CZ294457B6 - DNA kódující 2-acyltransferázy - Google Patents
DNA kódující 2-acyltransferázy Download PDFInfo
- Publication number
- CZ294457B6 CZ294457B6 CZ19951506A CZ150695A CZ294457B6 CZ 294457 B6 CZ294457 B6 CZ 294457B6 CZ 19951506 A CZ19951506 A CZ 19951506A CZ 150695 A CZ150695 A CZ 150695A CZ 294457 B6 CZ294457 B6 CZ 294457B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- leu
- ala
- dna sequence
- ser
- acyltransferase
- Prior art date
Links
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims abstract description 38
- 108700016155 Acyl transferases Proteins 0.000 claims abstract description 30
- 102000057234 Acyl transferases Human genes 0.000 claims abstract description 22
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 22
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 22
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims abstract description 21
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 17
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 claims abstract description 12
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 11
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 150000003626 triacylglycerols Chemical group 0.000 claims abstract description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 8
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 71
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 54
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 35
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 25
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 17
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 15
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 14
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 14
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 claims description 12
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 claims description 12
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 claims description 7
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 5
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 5
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 claims description 4
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 claims description 4
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 claims description 4
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 claims description 4
- 241001547351 Libyostrongylus douglassi Species 0.000 claims description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 235000003901 Crambe Nutrition 0.000 claims description 2
- 241000220246 Crambe <angiosperm> Species 0.000 claims description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 claims description 2
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000185347 Lippia alba Species 0.000 claims description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims 3
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 23
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 20
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 19
- DPUOLQHDNGRHBS-UHFFFAOYSA-N Brassidinsaeure Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCCCCCC(O)=O DPUOLQHDNGRHBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- URXZXNYJPAJJOQ-UHFFFAOYSA-N Erucic acid Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCCCCCC(O)=O URXZXNYJPAJJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- DPUOLQHDNGRHBS-KTKRTIGZSA-N erucic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCCCCC(O)=O DPUOLQHDNGRHBS-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 18
- RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N Ala-Ala-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O RLMISHABBKUNFO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 15
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 description 13
- WRGQSWVCFNIUNZ-GDCKJWNLSA-N 1-oleoyl-sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O WRGQSWVCFNIUNZ-GDCKJWNLSA-N 0.000 description 12
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 description 10
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 10
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 10
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 8
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 8
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 8
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 8
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerol group Chemical group OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 8
- NSTPXGARCQOSAU-VIFPVBQESA-N N-formyl-L-phenylalanine Chemical compound O=CN[C@H](C(=O)O)CC1=CC=CC=C1 NSTPXGARCQOSAU-VIFPVBQESA-N 0.000 description 7
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 6
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 description 6
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 6
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 6
- 235000006008 Brassica napus var napus Nutrition 0.000 description 5
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 description 5
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 5
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 5
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 5
- 108010080629 tryptophan-leucine Proteins 0.000 description 5
- JSLGXODUIAFWCF-WDSKDSINSA-N Arg-Asn Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O JSLGXODUIAFWCF-WDSKDSINSA-N 0.000 description 4
- DNLQVHBBMPZUGJ-BQBZGAKWSA-N Arg-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O DNLQVHBBMPZUGJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 4
- DDBMKOCQWNFDBH-RHYQMDGZSA-N Arg-Thr-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)O DDBMKOCQWNFDBH-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 4
- HVKAAUOFFTUSAA-XDTLVQLUSA-N Glu-Tyr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HVKAAUOFFTUSAA-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 4
- UUTGYDAKPISJAO-JYJNAYRXSA-N Glu-Tyr-Leu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 UUTGYDAKPISJAO-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 4
- RWYCOSAAAJBJQL-KCTSRDHCSA-N Ile-Gly-Trp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)N RWYCOSAAAJBJQL-KCTSRDHCSA-N 0.000 description 4
- KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N L-leucyl-L-phenylalanine Natural products CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N 0.000 description 4
- VGPCJSXPPOQPBK-YUMQZZPRSA-N Leu-Gly-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VGPCJSXPPOQPBK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 4
- RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N Leu-Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RXGLHDWAZQECBI-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 4
- OVIVOCSURJYCTM-GUBZILKMSA-N Lys-Asp-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O OVIVOCSURJYCTM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 4
- HAQLBBVZAGMESV-IHRRRGAJSA-N Met-Lys-Lys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O HAQLBBVZAGMESV-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 4
- SSJMZMUVNKEENT-IMJSIDKUSA-N Ser-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CO SSJMZMUVNKEENT-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 4
- OZPDGESCTGGNAD-CIUDSAMLSA-N Ser-Ser-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CO OZPDGESCTGGNAD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 4
- CXPJPTFWKXNDKV-NUTKFTJISA-N Trp-Leu-Ala Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)=CNC2=C1 CXPJPTFWKXNDKV-NUTKFTJISA-N 0.000 description 4
- 108700014220 acyltransferase activity proteins Proteins 0.000 description 4
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 4
- 108010044056 leucyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 4
- 108010038320 lysylphenylalanine Proteins 0.000 description 4
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 4
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 4
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 4
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- RVLOMLVNNBWRSR-KNIFDHDWSA-N (2s)-2-aminopropanoic acid;(2s)-2,6-diaminohexanoic acid Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O RVLOMLVNNBWRSR-KNIFDHDWSA-N 0.000 description 3
- 101710124165 1-acyl-sn-glycerol-3-phosphate acyltransferase Proteins 0.000 description 3
- HHGYNJRJIINWAK-FXQIFTODSA-N Ala-Ala-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N HHGYNJRJIINWAK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 3
- NWVVKQZOVSTDBQ-CIUDSAMLSA-N Ala-Glu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O NWVVKQZOVSTDBQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N Ala-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- NYDIVDKTULRINZ-AVGNSLFASA-N Arg-Met-Lys Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N NYDIVDKTULRINZ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- ZKDGORKGHPCZOV-DCAQKATOSA-N Asn-His-Arg Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N ZKDGORKGHPCZOV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 3
- RCGVPVZHKAXDPA-NYVOZVTQSA-N Asp-Trp-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC3=CNC4=CC=CC=C43)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N RCGVPVZHKAXDPA-NYVOZVTQSA-N 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 241000701489 Cauliflower mosaic virus Species 0.000 description 3
- HPJLZFTUUJKWAJ-JHEQGTHGSA-N Glu-Gly-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O HPJLZFTUUJKWAJ-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 3
- MWMJCGBSIORNCD-AVGNSLFASA-N Glu-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MWMJCGBSIORNCD-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- YTRBQAQSUDSIQE-FHWLQOOXSA-N Glu-Phe-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 YTRBQAQSUDSIQE-FHWLQOOXSA-N 0.000 description 3
- JBCLFWXMTIKCCB-VIFPVBQESA-N Gly-Phe Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- LLWQVJNHMYBLLK-CDMKHQONSA-N Gly-Thr-Phe Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O LLWQVJNHMYBLLK-CDMKHQONSA-N 0.000 description 3
- WTUSRDZLLWGYAT-KCTSRDHCSA-N Gly-Trp-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)CN WTUSRDZLLWGYAT-KCTSRDHCSA-N 0.000 description 3
- JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N H-Gly-Phe-OH Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NHJKZMDIMMTVCK-QXEWZRGKSA-N Ile-Gly-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N NHJKZMDIMMTVCK-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 3
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MYGQXVYRZMKRDB-SRVKXCTJSA-N Leu-Asp-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN MYGQXVYRZMKRDB-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- LVTJJOJKDCVZGP-QWRGUYRKSA-N Leu-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O LVTJJOJKDCVZGP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 3
- FIICHHJDINDXKG-IHPCNDPISA-N Leu-Lys-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O FIICHHJDINDXKG-IHPCNDPISA-N 0.000 description 3
- UQRZFMQQXXJTTF-AVGNSLFASA-N Lys-Lys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UQRZFMQQXXJTTF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- MGKFCQFVPKOWOL-CIUDSAMLSA-N Lys-Ser-Asp Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N MGKFCQFVPKOWOL-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- BIWVMACFGZFIEB-VFAJRCTISA-N Lys-Trp-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O BIWVMACFGZFIEB-VFAJRCTISA-N 0.000 description 3
- 101710097496 Lysophospholipid acyltransferase Proteins 0.000 description 3
- BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N Nalpha-L-Leucyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 3
- NYQBYASWHVRESG-MIMYLULJSA-N Phe-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 NYQBYASWHVRESG-MIMYLULJSA-N 0.000 description 3
- VFDRDMOMHBJGKD-UFYCRDLUSA-N Phe-Tyr-Arg Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N VFDRDMOMHBJGKD-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 3
- FPCGZYMRFFIYIH-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FPCGZYMRFFIYIH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- JJUNLJTUIKFPRF-BPUTZDHNSA-N Ser-Met-Trp Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N JJUNLJTUIKFPRF-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 3
- XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- BIYXEUAFGLTAEM-WUJLRWPWSA-N Thr-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O BIYXEUAFGLTAEM-WUJLRWPWSA-N 0.000 description 3
- WPAKPLPGQNUXGN-OSUNSFLBSA-N Thr-Ile-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O WPAKPLPGQNUXGN-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 3
- PRNGXSILMXSWQQ-OEAJRASXSA-N Thr-Leu-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O PRNGXSILMXSWQQ-OEAJRASXSA-N 0.000 description 3
- XNTVWRJTUIOGQO-RHYQMDGZSA-N Thr-Met-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O XNTVWRJTUIOGQO-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 3
- IQIRAJGHFRVFEL-UBHSHLNASA-N Trp-Ser-Cys Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N IQIRAJGHFRVFEL-UBHSHLNASA-N 0.000 description 3
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 3
- 108010090037 glycyl-alanyl-isoleucine Proteins 0.000 description 3
- 108010081551 glycylphenylalanine Proteins 0.000 description 3
- 108010083476 phenylalanyltryptophan Proteins 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- 108010038745 tryptophylglycine Proteins 0.000 description 3
- PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- 241000589158 Agrobacterium Species 0.000 description 2
- WUHJHHGYVVJMQE-BJDJZHNGSA-N Ala-Leu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O WUHJHHGYVVJMQE-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 2
- SLNCSSWAIDUUGF-LSJOCFKGSA-N Arg-His-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SLNCSSWAIDUUGF-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 2
- UZGFHWIJWPUPOH-IHRRRGAJSA-N Arg-Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N UZGFHWIJWPUPOH-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- LRPZJPMQGKGHSG-XGEHTFHBSA-N Arg-Ser-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)O LRPZJPMQGKGHSG-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 2
