ES2203093T3 - Soporte de muestras. - Google Patents

Soporte de muestras.

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ES2203093T3 ES99911779T ES99911779T ES2203093T3 ES 2203093 T3 ES2203093 T3 ES 2203093T3 ES 99911779 T ES99911779 T ES 99911779T ES 99911779 T ES99911779 T ES 99911779T ES 2203093 T3 ES2203093 T3 ES 2203093T3
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Abstract

Soporte de muestras, con - al menos una cámara de recepción (20) de las muestras para un líquido de muestras, - un canal de distribución (24) para líquido de muestras, que está conectado con al menos una cámara de recepción de las muestras, donde desde cada cámara de recepción de las muestras se extiende al menos un canal de distribución, - al menos una cámara de reacción (28), que presenta una cavidad delimitada por superficies, en la que desemboca un canal de admisión (26) que se deriva desde al menos un canal de distribución, y - un orificio de ventilación para cada cámara de reacción, - donde el dimensionado de cada canal de distribución y de cada canal de admisión está realizado de tal manera que el transporte del líquido se realiza a través de los canales de distribución y de admisión como consecuencia de fuerzas capilares.

Description

Soporte de muestras.
La invención se refiere a un soporte de muestras, como se utiliza para investigaciones microbiológicas de líquidos de muestra así como para la analítica y diagnóstico médicos y del medio ambiente.
En el diagnóstico microbiológico se emplean análisis de absorción, de dispersión y de luminiscencia como procedimientos ópticos, por ejemplo mediciones de transmisión, de fluorescencia o de turbiedad. En este caso se utilizan soportes de muestras o franjas de ensayo de plástico transparente con una pluralidad de cámaras abiertas por un lado o de cavidades en forma de taza. El soporte de muestras o las franjas de ensayo tienen, por ejemplo, de 32 a 96 cámaras o cavidades, que están ocupadas con un reactivo. Después de la vacunación con suspensión de bacterias, se sellan los soportes de muestras o franjas de ensayo, dado el caso, con una lámina transparente o se cierran con una tapa. Las cavidades tienen un volumen de llenado entre 60 \mul y 300 \mul y se llevan de forma individual con la ayuda de medios auxiliares de aparatos; a tal fin se utilizan pipetas con un canal o con 8, 48 y 96 canales.
Se conoce por el documento US-4 038 151 una placa de muestras para un procedimiento de investigación óptico automatizado, que sirve para la verificación y recuento de microorganismos suspendidos y para la determinación de su sensibilidad frente a antibióticos. La placa está constituida por un plástico transparente rígido y contiene, por ejemplo, 20 cámaras de reacción cónicas. El área de la sección transversal de las cámaras de reacción sobre uno de los lados de la placa es mayor que sobre el otro lado de la placa. Junto a cada cámara de reacción están colocadas dos cámaras de rebosamiento, que se encuentran sobre aquel lado de cada cámara de reacción, sobre el que se encuentra un canal de admisión para la cámara de reacción respectiva. Las cámaras de reacción están conectadas con las cámaras de rebosamiento a través de muescas. Las cámaras de reacción, las muescas y las cámaras de rebosamiento se extienden sobre todo el espesor de la placa de muestras. Las cámaras de reacción están conectadas por grupos a través de canales de admisión ramificados dispuestos y formados especialmente y situados sobre un lado de las placas con al menos una cámara de recepción de muestras, que está cerrada con un tabique. Los canales de admisión entran tangencialmente en el lado mayor de la cámara de reacción cónica. La forma y la superficie de la sección transversal de cada canal de admisión se modifica de repente en un lugar respectivo. En estos lugares -vistos en la dirección de la circulación- un canal plano y ancho pasa, respectivamente, a un canal profundo y estrecho. Los canales de admisión dispuestos sobre un lado de la placa pueden ser más largos que la conexión más corta respectiva entre la cámara de reacción y la cámara de recepción de las muestras, para dificultar la difusión de retorno de componentes que están presentes en la suspensión. La placa está encolada -salvo una región marginal- sobre los dos lados con una lámina semipermeable respectiva, que cubre las cámaras de reacción, las cámaras de rebosamiento, las ranuras y los canales de admisión realizados sobre uno de los lados de la placa así como un lado de la cámara de toma de muestras. Las cámaras de reacción están ocupadas con una capa seca de una substancia reactiva.
Para la introducción del líquido de las muestras en la placa de muestras conocida se evacúan sus canales y cámaras, de manera que el líquido de las muestras es conducido desde un depósito que se encuentra fuera de la placa por medio de una cánula a través del tabique desde el canto de la placa a la cámara de recepción de las muestras y circula a través de los canales de admisión a las cámaras de reacción y, dado el caso, a las cámaras de rebosamiento. La corriente de suspensión (líquido de la muestra) introducida en la cámara de reacción y la capa de reactivo están en contacto con la capa de adhesivo aplicada sobre la lámina.
En el caso de investigación óptica de las muestras en las cámaras de reacción, la placa de muestras está colocada vertical en el aparato de medición. En esta posición, los canales de admisión entran desde arriba en las cámaras de reacción con relación a la dirección de la fuerza de la gravedad, y las cámaras de rebosamiento se encuentran por encima de las cámaras de reacción. De esta manera, las burbujas de gas presentes, dado el caso, en la cámara de reacción o que se producen en el caso de una reacción o de un cambio de substancia, se acumulan en las cámaras de rebosamiento, sin perturbar la investigación óptica de las muestras.
Se conoce por el documento US 5-670 375 una placa de muestras, cuyas hasta 64 cavidades son inoculadas al mismo tiempo. Después de que ha sido aspirado el aire fuera de las cavidades, el líquido a investigar circula desde un depósito que se encuentra fuera de la placa de muestras a través de un tubo de conexión a las cavidades y las llena.
Se conoce por el documento US-A-5.223.219 un soporte de muestras, en el que partiendo de una región de carga de muestras, el líquido de las muestras llega a través de un sistema de canales de distribución a cámaras de reacción. En las cámaras de reacción se encuentran piezas de inserción porosas, que presentan reactivos. El líquido de las muestras es "aspirado" en las cámaras de reacción en virtud de las fuerzas capilares que se producen en las piezas de inserción porosas. La circunstancia de que se encuentren piezas de inserción en las cámaras de reacción, limita las investigaciones fotométricas de los líquidos de las muestras que reaccionan con los reactivos en las cámaras de reacción. Así, por ejemplo, no es posible realizar mediciones al trasluz y mediciones ópticas de turbiedad en una disposición de este tipo.
Por último existen en el estado de la técnica todavía sistemas de distribución del líquido para el transporte de un líquido de muestras a partir de una ampolla en una pluralidad de cámaras de reacción, siendo utilizada en estos sistemas la fuerza de la gravedad para la generación de una circulación de líquido a través de los canales de distribución. Las cámaras de reacción deben ventilarse, lo que se realiza a través de canales de ventilación que parten desde las cámaras de reacción, que forman igualmente un sistema de canales de ventilación. Ambos sistemas de canales (sistema de canales de distribución y sistema de canales de ventilación) están configurados a modo de tubos comunicantes, lo que impide, puesto que se utiliza la fuerza de la gravedad, que el líquido de las muestras salga desde los canales de ventilación después del llenado de las cámaras de reacción.
La propagación y automatización crecientes de investigaciones de la microbiología, analítica y diagnóstico que se desarrollan casi en paralelo hacen necesario desarrollar adicionalmente sistemas de soportes de muestras y sistemas de distribución de líquido de muestras existentes y especialmente miniaturizarlos. En virtud de las áreas de la sección transversal relativamente pequeñas de los canales que resultan de esta manera es deseable que se pueden utilizar para el transporte del líquido fuerzas distintas a la fuerza de la gravedad o a las fuerzas de presión. Aquí se ofrecen especialmente fuerzas capilares, lo que lleva consigo entonces la dificultad de poder mantener también todavía el transporte de líquido cuando el líquido debe fluir desde una región de sección transversal más pequeña a una región de sección transversal mayor dentro del soporte de muestras o bien del sistema de distribución del líquido de muestras.
Por lo tanto, la invención tiene el cometido de crear un soporte de muestras y un sistema de distribución del líquido de muestras, que disponen de una densidad muy alta en cámaras de reacción por unidad de superficie, se pueden fabricar con coste favorable, se pueden manipular fácilmente y disponen de un mecanismo de circulación del líquido que se puede controlar fácilmente desde el exterior.
Para la solución de este cometido se propone con la invención un soporte de muestras, que está provisto con
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al menos una cámara de recepción de las muestras para un líquido de muestras,
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un canal de distribución para líquido de muestras, que está conectado con al menos una cámara de recepción de las muestras, donde desde cada cámara de recepción de las muestras se extiende al menos un canal de distribución,
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al menos una cámara de reacción, en la que desemboca un canal de admisión que se deriva desde al menos un canal de distribución, y
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un orificio de ventilación para cada cámara de reacción, donde
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el dimensionado de cada canal de distribución y de cada canal de admisión está realizado de tal manera que el transporte del líquido se realiza a través de los canales de distribución y de admisión como consecuencia de fuerzas capilares, y que se caracteriza
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porque en cada cámara de reacción, las superficies que delimitan la cavidad están configuradas en la región de la desembocadura del canal de admisión para la formación de una instalación para la generación de una fuerza capilar para la circulación del líquido de muestras desde el canal de admisión hasta la cámara de reacción.
