ES2206257T3

ES2206257T3 - Derivado del acido quinolino-carboxilico o sus sales.

Info

Publication number: ES2206257T3
Application number: ES00940804T
Authority: ES
Inventors: Akira Wakunaga Pharmaceutical Co. Ltd. YAZAKI; Yoshiko Wakunaga Pharmaceutical Co. Ltd. NIINO; Yasuhiro Wakunaga Pharmaceut. Co. Ltd. KURAMOTO; Yuzo Wakunaga Pharmaceutical Co. Ltd. HIRAO; Yoshihiro Wakunaga Pharmaceutical Co. Ltd OHSHITA; Norihiro Wakunaga Pharmaceutical Co. Ltd HAYASHI; Hirotaka Wakunaga Pharmaceutical Co. Ltd. AMANO
Original assignee: Wakunaga Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Wakunaga Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1999-07-01
Filing date: 2000-06-22
Publication date: 2004-05-16
Anticipated expiration: 2020-06-22
Also published as: CZ302033B6; ZA200110357B; JP3477465B2; EP1193266B1; US6858625B1; SK285814B6; EP1193266A1; EP1193266A4; CN1358183A; HK1047103B; CN1157389C; DE60004846T2; DK1193266T3; NZ516201A; TW576832B; KR20020020733A; NO20016378L; IL147043A0; KR100628414B1; NO20016378D0

Abstract

El ácido 1-(6-amino-3, 5-di-fluoro-piridin-2-il)-8- bromo-7-(3-etilamino-acetidin-1-il)-6-fluoro-4-oxo-1, 4- dihidro-quinolino-3-carboxílico o una de sus sales.

Description

Derivado de ácido quinolino-carboxílico o sus sales.

Campo técnico

Esta invención se refiere a un derivado del ácido quinolino-carboxílico y a sus sales, que tiene excelentes efectos microbicidas y absorción oral, y también a agentes microbicidas que comprenden al derivado del ácido quinolino-carboxílico.

Antecedentes de la técnica anterior

Se conoce que los compuestos que tienen el espinazo básico del ácido quinolino-carboxílico incluyen muchos compuestos útiles como microbicidas sintéticos por sus excelentes actividades microbicidas y sus amplios espectros microbicidas. Entre tales compuestos, la norfloxacina (JP 53-141286 A), enoxacina (JP 55-31042 A), ofloxacina (JP 57-46986 A), ciprofloxacina (JP 58-74667A), tosufloxacina (JP 60-228479) y sus análogos se usan ampliamente en la práctica clínica como agentes terapéuticos para las enfermedades infecciosas.

Estos compuestos, sin embargo, no son todavía los idóneos debido a su actividad microbicida, absorción intestinal y estabilidad metabólica, y todavía involucran muchos problemas que se deben resolver, como la reducción de su fototoxicidad y citotoxicidad, por ser las dos específicas al ácido quinolino-carboxílico y a sus derivados. Recientemente, la aparición de bacterias resistentes a estos medicamentos también ha planteado un nuevo problema.

Descripción de la invención

Por consiguiente, un objeto de la presente invención es proporcionar un agente microbicida que sea clínicamente aplicable, tenga excelente poder microbicida, absorción intestinal y estabilidad metabólica, y tenga bajos efectos colaterales.

En las circunstancias anteriores, los presentes inventores han dirigido una investigación adicional para proporcionar agentes medicinales clínicamente excelentes. Como resultado, fue encontrado que los derivados del ácidos piridono-carboxílico, cada uno de los cuales se representa por la siguiente fórmula (I):

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en la que R^{1} representa un átomo de hidrógeno o un grupo protector carboxílico, R^{2} representa un grupo hidroxilo, un grupo alcóxido inferior o un grupo amino sustituido o no sustituido, R^{3} representa un átomo de hidrógeno o un átomo de halógeno, R^{4} representa un átomo de hidrógeno o un átomo de halógeno, R^{5} representa un átomo de halógeno o un grupo amino cíclico saturado, sustituido o no sustituido, R^{6} representa un átomo de hidrógeno, un átomo de halógeno, un grupo nitro o un grupo amino protegido o no protegido, X, Y y Z pueden ser el mismo, o diferente, y cada uno independientemente representa un átomo de nitrógeno, -CH =, o -CR^{7}= , en el que R^{7} representa un grupo alquilo inferior, un átomo de halógeno o un grupo ciano con la condición de que por lo menos uno de X, Y y Z represente un átomo de nitrógeno, y W represente un átomo de nitrógeno o -CR^{8}= en el que R^{8} represente un átomo de hidrógeno, un átomo de halógeno o un grupo alquilo inferior; y sus sales, tienen un excelente poder microbicida y son útiles como agentes microbicidas sintéticos, y se presentó una solicitud internacional de PCT referente a éstos (WO 97/11068 A).