- SJUXYGVRSGTPMC-IMJSIDKUSA-N Asn-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O SJUXYGVRSGTPMC-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- NPDLYUOYAGBHFB-WDSKDSINSA-N Asn-Arg Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N NPDLYUOYAGBHFB-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- HUZGPXBILPMCHM-IHRRRGAJSA-N Asn-Arg-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O HUZGPXBILPMCHM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- GHODABZPVZMWCE-FXQIFTODSA-N Asp-Glu-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GHODABZPVZMWCE-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N Asp-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- DWBZEJHQQIURML-IMJSIDKUSA-N Asp-Ser Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DWBZEJHQQIURML-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- 235000011293 Brassica napus Nutrition 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- WOSRKEJQESVHGA-CIUDSAMLSA-N Glu-Arg-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WOSRKEJQESVHGA-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- VHPVBPCCWVDGJL-IRIUXVKKSA-N Glu-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O VHPVBPCCWVDGJL-IRIUXVKKSA-N 0.000 description 2
- DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N 0.000 description 2
- REJKOQYVFDEZHA-SLBDDTMCSA-N Ile-Asp-Trp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)N REJKOQYVFDEZHA-SLBDDTMCSA-N 0.000 description 2
- QNBYCZTZNOVDMI-HGNGGELXSA-N Ile-His Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 QNBYCZTZNOVDMI-HGNGGELXSA-N 0.000 description 2
- DNKDIDZHXZAGRY-HJWJTTGWSA-N Ile-Met-Phe Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)N DNKDIDZHXZAGRY-HJWJTTGWSA-N 0.000 description 2
- XBBKIIGCUMBKCO-JXUBOQSCSA-N Leu-Ala-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O XBBKIIGCUMBKCO-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 2
- HYIFFZAQXPUEAU-QWRGUYRKSA-N Leu-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C HYIFFZAQXPUEAU-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- PBGDOSARRIJMEV-DLOVCJGASA-N Leu-His-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PBGDOSARRIJMEV-DLOVCJGASA-N 0.000 description 2
- AZLASBBHHSLQDB-GUBZILKMSA-N Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C AZLASBBHHSLQDB-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- INCJJHQRZGQLFC-KBPBESRZSA-N Leu-Phe-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(O)=O INCJJHQRZGQLFC-KBPBESRZSA-N 0.000 description 2
- YSZNURNVYFUEHC-BQBZGAKWSA-N Lys-Ser Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YSZNURNVYFUEHC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- QEVRUYFHWJJUHZ-DCAQKATOSA-N Met-Ala-Leu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C QEVRUYFHWJJUHZ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- JACAKCWAOHKQBV-UWVGGRQHSA-N Met-Gly-Lys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN JACAKCWAOHKQBV-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- GMWNQSGWWGKTSF-LFSVMHDDSA-N Phe-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GMWNQSGWWGKTSF-LFSVMHDDSA-N 0.000 description 2
- YMDNFPNTIPQMJP-NAKRPEOUSA-N Ser-Ile-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O YMDNFPNTIPQMJP-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 2
- LPSKHZWBQONOQJ-XIRDDKMYSA-N Ser-Lys-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)N LPSKHZWBQONOQJ-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 2
- XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- ZOCJFNXUVSGBQI-HSHDSVGOSA-N Thr-Trp-Arg Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N)O ZOCJFNXUVSGBQI-HSHDSVGOSA-N 0.000 description 2
- MNMYOSZWCKYEDI-JRQIVUDYSA-N Tyr-Asp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O MNMYOSZWCKYEDI-JRQIVUDYSA-N 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- FMHNUJFNRVUDRQ-KTKRTIGZSA-N [3-[(z)-docos-13-enoxy]-2-hydroxypropyl] dihydrogen phosphate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCCCCCOCC(O)COP(O)(O)=O FMHNUJFNRVUDRQ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 description 2
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 2
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 238000000376 autoradiography Methods 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 2
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 108010079547 glutamylmethionine Proteins 0.000 description 2
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 2
- 108010073101 phenylalanylleucine Proteins 0.000 description 2
- 101150112552 plsB gene Proteins 0.000 description 2
- 101150057826 plsC gene Proteins 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J sodium diphosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 235000019818 tetrasodium diphosphate Nutrition 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010027345 wheylin-1 peptide Proteins 0.000 description 2
- CWEAKSWWKHGTRJ-BQBZGAKWSA-N Ala-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O CWEAKSWWKHGTRJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- QQACQIHVWCVBBR-GVARAGBVSA-N Ala-Ile-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O QQACQIHVWCVBBR-GVARAGBVSA-N 0.000 description 1
- VGMNWQOPSFBBBG-XUXIUFHCSA-N Ala-Leu-Leu-Asp Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O VGMNWQOPSFBBBG-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- XUCHENWTTBFODJ-FXQIFTODSA-N Ala-Met-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O XUCHENWTTBFODJ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- AWNAEZICPNGAJK-FXQIFTODSA-N Ala-Met-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O AWNAEZICPNGAJK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- CYBJZLQSUJEMAS-LFSVMHDDSA-N Ala-Phe-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)NC(=O)[C@H](C)N)O CYBJZLQSUJEMAS-LFSVMHDDSA-N 0.000 description 1
- LYILPUNCKACNGF-NAKRPEOUSA-N Ala-Val-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C)N LYILPUNCKACNGF-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- 241000219194 Arabidopsis Species 0.000 description 1
- TTXYKSADPSNOIF-IHRRRGAJSA-N Arg-Asp-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O TTXYKSADPSNOIF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- OQCWXQJLCDPRHV-UWVGGRQHSA-N Arg-Gly-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O OQCWXQJLCDPRHV-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- UHFUZWSZQKMDSX-DCAQKATOSA-N Arg-Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N UHFUZWSZQKMDSX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- IJYZHIOOBGIINM-WDSKDSINSA-N Arg-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N IJYZHIOOBGIINM-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- FBXMCPLCVYUWBO-BPUTZDHNSA-N Arg-Ser-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N FBXMCPLCVYUWBO-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 1
- JEPNYDRDYNSFIU-QXEWZRGKSA-N Asn-Arg-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(O)=O JEPNYDRDYNSFIU-QXEWZRGKSA-N 0.000 description 1
- NVWJMQNYLYWVNQ-BYULHYEWSA-N Asn-Ile-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(O)=O NVWJMQNYLYWVNQ-BYULHYEWSA-N 0.000 description 1
- GLWFAWNYGWBMOC-SRVKXCTJSA-N Asn-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O GLWFAWNYGWBMOC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- PYXXJFRXIYAESU-PCBIJLKTSA-N Asp-Ile-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O PYXXJFRXIYAESU-PCBIJLKTSA-N 0.000 description 1
- YUELDQUPTAYEGM-XIRDDKMYSA-N Asp-Trp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N YUELDQUPTAYEGM-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 1
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 description 1
- VZFYRMTZAZXALA-LXGUWJNJSA-N CC(=O)N=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO Chemical compound CC(=O)N=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO VZFYRMTZAZXALA-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 241000252203 Clupea harengus Species 0.000 description 1
- 101710094648 Coat protein Proteins 0.000 description 1
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 1
- GMXSSZUVDNPRMA-FXQIFTODSA-N Cys-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GMXSSZUVDNPRMA-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- VXLXATVURDNDCG-CIUDSAMLSA-N Cys-Lys-Asp Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N VXLXATVURDNDCG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- CVPXINNKRTZBMO-CIUDSAMLSA-N Glu-Arg-Asn Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)CN=C(N)N CVPXINNKRTZBMO-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- LSPKYLAFTPBWIL-BYPYZUCNSA-N Glu-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O LSPKYLAFTPBWIL-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- OAGVHWYIBZMWLA-YFKPBYRVSA-N Glu-Gly-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O OAGVHWYIBZMWLA-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- HKTRDWYCAUTRRL-YUMQZZPRSA-N Glu-His Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 HKTRDWYCAUTRRL-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- ZWABFSSWTSAMQN-KBIXCLLPSA-N Glu-Ile-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZWABFSSWTSAMQN-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- QIQABBIDHGQXGA-ZPFDUUQYSA-N Glu-Ile-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O QIQABBIDHGQXGA-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- GMVCSRBOSIUTFC-FXQIFTODSA-N Glu-Ser-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GMVCSRBOSIUTFC-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- JSIQVRIXMINMTA-ZDLURKLDSA-N Glu-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O JSIQVRIXMINMTA-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- YMUFWNJHVPQNQD-ZKWXMUAHSA-N Gly-Ala-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN YMUFWNJHVPQNQD-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- OVSKVOOUFAKODB-UWVGGRQHSA-N Gly-Arg-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCN=C(N)N OVSKVOOUFAKODB-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- UHPAZODVFFYEEL-QWRGUYRKSA-N Gly-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CN UHPAZODVFFYEEL-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100021181 Golgi phosphoprotein 3 Human genes 0.000 description 1
- KZTLOHBDLMIFSH-XVYDVKMFSA-N His-Ala-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O KZTLOHBDLMIFSH-XVYDVKMFSA-N 0.000 description 1
- QMUHTRISZMFKAY-MXAVVETBSA-N His-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N QMUHTRISZMFKAY-MXAVVETBSA-N 0.000 description 1
- VYUXYMRNGALHEA-DLOVCJGASA-N His-Leu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VYUXYMRNGALHEA-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- NKVZTQVGUNLLQW-JBDRJPRFSA-N Ile-Ala-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)N NKVZTQVGUNLLQW-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- VAXBXNPRXPHGHG-BJDJZHNGSA-N Ile-Ala-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N VAXBXNPRXPHGHG-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- GAZGFPOZOLEYAJ-YTFOTSKYSA-N Ile-Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)O)N GAZGFPOZOLEYAJ-YTFOTSKYSA-N 0.000 description 1
- AKOYRLRUFBZOSP-BJDJZHNGSA-N Ile-Lys-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N AKOYRLRUFBZOSP-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- ZLFNNVATRMCAKN-ZKWXMUAHSA-N Ile-Ser-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)O)N ZLFNNVATRMCAKN-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- KBDIBHQICWDGDL-PPCPHDFISA-N Ile-Thr-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N KBDIBHQICWDGDL-PPCPHDFISA-N 0.000 description 1
- OMDWJWGZGMCQND-CFMVVWHZSA-N Ile-Tyr-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N OMDWJWGZGMCQND-CFMVVWHZSA-N 0.000 description 1
- ZYVTXBXHIKGZMD-QSFUFRPTSA-N Ile-Val-Asn Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N ZYVTXBXHIKGZMD-QSFUFRPTSA-N 0.000 description 1
- HGCNKOLVKRAVHD-UHFFFAOYSA-N L-Met-L-Phe Natural products CSCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 HGCNKOLVKRAVHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 description 1
- LCPYQJIKPJDLLB-UWVGGRQHSA-N Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C LCPYQJIKPJDLLB-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- XVZCXCTYGHPNEM-UHFFFAOYSA-N Leu-Leu-Pro Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)N1CCCC1C(O)=O XVZCXCTYGHPNEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- RZXLZBIUTDQHJQ-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O RZXLZBIUTDQHJQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VCHVSKNMTXWIIP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- WMIOEVKKYIMVKI-DCAQKATOSA-N Leu-Pro-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WMIOEVKKYIMVKI-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- QWWPYKKLXWOITQ-VOAKCMCISA-N Leu-Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C QWWPYKKLXWOITQ-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- 241001072282 Limnanthes Species 0.000 description 1
- KPJJOZUXFOLGMQ-CIUDSAMLSA-N Lys-Asp-Asn Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N KPJJOZUXFOLGMQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- WGCKDDHUFPQSMZ-ZPFDUUQYSA-N Lys-Asp-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN WGCKDDHUFPQSMZ-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- NRQRKMYZONPCTM-CIUDSAMLSA-N Lys-Asp-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NRQRKMYZONPCTM-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- IOQWIOPSKJOEKI-SRVKXCTJSA-N Lys-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IOQWIOPSKJOEKI-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 1
- QGQGAIBGTUJRBR-NAKRPEOUSA-N Met-Ala-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC QGQGAIBGTUJRBR-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- QXOHLNCNYLGICT-YFKPBYRVSA-N Met-Gly Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O QXOHLNCNYLGICT-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ZRACLHJYVRBJFC-ULQDDVLXSA-N Met-Lys-Phe Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ZRACLHJYVRBJFC-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- NTYQUVLERIHPMU-HRCADAONSA-N Met-Phe-Pro Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N NTYQUVLERIHPMU-HRCADAONSA-N 0.000 description 1
- RMLLCGYYVZKKRT-CIUDSAMLSA-N Met-Ser-Glu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O RMLLCGYYVZKKRT-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- HMEVNCOJHJTLNB-BVSLBCMMSA-N Met-Trp-Phe Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)N[C@@H](CC3=CC=CC=C3)C(=O)O)N HMEVNCOJHJTLNB-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 108091093105 Nuclear DNA Proteins 0.000 description 1
