DK156223B - Glucagonlignende peptider til anvendelse som spasmolytiske midler ved diagnosticering - Google Patents
Glucagonlignende peptider til anvendelse som spasmolytiske midler ved diagnosticering Download PDFInfo
- Publication number
- DK156223B DK156223B DK288581A DK288581A DK156223B DK 156223 B DK156223 B DK 156223B DK 288581 A DK288581 A DK 288581A DK 288581 A DK288581 A DK 288581A DK 156223 B DK156223 B DK 156223B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- glucagon
- ser
- gln
- thr
- asp
- Prior art date
Links
- 108010088406 Glucagon-Like Peptides Proteins 0.000 title claims description 6
- DDYAPMZTJAYBOF-ZMYDTDHYSA-N (3S)-4-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-5-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S,3R)-1-[[(2S)-6-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S)-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S)-4-amino-1-[[(2S,3S)-1-[[(1S)-1-carboxyethyl]amino]-3-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-5-carbamimidamido-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxohexan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-1,4-dioxobutan-2-yl]amino]-4-methylsulfanyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)-1-oxopropan-2-yl]amino]-1,5-dioxopentan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-3-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-(1H-imidazol-4-yl)propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical class [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O DDYAPMZTJAYBOF-ZMYDTDHYSA-N 0.000 title claims description 5
- 239000000812 cholinergic antagonist Substances 0.000 title claims description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 20
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 10
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims description 8
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 4
- SAHTWBLTLJWAQA-XIRDDKMYSA-N Gln-Trp-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N SAHTWBLTLJWAQA-XIRDDKMYSA-N 0.000 claims description 3
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 71
- 102000051325 Glucagon Human genes 0.000 description 62
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 62
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 62
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 21
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 230000002048 spasmolytic effect Effects 0.000 description 10
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 8
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 8
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 239000002933 immunoreactive insulin Substances 0.000 description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 101710173664 Glucagon-2 Proteins 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 5
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- HTKQXZVWMVGUHF-XCHZYIBMSA-N (2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-(1H-imidazol-4-yl)propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]propanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]butanedioic acid Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC3=CC=C(C=C3)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC4=CNC=N4)N)O HTKQXZVWMVGUHF-XCHZYIBMSA-N 0.000 description 4
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 4
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 238000001994 activation Methods 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102000030621 adenylate cyclase Human genes 0.000 description 3
- 108060000200 adenylate cyclase Proteins 0.000 description 3
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 210000003405 ileum Anatomy 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 230000008991 intestinal motility Effects 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 230000002366 lipolytic effect Effects 0.000 description 3
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 3
- VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 1,2-ethanedithiol Chemical compound SCCS VYMPLPIFKRHAAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 1- (biphenyl-4-yl) -1-methylethoxycarbonyl Chemical group 0.000 description 2
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 2
- 101710173663 Glucagon-1 Proteins 0.000 description 2
- 101710173666 Glucagon-3 Proteins 0.000 description 2
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 2
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 2
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DRBBFCLWYRJSJZ-UHFFFAOYSA-N N-phosphocreatine Chemical compound OC(=O)CN(C)C(=N)NP(O)(O)=O DRBBFCLWYRJSJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- APIXJSLKIYYUKG-UHFFFAOYSA-N 3 Isobutyl 1 methylxanthine Chemical compound O=C1N(C)C(=O)N(CC(C)C)C2=C1N=CN2 APIXJSLKIYYUKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VBKIFHUVGLOJKT-FKZODXBYSA-N Asn-Thr Chemical compound C[C@@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N)O VBKIFHUVGLOJKT-FKZODXBYSA-N 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical group [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 102000004420 Creatine Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010042126 Creatine kinase Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 208000013016 Hypoglycemia Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011785 NMRI mouse Methods 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 101500026190 Ovis aries Glucagon Proteins 0.000 description 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 1
- 102000015731 Peptide Hormones Human genes 0.000 description 1
- 108010038988 Peptide Hormones Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QOSMNYMQXIVWKY-UHFFFAOYSA-N Propyl levulinate Chemical compound CCCOC(=O)CCC(C)=O QOSMNYMQXIVWKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 1
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Chemical group BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052794 bromium Chemical group 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 238000010612 desalination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 201000010063 epididymitis Diseases 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 210000000232 gallbladder Anatomy 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 108010057331 glucagon (1-21) Proteins 0.000 description 1
- SSBQIOONMDHENV-PYUFTPOESA-N glucagon(1-21) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=C(O)C=C1 SSBQIOONMDHENV-PYUFTPOESA-N 0.000 description 1
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 210000001630 jejunum Anatomy 0.000 description 1
- 230000004130 lipolysis Effects 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- 229940105631 nembutal Drugs 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N p-hydroxybenzoic acid propyl ester Natural products CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 210000001187 pylorus Anatomy 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002040 relaxant effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
DK 156223 B
Den foreliggende opfindelse angâr glucagonlignende peptider med den almene formel I
His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-R (I) 5 hvor R betegner OH, peptidkæden -Phe-Val-Gln-Trp-Leu eller -Met-Asn-Thr eller en peptidkæde, som er identisk med en af de to sidstnævnte peptidkæder, med det forbehold, at én eller f1ère af aminosyreenhederne er udeladt, eller salte deraf til an-vendelse som spasmolytiske midler ved diagnosticering.
