ES2224271T3 - Sulfonamidas y derivados de estos, que modulan la actividad de laendotelina. - Google Patents

Sulfonamidas y derivados de estos, que modulan la actividad de laendotelina.

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ES2224271T3 ES97943629T ES97943629T ES2224271T3 ES 2224271 T3 ES2224271 T3 ES 2224271T3 ES 97943629 T ES97943629 T ES 97943629T ES 97943629 T ES97943629 T ES 97943629T ES 2224271 T3 ES2224271 T3 ES 2224271T3
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Abstract

LA INVENCION SE REFIERE A TIENIL -, FURIL - Y PIRROLIL SULFONAMIDAS, FORMULACIONES DE SALES FARMACEUTICAMENTE ACEPTABLES DE LAS MISMAS Y A PROCEDIMIENTOS PARA MODULAR O ALTERAR LA ACTIVIDAD DE LA FAMILIA DE PEPTIDOS DE LA ENDOTELINA. EN PARTICULAR, SE PROPORCIONAN N - (ISOXANOLIL)TIENILSULFONAMIDAS, N - (ISOXAZOLIL)FURILSULFONAMIDAS Y N (ISOXAZOLIL)PIRROLILSULFONAMIDAS, FORMULACIONES DE LAS MISMAS Y PROCEDIMIENTOS QUE EMPLEAN DICHAS SULFONAMIDAS PARA INHIBIR LA UNION DE UN PEPTIDO DE ENDOTELINA A UN RECEPTOR DE ENDOTELINA, PONIENDO EN CONTACTO DICHO RECEPTOR CON LA SULFONAMIDA. SE SUMINISTRAN TAMBIEN PROCEDIMIENTOS DE TRATAMIENTO DE ALTERACIONES MEDIADAS POR ENDOTELINA, MEDIANTE LA ADMINISTRACION DE CANTIDADES EFECTIVAS DE UNA O MAS DE DICHAS SULFONAMIDAS O PROFARMACOS DE LAS MISMAS, QUE INHIBEN LA ACTIVIDAD DE LA ENDOTELINA.

Description

Sulfonamidas y derivados de estos, que modulan la actividad de la endotelina.
Campo de la invención
La presente se refiere a compuestos que modulan la actividad de la familia de péptidos de endotelina. En particular, la invención se refiere al uso de sulfonamidas y sales de sulfonamida y pro-fármacos como agonistas y antagonistas de endotelina.
Antecedentes de la invención
El endotelio vascular libera una variedad de sustancias vasoactivas, incluyendo el péptido vasoconstrictor derivado del endotelio, endotelina (ET) (ver, v.g., Vanhoutte y col. (1.986) Annual Rev. Physiol. 48: 307-320; Furchgott y Zawadski (1.980) Nature 288: 373-376). La endotelina, que fue identificada originalmente en el sobrenadante de cultivo de células endoteliales aórticas porcinas (ver, Yanagisawa y col. (1.988) Nature 332: 411-415), es un potente vasoconstrictor peptídico de veintiún aminoácidos. Es el vasopresor más potente conocido y es producido por numerosos tipos de células, incluyendo las células del endotelio, la traquea, el riñón y el cerebro. La endotelina es sintetizada en forma de un precursor de doscientos tres aminoácidos, preproendotelina, que contiene una secuencia señal que es escindida por una proteasa endógena para producir un péptido de treinta y ocho (humano) o treinta y nueve (porcino) aminoácidos. Este intermedio, referido como endotelina grande, es transformado in vivo en la forma biológicamente madura activa por una supuesta enzima conversora de endotelina (ECE) que parece ser una proteasa neutra dependiente de un metal (ver, v.g., Kashiwabara y col. (1.989) FEBS Lttrs 247: 337-340). Se requiere la escisión para la inducción de las respuestas fisiológicas (ver, v.g., von Geldern y col. (1.991) Peptide Res. 4: 32-35). En las células endoteliales aórticas porcinas, el intermedio de treinta y nueve aminoácidos, la endotelina grande, es hidrolizada en el enlace Trp^{21}-Val^{22} para generar la endotelina 1 y un fragmento C-terminal. En las células humanas se produce una escisión similar a partir del intermedio de treinta y ocho aminoácidos. Se han identificado tres isopéptidos de endotelina distintos, endotelina 1, endotelina 2 y endotelina 3, que manifiestan una potente actividad vasoconstrictora.
La familia de los tres isopéptidos endotelina 1, endotelina 2 y endotelina 3 está codificada por una familia de tres genes (ver, Inoue y col. (1.989) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:2863-2867; ver, también Saida y col. (1.989) J. Biol. Chem. 264: 14613-14616). Las secuencias de nucleótidos de los tres genes humanos están altamente conservadas dentro de la región que codifica los péptidos de 21 aminoácidos maduros y las porciones C-terminales de los péptidos son idénticas. La endotelina 2 es (Trp^{6}, Leu^{7})endotelina 1 y la endotelina 3 es (Thr^{2}, Phe^{4}, Thr^{5}, Tyr^{6}, Lys^{7}, Tyr^{14})endotelina 1. Estos péptidos están, por tanto altamente conservados en los extremos C-terminales. La liberación de endotelinas a partir de células endoteliales cultivadas está modulada por una variedad de estímulos químicos y físicos y parece estar regulada a nivel de la transcripción y/o de la traducción. La expresión del gen que codifica la endotelina 1 es incrementada por estímulos químicos, incluyendo la adrenalina, la trombina y el ionóforo del Ca^{2+}. La producción y liberación de endotelina a partir del endotelio es estimulada por la angiotensina II, la vasopresina, la endotoxina, la ciclosporina y otros factores (ver, Brooks y col. (1.991) Eur. J. Pharm. 194:115-117), y es inhibida por el óxido nítrico. Las células endoteliales parecen secretar factores relajantes derivados del endotelio de vida corta (EDRF), incluyendo óxido nítrico o una sustancia relacionada (Palmer y col. (1.987) Nature 327:524-526), cuando son estimuladas por agentes vasoactivos, tales como la acetilcolina y la bradiquinina. La vasoconstricción inducida por endotelina también es atenuada por el péptido natriurético atrial (ANP).
Los péptidos de endotelina muestran numerosas actividades biológicas in vitro e in vivo. La endotelina provoca una vasoconstricción fuerte y sostenida in vivo en ratas y en preparaciones de músculo liso vascular aislado; asimismo provoca la liberación de eicosanoides y del factor relajante derivado del endotelio (EDRF) a partir de lechos vasculares perfundidos. La administración intravenosa de endotelina 1 y la adición in vitro a tejidos de músculo liso vasculares y otros produce efectos presores y contracción de larga duración, respectivamente (ver, v.g. Bolger y col. (1.991) Can. J. Physiol. Pharmacol. 69: 406-413). En tiras vasculares aisladas, por ejemplo, la endotelina 1 es un potente agente contráctil (CE_{50} = 4 x 10^{-10} M), de acción lenta, pero persistente. in vivo, una única dosis eleva la presión sanguínea en aproximadamente veinte a treinta minutos. La vasoconstricción inducida por endotelina no resulta afectada por antagonistas de los neurotransmisores o los factores hormonales conocidos, pero es abolida por los antagonistas del canal del calcio. El efecto de los antagonistas del canal del calcio, sin embargo, es muy probablemente el resultado de la inhibición del influjo de calcio, puesto que el influjo de calcio parece ser necesario para la respuesta contráctil del endotelio de larga duración.
