ES2205218T3

ES2205218T3 - Inhibidores de la produccion de la s-cd23 y de la secrecion de factor de necrosis de tumores (fnt).

Info

Publication number: ES2205218T3
Application number: ES97923064T
Authority: ES
Inventors: Stuart Smithkline Beecham Pharmaceuticals Bailey; Derek Richard SmithKline Beecham BUCKLE; Andrew SmithKline Beecham FALLER; David Glynn SmithKline Beecham SMITH
Original assignee: SmithKline Beecham Ltd
Current assignee: SmithKline Beecham Ltd
Priority date: 1996-05-10
Filing date: 1997-05-06
Publication date: 2004-05-01
Anticipated expiration: 2017-05-06
Also published as: AR007060A1; JP2000510473A; TR199802271T2; DE69723984T2; WO1997043249A1; ZA973964B; ATE246673T1; GB9609794D0; CZ363198A3; CA2253590A1; KR20000010892A; NO985214D0; CO4990945A1; AU2897397A; NO985214L; DE69723984D1; EP0918747B1; NZ332628A; EP0918747A1; PL329855A1

Abstract

SE EXPONEN COMPUESTOS DE FORMULA (I) EN LA QUE: R ES HIDROXI, HIDROGENO, ALQUILO, ALQUENILO, ALQUINILO O ARILO; R 1 ES ARILMETILO O HETEROCICLILMETILO; R 2 ES ALQUILO, ALQUENILO, ARILO, CICLOALQUILO O CICLOALQUENILO; Y R 3 ES HID ROGENO, ALQUILO, ALQUENILO, ALQUINILO O ARILO; CON LA CONDICION DE QUE: SI R 1 ES FENILMETILO O NAFTILMETILO, ESTANDO EL GRUPO FENILO O NAFTILO SUSTITUIDO O NO SUSTITUIDO POR UN MAXIMO DE CINCO SUSTITUYENTES ELEGIDOS DEL GRUPO FORMADO POR HALOGENO, ALQUILO(C 1-6 ), ARIL - ALQUILO(C 1-6 , ALCOXI(C SU B,16 ), ALCOXI(C 1-6 ) - ALQUILO (C 1-6 ), HALOALQUILO(C 1-6 ), HIDROXI, NITRO, AMINO, MONO - Y DI - N - ALQUILA MINO(C 1-6 ), ACILAMINO, ACILOXI, CARBOXI, SALES CARBOXI, ESTERES DE CARBOXI, CARBAMOILO, MONO - Y DI - N ALQUILCARBAMOILO(C 1-6 ), ALCOXICARBONILO(C 1-6 ), ARILOXICARBONILO, UREIDO, GUANIDINO, SULFONILAMINO, AMINOSULFONILO, ALQUILTIO(C SUB,1-6 ), ALQUILO(C 1-6 ), SULFINIL - ALQUILSULFONILO(C S UB,1-6 ), HETEROCICLILO, HETEROCICLIL - ALQUILO(C 1-6 ) Y UNA CADENA DE ALQUILENO(C 3-5 ) QUE VINCULA DOS ATOMOS ADYACENTES DE CARBONO EN ANILLO, PARA FORMAR UN ANILLO CARBOCICLICO; ENTONCES R ES HIDROXI; SON UTILES EN EL TRATAMIENTO DE TRASTORNOS MEDIADOS POR S - CD23.

Description

Inhibidores de la producción de la s-CD23 y de la secreción de factor de necrosis de tumores (FNT).

Este invento se refiere a nuevos inhibidores de la formación de la CD23 humana soluble y a su utilización en el tratamiento de condiciones asociadas con la producción en exceso de la CD23 soluble (s-CD23), tales como una enfermedad autoinmune y una alergia. Los compuestos del invento son también inhibidores de la liberación del factor de necrosis de tumores (TNF).

La CD23 (la FceRII de receptores de IgE de baja afinidad, Blasto 2) es una proteína integral del tipo II de 45 kDa expresada en la superficie de una diversidad de células maduras, inclusive linfocitos B y T, macrófagos, células asesinas naturales, células de Langerhans, monocitos y plaquetas (Delespesse et al, Adv Immunol, 49 [1991] 149-191). También hay una molécula similar a la CD23 en eosinófilos (Grangette et al, J Immunol, 143 [1989] 3580-3588). La CD23 ha sido implicada en la regulación de la respuesta inmune (Delespesse et al, Immunol Rev, 125 [1992] 77-97). La CD23 humana existe como dos isoformas reguladas diferencialmente, a y b, que difieren solamente en los aminoácidos situados en el extremo N intracelular (Yokota et al, Cell, 55 [1988] 611-618). En seres humanos, la isoforma a constitutiva se halla solamente en linfocitos B, mientras que la isoforma del tipo b, inducible por IL4, se encuentra en todas las células capaces de expresar CD23.

Se sabe que la CD23 intacta, fijada a células (i-CD23) experimenta disociación desde la superficie celular, conduciendo a la formación de un cierto número de fragmentos solubles (s-CD23) bien definidos, que se producen como resultado de una compleja secuencia de sucesos proteolíticos, cuyo mecanismo todavía está mal comprendido (Bourget et al J Biol Chem, 296 [1994] 6927-6930]. Aunque todavía no ha sido probado esto, se postula que los fragmentos solubles principales (Mr 37, 33, 29 y 25 kDa) de estos sucesos proteolíticos, todos los cuales retienen al dominio de lectina situado en el extremo C, que es común para i-CD23, se presentan secuencialmente mediante formación inicial del fragmento de 37 kDA (Letellier et al, J Exp Med, 172 [1990] 693-700). Una trayectoria de disociación intracelular alternativa conduce a un fragmento estable de 16 kDa, que difiere en el dominio del extremo C de la i-CD23 (Grenier-Brosette et al, Eur J Immunol, 22 [1992] 1573-1577).

Se han atribuido diversas actividades a la i-CD23 fijada a membranas en seres humanos, habiéndose mostrado que todas estas actividades desempeñan un cierto papel en la regulación de la IgE. Las actividades particulares incluyen: a) presentación de antígenos, b) citotoxicidad para eosinófilos mediada por IgE, c) alojamiento de células B en centros germinales de nodos linfáticos y bazo, y d) regulación de la síntesis de IgE (Delespesse et al, Adv Immunol, 49, [1991] 149-191). Los tres fragmentos de CD23 soluble de mayor peso molecular (Mr 37, 33 y 29 kDa) tienen propiedades multifuncionales de citoquinas que manifiestan desempeñar un papel principal en la producción de IgE. Por lo tanto, la formación en exceso de s-CD23 ha sido implicada en la sobreproducción de IgE, que es la marca de contraste de enfermedades alérgicas, tales como asma extrínseca, rinitis, conjuntivitis alérgica, eczema, dermatitis atópica y anafilaxis (Sutton y Gould, Nature, 366, [1993] 421-428). Otras actividades biológicas, atribuidas a la s-CD23, incluyen la estimulación del crecimiento de células B y la inducción de la liberación de mediadores a partir de monocitos. Por lo tanto, se han observado elevados niveles de s-CD23 en el suero de pacientes que tienen leucemia linfocítica B-crónica (Sarfati et al, Blood, 71 [1988] 94-98) y en los fluidos sinoviales de pacientes que tienen artritis reumatoide (Chomarat et al, Arthritis and Rheumatism, 36 [1993] 234-242). El hecho de que hay un papel de la CD23 en la inflamación ha sido sugerido por cierto número de fuentes. En primer lugar, se ha informado que la s-CD23 se fija a receptores extracelulares, los cuales, cuando están activados, son implicados en sucesos de inflamación mediados por células. Por lo tanto, se informa que la s-CD23 activa directamente la liberación de TNF, IL-1 e IL-6 de monocitos (Armant et al, vol. 180, J. Exp. Med., 1005-1011 (1994)). Se ha informado que la CD23 interactúa con las moléculas de adhesión de integrina B2, CD11b y CD11c en monocitos/macrófagos (S. Lecoanet-Henchoz et al, Immunity, vol 3; 119-125(1995)) que desencadenan la liberación de NO_{2}^{-}, peróxido de hidrógeno y citoquinas (IL-1, IL-6 y TNF). Finalmente, la IL-4 o IFN induce la expresión de CD23 y su liberación en forma de s-CD23 por monocitos humanos. La ligación del receptor de CD23 fijado a membranas con complejos inmunes de IgE anti-IgE o anticuerpos monoclonales mAB anti-CD23 activa la producción de cAMP e IL-6 y la formación de tromboxano B2, demostrando un papel mediado por receptores de la CD23 en una inflamación.