10 Det er kendt, at glucagon, som er et polypeptidhormon bestâende af 29 aminosyrer, udviser flere farmakologiske virk-ninger. Anvendelsen af glucagon til behandlingen af hypoglykæmi skyldes forbindelsens metaboliske virkning. Glucagon udviser endvidere en spasmolytisk virkning pâ glat muskulatur. Det bar 15 nu overraskende vist sig, at forbindelser med formel I kvanti-tativt udviser samme spasmolytiske virkning som glucagon, selv om forbindelser med formel I ikke udviser nogen eller kun en mindre, ubetydelig metabolisk virkning. Forbindelser med formel I kan sâledes betragtes som overlegne i forhold til glucagon, 20 nâr der kun onskes en spasmolytisk virkning.
Det har f.eks. vist sig, at glucagon^^^f gluca-^onl-26 ^es(22-26)glucagon in vitro med hensyn til inhibe-rende virkning pâ amplityden af elektrisk stimulerede marsvine-ileumskontraktioner har omtrentlig samme aktivitet som gluca- -5 25 gon, jfr. Europ.J.Pharmacol. 9_0 (1983), side 318, tabel 1. 10 M glucagon giver 83 ± 4% (X ± sd, N = 3) inhibering sammenlig-net med 78 ± 5% for glucagon-j^-^· Virkningen af 10 ^ M er hen-holdsvis 50 ± 3% og 52 ± 5% og af 10 ^ M: 27 ± 3% for hvert peptid.
30 Glucagon^ har endvidere omtrentlig samme aktivitet som glucagon med hensyn til reducerende virkning pâ intestinal motilitet in vivo pâ kaniner. 100 - 200 μg glucagon og 77 - 154 μg glucagon^_2^f som administreres intraven0st som bolusinjek-
DK 156223B
2 tion til anæsteserede kaniner vejende 2,5 - 3,0 kg, giver en inhibering af intestinal motilitet, soin begynder 1 minut efter administreringen, og soin varer ca. 10 min.
De metaboliske virkninger af glucagon^_2^, gluca-5 9οηι_26 °9 des(22-26)glucagon er, nâr de eksemplificeres ved deres lipolytiske virkning in vitro pâ frie fedtceller fra rot-ter og deres virkning in vitro pâ aktiveringen af adenylatcy-clase, ubetydelige sammenlignet med glucagons metaboliske virkninger , j fr. nedenstâende fors0g F, tabel 2. Der er ikke fundet 10 metaboliske virkninger efter administrering til rotter in vivo.
Det er vist, at glucagon frigor insulin fra isoleret, perfunderet rottepancreas, men glucagon^_2^ har ikke en sâdan effekt, nâr det infunderes til samme koncentration som glucago-net. Glucagon^_22 giver endvidere ikke - i modsætning til glu-15 cagon - hyperglykæmi eller frigor insulin in vivo hos rotter.
Glucagon^_2^ og glucagon er omtrentlig ækvipotente med hensyn til relakserende virkning pâ submaximalt kontrahere-de kaningaldeblærepræparater in vitro.
