CZ287273B6 - 10,11-Methanodibenzosuberane derivatives, process of their preparation, pharmaceutical preparation containing thereof and their use - Google Patents

Description

Oblast techniky

Vynález se týká 10,11-methanodibenzosuberanových derivátů, způsobu jejich výroby, farmaceutického prostředku je obsahujícího a jejich použití. Uvedené deriváty se využívají zejména při léčbě rakoviny, zvláště pro zvýšení účinnosti probíhající chemoterapie a pro léčbu multiléčivové rezistence.

Dosavadní stav techniky

Jedním z problémů, se kterými se potýká nádorová chemoterapie, je rozvoj rezistence nádorových buněk vůči chemofarmakům, používaným v léčebném procesu. Nádory, které zpočátku vykazují na určité léčivo nebo léčiva dobrou odezvu, si po čase vůči ním vypěstují odolnost. Toto stádium nemoci, zvané multiléčivová rezistence, je široce diskutováno v práci Kuzmich and Tew, „Detoxification Mechanisms and Tumor Cell Resistence to Anticancer Drugs, „zvláště v části VII „The Multidrug-Resistent Phenotype (MDR), „Medical Research Reviews, Vol. 11, No. 2, 185 - 217 a zvláště 208 - 213 (1991) a v práci Georges, Sharom and Ling, „Multidrug Resistance and Chemosensitization: Therapeutic Implications for Cancer Chemotherapy, „Advances in Pharmacology, Vol. 21, 185 - 220 (1990).

Některá účinná činidla, tzv. chemosenzibilátory nebo potenciátory, byla popsána jako činidla, která mají schopnost modifikovat multiléčivovou rezistanci, avšak vyznačovala se zároveň jinými nevýhodnými vlastnostmi. Skupina těchto činidel zahrnovala např. verapamil (kalciumblokátor snižující krevní tlak a prokazující při zkouškách in vitro účinnost při léčbě malárie rezistentní vůči léčivům), steroidy, trifluoperazin (činidlo ovlivňující CNS), vindolin a reserpin (a-2 blokátor ovlivňující CNS). Stále proto přetrvává poptávka po účinných činidlech, schopných léčit, tj. zvrátit, potlačit a/nebo úplně zabránit rozvoji multiléčivové rezistence, a to pokud možno s minimálními, nebo vůbec žádnými nežádoucími vedlejšími účinky.

Chemosenzibilátory reagující s P-glykoproteinem, což je látka, fungující jako pumpa odvádějící léčiva z buněk ven, nacházející se v buněčných membránách zvláště nádorových buněk, které vykazují multiléčivovou rezistenci a dále v buňkách gastrointestinálního traktu a v endotelových buňkách hemotoencefalické bariéry. Blokováním této pumpy potlačují chemosenzibilátory odvod protirakovinných chemoterapeutik z nádorových buněk ven. Dále tyto činidla usnadňují prostupnost živin nebo účinných činidel gastrointestinálním traktem a prostupnost účinných činidel hematoencevalickou bariérou.

Patent USA č. 5112817 od Fukazawa et al. popisuje určité chinolinové deriváty, použitelné jako potenciátory kancerostatik při léčbě multiléčivové rezistence. Jedno z popisovaných zpočátku slibných účinných činidel je MS-073, s následující strukturou:

-1 CZ 287273 B6

MS - 073

Ačkoli látka vykazovala při testování in vitro vysokou účinnost, problém se ukázal v její špatné biologické využitelnosti per os a nestabilitě v roztoku. Jiné sloučeniny těchto skupin, jak třeba bifenylmethylkarbonylový derivát MS-209, vykazovaly vyšší stabilitu a lepší biologickou využitelnost per os, avšak za cenu zvýšení účinných dávek. Stále aktuální tak zůstává problém nalezení takového potenciátoru kancerostatik, který by měl účinnost srovnatelnou s látkou MS073 a současně dobrou biologickou využitelnost per os a dostatečnou stabilitu.

Tento vynález přispívá k řešení uvedených problémů.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu jsou 10,11-methanodibenzosuberanové deriváty obecného vzorce I

v němž

A je skupina -CH2-CH2-, -CH2-CHR^a-CH2-, v níž R^a je vodík, hydroxy nebo Cj_6 acyloxyskupina, nebo -CH2-CHR^a-CHR^b-CH2-, v níž jeden z R^a nebo R^b je vodík, hydroxy nebo Ci_6 acyloxyskupina a druhý je vodík,

-2CZ 287273 B6

R¹ je vodík, fluor, chlor nebo brom,

R² je vodík, fluor, chlor nebo brom a

R³ je C6-12 heteroaryl se dvěma kondenzovanými kruhy a 1 až 3 heteroatomy vybranými ze skupiny zahrnující dusík, kyslík a síru, nebo fenyl substituovaný fluorem, chlorem, bromem, skupinou CF₃, CN, NO₂ nebo OCHF₂, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Jednu výhodnou skupinu tvoří 10,11-methanodibenzosuberanové deriváty podle vynálezu, obecného vzorce I, v němž R³ je C^n heteroaryl se dvěma kondenzovanými druhy a s 1 až 3 heteroatomy dusíku, kyslíku a síry a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Druhou skupinou jsou 10,11-methanodibenzosuberové deriváty uvedeného obecného vzorce I, v němž R³ je chinolyl nebo benzofurazanyl a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Do třetí výhodné skupiny patří 10,11-methanodibenzosuberanové deriváty obecného vzorce I, v němž R₃ je 5-chinolyl a ostatní substituenty mají shora uvedený významy, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Čtvrtou skupinou jsou 10,11-methanodibenzosuberanové deriváty obecného vzorce I, v němž R^a nebo R^b je hydroxyskupina a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Pátou výhodou skupinou je 10,11-methanodibenzosuberanové deriváty obecného vzorce I, v němž A je skupina -CH₂-CHR^a-CH2-, v níž R^a je hydroxyskupina a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Výhodnými konkrétními sloučeninami podle vynálezu jsou:

10,11-methanodibenzosuberanový derivát vzorce

a jeho farmaceuticky přijatelné soli,

-3CZ 287273 B6

10,11-methanodibenzosuberanový derivát vzorce

a j eho farmaceuticky přij atelné soli a

10,11-methanodibenzosuberanový derivát vzorce

a jeho farmaceuticky přijatelné soli,

Předmětem vynálezu je dále farmaceutický prostředek, který jako účinnou látku obsahuje alespoň jeden derivát nebo jeho sůl podle vynálezu.

Farmaceutický prostředek podle vynálezu s výhodou dále obsahuje farmaceuticky přijatelné vehikulum a excipient.

-4CZ 287273 B6

Předmětem tohoto vynálezu je též použití derivátů nebo jejich solí pro výrobu farmaceutického prostředku jakož i jejich použití pro výrobu chemosenzibilátoru.

Dalším předmětem vynálezu je způsob výroby 10,11-methanodibenzosuberanových derivátů shora uvedeného obecného vzorce I, v němž je skupina -CH₂-CH₂-, -CH2-CHR^a-CH₂-, v níž R^a je vodík, hydroxy nebo Ci_6 acyloxyskupina, nebo -CH2-CHR^a-CHR^b-CH2-, v níž jeden z R^a nebo R^b je vodík, hydroxyl nebo C]_6 acyloxyskupina a druhý je vodík, je vodík, fluor, chlor nebo brom, je vodík, fluor, chlor nebo brom a je C6-12 heteroaryl se dvěma kondenzovanými kruhy a 1 až 3 heteroatomy vybranými ze skupiny zahrnující dusík, kyslík nebo síru, nebo fenyl substituovaný fluorem, chlorem, bromem, skupinou CF₃, CN, NO₂ nebo OCHF₂, a jejich farmaceuticky přijatelných soli.

Podstata způsobu výroby podle vynálezu je v tom, že se

a) sloučenina obecného vzorce II

N (II) v němž R¹ a R² mají shora uvedené významy, kondenzuje se sloučeninou obecného vzorce ΙΠ

(III) v němž n je 2 až 4 a R³ má shora uvedené významy, nebo se sloučeninou obecného vzorce IV

X-(CH₂)„-O-R³ (IV) v němž n je 2 až 4, X je halogen a R³ má shora uvedené významy, za vzniku derivátu obecného vzorce I, který se popřípadě převede na jeho farmaceuticky přijatelnou sůl, nebo se

b) epoxid obecného vzorce V

-5CZ 287273 B6

1 v němž R a R' mají shora uvedené významy, kondenzuje se sloučeninou obecného vzorce R OH, v němž R³ má shora uvedené významy, za vzniku derivátu obecného vzorce Γ

v němž R¹, R² a R³ mají shora uvedené významy, které se popřípadě převede na jeho farmaceuticky přijatelnou sůl, nebo se

c) derivát obecného vzorce I, v němž A je -CH₂-CHR^a-CH2— nebo -CH2-CHR^a-CHR^b-CH₂-, kde R^a nebo R^b je hydroxyskupina uvede v reakci s Ci_6 acylhalogenidem obecného vzorce R'C(O)-X, kde R' je Ci_6 alkyl a X je halogen, za vzniku derivátu obecného vzorce I, v němž R¹, R² a R³ mají shora uvedené významy a R^a nebo R^b je Ci_6 acyloxyxskupina, a vzniklý derivát se popřípadě převede na jeho farmaceuticky přijatelnou sůl, nebo se

d) derivát obecného vzorce I nechá reagovat s farmaceuticky přijatelnou kyselinou za vzniku odpovídající adiční soli s kyselinou, nebo se

e) adiční sůl s kyselinou derivátu obecného vzorce I nechá reagovat se zásadou za vzniku odpovídající vodné báze derivátu obecného vzorce I.

Výhodný způsob výroby 10,11-methanodibenzosuberanových derivátů podle tohoto vynálezu, odstavec a), je vtom, že se 2,3-epoxypropan kondenzuje s 1—<10,11-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazinem za vzniku 5-{ 3-(4-( 10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5yl)piperazin-l-yl]-2-hydroxypropoxy}chinolinu.

S výhodou se způsobem výroby 10,11-methanodibenzosuberanových derivátů získává

-6CZ 287273 B6 (2R)-anti izomer 5-{3-[4-(10,l l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yI]-2hydroxypropoxy}chinolinu.

Předmětem vynálezu je ještě další použití, a to použití 10,11-methanodibenzosuberanových derivátů podle vynálezu pro výrobu léčiva k léčení drogové závislosti a použití 10,11-methanodibenzosuberanových derivátů podle vynálezu pro výrobu léčiva k léčení malárie.

Farmaceutický prostředek podle vynálezu se podává savcům v množství terapeuticky schopném potenciovat účinnost současně podávaných protirakovinných chemoterapeutik. Příklady takovýchto protirakovinných chemoterapeutik zahrnují antimetabolity, jako je 6-merkaptopurin, 5-fluoruracil, cytosin, arabinosid a jejich metabolity a deriváty těchto činidel. Jiná protirakovinná chemoterapeutika zahrnují antifoláty, jako je methotrexát nebo činidla odvozená z přírodních látek, například z vínkových alkaloidů (barvínek) jako je vinblastin, vincristin a colchicin, dále adriamycin, daunurobicin, doxorubicin, teniposid nebo etoposid. Tato protirakovinná chemoterapeutika také zahrnují kancerostatika obsahující platinu, jako jsou cisplatin a carboplatin. Kromě toho mohou být činidla tohoto vynálezu podávána spolu s cyklofosfamidem, busulfonem, prokarbazinem, dekarbazinem, carmustinem, lomustinem, mechlorethaminem, chlorambucilem, hydroxyureou, melphalanem, mitotonem, taxolem a spirogermaniem. Multiléčivová rezistence je nejčastěji pozorována u vínkových alkaloidů, anthracenových cyklů jako je daunorubicin, doxorubicin a adriamycin a etoposidů a tenoposidů, méně častěji pak u antimetabolitů a ostatních chemoterapeutik.