De acuerdo con la invención, está previsto que los canales de distribución y los canales de admisión presenten áreas de la sección transversal tan pequeñas o bien áreas de la sección transversal configuradas de tal manera que en ellas el transporte del líquido se realiza por medio de fuerzas capilares. Por lo tanto, los canales están configurados como capilares. Las cámaras de reacción, en las que debe afluir el líquido de muestra que circula a través de los canales, tienen una sección transversal mayor que los canales de admisión. De esta manera surge la situación de que el líquido debe afluir desde un canal de sección transversal pequeña a una cavidad mayor, a saber, una cámara de reacción. Para que esto se lleve a cabo única y exclusivamente en virtud de la acción de fuerzas capilares, está previsto según la invención que en cada cámara de reacción, en la región de desembocadura del canal de admisión, a través de la configuración de estructuras en el lado interior de la cámara de reacción o a través de la configuración de asimetrías se creen instalaciones para la generación de una fuerza capilar, que posibilitan una circulación del líquido de la muestra desde el canal de admisión hasta la cámara de reacción. A través de la creación de instalaciones de generación de fuerza capilar de este tipo en la región de la desembocadura de un canal de admisión en una cámara de reacción se mantiene el flujo del líquido de muestras generado por medio de las fuerzas capilares, hasta que se llena la cámara de reacción. Estas instalaciones de generación de fuerza capilar favorecen la humidificación de las paredes de las cámaras de reacción con líquido de muestras y de esta manera mantienen la corriente de líquido. Como una alternativa a las configuraciones indicadas anteriormente de las instalaciones de generación de fuerza capilar, éstas pueden estar configuradas también a través de tratamientos superficiales de las cámaras de reacción, que vuelven hidrófilas las superficies o bien están configuradas tan hidrófilas que se produce la humidificación de los lados interiores de las cámaras de reacción y, por lo tanto, el llenado completo de las cámaras de reacción con líquido de muestras.
Especialmente, las instalaciones de generación de la fuerza capilar en la región de la desembocadura de los canales de admisión en las cámaras de reacción se realizan a través de la incorporación de estructuras, especialmente a través de la incorporación de una ranura de entrada o similar. Esta ranura de entrada presenta al menos dos superficies de limitación, que están conectadas entre sí a través de una región de transición. Esta región de transición está provista con redondeos, cuyos radios son tan pequeños que se originan fuerzas capilares que son necesarias para la circulación de este líquido de muestras a lo largo de esta ranura. Si el canal de entrada desemboca a la altura de la superficie del fondo en la cámara de reacción, entonces con una selección correspondiente del radio de redondeo entre región entre la superficie de fondo y las superficies laterales de la cámara de reacción, se puede mantener el flujo de líquido porque éste fluye en primer lugar a lo largo de las regiones de las esquinas y de las regiones de transición entre la superficie del fondo y las superficies laterales, para humedecer de esta manera toda la superficie del fondo, después de lo cual se mantiene el transporte posterior a través del efecto capilar de la cámara de reacción, cuya sección transversal está totalmente llena ahora con líquido de muestras. Si desembocase el canal de admisión por encima de la superficie del fondo desde una de las superficies laterales de la cámara de reacción a la cámara de reacción, entonces debería estar realizada entre la desembocadura y la superficie del fondo en la pared lateral respectiva una ranura o muesca similar. Como tal ranura es adecuada también la región de esquina de dos superficies laterales, que se extienden en ángulo recto entre sí, de la cámara de reacción, si el radio de redondeo en la región de esquina o bien en la región de transición de las dos superficies laterales es tan pequeño que se producen fuerzas capilares que actúa sobre el líquido de la muestra, que son tan grandes que "tiran" del líquido de las muestras desde el canal de admisión. Por lo que se refiere a los radios de curvatura necesarios de estas ranuras, se aplica en general que deberían ser más pequeños que la dimensión mínima del canal, en el que se conectan las ranuras.
Una configuración alternativa a la instalación de generación de la fuerza capilar consiste en que los canales se extienden en un ángulo distinto de 90º desde una superficie que delimita la cámara. En virtud de la abertura de desembocadura no redonda circular que resulta en este caso, el líquido de las muestras fluye en el caso más favorable sin medidas adicionales desde el canal a la cámara.
El mecanismo, a través cual fluye desde las cámaras de toma de muestras el líquido de muestras a investigar hasta los canales de distribución, se puede realizar igualmente utilizando estructuras que generan fuerzas capilares. En el caso más sencillo, los canales de distribución se derivan a la altura de las superficies del fondo de las cámaras de recepción de las muestras. Puesto que después del llenado de las cámaras de recepción de las muestras con líquido de muestras, las secciones transversales de los canales de distribución están humedecidos con líquido en la región de desembocadura, se produce automáticamente una circulación dentro de los canales de distribución. De esta manera, se garantiza la salida de líquido desde las cámaras de recepción de las muestras.
Diferente aparece la situación cuando, lo que sucederá por razones técnicas de fabricación, los canales de distribución desembocan en las cámaras de recepción de las muestras por encima de las superficies del fondo de las mismas. En este caso, debe procurarse que el líquido de las muestras "sea atraído hacia arriba" partiendo del nivel del líquido dentro de las cámaras de las muestras. Esto se lleva a cabo por medio de una instalación de generación de fuerza capilar, configurada en la cámara de recepción de las muestras, que puede estar configurada de la misma manera que las instalaciones de generación de la fuerza capilar, que están dispuestas en las cámaras de reacción. Como variante preferida se contempla también aquí una ranura, que está configurada como ranura de salida en una de las paredes laterales de las cámaras de recepción de las muestras. Como una alternativa a ello, la ranura se puede representar como región de transición o bien como región de esquina entre dos superficies laterales que se extienden en ángulo recto entre sí de las cámaras de recepción de las muestras. En todos los casos hay que procurar que a través de la selección correspondientemente pequeña del radio de redondeo de la ranura o bien de la región de esquina se generen fuerzas capilares que actúan sobre el líquido de tal forma que se produce una circulación autónoma.
Como se deduce a partir de la descripción anterior, la miniaturización permite disponen sobre un espacio muy estrecho una pluralidad de cámaras de reacción, que se representan, por ejemplo, como cavidades realizadas en un cuerpo de base. En el caso de distribución del líquido de muestras sobre los canales de distribución y los canales de admisión que se derivan de ellos, es deseable que el líquido de las muestras llene de la manera más uniforme posible y especialmente al mismo tiempo todas las cámaras de reacción. Para garantizarlo en el sistema de canales de distribución previsto según la invención, es conveniente que los canales de admisión presenten un área de la sección transversal menor que los canales de distribución. De esta manera, los canales de admisión actúan a modo de estrangulamientos, que reducen la velocidad de transporte del líquido, que es provocado, además, a través de fuerzas capilares. Todos los canales de admisión que se derivan a lo largo de la extensión de un canal de distribución pueden presentar las mismas áreas de la sección transversal. Una alternativa consiste en elevar las áreas de la sección transversal de los canales de admisión con distancia creciente de los mismos con respecto a la cámara de recepción de las muestras, con el fin de conseguir en los primeros canales de admisión en derivación -con respecto a la dirección de la circulación del líquido de muestras a través de los canales de distribución- un efecto de estrangulamiento mayor que en los canales de admisión que se derivan posteriormente.
Por razones de espacio es conveniente que los canales de admisión se deriven en cada caso a ambos lados de los canales de distribución desde estos canales de distribución. A este respecto, desde el punto de vista de la técnica de la circulación es ventajoso que dos puntos de derivación del canal de distribución, desde los que se derivan canales de admisión opuestos entre sí sobre lados opuestos, no estén dispuestos colocados enfrentados, sino desplazados entre sí a lo largo de la extensión del canal de distribución. Puesto que cada derivación de un canal de admisión desde el canal de distribución sirve de perturbación, aunque sea insignificante, para el transporte de líquido que se mantiene a través de fuerzas capilares. Por lo tanto, por este motivo, las perturbaciones de este tipo no deberían repercutir al mismo tiempo sobre el frente de líquido que se mueve a lo largo de los canales de distribución, lo que sucedería si dos canales de admisión que se derivan opuestos entre sí se derivan a la misma altura del canal de distribución y/o exactamente enfrentados.
Para que partiendo de las cámaras de recepción de las muestras pueda afluir líquido de las muestras a las cámaras de reacción, hay que procurar que se pueda escapar el gas que se encuentra en estas cámaras y en el sistema de canal que conduce hacia ellas. Por lo tanto, cada cámara de reacción está provista con un orificio de ventilación. Si se humedecen o incluso se cubren estos orificios de ventilación durante el llenado de las cámaras de reacción con líquido de muestras, entonces existe el peligro de que el líquido de muestras fluya más allá de los orificios de ventilación fuera de las cámaras de reacción, si la humidificación y la cobertura de los orificios de ventilación pueden provocar en éstos fuerzas capilares suficientemente grandes. En realidad, es deseable rellenar las cámaras de reacción totalmente con líquido de muestras, puesto que el gas que afluye eventualmente todavía dificulta, cuando no hace imposible, la investigación óptica por medio de fotometría.