Opfinderne har dokumenteret, at glucagon^_2^/ gluca-20 gon. og des(22-26)glucagon har spasmolytisk virkning og har ingen eller meget ringe metabolisk virkning. Endvidere er det kendt, at glucagon har bâde spasmolytisk og metabolisk virkning. Nâr det er dokumenteret, at glucagon-j^^ og glucagon^_2g har de patentbegrundende, overraskende egenskaber, er det ogsâ 25 sandsynliggjort, at bl.a. glucagon^_22/ glucagon^^^, gluca- g°nl_24 og glucagon-j^^ har samme egenskaber. Nâr det yderlige-re er dokumenteret, at des(22-26)glucagon har samme egenskaber, er det ogsâ sandsynliggjort, at bl.a. des(22-27)glucagon og des(22-28)glucagon har samme egenskaber.
30 Forbindelser med formel I eller salte deraf kan f.eks. anvendes ved radiologisk (r0ntgenunders0gelse), endosko-pisk (direkte iagttagelse af mave- og tarmomrâdet) og hystero-salpingografisk diagnosticering.
Forbindelser med formel I kan omdannes til ved diag-35 nosticering anvendelige præparater og kan administreres, for-trinsvis til mennesker, analogt med kendte metoder.
DK 156223 B
3
Forbindelser med formel I eller salte deraf kan ved diagnosticering anvendes analogt med anvendelsen af glucagon til samme formai. Forbindelser med formel I eller salte deraf kan administreres intravenost, intramuskulært eller subkutant i 5 doser i omrâdet fra ca. 1 til ca. 1000 μς/kg legemsvægt, for-trinsvis fra ca. 10 til ca. 100 μg/kg legemsvægt, selv om der kan administreres lavere eller hojere doser. Den pâbudte dosis afhænger af patientens tilstand og behandlingens varighed.
Forbindelser med formel I kan eventuelt administreres 10 orait, f.eks. ved anvendelse af særlige tilsætninger.
Til parentéral administrering oploses forbindelser med formel I i destilleret vand, og pH-værdien indstilles pâ ca. 6 - ca. 8. Til lettelse af en frysetOrring og til opnâelse af et egnet produkt kan der sættes lactose til oplosningen» 15 Oplosningen sterilfiltreres og fyldes i hætteglas. Derefter frysetorres oplosningen, og hætteglassene lukkes under asepti-ske betingelser.
Forbindelser med formel I og salte deraf kan frem-stilles under anvendelse af metoder, som generelt er kendt 20 inden for peptidsyntese. Forbindelser med formel I kan - kort angivet - opbygges ud fra et beskyttet glucagonfragment, f.eks, beskyttet glucagon^_^, og et beskyttet peptid indeholdende de resterende aminosyreenheder i den onskede forbindelse med form-len I. Fremstilling af beskyttet glucagon^_-^,- er beskrevef i 25 Res.Discl. 1979, 247. Peptider indeholdende flere end amino- syreenhederne 16 - 21 i glucagon kan opbygges ud fra et beskyttet glucagonfragment, f.eks. beskyttet glucagon^g_2]/ °9 et ke-skyttet peptid indeholdende de resterende aminosyreenheder. Anvendelsen af egnede beskyttelsesgrupper og aktiveringer under 30 peptidsynteserne er kendt for fagmanden. Det foretrækkes at an-vende beskyttelsesgrupper, som let kan fjernes.
