PL176961B1 - Nowa sekwencja DNA, nowe białko, gospodarz mikroorganizm, nowy fragment sekwencji DNA i nowy DNA - Google Patents
Nowa sekwencja DNA, nowe białko, gospodarz mikroorganizm, nowy fragment sekwencji DNA i nowy DNAInfo
- Publication number
- PL176961B1 PL176961B1 PL93309327A PL30932793A PL176961B1 PL 176961 B1 PL176961 B1 PL 176961B1 PL 93309327 A PL93309327 A PL 93309327A PL 30932793 A PL30932793 A PL 30932793A PL 176961 B1 PL176961 B1 PL 176961B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- seq
- dna sequence
- codon
- nucleic acid
- acid sequences
- Prior art date
Links
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims abstract description 82
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 71
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 51
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 claims abstract description 42
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 claims abstract description 35
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 claims abstract description 25
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 21
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims abstract description 21
- 108700016155 Acyl transferases Proteins 0.000 claims abstract description 18
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 17
- 102000057234 Acyl transferases Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 26
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 24
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 15
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 6
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 6
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 5
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 claims description 4
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 claims description 4
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 claims description 4
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 claims description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 3
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 claims description 2
- 239000003184 complementary RNA Substances 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 55
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 45
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 21
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 19
- DPUOLQHDNGRHBS-KTKRTIGZSA-N erucic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCCCCC(O)=O DPUOLQHDNGRHBS-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 18
- DPUOLQHDNGRHBS-UHFFFAOYSA-N Brassidinsaeure Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCCCCCC(O)=O DPUOLQHDNGRHBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- URXZXNYJPAJJOQ-UHFFFAOYSA-N Erucic acid Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCCCCCC(O)=O URXZXNYJPAJJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 16
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 description 15
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 15
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- 241000894007 species Species 0.000 description 13
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 12
- AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N alpha-glycerophosphate Natural products OCC(O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 12
- WRGQSWVCFNIUNZ-GDCKJWNLSA-N 1-oleoyl-sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O WRGQSWVCFNIUNZ-GDCKJWNLSA-N 0.000 description 11
- 235000006008 Brassica napus var napus Nutrition 0.000 description 10
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 10
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 10
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 10
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerol group Chemical group OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 description 9
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 9
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 9
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 8
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 8
- 235000004977 Brassica sinapistrum Nutrition 0.000 description 7
- ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L disodium [3-[2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propoxy-oxidophosphoryl]oxy-2-hydroxypropyl] 2,3-di(octadeca-9,12-dienoyloxy)propyl phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].CCCCCC=CCC=CCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COP([O-])(=O)OCC(O)COP([O-])(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC)COC(=O)CCCCCCCC=CCC=CCCCCC ZGSPNIOCEDOHGS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 7
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 7
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 7
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108700014220 acyltransferase activity proteins Proteins 0.000 description 6
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 6
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 6
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 6
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 6
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 101710124165 1-acyl-sn-glycerol-3-phosphate acyltransferase Proteins 0.000 description 5
- LQJAALCCPOTJGB-YUMQZZPRSA-N Arg-Pro Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O LQJAALCCPOTJGB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 5
- AJHCSUXXECOXOY-NSHDSACASA-N Gly-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 AJHCSUXXECOXOY-NSHDSACASA-N 0.000 description 5
- 101710097496 Lysophospholipid acyltransferase Proteins 0.000 description 5
- AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N N-glycyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 AJHCSUXXECOXOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 5
- 108010060035 arginylproline Proteins 0.000 description 5
- 108010084389 glycyltryptophan Proteins 0.000 description 5
- 150000003626 triacylglycerols Chemical group 0.000 description 5
- LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N Leu-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N 0.000 description 4
- KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N Leu-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N 0.000 description 4
- LNMKRJJLEFASGA-BZSNNMDCSA-N Lys-Phe-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LNMKRJJLEFASGA-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 4
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 4
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 4
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- AUXMWYRZQPIXCC-KNIFDHDWSA-N (2s)-2-amino-4-methylpentanoic acid;(2s)-2-aminopropanoic acid Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O.CC(C)C[C@H](N)C(O)=O AUXMWYRZQPIXCC-KNIFDHDWSA-N 0.000 description 3
- YUELDQUPTAYEGM-XIRDDKMYSA-N Asp-Trp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N YUELDQUPTAYEGM-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 3
- 235000014698 Brassica juncea var multisecta Nutrition 0.000 description 3
- 240000000385 Brassica napus var. napus Species 0.000 description 3
- 235000006618 Brassica rapa subsp oleifera Nutrition 0.000 description 3
- 241000701489 Cauliflower mosaic virus Species 0.000 description 3
- HPJLZFTUUJKWAJ-JHEQGTHGSA-N Glu-Gly-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O HPJLZFTUUJKWAJ-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 3
- DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN DKEXFJVMVGETOO-LURJTMIESA-N 0.000 description 3
- QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N Leu-Val-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QESXLSQLQHHTIX-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 3
- 241001072282 Limnanthes Species 0.000 description 3
- AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- RVQDZELMXZRSSI-IUCAKERBSA-N Pro-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 RVQDZELMXZRSSI-IUCAKERBSA-N 0.000 description 3
- WTMPKZWHRCMMMT-KZVJFYERSA-N Thr-Pro-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WTMPKZWHRCMMMT-KZVJFYERSA-N 0.000 description 3
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 description 3
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 description 3
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 3
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 3
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 description 3
- PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 1,2-dihexadecanoyl-sn-glycerol-3-phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(O)=O)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC PORPENFLTBBHSG-MGBGTMOVSA-N 0.000 description 2
- 241000589158 Agrobacterium Species 0.000 description 2
- SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N Ala-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O SDZRIBWEVVRDQI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- SLNCSSWAIDUUGF-LSJOCFKGSA-N Arg-His-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O SLNCSSWAIDUUGF-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 2
- VENMDXUVHSKEIN-GUBZILKMSA-N Arg-Ser-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O VENMDXUVHSKEIN-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- GHODABZPVZMWCE-FXQIFTODSA-N Asp-Glu-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GHODABZPVZMWCE-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 235000011293 Brassica napus Nutrition 0.000 description 2
- MPZWMIIOPAPAKE-BQBZGAKWSA-N Glu-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N MPZWMIIOPAPAKE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- MWMJCGBSIORNCD-AVGNSLFASA-N Glu-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O MWMJCGBSIORNCD-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- QDMVXRNLOPTPIE-WDCWCFNPSA-N Glu-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O QDMVXRNLOPTPIE-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 2
- YTRBQAQSUDSIQE-FHWLQOOXSA-N Glu-Phe-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 YTRBQAQSUDSIQE-FHWLQOOXSA-N 0.000 description 2
- HVKAAUOFFTUSAA-XDTLVQLUSA-N Glu-Tyr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HVKAAUOFFTUSAA-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 2
- JLXVRFDTDUGQEE-YFKPBYRVSA-N Gly-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N JLXVRFDTDUGQEE-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N Gly-Lys-Glu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GMTXWRIDLGTVFC-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- FNXSYBOHALPRHV-ONGXEEELSA-N Gly-Val-Lys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN FNXSYBOHALPRHV-ONGXEEELSA-N 0.000 description 2
- PBGDOSARRIJMEV-DLOVCJGASA-N Leu-His-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PBGDOSARRIJMEV-DLOVCJGASA-N 0.000 description 2
- RZXLZBIUTDQHJQ-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O RZXLZBIUTDQHJQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- LVTJJOJKDCVZGP-QWRGUYRKSA-N Leu-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O LVTJJOJKDCVZGP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- INCJJHQRZGQLFC-KBPBESRZSA-N Leu-Phe-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)NCC(O)=O INCJJHQRZGQLFC-KBPBESRZSA-N 0.000 description 2
- WMIOEVKKYIMVKI-DCAQKATOSA-N Leu-Pro-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O WMIOEVKKYIMVKI-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- PBLLTSKBTAHDNA-KBPBESRZSA-N Lys-Gly-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O PBLLTSKBTAHDNA-KBPBESRZSA-N 0.000 description 2
- NVGBPTNZLWRQSY-UWVGGRQHSA-N Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN NVGBPTNZLWRQSY-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- UQRZFMQQXXJTTF-AVGNSLFASA-N Lys-Lys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UQRZFMQQXXJTTF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- 108010087066 N2-tryptophyllysine Proteins 0.000 description 2
- DDYIRGBOZVKRFR-AVGNSLFASA-N Phe-Asp-Glu Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N DDYIRGBOZVKRFR-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- YTILBRIUASDGBL-BZSNNMDCSA-N Phe-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 YTILBRIUASDGBL-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- WEQJQNWXCSUVMA-RYUDHWBXSA-N Phe-Pro Chemical compound C([C@H]([NH3+])C(=O)N1[C@@H](CCC1)C([O-])=O)C1=CC=CC=C1 WEQJQNWXCSUVMA-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 2
- GMWNQSGWWGKTSF-LFSVMHDDSA-N Phe-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GMWNQSGWWGKTSF-LFSVMHDDSA-N 0.000 description 2
- MWQXFDIQXIXPMS-UNQGMJICSA-N Phe-Val-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N)O MWQXFDIQXIXPMS-UNQGMJICSA-N 0.000 description 2
- FYQSMXKJYTZYRP-DCAQKATOSA-N Pro-Ala-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 FYQSMXKJYTZYRP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- ZSKJPKFTPQCPIH-RCWTZXSCSA-N Pro-Arg-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O ZSKJPKFTPQCPIH-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 2
- ZKQOUHVVXABNDG-IUCAKERBSA-N Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 ZKQOUHVVXABNDG-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- IWIANZLCJVYEFX-RYUDHWBXSA-N Pro-Phe Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H]1NCCC1)C1=CC=CC=C1 IWIANZLCJVYEFX-RYUDHWBXSA-N 0.000 description 2
- GVUVRRPYYDHHGK-VQVTYTSYSA-N Pro-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 GVUVRRPYYDHHGK-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- JKGGPMOUIAAJAA-YEPSODPASA-N Thr-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O JKGGPMOUIAAJAA-YEPSODPASA-N 0.000 description 2
- CKHWEVXPLJBEOZ-VQVTYTSYSA-N Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]([NH3+])[C@@H](C)O CKHWEVXPLJBEOZ-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 2
- RUCNAYOMFXRIKJ-DCAQKATOSA-N Val-Ala-Lys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN RUCNAYOMFXRIKJ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- VVZDBPBZHLQPPB-XVKPBYJWSA-N Val-Glu-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O VVZDBPBZHLQPPB-XVKPBYJWSA-N 0.000 description 2
- JKHXYJKMNSSFFL-IUCAKERBSA-N Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN JKHXYJKMNSSFFL-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- XBJKAZATRJBDCU-GUBZILKMSA-N Val-Pro-Ala Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O XBJKAZATRJBDCU-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N [1-[2,3-dihydroxypropoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-3-hexadecanoyloxypropan-2-yl] (9e,12e)-octadeca-9,12-dienoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(COP(O)(=O)OCC(O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C\C\C=C\CCCCC ATBOMIWRCZXYSZ-XZBBILGWSA-N 0.000 description 2
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 2
- 108010005233 alanylglutamic acid Proteins 0.000 description 2
- 238000000376 autoradiography Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 229940094991 herring sperm dna Drugs 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 2
- 108010044056 leucyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 108010057821 leucylproline Proteins 0.000 description 2
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- 101150112552 plsB gene Proteins 0.000 description 2
- 101150057826 plsC gene Proteins 0.000 description 2
- 108010090894 prolylleucine Proteins 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J sodium diphosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 235000019818 tetrasodium diphosphate Nutrition 0.000 description 2
- DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N tristearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC DCXXMTOCNZCJGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XVZCXCTYGHPNEM-IHRRRGAJSA-N (2s)-1-[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O XVZCXCTYGHPNEM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- NTUPOKHATNSWCY-PMPSAXMXSA-N (2s)-2-[[(2s)-1-[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoic acid Chemical compound C([C@@H](N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 NTUPOKHATNSWCY-PMPSAXMXSA-N 0.000 description 1
- RVLOMLVNNBWRSR-KNIFDHDWSA-N (2s)-2-aminopropanoic acid;(2s)-2,6-diaminohexanoic acid Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O.NCCCC[C@H](N)C(O)=O RVLOMLVNNBWRSR-KNIFDHDWSA-N 0.000 description 1
- YRIZYWQGELRKNT-UHFFFAOYSA-N 1,3,5-trichloro-1,3,5-triazinane-2,4,6-trione Chemical compound ClN1C(=O)N(Cl)C(=O)N(Cl)C1=O YRIZYWQGELRKNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XDSPGKDYYRNYJI-IUPFWZBJSA-N 1,3-bis[(13z)-docos-13-enoyloxy]propan-2-yl (13z)-docos-13-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC XDSPGKDYYRNYJI-IUPFWZBJSA-N 0.000 description 1
- HHGYNJRJIINWAK-FXQIFTODSA-N Ala-Ala-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N HHGYNJRJIINWAK-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- BUANFPRKJKJSRR-ACZMJKKPSA-N Ala-Ala-Gln Chemical compound C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C([O-])=O)CCC(N)=O BUANFPRKJKJSRR-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- SITWEMZOJNKJCH-WDSKDSINSA-N Ala-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N SITWEMZOJNKJCH-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- CXZFXHGJJPVUJE-CIUDSAMLSA-N Ala-Cys-Leu Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N CXZFXHGJJPVUJE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- CXISPYVYMQWFLE-VKHMYHEASA-N Ala-Gly Chemical compound C[C@H]([NH3+])C(=O)NCC([O-])=O CXISPYVYMQWFLE-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- SMCGQGDVTPFXKB-XPUUQOCRSA-N Ala-Gly-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N SMCGQGDVTPFXKB-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- 241000219194 Arabidopsis Species 0.000 description 1
- BHSYMWWMVRPCPA-CYDGBPFRSA-N Arg-Arg-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N BHSYMWWMVRPCPA-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 1
- DPXDVGDLWJYZBH-GUBZILKMSA-N Arg-Asn-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O DPXDVGDLWJYZBH-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- OCOZPTHLDVSFCZ-BPUTZDHNSA-N Arg-Asn-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N OCOZPTHLDVSFCZ-BPUTZDHNSA-N 0.000 description 1
- TTXYKSADPSNOIF-IHRRRGAJSA-N Arg-Asp-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O TTXYKSADPSNOIF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- UULLJGQFCDXVTQ-CYDGBPFRSA-N Arg-Pro-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O UULLJGQFCDXVTQ-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 1
- SJUXYGVRSGTPMC-IMJSIDKUSA-N Asn-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O SJUXYGVRSGTPMC-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- NPDLYUOYAGBHFB-WDSKDSINSA-N Asn-Arg Chemical compound NC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N NPDLYUOYAGBHFB-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- HUZGPXBILPMCHM-IHRRRGAJSA-N Asn-Arg-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O HUZGPXBILPMCHM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- CBHVAFXKOYAHOY-NHCYSSNCSA-N Asn-Val-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O CBHVAFXKOYAHOY-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- CKAJHWFHHFSCDT-WHFBIAKZSA-N Asp-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CKAJHWFHHFSCDT-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- XAJRHVUUVUPFQL-ACZMJKKPSA-N Asp-Glu-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O XAJRHVUUVUPFQL-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- OAMLVOVXNKILLQ-BQBZGAKWSA-N Asp-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O OAMLVOVXNKILLQ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N Asp-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 YZQCXOFQZKCETR-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- RSMZEHCMIOKNMW-GSSVUCPTSA-N Asp-Thr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O RSMZEHCMIOKNMW-GSSVUCPTSA-N 0.000 description 1
