DK164757B - Organ til kvalitativ diagnostisk bestemmelse af herpes virus, eppstein-barr virus, varicella zoster virus eller human t-lymfocyt virus - Google Patents

Organ til kvalitativ diagnostisk bestemmelse af herpes virus, eppstein-barr virus, varicella zoster virus eller human t-lymfocyt virus Download PDF

Info

Publication number
DK164757B
DK164757B DK360186A DK360186A DK164757B DK 164757 B DK164757 B DK 164757B DK 360186 A DK360186 A DK 360186A DK 360186 A DK360186 A DK 360186A DK 164757 B DK164757 B DK 164757B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
virus
organ
hsv
human
antibody
Prior art date
Application number
DK360186A
Other languages
English (en)
Other versions
DK164757C (da
DK360186D0 (da
DK360186A (da
Inventor
Ennio Iaccheri
Paola Piro
Original Assignee
Boehringer Biochemia Srl
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Boehringer Biochemia Srl filed Critical Boehringer Biochemia Srl
Publication of DK360186D0 publication Critical patent/DK360186D0/da
Publication of DK360186A publication Critical patent/DK360186A/da
Publication of DK164757B publication Critical patent/DK164757B/da
Application granted granted Critical
Publication of DK164757C publication Critical patent/DK164757C/da

Links

Classifications

    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/74Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
    • G01N33/743Steroid hormones
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61BDIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B10/00Instruments for taking body samples for diagnostic purposes; Other methods or instruments for diagnosis, e.g. for vaccination diagnosis, sex determination or ovulation-period determination; Throat striking implements
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56911Bacteria
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56983Viruses
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61BDIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B10/00Instruments for taking body samples for diagnostic purposes; Other methods or instruments for diagnosis, e.g. for vaccination diagnosis, sex determination or ovulation-period determination; Throat striking implements
    • A61B2010/0009Testing for drug or alcohol abuse
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/805Test papers
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/81Packaged device or kit
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/807Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
    • Y10S436/808Automated or kit
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/807Apparatus included in process claim, e.g. physical support structures
    • Y10S436/81Tube, bottle, or dipstick