Los presentes inventores han proseguido con una investigación adicional. Como resultado, se ha encontrado que entre los derivados del ácido piridono-carboxílico, anteriormente descritos (I), el ácido 1-(6-amino-3,5-di-fluoro-piridin-2-il)-8-bromo-7-(3-etilamino-acetidin-1-il)-6-fluoro-4-oxo-1,4-dihidro-quinolino-3-carboxílico que tiene un grupo 6-amino-3, 5-di-fluoro-piridinilo en posición 1, un grupo etil-amino-acetidinilo en posición 7 y un átomo bromo en posición 8 y que se representa por la siguiente fórmula:

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y sus sales, tienen excelentes propiedades con un poder microbicida sumamente bueno y un amplio espectro microbicida que cubre bacterias resistentes, que no muestran fototoxicidad, que es la toxicidad específica a la quinolona, y que tienen inferior efecto antihipertensivo y menores efectos colaterales en la piel, como erupción, que los compuestos conocidos de estructuras similares, y es más, tienen una vida media en sangre más larga, una bioaccesibilidad sumamente alta y son sumamente útiles como sustancias preventivas y terapéuticas para diversas enfermedades infecciosas, llevando a la completitud de la presente invención.

Describiéndola específicamente, la presente invención aporta el ácido 1-(6-amino-3,5-di-fluoro-piridin-2-il)-8-bromo-7-(3-etilamino-acetidin-1-il)-6-fluoro-4-oxo-1,4-dihidro-quinolino-3-carboxílico (de aquí en adelante se denominará "Compuesto 1") o una de sus sales.

La presente invención también aporta una medicina que comprende como un ingrediente activo el compuesto 1 o una de sus sales.

La presente invención también proporciona una composición medicinal que comprende el compuesto 1 o una de sus sales, y un portador farmacéuticamente aceptable.

La presente invención aún proporciona adicionalmente el uso del compuesto 1, o una de sus sales, en la elaboración de una medicina para el tratamiento de una enfermedad infecciosa.

Mejores modos para llevar a cabo la invención

El compuesto 1 de la presente invención se puede formar tanto en sales ácidas de adición como en sales básicas de adición. Será notado que también son incluidos en tales sales aquellos compuestos que formen quelatos con el boro.

Los ejemplos de sales ácidas de adición pueden incluir (a) sales con ácidos minerales como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico y ácido fosfórico, (b) sales con ácidos carboxílicos orgánicos como ácido fórmico, ácido acético, ácido cítrico, ácido tricloro-acético, ácido trifluoro-acético, ácido fumárico y ácido maleico, y (c) sales con ácidos sulfónicos como ácido metan-sulfónico, bencen-sulfónico ácido, ácido p-toluen-sulfónico, ácido mesitilen-sulfónico y ácido naftalen-sulfónico, mientras que los ejemplos de sales básicas de adición pueden incluir (a') sales con metales alcalinos como sodio y potasio, (b') sales con metales alcalinotérreos como calcio y magnesio, (c') sal de amonio, (d') sales con bases orgánicas que contengan nitrógeno como trimetilamina, trietilamina, tributilamina, piridina, N,N-xilidina, N-metilpiperidina, N-metilmorfolina, dietilamina, ciclohexilamina, procaína, dibencilamina, N-bencil-\beta-fenetilamina, 1-efenamina y N,N'-dibencil-etilendiamina. Son ilustrativos de los compuestos de boro los haluros de boro como fluoruro de boro, y los aciloxi-boros inferiores como acetoxi-boro. De estos, se prefieren las sales ácidas de adición y se prefieren particularmente, con maleato, metan-sulfonato, p-toluen-sulfonato y clorhidrato.

El compuesto 1 o sus sales según la presente invención puede existir no sólo en forma no solvatada, sino que también en forma de hidrato o solvato. Por consiguiente, para los compuestos según la presente invención se cumple que cada uno abarca todas sus formas cristalinas, su hidrato y sus solvatos.

Para el compuesto 1 o sus sales, según la presente invención, se cumple que cada uno se puede producir por el proceso que se desee. Un proceso ejemplar se puede ilustrar como sigue:

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en el que R^{1} y R^{2} representan grupos alquilos inferiores, y R^{3} representa un átomo de hidrógeno o un grupo protector amino (por ejemplo, t-butilo, bencilo, p-metoxibencilo o 1, 1,3,3-tetra-metil-butilo).

