ES2176233T3 - Deteccion diagnostica amplificada con ribozimas. - Google Patents

Abstract

SE DESCRIBE UN SISTEMA PARA EL USO DE UNA RIBOENZIMA COMO HERRAMIENTA DE DIAGNOSTICO PARA DETECTAR LA PRESENCIA DE UN ACIDO NUCLEICO, PROTEINA, U OTRA MOLECULA, EN EL QUE LA FORMACION DE UNA RIBOENZIMA ACTIVA Y LA DIVISION DE UN INDICADOR ANALIZABLE DEPENDE DE LA PRESENCIA O AUSENCIA DE UNA MOLECULA OBJETIVO ESPECIFICA. EL COMPONENTE ESENCIAL ES UNA RIBOENZIMA QUE SE UNE ESPECIFICAMENTE PERO REVERSIBLEMENTE A UN OBJETIVO SELECCIONADO EN COMBINACION CON UN CO-OBJETIVO MARCADO, PREFERENTEMENTE INMOVILIZADO EN UNA ESTRUCTURA DE SOPORTE. CUANDO EL OBJETIVO Y EL CO-OBJETIVO ESTAN UNIDOS, LA RIBOENZIMA DIVIDE LA MARCA DEL CO-OBJETIVO, QUE ES ENTONCES CUANTIFICABLE. PUESTO QUE LA RIBOENZIMA ESTA UNIDA REVERSIBLEMENTE POR EL OBJETIVO Y EL COOBJETIVO, PUEDE REASOCIARSE CON UN CO-OBJETIVO ADICIONAL, DIVIDIENDO MAS MARCAS Y POR LO TANTO AMPLIFICANDO LA SEÑAL DE REACCION. EN UNA MATERIALIZACION, EL OBJETIVO ES UN ACIDO NUCLEICO QUE HIBRIDIZA CON SECUENCIAS COMPLEMENTARIAS QUE FORMAN PARTE DE LA RIBOENZIMA; EN UNA SEGUNDA MATERIALIZACION, EL OBJETIVO ES UNA PROTEINA U OTRA MACROMOLECULA QUE ESTA UNIDA POR INTERACCIONES CON UNA PORCION DE LA MOLECULA DE LA RIBOENZIMA. EN OTRA MATERIALIZACION, SE UTILIZA UNA RIBOENZIMA TERMOESTABLE, DE MODO QUE UNA RIBOENZIMA UNIDA DE FORMA INADECUADA SE DESESTABILICE Y QUEDE INACTIVA A ELEVADAS TEMPERATURAS. TAMBIEN SE PRESENTA UN METODO PARA AISLAR RIOBOENZIMAS REGULABLES. LAS RIBOENZIMAS REGULABLES SON UTILES EN EL METODO PARA DETECTAR LA PRESENCIA DE UNA MACROMOLECULA ESPECIFICA, O PUEDEN SER UTILIZADAS EN METODOS IN VITRO O IN VIVO, PARA LA INACTIVACION O LA ACTIVACION DE LA DIVISION DE LAS MOLECULAS DE RNA OBJETIVO.