De manera más ventajosa, el transporte posterior del líquido de las muestras a través de los orificios de ventilación es impedido por medio de instalaciones que impiden el flujo posterior del líquido de muestras. Estas instalaciones se basan de manera más ventajosa en el principio de procurar, a través de la configuración geométrica de los orificios de ventilación y, dado el caso, de los canales de ventilación que se conectan en éstos, que las fuerzas capilares resultantes sean tan pequeñas que se produzca una interrupción de la corriente de líquido de las muestras. Aquí se ofrecen especialmente los llamados "saltos capilares", es decir, ensanchamientos de los canales, en los que el líquido de las muestras no puede afluir por sí mismo en virtud de las condiciones de humidificación difíciles de las paredes de los ensanchamientos de los canales. Por ejemplo, los canales de ventilación que se conectan en los orificios de ventilación desembocan en una cavidad o bien en un ensanchamiento de canal, estando la región de desembocadura dentro de una superficie lateral del ensanchamiento del canal o cavidad, y alrededor de la región de desembocadura no están dispuestas regiones de esquina de ninguna clase o solamente pocas regiones de esquina. Puesto que cada región de esquina genera de nuevo fuerzas capilares que están determinadas, por su parte, a través del grado de redondeo.
De una manera más conveniente, en los orificios de ventilación de las cámaras de reacción se conectan canales de comunicación, que desembocan en un canal colector de ventilación. Este canal colector de ventilación está provisto con un orificio de ventilación, que conecta el sistema de ventilación del soporte de muestras con el entorno. Por lo tanto, después de que está presente un segundo sistema de canal de distribución, que posibilita desde un puesto central, a saber, los canales colectores de ventilación, una comunicación de fluido con las cámaras de reacción individuales, es deseable introducir a través de este segundo sistema de distribución de forma selectiva líquidos reactivos adicionales en las cámaras de reacción. A través de la introducción de líquidos reactivos adicionales de este tipo, se pueden someter los líquidos de muestras, que han reaccionado en las cámaras de reactivos ya con una substancia reactiva introducida previamente allí y que se encuentra, por ejemplo, en forma seca, a una segunda reacción. No obstante, puesto que el sistema de ventilación dispone de una instalación, especialmente en forma de ensanchamientos de canal, que debe impedir la corriente del líquido de muestras desde las cámaras de reacción a través de los orificios de ventilación, una instalación de este tipo dificultará también el transporte del líquido de reacción a través del sistema de canales de ventilación a las cámaras de reacción. A este respecto, es ventajoso que a través de la configuración correspondiente de los ensanchamientos de los canales que forman la instalación de supresión de la circulación se procure que se posibilite el flujo de líquido de reactivos a los ensanchamientos de canales a través de las fuerzas capilares. Aquí se ofrecen de nuevo las estructuras de ranura de entrada ya descritas anteriormente, que se pueden realizar a través de regiones de esquina configuradas de forma correspondiente en la región de transición de varias superficies que están en ángulo entre sí de los ensanchamientos de los canales.
En virtud de la configuración descrita anteriormente de los ensanchamientos de los canales con instalaciones que generan fuerza capilar, que permiten la afluencia de líquido de reactivos en los ensanchamientos de los canales, se llenan estos ensanchamientos de los canales con líquido de reactivos hasta que el líquido de los reactivos cubre la desembocadura de las secciones de los canales de ventilación que se extienden desde las cámaras de reacción. De esta manera, en estas regiones de desembocadura se tocan los frentes del líquido de reactivo y del líquido de las muestras. El transporte posterior de los reactivos se lleva a cabo ahora a través de difusión hasta el interior de las cámaras de reacción.
El llenado selectivo de los ensanchamientos de los canales, de manera que se produce el transporte por difusión de los reactivos, se puede conseguir de forma alternativa también a través de la introducción de un líquido de control inerte (frente a los reactivos y al líquido de las muestras). Con este fin, en el ensanchamiento del canal desemboca entonces un canal de control, a través del cual el líquido de control llega al ensanchamiento del canal. De esta manera se crea una válvula controlada por líquido, que permite, por así decirlo, la activación de una sola vez para la transición de la válvula desde el estado de bloqueo a su estado de paso con respecto a la posibilidad de un transporte por difusión de los reactivos. La introducción del líquido de control en los ensanchamientos de los canales se puede realizar a través de la impulsión con presión del líquido de control o de nuevo a través de la utilización de fuerzas capilares. Aquí se ofrecen de nuevo los mismos mecanismos y configuraciones de las paredes laterales y de las regiones de desembocadura de los ensanchamientos de los canales, que se han descrito ya más arriba.
La introducción del líquido de reactivos en el canal colector de ventilación o bien en el sistema de canal de ventilación de las cámaras de reacción se realiza de una manera más conveniente porque este sistema de canales está conectado en cuanto al fluido con al menos una cámara de recepción de líquido de reactivos. El líquido de reactivos llega desde esta cámara, especialmente utilizando los mecanismos que se han descrito anteriormente con relación a las cámaras de recepción de las muestras y a los canales de distribución.
Para la investigación de muestras microbiológicas con la ayuda del soporte de muestras según la invención puede ser necesario ampliar previamente la muestra a investigar, es decir, que el material de la muestra debe ser multiplicado en cuanto a la cantidad antes de que sea conducido, a través del sistema de canales de admisión de distribución a las cámaras de reacción individuales. El proceso de la amplificación y de la introducción de la muestra amplificada en las cámaras de recepción de las muestras se simplifica cuando la amplificación propiamente dicha se realiza en el lugar de las cámaras de recepción de las muestras. Entonces es deseable transmitir el material amplificado de las muestras, controlado desde el exterior, a las cámaras de reacción asociadas a las cámaras de recepción de las muestras. Esto se realiza, de acuerdo con una variante ventajosa de la invención porque entre la cámara de recepción de las muestras y el primer canal de admisión que se deriva desde el al menos un canal de comunicación, está dispuesta una primera válvula, que está configurada con preferencia como válvula de una sola vez, que solamente puede ser transferida una sola vez desde su estado de bloqueo al estado de paso. Cuando el transporte de la muestra desde la cámara de recepción de la muestra hacia las cámaras de reacción individuales se realiza a través de fuerzas capilares, lo que se pretende con preferencia, por lo que todos los canales configurados en el soporte de muestras están configurados como capilares, entonces esta primera válvula puede estar dispuesta también en el canal de ventilación, que está asociado al grupo de cámaras de reacción, con las que está conectada la cámara de recepción de las muestras. Puesto que a través de la ventilación controlada de las cámaras de reacción, realizada de esta manera, se controla la afluencia del material de las muestras desde la cámara de recepción de las muestras a las cámaras de reacción individuales.
El "interfaz" del soporte de muestras según la invención para la activación de la primera válvula o bien de las primeras válvulas debería estar configurado muy sencillo. Esto presupone que la válvula se puede activar fácilmente desde el exterior. Con preferencia, está previsto que la válvula sea controlada hidráulica o pneumáticamente, y en particular a través del líquido que se encuentra en la válvula o bien a través del gas que está presente. En efecto, por ejemplo, si se ejerce un impulso de presión sobre el material de las muestras que se encuentra en la cámara de recepción de las muestras, entonces aparece en la primera válvula una presión hidráulica, que rompe un elemento de bloqueo de la primera válvula o lo puentea en otro caso. Así, por ejemplo, es concebible que la primera válvula esté configurada como válvula rompible con una lámina rompible, que se rompe cuando se excede una presión determinada y, por lo tanto, abre el canal, en el que se encuentra la válvula. Como una alternativa, se pueden emplear válvulas de chapaleta o bien válvulas de retención, que se abren cuando se alcanza una presión correspondiente de fluido (líquido o gas) existente. Este tipo de válvulas es especialmente preferido cuando el transporte de los fluidos se realiza impulsado con presión a través del soporte de válvulas, es decir, que no se realiza a través de fuerzas capilares.
Otra alternativa de la configuración de la primera o bien de las primeras válvulas consiste en que ésta presenta una configuración hidrófoba, que se realiza en forma de una mecanización correspondiente de la superficie del canal en la región de la válvula o a través de una pieza de inserción. El fluido que se encuentra en la válvula hidrófoba la puentea, por ejemplo, como consecuencia de una impulsión de presión especialmente del tipo de impulso. Cuando el canal está humedecido con líquido de esta manera en la región de la válvula y se emplean fuerzas capilares para el transporte adicional del líquido, entonces se crea de esta manera una válvula de una sola vez, que se puede puentear muy fácilmente desde el exterior, a saber, a través de la impulsión con presión de las cámaras de recepción de las muestras.
Pero la primera válvula puede estar configurada de una manera más ventajosa como ensanchamiento del canal, que actúa, por su parte, como un salto capilar (ver a este respecto también la descripción anterior con relación a los canales de ventilación). Tan pronto como este ensanchamiento del canal está relleno con líquido, lo que se realiza, por ejemplo, a través de la impulsión correspondiente con presión en la cámara de recepción de las muestras o, en cambio, se lleva a cabo a través de la introducción de un líquido externo o líquido de control desde el exterior, está asegurado el transporte del líquido detrás de la válvula a través de fuerzas capilares, de manera que la válvula propiamente dicha puede ser puenteada de nuevo hidráulicamente.