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Description

DK 164757 B
i
Den foreliggende opfindelse angår et organ til kvalitativ diagnostisk bestemmelse af Herpes virus, Eppstein-Barr virus, Varicella Zoster virus, Human T-lymfocyt virus bestående af en bærer, hvoraf en zone er belagt med en forud fastlagt mængde 5 af de tilsvarende specifikke antistoffer til de nævnte viruser.
Organet ifølge opfindelsen består således af en fast bærer (af passende karakter, form og størrelse), som ved en egnet teknik 10 bærer fikseret på sin overflade, en forud fastlagt mængde af et antistof. Organet ifølge opfindelsen kan anvendes ved en diagnostisk fremgangsmåde, som omfatter, at man bringer dette organ i kontakt med de biologiske væv indeholdende antigenerne, som skal analyseres. Det agglutinerede produkt, der er 15 dannet og fikseret på organet, mærkes så enzymatisk ved reaktion med et specifikt antistof konjugeret med et enzym. Efter fjernelse af de mærkede antistoffer, der ikke er specifikt bundne, ved hjælp af vask (f.eks. med vand) dyppes organet i en egnet påvisningsopløsning indeholdende et substrat for det 20 mærkende enzym, som er i stand til at give en reaktion, der er nyttig til kvalitative og/eller kvantitative målinger.
Data i litteraturen angiver, at bedømmelsen af mange parametre af klinisk interesse ved analyse af en biologisk væske kræver 25 overføring af en nøjagtig målt mængde til en egnet beholder, hvor den skal inkuberes med en forud fastlagt mængde reagens for at give en påvisningsreaktion.
De sædvanlige fremgangsmåder indebærer ingen særlige vanskelig-30 heder, når de biologiske materialer let kan opsamles og står til rådighed i forholdsvis høj mængde, således som det i reglen er tilfældet med urin og blod, men det samme er ikke tilfældet, når analytiske bestemmelser skal udføres på biologiske materialer, der står til rådighed i små eller meget små mæng-35 der (exudater, pus, slim, spyt osv.), eller af en hård samling fra histologisk ændrede væv og/eller væv i næppe tilgængelige områder, f.eks. pustuler, syphilomaer, sår osv.
DK 164757 B
2
Ulemperne ved den tidligere nævnte teknik overvindes med organet ifølge den foreliggende opfindelse, der som nævnt består af en bærer, hvoraf en zone er belagt med en forud fastlagt mængde af de tilsvarende specifikke antistoffer til de oven-5 nævnte viruser, og som er ejendommeligt ved, at zonen har en form, der er egnet til direkte prøvetagning af de uopløselige antigener ved kontakt med og/eller punkter fra dyrekroppe eller menneskekroppe eller væv.
10 Organet ifølge opfindelsen muliggør faktisk direkte saml i ng af det biologiske materiale, som skal undersøges, uden at der tyes til måling af prøven. Prøven kan faktisk opsamles direkte på patienten eller senere på prøven af væske eller biologisk væv opsamlet ved en af de sædvanlige laboratorieteknik-15 ker.
For tiden er de eneste diagnostiske fremgangsmåder til påvisning af viruser i biologisk væv (f.eks. under virusinfektioner eller for at bedømme mulige sunde bærere i en befolkning) base-20 ret på cellekulturmetoder, som kræver kostbart apparatur, træ net personale og lang tid (3 eller flere dage) til bedømmelse af resultaterne.
Disse grunde vanskeliggør rettidig diagnostisk analyse, som 25 kunne være nyttig til forhindring af sygdomsspredning til epidemiologiske undersøgelser og generelt til tidlig diagnose af vi russygdomme.
Eksempler på viruser, hvis tilstedeværelse ofte må påvises 30 omfatter herpesviruser (type 1 og 2), Eppstein-Barr virus, Varicella Zoster virus, Human T-Lymfocyt virus 3 (HTLV-3).
Det er derfor et ønske at tilvejebringe et organ til anvendelse ved en fremgangsmåde til påvisning af disse viruser, 35 hvilken kan udføres selv i ikke specialiserede centre af ikke højt uddannede eller specialiserede personer, og uden specielle apparater, såsom sterile værelser og lignende.
DK 164757 B
3
Organet ifølge opfindelsen muliggør, at ulemperne ved de kendte fremgangsmåder, overvindes. Dets anvendelse er faktisk særlig enkel, billig, hurtig, sikker og nøjagtig.
