5
- SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 2-aminopentanoic acid Chemical compound CCCC(N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 4
- 210000000013 bile duct Anatomy 0.000 description 4
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 4
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N tetrachloromethane Chemical compound ClC(Cl)(Cl)Cl VZGDMQKNWNREIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 4
- KWTSXDURSIMDCE-QMMMGPOBSA-N (S)-amphetamine Chemical compound C[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 KWTSXDURSIMDCE-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940025084 amphetamine Drugs 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 3
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 3
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003304 gavage Methods 0.000 description 3
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 3
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 3
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 3
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 3
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- OYIFNHCXNCRBQI-UHFFFAOYSA-N 2-aminoadipic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CCCC(O)=O OYIFNHCXNCRBQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000055 Corticotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 2
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- 125000000998 L-alanino group Chemical group [H]N([*])[C@](C([H])([H])[H])([H])C(=O)O[H] 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 206010027458 Metastases to lung Diseases 0.000 description 2
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RHQDFWAXVIIEBN-UHFFFAOYSA-N Trifluoroethanol Chemical compound OCC(F)(F)F RHQDFWAXVIIEBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 2
- HIMXGTXNXJYFGB-UHFFFAOYSA-N alloxan Chemical compound O=C1NC(=O)C(=O)C(=O)N1 HIMXGTXNXJYFGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical class [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- RCTYPNKXASFOBE-UHFFFAOYSA-M chloromercury Chemical compound [Hg]Cl RCTYPNKXASFOBE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- IDLFZVILOHSSID-OVLDLUHVSA-N corticotropin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO)C1=CC=C(O)C=C1 IDLFZVILOHSSID-OVLDLUHVSA-N 0.000 description 2
- 229960000258 corticotropin Drugs 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- MKRTXPORKIRPDG-UHFFFAOYSA-N diphenylphosphoryl azide Chemical compound C=1C=CC=CC=1P(=O)(N=[N+]=[N-])C1=CC=CC=C1 MKRTXPORKIRPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 2
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 2
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 2
- 229910000040 hydrogen fluoride Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N palladium;triphenylphosphane Chemical compound [Pd].C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 231100000398 testicular damage Toxicity 0.000 description 2
- 210000005239 tubule Anatomy 0.000 description 2
- 230000036269 ulceration Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DNXIKVLOVZVMQF-UHFFFAOYSA-N (3beta,16beta,17alpha,18beta,20alpha)-17-hydroxy-11-methoxy-18-[(3,4,5-trimethoxybenzoyl)oxy]-yohimban-16-carboxylic acid, methyl ester Natural products C1C2CN3CCC(C4=CC=C(OC)C=C4N4)=C4C3CC2C(C(=O)OC)C(O)C1OC(=O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 DNXIKVLOVZVMQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KNCMKWVOMRUHKZ-UHFFFAOYSA-N 2,5-dimethylhex-3-ene Chemical group CC(C)C=CC(C)C KNCMKWVOMRUHKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 208000020576 Adrenal disease Diseases 0.000 description 1
- 108010082126 Alanine transaminase Proteins 0.000 description 1
- 206010002961 Aplasia Diseases 0.000 description 1
- HPNDBHLITCHRSO-WHFBIAKZSA-N Asp-Ala-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O HPNDBHLITCHRSO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 1
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 1
- 206010003694 Atrophy Diseases 0.000 description 1
- 206010048962 Brain oedema Diseases 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 1
- 241001445332 Coxiella <snail> Species 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N L-2-aminopentanoic acid Chemical compound CCC[C@H](N)C(O)=O SNDPXSYFESPGGJ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- 238000011785 NMRI mouse Methods 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 206010033627 Pancreatic injury Diseases 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 206010048988 Renal artery occlusion Diseases 0.000 description 1
- LCQMZZCPPSWADO-UHFFFAOYSA-N Reserpilin Natural products COC(=O)C1COCC2CN3CCc4c([nH]c5cc(OC)c(OC)cc45)C3CC12 LCQMZZCPPSWADO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QEVHRUUCFGRFIF-SFWBKIHZSA-N Reserpine Natural products O=C(OC)[C@@H]1[C@H](OC)[C@H](OC(=O)c2cc(OC)c(OC)c(OC)c2)C[C@H]2[C@@H]1C[C@H]1N(C2)CCc2c3c([nH]c12)cc(OC)cc3 QEVHRUUCFGRFIF-SFWBKIHZSA-N 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 1
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- PQLVXDKIJBQVDF-UHFFFAOYSA-N acetic acid;hydrate Chemical compound O.CC(O)=O PQLVXDKIJBQVDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N amantadine Chemical compound C1C(C2)CC3CC2CC1(N)C3 DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003805 amantadine Drugs 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001430 anti-depressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000000935 antidepressant agent Substances 0.000 description 1
- 229940005513 antidepressants Drugs 0.000 description 1
- 150000001510 aspartic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037444 atrophy Effects 0.000 description 1
- IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N azide group Chemical group [N-]=[N+]=[N-] IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 208000006752 brain edema Diseases 0.000 description 1
- 201000008275 breast carcinoma Diseases 0.000 description 1
- OZVBMTJYIDMWIL-AYFBDAFISA-N bromocriptine Chemical compound C1=CC(C=2[C@H](N(C)C[C@@H](C=2)C(=O)N[C@]2(C(=O)N3[C@H](C(N4CCC[C@H]4[C@]3(O)O2)=O)CC(C)C)C(C)C)C2)=C3C2=C(Br)NC3=C1 OZVBMTJYIDMWIL-AYFBDAFISA-N 0.000 description 1
- 229960002802 bromocriptine Drugs 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 230000005595 deprotonation Effects 0.000 description 1
- 238000010537 deprotonation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000003291 dopaminomimetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000000816 effect on animals Effects 0.000 description 1
- 230000000797 effect on infection Effects 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 208000010227 enterocolitis Diseases 0.000 description 1
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 150000002307 glutamic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 1
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 1
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000266 injurious effect Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L mercury dichloride Chemical compound Cl[Hg]Cl LWJROJCJINYWOX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N methyl 1-acetylthieno[3,2-c]pyrazole-5-carboxylate Chemical compound CC(=O)N1N=CC2=C1C=C(C(=O)OC)S2 XELZGAJCZANUQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000013421 nuclear magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000024691 pancreas disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002990 parathyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- BJOIZNZVOZKDIG-MDEJGZGSSA-N reserpine Chemical compound O([C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H]2C[C@@H]3C4=C([C]5C=CC(OC)=CC5=N4)CCN3C[C@H]2C1)C(=O)OC)OC)C(=O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 BJOIZNZVOZKDIG-MDEJGZGSSA-N 0.000 description 1
- 229960003147 reserpine Drugs 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- MDMGHDFNKNZPAU-UHFFFAOYSA-N roserpine Natural products C1C2CN3CCC(C4=CC=C(OC)C=C4N4)=C4C3CC2C(OC(C)=O)C(OC)C1OC(=O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 MDMGHDFNKNZPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 231100000161 signs of toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000935 solvent evaporation Methods 0.000 description 1
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 1
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000006190 sub-lingual tablet Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000009182 swimming Effects 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000002381 testicular Effects 0.000 description 1
- 229940061994 testosterone 30 mg Drugs 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N triflic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 125000002987 valine group Chemical group [H]N([H])C([H])(C(*)=O)C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 1
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 1
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 1
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/24—Antidepressants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/26—Psychostimulants, e.g. nicotine, cocaine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/12—Antihypertensives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Neurology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Obesity (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Syntetické peptidy obsahující pouze 8 až 15 zbytků aminokyselin v peptidovém řetězci, s molekulovou hmotností v romezí 900 až 1600, mají biologickou účinnost, srovnatelnou s účinností přírodní organoprotektivní sloučeniny BPC, současně však mají zvýšenou selektivitu. Způsob výroby těchto peptidů je snadný a ekonomický, mimoto peptidy vyvolávají menší množství vedlejších reakcí než přírodní látka vzhledem k obsahu menšího počtu zbytků aminokyselin v molekule. Farmaceutické prostředky s obsahem těchto peptidů jsou vhodné pro použití různých onemocnění a poškozeních organismu.ŕ
Description
Použití peptidů s organoprotektivním účinkem pro výrobu farmaceutických prostředků
Oblast techniky
Vynález se týká použití peptidů s organoprotektivním účinkem s vysokou biologickou účinností téhož typu jako u přírodní sloučeniny BPC, avšak s kratším řetězcem, pro výrobu farmaceutických prostředků.