Glucagon^_2^, glucagon^_2g og des(22-26)glucagon kan sâledes fremstilles ved at koble det beskyttede glucagonfragment med formlen II
DK 156223 B
4
Adoc-His(Adoc ) -Ser (Bu*') -Gln-Gly-Thr (Bu1' ) -Phe-Thr (But) -Ser ( Bu1' ) -Asp ( OBut ) -Tyr ( But ) -Ser ( But ) -Lys ( Boc ) -Tyr ( But ) -L eu-Asp ( OBu1" ) -OH (II)
med de beskyttede glucagonfragmenter med foraient henholdsvis 5 III, IV eller V
H-Ser ( Bu1' ) -Arg ( HCl ) -Arg ( HCl ) -Ala-Gln-Asp ( OBut ) -OBu1" ( III ) H-Ser ( Bu1" ) -Arg ( HBr ) -Arg ( HBr ) -Ala-Gln-Asp ( OBu1" ) -Phe-Val-t
Gln-Trp-Leu-OBu (IV) H-Ser ( Bu1" ) -Arg ( HBr ) -Arg ( HBr ) -Ala-Gln-Asp ( OBu*1 ) -Met-Asn-10 Thr ( Bu1" )-OBu11 (V) ved den blandede anhydridmetode under anvendelse af isobutyl-chlorformiat. Fra de pâ denne mâde vundne, fuldt beskyttede peptider kan beskyttelsesgrupperne fjernes under sure betingel-ser, f.eks. ved behandling med trifluoreddikesyre indeholdende 15 10% 1,2-ethandithiol. De râ peptider kan renses ved ionbytter-
kromatografering, f.eks. QAE-Sephadex® A-25, efterfulgt af en afsaltning, f.eks. gelfiltrering pâ Sephadex® G-25. De rensede peptider kan isoleres ved fryset0rring. De beskyttede glucagon-mellemproduktfragmenter med formlen IV og V kan fremstilles ved 20 kobling af dét beskyttede glucagonfragment med formlen VI
Bpoc-Ser(Bufc)-Arg(HBr)-Arg(HBr)-Ala-Gln-Asp(0Bufc)OH (VI)
med de beskyttede glucagonfragmenter med formlen henholdsvis VII eller VIII
DK 156223 B
5 H-P he-Val-Gln-Trp-Leu-OBu^ (VII) H-Met-Asn-Thr(But)-OBut (VIII) under anvendelse af den blandede anhydridmetode, hvorefter den N-terminale Bpoc-gruppe kan fjernes selektivt under milde, sure 5 betingelser, f.eks. ved behandling med HCl (0,2N) i methanol/ N,N-dimethylformamid.
De beskyttede peptidfragmenter med formlen III, VI, VII og VIII kan fremstilles ved trinvis forlængelse af kæden under anvendelse af konventionelle metoder, sâsom den aktive 10 estermetode eller den blandede anhydridmetode til kobling.
Peptider med formel I, hvor R betegner en peptidkæde7 der er identisk med en af de to petidkæder -Phe-Val-Gln-Trp=Leu og -Met-Asn-Thr, i hvilken dog en eller flere af aminosyreenhe-derne er udeladt, kan fremstilles pâ tilsvarende mâde som be-15 skrevet ovenfor, med den undtagelse, at en eller flere af de pâgældende aminosyreenheder udelades i de beskyttede petidfrag-menter med formel VII og VIII.
En fremgangsmâde til fremstilling af glucagon^^i er beskrevet i J.Biol.Chem. 247, nr. 7, 2132 - 2138 (1972), nemlig 20 fordojelse af svine-, okse- eller fâreglucagon med carboxy-petidase A. Glucagon1_2g er kendt fra Metabolism 25, Suppl. 1, 1315 - 1316 (1976).
Som eksempler pâ specifikke forbindelser med formlen I kan angives forbindelser med formel I, hvor R er Phe, Val, 25 Gin, Trp, Leu, Met, Asn eller Thr. En foretrukken forbindelse med formlen I er glucagon^^i' idet den udviser ekstra gode egenskaber, og idet den let kan fremstilles, f.eks. ud fra na-turligt glucagon.
Forbindelser med den almene formel I* 30 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-
Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-R' (I1)
DK 156223 B
6
hvor R' har samme betydning som R, med de forbehold, at R' ikke betegner -Phe-Val-Gln-Trp-Leu eller OH, kan - kort angivet -fremstilles ved at behandle en forbindelse med den almene formel IX
5 Adoc-His ( Adoc ) -Ser ( Bufc ) -Gln-Gly-Thr ( Bu1^ ) -Phe-Thr ( Bufc ) -
Ser ( Bufc ) -Asp ( OBu^ ) -Tyr ( Bu1' ) -Ser ( But ) -Lys ( Boc ) -Tyr ( Bu^ ) -Leu-Asp ( OBu1' ) -Ser ( Bufc ) -Arg ( HX ) -Arg ( HX ) -Ala-Gln-Asp ( OBu1^ ) -R1-OBut (IX) hvor R1 betegner peptidkæden -Phe-Val-Gln-Trp-Leu-, fra hvilken 10 én eller flere af aminosyreenhederne er udeladt, peptidkæden -Met-Asn-Thr(Bu1")- eller en peptidkæde, som er identisk med sidstnævnte peptidkæde, med det forbehold, at ën eller flere af aminosyreenhederne er udeladt, og X betegner chlor eller brom, med en syre sâsom trifluoreddikesyre.
