CZ291186B6 - Rekombinantní rostlinný jaderný nebo mitochondriální genom, cytoplazma, rostlina, způsob přípravy rostliny, sonda nukleové kyseliny, DNA molekula - Google Patents
Rekombinantní rostlinný jaderný nebo mitochondriální genom, cytoplazma, rostlina, způsob přípravy rostliny, sonda nukleové kyseliny, DNA molekula Download PDFInfo
- Publication number
- CZ291186B6 CZ291186B6 CS1993454A CS4549391A CZ291186B6 CZ 291186 B6 CZ291186 B6 CZ 291186B6 CS 1993454 A CS1993454 A CS 1993454A CS 4549391 A CS4549391 A CS 4549391A CZ 291186 B6 CZ291186 B6 CZ 291186B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- plant
- sequence
- genome
- dna
- mitochondrial
- Prior art date
Links
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 title claims abstract description 43
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 title claims abstract description 34
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 title claims description 29
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 14
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 title claims 5
- 108020004711 Nucleic Acid Probes Proteins 0.000 title claims 2
- 239000002853 nucleic acid probe Substances 0.000 title claims 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 66
- 206010021929 Infertility male Diseases 0.000 claims abstract description 41
- 208000007466 Male Infertility Diseases 0.000 claims abstract description 41
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 35
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims abstract description 34
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims abstract description 32
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims abstract description 32
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims abstract description 29
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 claims abstract description 25
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 claims abstract description 24
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims abstract description 6
- 102000000634 Cytochrome c oxidase subunit IV Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 108050008072 Cytochrome c oxidase subunit IV Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 101150062589 PTGS1 gene Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 238000013519 translation Methods 0.000 claims abstract description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 158
- 240000007124 Brassica oleracea Species 0.000 claims description 33
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 claims description 31
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 claims description 25
- 210000003763 chloroplast Anatomy 0.000 claims description 25
- 241000219198 Brassica Species 0.000 claims description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 21
- 230000029087 digestion Effects 0.000 claims description 20
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims description 18
- 235000011331 Brassica Nutrition 0.000 claims description 17
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 17
- 210000001938 protoplast Anatomy 0.000 claims description 10
- 230000014616 translation Effects 0.000 claims description 7
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims description 6
- 244000257790 Brassica carinata Species 0.000 claims description 4
- 244000140786 Brassica hirta Species 0.000 claims description 4
- 244000180419 Brassica nigra Species 0.000 claims description 4
- 108020004566 Transfer RNA Proteins 0.000 claims description 4
- 244000178993 Brassica juncea Species 0.000 claims description 3
- PYUSHNKNPOHWEZ-YFKPBYRVSA-N N-formyl-L-methionine Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC=O PYUSHNKNPOHWEZ-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 3
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 claims description 3
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 claims description 2
- 230000014639 sexual reproduction Effects 0.000 claims description 2
- 241001301148 Brassica rapa subsp. oleifera Species 0.000 claims 2
- 101150020304 bglI gene Proteins 0.000 claims 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 abstract description 4
- 101100221647 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) cox-1 gene Proteins 0.000 abstract description 3
- 108020005196 Mitochondrial DNA Proteins 0.000 description 26
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 17
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 17
- 208000021267 infertility disease Diseases 0.000 description 17
- 235000003899 Brassica oleracea var acephala Nutrition 0.000 description 11
- 235000011301 Brassica oleracea var capitata Nutrition 0.000 description 11
- 235000001169 Brassica oleracea var oleracea Nutrition 0.000 description 11
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 10
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 10
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 9
- 241000219193 Brassicaceae Species 0.000 description 7
- 244000088415 Raphanus sativus Species 0.000 description 7
- 230000009418 agronomic effect Effects 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- JYEUMXHLPRZUAT-UHFFFAOYSA-N 1,2,3-triazine Chemical compound C1=CN=NN=C1 JYEUMXHLPRZUAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000011293 Brassica napus Nutrition 0.000 description 5
- 230000010152 pollination Effects 0.000 description 5
- 244000060924 Brassica campestris Species 0.000 description 4
- 240000003259 Brassica oleracea var. botrytis Species 0.000 description 4
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 4
- 235000006140 Raphanus sativus var sativus Nutrition 0.000 description 4
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 4
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 4
- 108091064355 mitochondrial RNA Proteins 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 235000011303 Brassica alboglabra Nutrition 0.000 description 3
- 235000011302 Brassica oleracea Nutrition 0.000 description 3
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000006278 hypochromic anemia Diseases 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 3
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 3
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 3
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 3
- 101000758020 Alkalihalobacillus pseudofirmus (strain ATCC BAA-2126 / JCM 17055 / OF4) Uncharacterized aminotransferase BpOF4_10225 Proteins 0.000 description 2
- 235000011299 Brassica oleracea var botrytis Nutrition 0.000 description 2
- 101000744710 Clostridium pasteurianum Uncharacterized glutaredoxin-like 8.6 kDa protein in rubredoxin operon Proteins 0.000 description 2
- 101000653283 Enterobacteria phage T4 Uncharacterized 11.5 kDa protein in Gp31-cd intergenic region Proteins 0.000 description 2
- 101000618324 Enterobacteria phage T4 Uncharacterized 7.9 kDa protein in mobB-Gp55 intergenic region Proteins 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 101100492886 Mus musculus Mtatp6 gene Proteins 0.000 description 2
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 2
- 101000961876 Pyrococcus woesei Uncharacterized protein in gap 3'region Proteins 0.000 description 2
- 101001056915 Saccharopolyspora erythraea 6-deoxyerythronolide-B synthase EryA2, modules 3 and 4 Proteins 0.000 description 2
- 101000819248 Staphylococcus aureus Uncharacterized protein in ileS 5'region Proteins 0.000 description 2
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 2
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- NKDFYOWSKOHCCO-YPVLXUMRSA-N 20-hydroxyecdysone Chemical compound C1[C@@H](O)[C@@H](O)C[C@]2(C)[C@@H](CC[C@@]3([C@@H]([C@@](C)(O)[C@H](O)CCC(C)(O)C)CC[C@]33O)C)C3=CC(=O)[C@@H]21 NKDFYOWSKOHCCO-YPVLXUMRSA-N 0.000 description 1
- 235000005637 Brassica campestris Nutrition 0.000 description 1
- 235000003351 Brassica cretica Nutrition 0.000 description 1
- 235000006008 Brassica napus var napus Nutrition 0.000 description 1
- 240000000385 Brassica napus var. napus Species 0.000 description 1
- 235000004221 Brassica oleracea var gemmifera Nutrition 0.000 description 1
- 235000017647 Brassica oleracea var italica Nutrition 0.000 description 1
- 244000308368 Brassica oleracea var. gemmifera Species 0.000 description 1
- 244000304217 Brassica oleracea var. gongylodes Species 0.000 description 1
- 235000008744 Brassica perviridis Nutrition 0.000 description 1
- 244000233513 Brassica perviridis Species 0.000 description 1
- 235000000540 Brassica rapa subsp rapa Nutrition 0.000 description 1
- 235000003343 Brassica rupestris Nutrition 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N Cyanide Chemical compound N#[C-] XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007400 DNA extraction Methods 0.000 description 1
- 230000007023 DNA restriction-modification system Effects 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000701959 Escherichia virus Lambda Species 0.000 description 1
- 206010049290 Feminisation acquired Diseases 0.000 description 1
- 208000034793 Feminization Diseases 0.000 description 1
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 1
- 101150021539 MT-CO2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100271432 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) atp-9 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100324954 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) oli gene Proteins 0.000 description 1
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 101710147134 Putative transposase for insertion sequence element IS986/IS6110 Proteins 0.000 description 1
- 239000013614 RNA sample Substances 0.000 description 1
- 235000019057 Raphanus caudatus Nutrition 0.000 description 1
- 235000011380 Raphanus sativus Nutrition 0.000 description 1
- 108091081062 Repeated sequence (DNA) Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 101710099762 Uncharacterized protein in sodM 3'region Proteins 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000010165 autogamy Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N bis(2-chloroethyl) sulfide Chemical compound ClCCSCCCl QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 1
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 1
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 1
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000010211 insect pollination Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 235000010460 mustard Nutrition 0.000 description 1
- -1 ndhl Proteins 0.000 description 1
- 108091027963 non-coding RNA Proteins 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 230000010153 self-pollination Effects 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000017260 vegetative to reproductive phase transition of meristem Effects 0.000 description 1
- 108700026220 vif Genes Proteins 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/415—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8287—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for fertility modification, e.g. apomixis
- C12N15/8289—Male sterility
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
- C12N5/12—Fused cells, e.g. hybridomas
- C12N5/14—Plant cells
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
- C12Q1/6895—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Botany (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Rekombinantn rostlinn² jadern² nebo mitochondri ln genom obsahuj c a) DNA sekvenci vymezenou nukleotidy . 928 a 1569 podle obr zku 1 -SEQ ID NO: 1 nebo b) DNA sekvenci k duj c proteinov² produkt translace identick² s t m, kter² je k dov n, kde uveden sekvence ud luje cytoplazmatickou sam sterilitu rostlin , v jej m mitochondri ln m genomu je p° tomna, p°i em tento rekombinantn genom neobsahuje funk n kopii genu z Ogurova genomu, p°i em tento gen z Ogurova genomu je definov n takto: i) gen pro formylmethionin-transferovou RNA pou van² pro iniciaci translace, kter² je charakterizov n t m, e po NruI t pen poskytuje DNA fragment o velikosti 15 kilob z nebo po SalI t pen poskytuje DNA fragment o velikosti 5,1 kilob z a oba tyto fragmenty je mo n vizualizovat hybridizac se sondou odpov daj c sekvenci vymezen nukleotidy 389 a 1199 v sekvenci zobrazen na obr zku 1 -SEQ ID NO: 1 nebo ii) Cox1 gen k duj c podjednotku . 1 cytochrom oxid zy, kter² je charakterizov n t m, e po BglI t pen poskytuje DNA fragment o velikosti 10,7 kilob z nebo po NruI t pen poskytuje DNA fragment o velikosti 11 kilob z a oba tyto fragmenty je mo n vizualizovat hybridizac s Cox1 sondou.\
Description
Oblast techniky
Předkládaný vy nález se týká biologického materiálu vykazujícího samčí sterilitu, která je vhodná pro vývoj hybridních variet druhů důležitých z agronomického hlediska.
Předkládaný vynález se zvláště týká rostlin náležejících do čeledi Cruciferae, jejichž buněčná cytoplazma obsahuje organely nesoucí nukleotidovou sekvenci, která uděluje vlastnosti samčí sterility a vhodné agronomické vlastnosti.
Dosavadní stav techniky
Vývoj hybridních variet může být usnadněn nebo umožněn použitím systému cytoplazmatické samčí sterility. Hybridi mohou být získány kříženým oplodněním mezi dvěma rodičovskými populacemi, z nichž jedna plní roli samčí a druhá roli samičí. Je-li cílem získat hybridní variety stejné kvality sexuálním křížením samooplodňujících se druhů, je jednu z překážek samoopylovací schopnost rostlin. Systém samčí sterility umožňuje získat samičí rostliny, které nejsou schopné samooplodnění a z nichž lze po opylení, bez použití náročných technik jako je například kastrace květů, přímo získat semena, která jsou všechna hybridní.
Genetické determinanty samčí sterility zahrnují determinanty nesené cytoplazmou. U každé sexuálním způsobem vzniklé generace, jsou tyto determinanty přenášeny výlučně matkou. V systému cytoplazmatické samčí sterility (CMS) je tedy 100 % samčího potomstva sterilní. Tyto genetické determinanty jsou neseny mitochondriálním genomem.
Vhodný systém samčí sterility pro Cruciferae je definován následujícími vlastnostmi:
1) Samčí sterilita musí být úplná, to znamená, že nesmí docházet k žádné produkci pylu nehledě na kultivační podmínky a bez ohledu na linii, která se používá jako samičí rodič. Není-li tato podmínka splněna, budou semena sklizená z těchto samičích rostlin zčásti pocházet ze samooplození a nebudou tudíž FI hybridního typu.
2) Při produkci těchto semen se musí využívat přírodních pylových vektorů, což v případě těchto druhů znamená využívat Hymenopter, Dipter a větru. Pyl musí být přenášen z pylujících rostlin na samčí (samičí) sterilní rostliny. Ve skutečnosti může u Cruciferae tento přenos na vzdálenost uskutečnit pouze hmyz.
Samičí rostliny musí proto být dostatečně přitažlivé pro hmyz, který na nich sbírá nektar. Morfologie květů musí nutit hmyz k plnění toho úkolu přes vršek květu tak, že především thorax hmyzu přijde do kontaktu s bliznou. V praxi to vede k situaci, kdy základ korunních plátků musí vytvořit trubičku kolem základu pestíku.
3) Morfologie samičích orgánů (pestíku) musí být stejná jako u fertilních rostlin, obzvláště jdeli o jeden pestík na květ, který’ má přímý tvar. Samčí sterility mají často za následek feminizaci prašníků, které jsou přeměněny v pseudopestíky a dokonce transformaci nektarií na kompletní květy. Někdy je takto vzniklý pestík nebo pestíky také deformován. Všechny tyto poruchy neumožňují dobrou produkci semen, což může být považováno za ekvivalent určitého stupně samčí sterility.
-1 CZ 291186 B6
4) Pro produkci F1 hybridních variet u druhů, z nichž jsou sbírána semena, jako jsou řepka nebo hořčice, je důležité, že samčí rodič hybrida naprosto potlačuje efekt samčí sterilní cvtoplazmy, takže hybridní rostliny jsou snadno opylovány.
U Cruciferae byl první případ samčí sterilní cytoplazmy neboli CMS popsán pro ředkev, Raphanus sativus Ogurou (1968). Bannerot (1974, 1977) přenesl Ogurovu cytoplazmu do Brassicae, čímž získal rostliny vykazující samčí cytoplazmatickou sterilitu. Tyto rostliny nevykazovaly vyhovující agronomické vlastnosti (chloróza za klesající teploty, slabá samičí fertilita), což mělo za následek malý výnos a nevhodnost těchto rostlin pro komerční využití.
Aby se u Cruciferae zabránilo této chloróze, musí být v jedné buňce kombinován jaderný a chloroplastový genom jednoho a téhož rodu. Rostliny Brassica obsahující jeden zchloroplastových genomů Brassicae nevykazují chlorózu. Pokud obsahují celý Ogurův mitochondriální genom, vykazují totální cytoplazmatickou samčí sterilitu, ale květy mají aberantní morfologii, což znemožňuje jejich opylení přirozenými vektory.
U těch druhů, kde je zájem soustředěn na semena, je vhodné u hybridních variet obnovit samčí fertilitu, čehož je dosahováno pomocí jaderných genů označovaných jako obnovující geny (restorer genes).