5 Det forudsættes ved anvendelse af organet ifølge opfi ndel sen at der haves et specifikt antistof, og specifikke antistoffer mærket med enzymer. Antistoffet mod viruset, der skal bestemmes, er bundet på organet ifølge opfindelsen. Efter agglutineringsreaktionen bringes organet i kontakt med antistoffet 10 mærket med enzymet, og neddykkes så i den tilsvarende påvisningsopløsning efter fjernelse af det enzymmærkede antistof, der ikke er specifikt bundet.
Hvor det drejer sig om herpes virus absorberes f.eks. et mono-15 klonalt eller polyklonalt anti-HVS på et organ, som har en form, der er egnet til direkte prøveudtagning af vævene (f.eks. en hudblære).
250 patienter er blevet underkastet denne diagnostiske metode 20 sammenlignet med de kendte cellekulturmetoder. Anvendelsen af organet ifølge opfindelsen viste sig at være yderst pålidelig og i fuldstændig overensstemmelse med de tidligere metoder. Resultaterne blev imidlertid opnået på kun en time, medens cellekulturmetoderne krævede mindst 3 dage.
25
Analogt er organet ifølge opfindelsen egnet til påvisning af HTLV-3, en virus der er ansvarlig for sygdommen, der er kendt som AIDS, både til analyse af blodprøver fra individuelle personer og af blod fra ukendte donorer.
30
En anden vigtig fordel ved anvendelse af organet ifølge den foreliggende opfindelse er, at det er muligt at påvise virusen selv i en inaktiv, ikke replikativ fase, medens cellekulturmetoderne kræver, at viruserne kan replicere, idet der ellers 35 behøves en aktivering (med deraf følgende yderligere operative vanskeligheder).
DK 164757 B
4
Organet ifølge opfindelsen bringes i kontakt med det biologiske materiale, der skal undersøges, hvilket organ består i det væsentlige af et håndgreb og en ekstremitet, der er beregnet til at komme i kontakt med det biologiske materiale, og som 5 ved passende teknik bærer fikserede, forud fastlagte mængder af antistoffer, der er specifikke eller delvis specifikke for de antigen-forbindelser, som skal bestemmes.
Antistofferne fikseret på ekstremiteten af organet ifølge op-10 findelsen vil derfor ved immunokemisk reaktion binde til antigenerne, der findes i materialet som undersøges, i en grad, der er proportional med mængden indeholdt i materialet selv.
I en foretrukken udføre!sesform ifølge opfindelsen efter vask 15 med et egnet opløsningsmiddel eller opløsning for at fjerne stofferne, der ikke er fikseret med en specifik binding til antistoffet, der forud er fikseret på organet, skal en direkte kvantitativ og/eller kvalitativ bestemmelse af den undersøgte kliniske parameter fortrinsvis udføres ved at benytte allerede 20 kendt teknik baseret f.eks. på kemiske, immunokemiske, immuno-enzymatiske, enzymatiske osv. reaktioner.
Formen og størrelsen af organet ifølge opfindelsen og især af ekstremiteten, der er belagt med antistofferne, er ikke i sig 25 selv afgørende for opfindelsens karakter, idet det naturligvis er betinget af den tilsigtede anvendelse og den type opsamling, som kræves til den analytiske bestemmelse.
Hvis der f.eks. skal ske opsamling ved hudpunktur, skal der 30 hensigtsmæssigt anvendes et organ, som er karakteristisk ved en mere eller mindre tilspidset, men i hovedsagen konisk form med en ekstremitet, der er belagt med antistoffer. Hvis på den anden side opsamlingen kræver en simpel kontakt med vævet eller en dypning i en biologisk væske, kan overfladen belagt med 35 antistofferne have en cylindrisk, kugleformet, ægformet, konisk eller keglestubformet facon.
DK 164757 B
5
Hvis opsamling skal ske ved hudpunktur, har et organ vist sig særlig egnet bestående af en metalkerne, eventuelt belagt med plastmateriale, og som i sin ekstremitet er udstyret med et legeme belagt med antistoffer af passende størrelse og form 5 (f.eks. en lille kugle med en diameter på 2-5 mm), hvorfra en metalspids egnet til injektion rager nogle få mm frem (f.eks. 0,5-2 mm). Under brugen vil metalspidsen bevirke, at den biologiske væske siver ud (f.eks. en dråbe blod) og imprægnerer legemet, der er belagt med antistof, idet den er i umiddelbar 10 kontakt dermed på grund af den minimale afstand.