El compuesto 1 de la presente invención se puede obtener haciendo reaccionar un éster de ortoformiato, como ortoformiato de etilo u ortoformiato de metilo con el compuesto (A) para formar un derivado éster del acrilato (B), haciendo reaccionar el derivado de éster de acrilato con un compuesto aminado (C) para dar un compuesto (D), someter el compuesto (D) a una reacción de ciclación para obtener un compuesto (E), hidrolizar el compuesto (E) a un compuesto (F) y haciendo luego reaccionar el compuesto (F) con 3-etil-amino-acetidina.

La reacción entre el compuesto (A) y el éster de ortoformiato generalmente se puede conducir a 0 hasta 160ºC, preferentemente a 50 hasta 150ºC, y el tiempo de reacción generalmente puede ser 10 minutos hasta 48 horas, preferentemente 1 hasta 10 horas. El éster de ortoformiato se puede usar preferentemente en una cantidad equimolar o mayor que la del compuesto (A), sobresalientemente en una cantidad molar aproximadamente 1 hasta 10 veces la del compuesto (A). Se prefiere agregar, como promotor de la reacción, un anhídrido de ácido carboxílico como el anhídrido acético. Este anhídrido de ácido carboxílico se puede usar preferentemente en una cantidad equimolar o mayor que la del compuesto (A), sobresalientemente en una cantidad molar aproximadamente 1 hasta 10 veces la del compuesto (A).

La reacción con el compuesto (C) se conduce sin solvente o en un solvente apropiado. Se puede usar cualquier solvente en esta reacción ya que no la afecta. Solventes ilustrativos son los hidrocarburos aromáticos, como benceno, tolueno y xilenos; éteres, como dietil-éter, tetra-hidrofurano, dioxano, monoglima y diglima; hidrocarburos alifáticos, como pentano, hexano, heptano y ligroína; hidrocarburos halogenados, como cloruro de metileno, cloroformo y tetracloruro de carbono; solventes polares apróticos, como dimetil-formamida y dimetil-sulfóxido; y alcoholes como metanol, etanol y propanol. Esta reacción generalmente se puede conducir a 0 hasta 150ºC, preferentemente a 0 hasta 100ºC, y el tiempo de reacción en general es 10 minutos hasta 48 horas. El compuesto (C) se puede usar en una cantidad equimolar o mayor respecto a del compuesto (A), sobresalientemente en una cantidad molar 1 a 2 veces la del compuesto (A).

Como un proceso alternativo, se hace reaccionar un acetal como N,N-dimetil-formamida-dimetil-acetal, o N,N-dimetil-formamida-dietil-acetal con el compuesto (A), seguido por una reacción adicional con el compuesto (C) para dar el compuesto (D). Se puede usar cualquier solvente en la reacción con el acetal, ya que éste no afecta la reacción. Solventes ilustrativos son los ejemplificados anteriormente. Esta reacción generalmente se puede conducir a 0 hasta 150ºC, preferentemente a temperatura ambiente a 100ºC, y el tiempo de reacción puede variar desde 10 minutos hasta 48 horas, preferentemente desde 1 hasta 10 horas.

A continuación, la reacción, en la que el compuesto (D) se somete a la reacción de ciclación para obtener el compuesto (E), se conduce en un solvente en presencia o ausencia de un compuesto básico. Cualquier solvente se puede usar en esta reacción ya que no afecta la reacción. Son ilustrativos los hidrocarburos aromáticos como benceno, tolueno y xilenos; éteres como éter dietílico, tetrahidrofurano, dioxano, monoglima y diglima; hidrocarburos halogenados como cloruro de metileno, cloroformo y tetracloruro de carbono; solventes polares apróticos como dimetil-formamida y dimetil-sulfóxido; y alcoholes como metanol, etanol y propanol. Los compuestos utilizables como compuestos básicos incluyen, por ejemplo, metales alcalinos como sodio metálico y potasio metálico; hidruros de metales como hidruro de sodio e hidruro de calcio; sales inorgánicas como hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, carbonato de sodio y carbonato de potasio; alcóxidos como metóxido de sodio, etóxido de sodio y t-butóxido de potasio; fluoruros de metal como fluoruro de sodio y fluoruro de potasio; y bases orgánicas como trietil-amina y 1,8-diaza-biciclo[5.4.0]undeceno (DBU, por las siglas de su expresión inglesa, Diaza Bicyclo Undecene). La temperatura de reacción generalmente va desde 0 hasta 200ºC, preferentemente de temperatura ambiente hasta 180ºC, y la reacción se puede completar en general en 5 minutos hasta 24 horas. El compuesto básico se usa en una cantidad equimolar o mayor a la del compuesto (D), sobresalientemente en una cantidad molar 1 hasta 2 veces la del compuesto (D).

La eliminación de un grupo protector carboxílico como R^{1} y de un grupo protector amino como R^{3}, por hidrólisis del compuesto (E), hace posible la obtención el compuesto (F).

