DK163988B

DK163988B - 9alfa,11alfa-epoxy-20-spiroxaner og analoge deraf med aaben tetrahydrofuranring e samt deres fremstilling og farmaceutiske praeparater indeholdende dem

Info

Publication number: DK163988B
Application number: DK189484A
Authority: DK
Inventors: Juergen Grob; Jaroslav Kalvoda
Original assignee: Ciba Geigy Ag
Priority date: 1983-04-13
Filing date: 1984-04-12
Publication date: 1992-04-27
Also published as: NL300144I2; AR242222A1; PT78413A; ES8705460A1; DD233375A5; JPS59231100A; ES8602846A1; NO159800C; AU565017B2; ES544768A0; ES544769A0; FI77669B; ATE39256T1; LU91072I2; ES8705459A1; CA1220781A; IE840906L; DE122004000012I1; EP0122232B1; IL71504A

Description

i

DK 163988 B

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte 9a,lla-spir-oxaner og analoge deraf med åben tetrahydrofuranring E med den almene formel CH, Y1 y2 5 'll 0Η3ΓοΝί—{•“•(chJ.-A-x (AfV/y* /vVv • '1

10 R

hvori -A-A betyder gruppen -CH2-CH2- eller -CH=CH-, R1 betyder hydrogen, og R1 betyder α-orienteret lavalkoxycarbonyl, eller hvor R1 og R1 sammen betyder en a- eller /3-orienteret methyl-engruppe, -B-B- betyder gruppen -CH2-CH2- eller en a- eller 15 /3-orienteret gruppe CH? /\ -CH-CH- 20 X betyder 2 hydrogenatomer eller oxo, Y1 og Y1 sammen betyder en oxygenbro -0-, eller Y1 betyder hydroxyl, og Y1 betyder hydroxyl, lavalkoxy eller, såfremt X betyder H2, lavalkanoyl-oxy, eller er salte af forbindelser med formlen I, hvori X betyder oxo, og Y1 betyder hydroxyl, dvs. af tilsvarende 17jS-25 hydroxy-21-carboxylsyrer.

Opfindelsen angår også fremgangsmåder til fremstilling af disse forbindelser og farmaceutiske præparater indeholdende disse forbindelser. De omhandlede forbindelser og præparater 30 anvendes især som aldosteron-antagoniserende diuretika.

Ved udtrykket "lav" i forbindelse med organiske grupper skal her forstås sådanne med højst 7, fortrinsvis 1-4, carbonatomer.

35 En lavalkoxycarbonylgruppe er fortrinsvis en gruppe, som er afledt af alkyl med 1-4 carbonatomer, dvs. methyl, ethyl,

DK 163988 B

2 propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, sek-butyl og tert-butyl, og især foretrækkes methoxycarbonyl, ethoxycarbonyl og isoprop-oxycarbonyl. En lavalkoxygruppe er fortrinsvis en gruppe, der er afledt af en af de ovenfor anførte C^-C^alkylgrupper, 5 især en primær gruppe. En lavalkanoylgruppe er fortrinsvis en sådan, der er afledt af ligekædet alkyl med 1-7 carbonatomer, og især foretrækkes formyl og acetyl.

En methylenbro i 6,7- og/eller 15,16-stillingen er fortrinsvis β-orienteret.

10 Foretrukne forbindelser med formlen I er sådanne, hvori 1 2 Y og Y sammen betyder en oxygenbro -0-.

Særligt foretrukne forbindelser med formlen I er forbindelser, hvori X betyder oxo.

Blandt forbindelser med formlen I, hvori R betyder hydrogen, 2 15 R betyder lavalkoxycarbonyl, og X betyder oxo, foretræk- 1 2 kes ganske specielt sådanne, hvori Y sammen med Y udgør oxygenbroen· -O-.

173-Hydroxy-21-carboxylsyrerne kan som allerede nævnt også foreligge i form af deres salte. Der kan især anvendes 20 metal- og ammoniumsalte, såsom alkalimetal- og jordalkali-metalsalte, f.eks. natrium-, calcium-, magnesium- og fortrinsvis kaliumsalte, eller ammoniumsalte afledt af ammoniak eller en egnet, fortrinsvis fysiologisk uskadelig, organisk nitrogenholdig base. Som baser kan der anvendes 25 såvel aminer, f.eks. lavalkylaminer (triethylamin), hydroxy-lavalkylaminer, såsom 2-hydroxyethylamin, di-(2-hydroxy-ethyl)-amin eller tri-(2-hydroxyethyl)-amin, cycloalkylaminer (såsom dicyclohexylamin) eller benzylaminer (såsom benzylamin og N,N'-dibenzylethylen), som nitrogenholdige 30 heterocycliske forbindelser, f.eks. sådanne forbindelser med aromatisk karakter (f.eks. pyridin eller quinolin) 3

DK 163988 B

eller sådanne med mindst en delvis mættet heterocyclisk ring (N-ethylpiperidin, morpholin, piperazin eller N,N'-dimethylpiperazin).

Til de foretrukne forbindelser hører også alkalimetalsalte- 5 ne, især kaliumsaltene af forbindelserne med formlen I, 1 2 hvori R og R sammen betyder en methylengruppev eller 1 2 hvor R først og fremmest betyder hydrogen, og R først og fremmest betyder lavalkoxy, idet X betyder oxo, og 2 og Y hver for sig betyder hydroxyl.

10 Særligt foretrukne forbindelser med formlen I er følgende forbindelser: 9a,lla-epoxy-7a-methoxycarbonyl-20-spirox-4-en-3,21-dion, 9a,lla-epoxy-7a-ethoxycarbonyl-20-spirox-4-en-3,21-dion og 9a,lla-epoxy-7a-isopropoxycarbonyl-20-spirox-4-en-3,21-dion, 15 samt 1,2-dehydro-analoge af disse forbindelser, 9a,lla-epoxy-6a,7a-methylen-20-spirox-4-en-3,21-dion, 9a,lla-epoxy-63/7&-methylen-20-spirox-4-en-3,21-dion og 9a,lla-epoxy-ββ,7β;153/163-bismethylen-20-spirox-4-en-3,21-dion 20 samt den 1,2-dehydro-analoge af disse forbindelser, 9a,lla-epoxy-7a-methoxycarbonyl-173-hydroxy-3-oxo-pregn- 4-en-21-carboxylsyre, 9a,lla-epoxy-7a-ethoxycarbonyl-173-hydroxy-3-oxo-pregn-4-en-21-carboxylsyre, 25 9a,lla-epoxy-7a-isopropoxycarbonyl-173-hydroxy-3-oxo-pregn- 4-en-21-carboxylsyre, 9a,lla-epoxy-173-hydroxy-6a,7a-methylen-3-oxo-pregn-4-en-21-carboxylsyre, 9a,lla-epoxy-173~hydroxy-63/73-methylen-3-oxo-pregn-4-en-30 21-carboxylsyre og 9a,lla-epoxy-173-hydroxy-63/73;153,163-bismethylen-3-oxo-pregn-4-en-21-carboxylsyre

DK 163988B

4 samt alkalimetalsalte, først og fremmest kaliumsalte, af alle disse syrer og også en tilsvarende 1,2-dehydro-analog af hver enkelt af de nævnte carboxylsyrer eller et salt deraf, 5 9α,lla-epoxy-153,163-methylen-3,21-dioxo-2 0-spirox-4-en-7a- carboxylsyre-methylester, -ethylester og -isopropylester, 9a,lla-epoxy-153,163-methylen-3,21-dioxo-20-spiroxa-l,4-dien-7a-carboxylsyre-methylester, -ethylester og -isopropylester, og desuden 10 9a,lla-epoxy-3-oxo-20-spirox-4-en-7a-carboxylsyre-methyl- ester, -ethylester og -isopropylester, 9a,lla-epoxy-63,7 3-methylen-2 0-spirox-4-en-3-on, 9a,lla-epoxy-63,73;153,16f3-bismethylen-20-spirox-4-en-20-on, og desuden 15 9a,lla-epoxy-173-hydroxy-17a-(3-hydroxypropyl)-3-oxo-androst- 4-en-7a-carboxylsyre-methylester, -ethylester og -isopropylester, 9a,lla-epoxy-173~hydroxy-17a- (3-hydroxypropyl)-6a,7a-methylen-androst-4-en-3-on, 20 9a,lla-epoxy-173-hydroxy-17a- (3-hydroxypropyl)-63,73- methylen-androst-4-en-3-on og 9 a,1la-epoxy-173-hydroxy-17 a-(3-hydroxypropy1)-63,73?153,163-bismethylen-androst-4-en-3-on herunder 17a-(3-acetoxypropyl)- og 17a-(3-formyloxypropyl)-25 analoge af de nævnte androstan-forbindelser, samt tillige 1,2-dehydro-analoge af alle de nævnte forbindelser af androst-4-en-3-on- og 20-spirox-4-en-3-on-rækken.

Forbindelserne ifølge opfindelsen udmærker sig ved gunstige biologiske egenskaber og er således værdifulde farmakologi-30 ske aktive stoffer. Forbindelserne har en kraftig aldosteron-antagoniserende virkning, idet de formindsker og normaliserer voldsomt stor natrium-retention og kalium-ekskretion fremkaldt af aldosteron. Forbindelserne ifølge opfindelsen har derfor en vigtig anvendelse som kaliumbesparende diure-35 tika ved behandling af f.eks. hypertension, hjerteinsufficiens eller levercirrhose.

DK 163988 B

5

Fra f.eks. Fieser og Fieser: Steroids, side 708 (Reinhold Publ. Corp., New York, 1959) og GB-patentskrift nr. 1.041.534 kendes 20-spiroxan-derivater med aldosteron-antagoniserende virkning. Fra f.eks. US-patentskrift nr. 3.849.404 kendes 5 endvidere analog virksomme 170-hydroxy-21-carboxylsyrer og salte deraf. De kendte forbindelser mangler den karakteristiske 9a,lla-epoxy-gruppe, som er væsentlig for de omhandlede forbindelsers virkning. Endvidere har de i terapien hidtil anvendte forbindelser af denne art den væsentlige ulempe, at 10 de altid har en vis sexualspecifik aktivitet, som ved den sædvanlige langvarige terapi før eller senere fremkalder forstyrrelser. Særligt uønskede er forstyrrelser, der skyldes de kendte antialdosteron-præparaters antiandrogene virkning.

Det har nu vist sig, at 9a, lla-epoxy-forbindelserne med forra-15 len I fremkalder de uønskede bivirkninger i væsentlig lavere grad, selv om de har helt samme gunstige antialdosteron-virkning som analogt opbyggede, men i 9,11-stillingen usubstituerede forbindelser. Således udviser f.eks. 9a,11a-epoxy-63,73-methylen-20-spirox-4-en-3,21-dion på adrenal-20 ektomiserede hanrotter ved Kagawa-testen [Kagawa et al.:

Proc. Soc. Exptl. Biol. Med. (N.Y.) 115, 837-840 (1964)] i hele det afprøvede dosisområde på 1-10 mg/kg en lige så stor, om ikke kraftigere, aldosteron-antagoniserende virkning som den tilsvarende 9,11-usubstituerede sammenlignings-25 forbindelse 6|3,7|3-methylen-20-spirox-4-en-3,21-dion (J.F. Zawadzki et al.: U.S. Patent nr. 3.849.404). Derimod bindes førstnævnte forbindelse ved en specifik kvantitativ test in vitro, ved hvilken bindingen af forsøgsforbindelsen til androgen-receptorer i homogenater af ventral rotte-30 prostata måles som udtryk for antiandrogen virkning, ca.

20 gange (efter en forsøgstid på 2 timer) til endog 27 gange (efter en forsøgstid på 20 timer) svagere end ovennævnte sammenligningsforbindelse.

De kemiske navne for forbindelser med formlen I og for 35 analoge forbindelser med de samme karakteriske strukturkendetegn er afledt af den gængse nomenklatur på følgende

DK 163988 B

6 af 20-spiroxan (eksempelvis er en forbindelse med formlen 1 2 I, hvori X betyder oxo, og Y sammen med Y betyder -0-, afledt af 20-spiroxan-21-on), for forbindelser, hvori Y^ 2 og Y hver for sig betyder hydroxyl, og X betyder oxo, 5 af 175-hydroxy-17a-pregnan-21-carboxylsyre, og for for- 1 2 bindeiser, hvori Y og Y hver for sig betyder hydroxyl, og X betyder 2-hydrogenatomer, af 173-hydroxy-17a-(3-hydroxypropyl)-androstan. Da de cycliske former og former med åben kæde, dvs. henholdsvis lactoner og 173-hydroxy-10 21-carboxylsyrer og deres salte, er så snævert forbundne, at de sidstnævnte blot kan betragtes som en hydratiseret form af førstnævnte, skal der ovenfor og i det følgende såvel ved slutforbindelserne med formlen I som ved analogt opbyggede udgangsforbindelser og mellemprodukter forstås 15 alle de nævnte former, medmindre andet specielt er anført.

