DD202506A5 - Verfahren zur herstellung von reinem hepatitis b-oberflaechenantigen - Google Patents
Verfahren zur herstellung von reinem hepatitis b-oberflaechenantigen Download PDFInfo
- Publication number
- DD202506A5 DD202506A5 DD82240579A DD24057982A DD202506A5 DD 202506 A5 DD202506 A5 DD 202506A5 DD 82240579 A DD82240579 A DD 82240579A DD 24057982 A DD24057982 A DD 24057982A DD 202506 A5 DD202506 A5 DD 202506A5
- Authority
- DD
- German Democratic Republic
- Prior art keywords
- hepatitis
- plasma
- proteins
- hbsag
- pepsin
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/29—Hepatitis virus
- A61K39/292—Serum hepatitis virus, hepatitis B virus, e.g. Australia antigen
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2730/00—Reverse transcribing DNA viruses
- C12N2730/00011—Details
- C12N2730/10011—Hepadnaviridae
- C12N2730/10111—Orthohepadnavirus, e.g. hepatitis B virus
- C12N2730/10134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/806—Antigenic peptides or proteins
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von reinem Herpatitis B-Oberflaechenartigen aus menschlichem Plasma durch Entfernen von Lipiden und eines Teils der Plasmaproteine, enzymatischen Abbau verbliebener Ballastproteine und Isolierung immunologisch wirksamer Antigenteilchen. Ziel der Erfindung ist die Bereitstellung eines verbesserten Verfahrens, das zur Produktion von Vakzinen fuer die Anwendung zur Immunisierung geeignet ist. Erfindungsgemaess wird zur Herstellung von reinem Hepatitis B-Oberflaechenantigen das Ausgangsmaterial von Lipiden und teilweise von menschlichen Plasmaproteinen befreit, einer Digerierung mit Pepsin in Mengen von 0,01 bis 0,50 mg/mg des Proteins, vorzugsweise 0,05 mg/mg des Proteins unterworfen, ueber Molekularfilter abfiltriert, wobei Molekuele bis zu 10000 Dalton in ein Phosphat-gepuffertes Medium gelangen, dessen ph-Wert bis zu 7,1 bis 7,3 liegt, und die Infektiositaet anschliessend mittels Formaldehyd, vorzugsweise in einem Verhaeltnis von 1:2000, auf das Volumen bezogen, ueber 96 Stunden, inaktiviert.
Description
240579 4 -f- T7
C08G/240 579
Verfahren zur Herstellung von reinem Hepatitis B - Oberflächenantigen
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von reinem Hepatitis B -Oberflächenantigen (HBsAg) aus menschlichem Plasma. Das HBsAg ist ein virales Protein, das im Blut von mit Hepatitis, Typ B, befallenen Menschen auftritt oder im Blut von Trägern des Hepatitis B-Virus ständig vorhanden ist. Y/enn HBsAg von den verbliebenen Plasmaproteinen gereinigt ist, liegt eine Vaccine für die infektiöse B-Hepatitis vor, die, an Mensch oder Tier verabreicht, die Produktion von HBs-Antikörpera im Organismus des Patienten bewirkt. Diese Antikörper schützen den Organismus vor vollständiger Infektion, d. h. vor einer Infektion durch den infektiös wirkenden Teil des Hepatitis B-Virus..
Es ist ein Verfahren zur Herstellung von reinem HBsAg durch mehrfaches Zentrifugieren eines auf geeignete Weise hergestellten Plasmas in Dichtegradienten bekannt, das aus Saccharose oder Cäsiumchlorid erhalten wurde. Bei dem Verfahren zur Trennung über ein Dichtegefälle durch Ultrazentrifugieren, also Zentrifugieren mit hohen Geschwindigkeiten, kann man HBsAg-Präparationen erhalten, die von den restlichen Plasmaproteinen befreit sind. Das Verfahren des Ultrazentrifugierens ist ein sehr zeitraubendes Verfahren, es erfordert sehr zahlreiche teure Geräte und führt zu nur geringen Mengen dee Antigens allein für Forschungszweckeo Es ist daher ein Laborverfahren und keine Produktionsmethode. Mit diesem Verfahren ist es nicht möglich, eine größere Stoffmenge zu erhalten, die zur Immunisierung über Vakzination für eine relativ kleine Personengruppe erforderlich wäreo
240 57 9 4 -2- 60 954,12
27.10.82
Es sind weitere Herstellungsverfahren von HBsAg bekannt, bei denen eine Filtration über mit Gel gefüllten Säulen, auf chromatischem Wege und über eine Elektrophorese die Trennung erfolgt. Alle diese Verfahren führen nicht zu vollständig reinen Antigen-Präparationen, sie haben Laboratoriumsoharakter und sind nur wenig produktiv.