Para la hidrólisis, son del todo aplicables las condiciones de reacción empleadas en hidrólisis conocidas. Por ejemplo, la hidrólisis se puede efectuar en presencia de un compuesto básico como hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, carbonato de sodio o carbonato de potasio, de un ácido mineral como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico o ácido bromhídrico o de un ácido orgánico como ácido p-toluen-sulfónico, en un solvente, por ejemplo, en agua, en un alcohol como metanol, etanol o propanol, en un éter como tetrahidrofurano o dioxano, en una cetona como acetona o metil-etil-cetona, en ácido acético o en un solvente mezcla de los anteriores. La reacción generalmente se puede conducir a temperatura ambiente hasta 180ºC, preferentemente a temperatura ambiente hasta 140ºC, el tiempo de reacción generalmente puede variar desde 1 hasta 24 horas.

Adicionalmente, el compuesto (F) se hace reaccionar con 3-etil-amino-acetidina para obtener el compuesto 1 de la presente invención.

Esta reacción se puede conducir en un solvente que no afecte la reacción, por ejemplo, en un hidrocarburo aromático como benceno, tolueno o xileno, en un alcohol como metanol o etanol, en un éter como tetrahidrofurano, dioxano o monoglima, en un hidrocarburo halogenado como cloruro de metileno, cloroformo o tetracloruro de carbono, en un solvente polar aprótico como dimetil-formamida, dimetil-sulfóxido o N-metil-pirrolidona, cianometano o piridina, de ser necesario en presencia de un agente neutralizador de ácido, por ejemplo, de carbonato de sodio, carbonato de calcio, trietil-amina o 1, 8-diaza-biciclo[5.4.0)-undeceno (DBU), temperatura ambiente hasta 160ºC, el tiempo de reacción puede variar desde varios minutos hasta 48 horas, aunque se prefiere con un intervalo desde 10 minutos hasta 24 horas. Se puede usarse 3-etil-amino-acetina en una cantidad equimolar o mayor al compuesto (F), preferentemente en una cantidad molar 1 hasta 5 veces mayor que la del compuesto (F).

El compuesto 1 se puede convertir en una sal de adición ácida o una sal de adición básica por un método conocido per se en la técnica.

Esta reacción se puede conducir en un solvente polar, por ejemplo, en un alcohol como metanol o etanol, o en agua, en presencia de un ácido mineral como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico o ácido fosfórico, de un ácido carboxílico orgánico como ácido fórmico, ácido acético, ácido cítrico, ácido tricloro-acético, ácido trifluoro-acético, ácido fumárico o ácido maleico, de un ácido sulfónico orgánico como ácido metan-sulfónico, ácido bencen-sulfónico, ácido p-toluen-sulfónico, ácido mesitilen-sulfónico o naftalen-sulfónico, de un compuesto básico como hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, hidróxido de calcio o hidróxido de magnesio, o de una base orgánica que contenga nitrógeno como amoníaco, trimetil-amina, trietil-amina, tributilamina, piridina, N,N-dimetil-anilina, N-metil-piperidina, N-metil-morfolina, dietil-amina, ciclohexil-amina, procaína, dibencil-amina, N-bencil-\beta-fenetil-amina, 1-efenamina o N,N'-dibencil-etilen-diamina, a temperatura ambiente o con calentamiento de ser necesario.

A propósito, el compuesto de partida (A) se puede producir, por ejemplo, por el proceso publicado en cualquiera de las siguientes publicaciones, o por un proceso similar:

(1) J. Heterocyclic Chem., 22, 1033 (1985)

(2) Liebigs Ann. Chem., 29 (1987)

(3) J. Med. Chem., 31, 991 (1988)

(4) J. Org. Chem., 35, 930 (1970)

(5) JP 62-246541 A

(6) JP 63-26272 A

(7) JP 63-145268 A

(8) J. Med. Chem., 29, 2363 (1986)

(9) J. Fluorin. Chem. 28, 361 (1985)

(10) JP 63-198664 A

(11) JP 63-264461 A

(12) JP 63-104974 A

Por otro lado, el compuesto reactante (C) se puede producir por el proceso que se desee. Por ejemplo, se puede producir sustituyendo un derivado de amina por un átomo de halógeno unido a un átomo de carbono que sea constituyente de un anillo de 6-miembros de acuerdo con una conocida reacción de sustitución halógeno-amina, como esta publicado en WO 97/11068 A o WO 97/38971 A.

El compuesto de la presente invención, obtenido como se ha descrito anteriormente, se puede aislar y se puede purificar de una manera conocida per se en la técnica. Dependiendo de las condiciones para el aislamiento y purificación, se obtiene en forma de una sal, en forma de un ácido carboxílico libre o de una amina libre. Estas dos formas se pueden convertir una a la otra como se desee y el compuesto de la presente invención se puede producir en la forma concebida.