De ovenfor karakteriserede forbindelser med formlen I kan fremstilles ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, der er ejendommelig ved, at man a) omsætter en forbindelse med formlen . CH3 γ1 Y2

20 ffyV

/vYY

R1 12 1 2 hvori A-A, B-B, R , R , X, Y og Y har de ovenfor angivne betydninger, med en peroxysyre eller b) omsætter en forbindelse med formlen CH Y1 Y2 aA/ V v (III)

Til iA/v\2 '1

R

7

DK 163988 B

1 o i 2 hvori A-A, B-B, R , R , Y og Y har de ovenfor angivne 1 2 betydninger, og mindst §t af symbolerne Z og Z betyder hydroxyl sammen med hydrogen og det andet symbol har samme betydning eller betyder oxo eller, som symbolet Z , også 5 kan betyde 2 hydrogenatomer, med et oxidationsmiddel eller c) til fremstilling af en forbindelse, hvori Y^ betyder hydroxyl, og de øvrige symboler har de ovenfor anførte betydninger, hydrogenerer en forbindelse med formlen CH OH Y2 Ύ0ν:·-κ4'χ ίο (IV) /vV'v k1 12 2 hvori A-A, B-B, R , R , X og Y har de ovenfor angivne betydninger, og W betyder en gruppe -CH=CH- eller -CsC-, til mætning af dobbeltbindingen i sidekæden eller 15 d) til fremstilling af en forbindelse med formlen I, 1 2 hvori Y og Y sammen betyder en oxygenbro -O-, og de øvrige symboler har de ovenfor angivne betydninger, cycli-serer en forbindelse med formlen

CH, Y

. , 3 OH ,o ,Αΐ/γν* /vVv 1 2 20 hvori A-A, B-B, R , R og X har de ovenfor angivne betydninger, og Y0 betyder en fraspaltningsgruppe, under fraspaltning af gruppen YQ eller e) til fremstilling af en forbindelse med formlen I, hvori 1 2 R betyder hydrogen og R betyder en lavalkoxycarbonyl-25 gruppe, og de øvrige symboler har de ovenfor angivne betyd- 8

DK 163988 B

ninger, omdanner en forbindelse med formlen CH · CH3 f1 γ2 V::o r—r- CCH2>2-i-x /vy\> <V1) ΛΑΛ 0 1 2 hvori A-A, B-B, X, Y og Y har de ovenfor angivne betydninger, og Rq betyder frit carboxyl, eller et salt af en sådan forbindelse til en lavalkylester eller 5 f) til fremstilling af en forbindelse, hvori Rx og R^ sammen betyder en methylengruppe, og de øvrige symboler har de ovenfor angivne betydninger, adderer en methylengruppe til en forbindelse med formlen 1 2 CH3 y y !*~(CH2)2-i-0 (VII) fArV^

</W

2 10 hvori A-A, B-B, X, Y og Y har de ovenfor angivne betydninger, og, om ønsket, omsætter en fremstillet forbindelse med formlen I, hvori -A- betyder -CE^-CI^·"/ med et dehydrogeneringsmiddel til indføring af en 1,2-dobbeltbinding og/eller 15 cycliserer en fremstillet forbindelse med formlen I, 2 1 2 hvori Y og Y hver for sig betyder en hydroxylgruppe, ved fraspaltning af bestanddelene i vand til dannelse af en forbindelse med formlen I, hvori Y og Y sammen betyder en oxygenbro, og/eller 20 oxiderer en fremstillet forbindelse med formlen I, hvori X betyder 2 hydrogenatomer, til en tilsvarende forbindelse, hvori X betyder oxo, og/eller i en fremstillet forbindelse med formlen I, hvori X betyder 2 hydrogenatomer, og Y og Y hver for sig betyder 25 en fri hydroxylgruppe, omdanner den endestillede hydroxylgruppe til en lavalkanoyloxygruppe og/eller 9

DK 163988 B

omdanner en fremstillet forbindelse med formlen I, hvori 1 2 X betyder oxo, Y betyder hydroxyl, og Y betyder hydroxyl 1 2 eller lavalkoxy, eller Y og Y sammen danner en oxygenbro, til et salt af den tilsvarende 173-hydroxy-21-carboxylsyre 1 2 5 med formlen I, hvori X betyder oxo, og y og Y hver for sig betyder hydroxyl, og/eller omdanner et sådant salt til den frie syre og/eller omdanner den frie syre eller et salt deraf til en lavalkylester.

Fremgangsmåde a), dvs. epoxideringen af 9(11) -dobbelt-10 bindingen, gennemføres på i og for sig kendt måde ved omsætning af udgangsmaterialet med formlen II med en peroxysyre, fortrinsvis en organisk peroxysyre, f.eks. en aliphatisk peroxysyre, såsom især permyresyre eller pereddikesyre, eller fortrinsvis en aromatisk peroxysyre.

15 Blandt sidstnævnte anvender man fordelagtigt perbenzoesyre eller en substitueret perbenzoesyre, såsom m-chlorperben-zoesyre eller monoperoxyphthalsyre (perphthalsyre) . Omsætningen gennemføres fortrinvis i et indifferent organisk opløsningsmiddel, f.eks. i en alkan, såsom pentan, hexan 20 eller heptan, en halogeneret lavalkan, såsom især methylen-chlorid, chloroform eller 1,2-dichlorethan, eller en åben eller cyclisk ether, f.eks. især diethylether, dioxan eller tetrahydrofuran, eller en hensigtsmæssig blanding deraf. Reaktionstemperaturen skal i reglen ikke overstige den 25 temperatur, hvorved den spontane sønderdeling af reaktionsmidlet forløber hurtigere end epoxideringsreaktionen, og der arbejdes især ved stuetemperatur og fortrinsvis under stuetemperatur ned til en temperatur på ca. -20°C, især ved temperaturer mellem -10 og 10°C.

30 Udgangsforbindelser med formlen II kan, såfremt de er hidtil ukendte, fremstilles under anvendelse af kendte analogifremgangsmåder, f.eks. analogt med en af de nedenfor beskrevne fremgangsmåder b)— f)eller de ovenfor beskrevne om-omdannelser af et slutprodukt til et andet, eller kombinationer der-35 af ud fra kendte udgangsmaterialer, f.eks. ud fra tilsvarende substituerede 17-oxo-derivater af androstanraekken ved den konventionelle opbygning af 3-hydroxypropyl-side-

DK 163988 B

10 kæden eller spiro-ringen. Eventuelt kan man også dehydra-tisere en forbindelse, som er analog med en forbindelse med formlen I, men som i stedet for 9,11-epoxyringen indeholder en 11a- eller Ιΐβ-hydroxylgruppe. 11-Hydroxy-5 forbindelsen kan eksempelvis fremstilles ved mikrobiologisk hydroxylering af en 9,11-usubstitueret forbindelse.

Fremgangsmåde b) gennemføres ligeledes på i og for sig kendt måde under anvendelse af konventionelle oxidationsmidler og oxidationsfremgangsmåder, som er almindeligt 10 anvendt til omdannelse af en hydroxylgruppe til en oxo-gruppe. Som foretrukne oxidationsmidler anvender man hexavalente chromforbindelser, såsom chromtrioxid, chrom-syre og metalsalte deraf, især alkalimetalsalte, og som foretrukket reaktionsmedium lavalkancarboxylsyrer, såsom 15 eddikesyre og propionsyre, eller pyridin eller acetone, eventuelt under fortynding med en halogeneret lavalkan, såsom dichlormethan eller chloroform. Reaktionsbetingelserne kan tilpasses nærmere til den specifikke karakter af hydroxylgruppen i udgangsmaterialet og af oxogruppen i pro-20 duktet: til oxidationen af en allylisk 3-hydroxylgruppe anvendes milde betingelser, såsom afkøling til en temperatur under stuetemperatur, f.eks. til en temperatur på fra ca. -10 til ca. 10°C. Til oxidationen til carboxylgruppen, enten den frie eller den lactoniserede carboxylgruppe, er 25 det hensigtsmæssigt at anvende energiske betingelser, såsom forlænget reaktionstid, reaktionstemperaturer i området omkring stuetemperatur eller derover (op til ca. 50°C) og/eller vandig svovlsyre som opløsningsmiddel for oxidationsmidlet (f.eks. i form af en 8 N opløsning af såkaldt 30 Jones-reagens). Eventuelt kan man gennemføre oxidationen af en allylisk 3-hydroxylgruppe med mangandioxid i en halogeneret lavalkan, såsom chloroform ved temperaturer fra stuetemperatur op til kogetemperaturen for reaktionsblandingen eller også med aluminiumisopropylat og en keton, 35 f.eks. især acetone eller cyclohexanon, ved temperaturer fra stuetemperatur op til blandingens kogetemperatur.

11

DK 163988 B

Udgangsforbindelser med formlen III kan, såfremt de er hidtil ukendte forbindelser, fremstilles under anvendelse af kendte fremgangsmåder fra steroidkemien, f.eks. ved de under fremgangsmåde a) og/eller c)-f) beskrevne fremgangsmåder eller 5 ved de ovenfor beskrevne omdannelser af et slutprodukt til et andet og hensigtsmæssige kombinationer deraf. Således fremstilles eksempelvis 1 12 en udgangsforbindelse med formlen III, hvori Z betyder oxo, Y , Y og 2 Z hver for sig betyder hydroxyl, idet det sidstnævnte symbol yderligere indeholder et hydrogenatom, ved at man omsætter en tilsvarende 17-oxo-10 forbindelse under forbigående beskyttelse af 3-oxogruppen med et organometalderivat med formlen R -O a \ CH-tCHn)~-Met / z V° hvori Met betyder et alkalimetal eller halogenmagnesium-gruppen af et tilsvarende Grignardreagens, og substituen-15 terne hver for sig betyder lavalkyl eller sammen eller trimethylen, og fraspalter oxo-beskyttelsesgrupper-ne. Den fremstillede forbindelse foreligger i form af en blanding af flere tautomere, til dels også hydratiserede former, som svarer til delformlerne

H OH

OH OH <?H \ f 20 -·*-(οη2)2-οη=ο , -j... (ch2)2-ch-oh ϊ F*

-r.......‘S

(A) (B) (C) der dog opfører sig ens ved oxidationen. Forbindelser med formlen III, hvori Z1 betyder -OH sammen med hydrogen, dannes, når en tilsvarende 3-oxoforbindelse behandles med et almindeligt reduktionsmiddel.

DK 163988 B

12

Fremgangsmåde c) gennemføres ligeledes på i og for sig kendt måde under anvendelse af konventionelle hydrogeneringsmidler under almindeligt kendte reaktionsbetingelser for katalytisk hydrogenering. Omsætningen gennemføres med 5 hydrogengas med almindeligt tryk eller forhøjet tryk under betingelser for heterogen eller homogen katalyse.

Som katalysatorer til førstnævnte er finfordelte metaller, f.eks. Raney-metaller, såsom Raney-nikkel, eller ædelmetaller, såsom palladium, platin eller rhodium, som even-10 tuelt kan være fordelt på et bærestof, såsom calciumcar-bonat eller bariumsulfat, særligt velegnede. Til den homogene katalyse anvender man især komplekse rhodium-forbindelser, f.eks. tris-(triphenylphosphin)-rhodium(I)-chlorid. Betingelserne skal vælges således, at 1,2- og/el-15 ler 4,5-dobbeltbindingen ikke også reduceres.

Udgangsforbindelser med formlen IV kan, såfremt de er hidtil ukendte, fremstilles under anvendelse af i og for sig kendte analogifremgangsmåder fra steroidkemien, f.eks. ved de under fremgangsmåde a), b) og/eller d) til f) be-20 skrevne fremgangsmåder og hensigtsmæssige kombinationer deraf. Således fremstilles eksempelvis en udgangsforbindelse med formlen IV, hvori W betyder gruppen -C=C-, ved omsætning af en egnet 17-oxoforbindelse med en ethynyl-or-ganometal-forbindelse, især ethynyl-alkalimetalforbindel-25 se, f.eks. natrium- eller kaliumacetylid eller især li-thiumacetylid. I sidstnævnte tilfælde er det særligt fordelagtigt at anvende lithiumacetylidet i form af et kompleks med ethylendiamin. Den indførte ethynylgruppe kan man derpå carboxylere i et andet trin, idet man i 30 ethynylgruppen ombytter det endestillede hydrogenatom ved behandling med en Grignardforbindelse og efterfølgende omsætning af det dannede ω-magnesiumhalogenid med carbondioxid med en carboxylgruppe. 3-oxogruppen beskyttes i reglen ved denne omsætning på sædvanlig måde. Eventuelt 35 kan man også anvende et egnet organometalderivat af prop-insyren på analog måde.

13

DK 163988 B

Rent formelt, uanset reaktionsmekanismen, forløber fremgangsmåde d) ved samtidig fraspaltning af fraspaltnings-gruppen YQ og hydrogenatomet i 173-hydroxylgruppen under dannelse af oxygenbroen -0-. Ved praktisk gennem-5 førelse af fremgangsmåden anvender man kendte sædvanlige analogifremgangsmåder fra den organiske kemi til dannelse af en mættet furanring, idet man ved valg af reaktionsbetingelser og reaktionsmidler tager hensyn til de særlige egenskaber ved fraspaltningsgruppen Y .

10 En foretrukket fraspaltningsgruppe YQ i forbindelser med formlen V, hvori X betyder oxo, er en aminogruppe Am.

Aminogruppen Am er fortrinsvis en tertiær aminogruppe, især en dilavalkylaminogruppe, såsom først og fremmest en dimethylaminogruppe og en diethylaminogruppe, og med 15 den nabostillede carbonylgruppe danner den en eventuel Ν,Ν-disubstitueret 21-carboxamid-gruppe -C(=0)-Am, hvori

Am har den ovenfor anførte betydning. Omdannelsen af et sådant udgangsmateriale til en lacton med formlen I, 1 2 hvori Y og Y sammen betyder en oxygenbro -O-, og X be-20 tyder oxo, gennemføres på i og for sig kendt måde ved anvendelse af sure midler, især ved behandling med en sur ionbytter i H-cyklus. Amidudgangsmaterialet kan fremstilles på i og for sig kendt måde, f.eks. ved at man omsætter en tilsvarende 17-oxoforbindelse under forbigående 25 konventionel beskyttelse af 3-oxogruppen (f.eks. som ketal eller thioketal) i dimethylsulfoniummethylid, eksempelvis ifølge den i US-patentskrift nr. 3.320.242 beskrevne fremgangsmåde, og kondenserer det dannede 17β,20-epoxy-17a-methyl-steroid med α-carbanionen af et N,N-dilav-30 alkylacetamid (eller et ved methyl med et alkalimetal, såsom natrium eller lithium, metalliseret N,N-dilavalkyl-acetamid) på i og for sig kendt måde.

En anden fordelagtigt fraspaltningsgruppe γ , der især er egnet til forbindelser, hvori X betyder 2 hydrogenatomer, "Ή 35 er en kvaternær ammoniumgruppe Am . Gruppen

Am er fortrinsvis en trilavalkylammoniumgruppe, såsom 14

DK 163988 B

især en trimethylanimoniumgruppe. Cycliseringen af den kvaternære base med formlen V, hvori X betyder 2 hydrogen- j* «Μ atomer, og Y betyder Am OH , til forbindelser med form-° 1 2 len I, hvori Y og Y sammen betyder en oxygenbro, gennem-5 føres ved opvarmning af basen, eventuelt i et højtkogen-de organisk opløsningsmiddel, såsom ethylenglycol, til sønderdelingstemperaturen. Det tilsvarende udgangsmateriale kan fremstilles på i og for sig kendt måde. Til dette formål omsættes en tilsvarende 17-oxoforbindelse 10 under midlertidig konventionel beskyttelse af 3-oxogrup-pen med en organometalforbindelse med formlen Rc~(CH2)3“M, hvori M betyder en gruppe MgX, hvori X er et halogenatom, eller et alkalimetalatom, især et lithiumatom, og R be-tyder en dilavalkylaminogruppe, fortrinsvis en dimethyl-15 aminogruppe. Den dannede 173-hydroxy-17a-(3-dilavalkyl-aminopropyl)-forbindelse omdannes derpå ved addition af en lavalkylester af en stærk syre, f.eks. et lavalkyl-sulfat eller et lavalkylhalogenid, især methyliodid, til et tilsvarende kvaternært trilavalkylammoniumsalt.

20 Fra dette frigøres den tilsvarende kvaternære base ved behandling med en stærk base, fortrinsvis et metalhydroxid, f.eks. sølvhydroxid, eller et alkalimetal- eller jordalkalimetalhydroxid, såsom kalium-, natrium- eller bariumhydroxid.