U rostlin obsahujících celý Ogurův mitochondriální genom je obtížné obnovit samčí fertilitu, protože je nutné dosáhnout účasti několika obnovujících genů zároveň.
Byla snaha získat vyhovující systém samčí sterility odstraněním genů zodpovědných za nevhodné vlastnosti Ogurovy cytoplazmy při současném zachování účinné a snadno obnovitelné samčí sterility.
Podstata vynálezu
Předkládaný vynález se týká rekombinantního rostlinného jaderného nebo mitochondriálního genomu, který obsahuje
a) DNA sekvenci vymezenou nukleotidy č. 928 až 1569 podle obrázku 1 -SEQ ID NO: 1 nebo
b) DNA sekvenci kódující proteinový produkt translace identický s tím, který je kódován a), kde uvedená sekvence uděluje cytoplazmatickou samčí sterilitu rostlině, v jejímž mitochondriálním genomu je přítomna, přičemž tento rekombinantní genom neobsahuje funkční kopii genu z Ogurova genomu, přičemž tento gen z Ogurova genomu je definován takto:
i) gen pro formylmethionin-transferovou RNA používaný pro iniciaci translace, který je charakterizován tím, že po Nrul štěpení poskytuje DNA fragment o velikosti 15 kilobází nebo po Sáli štěpení poskytuje DNA fragment o velikosti 5,1 kilobází a oba tyto fragmenty je možné vizualizovat hybridizací se sondou odpovídající sekvenci vymezené nukleotidy 389 až 1199 v sekvenci zobrazené na obrázku 1 - SEQ ID NO: 1 nebo ii) Coxl gen kódující podjednotku č. 1 cytochrom oxidázy, který je charakterizován tím, že po BglI štěpení poskytuje DNA fragment o velikosti 10,7 kilobází nebo po Nrul štěpení poskytuje DNA fragment o velikosti 11 kilobází a oba tyto fragmenty je možné vizualizovat hybridizací s Coxl sondou.
-2CZ 291186 B6
Předkládaný vynález se týká DNA sekvence, která zde bude označována jako DNA sekvence Ogurovy sterility, která uděluje uvedené rostlině, je-li přítomna v jejím mitochondriálním genomu, cytoplazmatickou samčí sterilitu.
Konkrétně je předmětem předkládaného vynálezu DNA sekvence Ogurovy sterility, která v mitochondriálních samčích sterilních rostlin je transkribována na RNA.
V následující části textu se budou vyskytovat odkazy na následující obrázky:
Obrázek 1: nukleotidová sekvence fragmentu Ogurovy mitochondriální DNA z ředkve, která nese CMS charakter.
Obrázek 2: restrikční mapa fragmentu mitochondriální DNA popsaného na obrázku 1.
Obrázek 3: elektroforéza mitochondriální DNA po štěpení BglI (3a) a Nrul (3b). Zobrazené pruhy odpovídají hybridizaci s Coxl sondou (Hiessel et al. 1987).
Obrázek 4: Elektroforéza mitochondriální DNA po Sáli štěpení. Zobrazené pruhy odpovídají hybridizaci se sondou vymezenou nukleotidy 389 až 1199 v sekvenci popsané na obrázku 1.
Obrázek 5: Plody produkované rostlinami zelí nesoucími různé cytoplazmatické genomy.
Obrázek 6: Elektroforéza mitochondriální RNA. Zobrazené pruhy odpovídají hybridizaci se sondou získanou označením EcoRI-BamHI fragmentu, který zahrnuje část sekvence označované jako ORF B.
DNA sekvence Ogurovy sterility je definována ve vztahu k sekvenci ohraničené čísly 1 až 2428 na obrázku 1. Je nesena transkribovanou sekvencí, jejíž 3' a 5' konce jsou na obrázku 2 spojeny přerušovanou čarou a která je pozorována pouze u sterilních samčích rostlin. ORF B odpovídá otevřenému čtecímu rámci; toto označení bylo zavedeno na základě pozorované homologie se sekvencí popsanou Brennickem. Na obrázku 2 je plným obdélníkem znázorněna sekvence odpovídající jednomu ze dvou genů pro formylmethionin-transferovou RNA.
DNA sekvence ohraničená nukleotidy 928 až 2273 podle obrázku 1 odpovídá transkriptu který může být vizualizován molekulární hybridizaci (1.4), což je znázorněno na obrázku 6. Na obrázku 6 odpovídají jamky označení (F) fertilní rostlině a jamky označené (S) sterilní rostlině. Pouze samčí sterilní rostliny syntetizují transkript dlouhý přibližně 1400 bází. Tento transkript začíná na pozici 928 (± 10 bází) sekvence z obrázku 1 a končí na pozici 2273 (± 5) (iniciace a terminace transkripce může v rostlinných mitochondriích probíhat na různých pozicích).
Především se předkládaný vynález vztahuje na cytoplazmu obsahující DNA sekvenci, která vykazuje přinejmenším 50% homologii se sekvencí ohraničenou nukleotidy 928 až 2273 podle obrázku 1 a která poskytuje vlastnosti CMS, nebo na cytoplazmu obsahující DNA sekvenci, která vykazuje přinejmenším 50% homologii se sekvencí ohraničenou nukleotidy 928 až 1569 podle obrázku 1, je transkribována do RNA, a která poskytuje vlastnosti CMS a je charakterizována takto:
- obsahuje chloroplasty stejného druhu jako jaderný genom nebo chloroplasty jiného druhu, které jsou slučitelné s tímto jaderným genomem,
- neobsahuje ani celý ani část jednoho nebo druhého (nebo obou) fragmentů Ogurova mitochondriálního genomu, který je definován níže:
nese jeden ze dvou genů pro formylmethionin-transferázovou RNA používanou při iniciaci translace,
-3CZ 291186 B6 nese Coxl gen kódující podjednotku č. 1 cytochrom oxidázy.
Absence těchto fragmentů, označovaných jako „nevhodné sekvence“, je naprosto nezbytná k získání mitochondriálních genomů odpovídajících dobré kvalitě samčí sterility, která vyhovuje čtyřem výše uvedeným charakteristikám.
Dalším aspektem, kterého se vynález týká je rekombinantní rostlinný jaderný nebo mitochondriální genom, charakterizovaný tím, že obsahuje DNA sekvenci Ogurovy sterility, která:
a) je nesena DNA sekvencí vymezenou nukleotidy 928 až 2273 znázorněna na obrázku 1 nebo
b) vykazuje alespoň 50% homologii se sekvencí uvedenou v a), a uděluje, je-li přítomna v cytoplazmě rostliny, uvedené rostlině cytoplazmatickou samčí sterilitu.
Jedním z předmětů tohoto vynálezu je rekombinantní rostlinný jaderný nebo mitochondriální genom, charakterizovaný tím, že obsahuje DNA sekvenci Ogurovy sterility, která:
c) je nesena sekvencí vymezenou nukleotidy s číslem 928 až 1569 podle obrázku 1 nebo
d) vykazuje alespoň 50% homologii se sekvencí uvedenou v c) a uděluje, je-li přítomna v cytoplazmě rostliny a transkribována na RNA, uvedené rostlině cytoplazmatickou samčí sterilitu.
Jaderný nebo mitochondriální genom lze podle vynálezu charakterizovat tím, že je zmíněný rekombinantní mitochondriální genom zbaven všech nebo části Ogurových genomových fragmentů:
- nesoucích jeden ze dvou genů pro formylmethyonin-transferovou RNA používanou pro iniciaci translace,
- nesoucích Coxl gen kódující podjednotku č. 1 cytochrom oxidázy nebojsou v tomto genomu zmíněné fragmenty neaktivní.
Podrobněji lze rekombinantní mitochondriální genom podle vynálezu charakterizovat tím, že:
1) je zbaven celého nebo části fragmentu o velikosti přibližně 10,7 kilobází (kb) vzniklého po BglI štěpení nebo fragmentu o velikosti přibližně 11 kilobází vniklého po Nrul štěpení, přičemž tyto fragmenty nesou Coxl gen.
To je konkrétně znázorněno na obrázku 3 pomocí molekulární hybridizace se sondou nesoucí Coxl sekvenci.
2) je zbaven celého nebo části fragmentu o velikosti 5,1 kilobází vzniklého po Sáli štěpení nebo fragmentu o velikosti přibližně 15 kilobází vzniklého po Nrul štěpení nebo fragmentu o velikosti přibližně 18,5 kilobází vzniklého po BglI štěpení, přičemž tyto fragmenty nesou jeden ze dvou genů pro formylmethionin-transferovou RNA.
To je konkrétně znázorněno na obrázku 4 pomocí molekulární hybridizace se sondou ohraničenou nukleotidy č. 389 až 1199 v sekvenci popsané na obrázku 1.
-4CZ 291186 B6
Genotypy na obrázcích 3 a 4, které jsou označeny čísly, odpovídají genotypům rostlin nesoucím vhodný systém cytoplazmatické samčí sterility.
| GENOTYPY | CHLOROPLASTY | MITOCHONDRIE |
| B.n | B. napus | B. napus |
| 27 | B.napus | B. napus/Ogura |
| OGU. | R. sativus (OGU) | R. sativus (OGU) |
| 9, 17,21,24, 27c | B. oleracea | B. oleracea/Ogura |
| B.o | B. oleracea | B. oleracea |
Existence CMS charakteru dobré kvality vyžaduje přítomnost DNA sekvence, která může být identifikována pomocí DNA/DNA hybridizací po štěpeních. Tento vynález se tedy týká DNA sekvence, kterou je možné definovat a která je charakterizována tím, že obsahuje sekvenci, která poskytuje po Ncol štěpení fragment o velikosti 2,5 kilobází, po Nrul štěpení fragment o velikosti 6,8 kilobází a po Sáli štěpení fragment o velikosti 4,4 kilobází.
Tuto sekvenci lze také identifikovat pomocí hybridizace s celkovou RNA samčích sterilních rostlin, přičemž je demonstrován transkript dlouhý 1400 párů bází. Tento transkript se nevyskytuje u rostlin, které znovu získaly fertilitu.
Definice „nevhodných“ nukleotidových sekvencí a nukleotidových sekvencí „nezbytných“ pro Ogurovu sterilitu podle vynálezu, umožňuje pomocí DNA hybridizačních metod, s nimiž jsou odborníci dobře obeznámeni, vybrat rostlinný materiál obsahující chloroplasty kompatibilní s jaderným genomem a obsahující mitochondrie dobré kvality, přičemž není třeba čekat na dospělost rostliny a výskyt květů a plodů. Uživatel má tedy k dispozici vysoce efektivní nástroj pro výběr rostlin nesoucích samčí sterilní cytoplazmu s dobrými agronomickými vlastnostmi.
Ve svém dalším aspektu se vynález týká mitochondrie charakterizované tím, že obsahuje nukleotidovou sekvenci odpovídající DNA vykazující alespoň 50%homologii se sekvencí vymezenou bázemi č. 928 až 2273 podle obrázku 1 a kódující Ogurovu cytoplazmatickou samčí sterilitu; nebo mitochondrie obsahuje DNA sekvenci nesenou sekvencí vymezenou nukleotidy 928 až 1569 podle obrázku 1 nebo vykazující 50% homologii s touto sekvencí, přičemž tato sekvence je v mitochondriích samčích sterilních rostlin transkribována na RNA. Tato DNA může navíc vykazovat charakteristiky definované výše, zvláště nepřítomnost nevhodných sekvencí.
Předkládaný vynález se také týká cytoplazmy čeledi Cruciferae, charakterizované tím, že obsahuje DNA sekvenci „Ogurovy sterility“; tato cytoplazma navíc obsahuje chloroplasty stejného druhu nebo jiného druhu, ale takové, které jsou slučitelné s jaderným genomem.
Sekvence Ogurovy sterility je charakterizována tím, že:
a) je nesena DNA sekvencí dlouhou 2428 párů bází znázorněnou na obrázku 1,
b) Je vymezena nukleotidy 928 až 2273 podle obrázku 1 a odpovídá transkriptu vyznačenému přerušovanou čarou na obrázku 2 a vizualizovanému pomocí molekulární hybridizace (1.4) na obrázku 6,
c) vykazuje alespoň 50% homologii se sekvencí uvedenou v b) a uděluje, je-li přítomna v mitochondriálním genomu rostliny, této rostlině cytoplazmatickou samčí sterilitu nebo
d) je nesena sekvencí vymezenou nukleotidy 928 až 1569 podle obrázku 1 a v mitochondriích sterilních rostlin je transkribována na RNA nebo
-5CZ 291186 B6
e) vykazuje alespoň 50% homologii se sekvencí uvedenou v d) a v mitochondriích sterilních rostlin je transkribována na RNA.
Předkládaný vynález se také týká rostliny z čeledi Cruciferae, charakterizované tím, že obsahuje chloroplasty a jádro stejného druhu nebo takové, které jsou slučitelné, a mitochondrie nesoucí genom udělující CMS charakter, jak je definováno výše.
Přesněji se předkládaný vynález týká také rostliny patřící do rodu Brassica charakterizované tím, že obsahuje chloroplasty a jádro rodu Brassica a mitochondrie nesoucí genom udělující CMS charakter, jak je definováno výše.
Mitochondriální genom musí nést také řadu genů rodu Brassica, o který se jedná. Toho je dosaženo rekombinací mezi Ogurovým genomem a genomem rodu Brassica.
Předkládaný vynález se konkrétně týká rostliny patřící k druhu Brassica napus charakterizované tím, že obsahuje jádro rodu Brassica a tím, že cytoplazma obsahuje chloroplasty rodu Brassica a samčí sterilní mitochondrie nesoucí DNA definovanou výše v předkládaném vynálezu; tyto mitochondrie mohou také nést většinu mitochondriálních genů Brassica napus (18s, Atp9, Atp6, CoxII, ndhl, cob). Brassica napus odpovídá řepce a tuřínu.
Předkládaný vynález se týká rostliny druhu Brassica oleracea charakterizované tím, že obsahuje jádro rodu Brassica a tím, že cytoplazma obsahuje chloroplasty rodu Brassica a mitochondrie nesoucí DNA sekvenci kódující CMS charakter, jak bylo definováno.
Brassica oleracea zahrnuje různé typy zelí: zralé zelí, růžičkovou kapustu, kedluben, brokolici, krmnou kapustu a květák.
Předkládaný vynález se také týká rostliny druhu Brassica campestris charakterizované tím, že obsahuje jádro rodu Brassica a tím, že cytoplazma obsahuje chloroplasty rodu Brassica, které jsou slučitelné sjaderným genomem, a mitochondrie nesoucí DNA sekvenci kódující CMS charakter, jak bylo definováno.