A causa de estas diversas propiedades de la CD23, los compuestos que inhiban la formación de s-CD23 deberán tener las acciones dobles de a) intensificar la retroinhibición negativa de la síntesis de IgE manteniendo unos niveles de i-CD23 en la superficie de células B, y b) inhibir las actividades de citoquinas inmunoestimuladoras de fragmentos solubles con mayor peso molecular (Mr 37, 33 y 29 kDa) de la s-CD23. Además, la inhibición de la disociación de CD23 deberá mitigar la activación de monocitos y la formación de mediadores, que se inducen por s-CD23, reduciendo con ello la respuesta inflamatoria.

El TNF\alpha es una citoquina pro-inflamatoria que es puesta en libertad a partir de células estimuladas por disociación específica de una secuencia de señal de 76-aminoácidos en el precursor inactivo para generar la forma madura. Se ha informado que la disociación del TNF\alpha es llevada a cabo por una metaloproteasa (Gearing, A.J.H. et al, (1994) Nature 370, 555-557; McGechan, G.M. et al, (1994) Nature 370, 558-561; Mohler, K.M. et al, (1994) Nature 370, 218-220). Los compuestos de los que se ha informado que inhiben la disociación de TNF\alpha por la enzima procesadora de TNF se pueden describir ampliamente como inhibidores de metaloproteasas de matriz, particularmente de la clase del ácido hidroxámico.

El TNF\alpha es inducido en una diversidad de tipos de células como respuesta a bacterias, endotoxinas, diversos virus y parásitos, de manera tal que una de las funciones fisiológicas atribuidas a la TNF\alpha es una contribución a la respuesta inflamatoria a la infección aguda por bacterias, parásitos, etc. (Dinarello, C.A. (1992) Immunol. 4, 133-145). La sobreproducción de TNF\alpha ha sido implicada en estados de enfermedad tales como artritis reumatoide, choque séptico, enfermedad de Crohn y caquexia (Dinarello, 1992). La inhibición del procesamiento de TNF\alpha a la forma activa madura sería por lo tanto beneficiosa en el tratamiento de estos trastornos inflamatorios. El TNF\alpha puede contribuir también a la destrucción de tejido en una enfermedad autoinmune, aunque no es un factor iniciador en estas enfermedades. Confirmando la importancia del TNF\alpha en la artritis reumatoide, se ha mostrado que los anticuerpos de TNF\alpha reducen la gravedad de una enfermedad en estudios a corto plazo en modelos de artritis reumatoide (Elliott, M.J., et al (1993) Arthrit. Rheum. 12, 1681-1690; Elliott et al (1994) Lancet 344, 1125-1127).

La Solicitud de Patente Internacional Nº WO 96/02240 (de SmithKline Beecham plc) describe que los compuestos que inhiben la acción de metaloproteasas de matriz (p.ej. colagenasa, estromelisina y gelatinasa) son eficaces inhibidores de la liberación de CD23 soluble humana transfectada dentro de sistemas de cultivo celular de mamíferos.

La solicitud de Patente Internacional Nº WO/95/19956 (Bristish Biotech Pharmaceuticals Limited) describe compuestos que tienen actividad inhibidora de una metaloproteinasa de matriz, de fórmula (A):

1

en la que

X es un grupo -CO_{2}H o -CONHOH;

R^{1} es hidrógeno; alquilo(C_{1-6}); alquenilo(C_{2-6}); fenilo; fenilo sustituido; fenil-alquilo(C_{1-6}); fenil sustituido-
alquilo(C_{1-6}); heterociclilo; heterociclilo sustituido; heterociclilo-alquilo(C_{1-6}); heterociclilo sustituido-alquilo C_{1-6}; un grupo BSOnA- en el que n es 0, 1 ó 2, y B es hidrógeno o un grupo alquilo(C_{1-6}), fenilo, fenilo sustituido, heterociclilo, acilo C_{1-6}, fenacilo o fenacilo sustituido, y A representa alquilo(C_{1-6}); amino; amino protegido; acilamino; OH; SH; alcoxi(C_{1-6}); alquil(C_{1-6})-amino, dialquil(C_{1-6})-amino; alquil (C_{1-6})-tio; aril-alquilo(C_{1-6}); amino-alquilo(C_{1-6}); hidroxi-alquilo(C_{1-6}), mercapto-alquilo C_{1-6} o carboxi-alquilo C_{1-6}, donde el grupo amino-, hidroxi-, mercapto-, o carboxilo están protegidos opcionalmente o el grupo carboxilo, amidado; alquilo inferior sustituido por carbomilo, mono(alqilo inferior)-carbomilo; di(alquilo inferior)-carbomilo, di(alquilo inferior)-amino, o carboxi-alcano inferior-amino;

R_{2} es un alquilo(C_{1-6}); alquenilo(C_{1-6}); alquinilo(C_{2-6}); fenil-alquilo(C_{1-6}); heteroaril-alquilo(C_{1-6}); cicloalquil-alquilo(C_{1-6}) o cicloalquenil-alquilo(C_{1-6}), cualquiera de los cuales puede estar sustituido opcionalmente por uno o más sustituyentes seleccionados entre alquilo(C_{1-6}), -O-alquilo(C_{1-6}), -S-alquilo C_{1-6}, halo y ciano (-CN);

y R_{3} es el grupo característico de un \alpha aminoácido natural o no natural, en el que cualesquiera grupos funcionales pueden estar protegidos.

La solicitud de Patente inglesa Nº 9315222.1 (Bristis Technology Limited) describe compuestos que tienen actividad inhibidora de una metaloproteinasa de matriz, de fórmula (B):

2

en la que

\newpage

R_{2} representa un grupo R_{6}-A- donde A representa una cadena hidrocarbonada saturada o insaturada, recta o ramificada, divalente de hasta 6 átomos que puede estar interrumpida por un átomo de O o S, y R_{6} representa hidrógeno o un grupo cicloalquenilo, ciloalquilo, o fenilo opcionalmente sustituido.

La Solicitud de Patente del Reino Unido Nº 9601041.8 (de SmithKline Beecham plc) describe que ciertos compuestos de fórmula (I) son eficaces inhibidores de la liberación de CD23 soluble humana transfectada dentro de sistemas de cultivo celular de mamíferos:

3

De acuerdo con el presente invento, se crea un compuesto de la precedente fórmula (I), en la que:

R es hidroxi, hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo o arilo;

R^{1} es metilo sustituido por un sistema de anillo condensado arilo o metilo sustituido por un amillo heterocíclico;

R^{2} es alquilo, alquenilo, arilo, cicloalquilo o cicloalquenilo; y

R^{3} es hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo o arilo;

con la condición de que;

si R^{1} es naftilmetilo, en que el grupo naftilo está sin sustituir o sustituido con hasta cinco sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halógeno, alquilo(C_{1-6}), aril-alquilo(C_{1-6}), alcoxi(C_{1-6}), alcoxi(C_{1-6})-alquilo(C_{1-6}), halo-alquilo(C_{1-6}), hidroxi, nitro, amino, mono- y di-N-alquil(C_{1-6})-amino, acilamino, aciloxi, carboxi, sales de carboxi, ésteres de carboxi, carbamoílo, mono- y di-N-alquil(C_{1-6})-carbamoílo, alcoxi(C_{1-6})-carbonilo, ariloxi-carbonilo, ureido, guanidino, sulfonilamino, aminosulfonilo, alquil(C_{1-6})-tio, alquil(C_{1-6})-sulfinilo, alquil(C_{1-6})-sulfonilo, heterociclilo, heterociclil-alquilo (C_{1-6}), y una cadena alquileno(C_{3-5}) que enlaza a dos átomos de carbono de anillos adyacentes para formar un anillo carbocíclico;

entonces R es hidroxi.

Los grupos alquilo, alquenilo y alquinilo, aquí mencionados, incluyen grupos lineales y ramificados que contienen hasta seis átomos de carbono y están sustituidos opcionalmente con uno o más grupos seleccionados entre el grupo que consiste en arilo, heterociclilo, alquil(C_{1-6})-tio, alcoxi(C_{1-6}), aril-alcoxi(C_{1-6}), aril-alquil(C_{1-6})-tio, amino, mono o di-alquil(C_{1-6})-amino, cicloalquilo, cicloalquenilo, carboxi y sus ésteres, hidroxi y halógeno.

Los grupos cicloalquilo y cicloalquenilo aquí mencionados incluyen grupos que tienen entre tres y ocho átomos de carbono en el anillo y están opcionalmente sustituidos tal como se describe aquí con anterioridad para los grupos alquilo, alquenilo y alquinilo.

Cuando se utiliza en el presente contexto, el término "arilo" significa anillos únicos y condensados que contienen apropiadamente de 4 a 7, preferiblemente 5 ó 6, átomos de anillo en cada anillo, cada uno de cuyos anillos puede estar sin sustituir o sustituido con, por ejemplo, hasta tres sustituyentes. Un sistema de anillos condensados puede incluir anillos alifáticos y solamente necesita incluir un anillo aromático.

