DK170855B1 - Phenylalaninderivater - Google Patents

Description

DK 170855 B1

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte phenylalaninderivater samt ikke-toksiske salte deraf, der kan anvendes som absorptionsfremmende midler (ved oral eller rectal indgivelse) i insulinpræparater.

5 Phenylalaninderivaterne ifølge opfindelsen har den almene formel

R2-Y-CO-NH-CH-COOH

-a..

i hvilken R1 er et hydrogenatom, en nitrogruppe, en hy-droxylgruppe eller en benzyloxycarbonyloxy-gruppe, 15 - Y - er en binding, en lavere alkylengruppe, en vinylengruppe eller en gruppe med formlen -CH2-0- eller -0-CH2-, og R2 er en eventuelt med et chloratom, en nitrogruppe eller en methoxygruppe substitueret 20 phenyl- eller naphthylgruppe, eller -R2-Y-C0- er en N-benzyloxycarbonyl-phenylalanyl-, N-benzyloxycarbonyl-4-fluor-phenylalanyl- eller N-(m-methoxycinnamoyl)-phenylalanylgruppe, og opfindelsen angår 25 også de ikke-toksiske salte deraf.

Forbindelserne med formlen I er enestående derved, at de kan anvendes som insulinabsorptionsaktivatorer. Phenyl-alanin i sig selv eller N-acetylphenylalanin eller lavere 30 alkylestere eller amider af syrerne med formlen I kan ikke anvendes som absorptionsaktivatorer. Forbindelserne med formlen I har asymmetriske carbonatomer og kan derfor foreligge i D-form, L-form eller DL-form, afhængigt af substitu-enternes særlige kombination. Phenylalaninderivaterne ifølge 35 den foreliggende opfindelse er hidtil ukendte og kan fremstilles ved gængse N-acyleringsmetoder.

2 DK 170855 B1

Phenylalaninderivaterne ifølge opfindelsen kan foreligge i form af et salt såsom et metalsalt, f.eks. natriumkalium-, lithium- og calciumsalte, og som et salt med en organisk base, når disse er farmaceutisk acceptable. Som 5 organiske baser kan der anvendes aminer såsom ammoniak (ammoniumsalt) , dicyclohexylamin og N-methyl-D-glucamin og basiske aminosyrer såsom lysin og arginin.

Phenylalaninderivaterne ifølge opfindelsen indgives oralt eller rectalt sammen med insulinet. Ikke blot fremmes 10 absorptionen af insulin, men også nedbrydningen af insulin i nærvær af trypsin og chymotrypsin inhiberes.

Især er oral eller rectal indgivelse af insulin ved behandling af diabetes mellitus endnu ikke klinisk anerkendt, og udviklingen af en insulin-absorptionspromotor, der frem-15 byder langvarig og bekvem anvendelse til mennesker, udgør et stort behov.

Phenylalaninderivaterne ifølge opfindelsen kan anvendes i en mængde i intervallet fra 0,1 til 2000 mg, fortrinsvis 0,2 til 500 mg, til 25 enheder insulin.

20 Absorptionspromotoren kan indgives i sammensat form med insulinet.

Med hensyn til præparat formen kan phenylalaninderiva-tet anvendes ved at sammensætte det til et præparat såsom tabletter, kapsler samt eliksirer i form af opløsninger og 25 suspensioner etc.

Phenylalaninderivatet og insulinet kan indgives til en patient med behov for en sådan behandling (mennesker) i et dosisinterval fra 0,1 til 1000 mg pr. patient almindeligvis flere gange daglig, dvs. en samlet daglig dosis på 0,2 30 til 2000 mg. Dosis varierer alt efter sygdommens sværhedsgrad, patientens legemsvægt og andre faktorer, der vil blive taget i betragtning af fagmanden.

De ovennævnte typiske præparatkombinationer sammensættes til farmaceutiske midler som anført nedenfor. Ca.

35 0,2-500 mg phenylalaninderivat og insulin blandes i enheds doseringsforroer, der er almindelig anerkendt eller påkrævet 3 DK 170855 B1 inden for farmaceutisk praksis sammen med farmaceutisk acceptable bærestoffer, excipienser, bindemidler, antiseptiske midler, stabilisatorer, smagsstoffer etc. Mængden af hvert aktivt stof i disse sammensætninger eller præparater er 5 afpasset således, at de giver en passende dosis inden for det foreskrevne interval.