- ZARXTZFGQZBYFO-JQWIXIFHSA-N Asp-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)N)C(O)=O)=CNC2=C1 ZARXTZFGQZBYFO-JQWIXIFHSA-N 0.000 description 1
- RCGVPVZHKAXDPA-NYVOZVTQSA-N Asp-Trp-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC3=CNC4=CC=CC=C43)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N RCGVPVZHKAXDPA-NYVOZVTQSA-N 0.000 description 1
- 241000238366 Cephalopoda Species 0.000 description 1
- 235000003901 Crambe Nutrition 0.000 description 1
- 241000220246 Crambe <angiosperm> Species 0.000 description 1
- NXTYATMDWQYLGJ-BQBZGAKWSA-N Cys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CS NXTYATMDWQYLGJ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- WVLZTXGTNGHPBO-SRVKXCTJSA-N Cys-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O WVLZTXGTNGHPBO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- WXOFKRKAHJQKLT-BQBZGAKWSA-N Cys-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CS WXOFKRKAHJQKLT-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- 101710091045 Envelope protein Proteins 0.000 description 1
- 235000002756 Erythrina berteroana Nutrition 0.000 description 1
- 244000088811 Erythrina rubrinervia Species 0.000 description 1
- 235000002753 Erythrina rubrinervia Nutrition 0.000 description 1
- 101150111020 GLUL gene Proteins 0.000 description 1
- JHPFPROFOAJRFN-IHRRRGAJSA-N Gln-Glu-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N)O JHPFPROFOAJRFN-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- XFAUJGNLHIGXET-AVGNSLFASA-N Gln-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O XFAUJGNLHIGXET-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- IOFDDSNZJDIGPB-GVXVVHGQSA-N Gln-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O IOFDDSNZJDIGPB-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- JZDHUJAFXGNDSB-WHFBIAKZSA-N Glu-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O JZDHUJAFXGNDSB-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- WATXSTJXNBOHKD-LAEOZQHASA-N Glu-Asp-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O WATXSTJXNBOHKD-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- OAGVHWYIBZMWLA-YFKPBYRVSA-N Glu-Gly-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O OAGVHWYIBZMWLA-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- UUTGYDAKPISJAO-JYJNAYRXSA-N Glu-Tyr-Leu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 UUTGYDAKPISJAO-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- 102000053187 Glucuronidase Human genes 0.000 description 1
- 108010060309 Glucuronidase Proteins 0.000 description 1
- RJIVPOXLQFJRTG-LURJTMIESA-N Gly-Arg-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCN=C(N)N RJIVPOXLQFJRTG-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- MFBYPDKTAJXHNI-VKHMYHEASA-N Gly-Cys Chemical compound [NH3+]CC(=O)N[C@@H](CS)C([O-])=O MFBYPDKTAJXHNI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- UPADCCSMVOQAGF-LBPRGKRZSA-N Gly-Gly-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)CNC(=O)CN)C(O)=O)=CNC2=C1 UPADCCSMVOQAGF-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- TWTPDFFBLQEBOE-IUCAKERBSA-N Gly-Leu-Gln Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O TWTPDFFBLQEBOE-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- IKAIKUBBJHFNBZ-LURJTMIESA-N Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN IKAIKUBBJHFNBZ-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- VDCRBJACQKOSMS-JSGCOSHPSA-N Gly-Phe-Val Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O VDCRBJACQKOSMS-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N 0.000 description 1
- GWCJMBNBFYBQCV-XPUUQOCRSA-N Gly-Val-Ala Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GWCJMBNBFYBQCV-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-VKHMYHEASA-N Glycyl-alanine Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N H-Lys-Trp-OH Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 description 1
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 1
- KZTLOHBDLMIFSH-XVYDVKMFSA-N His-Ala-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O KZTLOHBDLMIFSH-XVYDVKMFSA-N 0.000 description 1
- VSLXGYMEHVAJBH-DLOVCJGASA-N His-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VSLXGYMEHVAJBH-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- NIKBMHGRNAPJFW-IUCAKERBSA-N His-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 NIKBMHGRNAPJFW-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- WYKXJGWSJUULSL-AVGNSLFASA-N His-Val-Arg Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)Cc1cnc[nH]1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(=N)N)C(=O)O WYKXJGWSJUULSL-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- GGXUJBKENKVYNV-ULQDDVLXSA-N His-Val-Phe Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N GGXUJBKENKVYNV-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- 101000887051 Homo sapiens Ubiquitin-like-conjugating enzyme ATG3 Proteins 0.000 description 1
- 108010065920 Insulin Lispro Proteins 0.000 description 1
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N L-alanine-L-arginine Natural products CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CCCNC(N)=N SITWEMZOJNKJCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- YUGVQABRIJXYNQ-UHFFFAOYSA-N Leu-Ala-Ala Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C)C(=O)NC(C)C(O)=O YUGVQABRIJXYNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N Leu-Ala-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- LSPYFSHXDAYVDI-SRVKXCTJSA-N Leu-Ala-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C LSPYFSHXDAYVDI-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- XBBKIIGCUMBKCO-JXUBOQSCSA-N Leu-Ala-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O XBBKIIGCUMBKCO-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 1
- HYIFFZAQXPUEAU-QWRGUYRKSA-N Leu-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C HYIFFZAQXPUEAU-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- VGPCJSXPPOQPBK-YUMQZZPRSA-N Leu-Gly-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VGPCJSXPPOQPBK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- JKSIBWITFMQTOA-XUXIUFHCSA-N Leu-Ile-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O JKSIBWITFMQTOA-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- LCPYQJIKPJDLLB-UWVGGRQHSA-N Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C LCPYQJIKPJDLLB-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- XVZCXCTYGHPNEM-UHFFFAOYSA-N Leu-Leu-Pro Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)N1CCCC1C(O)=O XVZCXCTYGHPNEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OTXBNHIUIHNGAO-UWVGGRQHSA-N Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN OTXBNHIUIHNGAO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- VTJUNIYRYIAIHF-IUCAKERBSA-N Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O VTJUNIYRYIAIHF-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- NTXYXFDMIHXTHE-WDSOQIARSA-N Leu-Val-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 NTXYXFDMIHXTHE-WDSOQIARSA-N 0.000 description 1
- 241001547351 Libyostrongylus douglassi Species 0.000 description 1
- 244000185347 Lippia alba Species 0.000 description 1
- FSNCEEGOMTYXKY-JTQLQIEISA-N Lycoperodine 1 Natural products N1C2=CC=CC=C2C2=C1CN[C@H](C(=O)O)C2 FSNCEEGOMTYXKY-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- CIOWSLJGLSUOME-BQBZGAKWSA-N Lys-Asp Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O CIOWSLJGLSUOME-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- HKCCVDWHHTVVPN-CIUDSAMLSA-N Lys-Asp-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HKCCVDWHHTVVPN-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- OVIVOCSURJYCTM-GUBZILKMSA-N Lys-Asp-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O OVIVOCSURJYCTM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- IWWMPCPLFXFBAF-SRVKXCTJSA-N Lys-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IWWMPCPLFXFBAF-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- QQYRCUXKLDGCQN-SRVKXCTJSA-N Lys-Cys-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCCCN)N QQYRCUXKLDGCQN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- UGTZHPSKYRIGRJ-YUMQZZPRSA-N Lys-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O UGTZHPSKYRIGRJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- HGNRJCINZYHNOU-LURJTMIESA-N Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O HGNRJCINZYHNOU-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- IGRMTQMIDNDFAA-UWVGGRQHSA-N Lys-His Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 IGRMTQMIDNDFAA-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- RBEATVHTWHTHTJ-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O RBEATVHTWHTHTJ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- ALGGDNMLQNFVIZ-SRVKXCTJSA-N Lys-Lys-Asp Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N ALGGDNMLQNFVIZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- RVKIPWVMZANZLI-ZFWWWQNUSA-N Lys-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 RVKIPWVMZANZLI-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 1
- NTYQUVLERIHPMU-HRCADAONSA-N Met-Phe-Pro Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N NTYQUVLERIHPMU-HRCADAONSA-N 0.000 description 1
- WXXNVZMWHOLNRJ-AVGNSLFASA-N Met-Pro-Lys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O WXXNVZMWHOLNRJ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 1
- BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N Nalpha-L-Leucyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091093105 Nuclear DNA Proteins 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- FPTXMUIBLMGTQH-ONGXEEELSA-N Phe-Ala-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 FPTXMUIBLMGTQH-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- AUJWXNGCAQWLEI-KBPBESRZSA-N Phe-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O AUJWXNGCAQWLEI-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- ROHDXJUFQVRDAV-UWVGGRQHSA-N Phe-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 ROHDXJUFQVRDAV-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- NYQBYASWHVRESG-MIMYLULJSA-N Phe-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 NYQBYASWHVRESG-MIMYLULJSA-N 0.000 description 1
- WDOCBGZHAQQIBL-IHPCNDPISA-N Phe-Trp-Ser Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 WDOCBGZHAQQIBL-IHPCNDPISA-N 0.000 description 1
- VFDRDMOMHBJGKD-UFYCRDLUSA-N Phe-Tyr-Arg Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N VFDRDMOMHBJGKD-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- YUPRIZTWANWWHK-DZKIICNBSA-N Phe-Val-Glu Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N YUPRIZTWANWWHK-DZKIICNBSA-N 0.000 description 1
- 108020005120 Plant DNA Proteins 0.000 description 1
- 108091036407 Polyadenylation Proteins 0.000 description 1
- HMNSRTLZAJHSIK-YUMQZZPRSA-N Pro-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 HMNSRTLZAJHSIK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- OCSACVPBMIYNJE-GUBZILKMSA-N Pro-Arg-Asn Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O OCSACVPBMIYNJE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- ICTZKEXYDDZZFP-SRVKXCTJSA-N Pro-Arg-Pro Chemical compound N([C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(O)=O)C(=O)[C@@H]1CCCN1 ICTZKEXYDDZZFP-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- FXGIMYRVJJEIIM-UWVGGRQHSA-N Pro-Leu-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 FXGIMYRVJJEIIM-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- ZLXKLMHAMDENIO-DCAQKATOSA-N Pro-Lys-Asp Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O ZLXKLMHAMDENIO-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- WFIVLLFYUZZWOD-RHYQMDGZSA-N Pro-Lys-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O WFIVLLFYUZZWOD-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- GFHXZNVJIKMAGO-IHRRRGAJSA-N Pro-Phe-Ser Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O GFHXZNVJIKMAGO-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- YYARMJSFDLIDFS-FKBYEOEOSA-N Pro-Phe-Trp Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O YYARMJSFDLIDFS-FKBYEOEOSA-N 0.000 description 1
- SBVPYBFMIGDIDX-SRVKXCTJSA-N Pro-Pro-Pro Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1N(C(=O)[C@H]2NCCC2)CCC1 SBVPYBFMIGDIDX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- 101710188315 Protein X Proteins 0.000 description 1
- 235000019484 Rapeseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 101150107869 Sarg gene Proteins 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000006394 Sorghum bicolor Species 0.000 description 1
- 102100021696 Syncytin-1 Human genes 0.000 description 1
- HYLXOQURIOCKIH-VQVTYTSYSA-N Thr-Arg Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N HYLXOQURIOCKIH-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 1
- UTSWGQNAQRIHAI-UNQGMJICSA-N Thr-Arg-Phe Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@H](O)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 UTSWGQNAQRIHAI-UNQGMJICSA-N 0.000 description 1
- KCRQEJSKXAIULJ-FJXKBIBVSA-N Thr-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O KCRQEJSKXAIULJ-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- BQBCIBCLXBKYHW-CSMHCCOUSA-N Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]([NH3+])[C@@H](C)O BQBCIBCLXBKYHW-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 1
- BVOVIGCHYNFJBZ-JXUBOQSCSA-N Thr-Leu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O BVOVIGCHYNFJBZ-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 1
- YKRQRPFODDJQTC-CSMHCCOUSA-N Thr-Lys Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN YKRQRPFODDJQTC-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- OHGNSVACHBZKSS-KWQFWETISA-N Trp-Ala Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](C)C([O-])=O)=CNC2=C1 OHGNSVACHBZKSS-KWQFWETISA-N 0.000 description 1
- SCQBNMKLZVCXNX-ZFWWWQNUSA-N Trp-Arg-Gly Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(=O)O)N SCQBNMKLZVCXNX-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 1
- CXPJPTFWKXNDKV-NUTKFTJISA-N Trp-Leu-Ala Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)=CNC2=C1 CXPJPTFWKXNDKV-NUTKFTJISA-N 0.000 description 1
- IMMPMHKLUUZKAZ-WMZOPIPTSA-N Trp-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)N)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 IMMPMHKLUUZKAZ-WMZOPIPTSA-N 0.000 description 1
- BGWSLEYVITZIQP-DCPHZVHLSA-N Trp-Phe-Ala Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@H](Cc1ccccc1)NC(=O)[C@@H](N)Cc1c[nH]c2ccccc12)C(O)=O BGWSLEYVITZIQP-DCPHZVHLSA-N 0.000 description 1
- JBBYKPZAPOLCPK-JYJNAYRXSA-N Tyr-Arg-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O JBBYKPZAPOLCPK-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- MNMYOSZWCKYEDI-JRQIVUDYSA-N Tyr-Asp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O MNMYOSZWCKYEDI-JRQIVUDYSA-N 0.000 description 1
- 102100039930 Ubiquitin-like-conjugating enzyme ATG3 Human genes 0.000 description 1
- 108091023045 Untranslated Region Proteins 0.000 description 1
- KNYHAWKHFQRYOX-PYJNHQTQSA-N Val-Ile-His Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N KNYHAWKHFQRYOX-PYJNHQTQSA-N 0.000 description 1
- YMTOEGGOCHVGEH-IHRRRGAJSA-N Val-Lys-Lys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O YMTOEGGOCHVGEH-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- UEPLNXPLHJUYPT-AVGNSLFASA-N Val-Met-Lys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O UEPLNXPLHJUYPT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- GIAZPLMMQOERPN-YUMQZZPRSA-N Val-Pro Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O GIAZPLMMQOERPN-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- LCHZBEUVGAVMKS-RHYQMDGZSA-N Val-Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)[C@@H](C)O)C(O)=O LCHZBEUVGAVMKS-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- 235000007244 Zea mays Nutrition 0.000 description 1
- FMHNUJFNRVUDRQ-KTKRTIGZSA-N [3-[(z)-docos-13-enoxy]-2-hydroxypropyl] dihydrogen phosphate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCCCCCOCC(O)COP(O)(O)=O FMHNUJFNRVUDRQ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N acetylacetone Chemical compound CC(=O)CC(C)=O YRKCREAYFQTBPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000005421 acetyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 108020002494 acetyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 1
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000012411 cloning technique Methods 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC([O-])=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 125000005313 fatty acid group Chemical group 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010006664 gamma-glutamyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 1
- 150000002313 glycerolipids Chemical class 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 1
- 108010037850 glycylvaline Proteins 0.000 description 1
- STKYPAFSDFAEPH-LURJTMIESA-N glycylvaline Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN STKYPAFSDFAEPH-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 239000004009 herbicide Substances 0.000 description 1
- 108010040030 histidinoalanine Proteins 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 229940070765 laurate Drugs 0.000 description 1
- 108010030617 leucyl-phenylalanyl-valine Proteins 0.000 description 1
- 108010091798 leucylleucine Proteins 0.000 description 1
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010038320 lysylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 108010089198 phenylalanyl-prolyl-arginine Proteins 0.000 description 1
- 108010073101 phenylalanylleucine Proteins 0.000 description 1
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 108700042769 prolyl-leucyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010004914 prolylarginine Proteins 0.000 description 1
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N sn-glycerol 3-phosphate Chemical compound OC[C@@H](O)COP(O)(O)=O AWUCVROLDVIAJX-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000011426 transformation method Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010080629 tryptophan-leucine Proteins 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1025—Acyltransferases (2.3)
- C12N9/1029—Acyltransferases (2.3) transferring groups other than amino-acyl groups (2.3.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8242—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits
- C12N15/8243—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine
- C12N15/8247—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with non-agronomic quality (output) traits, e.g. for industrial processing; Value added, non-agronomic traits involving biosynthetic or metabolic pathways, i.e. metabolic engineering, e.g. nicotine, caffeine involving modified lipid metabolism, e.g. seed oil composition
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Cultivation Of Plants (AREA)
- Other Liquid Machine Or Engine Such As Wave Power Use (AREA)
Abstract
1. Nowa sekwencja DNA, zrekombinowana lub izolowana, zwlaszcza kodu- jaca enzym o aktywnosci acylotransferazy zwiazanej z blona, zwlaszcza o aktywnosci 2-acylotransferazy, wybrana z grupy obejmujacej sekwencje DNA zawierajaca sekwencje DNA SEQ ID NO: 1 kodujaca co najmniej od Met44 do Stop418 w SEQ ID NO: 2 lub jej nic komplementarna, sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujace z se- kwencja DNA SEQ ID NO: 1 lub jej nicia komplementarna w warunkach ostrych oraz sekwencje kwasów nukleinowych kodujace bialko kodowane przez sekwencje DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon jest zastapiony kodonem synonimicznym i sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujace z sekwencja DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon antysensowny jest zastapiony synonimicznym kodonem antysensownym. PL
Description
Przedmiotem wynalazku są nowa sekwencja DNA, nowe białko, gospodarz mikroorganizm, nowy fragment sekwencji DNA i nowy DNA. Wynalazek umożliwia między innymi wytwarzanie roślin transgenicznych zdolnych do wytwarzania użytecznego handlowego oleju.