Los grupos arilo apropiados incluyen fenilo y naftilo tal como 1-naftilo o 2-naftilo.

Apropiadamente, cualquier grupo arilo, inclusive fenilo y naftilo, puede estar opcionalmente sustituido con hasta cinco, preferiblemente hasta tres sustituyentes. Sustituyentes apropiados incluyen halógeno, alquilo(C_{1-6}), arilo, aril-alquilo(C_{1-6}), alcoxi(C_{1-6}), alcoxi(C_{1-6})-alquilo(C_{1-6}), halo-alquilo(C_{1-6}), aril-alcoxi(C_{1-6}), hidroxi, nitro, ciano, azido, amino, mono- y di-N-alquil(C_{1-6})amino, acilamino, arilcarbonilamino, aciloxi, carboxi, sales de carboxi, ésteres de carboxi, carbamoílo, mono- y di-N-alquil(C_{1-6})-carbamoílo, alcoxi(C_{1-6})-carbonilo, ariloxicarbonilo, ureido, guanidino, sulfonilamino, aminosulfonilo, alquil(C_{1-6})-tio, alquil(C_{1-6})-sulfinilo, alquil(C_{1-6})-sulfinilo, heterociclilo y heterociclil-alquilo(C_{1-6}). Además, dos átomos adyacentes de carbono de anillo pueden estar enlazados por una cadena de alquileno(C_{3-5}) para formar un anillo carbocíclico.

Cuando se utilizan en el presente contexto, los términos "heterociclilo" y "heterocíclico" incluyen apropiadamente, a menos que se defina de otro modo distinto, anillos aromáticos y no aromáticos, únicos y condensados, que contienen apropiadamente hasta cuatro heteroátomos en cada anillo, cada uno de los cuales se selecciona entre oxígeno, nitrógeno y azufre, cuyos anillos pueden estar sin sustituir o sustituidos con, por ejemplo, hasta tres sustituyentes. Cada anillo heterocíclico tiene apropiadamente de 4 a 7, preferiblemente 5 ó 6, átomos de anillo. Un sistema heterocíclico de anillos condensados pueden incluir anillos carbocíclicos y necesita solamente incluir un anillo heterocíclico.

Preferiblemente, un sustituyente para un grupo heterociclilo se selecciona entre halógeno, alquilo(C_{1-6}),aril-alquilo(C_{1-6}), alcoxi(C_{1-6}), alcoxi(C_{1-6})-alquilo(C_{1-6}),halo-alquilo(C_{1-6}), hidroxi, amino, mono- y di-N-alquil(C_{1-6})-amino, acilamino, sales de carboxi, ésteres de carboxi, carbamoílo, mono- y di- N-alquil(C_{1-6})-carbonilo, ariloxi-carbonilo, alcoxi(C_{1-6})-carbonil-alquilo(C_{1-6}), arilo, grupos oxi, ureido, guanidino, sulfonilamino, aminosulfonilo, alquil(C_{1-6})-tio, alquil(C_{1-6})-sulfinilo, alquil(C_{1-6})-sulfonilo, heterociclilo y heterociclil-alquilo(C_{1-6}).

En un aspecto particular del invento, R es hidroxi; R^{1} es 1- o 2-naftilmetilo; y/o R^{2} es bencilo o t-butilo; y/o R^{3} es hidrógeno o metilo.

En otro aspecto más del invento, cada uno de R a R^{3} se selecciona entre el grupo que consta de los significados que se les atribuyen en los Ejemplos seguidamente presentados. Preferiblemente, el compuesto de fórmula (I) del invento se selecciona entre el grupo que consta de los compuestos descritos en los Ejemplos presentados seguidamente.

De acuerdo con otro aspecto más, el presente invento crea el uso de un compuesto de fórmula (I) para la producción de un medicamento destinado al tratamiento o a la profilaxis de trastornos tales como alergia, trastornos inflamatorios y una enfermedad autoinmune en que está implicada la sobreproducción de s-CD23.

El invento crea también una composición farmacéutica para el tratamiento o la profilaxis de trastornos tales como alergia, trastornos inflamatorios y una enfermedad autoinmune en que está implicada la sobreproducción de s-CD23, que comprende un compuesto de fórmula (I) y opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable para el mismo.

Ha de entenderse que las sales farmacéuticamente aceptables, los solvatos y otros derivados farmacéuticamente aceptables del compuesto de fórmula (I) se incluyen también en el presente invento.

Las sales de compuestos de fórmula (I) incluyen por ejemplo sales por adición de ácidos que se derivan de ácidos inorgánicos u orgánicos, tales como hidrocloruros, hidrobromuros, hidroyoduros, p-toluenosulfonatos, fosfatos, sulfatos, acetatos, trifluoroacetatos, propionatos, citratos, maleatos, fumaratos, malonatos, succinatos, lactatos, oxalatos, tartratos y benzoatos.

También se pueden formar sales con bases. Tales sales incluyen las sales que se derivan de bases inorgánicas u orgánicas, por ejemplo sales de metales alcalinos tales como sales de sodio o potasio, y sales de aminas orgánicas tales como sales de morfolina, piperidina, dimetilamina o dietilamina.

Se ha descubierto con sorpresa que los compuestos del presente invento son potentes y selectivos inhibidores del procesamiento de CD23 y de la liberación de TNF, mientras que exhibe una actividad inhibidora de colagenasa reducida en comparación con los compuestos antes mencionados de la técnica anterior.

Los compuestos del invento se pueden preparar mediante uso de cualquier método convencional apropiado, por ejemplo por analogía a los métodos descritos en la publicación de Patente Británica GB 2 268 934.

Correspondientemente, un aspecto adicional del invento crea un procedimiento para preparar un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente en esta memoria descriptiva, cuyo procedimiento comprende:

(a) desproteger un compuesto de fórmula (II):

4

en la que R hasta R^{3} son tal como se definen anteriormente en esta memoria descriptiva, y X es un grupo protector tal como bencilo o trimetilsililo, o

(b) hacer reaccionar un compuesto de fórmula (III):

5

en la que R hasta R^{3} son tal como se definen anteriormente en esta memoria descriptiva, y cualquier grupo hidroxi está opcionalmente protegido, con hidroxilamina o una sal de la misma, o

c) hacer reaccionar un compuesto de fórmula (IV):

6

(d) convertir un compuesto de fórmula (I) en un diferente compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente en esta memoria descriptiva.

Los compuestos de fórmulas (II) y (III), en las que R es hidroxi o hidroxi protegido, y los compuestos de fórmula (IV), en la que R^{1} es metilo sustituido por un anillo heterociclilo, son nuevos y constituyen un aspecto adicional del invento.

Los compuestos de fórmula (II) se pueden preparar a partir de compuestos de fórmula (III) por reacción con una hidroxilamina protegida. Los compuestos de fórmula (III) que tienen uno o más grupos hidroxi protegidos, se pueden convertir por hidrólisis en un correspondiente compuesto de fórmula (III) sin proteger.

Los apropiados grupos protectores para un ácido hidroxámico son bien conocidos en la técnica e incluyen bencilo, trimetilsililo, t-butilo y t-butildimetilsililo.

Los apropiados grupos protectores para un ácido carboxílico son bien conocidos en la técnica e incluyen t-butilo, bencilo y metilo.

Ciertos compuestos de fórmula (III) se pueden preparar por reducción de un compuesto de fórmula (V):

7

en la que R^{1} hasta R^{3} son como se definen anteriormente en esta memoria descriptiva, Y es un grupo protector tal como t-butilo y Z es un grupo tal que ZCH_{2}- es R.

Los compuestos de fórmula (III) se pueden preparar también haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (VI):

8

en la que R, R^{1} e Y son como se definen anteriormente en esta memoria descriptiva, con un compuesto de fórmula (VII):

9

en la que R^{2} y R^{3} son como se definen anteriormente en esta memoria descriptiva, o un derivado activado del mismo.

Los compuestos de fórmula (III) se pueden preparar también haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (VIII):

10

en la que R^{1} hasta R^{3} son como se definen anteriormente en esta memoria descriptiva, con un tiol para dar un compuesto de fórmula (III) en la que R es metilo sustituido con alquiltio, ariltio, aralquiltio o heterocicliltio.

Los compuestos de fórmula (VIII) se pueden preparar haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (IX):

11

en la que R^{1} e Y son como se definen anteriormente en esta memoria descriptiva, con un compuesto de fórmula (VII) como se define anteriormente en esta memoria descriptiva, o un derivado activado del mismo, seguido por hidrólisis para eliminar el grupo protector Y.