Særlige materialer, der kan inkorporeres i tabletter, kapsler m.m., er følgende: et bindemiddel såsom traganth, gummi arabicum, majsstivelse og gelatine; et excipiens såsom 10 mikrokrystallinsk cellulose; et kvældningsmiddel såsom majsstivelse, prægelatineret stivelse og argininsyre; et smøremiddel såsom magnesiumstearat; et sødemiddel såsom saccharose, lactose og saccharin; et smagsstof såsom pebermynte, olie fra Gaultheria adenothrix max. og kirsebær. Enterisk 15 overtræk kan anvendes med fordel, f.eks. hydroxyphenylmethyl-cellulose i 8%'s.vandig opløsning som præ-overtræk som underbelægning og hydroxypropylmethylcellulosephthalat (10%) og triacetin (3%) i vandig opløsning som overtræksmiddel.

Når enhedsdoseringsformen er en kapsel, kan der endvidere 20 inkorporeres et flydende bærestof såsom fed olie i den ovennævnte type materialer. Der kan forekomme forskellige andre materialer som overtræksmateriale eller med henblik på at variere enhedsdoseringsformernes fysiske form ifølge andre metoder. Således kan tabletter overtrækkes med shellak og/el-25 ler sukker. Sirupper eller eliksirer kan indeholde aktive forbindelser, saccharose som sødemiddel, methyl- og propylparaben som konserveringsmiddel, et farvestof, et smagsstof såsom kirsebærsmag eller appelsinsmag.

Konserveringsmidler kan sammensættes ifølge sædvanlig 30 praksis ved fremstilling af farmaceutiske doseringsformer, ved hvilken et aktivt stof opløses eller suspenderes i et bærestof såsom vand.

En puffer, et konserveringsmiddel og et antioxida-tionsmiddel kan yderligere inkorporeres efter behov.

35 Opfindelsen vil i det følgende blive nærmere forklaret ved hjælp af eksempler.

DK 170855 Bl 0 4

Eksempel 1 fremstilling af "S-6", H02c *W2 21 g 4-nitro-L-phenylalanin opløses i 10 mi 10%'s NauH, og der tilsættes SKifrevis 1,7 g ethylerheropløsning af phenoxyacetyichiorid og en vandig n32^0opløsning fremstil-10 ler af 2,1 g Na^CO^ og 25 ml vand portionsvis under omrøring vea stuetemperarur i løDet af 20 minurter. Deretter omrøres blandingen ved stuetemperatur i 3 timer og syrnes derefter med fortyndet saltsyre til fældning af krystaller. Krystallerne filtreres, vasKes med vana og omkrystalliseres ud fra 15 dioxan, hvorved fas 2,4 g w-pnenoxyaceryl-4-nitro-L-phenyl-alanin som nåie med et smeltepunkt pa 147°C.

Analyse: Beregnet: C 5*,3u, H 4,6b, N b,14.

Fundet: C 59,47, n 4,51, N 8,03.

20 25 30 35 0 5 DK 170855 B1

Eksempel 2

Fremstilling at "S-8", i§^JU3§>

H

25 g 4-phenylsmørsyre opløses i 50u ml chlorotorm, og hertil sættes 17,3 g κι-hydroxysuccinimid. Der tilsættes portionsvis 31 g N,N'-dicyclohexylcaroodiimid under isafkøling 10 og omrøring. Blandingen omrøres i én rime under afkøling og derefter i 7 timer vea stuetemperatur. Efter tilsætning af 10 ml iseddike omrøres blandingen i én time, det uopløselige materiale fjernes ved filtrering, og filtratet inddampes til tørhed under formindsket tryk. Remanensen omkrystalliseres 15 ud fra etnylacetat, hvorved fas 35 g 4-phenylsmørsyre-N-ny-droxysuccinimidester med et smeltepunkt på b2°cj.

13 g af ovennævnte ester opløses i 200 ml chloroform Denne opløsning dryppes til en opløsning bestående af 16,5 g L-phenylalanin og l5,y g Ν3200^ i 150 ml vand, idet der om-20 røres ved stuetemperatur. Herefter omrøres blandingen i 7 timer, og det uopløselige materiale, der opstår, fjernes ved filtrering. Filtratet syrnes til pH 1,0 med 6n saltsyre. De udfældede Krystaller filtreres, vaskes med vand og omkrystalli-seres ud fra y0%'s vandig methanol, hvorved der fås 11,2 g 25 Μ-(4-pnenylbutyroyi)-JLi-pnenylaianin med er smeltepunkt på 178°C.

analyse: Beregnet: C /3,28, h 6,79, N 4,49.