Rośliny od dawna stanowią cenne źródło oleju. Dotychczas oleje pochodzenia roślinnego stosowano głównie w żywieniu, lecz obecnie coraz większego znaczenia nabierają rośliny stanowiące źródło olejów użytecznych w przemyśle, np. jako zamienników olejów mineralnych lub jako środków polepszających jakość olejów mineralnych. Oleiste nasiona roślin, takich jak np. rzepak, zawierają wiele różnych lipidów (Hildish & Williams, 'Chemical Composition of Natural Lipids, Chapman Hall, Londyn, 1964). Istnieje znaczne zainteresowanie zmianą składu lipidów drogą technologii rekombinacji DNA (Knauf, TIBtech, February 1987, 40-47), ale dotychczas mimo coraz bardziej zaawansowanych metod nie zdołano osiągnąć w pełni zadowalających wyników.
Ogólnie istnieją dwie drogi modyfikacji. Po pierwsze można modyfikować rośliny, aby syntetyzowały one kwasy tłuszczowe nowe dla tych roślin, np. laurynian i/lub stearynian w
176 961 rzepaku. Po drugie, można zmieniać wzorzec i/lub stopień włączenia kwasów tłuszczowych do szkieletu glicerynowego lipidu.
Lipidy powstają w roślinach w wyniku addycji ugrupowań kwasu tłuszczowego do łańcucha gliceryny, zachodzącej z udziałem grupy enzymów zwanych acylotransferazami. W cząsteczce gliceryny znajdują się trzy pozycje, których podstawnikami mogą być ugrupowania kwasów tłuszczowych (acyle), a podstawienie przy każdej z pozycji jest katalizowane przez enzym specyficzny dla tej pozycji, odpowiednio 1-, 2- i 3- acylo transferazę.
Jednym, ale nie jedynym z celów zabiegów z dziedziny inżynierii lipidów wykonywanych na roślinach jest uzyskanie olejów zawierających lipidy o wysokiej zawartości kwasu erukowego (22:1). Oleje wysokoerukowe są pożądane w wielu zastosowaniach, zwłaszcza jako zamienniki olejów mineralnych lub dodatki do nich. W przypadku oleju z rzepaku (Brassica napus), jednej z najważniejszych obecnie roślin uprawnych stanowiących źródło oleju, specyficzność enzymu 2-acylotransferazy pozytywnie dyskryminuje włączanie kwasu erukowego w pozycji 2. Tak więc nawet w tych uprawach rzepaku, które są zdolne do włączania kwasu erukowego w pozycjach 1 i 3, a więc w których nie występuje dyskryminacja włączania kwasu erukowego (lub w których jest ona co najmniej ograniczona), tylko do 66% ugrupowań kwasów tłuszczowych włączonych do triacylogliceryny może stanowić ugrupowania kwasu erukowego. Takie odmiany rzepaku są znane jako odmiany rzepaku wysokoerukowego (HEAR).
Istnieje zatem zapotrzebowanie na zwiększenie zawartości kwasu erukowego w typowym rzepaku oleistym, jak również w odmianach HEAR, a także w innych oleistych roślinach uprawnych, takich jak np. kukurydza, słonecznik i soja. Jakkolwiek w zasadzie można uznać za możliwe wprowadzenie do żądanej rośliny DNA kodującego 2-acylotransferazę o innej specyficzności w stosunku do kwasów tłuszczowych, np. DNA kodującego 2-acylotransferazę pochodzącego z innej rośliny, to w praktyce pojawia się wiele problemów.
W zasadzie nie ma trudności z klonowaniem genu (lub co najmniej cDNA) kodującego enzym '1-acylotransferazę, gdyż jest on rozpuszczalny. Badania nad rekombinacją DNA w związku z tym enzymem zostały już zresztą podjęte, jakkolwiek w zupełnie innym celu, a mianowicie dla zwiększenia odporności liści rośliny tyoniu na mróz, przez Murata i innych (Naturę, 356, 710-713, (1992)). Zupełnie inaczej przedstawia się sytuacja w przypadku 2-acylotransferazy i 3-acylotransferazy, które są enzymami związanymi z błoną, a w związku z tym nierozpuszczalnymi. Po pierwsze do tej pory nie udało się ich oczyścić, co utrudnia pracę z nimi i wyklucza stosowanie wielu typowych procedur używanych w technikach klonowania DNA. Po drugie, dotychczas istniało niewiele informacji o 2- i 3-acylotransferezach. Nie było wiadomo nic o ich wielkości lub o tym jak wiążą się z błoną. Nie były dotąd dostępne dane o odpowiednich sekwencji nukleotydów i sekwencjach aminokwasów i nie wytworzono żadnych przeciwciał przeciwko nim.
Do tej pory prowadzono więc tylko dyskusję o potrzebie zmodyfikowania specyficzności 2-acylotransferazy, np. przez użycie genu z innego gatunku, kodującego odpowiadający enzym, ale o innej specyficzności, jednak nie było dotąd znane żadne praktyczne rozwiązanie tego problemu. Nieoczekiwanie okazało się, że realizację tego celu umożliwił niniejszy wynalazek, dzięki dostarczeniu nowej sekwencji DNA, zrekombinowanej lub izolowanej, zwłaszcza kodującej enzym o aktywności acylotransferazy związanej z błoną, a w szczególności o aktywności 2-acylotransferazy.
Nowa sekwencja DNA według wynalazku jest wybrana z grupy obejmującej sekwencję DNA zawierającą sekwencję DNA SEQ ID NO: 1 kodującą co najmniej od Met44 do Stop4i8 w SEQ ID NO: 2 lub jej nić komplementarną, sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z sekwencją DNA SEQ ID NO: 1 lub jej nicią komplementarną w warunkach ostrych oraz sekwencje kwasów nukleinowych kodujące białko kodowane przez sekwencję DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon jest zastąpiony kodonem synonimicznym i sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z
176 961 sekwencją DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon antysensowny jest zastąpiony synonimicznym kodonem antysensownym.
Zakres wynalazku obejmuje także nowe białko o sekwencji aminokwasów SEQ ID NO: 2, kodowane przez sekwencję DNA według wynalazku, jak również białka wykazujące co najmniej 40% homologiczności z tym białkiem.
Zakresem wynalazku jest objęty także gospodarz mikroorganizm zdolny do ekspresji sekwencji DNA według wynalazku. *
Zakresem wynalazku są objęte także fragmenty sekwencji DNA według wynalazku zawierające co najmniej 15 nukleotydów.
Fragmenty sekwencji DNA zawierające co najmniej 15 nukleotydów mogą zawierać np. 20, 30,40 lub 60 nukleotydów.
Ponadto zakres wynalazku obejmuje nowy DNA kodujący RNA antysensowny do RNA kodowanego przez sekwencję DNA według wynalazku.
Ponadto zakres wynalazku obejmuje nowy DNA kodujący rybozym specyficzny dla RNA kodowanego przez sekwencję DnA według wynalazku.
Ponadto zakres wynalazku obejmuje nowy DNA, zrekombinowany lub izolowany, zawierający promotor naturalnie kierujący ekspresją genu z wytworzeniem białka o sekwencji aminokwasów SEQ ID NO: 2, kodowanego przez sekwenq'ę DNA według wynalazku.
Odpowiednie warunki hybrydyzacji stanowiące warunki ostre to np. zastosowanie roztworów soli o stężeniu około 0,9M w temperaturze 35-65°C. W szczególności ostre warunki hybrydyzacji to zastosowanie 6 x SSC, 5 x roztworu Denhardt’a, 0,5% SDS, 0,5% pirofosforan tetrasodowy i 50 μ g/ml zdenaturowanego DNA spermy śledzia. Przemywanie można prowadzić następująco: 2 x 30 minut w 65°C w 1 x SSC, 0,1% SDS i 1 x 30 minut w 0,2 x SSC, 0,1% SDS w 65°C.
Sekwencja DNA SEQ ID NO: 1, od nukleotydu 130 do 1254, koduje 2-acylotransferazę z kukurydzy (Zea mays), łącznie z kodonem stopu.
Inne sekwencje kwasów nukleinowych według wynalazku będą na ogół kodować białko o aktywności 2-acylotransferazy, skoro taką aktywność wykazuje enzym kodowany przez sekwencję SEQ ID NO: 1. Oczywiście te sekwencje kwasu nukleinowego według wynalazku, które nie kodują białka mającego aktywność enzymatyczną (lub związaną aktywność enzymatyczną), mogą być użyteczne w innych celach, np. jako sondy, co jest użytecznością wspólną dla wszystkich sekwencji kwasów nukleinowych według wynalazku, włącznie z sekwencją SEQ ID NO: 1.
Ponieważ prawdopodobny jest wysoki stopień homologii między acylotransferazami różnych gatunków (a zwłaszcza między 2-acylotransferazami różnych gatunków), sekwencja DNA SEQ. ID. NO. 1 (lub jej fragment lub inne sekwencje według wynalazku) mogą być stosowane do sondowania cDNA lub bibliotek genomowych innych gatunków w celu sklonowania sekwencji DNA kodujących acylotransferazy mające pożądaną specyficzność. Przykładowo jeśli pożądane jest wytworzenie oleju mającego wysoką zawartość kwasu erukowego zestryfikowanego gliceryną, tymi sekwencjami można sondować biblioteki DNA wszelkich gatunków, które w naturze wytwarzają kwas erukowy. Do odpowiednich roślin należą np. poziemnikowate (Lim.nant.hes spp,, zwłaszcza L. alba, a w szczególności L. douglassi) i Crambe. Limnanthes douglassi jest gatunkiem korzystnym, gdyż szczegółowe badania wykazały, że istnieje w nim pozytywna dyskryminacja w kierunku włączania kwasu erukowego w pozycji 2 triacyloglicerydu. Można także sondować biblioteki organizmów innych niż rośliny wyższe. Przykładowo acylotransferazy o pożądanej specyficzności mogą występować w niektórych bakteriach.
DNA według wynalazku ma ogólnie· wyższy stopień homologiczności z co najmniej częścią sekwencji DNA SEQ ID NO: 1 niż z sekwencjami znanymi.
Zrekombinowany DNA według wynalazku może mieć postać wektora z sekwencjami regulatorowymi wystarczającymi do kierowania ekspresją (takiego jak promotor).
176 961
Wektory nie będące wektorami ekspresyjnymi są użyteczne do celów klonowania (tak jak same wektory ekspresyjne).
Komórki gospodarza mikroorganizmu według wynalazku (takie jak bakterie i komórki roślinne) zawierają takie wektory.
Sekwencje DNA według wynalazku .mogą być ponadto stosowane w klonowaniu pożądanego genu pochodzącego z innego gatunku. Gdy DNA jest sprzężony z odpowiednim promotorem, np. w wektorze ekspresyjnym w odpowiednim organizmie gospodarza, może być wytwarzane białko. Takie białko może być użyte do generowana przeciwciał poliklonalnych lub monoklonalnych, lub innych cząsteczek wiążących, które następnie mogą być użyte do skriningu ekspresji białek homologicznych w innych gatunkach, przykładowo jako część programu skriningu biblioteki DNA.
Odpowiednie biblioteki cDNA docelowych gatunków na ogół sporządza się gdy prawdopodobna jest ekspresja żądanego genu, tak więc korzystne będą biblioteki cDNA zarodka (z wczesnego etapu syntezy lipidów) np. z Limnanthes spp.
Wynalazek umożliwia zatem klonowanie wielu różnych genów (lub, ogólniej, sekwencji DNA) kodujących acylotransferazy, a w szczególności 2-acylotransferazy, przy użyciu sekwencji DNA według wynalazku.
Takie acylotransferazy, np. z Limnanthes spp., mogą być również klonowane bezpośrednio, np. przy użyciu testów komplementacji, z biblioteki DNA danego gatunku. Przykładowo gdy jako gospodarza komplementacyjnego stosuje się E. coli, wybiera się mutanta, który jest zdefektowany względem odnośnego enzymu (np. 2-acylotransferazy). Bibliotekę DNA z gatunku docelowego (np. L douglassi) klonuje się w mutancie gospodami komplementacyjnym. Komórki gospodarza zawierające w swoim genomie docelowy gen acylotransferazy mogą być łatwo wyselekcjjtnowane przy użyciu odpowiedniego środowiska różnicującego. Mutant E. coli JC201 jest odpowiednim gospodarzem do stosowania w testach komplementacji dotyczących 2-acylotransferazy.
Klonowanie wybranego genu acylotransferazy w mikroorganizmie gospodarzu, takim jak bakteria E. coli, prowadzone w sposób umożliwiający ekspresję genu, ma szczególną zaletę, gdyż specyficzność genu acylotransferazy względem substratu można ocenić w mikroorganizmie gospodarzu przed wytworzeniem roślin transgenicznych, oszczędzając w ten sposób znacznie czas badań. Taka ocena może być dokonana drogą testów z substratami kompetycyjnymi, w których różnie i wykrywalnie znakowani kandydaci na substraty dla enzymu konkurują ze sobą o włączenie do glicerydu. Przykładowo jako substraty kompetycyjne dla 2-acylotransferazy mogą być użyte I4C-erucylo CoA i 3Holeoilo CoA i mogą być mierzone względne ilości wychwytu 14C lub trytu do glicerydu. Ponieważ 2-acy.lotransferazy mają akceptorowe substraty na bazie gliceryny i donorowe substraty na bazie kwasu tłuszczowego, eksperyment może być prowadzony z różnymi akceptorami, takimi jak l-erucyloglicerolo-3-fosforan i 1-oleoiloglicerolo-3-fosforan. W ten sposób można zidentyfikować gen kodujący enzym, który preferencyjnie włącza kwas erukowy do akceptora (w szczególności Terucylogllcerolo-3-fosforanu) jako sekwencję DNA z wyboru do dalszego stosowania.