Un aspecto específico del invento crea un procedimiento para preparar un compuesto de fórmula (I) como se define anteriormente en esta memoria descriptiva, en la que R es hidroxi, cuyo procedimiento comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (X):

12

en la que R^{1} hasta R^{3} son tal como se definen anteriormente en esta memoria descriptiva, y R^{4} y R^{5} son iguales o diferentes y cada uno de ellos es hidrógeno o un grupo protector de hidroxi, o R^{4} y R^{5} en común forman un grupo protector de hidroxi divalente, con hidroxilamina o una sal de la misma.

Los compuestos de fórmula (X) en la que R^{4} y R^{5} son hidrógeno, se pueden preparar por desprotección (p.ej. hidrólisis y/o deseterificación) de un correspondiente compuesto en el que R^{4} y R^{5} no son hidrógeno.

Los compuestos de fórmula (X) en la que R^{4} y R^{5} no son hidrógeno se pueden preparar haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (XI):

13

en la que R^{1}, R^{4} y R^{5} son como se definen anteriormente en esta memoria descriptiva, con un compuesto de fórmula (VII) como se define anteriormente en esta memoria descriptiva.

Compuestos preferidos de fórmula (IX) se pueden preparar haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (XII):

14

en la que R^{1} es como se define anteriormente en esta memoria descriptiva, con dimetoxipropano.

Los compuestos de fórmula (XII) se pueden preparar haciendo reaccionar un diéster (tal como el éster dimetílico o dietílico) de ácido 2-hidroxi-succínico con un compuesto de fórmula R^{1}X' en presencia de una base fuerte tal como diisopropil-amiduro de litio, en que X' es un grupo lábil tal como bromo o yodo, e hidrolizando luego el compuesto resultante para eliminar los grupos de éster.

Los isómeros, inclusive los estereoisómeros, de los compuestos del presente invento se pueden preparar en forma de mezclas de tales isómeros o como isómeros individuales. Los isómeros individuales se pueden preparar por cualquier método apropiado, por ejemplo se pueden preparar estereoisómeros individuales mediante síntesis química estereoespecífica, partiendo de substratos quirales o separando mezclas de diastereoisómeros utilizando métodos conocidos. En un aspecto preferido, el invento crea compuestos de fórmula (IA):

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Se prefiere que los compuestos sean aislados en forma sustancialmente pura.

Tal como se expone en el presente documento, un inhibidor de la formación de CD23 humana soluble tiene útiles propiedades médicas. Preferiblemente, los compuestos activos se administran como composiciones farmacéuticamente aceptables.

Las composiciones están destinadas preferiblemente a su administración por vía oral. Sin embargo, pueden estar destinadas a otros modos de administración, por ejemplo en la forma de una nebulización, un aerosol u otro método convencional para inhalación, para tratar trastornos del tracto respiratorio; o para administración por vía parenteral a pacientes que padecen de fallo cardíaco. Otros modos alternativos de administración incluyen la administración por vía sublingual o transdérmica.

Las composiciones pueden estar en la forma de comprimidos, cápsulas, polvos, gránulos, pastillas, supositorios, polvos reconstituibles, o preparaciones líquidas, tales como soluciones o suspensiones parenterales estériles u orales.

Con el fin de obtener una coherencia de administración, se prefiere que una composición del invento esté en la forma de una dosis unitaria.

Las formas de presentación de dosis unitarias para administración por vía oral pueden ser tabletas y cápsulas, y pueden contener excipientes convencionales tales como agentes aglutinantes, por ejemplo jarabe, goma acacia, gelatina, sorbitol, tragacanto o poli(vinilpirrolidona); materiales de relleno, por ejemplo lactosa, azúcar, almidón de maíz, fosfato de calcio, sorbitol o glicina; lubricantes para formación de tabletas, por ejemplo estearato de magnesio; desintegrantes, por ejemplo almidón, poli(vinilpirrolidona), almidón-glicolato de sodio o celulosa microcristalina; o agentes humectantes farmacéuticamente aceptables, tales como lauril-sulfato de sodio.

Las composiciones sólidas para vía oral se pueden preparar por métodos convencionales de mezclar, rellenar o formar tabletas. Se pueden utilizar repetidas operaciones de mezcladura para distribuir el agente activo por toda la masa de estas composiciones empleando grandes cantidades de materiales de relleno. Tales operaciones son desde luego convencionales en la técnica. Las tabletas se pueden revestir de acuerdo con métodos bien conocidos en la práctica farmacéutica normal, en particular con un revestimiento entérico.

Las preparaciones líquidas orales pueden estar en la forma de, por ejemplo, emulsiones, jarabes o elixires, o se pueden presentar como un producto seco para su reconstitución con agua u otro vehículo apropiado antes del uso. Dichas preparaciones líquidas pueden contener aditivos convencionales tales como agentes suspendedores, por ejemplo sorbitol, jarabe, metil-celulosa, gelatina, hidroxietil-celulosa, carboximetil-celulosa, gel de estearato de aluminio, grasas comestibles hidrogenadas; agentes emulsionantes, por ejemplo lecitina, monooleato de sorbitán, o goma acacia; vehículos no acuosos (que pueden incluir aceites comestibles), por ejemplo aceite de almendras, aceite de coco fraccionado, ésteres oleosos tales como ésteres de glicerol, propilen-glicol o alcohol etílico; conservantes, por ejemplo
p-hidroxi-benzoato de metilo o propilo o ácido sórbico; y, si se desea, convencionales agentes saboreantes o colorantes.

Para la administración por vía parenteral, se preparan formas de dosificación unitaria fluidas utilizando el compuesto y un vehículo estéril, y, dependiendo de la concentración utilizada, este compuesto se puede suspender o disolver en el vehículo. Para preparar soluciones, el compuesto se puede disolver en agua para inyección y se puede esterilizar en filtro antes de cargarlo en un vial o una ampolla de carácter adecuado y de cerrar herméticamente. Ventajosamente, se pueden disolver en el vehículo coadyuvantes tales como un anestésico local, un conservante y agentes tamponadores. Para aumentar la estabilidad, la composición se puede congelar después de haberla cargado dentro del vial y el agua se puede eliminar bajo vacío. Las suspensiones parenterales se preparan sustancialmente de la misma manera, excepto que el compuesto se suspende en el vehículo, en lugar de ser disuelto, y la esterilización no se puede conseguir por filtración. El compuesto se puede esterilizar por exposición a óxido de etileno, antes de suspenderlo en el vehículo estéril. Ventajosamente, se incluye en la composición un agente tensioactivo o humectante para facilitar la distribución uniforme del compuesto.

Las composiciones de este invento se pueden presentar también apropiadamente para su administración al tracto respiratorio como un preparado para inhalación nasal o bien un aerosol o una solución para un nebulizador, o como un polvo microfino para insuflación, a solas o en combinación con un vehículo inerte tal como lactosa. En dicho caso, las partículas del compuesto activo tienen apropiadamente unos diámetros menores que 50 micrómetros, con preferencia menores que 10 micrómetros, por ejemplo unos diámetros en el margen de 1-50 micrómetros, 1-10 micrómetros o
1-5 micrómetros. Cuando ello sea apropiado, se pueden incluir pequeñas cantidades de otros agentes antiasmáticos y broncodilatadores, por ejemplo aminas simpatomiméticas tales como isoprenalina, isoetarina, salbutamol, fenilefrina y efedrina; derivados de xantina, tales como teofilina y aminofilina, y corticoesteroides tales como prednisolona y estimulantes adrenales tales como ACTH.

Las composiciones pueden contener de 0,1% a 99% en peso, preferiblemente de 10-60% en peso, del material activo, dependiendo del método de administración. Un margen preferido para administración inhalada es el de
10-99%, especialmente de 60-99%, por ejemplo 90, 95 ó 99%.

Las formulaciones de polvos microfinos se pueden administrar apropiadamente en un aerosol como una dosis medida o por medio de un apropiado dispositivo activado por la respiración.

Las apropiadas formulaciones de aerosoles de dosis medidas comprenden agentes propulsores convencionales, disolventes conjuntos, tales como etanol, agentes tensioactivos tales como alcohol oleílico, agentes lubricantes tales como alcohol oleílico, agentes desecantes tales como sulfato de calcio y agentes modificadores de la densidad, tales como cloruro de sodio.

Las soluciones apropiadas para un nebulizador son soluciones esterilizadas isotónicas, opcionalmente tamponadas, por ejemplo a un pH entre 4 y 7, que contienen hasta 20 mg/ml de un compuesto, pero más generalmente de 0,1 a 10 mg/ml, destinadas a utilizarse con un equipo normalizado de nebulización.