Fundet: C 73,24, H 6,94, N 4,46.

26 o

Oprisk drejning: [aj = +8,33 ic = l, acetone;.

På samme måde som beskrevet ovenfor fremstilles føl-30 gende produkter, hvis strukturformler fremgår af den følgende tabel II.

35 0 6 DK 170855 B1

Produkt Molekylformel_Smp. °C_Optisk drejning__ S-2 4 C18H16C1N03 155-158 [a]3DU “31,02° (c=l , weOH) 5 25 " 157-159 [α]3β0 +31,20° (c=l, MeOH) 27 C19Hi9N03 135-140 [α12β5 -35,39° (c=l, MeOH) 30 C19H16F'NC'3 158-160 [a ] 2D° -19,10° (c=l, MeOH) 10 31 C18H16FN03 145-148 [a] 2£ -50,98° (c=l, MeOH) 36 C]9H16F3N03 157-160 [o]2^ +19,03° (c=l, MeOH) 15

Eksempel 3

Fremstilling af "S-ll" O COjH

0,1 mol L-phenylalanin opløses i 50 ml 2N NaOH, og hertil sættes 20 ml ethylether. Til blandingen sættes under kraftig omrøring og isafkøling det ønskede naphthoxyacetylchlorid (0,1 mol) og 100 ml 2N NaOH i små portioner. Blandingen omrø-25 res i 3 timer ved stuetemperatur og vaskes én gang med ethylether. Det vandige lag indstilles til pH 2 med 4N saltsyre til udfældning af rå krystaller. Krystallerne anbringes på filtrerpapir, tørres og omkrystalliseres ud fra ethylacetat/petro-leumether. Forbindelse "S-12" fremstilles på samme måde. De 30 opnåede resultater er som følger:

Tabel Γ 20

Smeltep. [α] D Udbytte af

Produkt (°C) (c-1, me- renset krystal _thanol)_(%_)_ 35 N-[(1-naphthoxy)acetyl]-L- 137-142 -10,6° 33 phenylalanin (S-ll) N-[(2-naphthoxy)acetyl]-L- 173-176 +25,1° 36 phenylalanin (S-12)_ 7 DK 170855 B1 q Eksempel 4

Fremstilling af "S-21", Z-PheL-PheD, hvor Z betegner en benzyloxycarbonylgruppe.

17,3 g D-phenylalanin og 17,6 g NaHCO^ sættes til 150 ml vand.

5 27,7 g N-benzyloxycarbonyl-L-phenylalanin-N-hydroxy-

succinimidester opløses i 150 ml tetrahydrofuran, og den således fremstillede opløsning sættes til ovennævnte vandige opløsning ved stuetemperatur. Blandingen får lov at reagere natten over. Til reaktionsopløsningen sættes 200 ml vand, og 10 derefter indstilles den vandige fase på pH 2 med afkølet 4N

saltsyre. Det ønskede produkt ekstraheres med 500 ml ethylace-tat. Det organiske lag vaskes med IN saltsyre og mættet vandig NaCl-opløsning i nævnte rækkefølge og tørres over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningen inddampes til tørhed under for-15 mindsket tryk. Den således fremstillede remanens, der vejer 28,0 g/ omkrystalliseres fra ethylacetat/n-hexan, hvorved defås 20,3 g af det ønskede produkt, svarende til et udbytte på 65%.

På samme måde som beskrevet ovenfor fås forbindelser-20 ne "S-22", "S-23" og S-32". Strukturformlerne fremgår af den følgende tabel II.

Pro- dukt Molekylformel__Smp. (°c) Optisk drejning _ S-21 C26H26N205 119-125 [a] = -34,2° (c=l, EtOH) 25 S-22 C2gH25FN205 158-163 [a]^3 = +13,9° (c=l, EtOH) S-23 C26H25FN2°5 133-135 [a]^3 = "19 »5° (c=l, EtOH)

S-32 C28H28N205 189-191 [a]2D2 = -24,0° <0-1, D13F

30 De omhandlede forbindelser vil nedenfor blive beskre vet luere detaljeret under henvisning til eksempler og laboratorieprøver.