v
Ziel der Erfindung
Ziel der Erfindung ist die Bereitstellung eines verbesserten Verfahrens zur Herstellung von reinem Hepatitis B -Oberflächenantigen aus menschlichem Plasma, das zur Produktion von Vakzinen für die Anwendung zur Immunisierung geeignet ist,
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, eine neuartige Herstellungstechnologie zur Verfugung zu stellen·
Erfindungsgemäß besteht das Verfahren zur Herstellung von reinem HBsAg darin, daß das Ausgangsmaterial von Lipiden und teilweise von menschlichen Plasmaproteinen befreit wird, einer Digerierung mit Pepsin in Mengen von 0,01 bis 0,50 mg/mg des Proteins, vorzugsweise 0,05 mg/mg des Proteins unterworfen wird, über Molekularfilter abfiltriert wird, wobei Moleküle bis zu 100 000 Dalton in ein Phosphat-gepuffeftes Medium gelangen, dessen pH-Wert bis zu 7,1 bis 7,3 liegt, und die Infektiosität anschließend mittels Formaldehyd, vorzugsweise in einem Verhältnis von 1 : 2000, auf das Volumen bezogen, über 96 Stunden, inaktiviert wird»
Im Gegensatz zu den bekannten Verfahren führt das erfindungsgemäße Verfahren zu HBsAg, das von Plasmaproteinen vollständig frei ist* Wenn dieses Antigen als Vakzine für die infek-
24057 9 4 "3- 6O95412
27.10.82
tiöse Hepatitis, Typ B, eingesetzt wird, ruft es bei den vakzinierten Patienten keine Nebenwirkungen hervor. Darüber hinaus kann das erfindungsgemäße Verfahren dazu eingesetzt werden, eine große Produktion der Vakzine aus Plasma zu ermöglichen, das Hepatitis B-Virusprotein enthält.
Die Herstellung des gereinigten Hepatitis B-Oberflächenantigens nach dem'erfindungsgemäßen Verfahren läuft wie folgt ab:
In der ersten Stufe wird das menschliche Plasma von den Lipiden befreit. Es werden daher zu 1000 ml Plasma von HBsAg-Spendern mit einem Titer gemäß Immuno-Elektroosmosefällung (IEOP) von mindestens 1 : 10 eine Menge von 1000 ml 0,1 M FmCl2 · HpO hinzugegeben. Nach dem Zusatz von Manganchlorid wird das Plasma mit einem elektromagnetischen Rührer 1 Stunde bei Eisbadtemperaturen gerührt. Anschließend wird das Material 30 Minuten mit einer Geschwindigkeit von 6000 U/min zentrifugiert. Nach dem Zentrifugieren wird der kein HBsAg enthaltene Niederschlag verworfen.
Die nach der Zentrifugierung erhaltene überstehende Flüssigkeit wird mit 0,1 HGl auf einen pH-Wert von 5»6 gebracht, und Polyäthylenglykol 6000 (PEG 6000) wird in einer Menge von 75 g pro 100 ml des Materials hinzugegeben. Das Material wird dann 12 Stunden bei 4 0C mit einem elektromagnetischen Rührwerk gerührt und danach in einer Zentrifuge 30 Minuten bei einer Geschwindigkeit von 6000 U/min zentrifugiert« Die überstehende Flüssigkeit, die kein Antigen enthielt, wurde verworfen, das beim Zentrifugieren erhaltene Sediment für weitere Verfahrensschritte gesammelt.
Dies.es Sediment wurde in 200 ml 0,9 NaCl gelöst und die Lösung mit entionisiertem Wasser bis su dem Volumen aufgefüllt, das das Material vor dem Zentrifugieren aufwies.