Una cantidad eficaz dependerá de la eficacia relativa de los compuestos del presente invento, de la gravedad de la enfermedad que se esté tratando y del peso del paciente. Apropiadamente, una forma de dosificación unitaria de una composición del invento puede contener de 0,1 hasta 1.000 mg de un compuesto del invento (de 0,001 hasta 10 mg por vía de inhalación) y más usualmente de 1 a 500 mg, por ejemplo de 1 a 25 o de 5 a 500 mg. Dichas composiciones se pueden administrar de 1 a 6 veces por día, más usualmente de 2 a 4 veces por día, de una manera tal que la dosis diaria sea desde 1 mg hasta 1 g para un adulto humano de 70 kg de peso, y más particularmente de 5 a 500 mg. Esto se encuentra en el margen de desde aproximadamente 1,4 x 10^{-2} mg/kg/día hasta 14 mg/kg/día, y más particularmente en el margen de desde aproximadamente 7 x 10^{-2} mg/kg/día hasta 7 mg/kg/día.

Los siguientes Ejemplos ilustran el invento, pero no lo limitan de ninguna manera.

Métodos de ensayo biológicos

Procedimiento 1

La capacidad de los compuestos en ensayo para inhibir la liberación de CD23 soluble se investigó mediante utilización del siguiente procedimiento.

Ensayo de actividad de disociación de CD23 de membrana celular RPMI 8866

Membranas de plasma procedentes de células RPMI 8866, una línea de células B transformadas por el virus de Epstein-Barr humano (Sarfati et al., Immunology 60 [1987] 539-547), que expresan altos niveles de CD23, se purifican utilizando un método de extracción acuosa. Las células resuspendidas en un tampón de homogeneización (HEPES 20 mM, pH 7,4, NaCl 150 mM, MgCl_{2} 1,5 mM, DTT 1mM) se rompen por cavitación con N_{2} en una bomba de Parr y la fracción de membranas de plasma, mezclada con otras membranas, se recupera por centrifugación a 10.000Xg. El sedimento ligero se vuelve a suspender en fosfato de potasio 0,2 M, pH 7,2, utilizando 2 ml por 1-3 g de células húmedas, y se desecha el sedimento nuclear. Las membranas se fraccionan adicionalmente repartiendo entre Dextrano 500 (6,4% p/p) y polietilen-glicol (PEG) 5000 (6,4% p/p) (ref.), en sacarosa 0,25 M en un total de 16 g por 10-15 mg de proteínas de membrana [Morre and Morre. Bio Techniques 7, 946-957(1989)]. Las fases se separan por breve centrifugación a 1.000Xg y la fase (superior) de PEG se recoge, se diluye a 3-5 veces con tampón fosfato de potasio 20 mM de pH 7,4, y se centrifuga a 100.000Xg para recuperar membranas en esa fase. El sedimento se vuelve a suspender en una solución salina tamponada con fosfato y consta de membranas de plasma enriquecidas a 3-4 veces así como de algunas otras membranas celulares (p.ej. lisosomas, Golgi). Las membranas se reparten en partes alícuotas y almacenan a -80ºC. El fraccionamiento con Dextrano al 6,6%/PEG proporciona membranas de plasma enriquecidas en 10 veces.

Las membranas fraccionadas se incuban a 37ºC durante unos períodos de tiempo hasta de 4 horas para producir fragmentos de CD23, que se separan a partir de las membranas por filtración en placas de filtro Durapore de 0,2 micrómetros (Millipore), después de sofocar la tanda de ensayo con la Preparación 1 5 \muM procedente de P30994. Se determina la s-CD23 liberada desde la membrana utilizando el estuche EIA de The Binding Site (Birmingham, Reino Unido) o uno similar, utilizando el mAb (anticuerpo monoclonal) MHM6 anti-CD23 [Rowe et al., Int. J. Cancer, 29, 373-382 (1982)] u otro mAB anti-CD23 como el anticuerpo de captura en un EIA en emparedado. La cantidad de CD23 soluble producida por 0,5 \mug de proteína de membranas en un volumen total de 50 \mul de solución salina tamponada con fosfato, se mide por EIA y se compara con la cantidad producida en presencia de diversas concentraciones de inhibidores.

Se preparan los inhibidores en soluciones en agua o dimetilsulfóxido (DMSO) y la concentración final de DMSO no es mayor que 2%. Se determinan las CI_{50} mediante adaptación de curvas como la concentración a la que se observa una inhibición del 50% de la producción de s-CD23 con relación a la diferencia en cuanto a s-CD23 entre testigos incubados sin inhibidor.

Procedimiento 2

La capacidad de los compuestos en ensayo para inhibir la colagenasa se investigó utilizando el siguiente procedimiento.

Ensayo de inhibición de colagenasa

Se determinó la potencia de los compuestos para actuar como inhibidores de colagenasa mediante el método de Cawston y Barrett (Anal. Biochem. 99, 340-345, 1979), que se incorpora a la presente por su referencia, según el cual una solución 1 mM del inhibidor que se estaba ensayando, o diluciones de la misma, se incubó a 37ºC durante 18 h con colágeno y colagenasa recombinante humana, procedente de fibroblastos sinoviales clonados, expresados y purificados a partir de E. Coli, (tamponada con Tris 150 mM, pH 7,6, que contiene cloruro de calcio 15 mM, Brij 35 al 0,05%, cloruro de sodio 200 mM y aziduro de sodio al 0,02%). El colágeno era ^{3}H-colágeno bovino del tipo I acetilado, preparado por el método de Cawston y Murphy (Methods in Enzymology 80, 711, 1981). Las muestras se centrifugaron para sedimentar el colágeno no digerido y se retiró una parte alícuota del material sobrenadante radiactivo para analizarla en un contador de escintilación como una medida de la hidrólisis. Se comparó la actividad de colagenasa en presencia de inhibidor 1 mM, o una dilución del mismo, con la actividad en un testigo desprovisto de inhibidor, y los resultados se informaron como la concentración que afecta a un 50% de la colagenasa (CI_{50}).

Procedimiento 3

Se investigó la capacidad de los compuestos de ensayo para inhibir la liberación de TNF, utilizando el siguiente procedimiento.

Ensayo en cuanto a inhibición de la liberación de TNF\alpha a partir de monocitos humanos estimulados por endotoxina de lipopolisacáridos (LPS)

Monocitos humanos, cultivados en el medio RPMI 1640 suplementado con 10% de suero de ternero fetal, se centrifugan a 1.000Xg durante 5 min y luego se vuelven a suspender en el medio a razón de 2 x 10^{6} células/ml. La suspensión de células se reparte en partes alícuotas en placas de 24 pocillos, a razón de 1 ml por pocillo. Los compuestos a ensayar se disuelven en dimetilsulfóxido (DMSO) puro y se añaden a un cultivo, que tiene la concentración final de DMSO de 0,1%. Los compuestos se añaden a células situadas en pocillos en triplicado. La liberación de TNF\alpha es estimulada por adición de LPS a las células en una concentración final de 200 ng/ml. Se ajustan también en tandas en triplicado los cultivos testigos apropiados. Las placas se incuban durante 18-20 horas a 37ºC, con CO_{2} al 5%, luego se centrifugan a 1.000Xg durante 5 min. Se utiliza un ELISA específico para TNF\alpha humano (SmithKline Beecham) para medir los niveles de TNF en los materiales sobrenadantes de cultivo exentos de células.

Ejemplo 1 Preparación de N'-[3S-hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-naftilmetil)succinil]-S-terc.-leucina-N-metilamida

a) 2S-Hidroxi-3R-(2-naftilmetil)succinato de dimetilo

16

A una solución de diisopropilamina (3,1 ml, 22 mmol) en tetrahidrofurano (30 ml) a -10ºC se le añadió gota a gota n-butil-litio (1,6 M en hexano, 13,75 ml, 22 mmol). La solución se agitó durante 30 min, luego se enfrió a -70ºC y se añadió gota a gota una solución de (S)-malato de dimetilo (1,6 g, 10 mmol) en tetrahidrofurano (20 ml). Después de 90 min se añadió bromuro de 2-naftilmetilo (4,42 g, 22 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 2 h y luego se vertió en ácido clorhídrico 2 N, y el producto se extrajo con dietil-éter (3 x 50 ml). Los extractos combinados se lavaron con agua (30 ml), con hidrogenocarbonato de sodio (30 ml) y con salmuera, y se secaron (sobre MgSO_{4}). La filtración y la evaporación dieron un aceite, el cual se cromatografió sobre sílice. La elución en gradiente (0-50% de éter/hexano) dio (1,08 g) como un sólido de color blanco, p.f. 91-92ºC.