Asimismo, la endotelina media la liberación de renina, estimula la liberación de ANP e induce una acción inotrópica positiva en atrios de cobaya. En el pulmón, la endotelina 1 actúa como un potente broncoconstrictor (Maggi y col. (1.989) Eur. J. Pharmacol. 160:179-182). La endotelina incrementa la resistencia vascular renal, disminuye el flujo sanguíneo renal, y disminuye la velocidad de filtración glomerular. Es un potente mitógeno para las células mesangiales glomerulares e invoca la cascada de fosfoinósido en tales células (Simonson y col. (1.990) J. Clin. Invest. 85: 790-797).
Existen sitios de unión de alta afinidad específicos (constantes de disociación en el intervalo de 2-6 x 10^{-10}M) para las endotelinas en el sistema vascular y en otros tejidos, incluyendo el intestino, el corazón, los pulmones, los riñones, el bazo, las glándulas suprarrenales y el cerebro. La unión no es inhibida por las catecolaminas, los péptidos vasoactivos, las neurotoxinas o los antagonistas del canal de calcio. La endotelina se une e interacciona con los sitios receptores que son distintos de otros receptores autónomos y de los canales del calcio dependientes del voltaje. Los estudios de unión competitiva indican que existen múltiples clases de receptores con diferentes afinidades por los isopéptidos de endotelina. Las sarafotoxinas, un grupo de toxinas peptídicas del veneno de la serpiente Atractaspis eingadensis que ocasiona un grave vasoespasmo coronario en las víctimas de la mordedura de la serpiente, tienen una homología estructural y funcional con la endotelina 1 y se unen competitivamente a los mismos receptores de la membrana cardiaca (Kloog y col. (1.989) Trends Pharmacol. Sci. 10: 212-214).
Se han identificado dos receptores de endotelina distintos, denominados ET_{A} y ET_{B} y se han aislado clones de ADN que codifican cada receptor [Arai y col. (1.990) Nature 348: 730-732; Sakurai y col. (1.990) Nature 348: 732-735]. Basándose en las secuencias de aminoácidos de las proteínas codificadas por el ADN clonado, parece que cada receptor contiene siete dominios que cruzan la membrana y manifiesta similitud estructural con las proteínas de membrana acopladas a la proteína G. El ARN mensajero que codifica ambos receptores ha sido detectado en una variedad de tejidos, incluyendo el corazón, el pulmón, el riñón y el cerebro. La distribución de los subtipos de receptores es específica de los tejidos (Martín y col. (1.989) Biochem. Biophys. Res. Commun. 162: 130-137]. Los receptores ET_{A} parecen ser selectivos para la endotelina 1 y predominan en los tejidos cardiovasculares. Los receptores ET_{B} predominan en los tejidos no cardiovasculares, incluyendo el sistema nervioso central y el riñón, e interaccionan con los tres isopéptidos de endotelina (Sakurai y col. (1.990) Nature 348: 732-734). Además, los receptores ET_{A} existen en el músculo liso vascular, están conectados con la vasoconstricción y han sido asociados con las enfermedades del sistema vascular, renal y nervioso central; mientras los receptores ET_{B} están localizados en el endotelio vascular, conectados a la vasodilatación (Takayanagi y col. (1.991) FEBS Lttrs. 282: 103-106) y han sido asociados con las alteraciones broncoconstrictoras.
En virtud de la distribución de los tipos de receptor y de la afinidad diferencial de cada isopéptido por cada tipo de receptor, la actividad de los isopéptidos de endotelina varía en los diferentes tejidos. Por ejemplo, la endotelina 1 inhibe la unión a endotelina 1 marcada con I^{125} en tejidos cardiovasculares entre cuarenta y setecientas veces más potentemente que la endotelina 3. La unión a endotelina 1 marcada con I^{125} en tejidos no cardiovasculares, tales como el riñón, la glándula suprarrenal, y el cerebelo, es inhibida en el mismo grado por la endotelina 1 y la endotelina 3, lo que indica que los receptores ET_{A} predominan en los tejidos cardiovasculares y los receptores ET_{B} predominan en los tejidos no cardiovasculares.
Los niveles de endotelina en plasma son elevados en ciertos estados de enfermedad (ver, v.g., la Solicitud PCT Internacional WO 94/27979, y la Patente de los Estados Unidos Núm. 5.382.569). Los niveles de endotelina 1 en plasma en individuos sanos, medidos mediante radioinmunoanálisis (RIA), son de aproximadamente 0,26-5 pg/ml. Los niveles de endotelina 1 y su precursor, la endotelina grande, en sangre son elevados en la apoplejía, el infarto de miocardio, la angina de pecho, la insuficiencia renal y una variedad de alteraciones del tejido conectivo. En pacientes que experimentan hemodiálisis o transplante de riñón y padecen un choque cardiogénico, infarto de miocardio o hipertensión pulmonar se han observado niveles tan elevados como 35 pg/ml (ver, Stewart y col. (1.991) Annals Internal Med. 114: 464-469). Debido a que la endotelina es probablemente un factor regulador local, más que generalizado, es probable que los niveles de endotelina en la interfase endotelio/músculo liso sean mucho más altos que los niveles circulantes.
Asimismo se han medido niveles elevados de endotelina en pacientes que padecen enfermedades cardiacas isquémicas (Yasuda y col. (1.990) AMER. Heart J. 119:801-806, Ray y col. (1.992) Br. Heart J. 67:383-386). La inmunorreactividad de la endotelina circulante y en los tejidos aumenta más del doble en pacientes con aterosclerosis avanzada (Lerman y col. (1.991) New Engl. J. Med. 325:997-1001). También se ha asociado una inmunorreactividad de endotelina incrementada asociada con la enfermedad de Buerger (Kanno y col. (1.990) J. Amer. Med. Assoc. 264:2868) y el fenómeno de Raynaud (Zamora y col. (1.990) Lancet 336 1144-1147). Se observaron niveles de endotelina circulante incrementados en pacientes que padecían angioplastia coronaria transluminal percutánea (PTCA) (Tahara y col. (1.991) Metab. Clin. Exp. 40:1235-1237; Sanjay y col. (1.991) Circulation 84(Suppl. 4):726), y en individuos (Miyauchi y col. (1.992) Jpn. J. Pharmacol. 58:279P; Stewart y col. (1.991) Ann. Internal Medicine 114:464-469) con hipertensión pulmonar. Así, existen datos clínicos sobre humanos que apoyan la correlación entre los incrementos del nivel de endotelina y numerosos estados de enfermedad.