25 En anden fordelagtig fraspaltningsgruppe YQ i forbindelser med formlen V, hvori X betyder 2 hydrogenatomer, er en reaktiv forestret hydroxylgruppe. Den esterdannende komponent er i dette tilfælde f.eks. en oxygenholdig uorganisk syre, såsom svovlsyre, svovlsyrling, phosphorsyre, 30 phosphorsyrling eller et substitutionsderivat deraf, hvori en eller flere af hydroxylgrupperne er ombyttet med halogen, især chlor (dvs. en syrerest af typen C1S02-, CISO-, C12P-, C12P(=0)- eller C14P-), eller en oxygenfri uorganisk syre, især en hydrogenhalogenidsyre, såsom 35 hydrogenchloridsyre, hydrogenbromidsyre eller hydrogen-iodidsyre, eller en stærk organisk syre, f.eks. oxalsyre eller især en sulfonsyre, såsom en aliphatisk eller aroma- 15

DK 163988 B

tisk carbocyclisk sulfonsyre, f.eks. især methan-, ethan-, trifluormethan- eller benzen-, p-toluen- eller p-bromben-zen-sulfonsyre. Cycliseringen ved fraspaltning af en sådan reaktiv forestret hydroxylgruppe gennemføres ved be-5 handling med et uorganisk eller organisk basisk middel. Uorganiske basiske midler til dette formål er eksempelvis alkalimetal- og jordalkalimetalhydroxider, såsom natrium-, kalium-, batrium- eller calciumhydroxid, samt deres salte med svage uorganiske eller organiske 10 syrer, såsom især carbonater og hydrogencarbonater eller acetater og formiater. Organiske basiske midler til dette formål er eksempelvis tertiære baser af aliphatisk karakter, såsom tertiære aminer afledt af lavalkyl- og benzyl-grupper (f.eks. triethylamin, benzyl-dimethyl-amin, 15 diisopropyl-ethyl-amin, diisopropyl-benzyl-amin, di- benzyl-methyl-amin eller dimethyl-butyl-amin) og de hete-rocycliske mættede analoge forbindelser (f.eks. N-methyl-pyrrolidin, N-methylpiperidin, N-benzylpiperidin eller Ν,Ν'-dimethylpiperazin), eller især aromatiske hetero-20 cycliske baser, såsom pyridin og dets C-methylerede analoge forbindelser (f.eks. collidin) eller quinolin.

En særlig fordelagtigt udførelsesform for denne fremgangsmåde består i, at man in situ fraspalter en i reaktionsblandingen dannet reaktiv forestret hydroxylgruppe, dvs.

25 umiddelbart efter at den i samme reaktionsmedium er dannet ved forestring af den endestillede hydroxylgruppe (dvs. den med symbolet Y betegnede) i en forbindelse med formlen II ved hjælp af et reaktionsdygtigt syrederivat i et basisk middel. Et reaktionsdygtigt syrederivat 30 er i denne forbindelse især et syrehalogenid, såsom et syrechlorid, som er afledt af en af de ovenfor nævnte oxygenholdige uorganiske eller organiske syrer. Som et typisk eksempel på et sådant reaktionsmiddel kan nævnes methansulfochlorid og især p-toluensulfochlorid, og som 35 reaktionsmedium anvendes først og fremmest en aromatisk heterocyclisk base, såsom pyridin. På denne måde cycli- seres slutforbindelser med formlen I, hvori X betyder 1 2 2 H-atomer, og Y og Y hver for sig betyder hydroxyl, til

DK 163988 B

16 slutforbindelser med formlen I, hvori X betyder 2 H-ato-1 2 mer, og Y sammen med Y betyder -O-.

Fremgangsmåde e) gennemføres også på i og for sig kendt måde. Således gennemføres omdannelsen af syren med 5 formlen VI til den ønskede ester med formlen I under anvendelse af en af de talrige konventionelle forestrings-metoder, f.eks. ved omsætning med en lavalkanol eller et reaktionsdygtigt derivat deraf, eventuelt i nærværelse af katalysatorer, især sure katalysatorer, og/eller vand-10 bindende midler, f.eks. et symmetrisk substitueret carbo-diimid, især Ν,Ν'-dicyclohexylcarbodiimid. Blandt sure katalysatorer anvendes først og fremmest stærke uorganiske syrer, såsom svovlsyre, phosphorsyre og perchlorsyre, samt organiske sulfonsyrer, såsom methan-, benzen- eller 15 p-toluensulfonsyre. Den tilsvarende alkohol anvendes i overskud, for det meste samtidig som opløsningsmiddel.

Eventuelt kan man også foretage forestring med en diazo-alkan, først og fremmest diazomethan, på i og for sig kendt måde, eller man kan omdanne den frie syre til et 20 reaktionsdygtigt derivat, såsom et chlorid eller anhydrid, f.eks. et blandet anhydrid med trifluoreddikesyre, og omsætte dette med den tilsvarende lavalkanol. Udgangsforbindelser med formlen VI kan, såfremt de er hidtil ukendte forbindelser, fremstilles under anvendelse af kendte 25 analogifremgangsmåder, f.eks. ved addition af hydrogencyanid til 6,7-dobbeltbindingen i en passende 3-oxo—4,6-dien-forbindelse (se nedenfor) og en konventionel omdannelse af cyanogruppen til carboxylgruppen, f.eks. ved hydrolyse eller ved reduktion til formylgruppen og efter-30 følgende oxidation.

Fremgangsmåde f) gennemføres også på i og for sig kendt måde under anvendelse af konventionelle analogifremgangsmåder til addition af methylengruppen til en dobbeltbinding. Additionen gennemføres f.eks. ifølge en fore-35 trukken udførelsesform på den måde, at man omsætter en 6,7-dehydroforbindelse med formlen VII med dimethyloxo- 17

DK 163988 B

sulfoniummethylid. Denne udførelsesform har også den væsentlige fordel, at den har en meget høj stereospecificitet og i overvejende grad fører til 6,7-methylenfor-bindelser, hvori methylengruppen for det meste har a-5 konfiguration. Omsætningen gennemføres eksempelvis hensigtsmæssigt på den måde, at man under en indifferent gas, f.eks. en nitrogenatmosfære, og under udelukkelse af fugtighed blander en dispersion af natriumhydrid i mineralolie med trimethylsulfoxiniumiodid og tilsætter di-10 methylsulfoxid, hvorpå dannelsen af dimethyloxosulfonium-methylidet finder sted. Til dette in situ fremstillede reagens sættes det 6,7-umættede steroidudgangsmateriale i molforholdet reagens:steroid = ca. 1:1 til ca. 5:1. Omsætningen gennemføres ved temperaturer omkring stuetem-15 peratur, og reaktionsblandingen behandles med vand, hvorefter steroidet isoleres på kendt måde. Ved sådanne slutprodukter, som indeholder basefølsomme grupper, såsom lacton- eller estergrupper, er det hensigtsmæssigt at gennemføre spaltningen af reaktionsblandingen således, 20 at pH-værdien i størst mulig omfang forbliver i det neutrale eller svagt sure område. En analog fremgangsmåde er også egnet til indføring af methylengruppen i forskellige mellemprodukter ved fremstilling af udgangsforbindelser med formlen II til VI. De til denne udførelsesform nød-25 vendige udgangsforbindelser med formlen VII kan, såfremt de er hidtil ukendte, fremstilles under anvendelse af kendte analogifremgangsmåder, f.eks. ved vandfraspaltning (dehydratisering) af de tilsvarende 11a- eller Ιΐβ-hydro-xyforbindelser eller ved dehydrogenering af tilsvarende 30 6,7-mættede mellemprodukter.

Ved en eventuel omdannelse af et slutprodukt til et andet slutprodukt dehydrogeneres 1,2-mættede forbindelser til de tilsvarende 1,2-dehydro-derivater på i og for sig kendt måde. Der kan anvendes 35 biologiske dehydrogeneringsfremgangsmåder, f.eks. ved hjælp af mikroorganismerne Corynebacterium simplex eller Septomyxa affinis eller deres enzymsystemer, eller 18

DK 163988 B

man kan behandle med selendioxid i et organisk opløsningsmiddel , f.eks. tert-butylalkohol. Fortrinsvis foretages dog dehydrogenering med 2,3-dichlor-5,6-dicyan-l,4-benzo-quinon i flere timer, f.eks. 6-24 timer, og eventuelt 5 ved opvarmning til blandingens kogetemperatur, i organiske opløsningsmidler, f.eks. aromatiske carbonhydrider, såsom benzen eller xylen, lavere aliphatiske alkoholer, såsom ethanol, propanol eller tert-butylalkohol, lavere aliphatiske ketoner, såsom acetone eller 2-butanon, 10 aliphatiske estere, såsom ethylacetat, eller cycliske ethere, såsom dioxan eller tetrahydrofuran.

Den eventuelle cyclisering af et slutprodukt med åben kæde til et cyclisk slutprodukt gennemføres også på i og for sig kendt måde. Cyclisering af forbin-15 delser med formlen I, hvori X betyder 2 hydrogenatomer, gennemføres eksempelvis på den under fremgangsmåde d) beskrevne måde. Slutprodukter med formlen I, hvori 1 2 X betyder oxo, og Y og Y hver for sig betyder hydroxyl, dvs. frie 170-hydroxy-21-carboxylsyrer, cycliseres 20 (lactoniseres) på i og for sig kendt måde, idet de eksempelvis behandles med et vandbindende middel, f.eks. eddikesyreanhydrid, vandfrit kobbersulfat, molekylsig-ter eller dicyclohexylcarbodiimid, i et indifferent organisk opløsningsmiddel. Lactoniseringen kan også 25 indtræde spontant, især under sure betingelser og/eller ved forhøjet temperatur, og gennemføres f.eks. ved azeotrop afvanding.

Den eventuelle oxidation af methylengruppen i spiro-rin-gen E til carbonylgruppen gennemføres også under 30 anvendelse af i og for sig kendte fremgangsmåder til oxidation af en tetrahydrofuranring til den tilsvarende lactonring. Der anvendes især hexa-valente chromforbindelser, og reaktionen gennemføres under betingelser, som eksempelvis er analoge med de 35 betingelser, der er beskrevet ovenfor under fremgangsmåde b) for oxidationen af tilsvarende åbenkædede for- 2 19

DK 163988 B

bindeiser, hvori Y betyder hydroxyl, og X betyder 2 hydrogenatomer, til frie carboxylsyrer.

Gennemførelsen af den eventuelle lavalkanoylering sker under anvendelse af almen kendte forestringsfremgangs-5 måder, fortrinsvis ved behandling med en lavalkansyre, især med myresyre alene eller med et reaktionsdygtigt derivat deraf, såsom et anhydrid eller et halogenid, især et chlorid, fortrinsvis i nærværelse af en organisk base, især en tertiær amin, såsom triethylamin, 10 dimethylbenzylamin eller Ν,Ν-dimethylanilin, eller en mættet tertiær heterocyclisk base, såsom N-ethylpiper-idin eller Ν,Ν'-dimethylpiperazin, eller en aromatisk heterocyclisk base, såsom guinolin, collidin, luthidin og først og fremmest pyridin. Som reaktionsmedium kan 15 også anvendes indifferente aprotiske organiske opløsningsmidler.

De eventuelle saltdannelser eller omdannelser af salte til syrer eller estere foretages under anvendelse af almen kendte konventionelle fremgangsmader. Fremstillede lactoner og 22-estere kan omdannes på i og 20 for sig kendt måde til de tilsvarende 173~hydroxy-21-carboxylsyrer eller salte deraf, idet man f.eks. hydrolyserer dem med en alkalimetal- eller jordalkalimetal-base, hvorpå man eventuelt, når den frie syre ønskes, frigør denne ved syrning. Som alkalimetal- eller jordal-25 kalimetalbaser anvender man eksempelvis tilsvarende hydroxider, såsom natrium- og især kaliumhydroxid, carbonater, såsom natrium- og kaliumcarbonat, eller hydrogencarbonater, såsom natrium- og kaliumhydrogen-carbonat. Som reaktionsmedium anvendes hensigtsmæssigt 30 blandinger af vand med et eller flere organiske opløsningsmidler, fortrinsvis sådanne, som er blandbare med vand, f.eks. med lavalkanoler, såsom methanol, ethanol eller isopropylalkohol, med cycliske ethere, såsom tetrahydro-furan eller dioxan, med lavalkanoner, såsom acetone eller 35 2-butanon, eller med lavalkylamider af lavaliphatiske carboxylsyrer, herunder især med Ν,Ν-dimethylformamid.

DK 163988B

20

Fortrinsvis anvender man ikke mere end en ækvivalent mængde base og undgår energiske reaktionsbetingelser, som kan indvirke på andre oxygenfunktioner. Når der findes en estergruppe i 7-stillingen, kan den som regel holdes 5 intakt under de ovenfor beskrevne milde betingelser, da den hydrolyseres væsentligt langsommere end den forestrede eller lactoniserede 21-carboxylgruppe.

Alkalimetal- eller jordalkalimetalsaltene fremstillet på denne måde kan omdannes til de tilsvarende frie 17β-10 hydroxy-21-carboxylsyrer ved syrning af en opløsning eller suspension af et salt i vand eller et vandholdigt organisk opløsningsmiddel. Saltene kan også omdannes til estrene, f.eks. med et dilavalkylsulfat eller et lavalkyl-halogenid. Frie 17(3-hydroxy-21*-carboxylsyrer kan man også 15 om ønsket omdanne ved behandling med en tilsvarende base til salte, f.eks. til ammoniumsalte og salte med organiske baser, eller de kan forestres, f.eks. på den ovenfor under e) beskrevne måde.

Opfindelsen angår også sådanne udførelsesformer for de 20 ovenfor beskrevne fremgangsmåder, ved hvilke et udgangsmateriale dannes under reaktionsbetingelserne.

Farmaceutiske præparater ifølge opfindelsen indeholdende en forbindelse med formlen I eller et salt deraf kan især anvendes til behandling af forskellige former for hyper-25 aldosteronismus. De farmaceutiske præparater indeholder en virksom mængde af det aktive stof alene eller i blanding med uorganiske eller organiske, faste eller flydende, farmaceutiske anvendelige bærestoffer og, om ønsket, også med andre famakologisk eller terapeutisk værdifulde 30 stoffer, og de egner sig især til enteral, f.eks. oral eller rektal, eller til parenteral indgift. Uden en nærmere specificeret angivelse skal der ved udtrykket "aktivt

DK 163988 B

21 stof" i hele det følgende forstås en forbindelse med formlen I eller et salt deraf som defineret ovenfor.

Den foreliggende opfindelse angår især farmaceutiske præparater, der som aktivt stof indeholder en forbindelse 5 ifølge opfindelsen med formlen I (herunder salte) i form af en steril og/eller isotonisk vandig opløsning eller i blanding med mindst et fast eller halvfast bærestof.