^{1}H NMR (CDCl_{3}) 3.13-3.47 (3H, m), 3,26 (1H, d, J = 7Hz). 3,69 (3H, s), 3.74 (3H, s), 4.12 (1H, dd, J = 7, 2.5 Hz), 7.38-7,50 (3H, m), 7.73 (1H, s). 7.81 (4H, d ancho, J = 8Hz).

b) N'-[2R-(2,2-Dimetil-4-oxo-1,3-dioxalan-5S-il)-3-(2-naftil)propanoil]-S-terc.-leucina-N-metilamida

17

A una solución de 2S-hidroxi-3R-(2-naftilmetil)succinato de dimetilo (2,0 g, 6,6 mmol) en dioxano (15 ml) y agua (30 ml) se le añadió hidróxido de potasio (1,11 g). La solución de color amarillo se calentó a reflujo durante 3 h, se acidificó utilizando una resina Dowex 50 x 8 y se concentró. El sólido de color rosado resultante se disolvió en dimetilformamida (50 ml) y se añadieron 2,2-dimetoxi-propano (50 ml) y cloruro de tosilo (0,1 g). Después de haber agitado durante 18 h la solución se concentró. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con una solución de hidrogenocarbonato de sodio, se secó (sobre MgSO_{4}) y se concentró para dar una espuma de color amarillo (1,664 g). Ésta se disolvió en dimetilformamida seca (10 ml) y se añadieron hidrato de 1-hidroxi-benzotriazol (367 mg), terc.-leucina-metilamida (218 mg, 1,5 mmol) e hidrocloruro de 1-(3-dimetilamino-propil)-3-etil-carbodiimida (312 mg, 1,6 mmol). La solución se agitó durante 18 h y luego se concentró. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con ácido cítrico (al 10%, 2 x 20 ml), con agua (20 ml), con una solución de hidrogenocarbonato de sodio (20 ml) y con salmuera (10 ml), y se secó (sobre MgSO_{4}). La eliminación del disolvente y la cromatografía del residuo sobre sílice (en dietil-éter) dio N'-[2R-(2,2-dimetil-4-oxo-1,3-dioxalan-5S-il)-3-(2-naftil)propanoil]-S-terc.-leucina-N-metilamida (434 mg) como un polvo de color blanco de p.f. 118-9ºC.

^{1}H NMR (d_{6} DMSO) 0.84 (9H, s), 1.49 (3H, s), 1,59 (3H, s), 2.33 (3H, d, J = 4.5 Hz), 3.0-3.24 (2H, m), 4.16 (1H, d, J = 10Hz), 4.55 (1H, d, J = 8.5Hz), 7.33 (1H, d, J = 7Hz), 7.4-7.5 (2H, m), 7.65 (1H, s), 7.67-7.86 (5H, m).

c) N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-naftilmetil)-succinil]-S-terc.-leucina-N-metilamida

18

Se agitó durante 24 h una solución de N'-[2R--(2,2-dimetil-4-oxo-1,3-dioxalan-5S-il)-3-(2-naftil)propanoil]-S-terc.-leucina-N-metilamida (410 mg, 0,9 mmol), hidrocloruro de hidroxilamina (259 mg, 3,7 mmol) y N-metil-morfolina (0,41 ml, 3,7 mmol) en metanol (5 ml) se agitó durante 24 h. La solución se concentró, se trituró con dietil-éter, con agua y luego se filtró para dar N'-[3S--hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-naftilmetil)succinil]-S--terc.-leucina-N-metilamida como un sólido de color blanco (257 mg) de p.f. 189-90ºC.

^{1}H NMR (d_{6} DMSO) 0.85(9H,s), 2.25 (3H, d, J = 4.5 Hz), 2.74 (1H, dd, J = 13,4, 5 Hz), 2.94 (1H, t ap., J = 11Hz), 3.07-3.09 (1H, m), 3.86 (1H. t. J = 7.5 Hz), 4.09 (1H,d, J = 10Hz), 5,55 (1H, d, J = 8 Hz), 7.29 (1H, d, J 8 Hz), 7.4-7,51 (3H. m:), 7.51 (1H, s), 7.75-7.85 (4H. m). 8. 89 (1H, s) 10,67 (1H, s).

Se prepararon los siguientes compuestos utilizando el método descrito en el Ejemplo 1:

Ejemplo 2 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-naftilmetil)-succinil]-S-fenilalanina-N-metilamida

19

p.f. 168-70ºC, ^{1}H NMR (d_{6} DMSO) 2.28 (3H, d, J = 4 Hz), 2.77-2.96 (5H, m), 3,94 (1H, t, J = 4Hz), 4.27 (1H,q. J = 5Hz), 5.77 (1H, d, J = 6 Hz), 7.1-7.87 (13H, m), 7.98 (1H, d, J = 7,5Hz), 8.93 (1H, s) 10.74 (1H, s).

Ejemplo 3 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-naftilmetil)-succinil]-S-fenilalaninamida

20

p.f. 175-7ºC. ^{1}H NMR (d_{6} DMSO) 2.75-3.0 (4H, m), 3.01 (1H, dd. J = 13.5, 5 Hz).3.93(1H.t, J = 6Hz),4.26 (1H,dd, J = 8, 5.5 Hz), 5.82 (1H, d, J-6Hz), 7.02 (1H, s ancho), 7.16 (5H. s), 7.22 (2H, d, J = 10 Hz), 7.41-7.50 (2H, m), 7.55 (1H, s ancho), 7.75-7.86 (3H, m), 7.95 (1H d, J = 8 Hz), 8.91 (1H, s) 10.70 (1H, a).

Ejemplo 4 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-fenil-bencil)-succinil]-S-fenilalanina-N-metilamida MNa^{+} 498 Ejemplo 5 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-benzotiofenilmetil)-succinil]-S-fenilalaninamida

21

p.f. 189-190ºC. ^{1}H NMR, (d_{6} DMSO) 2.8-3.14 (5H, m), 4,00 (1H, t, J = 6.5 Hz), 4.31 (1H, dd, J = 5.3 Hz), 5.85 (1H, d, J = 6. 5 Hz). 6.97 (1H, s), 7.06 (1H, s ancho), 7.15 (5H, S), 7.24-7.32 (2H. m), 7.34 (1H, s ancho), 7.67 (1H. d, J = 7 Hz), 7.84 (1H, d, J = 7 Hz), 7.99 (1H, d, J = 8Hz), 8.93 (1H, d, J = 2 Hz), 10.70 (1H. d, J = 2 Hz).

Ejemplo 6 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(3-benzotiofenilmetil)-succinil]-S-fenilalanina-N-metilamida

22

p.f. 148-150ºC; MH^{+} = 456; MNa^{+} = 478.

Ejemplo 7 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2-R-(2-benzofuranilmetil)-succinil]-S-fenilalanina-N-metilamida

23

p.f. 160-161ºC. ^{1}H NMR, (d_{6} DMSO) 2.43 (3H, d, J = 4 Hz), 2.75-3.10 (5H, m), 4.01 (1H, t, J = 6 Hz), 4.33 (1H, q. Ap. J = 5.5 Hz), 5.86 (1H. d, J = 6 Hz), 6.40 (1H, s), 7.02-7.25 (7H, m), 7.44-7.50 (2H, m), 7.66 (1H, q, J = 4 Hz),8.07 (1H, d, J = 6 Hz), 8.94 (1H, s), 10.75 (1H, s).

Ejemplo 8 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2-R-(7-metoxi-benzo-furanilmetil)succinil]-S-fenilalanina-N-metilamida

24

p.f. 161-163ºC; MH^{+} = 470; MNa^{+} = 492.

Ejemplo 9 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-(3-metil)benzotiofenilmetil)succinil]-S-fenilalanina-N-metilamida

25

MH^{+} = 470; MNa^{+} = 492.

Ejemplo 10 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-benzotiazalil-metil)succinil]-S-terc.-leucina-N-metilamida

26

p.f. 132-134ºC. ^{1}H NMR, (d_{6} DMSO) 0.86 (9H, s), 2.39 (3H, d, J = 4.5 Hz), 2.5-2.6 (1H obs), 3.0-3.24 (2H,m), 3.95(1H, t, J = 3 Hz), 4.15 (1H, d, J = 8 Hz), 7.4-7.7 (3H, m), 7.75 (1H, q. ancho J = 4.5 Hz), 7.88 (1H. d. J = 9 Hz), 8.94 (1H, s), 10.73 (1H, s).

Ejemplo 11 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-benzotiazalil-metil)succinil]-S-fenilalaninamida

27

p.f. 165-167ºC. ^{1}H NMR (d_{6} DMSO) 2.88 (1H, dd, J = 14.8 Hz), 3.01-3.22 (4H, m), 4.06 (1H. t ap., J = 6.5 Hz), 4.28 (1H, dd, J = 8,3 Hz), 5.80 (1H, d, J = 6 Hz), 7.05-7.15 (6H, m), 7.38-7.51 (3H. m), 7.89 (1H, d, J = 8 Hz), 8.02 (1H, d. J = 7 Hz), 8.08 (1H, d, J = 8 Hz), 8.95 (1H, s), 10.71 (1H. s).