Dosavadní stav techniky
Biologicky účinná bílkovina s organoprotektivním účinkem, izolovaná z lidského nebo živočišného organismu a nazvaná BPC (Body protecting Compund, sloučenina, chránící tkáně) byla popsána v EP 432 400 a mimoto také v publikaci P. Sikiric a další, Exp. Clin. Gastroenterol., 1, 15-26, 1991. Tato bílkovina má vysokou molekulovou hmotnost přibližně 40 000 ± 5000 a pouze částečně určenou strukturu. Sloučenina má široké spektrum biologických účinků, poskytuje například ochranu proti tvorbě vředů, ochranu jatemí tkáně, chrání proti virům, brání vzniku otoků, obecně brání tvorbě zánětlivé reakce, poskytuje ochranu proti vzniku zhoubného bujení a podobně. Látka je navrhována pro použití k léčení uvedených chorobných stavů a mimoto také při léčení různých onemocnění a poruch nervového systému, poruch dopaminergního původu, při léčení stavů po chirurgickém zákroku, v zubním lékařství, při neplodnosti a u různých chorob ve veterinárním lékařství. Uvedené široké spektrum účinku však může být také důsledkem dosud nedostatečně stanovené struktury nebo dokonce nedostatečné čistoty nebo homogenity bílkoviny BPC, tak jak byla izolována.
V naší zveřejněné patentové přihlášce PV 205-94, u níž v současné době rovněž probíhá řízení, je popsána skupina nových peptidů s organoprotektivním účinkem. Tyto peptidy je možno použít pro výrobu farmaceutických prostředků, určených pro léčení různých typů poškození tkáně, například stresem, úrazem, zánětem, šokem, tvorbou vředů a podobnými stavy.
Nyní bylo neočekávaně zjištěno, že uvedená skupina peptidů, která je velmi výhodná zejména pro svůj krátký řetězec, takže nevyvolává značnější vedlejší účinky, má ještě další nepředpokládané biologické vlastnosti. Na jejich základě je možno uvedenou skupinu peptidů použít pro výrobu farmaceutických prostředků, určených pro léčení řady dalších onemocnění, například onemocnění jater a slinivky, atrofie varlat, léčení cukrovky a podobně, jak bude dále podrobněji vysvětleno.
Podstata vynálezu
V poslední době byla připravena skupina biologicky vysoce účinných peptidů s obdobným účinkem a velmi dobře definovanou strukturou.
Uvedené peptidy lze využít k léčebným účelům. Vynález tvoří použití peptidů s organotektivním účinkem, obsahujících 8 až 15 zbytků aminokyselin, obecného vzorce
Xaa Zaa Pro Pro Pro Xaa Yaa Pro Ala Asp Zaa Ala Xaa Xaa Xaa
10 15 kde
- 1 CZ 285155 B6
Xaa znamená zbytek neutrální alifatické aminokyseliny jako Ala, bAla, Leu, Ile, Gly; Val, Nle, Nva,
Yaa znamená zbytek bazické aminokyseliny, jako Lys, Arg, Orgn, His,
Zaa znamená zbytek kyselé aminokyseliny, jako Glu, Asp, Aad nebo Apm, přičemž alespoň jeden ze zbytků Xaa nebo Zaa může být vynechán a současně mohou být vynechány zbytky v polohách 10 až 15, molekula peptidu je popřípadě cyklizována amidovou vazbou mezi prvním a posledním zbytkem aminokyseliny, pro výrobu farmaceutických prostředků pro léčení poruch a onemocnění jater a slinivky, atforie varlat a poruch motility spermií, poruch plodnosti, ke zlepšení chovu a množení zvířat, k potlačení infekce rickettsiemi, k léčení stavů po thyreoparathyreoidektomii, k léčení cukrovky, poruch nadledvinek, poruch krvetvorného systému, poruch krevní srážíivosti a doby krvácení, poruch po kastraci a po menopauze, k léčení ischemického a toxického poškození, psychiatrických poruch, zvýšeného krevního tlaku, odchylek od tělesné teploty, bolestivých stavů a nádorového bujení.
Zbytek Xaa, YAA a Zaa, které je v uvedených peptidech možno použít, budou uvedeny podle skupiny pro jednotlivé symboly v následující tabulce I.
Vzhledem ktomu, že je možno použít i některé méně známé zbytky, uvádíme význam jejich zkratek:
bAla kyselina beta-aminopropionová
Nva nor-valin
Apm kyselina 2-aminopimelová
Aad kyselina 2-aminoadipová.
Tabulka I
| Zbytek | Substituent |
| Xaa | neutrální alifatická aminokyselina: Ala, bAla, Leu, Ile, Gly, Val, Nle, Nva |
| Yaa | bazická aminokyselina: Lys, Arg, Om, His |
| Za | kyselá aminokyselina: Glu, Asp, Aad, Apm |
Výhodnými peptidy jsou následující sloučeniny:
Řetězec č. 1
Leu Glu Pro Pro Pro Gly Lys Pro Ala Asp Asp Ala Leu Gly Val 15 10 15
-2 CZ 285155 B6
Řetězec č. 2
Gly Glu Pro Pro Pro Gly Lys Pro Ala Asp Asp Ala Gly Leu Val
| 1 5 | 10 | 15 |
| Řetězec č. 3 | ||
| Leu Glu Pro Pro Pro Leu Lys Pro Ala Asp Asp Ala Leu Gly Val | ||
| 1 5 | 10 | 15 |
Podle dalšího provedení vynálezu tvoří součást podstaty vynálezu analogické peptidy s amidovým zakončením nebo s koncovou karboxyskupinou na C-zakončení, tyto peptidy mají svrchu uvedený strukturní vzorec, přičemž alespoň jeden a nejvýše sedm zbytků aminokyselin mezi polohami 1 až 15 je vynecháno a alespoň jeden ze zbývajících zbytků aminokyselin může být nahrazen podle schématu, které bylo uvedeno v tabulce I.
Výhodnými peptidy podle tohoto provedení mohou být následující sloučeniny:
Řetězec č. 4
Leu Glu Pro Pro Pro Leu Lys Pro Ala Asp Ala Leu Gly Val
1014
Řetězec č. 5
Gly Glu Pro Pro Pro Gly Lys Pro Ala Asp Ala Gly Leu Val
5 1014
Řetězec č. 6
Glu Pro Pro Pro Leu Lys Pro Ala
158
Řetězec č. 7
Asp Pro Pro Pro Ile Arg Pro Ala Asp
59
Řetězec č. 8
Glu Pro Pro Pro Leu Lys Pro Ala Asp
59
Podle dalšího možného provedení tvoří součást podstaty vynálezu peptidy, které odpovídají svrchu uvedenému strukturnímu vzorci a v nichž může být alespoň jeden ze zbytků aminokyselin vynechán a alespoň jeden ze zbývajících zbytků aminokyselin může být nahrazen tak, jak bylo svrchu uvedeno v tabulce I, přičemž tyto peptidy jsou transformovány na cyklickou formu tvorby nové vazby CO-NH mezi prvním a posledním zbytkem aminokyseliny v molekule. Výhodnými peptidy podle tohoto provedení jsou následující látky:
Řetězec č. 9
Leu Glu Pro Pro Pro Leu Lys Pro Ala Asp Ala Leu Gly Va
I 2 5 10 13
-3 CZ 285155 B6
Řetězec č. 10
Gly Glu Pro Pro Pro Gly Arg Pro Ala Asp
I 2 5 9
Bylo prokázáno, že v případě použití svrchu popsaných peptidů je možno prokázat biologickou účinnost, která je srovnatelná nebo je ještě vyšší než biologická účinnost známé bílkoviny BPC.