Todos los canales, cámaras y estructuras similares son introducidas con preferencia desde un lado en un cuerpo de base, que está cubierto de manera hermética al líquido por medio de un cuerpo de cubierta, que puede ser, por ejemplo, una lámina. Pero ambos cuerpos, el cuerpo de base y el cuerpo de cubierta, pueden formar también conjuntamente los canales y cavidades. El soporte de muestras está constituido con preferencia por plástico, como poliestireno o polimetilmetacrilato (PMMA), policarbonato o ABS. El soporte de muestras se puede fabricar a través de moldeo de un inserto moldeado, respectivamente, en el procedimiento de fundición por microinyección. La estructura del inserto moldeado es en este caso complementaria de la estructura del cuerpo de base y/o del cuerpo de cubierta. Los insertos moldeados a emplean para estas técnicas de fundición por inyección se fabrican a través de litografía o galvanoformación, a través de microerosión o a través de mecanización micromecánica, como fresado con diamante. Por otro lado, los elementos estructurados del soporte de muestras pueden estar fabricados a partir de un vidrio fotodecapable o a partir de silicio a través de decapado anisotrópico o a través de procedimientos de mecanización micromecánicos. Las piezas individuales del soporte de muestras (cuerpo de base y cuerpo de tapa) se conectan entre sí en sus superficies de contacto y en particular especialmente a través de soldadura ultrasónica. En cualquier caso, esta conexión debe ser hermética al líquido y al gas para que las cámaras y los canales individuales no estén en contacto a través de las superficies de contacto de los elementos, a partir de los cuales está constituido el soporte de muestras (cuerpo de base y cuerpo de cubierta).
El soporte de muestras según la invención puede estar constituido para mediciones al trasluz por material transparente y para mediciones de luminiscencia por material transparente u opaco. Si el soporte de muestras está constituido de varias partes (cuerpo de base y cuerpo de cubierta), las partes individuales del soporte de muestras pueden estar constituidas por diferentes materiales.
La altura de las cámaras de reacción y, por lo tanto, el espesor de la capa de líquido irradiada por la luz pueden estar adaptados al procedimiento de evaluación óptica. Dentro del soporte de muestras pueden estar presentes cámaras de reacción con diferentes alturas.
El soporte de muestras según la invención puede presentar cámaras de reacción con volúmenes, que están entre 0,01 \mul y 10 \mul. La densidad de las cámaras de reacción puede ser hasta 35/cm^{2}. Por lo tanto, sobre un soporte de muestras de tamaño manual se pueden alojar sin problemas de 50 a 10.000 cámaras de reacción. Los canales individuales tienen una anchura y una profundidad de 10 \mul a 1000 \mul y especialmente de 10 \mul a 500 \mul.
Un soporte de muestras constituido según la invención tiene, por ejemplo, una altura de 4 m, presentando el cuerpo de base, en el caso de una estructura de dos partes (cuerpo de base y cuerpo de cubierta), un espesor de aproximadamente 3,5 mm y presentando el cuerpo de cubierta configurado como lámina un espesor de 0,5 mm. Las cámaras de reacción dado el caso redondas, pero que se pueden configurar igualmente angulares, tienen una profundidad de aproximadamente 3,0 mm, de manera que se ajusta un espesor de la pared del fondo de 0,5 mm. El volumen de estas cámaras de reacción es, respectivamente, 1,5 \mul. Los canales individuales presentan especialmente una sección transversal rectangular, teniendo los canales de admisión aproximadamente 400 \mul de anchura y 380 \mul de profundidad y teniendo los canales de distribución, desde los que se derivan los canales de admisión, aproximadamente 500 \mul de anchura y 380 \mul de profundidad. Los orificios de ventilación (con sección transversal rectangular) tienen aproximadamente 420 \mum y aproximadamente 380 \mum de profundidad. Los canales de ventilación que se conectan en los orificios de ventilación presentan especialmente una anchura y profundidad de 500 \mum y 1000 \mum. Sobre un área de 21,5 mm x 25 mm, es decir, 540 mm^{2}, se encuentran 96 cámaras de reacción que se pueden llenar al mismo tiempo. Por lo tanto, la necesidad de área calculada de cada cámara de reacción es 5,6 mm^{2}.
El soporte de muestras según la invención tiene las siguientes ventajas especiales:
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Contiene un número mayor de cámaras de reacción con volumen reducido, lo que conduce a una densidad elevada de las cámaras de muestras.
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El llenado de las cámaras de reacción con el líquido de muestra se realiza más rápidamente y con mayor facilidad junto con un gasto más reducido de aparatos, puesto que el líquido de muestras solamente se aplica en algunos pocos lugares (cámaras de recepción de las muestras) y desde allí circula de forma automática como consecuencia de fuerzas capilares hasta las cámaras de reacción.
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Para el llenado de las cámaras de reacción no es necesaria ni una sobrepresión del líquido de muestras ni una presión negativa en las cámaras de reacción.
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Las cámaras de recepción de las muestras se llenan por medio de aparatos de venta en el comercio, a los que están adaptadas de acuerdo con las dimensiones y el volumen.
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Un líquido de reactivos presente en un líquido se puede introducir posteriormente, en el caso de un soporte de muestras, que está provisto con cámaras de recepción de las muestras para el líquido de reactivos, de manera sencilla en las cámaras de reacción llenas ya con un fluido.
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El material de las muestras puede ser transferido de forma selectiva desde la cámara de recepción de las muestras a las cámaras de reacción individuales, y en concreto a través de la introducción de una primera válvula en el sistema de canales, que se conecta, en general, en la cámara de recepción de las muestras.
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También el líquido de reactivos a alimentar, dado el caso, a las cámaras de reacción desde su lado de ventilación, se puede introducir de manera controlada en las cámaras de reacción, estando dispuestas segundas válvulas en la vía de ventilación. Estas segundas válvulas se pueden controlar por medios hidráulicos, pneumáticos o similares, de la misma manera que también las primeras válvulas.
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Las cámaras de reacción cubiertas son llenadas totalmente con el fluido a investigar. El volumen de llenado de cada cámara de reacción es fijado de forma automática; no es necesario un dispositivo de dosificación para cada cámara de reacción individual.
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El fluido que se encuentra en las cámaras de reacción está protegido de una manera eficaz frente a evaporación durante un eventual tratamiento posterior y durante la medición a través de la lámina de cubierta conectada herméticamente con el cuerpo de base.
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La necesidad de material para la ocupación de las cámaras de reacción con un reactivo, la necesidad de material de investigación, por ejemplo la suspensión de bacterias, muestras de sangre o substancias activas y, por lo tanto, los costes son menores que en los soportes de muestras con volumen mayor de las cámaras de reacción.
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Para el fluido a investigar, por ejemplo una suspensión de bacterias, se pueden prever cámaras de recepción de las muestras, que se encuentran en el cuerpo de base o en el cuerpo de tapa, y que desembocan, dado el caso, en la pluralidad de los canales de comunicación.
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La investigación microbiológica, microquímica o bacteriológica de las muestras introducidas en el soporte de muestras se puede automatizar totalmente con un gasto reducido para los aparatos de medición.
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Los soportes de muestras se pueden alojar a temperatura ambiente normal. La necesidad de espacio para el almacenamiento es claramente menor que en los soportes de muestras convencionales.
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Los soportes de muestras, de una manera similar a los soportes de muestras conocidos, están destinados para un uso de una sola vez. Debido a la densidad mayor de empaquetadura de las cámaras de reacción, la cantidad de soportes de muestras usados a evacuar es menor que en el caso de utilización de soportes de muestras convencionales.
Las cámaras de reacción en el soporte de muestras se pueden ocupar por medio de un dispositivo miniaturizado adaptado con un reactivo química o biológicamente activo, que se seca después de la introducción del flujo de reactivo y se adhiere sobre el fondo y sobre las paredes de las cámaras de reacción. Como reactivos se pueden utilizar, por ejemplo, derivados de oligopéptido-\beta-NA, derivados de p-nitrofenilo, azúcar para investigaciones de fermentación y otras investigaciones, ácidos orgánicos, aminoácidos para investigaciones de asimilación, substratos de decarboxilasa, antibióticos, antimicóticos, suelos nutritivos, substancias marcadoras, substancias indicadoras y otras substancias.
El soporte de muestras según la invención y ocupado, dado el caso, con reactivo, se puede utilizar para la verificación bioquímica y la verificación de la sensibilidad de microorganismos significativos desde el punto de vista clínico. En un sistema totalmente automatizado y miniaturizado se prepara una suspensión definida de microorganismos, con la que se carga el soporte de muestras. El soporte de muestras inoculado es dimensionado -dado el caso después de un tratamiento posterior- por medio de un procedimiento óptico. Los resultados obtenidos en este caso son detectados asistidos con ordenador y son evaluados y juzgados matemáticamente por medio de procedimientos adaptados.
El soporte de muestras según la invención se puede utilizar en la serología de grupos sanguíneos, en la química clínica, en la verificación microbiológica de microorganismos, en la verificación de la sensibilidad de microorganismos contra los antibióticos, en la microanalítica así como en la verificación de substancias activas.
A continuación se explica en detalle la invención con la ayuda de las figuras. En particular:
La figura 1 muestra una vista en planta superior sobre el lado superior de un soporte de muestras con lámina de cubierta parcialmente fragmentada.
La figura 2 muestra una vista en sección a lo largo de la línea II-III de la figura 1 a través de la cámara de recepción de las muestras con canal de distribución que se conecta en ésta.
La figura 3 muestra una sección a lo largo de la línea III-III a través de las cámaras de muestras con representación de los canales de distribución que se derivan desde éstas.
La figura 4 muestra una sección a lo largo de la línea IV-IV de la figura 1 a través de las cámaras de reacción que están dispuestas adyacentes a lo largo de la anchura del soporte de muestras.