Brassica campestris odpovídá brukvi řepce, vodnici a čínskému, pekingskému a japonskému zelí.
Obdobně se předkládaný vynález týká rostliny vybrané ze skupiny obsahující B. juncea, B. nigra, B. hirta a B. carinata charakterizované tím, že obsahuje jádro rodu Brassica a tím, že cytoplazma obsahuje chloroplasty rodu Brassica, které jsou slučitelné s jaderným genomem, a mitochondrie nesoucí DNA sekvenci kódující CMS charakter, jak bylo definováno.
Podle dalšího aspektu je předmětem předkládaného vynálezu rostlina patřící do rodu Brassica, jejíž jaderný genom obsahuje výše definovanou sekvenci Ogurovy sterility a také prvky ovlivňující její expresi a transport produktu translace do mitochondrie. Tato rostlina může konkrétně patřit do jednoho z následujících druhů: B. napus, B. oleracea, B. campestris, B. nigra, B. juncea, B. hirta a B. carinata.
Přítomnost „sekvence Ogurovy sterility“ je nezbytná a dostačující pro indukci naprosté nepřítomnosti pylu v nepřítomnosti obnovujících genů. V důsledku dobré produkce nektaru probíhá opylení těchto rostlin normálně.
Morfologie samičích orgánů je normální, a vzniklé plody (šešule) obsahují normální počet semen. Obrázek 5 znázorňuje morfologii pozorovanou u normální kontrolní rostliny (z) a rostlinu s aberantní morfologií obsahující celý Ogurův genom (z(6)), chloroplasty Brassica oleracea, což je rostlina zelí, nesoucí chloroplasty Brassica napus a samčí sterilní mitochondrie s geny Brassica napus (z(A)), rostliny nesoucí chloroplasty rodu Brassica oleracea (z(9)) a rekombinantní
-6CZ 291186 B6 mitochondrie, které již neobsahující nevhodné sekvence (z(17)). Rostliny vykazují následující charakteristiky:
| GENOTYP | CHLOROPLASTY | MITOCHONDRIE |
| z | B. oleracea | B. oleracea |
| z(A) | B. napus | B. napus/Ogura |
| z(6) | B. oleracea | Ogura |
| z(9) | B. oleracea | B. oleracea/Ogura |
| z(17) | B. oleracea | B. oleracea/Ogura |
Genotypy z(A) a z(6) neposkytují vhodný systém cytoplazmatické samčí sterility.
Takovéto rostliny mohou být získány například metodami fáze protoplastů nebo jakýmikoli jinými metodami, které vedou k účinné rekombinaci mezi mitochondriálním genomem druhu, o nějž se jedná, a Ogurovým mitochondriálním genomem. V takovýchto rostlinách je fertilita 10 znovu nastolena jedním obnovujícím genem, označovaným Rfl, původem z ředkvičky, k čemuž nedochází u rostlin nesoucích celý nevhodný mitochondriální genom.
Takovéto rostliny mohou být také získány přirozenou nebo umělou sexuální reprodukcí.
ís Rostliny obsahující mitochondriální genom odpovídající tomuto vynálezu mohou být také získány genovým přenosem do mitochondrií.
Ve všech případech nesou tyto rostliny vhodný CMS systém, konkrétně:
- úplnou samčí sterilitu,
- morfologii umožňující dobré opylení a dobrou produkci semen, jak je znázorněno v tabulce 1 a v tabulce 2.
Předkládaný vynález se tedy týká také způsobu přípravy hybridních rostlin charakterizovaného tím, že rostlina nesoucí vhodný CMS charakter, obsahující sekvenci Ogurovy sterility ve svém mitochondriálním nebo jaderním genomu, je zkřížena s normální rostlinou, v případě jedlých nebo krmných plodin, nebo s rostlinou poskytující gen Rfl, který znovu nastolí fertilitu, v případě, že se mají sklidit semena. Vynález se také týká hybridní rostliny získané tímto 30 způsobem.
Obecně řečeno, jsou nejlepší agronomické vlastnosti získávány u samčích sterilních rostlin obsahujících chloroplasty stejného druhu, jako je jádro, a obsahujících mitochondrie, které nesou vhodný systém samčí sterility.
Tabulka 1 znázorňuje produktivitu linie zelí s různými typy cytoplazmy (vhodné jsou genotypy Z9 a Z17). Tabulka 2 znázorňuje produktivitu linie řepky s různými typy cytoplazmy (vhodné jsou genotypy Fu 27, Fu 58 a Fu 85).
Tabulka 1
Produktivita linie z (hlávkové zelí) obsahující různé typy cytoplazmy
| Cytoplazma | Genotypy | Výnos semen | |
| Chloroplasty B. oleracea | Mitochondrie B. oleracea | (z) | g/rostlinu 53.1 |
| (fertilní kontrola) B. napus Ogura | (zC) | 0 | |
| B. napus | Ogura/napus | (zA) | 22.7 |
| B. oleracea | Ogura | (z6) | 9.3 |
| Ogura | Ogura | (z0) | 20.1 |
| B. oleracea | Ogura/oleracea | (z9 nebo z 17) | 91.8 |
Tabulka 2
Produktivita linie DARMOR (ozimná řepka) obsahující různé typy cytoplazmy * Výnos * Samčí fertilní a samčí sterilní (Fu) ozimná řepka DARMOR
| Výnos (% DARMOR) | Chloroplasty | Mitochondrie | |
| DARMOR | 100 (35 qx) | B.napus | B. napus |
| Fu 27 | 118 | B. napus | B. napus/Ogura |
| Fu 58 | 120 | B. napus | B. napus/Ogura |
| Fu 77 | 96 | B. campestris | Ogura |
| Fu 85 | 114 | B.napus | B. napus/Ogura |
| Fu 118 | 103 | B. napus | B. napus/Ogura |
| BIENVENUE | 108 | ||
| JETNEUF | 89 |
Tabulka 2 (pokračování)
Složky výnosu (Clermont-Ferrand)
| NSq | WlSq | NSdPSq | NSd | WlSd | TDM | HI | YLD | HT | |
| DARMOR | 7183 | 81,9 | 9,9 | 70028 | 4,31 | 1077 | 0,256 | 31,6 | 120 |
| BIENVENU | 7334 | 80,7 | 11,2 | 81841 | 3,88 | 1064 | 0,269 | 30,7 | 109 |
| JETNEUF | 7977 | 87,7 | 8,6 | 67219 | 4,98 | 1176 | 0,262 | 33,3 | 115 |
| Fu 27 DARMOR | 9292 | 82,8 | 11,6 | 106188 | 4,09 | 1337 | 0,293 | 42,2 | 122 |
| Fu 58 DARMOR | 8617 | 76,5 | 11,7 | 99947 | 3,65 | 1228 | 0,270 | 36,0 | 131 |
| Fu 118 DARMOR* | 8389 | 84,6 | 11,0 | 92428 | 4,11 | 1243 | 0,276 | 38,1 | 132 |
NSq: počet šešulí/m2
WlSq: váha jedné šešule (mg) NSdPSq: počet semen/šešulí
NSd: počet semen/m2
WlSd: váha jednoho semene (mg)
-8CZ 291186 B6
TDM: celkový suchý materiál (g/m2)
HI: index výnosu (%)
YLD: výnos (qx/ha)
HT: výška (cm) * Tyto rostliny často nesou deformované plody (šešule).
Předmětem předkládaného vynálezu je také sonda obsahující sekvenci alespoň 10 bloků, s výhodou 15 bloků, z úseku sekvence vymezené nukleotidy č. 928 až 1569 podle obrázku 1; zmíněná sonda může být označena, například pomocí radioaktivní báze nebo jinými způsoby, jako například fluorescenčně. Tato sonda může být použita na demonstraci samčí sterility a může být konkrétně využita při selekci klonů.
Některé vlastnosti a výhody předkládaného vynálezu budou zřetelněji znázorněny na následujících příkladech.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Určení DNA sekvence zodpovědné za Ogurovu cytoplazmatickou samčí sterilitu
1. Rostlina
Pojem „cybrid“ označuje formy získané fůzí izolovaných protoplastů a následující regenerací celé rostliny. Tento způsob produkce umožňuje smíchání cytoplazmatické informace pocházející zobou rodičů v buňce. Cybrid č. 13 byl získán mezi přibližně 820zregenerovanými rostlinami pro fúzi protoplastů mezi Ogura-cms, což je cybrid B. napus rezistentní na triazin (potomstvo cybridu 77 popsaného vPelletier et alk., 1983 a Chétrit et al., 1985), a mezi fertilní varietou pocházející z linie Brutor, citlivou na triazin. Test rezistence na triazin (Ducruet a Gasquez, 1978) provedený na vzorku listu každé zregenerované rostliny umožnil určení typu chloroplastu (chloroplasty rezistentní na triazin pocházely zrodíce 77 a chloroplasty citlivé na triazin pocházely z linie Brutor). Rostliny byly kultivovány a byl pozorován stupeň kvetení. Rostliny vykazující nerodičovské kombinace (buď citlivost/samčí sterilita, nebo rezistence/samčí fertilita) byly vybrány jako cybridi. Cybrid č. 13 byl typu citlivost/samčí sterilita. Cybrid 1 byl typu rezistence/samčí fertilita.
2. Izolace nukleové kyseliny
Z listů rostlin starých 4 týdny byla metodou popsanou Dellaportem (1983) izolována celková DNA. Mitochondriální DNA byla extrahována z listů 8 týdnů starých rostlin podle Věděla a Mathieu, 1982, s následujícími modifikacemi:
Mitochondrie nebyly před lyží purifikovány na sacharózovém gradientu a lyže byla provedena v 4% sarkozylu s 0,5 mg/ml proteinázy K (Boehringer Mannheim GmbH) v 50mM Tris pH 8, 20mM EDTA. Po precipitaci byla mitochondriální DNA purifikována centrifugací v gradientu ethidium-bromidu/cezium-chloridu (metoda 1 - Vedek a Mathieu, 1982) v polyallomemích centrifugačních zkumavkách.
Celková RNA byla izolována z listů nebo květních pupenů podle Logemanna et al., 1987.
Mitochondriální RNA byla extrahována z rostlin květáku starých 8 týdnů podle metody Sterna a Newtona, 1986.
-9CZ 291186 B6
3. Restrikční analýza mitochondriální DNA a elektroforéza v agarózovém gelu
Tyto procedur}· byly provedeny podle Pelletiera et al., 1983. Celková nebo mitochondriální RNA byla nanesena na elektroforézní gel obsahující formaldehyd, jak bylo popsáno Sambrookem etal., 1989.
4. Hybridizace
Přenos DNA nebo RNA na nylonové membrány (Hybond-N, Amersham) byl proveden kapilární absorpcí v 6xSSC, v případě DNA, nebo v lOxSSPE, v případě RNA, podle návodu výrobce. Prehybridizace a hybridizace byly provedeny podle Amersham, s použitím sond označených DNA značícím systémem využívajícím více oček (primerů) (Amersham) purifikovaných na kolonách Sephadex G-50 (Sambrook et al., 1989).
5. Klonování mitochondriální DNA
S použitím EMBL3 vektoru odvozeného od fága lambda byly připraveny dvě genomové knihovny samčí sterilní linie (13-7) a revertované cybridní linie (13-6) a byly kultivovány na restriktivním kmeni E. coli Nm539 (Frischauf et al., 1983). Bylo získáno přibližně 2,5xl04 klonů na pg mitochondriální DNA.
Mitochondriální DNA knihovny byly testovány a vysety za účelem izolace plaků, které pak byly přeneseny na nylonové filtry (Sambrook et al., 1989). Hybridizační sonda používaná k testování dvou knihoven mitochondriální DNA byla připravena následovně: mitochondriální DNA fragment specifický pro cms byl vyčištěn s použitím Geneclean™ procedury (Bio 101 ONC.) z produktů digesce mitochondriální DNA nanesených na preparativní agarózový gel. Vyčištěná DNA pak byla označena, jak bylo popsáno.
Extrakce lambda DNA, subklonování 2,5 Ncol fragmentu do Ncol místa pTrc99A (amann et al., 1988) a extrakce plazmidové DNA byly provedeny podle protokolů Sambrook et al., 1989. Rekombinantní plazmidy byly vpraveny do E. coli kmene NM522 (Gough a Murray, 1983).
6. Genetický výzkum cybridu 13 a jeho potomstva
V první generaci potomstva získaného opylením cibridu 13 Brutorem, skládající se z 13 rostlin, je 5 samčích rostlin úplně sterilních (zahrnuje rostliny 13-2 a 13-7), jedna samčí rostlina je fertilní (č. 13-6) a 7 samčích rostlin je téměř sterilních s několika samčími fertilními květy.
Fertilní rostlina 13-6 byla samoopylena a zkřížena s Brutorem. V obou případech byly získány pouze fertilní rostliny (43, respektive 42).
Při kříženích mezi samčí sterilní rostlinou č. 13-7 a Brutorem, bylo 24 potomků naprosto sterilních a 6 neslo několik málo fertilních květů, což byl výsledek podobný tomu, pozorovanému scybridem samotným. Rostlina 13-2 byla křížena s obnovující („restorer“) linií RF, která je homozygotní ve specifickém obnovujícím genu pro Ogurovu samčí sterilitu (Chétrit et al., 1985). Potomstvo tohoto křížení se skládá z 53 samčích sterilních rostlin, 37 samčích fertilních rostlin a z 9 téměř sterilních rostlin, které mají několik málo fertilních květů. Tyto výsledky ukazují na to, že samčí sterilní rostliny z rodiny cybridu 13 obsahující Ogurovu cms determinantu, stejně jako další dříve studovaní cybridi s jednodušším obnovujícím profilem (Chétrit et al., 1985).
V tomto stadiu výzkumu mohou nastat dvě možnosti: buď obsahuje cybrid 13 směs samčích fertilních a samčích sterilních mitochondriálních genomů a je možné dále selektovat na oba fenotypy, nebo obsahuje cybrid 13 rekombinantní mitochondriální genom nestálé struktury, které
-10CZ 291186 B6 revertuje na stabilnější „fertilní“ konfiguraci a v následujících generacích bude nemožné udržet homogenní samčí sterilní fenotyp.
Samčí sterilní rostliny získané z potomstva samčí sterilní rostliny č. 13-7 byly množeny jak řízkováním tak sexuálním křížením s Brutorem. Ό obou metod poskytly po různém počtu generací (1 až 5) obě rodiny fertilní rostliny. Naproti tomu takto získané zcela fertilní rostliny nikdy nedaly vzniknout sterilním rostlinám.
Tyto výsledky ukazují, že správné je druhé z navržených vysvětlení, to znamená, že cybrid 13 nese nestabilní mitochondriální genom, který postupně ztrácí Ogurovu cms determinantu, což vede k fertilní konfiguraci bez možnosti návratu ke sterilnímu fenotypu.