240579 4 -4- -
ITach dem Zusatz von ITaCl zeigte sich erneut Sediment in der Lösung. Diese Lösung wurde noch einmal 30 Minuten mit 6000 U/min zentrifugiert. Kach dem Zentrifugieren wurde die überstehende Flüssigkeit, die HBs-Antigen enthielt, gesammelt und das Sediment, worin dies nicht enthalten war, verworfene
Durch den Zusatz von- ent ionisiertem Y/asser erhöhte sich das Volumen der überstehenden Plüssigkeit auf 10 000 ml· Eine geringe Menge von nach der Verdünnung verbliebenem Sediment wurde durch 3Ominütiges Zentrifugieren mit einer Geschwindigkeit von 6000 U/min entfernt. Für die weiteren Stufen des Antigen-Hersteilungsverfahrens wurde die überstehende Flüssigkeit verwendet, die man bei diesem Zentrifugieren erhielt«
Das auf diese Weise nach der Abtrennung der Lipide erhaltene Material wird nun einer Digerierung mit einem Enzym unterworfen. 10 000 ml des Materials werden auf 37 0C erwärmt und der pH-Wert mittels 1ΪΤ HCl auf 2,5 eingestellt. Dem so vorbereiteten Material wird nun Pepsin Sigma hinzugesetzt, wiederholt kristallisiert, und zwar in einer Menge von 0,05 mg pro 1 mg der Lösungsproteineβ Der Proteingehalt der Lösung wird nach spektralphotometrischen Verfahren bestimmt. Hach etwa einer Stunde wird die Digerierung mit Pepsin dadurch unterbrochen, daß die Lösung mittels 1ΕΓ HaOH auf einen pH-Wert von 4,6 eingestellt wird. Nach Abschluß der Digerierung wird die Lösung 30 Minuten lang bei 6000 U/min zentrifugiert. In dem nach dem Zentrifugieren verbleibenden Sediment wird kein HBsAg mehr festgestellt, das vollständig in die überstehende Flüssigkeit übergegangen ist.
Die Digerierung mit Pepsin führt zu einem Abbau der menschlichen Plasmaproteine zu Polypeptideinheiten, die nicht größer als 30 000 Dalton sind. Das HBsAg-Protein wird allerdings dabei nicht digeriert.
240 57 9 4 - 5- *> 95412
27.10.82
Es folgt nun die Stufe der Reinigung des Materials von Plasmaproteinen, die mit Pepsin digeriert wurden, mit Hilfe von Molekularfiltern, die die Teilchen bis zu einer Größe von 100 000 Dalton hindurchlassen. Dafür kann ein in einem geschlossenen Kreislauf arbeitendes Piltrationssystem eingesetzt werden, wo das abzufiltrierende Material der Filtrationszone mehrmals zugeleitet wird, wodurch Teilchen aus der Lösung mittels Molekularfilter abgetrennt v/erden, die über der Piltergröße liegen. -Erfindungsgemäß wird ein Filter des Typs H 1 χ 100 zum Filtrieren eingesetzt, der die Teilchen mit einer Größe von bis zu 100 000 Dalton hindurchläßt. Der volle Filtrationszyklus umfaßt ein neunmaliges Umpumpen des Materials bei einem Volumen von 80 Litern unter einem Druck von 6,2 kp/cm . Bevor das Material in das Filtrationssystem eingeführt wird, verdünnt man es mit Phosphat-gepuffertem, entionisiertem, apyrogenem Wasser auf das oben genannte Volumen.
An das Filtrieren schließt sich ein vollständiges Auswaschen der Plasmaproteine an, die vorher mit Pepsin digeriert worden sind. Das aus dem Filtrationssystem erhaltene Material, das gereinigte HBsAg enthält, wird in jeweils 10.000 ml-Volumina nach Zusatz von Formaldehyd 96 Stunden im Kühlschrank gehalten. Der Zusatz von Formaldehyd liegt in einer Größe, die für die Aufrechterhaltung seiner Konzentration in der Lösung von etwa 1 : 2000 Volumenteilen erforderlich ist. lach dem Herausnehmen aus dem Kühlschrank wird Formaldehyd durch De-Dialyse aus dem Material abgetrennt. Anschließend erfolgt die Adsorption von HBsAg an Aluminiumhydroxid, das der Lösung in einer Menge von 1 mg pro 1 ml Lösung hinzugesetzt wird. Die auf diese Weise endgültig erhaltene Vakzine wird in Ampullen abgefüllt.