La figura 5 muestra la región del soporte de muestras, identificada con V en la figura 1, en la vista en planta superior y en representación ampliada.
Las figuras 6 a 9 muestran vistas en la sección transversal a lo largo de las líneas VI-VI a IX-IX de la figura 5 para la ilustración de la configuración de los canales y cámaras en sus regiones de transición respectiva y sus regiones de desembocadura, y
Las figuras 10 a 14 muestran representaciones de diferentes configuraciones de válvulas en la vista en planta superior y en la sección, estando dispuestas estas válvulas en la región identificada con XI en la figura 5.
El soporte de muestras 10 representado en el dibujo presenta una estructura de dos partes y está constituido por una placa de base 12, cuyo lado superior 14 representado en la figura 1 está cubierto por una lámina de cubierta (ver también las figuras 2 a 4). El cometido del soporte de muestras 10 es conducir líquido de muestras aplicado utilizando fuerzas capilares en una pluralidad de cámaras de reacción, en las que se encuentran diferentes substancias reactivas. Además, las cámaras de reacción rellenas con líquido de muestras deben poder investigarse fotométricamente. Además, está previsto introducir líquidos desde diferentes lugares en las cámaras de reacción.
Como se puede reconocer especialmente con la ayuda de la figura 1, el soporte de muestras 10 está dividido en varias secciones 18, cuyas configuraciones son iguales entre sí. En la descripción siguiente, se trata, respectivamente, de la configuración de una de estas secciones. Dentro de cada sección 18, la placa de base 12 del soporte de muestras 10 está estructurada en su lado superior 14, lo que está realizado a través de la aplicación de ranuras y cavidades desde el lado superior 14 en la placa de base 12. Todas las ranuras y cavidades forman un sistema de distribución del líquido de muestras y un sistema de distribución del líquido de reactivos, que están cubiertos hacia el lado superior del soporte de muestras 10 por medio de la lámina de cubierta 16.
En cada sección 18 del soporte de muestras 10 se encuentra una cámara de recepción de muestras 20 para la recepción de un líquido de muestras 22 (ver la figura 2). En comunicación de fluido con la cámara de recepción de muestras 20 está un canal de distribución 24, que desemboca en la cámara de recepción de las muestras 20 por el extremo superior de la misma. Desde el canal de distribución 24 se extienden a ambos lados del mismo en la vista en planta superior según la figura 1 canales de admisión 26 que se extienden en forma de serpentinas, que están configurados como el canal de distribución 24 a través de la realización de ranuras en el lado superior 14 de la placa de base 12. Los canales de admisión 26 se extienden a partir del canal de distribución 24 hasta las cámaras de reacción 28, que están configuradas como cavidades realizadas en la placa de base 2 desde el lado superior 14. Desde las cámaras de reacción 28 se extienden canales de comunicación (de ventilación) 30. Estos canales de comunicación 30 desembocan por grupos en dos canales colectores de ventilación 32, que se extienden paralelos entre sí y paralelos al canal de distribución 24. Con otras palabras; las cámaras de reacción 28 dispuestas a ambos lados del canal de distribución 24 se encuentran entre, por una parte, el canal de distribución 24 y, por otra parte, uno de los dos canales colectores de ventilación 32. También los canales de comunicación 30 y los canales colectores de ventilación 32 están configurados a través de la introducción de ranuras en el lado superior 14 de la placa de base 12. Además, los canales colectores de ventilación 32 terminan en uno de sus extremos en un orificio de ventilación 34, que se encuentras en un lado marginal exterior 36 (ver la figura 2) de la placa de base 12. El extremo de los canales colectores de ventilación 32, que se encuentra opuesto, respectivamente, a estos orificios de ventilación, está conectado con una cámara de recepción 38 para el líquido de reactivos, que se describirá todavía más adelante. También esta cámara 38 está realizada a través de la aplicación de una cavidad en el lado superior 14 de la placa de base 12.
El transporte de líquido de muestras 32 desde la cámara de recepción de las muestras 20 de una sección 18 del soporte de muestras 10 hasta las cámaras de reacción 28 asociadas a la cámara de recepción de las muestras 20 se realiza utilizando fuerza capilares. Lo mismo se aplica para el transporte de líquido de reactivos desde las cámaras 38 a las cámaras de reacción 28. Para que estas fuerzas capilares puedan aparecer dentro de los canales, estos canales 24, 26, 30, 32 deben estar dimensionados de forma correspondiente. Dado el caso, se necesita un tratamiento superficial de los lados interiores de los canales para hidrofilizar estas superficies. Si es necesaria una hidrofilización de este tipo, depende, por una parte, del material, del que están constituidos la placa de base 12 y la lámina de cubierta 16 y, por otra parte, de la viscosidad y de la naturaleza de los líquidos a transportar (líquido de las muestras y líquido de reactivos).
Aunque se puede realizar de una manera sencilla la utilización de las fuerzas capilares dentro de los canales a través de las medidas descritas anteriormente, es problemático garantizar el transporte de líquido desde las cámaras 20, 38, 28 al interior de los canales conectados o bien desde los canales 26 al interior de las cámaras de reacción conectadas. Por parte de la comunicación de fluido del canal de distribución 24 con la cámara de toma de muestras 20, el problema consiste especialmente en que el lugar de desembocadura 40 del canal de distribución 24 en la cámara de toma de muestras 20 se encuentra por encima de la pared del fondo 42 de la cámara 20 y dentro de la limitación lateral 33 de la cámara 20. La limitación lateral 44 de la cámara 20 se forma por medio de secciones laterales de la superficie 46. Como se puede reconocer especialmente con la ayuda de la figura 1, las superficies laterales 46 se extienden en ángulo en la región debajo del lugar de desembocadura 40, en este caso bajo un ángulo de aproximadamente 90º, de manera que se forma una región de esquina 48 entre las dos superficies laterales 46. Esta región de esquina 48 presenta en su fondo un radio de curvatura tan pequeño que se forma una ranura de salida 50, en la que se configura un menisco de líquido durante la humidificación con líquido de muestras 22. En el caso descrito aquí, esta ranura de salida 50 se extiende transversalmente a la pared de fondo 42. Por lo tanto, en la ranura de salida 50 se producen, como consecuencia de la humidificación de las superficies laterales 46 en la región de esquina 48 fuerzas capilares que actúan sobre el líquido de muestras 20, que son suficientes para aspirar el líquido de muestras 22 desde la cámara de toma de muestras 20 hasta el canal de distribución 24. El canal de salida 50 se extiende especialmente hasta la pared de fondo 42 de la cámara de recepción de las muestras 20. Tan pronto como el área de la sección transversal del canal de distribución 24 está totalmente llena por el líquido de muestras 22, se lleva a cabo el transporte posterior del líquido de muestras en el canal de distribución 24 a través de las fuerzas capilares que actúan ahora allí.
Transversalmente a la extensión del canal de distribución 24, desde éste se derivan canales de admisión 26. También en estos canales de admisión 26 se lleva a cabo el transporte posterior del líquido de muestras 22 a través de fuerzas capilares. El transporte de líquido a través de los canales de admisión 26 se extiende en primer lugar hasta el lugar de desembocadura 52 de cada canal de admisión 26 en la cámara de reacción 28 asociada al mismo (ver la figura 5). Sin medidas especiales o sin tener en cuenta las particularidades especiales de los canales de admisión 26 y de las cámaras de reacción 28 existe el peligro de que el frente de líquido que parte desde el lugar de la desembocadura 52 del canal de admisión 26 no se extiende hasta la cámara de reacción 28.
Para garantizar aquí, además, el transporte seguro del líquido a través de la actuación de fuerzas capilares, el lugar de la desembocadura 52 está dispuesto en el extremo superior, alejado de la pared de fondo 54 de una cámara de reacción 28, de dos superficies laterales 56 yuxtapuestas de la cámara de reacción 28. En general, la cámara de reacción 28 presenta una sección transversal cuadrada o al menos rectangular (ver la representación en las figuras 1 y 5), de manera que resultan regiones de esquina 58 y 60, respectivamente, entre superficies laterales 56 vecinas entre sí, respectivamente, y entre las superficies laterales 56 y la superficie de fondo 54. Si estas regiones de esquina no están provistas con un radio de redondeo suficientemente pequeño, entonces se puede configurar en la región de transición de las superficies que forman las regiones de esquina respectivas, un menisco de líquido, que continúa, en virtud de la tendencia del líquido a humedecer las regiones superficiales adyacentes, como consecuencia de fuerzas capilares a lo largo de las regiones de esquina 58, 60.
Por lo tanto, la región de esquina 58, dentro de la cual está dispuesto el lugar de la desembocadura 52 del canal de admisión 26, actúa como una ranura de entrada 62. esta ranura de entrada 62 posibilita el flujo del líquido de muestras 22 desde el canal de admisión 26 a la cámara de reacción 28. este líquido fluye en primer lugar a lo largo de la ranura de entrada 62 en dirección hacia la superficie de fondo 54 de la cámara de reacción 28, para desplazarse desde allí a lo largo de las regiones de esquina 58 circundantes cuadradas, hasta que se ha humedecido todo el fondo de la cámara de reacción 28. De esta manera, se llena la cámara de reacción 28 de manera creciente con líquido de muestras 22, y en particular única y exclusivamente en virtud de la utilización de fuerzas capilares.