Som egnende materialer til bæreren, der skal belægges, kan anvendes plastmaterialer, som er i stand til at binde antistoffer ved adsorption ifølge opfindelsen såsom polyethylen, poly-15 propylen, polystyren, polyurethaner, polyvinylchlorid, BUNA-N, nylon, po1yacry1 ater, polymethacrylater, polytetraf1uorethy-lenharpikser (TeflonR), phenolharpikser, polyacrylamider, Del-rinR, LexanR, cellulosederivater, si 1iconederivater osv.
20 Disse materialer kan også belægge en metalkerne.
Bi ndi ngen af antistoffet med organet ifølge opfindelsen kan også være kemisk, hvis det konstruktive plastmateriale indeholder aminogrupper, hydroxygrupper, carboxygrupper eller iso-25 cyanogrupper, som er egnet til at fiksere forbindelser med en kemisk binding. Det egnede plastmateriale kan eventuelt aktiveres ved at dyppe det i en pufret opløsning med pH-værdi 9 af g 1utaraldehyd i overensstemmelse med allerede velkendt teknik eller i overensstemmelse med andre lignende velkendte metoder 30 f.eks. inden for området enzymimmobilisering.
Metalmeterialer kan også anvendes, når de forud har været underkastet en fremgangsmåde, der gør dem porøse eller i hvert tilfælde i stand til at adsorbere antistoffer f.eks. ved gal-35 vanisk teknik til aflejring af colloidt guld eller andre metaller i colloid form.
DK 164757 B
6
Eksempler på belægning af disse materialer med et antistof på de nævnte fremgangsmåder er beskrevet i amerikansk patent nr. 4.003.988 og i følgende artikler:
(a) IMMUNOASSAY USING ANTIGEN-ENZYME CONJUGATES
5 B.K. Van Weemen og A.H.W. Schuurs febs. letters bind 15, nr. 3, juni 1971, side 232-235.
(b) SOLID PHASE ANTIBODY ASSAY BY MEANS OF ENZYME CONJUGATED TO ANTI-IMMUNOGLOBULIN
P. Leinikki og Suvi Passila, J. Clin. Path., 1976, 29, 10 side 1116-1120.
(C) ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY WITH POLYVALENT GONOCOCCAL ANTIGEN
B.R. Brodeur, F.E. Ashton og B.B. Diena, The Journal of Medical Microbiology, bind 15, nr. 1, 1981, side 1-9.
15 (d) A MICROPLATE ENZYME-IMMUNOASSAY FOR TOXOPLASMA ANTIBODY
J. Clin. Path., 1976, nr. 29, side 150-153.
(e) ENZYMOLOGY (Immobilized Enzymes, Antigens, Antiobodies and Peptides - Preparation and Characterization, bind I, red. af H. Howard Weetall, Marcel Dekker Inc., New York (1975).
20
Antistoffet eller antistofferne, der anvendes til at belægge bæreren, kan være polyklonalt eller monoklonalt eller eventuelt blandinger deraf og kan være specifikt for et eller flere aktive steder af antigenet, der skal bestemmes. Endvidere kan 25 denne specificitet være rettet mod et eller flere antigener.
Antistoffer kan fikseres på bæreren uden nogen mængdebegrænsninger, men en mængde, der'er egnet til den tilsigtede analysetype bør vælges, og ligger sandsynligvis mellem et picogram 30 og et milligram pr. kvadratcentimeter.
Organet ifølge opfindelsen kan anvendes til direkte bestemmelse af viruser.
35 I reglen udføres påvisningsreaktionen rigtigt ved hjælp af et antistof mærket med et egnet enzym, som er specifikt for antigen-antistof kompl ekset , der er fikseret på bæreren efter prøve-
DK 164757 B
7 opsamlingen. Til dette formål bliver organet, som bærer anti-gen-antistofkomplekset, fikseret derpå, vasket med en egnet stødpude og/eller vandig opløsning for at fjerne det uspecifikt bundne antigen eller antistof, og bliver derefter dyppet 5 og inkuberet i passende tid i en opløsning af antistoffet konjugeret med et enzym.
Disse antistofopløsninger indeholder fortrinsvis ikke-ioniske, ioniske og amfotere stødpudemidler og emulgeringsmidler med en 10 koncentration af enzymmærket antistof, der ligger fra 0,01 til 0,005 vægt%. Det enzymmærkede antistof-antigen-antistofkompleks vil derfor blive fikseret på bæreren. Efter fjernelse af et muligt uspecifikt bundet mærket antistof ved vask med en egnet stødpude og/eller vandig opløsning, dypning af bæreren, behand-15 ling som ovenfor anført i en opløsning indeholdende et egnet chromogent system baseret på et substrat for enzymet muliggøres en enkelt og direkte antigenbestemmelse af produktet fra den enzymatiske reaktion ved kolorimetrisk, spektrofotometrisk eller forskellig anden teknik.
20