Opfindelsen angår også sådanne lægemidler i form af doseringsenheder, som indeholder mindst ét af de 10 aktive stoffer ifølge opfindelsen alene eller i blanding med ét eller flere bærestoffer, især sådanne på fast form.

Opfindelsen angår især lægemidler i form af tabletter, herunder sugetabletter, granulater og pastiller, dragéer, 15 kapsler, piller, ampuller, tørhætteglas eller suppositorier, som indeholder det ovenfor definerede aktive stof alene eller i blanding med ét eller flere bærestoffer.

Som en særlig form for de farmaceutiske præparater ifølge opfindelsen skal også nævnes sådanne, som 20 foruden de omhandlede aldosteron-antagoniserende forbindelser med formlen I (herunder salte), som i denne sammenhæng betegnes som komponent A, også indeholder en med hensyn til elektrolytter uspecifik diuretisk komponent B.

Som sådanne med hensyn til elektrolytudskillelsen uspeci-25 fikke diuretiske komponenter B kan anvendes sædvanlige "klassiske" diuretika eller blandinger deraf, som forøger diuresen både ved renal og ved ekstrarenal virkning på væv, især stoffer med hæmmende virkning på tilbageresorptionen i tubulus, såsom saluretika eller ethacrinsyre og 30 analoge deraf. Særligt egnede som elektrolyt-uspecifikke komponenter B er benzothiadiazinderivater, såsom thiazider og hydrothiazider, desuden benzensulfonamider, phenoxy-eddikesyre, benzofuran-2-carboxylsyrer og 2,3-dihydro-

DK 163988 B

22 benzofuran-2-carboxylsyrer. Den elektrolyt-uspecifikke komponent B kan bestå af et enkelt aktivt stof eller en hensigtsmæssig kombination af flere aktive stoffer.

Som komponent B anvendes især følgende gængse 5 diuretika: l-oxo-3-.(3-sulfamyl-4-chlor- phenyl)-3-hydroxyisoindolin, 6-chlor-7-sulfamyl-3, 4-di-hydro-1, 2,4-benzothiadiazin-l,1-dioxid, 3-cyclopentyl-methyl-6-chlor-7-sulfamyl-3,4-dihydro-l,2,4-benzothiadiazin-1, 1-dioxid, 4-(2-methylenbutyryl)-2,3-dichlor-phenoxy-10 eddikesyre, 4-thenoyl-2,3-dichlor-phenoxyeddikesyre, (l-oxo-2-methyl-2-phenyl-6,7-dichlor-5-indanyloxy)-eddikesyre, 2-chlor-4-furfurylamino-5-carboxybenzen-sulfonamid, 2-phenoxy-3-butylamino-5-carboxybenzensulfonamid og 2-phenoxy-3-[3-(1-pyrrolyl)-propyl]-5-carboxybenzensulfonamid.

15 I sådanne farmaceutiske præparater ifølge opfindelsen er forholdet mellem komponent A og komponent B især ca. 4:1 til 1:4, fortrinsvis ca. 3:2 til ca. 2:3, beregnet på den pågældende gennemsnitlige effektive dosis. Da den gennemsnitlige effektive dosis for hver enkelt specifik 20 komponent ær en kendt størrelse eller kan bestemmes ved anvendelse af kendte farmakologiske testmetoder, er det let for en fagmand, indenfor de ovenfor anførte grænser, at foreskrive et egnet forhold mellem de to komponenter for enhver patient, under hensyntagen til den specifikke lidelse, al-25 mene sundhedstilstand, individuelle påvirkelighed og alder samt også patientens køn.

Sådanne kombinationspræparater indeholder eksempelvis 5-150 mg, især 10-50 mg pr. dosisenhed af en forbindelse med formlen I eller et salt deraf som komponent A og som kom-30 ponent B eksempelvis 10-100 mg, især 25-50 mg 2-chlor- 5-[3-hydroxy-l-oxo-isoindolyl-(3)]-benzensulfonamid eller 4-(2-methylenbutyryl)-2,3-dichlorphenoxy-eddikesyre, 5-50 mg, især 12-25 mg 6-chlor-7-sulfamyl-3,4-dihydro-l,2,4-benzothiadiazin-1,1-dioxid eller 2-chlor-4-furfurylamino-35 5-carboxybenzensulfonamid, 2-20 mg, især 5-10 mg 2-phenoxy-

DK 163988 B

23 3-[3-(1-pyrrolyl)-propyl]-5-carboxybenzensulfonamid, 0,1-1,0 mg, især 0,25-0,5 mg 3-cyclopentylmethyl-6-chlor-7-sulfamyl- 3,4-dihydro-l,2,4-benzothiadiazin-l,l-dioxid eller 2-phen-oxy-3-butylamino-5-carboxybenzensulfonamid, 100-400 mg, 5 især 200. mg 4-thenoyl-2,3-dichlor-phenoxyeddikesyre og 5-25 mg, især 10 mg racemisk (l-oxo-2-methyl-2-phenyl~6,7-dichlor-5-indanyloxy)-eddikesyre, eller den halve mængde af levoformen af denne syre.

Til ødembehandling i et middelsvært tilfælde gives eksempel-10 vis dagligt 1-3 dosisenheder, som indeholder de aktive stoffer i vægtmængder, som ligger ved den øvre grænse for den ovenfor anførte særligt foretrukne dosering. Et middelsvært tilfælde af essentielt hypertoni behandles eksempelvis med 1-3 dosisenheder, hvis indhold af aktivt stof 15 ligger omkring den nedre særligt foretrukne mængdegrænse.

Udtrykket "lægemiddel" anvendes til betegnelse af enkelte adskilte portioner af ensartet sammensætning, som er egnede til medicinsk indgift. Udtrykket "lægemiddel i form af doseringsenheder" er i nærværende sammenhæng anvendt 20 til betegnelse af enkelte adskilte portioner af ensartet sammensætning, som er egnede til medicinsk indgift, og som hver især indeholder en specifik mængde af det omhandlede aktive stof, der svarer til fra ca. 0,05 til ca. 2, fortrinsvis fra ca. 0,1 til ca. 1 dagsdosis.

25 Bærestofferne, som anvendes i de farmaceutiske præparater, er almindeligt kendte materialer.

De farmaceutiske præparater ifølge opfindelsen indeholder fortrinsvis fra ca. 0,1 til ca. 99,5, især fra ca. 1 til 90 vægt-% aktivt stof.

30 Den anbefalede dagsdosis af det aktive stof med formlen I (herunder salte) for et varmblodet dyr eller menneske med en legemsvæt på 75 kg udgør fra ca. 5 til ca. 200, fortrinsvis fra ca. 10 til ca. 100 mg, men den kan dog variere

DK 163988 B

24 indenfor vide grænser afhængigt af arten, alderen og den individuelle påvirkelighed og kan endvidere overskride den øvre grænse.

Fremstillingen af de farmaceutiske sammensætninger, præpa-5 rater, lægemidler og lægemidler i form af doseringsenheder gennemføres ved anvendelse af konventionelle, i og for sig kendte fremstillingsmetoder fra den farmaceutiske industri, f.eks. ved hjælp af gængse blandings-, granulerings-, tabletterings-, dragéerings-, opløsnings- og lyofiliserings-10 fremgangsmåder, idet man om ønsket kan arbejde under kimfri betingelser, eller man kan sterilisere et mellemprodukt eller et færdigt produkt.

Opfindelsen illustreres nærmere i de efterfølgende eksempler. Alle de anførte smeltepunkter er ukorrigerede.

DK 163988B

25

Eksempel 1

Til en opløsning af 100 mg 7a-methoxycarbonyl-20-spiroxa-4,9(ll)-dien-3,21-dion i 2 ml methylenchlorid sættes 75 mg 90%'s m-chlorperbenzoesyre, og blandingen henstår i 18 ti-5 mer ved ca. 4°c og derefter i yderligere 7 timer ved stuetemperatur. Efter fortynding med methylenchlorid vaskes blandingen med 10%'s kaliumiodidopløsning, 10%'s natrium-thiosulfatopløsning, iskold mættet natriumhydrogencarbonat-opløsning og vand i nævnte rækkefølge, tørres og inddampes 10 under vandstrålevakuum. Det amorfe råprodukt underkastes præparativt tyndtlagskromatografi på kiselgel i systemet methylenchlorid-acetone (85:15). Hovedzonen elueres med 100 ml ethylacetat og inddampes. Den dannede krystallinske 9a, lla-epoxy-7a-methoxycarbonyl-20-spirox-4-en-3,21-dion 15 omfældes fra methylenchlorid/ether, smp. 239-241°C.

Analogt med den ovenfor beskrevne fremgangsmåde omsættes 7a-methoxycarbonyl-153,163-methylen-20-spiroxa-4,9(11)-dien-3,21-dion til 9a,lla-epoxy-7a-methoxycarbonyl-153,163-methylen-2 0-spirox-4-en-3,21-dion.

20 Udgangsforbindelsen kan fremstilles på følgende måde: a) Til en iskold opløsning af 0,636 ml vandfri hydrogen-cyanidsyre i 6,44 ml benzen sættes under udelukkelse af fugtighed i løbet af 1,5 timer under isafkøling og omrøring en opløsning af 3,54 ml triethylaluminium i 9,66 ml benzen, 25 hvorefter blandingen omrøres i 16 timer ved stuetemperatur.

Den dannede diethylaluminiumcyanidopløsning sættes til en opløsning af 2,0 g 20-spiroxa-4,6,9(11)-trien-3,21-dion [jfr. J. Med. Chem., 6, 732-735 (1963)] i 40 ml tetrahydro-furan, blandingen opvarmes i 30 minutter med tilbagesvaling 30 og afkøles. Reaktionsopløsningen hældes under omrøring i 40 ml IN natriumhydroxidopløsning og ekstraheres to gange med ethylacetat. Den organiske fase vaskes med mættet natrium-chloridopløsning og derpå med iskold fortyndet saltsyre, tørres og inddampes under vandstrålevakuum. Ved kromatogra-35 fi af det olieformige råprodukt på kiselgel og eluering

DK 163988 B

26 med en blanding af hexan-ether-methanol (2:9:1) fås 7a-cya-no-20-spiroxa-4,9(11)-dien-3,21-dion, smp. 241-243°C.

Analogt med den ovenfor beskrevne fremgangsmåde omsættes 15β,163-methylen-20-spiroxa-4/6,9(11)-trien-3,21-dion 5 (se eksempel 7, fremstilling af udgangsforbindelser) til dannelse af 7a-cyano-153f168-methylen-20-spiroxa-4,9(11)-dien-3,21-dion.

b) 400 mg 7a-cyano-20-spiroxa-4,9(11)-dien-3,21-dion fra trin a) opløses i 16 ml benzen, der tilsættes 4,8 ml 20%'s 10 (vægt/rumfang) opløsning af diisobutylaluminiumhydrid i toluen ved en temperatur på 10°C, hvorpå der omrøres i 30 minutter under isafkøling. Blandingen opvarmes til stuetemperatur, omrøres i yderligere 10 minutter, fortyndes med 8 ml benzen, hvorpå der omrøres i yderligere 15 20 minutter ved stuetemperatur. Under afkøling med et is- natriumchloridkølebad sættes dråbevis til reaktionsblandingen ved en indre temperatur på højst 10°C først 4,8 ml ethylalkohol og derpå 48 ml vand, hvorpå blandingen opvarmes i 5 timer under tilbagesvaling og derpå afkøles. Blandingen 20 syrnes med iskold fortyndet saltsyre, ekstraheres med chloroform, og den organiske fase inddampes ved vandstrålevakuum.

Analogt med den ovenfor beskrevne fremgangsmåde fremstilles ud fra 7a-cyano-153,163-methylen-20-spiroxa-4,9(11)-dien- 3,21-dion den tilsvarende 7a-formyl-15|3,163-methylen-20-25 spiroxa-4,9(11)-dien-3,21-dion.

c) Den rå 7ct-formyl-20-spiroxa-4,9 (11) -dien-3,21-dion fra trin b) opløses i 20 ml acetone, hvorpå der ved en temperatur på 7-10°C tilsættes 1,2 ml 8 N opløsning af chromtri-oxid i vandig svovlsyre, og blandingen omrøres i 1 time 30 under isafkøling. Blandingen fortyndes med isvand, ekstraheres med chloroform, og den organiske fase vaskes en gang med vand og derpå med 2 x 40 ml mættet natriumhydrogen-carbonatopløsning. De sammenblandede basiske udtræk syrnes under isafkøling med 4 N saltsyre, og blandingen henstår

DK 163988 B

27 henstår i 10 minutter. Fra den mælkeagtige blanding optages produktet i chloroform, og efter tørring inddampes chloroformfasen ved vandstrålevakuum. Den dannede amorfe 3.21- dioxo-20~spiroxa-4,9(11)-dien-7a-carboxylsyre videre-5 forarbejdes uden yderligere rensning.

Analogt med den ovenfor beskrevne fremgangsmåde fremstilles ud fra 7a-formyl-15|3,16£-methylen-20-spiroxa-4,9 (11) -dien- 3.21- dion 3,21-dioxo-153,163-methylen-20-spiroxa-4,9(11)-dien-7a-carboxylsyre.

10 d) En etherisk diazomethanopløsning sættes dråbevis til en opløsning af 235 mg 3,21-dioxo-20-spiroxa-4,9(ll)-dien-7a-carboxylsyre i 2,35 ml methylenchlorid, indtil nitrogenudviklingen er ophørt. Efter 20 minutter ved stuetemperatur inddampes den gule reaktionsopløsning forsigtigt, og rema-15 nensen omfældes en gang fra methylenchlorid-ether-petro-leumsether, hvorved man får 7a-methoxycarbonyl-20-spiroxa-4,9(11)-dien-3,21-dion, smp. 205-206°C.

Analogt med den ovenfor beskrevne fremgangsmåde fremstilles ud fra 3,21-dioxo-153,16P-methylen-20-spiroxa-4,9(11)-20 dien-7a-carboxylsyre den tilsvarende methylester.

Eksempel 2

En blanding af 3,9 g 7a-methoxycarbonyl-20-spiroxa-4,9(11)-dien-3,21-dion, 1,95-g dikaliumhydrogenphosphat, 5,85 ml trichloracetonitril, 17,5 ml 301's vandig hydrogenperoxid-25 opløsning og 89 ml methylenchlorid omrøres intensivt ved stuetemperatur i 2 timer, hvorpå der fortyndes med yderligere methylenchlorid, og blandingen vaskes med 10%'s kaliumiodidopløsning, 10%'s natriumthiosulfatopløsning, iskold mættet natriumhydrogencarbonatopløsning og vand i 30 nævnte rækkefølge, tørres og inddampes ved vandstrålevakuum.