Dále budou uvedeny farmakologické pokusy s peptidy podle vynálezu na řadě běžně používaných modelů in vitro i in vivo, na základě těchto pokusů byly prokázány následující farmakologické účinky peptidů podle vynálezu:
1) Ochranný účinek na játra a na slinivku břišní
Ochranný účinek nově připravených peptidů s řetězci č. 2, 3, 4, 6 byl srovnáván s ochranným účinkem standardních sloučenin, užívaných pro obdobné účely (bromocriptin, amantadin, somatostatin) na různých experimentálních modelech poškození jater a slinivky břišní u krys. Šlo o podvázání žlučovodu na 24 hodin, o podvázání žlučovodu a jatemí tepny na 24 hodin, o stres, trvající 48 hodin a o aplikaci tetrachlormethanu. Bylo prokázáno, že uvedené peptidy, podané v množství 10 mikrogramů až 10 ng/kg hmotnosti do žaludku nebo intraperitoneálně významně chrání játra i slinivku břišní proti nekrose, nedochází také k tukovým změnám těchto orgánů u zvířat po podvázání žlučovodu na 24 hodiny, po podvázání žlučovodu a jatemí tepny na 24 hodin, po stresu v trvání 48 hodin ani po aplikaci tetrachlormethanu. Biochemické hodnoty pro bilirubin, SGOT a SGPT byly zcela v souladu s prokázanými makroskopickými a mikroskopickými údaji při uvedeném hodnocení.
2) Vliv na poškození ledvin
a) Jednostranné vyjmutí ledviny
V pokusu byly užity krysy Kmene Wistar, šlo o bílé krysy obojího pohlaví s hmotnosti 190 až 250 g. Na jedné straně byla odstraněna ledvina a v důsledku tohoto zákroku bylo možno pozorovat zvýšení hmotnosti zbývající ledviny u kontrolních zvířat i u skupin, jimž byly podány peptidy s řetězcem 2, 3, 4 nebo 6 v dávce 10 mikrogramů/kg hmotnosti intraperitoneálně 1 hodinu před chirurgickým zákrokem. V případě skupin, jimiž byly podány peptidy, bylo možno pozorovat pomalejší vzestup hmotnosti zbývající ledviny.
U obou skupin byly srovnávány také biochemické parametry. Podle dosažených výsledků došlo po podání všech použitých peptidů ke zlepšení funkce zbývající ledviny.
b) Podání gantamicinu
K pokusům byly použity bílé krysí samice kmene Wistar. Poškození tubulů ledvin byla vyvolána podáním gantamicinu, tato látka byla podána v dávce 40 mg/kg jednou denně po dobu 30 dnů. Po posledním podání této látky byla zvířata po pěti dnech usmrcena. U kontrolních skupin bylo možno pozorovat významné poškození tubulů ledvin, kdežto u skupin, které byly léčeny svrchu uvedenými peptidy bylo možno prokázat mikroskopicky statisticky významně nižší poškození než u kontrolních skupin.
c) Chlorid rtuťnatý
K pokusu byly použity bílé krysy kmene Wistar. Chlorid rtuťnatý byl podán v dávce 2 mg/kg hmotnosti nitrožilně a peptidy s řetězcem 2, 3, 4 a 6 byly podány v dávce 20 mikrogramů/kg hmotnosti jednu hodinu před podáním chloridu rtuťnatého. U všech skupin, které byly ošetřeny
-4CZ 285155 B6 podáním peptidu podle vynálezu, bylo možno ve srovnání se stejnými hodnotami pro kontrolní skupiny prokázat biochemicky i mikroskopicky ochranný účinek.
3) Vliv na poškození varlat
Vliv peptidů s řetězcem 2, 3, 4 a 6 na poškození varlat bylo sledováno po podání ketoconasolu v dávce 24 mg/kg žaludeční sondou, po podání testosteronu 30 mg/kg intraperitoneálně nebo po ozáření při použití 6 Gy. Peptidy s uvedenými řetězci byly podány jednu hodinu před podáním poškozující látky nebo před ozářením, pro všechny tyto peptidy bylo možno prokázat ochranný účinek.
4) Plodnost/vliv na rozmnožování zvířat
a) Peptidy s řetězcem č. 2, 3, 4 a 6 a plodnost
Byl pozorován vliv na oligoasthenospermii. Pokusy byly provedeny u deseti mužů ve stáří 30 až 40 let, u nichž bylo prokázáno uvedené onemocnění. U těchto nemocných byl odebrán ejekulát po 3 až 4 dnech abstinence. Po zkapalnění 30 minut bylo k 0,5 ml tohoto materiálu přidáno vždy 0,5 ml prostředí, kontrolní prostředí bylo tvořeno prostředím HAM-F 10 s 10 % deaktivovaného chordální séra. Experimentální prostředí obsahovalo mimoto ještě dva nebo čtyři mikrogramy/ml sloučeniny BPC. Po době pohybu 90 minut při teplotě 37 °C v atmosféře s obsahem 5 % oxidu uhličitého v komůrkách pro toto stanovení (Horwell Fertility Chamber) byl stanoven počet progresivně putujících, na místě pohyblivých a nepohyblivých spermatozoí v 1 ml ejekulátu. Předběžné výsledky neprokázaly žádný průkazný vliv na motilitu spermatozoí při použití nižších koncentrací uvedených peptidů. Avšak při použití vyšších koncentrací, 4 mikrogramy těchto peptidů na ml prostředí došlo ke statisticky významnému zvýšení podílu pohyblivých částic ve srovnání s kontrolními vzorky.
b) Peptidy s řetězcem č. 2, 3, 4 a 6 a reprodukční pochody
Uvedené peptidy byly zkoumány u myší, které již předtím byly alespoň třikrát březí. 20 dnů po konci poslední laktace byla zvířata připuštěna. Uvedené peptidy byly podávány v dávce 10 mikrogramů/kg hmotnosti intraperitoneálně jednou denně po celou dobu březosti, to znamená 19 až 21 dnů a po celou dobu laktace, následující tři týdny. Kontrolním skupinám byl současně podáván stejný objem fyziologického roztoku chloridu sodného. Pak byl zaznamenám počet mláďat na jednu samici a hmotnost každého mláděte.
Při pečlivé statistické analýzy získaných výsledků bylo možno prokázat statisticky významné zvýšení počtu mláďat na jednu samici, současně však bylo možno prokázat, že neočekávaně nedochází k žádnému rozdílu v tělesné hmotnosti v žádném ze zkoumaných časových intervalů. Všechny samice byly po ustání laktace na 25 dnů chovány odděleně, pak byly opět připuštěny a byla zkoumána jejich pátá březost a její výsledky.
Ve srovnání s kontrolní skupinou bylo možno pozorovat u všech ošetřených skupin zvýšení fertility a také zvýšenou schopnost laktace po podání všech čtyř svrchu uvedených peptidových řetězců.
Je nutno uvést, že zmíněné peptidy mohou zlepšit fertilitu i u poměrně starých myší. Je tedy možno uzavřít, že získané výsledky jsou v souladu s celkovým příznivým účinkem peptidů a s údaji in vitro, které byly získány při použití lidského spermatu.
