EP0281958A2 - Vorrichtung zum Thermostatisieren und Mischen des Inhaltes von Gefässen einer Mikrotitrationssplatte - Google Patents
Vorrichtung zum Thermostatisieren und Mischen des Inhaltes von Gefässen einer Mikrotitrationssplatte Download PDFInfo
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- EP0281958A2 EP0281958A2 EP88103357A EP88103357A EP0281958A2 EP 0281958 A2 EP0281958 A2 EP 0281958A2 EP 88103357 A EP88103357 A EP 88103357A EP 88103357 A EP88103357 A EP 88103357A EP 0281958 A2 EP0281958 A2 EP 0281958A2
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Definitions
- the invention relates to a device for thermostatting and mixing the contents of vessels of a microtitration plate for immunological tests.
- antigens are surface-fixed on the vessel walls of a microtitration plate with which the antibodies (antigens) present in the sample bind during the first incubation period. After washing out unbound sample components, enzyme conjugate is dosed. After the second incubation has ended, excess conjugate is removed by washing and substrate is dosed. After the third incubation, the implementation is stopped. All steps are carried out at a certain temperature. The vessels must therefore be thermostatted. A disadvantage is not only the complex thermostatting of the microtitration plate, but also the relatively long incubation time. The invention seeks to remedy this.
- a device which is characterized in that a hood corresponding to the surface of the microtitration plate is designed as a cavity which is closed on all sides, into which a gas line opens and whose boundary wall facing the microtitration plate is provided with gas outlet openings which are eccentric with respect to the Vessel axes are arranged and directed at an angle ⁇ to the surfaces of the liquids in the vessels.
- the device offered the advantage that the liquid in the vessels was replaced by thermostated gas a circular movement is set, which not only improves the thermostatting of the liquid, but also the binding and reaction of the reagents with the samples in the wall area. This results in shorter incubation times and thus shorter test times.
- the device consists essentially of a hood 1, the dimension of which corresponds to the area of the microtitration plate 2 with the vessels 7 and which is provided with a cavity 3 into which a gas line 4 for thermostatted gas, for. B. air from 30 ° to 50 ° C opens.
- the boundary wall 5 for the cavity 3 of the hood 1 facing the microtitration plate 2 is provided with gas outlet openings 6.
- the cavity 3 serves as a gas distributor for the gas outlet openings 6.
- the gas outlet openings 6 can be designed as nozzles or cannulas. These are placed in the boundary wall 5 so that they are arranged eccentrically with respect to the vessel axes 8.
- the air flow creates an indentation 11 on the radius R when it hits the liquid surface 10.
- the nozzle axis is inclined by the angle ⁇ with respect to the surface 10.
- the distance of the gas outlet opening from the vessel wall in the radial direction can be 0.2 to 0.5 vessel radii and the angle ⁇ at which the gas outlet opening is inclined toward the liquid surface can be 40 ° to 80 °.
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Abstract
Bei der Vorrichtung zum Thermostatisieren und Mischen des Inhaltes von Gefäßen einer Mikrotitrationsplatte ist eine Haube (1), die der Fläche der Mikrotitrationsplatte (2) entspricht, als allseits geschlossener Hohlraum ausgebildet. In den Hohlraum mündet eine Gasleitung (4). Seine der Titrationsplatte (2) zugewandte Begrenzungswand (5) ist mit Gasaustrittsöffnungen (6) versehen, die exzentrisch in Bezug auf die Gefäßachsen angeordnet und unter einem Winkel auf die Oberflächen der Flüssigkeiten gerichtet sind.
Description
- Gegenstand der Erfindung ist eine Vorrichtung zum Thermostatisieren und Mischen des Inhaltes von Gefäßen einer Mikrotitrationsplatte für immunologische Tests.
- Bei immunologischen Tests, wie z. B. bei Enzyme-Linked-Immuno-Sorbent-Assays (ELISA) sind auf den Gefäßwänden einer Mikrotitrationsplatte Antigene (Antikörper) oberflächenfixiert, mit denen sich während der ersten Inkubationszeit die in der Probe vorhandenen Antikörper (Antigene) binden. Nach Auswaschen nicht gebundener Probenbestandteile wird Enzym-Konjugat dosiert. Nach Ablauf der zweiten Inkubation wird überschüssiges Konjugat durch Waschen entfernt und Substrat dosiert. Nach Ablauf der dritten Inkubation wird die Umsetzung gestoppt. Alle Schritte werden bei einer bestimmten Temperatur durchgeführt. Die Gefäße müssen also thermostatisiert werden. Nachteilig ist nicht nur das aufwendige Thermostatisieren der Mikrotitrationsplatte, sondern auch die verhältnismäßig lange Inkubationszeit. Hier will die Erfindung Abhilfe schaffen.