24057 9 4 -6" 60 954 12
27.10.32
Die nach dem obigen Verfahren erhaltene Vakzine zeigt, wenn sie in Anwesenheit von menschlichem Plasmaprotein nach dem Doppeldiffusionsverfahren in Agar analysiert wird, keine Fällungslinien bei 3Ofacher Eindickung mit Plasma von Antihuman-Proteinen. Die Vakzine enthält auch keine infektiösen Teile des Hepatitis B-Virus«,
Die Erfindung wird nachstehend an einem Beispiel näher erläutert.
Von einem HBsAg-Sp end er wird. Plasma, mittels Plasmapherese gesammelt. Die Aktivität von HBsAg liegt bei einem Titer von nicht kleiner als,1 : 16, bestimmt mittels Immuno-Elektro· osmophorese. Das menschliche Plasma wird einem Verfahren zur Entfernung der Lipide unterworfen, indem auf 1 1 Plasma 1 1 0,1M 1InCl2 · 4 HpO und 150 000 Int, Einheiten Heparin in einem Volumen von 30 ml hinzugesetzt werden. Das Material wird bei Zimmertemperatur auf einem elektromagnetischen Rührer für 0,5 Stunden inkubiert. Uach Verstreichen dieser Zeit wird das gesamte Material auf einer Beckmann-Zentrifuge J-6 in dem Rotor JA-10 bei 6000 U/min zentrifugiert. Das erhaltene Sediment, das HBsAg(-) darstellt, wird verworfen und der Überstand in einem 2-1-Kolben gesammelt.
Zu diesem Material wird eine Menge 7,5 %iger PEG-Lösung mit einer Molmasse von 6000 gegebene Der pH-Wert wird mit 1 U HCl auf 5j5 eingestellt. Dann wird das Material in einen Kühlschrank gebracht und über Nacht unter kontinuierlichem Rühren inkubiert.
Am nächsten Tage wird das Material auf einer Beckmann-Zentrifuge J-6 in einem Rotor JA-10 bei 6000 U/min zentrifugiert.
240579 4-7- 60 954 12
27.10.82
Das Überstehende, das HBsAg( ) darstellt, wird verworfen; das Sediment in 200 ml 10,9 %iger HaCl-Lösung gelöst und mit entionisiertem Wasser auf ein Volumen von 2 1 aufgefüllt. Wenn nach 20 bis 30 Minuten ausreichend Sediment auftritt, so wird es durch Zentrifugieren auf der Beckmann-Zentrifuge J-6 im Rotor JA-10 bei 6000 U/min innerhalb von 30 Minuten entfernt. Das erhaltene klare Piltrat zeigt die Wirksamkeit von HBsAg bei Immuno-Elektroosmophorese mit dem Titer 1 ; 8. Das Materialvolumen wird dann durch Zusatz von entionisiertem V/asser (21 + 81 ent ionisiertes V/asser) auf 10 1 erhöht. Nach 30 Minuten wird ein Absetzen einer geringen Sedimentmenge beobachtet, die durch Zentrifugieren auf der Beckmann-Zentrifuge J-6 im Rotor JA-10 bei 6000 U/min über 30 Minuten entfernt wird. Man erhält ein klares Überstehendes, dessen Titer nach Immuno-Elektroosmosefällung bei etwa 1 : 2 liegt.
Zu 10 1 des Überstehenden werden dann 90 g HaCl gegeben, wodurch man eine 0,9 $ige NaCl-Lösung erhält. Das auf diese Weise erhaltene Material wird bei einer Temperatur von 37 0C über einen Zeitraum von 2 Stunden inkubiert. Danach wird der Flüssigkeit mit einer Temperatur von 37 0C und einem pH-Wert von 2,5 Pepsin in einer Menge von 0,05 ml/ml hinzugesetzt, d. h. 0,5 g Pepsin pro 10 1 Material. Das Digerieren der Lösung mit Pepsin erfolgt über 1 Stunde bei 37 0C. Nach einer Stunde wird das Digerieren durch Erhöhung des pH-Wertes auf 3,5 mittels 0,1 N NaOH gestoppt. Das verbleibende Sediment wird auf der Beckmann-Zentrifuge J-6 in dem Rotor JA-10 bei 6000 U/min über 20 Minuten zentrifugiert und danach verworfen. Das Überstehende wird einer Molekularfiltration in einem DC-30-Gerät unterworfen, wobei Hohlfaserfilter H 10 χ 100 eingesetzt werden.