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 1
- FPTXMUIBLMGTQH-ONGXEEELSA-N Phe-Ala-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 FPTXMUIBLMGTQH-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- GHNVJQZQYKNTDX-HJWJTTGWSA-N Phe-Ile-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O GHNVJQZQYKNTDX-HJWJTTGWSA-N 0.000 description 1
- KXUZHWXENMYOHC-QEJZJMRPSA-N Phe-Leu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O KXUZHWXENMYOHC-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- YTILBRIUASDGBL-BZSNNMDCSA-N Phe-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 YTILBRIUASDGBL-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- AUJWXNGCAQWLEI-KBPBESRZSA-N Phe-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O AUJWXNGCAQWLEI-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- XNQMZHLAYFWSGJ-HTUGSXCWSA-N Phe-Thr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O XNQMZHLAYFWSGJ-HTUGSXCWSA-N 0.000 description 1
- ULWBBFKQBDNGOY-RWMBFGLXSA-N Pro-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O ULWBBFKQBDNGOY-RWMBFGLXSA-N 0.000 description 1
- 101710083689 Probable capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 235000019484 Rapeseed oil Nutrition 0.000 description 1
- LTFSLKWFMWZEBD-IMJSIDKUSA-N Ser-Asn Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(N)=O LTFSLKWFMWZEBD-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- COAHUSQNSVFYBW-FXQIFTODSA-N Ser-Asn-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O COAHUSQNSVFYBW-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- LAFKUZYWNCHOHT-WHFBIAKZSA-N Ser-Glu Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O LAFKUZYWNCHOHT-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- LALNXSXEYFUUDD-GUBZILKMSA-N Ser-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LALNXSXEYFUUDD-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- GRSLLFZTTLBOQX-CIUDSAMLSA-N Ser-Glu-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N GRSLLFZTTLBOQX-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- GZFAWAQTEYDKII-YUMQZZPRSA-N Ser-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CO GZFAWAQTEYDKII-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- SBMNPABNWKXNBJ-BQBZGAKWSA-N Ser-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO SBMNPABNWKXNBJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- IFLVBVIYADZIQO-DCAQKATOSA-N Ser-Met-Lys Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N IFLVBVIYADZIQO-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N Ser-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 PPQRSMGDOHLTBE-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- DKGRNFUXVTYRAS-UBHSHLNASA-N Ser-Ser-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O DKGRNFUXVTYRAS-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- HYLXOQURIOCKIH-VQVTYTSYSA-N Thr-Arg Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N HYLXOQURIOCKIH-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 1
- CEXFELBFVHLYDZ-XGEHTFHBSA-N Thr-Arg-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CEXFELBFVHLYDZ-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- ZSPQUTWLWGWTPS-HJGDQZAQSA-N Thr-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O ZSPQUTWLWGWTPS-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- APIDTRXFGYOLLH-VQVTYTSYSA-N Thr-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O APIDTRXFGYOLLH-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 1
- GXDLGHLJTHMDII-WISUUJSJSA-N Thr-Ser Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GXDLGHLJTHMDII-WISUUJSJSA-N 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- GHXXDFDIDHIEIL-WFBYXXMGSA-N Trp-Ala-Cys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N GHXXDFDIDHIEIL-WFBYXXMGSA-N 0.000 description 1
- LCPVBXOHXMBLFW-JSGCOSHPSA-N Trp-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)=CNC2=C1 LCPVBXOHXMBLFW-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- SMDQRGAERNMJJF-JQWIXIFHSA-N Trp-Cys Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O)=CNC2=C1 SMDQRGAERNMJJF-JQWIXIFHSA-N 0.000 description 1
- KBKTUNYBNJWFRL-UBHSHLNASA-N Trp-Ser-Asn Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 KBKTUNYBNJWFRL-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- FGVFBDZSGQTYQX-UFYCRDLUSA-N Tyr-Phe-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O FGVFBDZSGQTYQX-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- 235000007244 Zea mays Nutrition 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000004186 co-expression Effects 0.000 description 1
- 101150047356 dec-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L disodium [3-[2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propoxy-oxidophosphoryl]oxy-2-hydroxypropyl] 2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propyl phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].CCCCCC=CCC=CCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COP([O-])(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC([O-])=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 125000005313 fatty acid group Chemical group 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010006664 gamma-glutamyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010063718 gamma-glutamylaspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002363 herbicidal effect Effects 0.000 description 1
- 235000019514 herring Nutrition 0.000 description 1
- 229940094991 herring sperm dna Drugs 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 108010078274 isoleucylvaline Proteins 0.000 description 1
- 229940070765 laurate Drugs 0.000 description 1
- 108010091798 leucylleucine Proteins 0.000 description 1
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 108010005942 methionylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010068488 methionylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002811 oleoyl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])/C([H])=C([H])\C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000006152 selective media Substances 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 238000011426 transformation method Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1025—Acyltransferases (2.3)
- C12N9/1029—Acyltransferases (2.3) transferring groups other than amino-acyl groups (2.3.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8242—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits
- C12N15/8243—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine
- C12N15/8247—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine involving modified lipid metabolism, e.g. seed oil composition
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Cultivation Of Plants (AREA)
- Other Liquid Machine Or Engine Such As Wave Power Use (AREA)
Abstract
Je popsána rekombinantí nebo izolovaná DNA sekvence vybraná z (i) DNA sekvence, obsahující DNA sekvenci z obr. 1, kódující alespoň od Met.sub.44.n. do Stop.sub.418.n. (SEQ ID: 2) nebo její komplementární řetězec; (ii) sekvence nukleové kyseliny hybridizující k DNA sekvenci na obr. 1 (SEQ ID: 1) nebo jejímu komplementárnímu řetězci za stringentních podmínek; a (iii) sekvence nukleové kyseliny, které by hybridizovaly k DNA sekvenci na obr. 1 (SEQ ID: 1) nebo jejímu komplementárnímu řetězci za stringentních podmínek, kdyby nebylo degenerace genetického kódu, přičemž uvedená DNA sekvence kóduje enzym mající membránově vázanou acyltransferázovou aktivitu. Dále je popsána transgenní rostlina, která poskytuje změněné lipidové složení triacylglyceridů v porovnání s netrasgenní rostlinou stejného druhu, která obsahuje DNA sekvenci nerozpustné acyltransferázy, jež je kódována shora popsanou DNA sekvenci.ŕ
Description
DNA kódující 2-acyltransferázy
Oblast techniky
Předložený vynález se týká modifikovaných rostlin. Zejména se vynález týká rostlin modifikovaných tak, že alespoň část rostliny /například semena rostliny/ je schopna poskytnout komerčně využitelný olej.
Dosavadní stav techniky
Rostliny jsou již dlouhou dobu komerčně cenným zdrojem oleje. Nutriční využití olejů získaných z rostlin bylo dosud dominantní, ale pozornost je nyní obrácena k rostlinám jako zdroji průmyslově využitelných olejů, například jako náhrad nebo zlepšení minerálních olejů. Olejová semena, jako z řepky, obsahují různé lipidy /Hildish and Williams, „Chemical Composition ofNatural Lipids“, Chapman Halí, Londýn, 1964/. Nyní je projevován zájem o změnu lipidového složení za použití rekombinantní DNA technologie /Knauf, TIBtech, únor 1987, 40-47/, ale dosud nebyly realizovány žádné z těchto cílů, a to z mnoha různých příčin navzdory stále se zvyšující náročnosti technologie.
Úspěch ve změně obsahu lipidů v olejích získaných z rostlin vyžaduje spolehlivou znalost biochemie a genů, které jsou zde obsaženy. V širším smyslu jsou dostupná dvě řešení. Za prvé mohou být rostliny modifikovány tak, aby umožnily syntézu mastných kyselin, které jsou nové /pro rostlinu/; tak mohou být například laurát a/nebo stearát syntetizovány z řepy. Za druhé, způsob a/nebo přebytek inkorporace mastných kyselin do glycerolového řetězce lipidu může být změněn. Druhé řešení je obsaženo v předloženém vynálezu i když první může být navíc také využito.
Lipidy jsou vytvářeny v rostlinách adicí skupin mastné kyseliny na glycerolový řetězec sérií acyltransferázových enzymů. V glycerolové molekule jsou tři polohy, do kterých mohou být skupiny mastné kyseliny /acyl/substituovány a substituce dosahovaná v každé poloze je katalyzována polohově specifickým enzymem: tento enzym je znám jako 1-, 2- a 3-acyltransferáza.
Jedním, ale ne pouze tímto, současným cílem „lipidového inženýrství“ v rostlinách je poskytnutí olejů, obsahujících lipidy s vysokým obsahem erukové /22:1/ kyseliny. Erukovou kyselinu obsahující lipidy jsou komerčně žádoucí z mnoha důvodů, zejména jako náhrady nebo doplňky minerálních olejů za určitých podmínek, jako bylo uvedeno výše. V případě oleje ze semen řepky /Brassica napus/, v současnosti jedné z nejvýznamnějších olej produkujících plodin, specifita enzymu 2-acyltransferáza pozitivně rozpoznává inkorporaci erukové kyseliny v poloze 2. Tak i když jsou tyto kultivary řepky schopny inkorporovat kyselinu erukovou v polohách 1 a 3, není zde žádná /nebo je alespoň redukována/ diskriminace vůči erukové kyselině, pouze maximálně 66 % mastných kyselin inkorporovaných do triacylglycerolů může být kyselina eruková. Takové odrůdy řepky jsou známé jako HEAR /high erucic acid rape - řepka s vysokým obsahem kyseliny erukové/.
Bylo by žádoucí zvýšit obsah kyseliny erukové v běžných řepkových olejnatých semenech, jakož i HEAR odrůdách; totéž je možno uvést u rostlin, které jsou zdrojem rostlinných olejů, jako je kukuřice, slunečnice a sója, což představuje jen několik příkladů takových rostlin. I když v zásadě je možné zavést do požadované rostliny DNA, kódující 2-acyltransferázu specifickou pro odlišnou mastnou kyselinu, například z odlišné rostliny, v praxi zde existuje řada problémů.
V prvé řadě jsou 2-acyltransferáza a 3-acyltransferáza membránově vázané a proto nerozpustné enzymy. Nebyly čištěny. Toto činí práci s nimi obtížnou a vylučuje použití mnoha běžných DNA klonovacích postupů. Tato obtíž paradoxně nespočívá ve způsobu klonování genu (nebo alespoň cDNA) kódujícího 1-acyltransferázový enzym, který je rozpustný: ve skutečnosti již byly práce na rekombinantní DNA tohoto enzymu provedeny ze zcela rozdílných důvodů, jmenovitě kvůli zvýšení odolnosti vůči chladu v listech tabákových rostlin - Murata a spol. (Nátuře 356 710-713 (1992)).
Dle je velmi málo známo o 2- a 3-acyltransferázách. Neexistuje žádná představa o jejich velikosti nebo jak jsou cíleny k membránám. Nejsou dostupné žádné údaje o nukleotidových nebo aminokyselinových sekvencích a vůči nim nebyly vytvořeny židné protilátky.
Podstata vynálezu
I když zde bylo uvedeno,že je žádoucí modifikovat 2-acyltransferázovou specifitu, například importováním genu kódujícího odpovídající enzym, jenž však má odlišnou specifitu, z jiných druhů, existuje v oboru potřeba klíčového řešení, které by umožnilo tuto práci provést. Předložený vynález poskytuje takové klíčové řešení ve formě DNA sekvence (ve specifickém případě cDNA sekvence) kódující 2-acyltransferázu. DNA sekvence na obr. 1 od nukleotidu 130 do nukleotidu 1254 kóduje 2-acyltransferázu z kukuřice (Zea mays), včetně stop kodónu.
Podle prvního aspektu vynálezu je zde poskytnuta rekombinantní nebo izolovaná DNA sekvence vybrána z (i) DNA sekvence, obsahující DNA sekvenci z obr. 1, kódující alespoň od Met44 do Stop4)8 (SEQ ID: 2) nebo její komplementární řetězec, (ii) sekvence nukleové kyseliny hybridizují kDNA sekvenci na obr.l (SEQ. ID 1) nebo jejímu komplementárnímu řetězci za stringentních podmínek, a (iii) sekvence nukleové kyseliny, které by hybridizovaly k DNA sekvenci na obr. 1 (SEQ. ID. 1) nebo jejímu komplementárnímu řetězci za stringentních podmínek, kdyby nebylo degenerace genetického kódu, přičemž uvedená DNA sekvence kóduje enzym mající membránově vázanou acyltransferázovou aktivitu.
Fragmenty výše uvedených sekvencí, délky například alespoň 15, 20, 30, 40 nebo 60 nukleotidů, také spadají do rozsahu vynálezu.
Vhodné stringentních podmínky zahrnují použití solných roztoků - přibližně 0,9 molámích - při teplotě od 35 °C do 65 °C. Konkrétněji, stringentní hybridizační podmínky zahrnují 6 x SSC, 5 x Denhardtův roztok, 0,5 % pyrofosforečnan tetrasodný a 50 pg/ml denaturované DNA sledího spermatu; promývá se 2 x 30 minut při 65 °C v 1 x SSC, 0,1 % SDS a 1 x 30 minut v 0,2 x SSC, 0,1 % SDS při 65 °C.
Sekvence nukleové kyseliny v rozsahu prvního aspektu vynálezu budou obecně kódovat protein, mající 2-acyltransferázovou aktivitu jako je aktivita enzymu kódovaného nukleokyselinovou sekvencí na obr. 1. Nukleokyselinové sekvence nekódující protein, mající enzymatickou aktivitu (nebo relevantní enzymatickou aktivitu), ale jinak v souladu s prvním aspektem vynálezu jak je uveden výše, mohou být použitelné pro jiné účely (a proto také jsou zahrnuty v rozsahu vynálezu); například mohou být použitelné jako sondy, jejichž použitelnost je dána nukleokyselinovými sekvencemi podle prvního aspektu vynálezu, včetně samotné sekvence na obr. 1.