El llenado de la pluralidad de cámaras de reacción 28 debería realizarse de una manera uniforme y especialmente también al mismo tiempo. Un relleno suplementario de las cámaras de reacción 28 con líquido de muestras 22 puede conducir a efectos no deseados, puesto que, en efecto, el líquido de muestras 22 puede salir de nuevo de manera no deseada, dado el caso, a través de los canales de comunicación 30 previstos para la ventilación. Por lo tanto, es ventajoso que la entrada del líquido de muestras 22 en las cámaras de reacción 28 sea realizada bajo control de estrangulamiento. Por este motivo, las secciones transversales de los canales de admisión 26 son menores que la sección transversal del canal de distribución 24. Los canales de admisión 26 forman, por lo tanto, una especie de estrangulamiento con elevada resistencia a la circulación. Este efecto de estrangulamiento tiene, además, la ventaja de que aunque los canales de admisión individuales se deriva a diferentes distancias con respecto a la cámara de recepción de muestras 20 desde el canal de distribución 24, todas las cámaras de reacción 28 se llenan esencialmente al mismo tiempo (aquí se tolera un cierto retraso).
Como se puede reconocer especialmente con la ayuda de las figuras 1 y 5, los canales de admisión 26 se ramifican en extensión del canal de distribución 24 desplazados entre sí a partir de este canal e distribución. Esto tiene la ventaja de que el frente del líquido, que se mueve hacia adelante a través del canal de distribución 24, solamente es "perturbado" en la región de la desviación del canal de admisión 26, respectivamente, a través de la desembocadura de un canal de admisión 26. En efecto, si se ramificasen los canales de admisión 26, dispuestos por parejas a ambos lados del canal de distribución 24, de manera enfrentados entre sí, entonces se podría perturbar el transporte del líquido de tal forma que se produciría una parada. En este caso, hay que tener en cuenta que las irregularidades de la superficie pueden repercutir a veces en gran medida sobre la actuación de las fuerzas capilares. La ramificación de un canal de admisión 26 desde el canal de distribución 24 actúa como un ensanchamiento del canal que, cuando es demasiado grande, podría conducir a la parada de la circulación. Puesto que el transporte a través de un canal de admisión 26 de ramificación por medio de las fuerzas capilares que actúa sobre éste solamente se produce cuando el líquido en el canal de distribución 24 cubre la sección transversal del canal de admisión 26 en derivación. Por lo tanto, los canales de admisión 26 están configurados pequeños en la sección transversal para que no representen en último término ningún obstáculo para la tendencia del líquido a humedecer las paredes interiores del canal de distribución 24 a pesar de la ramificación del canal de admisión 26.
Durante el llenado de las cámaras de reacción 28 con el líquido de muestras 22 se descarga el aire o bien el gas que se encuentra en estas cámaras a través de los canales de comunicación 30. Cada canal de comunicación 30 desemboca a través de un espacio de precámara 64 en la cámara de reacción 28 respectiva (ver también la figura 7). El espacio de precámara 64 está dispuesto en el extremo superior de la cámara de reacción 28 y está delimitado hacia arriba a través de la lámina de cubierta 16. Su pared de fondo 66, que está opuesta a la lámina de cubierta 16, se extiende de manera descendente inclinada en dirección a la cámara de reacción 28. La configuración del espacio de precámara 64 está elegida para que todo el aire o bien todo el gas, que se encuentra en la cámara de reacción 28, sea descargado durante el llenado de la misma, para que en último término el nivel del líquido dentro de la cámara de reacción 28 se extienda hasta la lámina de cubierta 26 y no se perturbado por burbujas de gas o similares. Como se puede reconocer especialmente en la figura 5, los canales de comunicación 30 que sirven para la ventilación de las cámaras de reacción 28 desembocan a través de regiones de ensanchamiento 68, que presentan una forma de corazón en la vista en planta superior, en el canal colector de ventilación 32. Cada región de ensanchamiento 68 presenta en este caso regiones de cámaras 72 que se extienden a ambos lados de la desembocadura 70 del canal de comunicación 30, que se extienden hasta una región de aguas arriba -con respecto a la dirección de la circulación de gas- del lugar de la desembocadura 70 y se estrechan hacia el canal colector de ventilación 32. El lugar de la desembocadura 70 se encuentra en una región 74 de las superficies laterales del ensanchamiento 68, no estando configuradas regiones de esquina dentro de esta región 74 de las superficies laterales ni lateralmente ni tampoco debajo del lugar de la desembocadura 70. La única región de esquina, que se ajusta, aparece en el lateral del lugar de la desembocadura 70 y adyacente a la lámina 16. De esta manera, el canal de comunicación 30 termina dentro del ensanchamiento 68 de tal forma que su lugar de desembocadura 70 está rodeado por secciones planas. Un lugar de desembocadura 70 de este tipo tiene el inconveniente de que ahora el frente de líquido existente se detienen en el lugar de la desembocadura 70, puesto que está impedido su transporte siguiente a través de fuerzas capilares. Este frente de líquido se desplaza a través de los canales de comunicación 30, puesto que a continuación del llenado completo de las cámaras de reacción 28, el líquido de muestras se desplaza hacia delante a través del espacio de precámara 64 hasta el interior de los canales de comunicación 30 que actúan como capilares. Por lo tanto, el ensanchamiento 38 impide que el líquido de muestras llegue hasta el canal colector de ventilación 32.
Como ya se ha mencionado anteriormente, cada canal colector de ventilación 32 se extiende desde una cámara de recepción de líquido de reactivos 38. En estas cámaras de recepción 38 se encuentra un líquido de reactivos adicional, que se necesita para la activación de reacciones del líquido de muestras en las cámaras de reacción 28. Las cámaras de reacción 28 están ocupadas ellas mismas ya de una manera más ventajosa con substancias reactivas, que están preconfeccionadas y que han sido aplicadas en las cámaras de reacción en función de las investigaciones a realizar. Hasta la entrada del líquido de muestras 22, estas substancias de reacción se encuentran en forma seca en las cámaras de reacción 28.
Después de que ahora ha tenido lugar la reacción del líquido de muestras con las substancias reactivas que se encuentran en las cámaras de reacción 28, puede ser necesario inducir una reacción adicional. Con este fin, el sistema de conducción utilizado hasta ahora como sistema de ventilación, formado por el conducto colector de ventilación 32 y por los conductos de comunicación 30 así como por los ensanchamientos 68 se utiliza para introducir ahora reactivos adicionales en las cámaras de reacción 28. Para este caso de aplicación debería estar garantizado que las regiones de ensanchamiento 68 pueden ser atravesadas por el líquido de reactivos. Esto se puede realizar, por ejemplo, porque los lugares de desembocadura 76 de los canales colectores de ventilación 32 están configurados en las regiones de ensanchamiento 68 de tal forma que, como consecuencia de acciones capilares, está asegurada la afluencia del líquido de reactivos en los ensanchamientos. Aquí se ofrecen los mismos mecanismos que se han descrito más arriba ya con relación a la afluencia del líquido de muestras 22 desde los canales de admisión 26 a las cámaras de reacción 28. A través de la configuración de regiones de esquina con radios de redondeo suficientemente reducidos en la proximidad del lugar de desembocadura 76 se puede realizar la afluencia del líquido de reacción en las cámaras 72 de los ensanchamientos 68 a través de la fuerza capilar. Otra alternativa consiste en que bajo la acción de una presión hidráulica sobre los líquidos de reacción en las cámaras 38, se llenan los ensanchamientos 68 con líquido de reacción. Una tercera posibilidad consiste en introducir de forma selectiva un líquido de control en los ensanchamientos 68 (los canales de control y las cámaras de recepción del líquido de control que se requieren para ello no están representados en las figuras). Todas las variantes descritas aquí tienen en común que para el transporte posterior de las substancias reactivas que se encuentran en el líquido de reactivos al interior de las cámaras de reacción 28 se requiere el llenado de líquido de las regiones de ensanchamiento 68. Tan pronto como estas regiones 68 están rellenas de líquido, se produce en el lugar de la desembocadura 70 el contacto de este líquido con el líquido de muestras que se encuentra en el canal de comunicación 30. El transporte posterior de los reactivos del líquido de reactivos se lleva a cabo entonces por difusión. Con otras palabras: el ensanchamiento 68 es una válvula bidireccional, que se encuentra o bien en el estado de bloqueo o en el estado de paso en función de la dirección de la circulación.
Para completar, se hace referencia todavía a las figuras 5 a 9, en el sentido de que de nuevo para el transporte de reactivos desde las cámaras de recepción de reactivos 38 a los canales colectores de ventilación 32 conectados en éstas se utilizan fuerzas capilares. El mecanismo es similar al que se ha descrito con la ayuda de las figuras 1 y 6. De acuerdo con la figura 9, el canal colector de ventilación 32 de ramifica en el extremo superior que está alejado de la pared del fondo 78 de la cámara 38. El lugar de la desembocadura 80 en la delimitación de pared lateral 82 de la cámara 38 está redondeado en esta región, como se muestra en la figura 5. Para realizar ahora una circulación basada en fuerzas capilares desde la cámara 38 hasta el canal 32, se necesita de nuevo una especie de ranura de salida 84, que presenta un radio de curvatura tan pequeño que se forma un menisco de líquido que, en virtud de la tendencia del líquido a humedecer la ranura 84, se desplaza hacia delante a lo largo de ésta, en este caso hacia arriba.