In dem erhaltenen molekülfiltrierten Material von 10 1 Rauminhalt liegt der Titer nach Immuno-Elektroosmosefällung von
2 A O 5 7 9 4 - 8 - 60 954 12
27.10.82
HBsAg bei 1. : 2.
Dieses Material zeigt bei 100facher Eindickung keine Fällungslinien bei der Immunodiffusionstechnik auf Agar unter Einsatz von tierischem Plasma: Anti-IgG, Anti-IgM, Anti-IgA, Antihumanprotein und Plasma-Antihumanproteine
Die Vakzination von Labortieren wie Guineaschweinen oder Kaninchen mit 10Ofach eingedicktem Material zeigt keine immunologische Reaktion gegen die Kontamination der Präparation mit aus menschlichem Plasma herrührenden Proteinen. Man erhält nur eine Fällungslinie mit dem HBsAg enthaltenden Material.
Das mit dem beschriebenen Verfahren erhaltene Material ist ein hoch immunogenes Material, was aus Vakzinationsversuchen mit Schimpansen und freiwilligen Versuchspersonen hervorgeht«,
Chemische Charakteristik der Vakzine für die virale B-Hepatitis
HBsAg - 0,5 /Ug/cnr
Gesamtprotein - 0,5 /Ug/cnr
Polypeptide-Mol-Gew.- 3000 - 0,02 /Ug/cnr
NaCl - 0,85 %
Aluminiumhydroxid - 1 mg/cnr
Merthiolat - 100 /Ug/cnr
Bei Einsatz des dritten Generationstestes konnte in dem Material kein HBsAg, HIeAg und keine DKS-Polymerase festgestellt werdenc
Claims (3)
1, Verfahren zur Herstellung von reinem Hepatitis B-Oberflächenantigen aus menschlichem Plasma durch Entfernung von Lipiden und eines Teiles der Piasmoproteine, enzymatischen Abbau verbliebener Ballastproteine und schließlich Isolierung immunologisch wirksamer Antigenteilchen, gekennzeichnet dadurch, daß das anfänglich von Lipiden und teilweise von Plasmaproteinen befreite Material mit Pepsin in Mengen von 0,01 bis 0,50 mg/mg, vorzugsweise 0,05 mg/mg digeriert wird, anschließend über Molekularfilter abfiltriert wird, wobei die Teilchen bis zu 100 000 Dalton's in ein phosphatgepuffertes Medium von pH 7f1 bis 7,3 gelangen und die Infektiosität mittels Formaldehyd inaktiviert wird.
2, Verfahren nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, daß das Anfangsmaterial der Digerierung mit Pepsin in einer Menge von 0,05 mg/mg des Proteins unterworfen wird.
3, Verfahren nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, daß das von Plasmaproteinen gereinigte Antigen in Hinblick auf seine Infektiosität mit Formaldehyd in einer Menge von 1 : 2000 Vol/Vol über einen Zeitraum von 36 Stunden inaktiviert wird·
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL1981231588A PL133476B1 (en) | 1981-06-10 | 1981-06-10 | Method of obtaining pure antigen hba from human serum |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DD202506A5 true DD202506A5 (de) | 1983-09-21 |
Family
ID=20008812
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DD82240579A DD202506A5 (de) | 1981-06-10 | 1982-06-09 | Verfahren zur herstellung von reinem hepatitis b-oberflaechenantigen |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4558011A (de) |
| JP (1) | JPS584729A (de) |
| AU (1) | AU8471282A (de) |
| CA (1) | CA1203169A (de) |
| CH (1) | CH650682A5 (de) |
| CS (1) | CS232726B2 (de) |
| DD (1) | DD202506A5 (de) |
| DE (1) | DE3221813A1 (de) |
| DK (1) | DK260482A (de) |
| ES (1) | ES8303916A1 (de) |
| FI (1) | FI822018A7 (de) |
| FR (1) | FR2507478A1 (de) |
| GB (1) | GB2099700B (de) |
| HU (1) | HU186864B (de) |
| IT (1) | IT1151793B (de) |
| NO (1) | NO821927L (de) |
| PL (1) | PL133476B1 (de) |
| PT (1) | PT75031B (de) |