Využitelnost sondy vzniká následovně. Protože zde je pravděpodobně vysoký stupeň homologie mezi acyltransferázami různých druhů (a zejména mezi 2-acyltransferázami různých druhů)
-2CZ 294457 B6 sekvence na obr. 1 (nebo části této sekvence, nebo jinými sekvencemi v rozsahu vynálezu) může být použita k sondování cDNA nebo genomických knihoven jiných druhů za účelem klonování DNA sekvencí, kódujících acyltransferázy, mající požadované specifíty. Například, jestliže je žádoucí produkovat olej, mající vysoký obsah erukové kyseliny esterifíkované ke glycerolu, může být sondována DNA knihovna jakýchkoliv druhů, které přirozeně vytvářejí kyselinu erukovou. Vhodné rostliny zahrnuji (Limnathes spp., zejména L. alba a zejména, L. douglassi) a Crambe. Limnathes douglassi je preferovaný druh, protože studie specifíty ukazují, že je zde pozitivní rozlišování proti inkorporaci erukové kyseliny do polohy 2 triacylglyceridu. Knihovny organismů jiných než vyšších rostlin mohou být sondovány; například určené bakterie mohou mít acyltransferázu požadované specifíty.
DNA podle vynálezu bude obecně mít vyšší stupeň homologie s alespoň částí sekvence na obr. 1 než se známými sekvencemi.
Rekombinantní DNA podle vynálezu může mít formu vektoru, který může být dostatečně regulační sekvence (jako je promotor) pro řízení exprese. Vektory, které nejsou expresní vektory jsou vhodné pro klonovací účely (jako mohou být samotné expresní vektory). Hostitelské buňky (jako je bakterie a rostlinné buňky) obsahují vektory podle vynálezu jako takové tvoří součást vynálezu.
DNA sekvence podle vynálezu mohou být použity při dalším způsobu klonování genu z jiných druhů: jestliže DNA je kopulována do vhodného promotoru, například expresního vektoru ve vhodném hostitelském organismu, může být produkován protein. Takový protein může být použit pro přípravu polyklonálních nebo monoklonálních protilátek, nebo jiných vazebných molekul, které pak mohou být použity pro prohledávání při expresi homologních proteinů v jiných druzích, například jako část screeningového programu DNA knihovny.
Vhodné cDNA knihovny cílových druhů budou obecně připraveny, jestliže existuje pravděpodobnost, že požadovaný gen bude exprimován; takže budou preferovány cDNA embryové knihovny (připravené v časném stadiu lipidové syntézy) například Limnanthes spp..
Vynález tak umožňuje klonování širokého množství genů (nebo obecněji DNA sekvencí),kódujících acyltransferázy a 2-acyltransferázy zejména, a to při použití výše popsaných DNA sekvencí.
Takové acyltransferázy, jako je acyltransferáza z Limnathes spp., mohou být také klonovány přímo, například za použití komplementačních studií, z DNA knihovny požadovaných druhů. Například jestliže je E.coli použita jako komplementační hostitel, je zvolen mutant, který je defektní v relevantním enzymu (například 2-acyltransferáze); DNA knihovna z cílových druhů (jako je L. douglassi) se klonuje do mutantního komplementačního hostitele; hostitelské buňky inkorporující do svého genomu gen cílové acyltransferázy, mohou být snadno odděleny za použití vhodného selektivního média. E. coli mutant JC201 je vhodný hostitel pro použití v komplementačních studiích týkajících se 2-acyltransferázy.
Klonování zvoleného acyltransferázového genu do mikrobiálního hostitele, jako je bakterie podobná E. coli, tak, že gen může být exprimován, za zvláštní výhodu v tom, že substrátová specifíta acyltransferázového genu může být hodnocena v mikrobiálním hostiteli před přípravou transformovaných rostlin, čímž se ušetří čas pro výzkum. Takové hodnocení může být provedeno kompetitivními substrátovými zkouškami, ve kterých různě detegovatelné značené substráty pro enzym vzájemně soutěží o inkorporaci do glyceridu. Například 14C-eurocyl CaO a 3H-oleoyl CoA mohou být použity jako kompetitivní substráty pro 2-acyltransferázu a mohou být měřena relativní množství I4C nebo tritia přijatého do glyceridu.(Protože 2-acyltransferázy obsahují akceptor, na bázi glycerolu, substráty a donor, na bázi mastných kyselin, substráty, může být pokus proveden s různými akceptory, jako je l-erucylglycerol-3-fosfát a l-oleoyl-glycerol-3fosfát). Gen, kódující enzym, který přednostně dodává erukovou kyselinu k akceptoru (zejména
-3CZ 294457 B6
1- erucyl-glycerol-3-fosfát), může být identifikován jako DNA sekvence volby pro další použití ve vynálezu, jak je popsáno dále.
Druhým aspektem tohoto vynálezu je transgenní rostlina, která poskytuje změněné lipidové složení triacylglyceridů v porovnání s netransgenní rostlinou stejného druhu, přičemž tato rostlina obsahuje DNA sekvenci nerozpustné acyltransferázy, která je kódována DNA sekvencí podle prvního aspektu tohoto vynálezu.
I když místně řízená mutageneze a/nebo jiné techniky proteinového inženýrství mohou být použity ke změnění specifíty enzymu přirozeného pro rostlinu, je preferováno, že rostlina bude transgenní a inkorporovat expresibilní acyltransferázový gen, kódující enzym požadované specifíty z jiných druhů. 2-acyltransferázy jsou enzymy volby. Například jak je popsáno výše,
2- acyltransferázový enzym, který má zvýšenou specifitu pro, nebo alespoň nepůsobí proti, erukové kyselině, může být připraven těmito prostředky k expresi v rostlině, která by normálně neinkorporovala erukovanou kyselinu do triacylglyceridů. Důležité provedené vynálezu se týká genetickým inženýrstvím zpracovaných rostlin, které mají vyšší hladiny erukové kyseliny inkorporované do triacylglycerolů než je tomu v nezpracovaných rostlinách. I když toto je výhodné provedení, není vynález omezen na zvýšení inkorporace kyseliny erukové do glyceridů: podle okolností mohou být žádoucí i jiné kyseliny.
K acyltransferázovému transgenu byl operativně kopulován promotor, aby tento byl expresibilní. Protože za současného stavu v oboru je obtížné přesně regulovat místo inkorporace transgenu do hostitelského genomu, je výhodné, aby transgen byl kopulován ke svému promotoru před transformací rostliny. Promotory vhodné podle vynálezu mohou být časově- a/nebo semenově specifické, ale není zde žádná nutnost, aby takové byly: konstitutivní promotory, jako je CaMV 35S promotor, mohou být ve skutečnosti preferovány, protože to jsou obvykle silné promotory. Jiné tkáně jsou naneštěstí nežádoucím způsobem ovlivněny, jestliže transgen, kódující acyltransferázový enzym je exprimován v nich, protože využitelnost mastná kyselina CoA substrátů je účinně omezena na semeno.
Konstrukt promotor-transgen, je-li připraven, se zavede do rostlinných buněk jakýmikoliv vhodnými prostředky. Vynález zahrnuje takové rostlinné buňky. Výhodně je DNA transformována do rostlinných buněk za použití bezraménkového Ti-plazmidového vektoru a nesena Agrobacteriem postupy známými v oboru, jak jsou například popsány v EP-A-0116718 a EPA-0270822. Alternativně by mohla být cizí DNA zavedena přímo do rostlinných buněk za použití zařízení s elektrickým výbojem. Tato metoda je preferována jestliže je Agrobacterium neúčinné, například tam, kde je rostlina, která je příjemcem, jednoděložná. Vhodná může také být jakákoliv jiná metoda, která poskytuje stabilní inkorporaci DNA do jaderné DNA jakéhokoliv rostlinné buňky jakéhokoliv druhu. Toto zahrnuje druhy rostlin, které nejsou v současnosti schopny genetické transformace.
Výhodně obsahuje DNA podle předloženého vynálezu také druhý chimérický gen /“markér“ gen/, který umožňuje aby transformovaná rostlina nebo tkáňová kultura, obsahující cizí DNA byly snadno odlišeny od jiných rostlin neb tkáňových kultur, které neobsahují cizí DNA. Příklady takového markerového genu zahrnují antibiotickou rezistenci /Herrera-Estrella a spol., EMBO J. 2/6/ 987-95 /1983/ a Herrera-Estrella a spol., Nátuře 303 209-13 /1983//, herbicidní rezistenci /EP-A-0242246/ a glukorurodidasovo /GUS/ expresi /EP-A-0344029/. Exprese markerového genu je výhodně kontrolována druhým promotorem, který umožňuje expresi buněk jiných než je tapetum, a tak umožňuje selekci buněk nebo tkáně, obsahujících markér v jakémkoliv stadiu regenerace rostliny. Preferovaný druhý promotor je odvozen od genu, který kóduje 35S podjednotku obalového proteinu viru květákové mozaiky /Cauliflower Mosaic Virus - CaMV/. Může však být použit jakýkoliv jiný vhodný druhý promotor.
-4CZ 294457 B6
Celá rostlina může být regenerována z jediné transformované rostlinné buňky a vynález proto poskytuje transgenní rostliny /nebo jejích části, jako je rozmnožovací materiál/, obsahující DNA podle vynálezu jak je uvedeno výše. Regenerace může být provedena známými metodami.
V jednom provedení vynálezu může být nativní acyltransferázový gen transgenní rostliny, který odpovídá transgenu učiněn alespoň částečně neoperativním nebo může být odstraněn. Tak, jestliže transgen kóduje 2-acyltransferázu, může být rostlinná nativní 2-acyltransferáza učiněná neoprativní, například, technikami „antisense“ nebo ribozymovou technikou, které jsou v oboru známy.
Prostředky podle vynálezu mohou být produkovány rostliny, vytvářející olej se stanoveným obsahem lipidů. Například lipidové složení triacylglyceridů v rostlině může být podstatně změněno za produkce triglyceridů s požadovanou mastnou kyselinou /například kyselinou erukovou/ a určitém obsahu který je vyšší než bylo doposud možné. Například olejnatá semena řepky /B. napus/ mohou být transformována za vzniku oleje, jehož triacylglycerid má obsah erukované kyseliny nad 70 %.
Je zřejmé, že rostliny se zvýšenými hladinami lipidů mohou být produkovány prostředky podle předloženého vynálezu. Avšak vynález je také vhodný pro produkci rostlin se sníženými hladinami lipidů, které mohou být požadovány jestliže jsou žádoucí zvýšené hladiny proteinu a/nebo škrobu. Snížených hladin lipidů může být dosaženo interferováním se správnou funkcí genu, kódujícího 2-acyltransferázu, například „antisense“ nebo ribozymovou technologií. /Takové rostliny s redukovanými lipidy mohou být, je-li to žádoucí, dále zpracovávány pro vyšší obsah proteinu a/nebo škrobu, je-li to žádoucí/.
Promotory, které přirozeně pohánějí 2-acyltransferázy mohou také být získány hybridizací a/nebo restrikcí a/nebo sekvenčními studiemi za použití sekvence na obr. 1.
Vynález umožňuje produkci proteinu kódovaného DNA podle prvního aspektu předloženého vynálezu, který je požadován. Protein může být exprimován hostitelskými buňkami nesoucími DNA ve formě expresního vektoru. Protein, kterým může být enzym, mající aktivitu 2-acyltransferázy, může mít aminokyselinovou sekvenci, které je shodná s nebo homologní se sekvencí na obr. 1. Stupeň homologie bude obecně větší než u známých proteinů a musí být alespoň 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95 nebo 99 %.
Preferované rysy každého aspektu předloženého vynálezu jsou pro každý další aspekt mutakis mutandis.
Vynález je ilustrován následujícími příklad. Příklady se opírají o připojené obrázky.
Přehled obrázků na výkresech
Obr. 1 představuje cDNA sekvenci získanou v příkladu 1 /SEQ ID: 1/ a její odvozenou proteinovou sekvenci /SEQ ID: 2/.