Det amorfe råprodukt underkastes præparativ tyndtlagskro-matografi på kiselgel i systemet methylenchlorid-acetone (85:15). Hovedzonen elueres med 100 ml ethylacetat og inddampes. Den dannede krystallinske 9a,lla-epoxy-7a-methoxy-

DK 163988 B

28 carbonyl-20-spirox-4-en-3,21-dion med smp. 239-24X°c er identisk med forbindelsen fremstillet ifølge eksempel 1.

Eksempel 3 a) En suspension af 13,0 g 3,21-dioxo-20-spiroxa-4,9(11)— 5 dien-7a-carboxylsyre (jfr. eksempel 1c) , 5,2 ml 1,5-diaza- bicyclo(5/4/0)undec-5-en og 9,5 ml isopropylbromid i 80 ml benzen omrøres under tilbagesvaling i 3 timer. Efter afkøling sættes 800 ml mættet natriunchloridopløsning til reaktionsblandingen, som ekstraheres 2 gange med ethyl-10 acetat. De organiske faser vaskes med fortyndet saltsyre, fortyndet natriumhydroxidopløsning og mættet natriumchloridopløsning i nævnte rækkefølge, tørres og inddampes. Råproduktet kromatograferes i chloroform på den 3O-dobbelte vægtmængde kiselgel. De kromatografisk rene fraktioner 15 giver efter omfældning fra methylenchlorid/ether 3,21-dioxo-20-spiroxa-4,9(11)-dien-7a-carboxylsyreisopropylester, smp. 138-139°C.

b) Til en opløsning af 0,2 g 3,21-dioxo-20-spiroxa-4,9(11)-dien-7a-carboxylsyreisopropylester i 1,6 ml methylenchlorid 20 og 0,4 ml trichloracetonitril sættes 0,5 ml af en opløsning af 1,1 g dikaliumhydrogenphosphat i 2,5 ml 30%'s hydro-genperoxidopløsning, og blandingen omrøres i 5 timer ved 40°C. Efter fornyet tilsætning af 0,4 ml 30%'s hydrogen-peroxidopløsning fortsættes omrøringen i 21 timer ved 25 40°C. Ved oparbejdning på sædvanlig måde fås et amorft råprodukt, som kromatograferes på den 50-dobbelte vægtmængde kiselgel i systemet methylenchlorid-acetone (98:2).

Ved krystallisation af de kromatografisk rene fraktioner fra methylenchlorid-ether får man 9a, 11a-epoxy-7et-isoprop-30 oxycarbonyl-20-spirox-4-en-3,21-dion, smp. 207-209°C.

' Eksempel 4 a) En suspension af 7,2 g 3,21-dioxo-20-spiroxa-4,9(11) -dien-7a-carboxylsyre (jfr. eksempel lc), 2,88 ml 1,5-diaza-bicyclo(5,4,0)undec-5-en og 5,6 ml ethylbromid i 43 ml ben-35 zen omrøres i 3 timer under tilbagesvaling. Efter afkøling

DK 163988B

29 sættes 400 ml mættet natriumchloridopløsning til reaktions-blandingen, som ekstraheres 2 gange med ethylacetat. De organiske faser vaskes med fortyndet saltsyre, fortyndet natriumhydroxidopløsning og mættet natriumchloridopløsning 5 i nævnte rækkefølge, tørres og inddampes. Råproduktet kromatograferes i chloroform på den 3O-dobbelte vægtmængde kiselgel. De kromatografisk rene fraktioner giver efter omfældning fra methylenchlorid/ether 3,21-dioxo-20-spiroxa-4,9(11)-dien-7a-carboxylsyreethylester, smp. 128-129°C.

10 b) En blanding 1,93 g 3,21-dioxo-20-spiroxa-4,9(11)-dien-7a-carboxylsyreethylester, 19,3 ml methylenchlorid, 2,89 ml trichloracetonitril, 365 ml dikaliumhydrogenphosphat og 8,68 ml 30%'s hydrogenper oxidopløsning omrøres i 6 timer ved 40°C. Ved oparbejdning på sædvanlig måde fås et amorft 15 råprodukt, som kromatograferes på den 5O-dobbelte vægtmængde kiselgel i systemet methylenchlorid-acetone (95:5).

Ved krystallisation af de kromatografisk rene fraktioner fra methylenchlorid-ether får man 9a,lla-epoxy-7a-ethoxy-carbonyl-20-spirox-4-en-3,21-dion, smp. 177-179°C.

20 Eksempel 5

Til en opløsning af 570 mg 3,21-dioxo-20-spiroxa-4,9(11)-dien-7a-carbcxylsyre (se eksempel lc) i 11,4 ml methylenchlorid sættes 430 mg 90%'s m-chlorperbenzoesyre, og blandingen henstår i 3 timer ved stuetemperatur. Under isafkø-25 ling sættes etherisk diazomethanopløsning til blandingen, indtil der ikke længere konstateres nogen synlig nitrogenudvikling. Den med methylenchlorid fortyndede reaktionsopløsning vaskes med 10%'s kaliumiodidopløsning, 10%'s na-triumthiosulfatopløsning og iskold mættet natriumhydrogen-30 carbonatopløsning i nævnte rækkefølge, tørres og inddampes ved vandstrålevakuum. Det gelagtige råprodukt kromatogra-feres på den 100-dobbelte vægtmængde kiselgel med en blanding af methylenchlorid og acetone (96:4) . Den dannede 9a,lla-epoxy-7a-methoxycarbonyl-20-spirox-4-en-3,21-dion 35 er identisk med forbindelsen fremstillet ifølge eksempel 1, smp. 239-241°C (efter omfældning to gange fra methylenchlorid-ether) .

DK 163988 B

30

Eksempel 6

En opløsning af 980 mg 3,21-dioxo-20-spiroxa-4,9(11)-dien-7a~carboxylsyre (jfr. eksempel lc) og 735 mg 90%'s m-chlor-perbenzoesyre i 19,6 ml methylenchlorid henstår i 3 timer 5 ved stuetemperatur. Efter fortynding med methylenchlorid vaskes blandingen med 10%'s kaliumiodidopløsning og derpå med 10%’s natriumthiosulfatopløsning, hvorpå den ekstrahe-res med en iskold 0,5 N natriumcarbonatopløsning. Den vandige fase vaskes med ether og frysetørres. Det pulver-10 formige natriumsalt af 7a-carboxylsyren suspenderes i 4,9 ml dimethylformamid, der tilsættes 1,9 ml isopropyl-iodid, og blandingen omrøres i 16 timer ved 40°C. Den afkølede reaktionsblanding fortyndes med isvand og syrnes med fortyndet saltsyre. Det udfældede bundfald frasuges, 15 eftervaskes med vand og opløses i methylenchlorid. Opløsningen tørres og inddampes ved vandstrålevakuum. Det olie-formige råprodukt opløses i methylenchlorid, opløsningen filtreres gennem aluminiumoxid (neutral) og inddampes, hvorved man får den amorfe 9a,lla-epoxy-7a-isopropoxycarbonyl-20 20-spirox-4-en-3,21-dion, som efter omfældning fra methylenchlorid-ether smel ter ved 207-209°C, og som er identisk med forbindelsen fremstillet i eksempel 3.

Eksempel 7

Til en opløsning af 15,7 g 63,7|3-methylen-20-spiroxa-4,9 (11) -dien-3,21-dion i 628 ml chloroform sættes 11,3 g 80%·s p-25 nitroperbenzoesyre, og blandingen henstår i 2 timer ved stuetemperatur. Efter fortynding med methylenchlorid vaskes blandingen en gang med 10%'s kaliumiodidopløsning, en gang med 10%'s natriumthiosulfatopløsning og en gang med iskold fortyndet natriumhydroxidopløsning i nævnte række-30 følge, og de organiske faser tørres og inddampes ved vandstrålevakuum. Ved kromatografi på den 150-dobbelte vægtmængde kiselgel og eluering med en blanding af toluen og ethylacetat (80:20) får man 9a,lla-epoxy-6&,73-methylen-20-spirox-4-en-3,21-dion, som efter en enkelt omfældning 35 fra methylenchlorid-ether har et smeltepunkt på 299-301°C.

DK 163988B

31

Analogt med den ovenfor beskrevne fremgangsmåde kan 63,73, 153,163-bis-methylen-20-spiroxa-4,9(11) -dien-3,21-dion omdannes til 9a,lla-epoxy-63,73,153/163-bis-methylen-20-spirox-4-en-3,21-dion.

5 De nøvendige udgangsmaterialer kan fremstilles på følgende måde:

Til en blanding af 30,4 g trimethylsulfoxoniumiodid og 102 ml dimethyl sul f oxid isættes under streng udelukkelse af fugtigheden 4,37 g 72%'s (vægt/rumfang) suspension af 10 natirumhydrid i mineralolie, og blandingen omrøres i 1 time ved stuetemperatur. Til denne blanding sættes 7,80 g 20-spiroxa-4,6,9(11)-trien-3,21-dion [jfr. J. Med. Chem., 6, 732-735 (1963)], og efter efterskylning med 7,8 ml di-methylsulfoxid omrøres blandingen i 2 timer ved stuetempe-15 ratur. Under god omrøring hældes reaktionsblandingen i isvand, blandingen syrnes med fortyndet saltsyre, og der ekstraheres to gange med ethylacetat. De organiske faser vaskes med en mættet natriumchloridopløsning, iskold fortyndet natriumhydroxidopløsning og derpå atter med 20 natriumchloridopløsning, tørres og inddampes i vandstråle-vakuum. Råproduktet kromatograferes derefter på en 50-dob-belt vægtmængde kiselgel og elueres med en blanding af toluen-ethylacetat (85:15). Efter fordampning af opløsningsmidlet får man 63/73-methylen-20-spiroxa-4,9(11)-dien-3,21-25 dion, smp. 174-178°C (efter dobbelt omfældning fra methylen-chlorid-ether).

Analogt med den ovenfor beskrevne fremgangsmåde fremstilles også 63,73;153,163-bis-methylen-20-spiroxa-4,9 (11) -dien- 3,21-dion ud fra 153,163-methylen-20-spiroxa-4,6,9(11)-30 trien-3,21-dion. Sidstnævnte forbindelse kan fremstilles på følgende måde: a) En opløsning af 20 g 17a,20?20,21-bis-methylendioxy-pregn-5-en-33,113“diol (U.S. patentskrift nr. 3.409.610) i 150 ml pyridin og 150 g eddikesyreanhydrid opvarmes i

DK 163988 B

32 1 time under tilbagesvaling. Den afkølede reaktionsopløsning hældes på 3000 g isstykker under omrøring, og blandingen omrøres indtil isen er smeltet. Bundfaldet frasuges og lufttørres, og den rå 33,113-diacetoxy-17a,20;20,21-bis-5 methylendioxy-pregn-5-en videreforarbejdes uden rensning.

b) 20,3 g af det lufttørrede 3,11-diacetat sættes portionsvis under ydre afkøling med isvand og omrøring til 71 ml af en opløsning, som er fremstillet ved tilførsel af 141 g gasformig hydrogenfluorid ved ca. 0°C til en opløs-10 ning bestående af 100 ml isopropylalkohol, 48 g urinstof og 9,6 ml vand.

Reaktionsblandingen omrøres under afkøling med isvand i 1 time, hvorefter den forsigtigt hældes i en iskold opløsning af 142 g natriumsulfit i 1015 ml vand og omrøres 15 i 20 minutter. Blandingen ekstraheres med ethylacetat, og der vaskes med mættet natriumchloridopløsning; iskold fortyndet saltsyre, iskold fortyndet natriumhydroxidopløsning og derpå atter med fortyndet natriumchloridopløsning i nævnte rækkefølge, tørres og inddampes under vandstrålevakuum.

20 Remanensen kromatograferes på den 10-dobbelte vægtmængde kiselgel. Ved eluering med en blanding af methylenchlorid og acetone (95:5) fås kromatografisk rene fraktioner, som efter en enkelt omfældning fra methylenchlorid-methanol-ether giver 3β, 113-diacetoxy-17oc, 21-dihydroxy-pregn-5-en-20-on 25 med smp. 231-233°C.

c) Til en opløsning af 13,8 g af den ovenfor fremstillede forbindelse i 207 ml dioxan sættes 69 g finpulveriseret mangandioxid, og blandingen koges i 3 timer med tilbagesvaling. Efter afkøling til stuetemperatur frasuges de 30 faste bestanddele, og der eftervaskes grundigt med chloroform. Filtratet inddampes, remanensen opløses i methylenchlorid og filtreres gennem den 10-dobbelte vægtmængde neutralt aluminiumoxid. Ved fordampning af opløsningsmidlet fås krystallinsk 33,ll$-diacetoxy-androst-5-en-17-on, 35 som efter en enkelt omkrystallisation fra methylenchlorid-

DK 163988 B

33 petroleumsether smelter ved 177-179°C.

d) En blanding af 7,5 g 33,113-diacetoxy-androst-5-en-17-on og 150 mg p-toluensulfonsyre i 450 ml benzen og 7,5 ml ethylenglycol koges i 16 timer på en vandudskiller ved 5 tilbagesvaling. Efter afkøling fortyndes opløsningen med ethylacetat, hvorpå den straks vaskes med 225 ml iskold mættet natriumchloridopløsning. Den organiske fase tørres og inddampes under vandstrålevakuum, og den olieformige 33,lip-diacetoxy-17,17-ethylendioxy-androst-5-en anvendes 10 i de efterfølgende trin uden rensning.

e) Til en omrørt suspension af 2,35 g lithiumaluminium-hydrid i 95 ml tetrahydrofuran sættes dråbevis ved en indre temperatur på 5-10°C en opløsning af 4,7 g 33,11β-diacetoxy-17,17-ethylendioxy~androst-5-en i 140 ml tetra- 15 hydrofuran, der efterskylles med 9 ml tetrahydrofuran, og blandingen koges i 12 timer med tilbagesvaling. Til reaktionsblandingen sættes forsigtigt dråbevis ved en indre temperatur på højst 5°C en blanding af 9 ml tetrahydrofuran og 14 ml ethylacetat og derpå en blanding af 20 9 ml tetrahydrofuran og 14 ml vand, og efter tilsætning af 70 g vandfrit natriumsulfat fortsættes omrøringen i 30 minutter uden afkøling. De faste bestanddele fjernes ved sugefiltrering over et kiselgurlag (eftervaskning med tetrahydrofuran), og filtratet inddampes under vandstråle-25 vakuum. Den amorfe remanens kromatograferes på den 50-dob-belte vægtmængde kiselgel. Ved eluering med en blanding af methylenchlorid-acetone (93:7) og fordampning af opløsningsmidlet fås kromatografisk ren 17,17-ethylendioxy-androst-5-en-33,113-diol, som efter en enkelt omfældning 30 fra methylenchlorid-ether smelter ved 123-125°C.

f) Til en opløsning af 16,8 g 17,17-ethylendioxy-androst- 5-en-33,Ιΐβ-diol i 102 ml tetrahydrofuran sættes 36,3 g pyridinhydrobromidperbromid, og blandingen omrøres i 2 1/2 time ved stuetemperatur. Til blandingen sættes 26,9 g na- 35 triumiodid, hvorefter blandingen omrøres i yderligere 30

DK 163988B

34 minutter, og der tilsættes en opløsning af 36,3 g natrium-thiosulfat i 50,4 ml vand og derpå 100 ml pyridin, hvorpå blandingen omrøres i yderligere 2 timer ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen fortyndes med 100 ml vand og 5 inddampes under vandstrålevakuum ved en temperatur på ca.