Con la ayuda de las figuras 10 a 14 se explica a continuación todavía otras posibilidades de diseño de una configuración de válvula, con la que es posible hacer circular el líquido que se encuentra en las cámaras de recepción de muestras 20 de manera selectiva a través de los canales de distribución 24 conectados.
En la figura 10 se muestra una primera variante de una válvula 86 de este tipo. En esta construcción de la válvula 87, el canal de distribución 24 se extiende a través de un ensanchamiento de canal 88 redondo en la sección transversal, en el que está dispuesto un cuerpo de inserción 90 hidrófobo poroso. En virtud de sus propiedades hidrófobas, el cuerpo 90 bloquea el transporte de líquido a través del ensanchamiento 88. Si se expone a continuación el líquido de muestras en la cámara de alojamiento 20 a una presión, entonces se introduce a presión el líquido en el ensanchamiento 88 y, por lo tanto, en las porosidades del cuerpo de inserción 90 hidrófobo. En este caso, el cuerpo poroso 90 es aclarado por líquido de muestra hasta que éste llega a la región de los canales de distribución 24, que se conecta en el ensanchamiento del canal 88 y que se encuentra detrás del cuerpo de inserción 90 con respecto a la dirección de la circulación. Desde allí, el transporte siguiente del líquido se lleva a cabo a través de fuerzas capilares. Puesto que el cuerpo de inserción 90 hidrófobo está humedecido con el líquido de muestra sobre sus superficies a través de la impulsión con presión de este líquido de muestra, se mantiene la circulación del líquido como consecuencia de las fuerzas capilares. Por lo tanto, de esta manera a través del control del líquido (control de la presión del líquido de muestras) se realiza una función de válvula.
Las figuras 11 y 12 muestran una configuración alternativa de la válvula 86'. La idea en la que se basa este diseño de la válvula 86' es la que se ha descrito con la ayuda de las regiones de ensanchamiento 68 (ver las figuras 5 y 8). También en esta configuración 86', en el canal de distribución 24 se encuentra un ensanchamiento especial del canal 88', que está configurado en la vista en planta superior y en la vista en sección de la manera que se muestra en las figuras 11 y 12. En la región de la desembocadura 92 de la parte del canal de distribución 24, que procede desde la cámara de recepción de las muestras 20, el ensanchamiento 88' presenta una superficie lateral plana 94, que está delimitada solamente hacia la lámina de cubierta 14 por medio de una región de esquina. Las fuerzas capilares que se generan posiblemente a ambos lados de la desembocadura 92 en el lado inferior de la lámina de cubierta 14 no son suficientes para aspirar el líquido desde el canal de distribución 24. De esta manera, el frente de líquido que parte desde la cámara de muestras 20 y que se mueve a través de la sección siguiente del canal de distribución 24 se detiene en el lugar de la desembocadura 92. Solamente cuando se aplica presión sobre el líquido de la cámara de recepción de muestras 20, llega el líquido de muestras al interior de la región de ensanchamiento 88' y la llena. La región de ensanchamiento 88' presenta una salida 96, que desemboca en al desarrollo posterior del canal de distribución 24. Tan pronto como el líquido impulsado por presión en la región de ensanchamiento 88' alcanza la salida 96, se lleva a cabo el transporte posterior del líquido de muestras de nuevo a través de acción capilar.
Una última configuración de una válvula 86" se muestra en las figuras 13 y 14. Los mecanismos y la configuración de esta válvula son casi idénticos s la configuración de a válvula 86'. La diferencia entre los dos consiste en que el llenado de la región de ensanchamiento 88'' de a válvula 86'' no se lleva a cabo a través del líquido de muestras, sino a través de un líquido de control 98 inerte frente al líquido de muestras. El líquido de control 98 se encuentra en una cámara de recepción 100, que está conectada a través de un canal de control 102 con la región de ensanchamiento 88'. La introducción del líquido de control 98 en el ensanchamiento 88'' se puede realizar, por una parte, a través de la aplicación de presión sobre el líquido de control 98, pero, por otra parte, también a través del mantenimiento de una corriente de líquido utilizando fuerzas capilares. En el último caso mencionado, se procede de la manera que se ha descrito anteriormente con relación a la entrada del líquido de muestras 22 en las cámaras de reacción 28, siendo realizada la desembocadura 104 del canal de control 102 en el ensanchamiento del canal 88'' en una región, en la que dentro del ensanchamiento de canal 88'' están configuradas regiones de esquina con radios de redondeo suficientemente reducidos, a lo largo de las cuales se forma y se propaga un menisco de líquido. A través de la aplicación (ver las figuras 13 y 14) de líquido de control en las cámaras 100 se puede influir entonces de forma casi automática sobre el estado de conmutación de la válvula 86" (a saber, desde el estado de bloqueo al estado conductor). Para que el líquido de control 98 llegue desde la cámara 100 al canal de control 102, se pueden utilizar de nuevo los mecanismos y las medidas descritos ya anteriormente con relación a los canales de salida de las cámaras 20 y 38.
Como ya se ha mencionado anteriormente, se pueden introducir por parte del fabricante en las cámaras de reacción del soporte de muestras ya substancias de reacción, que están almacenadas allí especialmente en forma seca. Debido a los volúmenes pequeños de las cámaras de reacción, solamente se necesitan cantidades reducidas de substancias de reacción, lo que es necesario para el proceso de secado.
La introducción del líquido de muestras se realiza en el lado del usuario. Si la lámina de cubierta 16 no se extiende hasta las regiones del lado superior 14 de la placa de base 12, en las que se encuentran las cámaras de recepción de las muestras 20, éstas son libremente accesibles, de tal forma que el líquido de muestras puede ser introducido de manera convencional a través de pipeta. Lo mismo se aplica cuando la lámina de cubierta se extiende sobre todo el lado superior y presenta orificios alineados con las cámaras de muestra (y las cámaras de recepción de líquido reactivo 38). En virtud de una protección mejorada contra la evaporación es ventajoso que la lámina de cubierta cubra las cámaras 20 y 38. En tal caso, el líquido de muestras se puede introducir a través de punción de la lámina de cubierta. Una alternativa consiste en que la lámina de cubierta está ranurada en la región de las cámaras 20 y 38, por lo tanto, se puede abrir a modo de un tabique para la introducción de líquido de muestras.
Con relación a los mecanismos que son importantes para la circulación del líquido en las regiones de esquina y a lo largo de éstas, hay que subrayar en este lugar que los radios de redondeo, a los que se hace referencia en esta descripción, están en el intervalo de \mum y de sub-\mum. Además, en principio, para el radio de curvatura se aplica que éste es de una manera más ventajosa menor que la dimensión mínima del canal, en el que se conecta la región de esquina.

Claims (38)

1. Soporte de muestras, con
-
al menos una cámara de recepción (20) de las muestras para un líquido de muestras,
-
un canal de distribución (24) para líquido de muestras, que está conectado con al menos una cámara de recepción de las muestras, donde desde cada cámara de recepción de las muestras se extiende al menos un canal de distribución,
-
al menos una cámara de reacción (28), que presenta una cavidad delimitada por superficies, en la que desemboca un canal de admisión (26) que se deriva desde al menos un canal de distribución, y
-
un orificio de ventilación para cada cámara de reacción,
-
donde el dimensionado de cada canal de distribución y de cada canal de admisión está realizado de tal manera que el transporte del líquido se realiza a través de los canales de distribución y de admisión como consecuencia de fuerzas capilares, caracterizado
-
porque en cada cámara de reacción, las superficies que delimitan la cavidad están configuradas en la región de la desembocadura (52, 62) del canal de admisión para la formación de una instalación para la generación de una fuerza capilar para la circulación del líquido de muestras desde el canal de admisión hasta la cámara de reacción.
2. Soporte de muestras según la reivindicación 1, caracterizado porque cada cámara de reacción presenta una superficie de fondo con superficies laterales que se extiende en ángulo con respecto a ésta y porque la instalación de generación de la fuerza capilar está realizada a través de la configuración de un radio de redondeo tan pequeño en la región de la transición entre las superficies laterales y la superficie de fondo, que el líquido de las muestras fluye a lo largo de las regiones de transición por medio de fuerzas capilares.
3. Soporte de muestras según la reivindicación 2, caracterizado porque el canal de admisión desemboca en la región de transición entre las superficies laterales y la superficie de fondo de una cámara de reacción en esta cámara de reacción.
4. Soporte de muestras según la reivindicación 2, caracterizado porque el canal de admisión desemboca por encima de la superficie de fondo de una cámara de reacción en esta cámara de reacción y porque entre la desembocadura del canal de admisión y la región de transición entre la superficie de fondo y las superficies laterales se extiende una ranura de entrada con un área y forma de la sección transversal que genera la circulación del líquido de muestras a través de fuerza capilar.
5. Soporte de muestras según la reivindicación 4, caracterizado porque la ranura de entrada está configurada por el radio de redondeo en la región de transición entre dos superficies laterales vecinas y que se extienden en ángulo entre sí de la cámara de reacción.
6. Soporte de muestras según una de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque cada cámara de recepción de las muestras presenta una superficie de fondo y superficies laterales que se extienden en ángulo con respecto a ella y porque cada canal de distribución desemboca en la cámara de recepción de muestras asociado al mismo en la región de transición entre la superficie de fondo y las superficies laterales.