El compuesto 1, que tiene un grupo 6-amino-3,5-difluoro-piridinailo en posición 1, un grupo etil-amino-acetidinilo en posición 7 y un átomo de bromo en posición 8, y sus sales, obtenidas como fue descrito anteriormente, como se demostrará en los Experimentos 1-4 tienen efectos impredecibles a partir de las correlaciones estructura-actividad aceptadas hasta la fecha en relación con los derivados de ácidos piridono-carboxílicos representados por la fórmula (I), es decir, tienen una vida media en la sangre mas larga cuando se administran oralmente y muestran un valor sumamente alto de 78% referido a la bioaccesibilidad, tal como se calcula de un AUC hasta 24 horas después de su administración, mientras que retienen excelentes propiedades tales como un poder microbicida sumamente bueno y no exhibir fototoxicidad, que es la toxicidad específica a la quinolona. Adicionalmente, el compuesto 1 y sus sales tienen también propiedades inestimables ya que son inferiores en el efecto antihipertensivo y sus efectos colaterales en la piel, tales como erupción, respecto a los compuestos conocidos con estructuras similares.

El compuesto 1 y sus sales según la presente invención se pueden cada uno formular como un agente microbicida junto con portadores farmacéuticamente aceptables en composiciones para administración parenteral como inyección, administración o instalación rectal, o administración oral en formas sólidas o líquidas.

Las preparaciones características para inyección pueden incluir soluciones, suspensiones y emulsiones farmacéuticamente aceptables, estériles, acuosas o no acuosas. Portadores ilustrativos de diluyentes, solventes y vehículos no acuosos son propilenglicol, polietilenglicol, aceites vegetales, por ejemplo, aceite de oliva, y ésteres orgánicos inyectables, por ejemplo, oleato de etilo. En caso de ser necesario, tales soluciones también pueden contener aditivos, como agentes preservantes, humectantes, emulsores y dispersantes. Por ejemplo, estas inyecciones se pueden esterilizar por filtración a través de filtros bacterianos o por la adición inmediatamente antes de su uso de agentes esterilizantes puros o en forma de composiciones sólidas estériles, solubles en algunos otros medios estériles para inyección.

De ser necesario a las preparaciones para administración por instilación se pueden agregar, solubilizadores, preservativos, reguladores de isotonía, espesantes y análogos, además de los compuestos según la presente invención.

Las preparaciones sólidas características para administración oral pueden incluir cápsulas, tabletas, píldoras, polvos y gránulos. En la formulación de tales preparaciones sólidas, los compuestos según la presente invención son generalmente mezclados por lo menos con un aumentador inerte, por ejemplo, sacarosa, lactosa o almidón. En la formulación de preparaciones ordinarias, también se pueden usar otras materiales diferentes de los aumentadores inertes, como son los lubricantes (por ejemplo, estearato magnésico). En las cápsulas, tabletas y píldoras, se pueden usar tampones. A las tabletas y píldoras se pueden les aplicar recubrimientos entéricos.

Las preparaciones líquidas características para administración oral pueden incluir emulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elixires farmacéuticamente admisibles que contengan diluyentes inertes empleados normalmente, por ejemplo, agua. Además de tal diluyente inerte, también se pueden agregar aditivos como agentes humectantes, agentes emulsionantes o de suspensión, edulcorantes, condimentos y sabores.

Las preparaciones para administración rectal pueden contener, además de los compuestos según la presente invención, excipientes como aceite de cacao y cera de supositorios.

La dosificación de cada compuesto de la presente invención varía dependiendo de las propiedades del compuesto, la vía de administración, el período de tratamiento deseado y otros factores. Sin embargo, en general, su dosificación diaria puede variar preferentemente desde aproximadamente 0,1 hasta 1,000 mg/kg, siendo particularmente preferente un intervalo desde aproximadamente 0,5 hasta 100 mg/kg. Adicionalmente, según se desee esta dosificación diaria se puede administrar en 2 a 4 porciones.

Ejemplos

La presente invención se describirá de aquí en adelante en detalles adicionales con ejemplos y ejemplos de referencia.