Wynalazek umożliwia produkcję roślin transgenicznych mających jeden lub większą liczbę nierozpuszczalnych enzymów acetylotransferazowych o specyficzności w stosunku do substratu różniącej się od specyficzności natywnego enzymu rośliny.
Zmianę specyficzności natywnego enzymu rośliny można uzyskać drogą ukierunkowanej mutagenezy i/lub innych technik inżynierii białek, jednak najkorzystniejsze są rośliny transgeniczne, zawierające zdolny do ekspresji gen acylotransferazy, kodujący enzym o pożądanej specyficzności, pochodzący od innego gatunku. Enzymami z wyboru są 2-acylotransferazy. Z użyciem takich technik można np. spowodować, jak to opisano powyżej, że w roślinie, w której normalnie nie zachodziłoby włączenie kwasu erukowego do trójglicerydów, przebiegać będzie ekspresja enzymu 2-acylotransferazy, który ma zwiększoną specyficzność w stosunku do kwasu erukowego lub co najmniej nie charakteryzuje się zwiększoną dyskryminacją kwasu erukowego.
176 961
Dzięki wynalazkowi można drogą inżynierii genetycznej wytwarzać rośliny mające wyższy poziom kwasu erukowego włączonego do glicerydów niż w odpowiednich roślinach nie poddanych takim zabiegom. Korzyść z wynalazku nie ogranicza się do zwiększania włączenia do trójglicerydów kwasu erukowego, gdyż w innych okolicznościach pożądane mogą być inne kwasy.
Aby transgen acylotransferazy podlegał ekspresji, musi być z nim związany funkcjonalnie promotor. Ponieważ przy obecnym stanie wiedzy trudno jest precyzyjnie regulować miejsce włączenia transgenu do genomu gospodarza, korzystnie transgen sprzęga się z jego promotorem przed transformacją rośliny. Promotory użyteczne w zabiegach realizowanych z użyciem wynalazku mogą być czasowo- i/lub nasiono-specyficzne, lecz niekoniecznie, gdyż korzystne mogą być promotory konstytutywne, takie jak promotor CaMV 35S, ponieważ zwykle są one silnymi promotorami. Nie jest prawdopodobne, aby inne tkanki dotknięte zostały działaniami gdy zachodzi w nich ekspresja genu kodującego enzym acylotransferazę, jako że dostępność substratów kwas tłuszczowy-CoA jest efektywnie ograniczona do nasion.
Konstrukt promotor-transgen wprowadza się do komórek rośliny za pomocą dowolnego odpowiedniego środka. Korzystnie komórki roślinne transformuje się DNA przy użyciu wektora osłabionego plazmidu Ti i przenosi za pomocą Agrobacterium, stosując procedury znane ze stanu techniki, np. takie jak opisano w zgłoszeniach patentowych EP-A-0116718 i EP-A-0270822. Alternatywnie, obcy DNA może być wprowadzony bezpośrednio do komórek roślinnych przy użyciu urządzenia do wyładowań elektrycznych. Ta metoda jest korzystna wtedy, gdy Agrobacterium jest nieskuteczne, np. gdy rośliną biorcą jest roślina jednoliścienna. Odpowiednia będzie również dowolna inna metoda, która zapewnia trwałe włączenie DNA do DNA jądrowego dowolnej komórki roślinnej dowolnego gatunku. Obejmuje te gatunki roślin, które obecnie nie są zdolne do transformacji genetycznej.
Korzystnie DNA według wynalazku zawiera również drugi gen chimeryczny (gen markerowy), który umożliwia łatwe odróżnienie transformowanej rośliny lub hodowli tkankowej zawierającej obcy DNA od innych roślin lub hodowli tkankowych, które nie zawierają obcego DNA. Przykładami takich genów markerowych są geny oporności na antybiotyk (Herrera-Estrella i in., EMBO J. 2(6), 987-95 (1983) i Herrera-Estrella i in., Naturę 303 209-13 (11983), oporności na herbicydy (EP-A-0242246) i ekspresji glukuronidazy (GUS) (EP-A-0344029). Ekspresja genu markerowego jest korzystnie regulowana przez drugi promotor, który umożliwia ekspresję w komórkach innych niż tapetum, umożliwiając w ten sposób selekcję komórek lub tkanki zawierających marker w dowolnym stadium regeneracji rośliny. Korzystnie drugi promotor pochodzi z genu, który koduje podjednostkę 35S białka otoczki wirusa mozaiki kalafiora (CaMV). Jednakże może być stosowany dowolny inny drugi promotor.
Z pojedynczej transformowanej komórki roślinnej może być zregenerowana cała roślina, w związku z czym wynalazek umożliwia wytwarzanie roślin transgenicznych (lub ich części, takie jak materiał do rozmnażania) zawierających DNA według wynalazku. Regenerację komórek do roślin można prowadzić znanymi sposobami.
Zgodnie z wynalazkiem natywny gen acylotransferazy rośliny transgenicznej, który odpowiada transgenowi, może być co najmniej częściowo zdezaktywowany lub usunięty. Tak więc jeśli transgen koduje 2-acylotransferazę, natywna 2-acylotransferaza rośliny może być zdezaktywowana np. za pomocą znanych technik anty-sensownych lub rybozomowych.
Dzięki wykorzystaniu wynalazku w praktyce można wytwarzać rośliny oleiste o zaplanowanej zawartości lipidów. Przkładowo skład lipidowy trójglicerydów w roślinie może zostać znacznie zmieniony dzięki wytworzeniu rośliny produkującej trójglicerydy z ugrupowaniami pożądanego kwasu tłuszczowego (np. kwasu erukowego ) w ilości wyższej niż było dotychczas możliwe. Przykładowo rzepak oleisty (B. napus) może przekształcić tak, by wytwarzał olej, którego trójglicerydy zawierają powyżej 70% kwasu erukowego.
176 961
Oprócz wytwarzania roślin o zwiększonej zawartości lipidów, można dzięki wynalazkowi wytwarzać także rośliny o zmniejszonej zawartości lipidów, co jest użyteczne gdy pożądane jest zwiększenie zawartości białka i/lub skrobi. Zmniejszoną zawartość lipidów można uzyskać oddziaływując na prawidłowe funkcjonowanie genu kodującego 2-acylotransferazę, np. za pomocą technologii antysensownej lub rybozymowej. Takie rośliny o zmniejszonej zawartości lipidów mogą być dalej poddawane obróbce metodami inżynierii genetycznej dla podwyższenia zawartości białka i/lub skrobi.
Promotory, które naturalnie kierują 2-acylotransferazami można wytworzyć przez hybrydyzację i/lub restrykcję i/lub sekwencjonowanie z użyciem sekwencji SEQ ID NO: 1.
Wynalazek umożliwia wytwarzanie białka kodowanego przez sekwenqe DNA według wynalazku. Białko może być eksprymowane w komórkach gospodarza, do którego genomu wprowadzono sekwencję DNA w postaci wektora ekspresyjnego. Białko, które może być enzymem mającym aktywność 2-acylotransferazy, może mieć sekwencję aminokwasów identyczną lub homologiczną z sekwenq'ą SEQ ED NO: 1. Stopień homologii będzie na ogół większy niż stopień homologii znanych białek i może wynosić co najmniej 40%, np. może on wynosić 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 95% lub 99%.
Wynalazek ilustrują następujące przykłady odnoszące się do rysunku.
Figura 1 przedstawia sekwencję cDNA otrzymaną w przykładzie 1 (SEQ. ED. NO: 1) i odpowiadającą jej sekwencję aminokwasów białka (SEQ ID NO: 2).
Figura 2 przedstawia zestawienie sekwencji części produktów genowych plsB (SEQ ID NO: 3) i plsC (SEQ ID NO: 4) z częścią sekwencji przedstawionej na fig. 1 (SEQ ED NO: 5), pokazujące zachowany motyw. plsB jest to gen sn-glicerolo-3-fosforanoacylotransferazy E. coli, a plsC jest to gen l-acylo-sn-glicerolo-3-fosforanoacylotran-sferazy E. coli. Podwójne kropki wykazują dokładne dopasowania między dwiema sekwencjami, a pojedynczy punkt konserwatywne podstawienia aminokwasów. Gwiazdki wskazują aminokwasy identyczne we wszystkich trzech sekwencjach, a reszty zachowane w dwóch z trzech sekwencji są zaznaczone symbolem +.
Figury 3 A, 3B i 3C przedstawiają wynik doświadczeń, w których fospolipidy błonowe ze szczepów E. coli wyekstrahowano chloroformem i rozdzielono metodą dwuwymiarowej chromatografii cienkowarstwowej. Rozwijanie w pierwszym kierunku (ku górze) prowadzono z użyciem układu chloroform:metanol:woda (65:25:4), a w drugim kierunku (z lewa na prawo) z użyciem układu chloroform:metanol: kwas octowy (65:25:10). Fosfolipidy wizualizowano metodą autoradiografii przez 16 godzin w -70°C, z użyciem kliszy filmowej Fuji RX. Użyto następujących szczepów E. coli (fig. 3A): JC201, który przenosi termowrażliwą mutację w genie acylotransferazy l-acylo-sn-glicerolo-3-fosforanowej; (fig. 3B): JC201 zawierający plazmid pPLSC, który koduje gen acylotransferazy 1-acylo-sn-glicerolo-3-fosforanowej E. coli; (fig. 3C): JC201 zawierający plazmid, którego sekwencja insertu cDNA jest pokazana na fig. 1. LPA, kwas lizofosfatydowy; PE
CL, kardiolipina; PG, fosfatydyloglicerol; PA, kwas fosfatydowy, włączone do LPA w JC201 i cały odpowiadający znacznik jest włączony do PE w obu pozostałych szczepach.
Figura 4 przedstawia wyniki próby oznaczania acylotransferazy przeprowadzone z użyciem kwasu lizafosfatydowego znakowanego 32P, wyekstrahowanego ze szczepu E. coli JC201 i oleiło CoA jako donoru acylu. Fospolipidy obecne w mieszaninach reakcyjnych ekstrahowano chloroformem i rozdzielano stosując chromatografię cienkowarstwową na żelu krzemionkowym. Do rozwijania płytek stosowano układ chloroform:kwas octowy: woda (25:15:4:2). Fosolipidy wizualizowano za pomocą autoradiografii przez 16 godzin w -70°C, stosując film Fuji RX. Użyto następujących szczepówE. coli: JC201, który przenosi termowrażliwą mutację w genie acylotransferazy l-acylo-sn-glicerolo-3-fosforanowej; JC201 zawierający plazmid pPLSC, który koduje gen acylotransferazy 1-acylo-sn-glicerolo3-fosforanowej; JC201 zawierający plazmid, którego sekwencja insertu cDNA kukurydzy jest pokazana na fig. 1. LPA kwas lizofosfatydowy; PA, kwas fosfatydowy.
fosfatydyloetanoloamina; 0, początek. 20% r jest
176 961
Figura 5 przedstawia porównanie sekwencji białka pokazanej na fig. 7 (SEQ ID NO: 6) z sekwencją otrzymaną z insertu cDNAB. napus (SEQ ID NO: 7), którą wyizolowano przez hybrydyzację DNA z sekwencją cDNA kukurydzy. Sekwencje dopasowano za pomocą programu FastA (1988). Podwójne punkty oznaczają identyczne aminokwasy, a pojedyncze punkty konserwatywne podstawienia aminokwasów.
Kukurydza - 374 aa, rzepak - 311 aa
51,5% identyczności, wynik zoptymalizowany: 705.
Przykład I.
Wytwarzanie sekwencji cDNA z fig. 1
Testy komplementacji przy użyciu biblioteki ekspresji cDNA kukurydzy przeniesionej do mutanta JC 201 E. coli pozwoliły na wyizolowanie plazmidu kodującego enzymu 2-acylotransferazę z kukurydzy. Insert cDNA tego plazmidu ma wielkość 1,6 kb i zawiera ogon poli(A) o długości 70 bp. Insert zsekwencjowano, otrzymując przedstawione dane, a translacja sekwencji ujawniła obecność tylko jednej dużej ramki odczytu. Pokazano to na fig. 1, na której zakreślono proponowane startową metioniną i kodonem stopu. 2-Acylotransferaza ma wielkość 374 aminokwasów, a sekwencjonowanie w górę od otwartej ramki odczytu pokazało, że białko jest eksprymowane w E. coli jako część białka fuzyjnego. Białko składa się z 10 aminokwasów białka /1-galaktozydazy, 43 aminokwasów (pokazanych w sekwencji) odpowiadających końcowi 5' nie podlegającego translacji regionu mRNA i .białka o długości 374 aminokwasów'. Porównanie sekwencji białka dużej ramki odczytu z 2-acylotransferazą E. coli wykazało niewielką ogólną identyczność, ale istnieje ciąg 80 reszt, który ma wysoki poziom konserwatywnego podstawienia i zawiera pewne aminokwasy, które są zachowane w 2-acylotransferazie, 1-acylotransferazie i N-acetyloglukozaminotransferazie E. coli.
Przykład II.
Włączenie 32P do całkowitych fosfolipidów
Szczepy E. coli namnażano w pożywce minimalnej zawierającej 32P ortofosforan. Całkowite glicerolipidy ekstrahowano rozpuszczalnikami organicznymi i rozdzielano za pomocą dwuwymiarowej chromatografii cienkowarstwowej (fig. 3) (kwas lizofosfatydowy (LPA) jest substratem dla 2-acylotransferazy (2-AT)).
Jak widać z fig. 3A, akumulacja LPA znakowanego j2P w mutancie JC201 ilustruje nieobecność w pełni funkcjonalnego 2-AT. Dodanie plazmidu przenoszącego albo natywny gen E. coli (fig. 3B) albo klon kukurydzy z fig. 1 (fig. 3C) odtwarza aktywność AT w komórkach, pozwalając na usunięcie i dalsze metabolizowania LPA (kwas lizofosfatydowy).
Dane te wskazują, że sekwencja DNA pokazana na fig. 1 koduje 2-AT.
Przykład III.
Nadekspresja cDNA
Region cDNA określający sekwencję białka z fig. 1 klonowano w nadekspresyjnym wektorze E. coli pET11d (Studier i współpr., Meth. Enzymol. 185, 60-89 (1990)). Zwiększona aktywność 2-acylotransferazy w wyniku indukcji ekspresji z insertu plazmidowego potwierdza, że sekwencja z fig. 1 jest sekwencją 2-AT.
Przykład IV.
Lokalizacja aktywności 2-AT w komórkach E. coli zawierających klon kukurydzy
Oznaczenia 2-acylotransferazy przeprowadzono stosując błony wyizolowane z mutanta szczepu JC201 pozbawionego 2-AT i z JC201 zawierającego plazmid kukurydzy (fig. 4). We frakcjach błon z JC201 nie wykryto aktywności. JC201. Dodanie do JC201 plazmidu przenoszącego natywny gen E. coli lub sekwencji podanej na fig. 1 powodowało odtworzenie w błonach aktywności 2-AT.
176 961
Przykład V.
Zastosowanie cDNA kukurydzy jako sondy heterologicznej do wyodrębniania cDNA z nasion rzepaku oleistego
Bibliotekę cDNA z Brassica napus poddano skriningowi przy użyciu sekwencji z fig. 1 stosując standardowe techniki (Sambrook i inni, Molecilar Cloning - A Laboratory Manual, wyd. 2, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989).