- 5 CZ 285155 B6
c) Množení zvířat v komerčním měřítku
1419 zdravých vepřů (z celkového množství 4306 vepřů) bylo ihned po vrhu podáno 10 mikrogramů peptidů s řetězcem č. 2, 3, 4 nebo 6, dalším 1440 vepřům byly peptidy podány ve 13. dnu života jednu hodinu před kastrací, kdežto zbývajícím 1477 vepřům bylo jako obvykle podáno pouze železo. Pak byly po 4 týdny sledovány známky poškození, otok, mortalita, tělesná hmotnost a spotřeba potravy. V případě použití peptidů dochází po jediném podání ke statisticky významnému poklesu jakéhokoliv poškození u skupin s podáním peptidů těsně po vrhu a k významnému snížení rozsahu poškození u skupin, jimž byly peptidy podány těsně před kastrací. U zvířat, jimž byly podávány peptidy, bylo možno pozorovat tutéž hmotnost při významně nižší spotřebě krmivá. Pokud jde o vliv na průběh infekce, byla sledována u 40 kojených selat ve stáří 28 dnů infekce způsobená E. coli. V průběhu vzniklé enterokolitidy byly peptidy podávány 20 zvířatům v dávce 10 mikrogramů/kg hmotnosti nitrosvalově. Po dalším měsíci bylo možno prokázat statisticky významné snížení počtu uhynulých selat ve skupinách, jimž byly podávány peptidy podle vynálezu.
V dalším pokusu bylo sledováno uhynutí zvířat v průběhu prvního týdne u celkového počtu 1200 zdravých selat. 400 zvířat obdrželo peptidy okamžitě po vrhu navíc k běžnému podání železa. U zvířat, jimž byly peptidy podány v dávce 10 mikrogramů/kg hmotnosti nitrosvalově bylo možno prokázat statisticky významné snížení počtu uhynulých zvířat ve srovnání s kontrolními skupinami.
5) Vliv na chování podání amfetaminu
Vliv peptidů s řetězcem č. 2, 3, 4 a 6 byl sledován po podání dávky 10 mikrogramů/kg nebo lOng/kg hmotnosti intraperitoneálně 5 minut před podáním nebo současně s podáním amfetaminu. U skupin, jimž byly podány uvedené peptidy, bylo možno pozorovat statisticky významný pokles poruch chování po podání amfetaminu ve srovnání s neléčenými kontrolními skupinami.
6) Doba krvácení
Účinek peptidů s řetězcem č. 2, 3, 4 a 6 byl sledován při provádění obvyklých zkoušek na krvácení u myší a u krys, šlo o naříznutí ocasu po podání nebo bez podání heparinu, heparin byl podán v dávce 1000 MJ/kg podkožně 3 hodiny před vyvoláním krvácení. Zkoumané peptidy byly podávány v dávce 10 mikrogramů nebo lOng/kg intraperitoneálně současně s vyvoláním krvácení. U všech zvířat, která byla vyléčena podáním peptidů podle vynálezu, bylo možno prokázat statisticky významné zkrácení doby krvácení ve srovnání s neléčenými kontrolními skupinami.
7) Vliv na důsledky kastrace
Byl proveden modifikovaný postup metodou Allen-Doisy. Byly podány různé dávky 10 mikrogramů nebo 10 ng/kg intraperitoneálně v jediném podání nebo jednou denně jako předběžné nebo následné ošetření. U skupin, které byly léčeny podáním peptidů podle vynálezu bylo možno pozorovat zábranu nebo zlepšení nepříznivých důsledků kastrace, jako jsou atrofie poševní výstelny nebo osteoporóza.
8) Zvýšený krevní tlak
Zvýšený krevní tlak byl vyvolán uzávěrem ledvinové tepny na jedné straně. Po 10 dnech byly zvířatům podány peptidy podle vynálezu s řetězcem 2, 3, 4 nebo 6 v dávce 10 mikrogramů nebo 10 ng/kg hmotnosti intraperitoneálně nebo byl u kontrolních skupin podán fyziologický roztok chloridu sodného, podání bylo v jedné dávce nebo kontinuálně. U skupin, které byly léčeny
-6CZ 285155 B6 podáním peptidu podle vynálezu, bylo možno pozorovat statisticky významný pokles zvýšených hodnot krevního tlaku ve srovnání s kontrolními skupinami.
9) Vliv na pokusně vyvolanou cukrovku
Bílí krysí samci kmene Wistar s hmotností 175 až 230 g byli užiti při pokusu, v němž byla cukrovka vyvolána podáním straptozotocinu nebo alloxanu. Peptidy s řetězcem č. 2, 3, 4 nebo 6 byly podány v dávce 10 nebo 100 mikrogramů/kg. Po jejich podání došlo ke statisticky významnému opoždění vzniku cukrovky u zvířat, jimž byl podáván straptozotocin. Mimoto byla statisticky významně prodloužena doba přežití u těchto zvířat.
10) Vliv na thyreoparathyreoidektomii
U krys kmene Wistar byla úplně odstraněna štítná žláza spolu s příštítnými tělísky. Pak byly krysám podány peptidy podle vynálezu s řetězcem 2, 3, 4 nebo 6 v dávce 10 ng/kg hmotnosti intraperitoneálně nebo bylo podáno 5 ml fyziologického roztoku chloridu sodného na kg hmotnosti intraperitoneálně, jednorázově nebo opakovaně. U skupin, jimž byly podány peptidy podle vynálezu, došlo k podstatnému snížení důsledků odstranění uvedených žláz.
11) Podvázání krkavice
Zvířata byla usmrcena 3 hodiny po podvázání obou krkavic. Jednu hodinu předtím byly všem zvířatům podány peptidy podle vynálezu s řetězcem č. 2, 3, 4 nebo 6 v dávce 10 ng/kg hmotnosti intraperitoneálně nebo bylo podáno 5 ml fyziologického roztoku chloridu sodného na kg hmotnosti intraperitoneálně. U skupin, léčených podáním peptidů podle vynálezu bylo možno prokázat významně menši otok mozku než u kontrolních skupin.
12) Nadledvinky
Aby bylo možno prokázat vliv peptidů podle vynálezu na poškození nadledvinek, byl zvířatům podáván anilin 7 dnů v dávce 300 mg/kg podkožně. Zvířatům byly současně podávány peptidy podle vynálezu s řetězcem č. 2, 3, 4 nebo 6 v dávce 10 mikrogramů nebo 10 ng/kg hmotnosti intraperitoneálně nebo bylo podáno 5 ml fyziologického roztoku chloridu sodného na kg hmotnosti intraperitoneálně. Pak byla stanovena hmotnost nadledvinek a mikroskopické zněny těchto orgánů. Ve srovnání s kontrolní skupinou, jíž byl podáván pouze anilin, došlo u skupin, jimž byly podávány peptidy podle vynálezu ke statistickému snížení vzestupu hmotnosti nadledvin po podání anilinu u obou použitých dávek. Mikroskopická ochrana tkáně nadledvin byla závislá na dávce podávaného peptidu. Jak je všeobecně uznáváno, jsou poruchy, vyvolané anilinem ve vztahu k hypersekreci hormonu ACTH, a skutečně bylo možno prokázat vztah mezi sledovanými peptidy a ACTH. Tato skutečnost je podporována také tím, že bylo možno prokázat tutéž hmotnost nadledvin u skupin, léčených peptidy podle vynálezu a u zdravých kontrolních skupin.
Mimoto byla zvířata podrobena na 48 hodin stresu, při němž nebyla podávána potrava a byl omezen pohyb, před pokusem byly podány peptidy podle vynálezu v dávce 10 mikrogramů nebo 10 ng/kg hmotnosti intraperitoneálně nebo žaludeční sondou. Pokles zvýšené hmotnosti nadledvin u zvířat, jimž byly podávány peptidy, byl v souladu s odpovídajícím mikroskopickým pozorováním.
13) Poruchy tělesné teploty
Zvýšení tělesné teploty bylo vyvoláno podáním roztoku kvasinek v dávce 400 mg/kg podkožně, pokles teploty byl vyvolán ponořením do chladné vody s teplotou 4 °C nebo podáním reserpinu v dávce 5 mg/kg intraperitoneálně. Peptidy podle vynálezu s řetězcem 2, 3,4 nebo 6 byly podány
- 7 CZ 285155 B6 podkožně nebo intraperitoneálně v dávce 10 ng/kg jak v případě zvýšené, tak v případě snížené tělesné teploty, v obou případech došlo k úpravě teploty na normální hodnoty.