Obr. 2 představuje sekvenci seskupení části genových produktů z plsB /SEQ ID: 3/ a plsC /SEQ ID: 4) s částí sekvence uvedené na obr. 1 /SEQ ID: 5/, ukazující konzervovaný motiv plsB je E. coli sn-glycerol-3-fosfát acyltransferázového genu a plsC l-acyl-sn-glycerol-3-fosfát acyltransferázového genu E. coli. Dvojtečky označují přesná srovnání mezi dvěma sekvencemi a jediná tečka konzervativní aminokyselinové substituce. Hvězdičky označují shodné aminokyseliny ve všech třech sekvencích a zbytky konzervované ve dvou ze tří sekvencí jsou označeny symbolem +.
-5CZ 294457 B6
Obr. 3A, 3B a 3C: Membránové fosfolipidy z E. coli kmenů byly extrahovány do chloroformu a odděleny 2-rozměrnou chromatograflí na tenké vrstvě, první rozměr /vzestupný/ byl vyvíjen za použití chloroformu: methanolu: vody /65:25:4/ a druhý rozměr /zleva doprava/ byl vyvíjen chloroformem:methanolem:kyselinou octovou /65:25/10/. Fosfolipidy byly vizualizovány autoradiografií po 16 h při -70 °C za použití Fuji RX filmu. E. coli kmeny, které byly použity /obr. 3A/: JC201, který nese termosenzitivní mutaci v l-acyl-sn-glycerol-3-fosfát acyltransferázovém genu; /obr. 3B/: JC201, obsahující plazmid pPLSC, který kóduje E. coli 1-acyl-snglycerol-3-fosfát acyltransferázový gen; /obr. 3C/: JC201, obsahující plazmid, jehož cDNA inzertová sekvence je uvedena na obr. 1, LPA, lysofosfatidická kyselina; PE, fosfatidylethanolamin; CL, cardiolipin; PG, fosfatidylgkycerol; PA, fosfatidická kyselina; O, původ. 20 % 32P je inkorporováno v LPA v JC201 a zbývající odpovídající hladina je inkorporována v PE v obou dalších kmenech.
Obr. 4: Acyltransferázové zkoušky byly provedeny za použití 32P-značené lysofosfatidická kyseliny, která byla extrahována zE. coli kmene JC201 a oleoyl CaA jako acyl-donoru. Fosfolipidy přítomné v reakčních směsích byly extrahovány do chloroformu a odděleny za použití silikagelové chromatografie na tenké vrstvě. Pro vyvíjení desek byl použit chloroform:methanol:kyselina octová:voda /25:15:4:2/. Fosfolipidy byly vizualizovány autoradiografií po 16 h při -70 °C za použití Fuji RX filmu. Použití E. coli kmene byly: JC201, který nese termosenzitivní mutaci v l-acyl-sn-glycerol-3-fosfát acyltransferázovém genu; JC201, obsahující plazmid pPLSC, který kóduje E. coli l-acyl-sn-glycerol-3-fosfát acyltransferázový gen; JC201, obsahující plazmid jehož kukuřičný cDNA inzertová sekvence je uvedena na obr. 1. LPA, lysofosfatidická kyselina; PA, fosfatidická kyselina.
Obr. 4 představuje porovnání proteinové sekvence uvedené na obr.l /SEQ ID: 6/ se sekvencí odvozenou /SEQ ID: 7/ zB. napus semenového cDNA inzertu, který byl izolován při DNA hybridizaci k sekvenci kukuřiční cDNA. Sekvence byly seřazeny pomoci FastA seřazovacího programu /1988/. Dvojtečky označují shodné aminokyseliny a jednotlivé tečky konzervativní aminokyselinové substituce.
kukuřice = 3Z4 ak vs. řepka = 311 ak
51,5% identita, optimalizované skóre: 705
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Derivace cDNA sekvence z obr. 1
Komplementační studie za použití kukuřičné cDNA expresní knihovny transferované do E. coli mutantu JC201 umožňují izolaci plazmidu, kódujícího 2-acyltransferázový enzym z kukuřice. cDNA inzert tohoto plazmidu má velikost l,6kb a obsahuje póly A konec velikosti 70 bp. Inzert byl sekvenován za poskytnutí uvedených dat a translace sekvence odhaluje přítomnost pouze jednoho velkého otevřeného čtecího rámečku. Toto je znázorněno na obr. 1 s navrženým start methioninem a stop kodonem v rámečku. 2-Acyltransferáza je velikosti 374 aminokyselin a sekvenování ve směru otevřeného čtecího rámečku ukazuje, že protein je exprimován jako část fuzního proteinu v E. coli. Tento tvoří 10 aminokyseliny β-galaktosidázového proteinu, 43 aminokyselin /uvedeno v sekvenci/, odpovídajících 5'netranslatovanému regionu mRNA a 374 aminokyselin proteinu. Srovnání proteinových sekvencí ve velkém otevřeném čtecím rámečku s 2-acyltransferázou E. coli ukazuje malou celkovou identitu, ale je zde rozsah 80 zbytků, který má velkou hladinu konzervativní substituce a obsahuje některé aminokyseliny, které jsou konzervovány ve 2-acyltransferáze, 1-acyltransferáze a N-acetylglukosimin acyltransferáze E. coli.
-6CZ 294457 B6
Příklad 2
Inkorporace 32P do celkových fosfolipidů
E. coli kmeny byly kultivovány v minimálním médiu, obsahujícím 32P orthofosfát. Celkové fosfolipidy byly extrahovány do organických rozpouštědel a odděleny 2D chromatografíi na tenké vrstvě /obr. 3//lysofosfatidická kyselina /LPA/je substrát pro 2-acyltransferázu /2-ΑΊ7.
Jak je zřejmé z obr. 3A, akumulace 32P-značené LPA v mutantu JC 201 ilustruje nepřítomnost plně funkční 2-AT. Adicí plazmidu, nesoucí buď nativní E. coli gen /obr. 3B/, nebo kukuřičný klon uvedený na obr. 1 /obr. 3C/ navrací 2-AT aktivitu buňkám, umožňující LPA aby byla odstraněna a dále metabolizovaná /lysofosfatidická kyselina/.
tyto údaje ukazují, že DNA sekvence uvedená na obr. 1 kóduje 2-AT.
Příklad 3
Nadexprese cDNA cDNA region specifikují proteinovou sekvenci uvedenou na obr. 1 byl klonován do E. coli nadexpresního vektoru pETlld /Studier a spol., Meth. Enzymol. 185 60-8/1990//. Zvýšená 2-acyltransferázová aktivita po indukci exprese z plazmidového inzertu potvrzuje, že sekvence na obr. 1 je sekvence 2-AT.
Příklad 4
Lokalizace 2-AT aktivit v E. coli buňkách, obsahujících kukuřičný klon
Byly provedeny 2-acyltransferázové studie za použití membrán izolovaných z mutantu kmene JC.201, který postrádá 2-AT a z JC.201, obsahujícího kukuřičný plazmid /obr. 4/. 2-AT aktivita nebyla detegována v membránových frakcích z JC.201. Adice plazmidu nesoucí nativní E. coli gen nebo sekvenci uvedenou na obr. 1, k JC.201 vede k navrácení 2-AT aktivity membránám.
Příklad 5
Použití kukuřičné cDNA jako heterologní sondy pro získání cDNA zolejnatých semen řepky
Knihovna semenové cDNA z Brassica napus byla screenována sekvencí uvedenou na obr. 1 za použití standardních technik /Sambrook a spol. „Molecular Cloning - A Laboratory Mannual“. 2. vydání, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989/.
Podmínky
Pro hybridizaci kukuřičného cDNA inzertu do řepkové knihovny: hybridizace byla v 6xSSC, 5xDenhardtův roztok, 0,5 % SDS, 0,5% pyrofosforečnan tetrasodný a 50 gg/ml denaturované DNA sledího spermatu. Filtry byly promývány 2 x 30 minut při 65 °C v lxSSC, 0,1 % SDS a 1 x 30 minut v 0,2xSSC? 0,1% SDS při 65 °C.
Hybridizující klon byl sekvenován a proteinová sekvence odvozena od velkého ORF. Spojení této proteinové sekvence se sekvencí odvozenou z kukuřičného cDNA klonu uvedenou na obr. 1, je uvedeno na obr. 5.
-ΊCZ 294457 B6
Silná identita mezi těmito sekvencemi ilustruje potenciál použití sekvence uvedené na obr. 1 pro získání další 2-ATS.
Příklad 6
Transgenní rostliny
Sekvence uvedená na obr. 1 může být klonována těsně vedle vhodného promotoru, do vhodného vektoru pro expresi do rostlin. Vektor může být použit ke transformování rostlin a výsledné rostliny exprimují 2-AT mohou být analyzovány na obsah lipidů. Lipidový metabolismus se očekává jako přeregulovaný a zvýšené hladiny lipidů byly detegovatelné v semenech.
Příklad 7
Antisense
Sekvence uvedená na obr. 1 může být klonována, těsně vedle vhodného promotoru, v antisense orientaci do vhodného vektoru pro expresi v rostlinách. Vektor může být použit pro transformování rostlin a výsledné rostliny exprimující 2-AT mohou být analyzovány na protein a obsah škrobu. Zvýšené hladiny škrobu a proteinu jsou považovány za detegovatelné v semenech.
Příklad 8
Potlačení nativní 2-AT
DNA sekvence 2-AT odvozená od L. douglassii /získaná jak je popsáno v příkladu 5/ může být zavedena do olejnaté řepky /OSR/ za exprese vhodného promotoru, za použití vektorů a metod transformace rostlin, které jsou v oboru dobře známé. Druhá sekvence, obsahující „antisense“ nebo ribozymy vůči řepkové cDNA /příklad 5/ může být zavedena pro současnou expresi. Výsledná transformovaná rostlina je považována za mající 2-AT aktivitu, odpovídající aktivitě L. douglassii, se současným potlačením nativního řepkového 2-AT genu.
Modifikovaná SOR rostlina takto získaná měla vyšší hladiny erukové kyseliny v poloze 2 svých triacylglycerolů, než mají původní rostliny. Navíc byly nalezeny vyšší hladiny trierucinu v oleji semen.
Příklad 9
Screening genomové knihovny
Sekvence uvedená na obr. 1 se použije ke screeningu genomové knihovny Arabidopsis a hybridu získaného použitím klonu. Za použití standardních technik může být z tohoto klonu získán promotor. Promotor může být použit k působení na expresi v rostlinných buněčných membránách.