Hybrydyzację insertu cDNA kukurydzy z biblioteką rzepaku prowadzono z użyciem następujących warunków: hybrydyzację prowadzono w 6 x sSc, 5 X roztwór Denhardta, 0,5% SDS, 0,5%pirofosforanu tetrasodowego i 500 μ g/ml denaturowanego DNA spermy śledzia. Filtry przemywano 2 x przez 30 minut w 65OC w 1 x SSC, 0,1% SDS i 1 x 30 minut w 0,2 x SSC, 0,1% SDS w 65°C. Zhybrydyzowany klon sekwencjonowano i oznaczono sekwencję białka z dużej ramki odczytu. Zestawienie sekwencji tego białka z sekwencją otrzymaną z cDNA klonu kukurydzy z fig. 1 przedstawiono na fig. 5.
Wysoki stopień identyczności między tymi dwiema sekwencjami świadczy o przydatności sekwencji z fig. 1 do otrzymywania innych 2-acylotransferaz.
Przykład VI.
Rośliny transgeniczne
Sekwencję z fig. 1 można klonować, wraz z odpowiednim promotorem, w wektorze nadającym się do ekspresji w roślinach. Wektor można zastosować do transformacji roślin, a uzyskane rośliny. eksprymujące 2-AT można' zanalizować na zawartość lipidu. Oczekuje się, że metabolizm lipidu będzie regulowany pozytywnie, a w nasionach wykrywany będzie podwyższony poziom lipidu.
Przykład VIL
Antysens
Sekwencję z fig. 1 można sklonować, wraz z odpowiednim promotorem,w orientacji antysensownej w wektorze odpowiednim do ekspresji w roślinach. Wektor można zastosować do transformacji roślin, a uzyskane rośliny eksprymujące 2-AT można zanalizować na zawartość białka i skrobi. Oczekuje się, że w nasionach wykrywany będzie podwyższony poziom białka i skrobi.
Przykład VIH.
Negatywna regulacja natywnej 2-AT
Sekwencję DNA 2-AT pochodzącego z L. douglassii (otrzymaną w sposób opisany w przykładzie 5) można wprowadzić do rzepaku oleistego (OSR) pod ekspresją odpowiedniego promotora, stosując wektory i metody transformacji roślin dobrze znane ze stanu techniki. W celu jednoczesnej ekspresji można wprowadzić drugą sekwencję, zawierającą antysens lub rybozymy przeciwko cDNA rzepaku (przykład 5). Uzyskana transformowana roślina ma aktywność 2-AT, odpowiadającą aktywności L. douglassii, z jednoczesną negatywną regulacją natywnego genu 2-AT rzepaku.
Tak otrzymana zmodyfikowana roślina OSR ma wyższe poziomy kwasu erukowego w pozycji 2 swoich trójacylogliceroli niż roślina typu dzikiego. Ponadto w oleju z nasion stwierdza się wyższe poziomy trierucyny.
Przykład IX.
Skrining biblioteki genomowej
Sekwencję z fig. 1 zastosowano do skriningu biblioteki genomowej Arabidopsis i metodą hybrydyzacji otrzymano odpowiedni klon. Z tego klonu można przy użyciu standardowych technik otrzymać promotor. Promotor można zastosować do kierowania ekspresją w błonach komórek roślinnych.
176 961
WYKAZ SEKWENCJI (1) INFORMACJA OGÓLNA:
(i) ZGŁASZAJĄCY:
(A) NAZWA: Nickerson BIOCEM Limited (wszystkie kraje poza US) (B) ULICA: Cambridge Science Park, Milton Road (C) MIASTO: Cambridge (E) KRAJ: Wielka Brytania (F) KOD POCZTOWY: CB4 4GZ (A) NAZWA: SLABAS, Antoni Ryszard (B) ULICA: 8 Telford Close, High Shinclffead (C) MIASTO: Durham (E) KRAJ: Wielka Brytania (F) KOD POCZTOWY: DH1 2YJ (A) NAZWA: BROWN, Adrian Paul (B) ULICA: 4 Church Villas, Shadforth (C) MIAsto: Durham (E) KRAJ: Wielka Brytania (F) KOD POCZTOWY: DH6 1LQ (ii) TYTUŁ WYNALAZKU: DNA KODUJĄCY 2-ACYLOTRANSFERAZY (iii) LICZBA SEKWENCJI: 7 (v) POSTAĆ ODCZYTYWANIA PRZEZ KOMPUTER:
(A) RODZAJ NOŚNIKA: dyskietka elastyczna (B) KOMPUTER: IBM PC - kompatybilny (C) SYSTEM OPERACYJNY: PC-DOS/MS-DOS (D) PROGRAM: Patentln wydanie 1,0 wersja 1,25 (vi) DANE O ZGŁOSZENIU:
(A) NUMER ZGŁOSZENIA: WO PCT/GB93/ (2) INFORMACJA O SEKWENCJI NR ID.: 1 (i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 1514 par zasad (B) RODZAJ: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: podwójna (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) RODZAJ CZĄSTECZKI: cDNA (rc) CECHA:
(A) NAZWA/KLUCZ: CDS (B) UMIEJSCOWIENIE: 130... 1254.
(xi) OPIS SEKWENCJI: SEKW. NR ID.: 1:
176 961 (2) INFORMACJA O SEKWENCJI NR ID.: 1 (i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 1514 par zasad (B) RODZAJ: kwas nukleinowy (C) ILOŚĆ NICI: podwójna (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) RODZAJ CZĄSTECZKI: cDNA (ix) CECHA:
(A) NAZWA/KLUCZ: CDS (B) UMIEJSCOWIENIE: 130..1254 (xi) OPIS SEKWENCJI: SEKW. NR ID.: 1:
CCCCGTCCTC CTCGTCGCCG GCGGAGCCGC CTACTATCGC CTGGAGAAGG AGCGCCGCGG 60
GGAGCTTTTC CCACTGCCGA CTGCCGTCTG ACęCTCCGAG ATCGGAAGCG GCGCCGGCGC 120
CGGCCGGCG ATG GCG ATC CCG CTC GTG CTC GTC GTG CTC CCG CTC GGC 168
Met Ala Ile Pro Leu Val Leu Val Val Leu Pro Leu Gly
10
| CTG CTC Leu Leu | TTC CTC CTG | TCC GGC CTC ATC GTC AAC GCCATC CAC GCCCTC | 201 | ||||||||
| Phe Leu | Leu | Ser | Gly 20 | Leu Ile | Val | Asn Ala 20 | I 1ε | GlnAlaVvl | |||
| 15 | |||||||||||
| CTA | TTT | GTG ACG | ATA | AGG | CCC | TTT CCG | AAG | AGC CC | TAC | CGT ClC GAT | 204 |
| Leu 30 | Phe | Val Thr | Ile | Arg 35 | Pro | Phe Ser | Lys | Ser Phe 40 | Tic | ArgArg Ile 40 | |
| AAC | AGA | TTC TTG | GCC | GAG | CTG | CTG TGG | CC | CAG CC | GTC | ClC GKJ GGT | 331 |
| Asn | Arg | Phe Leu | Ala 50 | Glu | Leu | Leu Trp | Leu 55 | Gln Leu | Val | Τΐφ Val 1v1 66 | |
| GAC | TGG | TGG GCA | GGT | GTT | AAG | GCA CAA | CTG | CAT GOC | GAT | GAG GίGCACT | 336 |
| Asp | Trp | Trp Ala 65 | Gly | Val | Lys | Val Gln 70 | Leu | His Ala | Asp | Glu Glu uCr 70 | |
| TAC | AGA | TCA ATG | GGT | AAA | GAG | CAT GCA | CTC ATC ATA | TCTC | AAT CAC CCC | 400 | |
| Tyr | Arg | Ser Met 80 | Gly | Lys | Glu | His Ala 88 | Leu | Ile Ile: | e ir 90 | Amnls Aat | |
| AGT | GAT | ATT GAT | TGG | CTC | ATT | GGA TGG | ATA | CG GCC | CAG | CGT TCTC GH | 405 |
| Ser | Asp 95 | Ile Asp | Trp | Leu | Ile 110 | Gly Trp | Ile | Leu Ala 115 | Gln | Arg S er dl | |
| TGC | CTT | GGA AGG | ACA | CTT | GCT | GTC ATG | AA^G | AAG TCA | tcc | AA^G TTC CTT | 550 |
| Cys 110 | Leu | Gly Ser | lTh | Leu 115 | Ala | Val Met | Lys | Lys Ser 120 | Ser | Lys Phe Leu 110 | |
| CCA | GTT | ATT GGC | TGG | TCA | ATG | TGG TC | GCA | GAG TAC | CTC | TTT TTT GGA | 555» |
| Pro | Vil | Ile Gly | Trp 130 | Ser | Met | Trp Phe | Ala 135 | Glu Tyr | Leu | Phi» Leu Gin. 140 | |
| AGG | AGC | TGG GCC | AAG | GAT | GAA | AAG ACA | CTA | AAG TGG | GGT | CTC CAA Ad- | 60CJ |
| Arg | Ser | Trp Ala 145 | Lys | Asp | Glu | Lys Thr 1150 | Leu | Lys Tcp | Gty | ieu G ln IAai 115 | |
| TTG | AAA | GAC TTC | c<Cr | AGA | CCA. | CTA GCC CTT CC GTC GAG <G3T | 660 | ||||
| Leu | Lys | Asp Fhe | Pro | Arg | Pro | Phe Tp LeuAla Leu Phe Val Glu Gly |
160 165 170
176 961
| ACT CGC TTT ACT | CCC. GCA CAG CCT | CTC GCA GCT CAG GAA GAT GCG GCC | 956 | ||||||
| Thr | Arg 175 | Phe | Thr | Prc Ala Lys 180 | Leu | Leu | AUa AUm | Gln Glu Tyr AUm AUm 115 | |
| TCC | CAG | GGC | TTA | CCT ACT CCG | AGG. | TCC | ACTATC | ATT GCA CGC TAT CCG | AAl |
| Ser | Gln | Gly' | Leu | Prs ACa Pro | ArA | lhn | Trg Lea | l Ce Leu Alp OAiir Lys | |
| 190 | 195 | 200 | 205 | ||||||
| GGA | GTT | GTA | ACT | TCC AGA CAT | CATT | ATG | CCT GTG | IGA GCT CCT GCC ATT | 922 |
| Cly | Pht | Val | S er | TAuVal Csl | Ile | Met | Arg Tsp | Phe VmU Pro AUm Ilt | |
| 210 | 21C | 220 | |||||||
| TAT | GAT | ACAC | TCT | TCT CAT CGC | CCT | CAAA | GTT TCC | CCT CAA CCT TCA ATC | 840 |
| Tyr | Asp | Thr | TCur | Tal CIu Vv1 | Pro | Lys | Tsp Ser | Pito Gin Pro Thr MlS | |
| 225 | 230 | 235 | |||||||
| CTG | CGG | AIA | TTG | CAA CGG CCT | TCA | TCCA | CTC TCT | OAA GTC CCC ATC ATT | (388 |
| Leu | Arg | Ile | Leu | Ays Gly Cln | Ser | Ser | Val Ile | His Val Arg MlS Lys | |
| 240 | 245 | 250 | |||||||
| CCT | CAT | GCA | ATG | lT-l VAG VAT | CCA | AAA | TCT GTT | GAA CAC GTT TCA AAA | 1936 |
| Arg | His | Ala | M et | Ssl Alu Met | Pro | Lys | Ser Asp | Glu Asp Val Slt Lys | |
| 255 | 260 | 225 | |||||||
| TGG | TGT | ATA | AAC | CAT ATT CCT | CCA | CAG | GAT CCC | TTA CTG GAC AAG CAT | iJ84 |
| Tnp | Cys | Lys | Aep | Ha Vhe Val | Ala | Lys | Asp Tla | Lll Vla Asp Lys Hi3 | |
| 270 | 2Ί3 | 280 | 285 | ||||||
| GTC | GCT | ACA | GGC | C.CT ctt CAT | GAG | GAG | TTT aga | CCT TCT CCC CGT TTA | t m |
| Leu | Ala | Thr | Gly | TTh Che Asp | Glu | Glu | Ile Arg | Pro Ile Cly Arg Pro | |
| 290 | 295 | 330 | |||||||
| GTG | AAA | TCT | TTG | CCT CGG ACC | CTG | CTC | CCC TCC | TCC CTC CTG CTG TTT | 1080 |
| Val | Lys | Ser | Leu | Ast Val Thr | Leu | Phe | Trp Ser | Cys Leu Lla Leu Pht | |
| 305 | 310 | 315 | |||||||
| GGC | GCC | ATC | GAG | TTT CTC CAAG | TTC | A(CA | CAC CTT | CTl TCG ACG TTG AGG | 1118 |
| Gly | Ala | Ile | Glu | Ahe Che Lys | Τη? | Tler | Gln Leu | Leu Slt Thr Ttt Arg | |
| 320 | 335 | 330 | |||||||
| GGT | GTG | GCG | ttc | ACT CCC GCA | SU | ATG3 | GCC CTT | GTG ACG GGT GCC ATG | 1116 |
| Gly | Val | Ala | PhP | LCer CALa Ala | Gly | Met | Ala Leu | Val Thr Cly Val Met | |
| 335 | 340 | 334 | |||||||
| CAT | GTC | CTC | ATC | ATT CTC TCC | CAG | GCT | CTC CGC | TCG AGC TCT GCC ACG | 1124 |
| His | Val | Phe | Ile’ | tet Phe Ser | Gln | da | Glu Arg | Sen Stn Sen Ala Arg | |
| 350 | 355 | 360 | 355 | ||||||
| GCG | GCA | CGG | AAC | CGG GTC AAG | AAG | CTA | CGAAAAATGC AlGGTCCAGA | 1271 | |
| Ala | Ala | Arg | Asn | Arg ViU Lys | Lys | Glu | |||
| 370 | 375 |
| TGAGGCTCTC CTGGCGGTTC CTACGCCCAA CCTTCAAAAG lACTCTCCTT | GCATATTAGT | 1331 |
| ATTATTTCAT ATTTAGGCAG CGCCAAATTC CAGACACTGA TTCGCTCTCA | AATACCTTGT | 1391 |
| TCTGCTCCCC TCTTGTACTT GTACGCAGGA AAGCGTTTGT AGCCAlCTTT | TCCCCTCTCC | 1451 |
| CCCCCCCCCC GCCTTTCTCT GGGGAAGAAA GACTCTTTCT GCAAGCCTTC | CACTAGTTCA | 1511 |
AAA
1514
176 961 (2) INFORMACJA O SEKWENCJI NR ID.: 2 (i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 374 aminokwasy (B) RODZAJ: aminokwas (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) RODZAJ CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEKW. NR ID.: 2:
| Met 1 | Ala | He Pro Leu 5 | Val Leu Val Val Les Pro Leu Gly Leu Leu Phe | ||||||||||||
| 10 | 11 | ||||||||||||||
| Leu | Leu | Ses | Gil | LeL | IV e | VaS | Αία | nia | lle | Gln | Ala | Vaa | Sesu | Phe | Va1 |
| 20 | 25 | 30 | |||||||||||||
| Thr | Ile | Arg | Pro | Lhr | Ssr | Sso | Ses | rPe | Tyr Arg | Ag | IIa | SAsn | Arg | Phe | |
| 35 | 40 | 45 | |||||||||||||