Agonistas y antagonistas de endotelina
Debido a que la endotelina está asociada con ciertos estados de enfermedad y está implicada en numerosos efectos fisiológicos, los compuestos que interfieren en o potencian las actividades asociadas con endotelina, tales como la interacción endotelina-receptor y actividad vasoconstrictora, son de interés. Se han identificado compuestos que manifiestan actividad antagónica de endotelina. Por ejemplo, se ha identificado un producto de la fermentación de Streptomyces misakiensis, denominado BE-18257B, como antagonista del receptor ET_{A}. BE-18257B, es un pentapéptido cíclico, ciclo(D-Glu-L-Ala-alo-D-Ile-L-Leu-D-Trp), que inhibe la unión a endotelina 1 marcada con I^{125} en tejidos cardiovasculares de una manera dependiente de la concentración (CI_{50} 1,4 \muM en músculo liso aórtico, 0,8 \muM en membranas de ventrículo y 0,5 \muM en células de músculo liso aórtico cultivadas), pero fracasa al inhibir la unión a receptores en tejidos en los que predomina ET_{B} a concentraciones de hasta 100 \muM. Se han sintetizado pentapéptidos cíclicos que tienen que ver con BE-18257B, tales como ciclo(D-Asp-Pro-D-Val-Leu-D-Trp) (BQ-123), y se ha demostrado que manifiestan actividad como antagonistas del receptor ET_{A} (ver, la Patente de los Estados Unidos Núm. 5.114.918 de Ishikawa y col.; ver, también, EP A1 0.436.189 de BANYU PHARMACEUTICAL CO., LTD (7 de Octubre de 1.991)). Los estudios que miden la inhibición por estos péptidos cíclicos de la unión de endotelina 1 a los receptores específicos de endotelina indican que estos péptidos cíclicos se unen preferentemente a los receptores ET_{A}. Se han identificado otros antagonistas de ET_{A} peptídicos y no peptídicos (ver, v.g. Patentes de los Estados Unidos núms.. 5.352.800, 5.334.598, 5.352.659, 5.248.807, 5.240.910, 5.198.548, 5.187.195, 5.082.838). Entre estos se incluyen otros pentapéptidos cíclicos, aciltripéptidos, análogos hexapeptídicos, ciertos derivados de antraquinona, ácidos indanocarboxílicos, ciertas N-piriminilbencenosulfonamidas, ciertas bencenosulfonamidas, y ciertas naftalenosulfonamidas (Nakajima y col. (1.991) J. Antibiot. 44:1348-1356; Miyata y col. (1.992) J. Antibiot. 45:74-8; Ishikawa y col. (1.992) J. Med. Chem. 35:2139-2142; Patente de los Estados Unidos Núm. 5.114.918 de Ishikawa y col. EP A1 0569193; EP A1 0.558.258; EP A1 0.436.189 de BANYU PHARMACEUTICAL CO., LTD (7 de Octubre de 1.991), Solicitud de Patente Canadiense 2.067.288; Solicitud de Patente Canadiense 2.071.193; Patente de los Estados Unidos Núm. 5.208.243; Patente de los Estados Unidos Núm. 5.270.313; Patente de los Estados Unidos Núm. 5.612.359, Patente de los Estados Unidos Núm. 5.514.696, Patente de los Estados Unidos Núm. 5.378.715; Cody y col. (1.993) Med. Chem. Res. 3:154-162; Miyata y col. (1.992) J. Antibiot 45:1041-1046; Miyata y col. (1.992) J. Antibiot 45:1029-1040, Fujimoto y col. (1.992) FEBS Lett. 305:41-44; Oshashi y col. (1.002) J. Antibiot 45:1684-1685; EP A10496 452; Clozel y col. (1.993) Nature 365:759-761; Solicitud de Patente Internacional WO 03/08799; Nishikibe y col. (1.993) Life Sci. 52:717-724; Y Benigni y col. (1.993) Kidney Int. 44:440-444). También se describen numerosas sulfonamidas que son antagonistas peptídicos de endotelina en las Patentes de los Estados Unidos Núms. 5.464.853, 5.594.021, 5.591.761, 5.571.821, 5.515.691, 5.464.853, solicitud de PCT Internacional núm. 96/31492 y solicitud PCT Internacional núm. WO97/27979.
En general, los compuestos identificados tienen actividades en los análisis in vitro como antagonistas de ET_{A} a concentraciones del orden de aproximadamente 50-100 \muM o menos. También se ha demostrado que varios de estos compuestos poseen actividad en modelos animales in vivo.
En EP-A-0819125 que cae dentro de los términos del Artículo 54(3) EPC, se describen ciertas tienil-, furil- y pirrolil-sulfonamidas útiles para modular o alterar la familia de péptidos de endotelina. Se describen ciertas N-(isoxalil)tienil-sulfonamidas.
Antagonistas y agonistas de endotelina como agentes terapéuticos
Se ha reconocido que los compuestos que manifiestan actividad a concentraciones CI_{50} o CE_{50} del orden de 10^{-4} o inferior en análisis in vitro normalizados que evalúan la actividad antagónica o agonística de endotelina tienen utilidad farmacológica (ver, v.g. las Patentes de los Estados Unidos núms. 5.352.800, 5.334.598, 5.352.659, 5.248.807, 5.240.910, 5.198.548, 5.187.195 y 5.082,838). En virtud de esta actividad, se considera que tales compuestos son útiles para el tratamiento de la hipertensión tal como la insuficiencia circulatoria periférica, las enfermedades cardíacas tales como la angina de pecho, la cardiomiopatía, la arterioesclerosis, el infarto de miocardio, la hipertensión pulmonar, el vasoespasmo, la restenosis vascular, la enfermedad de Raynaud, la apoplejía cerebral tal como el espasmo arterial cerebral, la isquemia cerebral, el espasmo cerebral en fase tardía tras la hemorragia subaracnoidea, el asma, la broncoconstricción, la insuficiencia renal, concretamente la insuficiencia renal post-isquémica, la nefrotoxicidad por ciclosporina tal como la insuficiencia renal aguda, la colitis, así como otras enfermedades inflamatorias, el choque endotóxico causado por o asociado con endotelina, y otras enfermedades en las que haya estado implicada la endotelina.
En vista de los numerosos efectos fisiológicos de la endotelina y de su asociación con ciertas enfermedades, se cree que la endotelina juega un papel crítico en estos estados patofisiológicos (ver, v.g. Saito y col. (1.990) Hipertensión 15:734-738; Tomita y col. (1.989) N. Engl. J. Med. 321:1127; Kurihara y col. (1.989) J. Cardiovasc. Pharmacol. 13(Suppl. 5):S13-S17; Doherty (1.992) J. Med. Chem. 35:1493-1508; Morel y col. (1.989) Eur. J. Pharmacol. 167:427-428). Un conocimiento más detallado de la función y la estructura de la familia de péptidos de endotelina proporcionaría una nueva percepción del progreso y el tratamiento de tales estados.
Para ayudar a conseguir una comprensión adicional y a desarrollar tratamientos para las alteraciones mediadas por o relacionadas con endotelina, existe la necesidad de identificar compuestos que modulen o alteren la actividad de la endotelina. La identificación de los compuestos que modulan la actividad de la endotelina, tales como los que actúan como antagonistas o agonistas específicos, puede ayudar no sólo a esclarecer la función de la endotelina, sino que puede rendir compuestos terapéuticamente útiles. En particular, los compuestos que interfieren específicamente en la interacción de los péptidos de endotelina con los receptores ET_{A} o ET_{B} deben ser útiles para identificar las características esenciales de los péptidos de endotelina, deben ayudar al diseño de agentes terapéuticos, y pueden ser útiles como agentes terapéuticos específicos de las enfermedades. Como se ha observado antes, muchos de los compuestos, concretamente los compuestos de sulfonamida, son potentes antagonistas de endotelina, y, por tanto, son candidatos clínicos ideales. Para uso clínico, son necesarios compuestos potentes optimizados para la actividad in vivo así como formulaciones estables y formulaciones adecuadas para diversas rutas de
administración.
Por lo tanto, un objeto de la presente es proporcionar compuestos que tengan la capacidad de modular la actividad biológica de uno o más de los isopéptidos de endotelina y que lo manifiesten in vivo. Otro objeto es proporcionar compuestos que tengan uso como antagonistas de endotelina específicos in vivo. También es un objeto utilizar compuestos que interaccionen específicamente con o inhiban la interacción de los péptidos de endotelina con los receptores ET_{A}. Asimismo es un objeto de la presente proporcionar formulaciones de tales compuestos útiles para el tratamiento de las enfermedades mediadas por endotelina. Estos compuestos deben ser útiles como agentes terapéuticos para el tratamiento de las enfermedades y alteraciones mediadas por endotelina.