Ejemplo de referencia 1

Síntesis de 8-bromo-1-[6-(t-butilamino)-3,5-difluoro-piridin-2-il]-6,7-difluoro-4-oxo-1,4-dihidro-quinolino-3-carboxilato de etilo

A una solución de cloroformo (5 ml) en la que está disuelto 3-etoxi-2-(3-bromo-2,4,5-trifluoro-benzoíl)acrilato de etilo que fue preparado a partir de 3-bromo-2,4,5-trifluoro-benzoíl-acetato de etilo (1,32 g) de una manera conocida per se en la técnica, se agregó 2-amino-6-(t-butilamino)-3,5-difluoro-piridina con supervisión de la reacción por TLC hasta que se completase la conversión a un derivado de acrilato de amina. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida para obtener un residuo sólido amarillo. Al residuo, se agregaron carbonato de potasio anhidro (1,2 g) y N,N-dimetil-formamida (2 ml), y la mezcla se agitó a 90ºC durante 15 minutos. Se dejó enfriar la mezcla. S agregaron cloroformo (30 ml) y agua destilada (300 ml), y la mezcla se dejó separar en capas. La capa de cloroformo se lavó dos veces con agua destilada (300 ml), se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se concentró a presión reducida, y luego se dejó estar. El precipitado se recogió por filtración y se lavó consecutivamente con etanol y éter di-isopropílico en este orden para obtener el compuesto del título (1,41 g) como un polvo incoloro.

Punto de fusión: 198-203ºC

^{1}H-NMR (CDCl_{3}) \delta

1.38 (s, 9H), 1,40 (t, J=7Hz, 3H), 4,04 (q, J=7Hz, 2H), 4,71(brs, 1H), 7,20 (dd, J=8Hz, 10Hz, 1H), 8,36 (dd, J=9Hz, 10Hz, 1H), 8,54 (s, 1H).

Ejemplo de referencia 2

Síntesis del ácido 1-(6-amino-3,5-difluoro-piridin-2-il)-8-bromo-6,7-difluoro-4-oxo-1,4-dihidro-quinolino-3-carboxílico

Se agregó 8-bromo-1-[6-(t-butilamino)-3,5-difluoro-piridin-2-il]-6,7-difluoro-4-oxo-1,4-dihidro-quinolino-3-carboxilato de etilo (1,38 g) a una mezcla líquida de ácido clorhídrico (3,5 ml) al 12% y ácido acético (3,5 ml), y la mezcla se calentó durante 5 horas con agitación y reflujo. A continuación de la adición de agua destilada (5 ml), se dejó enfriar la mezcla. El precipitado se recogió por filtración, y se lavó consecutivamente con etanol y éter di-isopropílico en este orden para obtener el compuesto del título (1,10 g) como un polvo incoloro.

Punto de fusión: 272-278ºC

^{1}H-NMR (D_{6}-DMSO) \delta

6,80(s, 2H), 7,99(t, J=9Hz, 1H), 8,38(t, J=9Hz, 1H), 8,93(s, 1H).

Ejemplo 1 Síntesis del ácido 1-(6-amino-3,5-difluoro-piridin-2-il)-8-bromo-7-(3-etil-amino-acetidin-1-il)-6-fluoro-4-oxo-1,4-dihidro-quinolino-3-carboxílico (Compuesto 1)

Se combinaron 3-etil-amino-acetidina (700 mg), ácido 1-(6-amino-3,5-difluoro-piridin-2-il)-8-bromo-6,7-difluoro-4-oxo-1,4-dihidro-quinolino-3-carboxílico (1,5 g), N-metil-tetrahidropirol (2,0 g) y dimetil-sulfóxido (4,5 g), y la mezcla se calentó con agitación a 40ºC durante 24 horas. Después de que se dejó enfriar la mezcla, se agregó éter isopropílico (10 ml), se agitó la mezcla y se retiró una capa clara de la parte superior de la mezcla. Se repitió el mismo procedimiento una vez más y el residuo se concentró a presión reducida. Se agregó etanol (5 ml) y la mezcla se calentó con agitación a 70ºC durante 30 minutos. El sólido precipitado se recogió por filtración. Se obtuvo el compuesto del título (1,38 g).

Apariencia: polvo incoloro

Punto de fusión: 195-196ºC

^{1}H-NMR (D6-DMSO) \delta

0,99 (t, J=7Hz, 3H), 2,48 (q, J=7Hz, 2H), 4,05-4,15 (m, 2H), 4,35-4,42 (m, 1H), 4,60-4,69 (m, 2H), 6,74 (brs, 2H), 7,88 (d, J=14Hz, 1H), 7, 93 (t, J=9Hz, 1H), 8,69 (s, 1H).

Ejemplo 2 Síntesis del maleato del ácido 1-(6-amino-3,5-difluoro-piridin-2-il)-8-bromo-7-(3-etil-amino-acetidin-1-il)-6-fluoro-4-oxo-1,4-dihidro-quinolino-3-carboxílico (Compuesto 2)

Se agregó ácido 1-(6-amino-3,5-difluoro-piridin-1-il)-6-fluoro-4-oxo-1,4-dihidro-quinolino-3-carboxílico (1,38 g) a etanol (13 ml) y a la mezcla, se agregó gradualmente ácido maleico (400 mg). La mezcla se calentó con agitación a 70ºC durante 5 horas. Después de que la mezcla se dejó enfriar, se recogió un sólido por filtración. El sólido se lavó con etanol. Se obtuvo el compuesto del título (1,33 g).