15 Som eksempel pâ salte af forbindelser med formel I
kan angives natrium-, kalium-, magnésium-, kalcium- og zink-salte og syreadditionssalte med organiske eller uorganiske syrer sâsom myresyre, methansulfonsyre, saltsyre og svovlsyre. Foretrukne salte af forbindelser med formel I er physiologisk 20 og farmaceutisk tolerabïe salte.
Præparater indeholdende en forbindelse med formel I eller et sait deraf kan ogsâ indeholde et eller flere farmaceutisk tolerabïe bærestoffer, fortyndingsmidler, fortrinsvis vand, og/eller tilsætningsstoffer. Som eksempler pâ sâdanne 25 bærestoffer kan angives konventionelle konserveringsmidler, f.eks. p-hydroxybenzoesyremethylester og -propylester, og na-triumchlorid.
Den heri anvendte nomenklatur er i overensstemmelse med den, der er angivet i J.Biol.Chem. 247, 977 - 983 (1972), 30 og Biochem.J. 104, 17 - 19 (1967). For kortheds skyld er gluca-gon-(l-21)-heneicosapeptid heri betegnet glucagon-j^i' gluca-gon-(l-26)-hexacosapeptid er betegnet glucagon1_26 °ÇT des-pentapeptid-(22-26)-glucagon er betegnet des(22-26)glucagon.
DK 156223 B
7
Bpoc betegner l-(biphenyl-4-yl)-l-methylethoxycarbonyl, Adoc t betegner 1-adamantyloxycarbonyl, Bu betegner tertiært butyl, og Boc betegner tert.butyloxycarbonyl.
Opfindelsen belyses nærmere ved felgende eksempler: 5 Eksempel 1 des(22-26)glucagon.
1 g Adoc-His(Adoc)-Ser(But)-Gln-Gly-Thr(But)-Phe-Thr(But)-Ser ( But ) -Asp ( OBu*1 ) -Tyr ( But ) -Ser ( Bu1" ) -Lys ( Boc ) -Tyr ( Bu^ ) -Leu-Asp ( OBut ) -Ser ( Bu*" ) -Arg ( HBr ) -Arg ( HBr ) -Ala-Gln-Asp ( OBu*" ) -Met-10 Asn-Thr(But)-OBu^ opldses i 25 ml trifluoreddikesyre indehol-dende 10% 1,2-ethandithiol, og reaktionsblandingen lades henstâ ved 15°C i 3 timer. Der tilsættes derefter langsomt 200 ml tetrahydrofuran, og bundfaldet isoleres, vaskes med tetrahydro-furan og terres i vakuum. Det resulterende produkt kan renses 15 ved ionbytterkromatografering pâ QAE-Sephadex® A-25 og afsaltes ved gelfiltrering pâ Sephadex® G-25.
Eksempel 2
Et præparat til parentéral administrering indeholden-de 1 mg glucagon^ ^]_ Pr· ^an fremstilles pâ f0lgende mâde: 20 1 g glucagon^^i °9 99 ÇT lactose opleses i én liter destilleret vand, og pü-værdien indstilles pâ 7,0. Derefter sterilfiltreres opldsningen. Den stérile oplesning fyldes i 10 ml's hætteglas pâ en sâdan mâde, at hvert hætteglas indeholder 1,0 ml oplesning. Opldsningerne fryseterres derefter, og hætte-25 glassene lukkes under aseptiske betingelser.
Produktet i hætteglassene skal f0r administreringen opleses i 1,0 ml sterilt vand.
DK 156223 B
8
Eksempel 3
Et præparat til parentéral administrering indeholden-de 10 mg glucagon1_21 pr. ml kan fremstilles pâ folgende mâde: 10 g glucagon^_2^ og 90 g lactose oploses i en liter 5 destilleret vand, og opl0sningen fremstilles pâ analog mâde som beskrevet i eksempel 2.