Tegningen, der illustrerer opfindelsen, viser skematisk et organ ifølge opfindelsen. Henvisningstallet 1 viser den kegleformede bærer, som er belagt med antistoffet, og som skal komme i kontakt med det biologiske materiale. Stilken 2 virker 25 som håndtag og kan være af en sådan form og størrelse, at brugen gøres let og komfortabel. 3, 4 og 5 viser henholdsvis antistoffet, antigenet og det enzymmærkede antistof.
Organet ifølge opfindelsen, der også muliggør at undgå en nøj-30 agtig bestemmelse af mængden af biologisk materiale, der skal undersøges, frembyder også den fordel indenfor metodens følsom-hedsgrænser, at give en højere pålidelighed og nøjagtighed i kraft af minimeringen af eksperimentalfejlene. Analysen bliver endvidere hurtigere og mere rettidig, uden at der er behov for 35 kostbart udstyr, således at der endog kan forudses en direkte anvendelse i hjemmet af analytisk udstyr.
DK 164757 B
8
Organerne ifølge opfindelsen skal fremstilles under strenge sterile betingelser, under egnede aseptiske forudsætninger og til sidst indføres i egnede sterile beholdere, f.eks. reagensglas forseglet med steriliserede propper.
5
Det følgende ikke-begrænsende eksempel illustrerer nogle mulige anvendelser af organet ifølge opfindelsen.
EKSEMPEL
10 (a) Fremstilling af et organ, der er egnet til bestemmelse af Herpes virus (HSV)
Polyvinylchloridpinde med en kegleformet ekstremitet blev an-15 vendt som fast fase.
Ekstremiteten af pindene fik lov at inkubere med et anti-HSV-2 antiserum fortyndet i forholdt 1:300 med 50 mM pH 9,6 carbo-nat/bicarbonatstødpude. Teknisk set blev antiserumet fikseret 20 på bæreren ved at dyppe pindens koniske ekstremitet i fordybningerne i en polyvinylchlorid mikroskive indeholdende 0,15 ml antiserum, således at hele det koniske areal kunne dyppes i opløsningen. Mikroskiven fik derefter lov at inkubere i 2 timer ved 37°C i et fugtigt kammer og derpå natten over ved 4°C.
25
Efter denne inkubation blev pindene vasket nøjagtigt med pH
7,4 saltvand med phosphatstødpude (KH2PO4 15 mM, Na2HP04 85 mM, NaCl 15 mM, KC1 25 mM) indeholdende 0,05¾ Tween, indført i fordybningerne i en anden skive indeholdende samme saltvand 30 med stødpude sammen med 0,3¾ okseserumalbumin og fik lov at inkubere i 1 time ved 37°C i et fugtigt kammer. Denne behandling har det formål at mætte alle mulige frie steder på poly-vinylchloridet, som i de følgende trin også kan bringes til at adsorbere de virale partikler eller det konjugerede antiserum.
På lignende måde blev fremstillet et organ til bestemmelse af Hepstein-Barr virus, Varicella Zoster virus og Human T-Lympho-cyt virus-3 (HTLV).
35 9
DK 164757 B
(b) In vitro bestemmelse af HSV
Efter et identisk trin fik pindene lov til i kort tid ved stuetemperatur at komme i kontakt med en HSV virus suspension for-5 tyndet 1:5 i saltvand (0,9% NaCl).
Efter vask blev pindene indført i reagensglas indeholdende anti-HSV-2-anti serum konjugeret med peroxidase i en 1:150 fortynding i saltvand med phosphatstødpude indeholdende 0,05% 10 Tween 20. Denne procedure blev efterfulgt af 30-40 minutters inkubation ved stuetemperatur og af vask i saltvand med phosphatstødpude indeholdende 0,05% Tween 20 for at forhindre en mulig analytisk genererende indblanding af det konjugerede antiserum, der er uspecifikt bundet med antigenet.
15
Efter det sidste trin af behandlingen blev pindene indført i en chromogen opløsning bestående af 3,4 mg ortho-pheny1endia-min opløst i 10 ml stødpude, dannet af lige dele 0,1 M citronsyre og 0,2 M Na2HPO4, hvortil der lige før brugen var sat 50 20 mel af en 3% H2O2 opløsning.
De registrerede resultater kunne vise den gode specificitet og følsomhed af denne teknik: de positive prøver viser faktisk gennem det chromogene system en intens farve, der tydeligt 25 kunne skelnes fra den næsten ikke eksisterende farve af de negative prøver.
(c) Forklarende procedure af en HSV bestemmelse ved direkte opsaml inq 30
Herpesinfektioner type 1, type 2 eller type 1 og 2 forekommer i reglen med dannelsen af blærer af forskellig størrelse i genitalområdet og/eller 1 abi al området. Dannelsen af herpesblæ-rer i andre legemsorganer er sjældnere.
Med det formål, at diagnostisere en faktisk viral infektion af herpetisk oprindelse, fik organet fremstillet ved fremgangsmå- 35