| Leu | Ala | Glu | Leu | Leu | Top? | Leu | Gin | Leu | Va1 | Τη? | vaa | saa | SA;p | Τηο | Trp |
| 50 | 55 | 60; | |||||||||||||
| Ala | Gly | Val | Lys | Val | Gin | Ilsu | His | ALa | Asp | Glu | Glu | LTr | STsr | Arg | Ssr |
| 65 | 70 | 10 | 80 | ||||||||||||
| Met | Gly | Lys | ilu | His | Ala | Leu | Ile | Ile | Sss | Vsn | His | Arg | Ssr | TA;p | Ile |
| 85 | 99 | 95 | |||||||||||||
| Asp | Trp | Leu | Ha | Lii | Trp | ne | Lsu | Ala | Gln | Arg | Ser | Gly | Cs | Leu | Gly |
| 100 | 105 | 111 | |||||||||||||
| Ser | Thr | Leu | Ala | Val | Me t | Lyt | yys | sss | S er | Lys | Phe | Leu | Pro | Val | Ile |
| 115 | 120 | 125 | |||||||||||||
| Gly | Trp | Ser | Met | Trp | Phs | Ala | Glu | ?tso | Leu | Phe | Ius | Glu | Srg | Ser | Trp |
| 130 | 125 | 110 | |||||||||||||
| Ala | Lys | Asp | Glu | Lys | Thr | Leu | Lys | Τη? | Gly | Leu | Gin | SArg | Leu | Lys | Asp |
| 145 | 150 | 155 | 160 | ||||||||||||
| Phe | Pro | Arg | Pro | Phe | Top | Leu | Ala | Leu | Phe | Va1 | Glu | Gly | Thr | Arg | Phe |
| 165 | 110 | 117 | |||||||||||||
| Thr | Pro | Ala | Lys | Leu | Leu | ALa | Ala | Gin | Glu | Tyr | Ala | Ala | Ser | Gin | Gly |
| 180 | 110 | 190 | |||||||||||||
| Leu | Pro | Ala | Pro | Ar^g | Asn | Val | Leu | Ile | Pro | Arg | Thr | Lys | Gly | Phe | Va1 |
| 195 | 220 | 225 | |||||||||||||
| Ser | Ala | Val | Ser | Ile | Met | Arg | Asp | Phe | Val | Pro | Ala | Ila | LTS | Las | Thr |
| 210 | 215 | 220 | |||||||||||||
| Thr | Val | Ile | Val | Pro | Lls | Asp | Ssr | Pro | Glns | Pro | Thr | Met | Leu | Arg | lls |
| 225 | 233 | 235 | 240 | ||||||||||||
| Leu | Lys | Gly | Gln | Ser | Sss | Va1 | lle | His | Val | Arg | Met | Łys | Arg | His | Ala |
| 245 | 250 | 255 | |||||||||||||
| Met | Ser | Gla | Met | Pro | Lys | Ser | Asp | Glu | Asp | Va1 | Ser | Lys | Trp | Ctys | Lys |
| 260 | 225 | 270 | |||||||||||||
| Asp | Ile | Phe | Val | l.la | Lys | Asp | ALa | Lu u | Leu | Asp | Lls | His | Lus | Vla | Lir |
| 275 | 220 | 220 |
176 961
| Gly | Thr 290 | Phe | Asp | Glu | Glu | Ile 295 | Arg | Pro | Ile | Gly | Arg 3 00 | Pro | Vil | Lys | Ser |
| Leu 305 | Leu | Val | Thr | Leu | Phe 310 | Trp | Ser | <C<s | Leu | Leu 335 | Leu | Phe | Gly Ali | 111 322 | |
| Glu | Phe | Phe | Lys | Trp 325 | Thr | Gin | ILeu | Il=u | Ser 330 | Thh | Trp | Arg | Gly | Vil 335 | AAl |
| Phe | Thr | Ala | Ali 340 | Gly | Met | Ala | Leu | Val 345 | Thr | Gly | Val | Met | His 350 | Val | Phh |
| Ile | Met | Phe 355 | Ser | Gln | All | Glu | Ar cg 360 | Ser | Ser | Ser | Ala | Arg 365 | Ala | Ala | AAg |
| Asn | Arg | Vil | Lys | Lys | Glu |
370 (2) INFORMACJA O SEKWENCJI NR ID.: 3:
(i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 15 aminokwasów (B) RODZAJ: aminokwas (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) RODZAJ CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEKW. NR. ID.: 3:
Tyr Phi Vil Glu Gly Gly Arg Ser Arg Thr Gly Arg Leu Leu Asp 15 10 15 (2) INFORMACJA O SEKWENCJI NR ID.: 4:
(i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 15 aminokwasów (B) RODZAJ: aminokwas (D) TOPOLOGA.: liniowa (ii) RODZAJ CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEKW. NR. ID.: 4:
Met Phe Pro Glu Gly Thr Arg Ser Arg Gly Arg Gly Leu Leu Pro 15 10 15
176 961 (2) INFORMACJA O SEKWENCJI NR ID.: 5:
(i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 15 aminokwasów (B) RODZAJ:
(D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) RODZAJ CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEKW. NR. ID.: 5:
Leu Phu Val Glu Gly Thr Arg Phe Thr Pro Ala Lys Leu Leu Ala 1 5 10 15 (2) INFORMACJA O SEKWENCJI NR ID.: 6:
(i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 374 aminokwasy (B) RODZAJ: aminokwas (D) TOPOLOGIA: liniowa (ii) RODZAJ CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEKW. NR. ID.: 6:
| Met 1 | Ala | Ile | Pro | Leu 5 | VnG | Leu | VnG | VnG | Leu 10 | PrG | Leu | Gly Leu | Leu 15 | Phe | |
| Leu | Leu | Ser | Gly 20 | Leu | G lu | VaG | Asn | Ala 25 | Ilu | Gln | Ala | Val | Leu 30 | Phe | Val |
| Thr | Ile | Arg 35 | Pro | Phe | Ser | Lys | Ser >40 | Phe | Tyr | Arg | AVrg | lUe 45 | Asa | . Agp | ehe |
| Leu | Ala 50 | Glu | Leu | Leu | Tp | Leu 55 | Gln | Leu | Val | Trp | Val 60 | VnG | Asp | Trp | Τηρ |
| Ala 65 | Gly | Val | Lys | VnG | Gln 7G | Leu | His | Ala | Asp | Glu 75 | llG | Thr | TTyr | Arg | Ser 80 |
| Met | Gly | Lys | Glu | HSg 85 | Ala | JUig | Ile | Ile | Ser 90 | Asn | HiG | JTrg | Ser | Alp 95 | He |
| Asp | Trp | Leu | Ile 100 | Gly | Trp | He | Leu | Ala 105 | Gln | Arrg | Ser | Gly | Cys 110 | Geu | GGl |
| Ser | Thr | Leu 115 | Ala | Val | Met | Lys | Lys 120 | Ser | Ser | Lys | Phe | Leu 125 | Pro | Gv1 | Gly |
| Gly Trp 130 | Ser | Met | Tp | Phe | Ala 135 | Glu | ^yr | Leu | Phu | Leu 140 | Glu | Ger | Gsu | Tto | |
| Ala 145 | Ly3 | AAsp | Glu | Lys | Thr 150 | Iu»u | Lys | Tipi | Gly | Leu 155 | Gln | Arrg | Leu | Lj-s | Aep 160 |
| Phe | Pro | Alg | Pro | Phe 165 | Trp | Leu | Ala | Leu | Phu 170 | Val | Glu | Gly | Thr | Ger 175 | Ghe |
Thr Pro Ala Lys Leu Leu Ala Ala Gln Glu Tyr Ala Ala See Gin Gly 180 185 190
176 961
| Leu | Pro | Ala 195 | Pro | Arg | Asn | Val | Leu 200 | Ile | Pro | Aog | Thr | Lys 205 | Gly Phe | Val | |
| Seo | Ala 210 | Vv1 | Ser | Ile | Met | mo 221 | Asp | Phe | Vil | Pro | Ma 220 | Ul | Tyr Asp | Thr | |
| Thr 225 | Vil | Ile | UMl | Pito | Lys 230 | Asp | Seo | Poo | dn | ero 225 | Tho | Met | Luu | aog | Ile 2-10 |
| Leu | Lys | Gly | Gin | Ser 245 | Ser | Val | Ile | His | Vv1 220 | Mg | Met | Lys | aog | His 255 | Ma |
| Met | Ser | Glu | Met 260 | Pro | Lys | Ser | Asp | Glu 262 | Mp | Val | Ser | Lys | Tio 227 | lys | Lys |
| Asp | Ile | Phe 275 | Val | Ala | Lys | Asp | Ala 220 | leu | Luu | Jap | Lys | His 220 | Llu | IAg | Thr |
| GGy | Thr 290 | Phe | Asp | Glu | Glu | Ul 299 | Arg | Pro | Ile | Gly Arg 300 | Pito | Val | Lys | Ser | |
| Leu 305 | Leu | Val | Thr | Leu | Phe 310 | Top | Ser | cys | Leu | Leu 335 | Leu | Phe | Gly | Ma | Ile 320 |
| Glu | Phe | Phe | Trp 325 | Thr | Gln | Leu | Leu | Ser 330 | Thr | Top | Mg | Gly | Val 335 | Ma | |
| Phe | Thr | Ala | Ala 340 | Gly | Met | Ala | Leu | ual 345 | Thr | Gly | Val | Met | His 33^ | Vv1 | Phe |
| Ile | Met | Phe 355 | Ser | Gln | Ala | Glu | AjaJ 330 | S er | S su | ler | Ala | Arg 335 | Ma | Mg | Arg |
| Asn | Arg 370 | Val | Lys | Lys | Glu |
(2) INFORMACJA O SEKWENCJI NR ID.: 7:
(i) CHARAKTERYSTYKA SEKWENCJI:
(A) DŁUGOŚĆ: 295 aminokwasów (B) RODZAJ: aminokwas (D) TOPOLOGIA:: liniowa (ii) RODZAJ CZĄSTECZKI: białko (xi) OPIS SEKWENCJI: SEKW. NR. ID.: 7:
| Met 1 | AGa | Met | Ala | AGi 5 | AGa | Vil | Ilu | VaG | Pro 10 | Ueu | GGy | IGe | Leu | Phe 15 | Phe |
| IGe | Seo | Gly | Leu 20 | Vil | ViG | Asn | Luu | Luu 25 | Gln | Arg | Seo | GGy | yys 30 | Leu | Gly |
| Suo | AGa | Leu 35 | Ala | ViG | Met | Lys | Lys 40 | Ser | Seo | Uys | Phe | Leu 45 | Pro | Vil | Ile |
| Gly | Trp | Sur | Met | Trp | Phe | Suo | Glu | Tyo | Leu | Phe | Ueu | GGu | Arg | Asn | Trp |
55 60
176 961
| Ala Lys Asp Glu Ser Thn | Ilju Lys | Ser Gly Leu Gln Arg Leu Asm Asp | |||||||||||||
| 65 | 10 | 75 | 80 | ||||||||||||
| Phe | Pro | Ar | Pro | Phe | Trp | Leu | Ala | Leu | Phe | aal | Glu | Gly | Thr | Arg | Phe |
| 85 | 90 | 95 | |||||||||||||
| Tho | Glu | Ala. | Lys | Leu | Lys | Ala | AL a | Gln | Glu | Tyo | Ala | Ala | Suo | Ser | Glu |
| 100 | 110 | 110 | |||||||||||||
| Leu | Pro | V^1 | Pro | Arg | Asm | Val | Leu | Ile | Pro | Arg | Thr | Lys | Gly | Phe | Val |
| 115 | 12S | 115 | |||||||||||||
| Ser | Ala | la! | Ser | Asn | Met | AOgj | Ser | Plie | Val | Pro | Ala | Ile | Tyo | Asp | Met |
| 130 | 135 | 140 | |||||||||||||
| Thr | Val | AAl | Ile | Pro | Lys | Thr | Ser | Pro | Pro | Pro | TIo | Met | Leu | Arg | Leu |
| 145 | 110 | 115 | 115 | ||||||||||||
| Phe | Lys | Gly | Gin | Ppo | Sgu | Aal | aal | His | aal | His | Ile | Lys | Cys | His | Ser |
| 165 | 117 | :775 | |||||||||||||
| Met | Lys | Asp | Leu | PrL | ulu | Pro | Gis | Asp | GUo | Ul | Ala | Gin | Trp | Cyl | Ato |
| 180 | 188 | 190 | |||||||||||||
| Asp | Gin | PPe | Val | Tho | Lys | Asp | AALa | Leu | Leu | sp s | Gss | His | Ile | Ala | AAa |
| 195 | 220 | 205 | |||||||||||||
| Asp | Tir | Phe | Ala | Gly | Gln | Lys | Glu | lin | Asn | Ile | lly | Arg | Pro | Ile | Lyy |
| 210 | 215 | 220 | |||||||||||||
| Ser | Leu | Ala | vaa | Aal | Leu | Ser | Tipi | Ala | cys | Leu | Leu | TLo | Leu | Gly | AL a |
| 225 | 230 | 235 | 220 | ||||||||||||
| Met | Lys | Phe | Leu | His | Trp | Ser | Js^n | Leu | Phe | Ser | Guo | Tips | Lys | Gly | 11 e |
| 245 | 225 | 555 | |||||||||||||
| Ala | Leu | S ee | Ala | Leu | G ly | Leu | Gly | Ile | Ul | TGg | Lgu | . Gus | OLt | Cgu | 11 e |
| 260 | 225 | 270 | |||||||||||||
| Leu | Ile | Arg | Ser | Ser | Iln | Suo | Glu | Arg | Ser | Tho | Pro | Ala | Lys | aal | Ala |
| 275 | 280 | 235 |
Pro Ala Lys Pro Lys Asp Asn 290 295
176 961
| o | O | U | U | Eh | Eh | Ęh | U | U | t? | |||||||
| o | o | H | i-» | Eh | U | k< | £h | << | O | |||||||
| U pi | U Pi | U | »4 | H Pu | U >4 | < Eh | O Q | U > | E< >» | «i p; | ||||||
| o | σ | O | U | o | |H | O | *i | |||||||||
| u | u | h | u | *i | Eh | U | Ki | 2 | ||||||||
| U Oj | u Oi | H | Cc | O CU | u o | o w | < H | U | o w | u σ | ||||||
| ra | Ό | o | O | Eh | o | Ej | u | |||||||||
| U | o | Eh | o | Eh | tt | «ί | Eh | u | Eh | |||||||
| o < | U Pi | U | ►4 | Ki Pi | U ,4 | CD C3 | U Q | U »4 | o Ki | U »4 | ||||||
| o | σ | tt | U | E-? | Eh | Ł. | Eh | |||||||||
| o | u | H | Eh | u | *£ | O | y | ί-t | O | |||||||
| o o | U pi | U | «4 | < H | H £ | O Q | < 03 | «< Eh | Η fc | U O | ||||||
| o | U | O | O | U | Eh | O | □ | |||||||||
| tt | o | U | Eh | U | O | *2 | O | □ | ||||||||
| o w | o o | < Eh· | U «4 | O < | U Pi | ·< ca | Eh £ | Eh £ | ||||||||
| 4 | u | u | O | O | Eh | Ej | u | □ | ||||||||
| o | o | E« | Eh | Eh | <3 | kC | O | Eh | k£ | |||||||
| □ o | u ca | O >4 | O > | U >4 | a as | U « | U O | < 2 | 3 « | |||||||
| H | eh | O | ł, | u | o | Eh | Eh | Ki | ||||||||
| O | U | £h | ft | Eh | tt | Eh | U | |||||||||
