CZ376597A3 - Derivát dolastatinu, způsob jeho přípravy a jeho použití - Google Patents
Derivát dolastatinu, způsob jeho přípravy a jeho použití Download PDFInfo
- Publication number
- CZ376597A3 CZ376597A3 CZ973765A CZ376597A CZ376597A3 CZ 376597 A3 CZ376597 A3 CZ 376597A3 CZ 973765 A CZ973765 A CZ 973765A CZ 376597 A CZ376597 A CZ 376597A CZ 376597 A3 CZ376597 A3 CZ 376597A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- methyl
- peptide
- xab
- xaa
- residues
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 23
- AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N dolastatin Chemical class CC(C)C(N(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)N(C)C(C(C)C)C(OC)CC(=O)N1CCCC1C(OC)C(C)C(=O)NC(C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract 2
- -1 2-tert-butylglycyl Chemical group 0.000 claims description 55
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 46
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 19
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 8
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 6
- 229950003188 isovaleryl diethylamide Drugs 0.000 claims description 6
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 5
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 125000000741 isoleucyl group Chemical group [H]N([H])C(C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[H])C(=O)O* 0.000 claims description 5
- 125000002114 valyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 4
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 3
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000000051 benzyloxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])O* 0.000 claims description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims description 3
- 125000001500 prolyl group Chemical group [H]N1C([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims description 3
- RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N Pyrrolidine Chemical group C1CCNC1 RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 claims description 2
- 125000001559 cyclopropyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C1([H])* 0.000 claims description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 2
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 125000001980 alanyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 abstract 1
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 57
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 25
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 25
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 23
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 22
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 21
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 14
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 11
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 9
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 8
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 7
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 7
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 6
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 6
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 6
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 6
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 6
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 6
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical class [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 125000004105 2-pyridyl group Chemical group N1=C([*])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 4
- BSCYXQIPEYZODK-UHFFFAOYSA-N 3-(diethylamino)propyl-(ethyliminomethylidene)azanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(CC)CC BSCYXQIPEYZODK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 4
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 4
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 4
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N carbonyldiimidazole Chemical compound C1=CN=CN1C(=O)N1C=CN=C1 PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 3
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 3
- VLNZUSMTOFYNPS-UHFFFAOYSA-N diethylphosphorylformonitrile Chemical compound CCP(=O)(CC)C#N VLNZUSMTOFYNPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 3
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 3
- 238000005932 reductive alkylation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UGNIYGNGCNXHTR-SFHVURJKSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-methylbutanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 UGNIYGNGCNXHTR-SFHVURJKSA-N 0.000 description 2
- CNPSFBUUYIVHAP-WHFBIAKZSA-N (2s,3s)-3-methylpyrrolidin-1-ium-2-carboxylate Chemical compound C[C@H]1CCN[C@@H]1C(O)=O CNPSFBUUYIVHAP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GKQLYSROISKDLL-UHFFFAOYSA-N EEDQ Chemical compound C1=CC=C2N(C(=O)OCC)C(OCC)C=CC2=C1 GKQLYSROISKDLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AKCRVYNORCOYQT-YFKPBYRVSA-N N-methyl-L-valine Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(O)=O AKCRVYNORCOYQT-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- KSPIYJQBLVDRRI-UHFFFAOYSA-N N-methylisoleucine Chemical compound CCC(C)C(NC)C(O)=O KSPIYJQBLVDRRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 2
- 125000003670 adamantan-2-yl group Chemical group [H]C1([H])C(C2([H])[H])([H])C([H])([H])C3([H])C([*])([H])C1([H])C([H])([H])C2([H])C3([H])[H] 0.000 description 2
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- IADUEWIQBXOCDZ-UHFFFAOYSA-N azetidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)C1CCN1 IADUEWIQBXOCDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N benzaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N benzyl chloroformate Chemical compound ClC(=O)OCC1=CC=CC=C1 HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- MKRTXPORKIRPDG-UHFFFAOYSA-N diphenylphosphoryl azide Chemical compound C=1C=CC=CC=1P(=O)(N=[N+]=[N-])C1=CC=CC=C1 MKRTXPORKIRPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 238000010265 fast atom bombardment Methods 0.000 description 2
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 208000037841 lung tumor Diseases 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 2
- UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N phenylmethyl ester of formic acid Natural products O=COCC1=CC=CC=C1 UYWQUFXKFGHYNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- UBQKCCHYAOITMY-UHFFFAOYSA-N pyridin-2-ol Chemical compound OC1=CC=CC=N1 UBQKCCHYAOITMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- YCXXXPZNQXXRIG-IBGZPJMESA-N (2s)-2-[9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonyl(methyl)amino]-3-methylbutanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 YCXXXPZNQXXRIG-IBGZPJMESA-N 0.000 description 1
- CANZBRDGRHNSGZ-NSHDSACASA-N (2s)-3-methyl-2-(phenylmethoxycarbonylamino)butanoic acid Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 CANZBRDGRHNSGZ-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- NNEHOKZDWLJKHP-LBPRGKRZSA-N (2s)-3-methyl-2-[methyl(phenylmethoxycarbonyl)amino]butanoic acid Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)N(C)C(=O)OCC1=CC=CC=C1 NNEHOKZDWLJKHP-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- CNPSFBUUYIVHAP-AKGZTFGVSA-N (2s)-3-methylpyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound CC1CCN[C@@H]1C(O)=O CNPSFBUUYIVHAP-AKGZTFGVSA-N 0.000 description 1
- OQJJVXKMPUJFJK-BQBZGAKWSA-N (2s,3s)-2-(dimethylamino)-3-methylpentanoic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N(C)C)C(O)=O OQJJVXKMPUJFJK-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- ZIWHMENIDGOELV-DMTCNVIQSA-N (2s,4r)-4-fluoropyrrolidin-1-ium-2-carboxylate Chemical compound OC(=O)[C@@H]1C[C@@H](F)CN1 ZIWHMENIDGOELV-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- ZIWHMENIDGOELV-IMJSIDKUSA-N (2s,4s)-4-fluoropyrrolidin-1-ium-2-carboxylate Chemical compound OC(=O)[C@@H]1C[C@H](F)CN1 ZIWHMENIDGOELV-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- UHPQFNXOFFPHJW-UHFFFAOYSA-N (4-methylphenyl)-phenylmethanamine Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C(N)C1=CC=CC=C1 UHPQFNXOFFPHJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JVSFQJZRHXAUGT-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethylpropanoyl chloride Chemical compound CC(C)(C)C(Cl)=O JVSFQJZRHXAUGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AHDSRXYHVZECER-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-tris[(dimethylamino)methyl]phenol Chemical compound CN(C)CC1=CC(CN(C)C)=C(O)C(CN(C)C)=C1 AHDSRXYHVZECER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OMGHIGVFLOPEHJ-UHFFFAOYSA-N 2,5-dihydro-1h-pyrrol-1-ium-2-carboxylate Chemical compound OC(=O)C1NCC=C1 OMGHIGVFLOPEHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IXSYUULNYWPWNY-UHFFFAOYSA-N 2-(dimethylamino)-3,3-dimethylbutanoic acid Chemical compound CN(C)C(C(O)=O)C(C)(C)C IXSYUULNYWPWNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(4-bromopyrazol-1-yl)ethyl]isoindole-1,3-dione Chemical compound C1=C(Br)C=NN1CCN1C(=O)C2=CC=CC=C2C1=O WFIYPADYPQQLNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001622 2-naphthyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C([H])=C(*)C([H])=C([H])C2=C1[H] 0.000 description 1