Compendio de la invención
Se proporcionan las sulfonamidas, las formulaciones de sulfonamidas y los métodos para modular la interacción de un péptido de endotelina con los receptores ET_{A} y/o ET_{B}. En particular, se proporcionan las sulfonamidas, las formulaciones de sulfonamidas y los métodos para inhibir la unión de un péptido de endotelina a los receptores ET_{A} o ET_{B}. Las sulfonamidas son sulfonamidas sustituidas con tienilo o no sustituidas.
Los compuestos son N-isoxazolil-tiofenosulfonamidas donde el tiofeno está sustituido con un grupo arilo, que es un grupo fenilo, que tiene sólo uno o dos sustituyentes hidrógeno. Estos compuestos parecen mostrar una potencia, eficacia, biodisponibilidad, vida media y/o estabilidad in vivo superiores en comparación con los compuestos en los que el grupo arilo tiene más de dos sustituyentes hidrógeno, a la vez que evitan efectos toxicológicos asociados con el carácter hidrofóbo. Además, estos compuestos parecen mostrar buenos perfiles en los ensayos de toxicidad in vitro normalizados.
Se ha descubierto que para la administración in vivo, es deseable alcanzar el grado de carácter hidrófilo apropiado, que reduce las propiedades hemolíticas potenciales de los compuestos. Se ha descubierto aquí, por ejemplo, que esto se logra si el grupo arilo está tetrasustituido, en las posiciones 2, 4 y 6, y uno de estos sustituyentes será preferiblemente un grupo polar, tal como hidroxilo, acetoxi, carboxilo y carboxamido. Semejante sustitución intensifica la actividad antagonista de endotelina y el carácter hidrófilo de los compuestos.
Semejante sustitución proporciona compuestos con una buena biodisponibilidad, una prolongada vida media in vivo, y/o una buena eficacia in vivo. En vista de la presente descripción, se pueden determinar empíricamente otros patrones de sustituyentes y sustituyentes óptimos utilizando modelos animales adecuados.
En otra realización, la invención proporciona una sulfonamida o una sal, ácido o éster de la misma farmacéuticamente aceptable de fórmula V:
1
2
donde:
Ar^{1} tiene la fórmula:
3
donde R^{A} y R^{B} son (i), (ii) o (iii) como sigue:
(i) R^{A} y R^{B} se seleccionan cada uno independientemente entre H, NH_{2}, NO_{2}, haluro, pseudohaluro, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, alcoxi, alquilamino, alquiltio, alquiloxi, haloalquilo, alquilsulfinilo, alquilsulfonilo, ariloxi, arilamino, ariltio, arilsulfinilo, arilsulfonilo, haloalquilo, haloarilo, alcoxicarbonilo, alquilcarbonilo, aminocarbonilo, arilcarbonilo, formilo, amido sustituido o no sustituido, ureido sustituido o no sustituido, donde las porciones alquílicas, alquenílicas y alquinílicas contienen de 1 a aproximadamente 14 átomos de carbono y son cadenas lineales o ramificadas o cíclicas, y las porciones arílicas contienen de aproximadamente 4 a aproximadamente 16 carbonos, excepto que R^{B} no es haluro o pseudohaluro; o
(ii) R^{A} y R^{B} forman juntos -(CH_{2})_{n}, donde n es de 3 a 6; o,
(iii) R^{A} y R^{B} forman juntos 1,3-butadienilo;
W es -NH-; y
R^{20} se selecciona del grupo formado por arilo, heteroarilo, heterociclilo, OH, CN, C(O)R^{16}, CO_{2}R^{16}, SH, S(O)_{n}R^{16} donde n es 0-2, un aminoácido D, L o racémico, una ribosa o hexosa, un O-glicósido, un cloruro de sulfonilo, -(CH_{2})_{x}
OH, NHOH, NR^{12}R^{16}, NO_{2}, N_{3}, OR^{16}, R^{12}NCOR^{16} y CONR^{12}R^{16};
R^{16} es hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, alquilarilo, heterociclo, aralquilo, aralcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo o cicloalquinilo;
R^{12} se selecciona entre hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, alquilarilo, heterociclo, aralquilo, aralcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo, cicloalquinilo, C(O)R^{17} y S(O)_{n}R^{17} donde n es 0-2;
R^{17} es hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, alquilarilo, heterociclo, aralquilo, aralcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo o cicloalquinilo; y
cada uno de R^{12}, R^{15} y R^{16} puede estar adicionalmente sustituido con cualquiera de los grupos mostrados para Z;
Z es hidrógeno, haluro, pseudohaluro, alquilo, alcoxi, alquenilo, alquinilo, arilo, aminoácidos, amidas primarias y secundarias, O-glicósidos, hexosas, ribosas, alquilarilo, alquilheteroarilo, heterociclo, aralquilo, aralcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo, cicloalquinilo, OH, CN, C(O)R^{16}, OC(O)R^{16}, CO_{2}R^{16}, OCO_{2}R^{16}, SH, S(O)_{n}R^{16} donde n es 0-2, NHOH, NR^{12}R^{16}, NO_{2}, N_{3}, OR^{16}, R^{12}NCOR^{16} y CONR^{12}R^{16}; R^{16} es hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, alquilarilo, heterociclo, aralquilo, aralcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo, cicloalquinilo, cloruro, NHR^{50}, alquilarilo, alquilheteroarilo, o -(CH_{2})_{x}OH; R^{50} es un sustituyente tal como hidrógeno, alquilo inferior, o alcoxi inferior; R^{12}, que se selecciona independientemente entre R^{11} y Z, se selecciona entre hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, alquilarilo, heterociclo, aralquilo, aralcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo, cicloalquinilo, C(O)R^{17} y S(O)_{n}R^{17} donde n es 0-2; R^{17} es hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, alquilarilo, heterociclo, aralquilo, aralcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo o cicloalquinilo; R^{12} y R^{16} pueden formar juntos alquileno.
De los compuestos descritos aquí, se prefieren aquellos que inhiben o incrementan una actividad mediada por endotelina en aproximadamente un 50% a concentraciones de menos de aproximadamente 10 \muM. Son más preferidos aquellos que inhiben o incrementan una actividad mediada por endotelina en aproximadamente un 50% a concentraciones de menos de aproximadamente 1 \muM, más preferiblemente menos de aproximadamente 0,1 \muM, incluso más preferiblemente menos de aproximadamente 0,01 \muM, y muy preferiblemente menos de aproximadamente 0,001 \muM. Se observa que, como se describe más abajo, la concentración CI_{50} determinada en los análisis in vitro es una función no lineal de la temperatura de incubación. Los valores preferidos citados aquí hacen referencia a los análisis que se realizan a 4ºC. Cuando los análisis se realizan a 24ºC, se observan concentraciones CI_{50} algo superiores (ver, Tabla 1). Por consiguiente, las concentraciones CI_{50} preferidas son aproximadamente 10 veces mayores. Además, de estos compuestos, aquellos que manifiestan la mayor biodisponibilidad y estabilidad, según se determina utilizando modelos animales normalizados
Asimismo, entre los compuestos más preferidos para su uso en los métodos proporcionados aquí, están aquellos que son selectivos para ET_{A}, es decir, interaccionan con los receptores ET_{A} a concentraciones sustancialmente inferiores (a una CI_{50} al menos aproximadamente 10 veces inferior, preferiblemente 100 veces inferior) que las que interaccionan con los receptores ET_{B}. En particular, se prefieren los compuestos que interaccionan con ET_{A} con una CI_{50} de menos de aproximadamente 10 \muM, preferiblemente menos de 1 \muM, más preferiblemente menos de 0,1 \muM, pero con ET_{B} con una CI_{50} de más de aproximadamente 10 \muM o los compuestos que interaccionan con ET_{B} con una CI_{50} de menos de aproximadamente 10 \muM, preferiblemente menos de 1 \muM, más preferiblemente menos de 0,1 \muM, pero con ET_{A} con una CI_{50} de más de aproximadamente 10 \muM.