45°C. Remanensen optages i ethylacetat og vaskes med mættet natriumchloridopløsning, iskold fortyndet saltsyre, iskold fortyndet natriumhydroxidopløsning og derpå atter med mættet natriumchloridopløsning og tørres over natrium-10 sulfat. Ved afdestillation af opløsningsmidlet under vandstrålevakuum fås en amorf remanens bestående af rå 16a-brom-17,17-ethylenxiody-androst-5-en-33,113-diol. Det dannede råprodukt (13 g) opløses i 143 ml dimethylsulfoxid, og i løbet af 30 minutter ved 45°C tilsættes under omrøring 15 en blanding af 7 g kalium-tert-butoxid i 13 ml dimethylsulfoxid, hvorpå blandingen omrøres i 20 timer ved en badtemperatur på 50°C. Blandingen afkøles til stuetemperatur, fortyndes med ca. 1300 ml mættet ammoniumchloridopløsning og optages i ethylacetat. Den organiske fase vaskes 3 20 gange med mættet natriumchloridopløsning og tørres over natriumsulfat. Ved afdestillation af opløsningsmidlet under vandstrålevakuum fås amorf 17,17-ethylendioxy-androsta- 5.15- dien-33,ll(3-diol, der er tilstrækkelig ren til den videre omsætning.

25 g) Til en opløsning af 800 mg 17,17-ethylendioxy-androsta- 5.15- dien-33,113-diol i 40 ml acetone sættes 4 ml af en opløsning af 100 mg p-toluensulfonsyre i 10 ml vand, og blandingen omrøres i ca. 6 timer ved stuetemperatur. Efter fortynding med 40 ml vand afdestilleres acetonen under 30 vandstrålevakuum, den olieformige remanens optages i chloroform og vaskes en gang med iskold mættet natriumhydrogen-carbonatopløsning. Efter fordampning af det organiske opløsningsmiddel fås amorf 33,113-dihydroxy-androsta-5,16-dien-17-on, som uden yderligere rensning kan anvendes i det 35 efterfølgende trin.

DK 163988 B

35 h) Til 64 ml dimethylsulfoxid sættes 1,52 g 55-60%'s na-triumhydrid (som mineraloliesuspension) og 7,57 g trimethyl-sulfoxoniumiodid under en nitrogenatmosfære, hvorefter blandingen omrøres i 30 minutter ved stuetemperatur og der-5 på i yderligere 30 minutter ved en ydre temperatur på 34-40°C. Blandingen afkøles til stuetemperatur, hvorpå der tilsættes 8 g 35,ll(3-dihydroxy-androsta-5,15-dien-17-on og efterskylles med 26 ml dimethylsulfoxid. Reaktionsblandingen omrøres i 3 timer ved stuetemperatur, hældes 10 il liter iskold mættet natriumchloridopløsning under efter-skylning med lidt methylalkohol og vand, syrnes med fortyndet saltsyre og omrøres i 30 minutter. Den udskilte olie optages i ethylacetat, og den organiske fase vaskes med mættet natriumchloridopløsning, iskold fortyndet natrium-15 hydroxidopløsning og derpå atter med mættet natriumchloridopløsning. Efter tørring fordampes opløsningsmidlerne i vandstrålevakuum, og den dannede amorfe 33,ll|3-dihydroxy-15(3,163-methylen-androst-5-en-17-on underkastes den efterfølgende acetylering uden rensning.

20 i) En opløsning af 7,9 g 3|3,llf3-dihydroxy-153,16|3-methylen-androst-5-en-17-on i 39,5 ml pyridin og 39,5 ml eddikesyre-anhydrid henstår i 5 timer ved stuetemperatur, hvorpå der fortyndes med 800 ml isvand og efter yderligere 1 times henstand foretages ekstraktion med ethylacetat. Den orga-25 niske fase vaskes med mættet natriumchloridopløsning, iskold fortyndet saltsyre, iskold fortyndet natriumhydroxidopløsning og derpå atter med mættet natriumchloridopløsning i nævnte rækkefølge, tørres og inddampes under vandstråle-vakuum. Ved kromatografi af råproduktet på den 30-dobbelte 30 vægtmængde kiselgel og eluering med en blanding af methylen-acetone (98:2) fås 3(3-acetoxy-118-hydroxy-153,163-methylen-androst-5-en-17-on, som efter en enkelt omfældning fra methylenchlorid-ether-petroleumsether har et smeltepunkt på 209-211°C.

DK 163988 B

36 j) Til en opløsning af 1,75 g 33-acetoxy-113-hydroxy-15|3, 16&-methylen-androst-5-en-17-on i 10,5 ml dimethylformamid og 3,5 ml γ-collidin sættes 2,6 ml af en opløsning af 5 vægt-% svovldioxid i methansulfonsyrechlorid, og blandin-5 gen omrøres i 20 minutter, hvorved den indre temperatur stiger til ca. 45°C. Blandingen samt det udfældede bundfald hældes i 17,5 ml isvand under omrøring, og omrøringen fortsættes i yderligere 10 minutter. Den udskilte olie optages i ethylacetat og vaskes med mættet natriumchloridop-10 løsning, iskold fortyndet saltsyre, iskold fortyndet natriumhydroxidopløsning og derpå atter med mættet natriumchlorid-opløsning. Efter fordampning af opløsningsmidlet fås kroma-rografisk ren 33-acetoxy-150,16|3-methylen-androsta-5,9 (11) -dien-17-onr som videreforarbejdes uden rensning.

15 k) Til en opløsning af 5,2 g 3&-acetoxy-15£,163-methylen-androsta-5,9(11)-dien-17-on i 127,5 ml tetrahydrofuran sættes under afkøling med isvand 1,78 g lithiumtråd (stykker af en længde på ca. 5 mm), hvorpå der i løbet af 10 minutter dråbevis tilsættes en opløsning af 12,75 ml cyclisk 20 ethylenacetal af β-chlorpropionaldehydet i 12,75 ml tetrahydrofuran, hvorpå blandingen omrøres i 1 time under isafkøling og derpå i 16 timer ved stuetemperatur. Til reaktionsblandingen sættes 330 ml ethylacetat, hvorpå blandingen omrøres i 45 minutter, fortyndes med yderligere acetat, 25 vaskes med mættet natriumchloridopløsning, iskold fortyndet saltsyre, iskold fortyndet natriumhydroxidopløsning og derpå atter med mættet natriumchloridopløsning i nævnte rækkefølge, tørres og inddampes under vandstrålevakuum.

Det olieformige råprodukt opløses i en blanding af toluen 3 0 og ethylacetat (90:10) , og opløsningen filtreres gennem en 10-dobbelt vægtmængde kiselgel. Opløsningsmidlet fordampes fra filtratet, hvorved man får 4,84 g amorft stof. Dette opløses i 363 ml chloroform, der tilsættes 142 g sur aluminiumoxid (aktivitetstrin 1), og blandingen omrøres i 35 2 1/2 time ved tilbagesvalingstemperaturen, hvorpå der for tyndes med yderligere 363 ml chloroform, omrøres i yderligere 5 minutter og afkøles. Blandingen sugefiltreres over

DK 163988 B

37 kiselgur, filterkagen eftervaskes med chloroform, og filtratet inddampes under vandstrålevakuum. Det dannede rå 21-carbaldehyd (4 g) opløses i 20 ml methylenchlorid og 80 ml acetone, hvorpå der ved 5°c i løbet af 5 minutter tilsættes 5 8 ml 8 N·chrom(VI)-svovlsyreopløsning, og blandingen om røres i 45 minutter under isafkøling. Blandingen fortyndes i 80 ml iskoldt vand, omrøres i 10 minutter uden afkøling og ekstraheres med methlenchlorid. Den organiske fase vaskes med iskold mættet natriumhydrogencarbonatopløsning 10 og tørres. Ved afdestillation af opløsningsmidlet under vandstrålevakuum fås et krystallinsk råprodukt, som filtreres i en opløsning i methylenchlorid gennem den 5-dobbel-te vægtmængde neutralt aluminiumoxid. Ved afdestillation af opløsningsmidlet fra hovedfraktionen fås krystaller, der 15 efter en enkelt omfældning fra methylenchlorid-ether giver 33-acetoxy-153,163-methylen-20-spiroxa-5,9(11)-dien-21-on med smp. 241-243°C.

l) Til en suspension af 1,9 g 33-acetoxy-153,163-methylen-20-spiroxa-5,9(11)-dien-21-on i 26,6 ml chloroform og 190 ml 20 methylalkohol sættes 19 ml 1 N natriumhydroxidopløsning. Blandingen omrøres i 1 time ved stuetemperatur, fortyndes med 190 ml vand og ekstraheres med chloroform og derpå med en blanding af chloroform og methanol (90:10). De sammenblandede organiske faser tørres og inddampes under vandstrå-25 levakuum, og det krystallinske råprodukt omkrystalliseres en gang fra methylenchlorid-ether-petroleumsether. Man får 33-hydroxy-153,163-methylen-20-spiroxa-5,9(11)-dien-21-on, som smelter ved 244-246°C.

m) Fra en suspension af 400 mg 33-hydroxy-153;163-methylen-30 20-spiroxa-5,9(11)-dien-21-on i 20 ml toluen og 3 ml cyclo- hexanon sidestilleres 4 ml opløsningsmiddel ved atmosfæretryk. Blandingen afkøles til en indre temperatur på ca.

80°C, hvorpå der tilsættes 480 mg aluminiumisopropylat, og blandingen omrøres i 2 timer under tilbagesvaling. Opløs-35 ningen afkøles til stuetemperatur, hvorpå der tilsættes en opløsning af 0,4 ml eddikesyre i 0,8 ml toluen, og blandingen inddampes 4 gange med 5 ml vand under vandstrålevakuum

DK 163988 B

38 til tørhed. Den olieformige remanens optages i chloroform, vaskes med iskold fortyndet saltsyre, med vand, med iskold natriumhydroxidopløsning og endnu en gang med vand, hvorpå den organiske fase tørres og inddampes under vandstråle-5 vakuum. Det amorfe råprodukt optages på den 50-dobbelte vægtmængde kiselgel og kromatograferes med en blanding af methylenchlorid og acetone (98:2) . Den dannede 15β,16β-methylen-20-spiroxa-4,9(ll)-dien-3,21-dion smelter efter en enkelt omfældning fra methylenchlorid-ether-petroleums-10 ether ved 172-174°C.

n) En opløsning af 3,27 g 15β,16β-πΐ6^γ1θη-20-3ρ^οχ3-4,9(11)-dien-3,21-dion i 16,35 ml dioxan og 6,54 ml ortho-myresyretrimethylester blandes med 0,654 ml af en opløsning af 900 mg p-toluensulfonsyre i 10 ml dioxan og 2 ml 15 ethylalkohol, hvorpå blandingen omrøres i 4 timer ved stuetemperatur, hvorefter den under omrøring hældes i 430 ml iskold 0,2 N natriumhydroxidopløsning, og der omrøres intensivt i 15 minutter. Bundfaldet frasuges, vaskes med vand og tørres på sugefilteret. Den dannede rå 3-ethoxy-20 15β,16β-π^1^1βη-20-5ρ^οχη-3,5,9 (11) -trien-21-on opløses i 105 ml acetone, og opløsningen behandles med en opløsning af 1,13 g natriumacetat (trihydrat) i 8,84 ml vand og derpå under afkøling til -5°C med 1,55 g N-bromacetamid og 1,13 ml eddikesyre. Blandingen omrøres i 30 minutter 25 ved en indre temperatur på ca. -3°C og derpå yderligere i 15 minutter uden afkøling, der tilsættes en opløsning af 0,88 g kaliumiodid i 17,7 ml vand og derpå en opløsning af 5,58 g natriumthiosulfat i 17,7 ml vand, hvorefter omrøres i yderligere 5 minutter og fortyndes med 88 ml vand.

30 Blandingen ekstraheres med chloroform, og den organiske fase vaskes med iskold mættet natriumhydrogencarbonat-opløsning. Ved tørring og inddampning af den organiske fase fås en amorf remanens, som opløses i 78 ml dimethyl-formamid, og der tilsættes 3,89 g lithiumcarbonat og 3,89 g 35 lithiumbromid, hvorpå blandingen omrøres i 3 timer ved 100°C. Den afkølede blanding hældes under omrøring i 750 ml isvand, hvorefter bundfaldet frasuges og vaskes med vand. Filterkagen opløses i chloroform, opløsningen tørres over

DK 163988 B

39 natriumsulfat/ hvorpå den inddampes til tørhed under vandstrå levakuum. Remanensen opløses i methylenchlorid, og opløsningen filtreres gennem en søjle af neutral aluminiumoxid (aktivitet II), hvorpå der elueres med yderligere 5 mængder af samme opløsningsmiddel. Eluatet inddampes/ og den ønskede 153/163-methylen-20-spiroxa-4,6,9(11)-trien- 3,21-dion udfældes på amorf form ved tilsætning af ether.

Produktet opfører sig ved tyndtlagskromatografi som et stof og er egnet til videre omsætning.

10 Eksempel 8

En blanding af 2,0 g 9a,lla-epoxy-63,73-methylen-20-spirox- 4-en-3,21-dion, 40 ml methylalkohol og 2,45 ml 2 N vandig kaliumhydroxidopløsning omrøres i 16 timer ved 60°C. Reaktionsopløsningen inddampes i vandstrålevakuum, og 15 rester af vand fjernes ved inddampning 3 gange med absolut ethylalkohol. Remanensen opløses i varm methanol, og ved tilsætning af ethylacetat udfældes et krystallinsk produkt.

Man får kalium-9a,lla-epoxy~173-hydroxy-63,73-methylen-3-oxo-17a-pregn-4-en-21-carboxylat, som tørres i højvakuum 20 ved 80°C.

Analyse: beregnet 8,83% K, fundet 8,76% K.

Samme kaliumsalt fremstilles analogt med den ovenfor beskrevne fremgangsmåde ud fra en ækvivalent mængde 9a,11a-epoxy-173-hydroxy-63f 73-methylen-3-oxo-17a-pregn-4-en-21-25 carboxylsyre-methylester.