ForsOg A: Spasmolytisk effekt
En hankanin, som vejer 2,56 kg, anæsteseres med nem-butal efter at hâve fastet natten over. Positionen for den bal-10 Ion, der anvendes til mâling af intestinal motilitet, er 1 m fra pylorus i jéjunum. Motiliteten registreres f0r og efter in-* traven0s administrering af 77 μg glucagon^_2j i 1 ml 0,9% salt-vand indeholdende 0,1% humant serumalbumin. Den opnâede effekt er nær atoni i tarmen. Effekten begynder 1 minut efter admini-15 strering og varer 11 minutter.
Forsog B: Spasmolytisk effekt
En hankanin, som vejer 2,32 kg, behandles med folgen-de doser som beskrevet i eksempel A: 77 μg glucagon^_21 i 1 ml af den i forsbg A angivne 20 opl0sning gav intraven0st ingen mâlelig spasmolytisk effekt.
154 μg glucagon^_2^ i 1 ml af den i forsog A angivne oplosning havde intraven0st tvivlsom virkning. 308 μg gluca-g°ni 2i ί 1 ml &f ovennævnte oplosning havde en tydelig spasmolytisk effekt, idet den næsten gav fuldstændig atoni. Effekten 25 begyndte 2 1/2 minut efter administreringen og varede 6 minutter.
DK 156223 B
9
Til samraenligning administreredes glucagon til samme kanin. 200 μg glucagon havde intravenost ingen mâlelig effekt, men 400 μg glucagon gav imidlertid en tydelig effekt, der var sammenlignelig med den effekt, som 308 μg glucagon^^ gav.
5 Forsog C: Akut toxicitet 10 mg glucagon1_21 administreret intravenost som bolus til NMRI-mus, som vejer 20 g (d.v.s. en dosis pâ 500 mg/kg legemsvægt), havde ingen skadelig virkninger. Der skete ingen d0dsfald.
10 Fors0g D: Spasmolytisk virkning
Fem marsvin (hanner og hunner), som vejede 300 - 350 g, blev dræbt med et slag mod hovedet efterfulgt af afblodning.
2 cm ileum-segmenter oralt fra ampulla blev anbragt i et 15 ml organbad indeholdende en Tyrode-oplosning, som ved 37°C blev.
15 gennemboblet med 95% C>2 og 5% CC>2. Vævene blev sat op med en tension pâ 1 g. Reaktionen over for transmural stimulering blev optegnet under anvendelse af en absorberingskile og en photo-elektrisk transducer (Devices), som var forbundet til en Kipp & Zonen-skriver. Submaksimale twitch-respons blev opnâet ved sti-20 mulering ved 1 - 5 V under anvendelse af platinelektroder og en Grass-stimulator. Pulshastigheden var 0,2 pps, og pulsvarig-heden var 50 ms. Rumfang pâ 100 μΐ blev tilsat til opnâelse af de endelige præparatkoncentrationer i badet.
Resultatet af undersogelsen blev, at den relative 25 aktivitet af glucagon^_2g og des(22-26)glucagon pâ inhiberingen af elektrisk stimuleret marsvineileum in vitro er 100% sammen-lignet med glucagons tilsvarende virkning.
DK 156223B
ίο
Forsog E: Metabolisk virkning
Glucagon, der blev administreret intraven0st til rot-ter soin en bolusinjektion i en dosis pâ 1 mg/kg, bevirkede sammenlignet med placebo en signifikant for0gelse af blod-5 glucose- og plasma-IRI- (immunoreaktivt insulin) niveauet (se nedenstâende tabel 1). En modérât for0gelse i blodglucose-niveauet hos de rotter, der var blevet behandlet med placebo i l0bet af fors0gsperioden, skyldtes det stress, rotterne var udsat for, nâr der blev taget blodpr0ver fra orbital plexus.
10 Plasma-IRI- og blodglucoseniveauet steg signifikant hos de rotter, der var behandlet med glucagon.
I modsætning hertil forârsagede glucagon^_2^ administreret intraven0st i ækvimolære doser (dvs. 0,77 mg/kg) ikke nogen for0gelse af blodglucose- eller plasma-IRI-niveauerne 15' sammenlignet med administration af placebo (jfr. tabel 1).