Claims (3)

  1. 5 Organet drejes derefter rundt og væsken fra den brudte blære får lov at komme i kontakt med anti-HSV-antistofferne, der forud var fikseret på pinden. Så snart væskeopsamlingen er afsluttet, indføres organet i en 10 ampul indeholdende 300 mel af en opløsning af anti-HSV konjugeret med peroxidaseenzym og fortyndet i en 30 mM phosphatstød-pude indeholdende 0,05% Tween 20 og 1% okseserumalbumin. EFter 15 minutters inkubation vaskes bæreren med rindende vand 15 i ca. 60 sek. og overføres til en ampul indeholdende 300 mel af en pH 5 opløsning karakteriseret ved følgende procentiske sammensætning (w/v): Tetramethy1benzidin 0,02 Citronsyre 2,10
  2. 20 Natriumperborat 0,07 Dibasisk natriumphosphat 3,00 Dimethylsulfoxid 20,00 Destilleret vand # 75,00
  3. 25 Efter 15 minutters inkubation iagttages opløsningen indeholdt i ampullen. Den kan være: (a) farveløs i tilfælde af et negativt resultat (fravær af HSV i patientens blære), (b) blå i tilfælde af et positivt resultat (tilstedeværelse af 30 HSV i patientens blære). Patentkrav. Organ til kvalitativ diagnostisk bestemmelse af Herpes virus, Eppstein-Barr virus, Varicella Zoster virus, Human T-lymfocyt 35 DK 164757 B virus bestående af en bærer, hvoraf en zone er belagt med en forud fastlagt mængde af de tilsvarende specifikke antistoffer til de nævnte viruser, kendetegnet ved, at zonen har en form, der er egnet til direkte prøvetagning af de uop-5 løselige antigener ved kontakt med og/eller punktur fra dyrekroppe eller menneskekroppe eller væv. 10 15 20 25 30 35
DK360186A 1984-12-06 1986-07-29 Organ til kvalitativ diagnostisk bestemmelse af herpes virus, eppstein-barr virus, varicella zoster virus eller human t-lymfocyt virus DK164757C (da)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IT2392684 1984-12-06
IT8423926A IT1213254B (it) 1984-12-06 1984-12-06 Metodo diagnostico per la valutazione di parametri clinici mediante prelievo diretto dimateriali biologici e dispositivoper la sua attuazione.
PCT/EP1985/000675 WO1986003590A1 (en) 1984-12-06 1985-12-05 Device and method for analysis of biological material
EP8500675 1985-12-05