14) Vliv na krvetvorbu
Bílým myším byly injekčně podány cytostatické látky endoxan, vincristin, adriablastin nebo cytosinarabinosid v dávkách LD50. Jednu hodinu před podáním těchto sloučenin byly zvířatům podány peptidy podle vynálezu s řetězcem č. 2, 3, 4 nebo 6 v dávce 10 mikrogramů, kdežto kontrolním zvířatům byl podán stejný objem fyziologického roztoku chloridu sodného. Zvířata byla po skupinách usmrcena třetího, pátého, sedmého a jedenáctého dne po začátku pokusu. Pak byly stanoveny obvyklé hodnoty v krvi (červené krvinky, hemoglobin, počet bílých krvinek, absolutní počet neutrofilů, mimoto byly stanoveny základní hodnoty pro kostní dřeň, byla provedena cytologie a histologie jater a sleziny.
Ve třetím dnu pokusu nebylo možno pozorovat žádné rozdíly pro jednotlivé skupiny, zejména pokud jde o počet leukocytů, červených krvinek a neutrofilů, avšak zachovaná krvetvorba v kostní dřeni u zvířat, léčených peptidy podle vynálezu, byla v silném kontrastu s aplasií, pozorovanou u kontrolní skupiny.
Počet neutrofilních buněk u leukocytů byl statisticky významně zvýšen u léčených zvířat od pátého dne a do sedmého dne byly uchovány normální hodnoty, kdežto u kontrolní skupiny nebylo možno pozorovat návrat k normálním hodnotám před jedenáctým dnem.
15) Snížení pocitu bolesti
Bolest byla vyvolána intraperitoneálním podáním množství 0,2 ml/myš, podán byl dvouprocentní roztok síranu hořečnatého nebo 0,6% roztok kyseliny octové. Mimoto byly podány peptidy podle vynálezu s řetězcem 2, 3, 4 nebo 6 v dávce 10 mikrogramů nebo 10 ng/kg hmotnosti intraperitoneálně, a to současně s látkou, vyvolávající pocit bolesti nebo 30 minut před jejím podáním. Podání peptidů podle vynálezu statisticky snížilo dobu trvání bolestivých křečí ve srovnání s kontrolními skupinami.
16) Infekce, vyvolaná Rickettsiemi
0,2 ml suspenze Coxiella bumetti, 10-9, se vstřikne do vajec. Do vajec se rovněž vstřiknou peptidy podle vynálezu s řetězcem 2, 3, 4 nebo 6 v dávkách 1 pg, 10 pg, 100 pg nebo 1 ng. Je možno pozorovat, že doba přežívání je u ošetřených vajec statisticky významně vyšší než u vajec kontrolních.
17) Účinek na nádorové buňky
a) Dvě buněčné linie, L-924 a melanomová linie B-16 byly pěstovány in vitro za standardních podmínek. Rovněž in vitro byl sledován vliv peptidů s řetězcem 2, 3, 4 nebo 6 na růst uvedených buněčných kultur. Dva dne po založení buněčných kultur byly uvedené peptidy přidávány v koncentraci 3%, dávka 0,1 ml roztoku. Po 3 dnech byl stanoven počet buněk v kultuře. Výsledky prokázaly inhibiční účinek použitých peptidů na melanomové buňky B-16.
b) Ehrlichův ascitický tumor EAT je nádor, který může růst u všech kmenů myší, a to jako ascitický nebo jako pevný nádor v závislosti na cestě podání nádorových buněk. Byl zkoumán vliv inkubace buněk EAT s peptidy s řetězcem 2, 3, 4 nebo 6 na dobu přežívání myší, jimž byl uvedený buněčný materiál vstříknut podkožně nebo intraperitoneálně. Zvířata byla pozorována po dobu 45 dnů. Kontrolním myším, 15 myším samců kmene NMRI bylo podáno 0,4 x 106 buněk EAT. Před injekcí byly nádorové buňky inkubovány 1 hodinu při teplotě 4 °C ve fyziologickém
- 8 CZ 285155 B6 roztoku chloridu sodného. Objem vstřiknutého materiálu byl 0,2 ml. Průměrná doba přežití u této skupiny myší byla 36 dnů a pouze 3 myši z 15 přežily až do doby 45 dnů.
V pokusné skupině bylo rovněž použito 15 myších samců kmene NMRI, zvířatům byla podána stejná dávka nádorových buněk ve stejném objemu, avšak buněčný materiál byl předběžně inkubován v roztoku s obsahem peptidů podle vynálezu v koncentraci 2 mikrogramy/ml roztoku.
V této skupině uhynuly v době 45 dnů pouze dvě z 15 myší, všechny další myši žily déle než 45 dnů. Rozdíl mezi kontrolní a pokusnou skupinou byl statisticky významný při p nižším než 0,01. Stejného výsledku bylo dosaženo v případě, že v průběhu téhož pokusu byly buňky EAT vstřiknuty intraperitoneálně místo podkožně.
c) Myši byly užity také pro sledování účinků peptidu podle vynálezu se řetězcem 2, 3, 4 nebo 6, v dávce 10 mikrogramů na kg hmotnosti intraperitoneálně v případě plicních metastáz, které byly vyvolány injekčním podáním buněk melanomu nebo aplastického karcinomu mléčné žlázy. Ve skupinách léčených podáním peptidů podle vynálezu bylo možno prokázat statisticky významné snížení počtu plicních metastáz ve srovnání s kontrolní skupinou.
Na základě svrchu uvedených údajů je možno uzavřít, že peptidy podle vynálezu mají protinádorovou účinnost a na základě této účinnosti jsou schopné prodloužit dobu přežívání u živočichů s nádorovým onemocněním.
18) Účinnost proti depresi
Aby bylo možno prokázat antidepresivní účinnost peptidů podle vynálezu, byl použit test s nuceným plaváním, popsaným v publikaci Porsolt a další, Eur. J. Pharmacol., 47, 379-391, 1978.
Krysí samci kmene Wistar s tělesnou hmotností 180 až 240 g byli užiti k uskutečnění zkoušek na depresi. Peptid podle vynálezu s řetězcem č. 4 byl podán způsobem, uvedeným v publikaci. Kontrolním zvířatům byl podán fyziologický roztok chloridu sodného, stanovení bylo prováděno 5 minut a pak byla vypočítána doba nepohyblivosti. Tato doba byla v kontrolní skupině průměrně 150 sekund, kdežto ve skupině ošetřených zvířat byla tato hodnota v rozmezí pouze 60 až 70 sekund. Byla připravena křivka závislosti odpovědi na dávce a byly vypočítány přibližně následující výsledky. Dávka 10 mikrogramů až 10 ng/kg hmotnosti zajistí plný účinek, při dávce 100 pg/kg je stále ještě možno pozorovat určitou účinnost a při dávce 1 pg/kg je účinek již nepozorovatelný.
Výsledkem farmakologických sledování těchto peptidů tedy je, že peptidy jsou schopny chránit organismus proti účinkům stresu a různým onemocnění, obecně tak, že dochází k opětné normalizaci funkcí organismu.
Peptidy by mohly rovněž být použity k prevenci a k léčení řady chorob a poruch u člověka i u jiných živočichů. Z řady chorob, které je možno tímto způsobem léčit, lze uvést zejména následující choroby:
- stres, vyvolaný poruchou nebo onemocněním,
- poruchy a poškození jater a slinivky,
- atrofie varlat a ztráta pohyblivosti spermií,
- poruchy plodnosti,
-je možno dosáhnout zvýšeného množení živočichů,
- choroby, způsobené riskettsiemi,
- stavy po thyreoparathyreoidektomii,
-9CZ 285155 B6
- diabetes mellitus,
- poruchy funkce nadledvin,
- poruchy systému pro krvetvorbu,
- poruchy srážlivosti,
- poruchy doby krvácení,
- poruchy po kastraci nebo menopauze,
- ischemická a toxická poškození,
- psychiatrické poruchy,
- zvýšený krevní tlak,
- poruchy tělesné teploty,
- pocity bolesti,
- nádorová onemocnění,
- deprese.