Vynález se také týká prostředku k léčení resistence proti lékům u savců, k léčení malárie rezistentní proti léčivům, k léčení rakoviny s multiléčivovou rezistencí vykazující příznaky klinické rezistence vůči protirakovinovým chemoterapeutikům, přičemž se sloučeniny nebo jejich soli podle vynálezu podávají v množství ovlivňujícím tuto rezistenci současně s terapeuticky účinným množstvím protirakovinového chemoterapeutika, proti němuž byla rezistence prokázána.

Dále se vynález týká prostředku k chemosenzibilaci biologické dostupnosti farmaceutických činidel podávaných savcům. Při tom se podává takové množství sloučeniny nebo soli podle vynálezu, které postačuje ke zvýšení prostupnosti hematoencefalové bariéry nebo gastrointestinálního traktu proti účinným činidlům.

Definice a obecné podmínky použité v textu

Následující definice ilustrují a definují význam a obsah termínů použitých zde k popisu vynálezu.

Termín „alkyl“ označuje plně nasycený monovalentní radikál, obsahující pouze atomy uhlíku a vodíku, který může být cyklický, rozvětvený nebo nerozvětvený. Tento termín je blíže vymezen názvy, jako je methyl, ethyl, t-butyl, pentyl, neopentyl, heptyl a adamantyl.

Termín „nižší alkyl“ označuje cyklický, rozvětvený nebo nerozvětvený, monovalentní alkylový radikál, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů. Tento termín je blíže vymezen názvy, jako je methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, t-butyl, i-butyl (nebo 2-methylpropyl), cyklopropylmethyl, i-amyl, n-amyl a hexyl.

Termín „alkylen“ označuje plně nasycený bivalentní alkylový radikál, obsahující pouze atomy uhlíku a vodíku, který může být rozvětvený nebo nerozvětvený. Tento termín je blíže vymezen názvy, jako je methyl, ethyl, n-propyl, t-butylen, i-pentylen a n-heptylen.

Termín „nižší alkylen“ označuje bivalentní alkylový radikál, obsahující 1 až 6 uhlíkových atomů. Tento termín je blíže vymezen názvy, jako je methylen, ethylen, n-propyl, i-propylen, n-butylen, t-butylen, i-butylen (nebo 2-methylpropylen), isoamylen, pentylen a n-hexylen.

-7CZ 287273 B6

Termín „nižší acyloxy“ označuje skupinu -O-QOj-R¹, kde R¹ je nižší alkyl.

Termín „aryl“ označuje monovalentní nenasycený aromatický karbocyklický radikál, obvykle obsahující 6 až 16 uhlíkových atomů, tvořených jedním (např. fenyl) nebo dvěma (např. naftyl) kondenzovanými prstenci a který může být popřípadě jednou, dvakrát nebo třikrát nezávisle substituovaný skupinami fluor-, chlor-, brom-, trifluormethyl-, kyan-, nitro- a/nebo difluormethoxy-.

Termín „heteroalkyl“ označuje monovalentní nenasycený aromatický heterocyklický radikál, obvykle obsahující 2 až 12 uhlíkových atomů a alespoň 1, obvykle však 1 až 3 heteroatomy, jako je N, O nebo S, začleněné do prstence. Heteroalkylový radikál má obvykle jeden prstenec, jako pyridyl, nebo dva kondenzované prstence, jako chinolyl, benzofuranyl a benzofurazanyl.

Termín „halogen“ označuje fluor (F), brom (Br), chlor (Cl) a jod (I).

Výrazy „popřípadě“ nebo „případně“ znamenají, že následně popisovaná událost nebo okolnosti mohou, ale nemusí nastat a že popis zahrnuje jak případy, kdy tato událost nebo okolnosti nastaly, tak i případy, kdy nenastaly.

„Farmaceuticky přijatelná sůl“ může být jakákoli sůl, odvozená z anorganické nebo organické kyseliny. Termín farmaceuticky přijatelný anion“ označuje anion takových adičních solí, vzniklých přídavkem kyseliny. Sůl a/nebo anion jsou zvoleny tak, aby byly biologicky či jinak nezávadné.

Anionty jsou odvozené z anorganických kyselin, jako je kyselina chlorovodíková, bromovodíková, sírová (poskytující síranové a organické síranové soli), dusičná, orthofosforečná a podobné a organických kyselin, jako je kyselina octová, propionová, glykolová, pyrohroznová, šťavelová, jablečná, malonová, jantarová, maleinová, fumarová, vinná, citrónová, benzoová, skořicová, mandlová, methansulfonová, ethansulfonová, salicylová, p-toluensulfonová, hexanová, heptanová, cyklopentanpropionová, mléčná, o-(4-hydroxybenzoyl)benzoová, 1,2ethandisulfonová, 2-hydroxyethansulfonová, benzensulfonová, p-chlorbenzensulfonová, 2naftalensulfonová, kafrosulfonová, 4-methylbicyklo[2.2.2.]okt-2-en-l-karboxylová, glukoheptonová, 4,4'-methylenbis(3-hydroxy-2-nafitoová), 3-fenylpropionová, trimethyloctová, tbutyoctová, laurylsírová, glukuronová, glutamová, 3-hydroxy-2-naftoová, stearová, mukonová a podobné.

Termín „léčba“ nebo „léčení“ znamená jakoukoli léčbu nemocí savců, včetně:

1) Prevence nemoci, tzn. zabránění vzniku klinických symptomů nemoci.

2) Omezení nemoci, tzn. zastavení rozvoje klinických symptomů nemoci.

3) Vyléčení nemoci, tzn. zapříčinění ústupu klinických symptomů nemoci.

Termín „účinné množství“ označuje dávku léčiva dostatečnou k léčení daného stádia nemoci. Toto množství kolísá v závislosti na pacientovi, nemoci a způsobu léčení.

Termín „současné podávání“ znamená podávání více než jednoho účinného činidla jako součást jediného léčebného režimu, ať již jsou léčiva podávání simultánně, nebo v různých časových intervalech.

„Struktura obecného vzorce I“ se týká struktury celé třídy sloučenin tohoto vynálezu. Chemické vazby, znázorněné vlnovkou, znázorňují nespecifikované stereochemické uspořádání, viz např. na pozici 5 u dibenzosuberanu, tj. na uhlíku, ke kterému je připojena piperazinová skupina.

-8CZ 287273 B6 „Izomerie“ označuje sloučeniny se stejnou molekulovou hmotností a počtem atomů, odlišujících se však navzájem jednou nebo více fyzikálními nebo chemickými vlastnostmi.

„Stereoizomer“ označuje jednu ze dvou možných chemických sloučenin, které se vyznačují stejnou molekulovou hmotností, chemickým složením a konstitucí, avšak odlišně seskupenými atomy. Znamená to, že určité, jinak identické chemické skupiny, mají odlišnou prostorovou orientaci a v případě, že je látka čistá, tak mají schopnost stáčet rovinu polarizovaného světla. Některé čisté stereoizomery však mohou stáčet rovinu polarizovaného světla tak málo, že odchylka není za současného stavu přístrojové techniky detekovatelná.

„Optická izomerie“ popisuje jeden z typů stereoizomerie, projevující se tím, že látka je schopná, ať už v čistém stavu, nebo v roztoku, stáčet rovinu polarizovaného světla. V mnoha případech je tato vlastnost způsobená připojením čtyř různých atomů nebo atomových skupin na alespoň jeden uhlíkový atom v molekule. Takové izomery se mohou popisovat jako d_, 1- nebo pár d, 1; D-, L- nebo pár D,L; (R)-, (S)- nebo pár (R,S), v závislosti na použité nomenklatuře.

Sloučenina obecného vzorce I existuje ve dvou izomemích konfiguracích, definovaných vztahem mezi substituenty 10,11-methano a 5-piperazinyl na dibenzosuberanové části molekuly (viz např. struktura obecného vzorce II v následující nomenklaturní části). V případě, že jsou oba substituenty 10,11-methano a 5-piperazinyl orientovány ve stejném směru vzhledem křovině dibenzosuberanu (např. oba nahoru nebo oba dolů), hovoříme o izomerické formě „syn“. V případě, že jsou oba substituenty 10,11-methano a 5-piperazinyl orientovány v navzájem opačných směrech vzhledem křovině dibenzosuberanu (např. jeden nahoru a druhý dolů), hovoříme o izomerické formě „anti“.

Určité sloučeniny obecného vzorce I mají asymetrické centrum na skupině „A“, kde R^a nebo R^b není H. Tyto sloučeniny mohou existovat ve dvou stereochemických formách, označených jako (+) a (-) nebo (R)- a (S)- nebo jako směs obou stereoizomerů. V této přihlášce je použit druhý způsob označování.

I když jsou v přihlášce jednotlivé specifikované stereoizomery popsány a pojmenovány, tento vynález musí být interpretován tak, že zahrnuje jak jednotlivé stereoizomery, tak i jejich racemické i jiné směsi.

Nomenklatura

Sloučenina následujícího obecného vzorce je pojmenována a očíslována takto:

-9CZ 287273 B6

Například sloučenina, ve které R¹ a R² jsou Cl, R^a je hydroxy a fenylová skupina (nebo R³ v obecném vzorci I) je substituována v poloze 3 skupinou NO₂, se pojmenuje (3R,S)-anti,syn-l{4—[4—(10,1 l-dichlormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yl]-3-hydroxybutoxy}-3-nitrobenzen.

Sloučenina, kde R¹ a R² jsou H, R^b je acetoxy ( v izomerické formě směřující dovnitř stránky), fenylová skupina (nebo R³ v obecném vzorce I) je substituována v poloze 5 trifluormethylem a vazba spojující polohu 4 piperazinu a polohou 5 benzosuberanu je v izomerické formě směřující nad stránku se pojmenuje (2S)-syn-l-{4-[4-(10,ll-methanodibenzosuber-5-yl)piperazin-lyl]-2-acetoxybutoxy}-5-trifluormethylbenzen.

Výhodná sloučenina tohoto vynálezu podle vzorce Ia

odpovídají sloučenině obecného vzorce I, kde R¹ a R² jsou F, A je (2R)-hydroxypropyl a R³ je chinolyl připojený v poloze 5 ke kyslíku, se pojmenuje (2R)-anti-5-{ 3-(4-( 10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yI]-2-hydroxypropoxyjchinoli. Podle Chemical Abstracts lze také sloučeninu vzorce Ia pojmenovat jako 1—(4— anti( 1,1-difluor-l a, 10b-dihydrodibenzo[a,e]cyklopropa[c]cykloheptan-6-yl)piperazin-l-yl)(2R)-3-(5-chinolyloxy)-2-propanol. (Číslování uvedené ve vzorce Ia neodpovídá nomenklatuře v Chemical Abstracts). Ačkoli oba nomenklaturní systémy popisují sloučeniny tohoto vynálezu adekvátně, pro účely tohoto vynálezu byl zvolen systém první.