Ejemplo 12 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-{2RS-(1,2,3,4-tetra-hidronaftilmetil)}succinil]-S-fenilalanina-N-metilamida

28

MNa^{+} = 476

^{1}H NMR (d_{6} DMSO) 1.07-1.45(2H, m), 1.49-1.67(2H. m), 2.10-2,31(1H, m), 2.46(3H, d, J = 4,4Hz, se aplasta a un singulete con D_{2}O), 2.51-2.65(4H, m), 2.81-2.87(2H, m), 3.06(1H, d,d, J = 4.2 & 8.0Hz), 3.89(1H, t, J = 7.3Hz,se aplasta a un doblete, J = 7.0Hz con D20), 4.30-4.47(1H, m), 5.65(l/3H, d, J = 7.2Hz, se cambia con D20), 5.72(2/3H, d, J = 7.2Hz. se cambia con D20), 7.03-7.18(9H, m), 7.8O(2/3H. q. J = 4.3Hz se cambia con D20), 7.89(1/3H, q, J = 4.3Hz, se cambia con D20), 7.98(1H. d. J = 8.25Hz se cambia con D20), 8.88(1H, s, se cambia con D2O), 10,66(1H, s, se cambia con D20).

Ejemplo 13 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-naftilmetil)-succinil]-S-terc.-leucinamida

29

MNa^{+} = 424

^{1}H NMR (d_{6} DMSO) 0.90 (9H, s), 2.75 (1H, dd, J = l3,5 Hz), 2.97-3.31 (2H, m), 3.84 (1H, t, J = 7 Hz), 4.15 (1H, d, J = 10 Hz), 5.61 (1H, d, J = 8 Hz), 6.88 (1H, s), 7.242 (1H, s), 7.32 (1H, d, J = 8 Hz), 7.45 (2H. m), 7.55 (1H, d, J = 10 Hz), 7.63 (1H, m), 7.82 (3H, m), 8.88 (1H, s), 10.68 (1H, s).

Ejemplo 14 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(5-benzotiofenil-metil)succinil]-S-fenilalanina-N-metilamida

30

MH^{+} = 456, MNa^{+} = 478

^{1}H NMR (d_{6} DMSO) 2.36 (3H, d, J = 4 Hz), 2.81-3.15 (5H, m), 3.92 (1H, m), 4.30 (1H, m), 5.78 (1H, d. J = 6 Hz), 7.05 (1H, d, J = 8 Hz); 7.17 (5H, m),7.35 (2H, d. J = 5.5 Hz), 7.52 (1H, s), 7.71 (1H. d. J = 5 Hz), 7.53 (1H, d, J = 8 Hz), 7.96 (1H, d, J = 8 Hz), 8.92 (1H, s), 10.73 (1H, s).

Ejemplo 15 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-5,6,7,8-tetrahidronaftilmetil)succinil]-S-terc.-leucina-N-metilamida

31

MNa^{+} = 442

Ejemplo 16 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(1-naftilmetil)-succinil]-S-terc.-leucina-N-metilamida

32

MNa^{+} = 438

Ejemplo 17 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-(3-quinolinil)-metil)succinil]-S-fenilalaninamida

^{1}H NMR (d_{6} DMSO; 400 MHz) 2.83-3.02 (5H, m), 3.97 (1H, d ancho), 4.28 (1H, m), 5.81 (1H, s ancho), 6.98 (1H, s ancho), 7.16 (5H, m), 7.28 (1H, m ancho), 7.57 (1H, ddd, J = 8, 7, 1 Hz), 7.70 (1H, ddd, J = 8, 7, 1 Hz), 7.86 (1H, dd, J = 8.1Hz), 7.95-7.99 (3H, m), 8.66 (1H, d, J = 2 Hz), 8.9l (1H. s ancho), 10.72 (1H, m).

Ejemplo 18 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-(3-quinolinil)-metil)succinil]-S-tirosinamida

^{1}H NMR (d_{6} DMSO; 400 MHz) 2.73-2.94 (5H, m), 3.97 (1H, t ancho), 4.21 (1H, m), 5.84 (1H, d ancho, J = 6Hz), 6.60 (2H, d, J = 8 Hz), 6.95 (1.H, s ancho), 6.96 (2H, d, J = 8 Hz), 7.24 (1H, s ancho), 7.56 (1H, ddd, J = 8, 7, 1 Hz), 7.69 (1H, ddd, J = 8, 7, l Hz), 7.85-7.98 (4H, m), 8.66 (1H, d, J = 2Hz), 8.91 (1H, s ancho), 9.13 (1H, s), 10.73 (1H, s).

Ejemplo 19 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-(6,7-difluoronaftil)metil)succinil]-S-tirosinamida

^{1}H NMR (d_{6} DMSO; 400 MHz) 2.67-2.87 (5H, m). 3,89 (1H, t, J = 6 Hz), 4.16 (1H, m), 5.74 (1H, d, J = 6 Hz), 6.56 (2H, d, J = 8 Hz), 6.90 (1H, s ancho), 6.92 (2H, d, J = 8 Hz), 7.04 (1H, s ancho), 7.21 (1H, d, J = 8 Hz), 7.51 (1H, s), 7.73-7.92 (4H, m), 8.86 (1H, s), 9.09 (1H. s), 10.66 (1H, s).

Ejemplo 20 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-(6-hidroxinaftil)-metil)succinil]-S-fenilalaninamida

^{1}H NMR (d_{6} DMSO; 400 MHz) 2.69-2.88 (4H, m), 3.01 (1H, dd. J = 14.4 Hz), 3.90 (1H, t, J = 6 Hz), 4.26 (1H, m), 5.83 (1H, d, J = 6 Hz), 7.02-7.25 (10H, m), 7.40 (1H, s), 7.53 (1H, d. J = 8Hz), 7.62 (1H, d, J = 9 Hz), 7.95 (1H, d, J = 8 Hz), 8.93 (1H, s), 9.64 (1H, s), 10. 72 (1H, s).

Ejemplo 21 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-(6-fluoronaftil)-metil)succinil]-S-fenilalaninamida

p.f. 198-201ºC; ^{1}H NMR (d_{6} DMSO; 400 MHz) 2.74-2.93 (4H, m), 3.01 (1H, dd, J = 14.5 Hz), 3.93 (1H, t, J = 6 Hz), 4.27 (1H, m), 5.78 (1H, d, J = 6 Hz), 6.98 (1H, s ancho), 7.16 (6H, m), 7.26 (1H, d, J = 8 Hz), 7.37 (1H, m), 7.59 (1H, s), 7.63 (1H, dd, J = 12,2 Hz), 7.76 (1H, d, J = 9 Hz), 7.86 (1H, m), 7.93 (1H, d, J = 8 Hz), 8.90 (1H, s), 10.69 (1H, s).

Ejemplo 22 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-(7-fluoronaftil)-metil)succinil]-S-fenilalaninamida

p.f. 197-8ºC; ^{1}H NMR (d_{6} DMSO; 400 MHz) 2.76-2.93 (4H, m), 3.01 (1H. dd, J = 14, 5 Hz), 3.93 (1H, t, J = 6 Hz), 4.28 (1H, m), 5.77 (1H, d, J = 7Hz), 6.99 (1H, s ancho), 7.17 (7H, m), 7.34 (1H, m), 7.55 (2H. m), 7.80 (1H, d, J = 8Hz), 7.92 (2H, m), 8.90 (1H, s), 10.69 (1H, s).

Ejemplo 23 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-(6-quinolinil)-metil)succinil]-S-fenilalaninamida

p.f. 215-20ºC; ^{1}H NMR (d_{6} DMSO; 400 MHz) 2.80-2.96 (4H. m), 3.01 (1H, dd, J = 14, 5 Hz), 3.95 (1H, t, J = 6 Hz), 4.28 (1H, m), 5.79 (1H, d, J = 6Hz), 6.99 (1H, s ancho), 7.15 (5H, m), 7.23 (1H, s ancho), 7.44-7.50 (2H, m), 7.60. (1H, s), 7.87 (1H, d, J = 9 Hz), 7.95 (1H, d, J = 8 Hz), 8.23 (1H, d, J = 8 Hz), 8.83 (1H, dd, J = 4,1 Hz), 8.91 (1H. s), 10.70 (1H, s).

Ejemplo 24 N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-(6-benciloxi-naftil)metil)succinil]-S-fenilalaninamida

p.f. 201-4ºC, ^{1}H NMR (d_{6} DMSO; 400 MHZ) 2.75 (1H, m), 2.83-2.91 (3H, m), 3.01 (1H, dd, J = l4, 5 Hz), 3.95 (1H, t, J = 6 Hz), 4.28 (1H, ddd, J = 8, 8, 5 Hz), 5.21 (2H, s), 5.78, d, J = 6 Hz), 6.99 (1H, s ancho), 7.17 (8H, m), 7,35 (2H, m), 7.41 (2H, m), 7.50 (3H, m), 7.64 (1H. d, J = 8.5 Hz), 7.72 (1H, d, J = 9 Hz), 7.91 (1H, d, J = 8 Hz), 8.88 (1H, s), 10.67 (1H, s).