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- KLDLRDSRCMJKGM-UHFFFAOYSA-N 3-[chloro-(2-oxo-1,3-oxazolidin-3-yl)phosphoryl]-1,3-oxazolidin-2-one Chemical compound C1COC(=O)N1P(=O)(Cl)N1CCOC1=O KLDLRDSRCMJKGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OEBIVOHKFYSBPE-UHFFFAOYSA-N 4-Benzyloxybenzyl alcohol Chemical compound C1=CC(CO)=CC=C1OCC1=CC=CC=C1 OEBIVOHKFYSBPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 1
- UIVWXNPUCAHAJX-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-1,1-dioxo-2,5-diphenylthiophen-3-one Chemical compound O=S1(=O)C(C=2C=CC=CC=2)C(=O)C(O)=C1C1=CC=CC=C1 UIVWXNPUCAHAJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IADUEWIQBXOCDZ-VKHMYHEASA-N Azetidine-2-carboxylic acid Natural products OC(=O)[C@@H]1CCN1 IADUEWIQBXOCDZ-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004970 Chain extender Substances 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000000249 D-isoleucyl group Chemical group N[C@@H](C(=O)*)[C@@H](CC)C 0.000 description 1
- 125000003625 D-valyl group Chemical group N[C@@H](C(=O)*)C(C)C 0.000 description 1
- ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N Diisopropyl ether Chemical compound CC(C)OC(C)C ZAFNJMIOTHYJRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFDNQWIFNXBECV-UHFFFAOYSA-N Dolastatin 10 Natural products CC(C)C(N(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)N(C)C(C(C)CC)C(OC)CC(=O)N1CCCC1C(OC)C(C)C(=O)NC(C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 OFDNQWIFNXBECV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQKSHSFQQRCAFW-UHFFFAOYSA-N Dolastatin 15 Natural products COC1=CC(=O)N(C(=O)C(OC(=O)C2N(CCC2)C(=O)C2N(CCC2)C(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)C(NC(=O)C(C(C)C)N(C)C)C(C)C)C(C)C)C1CC1=CC=CC=C1 LQKSHSFQQRCAFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000022072 Gallbladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000007821 HATU Substances 0.000 description 1
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 1
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- APGLTERDKORUHK-LURJTMIESA-N N,N-dimethyl-L-Valine Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)C)C(O)=O APGLTERDKORUHK-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKJIRPAQVSHGFK-UHFFFAOYSA-N N-acetylglycine Chemical compound CC(=O)NCC(O)=O OKJIRPAQVSHGFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 240000006694 Stellaria media Species 0.000 description 1
- 239000012317 TBTU Substances 0.000 description 1
- LQKSHSFQQRCAFW-CCVNJFHASA-N [(2s)-1-[(2s)-2-benzyl-3-methoxy-5-oxo-2h-pyrrol-1-yl]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl] (2s)-1-[(2s)-1-[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-(dimethylamino)-3-methylbutanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]-methylamino]-3-methylbutanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]pyrrolidine-2-carboxyl Chemical compound C([C@@H]1N(C(=O)C=C1OC)C(=O)[C@@H](OC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C)C(C)C)C(C)C)C1=CC=CC=C1 LQKSHSFQQRCAFW-CCVNJFHASA-N 0.000 description 1
- CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N [benzotriazol-1-yloxy(dimethylamino)methylidene]-dimethylazanium Chemical compound C1=CC=C2N(OC(N(C)C)=[N+](C)C)N=NC2=C1 CLZISMQKJZCZDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- 238000010976 amide bond formation reaction Methods 0.000 description 1
- 150000003862 amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 238000011717 athymic nude mouse Methods 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- UDLLFLQFQMACJB-UHFFFAOYSA-N azidomethylbenzene Chemical compound [N-]=[N+]=NCC1=CC=CC=C1 UDLLFLQFQMACJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000004305 biphenyl Substances 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- PBAYDYUZOSNJGU-UHFFFAOYSA-N chelidonic acid Natural products OC(=O)C1=CC(=O)C=C(C(O)=O)O1 PBAYDYUZOSNJGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000027326 copulation Effects 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- WDPNDMPWBDGXDB-UHFFFAOYSA-N dichloro-hydroxy-imino-$l^{5}-phosphane Chemical compound NP(Cl)(Cl)=O WDPNDMPWBDGXDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N diphenylmethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(N)C1=CC=CC=C1 MGHPNCMVUAKAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFDNQWIFNXBECV-VFSYNPLYSA-N dolastatin 10 Chemical compound CC(C)[C@H](N(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 OFDNQWIFNXBECV-VFSYNPLYSA-N 0.000 description 1
- 108010045524 dolastatin 10 Proteins 0.000 description 1
- 108010045552 dolastatin 15 Proteins 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 208000023965 endometrium neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000008098 formaldehyde solution Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 210000000232 gallbladder Anatomy 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 1
- 239000003966 growth inhibitor Substances 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 125000000250 methylamino group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N para-ethylbenzaldehyde Natural products CCC1=CC=C(C=O)C=C1 QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000013034 phenoxy resin Substances 0.000 description 1
- 229920006287 phenoxy resin Polymers 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 208000023958 prostate neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000007790 scraping Methods 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 125000003011 styrenyl group Chemical class [H]\C(*)=C(/[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001544 thienyl group Chemical group 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N triflic acid Chemical compound OS(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WZCZNEGTXVXAAS-UHFFFAOYSA-N trifluoromethanol Chemical compound OC(F)(F)F WZCZNEGTXVXAAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/10—Tetrapeptides
- C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/101—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
Description
Oblast techniky
Vynález se týká peptidu a farmaceutického prostředku, který ho obsahuje
Dosavadní stav techniky
Je známé, že peptidy izolované 2 mořských 2drojů jako Dolastatin-10 (americký patentový spis číslo 4 816444) a Dolastatin-15 (evropský patentový spis číslo EP-A-398558) mají mocnou aktivitu jako inhibitory růstu buněk (Biochem Pharmacology 40, č. 8, str. 1859 až 1864, 1990; J. Nati. Cancer Tnst.
85, str. 483 až 488, 1993 a tam uváděné odkazy na literaturu). Na základě zajímavých výsledků při pokusech s nádorovými systémy in vivo, se provádějí v současné době další preklinická hodnocení těchto přírodních produktů k iniciaci klinických studií na nemocných rakovinou.
Přírodní produkty mají však ten nedostatek, že jsou špatně rozpustné ve vodných rozpouštědlech a investiční náklady pro jejich syntézu jsou vysoké.
Vynález se týká nových peptidů a jejich derivátů, které představují 21epšený terapeutický potenciál pro ošetřování neoplastových onemocnění ve srovnání s Dolastat inem-15. Kromě toho lze nové peptidy podle vynálezu snadno syntetizovat dále podrobně popsaným způsobem.
« * · · ♦
1*1 I ♦· ·· • · · · · · • · ··
• · · • · · ·
Podstata .vynálezu
Podstatou vynálezu je peptid obecného vzorce T
RiRSN - CHX - CO - A - B - D - E - (F)t, - K ( I) kde znamená
R2
R1-N-R2
A
B
D
E
F
X
R2
R1-N-R2
A
B
D
E
F
X methyl, ethyl nebo isopropyl, vodík, methyl nebo ethyl, spolu dohromady pyrroi 1 idinový kruh, zbytky valyl, isoleucyl, leucyl, 2-terč.-buty1glycy1,
2-ethy1glycyl, norleucyl nebo norvalyl, zbytky N-methylvalyl, N-methylleucyl, N-methyli soleucyl, N-methylnorvalyl, N-methyl nor1eucyl, N-methyl-2terc.-buty1g1ycy1, N-methyl-3-terč.-butylalanyl nebo N-methyl-2-ethylglycyl, zbytky 3,4-dehydroprolyl, 4-fluoroproly1, 4,4-difluoroprolyl, azetidin-2-karbonyl, 3-methylprolyl, 4-methylprolyl nebo 5-methy1prolyl, zbytky prolyl, homoprolyl, hydroxyproly1 nebo thiazolidi n-4-karbony1, zbytky valyl, 2-terč.-butylglycyl, isoleucyl, leucyl, 2-cyklohexylglycyl, norleucyl, norvalyl, neopenty1g1ycyl, alanyl, beta-alanyl nebo aminoisobutyroy1, alkyl s výhodou s 2 až 5 atomy uhlíku, cyklopropyl nebo cyklopentyl, • · · · · · t O nebo 1 a
K alkoxy s výhodou s 1 až 4 atomy uhlíku, benzyloxy nebo substituovanou nebo nesubstituovanou aminoskupinu, nebo jeho soli s fyziologicky vhodnými kyselinami. Vynález se také týká způsobů přípravy těchto peptidů obecného vzorce I, farmaceutických prostředků, které tento peptid obecného vzorce I obsahují spolu s farmaceuticky vhodnými nosiči a kterých se používá pro ošetřování rakoviny.
Symbol K znamená obzvláště Ci-4-alkoxy, benzyloxy, NH2, “NH-Ci-n-alkyl, -NH-C(CH3)2CN, -NH-C(CH3)2CCH, -NH-C(CH3)2C-CH2, -NH-C(CH3)2CH2CH2OH, -NH-C(CH3)2CH2OH, -NH-Cj-e-cykloalkyl, -NH-[3,3,0]-bicyklooletyl, noře <^.edryl, norpseudoe^.edryl, -NH-Jtinolyl, -NH-pyrazyl, -NH-CH2-benzimidazolyl, -ΝΗ-adamantyl, -NH-CH2-adamantyl, -NH-CH(CH3)- <£enyl, -NH-C(CH3)2’^enyl, •N(C1.<“alkoxy) Ci-4-alkyl, -NfCi^-alkoxy)-CH2-^enyl, -N(Cj..«-alkoxy)_4enyl/ -N(CH3)OBzl, -NH-(CH2)v-^;enyl (v-0,1,2, .. 3), -NH-(CH2)ra-na^t2yl (m-0, · 1), -NH-(CH2 )w-benzhydryl (w-0,1, or 2), -NH-bifenyl, -NH-pyridyl, -NH-CH2-pyridyl, -NH-CH2-CH2-pyridyl, -NH-benzothiazolyl, -NH-benzoisothiazolyl, -NH-benzopyrazolyl, -ΝΗ-benzoxazolyl, -NH-(CH2)ra-fluorenyl (m-0 } 1)/
-NH-pyrimidyl, -NH-(CH2)m-indanyl (m-0 ;. 1),
-NH-(CH2CH2O)y-CH3 (y-0,1,2,3,4, 5), -NH- (CH2CH2O)y-CH2CH3 (y-0,1,2,3,4, 5), -(CH2CH2O)y-CH3 (y-0,1,2,3,4, 5),
- (CH2CH2O)y-CH2CH3 (y-0,1,2,3,4, -NCH3-NH-CH2-CsH5; tiébřř.