-8CZ 294457 B6
Seznam sekvencí (1) Obecná informace:
(i) Přihlašovatel:
(A) Jméno: Nickerson BIOCEM Limited (nejen US) (B) Ulice: Cambridge science Park, Milton Road (C) Město: Cambridge (E) Země: United Kingdom (F) Poštovní kód: (ZIP): CB4 4GZ (A) Jméno: SLABAS, Antoni Ryszard (jedn US) (B) Ulice: 8 telford Close, High Shinclffee (C) Město: Durham (E) Země: United Kingdom (F) Poštovní kód: (ZIP): DH1 2YJ (A) jméno BROWN, Adrian Paul (US pouze) (B) ulice: 4 Church Villas, Shadforth (C) město: Durham (E) země: Uniterd Kingdom (F) poštovní kód (ZIP): DH6 1LQ (ii) Název vynálezu: DNA, kódující 2-acyltransferázy (iii) počet sekvencí: 7 (iv) počítačově čtecí forma:
(A) typ média: Floppy disk (B) počítač: IBM PC compatible (C) operační systém: PC-DOS/MOS-DOS (D) software: PatentIN Release # 1,0. Version #1.25 (EPO) (v) údaje o přihlášce:
číslo přihlášky: WO PCT/GB93/----- (2) Informace o SEQ ID NO: 1:
(i) charakteristiky sekvence:
(A) délka: 1514 párů bází (B) typ: nukleová kyselina (C) řetězec: dvojitý (D) topologie: lineární (ii) typ molekuly: cDNA (ix) rysy:
(A) jméno/klíč: CDS (B) lokace: 130..1254 (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 1:
-9CZ 294457 B6
CCCCGTCCTC CTCGTCGCCG GCGGAGCCGC CTACTATCGC CTGGAGAAGG AGCGCCGCGG
GGAGCTTTTC CCACTGCCGA CTGCCGTCTG ACCCTCCGAG ATCGGAAGCG GCGCCGGCGC
120
CGGCCGGCG ATG GCG ATC CCG CTC GTG CTC GTC GTG CTC CCG CTC GGC 168
Met Ala Ile Pro Leu Val Leu Val Val Leu Pro Leu Gly 15 10
| CTG CTC | TTC Phe | CTC CTG Leu Leu | TCC GGC CTC ATC GTC AAC GCC ATC CAG GCC GTC | 216 | ||||||||||||
| Leu | Leu 15 | Ser Gly Leu 20 | Ile Val Asn | Ala 25 | Ile Gin Ala Val | |||||||||||
| CTA | TTT | GTG | ACG | ATA | AGG | CCC | ιΐιιιηι | TCG | AAG | AGC | TTC | TAC | CGT | CGG | ATC | 264 |
| Leu 30 | Phe | Val | Thr | Ile | Arg 35 | Pro | Phe | Ser | Lys | Ser 40 | Phe | Tyr | Arg | Arg | Ile 45 | |
| AAC | AGA | TTC | TTG | GCC | GAG | CTG | CTG | TGG | CTT | CAG | CTT | GTC | TGG | GTG | GTG | 312 |
| Asn | Arg | Phe | Leu | Ala 50 | Glu | Leu | Leu | Trp | Leu 55 | Gin | Leu | Val | Trp | Val 60 | Val | |
| GAC | TGG | TGG | GCA | GGT | GTT | AJ\G | GTA | CAA | CTG | CAT | GCA | GAT | GAG | GAA | ACT | 360 |
| Asp | Trp | Trp | Ala 65 | Gly | Val | Lys | Val | Gin 70 | Leu | His | Ala | Asp | Glu 75 | Glu | Thr | |
| TAC | AGA | TCA | ATG | GGT | AAA | GAG | CAT | GCA | CTC | ATC | ATA | TCA | AAT | CAT | CGG | 408 |
| Tyr | Arg | Ser 80 | Met | Gly | Lys | Glu | His 85 | Ala | Leu | Ile | Ile | Ser 90 | Asn | His | Arg | |
| AGT | GAT | ATT | GAT | TGG | CTC | ATT | GGA | TGG | ATA | TTG | GCC | CAG | CGT | TCA | GGG | 456 |
| Ser | Asn 95 | Ile | Asp | Trp | Leu | Ile 100 | Gly | Trp | Ile | Leu | Ala 105 | Gin | Arg | Ser | Gly | |
| TGC | CTT | GGA | AGT | ACA | CTT | GCT | GTC | ATG | AAG | AAG | TCA | TCC | AAG | TTC | CTT | 504 |
| Cys 110 | Leu | Gly | Ser | Thr | Leu 115 | Ala | Val | Met | Lys | Lys 120 | Ser | Ser | Lys | Phe | Leu 125 | |
| CCA | GTT | ATT | GGC | TGG | TCA | ATG | TGG | TTT | GCA | GAG | TAC | CTC | TTLT** | TTG | GAA | 552 |
| Pro | Val | Ile | Gly | Trp 130 | Ser | Met | Trp | Phe | Ala 135 | Glu | Tyr | Leu | Phe | Leu 140 | Glu | |
| AGG | AGC | TGG | GCC | AAG | GAT | GAA | AAG | ACA | CTA | AAG | TGG | GGT | CTC | CAA | AGG | 600 |
| Arg | Ser | Trp | Ala 145 | Lys | Asp | Glu | Lys | Thr 150 | Leu | Lys | Trp | Gly | Leu 155 | Gin | Arg | |
| TTG | AAA | GAC | TTC | CCT | AGA | CCA | TTT | TGG | CTA | GCT | CTT | TTC | GTC | GAG | GGT | 648 |
| Leu | Lys | Asp 160 | Phe | Pro | Arg | Pro | Phe 165 | Trp | Leu | Ala | Leu | Phe 170 | Val | Glu | Gly | |
| ACT | CGC | TTT | ACT | CCA | GCA | AAG | CTT | CTC | GCA | GCT | CAG | GAA | TAT | GCG | GCC | 696 |
| Thr | Arg 175 | Phe | Thr | Pro | Ala | Lys 180 | Leu | Leu | Ala | Ala | Gin 185 | Glu | Tyr | Ala | Ala | |
| TCC | CAG | GGC | ΤΤΆ | CCG | GCT | CCT | AGA | AAT | GTA | CTT | ATT | CCA | CGT | ACC | AAG | 744 |
| Ser 190 | Gin | Gly | Leu | Pro | Ala 195 | Pro | Arg | Asn | Val | Leu 200 | Ile | Pro | Arg | Thr | Lys 205 | |
| GGA | TTT | GTA | TCT | GCT | GTA | AGT | ATT | ATG | CGA | GAT | TTT | GTT | CCA | GCC | ATT | 792 |
| Gly | Phe | Val | Ser | Ala 210 | Val | Ser | Ile | Met | Arg 215 | Asp | Phe | Val | Pro | Ala 220 | ile | |
| TAT | GAT | ACA | ACT | GTA | ATA | GTC | CCT | AAA | GAT | TCC | CCT | CAA | CCA | ACA | ATG | 840 |
| Tyr | Asp | Thr | Thr 225 | Val | Ile | Val | Pro | Lys 230 | Asp | Ser | Pro | Gin | Pro 235 | Thr | Met | |
| CTG | CGG | ATT | TTG | AAA | GGG | CAA | TCA | TCA | GTG | ATA | CAT | GTC | CGC | ATG | AAA | 888 |
| Leu | Arg | Ile 240 | Leu | Lys | Gly | Gin | Ser 245 | Ser | Val | Ile | His | Val 250 | Arg | Met | Lys | |
| CGT | CAT | GCA | ATG | AGT | GAG | ATG | CCA | AAA | TCA | GAT | GAG | GAT | GTT | TCA | AAA | 936 |
| Arg | His | Ala | Met | Ser | Glu | Met | Pro | Lys | Ser | Asp | Glu | Asp | Val | Ser | Lys |
255 260 265
- 10CZ 294457 B6
| TGG TGT Trp Cys 270 | AAA GAC ATT | TTT GTG | GCA AAG | GAT GCC TTA CTG GAC AAG CAT | 984 | |||||||||||
| Lys | Asp | Ile | Phe 275 | Val | Ala | Lys | Asp | Ala Leu Leu Asp Lys His | ||||||||
| 200 | 285 | |||||||||||||||
| TTG | GCA | ACA | GGC | ACT | TTC | GAT | GAG | GAG | ATT | AGA | CCT | ATT | GGC | CGT | CCA | 1032 |
| Leu | Ala | Thr | Gly | Thr | Phe | Asp | Glu | Glu | Ile | Arg | Pro | Ile | Gly | Arg | Pro | |
| 290 | 295 | 300 | ||||||||||||||
| GTG | AAA | TCA | TTG | CTG | GTG | ACC | CTG | TTC | TGG | TCG | TGC | CTC | CTG | CTG | Ipfll | 1080 |
| Val | Lys | Ser | Leu | Leu | Val | Thr | Leu | Phe | Trp | Ser | Cys | Leu | Leu | Leu | Phe | |
| 305 | 310 | 315 | ||||||||||||||
| GGC | GCC | ATC | GAG | TTC | TTC | AAG | TGG | ACA | CAG | CTT | CTG | TCG | ACG | TGG | AGG | 1128 |
| Gly | Ala | Ile | Glu | Phe | Phe | Lys | Trp | Thr | Gin | Leu | Leu | Ser | Thr | Trp | Arg | |
| 320 | 325 | 330 | ||||||||||||||
| GGT | GTG | GCG | TTC | ACT | GCC | GCA | GGG | ATG | GCG | CTT | GTG | ACG | GGT | GTC | ATG | 1176 |
| Gly | Val | Ala | Phe | Thr | Ala | Ala | Gly | Met | Ala | Leu | Val | Thr | Gly | Val | Met | |
| 33S | 340 | 345 | ||||||||||||||
| CAT | GTC | TTC | ATC | ATG | TTC | TCC | CAG | GCT | GAG | CGG | TCG | AGC | TCA | GCC | AGG | 1224 |
| His | Val | Phe | Ile | Met | Phe | Ser | Gin | Ala | Glu | Arg | Ser | Ser | Ser | Ala | Arg | |
| 350 | 355 | 360 | 365 | |||||||||||||
| GCG | GCA | CGG | AAC | CGG | GTC | AAG | AAG | GAA | TGAAAAATGG AGGGTGGAGA | 1271 | ||||||
| Ala | Ala | Arg | Asn | Arg | Val | Lys | Lys | Glu |
370 375
| TGAGGTTCTC | GTGGGGTTTG | TTATGGGCAA | CCTTCAAAAG | GACTCTCCAT | TCATATTAGT | 1331 |
| ATTAATTCAT | ATATATGCAG | CGCCAAATTC | CAGACATTGA | TATGCTCTCA | AATAGGATGT | 1391 |
| TCTGCTCCCC | TCTTGTATTT | GTATGCAGGA | AAGGGTTTGT | AGGGAGTTTA | CCCCCCCCCC | 1451 |
| CCCCCCCCCC | GCCTTTCTTT | GGGGAAGAAA | GACATATTCT | GGAAGCCTTC | CAGTAGTTCA | 1511 |
| AAA | 1514 |
- 11 CZ 294457 B6 (2) Informace o SEQ ID NO: 2:
(i) Charakteristiky sekvence:
(A) délka: 374 aminokyselin (B) typ: aminokyselina (D) topologie: lineární (ii) typ molekuly: protein io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 2:
| Met 1 | Ala | Ile | Pro | Leu S | Val | Leu | Val | Val | Leu 10 | Pro | Leu | Gly | Leu | Leu 15 | Phe |
| Leu | Leu | Ser | Gly 20 | Leu | Ile | Val | Asn | Ala 25 | Zle | Gin | Ala | val | Leu 30 | Phe | Val |
| Thr | Ile | Arg 35 | Pro | Phe | Ser | Lys | Ser 40 | Phe | Tyr | Arg | Arg | Zle 45 | Asn | Arg | Phe |
| Leu | Ala 50 | Glu | Leu | Leu | Trp | Leu 55 | Gin | Leu | Val | Trp | Val 60 | Val | Asp | Trp | Trp |
| Ala 65 | Gly | Val | Lys | Val | Gin 70 | Leu | His | Ala | Asp | Glu 75 | Glu | Thr | Tyr | Arg | Ser 80 |
| Met | Gly | Lya | Glu | His 85 | Ala | Leu | Ile | Zle | Ser 90 | Asn | His | Arg | Ser | Asp 95 | Zle |
| Asp | Trp | Leu | Ile 100 | Gly | Trp | Ile | Leu | Ala 105 | Gin | Arg | Ser | Gly | Cys 110 | Leu | Gly |
| Ser | Thr | Leu 115 | Ala | Val | Met | Lys | Lys 120 | Ser | Ser | Lys | Phe | Leu 125 | Pro | Val | Ile |
| Gly | Trp 130 | Ser | Met | Trp | Phe | Ala 135 | Glu | Tyr | Leu | Phe | Leu 140 | Glu | Arg | Ser | Trp |
| Ala 145 | Lys | Asp | Glu | Lys | Thr 150 | Leu | Lys | Trp | Gly | Leu 155 | Gin | Arg | Leu | Lys | Asp 160 |
| Phe | Pro | Arg | Pro | Phe 165 | Trp | Leu | Ala | Leu | Phe 170 | Val | Glu | Gly | Thr | Arg 175 | Phe |
| Thr | Pro | Ala | Lys 150 | Leu | Leu | Ala | Ala | Gin 185 | Glu | Tyr | Ala | Ala | Ser 190 | Gin | Gly |
| Leu | Pro | Ala 195 | Pro | Arg | Asn | Val | Leu 200 | Zle | Pro | Arg | Thr | Lys 205 | Gly | Phe | Val |