Apariencia: polvo incoloro

Punto de fusión: 196-199ºC

^{1}H-NMR (D6-DMSO) \delta

1,16(t, J=7Hz, 3H), 2,93 (q, J=7Hz, 2H), 3,99-4,06 (m, 1H), 4,41-4,48 (m, 1H), 4,50-4,56 (m, 1H), 4,67-4,74 (m, 1H), 4,74-4,82 (m, 1H), 6,02 (s, 2H), 6,76 (brs, 2H), 7,95 (t, J=9Hz, 1H), 7,97 (d, J=14Hz, 1H), 8,75 (s, 1H).

Experimentos

Los resultados de los experimentos con el compuesto de la presente invención en relación a su efecto microbicida, fototoxicidad y la distribución in vivo se describirán en los experimentos 1-4. Como compuestos comparativos se usaron los siguientes compuestos, revelados en el documento WO 97/11068 A, y la ciprofloxacina (CPFX) y levofloxacina (LVFX), disponibles comercialmente.

Compuesto comparativo 1

Ácido 1-(6-amino-3,5-difluoro-piridin-2-il)-8-bromo-7-(3-metil-amino-acetidin-1-il)-6-fluoro-4-oxo-1,4-dihidro-quinolino-3-carboxílico

Compuesto comparativo 2

Ácido 1-(6-amino-3,5-difluoro-piridin-2-il)-8-cloro-7-(3-etil-amino-acetidin-1-il)-6-fluoro-4-oxo-1,4-dihidro-quinolino-3-carboxílico CPFX

Ácido 1-ciclo-propil-6-fluoro-7-(1-piperadinil)-1,4-dihidro-4-oxoquinolino-3-carboxílico.

LVFX

Ácido S(-)-9-fluoro-2,3-dihidro-3-metil-10-(4-metil-1-piperazinil)-7-oxo-7H-pirido[1,2,3-de][1,4]benzoxazin-6-carboxílico.

(1) Efectos microbicidas

Sus concentraciones mínimas inhibidoras del crecimiento (MIC, por las siglas de su expresión inglesa, Minimum Growth Inhibitory Concentrations, \mug/ml) se determinaron de acuerdo con el método estándar de la Sociedad de Quimioterapia del Japón [Quimioterapia, 29(1), 76, 1981)]. Los resultados se presentan en la Tabla 1.

TABLA 1

	Comp'd 1	Com Comp'd 1	Comp. Comp'd 2	CPFX	LVFX
S. aureus 209P	0,013	0,013	0,013	0,2	0,2
MRSA W200	0,013	0,025	0,025	0,78	0,39
S.epidermidis IF012293	0,025	0,05	0,05	1,56	0,78
E. faecalis IF012580	0,39	0,39	0,78	1,56	1,56
M. luteus IF012708	0,39	0,39	0,78	3,13	0,78

TABLA 1 (continuación)

	Comp'd 1	Com Comp'd 1	Comp. Comp'd 2	CPFX	LVFX
B. subtilis ATCC6633	0,025	0,05	0,025	0,05	0,1
E. coli NIHJ-JC2	0,025	0,013	0,025	0,025	0,05
K. pneumoniae KC-1	0,05	0,025	0,05	0,05	0,1
P vulgaris IF03167	0,1	0,1	0,2	0,05	0,05
S. marcescens IF03736	1,56	1,56	1,56	0,2	0,78
P. aeruginosa IF03445	0,78	0,39	0, 39	0,39	0,78
P. aeruginosa E-2	1,56	0,78	1,56	0,78	1,56

(2) Experimentos de fototoxicidad

Se realizó un experimento de fototoxicidad por el siguiente procedimiento.

A ratones ICR hembras (de 5 a 6 semanas de edad) se administraron intravenosamente los compuestos del experimento (40 mg/kg/10 ml), respectivamente, y se expusieron durante 4 horas a rayos ultravioletas (320 a 400 nm, 1,8 mW/cm^{2}/seg). Sus orejas se observaron en busca de anormalidades a la 0 hora (inmediatamente después de la exposición), a las 24 y 48 horas.

La anormalidad de la oreja se valoró por los siguiente criterios: ninguna anormalidad (0 punto), eritema moderado (1 punto), eritema medio (2 puntos), y eritema severo o edema (3 puntos). Los resultados se presentan en la Tabla 2.