5), -NCH3-NH-C6H5,
- 4 • · >
S
COOCHj
- 5 ·· ·«· * * »« • · · · · » · • · · · · * · é · · · · • · · · · • ·· · · « « ···
- 6 • · ·»·
| R1 | methyl | nebo ethyl, |
| R2 | vodík. | methyl nebo ethyl, |
| A | zbytky | valyl, isoleucyl nebo 2-terč.-butylg1ycy1, |
| B | zbytky 2-terč. | N-methylvalyl, N-methylisoleucyl nebo N-methyl- -buty1glycyl, |
D zbytky 3,4-dehydroprolyl, 4-fluoroprolyl, azetidin-2karbonyl, 3-methylprolyl nebo 5-methylprolyl,
E zbytky prolyl, homoprolyl, hydroxyprolyl nebo thiazo1 i din-4-karbony1,
F zbytky D-valyl, 2-terč,-butylg1ycyl , D-isoleucyl, Dleucyl nebo aminoisobutyroy1,
-CH(CH3)3/ -C(CH3)3, 0Γ -CH(CH3)CH2CH3;
t 0 nebo 1 a « ····
- 7 K s výhodou znamená
-OC(CH3)3, -NHCH3, -NHCH2CH3, -NH(CH2)2CH3, -NH(CH2)3CH3, -NH(CH2)4CH3, -NH(CH2)5CH3, -NH(CH2)6CH3, -NH(CH2)7CH3, -NHCH(CH3)2, -NHCH(CH3)CH2CH3, -NHCH(CH3)CH2CH2CH3, -NHCH(CH2CH3)2, -NH(CH2CH2CH3)2, -NHC(CH3)3/
- NHCH (CH2CH3 ) CH2CH2CH3, - NHCH (CH3) CH (CH3) 2 , -NHCH(CH2CH3)CH(CH3)2, -NHCH(CH3)C(CH3)3, -NH-cyklopropyl, -NH-cyklobutyl, -NH-cyklopentyl, -NH-cyUlohexyl, -NH-cykloheptyl, -NH-cyklooktyl, -NH-bicy|flo[3, 3,0]ofctyl, -N(CH3)OCH3, -N(CH3)OCH2CH3, -N(CH3)OCH3CH2CH3, -N(CH3)OCH(CH3)2, -N(CH2CH3)OCH3, -N(CH2CH3)OCH2CH3, -N(CH(CH3)2)OCH3, -N(CH3)OCH2C6H5, -N(OCH3)CH2-C6H5, ’N(CH3)OC6Hs, -NH-CH2-C6H5, -NH(CH2)2C6H5, -NH(CH2)3C6H5( -NHCH(CH3)C€H5, -NHC(CH3)2C6H5, -NHC(CH3)2CH2CH3, ’NHC(CH3) (CH2ch3)2, ~NHCH(CH3)CH(OH)C6H5, -NHCHrcyklohexyl, -NH-CH2CF3, -NHCH(CH2F)2, -NHC(CH3)2CH2CH2OH, -NH(CH2CH2O)2CH2CH3, -NHC(CH3)2CH(CH3)2, -NHC(CH3)2CN, -NHC(CH3)2CCH, norei-^edryl, norpseudoe^edryl, -NH-ckinolyl, -NH-pyrazyl, -NH-adamantyl(2), -NH-adajnantyl(l), -NH-CH2-adamantyl, -NH-CH2-na^ t\yl, -NH-benzhydryl, -NH-bi^enyl, -NH-pyridyl, -NH-CH2-pyridyl, -NH-CH2-CH2-pyridyl/ -NH-benzothiazolyl, -NH-benzoisothiazolyl, -NH-benzopyrazolyl, -NH-benzoxazolyl, -NH-fluorenyl, -NH-pyrimidyl, -NH~CH2-(4-methyl)thiazolyl(2), -NH-CH2-furanyl(2), -NH-CH2-thienyl(2), -NH-CH2-(5-methyl)thienyl(2), -NH-th.iazolyl(2), -NH-ísoxazolýl(3), -NH-(3-methyl)isoxazolyl(5), -NH-(3-methyl)isothiazolyl(5), -NH-(2 -trifluormethyl)thiadiazoly1(5), -NH-(2 -cyIdopropyl)thiadiazolyl(5), -nhc(GH3)2c-ch2, r~\
/\ s
ález toliko objasňují, nijak jej
H.C HjC
-n-í<] -x-kQ>
však neomezuj í.
- 8 •t ·4··
Pepi, idy obecného vzorce I se skládají
L-aminokse1 in, F muže však znamenat rovněž D-aminokyselinu.
Peptidy obecného vzorce I mohou být ve formě solí s fysiologicky vhodnými kyselinami, jako jsou např í k1ad kyše 1 i na chlorovodíková, citrónová, vinná, mléčná, fosforečná, methansulf onová, octová, mravenčí male inová, fumarová, jablečná, jantarová, malonová, sírová,
L-glutamová,
L-asparagová, pyrohroznová,
Muková, benzoová, glukuronová, štavelová, askorbová a acety1glycin .
Peptidy obecného vzorce I se mohou připravovat o sobě známými způsoby z chemie peptidů. Tak se například mohou postupně skládat z aminokyselin nebo se mohou získat vázáním vhodných malých peptidových fragmentu. Při postupném skládání se vychází z C zakončení peptidového řetězce, který se postupně prodlužuje vždy o jednu aminokyselinu. Při kopulaci fragmentů je možné spolu vázat fragmenty různé délky, přičemž se takové fragmenty získají postupným vázáním aminokyselin nebo rovněž kopulací fragmentů. Při obou těchto způsobech je nutné vázat vzájemně jednotky vytvářením amidové vazby. K tomuto účelu jsou vhodné jak chemické tak enzymatické způsoby.
Chemické způsoby pro vytváření amidové vazby podrobně popsal Mueller (Hetboden der organischen Chemie, svazek XV/2, str. 1 až 364, Thieme Verlag, Stuttgart, 1974; Stewart, Young, Solid Phase Peptide Synthesis, str. 31 až 34, 71 až 82, Pierce Chemical Company, Rockford, 1984; Bodans2ky, Klausner, Ondetti, Peptide Snthesis, str. 85 až 128, John Wiley and Sons, New York, 1976) a které jsou rovněž popsány v jiných základních publikacích o chemii peptidů. Obzvláště výhodným je azidový způsob, symetrický a směsný anhydridový způsob, in šitu generované a předformované aktivní estery, použití urethanu chráněného N-karboxyanhydridy aminokyselin a vytváření amidových vazeb za použití systému kopulační složka/akt ivátory, přičemž
- 9 *· ···· se zvláště uvádějí dicyklohexy1karbodi imid (DCC), diisopropylkarbod i i m i d ( D JO , 1 - et.hoxykarbony 1 - 2-ethoxy- 1, 2 - d i hydroch i nolin (EEDQ), 1 -ethyl-3-( 3-d i wiethy 1 am i nopropyl) karbodi i m i dhydrochlorid (EDCI), anhydrid n-propanfosfonové kyseliny (PPA), N,N-bi s( 2-oxo-3-oxasolidinyl)ami dofosf ory1chlorid ( BOP-Cl) , bromo-tris-pyrrolidinofosfoniumhexaf1uorfosfát (PyBrop), difenylfosforylazid (DPPA) reagencie Castro (BOP, PyBop), O-benzotriazolyl-N,N,N , N -tetramethyluroň iové soli (HBTU), O-azabenzotriazolyl-N,N,N , N -tetramethyluroň iové soli (HATU), diethy1fosfory1kyanid (DEPCN), 2,5-difenyl-2,3-dihydro-3-oxo-4hydroxythiofendioxid (Steglichovo reakční činidlo, HOTDO) a 1,1 - karbony1diimidazoI (CDI). Kopulační činidla se mohou používat samotná nebo v kombinaci s aditivy, jako jsou například N,N~di methyl - 4-aminopyridin ( DMAP) N-hydroxybenzotriazol (HOBt), N-hydroxysukcini mid (HOSu) nebo 2-hydroxypyridin.
Zatímco je zpravidla možné upustit, od chránících skupin při enzymatické syntéze peptidů, je přechodná ochrana reaktivních skupin, které se nepodílejí na amidové vazbě, nutná pro reakční složky při chemické syntéze, Při chemické syntéze peptidů se dává přednost třem běžným způsobům použití chránících skupin: způsobu používajícího benzyloxykarbony1 (Z), t-butoxykarbonyl (Boc) a 9-f 1 uorenylmethoxykarbonyl (Fitoc). V každém případě se používá chránící skupiny na alfa-aminoskupině jednotky prodlužující řetězec. Podrobný přehlad skupin chránících aminoskupinu uvádí Mueller (Methoden der organischen Chemie, svazek XV/1 , str. 20 až 906, Thieme Verlag, Stuttgart, 1974).
Jednotky, používané pro vytváření peptidového řetězce, se mohou nechávat reagovat v roztoku, v suspenzi nebo podobným způsobem, jaký popsal Murrifield (J. Amer. Chem. Soc, 85, str. 2149, 1963). Obzvláště výhodnými jsou 2působy, při kterých se peptidy vytvářejí postupně nebo kopulací fragmentů za použití chráních skupin Z, Boc nebo Fmoc. Jedna z reakČních složek při způsobu, který popsal Murrifield se váže na nerozpustný ·* ♦· ♦· ·« · · · · ···*· « * · · · ♦ ··· • · · · * · · · · ·· · « « · · 4 · ·♦ *»«· · ·· ·»·· ·· ·♦
- 10 polymeru i nosič (označovaný zde také jako pryskyřice). Peptid se zpravidla vytváří postupně na polvmerním nosiči 2a použití otíráních skupin Boc něho Fmoc, rostoucí peptidový řetězec je kovalentně vázán 0 zakončením na nerozpustné pryskyřičné částice (obr. 1 a 2). Tento způsob umožňuje odstranit reagenční činidla a vedlejší produkty filtrací a tedy je překrysta1 ování meziproduktů zbytečné.
Chráněné aminokyseliny se mohou vázat na jakýkoliv vhodný polymer, který musí být pouze nerozpustný v použitém rozpouštědle a musí mít stálou fyzikální formu, která usnadňuje filtraci . Polymer musí obsahovat funkční skupinu, na kterou se může pevně vázat, první chráněná aminokyselina kovalentní vazbou. Pro tento účel jsou vhodné nejrůznější polymery1 příkladně se uvdějí celulóza, polyviny1 a 1kohol, po1ymethakry1át, sulfonovaný polystyren, kopolymer chlormethylováného styrenu a di viny1 benzenu (Murrifie1dova pryskyřice), 4-methylbenzhydrylaminová pryskyřice (pryskyřice MRHÁ), feny1acetamidomethy1ová pryskyřice (Pam-pryskyřice). p-benzy1oxybenzy1 a1koholová pryskyřice, benzhydry1ami nová pryskyřice (RHA-pryskyřice), 4-(hydroxymethy1)benzoy1oxymethylová pryskyřice, pryskyřice, kterou popsal Breipohl a kol. (Tetrahedron Letters 28, str. 565, 1987, obchodní produkt společnosti BACHEM), 4-(2,4-dimethoxyfenylaminomethyl)fenoxypryskyřice (obchodní produkt společnosti Novabiochem) nebo o-chlortri ty1ová pryskyřice (obchodní produkt společnosti Biohellas).