35 DK 170855 B1 0 8

Eksempler og laboratorieprøver De i tabel II anførte prøver af absorptionsaktiva-toren opløses eller suspenderes i 0,5%'s CMC-0,05 molær tris--HCl-puffere (pH 7,8), og opløsningerne eller suspensionerne 5 blandes med vandig insulinopløsning. ICR-CD-1 hunmus, der er 5-7 uger gamle, indgives oralt forud bestemt mængder af blandingerne. Efter et i forvejen bestemt tidsrum måles den procentvise nedgang i blodglucose og graden af forøgelse af blodinsulin sammenlignet med kontrolgruppen. Resultaterne er vist i 10 tabel II. Symbolet "Z" i strukturformlerne i tabellen repræsenterer en benzyloxycarbonylgruppe. De øverste tal i kolonnerne "effektivitet" angiver den procentvise nedgang i blodglucose og de nederste tal i parentes viser graden af forøgelse af blodinsulin.

15 20 25 30 35 9 DK 170855 B1 c

•H

f-H

3 tn -» c c Ό 6 cd o r~ n i-ι i-h rr ldo r» oo to in Q * %. ·* ·*© *» V V«. Γ0 Q) »—| O LO O O σ\ rr CO .H » n OO 'S' i—I o U),Qvr>r~vD vd oo ao κο η μ o h ·*γ cm ·*ί· cd 8 P 3 O .H m O' Ό Ό o ta

rH V-J

Λ Cn tn

•H O

tn O' r-i c tu c O θ' -H -» ^ ^

tJ! $ E Ol ^ CM r— CM Γ» *3" σι in LD CO O CM

Ό ^ » » » ΟΊ » » »ID » » » » » Γ» ΦΟΟ'^'Χ» (DtH ^rj· CM» Γ" 00 c-l O O» 2. fe ro oo ld cm rH coco id co m to cm cm Γ" ι-t CM "

h; C

M, -H _ _

rH tT> t3l tr> CT> Cr> C7> O

r-Γ 3 O'

φ U3 4J O O O O O O O

O' £ O O 1—i Ή Ή ι—1 i—I »H i—I

0' -H rH ft) \ \ \ \ \ \ \

Ehi \ > O' O Ο O O' O' O'

Owtni ε ε ε ε ε ε tu ε g ID φ Ο Ο Ο Ο ID ιΗ Ο ». Ο » » » » » » »

cn CM (D ΚΩ ΚΩ ΚΩ CO CM fO CO

Ή ι-Η *“1 tn ^ ο α

CM

Ο CM

_ τ § Ο ~θ(θ) ^ Ν. = Γ< * ? J -* 8<9> >° *ϊ - δ =cm /¾ ν y

Jk> r! v y C >«ϊμ, >,Æp J- . s ? s /-< i g t r © © ? -p ! _M n to ° tu > · Ή •©.pi CM CO'S* LD ΚΩ Γ» u c tn i i i i i i o, tn ω i tn tn tn tn 10 DK 170855 B1 r· -pH I—ΐ 3 tt ~ C C Λ ^ ^

TJ E ^ r~ I O' tO 1 r- CO N LO<N CO H

q - VO "to -00-0 -»to -00 -00 (uJjQto-cri - ro - at - to - oo- r~ jj ^ o O CNCN -S-'S-LOLO touo H (T\ roro O — — - u n e o r-t tr-

CO

Ό Ό O <3 »—i ^ _0 tt

-H O

tt CO —I ·

C O C

e er -h _ ,- _ "S- E i—i rH ro oo in at o co oo in at or <n i-h OJ-j -ro - - - — - - -O - - -ro Ο O O Γ- - Γ— i—I I-H iH ta* f—I O - r-1 ro LfO- 2 t, ro lo i ro i—i to ^ in i-h m to ro'a* roto -i ro tt

-U

0 uh t—! —

M -H

^ C5 tJt - - O'1 e* O'1 Ot Ot Ot Cn C tti -s-> ^

n o “i ^ O O O O O O

«•Hr-lfyr1 Γ* r< ^ C* C1 ^ ^ — r> r: en tJi en DO Cn Cn Cn

^ ~ g E E EE E E E

= ^ g, o o o o o in o « " « vø ro to to to ι-H to tt w

O

Ω ►J® I,., o o ; J= J2

f Gi C3 ^ hO

°1 x °1 °i °° > 5 \°) _? ^ w yv / s <o> s <2) u

4-> ' I

cn N

0)