Analogt med den ovenfor beskrevne fremgangsmåde kan også 9a,lla-epoxy-63,73;153/163-bis-methylen-20-spirox-4-en- 3,21-dion eller 9a,lla-epoxy-173-hydroxy-63,73,153,163~ bis-methylen~3-oxo-17a-pregn-4-en-21-carboxylsyre-methyl-30 ester omdannes til kaliumsalte af sidstnævnte syre.

Eksempel 9

Til en suspension af 1,8 g 9a,11a-epoxy-63,73-methylen-20-spirox-4-en-3,21-dion i 18 ml methylalkohol sættes 1,5 ml 4 N methanolisk kaliumhydroxidopløsning, og blandingen

DK 163988 B

40 koges i 1 time med tilbagesvaling. Ved atmosfæretryk afde-stilleres ca. 12 ml opløsningsmiddel, der tilsættes 18 ml ethylacetat, og blandingen inddampes under vandstrålevakuum til et rumfang på ca. 12 ml. Efter fornyet tilsætning af 5 18 ml ethylacetat omrøres det dannede krystallinske bund fald i yderligere 10 minutter, frasuges, vaskes med ethylacetat og ether og tørres på filteret. Det gullige pulver opløses i 9 ml dimethylformamid, der tilsættes 0,9 ml methyliodid, og blandingen omrøres til 40 timer ved stue-10 temperatur i en lukket beholder. Blandingen fortyndes med isvand, og der omrøres i 15 minutter. Det udfældede bundfald frasuges, udvaskes med vand, opløses i chloroform, og efter tørring af den organiske fase inddampes denne under vandstrålevakuum. Det amorfe råprodukt sættes på den 15 30-dobbelte vægtmængde, kiselgel og elueres med en blanding af methylenchlorid-acetone (95:5) . De sammenblandede ens fraktioner giver efter en enkelt omfældning fra methylen-chlorid-ether 9a,lla-epoxy-17£-hydroxy-6|3,7£-methylen-3-oxo-17a-pregn-4-en-21-carboxylsyremethylester, smp. 189-191°C.

20 På analog måde kan man i stedet for methyliodid anvende en askvi valent masngde dimethylsulfat.

Eksempel 10

En opløsning af 1,3 g 9a,lla-epoxy-6(3,7i3-methylen-20-spirox- 4-en-3,21-dion og 1,3 g DDQ (2,3-dichlor-5,6-dicyanbenzo-25 quinon) i 26 ml dioxan omrøres i 15 timer ved 100°C. Den mørke reaktionsblanding inddampes 3 gange med toluen under vandstrålevakuum, remanensen opløses i methylenchlorid, og opløsningen filtreres gennem en 10-dobbelt vægtmængde aluminiumoxid (neutral). De dannede krystaller omfældes en 30 gang fra methylenchlorid-ether, hvorved man får den ønskede forbindelse 9a,lla-epoxy-ββ,73-methylen-20-spiroxa-l,4-dien- 3,21-dion, smp. 295-296°C.

Eksempel 11

En blanding af 1,3 g 9a,lla-epoxy-7a-methoxycarbonyl-20-spirox-4-en-3,21-dion, 17 ml methylalkohol og 1,41 ml 2 N vandig kaliumhydroxidopløsning omrøres i 16 timer ved

DK 163988 B

41 stuetemperatur og derefter i 20 minutter ved 60°C. Reaktionsopløsningen inddampes under vandstrålevakuum, og resten af vandet fjernes ved inddampning 3 gange med absolut ethylalkohol. Den krystallinske remanens udrøres 5 med 40 ml ethylacetat, sugefiltreres og udvaskes på filteret med ethylacetat og ether. Det dannede fnugagtige kalium-9a,lla-epoxy-173-hydroxy-7a-methoxycarbonyl-3-oxo-17a-pregn-4-en-21-carboxylat tørres i højvakuum ved 80°C.

Analyse: beregnet 8,31% K, fundet 8,02% K.

10 Samme salt kan også fremstilles ved omsætning på analog måde af en ækvivalent mængde 9a, lla-epoxy-17f3-hydroxy-3-oxo-173-pregn~4-en-7a,21-dicarboxylsyre-dimethylester.

Eksempel 12

En blanding af 1,25 g 9a,lla-epoxy-7a-isopropoxycarbonyl-15 20-spirox-4-en-3,21-dion, 15,6 ml methylalkohol og 1,27 ml 2 N vandig kaliumhydroxidopløsning omrøres i 16 timer ved stuetemperatur og derefter i 20 minutter under tilbagesvaling. Reaktionsopløsningen inddampes under vandstrålevakuum, og rester af vand fjernes ved inddampning 3 gange med abso-20 lut ethylalkohol. Den krystallinske remanens udrøres med 40 ml ethylacetat, sugefiltreres og udvaskes på filteret med ethylacetat og ether. Det dannede fnugagtige kalium-9a,lla-epoxy-173-hydroxy-7a-isopropoxycarbonyl-3-oxo-17a-pregn-4-en-21-carboxylat tørres i højvakuum ved 80°C.

25 Analyse: beregnet 7,66% K, fundet 7,15% K.

Analogt med den ovenfor beskrevne fremgangsmåde fremstilles ud fra en ækvivalent mængde 9a,lla-epoxy-7a-ethoxycarb-onyl-20-spirox-4-en-3,21-dion eller 9a, lla-epoxy-17f3-hydr-oxy-3-oxo-17f3-pregn-4-en-7a, 21-dicarboxylsyre-7-ethylester-30 21-methylester kaliumsaltet af 9a,lla-epoxy-7a-ethoxycarbon-yl-173-hydroxy-3-oxo-173-pregn-4-en-21-carboxylsyre. Analyserne for kaliumindhold svarer til den teoretiske værdi.

DK 163988 B

42

Eksempel 13

En blanding af 5,7 g trimethylsulfoxoniumiodid i 19 ml dimethyl sulf oxid omrøres under streng udelukkelse af fugtighed med 0,82 g 72%'s (vægt/rumfang) suspension af natrium-5 hydrid i mineralolie i 1 time ved stuetemperatur, hvorpå der tilsættes 1,46 g 9a,lla-epoxy-20-spiroxa-4,6-dien-3,21 dion [jfr. J. Med. Chem., £, 732-735 (1963)], efterskylles med 1,46 ml dimethylsulfoxid, hvorpå der omrøres i 3,5 timer ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen fortyndes 10 med 146 ml isvand, syrnes med fortyndet saltsyre og eks-traheres med ethylacetat. Den organiske fase vaskes med mættet natriumchloridopløsning, iskold fortyndet natriumhydroxidopløsning og derpå atter med mættet natriumchlorid-opløsning, tørres over natriumsulfat og inddampes under 15 vandstrålevakuum. Det dannede amorfe råprodukt kromato-graferes på den 10O-dobbelte vægtmængde kiselgel. Ved eluering med en blanding af toluen og acetone (95:5) og inddampning får man 9a,lla-epoxy-6a,7a-methylen-20-spirox- 4-en-3,21-dion, smp. 262-264°C (efter omfældning en gang 20 fra methylenchlorid/ether).

Eksempel 14

En blanding af 10 g 9a,lla-epoxy-7a-methoxycarbonyl-20-spi-rox-4-en-3,21-dion, 100 ml methylalkohol og 7,5 ml 4 N me-thanolisk kaliumhydroxidopløsning koges i 1 time med til-25 bagesvaling. Fra reaktionsblandingen afdestilleres ca. 80 ml ved atmosfæretryk, der tilsættes 60 ml ethylacetat, og suspensionen inddampes til ca. 20 ml under vandstrålevakuum. Efter fornyet fortynding med 60 ml ethylacetat henstår blandingen i 30 minutter ved stuetemperatur, hvor-30 på bundfaldet frasuges og udvaskes 2 gange med ether. Den pulverformige remanens suspenderes i 46 ml dimethylformamid, og efter tilsætning af 4,6 ml methyliodid omrøres blandingen i 40 timer i en lukket beholder ved stuetemperatur. Efter fortynding med 300 ml isvand isoleres bundfaldet, hvorpå 35 det vaskes med vand, opløses i ethylacetat, og opløsningen tørres og inddampes under vandstrålevakuum. Det dannede råprodukt kromatograferes på den 30-dobbelte mængde kisel-

DK 163988 B

43 gel. De· med en blanding af methylenchlorid og acetone (92:8) eluerede ens fraktioner giver efter besprøjtning med ether og en enkelt omfældning af det dannede bundfald fra methylenchlorid med ether den ønskede 9a,lla-epoxy-17|3-hydroxy-3-5 oxo-17a-pregn-4-en-7a,21-dicarboxylsyre-dimethylester på amorf form.

Analogt med den ovenfor beskrevne fremgangsmåde omdannes 9a,lla-epoxy-7a-methoxy-15|3,163-methylen-20-spirox-4-en- 3,21-dion til 9a,lla-epoxy-173-hydroxy-153,16f3-methylen-10 3-oxo-17α-pregn-4-en-7 α, 21-dicarboxy1syre-dimethylester.

Eksempel 15

Tabletter indeholdende ca. 20 mg aktivt stof, f.eks. 9a,11a-epoxy-7a-methoxycarbonyl-20-spirox-4-en-3,21-dion eller 9a,lla-epoxy-63,73-methylen-20-spirox-4-en-3,21-dion, frem-15 stilles på følgende måde:

Sammensætning for 1000 tabletter Aktivt stof, finitialet 20,0 g

Flormelis (saccharose) 79,0 -

Arabisk gummi 4,75 - 20 Sorbitol 3,75 -

Talkum 2,5

Magnesiumstearat 4,9

Mineralolie 0,1

Carboxymethylcellulose (Na-salt) 5,0 25 Fremstilling

Det aktive stof blandes med flormelis og arabisk gummi, blandingen sigtes og granuleres ved hjælp af en ca. 35%'s vandig sorbitolopløsning. Granulatet presses gennem en sigte, tørres, sigtes endnu en gang og blandes grundigt med de øv-30 rige hjælpestoffer (talkum, magnesiumstearat, mineralolie og carboxymethylcellulose-natriumsalt). Blandingen kompri-meres på sædvanlig måde til tabletter med en vægt på 120 mg pr. tablet.

DK 163988 B

44

Eksempel 16

Gelatinekapsler indeholdende ca. 25 mg aktivt stof, f.eks.

9a,lla-epoxy-63,73-methylen-20-spirox-4-en-3,21-dion, fremstilles på følgende måde: 5 S ammen sætning for 1000 kapsler

Aktivt stof, finmalet 25 g

Lactose, finmalet 25 g

Det aktive stof og lactosen blandes grundigt, udrives og sigtes, og det dannede pulver fyldes i gelatinekapsler i 10 portioner på 50 mg pr. kapsel.

Eksempel 17

Tabletter indeholdende ca. 25 mg komponent A og ca. 25 mg komponent B fremstilles på følgende måde:

Sammensætning for en tablet 15 Komponent A, mikroniseret 25,0 mg

Komponent B, mikroniseret 25,0 -

Majsstivelse 50,0 -

Kiselsyre, kolloid 5,0 -

Gelatine 5,0 - 20 Cellulose, mikrokrystallinsk 75,0 -

Natriumcarboxymethylstivelse 20,0 -

Magnesiumstearat 1,5 - 306,5 mg

Fremstilling af 100.000 tabletter 25 2,5 kg komponent A, mikroniseret, 2,5 kg komponent B, mi kroniseret, og 5,0 kg majsstivelse blandes med 0,5 kg kolloid kiselsyre, og blandingen forarbejdes til en fugtig masse med en opløsning af 0,5 kg gelatine i 5,0 kg destilleret vand (30°C). Denne blanding presses gennem en 30 sigte med en maskevidde på 3 mm, og produktet tørres ved 45°C (hvirvellagstørreapparat). Det tørre granulat presses gennem en sigte med en maskevidde på 0,8 mm, blandes med en forud sigtet blanding af 7,5 kg mikrokrystallinsk cellulose og 2,0 kg natriumcarboxymethylstivelse samt 0,15 kg

DK 163988B

45 magnesiumstearat, og blandingen presses til tabletter med en vægt på 306,5 mg pr. tablet.

Som komponent A anvendes f.eks. 9a,lla-epoxy-7a-(methoxy-carbonyl eller isopropoxycarbonyl)-20-spirox-4-en-3,21-dion, 5 9a,lla-epoxy-63,73-methylen-20-spirox-4-en-3,21-dion eller 9a,lla-epoxy-63,73;153,163“bis-methylen-20-spirox-4-en-3,21-dion, og som komponent B anvendes f.eks. 6-chlor-7-sulfamyl- 3,4-dihydro-l,2,4-benzothiadiazin-l,1-dioxid.

På analog måde kan man i ækvivalente mægnder også anvende 10 følgende aktive stoffer:

Som komponent A: Kalium- eller natriumsaltet af 9a,lla-epoxy-173-hydroxy-63,73-methylen-3-oxo-17a-pregn-4-en-21-carboxy1-syre (50 mg) eller 9a,lla-epoxy-173-hydroxy-7a-methoxycarb-onyl-3-oxo-17a-pregn-4-en-21-carboxylsyre (30 mg), 15 som komponent B: 2-chlor-5-(3-hydroxy-l-oxo-isoindolyl-3)-benzensulfonamid (50 mg) eller 4-(2-methylenbutyry1)-2,3-dichlorphenoxyeddikesyre (50 mg), 6-chlor-7-sulfamyl~3,4-dihydro-1,2,4-benzothiadiazin-l,1-dioxid (25 mg), 2-phen-oxy-3-butylamino-5-carboxybenzensulfonamid (0,5 mg), 20 (l-oxo-2-methyl-2-phenyl-6,7-dichlor-indanyl-5-oxy)-eddikesyre (som racemat 20 mg, som lævoformen 10 mg) eller 3-cyclopentylmethyl-6-chlor-7-sulfamyl-3,4-dihydro-l,2,4-benzothiadiazin-1,1-dioxid (0,5 mg).

Sammenligningsforsøg 25 Undersøgte forbindelser:

Spirolacton - 7a-Acetylthio-20-spirox-4-en-3,21-dion (kendt) Prorenon - 63,73-Methylen-20-spirox-4-en-3,21-dion (kendt) Mexrenon - 7a-Methoxycarbonyl-20-spirox-4-en-3,21-dion (kendt) Epoxyprorenon· - 9a,lla-Epoxy-63,73-methylen-20-spirox-4-en-30 3,21-dion (eksempel 7)

Epoxyitexrenon - 9a,lla-Epoxy-7a-methoxycarbonyl~20-spirox-4-en-3,21-dion (eksempel 1) 46

DK 163988 B

Forsøg 1.

Relativ bindingsaffinitet til androgen- og progesteron-receptorerne in vitro.