Pro peptidovou synthesu v roztoku se hodí všechna rozpouštědla, jež jsou inertní za reakčních podmínek, obzvláště voda, N,N-dimethy1formamid (DME), dimethy1 sulfoxid (DMSO), acetonitril, dichlormethan (DCM), 1,4-dioxan, tetrahydrofuran (THF), N-methyl-2-pyrroli don (NMP) a směsi těchto rozpouštědel. Peptidovou synthesu na polymerním nosiči lze provádět ve všech inertních organických rozpouštědlech, ve kterých jsou použité deriváty aminokyselin rozpustné. Výhodná rozpouštědla ·* *»<*
* «··« • «V♦ •· «♦ • » 9 «· ♦ *» * ·4 · jako N,N-di methylformamjd, dichlořmethan, N-methyl-2-pyrroli don, acetonitril a dimethy1su1foxid a jejich směsi však působí bobtnání pryskyřic. Když je synthesa ukončena, peptid se od polymerního nosiče odštěpí. Podmínky, za kterých je odštěpení od různých prykyřic mošně, jsou popsány v literatuře. Nejběžněji používané odštěpovací reakce jsou katalyžovány kyselinami a palladiem, obzvláště je vhodné štěpení v tekutém bezvodém hydrogenf1uoridu, v bezvodé trif1uormethansulfonové kyselině, ve zředěné nebo v koncentrované trif1uoroctové kyselině, palladiem katalyzované štěpení v tetrahydrofuran nebo ve směsi tetrahydrofuranu a dichlormethanu v přítomnosti slabé zásady jako je morfolin nebo štěpení ve směsích kyseliny octové a dichlormethantrifluormethanolu. V závislosti na zvolených chránících skupinách, mohou se tyto skupiny udržet nebo popřípadě odštěpit za štěpících podmínek. Cenné může být také částečné odstranění chránících skupin peptidu, mají-li se provést určité deri vat izační reakce. Peptidy dialkylované na N-zakončení se mohou připravovat
a) kopulací příslušných N,N-dia 1kylami nových kyselin v roztoku nebo na polymerním nosiči,
b) redukční alkylací peptidu vázaného na prykyřici v systému di methylformamid/1% octová kyselina s NaCNBH3 a s příslušným aldehydem nebo ketonem,
c) hydrogenací peptidu v roztoku v přítomnosti aldehydu nebo ketonu a palladia na uhlí.
Různé v přírodě se nevyskytující aminokyseliny podle vynálezu jsou obchodně dostupné nebo se mohou syntetizovat z obchodně dostupných materiálů způsoby známými ze stavu techniky. Obchodně dostupnými výchozími materiály jsou kyselina azetidin-2-karboxylová, 3-methyl-L-prolin, 5-methyl-L-prolin a skupinou Boc nebo Fmoc chráněný 3,4-dehydroprolin (ACROS, NOVABIOCHEM, RACHEM). Cis- a trans-4-f1uoroprolin lze připravit způsobem, který popsal Panasik a kol. (N. Panasik, E.S.
Eberhardt, A.S. Edison, D.R. Povelí, R.T. Raines, Int. J. Pep- 12 -
| ·» | ·«·· | • » | • » |
| » 4 | * | • « v | |
| « | • | * | * · |
| • | V · | * · | |
| • | • | • | * · |
| * * · | • * | ttlt |
Lide Protein Res. 44, str. 262 až 269, 1994) z hydroxyprolinu.
Sloučeniny podle vynálezu mohou sloužit k inhibici nebo jinému léčení pevných nádorů (například nádorů plicních, prsních, tlustého střeva, prostaty, žlučníku, konečníku nebo endometriálních nádorů) nebo hematologických onemocnění (například leukemie, lymphomas), podáváním sloučenin savcům.
Specielní předností nových sloučenin podle vynálezu je, že jsou odolnější vůči enzymatickému rozkladu ve srovnání s Dolastat inem-15.
Podávání může být běžnými farmaceutickými , s výhodou onkologickými prostředky, včetně orálních a parenterálních prostředků, subkutánně, intravenosně, intramuskulárně a intraper i toneá1 ně
Sloučeniny mohou být podávány samotné nebo v podobě farmaceutických prostředků obsahujících sloučeninu obecného vzorce I spolu s farmaceuti oky vhodným nosičem pro danou cestu podávání. Takovými farmaceutickými prostředky mohou být kombinované výrobky, mohou tedy obsahovat jiné terapeuticky účinné přísady
Dávka podávaná savcům obsahuje nádor inhibující účinnou látku, která závisí na běžných faktorech jako je biologická aktivita použité sloučeniny, způsob podání, věk, zdravotní stav a hmotnost pacienta, povaha a druh příznaků, frekvence ošetřování, podávání jiných léků a požadovaný účinek. Typickou denní dávkou je přibližně 0,5 až 50 mg na kg tělesné hmotnosti při orálním podávání a přibližně 0,05 až 20 při parenterálním podáván í.
Nové sloučeniny podle vynálezu lze podávat ve formě běžných pevných nebo tekutých farmaceutických prostředků, tedy povlečených nebo nepovíečených tablet, kapslí, prášků, granulí,
1* ···»
- 13 * ···» ·· • · · Ié • · ·· a · · ·· • ·♦ * * *f «··» ·· *· •* · · •· ·· • ♦· · B· • ·· ·
čípku nebo roztoku. Ty se vyrábějí obvyklým způsobem, llčinné látky mohou být při tom kombinovány s obvyklými farmaceutickými pomocnými látkami, jako s pojivý tablet, plnidly, chránícími činidly, činidly k rozpadavost i tablet,, regulátory tekutosti, zv1áčňovadly, ro2pouštědl antioxidanty a nebo s nosnými zeutische Technologie, Thierae podávané formy léčiv obsahují účinné látky.
látkami zpožďujícími účinek, plyny (H. Sucker a kol. PharmaVerlag, Stuttgart, 1978). Takto normálně hmotnostně 1 až 90 %
Následující příklady vynález objasňují, aniž ho jakkoli omezují. V příkladech jsou proteinové aminokyseliny uváděny zkratkami v běžném 3-písmenovém kódu. Jinými zkratkami jsou: Me2Val = N,N-dimethy1va1 in, MeVal = N-methylva1 in, Z = benzyloxykarbonyl.
Příklady provedení vynálezu
A. Obecné postupy
I. Peptidy podle vynálezu obecného vzorce I jsou buď syntetizovné klasickou roztokovou syntézou standardními shora popsanými způsoby za použití Z a Boc nebo standardními 2působy syntézy v pevném stavu pomocí chránících skupin Boc a Fmoc.
a) Cyklus syntézy pro techniku chránících skupin Fmoc.
1. promytí DHF
2. 20 % piperidinu v DMF
3. 20 % piperidinu v DMF
4. promytí DMF
5.
přidání předem aktivované chránící aminokyseliny (aktivované 1 ekvivalentem
TBTU a 5 ekvivalenty DTPEA v DMF) peptídová kopulce
1x1 min x 4 min x 16 min x 1 min x 61 min
| 6. | promyt í DMF | 3x1 | m i n |
| 7 | není-li konverse úplná, | ||
| opakování kopulace (zpět k 5. | ) | ||
| 8. | promyt í DMF | 3 x 1 | m i n |
| 9. | zpět do 2. | ||
| Ke kopulaci aminokyselin po | N-aminokyse1 inách se | použ í v á |
reakčních řinidel B0P-C1 a PyBrop. Reakční doby se příslušně zvětší zařazením dvojných vazeb. Při ro2tokové syntese je pro tento 2pusob kopulace nejvýhodnější použití buď Boc-chráněných (N-karboxy anhydridu) aminokyselin NCA, Z-chráněných (N-karboxyanhydridů) aminokyselin NCA, nebo pivaloy1chloridu jako kondenzačního činidla.
II. Redukční alkylace N-zakončení
Peptidová pryskyřice podle Ala se zbaví chrámcích skupin na N-2akončení (kroky 2 až 4 v Ala) a pak se nechá reagovat s 3-násobným molárním nadbytkem aldehydu nebo ketonu v systému dimehy1formamid/1 % octové kyseliny, s přísadou 3 ekvivalentů NaCNBHa. Po ukončení reakce (negativní Kai ser-test) se pryskyřice promyje několikrát vodou, isopropanolem, dimehy1formamidem a dichlormethanem. Reduktivní alkylace v roztoku 12e například dosáhnout reakcí peptidů zbavených chránících skupin na N-zakončení, peptidových fragmentu nebo aminokyselin s odpovídajícími aldehydy nebo ketony použitím NaCNBH3 nebo systému vodík palladium na uhlí.
III. Zpracování peptidových pryskyřic získaných podle odstavce Ib a II
Peptidová pryskyřice se vysuší za sníženého tlaku a pak se zpracuje 1,5 hodin směsí TFA/voda (95:5) (Wade, Tregear, Howard Florey Fmoc Workshop Manual, Melbourne, 1985). Pryskyřice se odfiltruje a promyje se TFA a dichlormethanem. Filtrát a •4 »*«·
4 «4 · ·4
- 15 «4 * · · · ·· 4 t 4 ** · · · 4 4 · 4·
4 4 · 4444
4444 4 «4 4 4 4 » 4444 promývací roztoky s ^koncentrují a peptid se vysráěí přísadou diethty1 etheru Po ochlazení v ledové lázni se sraženina odfiltruje, vyjme se do 30% octové kyseliny a lyofilizuje se.
IV. Použije-li se o-chlorotri ty1ové pryskyřice (obchodní produkt společnosti Biohellas), míchá se 1 hodinu při teplotě místnosti suspense peptidové pryskyřice v sysstému octová kyseli na/trif1uorethnol/dichlormethan (1:1=3), Pryskyřice se odfiltruje za odsávání a důkladně se promyje štěpícím roztokem. Spojené filtráty se 2koncentrují ve vakuu a zpracuji se etherem. Vysrážená pevná látka se odstraní filtrací nebo odstředěním. promyje se diethyletherem a vysuší se za sníženého t1aku.