7. Srovnání mitochondriálních DNA ze samčího sterilního a fertilního revertujícího potomstva. Izolace fragmentu specifického pro samčí sterilní rostliny.
Mitochondriální DNA byla extrahována z listů samčího sterilního potomstva rostliny 13-7 azfertilních revertantů (potomstvo rostlin 13-6 nebo 13-7) a štěpena několika restrikčními enzymy za účelem srovnání jejich restrikčních profilů. Mitochondriální genomy obou typů jsou si velmi podobné, protože s použitím různých enzymů nebyl pozorován žádný rozdíl v restrikčním profilu mitochondrií samčích sterilních rostlin a fertilních revertant. Pouze restrikční fragment o velikosti 6,8 kilobází nalezený v Nrul restrikčním profilu mitochondriální DNA ze samčí sterilní rostliny nebyl nikdy nalezen v odpovídajícím profilu fertilních revertant.
Tento fragment (označovaný jako N6,8) byl přečištěn z agarozového gelu, označen a použit jako sonda na Nrul restrikční profil mitochondriální DNA: intenzivní signál o velikosti 6,8 kilobází byl pozorován ve všech samčích sterilních potomcích cybridu 13, ale žádný fragment této velikosti nehybridizoval se sondou v mitochondriálních genomech fertilních revertant. Navíc, sonda N6,8 hybridizuje s fragmentem o velikosti 6,8 kilobází v Ogurově mitochondriální DNA štěpení Nrul, ale ne v B. napus cv Brutor, což ukazuje na Ogurův původ tohoto fragmentu.
Lambda knihovna obsahující mitochondriální DNA extrakty původem ze samčích sterilních rostlin (13-7) byla otestována s tímto označeným vyčištěným fragmentem a z 8 hybridizujících klonů byly izolovány 2 rekombinantní fágy obsahující celý N6,8 fragment spolu s přilehlými sekvencemi. Byla získána podrobná restrikční mapa této oblasti. Hybridizace restrikčních profilů mitochondriální DNA původem z fertilního a sterilního potomstva cybridu 13 se sondou N6,8 umožnila vymezit oblast specifickou pro samčí sterilní genotyp na Ncol fragment o velikosti
2,5 kilobází.
Ncol fragment o velikosti 2,5 kilobází byl označen a použit jako sonda vůči mitochondriální DNA pocházející z potomstva 13-7 a 13,6, která byla štěpena Ncol. Kromě signálu o velikosti
2,5 kilobází, který je specifický pro samčí sterilní profil, hybridizovalo u samčích sterilních profilů i u fertilních revertant několik Ncol fragmentů; tyto fragmenty byly dlouhé 2,2, 10 a 14 kilobází. Ncol fragment o velikosti 2,7 kilobází silně hybridizuje s mitochondriálním genomem fertilního potomstva, nikoli s genomem sterilního potomstva. Analýza hybridizačního profilu vede k závěru, že Ncol fragment o velikosti 2,5 kilobází je specifický pro samčí sterilní mitochondriální DNA, ale obsahuje i sekvence, které se opakují jinde v mitochondriálním genomu (ve fragmentech o velikosti 2,2 kilobází, 10 kilobází a 14 kilobází po Ncol štěpení) a tyto opakované sekvence jsou přítomny i v mitochondriální DNA fertilních revertant, které obsahující navíc specifický fragment o velikosti 2,7 kilobází.
Celková RNA byla izolována z listů nebo pupenů potomstva cybridu 13, ze samčích sterilních i samčích fertilních cybridů (pocházejících z jiných fúzních experimentů) a z linie Brutor. Byl proveden Northem blotting a membrány byly hybridizovány se sondou odpovídající inzertu z klonu lambda obsahujícího N6,8 popsaného v příkladu 3. Hlavní transkript o velikosti l,4kilobáze byl pozorován u všech samčích sterilních cybridů, včetně cybridu 13-7, zatímco
-11 CZ 291186 B6 u linie Brutor nebo u dvou fertilních cybridů (odlišných od 13) žádný transkript této velikosti pozorován nebyl. Navíc, fertilní rostliny obsahují transkript o velikosti 1,1 kilobází, který hybridizuje se zmíněnou sondou a který je u testovaných samčích sterilních cybridů přítomen ve velmi malém množství nebo není přítomen vůbec. Několik transkriptů společných pro všechny vzorky se sondou slabě hybridizuje, což souvisí s velkou velikostí značeného inzertu. Bylo potvrzeno, že ve vzorcích celkové RNA mohou být mitochondriální transkripty nalezeny pomocí hybridizace stejného Northem blotu s DNA fragmentem obsahujícím sekvenci genu atpa.
Stejný specifický 1,4 transkript byl nalezen s použitím 2,5NcoI fragmentu jakožto sondy v Ogurově mitochondriální RNA extrahované z rostlin květáku. Přesné hranice tohoto transkriptů byly určeny s použitím subklonů 2,5 Ncol fragmentu jakožto sond.
8. Studie cybridů 1 a jeho potomstva
Cybrid 1 byl samčí a fertilní. Zjeho potomstva byla rostlina 1.12 fertilní a rostlina 1.18 sterilní. Rostlina 1.12 poskytla ve svém potomstvu rostliny sterilní (S3) a fertilní (RF3). Rostlina 1.18 poskytla ve svém potomstvu rostliny sterilní (S2) a plodnou větev (RF2). Rostliny S2 a S3 jsou obnoveny stejným jaderným genem obnovujícím pylovou plodnost jako sterilní cybrid 13.
Při hybridizací se značeným Ncol fragmentem o velikosti 2,5 kilobází neposkytuje mitochondriální DNA rostlin S2 a S3 signál o velikosti 2,5 kilobází po Ncol štěpení ani signál o velikosti 6,8 kilobází po Nrul štěpení.
Obdobně hybridizace celkové RNA (Northem blotting) se sondou odpovídající ORFB sekvenci neposkytuje signál o velikosti 1,4 kilobází, jak se děje v případě sterilního cybridů 13. Naproti tomu, sonda odpovídající sekvenci vymezené nukleotidy 928 až 1569 podle obrázku 1 poskytuje signál na Northem blottingu o velikosti přibližně 1,3 kilobází. Tento signál není přítomen v RNA pocházející z rostlin RF], RF2, RF3 nebo zBrutora. Obdobně je možné použít tuto F sekvenci (928-1569) jako sondu pro dot-blotting celkové RNA a v tomto případě pouze samčí sterilní rostliny, a to všechny, poskytují signál.
Tyto výsledky ukazují, že rostliny S2 a S3, I když samčí a sterilní, neudržely nukleotidovou sekvenci popsanou na obrázku 1 v její původní konformaci a ukazují, že v této sekvenci část vymezená nukleotidy 928 až 1569 nese specifickou determinantu Ogurovy sterility a pokud je transkribována, způsobuje samčí sterilitu.
Tato sekvence nemá žádnou významnou homologii se sekvencemi přítomnými v databankách.
Příklad 2
Určení nevhodných sekvencí v Ogurově mitochondriálním genomu
Z druhu B. napus byl pomocí fuze protoplastů řepky nesoucí Ogurovu cytoplazmu a řepky normální získán soubor cybridů. Samčí rostliny řepky nesoucí Ogurovu cytoplazmu jsou sterilní a při nízkých teplotách deficientní v chlorofylu, zatímco rostliny normální řepky jsou zelené a fertilní. Mezi zregenerovanými rostlinami byli vybráni cybridi se sterilními a zelenými samčími rostlinami.
Stejným způsobem byl získán soubor cybridů druhu B. oleracea fúzí protoplastů z rostlin zelí nesoucích Ogurovu cytoplazmu a protoplastů z normálních rostlin zelí. Ze zregenerovaným rostlin byli vybráni cybridi se sterilními a zelenými samčími rostlinami.
-12CZ 291186 B6
Tito cybridi byli zkříženi s jinými varietami řepky v prvním případě a zelí v druhém případě. Křížení bylo opakováno v každé generaci se stejnými varietami za účelem získání definovaného genotypu blízkého genotypu původní variety.
Tyto různé variety s tímto způsobem změněnou cytoplazmou různých cybridů byly podrobeny agronomickým testům za účelem stanovení produkce zrna, která závisí na několika faktorech: dostatečné produkci nektaru, která umožní opylení hmyzem, normální morfologii květů, která umožní, že opylení je účinné a květy se vyvíjejí normálně.
Soubor cybridů tak může být rozdělen do dvou skupin:
- skupina cybridů vykazujících samčí sterilitu a vyhovujících komerční produkci semen,
- skupina cybridů nevykazujících všechny vlastnosti vhodné pro dobrou komerční produkci semen.
Cybridi řepky č. 27, 58 a 85 a cybridi zelí č. 9, 17, 21, 24 a 27c patří, například, do první skupiny.
Cybridi řepky č. 23s, 77 a 118 a cybridi zelí č. 1, 6 a 14 patří, například, do druhé skupiny.
Celková DNA těchto cybridů byla enzymaticky štěpena Sall, Ncol, Nrul, BglI, Pstl a KpnI. Získané Southem bloty byly hybridizovány s různými mitochondriálními sondami Atpa, Cob, Coxl, Atp6, 26S a 18S a se dvěma fragmenty Ogurova genomu - s fragmentem o velikosti
2,5 kilobází získaným po Ncol štěpení a s fragmentem o velikosti 19,4 kilobází získaným po Nrul štěpení.
Dvě skupiny cybridů se liší tím, že:
a) č. 23s, 77 a lis v případě řepky a č. 1, 16 a 11 v případě zelí obsahující oblast Ogurova genomu, která obklopuje Coxl gen a je rozpoznávána BglI fragmentem o velikosti 10,7 kilobází nebo Nrul fragmentem o velikosti 11 kilobází, a oblast Ogurova genomu, která obklopuje geny pro formylmethionin-transferovou RNA a je rozpoznávána Sall fragmentem o velikosti 5,1 kilobází nebo Nrul fragmentem o velikosti 15 kilobází.
b) č. 27, 58 a 85 v případě řepky a č. 9, 17, 21, 24 a 27c v případě zelí neobsahují odpovídající oblasti, protože byly v důsledku rekombinace mezi genomy dvou fúzovaných rodičů zaměněny za analogické oblasti mitochondriálního genomu č. 27, 58 a 85 v případě řepky a č. 9, 17, 21, 24 a 27c v případě zelí.
Z uvedených výsledků lze usuzovat, že tyto dvě oblasti Ogurova genomu, o kterých se pojednávalo, jsou nevhodné, je-li žádoucí získat systém samčí sterility vhodný pro komerční produkci semen.
Příklad 3
Tento příklad demonstruje jak je významné znát sekvence „Ogurovy samčí sterility“ a nevhodné sekvence pro provádění okamžitého třídění cybridů bez několikaletého čekání na zpětná křížení a agronomické testy.
Protoplasty rostliny Brassica, nesoucí Ogurovu cytoplazmu, jsou fúzovány s protoplasty druhů Brassica, o které se jedná. Kolonie získané po fúzí jsou pěstovány in vitro a regenerovány na médiu, které podporuje tvorbu pupenů (Pelletier et al., 1983).
-13CZ 291186 B6
Z jednoho gramu čerstvého materiálu, buď kalusu, nebo fragmentu zregenerované rostliny, je možné pomocí výše popsané techniky izolovat celkovou DNA. Po Sáli štěpení, by měla hybridizace Southemova typu se sondou vymezenou nukleotidy č. 389 až 1199 (viz obrázek 1) poskytnout signál pouze o velikosti 4,4 kilobází (neměla by poskytnout signál o velikosti 5,1 kilobází). Obdobně po štěpení Nrul a hybridizací se sondou nesoucí Coxl gen, by měl být získán signál jiné velikosti než 11 kilobází.
Tyto hybridizace umožňují předpovědět, že získaná samčí rostliny bude opravdu sterilní a vhodná pro komerční produkci semen.
Příklad 4
Tento příklad je obměnou příkladu 3 a místo provedení fúze protoplastů je založený na myšlence provedení sexuálního křížení mezi dvěma rodiči za speciálních podmínek nebo mezi rodiči se zvláštními genotypy s tím výsledkem, že, na rozdíl od známých procesů fertilizace u rostlin, zde dochází k smíšení cytoplazem oosfery a pylových trubiček nebo samčích gamet. Kdyby byla taková metoda popsána, mohlo by být stejným způsobem, s použitím stejných sond a stejných kriterií jako u příkladu 3, provedeno časné třídění mladých rostlin vzniklých z těchto umělých fertilizací.
Příklad 5
Tento příklad demonstruje, jak je významné znát sekvenci Ogurovy sterility pro způsob genetických manipulací, které již byly popsány u kvasinek (Johnston et al., 1988).
Počáteční normální rostlina Brassica, tedy její meristémy, případně buňky in vitro, jsou bombardovány mikroskopickými částečkami pokrytými DNA nesoucí sekvenci Ogurovy sterility. Pokud byla DNA schopná vstoupit do mitochondrií a integrovat se do genomu těchto organel budou rostliny získané v potomstvu takto zpracovaného meristému nebo zregenerované rostliny vykazovat znaky cytoplazmatické samčí sterility. Tato procedura umožní obejít problémy vyvolané nechtěnými sekvencemi, které nastávají, jsou-li jsou v procesu zahrnuty Ogurovy chloroplasty původem z ředkvičky nebo sekvence takto definovaného Ogurova mitochondriálního genomu.
Příklad 6
Tento příklad demonstruje, jak je významné znát sekvenci „Ogurovy sterility“ při konstrukci jaderné, nikoli cytoplazmatické, samčí sterility podléhající mendelovské dědičnosti za pomoci genetického inženýrství.
Po genetické transformaci buněk Brassica nebo buněk jiného rodu může být v jádrech přeměněných buněk zkonstruován chimemí gen vycházející z mitochondriální DNA sekvence vymezené nukleotidy 928 až 1569, který bude transkribován. Pokud chimemí gen obsahuje úvodní sekvenci, která umožňuje import jeho proteinového translačního produktu do mitochondrie, pak budou tyto přeměněné buňky vykazovat samčí sterilitu a tento charakter se bude chovat jako dominantní znak podle mendelovské dědičnosti.