Ejemplo 25 Preparación de N'-[3S-hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-naftilmetil)succinil]-S-tirosinilamida a) N'-[2R-(2,2-dimetil-4-oxo-1,3-dioxalan-5S-il)-3-(2-naftil)propanoil]-S-tirosinilamida

33

Este compuesto se preparó mediante el método general descrito en el Ejemplo 1(b), utilizando S-tirosinilamida en lugar de terc.-leucina-metilamida.

\newpage

^{\delta}H [(CD_{3})_{2}SO] 1.47(3H, s), 1.50(3H, s), 2.69(1H, Abq, J = 13.8, 8.l Hz), 2.82(1H, ABq, J = 13.8, 5.3 Hz), 3.14(2H, m), 4,38(1H, m), 4,49(1H, d, J = 6.2 Hz), 6.60(2H, d. J = 8.5 Hz), 6.96(3H, m), 7.12 (1H, s), 7.38-7.55(3H, m), 7.69(1H,s), 7.79-8.00(4H, m) y 9.16(1H, s), MNa+ 499 (+ve pulverización electrónica de iones).

b) N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-naftilmetil)-succinil]-S-tirosinilamida

34

Este compuesto se preparó por el método general descrito en el Ejemplo 1(c) utilizando N'-[2R-(2,2-dimetil-4-oxo-1,3-dioxalan-5S-il)-3-(2-naftil)propanoil]-S-tirosinilamida.

p.f. 179-180ºC. ^{\delta}H [(CD_{3})_{2}SO] 2.70-3.00(5H,m), 3.93(1H,m), 4.20(1H,m), 5.85(1H, d, J = 6.4Hz), 6.60(2H, d, J = 8.2Hz), 6.97(3H,m), 7.23(2H,s), 7.43-7.57(3H,m), 7.72-7.92(4H,m), 8.92(1H,s), 9.17(1H,s) y 10.72(1H,s), (M-H)- 450 (-ve pulverización electrónica de iones).

Datos de actividad

35

* El ejemplo comparativo era el del Ejemplo 2 del Documento de Patente PCT WO 90/05719, el compuesto de fórmula:

36

en la que R es CH_{2}S-(2-tienilo) y R^{1} es metilo.

Claims

1. Un compuesto de fórmula (I):

37

en la que:

R es hidroxi, hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo o arilo;

R^{1} es metilo sustituido por un sistema de anillo condensado arilo o un metilo sustituido por un anillo heterocíclico;

R^{2} es alquilo, alquenilo, arilo, cicloalquilo o cicloalquenilo; y

R^{3} es hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo o arilo; con la condición de que:

si R^{1} es naftilmetilo, en que el grupo naftilo está sin sustituir o sustituido con hasta cinco sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en halógeno, alquilo(C_{1-6}), aril-alquilo(C_{1-6}), alcoxi(C_{1-6}), alcoxi(C_{1-6})-alquilo(C_{1-6}), halo-alquilo(C_{1-6}), hidroxi, nitro, amino, mono- y di-N-alquil(C_{1-6})-amino, acilamino, aciloxi, carboxi, sales de carboxi, ésteres de carboxi, carbamoílo, mono- y di-N-alquil(C_{1-6})-carbamoílo, alcoxi(C_{1-6})-carbonilo, ariloxi-carbonilo, ureido, guanidino, sulfonilamino, aminosulfonilo, alquil(C_{1-6})-tio, alquil(C_{1-6})-sulfinilo, alquil(C_{1-6})-sulfonilo, heterociclilo, heterociclil-alquilo(C_{1-6}), y una cadena alquileno(C_{3-5}) que enlaza a dos átomos de carbono de anillos adyacentes para formar un anillo carbocíclico;

entonces R es hidroxi.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que R es hidroxi.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, en el que R^{1} se selecciona entre naftilmetilo, benzotiofenilo, benzofuranilo, benzotiazolilo y quinolinilo opcionalmente sustituido.

4. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R es hidroxi, R^{1} es 1- o 2-naftilmetilo; y/o R^{2} es bencilo o t-butilo; y/o R^{3} es hidrógeno o metilo.

5. Un compuesto según la reivindicación 2, seleccionado del grupo que consiste en los siguientes compuestos:

N'-[3S-hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-naftilmetil)succi-nil]-S-terc.-leucina-N-metilamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-naftilmetil)succinil]-S-fenilalanina-N-metilamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-naftilmetil)succinil]-S-fenilalaninamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-fenilbencil)succinil]-S-fenilalanina-N-metilamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-benzotiofenilmetil)-succinil]-S-fenilalaninamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(3-benzotiofenilmetil)-succinil]-S-fenilalanina-N-metilamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2-R-(2-benzofuranilmetil)-succinil]-S-fenilalanina-N-metilamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2-R-(7-metoxibenzo-furanilmetil)succinil]-S-fenilalanina-N-metilamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-(3-metil)benzotiofenilmetil)succinil]-S-fenilalanina-N-metilamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-benzotiazalilmetil)succinil]-S-terc.-leucina-N-metilamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-benzotiazalilmetil)succinil]-S-fenilalaninamida.

\newpage

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-{2RS-(1,2,3,4-tetrahidronaftilmetil)}succinil]-S-fenilalanina-N-metil-
amida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-naftilmetil)succinil]-S-terc.-leucinamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(5-benzotiofenilmetil)succinil]-S-fenilalanina-N-metilamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(4-bifenilmetil)succinil]-S-fenilalanina-N-metilamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-5,6,7,8-tetrahidronaftilmetil)succinil]-S-terc.-leucina-N-metilamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(1-naftilmetil)succinil]-S-terc.-leucina-N-metilamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-(3-quinolinil)metil)succinil]-S-tirosinamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-(6,7-difluoronaftil)metil)succinil]-S-tirosinamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-(6-hidroxinaftil)metil)succinil]-S-fenilalaninamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-(6-fluoronaftil)metil)succinil]-S-fenilalaninamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-(7-fluoronaftil)metil)succinil]-S-fenilalaninamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-(6-benziloxinaftil)-metil)succinil]-S-fenilalaninamida.

N'-[3S-Hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-(6-quinolinil)metil)succinil]-S-fenilalaninamida.

N'-[3S-hidroxi-4-(N-hidroxiamino)-2R-(2-naftilmetil)succinil]-S-tirosinilamida.

6. Un compuesto de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, que es un compuesto de la fórmula (IA):

38

en la que R, R^{1} y R^{2} se definen como en las reivindicaciones precedentes.

7. El uso de un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las precedentes reivindicaciones para la producción de un medicamento destinado al tratamiento o a la profilaxis de trastornos tales como alergia, trastornos inflamatorios y una enfermedad autoinmune en que está implicada la sobreproducción de s-CD23.

8. Una composición farmacéutica para el tratamiento o profilaxis de trastornos tales como alergia, trastornos inflamatorios y una enfermedad autoinmune en la que está implicada la sobreproducción de s-CD23, que comprende un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, y opcionalmente un vehículo farmacéuticamente aceptable para el mismo.

9. Un método para preparar un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, cuyo procedimiento comprende:

(a) desproteger un compuesto de fórmula (II):

4

\newpage

en la que R hasta R^{3} son como se han definido anteriormente, y X es un grupo protector tal como bencilo o trimetilsililo, o

(b) hacer reaccionar un compuesto de fórmula (III):

5

en la que R hasta R^{3} son como se han definido anteriormente, y cualquier grupo hidroxi está opcionalmente protegido, con hidroxilamina o una sal de la misma, o

(c) hacer reaccionar un compuesto de fórmula (IV):

41

en la que R^{1} hasta R^{3} son como se han definido anteriormente, con un tiol para dar un compuesto de fórmula (I) en la que R es metilo sustituido con alquiltio, ariltio, aralquiltio o heterocicliltio, o

(d) convertir un compuesto de fórmula (I) en un compuesto diferente de fórmula (I) como se ha definido anteriormente.

10. Un compuesto de fórmula (II) como se ha definido en la reivindicación 9, en la que R es hidroxi o hidroxi protegido.

11. Un compuesto de fórmula (IV) como se ha definido en la reivindicación 9, en la que R^{1} es heterociclilmetilo.

12. Un procedimiento para preparar un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, cuyo procedimiento comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (X):

42

en la que R^{1} hasta R^{3} son como se han definido anteriormente, y R^{4} y R^{5} son iguales o diferentes y cada uno de ellos es hidrógeno o un grupo protector de hidroxi, o R^{4} y R^{5} conjuntamente forman un grupo protector de hidroxi divalente, con hidroxilamina o una sal de la misma.