Parametry syntetických reakcí

Termíny „rozpošutědlo“, „inertní organické rozpouštědlo“ nebo „inertní rozpouštědlo“ označují rozpouštědlo inertní za podmínek, ve kterých v tomto rozpouštědle probíhá popisovaná reakce [včetně např. benzenu, toluenu, acetonitrilu, tetrahydrofuranu („THF“), dimethylformamidu („DMF“), chloroformu, methylenchloridu (nebo dichlormethanu), diethyletheru, methanolu, pyridinu a podobných rozpouštědel]. Pokud není řečeno jinak, rozpouštědla použitá v reakcích tohoto vynálezu jsou inertní organická rozpouštědla.

-10CZ 287273 B6

Pokud není řečeno jinak, reakce zde popisované probíhají za atmosférického tlaku a v teplotním rozmezí 5 °C až 100 °C (s výhodou 10 ^QC až 50 °C, nejvýhodněji při teplotě „místnosti“ na teploty „okolí“, např. 20 °C). Jasně zde však existuje několik reakcí, jejichž teplotní rozmezí spadá pod nebo nad tyto intervaly. Dále, pokud není řečeno jinak, uvedené reakční časy a podmínky jsou míněny pouze jako přibližné hodnoty a probíhají např. za přibližně atmosférického tlaku, v teplotním rozmezí přibližně od 5 °C do 100 °C (s výhodou od přibližně 10 °C do přibližně 50 °C, nejvýhodněji kolem 20 °C), v časovém rozmezí od přibližně 1 hodiny do přibližně 10 hodin (s výhodou okolo 5 hodin). Parametry uvedené v Příkladech provedení vynálezu jsou však míněny jako přesné, nikoli přibližné.

Izolace a čištění sloučenin a meziproduktů zde popisovaných mohou být v případě potřeby prováděny jakýmikoli vhodnými separačními nebo přečišťovacími metodami, jako je například filtrace, extrakce, krystalizace, sloupcová chromatografie, chromatografíe na tenké či silné vrstvě nebo různými kombinacemi těchto metod. Specifické příklady vhodných izolačních nebo separačních metod mohou být nalezeny v následujících příkladech. Jiné ekvivalentní metody separace nebo izolace však mohou být samozřejmě také použity.

Syntéza sloučenin obecného vzorce I

Sloučenina obecného vzorce I může být připravena postupem popsaným v USA patentu č. 5112817, zahrnutém zde formou odkazu, záměnou dibenzosuberonu za popřípadě substituovaný

10,11-methanodibenzosuberon, připraveného např. podle postupu uvedeného vCiganek, et al., „Imine Analogues of Tricyklic Antidepressants,“ J. Med. Chem., 1981, 24, 336 - 341, nebo v práci Coyne and Cusic, „Aminoalkyldibenzo[a,e]cyklopropa-[c]cykloheptene Derivatives. A series of Potent Antidepressants“, J. Med. Chem., 1974, Vol. 17, No, 1, 72 - 75, obě práce jsou zde zahrnuty formou odkazu. V další části jsou popsány různé syntézy sloučenin obecného vzorce I, s odkazem na reakční schémata 1,2 a 3.

Klíčovou roli při syntéze sloučenin obecného vzorce I hraje 1-(10,1 l-methanodibenzosuber-5yljpiperazin obecného vzorce IX, který může být popřípadě substituovaný v polohách 10 a 11. Tento klíčový meziprodukt je spojen nebo zkondenzován s reagentem obsahujícím skupinu AO-R³ za vzniku nebo přeměny na sloučeninu obecného vzorce I, nebo s reagentem obsahujícím jako základ A-epoxidovou skupinu nebo její derivát, skupinu A'-O-R³, za vzniku nebo přeměny na sloučeninu obecného vzorce I. Takovéto přeměny zahrnují např. acylaci hydroxyskupiny přítomné ve skupině A' na acyloxyskupin, nebo odstranění acyloxyskupiny přítomné ve skupině A', nebo přeměnu A-epoxydové skupiny se skupinou R³-OH na sloučeninu obecného vzorce I. Při takové přeměně, kdy je skupina R³-OH přidána kA-epoxidové skupině, se epoxidový prstenec otevře, čímž se vytvoří hydroxyskupina vicenální s uhlíkovým atomem, ke kterému je připojena skupina -OR³.

Stručný popis reakčních témat

Reakční schéma 1 znázorňuje syntézu sloučenin obecného vzorce I, kde R^a je H nebo OH.

Reakční schéma 2 znázorňuje syntézu sloučenin obecných vzorců XI a ΧΠ, reaktantů sloužících v kroku 5 reakčního schématu 1 jako prekurzory při syntéze sloučenin obecného vzorce I.

Reakční schéma 3 znázorňuje syntézu sloučenin obecného vzorce I, kde R^b je OH.

V reakčním schématech:

A je -CH₂-CH₂-, -CH₂-CHR^a-CH2 nebo -CH2-CHR^a-CHR^b-CH2-, kde jeden z R^a nebo

R^b je H, OH nebo nižší acyloxy a druhý je H;

-11CZ 287273 B6

R¹ je H, F, Cl nebo Br;

R² je H, F, Cl nebo Br a

R³ je heteroalkyl nebo fenyl popřípadě substituovaný F, Cl, Br, CF₃, CN, NO2 a OCHF₂.

Substituent „X“ označuje halogen, „n“ je 1 nebo 2 a „m“ je 1,2 3 nebo 4.

Výchozí látky

Sloučenina 5JZ-dibenzo[a,d]cyklohepten-5-on (také pojmenovaný jako dibenzo[a,b]-52/15 cyklohepten-5-on nebo dibenzosuberenon) je komerčně dostupná látka, např. od firmy Aldrich

Chemical Company, Milwaukee, WI. Ostatní reaktanty, jako epibromohydrin a l-bromo-3,4epoxybutan, jsou také dostupné komerčně nebo mohou být za použití obvyklých syntetických postupů odborníky snadno připraveny.

-12CZ 287273 B6

Reakční schéma 1

Obecný vzorec (VII)

(Vin)

Obecný vzorec CVIíD

-13CZ 287273 B6

Příprava sloučenin obecného vzorce VI

Roztok acetátu (jako je natriumchlordifluoracetát, methyltrichloracetát, ethyltrifluoracetát, v závislosti na požadovaném substituentu na R¹ a R²) v rozpouštědle (jako je diglym, benzen nebo petrolether) se přidá na dobu 4 až 8 hodin (s výhodou 6 hodin) do roztoku dibenzosuberenonu (např. v diglymu) za současného míchání a v dusíkové atmosféře, reakční teplota se udržuje na 160 až 165 °C. (V závislosti na reaktantech lze použít i jinou reakční teplotu, jak je uvedeno v Ciganek, et al. a v Coyne and Cusic). Reakční směs se poté ochladí na teplotu místnosti, vyleje se do vody a extrahuje se (např. etherem). Požadovaný 10,11substituovaný methanodibenzosuberon se izoluje a přečistí běžnými postupy a prostředky: organická (např. benzenová) fáze se například promyje vodou, vysuší (např. nad Na₂SO₄), odpaří a zbytek se rekrystalizuje (např. z ethanolu a popřípadě ještě jednou např. z acetonu/hexanu).

Anebo, sloučenina obecného vzorce VII (kde R¹ a R² nejsou identické, např. v pořadí H a Cl) může být připravena podle návodu popsaného v J. Med. Chem., Vol. 17, 72, (1974), zahrnutém zde formou odkazu. Sloučenina obecného vzorce VII (kde R¹ a R² jsou oba H), může být připravena podle návodu popsaného v Coyne a Cusic, „Aminoalkyldibenzo[a,e]cyklopropa[c]cycloheptene Derivatives. A Series of Potent Antidepressants,“ J. Med. Chem. 1974, Vol. 17, No. 1, 72 - 75, zahrnutém zde již formou odkazu.

Příprava sloučenin obecného vzorce VII

Roztok 10,11-(popřípadě substituovaného)methanodibenzosuberonu v rozpouštědle (např. THF/methanol) se ochladí (např. na ledové lázni) a přidá se do něj po částech redukční činidlo (např. tetrahydroboritan sodný). Reakční směs se ponechá, aby se její teplota vyrovnala s teplotou místnosti a míchá se po dobu 1 až 5 hodin (s výhodou 2 hodiny) a poté se vyleje do vody. Produkt se izoluje (např. filtrací) a přečistí obvyklými postupy (např. promytím vodou a vysušením), čímž se získá příslušný 10,11-(popřípadě substituovaný)methanodibenzosuberul.

Příprava sloučenin obecného vzorce VII, kde R je formy 1

Roztok 10,11-(popřípadě substituovaného)methanodibenzosuberolu v rozpouštědle (např. dioxanu) se ochladí (např. na ledové lázni) a poté se halogenuje [např. postupným přikapáváním thionylchloridu za zvýšené teploty (40 až 70 °C s výhodou 50 °C, po dobu 2 až 5 hodin, (s výhodou 4 hodiny)]. Reakční směs se odpaří dosucha, čímž se získá směs syn-a antiizomerů odpovídajícího 5-halogen-10,ll-(popnpadě substituovaného)methanodibenzosuberanu. Tento halogenovaný suberan se pak, bez dalšího přečišťování, rozpustí (např. v acetonitrilu) a nukleofílní substitucí halogenu se naváže piperazin [např. přidáním 1-piperazinkarboxaldehydu za současného míchání, s výhodou v dusíkové atmosféře za zvýšené teploty (např. 100 °C), po dobu 10 až 30 hodin (s výhodou 20 hodin)]. Reakční směs se odpaří dosucha a požadovaný 1[10,11-(popřípadě substituovaný)methanodibenzosuber-5-yl]-4-formylpiperazin se izoluje a přečistí obvyklými metodami [např. zbytek se rozdělí mezi vodný roztok NaHCO₃ a ethyiacetát, organická fáze se promyje vodou, vysuší (např. nad K₂CO₃) a odpaří]. Jednotlivé syn-a antiizomery ve zbytku se rozdělí např. pomocí flash chromatografíe na silikagelu (30% aceton/hexan).

Příprava sloučenin obecného vzorce IX

Roztok 1—[10,11 -(popřípadě substituovaného)methanodibenzosuber-5-yl]-4-formyIpiperazinu a hydroxidu draselného v rozpouštědle (např. v roztoku ethanolu ve vodě 9:1) se vaří pod zpětným chladičem po dobu 0, 5 až 2 hodin (s výhodou 1 hodinu) a pak se ochladí. Ochlazená reakční směs se zkoncentruje, zředí ve vodě, extrahuje (např. ethylacetátem), vysuší (např. nad K₂CO₃) a organická fáze se odpaří, čímž se získá příslušný 1-[10,11-(popřípadě substituovaný)methanodibenzosuber-5-yl]piperazin.

-14CZ 287273 B6

Příprava sloučenin obecného vzorce I

Roztok sloučeniny obecného vzorce III [např. l-(aryloxy nebo heteroaryloxy)-2,3-epoxypropan nebo l-(aryloxy nebo heteroaryloxy)-3,4-epoxybutan] nebo aryloxy- nebo heteroaryloxyalkylhalogenidu obecného vzorce X a 1-(10,11-(popřípadě substituovaného)methanodibenzosuber-5yljpiperazinu se vaří pod zpětným chladičem v rozpouštědle (např. isopropanolu) po dobu 10 až 30 hodin (s výhodou 20 hodin). Požadovaný produkt, což je příslušný 10,11-methanodibenzosuberanový derivát obecného vzorce I, se izoluje a přečistí obvyklými prostředky [např. odpařením dosucha a chromatografií na silikagelu (např. užitím směsí 70:30:1 ethylacetátu/hexanu/triethylaminu)].