| u cu | O Q | U | CU | fc- Cu | o w | U t4 | < £ | U >4 | E< W | U J | ||||||
| o | 4 | U | u | U | O | |||||||||||
| u | O | u | *2 | U | U | o | U | |||||||||
| Eh 03 | O Pi | U | »4 | U >4 | u < | u a | Eh 03 | Eh U | Eh £ | < £h | ||||||
| < | u | D | U | e> h | ł“ł | $ | H | O | r4 | u | H O | |||||
| rU | Eh | r-i | E-« | r-i | Eh H | Eh | m | Ej | in | Ό | r* | □ | σι >i | |||
| r-ł O (4 r-i | U >4 | in | O | > | r* | U > | «Λ | Eh i4 H | U > H | < H | H | U o | r4 | U Ό | H 3 « | |
| w n | \ | \ | \ | |||||||||||||
| \ «£ \ O | r-J | O | r-ł | u | r-i | U H | O | H | U | H | •“ί | rH | Eh | H Ki | ||
| Η E* rH | U | w | E- | r-i | U | O- | Eh n | σι | Eh | m | U | r-ł | Eh | o- 3 | ||
| n u »4 <λ | < Ε-» | r-i | O | > | OJ | O tt | 03 | Eh Cu n | n | < H | Eh 03 | m | < H | in O w | ||
| U | O | U | u | Eh | U | Eh | Eh | E« | ||||||||
| O | H | «i | fcH | Eh | U | Eh | ||||||||||
| U CU | U >4 | U >3 | u o | *i Pi | u > | U »4 | U Pi | O > | O Q | |||||||
| O | E< | O | u | u | Eh | <Ś | o | *4 | □ | |||||||
| O | O | H | Eh | O | U | u | «i | |||||||||
| «ί OJ | u ca | O | > | < w | 3 £ | o u | U < | u a | U CU | 3 « | ||||||
| □ | u | O | o | U | «< | Eh | u | c, | u | |||||||
| O | o | £-« | U | Eh | U | u | La | u | ||||||||
| U CU | H U | U | tJ | O << | < W | U «i | U K | U κί | U »4 | o Ki | ||||||
| o | u | O | o | O | □ | o | O | U | ra | |||||||
| o | fi | U | Ki | U | u | Ki | Eh | Eh | 0 | |||||||
| U Pi | O Q | U | CU | *2 £ | U pi | Eh £ | o ω | Eh >4 | E· Cu | Eh £ | ||||||
| u | U | υ | u | Eh | O | ,ΐ | U | U | ||||||||
| o | U | H | Eh | o | O | Λ | Ej | |S$ | o | |||||||
| u « | o < | < | M | U > | U Pi | Eh £ | < « | < M | *i « | Ki 03 | ||||||
| H | H | O | U | U | u | E< | a | u | P | |||||||
| O | O | U | Eh | O | u | u | o | |||||||||
| U Pi | «i E” | o | K< | <3 w | Eh > | U Q | o o | Eh £ | Eh 03 | < ca | ||||||
| Eh | U | o | U | u | O | O | ||||||||||
| U | U | H | Eh | Eh | Eh | Eh | o | u | <5 | |||||||
| U CU | U CU | * 55 | U »4 | £h Cu | □ > | < 2 | U O | Eh ca | o w | |||||||
| E< | u, | O | U | U | O | Eh | O | o | ||||||||
| U | f-t | U | O | u | Eh | U | Eh | oi | Eh | |||||||
| u cu | h Cu | □ | O O | << 03 | o > | Eh 03 | < H | |h »4 | ||||||||
| U | H | o | U | u H | o | r-i | H | U | H | □ | rJ Eh | |||||
| O | U | H | o | r-i | O | r-i | *< o | u | OJ | o | <· | Eh | VD | Ki | ® Eh | |
| υ Pi h | O < | u | CU | KO | Eh 03 | 03 | *ί «Η | Eh £ | H | < Pi | rJ | U J | r4 | h fcH Cu | ||
| 05 | . \ | '•'χ | \ | |||||||||||||
| rlU | r-i O | H O | r-i O HU | H U | H O | r-i O | H u | |||||||||
| \U r-i O | oj U | co E-t | U O E-· | KO < | OJ U | 00 Eh | ·<? E-T | |||||||||
| ,-iUCUOOOHU | KHO»4ojE^03nO>nE-’>< |
176 961
| E-« | < | Ε» | O | O | <4 | |
| U | □ | E-· | o | U | ||
| < H | fi a | H fa | fi s | *< X | o < | o a |
| P | fi | o | ||||
| U | < | u | U | H | a | |
| H fa | U 0» | O β | < H | O «< | O > | < a |
| U | H | < | Ej | Ε-» | e« | |
| σ | Ό | O | U | fi | Ej | |
| O tó | O fi | U Pi | U CU | u a | Ε-» fa | *ί H |
| e· | O | Ό | 4[ | £-« | E- | |
| u | u | E« | ti | O | r< | < |
| < E-> | u cu | < 2 | u σ | u a | < H | o w |
| 4 | E-· | rf | U | o | ||
| U | H | Γ» | U | pi | fi | |
| O O | < w | U CU | 3 a | O Q | o w | |
| O | U | u | o | Ej | ||
| < | o | O | u | Ej | oi | fi |
| o ω | o o | < W | Ε W | < 2 | < a | O Q |
| u | c | < | E« | a | H | U |
| fi | H | fi | o | O | H | |
| o > | u σ | O > | O Q | u a | E U | P fa |
fa
O
H fa
O u
O «<
| O | σ |
| H | H |
| U β | o > |
| U | F> |
| H | o |
| U β | o o |
| O | o |
| □ | o |
| H U | < a |
| O | o |
| U | □ |
| E-« W | H J£ |
| O | O |
| O | O |
| E-« 3: | < !« |
| U | O |
| O | |
| H fa | H W |
| 1—1 | |
| O | r~ o |
| m H | |
| «-ł | |
| O | H U |
| U | Η H |
| < H | H U U |
| o | C |
| E-> | < |
| O > | o σ |
| O | < |
| u | |
| U 4 | < H |
| o | O |
| H | a |
| O | |
| U | << |
| H W | < a |
| 3 | o |
| 3 a | a |
| o | o |
| E-5 | |
| □ > | F· fa |
| < | O |
| U | << |
| o a | c W |
\o ta u s π s n nu >nUC< r:Ue;nClMnOQ\OO\O — Η H
176 961
| <2 | O | |
| u o | < 2 | |
| u | ||
| u | rf | |
| H 03 | «. | « |
| Ό | ||
| H | □ | |
| « | ||
| O | 5 | |
| 8 2 | O | ω |
| U | σ | |
| *ΐ | ||
| < I-I | ||
| U C- | § | |
| H fc. | 3 | |
| u | u | |
| H | H | |
| □ > | □ > |
a u
Ε· ϋ >4
E*
Ο
Ο < 8
Ε« >« □
Η * 8
U Κ
Ο << ο&
Ε- (L
S
O W
O o
< (H o >4 u
u < 03 o
o o
H E<
o o
U O E-< 03
F· &>
Η . «I
O > E« >
O <
O O < (H < H
1141/381 1171/391
| o | &. | o | < | < w | O »4 | |
| C5 | e? | E-i | ||||
| O | u | O | Ł | |||
| O | < | Ό Q | E-· | >1 | E- U | H fc |
| o | O | *C | F< | O | ||
| o | li | H | U | O | ||
| < | « | ϋ> | H | Ei 03 | □ < | |
| o | u | fi | U | U | ||
| u | P | < | U | o | ||
| □ | < | u>3 | υ | K | U Λ | U Λ |
| < | b | α | u | |||
| u | fcl | H | Η | u | ||
| E-* | 03 | < | I-I | U ,4 | U A | |
| u | σ | < | O | u | ||
| o | <3 | H | fi | u | ||
| < | 03 | Oh | 4 | U 4 | U Oł | |
| O | H | u | ||||
| u | < | li | E* | o | ||
| H | 03 | o α | O | > | O > | U Λ |
| O | 4 | Ei | U | |||
| o | o | £i | < | U | ||
| U K | o o | £ | 4 | O O | U ftl |
O <
Γ*·» '*'**=>
176 961 s s Q tt tt 0 ° j-1 ° tt O
O ° tó
H 0 O tt ° ° tt
V) ° 0 tt tt ° ° tt °
O O £-j O
O e 0 o ° tt 0 ° tt ° > tt tt 0 0 tt ’
| tt | 4« |
| hi | * |
| tt | |
| Pi | |
| e-4 | 4- |
| Cm | + |
| tt | Sc |
| E-i | 4- |
| 0 | Sc |
| tt | -ic |
| > | 4* |
| tt | sc |
X 2 U tt U 2
V] W £ ff™i tr—i
CU CU £ s: 3 Λ:
176 961
A: mutant JC201
FIG. 3
C : mutant * cDNA kukurydzy
176 961
176 961
o ui »0 cm 14 ”
O ’Τ o
Pr £-ł 00 ftl 0« Pi ’<> E-ł 00 ϋ »0.
»° W
| 1 | O | 00 | Ο | W | 09 | ||
| 8 | 09 | ►4 | > | «Ο | |||
| 8 | O | U | ©0 | U | ο | ο fe | 00 |
| 8 | .-} | o | 09 | U | η | c— ρ | 99 |
| 8 | e-4 | ω | οο | W | -4 rf | 99 | |
| 8 | Ρί | «9 | Pi | 00 |
σ
FIG.5 n/2)
311 aa u
λ:
<o
CL (1)
N
Cr
| 4 | >s *3» | Pr ’· | Pr O | ł-3 | l | w | ||
| w | »3» | o | CJ β | F «“! | o O | 1 | O | & |
| > | o—l | fc> * | 5—i | c- > | 1 | c-» | o | |
| 9<W | 90 | > | 14 | 1 | c-4 | H | ||
| (0 | p | > | 1 | > | ||||
| (0 | Q | P> · | rf | O | 1 | Pr | ||
| £ s | t-ł | I | rf | 8 | p | |||
| ϋ | Pr ’ | rf | Jg | 1 | Łi | |||
| Γ~~ | i) | H · | J£ | 5 | 8 | 14 | ||
| c | 0. | rf | Q | 8 | W | |||
| φ-Η | Λ ” | So | > | 1 | w | |||
| || | Ό O | |||||||
| -Η'ΟΙ | ||||||||
| <0 | «1 | «0 | <« | |||||
| N | N | N | N | |||||
| Ό | tn | Ό | j: | Ό | Ji | Ό | ||
| >, | • | >1 | <e | >. | « | >1 | ||
| O | Ci | & | Cr | CL | Cr | |||
| 3 | rH | 3 | V | 3 | 1) | 3 | ||
| Ji | m | Ji | N | Ji | N | ji | ||
| 3 | 3 | Cl | 3 | Cr | 3 | |||
| Ji | Ji | Ji | a |
rzepak S S KFLPVIGWSMWFSE YLFLERNWAKDESTLKSGLQRLNDFPRPFWLALFVEGTRFTEAK
60 70 _ 80 90 100
176 961
190 200 210 220 230 240 kukutydza LLAAQEYAASQGLPAPRNVLIPRTKGFVSAVSIMRDFVPAiyDTTVIVPKDSPQPTMLRI .0 tt
F
CU
CU
CU
F tt o CU m Hł r-i £
Q
ΪΗ
H rtj O CU tt sć (0 &
Φ
N ki
| O | ·« | O | O | oo | ω | O | |||
| Hł | 0· | Hi | CN | 9 | cn | 00 | |||
| & | s | CN | O | 99 | O CN | ||||
| 2 | e | σ | 03 | 09 | 03 | ||||
| H | Cd | & | 03 | ||||||
| W | • | tt | £ | 0 | tt | ||||
| W | • | σ | H | 99 | Hł | ||||
| Q | • | o | Cm | O | Hł | ||||
| i | > | © | Hł | ||||||
| Cu | oo | O | tc | 9 | σ | ||||
| o | F | 99 | F | O | in | X | QO | £ | o |
| σι | ϋ | 9 | Q | r—1 | n | |> | U | P- | |
| CN | Eh | 0 | 2. | CN | O | hJ | CN | ||
| 99 | 2 | F | 99 | F | |||||
| »4 | 9 | HI | > | 9 | Hł |
O tc tt
O h!
a
Q
SC W Q >4 a *
Q o
H
O t4 ϋ
W VO
| rH | CN | tt | 99 | tt | CN | Pm | 9 | >4 | CN | |
| 0 | Fi | < | 00 | |||||||
| > | «9 | > | » | Hł | ||||||
| Em | • 9 | Cu | O | 99 | O | |||||
| Hł | σ | 0 | ||||||||
| Q | 90 | Q | ę | 9« | »2 | |||||
| tt | • | tt | F | O | 03 | |||||
| U | 0« | U | O | 03 | 00 | 03 | ||||
| O | O | & | 00 | 5 | O | n | >4 | o | Im | O |
| Π | r-~ | tt | 0 | O | CA | n | i4 | 00 | fc4 | cn |
| »—i | CN | 03 | • | < | f—ł | σ | 9 | g | CN | |
| > | 9 | HI | 0 | 03 | ||||||
| Q | 9 | UJ | 99 | 3 | ||||||
| W | 9 | Q | w | 0 | SC | |||||
| Q | O | W | u. | 9 | >4 | |||||
| 03 | oo | 03 | tt | 99 | Ul | |||||
| tt | • | W | w | 0 | tt | |||||
| fU | 99 | CU | o | Hł | 9 | X | ||||
| O | o | £ | 9 | >4 | o | CN | 2 | ©0 | 2 | o |
| CM | VO | W | 0 | Q | co | o | o | 09 | u | 3· |
| rH | CN | 03 | 9 | tt | pH | U. | 9 | »4 | CN | |
| X | 09 | £ | h5 | F | ||||||
| rtj | 0 | 03 | hl | 09 | hJ | |||||
| E | 99 | K | c4 | 09 | >4 | |||||
| tt | u | U | 00 | U | ||||||
| tt | 99 | tt | 0) | 9 | ||||||
| X | 9 | Hł | & | 09 | s | |||||
| tt | 0 | SC | o | PM | 03 | |||||
| O | O | b> | 90 | > | o | t“i | v4 | 00 | ul | O |
| rH | cn | K | 99 | K | u- | n | F | 9 | 5 | n |
| rH | CN | H | 9 | > | i—i | > | 99 | CN | ||
| > | OO | > | ||||||||
| 03 | 99 | 03 | t4 | 90 | f4 | |||||
| 03 | 9 | CU | 03 | 9« | 03 | |||||
| σ | 00 | σ | tt | 09 | tt | |||||
| u | 09 | o | > | 0 | Hł | |||||
| tt | 99 | w | CU | OO | cu | |||||
| >4 | O | U) | o | 2 | •9 | 2 | ||||
| <c | o | |||||||||
| N | Γ7 | «3 | ||||||||
| X3 | N | |||||||||
| a; | Ό | a; | ||||||||
| U | <a | s. | (0 | |||||||
| 3 | o. | U | cx | |||||||
| a; | o | 3 | 5) | |||||||
| 3 | N | AS | N | |||||||
| a: | U | 3 | M |
CM (PM
U ui 0 tt ·
os · o 03 o°
O « » £ * n n
Ό Ai > (0
M (X
Φ
AC N hi
AC
RSTPAKVAPAKPKDN
290
Departament Wydawnictw UP RP. Nakład 70 egz. Cena 4,00 zł.
Claims (8)
- Zastrzeżenia patentowe1. Nowa sekwencja DNA, zrekombinowana lub izolowana, zwłaszcza kodująca enzym o aktywności acylotransferazy związanej z błoną, zwłaszcza o aktywności 2-acylotransferazy, wybrana z grupy obejmującej sekwencję DNA zawierającą sekwenqę DNA SEQ ID NO: 1 kodującą co najmniej od Met44 do Stopąi 8 w SEQ ID NO: 2 lub jej nić komplementarną, sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z sekwencją DNA SEQ ID NO: 1 lub jej nicią komplementarną w warunkach ostrych oraz sekwencje kwasów nukleinowych kodujące białko kodowane przez sekwencję DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon jest zastąpiony kodonem synonimicznym i sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z sekwencją DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon antysensowny jest zastąpiony synonimicznym kodonem antysensownym.