| RO (1) | RO84231B (de) |
| SE (1) | SE8203435L (de) |
| SU (1) | SU1409121A3 (de) |
| YU (1) | YU116882A (de) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4683294A (en) * | 1985-04-03 | 1987-07-28 | Smith Kline Rit, S.A. | Process for the extraction and purification of proteins from culture media producing them |
| US4742158A (en) * | 1986-04-25 | 1988-05-03 | Merck & Co., Inc. | Purification of hepatitis pre-S antigens by polymerized serum albumin affinity binding |
| US5242812A (en) * | 1989-02-07 | 1993-09-07 | Bio-Technology General Corp. | Method for production and purification of hepatitis B vaccine |
| GB9822714D0 (en) | 1998-10-16 | 1998-12-09 | Smithkline Beecham Sa | Vaccines |
| RU2166708C1 (ru) * | 1999-11-01 | 2001-05-10 | Военный инженерно-космический университет им. А.Ф. Можайского | Высокоэффективная система длительного хранения сжиженных газов по схеме кириллова |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3636191A (en) * | 1969-10-08 | 1972-01-18 | Cancer Res Inst | Vaccine against viral hepatitis and process |
| DE2225548C3 (de) * | 1972-05-26 | 1980-05-29 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Intravenös verträglicher Impfstoff gegen Staupe- und Hepatite contagiosa canis |
| FR2303562A1 (fr) * | 1975-03-14 | 1976-10-08 | Community Blood Council Greate | Nouvelle preparation d'antigene utilisable comme vaccin |
| US4017360A (en) * | 1975-05-14 | 1977-04-12 | Merck & Co., Inc. | Method for purifying hepatitis B antigen |
| SE420977B (sv) * | 1976-03-18 | 1981-11-16 | Kabi Ab | Forfarande for rening och isolering av hepatitvirus for vaccinframstellning |
| SU810811A1 (ru) * | 1979-02-19 | 1981-03-07 | Институт Полиомиелита И Вирусныхэнцефалитов Amh Cccp | Способ получени вируса гепатитаА |
-
1981
- 1981-06-10 PL PL1981231588A patent/PL133476B1/pl unknown
-
1982
- 1982-06-03 SE SE8203435A patent/SE8203435L/xx not_active Application Discontinuation
- 1982-06-03 YU YU01168/82A patent/YU116882A/xx unknown
- 1982-06-07 US US06/386,182 patent/US4558011A/en not_active Expired - Fee Related
- 1982-06-07 FI FI822018A patent/FI822018A7/fi not_active Application Discontinuation
- 1982-06-08 CA CA000404716A patent/CA1203169A/en not_active Expired
- 1982-06-08 PT PT75031A patent/PT75031B/pt unknown
- 1982-06-08 CS CS824254A patent/CS232726B2/cs unknown
- 1982-06-09 RO RO107839A patent/RO84231B/ro unknown
- 1982-06-09 DE DE19823221813 patent/DE3221813A1/de not_active Withdrawn
- 1982-06-09 ES ES512971A patent/ES8303916A1/es not_active Expired
- 1982-06-09 NO NO821927A patent/NO821927L/no unknown
- 1982-06-09 IT IT21787/82A patent/IT1151793B/it active
- 1982-06-09 SU SU823454639A patent/SU1409121A3/ru active
- 1982-06-09 AU AU84712/82A patent/AU8471282A/en not_active Abandoned
- 1982-06-09 DD DD82240579A patent/DD202506A5/de unknown
- 1982-06-10 GB GB8216916A patent/GB2099700B/en not_active Expired
- 1982-06-10 HU HU821884A patent/HU186864B/hu unknown
- 1982-06-10 JP JP57099922A patent/JPS584729A/ja active Pending
- 1982-06-10 CH CH3598/82A patent/CH650682A5/de not_active IP Right Cessation
- 1982-06-10 DK DK260482A patent/DK260482A/da not_active Application Discontinuation
- 1982-06-10 FR FR8210146A patent/FR2507478A1/fr active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI822018A7 (fi) | 1982-12-11 |
| SE8203435L (sv) | 1982-12-11 |
| US4558011A (en) | 1985-12-10 |
| AU8471282A (en) | 1982-12-16 |