Reakční schéma 2
	0.	0^_____ _
	[/ CUH2JnX	* C ch2} π- θ- R
	(XI)	(III)
R3-OH + (XII)	Υ-ΓΓΙ4 Ί — Y
		► X-CCII23m-O-Rn
	(XIII)	(X)

Příprava sloučenin obecného vzorce ΠΙ

Do roztoku aryl- nebo heteroarylalkoholu (např. benzofurazan-4-ol, chinolin-5-ol nebo 2nitrifenol), rozpuštěného v rozpouštědle (např. acetonitril, THF nebo dimethylformamid) se přidá v mírném nadbytku silná zásada (např. hydrid sodný nebo t-butoxid draselný). Směs se zahřívá (např. na 50 °C) pod obu 10 minut až 2 hodin (s výhodou 30 minut). Přidá se sloučenina obecného vzorce XI (jako je l-chlor-2,3-epoxybutan, l-brom-2,3-epoxybutan, epibromhydrid, epichlorhydrin nebo jejich tosylové nebo mesylové deriváty) a směs se zahřívá (např. na 60 °C po dobu 1 až 5 hodin, s výhodou 2 hodin). Reakční směs se vyleje do vody a extrahuje se (např. ethylacetátem). Organická fáze se promyje vodou, vysuší nad Na₂SO₄ a příslušný l-(aryloxy nebo heteroaryloxy)-2,3-epoxypropan nebo l-(aryloxy nebo heteroaryloxy)-3,4-epoxybutan se izoluje a přečistí obvyklými prostředky [např. chromatografií na silikagelu (50% ethylacetát/hexan)]

Sloučeniny obecného vzorce ΙΠ, jako l-(5-chinolyloxy)-2,3-epoxypropan mohou být také syntetizovány podle nároku uvedeného v Drug Design and Discovery, Vol. 9, 69 (1992), zahrnutém zde formou odkazu.

Příprava sloučenin obecného vzorce X

Jak je vidět v reakčním schématu 2, anion aryl- nebo heteroalkylalkoholu reaguje s dihaloenalkylovou sloučeninou obecného vzorce ΧΙΠ, jako je l-brom-2-chlorethan, 1-brom3-chlorpropan nebo l-brom-4-chlorbutan, v rozpouštědle (jako je např. aceton, THF nebo DMF), v teplotním rozmezí od teploty místnosti až k teplotě varu daného rozpouštědla, za vzniku příslušné halogenalkyloxyarylové (nebo heteroarylové) sloučeniny obecného vzorce X. Tato syntéza je popsána v USA patentu č. 5112817, zahrnutém zde již formou odkazu.

-15CZ 287273 B6

Reakční schéma 3

(XIV)

Příprava sloučenin obecného vzorce XIV

Jak vidíme v kroku 1 reakčním schématu 3, sloučenina 1—[10,11—(popřípadě substituovaný)methanodibenzosuber-5-yl]piperazin obecného vzorce V reaguje se sloučeninou obecného vzorce IX (např. sloučenina, kde „n“ se rovná 2, je znázorněna v reakčním schématu 3, jiné sloučeniny obecného vzorce XI budou dávat zase jiné odpovídající produkty), za podmínek již popsaných v části „Příprava sloučenin obecného vzorce ΠΙ“ (reakční schémat 2), za vzniku 1[10,ll-(popřípadě substituované)methanodibenzosuber-5-yl]-4-(3,4-epoxybutyl)piperazinové sloučeniny obecného vzorce XIV.

Příprava sloučenin obecného vzorce I, kde R^b je OH

Jak vidíme v kroku 2 reakčního schématu 3, sloučenina 1-(10,11-(popřípadě substituovaný)methanodibenzosuber-5-yl]-4-(3,4-epoxybutyl)piperazin obecného vzorce XTV reaguje s aryl- nebo heteroalkylalkoholem (jako je benzofurazan-4-ol, chinolin-5-ol nebo 2-nitrofenol), za podmínek již popsaných v části „Příprava sloučenin obecného vzorce I“ (reakční schémat 1), za vzniku příslušné sloučeniny obecného vzorce I, kde R^b je OH.

Příprava sloučenin obecného vzorce I, kde R^a nebo R^b je nižší acyloxy

Sloučeniny obecného vzorce I, kde R^a nebo R^b je nižší acyloxy, se připravují podle návodu popsaného v USA patentu č. 5112817, zahrnutém zde již formou odkazu. Primární látka je

-16CZ 287273 B6 příslušná sloučenina obecného vzorce I, kde R^a nebo R^b je OH (připravená podle výše uvedeného návodu). Například sloučenina obecného vzorce I, kde R^a nebo R^b je OH, reaguje s acylchloridem za vzniku příslušné acyloxysloučeniny.

Příprava solí sloučenin obecného vzorce I

Sloučeniny obecného vzorce mohou být převedeny na adiční soli kyselin. Přeměna je prováděna přidáním stechiometrického množství příslušné kyseliny, jako je kyselina chlorovodíková (např. 3 molámí ekvivalenty kyseliny pro vznik trihydrochloridové soli v případě, že sloučenina obecného vzorce I obsahuje 3 zásadité dusíkové atomy). V případě, že R³ je fenyl, sloučenina obecného vzorce I má pouze 2 zásadité dusíkové atomy a bude tak absorbovat pouze 2 molámí ekvivalenty kyseliny za vzniku příslušné adiční soli kyseliny. Pokud substituenty R³ obsahuje 4 zásadité dusíkové atomy, zásada obecného vzorce I bude absorbovat 4 ekvivalenty kyseliny. Výhodné adiční soli kyselin obsahují 2 nebo 3 ekvivalenty kyseliny. Nejvýhodnější jsou adiční soli obsahující 3 ekvivalenty. Při vytváření soli podle tohoto vynálezu je obvykle volná zásada rozpuštěna v polárním organickém rozpouštědle, jako je methanol nebo ethanol a kyselina je přidávána do vody, methanolu nebo ethanolu. Teplota je udržována v rozmezí 0 až 50 °C. Příslušná sůl se vysráží buď sama, nebo může být získána z roztoku pomocí méně polárního rozpouštědla, odpařením rozpouštědla nebo ochlazením roztoku.

Při uvolňování volné zásady obecného vzorce I podle tohoto vynálezu, může být adiční sůl sloučeniny obecného vzorce I a kyseliny rozložena na příslušné volné zásady přidáním nadbytku vhodné zásady, jako je amoniak nebo hydrogenuhličitan sodný, obvykle za přítomnosti vodného rozpouštědla a v teplotním rozmezí 0 až 50 °C. Volná zásada se izoluje obvyklými prostředky, jako je extrakce organickým rozpouštědlem. Je samozřejmé, že stechiometrický nadbytek zásady musí brát v úvahu počet ekvivalentů kyseliny, vázaných zásadou obecného vzorce I.

Výhodné volné zásady obecného vzorce I obsahují 2 až 3 zásadité dusíkové atomy. Nej výhodnější zásady obsahují 3 zásadité dusíkové atomy.

Výhodné způsoby přípravy a závěrečné kroky l-(aryloxy nebo heteroaryloxy)-2,3-epoxypropan nebo l-(aryloxy nebo heteroaryloxy)-3,4epoxybutan, nebo aryloxy- nebo heteroaryloxyalkylhalogenid a 1—[10,11—(popřípadě substituovaný)methanodibenzosuber-5-yl]piperazin se sloučí za vzniku příslušného 10,11-methanodibenzosuberanového derivátu obecného vzorce I.

Sloučenina obecného vzorce I, kde R^a nebo R^b je OH, reaguje s acylchloridem za vzniku příslušné acyloxysloučeniny.

Sloučenina obecného vzorce XTV reaguje s alkoholem R³-OH za vzniku příslušného 10,11— methanodibenzosuberanového derivátu obecného vzorce I.

Sloučenina obecného vzorce I se přivede do kontaktu s farmaceuticky přijatelnou kyselinou za vzniku odpovídající adiční soli kyseliny.

Farmaceuticky přijatelná adiční sůl kyseliny a sloučeniny obecného vzorce I se přivede do styku se zásadou za vzniku příslušné volné zásady obecného vzorce I.

Výhodné jsou sloučeniny obecného vzorce I, kde R¹ a R² jsou F. Dále jsou výhodné sloučeniny, kde A je 2-hydroxypropylen. Dále jsou výhodné ty sloučeniny, kde R³ je 5-chinolyl nebo 4benzofurazanyl. Dále jsou výhodné ty sloučeniny, které kombinují výše uvedené rysy. Určité samostatné izomery jsou také výhodné.

-17CZ 287273 B6

Nej výhodnější je sloučenina

5—{3—[4—(10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yl]-2-hydroxypropoxy}-chinolin, obzvláště pak její izomer (2R)-anti.

Průmyslové využití

Obecné využití

Sloučeniny tohoto vynálezu jsou chemosenzibilační nebo potenciační činidla a jsou také užitečné jako činidla modifikující rezistenci. Používají sejednak pro léčení multiléčivové rezistence (tj. po objevení se příznaků klinické rezistence), ale mohou být také podávány hned na počátku chemoterapie (tj. ještě před tím, než se příznaky klinické rezistence objeví) pro zvýšení účinnosti primárně podávaných kancerostatik. Dále jsou sloučeniny tohoto vynálezu užitečné při léčení malárie rezistentní vůči léčivům.

Testování

Účinnost in vitro chemosenzibilačních nebo potenciačních činidel, vhodných pro léčení multiléčivové rezistence, se stanovuje proliferační zkouškou MTT, například modifikovanou zkouškou popsanou vMosmann, T. „Rapid Colorimetric Asssay For Cellular Growth And Survival: Application to proliferation and cytotoxicity asays,“ J. Immunol. Meth., Vol. 65, 55 - 63 (1983). Další proliferační zkouška MTT je popsána v Alley, et al., Feasibility of Drug Screening with Panels of Human Tumor Cell Lineš Úsing a Microculture Tetrazolium Assay,“ Cancer Research, Vol. 48,589-601 (1988).

Účinnost in vivo chemosenzibilačních nebo potenciačních činidel, vhodných pro léčení multiléčivové rezistence, se stanovuje například metodou popsanou v Slate and Michelson, „Drug Resistance Reversal Strategies: A Comparasion Of Experimental Data With Model Predictions,“ J. Nati. Cancer Inst., Vol. 83, 1574 - 1580 (1991). Jiné testovací procedury in vivo jsou popsány v Sáto, et al., „Circumvention of Multidrug Resistance by a Newly Synthesized Quinoline Derivative, MS-073,“ Cancer Research, Vol 51, 2420 - 2424 (1991). Tsuruo, et al., „Circumvention of Vincristine and Adriamycin Resistance in Vitro and in Vivo by Calcium Influx Blockers,“ Cance Research, Vol 43, 2905 - 2910 (1983) a Tsuruo, et al., „Overcoming of Vincristine Resistance in P388 Leukemia in Vivo and in Vitro through Enhanced Cytotoxicity of Vincristine and Vinblastine by Verapamil, „Cancer Research, Vol. 41, 1967 - 1972 (1981).

Stabilita sloučenin v roztoku je stanovována běžnými metodami, např. měřením množství sloučeniny, přetrvávajícím v roztoku při různých hodnotách pH a teploty.