Literatura
Amann E, Ochs B a Ábel K-J (1988) Gene 69:301-315
Bannerot H, Boulidard L, Cauderon Y a Tempé J (1974) Proč Eucarpia Meeting Cruciferae 25:52-54
-14CZ 291186 B6
Bannerot H, Boulidard L a Chupeau Y (1977) Eucarpia Cruciferae News 1:2-16
Chétrit P, Mathieu C, Vedel F, Pelletier G a Primard C (1985) Theor Appl Genet 69:361-366 Dellaporta S L, Wood J a Hicks J B (1983) Plant Mol Biol Rep 1:19—21
Ducruet J M a Gasquez J (1978) Chemosphere 8:691-696
Frishauf A M, Lehrach H, Poutska A a Murray N (1983) J Mol Biol 170:827-842
Gough J a MurrayN (1983) J Mol Biol 166:1-19
Hiesel R, Schobel W, Schuster W a Brennicke A (1987) EMBO J 6:29-34
Johnston S A, Anziano P Q, Shark K, Sanford J C a Butow R A (1988) Science 240:1538-1541 Logemann J, Schell J a WillmitzerL (1987) Analytical Biochem 163:16-20
Ogura H (1968) Mem Fac Agric Kagoshima Univ 6:39-78
Pelletier G, Primard C, Vedel F. Chétrit P, Rémy R, Rousselle P a Renard M (1983)
Mol Gen Genet 191:244-250
Sambrook J, Fritsch E F a Maniatis T (1989) Molecular cloning, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, New York
Stem D B a Newton K J (1986) Methods Enzymol 118:488-496
Vedel F a Mathieu C (1982) Anal Biochem 127:1-8
PATENTOVÉ NÁROKY
Claims (27)
1. Rekombinantní rostlinný jaderný nebo mitochondriální genom obsahující:
c) DNA sekvenci vymezenou nukleotidy č. 928 až 1569 podle obrázku 1 -SEQ ID NO: 1 nebo
d) DNA sekvenci kódující proteinový produkt translace identický s tím, který je kódován, kde uvedená sekvence uděluje cytoplazmatickou samčí sterilitu rostlině, v jejímž mitochondriálním genomu je přítomna, přičemž tento rekombinantní genom neobsahuje funkční kopii genu z Ogurova genomu, přičemž tento gen z Ogurova genomu je definován takto:
ii) gen pro formylmethionin-transferovou RNA používaný pro iniciaci translace, který· je charakterizován tím, že po Nrul štěpení poskytuje DNA fragment o velikosti 15 kilobází nebo po Sall štěpení poskytuje DNA fragment o velikosti 5,1 kilobází a oba tyto fragmenty je možné vizualizovat hybridizaci se sondou odpovídající sekvenci vymezené nukleotidy 389 až 1199 v sekvenci zobrazené na obrázku 1 - SEQ ID NO: 1 nebo iv) Coxl gen kódující podjednotku č. 1 cytochrom oxidázy, který je charakterizován tím, že po BglI štěpení poskytuje DNA fragment o velikosti 10,7 kilobází nebo po Nrul štěpení poskytuje DNA fragment o velikosti 11 kilobází a oba tyto fragmenty je možné vizualizovat hybridizaci s Coxl sondou.
2. Jaderný nebo mitochondriální genom podle nároku 1, přičemž tento genom obsahuje sekvenci, která po Ncol štěpení poskytuje fragment o velikosti 2,5 kilobází, po Nrul štěpení poskytuje fragment o velikosti 6,8 kilobází a po Sall štěpení poskytuje fragment o velikosti 4,4 kilobází.
3. Jaderný genom podle nároku 1, přičemž tento genom dále obsahuje úvodní sekvenci umožňující import translačního produktu této sekvence do mitochondrie.
4. Genom podle nároku 1, přičemž tento genom je mitochondriální.
- 15CZ 291186 B6
5. Mitochondrie obsahující genom podle nároku 4.
6. Cytoplazma obsahující mitochondriální genom podle nároku 4 a dále obsahující chloroplasty stejného druhu jako uvedený jaderný genom nebo chloroplasty jiného druhu, které jsou slučitelné s uvedeným jaderným genomem.
7. Rostlina náležející do rodu Brassica a obsahující chloroplasty Brassica, které jsou slučitelné s uvedeným jaderným genomem této rostliny, a mitochondrie podle nároku 5.
8. Rostlina náležející do rodu Brassica a mající jaderný genom obsahující genom podle nároku
3 a mající prvky ovlivňující jeho expresi a transport jeho translačních produktů do mitochondrie.
9. Rostlina podle nároku 7, kterou je rostlina patřící k druhu Brassica napus.
10. Rostlina podle nároku 7, kterou je rostlina patřící k druhu Brassica oleracea.
11. Rostlina podle nároku 7, kterou je rostlina patřící k druhu Brassica campestris.
12. Rostlina podle nároku 7, kterou je rostlina patřící k druhu Brassica jimcea.
13. Rostlina podle nároku 7, kterou je rostlina patřící k druhu Brassica nigra.
14. Rostlina podle nároku 7, kterou je rostlina patřící k druhu Brassica hirta.
15. Rostlina podle nároku 7, kterou je rostlina patřící k druhu Brassica carinata.
16. Rostlina podle nároku 7, kterou je rostlina patřící k druhům B. napus, B. oleracea, B. campestris, B. nigra, B. juncea, B. hirta nebo B. carinata.
17. Rostlina podle nároku 7, kterou je rostlina se získaná fúzí protoplastů.
18. Rostlina podle nároku 7, kterou je rostlina se získaná sexuální reprodukcí.
19. Rostlina podle nároku 7, kterou je rostlina se získaná genovým přenosem do mitochondrie.
20. Způsob přípravy hybridních rostlin, vyznačující se t í m, že zahrnuje křížení rostliny vykazující vlastnosti sterilní samčí cytoplazmy podle nároku 6 s rostlinou stejného druhu.
21. Sonda nukleové kyseliny obsahující jako první sekvenci alespoň 15 bází z druhé sekvence ohraničené nukleotidy č. 928 až 1569 zobrazených na obrázku 1 - SEQ ID NO: 1, přičemž druhá sekvence udělující vlastnosti cytoplazmatické samčí sterility je značena radioaktivním nebo neradioaktivním způsobem.
22. Izolovaná DNA molekula, která obsahuje:
a) DNA sekvenci vymezenou nukleotidy č. 928 až 1569 podle obrázku 1 - SEQ ID NO: 1 nebo
b) DNA sekvenci kódující proteinový produkt translace identický s tím, který je kódován;
přičemž zmíněná sekvence uděluje rostlině cytoplazmatickou samčí sterilitu, je-li přítomna v mitochondriálním genomu rostliny a je-li transkribována na RNA v mitochondriích zmíněné rostliny.
-16CZ 291186 B6
23. DNA molekula podle nároku 22, která obsahuje sekvenci vymezenou nukleotidy č. 928 až 1569 podle obrázku 1 - SEQ ID NO: 1.
24. DNA molekula podle nároku 22, která obsahuje sekvenci vymezenou nukleotidy č. 928 až 2273 podle obrázku 1 - SEQ ID NO: 1 nebo sekvenci kódující proteinový produkt translace identický stím, který je kódován zmíněnou sekvencí vymezenou nukleotidy 928 až 2273; přičemž zmíněná sekvence je transkribována na RNA v mitochondriích sterilní samčí rostliny.
25. DNA molekula podle nároku 24, která obsahuje sekvenci vymezenou nukleotidy č. 928 až 2273 podle obrázku 1 - SEQ ID NO: 1, přičemž zmíněná sekvence uděluje cytoplazmatickou samčí sterilitu rostlině, je-li přítomna v mitochondriálním genomu zmíněné rostliny.
26. Hybridní rostlina získaná způsobem podle nároku 20.
27. Způsob přípravy hybridních rostlin, vyznačující se tím, že zahrnuje křížení rostliny vykazující charakter cytoplazmatické samčí sterility podle nároku 6 s rostlinnou stejného druhu obsahující gen obnovující fertilitu Rfl.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR909011670A FR2667078B1 (fr) | 1990-09-21 | 1990-09-21 | Sequence d'adn conferant une sterilite male cytoplasmique, genome mitochondrial, mitochondrie et plante contenant cette sequence, et procede de preparation d'hybrides. |
| PCT/FR1991/000741 WO1992005251A1 (fr) | 1990-09-21 | 1991-09-20 | Sequence d'adn conferant une sterilite male cytoplasmique, genome mitochondrial, genome nucleaire, mitochondrie et plante contenant cette sequence, et procede de preparation d'hybrides |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ45493A3 CZ45493A3 (en) | 1994-02-16 |
| CZ291186B6 true CZ291186B6 (cs) | 2003-01-15 |
Family
ID=9400521
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS1993454A CZ291186B6 (cs) | 1990-09-21 | 1991-09-20 | Rekombinantní rostlinný jaderný nebo mitochondriální genom, cytoplazma, rostlina, způsob přípravy rostliny, sonda nukleové kyseliny, DNA molekula |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5789566A (cs) |
| EP (2) | EP0909815B1 (cs) |
| JP (2) | JP3156792B2 (cs) |
| KR (1) | KR930702520A (cs) |
| AT (2) | ATE396257T1 (cs) |
| AU (1) | AU652964B2 (cs) |
| CA (2) | CA2393476C (cs) |
| CZ (1) | CZ291186B6 (cs) |
| DE (2) | DE69132878T2 (cs) |
| DK (2) | DK0909815T3 (cs) |
| ES (2) | ES2169720T3 (cs) |
| FR (1) | FR2667078B1 (cs) |
| HU (2) | HU215494B (cs) |
| IE (2) | IE913320A1 (cs) |
| PL (4) | PL169149B1 (cs) |
| PT (1) | PT99024B (cs) |
| RO (1) | RO114978B1 (cs) |
| RU (1) | RU2117704C1 (cs) |
| SK (1) | SK284748B6 (cs) |
| UA (1) | UA26445C2 (cs) |
| WO (1) | WO1992005251A1 (cs) |
Families Citing this family (232)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2108230C (en) * | 1992-10-14 | 2006-01-24 | Takako Sakai | Methods for introducing a fertility restorer gene and for producing f1 hybrid of brassica plants thereby |
| NL194904C (nl) * | 1993-07-14 | 2003-07-04 | Sakata Seed Corp | Mannelijke steriele plant. |
| EP0675198A4 (en) * | 1993-10-01 | 1996-01-10 | Mitsubishi Chem Ind | Gene that identifies sterile plant cytoplasm and process for preparing hybrid plant by using the same. |
| AU2761495A (en) * | 1994-12-30 | 1996-07-24 | Asgrow Seed Company | Male sterile brassica oleracea plants |
| GB9513881D0 (en) | 1995-07-07 | 1995-09-06 | Zeneca Ltd | Improved plants |
| NL1003239C2 (nl) * | 1996-05-31 | 1997-12-03 | Bejo Zaden Bv | Cytoplasmatisch mannelijk steriele Brassica oleracea plant, alsmede werkwijze voor het verkrijgen van een dergelijke plant. |
| JPH1084998A (ja) * | 1996-09-13 | 1998-04-07 | Sumitomo Chem Co Ltd | 細胞質雄性不稔因子ｄｎａを含有する植物の識別方法及び利用される細胞質雄性不稔因子ｄｎａ |
| CA2193938A1 (en) | 1996-12-24 | 1998-06-24 | David G. Charne | Oilseed brassica containing an improved fertility restorer gene for ogura cytoplasmic male sterility |
| HUP0002501A3 (en) * | 1997-05-30 | 2001-11-28 | Univ Montreal Mcgill | Method for enhancement of naturally occurring cytoplasmic male sterility and for restoration of male fertility and uses thereof in hybrid crop production |
| US6852908B2 (en) | 1997-05-30 | 2005-02-08 | Mcgill University | Method for enhancement of naturally occurring cytoplasmic male sterility and for restoration of male fertility and uses thereof in hybrid crop production |
| CA2206673A1 (en) * | 1997-06-10 | 1998-12-10 | Lomas K. Tulsieram | Use of molecular markers for genotype determination of the ogura rf gene in brassica napus |
| US6323392B1 (en) * | 1999-03-01 | 2001-11-27 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Formation of brassica napus F1 hybrid seeds which exhibit a highly elevated oleic acid content and a reduced linolenic acid content in the endogenously formed oil of the seeds |
| AU2002251533B2 (en) | 2001-04-25 | 2006-09-28 | Institut National De La Recherche Agronomique | Protein involved in restoration of cytoplasmic male sterility to fertility and gene encoding the protein and gene |
| DE10136378C2 (de) * | 2001-07-26 | 2003-07-31 | Norddeutsche Pflanzenzucht Han | Männliche Sterilität in Gräsern der Gattung Lolium |
| AU2003262852A1 (en) * | 2002-08-23 | 2004-03-11 | Basf Plant Science Gmbh | Male sterility restoration as a selectable marker in plant transformation |
| GB0402106D0 (en) * | 2004-01-30 | 2004-03-03 | Syngenta Participations Ag | Improved fertility restoration for ogura cytoplasmic male sterile brassica and method |
| US8030549B2 (en) | 2004-05-19 | 2011-10-04 | Seminis Vegetable Seeds, Inc. | Broccoli type adapted for ease of harvest |
| GB2429462A (en) * | 2005-08-23 | 2007-02-28 | Elsoms Seeds Ltd | Male sterile swede plants and F1 hybrids |
| CN101522896B (zh) * | 2005-10-26 | 2016-09-07 | 坂田种苗株式会社 | 莴苣属的胞质杂种植物和其生产方法 |
| US8026416B2 (en) | 2005-11-22 | 2011-09-27 | Seminis Vegatable Seeds, Inc. | Broccoli type having curds with detached florets |
| US8247655B2 (en) | 2006-09-13 | 2012-08-21 | Syngenta Participations Ag | Rucola plants with cytoplasmic male sterility (CMS) |
| CL2007003743A1 (es) | 2006-12-22 | 2008-07-11 | Bayer Cropscience Ag | Composicion que comprende fenamidona y un compuesto insecticida; y metodo para controlar de forma curativa o preventiva hongos fitopatogenos de cultivos e insectos. |
| EP1969930A1 (de) | 2007-03-12 | 2008-09-17 | Bayer CropScience AG | Phenoxyphenylamidine und deren Verwendung als Fungizide |
| EP1969934A1 (de) | 2007-03-12 | 2008-09-17 | Bayer CropScience AG | 4-Cycloalkyl-oder 4-arylsubstituierte Phenoxyphenylamidine und deren Verwendung als Fungizide |