Asimismo resulta de interés cualquier derivado farmacéuticamente aceptable, incluyendo las sales, ésteres, ácidos y bases, solvatos, hidratos y profármacos de las sulfonamidas farmacéuticamente aceptables. Se prefieren las sales farmacéuticamente aceptables, incluyendo, pero no limitadas a, sales de aminas, tales como pero no limitadas a N,N'-dibenciletilendiamina, cloroprocaína, colina, amoníaco, dietanolamina y otras hidroxialquilaminas, etilendiamina, N-metilglucamina, procaína, N-bencilfenetilamina, 1-para-clorobencil-2-pirrolidin-1'-ilmetil-bencimidazol, dietilamina y otras alquilaminas, piperazina, tris(hidroximetil)aminometano, sales de metales alcalinos, tales como pero no limitados litio, potasio y sodio, sales de metales alcalinotérreos, tales como pero no limitados a bario, calcio y magnesio, sales de metales de transición, tales como pero no limitados a cinc y otras sales metálicas, tales como pero no limitadas a hidrogenofosfato de sodio y fosfato de disodio, preferiblemente sales de sodio, más preferiblemente la sal de sodio, e incluyendo también, pero no limitadas a, las sales de ácidos minerales, tales como pero no limitadas a hidrocloruros y sulfatos, sales de ácidos orgánicos, tales como pero no limitadas a acetatos, lactatos, malatos, tartratos, citratos, ascorbatos, succinatos, butiratos, valeratos y fumaratos. Concretamente se prefieren aquí las sales de metales alcalinos, concretamente las sales de sodio. Son muy preferidas las sales de sodio.
Asimismo se proporcionan las formulaciones farmacéuticas para la administración mediante una ruta apropiada y los medios que contienen concentraciones efectivas de uno o más de los compuestos proporcionados aquí o las sales, ésteres, ácidos y bases, solvatos, hidratos y profármacos de las sulfonamidas farmacéuticamente aceptables, preferiblemente las sales, más preferiblemente las sales de sodio, incluyendo pero no limitadas a sales de sodio y sales de hidrogenofosfato de sodio, muy preferiblemente la sal de sodio, de las mismas que liberan cantidades efectivas para el tratamiento de la hipertensión, la apoplejía, las enfermedades cardiovasculares, las enfermedades cardíacas incluyendo el infarto de miocardio, la hipertensión pulmonar, la hipertensión mediada por eritropoyetina, las enfermedades respiratorias, las enfermedades inflamatorias, incluyendo el asma, la broncoconstricción, las enfermedades oftalmológicas incluyendo el glaucoma y la perfusión retinal inadecuada, las enfermedades gastroentéricas, la insuficiencia renal, el choque por endotoxinas, las alteraciones menstruales, los estados obstétricos, la heridas, el choque anafiláctico, el choque hemorrágico, y otras alteraciones en las cuales están implicadas las respuestas fisiológicas mediadas por endotelina o que implican vasoconstricción o cuyos síntomas pueden ser aliviados mediante la administración de un antagonista o agonista de endotelina.
Las formulaciones son composiciones adecuadas para la administración mediante cualquier ruta deseada y se incluyen soluciones, suspensiones, emulsiones, tabletas, tabletas dispersables, píldoras, cápsulas, polvos, polvos secos para inhalación, formulaciones de liberación sostenida, aerosoles para liberación nasal y respiratoria, parches para liberación transdérmica y cualquier otra ruta adecuada. Las composiciones deben ser adecuadas para la administración oral, la administración parenteral mediante inyectables, incluyendo subcutáneamente, intramuscularmente o intravenosamente en forma de una solución o emulsión acuosa u oleosa inyectable, para la administración transdérmica y otras rutas seleccionadas.
Asimismo se proporcionan polvos liofilizados de los derivados de sulfonamida, métodos para la preparación de los mismos, y formulaciones que contienen formas reconstituidas de los polvos liofilizados. También se proporcionan viales y ampollas y jeringas y otros recipientes adecuados que contienen los polvos.
Entre las formulaciones preferidas se incluye un polvo liofilizado estéril que contiene sales farmacéuticamente aceptables, preferiblemente sales de sodio, más preferiblemente una sal de sodio, de una sulfonamida, y también se incluyen cápsulas y tabletas. Las formulaciones particularmente preferidas son aquellas que liberan cantidades efectivas para el tratamiento de la hipertensión o la insuficiencia renal. Las cantidades y concentraciones efectivas son eficaces para aliviar cualquiera de los síntomas de cualquiera de las alteraciones.
En una realización, las formulaciones son sólidos liofilizados que contienen una o más sales, preferiblemente hidrogenofosfato de sodio o sales de sodio, más preferiblemente sales de sodio, de uno o más compuestos de sulfonamida de fórmula I y también contienen uno o más de los siguientes: un tampón, tal como fosfato de sodio o potasio, o citrato; un agente solubilizante, tal como LABRASOL (glicéridos caprílico y cáprico de polietilenglicol-8 suministrados por Gattefosse SA, Francia), DMSO, bis(trimetilsilil)-acetamida, etanol, propilenglicol (PG), o polivinilpirrolidona (PVP); y un azúcar u otro carbohidrato, tal como sorbitol o dextrosa.
En otras realizaciones, las formulaciones son formas de dosificación sólidas, preferiblemente cápsulas o tabletas. En una realización preferida, las formulaciones son formas de dosificación sólidas, preferiblemente cápsulas o tabletas, que contienen el 10-100%, preferiblemente el 50-95%, más preferiblemente el 75-85%, muy preferiblemente el 80-85%, en peso de una o más sales, preferiblemente hidrogenofosfato de sodio o sales de sodio, más preferiblemente las sales de sodio, de uno o más compuestos de sulfonamida de fórmula I; aproximadamente el 0-25%, preferiblemente el 8-15%, de un excipiente o un aglutinante, tal como lactosa o celulosa microcristalina; aproximadamente del 0 al 10%, preferiblemente aproximadamente el 3-7%, de un disgregante, tal como almidón modificado o polímero de celulosa, concretamente una sal de sodio de carboximetilcelulosa entrecruzada, tal como croscarmelosa sódica (Crosscarmellose sodium NF es asequible comercialmente con el nombre AC-DI-SOL, FMC Corporation, Filadelfia, PA) o sal de sodio de glicolato de almidón; y el 0-2% de un lubricante, tal como un estearato de magnesio, talco y estearato de calcio. El disgregante, tal como la croscarmelosa sódica o la sal de sodio de glicolato de almidón, proporciona una rápida disgregación de la matriz de celulosa para la liberación inmediata del agente activo tras la disolución del polímero de revestimiento. En todas las realizaciones, se puede determinar empíricamente la cantidad precisa de ingrediente activo e ingredientes coadyuvantes y es una función de la ruta de administración y de la alteración que esté siendo
tratada.