| Ser | Ala 210 | Val | Ser | Zle | Met | Arg 215 | Asp | Phe | Val | Pro | Ala 220 | Zle | Tyr | Asp | Thr |
| Thr 225 | Val | Zle | Val | Pro | Lys 230 | Asp | Ser | Pro | Gin | Pro 235 | Thr | Met | Leu | Arg | Ile 240 |
| Leu | Lys | Gly | Gin | Ser 245 | Ser | Val | Zle | His | Val 250 | Arg | Met | Lys | Arg | His 255 | Ala |
| Met | Ser | Glu | Met 260 | Pro | Lys | Ser | Asp | Glu 265 | Asp | Val | Ser | Lys | Trp 270 | Cys | Lys |
| Asp | Zle | Phe 275 | Val | Ala | Lys | Asp | Ala 280 | Leu | Leu | Asp | Lys | His 285 | Leu | Ala | Thr |
-12CZ 294457 B6
| Gly | Thr | Phe | Asp | Glu | Glu | Ile | Arg | Pro | Ile | Gly | Arg | Pro | Val | Lys | Ser |
| 290 | 29S | 300 | |||||||||||||
| Leu | Leu | Val | Thr | Leu | Phe | Trp | Ser | Cys | Leu | Leu | Leu | Phe | Gly | Ala | Ile |
| 305 | 310 | 315 | 320 | ||||||||||||
| Glu | Phe | Phe | Lys | Trp | Thr | Gin | Leu | Leu | Ser | Thr | Trp | Arg | Gly | Val | Ala |
| 32S | 330 | 335 | |||||||||||||
| Phe | Thr | Ala | Ala | Gly | Met | Ala | Leu | Val | Thr | Gly | Val | Met | His | Val | Phe |
| 340 | 345 | 350 | |||||||||||||
| Ile | Met | Phe | Ser | Gin | Ala | Glu | Arg | Ser | Ser | Ser | Ala | Arg | Ala | Ala | Arg |
| 355 | 350 | 365 |
Asn Arg Val Lys Lys Glu 370 (2) Informace o SEQ ID NO: 3:
(i) Charakteristiky sekvence:
(A) délka: 15 aminokyselin (B) typ: aminokyselina (D) topologie: lineární (ii) typ molekuly: protein (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 3:
Tyr Phe Val Glu Gly Gly Arg Ser Arg Thr Gly Arg Leu Leu Asp 15 10 15 (2) Informace o SEQ ID NO: 4:
(i) Charakteristiky sekvence:
(A) délka: 15 aminokyselin (B) typ: aminokyselina (D) topologie: lineární (ii) typ molekuly: protein (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 4:
Met Phe Pro Glu Gly Thr Arg Ser Arg Gly Arg Gly Leu Leu Pro 15 10 15 (2) Informace o SEQ ID NO: 5:
(i) Charakteristiky sekvence:
(A) délka: 15 aminokyselin (B) typ: aminokyselina (D) topologie: lineární (ii) typ molekuly: protein (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 5:
-13CZ 294457 B6
Leu Phe Val Glu Gly Thr Arg Phe Thr Pro Ala Lys Leu Leu Ala 15 10 15 (2) Informace o SEQ ID NO: 6:
(i) Charakteristiky sekvence:
(A) délka: 374 aminokyselin (B) typ: aminokyselina (D) topologie: lineární (ii) typ molekuly: protein (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 6:
| Met Ala Ile Pro Leu | Val | Leu | Val Val Leu Pro Leu 10 | Gly Leu | Leu Phe 15 | ||||||||||
| 1 | 5 | ||||||||||||||
| Leu | Leu | Ser | Gly 20 | Leu | Ile | Val | Asn | Ala 25 | Ile | Gin | Ala | Val | Leu 30 | Phe | Val |
| Thr | Ile | Arg 35 | Pro | Phe | Ser | Lys | Ser 40 | Phe | Tyr | Arg | Arg | Ile 45 | Asn | Arg | Phe |
| Leu | Ala SO | Glu | Leu | Leu | Trp | Leu 55 | Gin | Leu | Val | Trp | Val 60 | Val | Asp | Trp | Trp |
| Ala 65 | Gly | Val | Lys | Val | Gin 70 | Leu | His | Ala | Asp | Glu 75 | Glu | Thr | Tyr Arg | Ser 80 | |
| Met | Gly | Lys | Glu | His 85 | Ala | Leu | Ile | Ile | Ser 90 | Asn | His | Arg | Ser | Asp 95 | Ile |
| Asp | Trp | Leu | Ile 100 | Gly | Trp | Ile | Leu | Ala 105 | Gin | Arg | Ser | Gly | Cys 110 | Leu | Gly |
| Ser | Thr | Leu 11S | Ala | Val | Met | Lys | Lys 120 | Ser | Ser | Lys | Phe | Leu 125 | Pro | Val | Ile |
| Gly | Trp 130 | Ser | Met | Trp | Phe | Ala 135 | Glu | Tyr | Leu | Phe | Leu 140 | Glu | Arg | Ser | Trp |
| Ala 145 | Lys | Asp | Glu | Lys | Thr 150 | Leu | Lys | Trp | Gly | Leu 155 | Gin | Arg | Leu | Lys | Asp 160 |
| Phe | Pro | Arg | Pro | Phe 165 | Trp | Leu | Ala | Leu | Phe 170 | Val | Glu | Gly | Thr | Arg 175 | Phe |
| Thr | Pro | Ala | Lys 180 | Leu | Leu | Ala | Ala | Gin 185 | Glu | Tyr | Ala | Ala | Ser 190 | Gin | Gly |
-14CZ 294457 B6
| Leu Pro | Ala 195 | Pro Arg Asn | Val | Leu 200 | Ile | Pro | Arg Thr Lys Gly Phe 205 | Val | |||||||
| Ser | Ala | Val | Ser | Ile | Met | Arg | Asp | Phe | Val | Pro | Ala | Ile | Tyr | Asp | Thr |
| 210 | 215 | 220 | |||||||||||||
| Thr | val | Ile | Val | Pro | Lys | Asp | Ser | Pro | Gin | Pro | Thr | Met | Leu | Arg | Ile |
| 225 | 230 | 235 | 240 | ||||||||||||
| Leu | Lys | Gly | Gin | Ser | Ser | Val | Ile | His | Val | Arg | Met | Lys | Arg | His | Ala |
| 245 | 250 | 255 | |||||||||||||
| Met | Ser | Glu | Met | Pro | Lys | Ser | Asp | Glu | Asp | Val | Ser | Lys | Trp | Cys | Lys |
| 260 | 265 | 270 | |||||||||||||
| Asp | Ile | Phe | Val | Ala | Lys | Asp | Ala | Leu | Leu | Asp | Lys | HiS | Leu | Ala | Thr |
| 275 | 280 | 285 | |||||||||||||
| Gly | Thr | Phe | Asp | G1U | Glu | Ile | Arg | Pro | Ile | Gly | Arg | Pro | Val | Lys | Ser |
| 290 | 295 | 300 | |||||||||||||
| Leu | Leu | Val | Thr | Leu | Phe | Trp | Ser | Cys | Leu | Leu | Leu | Phe | Gly | Ala | Ile |
| 305 | 310 | 315 | 320 | ||||||||||||
| Glu | Phe | Phe | Lys | Trp | Thr | Gin | Leu | Leu | ser | Thr | Trp | Arg | Gly | Val | Ala |
| 325 | 330 | 335 | |||||||||||||
| Phe | Thr | Ala | Ala | Gly | Met | Ala | Leu | Val | Thr | Gly | Val | Met | His | Val | Phe |
| 340 | 345 | 350 | |||||||||||||
| Ile | Met | Phe | ser | Gin | Ala | Glu | Arg | Ser | Ser | Ser | Ala | Arg | Ala | Ala | Arg |
| 35S | 360 | 365 | |||||||||||||
| Asn | Arg | val | Lys | Lys | Glu |
370
- 15CZ 294457 B6 (2) Informace o SEQ ID NO: 7:
(i) Charakteristiky sekvence:
(A) délka: 295 aminokyselin (B) typ: aminokyselina (D) topologie: lineární (ii) typ molekuly: protein io (xi) Popis sekvence: SEQ ID NO: 7:
| Met 1 | Ala Met Ala | Ala 5 | Ala Val Ile Val Pro Leu Gly Ile Leu Phe Phe | ||||||||||||
| 10 | 1S | ||||||||||||||
| Ile | Ser | Gly | Leu 20 | val | Val | Asn | Leu | Leu 25 | Gin | Arg | Ser | Gly | Cys 30 | Leu | Gly |
| Ser | Ala | Leu 35 | Ala | Val | Met | Lys | Lys 40 | Ser | Ser | Lys | Phe | Leu 45 | Pro | Val | Ile |
| Gly | Trp 50 | Ser | Met | Trp | Phe | Ser 55 | Glu | Tyr | Leu | Phe | Leu 60 | Glu | Arg | Asn | Trp |
| Ala 65 | Lys | ASp | Glu | Ser | Thr 70 | Leu | Lys | Ser | Gly | Leu 75 | Gin | Arg | Leu | Asn | Asp 80 |
| Phe | Pro | Arg | Pro | Phe 85 | Trp | Leu | Ala | Leu | Phe 90 | Val | Glu | Gly | Thr | Arg 95 | Phe |
| Thr | Glu | Ala | Lys 100 | Leu | Lys | Ala | Ala | Gin 105 | Glu | Tyr | Ala | Ala | Ser 110 | Ser | Glu |
| Leu | Pro | Val 115 | Pro | Arg | Asn | Val | Leu 120 | Ile | Pro | Arg | Thr | Lys 125 | Gly | Phe | Val |
| Ser | Ala 130 | Val | Ser | Asn | Met | Arg 135 | Ser | Phe | Val | Pro | Ala 140 | Ile | Tyr Asp | Met | |
| Thr 14S | Val | Ala | Ile | Pro | Lys 150 | Thr | Ser | Pro | Pro | Pro 155 | Thr | Met | Leu | Arg | Leu 160 |
| Phe | Lys | Gly | Gin | Pro 165 | Ser | Val | Val | His | Val 170 | His | Ile | Lys | Cys | HiS 175 | Ser |
| Met | Lys | Asp | Leu 180 | Pro | Glu | Ser | Glu | Asp 185 | Glu | Ile | Ala | Gin | Trp 190 | Cys | Arg |
| Asp | Gin | Phe 195 | Val | Thr | Lys | Asp | Ala 200 | Leu | Leu | Asp | Lys | His 205 | Ile | Ala | Ala |
| Asp | Thr 210 | Phe | Ala | Gly | Gin | Lys 21S | Glu | Gin | Asn | Ile | Gly 220 | Arg | Pro | Ile | Lys |
| Ser 225 | Leu | Ala | Val | Val | Leu 230 | Ser | Trp | Ala | Cys | Leu 235 | Leu | Thr | Leu | Gly | Ala 240 |
| Met | Lys | Phe | Leu | His 245 | Trp | Ser | Asn | Leu | Phe 250 | Ser | Ser | Trp | Lys | Gly 2S5 | Ile |
| Ala | Leu | Ser | Ala 260 | Leu | Gly | Leu | Gly | Ile 265 | Ile | Thr | Leu | Cys | Met 270 | Gin | Ile |
| Leu | Ile | Arg 275 | Ser | Ser | Gin | Ser | Glu 280 | Arg | Ser | Thr | Pro | Ala 285 | Lys | Val | Ala |
-16CZ 294457 B6
Pro Ala Lys Pro Lys Asp Asn
290 295
Claims (18)
1. Rekombinantní nebo izolovaná DNA sekvence vybraná z (i) DNA sekvence, obsahující DNA sekvenci z obr. 1, kódující alespoň od Met44 do Stop4i8(SEQ ID: 2) nebo její komplementární řetězec, (ii) sekvence nukleové kyseliny hybridizující kDNA sekvenci na obr. 1 (SEQ. ID.l) nebo jejímu komplementárnímu řetězci za stringentních podmínek, a (iii) sekvence nukleové kyseliny, které byl hybridizovaly k DNA sekvenci na obr. 1 (SEQ. ID. 1) nebo jejímu komplementárnímu řetězci za stringentních podmínek, kdyby nebylo degenerace genetického kódu, přičemž uvedená DNA sekvence kóduje enzym mající membránově vázanou acyltransferázovou aktivitu.
2. DNA sekvence podle nároku 1, ve které uvedená acyltransferázová aktivita je 2-acyltransferázová aktivita.
3. Izolovaný protein, který je produktem exprese DNA sekvence podle nároků 1 nebo 2.
4. Protilátka schopná specifického navázání k proteinu podle nároku 3.
5. Transgenní rostlina, která poskytuje změněné lipidové složení triacylglyceridů v porovnání s netransgenní rostlinou stejného druhu, obsahující DNA sekvenci nerozpustné acyltransferázy, která je kódována DNA sekvencí podle nároku 1.