| EP1969929A1 (de) | 2007-03-12 | 2008-09-17 | Bayer CropScience AG | Substituierte Phenylamidine und deren Verwendung als Fungizide |
| WO2008110279A1 (de) | 2007-03-12 | 2008-09-18 | Bayer Cropscience Ag | Dihalogenphenoxyphenylamidine und deren verwendung als fungizide |
| BRPI0808798A2 (pt) | 2007-03-12 | 2014-10-07 | Bayer Cropscience Ag | Fenoxifenilamidinas 3,5-dissubstituídas e seu uso como fungicidas |
| US8168567B2 (en) | 2007-04-19 | 2012-05-01 | Bayer Cropscience Ag | Thiadiazolyl oxyphenyl amidines and the use thereof as a fungicide |
| EP2016821A1 (en) | 2007-06-13 | 2009-01-21 | Syngeta Participations AG | New hybrid system for Brassica napus |
| DE102007045922A1 (de) | 2007-09-26 | 2009-04-02 | Bayer Cropscience Ag | Wirkstoffkombinationen mit insektiziden und akariziden Eigenschaften |
| DE102007045953B4 (de) | 2007-09-26 | 2018-07-05 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Wirkstoffkombinationen mit insektiziden und akariziden Eigenschaften |
| DE102007045957A1 (de) | 2007-09-26 | 2009-04-09 | Bayer Cropscience Ag | Wirkstoffkombinationen mit insektiziden und akarziden Eigenschaften |
| DE102007045920B4 (de) | 2007-09-26 | 2018-07-05 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Synergistische Wirkstoffkombinationen |
| DE102007045919B4 (de) | 2007-09-26 | 2018-07-05 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Wirkstoffkombinationen mit insektiziden und akariziden Eigenschaften |
| DE102007045955A1 (de) | 2007-09-26 | 2009-04-09 | Bayer Cropscience Ag | Wirkstoffkombinationen mit insektiziden und akariziden Eigenschaften |
| DE102007045956A1 (de) | 2007-09-26 | 2009-04-09 | Bayer Cropscience Ag | Wirkstoffkombination mit insektiziden und akariziden Eigenschaften |
| EP2090168A1 (de) | 2008-02-12 | 2009-08-19 | Bayer CropScience AG | Methode zur Verbesserung des Pflanzenwachstums |
| BRPI0818691A2 (pt) * | 2007-10-02 | 2014-09-30 | Bayer Cropscience Ag | Métodos para melhorar o crescimento vegetal. |
| EP2060168A1 (en) | 2007-11-16 | 2009-05-20 | Syngenta Participations AG | Method for the production of pink colored cabbage |
| EP2072506A1 (de) | 2007-12-21 | 2009-06-24 | Bayer CropScience AG | Thiazolyloxyphenylamidine oder Thiadiazolyloxyphenylamidine und deren Verwendung als Fungizide |
| WO2009100178A2 (en) | 2008-02-06 | 2009-08-13 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | New brassica ogura restorer lines with shortened raphanus fragment (srf) |
| EP2113172A1 (de) * | 2008-04-28 | 2009-11-04 | Bayer CropScience AG | Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen |
| US7947877B2 (en) | 2008-05-14 | 2011-05-24 | Monosanto Technology LLC | Plants and seeds of spring canola variety SCV328921 |
| US8829282B2 (en) | 2008-05-14 | 2014-09-09 | Monsanto Technology, Llc | Plants and seeds of spring canola variety SCV425044 |
| US7964774B2 (en) | 2008-05-14 | 2011-06-21 | Monsanto Technology Llc | Plants and seeds of spring canola variety SCV384196 |
| US7935870B2 (en) | 2008-05-14 | 2011-05-03 | Monsanto Technology Llc | Plants and seeds of spring canola variety SCV354718 |
| FR2932062B1 (fr) * | 2008-06-04 | 2013-05-10 | Clause | Plantes du genre eruca porteuses d'une sterilite male cytoplasmique |
| EP2168434A1 (de) | 2008-08-02 | 2010-03-31 | Bayer CropScience AG | Verwendung von Azolen zur Steigerung der Resistenz von Pflanzen oder Pflanzenteilen gegenüber abiotischem Stress |
| US20110190365A1 (en) | 2008-08-14 | 2011-08-04 | Bayer Crop Science Ag | Insecticidal 4-phenyl-1H-pyrazoles |
| DE102008041695A1 (de) | 2008-08-29 | 2010-03-04 | Bayer Cropscience Ag | Methoden zur Verbesserung des Pflanzenwachstums |
| EP2201838A1 (de) | 2008-12-05 | 2010-06-30 | Bayer CropScience AG | Wirkstoff-Nützlings-Kombinationen mit insektiziden und akariziden Eigenschaften |
| EP2198709A1 (de) | 2008-12-19 | 2010-06-23 | Bayer CropScience AG | Verfahren zur Bekämpfung resistenter tierischer Schädlinge |
| EP2204094A1 (en) | 2008-12-29 | 2010-07-07 | Bayer CropScience AG | Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants Introduction |
| EP2039772A2 (en) | 2009-01-06 | 2009-03-25 | Bayer CropScience AG | Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants introduction |
| EP2039771A2 (en) | 2009-01-06 | 2009-03-25 | Bayer CropScience AG | Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants |
| EP2039770A2 (en) | 2009-01-06 | 2009-03-25 | Bayer CropScience AG | Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants |
| BRPI1006916A8 (pt) | 2009-01-19 | 2016-05-03 | Bayer Cropscience Ag | Dionas cíclicas e seu uso como inseticidas, acaricidas e/ou fungicidas |
| EP2227951A1 (de) | 2009-01-23 | 2010-09-15 | Bayer CropScience AG | Verwendung von Enaminocarbonylverbindungen zur Bekämpfung von durch Insekten übertragenen Viren |
| EP2391608B8 (en) | 2009-01-28 | 2013-04-10 | Bayer Intellectual Property GmbH | Fungicide n-cycloalkyl-n-bicyclicmethylene-carboxamide derivatives |
| AR075126A1 (es) | 2009-01-29 | 2011-03-09 | Bayer Cropscience Ag | Metodo para el mejor uso del potencial de produccion de plantas transgenicas |
| EP2218717A1 (en) | 2009-02-17 | 2010-08-18 | Bayer CropScience AG | Fungicidal N-((HET)Arylethyl)thiocarboxamide derivatives |
| EP2398770B1 (en) | 2009-02-17 | 2016-12-28 | Bayer Intellectual Property GmbH | Fungicidal n-(phenylcycloalkyl)carboxamide, n-(benzylcycloalkyl)carboxamide and thiocarboxamide derivatives |
| TW201031331A (en) | 2009-02-19 | 2010-09-01 | Bayer Cropscience Ag | Pesticide composition comprising a tetrazolyloxime derivative and a fungicide or an insecticide active substance |
| FR2942583A1 (fr) * | 2009-03-02 | 2010-09-03 | Clause | Plantes du genre diplotaxis porteuses d'une sterilite male cytoplasmique |
| DE102009001469A1 (de) | 2009-03-11 | 2009-09-24 | Bayer Cropscience Ag | Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen |
| DE102009001681A1 (de) | 2009-03-20 | 2010-09-23 | Bayer Cropscience Ag | Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen |
| DE102009001730A1 (de) | 2009-03-23 | 2010-09-30 | Bayer Cropscience Ag | Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen |
| DE102009001728A1 (de) | 2009-03-23 | 2010-09-30 | Bayer Cropscience Ag | Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen |
| DE102009001732A1 (de) | 2009-03-23 | 2010-09-30 | Bayer Cropscience Ag | Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen |
| US8846568B2 (en) | 2009-03-25 | 2014-09-30 | Bayer Cropscience Ag | Active compound combinations having insecticidal and acaricidal properties |
| MX2011009916A (es) | 2009-03-25 | 2011-10-06 | Bayer Cropscience Ag | Combinaciones de principios activos con propiedades insecticidas y acaricidas. |
| MX2011009372A (es) | 2009-03-25 | 2011-09-27 | Bayer Cropscience Ag | Combinaciones de principios activos con propiedades insecticidas y acaricidas. |
| UA104887C2 (uk) | 2009-03-25 | 2014-03-25 | Баєр Кропсаєнс Аг | Синергічні комбінації активних речовин |
| US8828906B2 (en) | 2009-03-25 | 2014-09-09 | Bayer Cropscience Ag | Active compound combinations having insecticidal and acaricidal properties |
| EP2232995A1 (de) | 2009-03-25 | 2010-09-29 | Bayer CropScience AG | Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen |
| EP2239331A1 (en) | 2009-04-07 | 2010-10-13 | Bayer CropScience AG | Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants |
| WO2010127797A2 (en) | 2009-05-06 | 2010-11-11 | Bayer Cropscience Ag | Cyclopentanedione compounds and their use as insecticides, acaricides and/or fungicides |
| AR076839A1 (es) | 2009-05-15 | 2011-07-13 | Bayer Cropscience Ag | Derivados fungicidas de pirazol carboxamidas |
| EP2251331A1 (en) | 2009-05-15 | 2010-11-17 | Bayer CropScience AG | Fungicide pyrazole carboxamides derivatives |
| EP2255626A1 (de) | 2009-05-27 | 2010-12-01 | Bayer CropScience AG | Verwendung von Succinat Dehydrogenase Inhibitoren zur Steigerung der Resistenz von Pflanzen oder Pflanzenteilen gegenüber abiotischem Stress |
| PL2437595T3 (pl) | 2009-06-02 | 2019-05-31 | Bayer Cropscience Ag | Zastosowanie fluopyramu do zwalczania Sclerotinia ssp. |
| US8071848B2 (en) | 2009-06-17 | 2011-12-06 | Monsanto Technology Llc | Plants and seeds of spring canola variety SCV218328 |
| CN104430378A (zh) | 2009-07-16 | 2015-03-25 | 拜尔农作物科学股份公司 | 含苯基三唑的协同活性物质结合物 |
| WO2011015524A2 (en) | 2009-08-03 | 2011-02-10 | Bayer Cropscience Ag | Fungicide heterocycles derivatives |
| FR2948533A1 (fr) | 2009-08-03 | 2011-02-04 | Limagrain Verneuil Holding | Plante brassica restauratrice de la sterilite male cytoplasmique ogura, procede de production et utilisation de cette plante |
| EP2292094A1 (en) | 2009-09-02 | 2011-03-09 | Bayer CropScience AG | Active compound combinations |
| EP2343280A1 (en) | 2009-12-10 | 2011-07-13 | Bayer CropScience AG | Fungicide quinoline derivatives |
| US9000012B2 (en) | 2009-12-28 | 2015-04-07 | Bayer Cropscience Ag | Fungicide hydroximoyl-heterocycles derivatives |
| CN102725282B (zh) | 2009-12-28 | 2015-12-16 | 拜尔农科股份公司 | 杀真菌剂肟基-四唑衍生物 |
| TW201138624A (en) | 2009-12-28 | 2011-11-16 | Bayer Cropscience Ag | Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives |
| EA022553B1 (ru) | 2010-01-22 | 2016-01-29 | Байер Интеллектуэль Проперти Гмбх | Применение комбинации биологически активных веществ, набор и средство, содержащие комбинацию биологически активных веществ, для борьбы с вредителями животного происхождения и способ улучшения использования продукционного потенциала трансгенного растения |
| EP2353387A1 (de) | 2010-02-05 | 2011-08-10 | Bayer CropScience AG | Verwendung von Succinat-Dehydrogenase (SDH)-Inhibitoren in der Behandlung von Pflanzenarten der Familie der Süßgräser |
| US8148611B2 (en) | 2010-02-26 | 2012-04-03 | Monsanto Technology Llc | Plants and seeds of spring canola variety SCV453784 |
| US8138394B2 (en) | 2010-02-26 | 2012-03-20 | Monsanto Technology Llc | Plants and seeds of spring canola variety SCV431158 |
| US8143488B2 (en) | 2010-02-26 | 2012-03-27 | Monsanto Technoloy LLC | Plants and seeds of spring canola variety SCV470336 |
| JP2013521255A (ja) | 2010-03-04 | 2013-06-10 | バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング | フルオロアルキル置換２−アミドベンズイミダゾールおよび植物中のストレス耐性を強化するためのその使用 |
| US8581048B2 (en) | 2010-03-09 | 2013-11-12 | Monsanto Technology, Llc | Plants and seeds of spring canola variety SCV119103 |
| US8153865B2 (en) | 2010-03-11 | 2012-04-10 | Monsanto Technology Llc | Plants and seeds of spring canola variety SCV152154 |
| JP2013522274A (ja) | 2010-03-18 | 2013-06-13 | バイエル・インテレクチユアル・プロパテイー・ゲー・エム・ベー・ハー | 非生物的な植物ストレスに対する活性剤としてのアリールスルホンアミド類及びヘタリールスルホンアミド類 |
| WO2011124554A2 (de) | 2010-04-06 | 2011-10-13 | Bayer Cropscience Ag | Verwendung der 4-phenylbuttersäure und/oder ihrer salze zur steigerung der stresstoleranz in pflanzen |
| CA2795838A1 (en) | 2010-04-09 | 2011-10-13 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Use of derivatives of the(1-cyanocyclopropyl)phenylphosphinic acid, the esters thereof and/or the salts thereof for enhancing the tolerance of plants to abiotic stress |
| EP2377397A1 (de) | 2010-04-14 | 2011-10-19 | Bayer CropScience AG | Verwendung fungizider Wirkstoffe zur Kontrolle von Mykosen an Palmengewächsen |
| WO2011134913A1 (en) | 2010-04-28 | 2011-11-03 | Bayer Cropscience Ag | Fungicide hydroximoyl-heterocycles derivatives |
| WO2011134911A2 (en) | 2010-04-28 | 2011-11-03 | Bayer Cropscience Ag | Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives |
| JP2013525400A (ja) | 2010-04-28 | 2013-06-20 | バイエル・クロップサイエンス・アーゲー | 殺菌剤ヒドロキシモイル−複素環誘導体 |
| WO2011151370A1 (en) | 2010-06-03 | 2011-12-08 | Bayer Cropscience Ag | N-[(het)arylalkyl)] pyrazole (thio)carboxamides and their heterosubstituted analogues |
| ES2533026T3 (es) | 2010-06-03 | 2015-04-07 | Bayer Intellectual Property Gmbh | N-[(het)arilalquil)]pirazol (tio)carboxamidas y sus análogos heterosustituidos |
| UA110703C2 (uk) | 2010-06-03 | 2016-02-10 | Байєр Кропсайнс Аг | Фунгіцидні похідні n-[(тризаміщений силіл)метил]-карбоксаміду |