En una realización ejemplar, las formulaciones son cápsulas que contienen aproximadamente el 80-100%, preferiblemente aproximadamente el 75-95%, más preferiblemente aproximadamente el 83%, de una o más sales de sodio de uno o más compuestos de sulfonamida de fórmula I; aproximadamente el 0-15%, preferiblemente aproximadamente el 11% de un excipiente o aglutinante, tal como lactosa o celulosa microcristalina; aproximadamente el 0-10%, preferiblemente aproximadamente el 5% de un disgregante, tal como croscarmelosa sódica o sal de sodio de glicolato de almidón; y aproximadamente del 0 al 5%, preferiblemente aproximadamente el 1% de un lubricante, tal como estearato de magnesio. También se contemplan aquí las formas sólidas para la administración tales como tabletas. Se entiende que las cantidades precisas y la composición de las mismas pueden ser determinadas empíricamente por un artesano experto.
La invención proporciona adicionalmente el uso de compuestos de fórmula V y de las sales, ácidos o ésteres de los mismos farmacéuticamente aceptables en la preparación de medicamentos para fines específicos. Estos fines se estudian más abajo en términos de los métodos.
Se proporcionan los métodos en los que se utilizan tales formulaciones para modular la interacción de un péptido de endotelina con los receptores ET_{A} y/o ET_{B}. Los métodos se llevan a cabo poniendo en contacto los receptores con una o más de las sales farmacéuticamente aceptables de sulfonamida formuladas, preferiblemente sales de sodio formuladas, antes de, simultáneamente, o después de poner en contacto los receptores con un péptido de endotelina.
Se proporcionan los métodos para inhibir la unión de un péptido de endotelina a un receptor de endotelina. Estos métodos se ponen en práctica poniendo en contacto el receptor con uno o más de los compuestos o una o más de las formulaciones de las sales de los compuestos farmacéuticamente aceptables proporcionados aquí simultáneamente, antes, o después de poner en contacto el receptor con un péptido de endotelina.
Se proporcionan los métodos para el tratamiento de las alteraciones mediadas por endotelina, incluyendo, pero no limitadas a, hipertensión, asma, apoplejía, hipertensión ocular, glaucoma, perfusión retinal inadecuada y otros estados que están en cierto modo mediados por un péptido de endotelina, o para el tratamiento de una alteración que implique la vasoconstricción o que se alivie mediante la administración de un antagonista o agonista de endotelina.
En particular, se proporcionan los métodos de tratamiento de alteraciones mediadas por endotelina mediante la administración de cantidades eficaces de las sulfonamidas, los profármacos u otros derivados adecuados de las sulfonamidas. En particular, se proporcionan los métodos para tratar las alteraciones mediadas por endotelina, incluyendo la hipertensión, las enfermedades cardiovasculares, las enfermedades cardíacas incluyendo el infarto de miocardio, la hipertensión pulmonar, la hipertensión mediada por eritropoyetina, las enfermedades respiratorias, las enfermedades inflamatorias, incluyendo el asma, la broncoconstricción, las enfermedades oftalmológicas, las enfermedades gastroentéricas, la insuficiencia renal, el choque por endotoxinas, las alteraciones menstruales, los estados obstétricos, las heridas, el choque anafiláctico, el choque hemorrágico, y otras enfermedades en las cuales están implicadas las respuestas fisiológicas mediadas por endotelina, mediante la administración de cantidades eficaces de uno o más de los compuestos proporcionados aquí en portadores farmacéuticamente aceptables. Los métodos de tratamiento preferidos son los métodos para el tratamiento de la hipertensión y la insuficiencia renal.
Los métodos de tratamiento más preferidos son aquellos en los cuales las formulaciones contienen al menos un compuesto que inhibe la interacción de la endotelina 1 con los receptores ET_{A} a una CI_{50} de menos de aproximadamente 10 \muM, y preferiblemente menos de aproximadamente 5 \muM, más preferiblemente menos de aproximadamente 1 \muM, incluso más preferiblemente menos de 0,1 \muM, y muy preferiblemente menos de 0,05 \muM. Otros métodos preferidos son aquellos en los cuales las formulaciones contienen sales farmacéuticamente aceptables de uno o más compuestos que es o son selectivos para ET_{A} o sales farmacéuticamente aceptables de uno o más compuestos que es o son selectivos para ET_{A}. Los métodos en los cuales los compuestos son selectivos para ET_{A} son para el tratamiento de alteraciones, tales como la hipertensión; y los métodos en los cuales los compuestos son selectivos para ET_{B} son para el tratamiento de las alteraciones, tales como el asma, que requieren broncodilatación.
Al poner en práctica los métodos, se administran a un individuo que manifiesta los síntomas de una o más alteraciones cantidades eficaces de formulaciones que contienen concentraciones terapéuticamente eficaces de los compuestos formulados para aplicación oral, intravenosa, local y tópica para el tratamiento de la hipertensión, las enfermedades cardiovasculares, las enfermedades cardíacas incluyendo el infarto de miocardio, las enfermedades respiratorias, incluyendo el asma, las enfermedades inflamatorias, las enfermedades oftalmológicas, las enfermedades gastroentéricas, la insuficiencia renal, la vasoconstricción renal mediada por inmunosupresores, la vasoconstricción mediada por eritropoyetina, el choque por endotoxinas, el choque anafiláctico, el choque hemorrágico, la hipertensión pulmonar, y otras enfermedades en las cuales están implicadas respuestas fisiológicas mediadas por endotelina. Las cantidades son eficaces para mejorar o eliminar uno o más síntomas de las alteraciones.
Asimismo se proporcionan los métodos para la identificación y el aislamiento de los subtipos de receptores de endotelina. En particular, se proporcionan métodos para detectar, distinguir y aislar receptores de endotelina utilizando los compuestos descritos. En particular, se proporcionan métodos para detectar, distinguir y aislar receptores de endotelina utilizando los compuestos proporcionados aquí.
Además, también se proporcionan los métodos para identificar compuestos que son adecuados para su uso en el tratamiento de enfermedades concretas basadas en su afinidad preferente por un subtipo de receptor de endotelina concreto.
Se proporcionan los artículos de manufactura que contienen material de envasado, un compuesto proporcionado aquí, que es eficaz para aliviar los síntomas de una alteración mediada por endotelina, ejercer una acción antagónica sobre los efectos de la endotelina o inhibir la unión de los péptidos de endotelina a un receptor ET con una CI_{50} de menos de aproximadamente 10 \muM, dentro del material de envasado, y una etiqueta que indica que el compuesto o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo formulada se utiliza para ejercer una acción antagónica sobre los efectos de la endotelina, tratar una alteración mediada por endotelina, o inhibir la unión de un péptido de endotelina a un receptor ET.
Descripción detallada de las realizaciones preferidas Definiciones
A menos que se definan de otro modo, todos los términos técnicos y científicos utilizados aquí tienen el mismo significado conocido comúnmente por un experto en la técnica a la cual pertenece esta definición. Todas las patentes y publicaciones referidas aquí se incorporan como referencia.
Según se utiliza aquí, en los péptidos de endotelina (ET) se incluyen péptidos que tienen sustancialmente la secuencia de aminoácidos de la endotelina 1, la endotelina 2 o la endotelina 3 y que actúan como potentes péptidos vasoconstrictores endógenos.
Según se utiliza aquí, un estado mediado por endotelina es un estado que está ocasionado por la actividad anómala de la endotelina o uno en el que los compuestos que inhiben la actividad de endotelina tienen uso terapéutico. Entre tales enfermedades se incluyen, pero no están limitadas a, la hipertensión, las enfermedades cardiovasculares, el asma, las enfermedades inflamatorias, las enfermedades oftalmológicas, las alteraciones menstruales, los estados obstétricos, las enfermedades gastroentéricas, la insuficiencia renal, la hipertensión pulmonar, el choque por endotoxinas, el choque anafiláctico, o el choque hemorrágico. Entre los estados mediados por endotelina también se incluyen los estados que resultan de la terapia con agentes, tales como la eritropoyetina y los inmunosupresores, que elevan los niveles de endotelina.