> . O —I cnj ro -T

Λ L, 00 en Ή Ή .Η ιΗ r-Η

S c 1 111 I I I

cn I cn cn cn cn cn en 11 DK 170855 B1 c

•H

rH

3 in ~ c c _ ^ ^ ^ ^ ^ "ε ^ fN O O CM <N O CD Γ~ 1X5 o Q '00 *· O * *· “· ·. ' ^J· - CM -

mr_|o0'r^“0,H I O (N - Csl - i—II

il ,q φ ^ N n cm mm id r-i mm m in m O v w ^ w u u P c tr>

Ό Ό O P

Λ Sr· tt

H O

tt

Cri 1-1

C 0 C

O C1 -H ^ Λ ^ ^

Di "S· £ ld n o o oo no ^ n o o r-H

rP C-t *, ^ ·, ·» *. « v p·^ ^ cO > · * O O O r-. - r—I O "θ’ «3" (N * (N - (N ^ ni 2t,nnro ntn co n ld co cm (M -sr r-ι cd

«Η (M

tt

P

Sh 0 C-l

M C H -P

0i 0i 0i &i Cn CT> .C C O ° O o o o o o α ·* .h « r« r* r1 r1 r1 r1 r1 h \ > \ \ \ \ \ \ \ TJfcitt^ 171 1:71 6i 61 Di Cn o i e s e e e s ε ^^^,ο o o o n o o •h η o η o η co m w

O

Q

Jo J ►« o 0· ~ a> ° ~o ' JO QØ

O Λ -C

3 o (¾ &

P * II

.* JØ Jp Qø Qø JO) 3 -C j>i -C Λ X! J-i CU E-< CU D< Ph

Pli III

(Λ N tM N N N

0) > . n o r~ oo o η cm

λ Jj rH f—I i—i *—I m CM CN

p c I I 1 1 ' 1 I

a, w w co w w w w 12 DK 170855 B1

•tH

i—i 3

W

—» C C

c*> -H ^ ~ . — c ί ·<3> in ^ ^ τ m oo m rr oo Q * “-O'· -O- * »· m *-^3· m ,-1 O ΟΊ l Γ" ~ O I - ττ | <N I m *· r-H » tn Λ tø ^ mm og m r-ι tt r~ cm tt <nvd υ u 3 3 o Ό Ό O <3 sa ^ 0! •H G)

M

O rH ·

C O C

C Ol -P ^ „ „ _ __ _ _0 S- ε LO rH tØ CTl 1/1 O ffl ID V£> r-4 ' sj *“ *► *· ^ *» p- ^ ^ * ** 0 pOr^i r- * ττ i t—i ' oo i mi ii -hco Z fe m m mm m tø r- tt m mi—i

rH <N

tn

-P

o 14-1

i—I C W *H

,—i 3 O t7> OOOO O O O' O ;i -p

,£ G O Ol ° OOOO O O O

ra-HiHftO1 r-HHi-lr-l —I <—I Ή E-i\>'\ \ \ \ \ \ \ \ r-< %i O OOOO o o o 1 " i ε ε ε ε ε ε ε ε = LfI^,o mmmo o o o ΓΛ ΓΜ Ο "* ·*·**» ·* ^ *.

m Η η rH m mm m tn —

O

Q

tu i-3 Q i-3 G) G) 0) Οι

Λ s: Λ I

_ fe 04 fe i-3 iJ tJ

1110) <U QJ

rT* O O O £ Λ Λ

Oo U U U fe fe Øj

\_ Q I I I I II

r—\ as as as o o o SZ >—^ u u u u u u I \Cy æ as s i i i ^MVVVV vv v* en fc /v y^. as as as

I n fo) fol (c) V Y V

i r Vra βπ§i

CO U U S N/'o H

m 0) fe 2 0) >.m 'T m r- o >—i cm m « V* m <Nrs«Nm mm m

>-4 CS 1 I I I I II I

en I w w j to j to [ to to to to 13 DK 170855 B1 £

•H

iH

3

W

— C C

Hf> t-i — Ό E 1-1 ^ ^ O ‘ in æ h o ^ *· ^ i W Λ V£> ^ ^ _

O

U >-i

3 O

r—) 4-i tn Ό Ό O <0 •H >-l

O

~ i/3

-r4 O

W

Cr> i—i ·

C d> C

C t? -H _ _ t n s. S n co o Ό j-ι ..