Plasma- IRI-niveauet hos gruppen, der fik glucagon.^^, var lidt h0jere end niveauet hos placebo-gruppen. Niveauet var imidlertid ogsâ lidt h0jere allerede f0r behandlingen, men forskellene var ikke signifikante.
n DK 156223 B
Tabel 1
Virkning pâ blodglucose og plasma-IRI hos fodrede rotter_
Minutter efter in.traven.0s dosering til tiden 0 minutter _=5_2_5_10_15_30_60 5 Blodglucose, mg/100 ml X ± S.E.M.
Glucagon 94+2 116+ 5 128± 4a 134± 3a 137±4a 146± 6b 112+2
Placebo 89+3 107+ 3 112± 3 117± 4 115±4 108± 4 125±5
Glucagon1_21 101±3 111± 6 113± 5 122± 5 126±9 130± 6 129±5
Placebo 102±4 115± 2 119± 3 126+ 4 125±5 127± 6 126±3 10 Plasma IRI, μϋ/ml, X ± S.E.M.
Glucagon 19±4 95±18a 98±19a 82±16a 67±9b 53±15 17±5
Placebo 17±4 25± 3 28± 7 23± 3 20±3 22+ 3 25±2
Glucagon1_21 32±3 30± 3 33± 3 35± 6 43±8 38± 7 30+2
Placebo 13±2 20± 3 20± 3 22± 4 24±4 22± 4 16+4 a H ' 15 P mindre end 0,5; P mindre end 0,01 (Students test)
Forsog F: Lipolytisk virkning og adenylatcyclaseaktivering
Adenylatcyclaseaktiviteten i rotteleverplasmamembra- 3 2 ner blev bestemt ved mâling af omdannelsen af [μ- P^ATP til Ij^pJcAMP. Testmediet indeholdt fa-^P^ATP (40 pCi/ml), ATP 20 (0,1 mmol/1), MgCl2 (5 mmol/1), KC1 (10 mmol/1), 3-isobutyl-l- methylxanthin (1 mmol/1), cAMP (1 mmol/1), GTP (50 μπιο1/1), créâtinkinase (1 mg/ml), creatinphosphat (30 mmol/1), humant serumalbumin (0,1%) og leverplasmamembraner (0,1 - 0,2 mg protein/ml) i Tris 50 mmol/1, pH 7,6. Det totale reaktions-25 rumfang var 100 μΐ, og membranerne blev inkuberet ved 30°C i 15 minutter. Reaktionen blev stoppet, og cAMP blev renset som
DK 156223 B
12 beskrevet af Salomon et al. (Anal.Biochem. ,58, 541 - 548
VM
(1974)) under anvendelse af Dowex -50 og neutral âluminiumoxydchromatografering.
Den lipolytiske aktivitet af glucagon og glucagonana-5 loger blev bestemt ved mâling af glycerolfrigorelsen fra frie fedtceller i lobet af 60 minutters inkubering. Cellerne blev fremstillet fra epididymalfedtpuder fra Wistar-rotte, jfr.
Horm.Metab.Res. 5, 196 - 199 (1973).
De opnâede resultater fremgâr af nedenstâende tabel 10 2.
Tabel 2
Adenylatcyclase- Lipolyse,
Forbindelse aktivering, %_%_
Glucagon^_25 0,16 0,20 15 des(22-26)glucagon <. 0,001 0,01
Glucagon 100 100
Claims (4)
1. Glucagonlignende peptider til anvendelse sorti spas-molytiske midler ved diagnosticering, kendetegnet ved, at de har den almene formel I
5 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu- Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-R (I) hvor R betegner OH, peptidkæden -Phe-Val-Gln-Trp-Leu eller -Met-Asn-Thr eller en peptidkæde, som er identisk med en af de to sidstnævnte peptidkæder, med det forbehold, at én eller 10 flere af aminosyreenhederne er udeladt, eller salte deraf.
2. Glucagonlignende peptider ifolge krav 1, kendetegnet ved, at R betegner Phe, Val, Gin, Trp, Leu, Met, Asn eller Thr.
3. Glucagonlignende peptider if0lge krav 1, kendeteg-15 net ved, at R betegner OH, -Phe-Val-Gln-Trp-Leu eller -Met- Asn-Thr .