Según se utiliza aquí una cantidad eficaz de un compuesto para tratar una enfermedad concreta es una cantidad que es suficiente para aliviar, o de alguna manera reducir los síntomas asociados con la enfermedad. Semejante cantidad puede ser administrada en una sola dosis o puede ser administrada según un régimen, por medio del cual sea eficaz. La cantidad puede curar la enfermedad pero, típicamente, se administra con el fin de aliviar los síntomas de la enfermedad. Típicamente, se requiere una administración repetida para lograr el alivio deseado de los síntomas.
Según se utiliza aquí, un agonista de endotelina es un compuesto que potencia o manifiesta una actividad biológica asociada con o poseída por un péptido de endotelina.
Según se utiliza aquí, un antagonista de endotelina es un compuesto, tal como un fármaco o un anticuerpo, que inhibe la vasoconstricción y la contracción estimuladas por endotelina y otras respuestas fisiológicas mediadas por endotelina. El antagonista puede actuar interfiriendo en la interacción de la endotelina con un receptor específico de endotelina o interfiriendo en la respuesta fisiológica o bioactividad de un isopéptido de endotelina, tal como la vasoconstricción. Así, según se utiliza aquí, un antagonista de endotelina interfiere en la vasoconstricción estimulada por endotelina o en otra respuesta o interfiere en la interacción de una endotelina con un receptor específico de endotelina, tal como los receptores ET_{A}, como se evalúa mediante los análisis conocidos por los expertos en la técnica.
La eficacia de los agonistas y antagonistas potenciales puede ser evaluada utilizando métodos conocidos por los expertos en la técnica. Por ejemplo, la actividad agonística de endotelina puede ser identificada mediante su capacidad para estimular la vasoconstricción de anillos de aorta o vena porta torácica de rata aislados (Borges y col. (1.989) "Tissue selectivity of endothelin" Eur. J. Pharmacol. 165: 223-230). La actividad antagónica de endotelina puede ser evaluada mediante la capacidad para interferir en la vasoconstricción inducida por endotelina. Los análisis ejemplares se exponen en los Ejemplos. Como se ha observado antes, los intervalos de concentración CI_{50} preferidos se exponen con referencia a los análisis en los cuales se incuba el compuesto de ensayo con las células portadoras del receptor ET a 4ºC. Se identifican los datos presentados para los análisis en los cuales se realiza la etapa de incubación a la temperatura menos preferida de 24ºC. Se entiende que con fines de comparación, estas concentraciones son algo superiores a las concentraciones determinadas a 4ºC.
Según se utiliza aquí, biodisponibilidad hace referencia a la velocidad y el grado de absorción. Los métodos para determinar la biodisponibilidad son bien conocidos por los expertos en la técnica. Por ejemplo, la biodisponibilidad de cualquiera de los compuestos descritos aquí puede ser determinada empíricamente mediante la administración del compuesto a un animal, seguido de la toma de muestras de sangre a lo largo del tiempo y de la medida de la concentración en sangre del compuesto. La vida media in vivo (t_{1/2}) se define como el tiempo que lleva reducir a la mitad la concentración de compuesto en la sangre. Las estimaciones del área bajo la curva para la administración intravenosa pueden ser utilizadas para estimar el área bajo la curva para la administración oral, proporcionando los datos de biodisponibilidad. Ver, v.g., Milo Gibal (1.991) Biopharmaceutics and Pharmacology, 4ª edición (Lea y Sediger).
Según se utiliza aquí, la eficacia hace referencia al efecto máximo que puede ser producido por un compuesto. La eficacia puede ser determinada mediante métodos conocidos por los expertos en la técnica. Por ejemplo, se puede determinar mediante las propiedades del compuesto y su sistema receptor-efector y se refleja en la meseta de la curva concentración-efecto. La eficacia in vivo hace referencia a la eficacia que se determina en un modelo animal. Por ejemplo, se puede determinar la eficacia in vivo de los compuestos descritos aquí mediante hipertensión pulmonar inducida por hipoxia en rata. Ver, v.g., DiCarlo y col. (1.995) Am. J. Physiol. 269:L690-L697.
Según se utiliza aquí, en la actividad biológica o bioactividad de la endotelina se incluye cualquier actividad inducida, potenciada o influenciada por la endotelina in vivo. También se incluye la capacidad para unirse a receptores concretos y para inducir una respuesta funcional, tal como vasoconstricción. Esto puede ser evaluado mediante análisis in vivo o in vitro, tales como los ejemplificados aquí. Entre las actividades relevantes se incluyen, pero no están limitadas a, vasoconstricción, vasorrelajación y broncodilatación. Por ejemplo, los receptores ET_{B} parecen ser expresados en células endoteliales vasculares y pueden mediar la vasodilatación y otras respuestas semejantes; mientras los receptores ET_{A}, que son específicos de endotelina 1, aparecen en músculo liso y están ligados a la vasoconsctricción. Se puede utilizar cualquier análisis conocido por los expertos en la técnica para medir o detectar semejante actividad (ver, v.g., Spokes y col. (1.989) J. Cardiovasc. Pharmacol. 13(Suppl.5):S191-S192; Spinella y col. (1.991) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88:7443-7446; Cardeli y col. (1.991) Neurochem. Int. 18:571-574); y los Ejemplos de la presente).
Según se utiliza aquí, la CI_{50} hace referencia a una cantidad, concentración o dosificación de un compuesto de ensayo concreto que logra una inhibición del 50% de una respuesta máxima, tal como la unión de endotelina a los receptores de tejidos, en un análisis que mida semejante respuesta.
Según se utiliza aquí, la CE_{50} hace referencia a una dosificación, concentración o cantidad de un compuesto de ensayo concreto que logra una respuesta dependiente de la dosis a un 50% de la expresión máxima de una respuesta concreta que es inducida, provocada o potenciada por el compuesto de ensayo concreto.
Según se utiliza aquí una sulfonamida que es selectiva para ET_{A} hace referencia a sulfonamidas que manifiestan una CI_{50} que es al menos aproximadamente 10 veces inferior con respecto a los receptores ET_{A} que respecto a los receptores ET_{B}.
Según se utiliza aquí, una sulfonamida que es selectiva para ET_{B} hace referencia a sulfonamidas que manifiestan una CI_{50} que es al menos aproximadamente 10 veces inferior con respecto a los receptores ET_{B} que respecto a los receptores ET_{A}.
Según se utiliza aquí, entre las sales, ésteres, hidratos, solvatos u otros derivados farmacéuticamente aceptables de los compuestos se incluye cualquiera de tales sales, ésteres y otros derivados que pueden ser preparados por los expertos en esta técnica utilizando métodos conocidos para semejante transformación y que producen compuestos que pueden ser administrados a animales o humanos sin efectos tóxicos sustanciales y que son farmacéuticamente activos o son pro-fármacos. Entre las sales farmacéuticamente aceptables se incluyen, pero no están limitadas a, sales de metales alcalinos y metales alcalinotérreos, incluyendo pero no limitadas a sales de sodio, sales de potasio, sales de litio, sales de calcio y sales de magnesio; sales de metales de transición, tales como sales de cinc, sales de cobre y sales de aluminio; sales contraiónicas policatiónicas, tales como, pero no limitadas a sales de amonio y amonio sustituido y sales de aminas orgánicas, tales como hidroxialquilaminas y alquilaminas; sales de ácidos minerales, tales como, pero no limitadas a hidrocloruros y sulfatos, sales de ácidos orgánicos, tales como, pero no limitadas a acetatos, lactatos, malatos, tartratos, citratos, ascorbatos, succinatos, butiratos, valeratos y fumaratos. También se contemplan aquí los correspondientes ésteres.