o 0 o Γ" η (N i 2 fci n cm rH m r-H C4 1/3 4- > 5- l O 4-1

w. C

Μ, ·Η r-i' 3 tn O1 cn O CO -P _ .c. c o t n 2 ° <o -r4 -i « r1 r* E-ι' \ \ T3 W V) 51 g1 0 g K a 5 “i g o 33 " S « 10 —-

O

O

Q

d) X3 C4 •

O

u 33 u

II

>-i æ 3 a u

jj Qcu T

i I ®

W l·* U

m a d) £ * 7 7

Vj c 1 1 £ w w 0 14 DK 170855 B1

Nedenfor nævnes de forbindelser, der svarer til de i tabel II nævnte betegnelser: S-l : N-[(1-naphthyl)acetyl]-L-phenylalanin S-2 : N-[(4-nitrophenoxy)acetyl]-4-nitro-DL-phenylalanin 5 S-3 : N-cinnamoyl-L-phenylalanin S-4 : N,O-bis-(benzyloxycarbonyl)-L-tyrosin S-5 : N-phenoxyacetyl-L-phenylalanin S-6 : N-phenoxyacetyl-4-nitro-L-phenylalanin S-7 : N-benzyloxycarbonyl-L-phenylalanyl-L-phenylalanin 10 S-8 : N-(4-phenylbutyroyl)-L-phenylalanin S-9 : N-phenoxyacetyl-D-phenylalanin S—10: N-benzyloxycarbonyl-L-phenvlalanyl-L-tyrosin S-ll: N-[(1-naphthoxy)acetyl]-L-phenylalanin S-12: N-[(2-napthoxy)acetyl]-L-phenylalanin 15 S-13: N-[(4-chlorphenoxy)acetyl]-L-phenylalanin S-14: N-benzoyl-L-phenylalanin S-15: N-benzyloxycarbonyl-L-phenylalanin S-16: N-benzyloxycarbonyl-L-tyrosin S-17: N-(4-methoxybenzyloxycarbonyl)-L-phenylalanin 20 S-18: N-benzyloxycarbonyl-D-phenylalanin S-19: N-(4-fluorbenzyloxycarbonyl)-L-phenylalanin S-20: N-benzyloxycarbonyl-D-phenylalanvi-L-phenvlalanin S-21: N-benzyloxycarbonyl-L-phenylalany1-D-phenylalanin S-22: N-benzyloxycarbonyl-4-fluor-DL-phenylalanyl-L-phe-25 nylalanin S-23: N-benzyloxycarbonyl-L-phenylalanyl-4-fluor-DL-phe-nylalanin S-24: N-(4-chlorcinnamoyl)-L-phenylalanin S-25: N-(4-chlorcinnamoyl)-D-phenylalanin 30 S-26: N-(4-fluorcinnamoyl)-L-phenylalanin S-27: N-(4-methylcinnamoyl)-L-phenylalanin S-28: N-(4-trifluormethylcinnamoyl)-L-phenylalanin S-29: N-(3-methoxvcinnamoyl)-L-phenylalanin S-30: N-(3-trifluormethylcinnamoyl)-L-phenylalanin 35 S-31: N-(2-fluorcinnamoyl)-L-phenylalanin S-32: N-(3-methoxycinnamoyl)-L-phenylalanyl-L-phenylalanin S-33: N-(4-toluensulfonyl)-L-phenylalanin 0 15 DK 170855 B1 S-34: N-(4-toluensulfonyl)-DL-phenylalanin S-35: N-(4-trifluormethylcinnamoyl)-D-phenylalanin S-36: N-(3-trifluormethylcinnamoyl)-D-phenylalanin 5 Tabel II viser, hvor effektiv den her omhandlede ab sorptionspromotor er, når den indgives oralt, men de samme resultater fås ved at anvende absorptionspromotoren som et konventionelt suppositorium samme med insulin.

Som beskrevet ovenfor er den her omhandlede absorp-10 tionspromotor meget anvendelig, fordi den muliggør klinisk insulinterapi ad oral eller parenteral (f.eks. rectal) vej.