Podávání

Sloučeniny obecného vzorce I jsou podávány v terapeuticky účinných dávkách, tj. dávkách současně s druhým účinným činidlem, výhodně s protirakovinným chemoterapeutikem, zvláště vybraným z již uvedeného seznamu účinných činidel a nejvýhodněji s protirakovinným chemoterapeutikem, vůči kterému byla u léčeného savce prokázána klinická rezistence. Podávání sloučenin tohoto vynálezu nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí může být prováděno jakýmkoli způsobem, obvyklým u podobných činidel.

Ačkoli optimální podávači dávky sloučenin tohoto vynálezu pro člověka teprve budou muset být stanoven, obecně se denní dávky pohybují v rozmezí 0,01 až 4 mg/kg tělesné hmotnosti, výhodně 0,1 až 2 mg/kg tělesné hmotnosti a nejvýhodněji 0,3 - 1 mg/kg tělesné hmotnosti. U osob s tělesnou hmotností 70 kg by se tak denní dávka měla pohybovat v rozmezí 0,7 až 280 mg, výhodně v rozmezí 7 až 140 mg a nej výhodněji v rozmezí 21 až 70 mg. Množství podávané

-18CZ 287273 B6 účinné sloučeniny bude samozřejmě záviset na diagnóze a stádiu léčené nemoci, zátěži pacienta, způsobu a rozvrhu podávání léku (např. per os den před začátkem vlastní chemoterapie a intravenózně během chemoterapie) a také na vlastní úvaze předepisujícího lékaře.

Při využívání sloučenin tohoto vynálezu pro léčení výše popisovaných stavů, lze použít jakýkoli farmaceuticky přijatelný způsob podávání léku. Sloučeniny obecného vzorce I mohou být podávány bud’ samotně, nebo v kombinaci s jinými farmaceuticky přijatelnými vehikuly, včetně tuhých, polotuhých, kapalných nebo aerosolových forem, jako jsou například tablety, kapsle, prášek, kapaliny, suspenze, čípky, aerosoly a podobné formy. Sloučeniny obecného vzorce I mohou být také podávány v trvale nebo postupně se uvolňujících formách, včetně depozitních injekcí, osmotických pump, pilulek, transdermálních (včetně elektrotransportních) a podobných metod, prodlužujících délku působení sloučeniny na předem stanovenou dobu, s výhodou ve formách umožňujících podávání jednotlivých přesných dávek. Prostředky budou obvykle obsahovat konvenční farmaceutický nosič nebo vehikulum a sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl. Navíc také tyto prostředky mohou obsahovat další medicínská činidla, farmaceutická činidla, nosiče, adjuvanta atd., jako jsou protirakovinná chemoterapeutika vyjmenovaná v předchozích částech textu.

Obecně bude obsahovat farmaceuticky přijatelný prostředek, v závislosti na zamýšleném způsobu podávání, od 0,1 do 90 % hmotnostních s výhodou 0,5 až 50 % hmotnostních sloučeniny nebo soli obecného vzorce I a zbytek připadá na vhodná farmaceutická vehikula, nosiče atd.

Jeden ze způsobů podávání, výhodný pro podmínky popsané výše, je podávání per os, využívající konvenční režim denních dávek, případně upravených v závislosti na zátěži pacienta. Pro takové podávání per os je sestaven farmaceuticky přijatelný netoxický prostředek, vytvořený použitím kteréhokoli z běžně používaných vehikul, jako je například mannitol, laktóza, škrob, magnéziumstearát, natriumsacharin, práškovaný talek, celulóza, natriumkrosskarmellóza, glukóza, želatina, sacharóza, uhličitan hořečnatý a podobné látky. Takové prostředky existují ve formě roztoků, suspenzí, tablet, rozpustných tablet, pilulek, kapslí, prášku, trvale se uvolňujících fází a podobných prostředků.

Forma tablet nebo pilulek je pro tyto prostředky výhodná. Prostředek tak bude obsahovat, kromě účinných přísad, také ředicí fázi, jako je laktóza, sacharóza, fosforečnan divápenatý nebo podobné látky, dále mazivo, jako je magnéziumstearát nebo podobné látky a pojidlo, jako je škrob, arabská guma, želatina, polyvinylpyrrolidon, celulóza a její deriváty a podobné látky.

Kapalný prostředek, vhodný pro farmaceutické podávání, může být například připravený rozpuštěním, disperzí atd. účinné sloučeniny definované výše a případného farmaceutického adjuvanta v nosiči, jako je například voda, fyziologický roztok, vodný roztok dextrosy, glycerol, glykol, ethanol a podobné látky, za vzniku příslušného roztoku nebo suspenze. V případě potřeby může podávaný farmaceutický prostředek obsahovat také malá množství netoxických pomocných substancí, jako jsou smáčedla, emulgátory nebo solubilizátory, pH adjustační činidla a podobné látky, například acetát, natriumcitrát, deriváty cyklodextrinu, sorbitanmonolaurát, triethanolaminnatriumacetát, triethanolaminoleát atd. Skutečné způsoby přípravy těchto dávkovaných forem jsou odborníkům známé nebo zřejmé, viz například Remingtonů PharmaceuticalSciences Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania, 15^,h Edition, 1975. V každém případě bude podávaný prostředek či přípravek obsahovat takové množství účinné sloučeniny, které dostačuje ke zmírnění symptomů léčené nemoci.

Lze připravit dávkované formy nebo prostředky, obsahující účinnou složku v rozsahu od 0,05 až do 95 % a zbytek tvořený netoxickým nosičem.

Farmaceuticky přijatelný netoxický prostředek, určený pro podávání per os, je vytvořen zahrnutím libovolného z obvykle používaných vehikul, jako je například farmaceuticky kvalitní mannitol, laktóza, škrob, magnéziumstearát, práškovaný talek, deriváty celulózy, natrium

-19CZ 287273 B6 krosskarmellóza, glukóza, sacharóza, uhličitan hořečnatý, natriumsacharin a podobné látky. Prostředky jsou ve formě roztoků, suspenzí, tablet, kapslí, prášku, trvale se uvolňujících fází a podobných forem. Takové prostředky mohou obsahovat 0,01 až 95 %, s výhodou 0,1 až 50% účinné složky.

U pevných dávkovaných forem je roztok nebo suspenze účinné látky v například propylen- nebo ethylenkarbonátu nebo v jejich směsi, v rostlinných olejích nebo triglyceridech, s výhodou uzavírána do želatinové kapsle. Takové roztoky, jejich příprava a uzavírání do kapslí jsou popsány v USA patentech č. 4328245, 4409239 a 4410545. U kapalných dávkovaných forem může být roztok, např. polyethylenglykolu naředěn, pro snadnější odměřování dávek, patřičným objemem farmaceuticky přijatelného kapalného nosiče, např. vody.

Kapalné nebo polotuhé přípravky, určené pro podávání per os, mohou být také připraveny rozpuštěním nebo disperzí účinné sloučeniny nebo soli v rostlinném oleji, glykolu, triglyceridech, propylenglykolesterech (např. propylenkarbonátu), ethylenkarbonátu a jejich směsích a podobných látkách a uzavřením těchto roztoků nebo suspenzí do měkkých nebo tvrdých želatinových kapslí.

Jiné užitečné přípravky zahrnující ty, které jsou vyjmenované v USA patentech č. 28819 a 4358603.

Další výhodou tohoto vynálezu je, díky vynikající stabilitě sloučeniny obecného vzorce I, vhodnost této látky pro podávání per os a pro parenterální podávání, na rozdíl od již zmiňované látky MS-073.

Parenterální podávání je obecně charakterizováno podáváním léků injekcemi, a to bud’ podkožně, nitrosvalově nebo nitrožilně. Injekce mohou být připraveny v běžných formách, buď jako kapalné roztoky nebo suspense, pevné formy určené pro rozpuštění nebo vytvoření suspenze těsně před podáním nebo jako emulze. Vhodná vehikula jsou například voda, fyziologický roztok, dextróza, glycerol, ethanol a podobné látky. V případě potřeby tyto podávané farmaceutické prostředky mohou obsahovat také malá množství netoxických pomocných substancí, jako jsou smáčecí, emulgační nebo pH adjustační činidla, činidla zlepšující rozpustnost a podobné látky, jako jsou například natriumacetát, sorbitanmonolaurát, triethanolaminoleát, cyklodextriny atd.

Nejmodemější způsoby parenterálního podávání léků zahrnují implantaci pomalu nebo trvale se uvolňujících systémů, umožňujících dosáhnout konstantní hladiny účinné látky, vstupující do organismu. Viz např. USA patent č. 3710795.

Procentový obsah účinné sloučeniny v takovém parenterálním prostředku je velmi závislý na specifické povaze účinné sloučeniny, jakož i na její účinnosti na a potřebách subjektu. Vhodné procentové koncentrace účinných přísad však jsou od 0,01 do 10 % v roztoku. V případě, že je prostředek v tuhé formě, koncentrace je vyšší a na uvedené hodnoty se naředí až po rozpuštění.

Dále lze připravit roztoky pro nazální podávání, a to buď samotné účinné sloučeniny, nebo v kombinaci ostatními farmaceuticky přijatelnými vehikuly.

Přípravky obsahující účinnou sloučeniny nebo jejich soli jsou podávány také dýchacím traktem ve formě aerosolu nebo roztoku z nebulizéru nebo jako mikrojemný prášek pro insuflaci, a to buď samostatně, nebo v kombinaci s inertním nosičem, jako je laktóza. Částice přípravku mají v takovém případě průměr menší než 50 mikronů, s výhodou méně než 10 mikronů.

-20CZ 287273 B6

Příklady provedení vynálezu

Následující příklady a způsoby přípravy látek jsou určeny odborníkům k usnadnění porozumění a praktické realizaci vynálezu. Neměly by považovány za příklady vymezující vynález, pouze ho ilustrují a zastupují.

Příklad 1

10,11 -difluormethanodibenzosuberon

IA. Obecný vzorec VI, kde R¹ a R² jsou F.

Roztok natriumchlordifluoracetátu (350 g) vdiglymu (1400 ml) se 6 hodin přikapával do roztoku dibenzosuberonu (25 g) v diglymu (500 ml), za horního míchání, v dusíkové atmosféře, za současného udržování reakční teploty v rozmezí 160 až 165 °C. Ochlazená reakční směs se vylila do vody (1,8 1) a extrahovala se etherem (1,8 1). Organická fáze se promyla vodou, vysušila nad Na₂SO₄ a odpařila se. Zbytek se rekrystalizoval nejprve z ethanolu a poté z acetonu/hexanu, čímž se získalo 14 g 10,11-difluormethanodibenzosuberonu, s teplotou tání 149,6 °C. Dalších 6,5 g požadované látky se získalo flash chromatografíí zkombinovaných matečných roztoků na silikagelu, eluováných 20% acetonem/hexanem.

IB. Obecný vzorec VI, s různými substituenty na R¹ a R².

Postupem popsaným v části A a záměnou natriumchlordifluoracetátu za:

a. methyltrichloracetát,

b. methyltribromacetát,

c. natriumdichlorfluoracetát, se získají následující příslušné sloučeniny:

a. 10,11-dichlormethanodibenzosuberon,

b. 10,11-dibrommethanodibenzosuberon,

c. 10,11-chlorfluormethanodibenzosuberon.

Příklad 2

10,1 l-difluormethanodibenzosuberol

2A. Obecný vzorec VII, kde R¹ a R² jsou F.