V. Čištění a charakter i2ace peptidů
Čištění se provádí gelovou chromatografií (SEPHADEX G-10, G-15/10 % HOAc, SEPHADEX l.H20/Me0H) a/nebo středotlakou chromatografií (stacionární fáze; HD-STT. C-R. 20-45 mikrometrů, 100 Angstrom: mobilní fáze: gradient s A = systém 0,1 % TFA/ voda. B ~ systém O, 1 % TFA/MeOH), nebo preparativní chromatograf i í HPLC (stacionární fáze: Waters Delta-Pak C-18, 15 mikrometrů 100 Angstrom; mobilní fáze: gradient s A = systém 0,1 % TFA/voda, B = systém 0,1% TFA/MeOH).
Čistota výsledných produktů se zjišťuje analytickou chromatografií HPLC (stacionární fáze: 100 2,1 mm VYDAC C-18 300 Angstrom; mobilní fáze: aceton itri 1 - voda gradient, pufrováno s 0,1 % TFA, 40 C). Charakterizace bombardováním rychlými atomy hmotovou spektroskopi í a NMR spekt.roskopi í .
B- Specifické postupy
Příklad 1 (SEQ ID NO; 1)
MeaVal Val - MeVa 1 - 3, 4- dehydroprol y 1 -Pro- am i d • » » · ..··· • * ·· · · · ···* · • · ··· · · * Ml · «····* ·· ·*
- 16 Nechává se reagovat 0,53 g pryskyřice Fmoc-RINK (substituce 0,46 Mol/g), odpovídánící velikosti dávky 0,25 mmol jako v Ala pokaždé s 0,4 mmol
Frooc-Pro-OH,
Fmoc-3,4-dehydroprolin,
Fmoc-MeVal-OH,
Fmoc-Val-OH,
Fmoc-Val-OH.
Aminokyselina následující po N-methylaminokyse1 i ně se spojí dvojnou vazbou kapulačním činidlem ByProp. Po ukončení iterativních syntetických cyklech, se 2 peptidové pryskyřice odstraní chránící skupiny N-2akončení (kroky 2 až 4 v Ala) a nechá se dále reagovyt s vodným roztokem formaldehydu jako v ATI a vysuší se 2a sníženého tlaku. Výsledná pryskyřice se odštěpí TFA jako v ATTT. Surový produkt ( 132 mg) se čistí preparát i vní středotlakou chromatografií, čímž se 2Íská 32 mg žádaného čistého peptidu (10 až 40 % A v 10 ; 40 až 90 % A ve 140 ). Sloučenina se dále charakterizuje bombardováním rychlými atomy hmotovou spektroskopií a NMR spektroskopií. ([M+H1+.
Příklad 2 (SEQ ID NO · 1 )
MeaVal-Val -MeVa1 -[(2S,3S)- 3-methylpyrrolid i n-2-karbony11 -Probensylamid
a) Z-í2S,3S)-3-Methylpyrrolidin-2-karboxylová kyselina
Ve 4 ml vody a 2,33 ml 5N routoku hydroxidu sodného se rozpustí 1,5 g (2S,3S) 3-methy1pyrro1 i din-2-karboxy1ové kyšeliny (11,6 mmol). Během jedné hodiny se přidá při teplotě 4 C 2,12 ml bensylchlorformátu (Z-Cl: 12,8 mmol) a 6,5 ml 2N roztoku hydroxidu sodného. Po míchání směsí přes noc při teplotě místnosti se nastaví hodnota pH na 10. Vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (4x) nastaví se na hodnotu pH 2 5N kyselinou chlorovodíkovou a extrahuje se dich]ormethanem (2x). Spojené · ···· • to to · « to to · ♦ • a λ » « * » · · » • to « · · toto· • toto* · toto · to·· · · · ·
- 17 organické extrakty se vysuší síranem sodným a zkoncentrují se ve vakuu. Získá se 1,75 g produktu v podobě oleje.
b) Z-í25,38)-3-MeLby1pyrro1 i d i n-2-karbony1 -L- pro1y1benzy1 amid
V 66 ml dichlormethanu se rozpustí 1,75 g (2S,3S)-3-methylpyrrolidin-2-karhoxy1ové kyseliny (6,62 mmol) a 1,59 g prolinbenza1dehydbydrochloridu (6,62 mmol) a ochladí se na teplotu 4 C. Po přidání 0,89 ml N-methy]morfoli nu (7,94 mmol), 0,304 g ITOBt (2,21 mmol) a 1,28 g EDCI (6,62 mmol) se reakční směs míchá přes noc při teplotě místnosti, 2ředí se 450 ml dichlormethanu a promyje se nasyceným roztokem hydrogenuhli či tanu sodného (3x), vodou (lx), 5% citrónovou kyselinou (3x), vodou (1x), a nasyceným roztokem chloridu sodného (1x). Organická vrstva se vysuší síranem sodným a ^koncentruje se za sníženého tlaku. Získá se 2,63 g produktu v podobě vysoce viskosního ΟΙ e je .
c) (2S.3S) '3-Methylpyrro1 i din- 2-karbony1 -L-proly1benzy1am i d
Ve 43 ml methanolu se rozpustí 2,63 g Z-(2S,3S)-3-methylpyrrolidin-2-karbonyl-L-prolylbenzy1amidu (5,8 mmol). Po přidání 105 mg 10% palladia na uhlí se reakční směs hydrogenuje přes noc. Po filtraci a vysušení se získá 1,88 g cránicích skupin zbaveného dipeptidu.
d) Z-MeVal-[(2S,3S)- 3-Methy1pyrro1 i di n-2-karbony1]- Probenzy1am i d
V 58 ml dichlormethanu se rozpustí 1,54 g Z-MeVal-OH (5,8 mmol) a 1,88 g (2S,3S)- 3 - methylpyrrolidin-2-karbonyl-L-prolylo benzylamidu a ochladí se na teplotu 4 C. Po přidání 0,78 ml N-methylmorfolinu (6,96 mmol), 0,266 g HOBt (1,93 mmol) a 1,12 g EDCI (5,8 mmol) se reakční směs míchá přes noc při teplotě místnosti, zředí se 120 ml dich1ormethanu a promyje se nasyce- 18 *· ···· «< ·« ·· ·· «V · · · · · • · · · · · · · · · · • · ··* · · · • ··· » e * «··* λ* ·· ným roztokem hydrogenuhl iči tanu sodného ( 3x) , vodou (1x), 5% citrónovou kyselinou (3x), vodou (1x) a nasyceným roztokem chloridu sodného (1x). Organická vrstva se vysuší síranem sodným a zkoncentruje se za sníženého tlaku Získá se 3,01 g produktu v podobě suché bílé pěny.
e) MeVa 1 -[(2S,35)- 3-Methylpyrroli di n- 2- karbony1]-Pro-benzy1am i d
Ve 39 ml methanolu se rozpustí 3,01 g Z-MeVal-[(2S,3S)-3methylpyrrolidin-2-karbonyl]-Pro-benzylamidu (5,33 mmol). Po přidání 96 mg 10% palladia na uhlí se reakční směs hydrogenuje tři hodiny. Filtrací a odpařením k suchu se získá 2,18 g chránící skupiny zbaveného tripeptidu v podobě čirého oleje.
f) Z-Va1 -MeVa1 - Γ (2S.3S)- 3-Methy1pyrrol i d i n- 2-karbonyl]-Probenzyl am id
V 10 ml dichlormethanu se rozpustí 1,28 g Z-Val-OH (5,11 mmol). Po přidání 0,73 ml triethylaminu (5.37 mmol) a ochlazec ní na teplotu -10 C se pomalu přidá 0,66 ml píva1oy1chloridu (5,37 mmol). Po 1,5 -hodinovém míchání směsi při teplotě -10
C následuje přísada roztoku 2,18 g MeVal - [ ( 2S. 35)-3-methylpyrrolidin-2-karbonyl1-Pro-benzylamidu (5,11 mmol a 0,73 ml triethylami nu (5,37 mmol) v 10 ml dichlormethanu. Rekční směs e
se míchá 1,5 hodin při teplotě -10 0 a při teplotě místnosti přes noc, zředí se dichlormethanem a promyje se nasyceným roztokem hydrogenuhliči tanu sodného (3x), vodou (1x), 5% citrónovou kyselinou (3x), vodou (lx) a nasyceným roztokem chloridu sodného (1x). Organická vrstva se vysuší síranem sodným a zkoncentruje se za sníženého tlaku. Získá se 2,75 g produktu v podobě suché pěny
g) Val-MeVal-í(2S,3S)-3-Methy1pyrroli d i n- 2 -karbonyl]- Probenzy1am i d
Ve 30 ml methanolu se rozpustí 2,75 g Z-Val-MeVal-[(2S,35)• · « 4 4« • · · * · « « »·· · 4 • · · 4 « ··· *♦·» · ·4 · · a 4 «4 ·
- 19 3-me thy 1 pyrro 1 i d i n - 2-karbony 1 ] - Pro-benzy 1 am i du (4,13 mmol ) Po přidání 0,34 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové (4,13 mmol) a 78 mg 10% palladia na uhlí se reakční smés se hydrogenuje tři hodiny. Filtrace a odpaření k suchu poskytne 2,23 g chránící skupiny zbaveného tripeptidu v podobě suché bílé pěny. Surový produkt se dále rozpustí v 50 ml vody a hodnota pH se nastaví na 2 až 3 1N kyselinou chlorovodíkovou. Vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (3x), hodnota pH se nastaví na 10 5N roztokem hydroxidu sodného a dále se extrahuje dichlormethanem ( 3x) . Spojené organické extrakty se vysuší síranem sodným za sníženého tlaku, čímž se získá 1,71 g chránící skupiny zbaveného tetrapept j dbenza1dehydu .
h) MezVal - Val -MeVal - 1 ( 2.S, 3S) -3-Methylpyrro1 idin-2-karbonyl ] Pro-benzylamid
Ve 32 ml suchého DMF se rozpustí 0,47 g MezVal-OH (3,24 mmol) a 1,71 g Va1 -MeVa1 -[(2S,3S)-3-methyl pyrrolidin-2-karboo ny 1 ]- Pro-benzyl aiti i du (3,24 mmol). Po ochlazení na teplotu 4 C se přidá 1,07 ml DEPCN (6,48 mmol) a 1,88 ml triethy1ami nu (12,96 mmol). Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti a dimehy1formamid se odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se rozpustí ve 100 ml dichlormethanu promyje se nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3x), vodou (lx), 5% citrónovou kyselinou (3x), vodou (lx) a nasyceným roztokem chloridu sodného (lx). Organická vrstva se vysuší síranem sodným a zkoncentruje se za sníženého tlaku. Získá se 0,88 g produktu v podobě bezbarvého oleje. Surový produkt se rozpustí ve vroucím diisopropyletheru a vysráěí se za chlazení. Sraženina se oddělí a vysuší se 2a vzniku 0,56 g čistého produktu. Sloučenina se dále charakterizuje hmotovou spektrometrií při bombardování rychlými atomy. ([M+H]+ = 655,6).