| PT75031B (en) | 1984-05-09 |
| CS425482A2 (en) | 1984-06-18 |
| CS232726B2 (en) | 1985-02-14 |
| FR2507478B1 (de) | 1984-09-07 |
| DK260482A (da) | 1982-12-11 |
| HU186864B (en) | 1985-10-28 |
| FI822018A0 (fi) | 1982-06-07 |
| IT1151793B (it) | 1986-12-24 |
| JPS584729A (ja) | 1983-01-11 |
| FR2507478A1 (fr) | 1982-12-17 |
| SU1409121A3 (ru) | 1988-07-07 |
| YU116882A (en) | 1985-03-20 |
| PL231588A1 (de) | 1982-12-20 |
| ES512971A0 (es) | 1983-02-16 |
| NO821927L (no) | 1982-12-13 |
| RO84231B (ro) | 1984-07-30 |
| IT8221787A0 (it) | 1982-06-09 |
| RO84231A (ro) | 1984-05-23 |
| DE3221813A1 (de) | 1983-02-17 |
| PT75031A (en) | 1982-07-01 |
| CH650682A5 (de) | 1985-08-15 |
| PL133476B1 (en) | 1985-06-29 |
| ES8303916A1 (es) | 1983-02-16 |
| GB2099700A (en) | 1982-12-15 |
| GB2099700B (en) | 1984-12-19 |
| CA1203169A (en) | 1986-04-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE2611143A1 (de) | Biologisches material, seine verwendung und herstellung | |
| CH626256A5 (en) | Device for the continuous, extracorporal separation of specific substances from blood | |
| EP0173241B1 (de) | Vakzine zur Behandlung der Harnwegsinfektionen | |
| DE2457090C2 (de) | Verfahren zur Herstellung von Impfstoffen sowie Antibronchialimpfstoff | |
| DE2817871A1 (de) | Verfahren und vorrichtung zur abtrennung und reinigung von proteinen durch chromatographie | |
| EP1124575A1 (de) | Verfahren zur herstellung eines antiviralen mittels | |
| DE2301501B2 (de) | Verfahren zur gewinnung eines stabilen, von hypotensiven stoffen freien plasmaproteins | |
| DE2658170C2 (de) | Arzneimittel auf der Basis von Human-Gammaglobulinen zur Behandlung der durch den Hepatitisvirus B ausgelösten akuten oder chronischen Infektionen | |
| DD202506A5 (de) | Verfahren zur herstellung von reinem hepatitis b-oberflaechenantigen | |
| DE3152621C2 (de) | ||
| DE2518474A1 (de) | Mitogenes mittel, verfahren zu seiner herstellung und diese mittel enthaltende arzneimittel und biologische reagenzien | |
| DE2619715A1 (de) | Tumor-antigen und verfahren zu dessen herstellung | |
| DE1617332C3 (de) | Verfahren zum Isolieren eines wasserlöslichen Protein-Metall-Chelats mit antiphlogistischer Wirkung | |
| DE2748520C2 (de) | ||
| CH650154A5 (de) | Wasserloesliche, biologisch aktive fraktion aus dem interzellularen medium des knochenmarks, verfahren zu deren gewinnung und diese enthaltende pharmazeutische zubereitung. | |
| WO2001048476A2 (de) | Gewinnung von biologischen komponenten aus körperflüssigkeiten | |
| DE2528584A1 (de) | Verfahren zur inaktivierung der virusinfektiositaet unter gleichzeitiger stabilisierung von virusantigenen | |
| DE2353035A1 (de) | Verfahren zur stabilisierung menschlicher oder tierischer koerperfluessigkeiten oder pflanzlicher extrakte | |
| DE3877102T2 (de) | Methode fuer die behandlung von viraler gehirnentzuendung. | |
| CH639667A5 (de) | Verfahren zur herstellung von peptidkomplexen aus dns-haltigen organismen. | |
| DE2134930A1 (de) | Antigene Extrakte | |
| CH652028A5 (de) | Extrakt aus pflanzen vom genus epimedium sp., verfahren zur herstellung dieses extrakts und verwendung des extrakts als wirksame komponente in einem immunstimulierenden mittel. | |
| DE2815758C3 (de) | Peptidkomplexe aus DNS-haltigen Organismen | |
| DE2205897C3 (de) | Verfahren zur Herstellung von Antithymozytenserum | |
| DE2644149A1 (de) | Neue parasiten-antigene |