5 Til præparering af androgen-receptor isoleres den ventrale prostata 21-27 timer efter kastration af rotten. Til præparering af progesteron-receptor kastreres små hunkaniner ("belgisk hare"), der vejer 2,0-2,5 kg, og behandles 6 dage senere med dagsdoser på hver 10 ^g/kg/dag østron; 10 efter endnu 1 uge aflives dyrene, og uteri isoleres. Organerne findeles og homogeniseres i en vandig opløsning indeholdende (i millimolær koncentration) 10 mmol ΚΗ2Ρθ4*Κ2ΗΡθ4, 1 mmol ethylendiamintetraeddikesyre, 50 mmol natriummolybdat og 1 mmol mercaptoethanol ved pH = 15 7,5. Homogenisatet centrifugeres i 30 minutter ved 30.000 x g, og supernatanten inkuberes med den tilsvarende radioaktivt mærkede ligand, dvs. []-methyltrienolon (0,5 nanomol) som androgen henholdsvis [ ]-progesteron (1 nanomol) som gestagen og i nærvær eller fravær af den 20 undersøgte forbindelse og under tilsætning af 50 nanomol cortisol til at hindre bindingen til corticosteroid-bin-dende globulin.

Den undersøgte forbindelses relative bindingsaffinitet beregnes ved sammenligning af den koncentration, der 25 fremkalder 50%’s hæmning, med koncentrationen af standarden. Resultaterne er sammenfattet i tabel 1, og de viser, at forbindelserne ifølge opfindelsen har en langt svagere antiandrogen virkning end de kendte sammenligningsforbindelser.

Tabel 1 47

DK 163988 B

Relativ bindingsaffinitet til androgen- og progesteron-receptorer in vitro.

Aktivt stof Androgen-receptor Progesteron-receptor 5 (progesteron = 1)

Spironolacton 9,1 x 10_« t 16,5 % (7) 7,0 x 10 ? ± 11,0 :é (5)

Prorenon 1,9 x 10_, ±22,6% (4) l,2x 10_, - 20,0 % (5)

Epoxyprorenon 2,4 x 10_^ ±14,6% (4) 8,3x 10, i 9,8 % (5)

Mexrenon 1,1 x 10_, ± 12,7 % (5) 1,2 x 10_,. ± 21,7 % (5) 10 Epoxymexrenon 7,6 x 10 4 ± 26,3 % (6) < 5 x 10 (5) a) Som følge af dårlig opløselighed ved forsøgsbetingelserne er denne angivelse vanskelig at bestemme.

(Af hensyn til overskueligheden er den gennemsnitlige fejl udtrykt som procentisk afvigelse; angivelserne i parente-15 ser angiver antallet af bestemmelser.)

Forsøg 2

Antimineralocorticoid virkning hos rotte.

Kagawa's konventionelle metode anvendes. Hanrotter (IVArSDIV) adrenalektomares bilateralt og forsynes i 4-12 dage med drik-20 kevand med 1% natriumchlorid. 1 dag før forsøget indgives der dyrene 2 gange hver 20 ml/kg af en 0,85%'s natriumchloridop-løsning, og i de sidste 16 timer unddrages den enhver næring, og der stilles kun drikkevand ad libitum til rådighed. 30 minutter efter indgivelsen af det undersøgte stof indgives 1 25 Mg/kg aldosteron subkutant (s.c.) og 20 ml/kg af en 0,85%'s natriumchloridopløsning peroralt (p.o.). I de næste 4 timer opsamles urin, og Na+ og K* bestemmes ved hjælp af flammefoto-meter. Resultaterne er sammenfattet i graf 1, og de viser, at forbindelserne ifølge opfindelsen har væsentlig kraftigere 30 normaliserende virkning på aldosteronforøget natrium-retention og kalium-ekskretion i forhold til de kendte sammenligningsforbindelser.

DK 163988 B

48

Forsøg 3

Gestagen virkning.

Gestagen virkning bestemmes ved hjælp af Clauberg-McPhail's klassiske metode under anvendelse af kastre-5 rede, med østrogen forbehandlede infantile hunkaniner af racen "belgisk hare" med en vægt på 900-1200 g. 4 på hinanden følgende dage indgives det aktive stof forsøgsdyrene en gang daglig gennem mavesonde som alkoholisk suspension. Ved bedømmelsen af de endometriale 10 forandringer bedømmes sådanne med McPhail-værdi på 2 eller mere som positive. Resultaterne er sammenfattet i graf 2} og de viser, at de to forsøgsforbindelser ifølge opfindelsen har en væsentlig lavere gestagen virkning end den kendte sammenligningsforbindelse.

15 Forsøg 4

Antiandrogen virkning i kastrerede, testosteron-behandlede rotter. 1 7 dage efter kastration indgives der kastrerede infantile hanrotter (Tif: RA/f:SPF) med en legemsvægt på 20 ca. 50 g ei gang daglig 0,3 mg/kg testosteronpropionat s.c. I det samme tidsrum indgives der også 3 gange daglig dyrene enten forsøgsforbindelsen i form af en vandig suspension eller placebo gennem mavesonde. ih dag efter behandlingens afslutning aflives dyrene og organerne 25 isoleres og vejes. Den antiandrogene virkning illustreres som forskel i vægten af de tilsvarende organer hos behandlede dyr og kontroller. Resultaterne er sammenfattet i graf 3, og de viser, at de to forsøgsforbindelser ifølge opfindelsen har en væsentlig mindre antiandrogen virkning end 30 den kendte sammenligningsforbindelse.

Graf 1 49

DK 163988 B

Antimineralocorticoid virkning af epoxyderivater og deres usubstituerede stamforbindelser i adrenalektomerede rotter (Kagawa-forsøg) (gennemsnit ± standardafvigelse).

S = spirono- P = prorenon M = mexrenon lacton EP = epoxy- EM = epoxymexrenon . . , . prorenon

Urin % (vand- belastning) r

.„οι i T τ I I T T I

...Λ J T i τ τ Ip I T

”'c[§ 11Π 1.3. li JIU&m

S P EP M EM

Na (pmol/rel)

4π τ ΪΓ il d μΑλ IT

- » Λ1! ίΤΠΛ rM

i! |H 1 m . tiel bl 1113 101 01311¾¾¾¾ Li 13,1101¾¾¾

s P EP K EM

K (ymol/rel) nol ri« 1 r , r Ρ··3 I I r-H . T _ r i oo ^ T —j JL- , · . -i- _T JT » r 1_3_10_ i 3p jjlSÉll S p ep m em

Na/K

Il A| *~Μ ’.ikl II π n in låkiMM LiiÅ±iM&m s p ep m Em C = kontrol 1/3/10 = mg/kg p.o.

A = aldosteron

DK 163988 B

50

Graf 2

Gestagen virkning (Clauberg-forsøg) i kastrerede, østrogen-behandlede infantile hunkaniner efter 4 dages peroral indgivelse af spironolacton, epoxyprorenon og 5 epoxymexrenon. (Progesteron indgives en kontrolgruppe s.c.).

Individuelle Median-værdier .....

værdier_ index 4-• 3- « 2- 1__—>___II- w_Hl 11_LU__rm.t_·"··

Dosis mg/kg o.i ίο ιοο 10 too to too

Kontrol Progesteron Spirono- Epoxy- Epoxy- lacton prorenon mexrenon

Graf 3 51

DK 163988 B

Antiandrogen virkning i kastrerede, med testosteronpropio-nat behandlede rotter efter indgivelse af spironolacton, epoxyprorenon og epoxymexrenon 3 gange daglig p.o. i 7 5 dage (medianværdi ± standardafvigelse: n = 10).

O Spirono- ·*· Epoxy- O Epoxymexrenon lacton_ prorenon _

Organvægte Kontroldyr:100% * ^ * Bulba Lava tor fentral Sadblarer q^qerno~ ani prostata (fulde) (tomme)' 120 - I 1 o L·—Nrfnfydi— 70 ^ ^ \ Λ m 1 \ \ 40

Sil8 60 180 18 60 18C 18 60 l8c 18 60 18( 18 60 18( mg/kg p,o« __

Median: SEM: n = 10 .p <0,05 ..p <0,01

Claims

5 AC|Y°l~j.....(CH2>2'i“3t fAK V V «> /vyv r1 hvori -A-A- betyder gruppen eller -CH=CH-, R^ be tyder hydrogen, og R2 betyder α-orrenteret lavalkoxycarbonyl, 1 2 eller R og R sammen betyder en a- eller β-orienteret me-thylengruppe, -B-B- betyder gruppen -CH2"CH2“ eller en 10 a- eller (3-orienteret gruppe /c\2 -CH-CH- 1 2 X betyder 2 hydrogenatomer eller oxo, Y og Y sammen bety- 1 2 der en oxygenbro -O-, eller Y betyder hydroxy., og Y betyder hydroxy, lavalkoxy eller, når X betyder 2 hydrogenatomer, 15 tillige lavalkanoyloxy, eller er salte af forbindelser med form- 2 len I, hvori X betyder oxo, og Y betyder hydroxyl, idet med "lav" betegnede organiske grupper højst indeholder 7 carbonatomer.
2. Forbindelser ifølge krav 1, kendetegnet 2 ved, at R betyder methoxycarbonyl, ethoxycarbonyl eller 2 0 isopropoxycarbonyl.
3. Forbindelser ifølge krav 1, kendetegnet 1 2 ved, at methylengruppen dannet af R og R og/eller grup-pen /V -CH-CH- 25 defineret ved symbolet -B-B-, er β-orienteret. DK 163988 B 53
4. Forbindelse ifølge et af kravene 1-3, kende- 7 2 tegnet ved, at X betyder oxo, og Yx og Y sammen betyder en oxygenbro -0-.
5. Forbindelse ifølge et af kravene 1-3, kende- 5 tegnet ved, at den er et alkalimetalsalt af en forbin- 1 2 delse, hvori X betyder oxo, og Y og Y hver for sig betyder hydroxyl.
6. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den er 9a,lla-epoxy-7a-methoxycarbonyl~20-spirox- 10 4-en-3,21-dion.
7. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den er 9a,lla-epoxy-6|3,73-methylen-20-spirox-4-en-3,21-dion.
8. Forbindelse ifølge et af kravene 1-7 til anvendel-15 se som aldosteron-antagoniserende aktivt stof.
9. Fremgangsmåde til fremstilling af steroidforbindelser med den i krav 1 anførte formel I eller salte af sådanne O forbindelser, hvori X betyder oxo, og Y betyder hydroxyl, kendetegnet ved, at man 20 a) omsætter en forbindelse med formlen CH, Y1 v CV\ I '2 • i-i----(CHo),-0=X |A)A/Y* (II> /νγ’Υ Rl hvori A-A, B-B, R^, R^, X, Y^ og Y^ har de ovenfor angivne betydninger, med en peroxysyre eller b) omsætter en forbindelse med formlen DK 163988 B 54 . Γ3 γ1 γ2 —r - - «Η > -é-z2 tAf/y\> (II1) ziA.A/v Rl 12 1 2 hvori A-A, B-B, R , R , Y og Y har de ovenfor angivne betydninger, og mindst ét af symbolerne Z^- og 7?" betyder hydroxyl sammen med hydrogen og det andet har samme betyd- O 5 ning eller betyder oxo eller, som symbolet Z , betyder 2 hydrogenatomer, med et oxidationsmiddel eller c) til fremstilling af en forbindelse, hvori Y^ betyder hydroxyl, og de øvrige symboler har de ovenfor angivne betydninger, hydrogenerer en forbindelse med formlen CH_ 2 CH . , 3 oh Y 3/\l i i . V::o I—r-w-c-x 10 t . Ϋν* av) /vV’v 'l R 12 2 hvori A-A, B-B, R , R , X og Y har de ovenfor angivne betydninger, og W betyder en gruppe -CH=CH- eller -C=C-, til mætning af flerdobbeltbindingen i sidekæden eller ; d) til fremstilling af en forbindelse med formlen I, hvori i c 1 2 -10 Y og Y sammen betyder en oxygenbro -0-, og de øvrige symboler har de ovenfor angivne betydninger, cycliserer en forbindelse med formlen , r. , i r-p ;—;......(ch ) -ί-χ /Φνγ* (v) 1 i 1 /vV'v DK 163988 B 55 1 2 hvori A-A, B-B, R , R og X har de ovenfor angivne betydninger, og Yo betyder en fraspaltningsgruppe, under fraspaltning af gruppen YQ eller e) til fremstilling af en forbindelse med formlen I, 5 hvori R betyder hydrogen, og R betyder en lavalkoxycar-bonylgruppe, og de øvrige symboler har de ovenfor angivne betydninger, omdanner en forbindelse med formlen CH 1 Y2 Vl·]....."V,~< ΛΎ'ν /vV\ o 1 2 hvori A-A, B-B, X, Y og Y har de ovenfor angivne betyd-10 ninger, og RQ betyder frit carboxyl, eller et reaktionsdygtigt derivat eller et salt af en sådan forbindelse til en lavalkylester eller 1 2 f) til fremstilling af en forbindelse, hvori R og R sammen danner en methylenbro, og de øvrige symboler har de 15 ovenfor angivne betydninger, adderer en methylengruppe til en forbindelse med formlen ca, . ch3 i ϊ2 i'/r-r----<cH) -é-° aA/v\> t i i </ V V 1 2 hvori A-A, B-B, X, Y og Y har de ovenfor angivne betydninger, og, om ønsket, 20 behandler en fremstillet forbindelse med formlen I, hvori -A-A- betyder -, med et dehydrogeneringsmid- del til indføring af 1,2-dobbeltbindingen og/eller cycliserer en fremstillet forbindelse med formlen I, 1 2 hvori Y og Y hver for sig betyder en hydroxylgruppe, 25 ved fraspaltning af bestanddelene i vand til dannelse af en 1 2 forbindelse med formlen I, hvori Y og Y sammen betyder en oxygenbro, og/eller 56 oxiderer en fremstillet forbindelse med formlen I, P hvori X betyder 2 hydrogenatomer, til en tilsvarende forbindelse, hvori X betyder oxo, og/eller lavalkanoylerer den endestillede hydroxylgruppe i en frem-5 stillet forbindelse med formlen I, hvori X betyder 2 hydro-genatomer, og Y og Y hver for sig betyder en fri hydroxy1-gruppe, og/eller omdanner en fremstillet forbindelse med formlen I, hvori X betyder oxo, Y"*" betyder hydroxyl, og Y^ betyder 10 hydroxyl eller lavalkoxy, eller Y^ og Y^ sammen betyder en oxygenbro· -O-, til et salt af den tilsvarende 173-hydroxy-21-carboxylsyre med formlen I, hvori X betyder oxo, og Y^ og Y hver for sig betyder hydroxyl, og/eller omdanner et sådant salt til den fri syre og/eller omdanner den fri 15 syre eller et salt deraf til en lavalkylester.
10. Farmaceutisk præparat, kendetegnet ved, at det som aktivt stof indeholder en af de ifølge krav 1-8 definerede forbindelser, om ønsket sammen med et med hensyn til elektrolytudskillelsen uspecifikt diuretikum.