Roztok 10,11-difluormethanodibenzosuberonu (20,4 g) v THF/MeOH (1:2, 900 ml) se ochladil na ledové lázni. Po malých dávkách se přidával tetrahydroboritan sodný (12 g). Po odstranění chladicí lázně se reakční směs míchala po dobu 2 hodin při teplotě místnosti a poté se vylila do vody. Produkt se odfiltroval, promyl vodou a vysušil, čímž se získalo 20 g 10,11difluormethanodibenzosuberolu, s teplotou tání 230,1 až 230,6 °C.

2B. Obecný vzorec VII, s různými substituenty na R¹ a R².

Postupem popsaným v části A a záměnou 10,11-difluormethanodibenzosuberonuza:

a. 10,11-dichlormethanodibenzosuberon,

b. 10,11-dibrommethanodibenzosuberon,

-21CZ 287273 B6

c. 10,11-methanodibenzosuberon,

d. 10,11-chlorfluormethanodibenzosuberon, se získají následující příslušné sloučeniny:

a. 10,11-dichlormethanodibenzosuberol,

b. 10,11-dibrommethanodibenzosuberol,

c. 10,11-methanodibenzosuberol,

d. 10,11-chlorfluormethanodibenzosuberol.

Příklad 3

Syn- a anti—1—(10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)-4-formylpiperazin

A. Obecný vzorec VHI, kde R¹ a R² jsou F a R je formyl.

Do roztoku 10,11-difluormethanodibenzosuberolu (5,2 g) vdioxanu (70 ml), chlazeného v ledové lázni, se po kapkách přidal thionylchlorid (4,5 ml). Teplota byla zvýšena na 50 °C a udržovala se tak 4 hodiny. Reakční směs se odpařila dosucha, čímž se získala směs syn- a anti5-chlor-10,l 1-difluormethanodibenzosuberanu (5,7 g), který se rozpustil v acetonitrilu (200 ml) a poté se do něho přidal 1-piperazinkarboxaldehyd (10 ml). Směs se míchala v dusíkové atmosféře při teplotě 100 °C (teplota lázně) po dobu 20 hodin a poté se odpařila dosucha. Zbytek se rozdělil mezi vodný roztok NaHCO₃ a ethylacetát. Organická fáze se promyla vodou, vysušila nad K₂CO₃ a odpařila se. Ze zbytku se získal flash chromatografii na silikagelu (30% aceton/hexan) syn-l-(10,l l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)-4-fbnnylpiperazin (2,4 g) s teplotou tání 213 °C a anti—1-(10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)-4-formylpiperazin (2,6 g), s teplotou tání 238 °C:

3B. Obecný vzorec VHI, s různými substituenty na R¹ a R².

Postupem popsaným v části A a záměnou

10,11-difluormethanodibenzosuberolu za:

a. 10,11-dichlormethanodibenzosuberol,

b. 10,11-dibrommethanodienzosuberol,

c. 10,11-methanodibenzosuberol,

d. 10,11-chlorfluormethanodibenzosuberol, se získají následující příslušné sloučeniny al. anti-l-(10,l l-dichlormethanodibenzosuber-5-yl)-4—formylpiperazin, t.t. = 205 °C, a2. syn-l-(10,l l-dichlormethanodibenzosuber-5-yl)-4-formylpiperazin, bl. anti—1—(10,1 l-dibrommethanodibenzosuber-5-yl)-4-formylpiperazin, b2. syn-l-(10,l l-dibrommethanodibenzosuber-5-yl)-4-fonnylpiperazin, cl. anti-1-(10,1 l-methanodibenzosuber-5-yl)-4-formylpiperazin, t.t. = 195 °C, c2. syn-l-(10,l l-methanodibenzosuber-5-yl)-4—formylpiperazin, dl. anti-l-(10,l l-chIorfluormethanodibenzosuber-5-yl)-4-formylpiperazin, d2. syn-l-(10,l l-chlorfluormethanodibenzosuber-5-yl)-4-formylpiperazin.

-22CZ 287273 B6

Příklad 4

Anti—1-(10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin

4A. Obecný vzorec IX, kde R¹ a R² jsou F.

Roztok anti—1-(10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)-4-formylpiperazinu (2,55 g) a hydroxidu draselného (3,0 g) v ethanolu/H₂O (9:1, 100 ml) se vařil pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny a poté se ochladil. Ochlazená reakční směs se zkoncentrovala, rozředila vodou, extrahovala ethylacetátem a vysušila se nad K₂CO₃. Vysušená organická fáze se odpařila, čímž se získal anti-l-(10,ll-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin (2,35 g), s teplotou tání 131 °C.

4B. Obecný vzorec VII, s různými substituenty na R¹ a R²⁺

Postupem popsaným v části A a záměnou anti—1-(10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)-4formylpiperazinu za

a. syn-l-(10,l l-difluormethanodibenzosuber-5-yI)-4-formyipiperazin,

b. anti—1—(10,1 l-dichlormethanodibenzosuber-5-yl)-4-formylpiperazin,

c. syn-l-(10,l l-dichlormethanodibenzosuber-5-yl)-4-formylpiperazin,

d. anti-1-(10,11 -dibrommethanodibenzosuber-5-yl)-4—formylpiperazin,

e. syn-l-(10,l l-dibrommethanodibenzosuber-5-yl)-4-formylpiperazin,

f. anti—1—(10,1 l-methanodibenzosuber-5-yl)-4-formylpiperazin,

g. syn-l-(10,l l-methanodibenzosuber-5-yl)-4-formylpiperazin,

h. anti—1—(10,1 l-chlorfluormethanodibenzosuber-5-yl)-4-formylpiperazin,

i. syn-l-(10,l l-chlorfluormethanodibenzosuber-5-yl)-4-formylpiperazin, se získají následující příslušné sloučeniny:

a. syn-l-(10,ll-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin, t.t. = 225,5 °C,

b. anti-l-(10,ll-díchlormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin, t.t. = 199°C,

c. syn-l-(10,l l-dichlormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin,

d. anti—1—< 10,1 l-dibrommethanodibenzosuber-5-yl)piperazin,

e. syn-l-(10,l l-dibrommethanodibenzosuber-5-yl)piperazin,

f. anti-l-(10,ll-methanodibenzosuber-5-yl)piperazin,t.t. = 103 °C,

g. syn-1-(10,11 -methanodibenzosuber-5-yl)piperazin,

h. anti—1—(10,1 l-chlorfluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin,

i. syn-l-(10,l l-chIorfluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin.

Příklad 5 l-(4-benzofurazanyloxy)-2,3-epoxypropan

5A. Obecný vzorec ΙΠ, kde R³ je benzofurazanyl a „n“ je 1.

Hydrid sodný (620 mg, 60% olejová dispeze) se přidal po částech do benzofurazan—4-olu (1,74 g) v dimethylformamidu (30 ml). Směs se zahřívala na 50 °C po dobu 30 minut. Do směsi se přidal epibromhydrid (1,6 ml) a směs se zahřívala na 60 °C po dobu 2 hodin. Reakční směs se vylila do vody a extrahovala se ethylacetátem. Organická fáze se promyla vodou, vysušila nad Na₂SO₄ a odpařila se. Ze zbytku se chromatografií na silikagelu (30% ethylacetát/hexan) získal l-(4-benzofurazanyloxy)-2,3-epoxypropan (1,6 g), s teplotou tání 75 °C:

-23CZ 287273 B6

5B. Obecný vzorec ΙΠ, s různými substituenty na R³ a proměnlivou hodnotou „n“.

Postupem popsaným v části A a záměnou benzofurazan-4-olu a epibromhydrinu za:

a. chinolin-5-ol a l-chlor-3,4-epoxybutan,

b. 2-nitrofenol a epibromhydrin,

c. 2-chlorfenol a epibromhydrin,

d. 2-diflouromethanosyfenol a epibromhydrin,

e. pyridin-3-ol a epibromhydrin,

f. chinolin-5-ol a epibromhydrin, se získají následující příslušné sloučeniny:

a. l-(5-chinolyloxy)-3,4-epoxybutan,

b. l-(2-nitrofenoxy)-2,3-epoxypropan,

c. l-(2-chlorfenoxy)-2,3-epoxypropan,

d. l-(2-difluormethoxyfenoxy)-2,3-epoxypropan,

e. l-(3-pyridyloxy)-2,3-epoxypropan,

f. l-(chinolyloxy)-2,3-epoxypropan.

5C. Obecný vzorec X, s různými substituenty na R³ a proměnlivou hodnotou „n“.

Postupem popsaným v části A a záměnou benzofurazan-4-olu a epibromhydrinu za

a. chinolin-5-ol a l-brom-3-chlorpropan,

b. chinolin-5-ol a 1-brom—4-chlorbutan,

c. 2-nitrofenol a l-brom-3-chlorpropan, se získají následující příslušné sloučeniny:

a. l-(5-chinolyloxy)-3-chlorpropan,

b. l-(5-chinolyloxy)-4-chlorbutan,

c. l-(2-nitrofenoxy)-3-chlorpropan.

Příklad 6 (2R,S)-anti-5-{ 3—[4—(10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yI]-2-hydroxypropoxy}chinolin

6A. Obecný vzorec I, kde R¹ a R² jsou F, A je (2R,S)-hydroxypropyl a R³ je 5-chinolyl.

Roztok l-(5-chinolyloxy)-2,3-epoxypropanu (586 mg) a anti-l-(10,ll-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazinu (950 mg) v isopropanolu (20 ml) se vařil pod zpětným chladičem po dobu 20 hodin. Reakční směs se odpařila dosucha a chromatografií na silikagelu (70:30:1 ethylcetát/hexan/triethylamin) se ze zbytku získal (2R,S)-anti-5-{3-[4-(10,ll-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yl]-2-hydroxypropoxy}chinolin (1,33 g), který se reakcí s 3 molámími ekvivalenty HC1 převedl na trihydrochloridovou sůl, s teplotou tání 193,5 °C.

6B. Izomery obecného vzorce I, s různými substituenty na R¹, R², R³ a A.