Následující sloučeniny byly připraveny a mohou být připraveny pod1e př í k1adu 1 a 2:
• · ·♦** • ·
| 3 , | Xaa | Val | Xab | Xac | Xad |
| 4. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xae |
| 5. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xaf |
| 6. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xag |
| 7. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xah |
| 8. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xai |
| 9. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xak |
| 10. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xal |
| 11. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xam |
| 12. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xan |
| 13. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xao |
| 14. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xap |
| 15. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xaq |
| 16. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xar |
| 17. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xas |
| 18. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xat |
| 19. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xat |
| 20. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xav |
| 21. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xaw |
| 22. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xax |
| 23. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xay |
| 24. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xaz |
| 25. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xba |
| 26. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xbb |
| 27. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xbc |
| 28. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xbd |
| 29. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xbe |
| 30. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xbf |
| 31. | Xbg | Val | Xab | Xac | Xar |
| 32. | Xbg | Val | Xab | Xac | Xas |
| 33. | Xbh | Val | Xab | Xac | Xar |
| 34 . | Xbh | Val | Xab | Xac | Xas |
| 35. | Xaa | Ile | Xab | Xac | Xar |
| 36. | Xaa | Ile | Xab | Xac | Xas |
| 37. | Xaa | Xbk | Xab | Xac | Xar |
| 38. | Xaa | Xbk | Xab | Xac | Xas |
| 39. | Xaa | Val | Xbi | Xac | Xar |
| 40. | Xaa | Val | Xbi | Xac | Xas |
| 41. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xbi |
| 42. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xbra |
| 43 . | Xaa | Val | Xab | Xac | Xbn |
| 44 . | Xaa | Val | Xab | Xbo | Xae |
| 45. | Xaa | Val | Xab | Xbo | Xbp |
| 46. | Xaa | Val | Xab | Xbo | Xar | |
| 47. | Xaa | Val | Xab | Xbo | Xas | |
| 43. | Xaa | Val | Xab | Xbo | Xbm | |
| 49. | Xaa | Val | Xab | Xbq | Xae | |
| 50. | Xaa | Val | Xab | Xbq | Xar | |
| 51. | Xaa | Val | Xab | Xbq | Xas | |
| 52. | Xaa | Val | Xab | Xbq | Xbm | |
| 53. | Xaa | Val | Xab | Xbr | Xbp | |
| 54. | Xaa | Val | Xab | Xbr | Xae | |
| 55. | Xaa | Val | Xab | Xbr | Xas | |
| 56. | Xaa | Val | Xab | Xbr | Xar | |
| 57. | Xaa | Val | Xab | Xbs | Xae | |
| 58. | Xaa | Val | Xab | Xbs | Xas | |
| 59. | Xaa | Val | Xab | Xbs | Xar | |
| 60. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xbu | |
| 61. | Xaa | Val | Xab | Xac | Xbt | |
| 62. | Xaa | Val | Xab | Xbq | Xbu | |
| 63. | Xaa | Val | Xab | Xbq | Xbt | |
| 64. | Xaa | Val | Xab | Xac | Pro | Xbv |
| 65. | Xaa | Val | Xab -Xac | Pro | Xbw | |
| 66. | Xaa | Val | Xab | Xac | Pro | Xbx |
| 67. | Xaa | Val | Xab | Xac | Pro | Xby |
| 68. | Xaa | Val | Xab | Xac | Pro | Xbz |
| 64. | Xaa | Val | Xab | Xbq | Pro | Xbv |
| 65. | Xaa | Val | Xab | Xbq | Pro | Xbw |
| 66. | Xaa | Val | Xab | Xbq | Pro | Xbx |
| 67. | Xaa | Val | Xab | Xbq | Pro | Xby |
| 68. | Xaa | Val | Xab | Xbq | Pro | Xbz |
| 69. | Xaa | Val | Xab | Xbo | Xaz | |
| 70. | Xaa | Val | xab | Xbq | Xaz | |
| 71. | Xaa | Val | Xab | Xbq | Xbn | |
| 72. | Xaa | Val | Xab | Xbo | Xbn |
Příklady MS-chara1kteri sace syntetizovaných nových sloučenin jsou uvedeny v následující tabulce.
| Příklad | Analysa MS při bombardování rychlými atomy |
| č. | Cmol. hmotnost (naměřená)] |
| 45. | 627 |
53.
655 *
·»··
Tabulka I
Identifikace sekvence sloučenin připravených podle příkladu 1 a 2
| Sl oučen i na | č. | Sekvneční ID -c í s1 o |
| 1-34, 39 - | 63, 69 -72 | 1 |
| 35, 36 | 2 | |
| 37, 38 | 3 | |
| 64 - 68 | 4 |
Symboly Xaa v součtu mají následující význam:
Xaa : N,N-Dimethy1 val in
Xab '· N-Methylva1 in
3, 4-dehydropro1in f Xad:
ζ Xae:
•4 ··· » · • ·
- 23 1 Xah:
H3C
S Xai:
o H3C s Xak:
0 h3c
0 HjC v- Xam:
»« »
\ Xan:
0 h3c
Xao :
Xaq:
Γ Xar:
Xas:
Xat:
·· ·«·« • * • *
> Xau:
O ·· ·«·· *· ·· ···>
« « • « ·* *··· • · ♦ ·· · · < Xav:
Xaw:
' Xay:
' Xaz:
S Xba:
·; Xbb:
V» ···!
- 26 ; XJbc:
' Xbd:
·. Xbe:
<. Xbf:
Xbg:
N,N-dimethylisoleucin . xbh:
N,N-dimethyl-2-terC.-butyl-glycin
S Xbi:
N-methylisoleucin
Xbk:
2-tert.butylglycin , t‘
r· Xbm:
O ·· «··
| • · · * · « · 4 · ··· · · - 27 - | |
| Xbn: | γΆ 0 CH, |
| XbO: | L-azetidine-2- arbonyl |
| : Xbp: | 0 |
| Xbq: | (4 -fluoro)-L-prolin |
| - Xbr: | (5-methyl)-L-prolin |
| l Xbs: | (3-methyl)-L-prolin |
•í Xbt:
; Xbii:
Xbv:
> XbW:
- 28 ·· ·*♦·
««
Sloučeniny podle vynálezu se mohou testovat na účinek proti rakovině běžnými způsoby včetně například dále popsaného způsobu·
A. Metodologie in vítro
Cytotoxicita se měří standardní metodologií pro přilnuté buněčné linie jako je microculture tetrazolium test (MTT). Podrobnosti této zkoušky jsou popsány v literatuře (Alley, MC a kol, Cancer Research 48: str. 589 až 601, 1988). K získání kultur pro mikrotitrační destičky se použije exponenciálně rostoucích kultur nádorových buněk, jako jsou buňky HT-29 colon-carcinoma nebo LX-plicního nádoru. Buňky se nasadí v množství 5000 až 20 000 na důlek v 96-důlkových destičkách β
(ve 150 Lil media) a kultivují se přes noc při teplotě 37 C. Přidají se sloučeniny v 10-násobném zředění 104 M až 10_1° M. Buňky se pak inkubují 48 hodin. Ke zjištění počtu živých buněk »444 • 4 4 «444»4*4
44 4 4 4»4
4 44 « « « 4 4 4 44
4 444«44 •4444 44 4414 4«44
- 29 v každém důlku se přidá barvivo MTT (50 141 roztoku 3 mg/ml 3(4,5-dimethy1th1azo1-2-yI)-2,5-difeny1tetrazo1 iumbromidu v soo laňce). Tato směs se inkubuje 5 hodin při teplotě 37 Ca pak se do každého důlku přidá 50 nl 25% SDS, pH 2. Po celonoční inkubaci se pak odečítá absorhance každého důlku při 550 nm čítačem ELISfi. Vypočtou se střední hodnoty + /- SD dat z replikovaných důlků, za pouužití vzorce % T/C (% ošetřených živých buněk/kontrolních buněk).
OD ošetřených buněk
-- x 100 = % T/C
OD kontrolních buněk
Koncentrace zkoušené sloučeniny, která dává hodnotu inhibice růstu T/C = 50 % je označována jako hodnota IC50.
| Sloučenina podle příkladu | IC50 1M1 |
| 1 . | 1 x 10'9 |
| 2. | 1 x ΙΟ9 |
| 45 . | 1 y. ÍQ-% |
| 53. | 1 x 10-8 |
B. Metodologie in vivo
Sloučeniny podle vynálezu se zkoušely dále v preklinických testech na aktivitu in vivo, která je indikativní pro klinické použití. Takové testy se provádějí na holých myších, kterým se transplantují (xenoroubují) nádorové tkáně, s výhodou lidského původu, jak je to dobře známo v tomto oboru. Zkoušené sloučeniny se vyhodnocují z hlediska proti nádorové účinnosti po podání myším s xenoimplantátem.