- Die Aufgabe wird durch eine Vorrichtung gelöst, die dadurch gekennzeichnet ist, daß eine der Fläche der Mikrotitrationsplatte entsprechende Haube als allseits geschlossener Hohlraum ausgebildet ist, in den eine Gasleitung mündet und dessen der Mikrotitrationsplatte zugewandte Begrenzungswand mit Gasaustrittsöffnungen versehen ist, die exzentrisch in Bezug auf die Gefäßachsen angeordnet und unter einem Winkel α auf die Oberflächen der Flüssigkeiten in den Gefäßen gerichtet sind.
- Die Vorrichtung bietete den Vorteil, daß die in den Gefäßen befindliche Flüssigkeit durch thermostatisiertes Gas in eine zirkulare Bewegung versetzt wird, wodurch nicht nur die Thermostatisierung der Flüssigkeit, sondern auch im Wandbereich die Bindung und Umsetzung der Reagenzien mit den Proben verbessert wird. Daraus resultieren kürzere Inkubationszeiten und damit kürzere Testzeiten.
- Im folgenden wird die Erfindung anhand von lediglich einen Ausführungsweg darstellenden Zeichnungen näher erläutert. Es zeigt:
- Figur 1 die Vorrichtung zum Thermostatisieren und Mischen über einer Mikrotitrationsplatte angeordnet in perspektivischer Darstellung,
- Figur 2 eine Gasaustrittsöffnung in ein einzelnes Gefäß geschnitten und
- Figur 3 eine Gasaustrittsöffnung in ein einzelnes Gefäß in Draufsicht.
- Die Vorrichtung besteht im wesentlichen aus einer Haube 1, deren Abmessung der Fläche der Mikrotitrationsplatte 2 mit den Gefäßen 7 entspricht und die mit einem Hohlraum 3 versehen ist, in den eine Gasleitung 4 für thermostatisiertes Gas, z. B. Luft von 30° bis 50°C mündet. Die der Mikrotitrationsplatte 2 zugewandte Begrenzungswand 5 für den Hohlraum 3 der Haube 1 ist mit Gasaustrittsöffnungen 6 versehen. Der Hohlraum 3 dient als Gasverteiler für die Gasaustrittsöffnungen 6. Die Gasaustrittsöffnungen 6 können als Düsen oder Kanülen ausgebildet sein. Diese sind in der Begrenzungswand 5 so plaziert, daß sie exzentrisch im Bezug auf die Gefäßachsen 8 angeordnet sind. Der Luftstrom erzeugt beim Auftreffen auf die Flüssigkeitsoberfläche 10 eine Einbuchtung 11 auf dem Radius R. Die Düsenachse ist im Bezug auf die Oberfläche 10 um den Winkel α geneigt. Dabei kann der Abstand der Gasaustrittsöffnung von der Gefäßwand in radialer Richtung 0,2 bis 0,5 Gefäßradien betragen und der Winkel α, unter dem die Gasaustrittsöffnung zur Flüssigkeitsoberfläche hin geneigt ist, 40° bis 80°.
- Durch Reibung der Luft mit der Flüssigkeitsoberfläche 10, vorrangig bei 11, entstehen zwei sich überlagernde Strömungen der Flüssigkeit, und zwar eine kreisförmige Strömung 12 um die Gefäßachse 8 und eine nach unten in die Flüssigkeit gerichtete bogenförmige Strömung 9. Durch diese sich überlagernden Strömungen 12 und 9 wird die Flüssigkeit intensiv an der Gefäßwand vorbeiführt. Damit kann die Inkubationszeit erheblich verkürzt werden, d. h. die chemische Reaktion zwischen den Molekülen der Flüssigkeit und der Wand beschleunigt werden. Die Inkubationszeit des ELISA-Tests geht zurück und der Probendurchsatz des ELISA-Testgerätesnimmt zu.
Claims (1)
- Vorrichtung zum Thermostatisieren und Mischen des Inhaltes von Gefäßen einer Mikrotitrationsplatte, dadurch gekennzeichnet, daß eine der Fläche der Mikrotitrationsplatte (2) entsprechende Haube (1) als allseits geschlossener Hohlraum (3) ausgebildet ist, in den eine Gasleitung (4) mündet und dessen der Titrationsplatte (2) zugewandte Begrenzungswand (5) mit Gasaustrittsöffnungen (6) versehen ist, die exzentrisch in Bezug auf die Gefäßachsen (8) angeordnet und unter einem Winkel α auf die Oberflächen (10) der Flüssigkeiten gerichtet sind.
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