Obecně je možno uvést, že peptidy podle vynálezu je možno použít v široké škále farmaceutických prostředků v kombinaci s netoxickými, z farmaceutického hlediska přijatelnými nosiči nebo s nosnými prostředími, může jít o plniva, netoxické pufry nebo také fyziologický roztok chloridu sodného. Farmaceutické prostředky s obsahem peptidů podle vynálezu je možno použít místně nebo systemicky v jakékoliv vhodné formě, například ve formě kapalné, pevné nebo polotuhé, jako injekční roztoky, tablety, mazání, emulze, kapsle, tablety k rozpuštění pod jazyk a podobně.
Peptidy podle vynálezu budou obvykle podávány v dávce 10‘5 až 10'2 mg/kg tělesné hmotnosti v případě systemického podání. Při místním podání bude koncentrace vyšší, například 0,1 až 0,5 %.
Velmi příznivé je nepřítomnost jakýchkoliv známek toxicity peptidů podle vynálezu až do dávky 50 mg/kg hmotnosti a také dobrá účinnost těchto látek při perorálním podání včetně podání žaludeční sondou.
Peptidy podle vynálezu je možno připravit postupnou kondenzací chráněných aminokyselin v homogenním kapalném systému nebo s výhodou při použití metody na pevné fázi. Při přípravě cyklických peptidů se připraví chráněné lineární peptidy s požadovanou délkou, například s alkylesterovou skupinou na C. zakončení, tato skupina se převede na azidovou skupinu, pak se aminokyselina naváže a ochranná skupina se odstraní. Je také možno postupovat tak, že se částečně chráněný lineární peptid s volnými koncovými skupinami cyklizuje pomocí difenylfosforylazidu ve velmi zředěném roztoku.
Praktické provedení vynálezu, zejména pokud jde o výrobu peptidů podle vynálezu, bude nyní osvětleno následujícími příklady, které však nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu.
-10CZ 285155 B6
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Syntéza peptidů při použití ochranné skupiny Boc
Syntéza peptidů byla uskutečněna při použití 100 mg Boc-Val-PAM-pryskyřice k vytvoření Cterminálního peptidu s karboxylovou skupinou (pryskyřice PAM je podávána Applied Biosystems, substituce 0,56 meq/g, jde o derivát aminopolystyrenu s kyselinou aminoacyl-4(oxymethyl)fenyloctové. Aminokyseliny, opatřené ochrannou skupinou Boc, to znamená tercbutoxykarbonylovou skupinou byly navázány jedna po druhé po polymemí nosič při použití diisopropylkarbodiimidu DIPC jako kondenzačního činidla. V každém stupni byla skupina Boc odstraněna při použití 50% roztoku kyseliny trifluoroctové TFA v dichlormethanu. Pak byla aminoskupina deprotonována působením diisopropylethylenu.
V každém stupni by přeměna měla být vyšší než 99,5 %. V případě, že této přeměny není dosaženo, je nutno kondenzaci opakovat. Po ukončení syntézy se materiál odštěpí při použití nízké koncentrace fluorovodíku, odštěpení trvá 2 hodiny při teplotě 0 °C. Jako látka, schopná vázat karboniový ion se užije anisol. Fluorovodík se odpaří v proudu dusíku. Surový peptid se pak získá vlitím olejového zbytku do bezvodého etheru.
Surový peptid se pak čistí pomocí HPLC v reverzní fázi na sloupci s rozměrem 5 x 150 mm s náplní silikagelu RP-18, užije se gradientová eluce a systém rozpouštědel 0,1% TFA ve směsi vody a acetonitrilu. Detekce se provádí absorpcí ultrafialového světla při 225 nm. Syntéza peptidu s řetězcem č. 4 je znázorněna na obr. 1.
Příklad 2
Syntéza peptidu při použití skupiny FMOC
Pro syntézu byly použity aminokyseliny s ochrannou skupinou Fmoc, tj. 9-fluorenylmethyloxykarbonylovou skupinou. Funkce na postranním řetězci byly chráněny ve formě O-tetrabutylesterů v případě Asp, Apm, Glu a Aad a skupinou Boc v případě Lys. První aminokyselina Val byla navázána na polymemí nosič-DHA-pryskyřici, BHA = benzhydrylaminopryskyřice, jako vazné reakční činidlo byl užit diisopropylkarbodiimid. V každém stupni byla ochranná skupina Fmoc odstraněna působením piperidinu. Pak byly stejným způsobem navázány všechny následující aminokyseliny až do ukončení postupu. Nakonec byl materiál odštěpen působením směsi TFA/TFMSA/anisol v objemovém poměru 2 : 17 : 52.
Peptid byl pak čištěn při použití HPLC obdobným způsobem jako v příkladu 1. Syntézy peptidu s řetězcem č. 2 je znázorněna na obr. 2.
Příklad 3
Syntéza peptidu při použití skupin Ddz
Všechny aminokyseliny byly použity ve formě, chráněné na alfa-aminoskupině ochrannou skupinou Ddz, jde o alfa, alfa-dimethyl-3,5-dimethoxybenzyloxykarbonylovou skupinu. Funkce na postranním řetězci byly chráněny použitím skupiny Z, jde o benzyloxykarbonylovou skupinu v případě lysinu, v případě kyseliny asparagové a glutamové byla užita skupina O-t-Bu, to znamená, že postranní řetězec byl chráněn formou tvorby terč, butylesteru.
-11CZ 285155 B6
Pro vazbu první aminokyseliny s ochrannou skupinou Ddz ve formě česné soli byl užit Merrifieldův nosič, což je zesítěný chlormethylovaný polystyrénový gel s kapacitou 1,4 mmol/g. Po kondenzaci s použitím dicyklohexylkarbodimidu DCC byla v každém stupni ochranná skupina Ddz odstraněna působením 5% TFA v dichlormethanu, pak byl materiál promyt a deprotonová působením 10% triethylaminu v dichlormethanu. Po deprotonaci byla uskutečněna vazba následující aminokyseliny stejným způsobem. Postup byl opakován až do ukončení požadovaného řetězce peptidů.
Nakonec byl peptid z polymemího nosiče odštěpen při použití směsi HBr/TFA/anisoI. Po odpaření těkavého podílu byl odštěpený peptid vysrážen z bezvodého etheru a usušen. Pak byl surový peptid čištěn při použití HPLC způsobem podle příkladu 1.
Syntéza peptidů s řetězcem č. 6 je podrobněji znázorněna na obr. 3.
Příklad 4
Syntéza cyklického peptidů
Předběžně byl způsobem podle příkladu 1 nebo 2 připraven peptid v částečně chráněné formě se vzorcem
OBzl NO2 OBzl
I I I
Gly-Glu-Pro-Pro-Pro-Gly-Arg-Pro-Ala-Asp-OH
Roztok tohoto peptidů v dimethylformamidu s koncentrací 0,005 M byl smísen s difenylfosforylazidem a triethylaminem při teplotě 20 °C na 12 hodin.
Pak byla směs hydrogenována 8 hodin při teplotě 25 °C při použití vodíku a paladia na aktivním uhlí jako katalyzátor.
Pak bylo rozpouštědlo pečlivě odpařeno a surový produkt byl čištěn vysokotlakou kapalinovou chromatografií způsobem podle příkladu 1.