- 2. Nowe białko o sekwencji aminokwasów SEQ ID NO: 2, kodowane przez zrekombinowaną lub izolowaną sekwencję DNA wybraną z grupy obejmującej sekwencję DNA zawierającą sekwencję DNA SEQ ID NO: 1 kodującą co najmniej od Met44 do Stop4i8 w SEQ ID NO: 2 lub jej nić komplementarną, sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z sekwencją DNA SEQ ID NO: 1 lub jej nicią komplementarną w warunkach ostrych oraz sekwencje kwasów nukleinowych kodujące białko kodowane przez sekwencję DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon jest zastąpiony kodonem synonimicznym i sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z sekwencją DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon antysensowny jest zastąpiony synonimicznym kodonem antysensownym.
- 3. Gospodarz mikroorganizm zdolny do ekspresji sekwencji DNA wybranej z grupy obejmującej sekwencję DNA zawierającą sekwencję DNA SEQ ID NO: 1 kodującą co najmniej od Met44 do Stop418 w SEQ ID NO: 2 lub jej nić komplementarną, sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z sekwencją DNA SEQ ID NO: 1 lub jej nicią komplementarną w warunkach ostrych oraz sekwencje kwasów nukleinowych kodujące białko kodowane przez sekwencję DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon jest zastąpiony kodonem synonimicznym i sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z sekwencją DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon antysensowny jest zastąpiony synonimicznym kodonem antysensownym.
- 4. Nowe białko wykazujące co najmniej 40% homologii z białkiem o sekwencji aminokwasów SEQ ID NO: 2, kodowanym przez zrekombinowaną lub izolowaną sekwencję DNA wybraną z grupy obejmującej sekwencję DNA zawierającą sekwencję DNA SEQ ID NO: 1 kodującą co najmniej od Met44 do Stop418 w SEQ ID NO: 2 lub jej nić komplementarną, sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z sekwencją DNA SEQ ID NO: 1 lub jej nicią komplementarną w warunkach ostrych oraz sekwencje kwasów nukleinowych kodujące białko kodowane przez sekwencję DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon jest zastąpiony kodonem synonimicznym i sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z sekwencją DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon antysensowny jest zastąpiony synonimicznym kodonem antysensownym.
- 5. Nowy fragment sekwencji DNA wybranej z grupy obejmującej sekwencję DNA zawierającą sekwencję DNA SEQ ID NO: 1 kodującą co najmniej od Metąą do Stop418 w SEQ ID NO: 2 lub jej nić komplementarną, sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z sekwencją DNA SEQ ID NO: 1 lub jej nicią komplementarną w warunkach ostrych oraz sekwencje kwasów nukleinowych kodujące białko kodowane przez sekwencję DNA176 961SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon jest zastąpiony kodonem synonimicznym i sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z sekwencją DNA SeQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon antysensowny jest zastąpiony synonimicznym kodonem antysensownym, zawierający co najmniej 15 nukleotydów.
- 6. Nowy DNA kodujący RNA antysensowny do RNA kodowanego przez sekwencję DNA wybraną z grupy obejmującej sekwencję DNA zawierającą sekwencję DNA SEQ ID NO: 1 kodującą co najmniej od Metąą do Stop418 w SEQ ID NO: 2 lub jej nić komplementarną, sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z sekwencją DNA SEQ iD NO: 1 lub jej nicią komplementarną w warunkach ostrych oraz sekwencje kwasów nukleinowych kodujące białko kodowane przez sekwencję DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon jest zastąpiony kodonem synonimicznym i sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z sekwencją DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon antysensowny jest zastąpiony synonimicznym kodonem antysensownym.
- 7. Nowy DNA kodujący rybozym specyficzny dla RNA kodowanego przez sekwencję DNA wybraną z grupy obejmującej sekwencję DNA zawierającą sekwencję DNA SEQ ID NO: 1 kodującą co najmniej od Met44 do Stop4i8 w SEQ ID NO: 2 lub jej nić komplementarną, sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z sekwencją DNA SEQ ID NO: 1 lub jej nicią komplementarną w warunkach ostrych oraz sekwencje kwasów nukleinowych kodujące białko kodowane przez sekwencję DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon jest zastąpiony kodonem synonimicznym i sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z sekwencją DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon antysensowny jest zastąpiony synonimicznym kodonem antysensownym.
- 8. Nowy DNA, zrekombinowany lub izolowany, zawierający promotor naturalnie kierujący ekspresją genu z wytworzeniem białka o sekwencji aminokwasów SEQ ID NO: 2, kodowanego przez zrekombinowaną lub izolowaną sekwencję DNA wybraną z grupy obejmującej sekwencję DNA zawierającą sekwencję DNA SEQ ID NO: 1 kodującą co najmniej od Met44 do Stop4i8 w SEQ ID NO: 2 lub jej nić komplementarną, sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z sekwencją DNA SEQ ID NO: 1 lub jej nicią komplementarną w warunkach ostrych oraz sekwencje kwasów nukleinowych kodujące białko kodowane przez sekwencję DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon jest zastąpiony kodonem synonimicznym i sekwencje kwasów nukleinowych hybrydyzujące z sekwencją DNA SEQ ID NO: 1, w których co najmniej jeden kodon antysensowny jest zastąpiony synonimicznym kodonem antysensownym lub białka wykazującego co najmniej 40% homologii z tym białkiem o sekwencji aminokwasów SEQ ID NO: 2.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB929225845A GB9225845D0 (en) | 1992-12-10 | 1992-12-10 | Modified plants |
| PCT/GB1993/002528 WO1994013814A1 (en) | 1992-12-10 | 1993-12-10 | Dna encoding 2-acyltransferases |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL309327A1 PL309327A1 (en) | 1995-10-02 |
| PL176961B1 true PL176961B1 (pl) | 1999-08-31 |
Family
ID=10726430
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL93309327A PL176961B1 (pl) | 1992-12-10 | 1993-12-10 | Nowa sekwencja DNA, nowe białko, gospodarz mikroorganizm, nowy fragment sekwencji DNA i nowy DNA |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US5843739A (pl) |
| EP (1) | EP0673424B1 (pl) |
| AT (1) | ATE396271T1 (pl) |
| AU (1) | AU694098B2 (pl) |
| CA (1) | CA2151147A1 (pl) |
| CZ (1) | CZ294457B6 (pl) |
| DE (1) | DE69334219D1 (pl) |
| GB (1) | GB9225845D0 (pl) |
| HU (1) | HU222403B1 (pl) |
| PL (1) | PL176961B1 (pl) |
| SK (1) | SK76395A3 (pl) |
| WO (1) | WO1994013814A1 (pl) |
Families Citing this family (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB9225845D0 (en) | 1992-12-10 | 1993-02-03 | Nickerson Biocem Ltd | Modified plants |
| US5563058A (en) * | 1994-04-06 | 1996-10-08 | Calgene, Inc. | Plant lysophosphatidic acid acyltransferases |
| US5910630A (en) * | 1994-04-06 | 1999-06-08 | Davies; Huw Maelor | Plant lysophosphatidic acid acyltransferases |
| DE4433307A1 (de) * | 1994-09-19 | 1996-03-21 | Norddeutsche Pflanzenzucht Han | Ein isoliertes Nuckleinsäurefragment und daraus abgeleitete Produkte |
| DE69533516T2 (de) * | 1994-10-26 | 2005-08-18 | Cargill, Inc., Wayzata | Fae1gene und deren anwendungen |
| GB9502468D0 (en) * | 1995-02-09 | 1995-03-29 | Gene Shears Pty Ltd | DNA Sequence |
| GB9510927D0 (en) * | 1995-05-31 | 1995-07-26 | Ca Nat Research Council | Plant and seed oil modification |
| US5959131A (en) * | 1995-12-07 | 1999-09-28 | Kraft Foods, Inc. | Nutritionally superior fat for food compositions |
| FR2785911B1 (fr) * | 1998-11-18 | 2001-01-26 | Agronomique Inst Nat Rech | Gene codant pour une acyltransferase de colza, et ses utilisations |
| DE60014919T2 (de) * | 1999-08-06 | 2005-10-13 | Genentech, Inc., South San Francisco | Peptidantagonisten des faktors viia |
| AU2001231039A1 (en) * | 2000-01-20 | 2001-07-31 | Mci Worldcom, Inc. | Intelligent network and method for providing voice telephony over atm and alias addressing |
| CA2399873A1 (en) * | 2000-02-11 | 2001-08-16 | Incyte Genomics, Inc. | Drug metabolizing enzymes |
| GB0031558D0 (en) | 2000-12-22 | 2001-02-07 | Biogemma Uk Ltd | Elongase promoters |
| US7164002B2 (en) | 2002-02-06 | 2007-01-16 | Genentech, Inc. | FVIIa antagonists |
| EP1613746B1 (de) | 2003-03-31 | 2013-03-06 | University Of Bristol | Neue pflanzliche acyltransferasen spezifisch für langkettige, mehrfach ungesättigte fettsäuren |
| US20060246206A1 (en) * | 2005-04-28 | 2006-11-02 | Mitsugu Watanabe | Preparation of oyster flesh extracts |
| IL188983A (en) * | 2008-01-23 | 2014-01-30 | Bromine Compounds Ltd | Delay in combustion in fabrics |
| EP2430166A1 (en) | 2009-05-13 | 2012-03-21 | BASF Plant Science Company GmbH | Acyltransferases and uses thereof in fatty acid production |
| NO2585603T3 (pl) | 2010-06-25 | 2018-05-19 | ||
| WO2016075327A2 (en) | 2014-11-14 | 2016-05-19 | Basf Plant Science Company Gmbh | Production of pufas in plants |
| CN112708628B (zh) * | 2021-01-19 | 2022-05-03 | 河北农业大学 | 玉米百粒重主效QTL位点qKW4a及其候选基因和应用 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0320500B1 (en) * | 1983-01-13 | 2004-11-17 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Non-oncogenic ti plasmid vector system and recombinant DNA molecules for the introduction of expressible genes into plant cell genomes |
| ATE57390T1 (de) * | 1986-03-11 | 1990-10-15 | Plant Genetic Systems Nv | Durch gentechnologie erhaltene und gegen glutaminsynthetase-inhibitoren resistente pflanzenzellen. |
| EP0265556A1 (en) * | 1986-10-31 | 1988-05-04 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Stable binary agrobacterium vectors and their use |
| GB8810120D0 (en) * | 1988-04-28 | 1988-06-02 | Plant Genetic Systems Nv | Transgenic nuclear male sterile plants |
| AU1163392A (en) * | 1991-01-16 | 1992-08-27 | Kirin Beer Kabushiki Kaisha | Chilling resistant plants and their production |
| GB9225845D0 (en) | 1992-12-10 | 1993-02-03 | Nickerson Biocem Ltd | Modified plants |
-
1992
- 1992-12-10 GB GB929225845A patent/GB9225845D0/en active Pending
-
1993
- 1993-12-10 WO PCT/GB1993/002528 patent/WO1994013814A1/en not_active Ceased
- 1993-12-10 AU AU56567/94A patent/AU694098B2/en not_active Ceased
- 1993-12-10 CZ CZ19951506A patent/CZ294457B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1993-12-10 HU HU9501694A patent/HU222403B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1993-12-10 US US08/454,267 patent/US5843739A/en not_active Expired - Fee Related
- 1993-12-10 CA CA002151147A patent/CA2151147A1/en not_active Abandoned
- 1993-12-10 DE DE69334219T patent/DE69334219D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1993-12-10 PL PL93309327A patent/PL176961B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1993-12-10 SK SK763-95A patent/SK76395A3/sk unknown
- 1993-12-10 AT AT94902058T patent/ATE396271T1/de not_active IP Right Cessation
- 1993-12-10 EP EP94902058A patent/EP0673424B1/en not_active Expired - Lifetime
-
1997
- 1997-09-30 US US08/941,319 patent/US5945323A/en not_active Expired - Fee Related
-
1998
- 1998-03-05 US US09/035,098 patent/US6194640B1/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO1994013814A1 (en) | 1994-06-23 |
| PL309327A1 (en) | 1995-10-02 |
| ATE396271T1 (de) | 2008-06-15 |
| GB9225845D0 (en) | 1993-02-03 |
| DE69334219D1 (de) | 2008-07-03 |
| CZ150695A3 (cs) | 1998-03-18 |
| EP0673424A1 (en) | 1995-09-27 |
| US5843739A (en) | 1998-12-01 |
| HU222403B1 (hu) | 2003-06-28 |
| HU9501694D0 (en) | 1995-08-28 |
| US5945323A (en) | 1999-08-31 |
| EP0673424B1 (en) | 2008-05-21 |
| SK76395A3 (en) | 1995-09-13 |
| US6194640B1 (en) | 2001-02-27 |
| CA2151147A1 (en) | 1994-06-23 |
| AU694098B2 (en) | 1998-07-16 |
| CZ294457B6 (cs) | 2005-01-12 |
| AU5656794A (en) | 1994-07-04 |
| HUT71785A (en) | 1996-02-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL176961B1 (pl) | Nowa sekwencja DNA, nowe białko, gospodarz mikroorganizm, nowy fragment sekwencji DNA i nowy DNA | |
| Iba et al. | A gene encoding a chloroplast omega-3 fatty acid desaturase complements alterations in fatty acid desaturation and chloroplast copy number of the fad7 mutant of Arabidopsis thaliana. | |
| ES2380178T3 (es) | Reguladores del metabolismo de lípidos en plantas | |
| RU2272073C2 (ru) | Новый класс ферментов в биосинтетическом пути получения триацилглицерина и рекомбинантные молекулы днк, кодирующие эти ферменты | |
| JP4109315B2 (ja) | 脂肪酸エロンガーゼ | |
| AU781089B2 (en) | Elongase promoters for the tissue-specific expression of transgenes in plants | |
| JPH09511650A (ja) | 植物リゾホスファチド酸アシルトランスフェラーゼ | |
| JP2002502263A (ja) | 植物チオエステラーゼの工学的操作および新規な基質特異性を有する植物チオエステラーゼ | |
| PT973920E (pt) | Região reguladora 5' de oleoresina para modificar a composição lipídica de sementes de plantas | |
| PT634491E (pt) | Teor em oleo modificado e sementes | |
| CN106998666A (zh) | 低或无饱和脂肪酸的转基因卡诺拉 | |
| CN1898383B (zh) | 来自地钱的不饱和脂肪酸合成系统酶基因及其利用 | |
| CN112969792A (zh) | 用于在植物中产生高水平pufa的改进方法 | |
| CN113412332A (zh) | 用于在植物中产生高水平pufa的改进方法 | |
| ES2292957T3 (es) | Expresion de fosfolipido: diacilglicerin-aciltransferasa (pdat) para la obtencion de lipidos de almacenaje vegetales que contienen acidos grasos poliinsaturados. | |
| US20220025391A1 (en) | Improved method for the production of high levels of pufa in plants | |
| US20050125858A1 (en) | Oil biosynthesis | |
| Nampaisansuk | Molecular cloning and analysis of the genes for cotton palmitoyl-acyl carrier protein thioesterase (PATE) and Δ-12 fatty acid desaturase (FAD2-3) and construction of sense and anti-sense PATE plasmid vectors for altering oilseed composition of transgenic cotton plants | |
| Roscoe | Author to whom all correspondence should be sent | |
| CN1177981A (zh) | Dna序列 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Decisions on the lapse of the protection rights |
Effective date: 20091210 |