Publications (4)

Publication Number Publication Date
DK360186D0 DK360186D0 (da) 1986-07-29
DK360186A DK360186A (da) 1986-07-29
DK164757B true DK164757B (da) 1992-08-10
DK164757C DK164757C (da) 1992-12-28

Family

ID=11210926

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK360186A DK164757C (da) 1984-12-06 1986-07-29 Organ til kvalitativ diagnostisk bestemmelse af herpes virus, eppstein-barr virus, varicella zoster virus eller human t-lymfocyt virus

Country Status (14)

Country Link
US (1) US4842995A (da)
AT (1) AT395076B (da)
AU (1) AU5309986A (da)
BE (1) BE903810A (da)
CA (1) CA1270757A (da)
CH (1) CH674087A5 (da)
DE (1) DE3590624T1 (da)
DK (1) DK164757C (da)
ES (1) ES8706210A1 (da)
FR (1) FR2574553B1 (da)
GB (1) GB2191288B (da)
IE (1) IE58624B1 (da)
IT (1) IT1213254B (da)
WO (1) WO1986003590A1 (da)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5599720A (en) * 1982-08-27 1997-02-04 Multilyte Limited Measurement of analyte concentration
US5362654A (en) * 1984-07-20 1994-11-08 Sangstat Medical Corporation Self-contained quantitative assay
AT388618B (de) * 1987-05-05 1989-08-10 Binder Bernd Dr Verfahren zur quantitativen bestimmung von funktion und antigener konzentration einer in einer biologischen fluessigkeit enthaltenen substanz
GB8728639D0 (en) * 1987-12-08 1988-01-13 Scient Generics Ltd Device for analytical determinations
CA1307462C (en) * 1988-06-20 1992-09-15 Victor E.O. Valli Rapid stick test for the diagnosis of bovine leukemia virus infection from serum or milk
US5081010A (en) * 1989-02-09 1992-01-14 Eastman Kodak Company Extraction composition, test kit and their use to extract or determine herpes simplex viral antigen
US5415994A (en) * 1993-08-02 1995-05-16 Quidel Corporation Lateral flow medical diagnostic assay device with sample extraction means
US5874226A (en) * 1995-05-22 1999-02-23 H. Lee Browne In situ immunodetection of antigens
US7410807B2 (en) * 2000-07-24 2008-08-12 D Aurora Vito J Pregnancy and sex identification test based on saliva or other bodily fluids
AU2002348583B2 (en) * 2002-04-19 2006-12-07 Regen Biotech, Inc. The method for measuring the amount of betaig-h3 protein and diagnostic kit using the same
EP2136716A2 (en) * 2007-03-14 2009-12-30 Ogeno Gmbh Biopsy device for the in vivo enrichment of tissue, cells, or analytes

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH490125A (de) * 1968-10-17 1970-05-15 Josef Schuler Anton Laboratoriumsharpune
US3709868A (en) * 1971-03-08 1973-01-09 Hoffmann La Roche Opium alkaloid antigens and antibodies specific therefor
US3926521A (en) * 1973-02-21 1975-12-16 Byron E Ginzel Blood collecting and processing means
US3992631A (en) * 1975-02-27 1976-11-16 International Diagnostic Technology, Inc. Fluorometric system, method and test article
US4008317A (en) * 1975-12-29 1977-02-15 Recherche Et Industrie Therapeutiques (R.I.T.) Varicella-zoster virus vaccine and preparation thereof
US4329151A (en) * 1979-08-17 1982-05-11 Icl Scientific Stable diagnostic reagent and method for qualitative determinations of streptococci infections
FR2519650B1 (fr) * 1982-01-13 1985-07-12 Univ Paris Curie Lignees cellulaires hybrides murines anti-herpes, procede d'obtention, anticorps monoclonaux anti-herpes, applications biologiques
JPS59155762A (ja) * 1982-12-06 1984-09-04 フイ−ルダ−・ジルレスピ−・デイビス・リミテツド フイ−ルドイムノアツセイ反応システムおよび方法
AU529210B3 (en) * 1983-02-02 1983-04-14 Australian Monoclonal Development Pty. Ltd. Monoclonal antibody in occult blood diagnosis
AU2706384A (en) * 1983-05-06 1984-11-08 Monoclonal Antibodies Inc. Colorimetric immunoassay on solid surface
US4657869A (en) * 1984-05-18 1987-04-14 E. I. Du Pont De Nemours And Company Self-contained device for carrying out specific binding assays
US4720455A (en) * 1985-09-06 1988-01-19 Pitman-Moore, Inc. Progesterone assay method for mammals and monoclonal antibody therefor