TABLA 2

	0 hour (point, frecuencia)	24 horas	48 horas
Compuesto 1	0, 0/3	0, 0/3	0, 0/3
Comp. Comparativo 1	0, 0/3	0, 0/3	0, 0/3
Comp. Comparativo 2	0,7, 2/3	0, 0/3	0, 0/3

(3) Efectos bactericidas en neumococos aislados clínicamente, resistentes a la quinolona

Usando placas de agar a las que se agregó un 5% de sangre de oveja desfibrinada, se determinaron las concentraciones mínimas inhibidoras del crecimiento (MIC, \mug/ml) de ciertos neumococos de acuerdo con el método estándar de la Sociedad de Japón de Quimioterapia [Quimioterapia, 29(1), 76(1981)]. Los resultados se presentan en la

\hbox{Tabla 3.}

TABLA 3

	Compuesto 1	Comp. Comp 1	CPFX	LVFX
Cocos aislados 1	0,03	0,06	8	2
Cocos aislados 5	0,12	0,5	64	32

De los resultados de las Tabla 1-Tabla 3, se ve que el compuesto según la presente invención exhibió una actividad microbicida comparable con, o mejor que, la de los compuestos comparativos, y también dio negativo en fototoxicidad.

(4) Estudio farmacocinético in vivo

Se realizó una investigación de la absorción en, y excreción desde, perros de los compuestos de la presente invención.

Se administró forzadamente per os una suspensión al 0,5% de uno de los compuestos del experimento en metilcelulosa (10 mg/ml/kg) a sabuesos masculinos de 2-4 años de edad, en ayunas durante 16 a 17 horas. Después de la administración, se recogieron muestras de sangres a las 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 6, 8 y 24 horas, y muestras de suero. Para determinar la tasa de eliminación de orina, también se recolectaron muestras de orina a las 24 horas después de la administración. Las concentraciones del compuesto del experimento en las muestras de suero y muestras de orina se midieron por el método del disco de papel haciendo al uso del Bacilo subtilis ATCC6633 como bacteria de prueba, y se valoraron la absorción y excreción. Los resultados obtenidos se presentan en la Tabla 4.

(Tabla pasa a página siguiente)

6

Ha sido confirmado de la Tabla 4 que los compuestos de la presente invención tienen una actuación significativamente mejorada en el estudio farmacocinético in vivo respecto a los compuestos comparativos.

Aplicabilidad industrial

El compuesto 1 y sus sales según la presente invención tienen propiedades características tales que, cuando se administran oralmente, exhiben un largo período de vida media en la sangre y una bioaccesibilidad sumamente alta, al mismo tiempo que retienen las propiedades de efectos microbicidas sumamente altos y baja toxicidad. También el compuesto 1 y sus sales tienen propiedades excelentes ya que tienen inferior efecto antihipertensivo y menores efectos colaterales en la piel, como erupción, que los compuestos conocidos de estructuras similares. Por consiguiente, el compuesto 1 y sus sales se pueden usar ampliamente como preventivos y terapéuticos para diversas enfermedades infecciosas en humanos y animales, y también como drogas para peces, agroquímicos, preservantes de comidas y análogos. Adicionalmente, se espera que el compuesto 1 de la presente invención tenga efectos antivirales, sobre todo, efectos anti SIDA, y se considera que es eficaz para la prevención o tratamiento del SIDA.

Claims

1. El ácido 1-(6-amino-3,5-di-fluoro-piridin-2-il)-8-bromo-7-(3-etilamino-acetidin-1-il)-6-fluoro-4-oxo-1,4-dihidro-quinolino-3-carboxílico o una de sus sales.

2. Una medicina que comprende como ingrediente activo el ácido 1-(6-amino-3,5-di-fluoro-piridin-2-il)-8-bromo-7-(3-etilamino-acetidin-1-il)-6-fluoro-4-oxo-1,4-dihidro-quinolino-3-carboxílico o una de sus sales.

3. Una medicina según la reivindicación 2 que es una medicina microbicida.

4. Una composición medicinal que comprende el ácido 1-(6-amino-3,5-di-fluoro-piridin-2-il)-8-bromo-7-(3-etilamino-acetidin-1-il)-6-fluoro-4-oxo-1,4-dihidro-quinolino-3-carboxílico o una de sus sales y un portador farmacéuticamente aceptable.

5. Una composición medicinal según la reivindicación 4 que es una composición medicinal microbicida.

6. El ácido 1-(6-amino-3,5-di-fluoro-piridin-2-il)-8-bromo-7-(3-etilamino-acetidin-1-il)-6-fluoro-4-oxo-1,4-dihidro-quinolino-3-carboxílico, o una de sus sales, para ser usado como una medicina.

7. El uso del ácido 1-(6-amino-3,5-di-fluoro-piridin-2-il)-8-bromo-7-(3-etilamino-acetidin-1-il)-6-fluoro-4-oxo-1,4-dihidro-quinolino-3-carboxílico o una de sus sales en la elaboración de una medicina para el tratamiento de una enfermedad infecciosa.