Tímto způsobem byl ve výtěžku 10 % získán cyklický peptid s řetězcem č. 10
Gly Glu Pro Pro Pro Gly Arg Pro Ala Asp
5 10
Syntéza lineárních a cyklických peptid při použití ochranné skupiny Ddz
Tentýž postup pro přípravu lineárních a cyklických peptidů byl uskutečněn při použití ochranné skupiny Ddz. Tímto způsobem bylo možno získat lineární a cyklické peptidy, jejichž funkce na postranních řetězcích byly chráněny pomocí skupiny Z v případě lysinu nebo ve formě Obenzylesterových skupin OBzl v případě kyseliny glutamové a asparagové. Polymemím nosičem byla pryskyřice HYCRAMR (ORPEGEN, Heidelberg, SRN), jde o 4-bromkrotonyl-betaalanylamidomethylpolystyren. První aminokyselina Ddz-valin byla na polymemí nosič vázána ve formě česné soli.
-12CZ 285155 B6
Pak se skupina Ddz odstraní při použití 5% kyseliny trifluoroctové v dichlormethanu a aminoskupina se podrobí deprotonaci působením diisopropylethylaminu. V následujícím stupni se Ddz-glycin naváže na zbytek valinu v polymemí matrici při použití diisopropylkarbodiimidu DIPC v přítomnosti 1-hydroxybenzotriazolu.
Tyto stupně byly opakovány až do ukončení požadovaného peptidového řetězce. Pak byl syntetizovaný peptid v chráněné formě opatrně odštěpen z nosiče HYCRAMr působením tetrakis-(trifenylfosfin)paladia (O) v roztoku v bezvodém tetrahyrofuranu v nepřítomnosti kyslíku. Jako akceptorová molekula pro allylové skupiny byla užita zvláštní přísada, například 10 morfolin.
Pak byl polymemí nosič odfiltrován a promyt tetrahydrofuranem. Roztok peptidu byl pak zfiltrován přes krátký sloupec silikagelu k odstranění paladia jako katalyzátoru.
Eluát, obsahující částečně chráněný peptid se vzorcem 4a byl po odpaření rozpouštědla sušen ve vakuu.
Syntéza lineárního peptidu s řetězcem lc
Částečně chráněný peptid s řetězcem 4a byl rozpuštěn ve 2,2,2-trifluorethanolu a pak byl hydrogenován v přítomnosti 10% palladia na aktivním uhlí při použití plynného vodíku při teplotě 30 °C. Pak byl katalyzátor odfiltrován a rozpouštědlo bylo odpařeno ve vakuu. Surový odparek byl pak čištěn pomocí HPLC způsobem podle příkladu 1. Po čištění byl získán peptid s řetězcem č. 4. Produkt byl totožný s produktem z příkladu 1.
Syntéza cyklického peptidu s řetězcem č. 9
Částečně chráněný peptid vzorce 4a se rozpustí ve směsi dimethylformamidu a dichlormethanu v objemovém poměru 1:1 za vzniku roztoku s koncentrací 0,001 M. Pro cyklizaci byl přidán 30 DIPC a HOBt a směs byla ponechána 10 hodin při teplotě 20 °C. Pak byl roztok odpařen na malý objem, zředěn přidáním 2,2,2-trifluorethanolu a čištěn průchodem sloupce s náplní Sephadexu LH-20. Frakce, které obsahovaly částečně chráněný cyklický peptid s řetězcem 9a byly odděleny a hydrogenovány při použití 10% palladia na aktivním uhlí jako katalyzátoru při teplotě 30 °C a při probublávání hydrogenované směsi plynným vodíkem, postup byl za 35 intenzivního protřepávání prováděn 8 hodin.
Katalyzátor byl pak odstraněn filtrací a roztok byl vysušen odpařením rozpouštědla ve vakuu. Takto získaný surový peptid byl pak dále čištěn pomocí HPLC způsobem, který byl popsán v příkladu 1. Tímto způsobem byl získán čistý cyklický peptid, sloučenina byla totožná 40 s peptidem s řetězcem č. 9.
Syntéza na polymemím nosiči HYCRAM při použití ochranné skupiny Ddz a cyklizace jsou znázorněny na obr. 4 a 5. Všechny syntetizované peptidy byly kontrolovány, pokud jde o čistotu sloučenin při použití HPLC na sloupci silikagelu RP-18 (oktadecylsilanizovaný materiál) 45 sloupec byl vymýván směsí rozpouštědel, běžně byla užívána směs vody, acetonitrilu a kyseliny trifluoroctové obvyklým způsobem ve formě gradientu. Ve všech případech bylo možno prokázat čistotu vyšší než 95 %.
Připravené peptidy byly charakterizovány analýzou jednotlivých aminokyselin (získané hodnoty 50 se pohybovaly v rozmezí ± 10 % teoretického množství), analýzou řetězce, molekulovou hmotností, stanovenou hmotovou spektrometrií FAB a pomocí spektra v ultrafialovém a infračerveném světle, výsledky jsou znázorněny na obr. 6 a 7.
-13CZ 285155 B6
Vynález byl v příkladové části osvětlen na základě jednotlivých specifických provedení, je však zřejmé, že by bylo možno navrhnout řadu dalších provedení a uskutečnit různé změny, které by rovněž spadaly do oboru vynálezu tak, jak je jeho rozsah vymezen v nárocích.
Claims (12)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Použití peptidů s organoprotektivním účinkem, obsahujících 8 až 15 zbytků aminokyselin, obecného vzorceXaa Zaa Pro Pro Pro Xaa Yaa Pro Ala Asp Zaa Ala Xaa Xaa Xaa 15 10 15 kdeXaa znamená zbytek neutrální alifatické aminokyseliny jako Ala, bAla, Leu, Ile, Gly, Val, Nle, Nva,Yaa znamená zbytek bazické aminokyseliny, jako Lys, Arg, Om, His,Zaa znamená zbytek kyselé aminokyseliny, jako Glu, Asp, Aad nebo Apm, přičemž alespoň jeden ze zbytků Xaa nebo Zaa může být vynechán a současně mohou být vynechány zbytky v polohách 10 až 15, molekula peptidu je popřípadě cyklizována amidovou vazbou mezi prvním a posledním zbytkem aminokyseliny, pro výrobu farmaceutických prostředků pro léčení poruch a onemocnění jater a slinivky, atrofie varlat a poruch motility spermií, poruch plodnosti, ke zlepšení chovu a množení zvířat, k potlačení infekce rickettsiemi, k léčení stavů po thyreoparathyreoidektomii, k léčení cukrovky, poruch nadledvinek, poruch krvetvorného systému, poruch krevní srážlivosti a doby krvácení, poruch po kastraci a po menopauze, k léčení ischemického a toxického poškození, psychiatrických poruch, zvýšeného krevního tlaku, odchylek od tělesné teploty, bolestivých stavů a nádorového bujení.