| UA111593C2 (uk) | 2010-07-07 | 2016-05-25 | Баєр Інтеллекчуел Проперті Гмбх | Аміди антранілової кислоти у комбінації з фунгіцидами |
| AR082286A1 (es) | 2010-07-20 | 2012-11-28 | Bayer Cropscience Ag | Benzocicloalquenos como agentes antifungicos |
| CN103118541A (zh) | 2010-07-20 | 2013-05-22 | 拜耳知识产权有限责任公司 | 邻氨基苯甲酰胺衍生物通过灌注、土混、浇灌处理、滴注施用、注射至土壤、茎杆或花、在水培体系中通过处理栽植穴或浸渍施用、漂浮或种子箱施用或通过处理种子来防治昆虫和蛛螨的用途，以及增加植物对非生物胁迫的胁迫耐受性的用途 |
| RU2013114710A (ru) | 2010-09-03 | 2014-10-10 | Байер Интеллектуэль Проперти Гмбх | Замещенные конденсированные пиримидиноны и дигидропиримидиноны |
| EP2460406A1 (en) | 2010-12-01 | 2012-06-06 | Bayer CropScience AG | Use of fluopyram for controlling nematodes in nematode resistant crops |
| CN103298341B (zh) | 2010-09-22 | 2016-06-08 | 拜耳知识产权有限责任公司 | 活性成分在抗线虫作物中用于防治线虫的用途 |
| BR112013008446B1 (pt) | 2010-10-07 | 2018-06-12 | Bayer Cropscience Ag | ''composição e método para controlar os fungos fitopatogênicos ou insetos danificadores de plantas,safras ou sementes'' |
| BR112013009590B8 (pt) | 2010-10-21 | 2019-03-19 | Bayer Ip Gmbh | composto, composição fungicida e método |
| US9084424B2 (en) | 2010-10-21 | 2015-07-21 | Bayer Intellectual Property Gmbh | N-benzyl heterocyclic carboxamides |
| CA2815117A1 (en) | 2010-11-02 | 2012-05-10 | Bayer Intellectual Property Gmbh | N-hetarylmethyl pyrazolylcarboxamides |
| EP2640706B1 (en) | 2010-11-15 | 2017-03-01 | Bayer Intellectual Property GmbH | N-aryl pyrazole(thio)carboxamides |
| BR112013012081A2 (pt) | 2010-11-15 | 2016-07-19 | Bayer Ip Gmbh | 5-halogenopirazol (tio) carboxamidas |
| MX2013005407A (es) | 2010-11-15 | 2013-07-03 | Bayer Ip Gmbh | 5-halopirazolcarboxamidas. |
| EP2460407A1 (de) | 2010-12-01 | 2012-06-06 | Bayer CropScience AG | Wirkstoffkombinationen umfassend Pyridylethylbenzamide und weitere Wirkstoffe |
| AP3519A (en) | 2010-12-01 | 2016-01-11 | Bayer Ip Gmbh | Use of fluopyram for controlling nematodes in crops and for increasing yield |
| EP2658853A1 (en) | 2010-12-29 | 2013-11-06 | Bayer Intellectual Property GmbH | Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives |
| EP2474542A1 (en) | 2010-12-29 | 2012-07-11 | Bayer CropScience AG | Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives |
| WO2015106205A1 (en) * | 2014-01-11 | 2015-07-16 | Rutger, The State University Of New Jersey | Transfer of mitochondria in plant species for conferring cytoplasmic male sterility |
| EP2471363A1 (de) | 2010-12-30 | 2012-07-04 | Bayer CropScience AG | Verwendung von Aryl-, Heteroaryl- und Benzylsulfonamidocarbonsäuren, -carbonsäureestern, -carbonsäureamiden und -carbonitrilen oder deren Salze zur Steigerung der Stresstoleranz in Pflanzen |
| EP2494867A1 (de) | 2011-03-01 | 2012-09-05 | Bayer CropScience AG | Halogen-substituierte Verbindungen in Kombination mit Fungiziden |
| WO2012120105A1 (en) | 2011-03-10 | 2012-09-13 | Bayer Cropscience Ag | Use of lipochito-oligosaccharide compounds for safeguarding seed safety of treated seeds |
| BR112013023502A2 (pt) | 2011-03-14 | 2016-08-02 | Bayer Ip Gmbh | composto fórmula (i), composição fungicida, método para o controle de fungos fitopatogênicos de culturas, utilização dos compostos de fórmula (i) e processo para a produção das composições |
| US8513487B2 (en) | 2011-04-07 | 2013-08-20 | Zenon LISIECZKO | Plants and seeds of spring canola variety ND-662c |
| JP2014512358A (ja) | 2011-04-08 | 2014-05-22 | バイエル・インテレクチユアル・プロパテイー・ゲー・エム・ベー・ハー | 殺菌剤ヒドロキシモイル−テトラゾール誘導体 |
| US8513494B2 (en) | 2011-04-08 | 2013-08-20 | Chunren Wu | Plants and seeds of spring canola variety SCV695971 |
| AR085585A1 (es) | 2011-04-15 | 2013-10-09 | Bayer Cropscience Ag | Vinil- y alquinilciclohexanoles sustituidos como principios activos contra estres abiotico de plantas |
| AR085568A1 (es) | 2011-04-15 | 2013-10-09 | Bayer Cropscience Ag | 5-(biciclo[4.1.0]hept-3-en-2-il)-penta-2,4-dienos y 5-(biciclo[4.1.0]hept-3-en-2-il)-pent-2-en-4-inos sustituidos como principios activos contra el estres abiotico de las plantas |
| EP2511255A1 (de) | 2011-04-15 | 2012-10-17 | Bayer CropScience AG | Substituierte Prop-2-in-1-ol- und Prop-2-en-1-ol-Derivate |
| AR090010A1 (es) | 2011-04-15 | 2014-10-15 | Bayer Cropscience Ag | 5-(ciclohex-2-en-1-il)-penta-2,4-dienos y 5-(ciclohex-2-en-1-il)-pent-2-en-4-inos sustituidos como principios activos contra el estres abiotico de las plantas, usos y metodos de tratamiento |
| EA029682B1 (ru) | 2011-04-22 | 2018-04-30 | Байер Интеллекчуал Проперти Гмбх | Комбинации активных соединений, содержащие производное соединение (тио)карбоксамида и фунгицидное соединение |
| US8507761B2 (en) | 2011-05-05 | 2013-08-13 | Teresa Huskowska | Plants and seeds of spring canola variety SCV372145 |
| US8513495B2 (en) | 2011-05-10 | 2013-08-20 | Dale Burns | Plants and seeds of spring canola variety SCV291489 |
| US9173395B2 (en) | 2011-07-04 | 2015-11-03 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Use of substituted isoquinolinones, isoquinolindiones, isoquinolintriones and dihydroisoquinolinones or in each case salts thereof as active agents against abiotic stress in plants |
| US9265252B2 (en) | 2011-08-10 | 2016-02-23 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Active compound combinations comprising specific tetramic acid derivatives |
| US20140206726A1 (en) | 2011-08-22 | 2014-07-24 | Juergen Benting | Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives |
| EP2561759A1 (en) | 2011-08-26 | 2013-02-27 | Bayer Cropscience AG | Fluoroalkyl-substituted 2-amidobenzimidazoles and their effect on plant growth |
| EP2753177A1 (en) | 2011-09-09 | 2014-07-16 | Bayer Intellectual Property GmbH | Acyl-homoserine lactone derivatives for improving plant yield |
| JP6002225B2 (ja) | 2011-09-12 | 2016-10-05 | バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングＢａｙｅｒ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ ＧｍｂＨ | 殺菌性４−置換−３−｛フェニル［（ヘテロシクリルメトキシ）イミノ］メチル｝−１，２，４−オキサジアゾール−５（４ｈ）−オン誘導体 |
| MX362112B (es) | 2011-09-16 | 2019-01-07 | Bayer Ip Gmbh | Uso de fenilpirazolin-3-carboxilatos para mejorar el rendimiento de las plantas. |
| EP2755484A1 (en) | 2011-09-16 | 2014-07-23 | Bayer Intellectual Property GmbH | Use of 5-phenyl- or 5-benzyl-2 isoxazoline-3 carboxylates for improving plant yield |
| CN103929956B (zh) | 2011-09-16 | 2017-02-22 | 拜耳知识产权有限责任公司 | 酰基磺酰胺用于改善植物产量的用途 |
| US9226505B2 (en) | 2011-09-23 | 2016-01-05 | Bayer Intellectual Property Gmbh | 4-substituted 1-phenylpyrazole-3-carboxylic acid derivatives as agents against abiotic plant stress |
| WO2013050410A1 (en) | 2011-10-04 | 2013-04-11 | Bayer Intellectual Property Gmbh | RNAi FOR THE CONTROL OF FUNGI AND OOMYCETES BY INHIBITING SACCHAROPINE DEHYDROGENASE GENE |
| WO2013050324A1 (de) | 2011-10-06 | 2013-04-11 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Abiotischen pflanzenstress-reduzierende kombination enthaltend 4- phenylbuttersäure (4-pba) oder eines ihrer salze (komponente (a)) und eine oder mehrere ausgewählte weitere agronomisch wirksame verbindungen (komponente(n) (b) |
| CN103958531B (zh) | 2011-11-21 | 2016-12-28 | 拜耳知识产权有限责任公司 | 杀真菌剂n‑[(三取代的甲硅烷基)甲基]‑羧酰胺衍生物 |
| CA2857438A1 (en) | 2011-11-30 | 2013-06-06 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Fungicidal n-bicycloalkyl and n-tricycloalkyl (thio)carboxamide derivatives |
| IN2014CN04325A (cs) | 2011-12-19 | 2015-09-04 | Bayer Cropscience Ag | |
| US9556158B2 (en) | 2011-12-29 | 2017-01-31 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Fungicidal 3-[(pyridin-2-ylmethoxyimino)(phenyl)methyl]-2-substituted-1,2,4-oxadiazol-5(2H)-one derivatives |
| JP5976837B2 (ja) | 2011-12-29 | 2016-08-24 | バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングＢａｙｅｒ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ ＧｍｂＨ | 殺菌性３−［（１，３−チアゾール−４−イルメトキシイミノ）（フェニル）メチル］−２−置換−１，２，４−オキサジアゾール−５（２ｈ）−オン誘導体 |
| HUE036328T2 (hu) | 2012-02-22 | 2018-06-28 | Bayer Cropscience Ag | Fluopirám alkalmazása fabetegségek leküzdésére szõlõn |
| CA2865300C (en) | 2012-02-27 | 2021-02-16 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Active compound combinations containing a thiazoylisoxazoline and a fungicide |
| WO2013139949A1 (en) | 2012-03-23 | 2013-09-26 | Bayer Intellectual Property Gmbh | Compositions comprising a strigolactame compound for enhanced plant growth and yield |
| EP2836489B1 (en) | 2012-04-12 | 2016-06-29 | Bayer Cropscience AG | N-acyl-2-(cyclo) alkylpyrrolidines and piperidines useful as fungicides |
| JP6109295B2 (ja) | 2012-04-20 | 2017-04-05 | バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト | Ｎ−シクロアルキル−ｎ−［（ヘテロシクリルフェニル）メチレン］−（チオ）カルボキサミド誘導体 |
| JP2015516396A (ja) | 2012-04-20 | 2015-06-11 | バイエル・クロップサイエンス・アーゲーＢａｙｅｒ Ｃｒｏｐｓｃｉｅｎｃｅ Ａｇ | Ｎ−シクロアルキル−ｎ−［（三置換シリルフェニル）メチレン］−（チオ）カルボキサミド誘導体 |
| US8802935B2 (en) | 2012-04-26 | 2014-08-12 | Monsanto Technology Llc | Plants and seeds of spring canola variety SCV942568 |
| US8878009B2 (en) | 2012-04-26 | 2014-11-04 | Monsanto Technology, LLP | Plants and seeds of spring canola variety SCV318181 |
| US8859857B2 (en) | 2012-04-26 | 2014-10-14 | Monsanto Technology Llc | Plants and seeds of spring canola variety SCV259778 |
| US8835720B2 (en) | 2012-04-26 | 2014-09-16 | Monsanto Technology Llc | Plants and seeds of spring canola variety SCV967592 |
| EP2662360A1 (en) | 2012-05-09 | 2013-11-13 | Bayer CropScience AG | 5-Halogenopyrazole indanyl carboxamides |
| CN104364236B (zh) | 2012-05-09 | 2018-01-16 | 拜尔农作物科学股份公司 | 5‑卤代吡唑二氢茚基甲酰胺 |
| EP2662370A1 (en) | 2012-05-09 | 2013-11-13 | Bayer CropScience AG | 5-Halogenopyrazole benzofuranyl carboxamides |
| EP2662363A1 (en) | 2012-05-09 | 2013-11-13 | Bayer CropScience AG | 5-Halogenopyrazole biphenylcarboxamides |
| EP2662361A1 (en) | 2012-05-09 | 2013-11-13 | Bayer CropScience AG | Pyrazol indanyl carboxamides |
| EP2662364A1 (en) | 2012-05-09 | 2013-11-13 | Bayer CropScience AG | Pyrazole tetrahydronaphthyl carboxamides |
| JP6262208B2 (ja) | 2012-05-09 | 2018-01-17 | バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト | ピラゾールインダニルカルボキサミド類 |
| EP2662362A1 (en) | 2012-05-09 | 2013-11-13 | Bayer CropScience AG | Pyrazole indanyl carboxamides |
| AR091104A1 (es) | 2012-05-22 | 2015-01-14 | Bayer Cropscience Ag | Combinaciones de compuestos activos que comprenden un derivado lipo-quitooligosacarido y un compuesto nematicida, insecticida o fungicida |
| AU2013289301A1 (en) | 2012-07-11 | 2015-01-22 | Bayer Cropscience Ag | Use of fungicidal combinations for increasing the tolerance of a plant towards abiotic stress |
| CN104780764A (zh) | 2012-09-05 | 2015-07-15 | 拜尔农作物科学股份公司 | 取代的2-酰氨基苯并咪唑、2-酰氨基苯并噁唑和2-酰氨基苯并噻唑或其盐作为活性物质对抗非生物植物胁迫的用途 |
| WO2014060518A1 (en) | 2012-10-19 | 2014-04-24 | Bayer Cropscience Ag | Method of plant growth promotion using carboxamide derivatives |
| EP2908642B1 (en) | 2012-10-19 | 2022-02-23 | Bayer Cropscience AG | Method for enhancing tolerance to abiotic stress in plants by using carboxamide or thiocarboxamide derivatives |
| EA026839B1 (ru) | 2012-10-19 | 2017-05-31 | Байер Кропсайенс Аг | Комбинации активных соединений, содержащие карбоксамидные соединения |
| UA114648C2 (uk) | 2012-10-19 | 2017-07-10 | Байєр Кропсайнс Аг | Спосіб обробки рослин проти грибів, стійких до фунгіцидів, із застосуванням карбоксамідних або тіокарбоксамідних похідних |
| EP2735231A1 (en) | 2012-11-23 | 2014-05-28 | Bayer CropScience AG | Active compound combinations |
| UA117819C2 (uk) | 2012-11-30 | 2018-10-10 | Байєр Кропсайєнс Акцієнгезелльшафт | Подвійні пестицидні і фунгіцидні суміші |
| WO2014083088A2 (en) | 2012-11-30 | 2014-06-05 | Bayer Cropscience Ag | Binary fungicidal mixtures |
| CN104837351A (zh) | 2012-11-30 | 2015-08-12 | 拜耳作物科学股份公司 | 二元杀真菌或杀虫混合物 |
| CA2892712A1 (en) | 2012-11-30 | 2014-06-05 | Bayer Cropscience Ag | Ternary fungicidal and pesticidal mixtures |
| WO2014082950A1 (en) | 2012-11-30 | 2014-06-05 | Bayer Cropscience Ag | Ternary fungicidal mixtures |
| EP2740356A1 (de) | 2012-12-05 | 2014-06-11 | Bayer CropScience AG | Substituierte (2Z)-5(1-Hydroxycyclohexyl)pent-2-en-4-insäure-Derivate |