Toksicitetsundersøgelser af phenylalaninderivater med oral insulin-forstærkende aktivitet hos CD-I (ICR)hunmus giver følgende 15 resultater

Aminosyrederivatets kemiske struktur_LD50 ^m9/kg) N-phenoxyacetyl-L-phenylalanin >4 000 N-(1-Naphthyloxy)acetyl-L-phenylalanin >4000 N-(2-Naphthyloxy)acetyl-L-phenylalanin >4000 20 N-(4-Chlorphenoxy)acetyl-L-phenylalanin >3500 N-Benzyloxycarbonyl-L-phenylalanin >2750 N-Benzyloxycarbonyl-D-phenylalanin >4000 N-p-Methoxybenzyloxycarbonyl-L-phenylalanin 750 25 N-Benzyloxycarbonyl-L-phenylalanyl-L-phenylalanin >3000 N-Benzyloxycarbonyl-L-phenylalanyl-L-tyrosin >3000 N-Cinnamoyl-L-phenylalanin >2500 30 Phenylalaninderivaterne er suspenderet i 0,5% CMC.

35 0 16 DK 170855 B1

Præparateksempel

Tablet

Svineinsulin (0,577 g, 15.000 IE, Zn-indhold 0,5%) opløses i 30 ml 0,05N HC1, og den således fremstillede opløs-5 ning fortyndes med 30 ml destilleret vand.

6 g forbindelse "S-27" opløses i 200 ml 0,1N NaOH, og pH-værdien indstilles til 7,5 ved tilsætning af 0,1N HC1. Opløsningen fortyndes med phosphatpuffer (0,02 molær, pH 7,5) indtil et volumen på 600 ml.

10 Den ovenfor fremstillede insulinopløsning dryppes til S-27-Opløsningen ved 20°C under kraftig omrøring, og opløsningen indstilles på pH 7,5 og frysetørres umiddelbart derefter.

Der fremstilles tabletter indeholdende 25 mg af det frysetørrede materiale, prægelatineret med 82 mg stivelse, 82 15 mg mikrokrystallinsk cellulose og 1 mg magnesium stearat.

Enterisk overtrukne tabletter fremstilles ved gængse metoder ved anvendelse af en 8%'s vandig hydroxyphenylmethyl-celluloseopløsning som præ-overtrækningsmiddel beregnet som underlag og en vandig opløsning med 10% hydroxypropylmethylcellu-2o losephthalat og 3% polyacetyne som overtrækningsmiddel.

Kapsel

Til 250 ml iseddike sættes 30 g forbindelse S-22, der opløses ved opvarmning. Der tilsættes 2 g svineinsulin (52.200 IE, Zn-indhold 0,5%) i små portioner til ovennævnte 25 opløsning, der er afkølet ved 20°C under omrøring, og insulinet opløses· Eddikesyren afdestilleres fra opløsningen ved formindsket tryk ved samme temperatur.

Til den således opnåede faste remanens sættes 100 ml n-hexan, og den faste remanens pulveriseres og sigtes, og det 30 tilbageholdte materiale vaskes med n-hexan. n-Hexanen, der fastholdes på pulveret, afdampes under formindsket tryk. Pulveret tørres under formindsket tryk i nærvær af fast NaOH.

Der fremstilles kapsler med tørt materiale indeholdende 50 mg/kapsel aktivt stof.

35 Ovennævnte pulver 50 mg

Lactose 149 mg

Magnesiumstearat 1 mg pr. kapsel 200 mg 0 17 DK 170855 B1

Pulveret findeles til pulver, der passerer en sigte nr. 60.

Lactose og magnesiumstearat passeres gennem en sigte-klæde nr. 60, så at det falder ned på ovennævnte pulver og blan-5 des omhyggeligt dermed. Blandingen pakkes i tørre gelatinekapsler nr. 1.

10 15 20 25 30 35

Claims (1)

1. DK 170855 B1 Phenylalaninderivater, kendetegnet ved, at de har den almene formel 5 R2-Y-CO-NH-CH-COOH 10 i hvilken R1 er et hydrogenatom, en nitrogruppe, en hy-droxylgruppe eller en benzyloxycarbonyloxy-gruppe - Y - er en binding, en lavere alkylengruppe, en 15 vinylengruppe eller en gruppe med formlen -CH2-0- eller -0-CH2-, og R2 er en eventuelt med et chloratom, en nitrogruppe eller en methoxygruppe substitueret phenyl- eller naphthylgruppe, 20 eller R2-Y-CO er en N-benzyloxycarbonyl-phe- nylalanyl-, N-benzyloxycarbonyl-4-fluorphenyl-alanyl- eller N-(m-methoxycinnamoyl)-phenyl-alanylgruppe, samt ikke-toksiske salte deraf. 25 30 35