Lidské prsní nádory (MX-1), které rostly v athymické holé myši se transplantují do nové hostitelské myši pomocí nádorových fragmentů o velikosti přibližně 50 nm. Den transplantace
- 30 je dnem O. Šest, až deset dní později se myši ošetří zkoušenými sloučeninami podávanými jako intravenosní injekce ve skupinách po 5 až 10 myších při každé dávce. Sloučeniny se podávaly každý druhý den po dobu tří týdnu v dávkách 1 až 100 mg/kg tělesné hmotnosti . Průměry nádorů a tě lesná hmotnost se měřily dva krát týdně Objemy nádorů se vypočet,ly p. průměrů měřených posuvným měřítkem a pro každou ošetřovanou skupinu se vypočtou objemy nádorů podle vzorce (délka x šířka2)/2 = mm3 objemu nádoru
Pro každou skupinu se vypočtou střední objemy nádorů a zjistí se hodnoty T/C pro každou skupinu oproti neošetřeným kontrolním nádorům.
Nové sloučeniny vykazují dobré vlastnosti inhibice nádorů.
Průmyslová využitelnost
Peptid pro výrobu farmaceutických prostředků k ošetřování onkologických onemocnění savců.
- 31 · b»«·
Seznam sekvencí (1) Obecné informace
i) Přihlašovatel
A. Adresát'· BASF Akt i engese 1 1 schaf t
B. Ulice- Carl-Bosch-Strasse 38
C. Město: Ltidw i qshaf en
E. Stát: Německá spolková republika
F ZTP: D-67056
G. Telefon: 0621/6048526
H. Telefax: 0621/6043123
I. Telex'· 1762175170 i i) Název vynálezu: Pept, i d a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje i i i) Počet sekvencí: 4 i v) Farma pro počítač
A. Typ média: Disketa 3,5 palce, 2 DD
B. Počítač: IBM AT-kompatibi1ní, 80286 procesor
C. Operační systém: MS-DOS verš i on 5,0
D. Software: WordPerfect
2. Informace o SEO TD. NO: j:
i) Charakteristiky sekvence
A. Délka: 5 aminokyselin
B. Typ: aminokyselina
D. Topologie: lineární i i) Typ molekuly: peptid xi) Popis sekvence” SEQ ID. NO:1: Xaa Val Xaa Xaa Xaa
2. Informace o SEQ ID. NO: 2:
i) Charakteristiky sekvence
A. Délka: 5 aminokyselin
B Typ: aminokyse1 i na
D. Topologie: lineární i i) Typ molekuly: peptid xi) Popis sekvence SEQ ID. NO2: Xaa Ile Xaa Xaa Xaa
2. Informace o SEQ ID. NO: 3:
i) Charakteristiky sekvence
A. Délka: 5 aminokyselin
B. Typ: aminokyselina
D. Topologie: lineární i i) Typ molekuly- peptid xi) Popis sekvence SEQ ID. N0;3;
Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa
2. Informace o SEQ ID. NO: 4:
i) Charakteristiky sekvence
A. Délka’· 6 aminokyselin
B. Typ: aminokyse1 ina
D. Topologie: lineární li) Typ molekuly: peptid xi) Popis sekvence SEQ ID. NO:4: Xaa Val Xaa Xaa Pro Xaa kde
PATENTOVÉ
Pept. i d obecného vzorce I ·· ···· ·« •♦ *· •♦ •a a a • · a a • «
Claims (5)
- R1R2N - CHX - CO - A - B - D - E - (F)t znamená ( I)R1R2 methyl, ethyl nebo isopropyl, vodík, methyl nebo ethyl,RÍ-N-R2 spo tu dohromady pyrroi 1 idinový kruh,A zbytky valyl, isoleucyl, leucyl, 2-terč.-buty1g1ycy1,
- 2-ethylglycyl, norleucyl nebo norvalyl,B zbytky N-methyl valyl, N-methyl 1eucyl, N-methyl i soleucy] , N-methylnorva1yl , N-methyl nor]eucyl . N-methyl-2terč.-butylglycyl, N-methyl - 3-terč . -but,y 1 a] any 1 nebo N-methyl-2-ethylglycyl,D zbytky 3,4-dehydroproly1, 4-f1uoroproly1, 4,4-difluoroprolyl, azet, í d i n-2-karhonyl , 3-methylprolyl, 4-met,hylprolyl nebo 5-methy1prolyl,E zbytky prolyl, homoprolyl, hydroxyproly1 nebo thiazo1idin-4-karbonyl,F zbytky valyl, 2-terč. -buty1g1ycy1, isoleucyl, leucyl,2-cyk1ohexylglycy1, norleucyl, norvalyl, neopentylglycyl , alanyl, beta-alanyl nebo amino isobutyroy1,X alkyl s výhodou s 2 až 5 atomy uhlíku, cyklopropyl nebo cyklopentyl, í- 33 4* «· ·«4« • · · · · · ·· · b · · * 4 4·· • · · · ♦ · 4··«· • · · ·· v * • Η MH · ·«4 t O nebo 1 a alkoxy s výhodou s 1 až 4 atomy uhlíku, benzyloxy nebo substituovanou nebo nesubstituovanou aminoskupi nu, nebo jeho soli s fyziologicky vhodnými kyselinami.2. Peptid podle nároku 1 obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají v nároku 1 uvedený význam, nebo jeho soli pro použití v medicíně zvláště pro ošetřování onkologických nemocí.
- 3. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje terapeuticky účinné množství peptidu podle nároku 1 obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají v nároku 1 uvedený význam, a farmaceuticky vhodný nosič.
- 4. Způsob ošetřování nádorů savců vyznačuj ící setím, že se savcům s nádorovým onemocněním podává nádory inhi bující množství peptidu podle nároku 1 obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají v nároku 1 uvedený význam.
- 5 Způsob přípravy peptidu podle nároku 1 obecného vzor- ce T, kde jednotlivé symboly mají v nároku 1 uvedený význam, vyznačující se tím, že se peptid připravuje o sobě známými způsoby z peptidové chemie.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/472,453 US5831002A (en) | 1992-05-20 | 1995-06-07 | Antitumor peptides |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ376597A3 true CZ376597A3 (cs) | 1998-06-17 |
| CZ293683B6 CZ293683B6 (cs) | 2004-07-14 |
Family
ID=23875567
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19973763A CZ293682B6 (cs) | 1995-06-07 | 1996-06-03 | Peptid, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje |
| CZ19973765A CZ293683B6 (cs) | 1995-06-07 | 1996-06-03 | Peptid, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19973763A CZ293682B6 (cs) | 1995-06-07 | 1996-06-03 | Peptid, způsob jeho přípravy a farmaceutický prostředek, který ho obsahuje |
Country Status (33)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5831002A (cs) |
| EP (2) | EP0832104B1 (cs) |
| JP (2) | JP4221062B2 (cs) |
| KR (2) | KR100437986B1 (cs) |
| CN (2) | CN1182153C (cs) |
| AR (2) | AR003427A1 (cs) |
| AT (2) | ATE224910T1 (cs) |
| AU (2) | AU725164B2 (cs) |
| BG (2) | BG102125A (cs) |
| BR (2) | BR9609424A (cs) |
| CA (2) | CA2219818C (cs) |
| CO (2) | CO4700527A1 (cs) |
| CZ (2) | CZ293682B6 (cs) |
| DE (2) | DE69623992T2 (cs) |
| DK (2) | DK0832104T3 (cs) |
| ES (2) | ES2188759T3 (cs) |
| HR (2) | HRP960277A2 (cs) |
| HU (2) | HU228071B1 (cs) |
| IL (2) | IL122215A (cs) |
| MX (2) | MX9709147A (cs) |
| MY (2) | MY119042A (cs) |
| NO (2) | NO318384B1 (cs) |
| NZ (2) | NZ310444A (cs) |
| PL (2) | PL185763B1 (cs) |
| PT (2) | PT871656E (cs) |
| RO (2) | RO119783B1 (cs) |
| SI (2) | SI0832104T1 (cs) |
| SK (1) | SK282466B6 (cs) |
| TR (2) | TR199701544T1 (cs) |
| TW (2) | TW508357B (cs) |
| UA (2) | UA46775C2 (cs) |
| WO (2) | WO1996040752A1 (cs) |
| ZA (2) | ZA964710B (cs) |
Families Citing this family (30)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5807984A (en) * | 1995-11-09 | 1998-09-15 | Basf Aktienegesellschaft | Oligopeptides, the preparation and use thereof |
| TW474946B (en) * | 1995-12-15 | 2002-02-01 | Basf Ag | Novel compounds, the preparation and use thereof |
| US20010009901A1 (en) * | 1996-12-11 | 2001-07-26 | Basf Aktiengesellschaft Germany | Antineoplastic peptides |
| US5965537A (en) * | 1997-03-10 | 1999-10-12 | Basf Aktiengesellschaft | Dolastatin 15 derivatives with carbonyl and heterocyclic functionalities at the C-terminus |
| US6103698A (en) * | 1997-03-13 | 2000-08-15 | Basf Aktiengesellschaft | Dolastatin-15 derivatives in combination with taxanes |
| US6143721A (en) * | 1997-07-18 | 2000-11-07 | Basf Aktiengesellschaft | Dolastatin 15 derivatives |
| US6015790A (en) * | 1997-10-06 | 2000-01-18 | Basf Aktiengesellschaft | Methods and compositions for treating rheumatoid arthritis |
| US5985837A (en) * | 1998-07-08 | 1999-11-16 | Basf Aktiengesellschaft | Dolastatin 15 derivatives |
| EP1159273A1 (en) | 1999-03-02 | 2001-12-05 | Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. | Compounds useful as reversible inhibitors of cathepsin s |
| US6420364B1 (en) | 1999-09-13 | 2002-07-16 | Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. | Compound useful as reversible inhibitors of cysteine proteases |
| AU775373B2 (en) | 1999-10-01 | 2004-07-29 | Immunogen, Inc. | Compositions and methods for treating cancer using immunoconjugates and chemotherapeutic agents |
| US7018642B2 (en) | 2001-04-27 | 2006-03-28 | The Procter & Gamble Company | Compounds, compositions, and methods for controlling biofilms |
| WO2003051835A2 (en) * | 2001-12-18 | 2003-06-26 | Proteologics, Inc. | Methods and compositions for the inhibition of viral release |