Postupem popsaným v části A a záměnou anti-l-(10,l l-difluormethanodibenzosuber-5yl)piperazinu a l-(5-chinolyloxy)-2,3-epoxypropanu za:

-24CZ 287273 B6

a. syn-l-(10,l l-difluormethanodibenosuber-5-yl)piperazin a l-(5-chinolyloxy)-2,3-epoxypropan,

b. anti-l-(10,l l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin a (2R)-l-(5-chinolyloxy)-2,3epoxypropan,

c. anti-l-(10,ll-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin a (2S)-l-(5-chinolyloxy)-2,3epoxypropan,

d. syn-l-(10,ll-difluonnethanodibenzosuber-5-yl)piperazin a (2R)-l-(5-chinolyloxy)-2,3epoxypropan,

e. syn-l-(10,l l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin a (2S)-l-(5-chinolyloxy)-2,3epoxypropan,

f. anti-l-(10,ll-dichlormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin a l-(5-chinolyloxy)-2,3-epoxypropan,

g. anti-l-(10,ll-dichlormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin a (2R)-l-(5-chinolyloxy)-2,3epoxypropan,

h. anti-l-(10,ll-dichlormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin a (2S)-l-(5-chinolyloxy)-2,3epoxypropan,

i. anti—1—(10,1 l-methanodibenzosuber-5-yl)piperazin a l-(5-chinolyloxy)-2,3-epoxypropan,

j. anti—1—(10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin a l-(4-benzofurazanyloxy)-2,3epoxypropan,

k. syn-l-(10,l l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin a l-(4-benzofurazanyloxy)-2,3epoxypropan,

l. anti-l-(10,ll-dichlonnethanodibenzosuber-5-yl)piperazin a l-(4-benzofurazanyloxy)-2,3epoxypropan,

m. anti-l-(10,ll-difluonnethanodibenzosuber-5-yl)piperazin a l-(2-nitrofenoxy)-2,3-epoxypropan,

n. anti-l-(10,ll-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin a l-(2-chlorfenoxy)-2,3-epoxypropan,

o. anti-l-(10,ll-difluonnethanodibenzosuber-5-yl)piperazin a l-(2-difluormethoxyfenoxy)2,3-epoxypropan,

p. anti-l-(10,ll-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin a l-(3-pyridyloxy)-2,3- epoxypropan,

q. anti-l-(10,ll-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin a l-(5-chinolyloxy)-3- chlorpropan,

r. anti-l-(10,l l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazina l-(5-chinolyloxy)-4-chlorbutan,

s. anti-1-(10,1 l-difluormethanodienzosuber-5-yl)piperazin a l-(2-nitrofenoxy)-3-chlorpropan,

-25CZ 287273 B6

t. anti-1-(10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin a l-(5-chinolyloxy)-3,4-epoxybutan, se získají následující příslušné sloučeniny:

a. (2R,S)-syn-5-{ 3-(4-( 10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yl]-2-hydroxypropoxyjchinolin, t.t. = 208 °C (trihydrochlorid),

b. (2R)-anti-5-{3-(4-( 10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yI]-2-hydroxypropoxyjchinolin, t.t. = 190 °C (trihydochlorid),

c. (2S)-anti -5-(3-(4-(10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yl]-2-hydroxypropoxyjchinolin, t.t. = 195 °C (trihydochlorid),

d. (2R)-syn-5-{3-(4-( 10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yl]-2-hydroxypropoxy}chinolin, t.t. = 193 °C (trihydochlorid),

e. (2S)-syn-5-{3-(4-( 10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yI]-2-hydroxypropoxy}chinolin, t.t. = 188,5 °C (trihydochlorid),

f. (2R,S)-anti-5-{3-(4-(10,ll-dichlormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin— l-yI]-2-hydroxypropoxy}chinolin, t.t. = 195 °C (trihydochlorid),

g. (2R)-anti-5-{3-(4-( 10,1 l-dichlormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yl]-2-hydroxypropoxy}chinolin, t.t. = 218 °C (trohydochlorid),

h. (2S)-anti-5-{3-(4-( 10,1 l-dichlormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-y[|-2-hydroxypropoxyjchinolin, t.t. = 215 °C (trihydochlorid),

i. (2R, S)-anti-5-{ 3-(4-( 10,11 -methanodibenzosuber-5-yl)piperazin-1 -yl]-2-hydroxypropoxyjchinolin, rozmezí t.t. = 87,4 až 99,3 °C, hmotnost, spektr.: molekulární ion = 491

j. (2R,S)-anti-4-{3-(4-( 10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yí]-2-hydroxypropoxy}benzofurazan, t.t. = 186 °C (dihydrochlorid),

k. (2R,S)-syn-4—(3-(4-(10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yI]-2-hydroxypropoxy}benzofurazan, t.t. = 188 °C (dihydrochlorid),

l. (2R,S)-anti-4-{3-(4-( 10,1 l-dichlormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yI]-2-hydroxypropoxy} benzofurazan,

m. (2R,S)-anti-l-{3-[4-(10,ll-difluormthanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yI]-2-hydroxypropoxy}-2-nitrobenzen,

n. (2R,S)-anti-l-{3-(4-(10,ll-difluormthanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yí]-2-hydroxypropoxy }-2-chlorbenzen,

o. (2R,S)-anti-1 -{3-(4-( 10,11 -difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-1 -yIj-2-hydroxypropoxy }-2-difluormethoxybenzen,

p. (2R,S)-anti-3-( 3-(4-(10, ll-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yI]-2-hydroxypropoxy}pyridin,

-26CZ 287273 Β6

q. (2R,S)-anti-5-{3-[4-(10,l l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yI]-propoxy}chinolin,

r. (2R, S)-anti-5-{ 4—[4—(10,11 -difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-1 -yl]-butoxy} chinolin,

s. (2R,S)-anti-5-{ 3-(4-( 10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yI]-propoxy}2-nitrobenzen,

t. (2R, S)-anti-5-{ 3-(4-( 10,11 -difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-1 -yIJ-3-hydroxybutoxy} chinolin.

Příklad 7

Tento příklad ilustruje přípravu vzorového farmaceutického přípravku, určeného pro podávání per os, obsahujícího účinnou sloučeninu obecného vzorce I, např. (2R)-anti-5-{3-[4-(10,lldifluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yl]-2-hydroxypropoxy}chinolin.

Přísada____________________________________Množství na 1 tabletu, mg

Účinná sloučenina200

Laktóza, sušená rozprašováním148

Magnéziumstearát2

Uvedené přísady se promíchají a uzavřou do tvrdé želatinové kapsle. V případě použití trihydrochloridové soli bude její množství 243 mg.

V přípravcích, určených pro podávání per os, mohou být jako účinné sloučeniny v tomto případě použity také ostatní sloučeniny obecného vzorce I, připravené např. podle postupů uvedených v příkladech 1 až 6.

Příklad 8

Tento příklad ilustruje přípravu jiného vzorového farmaceutického přípravku, určeného pro podávání per os, obsahujícího účinnou sloučeninu obecného vzorce I, např. (2R)-anti-5-{3-[4(10,ll-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yl]-2-hydroxypropoxy}chinolin.

Přísady____________________________________Množství na 1 tabletu, mg

Účinná sloučenina400

Kukuřičný škrob50

Laktóza145

Magnéziumstearát5

Uvedené přísady se důkladně promíchají a vylisují do podoby talek sjedním povrchovým žlábkem. V případě použití trihydrochloridové soli bude její množství 486 mg.

V přípravách, určených pro podávání per os, mohou být jako účinné sloučeniny v tomto příkladu použity také ostatní sloučeniny obecného vzorce I, připravené např. podle postupů uvedených v příkladech 1 až 6.

-27CZ 287273 B6

Příklad 9

Tento příklad ilustruje přípravu vzorového farmaceutického přípravku, obsahujícího účinnou sloučeninu obecného vzorce I, např. (2R)-anti-5-{3-[4-(10,ll-difluormethanodibenzosuber-5yl)piperazin-l-yl]-2-hydroxypropoxy}chinolin.

Suspenze, určená pro podávání per os, má následující sloužení:

Přísada r¹·· ..................

Účinná sloučenina Kyselina fumarová

Chlorid sodný Methylparaben

Krystalový cukr Sorbitol (70% roztok) Veegum K (Vamderbilt Co.) Aromatizační přísada Barvicí přísada

Destilovaná voda

Množství

1,0 g

0,5 g

2,0 g o,l g

25,5 g

12,85 g

1,0 g

0,035 ml

0,5 mg doplnit do 100 ml

V případě použití trihydrochloridu na suspenzi bude množství použití soli 1215 g. V přípravcích, určených pro podávání per os, mohou být jako účinné sloučeniny v tomto příkladu použity také ostatní sloučeniny obecného vzorce I, připravené např. podle postupů uvedených v příkladech 1 až 6.

Příklad 10

Tento příklad ilustruje přípravu vzorového farmaceutického přípravku, obsahujícího účinnou sloučeninu obecného vzorce I, např. (2R)-anti-5-{3-[4-(10,l l-difluormethanodibenzosuber-5yl)piperazin-l-yl]-2-hydroxypropoxy}chinolin.

Přípravek určený pro injekční podávání, pufrovaný na pH 4, má následující složení:

Přísady Množství

Účinná sloučenina 0,2 g

Natriumacetátový pufrovací roztok (0,4 M) 2,0 ml

HC1 (1 N) doplnit na pH 4 destilovaná, sterilní voda doplnit do 20 ml

V případě použití trihydrochloridové soli bude její množství 0,243 g. V injekčně podávaných přípravcích mohou být jako účinné sloučeniny v tomto příkladu použity také ostatní sloučeniny obecného vzorce I, připravené např. podle postupů uvedených v příkladech 1 až 6.

Příklad 11

Tento příklad ilustruje přípravu vzorového farmaceutického přípravku, obsahujícího účinnou sloučeninu obecného vzorce I, např. (2R)—anti—5—{3—[4—(10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5yl)piperazin-l-yl]-2-hydroxypropoxy}chinolin.

Přípravek, určený pro podávání ve formě čípků o hmotnosti 2, 5 g má následující složení:

-28CZ 287273 B6

Účinná sloučenina

WitepsolH-15*

500 g zbytek (*Rostlinné mastné kyseliny nasycené triglyceridy, výrobek firmy Riches-Nelson, lne., New York, N.Y.).

V případě použití trihydrochloridové soli bude její množství 607 mg. Pro přípravu čípků mohou být v tomto příkladu použity jako účinné sloučeniny také ostatní sloučeniny obecného vzorce I, připravené např. podle postupů uvedených v příkladech 1 až 6.

Příklad 12

Stanovení stability v kyselém prostředí

Testovaná sloučenina (15 pg) se rozpustila ve 3 ml 0,01 N HC1 (pH 2) a nechala se inkubovat při 37 °C. V různých časových intervalech se pak odebíraly 10 μΐ alikvotní podíly a vstřikovaly se do 3 pm patronové kolony Pecosphere C-18 (3,3 x 0,46 cm) k provedení HPLC analýzy (mobilní fáze: 35% acetonitril/18% tetrahydrofuran/47% primární KH₂PO₄, obsah. 4 mM N, N-dimethyloktylaminu, průtoková rychlost 1 ml/min). Testovaná sloučenina a její rozložené produkty se pak monitorovaly pomocí absorpce vUV spektru při 240 nm. Vymizení mateřské sloučeniny se vyjádřilo jako výška procentového píku vzhledem k nulovému času, ze kterého se hodnota t 1/2 určila graficky:

MS-073 (USA patent č. 5112817), 11/2= 15 min.

(2R,S)-anti-5-{3-(4-(10,ll-methanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yl]-2-hydroxypropoxy}chinolin, 11/2 = 2,5 h.

(2R,S)-5-{ 3-(4-( 10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yI]-2-hydroxypropoxyjchinolin, 11/2 = > 72 h.

(2R,S)-anti-5-{3-[4-(10,l l-chlormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yl]-2-hydroxypropoxy} chinolin, 11/2 = > 72 h.

Podle uvedeného testu vykazují sloučeniny tohoto vynálezu významně lepší stabilitu v kyselém prostředí, než látkaMS-073.

Příklad 13

Stanovení účinnosti in vitro pomocí zkoušky MTT

Je to modifikace zkoušky popsané v Mosmann, T., „Rapid Colorimetric Assay For Cellular Growth And Survival: Application to proliferation and cytotoxicity Assays,“ J. Immimol. Meth.,

Vol. 65, 55-63,(1983).