6. Rostlina podle nároku 5, která je transgenní pro nerozpustný acyltransferázový enzym z jiných druhů.
7. Rostlina podle nároků 5 nebo 6, kterou je řepka, kukuřice, slunečnice nebo sója.
8. Rostlina podle nároku 6, kde uvedeným jiným druhem je druh rodu Limanthes, jako je L. alba nebo výhodně L. douglassi, nebo Crambe.
9. Rostlina podle kteréhokoliv z nároků 5 až 8, kde nerozpustným acyltransferázovým enzymem je 2-acyltransferáza.
10. Rostlina podle nároku 9, kde 2-acyltransferáza má vyšší specifitu pro kyselinu erukovanou než přirozený enzym rostliny.
11. Rostlina podle kteréhokoliv z nároků 5 až 10, kde uvedený přirozený enzym je alespoň částečně učiněn neoperativním nebo je odstraněn, a to například ribozomem nebo antisense nukleovou kyselinou.
12. Použití rostliny podle kteréhokoli z nároků 5 až 11 pro produkci oleje.
-17CZ 294457 B6
13. Protein, který je alespoň ze 40 procent homologní k proteinu podle nároku 3 a který má membránově vázanou acyltransferázovou aktivitu.
14. Fragment DNA sekvence podle nároků 1 nebo 2, obsahující alespoň 15 nukleotidů pro použití jako sonda nebo pro kódování proteinu majícího membránově vázanou acyltransferázovou aktivitu.
15. DNA kódující RNA, která je v opačném směru (antisense) k RNA, kódované DNA podle nároků 1 nebo 2.
16. DNA, kódující ribozym specifický k RNA, kódované DNA podle nároků 1 nebo 2.
17. Izolovaná nebo rekombinantní DNA, obsahující promotor, který přirozeně pohání expresi genu k produkci proteinu podle nároků 3 nebo 13.
18. Transgenní rostlina exprimující protein podle nároku 13.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB929225845A GB9225845D0 (en) | 1992-12-10 | 1992-12-10 | Modified plants |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ150695A3 CZ150695A3 (cs) | 1998-03-18 |
| CZ294457B6 true CZ294457B6 (cs) | 2005-01-12 |
Family
ID=10726430
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19951506A CZ294457B6 (cs) | 1992-12-10 | 1993-12-10 | DNA kódující 2-acyltransferázy |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US5843739A (cs) |
| EP (1) | EP0673424B1 (cs) |
| AT (1) | ATE396271T1 (cs) |
| AU (1) | AU694098B2 (cs) |
| CA (1) | CA2151147A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ294457B6 (cs) |
| DE (1) | DE69334219D1 (cs) |
| GB (1) | GB9225845D0 (cs) |
| HU (1) | HU222403B1 (cs) |
| PL (1) | PL176961B1 (cs) |
| SK (1) | SK76395A3 (cs) |
| WO (1) | WO1994013814A1 (cs) |
Families Citing this family (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB9225845D0 (en) | 1992-12-10 | 1993-02-03 | Nickerson Biocem Ltd | Modified plants |
| US5563058A (en) * | 1994-04-06 | 1996-10-08 | Calgene, Inc. | Plant lysophosphatidic acid acyltransferases |
| US5910630A (en) * | 1994-04-06 | 1999-06-08 | Davies; Huw Maelor | Plant lysophosphatidic acid acyltransferases |
| DE4433307A1 (de) * | 1994-09-19 | 1996-03-21 | Norddeutsche Pflanzenzucht Han | Ein isoliertes Nuckleinsäurefragment und daraus abgeleitete Produkte |
| DE69533516T2 (de) * | 1994-10-26 | 2005-08-18 | Cargill, Inc., Wayzata | Fae1gene und deren anwendungen |
| GB9502468D0 (en) * | 1995-02-09 | 1995-03-29 | Gene Shears Pty Ltd | DNA Sequence |
| GB9510927D0 (en) * | 1995-05-31 | 1995-07-26 | Ca Nat Research Council | Plant and seed oil modification |
| US5959131A (en) * | 1995-12-07 | 1999-09-28 | Kraft Foods, Inc. | Nutritionally superior fat for food compositions |
| FR2785911B1 (fr) * | 1998-11-18 | 2001-01-26 | Agronomique Inst Nat Rech | Gene codant pour une acyltransferase de colza, et ses utilisations |
| DE60014919T2 (de) * | 1999-08-06 | 2005-10-13 | Genentech, Inc., South San Francisco | Peptidantagonisten des faktors viia |
| AU2001231039A1 (en) * | 2000-01-20 | 2001-07-31 | Mci Worldcom, Inc. | Intelligent network and method for providing voice telephony over atm and alias addressing |
| CA2399873A1 (en) * | 2000-02-11 | 2001-08-16 | Incyte Genomics, Inc. | Drug metabolizing enzymes |
| GB0031558D0 (en) | 2000-12-22 | 2001-02-07 | Biogemma Uk Ltd | Elongase promoters |
| US7164002B2 (en) | 2002-02-06 | 2007-01-16 | Genentech, Inc. | FVIIa antagonists |
| EP1613746B1 (de) | 2003-03-31 | 2013-03-06 | University Of Bristol | Neue pflanzliche acyltransferasen spezifisch für langkettige, mehrfach ungesättigte fettsäuren |
| US20060246206A1 (en) * | 2005-04-28 | 2006-11-02 | Mitsugu Watanabe | Preparation of oyster flesh extracts |
| IL188983A (en) * | 2008-01-23 | 2014-01-30 | Bromine Compounds Ltd | Delay in combustion in fabrics |
| EP2430166A1 (en) | 2009-05-13 | 2012-03-21 | BASF Plant Science Company GmbH | Acyltransferases and uses thereof in fatty acid production |
| NO2585603T3 (cs) | 2010-06-25 | 2018-05-19 | ||
| WO2016075327A2 (en) | 2014-11-14 | 2016-05-19 | Basf Plant Science Company Gmbh | Production of pufas in plants |
| CN112708628B (zh) * | 2021-01-19 | 2022-05-03 | 河北农业大学 | 玉米百粒重主效QTL位点qKW4a及其候选基因和应用 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0320500B1 (en) * | 1983-01-13 | 2004-11-17 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Non-oncogenic ti plasmid vector system and recombinant DNA molecules for the introduction of expressible genes into plant cell genomes |
| ATE57390T1 (de) * | 1986-03-11 | 1990-10-15 | Plant Genetic Systems Nv | Durch gentechnologie erhaltene und gegen glutaminsynthetase-inhibitoren resistente pflanzenzellen. |
| EP0265556A1 (en) * | 1986-10-31 | 1988-05-04 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Stable binary agrobacterium vectors and their use |
| GB8810120D0 (en) * | 1988-04-28 | 1988-06-02 | Plant Genetic Systems Nv | Transgenic nuclear male sterile plants |
| AU1163392A (en) * | 1991-01-16 | 1992-08-27 | Kirin Beer Kabushiki Kaisha | Chilling resistant plants and their production |
| GB9225845D0 (en) | 1992-12-10 | 1993-02-03 | Nickerson Biocem Ltd | Modified plants |
-
1992
- 1992-12-10 GB GB929225845A patent/GB9225845D0/en active Pending
-
1993
- 1993-12-10 WO PCT/GB1993/002528 patent/WO1994013814A1/en not_active Ceased
- 1993-12-10 AU AU56567/94A patent/AU694098B2/en not_active Ceased
- 1993-12-10 CZ CZ19951506A patent/CZ294457B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1993-12-10 HU HU9501694A patent/HU222403B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1993-12-10 US US08/454,267 patent/US5843739A/en not_active Expired - Fee Related
- 1993-12-10 CA CA002151147A patent/CA2151147A1/en not_active Abandoned
- 1993-12-10 DE DE69334219T patent/DE69334219D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1993-12-10 PL PL93309327A patent/PL176961B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1993-12-10 SK SK763-95A patent/SK76395A3/sk unknown
- 1993-12-10 AT AT94902058T patent/ATE396271T1/de not_active IP Right Cessation
- 1993-12-10 EP EP94902058A patent/EP0673424B1/en not_active Expired - Lifetime
-
1997
- 1997-09-30 US US08/941,319 patent/US5945323A/en not_active Expired - Fee Related
-
1998
- 1998-03-05 US US09/035,098 patent/US6194640B1/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO1994013814A1 (en) | 1994-06-23 |
| PL309327A1 (en) | 1995-10-02 |
| ATE396271T1 (de) | 2008-06-15 |
| GB9225845D0 (en) | 1993-02-03 |
| DE69334219D1 (de) | 2008-07-03 |
| CZ150695A3 (cs) | 1998-03-18 |
| EP0673424A1 (en) | 1995-09-27 |
| PL176961B1 (pl) | 1999-08-31 |
| US5843739A (en) | 1998-12-01 |
| HU222403B1 (hu) | 2003-06-28 |
| HU9501694D0 (en) | 1995-08-28 |
| US5945323A (en) | 1999-08-31 |
| EP0673424B1 (en) | 2008-05-21 |
| SK76395A3 (en) | 1995-09-13 |
| US6194640B1 (en) | 2001-02-27 |
| CA2151147A1 (en) | 1994-06-23 |
| AU694098B2 (en) | 1998-07-16 |
| AU5656794A (en) | 1994-07-04 |
| HUT71785A (en) | 1996-02-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ294457B6 (cs) | DNA kódující 2-acyltransferázy | |
| Wolter et al. | Chilling sensitivity of Arabidopsis thaliana with genetically engineered membrane lipids. | |
| Iba et al. | A gene encoding a chloroplast omega-3 fatty acid desaturase complements alterations in fatty acid desaturation and chloroplast copy number of the fad7 mutant of Arabidopsis thaliana. | |
| US6828475B1 (en) | Nucleic acid sequences encoding a plant cytoplasmic protein involved in fatty acyl-CoA metabolism | |
| Kim et al. | Ubiquitous and endoplasmic reticulum–located lysophosphatidyl acyltransferase, LPAT2, is essential for female but not male gametophyte development in Arabidopsis | |
| JP4109315B2 (ja) | 脂肪酸エロンガーゼ | |
| PL207026B1 (pl) | Wyizolowany kwas nukleinowy, konstrukt genowy zawierający ten kwas, sekwencja aminokwasowa kodowana przez wyizolowaną sekwencję tego kwasu nukleinowego, wektor zawierający kwas nukleinowy lub konstrukt genowy, roślina transgeniczna lub mikroorganizm transgeniczny zawierający kwas nukleinowy, konstrukt genowy lub wektor, przeciwciało specyficznie wiążące się z polipeptydem kodowanym przez kwas nukleinowy, cząsteczka antysensownego kwasu nukleinowego oraz sposób wytwarzania wielonienasyconych kwasów tłuszczowych (PUFA) | |
| JPH09505739A (ja) | 脂肪アシル−ＣｏＡ代謝に関与する植物細胞質タンパク質をコードする核酸配列 | |
| JPH11506323A (ja) | 酵母ｓｌｃ遺伝子を用いての植物脂質及び種子油の変更 | |
| JP2003518369A (ja) | 多不飽和脂肪酸および脂質の合成に関与するタンパク質をコードするフィスコミトレラ・パテンス由来のコケの遺伝子 | |
| CN106413389A (zh) | 通过破囊壶菌PUFA合酶在油料作物中产生ω‑3长链多不饱和脂肪酸 | |
| WO2000032793A2 (en) | Plant cell derived diacylglycerol acyltransferases | |
| AU2006249983B2 (en) | Safflower with elevated gamma-linolenic acid | |
| US20050170478A1 (en) | Expression of phospholipid:diacylglycerine acyltranssferase (pdat) for the production of plant storage lipids with polyunsaturated fatty acids | |
| US20090036695A1 (en) | Oil Biosynthesis | |
| CN113412332A (zh) | 用于在植物中产生高水平pufa的改进方法 | |
| CN112996915A (zh) | 用于在植物中产生高水平pufa的改进方法 | |
| Nampaisansuk | Molecular cloning and analysis of the genes for cotton palmitoyl-acyl carrier protein thioesterase (PATE) and Δ-12 fatty acid desaturase (FAD2-3) and construction of sense and anti-sense PATE plasmid vectors for altering oilseed composition of transgenic cotton plants | |
| AU2008201181A1 (en) | Production of oil with higher erucic acid content | |
| HK1120823B (en) | Safflower with elevated gamma-linolenic acid |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20091210 |