| WO2014086751A1 (de) | 2012-12-05 | 2014-06-12 | Bayer Cropscience Ag | Verwendung substituierter 1-(arylethinyl)-, 1-(heteroarylethinyl)-, 1-(heterocyclylethinyl)- und 1-(cyloalkenylethinyl)-cyclohexanole als wirkstoffe gegen abiotischen pflanzenstress |
| EP2740720A1 (de) | 2012-12-05 | 2014-06-11 | Bayer CropScience AG | Substituierte bicyclische- und tricyclische Pent-2-en-4-insäure -Derivate und ihre Verwendung zur Steigerung der Stresstoleranz in Pflanzen |
| AR093909A1 (es) | 2012-12-12 | 2015-06-24 | Bayer Cropscience Ag | Uso de ingredientes activos para controlar nematodos en cultivos resistentes a nematodos |
| AR093996A1 (es) | 2012-12-18 | 2015-07-01 | Bayer Cropscience Ag | Combinaciones bactericidas y fungicidas binarias |
| EP2935218A1 (en) | 2012-12-19 | 2015-10-28 | Bayer CropScience AG | Difluoromethyl-nicotinic- tetrahydronaphtyl carboxamides |
| WO2014135608A1 (en) | 2013-03-07 | 2014-09-12 | Bayer Cropscience Ag | Fungicidal 3-{phenyl[(heterocyclylmethoxy)imino]methyl}-heterocycle derivatives |
| JP2016522800A (ja) | 2013-04-12 | 2016-08-04 | バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト | 新規トリアゾリンチオン誘導体 |
| CN105308032B (zh) | 2013-04-12 | 2017-05-24 | 拜耳作物科学股份公司 | 新的三唑衍生物 |
| WO2014170345A2 (en) | 2013-04-19 | 2014-10-23 | Bayer Cropscience Ag | Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants |
| US9554573B2 (en) | 2013-04-19 | 2017-01-31 | Bayer Cropscience Aktiengesellschaft | Binary insecticidal or pesticidal mixture |
| WO2014177514A1 (en) | 2013-04-30 | 2014-11-06 | Bayer Cropscience Ag | Nematicidal n-substituted phenethylcarboxamides |
| TW201507722A (zh) | 2013-04-30 | 2015-03-01 | Bayer Cropscience Ag | 做為殺線蟲劑及殺體內寄生蟲劑的ｎ－（２－鹵素－２－苯乙基）－羧醯胺類 |
| US9770022B2 (en) | 2013-06-26 | 2017-09-26 | Bayer Cropscience Ag | N-cycloalkyl-N-[(bicyclylphenyl)methylene]-(thio)carboxamide derivatives |
| CA2917559A1 (en) | 2013-07-09 | 2015-01-15 | Bayer Cropscience Aktiengesellschaft | Use of selected pyridone carboxamides or salts thereof as active substances against abiotic plant stress |
| WO2015013509A1 (en) | 2013-07-25 | 2015-01-29 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Method for producing hybrid brassica seed |
| EP2837287A1 (en) | 2013-08-15 | 2015-02-18 | Bayer CropScience AG | Use of prothioconazole for increasing root growth of Brassicaceae |
| WO2015032692A1 (de) | 2013-09-03 | 2015-03-12 | Bayer Cropscience Ag | Verwendung fungizider wirkstoffe zur kontrolle von chalara fraxinea an eschenbäumen |
| EP3077377B1 (en) | 2013-12-05 | 2020-01-22 | Bayer CropScience Aktiengesellschaft | N-cycloalkyl-n-{[2-(1-substitutedcycloalkyl)phenyl]methylene}-(thio)carboxamide derivatives |
| RU2685723C1 (ru) | 2013-12-05 | 2019-04-23 | Байер Кропсайенс Акциенгезелльшафт | Производные n-циклоалкил-n-{ [2-(1-замещенный циклоалкил)фенил]метилен} -(тио)карбоксамида |
| EP2865267A1 (en) | 2014-02-13 | 2015-04-29 | Bayer CropScience AG | Active compound combinations comprising phenylamidine compounds and biological control agents |
| EP2865265A1 (en) | 2014-02-13 | 2015-04-29 | Bayer CropScience AG | Active compound combinations comprising phenylamidine compounds and biological control agents |
| AR101214A1 (es) | 2014-07-22 | 2016-11-30 | Bayer Cropscience Ag | Ciano-cicloalquilpenta-2,4-dienos, ciano-cicloalquilpent-2-en-4-inas, ciano-heterociclilpenta-2,4-dienos y ciano-heterociclilpent-2-en-4-inas sustituidos como principios activos contra el estrés abiótico de plantas |
| AR103024A1 (es) | 2014-12-18 | 2017-04-12 | Bayer Cropscience Ag | Piridoncarboxamidas seleccionadas o sus sales como sustancias activas contra estrés abiótico de las plantas |
| US10214510B2 (en) | 2015-04-13 | 2019-02-26 | Bayer Cropscience Aktiengesellschaft | N-cycloalkyl-N-(biheterocyclylethylene)-(thio)carboxamide derivatives |
| UA126326C2 (uk) | 2015-04-30 | 2022-09-21 | Монсанто Текнолоджі Елелсі | Спосіб відбору рослини каноли, стійкої до кили капустяних |
| WO2017102923A1 (en) | 2015-12-15 | 2017-06-22 | Bayer Cropscience Nv | Brassicaceae plants resistant to plasmodiophora brassicae (clubroot) |
| AU2017247937A1 (en) | 2016-04-06 | 2018-10-04 | Bayer Cropscience Aktiengesellschaft | Combination of nuclear polyhedrosis virus and diamides |
| US20190159451A1 (en) | 2016-07-29 | 2019-05-30 | Bayer Cropscience Aktiengesellschaft | Active compound combinations and methods to protect the propagation material of plants |
| EP3515907A1 (en) | 2016-09-22 | 2019-07-31 | Bayer CropScience Aktiengesellschaft | Novel triazole derivatives |
| WO2018054829A1 (en) | 2016-09-22 | 2018-03-29 | Bayer Cropscience Aktiengesellschaft | Novel triazole derivatives and their use as fungicides |
| EP3531833A2 (en) | 2016-10-26 | 2019-09-04 | Bayer CropScience Aktiengesellschaft | Use of pyraziflumid for controlling sclerotinia spp in seed treatment applications |
| CA3046145A1 (en) | 2016-12-08 | 2018-06-14 | Bayer Cropscience Aktiengesellschaft | Use of insecticides for controlling wireworms |
| EP3332645A1 (de) | 2016-12-12 | 2018-06-13 | Bayer Cropscience AG | Verwendung substituierter pyrimidindione oder jeweils deren salze als wirkstoffe gegen abiotischen pflanzenstress |
| WO2018108627A1 (de) | 2016-12-12 | 2018-06-21 | Bayer Cropscience Aktiengesellschaft | Verwendung substituierter indolinylmethylsulfonamide oder deren salze zur steigerung der stresstoleranz in pflanzen |
| WO2019025153A1 (de) | 2017-07-31 | 2019-02-07 | Bayer Cropscience Aktiengesellschaft | Verwendung von substituierten n-sulfonyl-n'-aryldiaminoalkanen und n-sulfonyl-n'-heteroaryldiaminoalkanen oder deren salzen zur steigerung der stresstoleranz in pflanzen |
| CA3091687A1 (en) | 2018-03-16 | 2019-09-19 | BASF Agricultural Solutions Seed US LLC | Brassica plant resistant to plasmodiophora brassicae (clubroot) |
| WO2019224298A1 (en) * | 2018-05-25 | 2019-11-28 | Philip Morris Products S.A. | Method for classifying plant material |
| JP2021525774A (ja) | 2018-06-04 | 2021-09-27 | バイエル アクチェンゲゼルシャフトＢａｙｅｒ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | 除草活性二環式ベンゾイルピラゾール |
| EA202190389A1 (ru) | 2018-07-26 | 2021-06-16 | Байер Акциенгезельшафт | Применение ингибитора сукцинатдегидрогеназы флуопирама для борьбы с корневой гнилью и/или фузариозной гнилью, вызванной rhizoctonia solani, видом fusarium и видом pythium, у видов brassicaceae |
| BR112021004865A2 (pt) | 2018-09-17 | 2021-06-01 | Bayer Aktiengesellschaft | uso do fungicida isoflucypram para controlar claviceps purpurea e reduzir esclerócios em cereais |
| EP3852531A1 (en) | 2018-09-17 | 2021-07-28 | Bayer Aktiengesellschaft | Use of the succinate dehydrogenase inhibitor fluopyram for controlling claviceps purpurea and reducing sclerotia in cereals |
| AU2022313321B2 (en) | 2021-07-23 | 2026-05-07 | BASF Agricultural Solutions Seed US LLC | Blackleg resistant plants and methods for the identification of blackleg resistant plants |
| WO2025083165A1 (en) | 2023-10-19 | 2025-04-24 | Basf Agricultural Solutions Us Llc | Brassica napus plants having enhanced blackleg resistance |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0238596A1 (en) * | 1985-09-23 | 1987-09-30 | Allelix Inc. | Protoplast fusion product and process for preparing same |
| GB8901677D0 (en) * | 1989-01-26 | 1989-03-15 | Ici Plc | Hybrid seed production |
| HU204561B (en) * | 1987-12-17 | 1992-01-28 | Zaadunie Bv | Process for producing hybrid brassicaceae with citoplasmic male sterility |
| WO1990013654A1 (en) * | 1989-05-05 | 1990-11-15 | Biosource Genetics Corporation | Male sterility in plants |
-
1990
- 1990-09-21 FR FR909011670A patent/FR2667078B1/fr not_active Expired - Lifetime
-
1991
- 1991-09-20 EP EP98120228A patent/EP0909815B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 1991-09-20 UA UA93004577A patent/UA26445C2/uk unknown
- 1991-09-20 HU HU9300801A patent/HU215494B/hu unknown
- 1991-09-20 CA CA2393476A patent/CA2393476C/fr not_active Expired - Lifetime
- 1991-09-20 IE IE332091A patent/IE913320A1/en not_active IP Right Cessation
- 1991-09-20 AU AU86631/91A patent/AU652964B2/en not_active Expired
- 1991-09-20 DE DE69132878T patent/DE69132878T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1991-09-20 CZ CS1993454A patent/CZ291186B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1991-09-20 EP EP91919210A patent/EP0549726B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 1991-09-20 IE IE20020681A patent/IE20020681A1/en not_active IP Right Cessation
- 1991-09-20 AT AT98120228T patent/ATE396257T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-09-20 CA CA002092097A patent/CA2092097C/fr not_active Expired - Lifetime
- 1991-09-20 WO PCT/FR1991/000741 patent/WO1992005251A1/fr not_active Ceased
- 1991-09-20 JP JP51642391A patent/JP3156792B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1991-09-20 PL PL91309865A patent/PL169149B1/pl unknown
- 1991-09-20 RU RU93004879A patent/RU2117704C1/ru active
- 1991-09-20 DK DK98120228T patent/DK0909815T3/da active
- 1991-09-20 DK DK91919210T patent/DK0549726T3/da active
- 1991-09-20 SK SK222-93A patent/SK284748B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1991-09-20 ES ES91919210T patent/ES2169720T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-09-20 PL PL91309867A patent/PL169783B1/pl unknown
- 1991-09-20 ES ES98120228T patent/ES2307308T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-09-20 PL PL91309866A patent/PL169165B1/pl unknown
- 1991-09-20 RO RO93-00376A patent/RO114978B1/ro unknown
- 1991-09-20 AT AT91919210T patent/ATE211170T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-09-20 PL PL91298509A patent/PL168666B1/pl unknown
- 1991-09-20 DE DE69133597T patent/DE69133597D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1991-09-20 HU HU93801Q patent/HU9300801D0/hu unknown
- 1991-09-23 PT PT99024A patent/PT99024B/pt not_active IP Right Cessation
-
1993
- 1993-03-22 KR KR1019930700857A patent/KR930702520A/ko not_active Ceased
-
1995
- 1995-06-06 US US08/490,099 patent/US5789566A/en not_active Expired - Lifetime
-
2000
- 2000-10-10 JP JP2000309771A patent/JP2001145497A/ja active Pending
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU652964B2 (en) | DNA sequence imparting cytoplasmic male sterility, mitochondrial genome, nuclear genome, mitochondria and plant containing said sequence and process for the preparation of hybrids | |
| IE84070B1 (en) | DNA sequence imparting cytoplasmic male sterility, mitochondrial genome, nuclear genome, mitochondria and plant containing said sequence and process for the preparation of hybrids | |
| Jean et al. | Genetic mapping of nuclear fertility restorer genes for the ‘Polima’cytoplasmic male sterility in canola (Brassica napus L.) using DNA markers | |
| JP2002500512A (ja) | 天然に生じる雄性不稔性の増強および雄性不稔性の回復のための方法並びにハイブリッド作物の生産におけるその使用 | |
| EP0519869A2 (en) | A receptor protein kinase gene encoded at the self-incompatibility locus | |
| EP0825262A2 (en) | Tissue-specific toxin expression in plants | |
| US6583335B1 (en) | Direct transformation of higher plants through pollen tube pathway | |
| US20060123514A1 (en) | Self-fertile apple resulting from S-RNAase gene silencing | |
| US20250008903A1 (en) | Modified tom2a gene involved in tobamovirus resistance | |
| WO1998035052A1 (en) | Production of self-compatible brassica hybrids using a self-incompatible pollination control system | |
| He | Studies of plant nuclear-mitochondrial genetic interactions | |
| Aarts | An En/Spm based transposable element system for gene isolation in Arabidopsis thaliana | |
| Bravo | Cell culture and conventional breeding studies to establish cytoplasmic male sterility in the cultivated tomato (Lycopersicon esculentum) | |
| Kjellsson et al. | Glossary of terms and abbreviations | |
| L'Homme | Molecular characterization of cytoplasmic male sterility in Brassica napus | |
| JPWO1995009910A1 (ja) | 植物の不稔細胞質を同定する遺伝子およびそれを用いたハイブリッド植物の作成方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20110920 |