Buněčná suspenze (0,3 ml) obsahující buňky Čínského křečka CH^RC5 (2 x 10⁵ buněk/ml), vykazující multiléčivovou rezistenci, se uvede do styku s médiem (2,7 ml), obsahujícím testovanou sloučeninou nebo kontrolní vehikulum, za přítomnosti nebo nepřítomnosti adriamycinu (1 pg/ml) a vytvoří se suspenze. Alikvotní podíly buněčné suspenze (0,1 ml) se přenesou do osmi mističek v každé ze tří 96-miskových mikrotitračních destiček. Destičky se uloží do inkubátoru tkáňových kultur k inkubaci při teplotě 37 °C. Poté jsou všechny tři destičky, jedna po druhé, vyjímány z inkubátoru ven v časových intervalech 24, 48 a 72 h. Po vyjmutí destičky se do každé mističky přidá 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yI]-2,5-difenyltetraazolium

-29CZ 287273 B6 bromid, MTT (10 μΐ, ze zásobního roztoku 5 mg/ml ve fosfátovém pufru PBS) a destička je opět vrácena na tři hodiny do inkubátoru.

Odsátím média a přidáním DMSO (150 μΐ/misku) smícháním na rotační třepačce se rozpustí formazonové krystalky, vznikající činností mitochondriálních enzymů v živých buňkách.

A 570 (referenční vlnová délka 650 nm) se odečte na čtečce optické denzity a výsledky se vyjádří jako procenta z kontrolního vehikula nebo z kontrolního vzorku adriamycinu pro každý den nebo jako graf závislosti A570 na čase.

Podle uvedeného testu vykazují sloučeniny tohoto vynálezu účinnost. Konkrétně (2R)-anti-5{3-(4-(10,1 l-difluormethanodibensuber-5-yl)piperazin-l-yI]-2-hydroxypropoxy}chmolin vykazuje více než trojnásobnou účinnost, než látka MS-73, odpovídající izomer (2S)-anti vykazuje 1,7 násobnou účinnost než MS-73 a směs (2R,S)-anti je 1,6 krát účinnější, než MS73.

Příklad 14

Stanovení účinnosti n vivo pomocí zkoušky MDR

Je to modifikace zkoušky popsané v Slate a Michelson, „Drug Resistance Reversal Strategies: A Comparasion Of Experimental Data With Model Predictions,“ J. Nati. Cancer Inst., Vol. 83, 1574-1580(1991).

Samice myší (Jackson Laboratory, B6D2F1, 7 až 8 týdnů staré, přibliž. 20 gm) se náhodně vyberou, zváží a rozdělí se do skupin po 6 až 7 exemplářích. V den 0 je každé myši vstříknuto intraperitoneálně 0,2 ml buněk myší leukemie P388/AR, vykazujících multiléčivovou rezistenci (2,4 x 10⁷ buněk/ml). O dvě hodiny později je každé myši implantováno 7 denní minipumpa Alzet (model 2001, Alza Corporation, Palo Alto, CA), obsahující vehikulum (DMSO/PBS) plus adriamycin (3 mg/kg/den), samotnou testovanou sloučeninu (30 mg/kg/den) nebo adriamycin (3 mg/kg/den) plus testovanou sloučeninu (0,3; 3; 10 a 30 mg/kg/den). Myši byly denně pozorovány a od 7. dne se zaznamenávala úmrtí. Účinnost látky charakterizuje doba přežití nad rámec kontrolní skupiny s vehikulem a adriamycinem.

Podle uvedeného testu vykazují sloučeniny tohoto vynálezu účinnost. Konkrétně (2R)-anti-5{3-(4-( 10,1 l-difluormethanodibensuber-5-yl)piperazin-1 -ylj-2-hydroxypropoxy} chinolin vykazuje více než čtyřnásobnou účinnost, než látka MS-73 a odpovídající izomer (2S)-anti vykazuje 1,3 násobnou účinnost, než MS-73.

Navíc, při zkoušce na lidském děložním sarkomu vykazovala sloučenina (2R)-anti-5-{3-[4(10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yI|-2-hydroxypropoxy}chinolin třikrát vyšší účinnost než sloučeniny MS-73.

Příklad 15

Toxicita sloučenin obecného vzorce I

Myším byla jednou denně vstřikována intravenózně jednodávková látka (2R)-anti-5-{ 3-(4-( 10,11 -difluormethanodibensuber-5-yl)piperazin-l -y I]-2-hydroxypropoxy}chinolin, po dobu dvou týdnů, v dávkách 0 mg/kg (vehikulum: 5% w/v mannitol v přečištěné vodě), 10 mg/kg, 30 mg/kg a 100 mg/kg. Všechny myši ve skupinách 0 mg/kg, 10

-30CZ 287273 B6 mg/kg a 30 mg/kg přežily. U všech myší s dávkou 100 mg/kg se po první dávce objevily klonické křeče a smrt. Příčina smrti nebyla stanovena.

Claims (18)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. 10,11 -Methanodibenzosuberanové deriváty obecného vzorce I v němž

   A je skupina -CH2-CH2-, -CH2-CHR^a-CH2-, v níž R^a je vodík, hydroxy nebo Cj_6 acyloxyskupina, nebo -CH₂-CHR^a-CHR^b-CH2-, v níž jeden z R^a nebo R^b je vodík, hydroxy nebo C]_6 acyloxyskupina a druhý je vodík,

   R¹ je vodík, fluor, chlor nebo brom,

   R² je vodík, fluor, chlor nebo brom a

   R³ je Cé_i2 heteroaryl se dvěma kondenzovanými kruhy a s 1 až 3 heteroatomy vybranými ze skupiny zahrnující dusík, kyslík a síru, nebo fenyl substituovaný fluorem, chlorem, bromem, skupinou CF₃, CN, NO₂ nebo OCHF₂, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.
2. 2. 10,11-Methanodibenzosuberanové deriváty podle nároku 1, obecného vzorce I, v němž R³ je Cg_i2 heteroaryl se dvěma kondenzovanými kruhy a s 1 až 3 heteroatomy dusíku, kyslíku a síry a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.
3. 3. 10,11-Methanodibenzosuberanové deriváty podle nároku 1 nebo 2, obecného vzorce I, v němž R³ je chinolyl nebo benzofiirazanyl a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

   -31CZ 287273 B6
4. 4. 10,11-Methanodibenzosuberanové deriváty podle nároku 3, obecného vzorce I, v němž R₃ je 5-chinolyl a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.
5. 5. 10,11-Methanodibenzosuberanové deriváty podle některého z předchozích nároků, obecného vzorce I, v němž R^a nebo R^b je hydroxyskupina a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.
6. 6. 10,11-Methanodibenzosuberanové deriváty podle nároku 5, obecného vzorce I, v němž A je skupina -CH₂-CHR^a-CH₂-, v níž R^a je hydroxyskupina a ostatní substituenty mají shora uvedené významy, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.
7. 7. 10,11-Methanodibenzosuberanový derivát podle nároku 1 vzorce

   F F .N.

   a jeho farmaceuticky přijatelné soli.
8. 8. 10,11-Methanodibenzosuberanový derivát podle nároku 1 vzorce a jeho farmaceuticky přijatelné soli.

   -32CZ 287273 B6
9. 9. 10,11-Methanodibenzosuberanový derivát podle nároku 1 vzorce a jeho farmaceuticky přijatelné soli.
10. 10. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že jako účinnou látku obsahuje alespoň jeden 10,11-methanodibenzosuberanový derivát nebo jeho sůl podle nároků 1 až 9.
11. 11. Farmaceutický prostředek podle nároku 10, vyznačující se tím, že dále obsahuje farmaceuticky přijatelný excipient.
12. 12. Použití 10,11-methanodibenzosuberanových derivátů nebo jejich solí podle nároků 1 až 9 pro výrobu farmaceutického prostředku.
13. 13. Použití 10,11-methanodibenzosuberanových derivátů nebo jejich solí podle nároků 1 až 9 pro výrobu chemosenzibilátoru.
14. 14. Způsob výroby 10,11-methanodibenzosuberanových derivátů shora uvedeného obecného vzorce I, v němž

    A je skupina -CH2-CH2-, -CH2-CHR^a-CH₂-, v níž R^a je vodík, hydroxy nebo C]_6 acyloxyskupina, nebo -CH2-CHR^a-CHR^b-CH2-, v níž jeden z R^a nebo R^b je vodík, hydroxy nebo C[_6 acyloxyskupina a druhý je vodík,

    R¹ je vodík, fluor, chlor nebo brom,

    R² je vodík, fluor, chlor nebo brom a

    R³ je C6_i2 heteroaryl se dvěma kondenzovanými kruhy a 1 až 3 heteroatomy vybranými ze skupiny zahrnující dusík, kyslík nebo síru, nebo fenyl substituovaný fluorem, chlorem, bromem, skupinou CF₃, CN, NO₂ nebo OCHF₂, a jejich farmaceuticky přijatelných solí, vy z n a č uj í c i se tím, že se

    -33CZ 287273 B6

    a) sloučenina obecného vzorce II

    I H (II) v němž R¹ a R² mají shora uvedené významy, kondenzuje se sloučeninou obecného vzorce ΙΠ (>-CCH_a5_n-O-R₃ (III) v němž n je 2 až 4 a R³ má shora uvedené významy, nebo se sloučeninou obecného vzorce IV

    X-(CH₂)„-O-R³ (IV) v němž n je 2 až 4, X je halogen a R³ má shora uvedené významy, za vzniku derivátu obecného vzorce I, který se popřípadě převede na jeho farmaceuticky přijatelnou sůl, nebo se

    b) epoxid obecného vzorce V v němž R¹ a R² mají shora uvedené významy, kondenzuje se sloučeninou obecného vzorce

    R³-OH, v němž R³ má shora uvedené významy, za vzniku derivátu obecného vzorce Γ

    -34CZ 287273 B6 v němž R¹, R² a R³ mají shora uvedené významy, který se popřípadě převede na jeho farmaceuticky přijatelnou sůl, nebo se

    c) derivát obecného vzorce I, v němž A je -CH₂-CHR^a-CH2- nebo -CH2-CHR^a-CHR^b-CH2-, kde R^a nebo R^b je hydroxyskupina, uvede v reakci s Ci_$ acylhalogenidem obecného vzorce R'-C(O)-X, kde R' je Ci_6 alkyl a X je halogen, za vzniku derivátu obecného vzorce I, v němž R¹, R² a R³ mají shora uvedené významy a R^a nebo R^b je Ci_6 acyloxyskupina, a vzniklý derivát se popřípadě převede na jeho farmaceuticky přijatelnou sůl, nebo se

    d) derivát obecného vzorce I nechá reagovat s farmaceuticky přijatelnou kyselinou za vzniku odpovídající adiční soli s kyselinou, nebo se

    e) adiční sůl s kyselinou derivátu obecného vzorce I nechá reagovat se zásadou za vzniku odpovídající volné báze derivátu obecného vzorce I.
15. 15. Způsob výroby 10,11-methanodibenzosuberanových derivátů, podle nároku 14 odstavec a), vyznačující se tím, že se 2,3-epoxypropan kondenzuje s 1-(10,1 l-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazinem za vzniku 5-{3-[4-(10,ll-difluormethanodibenzosuber-5yl)piperazin-l-yl]-2-hydroxypropoxy}chinolinu.
16. 16. Způsob výroby 10,11-methanodibenzosuberanových derivátů, podle nároku 15, vyznačující se tím, že se získává (2R)-anti izomer 5-{ 3—[4—(10,11-difluormethanodibenzosuber-5-yl)piperazin-l-yl]-2-hydroxypropoxy}chinolinu.
17. 17. Použití 10,11-methanodibenzosuberanových derivátů podle nároků 1 až 9 pro výrobu léčiva k léčení drogové závislosti.
18. 18. Použití 10,11-methanodibenzosuberanových derivátů podle nároků 1 až 9 pro výrobu léčiva k léčení malárie.

    Konec dokumentu