| EP1531846A4 (en) * | 2002-02-27 | 2006-04-19 | Us Gov Health & Human Serv | Conjugates of ligand, linker and cytotoxic agent and related compositions and methods of use |
| EP1781310B1 (en) | 2004-08-02 | 2015-10-14 | Ramot at Tel Aviv University Ltd. | Articles of peptide nanostructures and method of forming the same |
| JP4954983B2 (ja) | 2005-05-18 | 2012-06-20 | ファーマサイエンス・インコーポレイテッド | Ｂｉｒドメイン結合化合物 |
| AU2006283677A1 (en) * | 2005-08-19 | 2007-03-01 | Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Topical formulations of histone deacetylase inhibitors and methods of using the same |
| EP1973928A2 (en) * | 2005-10-11 | 2008-10-01 | Ramot at Tel-Aviv University Ltd. | Self-assembled fmoc-ff hydrogels |
| CN101535300B (zh) | 2006-05-16 | 2014-05-28 | 埃格拉医疗公司 | Iap bir域结合化合物 |
| JP5452223B2 (ja) * | 2006-07-24 | 2014-03-26 | テトラロジック ファーマシューティカルズ コーポレーション | Ｉａｐ阻害剤 |
| WO2008127560A1 (en) * | 2007-04-12 | 2008-10-23 | Scinopharm Taiwan Ltd. | Process for making galantamine |
| UY32099A (es) | 2008-09-11 | 2010-04-30 | Enanta Pharm Inc | Inhibidores macrocíclicos de serina proteasas de hepatitis c |
| US8283372B2 (en) | 2009-07-02 | 2012-10-09 | Tetralogic Pharmaceuticals Corp. | 2-(1H-indol-3-ylmethyl)-pyrrolidine dimer as a SMAC mimetic |
| US9284350B2 (en) | 2010-02-12 | 2016-03-15 | Pharmascience Inc. | IAP BIR domain binding compounds |
| CA2822556A1 (en) | 2010-12-30 | 2012-07-05 | Enanta Pharmaceuticals, Inc | Macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors |
| EA201390988A1 (ru) | 2010-12-30 | 2014-04-30 | Энанта Фармасьютикалз, Инк. | Фенантридиновые макроциклические ингибиторы сериновой протеазы вируса гепатита c |
| US10201584B1 (en) | 2011-05-17 | 2019-02-12 | Abbvie Inc. | Compositions and methods for treating HCV |
| KR102356286B1 (ko) | 2011-05-27 | 2022-02-08 | 암브룩스, 인코포레이티드 | 비-천연 아미노산 연결된 돌라스타틴 유도체를 함유하는 조성물, 이를 수반하는 방법, 및 용도 |
| WO2015103490A1 (en) | 2014-01-03 | 2015-07-09 | Abbvie, Inc. | Solid antiviral dosage forms |
| CN118119409A (zh) | 2021-09-03 | 2024-05-31 | 东丽株式会社 | 癌的治疗和/或预防用药物组合物 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4816444A (en) * | 1987-07-10 | 1989-03-28 | Arizona Board Of Regents, Arizona State University | Cell growth inhibitory substance |
| US4879278A (en) * | 1989-05-16 | 1989-11-07 | Arizona Board Of Regents | Isolation and structural elucidation of the cytostatic linear depsipeptide dolastatin 15 |
| WO1993003054A1 (fr) * | 1991-08-09 | 1993-02-18 | Teikoku Hormone Mfg. Co., Ltd. | Nouveau derive de tetrapeptide |
| CA2136339C (en) * | 1992-05-20 | 2008-02-05 | Andreas Haupt | Derivatives of dolastatin |
| US5530097A (en) * | 1994-08-01 | 1996-06-25 | Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University | Human cancer inhibitory peptide amides |
| US5504191A (en) * | 1994-08-01 | 1996-04-02 | Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University | Human cancer inhibitory pentapeptide methyl esters |
-
1995
- 1995-06-07 US US08/472,453 patent/US5831002A/en not_active Expired - Lifetime
-
1996
- 1996-06-03 DE DE69623992T patent/DE69623992T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 ES ES96918661T patent/ES2188759T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 WO PCT/EP1996/002393 patent/WO1996040752A1/en not_active Ceased
- 1996-06-03 RO RO97-02254A patent/RO119783B1/ro unknown
- 1996-06-03 IL IL12221596A patent/IL122215A/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 MY MYPI96002155A patent/MY119042A/en unknown
- 1996-06-03 WO PCT/EP1996/002392 patent/WO1996040751A1/en not_active Ceased
- 1996-06-03 RO RO97-02264A patent/RO118953B1/ro unknown
- 1996-06-03 AU AU61241/96A patent/AU725164B2/en not_active Ceased
- 1996-06-03 PL PL96323726A patent/PL185763B1/pl unknown
- 1996-06-03 CN CNB961944684A patent/CN1182153C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 JP JP50013297A patent/JP4221062B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 TR TR97/01544T patent/TR199701544T1/xx unknown
- 1996-06-03 BR BR9609424-9A patent/BR9609424A/pt not_active Application Discontinuation
- 1996-06-03 NZ NZ310444A patent/NZ310444A/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 UA UA98010069A patent/UA46775C2/uk unknown
- 1996-06-03 SI SI9630539T patent/SI0832104T1/xx unknown
- 1996-06-03 HU HU9801910A patent/HU228071B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 CZ CZ19973763A patent/CZ293682B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 HU HU9801817A patent/HU228073B1/hu not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 PL PL96323723A patent/PL185762B1/pl unknown
- 1996-06-03 DK DK96918660T patent/DK0832104T3/da active
- 1996-06-03 SI SI9630550T patent/SI0871656T1/xx unknown
- 1996-06-03 NZ NZ310443A patent/NZ310443A/en not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 CA CA002219818A patent/CA2219818C/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 MX MX9709147A patent/MX9709147A/es unknown
- 1996-06-03 UA UA98010070A patent/UA46776C2/uk unknown
- 1996-06-03 CN CNB961944676A patent/CN1182154C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 KR KR1019970709064A patent/KR100437986B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 TR TR97/01545T patent/TR199701545T1/xx unknown
- 1996-06-03 KR KR1019970709063A patent/KR100437985B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 CA CA002219819A patent/CA2219819C/en not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 PT PT96918661T patent/PT871656E/pt unknown
- 1996-06-03 AT AT96918661T patent/ATE224910T1/de active
- 1996-06-03 PT PT96918660T patent/PT832104E/pt unknown
- 1996-06-03 CZ CZ19973765A patent/CZ293683B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 BR BR9609423A patent/BR9609423A/pt not_active Application Discontinuation
- 1996-06-03 EP EP96918660A patent/EP0832104B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 ES ES96918660T patent/ES2186783T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 SK SK1653-97A patent/SK282466B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 IL IL12221696A patent/IL122216A/en not_active IP Right Cessation
- 1996-06-03 MX MX9709146A patent/MX9709146A/es unknown
- 1996-06-03 DE DE69623472T patent/DE69623472T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 DK DK96918661T patent/DK0871656T3/da active
- 1996-06-03 JP JP50013197A patent/JP3957751B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1996-06-03 EP EP96918661A patent/EP0871656B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-06-03 AU AU61242/96A patent/AU725170B2/en not_active Ceased
- 1996-06-03 AT AT96918660T patent/ATE223431T1/de active
- 1996-06-04 MY MYPI96002170A patent/MY124487A/en unknown
- 1996-06-06 ZA ZA9604710A patent/ZA964710B/xx unknown
- 1996-06-06 AR ARP960102981A patent/AR003427A1/es active IP Right Grant
- 1996-06-06 AR ARP960102980A patent/AR003136A1/es active IP Right Grant
- 1996-06-06 ZA ZA9604711A patent/ZA964711B/xx unknown
- 1996-06-06 HR HR08/472,453A patent/HRP960277A2/hr not_active Application Discontinuation
- 1996-06-06 HR HR08/472,453A patent/HRP960257A2/hr not_active Application Discontinuation
- 1996-06-07 CO CO96029751A patent/CO4700527A1/es unknown
- 1996-06-07 CO CO96029749A patent/CO4700526A1/es unknown
- 1996-06-07 TW TW085106866A patent/TW508357B/zh not_active IP Right Cessation
- 1996-10-02 TW TW085106867A patent/TW424096B/zh not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-12-05 NO NO19975710A patent/NO318384B1/no not_active IP Right Cessation
- 1997-12-05 NO NO19975711A patent/NO317670B1/no not_active IP Right Cessation
- 1997-12-18 BG BG102125A patent/BG102125A/xx unknown
- 1997-12-29 BG BG102152A patent/BG102152A/xx unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CZ376597A3 (cs) | Derivát dolastatinu, způsob jeho přípravy a jeho použití | |
| AU679479B2 (en) | Dolostatin analog | |
| US6143721A (en) | Dolastatin 15 derivatives | |
| JP3523253B2 (ja) | ドラスタチン誘導体 | |
| JP3939354B2 (ja) | 抗腫瘍性ペプチド | |
| SK282467B6 (sk) | Peptidy, farmaceutický prostriedok s ich obsahom a ich použitie |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20150603 |