- 2. Použití podle nároku 1, při němž se užije peptid s řetězcem č. 1, vzorceLeu Glu Pro Pro Pro Gly Lys Pro Ala Asp Asp Ala Leu Gly Val 15 1015
- 3. Použití podle nároku 1, při němž se užije peptid s řetězcem č. 2, vzorceGly Glu Pro Pro Pro Gly Lys Pro Ala Asp Asp Ala Gly Leu Val 15 1015
- 4. Použití podle nároku 2, při němž se užije peptid s řetězcem č. 3, vzorceLeu Glu Pro Pro Pro Leu Lys Pro Ala Asp Asp Ala Leu Gly Val 15 1015-14CZ 285155 B6
- 5. Použití podle nároku 1, při němž se užije peptid s řetězcem č. 4, vzorceLeu Glu Pro Pro Pro Leu Lys Pro Ala Asp Ala Leu Gly Val 15 1014
- 6. Použití podle nároku 1, při němž se užije peptid s řetězcem č. 5, vzorceGly Glu Pro Pro Pro Gly Lys Pro Ala Asp Ala Gly Leu Val1 5 1014
- 7. Použití podle nároku 1, při němž se užije peptid s řetězcem č. 6, vzorceGlu Pro Pro Pro Leu Lys Pro Ala1 58
- 8. Použití podle nároku 1, při němž se užije peptid s řetězcem č. 7, vzorceAsp Pro Pro Pro Ile Arg Pro Ala Asp1 59
- 9. Použití podle nároku 1, při němž se užije peptid s řetězcem č. 8, vzorceGlu Pro Pro Pro Leu Lys Pro Ala Asp1 59
- 10. Použití podle nároku 1, při němž se užije peptid s řetězcem č. 9, vzorceLeu Glu Pro Pro Pro Leu Lys Pro Ala Asp Ala Leu Gly Val | 2_____________5 ____________10____________13|
- 11. Použití podle nároku 1, při němž se užije peptid s řetězcem č. 10, vzorceGly Glu Pro Pro Pro Gly Arg Pro Ala Asp
- 12_____!LJ12. Použití podle nároku 1, při němž se užije peptid s řetězcem č. 11, vzorceGlu Pro Pro Pro Leu Lys Pro Ala Asn
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HR921283 | 1992-11-16 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ162294A3 CZ162294A3 (en) | 1995-02-15 |
| CZ285155B6 true CZ285155B6 (cs) | 1999-05-12 |
Family
ID=10945833
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ941622A CZ285155B6 (cs) | 1992-11-16 | 1993-11-16 | Peptidy s organoprotektivním účinkem, způsob jejich výroby a farmaceutické prostředky s jejich obsahem |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0624164B1 (cs) |
| JP (1) | JP2812803B2 (cs) |
| AT (1) | ATE163131T1 (cs) |
| AU (1) | AU5624994A (cs) |
| BG (1) | BG61697B1 (cs) |
| CA (1) | CA2127553C (cs) |
| CZ (1) | CZ285155B6 (cs) |
| DE (1) | DE69316974T2 (cs) |
| ES (1) | ES2114170T3 (cs) |
| GR (1) | GR3026478T3 (cs) |
| HU (3) | HUT66303A (cs) |
| PL (1) | PL304666A1 (cs) |
| RO (1) | RO115733B1 (cs) |
| RU (1) | RU2116311C1 (cs) |
| SI (1) | SI9300595B (cs) |
| SK (1) | SK279227B6 (cs) |
| WO (1) | WO1994011394A2 (cs) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1166683C (zh) * | 1997-05-23 | 2004-09-15 | 普雷德拉格·西基瑞克 | 具有器官保护活性的新的bpc肽盐,其制备方法及其在治疗中的应用 |
| SI24318A (sl) * | 2013-03-13 | 2014-09-30 | Diagen D.O.O. | Nove stabilne soli pentadekapeptida, postopek za njihovo pripravo, njihova uporaba za izdelavo farmacevtskih pripravkov in njihova uporaba v terapiji |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| YU176089A (sh) * | 1989-09-12 | 1992-09-07 | Sikirić, Predrag | Postupak za pripremu supstancije bpc i supstancija bpc |
| WO1992017195A1 (en) | 1991-04-08 | 1992-10-15 | Magainin Pharmaceuticals, Inc. | Novel peptide compositions and uses therefor |
| ES2103854T3 (es) * | 1992-05-30 | 1997-10-01 | Sikiric Predrag | Peptidos con actividad organo protectiva, procedimiento para la preparacion de los mismos y su utilizacion en la terapia. |
-
1993
- 1993-11-16 PL PL93304666A patent/PL304666A1/xx unknown
- 1993-11-16 RO RO94-01091A patent/RO115733B1/ro unknown
- 1993-11-16 EP EP94901809A patent/EP0624164B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1993-11-16 HU HU9303247A patent/HUT66303A/hu unknown
- 1993-11-16 AU AU56249/94A patent/AU5624994A/en not_active Abandoned
- 1993-11-16 DE DE69316974T patent/DE69316974T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-11-16 CA CA002127553A patent/CA2127553C/en not_active Expired - Fee Related
- 1993-11-16 ES ES94901809T patent/ES2114170T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1993-11-16 HU HU9401952A patent/HUT67982A/hu unknown
- 1993-11-16 JP JP6511727A patent/JP2812803B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1993-11-16 SK SK857-94A patent/SK279227B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1993-11-16 AT AT94901809T patent/ATE163131T1/de active
- 1993-11-16 RU RU94037232A patent/RU2116311C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1993-11-16 WO PCT/EP1993/003217 patent/WO1994011394A2/en not_active Ceased
- 1993-11-16 CZ CZ941622A patent/CZ285155B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1993-11-16 SI SI9300595A patent/SI9300595B/sl not_active IP Right Cessation
-
1994
- 1994-07-15 BG BG98907A patent/BG61697B1/bg unknown
-
1995
- 1995-06-21 HU HU95P/P00304P patent/HU211260A9/hu unknown
-
1998
- 1998-03-27 GR GR980400664T patent/GR3026478T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL304666A1 (en) | 1995-01-09 |
| ATE163131T1 (de) | 1998-02-15 |
| SI9300595B (sl) | 2003-04-30 |
| CA2127553C (en) | 2003-01-28 |
| WO1994011394A2 (en) | 1994-05-26 |
| DE69316974D1 (de) | 1998-03-19 |
| EP0624164A1 (en) | 1994-11-17 |
| DE69316974T2 (de) | 1998-07-16 |
| WO1994011394A3 (en) | 1994-09-15 |
| HU211260A9 (en) | 1995-11-28 |
| HUT66303A (en) | 1994-11-28 |
| JPH07507568A (ja) | 1995-08-24 |
| SK85794A3 (en) | 1995-01-12 |
| JP2812803B2 (ja) | 1998-10-22 |
| RO115733B1 (ro) | 2000-05-30 |
| CZ162294A3 (en) | 1995-02-15 |
| BG98907A (bg) | 1995-05-31 |
| HU9401952D0 (en) | 1994-09-28 |
| GR3026478T3 (en) | 1998-06-30 |
| SI9300595A (en) | 1994-09-30 |
| EP0624164B1 (en) | 1998-02-11 |
| SK279227B6 (sk) | 1998-08-05 |
| HUT67982A (en) | 1995-05-29 |
| AU5624994A (en) | 1994-06-08 |
| RU94037232A (ru) | 1996-06-20 |
| RU2116311C1 (ru) | 1998-07-27 |
| CA2127553A1 (en) | 1994-05-26 |
| ES2114170T3 (es) | 1998-05-16 |
| BG61697B1 (bg) | 1998-03-31 |
| HU9303247D0 (en) | 1994-03-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR20090089316A (ko) | Ｐｅｇ 변형된 엑센딘 또는 엑센딘 유사체 및 조성물 및 이의 용도 | |
| JPS60120900A (ja) | Ｌｈｒｈアゴニストとして有用なｌｈｐｈ 同族体ノナペプチドおよびデカペプチド | |
| US20020035239A1 (en) | Peptide antibiotics | |
| CA2114313C (en) | Bpc peptides, their preparation and use | |
| CS251085B2 (en) | Method of peptides production liberating growth hormone | |
| JPH02500269A (ja) | 新規テトラペプチド、その製法ならびにその用途 | |
| CZ285155B6 (cs) | Peptidy s organoprotektivním účinkem, způsob jejich výroby a farmaceutické prostředky s jejich obsahem | |
| JPS62126199A (ja) | ペプチドおよび該ペプチドを含有する医薬組成物 | |
| US20200261534A1 (en) | New treatments of multiple myeloma | |
| AU2021200731B2 (en) | Pro-drug peptide with improved pharmaceutical properties | |
| US20080280326A1 (en) | Novel Gonadotropin-Releasing Hormone, Precursor Peptides Thereof and Genes Encoding the Same | |
| AU678917B2 (en) | Peptides with organo-protective activity, their preparation and use | |
| AU694701B2 (en) | Peptides with organo-protective activity, their preparation and use | |
| US5668109A (en) | Peptides for inhibiting pepsin release | |
| WO2025241148A1 (zh) | 化合物及其制备方法和应用 | |
| DE4340111A1 (de) | Tumor-Nekrose-Faktor-alpha inaktivierende Peptide | |
| JPS62116598A (ja) | インシユリン誘導体の製造方法 | |
| HK1001004B (en) | Bpc peptides, their preparation and use |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20111116 |