4. Glucagonlignende peptid ifolge krav 1 eller 3, kendetegnet ved, at R betegner OH.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DK288581A DK156223C (da) | 1980-07-01 | 1981-06-30 | Glucagonlignende peptider til anvendelse som spasmolytiske midler ved diagnosticering |
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DK283180 | 1980-07-01 | ||
| DK283180A DK283180A (da) | 1980-07-01 | 1980-07-01 | Polypeptider og derivater deraf |
| DK288581A DK156223C (da) | 1980-07-01 | 1981-06-30 | Glucagonlignende peptider til anvendelse som spasmolytiske midler ved diagnosticering |
| DK288581 | 1981-06-30 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK288581A DK288581A (da) | 1982-01-02 |
| DK156223B true DK156223B (da) | 1989-07-10 |
| DK156223C DK156223C (da) | 1989-12-04 |
Family
ID=26066755
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK288581A DK156223C (da) | 1980-07-01 | 1981-06-30 | Glucagonlignende peptider til anvendelse som spasmolytiske midler ved diagnosticering |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| DK (1) | DK156223C (da) |
-
1981
- 1981-06-30 DK DK288581A patent/DK156223C/da not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK288581A (da) | 1982-01-02 |
| DK156223C (da) | 1989-12-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6232468B1 (en) | Dipeptides with neurokinin-antagonistic activity | |
| US5847066A (en) | Analogs of growth hormone-releasing factor | |
| KR100493830B1 (ko) | 친지성부및혈관작용성장펩티드(vip)의프래그먼트의콘쥬게이트 | |
| JP6622690B2 (ja) | ペプチド組成物 | |
| JP2791955B2 (ja) | ニューロペプチドｙ作用剤及び部分的作用剤 | |
| JPH10330397A (ja) | サイトカイン調節剤およびサイトカインレベルの変化に関連する病状および状態における使用方法 | |
| DK150146B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af somatostatinanaloge hepta- eller octapeptider eller salte eller complexer deraf | |
| TW201315743A (zh) | 附加糖鏈之聚胜肽及含有該聚胜肽之醫藥組合物 | |
| KR102230363B1 (ko) | 아실화 옥신토모듈린 펩타이드 유사체 | |
| SK435783A3 (en) | Synthetic peptides, biologically active fragment and non-toxic synthetic peptide salt | |
| DE69424736T2 (de) | Dem Motilin ähnliche Peptide mit hemmender Wirkung auf den gastrointestinalem Trakt | |
| NO812233L (no) | Nye peptider og anvendelse av peptider. | |
| Coy et al. | Development of a potent bombesin receptor antagonist with prolonged in vivo inhibitory activity on bombesin-stimulated amylase and protein release in the rat | |
| DE69701269T2 (de) | Zyklische Motilin-ähnliche Polypeptide mit die gastrointestinale Motorik stimulierender Aktivität | |
| GB2045255A (en) | Peptide angiotensin converting enzyme inhibitors | |
| EP0269299A2 (en) | Atrial peptides | |
| ES2264174T3 (es) | Antagonistas de somatostatina. | |
| DE69425212T2 (de) | Dem Motilin ähnliche Polypeptide mit stimulierender Wirkung auf den gastrointestinalen Trakt | |
| EP0101929B1 (en) | Polypeptide-diesters, their production and use | |
| PT87857B (pt) | Processo para a preparacao de novos peptidos com propriedades imunossupressoras | |
| DK156223B (da) | Glucagonlignende peptider til anvendelse som spasmolytiske midler ved diagnosticering | |
| JPH04501259A (ja) | Ｃｒｆ拮抗体 | |
| EP0117447B1 (de) | Cyclische Peptide mit Somatostatin-Wirkung | |
| FI79716C (fi) | Daeggdjur-pgrf. | |
| KR101843248B1 (ko) | 흉선 기질 림프단백질 매개 신호전달을 제어하는 펩타이드 유도체 및 이를 포함하는 알러지 및 천식 질환 예방 및 치료용 약학 조성물 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PBP | Patent lapsed |