7. Soporte de muestras según una de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque cada cámara de recepción de muestras presenta una superficie de fondo y superficies laterales que se extienden en ángulo con respecto a ella, porque cada canal de distribución desemboca en la cámara de recepción de muestras asociado al mismo por encima de las regiones de transición entre la superficie de fondo y las superficies laterales y porque desde la desembocadura se extiende una ranura de salida en dirección a la superficie de fondo, cuyo área y forma de la sección transversal posibilitan una circulación del líquido de muestras a través de fuerza capilar.
8. Soporte de muestras según la reivindicación 7, caracterizado porque la ranura de salida está formada por dos superficies laterales que se extienden en ángulo entre sí, cuya región de transición presenta un radio de redondeo tan pequeño que se forman fuerzas capilares para la circulación del líquido de muestras a lo largo de la región de transición.
9. Soporte de muestras según una de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizado porque todos los canales de admisión que se derivan desde un canal de distribución presentan un área de la sección transversal menor que el canal de distribución.
10. Soporte de muestras según la reivindicación 7, caracterizado porque a ambos lados de cada canal de distribución se derivan canales de admisión y porque los canales de admisión que están opuestos a los puntos de derivación están desplazados unos con respecto a otros.
11. Soporte de muestras según una de las reivindicaciones 1 a 10, caracterizado porque desde cada orificio de ventilación de cada cámara de reacción se extiende un canal de conexión y porque varios canales de conexión desembocan, respectivamente, en un canal colector de ventilación, que presenta un orificio colector de ventilación.
12. Soporte de muestras según la reivindicación 11, caracterizado porque en cada canal de conexión y/o en cada orificio de ventilación está dispuesta una instalación para impedir la circulación siguiente de líquido de muestras como consecuencia de fuerzas capilares.
13. Soporte de muestras según la reivindicación 12, caracterizado porque las instalaciones de supresión de la fuerza capilar están dispuestas en las regiones de desembocadura de los canales de conexión e los canales colectores de ventilación.
14. Soporte de muestras según la reivindicación 12 ó 13, caracterizado porque cada instalación de supresión de la fuerza capilar está configurado como ensanchamiento del canal de conexión o como ensanchamiento del orificio de ventilación, que presenta en cada caso una superficie lateral, en la que desemboca un canal de conexión, donde la región de desembocadura de la sección del canal de conexión, que se extiende desde la cámara de reacción, no está delimitada en el ensanchamiento por ningún tipo de regiones de esquina o por un número tan pequeño de regiones de esquina con radios de redondeo que generan fuerza capilar que se impide el flujo del líquido de muestra en la región de desembocadura.
15. Soporte de muestras según la reivindicación 14, caracterizado porque cada canal colector de ventilación se extiende desde una cámara de recepción de reactivos, donde la circulación del líquido de reactivos a través de los canales de ventilación se realiza por medio de fuerzas capilares generadas en estos canales, y porque en la región de desembocadura de cada canal colector de ventilación en los ensanchamientos y/o en las regiones de desembocadura de las secciones de los canales de conexión que se extienden desde los canales de ventilación está dispuesta en los ensanchamientos una instalación para la generación de una fuerza capilar para el llenado de los ensanchamientos.
16. Soporte de muestras según la reivindicación 15, caracterizado porque cada cámara de recepción de reactivos presenta una superficie de fondo y superficies laterales que se extienden en ángulo recto con ella y porque el canal colector de ventilación asociado a una cámara de recepción de reactivos desemboca por encima de la superficie de fondo en la cámara de recepción de reactivos, estando dispuesta entre la desembocadura y la superficie de fondo una instalación para la generación de una fuerza capilar para la circulación de líquido de reactivos desde la cámara de recepción de reactivos hasta el canal colector de ventilación.
17. Soporte de muestras según la reivindicación 16, caracterizado porque la instalación de generación de la fuerza capilar está configurada como ranura de salida, cuya forma y área de la sección transversal posibilita una circulación del líquido de reactivos a través de fuerza capilar.
18. Soporte de muestras según la reivindicación 17, caracterizado la ranura de salida está configurada como muesca realizada en una superficie lateral.
19. Soporte de muestras según la reivindicación 17, caracterizado porque la ranura de salida está configurada como región de transición entre dos superficies laterales vecinas y que se extienden en ángulo recto entre sí, donde la región de transición presenta un radio de redondeo tan pequeño que se producen fuerzas capilares que generan una circulación del líquido de reactivos.
20. Soporte de muestras según la reivindicación 14, caracterizado porque cada canal de ventilación se extiende desde una cámara de recepción de reactivos para la recepción de un líquido de reactivos y porque en la región de desembocadura de cada canal colector de ventilación en los ensanchamientos y/o en las regiones de desembocadura de las secciones de los canales de conexión, que se extienden desde los canales de ventilación, en los ensanchamientos está dispuesta una instalación para la generación de una fuerza capilar para el llenado de los ensanchamientos.
21. Soporte de muestras según una de las reivindicaciones 1 a 20, caracterizado porque están previstas instalaciones para permitir el flujo controlado del líquido de muestras a través de los canales de distribución a la cámara de reacción.
22. Soporte de muestras según la reivindicación 21, caracterizado porque las instalaciones de control del flujo presentan válvulas, que están dispuestas en cada canal de distribución y/o en los orificios de ventilación de las cámaras de reacción o conectadas aguas abajo de éstas.
23. Soporte de muestras según la reivindicación 22, caracterizado porque cada válvula se puede transferir a través de la activación externa y/o a través de la impulsión con presión del líquido de muestras que se encuentra en ella o del gas que se encuentra en ella hidráulica o pneumáticamente desde un estado de bloqueo a un estado de paso.
24. Soporte de muestras según la reivindicación 23, caracterizado porque cada válvula presenta una lámina de explosión y/o una pieza de inserción hidrófoba porosa y/o una pared interior hidrófoba.
25. Soporte de muestras según la reivindicación 23, caracterizado porque cada válvula está configurada como ensanchamiento de canal dispuesto en un canal de distribución, en el que desemboca la primera sección de un canal de válvula que se extiende desde una cámara de recepción de muestras y desde el que se extiende la segunda sección del canal de distribución, que se extiende hacia los canales de admisión, donde la región de desembocadura de la primera sección del canal de distribución no está delimitada por regiones de esquina de ningún tipo o por un número tan pequeño de regiones de esquina con radios de redondeo que generan fuerzas capilares, que está interrumpido el flujo del líquido de muestras en la región de la desembocadura.
26. Soporte de muestras según la reivindicación 25, caracterizado porque los ensanchamientos de canal se pueden llenar con líquido de muestras a través de la impulsión con presión del líquido de muestras que se encuentra en las primeras secciones de los canales de distribución y de esta manera las secciones de los canales de distribución pueden ser puenteadas a través de líquido de muestras.
27. Soporte de muestras según la reivindicación 25, caracterizado porque en cada ensanchamiento de canal desemboca un canal de control para un líquido de control, con el que se puede llenar el ensanchamiento y, por lo tanto, las secciones de los canales de distribución pueden ser puenteadas a través de líquido de control.
28. Soporte de muestras según la reivindicación 27, caracterizado porque el flujo del líquido de control se realiza a través de los canales de control por medio de fuerzas capilares.
29. Soporte de muestras según la reivindicación 29, caracterizado porque la circulación del líquido de control se realiza desde los canales de control a los ensanchamientos de canal igualmente por medio de fuerzas capilares y/o a través de impulsión con presión del líquido de control.
30. Soporte de muestras según una de las reivindicaciones 27 a 29, caracterizado porque cana canal de control se extiende desde una cámara de recepción del líquido de control hasta el ensanchamiento del canal respectivo.
31. Soporte de muestras según la reivindicación 30, caracterizado porque cada cámara de recepción del líquido de control presenta una superficie de fondo y superficies laterales que se extienden en ángulo con respecto a ella y porque el canal colector de ventilación asociado a una cámara de recepción de líquido de control desemboca por encima de la superficie de fondo en la cámara de recepción de líquido de control, estando dispuesta entre la desembocadura y la superficie de fondo una instalación para la generación de una fuerza capilar para la circulación de líquido de control desde la cámara de recepción del líquido de control al canal colector de ventilación.
32. Soporte de muestras según la reivindicación 31, caracterizado porque la instalación de generación de la fuerza capilar está configurada como ranura de salida, cuya forma y área de la sección transversal posibilita una circulación del líquido de control a través de fuerza capilar.
33. Soporte de muestras según la reivindicación 32, caracterizado porque la ranura de salida está configurada como muesca realizada en una superficie lateral.
34. Soporte de muestras según una de las reivindicaciones 1 a 33, caracterizado porque las cámaras, los canales y otras estructuras están introducidos en el cuerpo de base desde al menos un lado de éste y porque al menos este lado del cuerpo de base está cubierto a prueba de líquido por un cuerpo de tapa.
35. Soporte de muestras según la reivindicación 34, caracterizado porque el cuerpo de base y el cuerpo de tapa están constituidos por plástico, vidrio, metal o silicio.
36. Soporte de muestras según la reivindicación 34 ó 35, caracterizado porque el cuerpo de tapa es una lámina.
37. Soporte de muestras según una de las reivindicaciones 1 a 36, caracterizado porque la al menos una cámara de reacción contiene reactivos secos.
38. Utilización de un soporte de muestras según una de las reivindicaciones anteriores, en el diagnóstico microbiológico, en la serología de grupos sanguíneos, en la química clínica, en la microanalítica y en la verificación de substancias activas, donde cada cámara de recepción de las muestras contiene reactivos diferentes.
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