Also Published As

Publication number Publication date
GB2191288A (en) 1987-12-09
CH674087A5 (da) 1990-04-30
CA1270757A (en) 1990-06-26
IE58624B1 (en) 1993-10-20
DE3590624T1 (da) 1987-10-08
DK164757C (da) 1992-12-28
IT8423926A0 (it) 1984-12-06
AU5309986A (en) 1986-07-01
FR2574553A1 (fr) 1986-06-13
IE853021L (en) 1986-06-06
GB2191288B (en) 1988-12-21
WO1986003590A1 (en) 1986-06-19
ATA908485A (de) 1992-01-15
IT1213254B (it) 1989-12-14
BE903810A (fr) 1986-04-01
DK360186D0 (da) 1986-07-29
ES8706210A1 (es) 1987-06-01
GB8711015D0 (en) 1987-06-10
FR2574553B1 (fr) 1988-06-03
ES549602A0 (es) 1987-06-01
DK360186A (da) 1986-07-29
AT395076B (de) 1992-09-10
US4842995A (en) 1989-06-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5890789B2 (ja) 分析物を検出するための装置および方法
CN101603967B (zh) 快速检测人ABO/Rh/MN血型的方法及试剂盒
US5989840A (en) Estimation of active infection by heliobacter pylori
DK165932B (da) Anordning og fremgangsmaade til hurtig kvalitativ og kvantitativ bestemmelse af tilstedevaerelsen af en reaktiv ligand i et fluidum
DK149908B (da) Fremgangsmaade, analysesaet og biotin-maerket antistof til paavisning og/eller kvantitativ bestemmelse af et biologisk stof i en proeve.
JPS6182166A (ja) 分析対象を検出し測定する免疫アツセイ系及びアツセイ方法
JPS61247965A (ja) 酵素免疫測定法
US4853325A (en) Saliva test for feline leukemia virus
JPH01202663A (ja) 固定化したビオチン化受容体を用いるリガンド測定のための試験装置,キットおよび方法
JP2005526513A (ja) 白血球数の測定方法および装置
EP0067182B1 (en) Method and test kit for detecting antigens and antibodies
US5599715A (en) Lower alcohol sulfate wash solution
JPH0750114B2 (ja) 免疫分析器具を用いる分析方法
DK164757B (da) Organ til kvalitativ diagnostisk bestemmelse af herpes virus, eppstein-barr virus, varicella zoster virus eller human t-lymfocyt virus
US4590157A (en) Method for detecting antigens and antibodies
JPH01248061A (ja) 試験キットおよび免疫リガンドの測定方法
KR19980703302A (ko) 글루타치온 s-트랜스퍼라제의 하나 또는 그 이상의 아이소엔자임 검출에 기초한 장기 상태 평가를 위한 쾌속 검정법
JPH07109420B2 (ja) 免疫試薬組成物およびクラミジア抗原または淋菌抗原の測定におけるその使用
JP6716241B2 (ja) 歯周病原菌に対するIgG抗体の検出方法
NO872095L (no) Immunologisk maalemetode og -sett.
EP0301141A1 (en) Solid phase enzyme immunoassay test apparatus and process for detecting antibodies
JPH02298866A (ja) 酵素検定キット及び完全細胞に適用可能な方法
WO1990015328A1 (en) Improved immunoassay
Sananikone et al. Quantitative lateral flow immunoassay for measuring progesterone in bovine milk
JPS62501034A (ja) 生物学的材料を直接採取して臨床パラメ−タ−を評価する診断法及びそれを実施する為の器具

Legal Events

Date Code Title Description
PBP Patent lapsed