Según se utiliza aquí, la referencia a las "sales de sodio" hace referencia a sales de cualquier compuesto de sodio en el cual el contraión incluye Na^{+} y puede incluir otros iones, tales como HPO_{4}^{2-}; la referencia a una "sal de sodio" (en lugar de sales de sodio) hace referencia específicamente a una sal en la cual el contraión es Na^{+}.
Según se utiliza aquí, tratamiento representa cualquier manera en la cual se alivian o se alteran beneficiosamente de otro modo los síntomas de afecciones, alteraciones o enfermedades. Tratamiento también abarca cualquier uso farmacéutico de las presentes composiciones, tal como el uso como agentes contraceptivos.
Según se utiliza aquí, tratamiento representa cualquier manera en la cual se alivian o se alteran beneficiosamente de otro modo los síntomas de afecciones, alteraciones o enfermedades. Tratamiento también abarca cualquier uso farmacéutico de las presentes composiciones, tales como el uso como agentes contraceptivos.
Según se utiliza aquí, alivio de los síntomas de una alteración concreta mediante la administración de una composición farmacéutica dada hace referencia a cualquier disminución, ya sea permanente o temporal, duradera o transitoria que se pueda atribuir o asociar con la administración de la composición.
Según se utiliza aquí, sustancialmente puro representa suficientemente homogéneo para parecer libre de impurezas fácilmente detectables como se determina mediante métodos de análisis normalizados, tales como la cromatografía en capa fina (TLC), la electroforesis en gel y la cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC), utilizados pos los expertos en la técnica para evaluar semejante pureza, o suficientemente puro de manera que la purificación adicional no altere detectablemente las propiedades físicas y químicas, tales como las actividades enzimáticas y biológicas, de la sustancia. Los métodos para la purificación de los compuestos para producir compuestos sustancialmente químicamente puros son conocidos por los expertos en la técnica. Un compuesto sustancialmente químicamente puro puede ser, sin embargo, una mezcla de estereoisómeros. En tales casos, la purificación adicional podría incrementar la actividad específica del compuesto.
Según se utiliza aquí, actividad biológica hace referencia a las actividades in vivo de un compuesto o a las respuestas fisiológicas que resultan de la administración in vivo de un compuesto, composición u otra mezcla. La actividad biológica, por tanto, abarca los efectos terapéuticos y la actividad farmacéutica de tales compuestos, composiciones y mezclas.
Según se utiliza aquí, estabilidad incrementada de una formulación significa que el porcentaje de componente activo presente en la formulación, según se determina mediante análisis conocidos por los expertos en la técnica, tales como la cromatografía de líquidos de alta resolución, cromatografía de gases, y similares, a un período de tiempo dado después de la preparación de la formulación es significativamente superior que el porcentaje de componente activo presente en otra formulación en el mismo período de tiempo tras la preparación de la formulación. En este caso, se dice que la primera formulación posee una actividad incrementada en relación con la última formulación.
Según se utiliza aquí, un profármaco es un compuesto que, tras la administración in vivo, es metabolizado o convertido de otro modo en la forma biológicamente, farmacéuticamente o terapéuticamente activa del compuesto. Para producir un profármaco, el compuesto farmacéuticamente activo es modificado de manera que el compuesto activo sea regenerado mediante procedimientos metabólicos. El profármaco puede ser diseñado para alterar la estabilidad metabólica o las características de transporte de un fármaco, para enmascarar los efectos secundarios o la toxicidad, para mejorar el aroma de un fármaco o alterar otras características o propiedades del fármaco. En virtud del conocimiento de los procedimientos farmacodinámicos y del metabolismo del fármaco in vivo, los expertos en la técnica, una vez conocido el compuesto farmacéuticamente activo, pueden diseñar profármacos del compuesto (ver, v.g., Nogrady (1.985) Medicinal Chemistry A Biochemical Approach, Oxford University Press, Nueva York, páginas 388-392). Por ejemplo, el succinil-sulfatiazol es un profármaco de 4-amino-N-(2-tiazolil)bencenosulfonamida (sulfatiazol) que manifiesta características de transporte alteradas.
Según se utiliza aquí, isóstero ácido representa un grupo que está significativamente ionizado a pH fisiológico. Entre los ejemplos de los isósteros ácidos adecuados se incluyen sulfo, fosfono, alquilsulfonilcarbamoílo, tetrazolilo, arilsulfonil-carbamoílo o heteroarilsulfonilcarbamoílo.
Según se utiliza aquí, halo o haluro hace referencia a los átomos de halógeno; F, Cl, Br, y I.
Según se utiliza aquí, los pseudohaluros son compuestos que se comportan de un modo sustancialmente similar a los haluros. Tales compuestos pueden ser utilizados de la misma manera y tratados de la misma manera que los haluros (X; donde X es un halógeno, tal como Cl o Br). Entre los pseudohaluros se incluyen, pero no están limitados a cianuro, cianato, tiocianato, selenocianato y azida.
Según se utiliza aquí, haloalquilo hace referencia a un radical alquilo inferior en el que uno o más de los átomos de hidrógeno son remplazados por halógeno incluyendo, pero no limitados a, clorometilo, trifluorometilo, 1-cloro-2-fluoroetilo y similares.
Según se utiliza aquí, alquilo representa un grupo hidrocarbonado alifático que es una cadena lineal o ramificada que tiene preferiblemente alrededor de 1 a 12 átomos de carbono en la cadena. Los grupos alquilo preferidos son grupos alquilo inferiores que son alquilos que contienen de 1 a aproximadamente 6 átomos de carbono en la cadena. Ramificado significa que uno o más grupos alquilo inferiores tales como metilo, etilo o propilo están anclados a una cadena alquílica lineal. El grupo alquilo puede no estar sustituido o estar sustituido independientemente con uno o más grupos, tales como, pero no limitados a: halo, carboxi, formilo, sulfo, sulfino, carbamoílo, amino e imino. Entre los grupos alquilo ejemplares se incluyen metilo, etilo, propilo, ácido metanoico, ácido etanoico, ácido propanoico, ácido etanosulfínico y ácido etanosulfónico.
Según se utiliza aquí el término inferior describe grupos alquilo, alquenilo y alquinilo que contienen aproximadamente 6 átomos de carbono o menos. También se utiliza para describir grupos arilo o grupos heteroarilo que contienen 6 átomos de carbono o menos en el anillo. Alquilo inferior, alquenilo inferior, y alquinilo inferior hacen referencia a cadenas carbonadas que tienen menos de aproximadamente 6 carbonos. En las realizaciones preferidas de los compuestos proporcionados aquí que incluyen porciones alquílicas, alquenílicas, o alquinílicas se incluyen porciones alquílicas inferiores, alquenílicas inferiores y alquinílicas inferiores.
Según se utiliza aquí, alquenilo representa un grupo hidrocarbonado alifático que contiene un doble enlace carbono-carbono y que puede ser de cadena lineal o ramificada que tiene de aproximadamente 2 a aproximadamente 10 átomos de carbono en la cadena. Los grupos alquenilo preferidos tienen de 2 a aproximadamente 4 átomos de carbono en la cadena. Ramificado significa que uno o más grupos alquilo inferiores o alquenilo inferiores están anclados a una cadena alquenílica lineal. Los grupos alquenilo pueden no estar sustituidos o estar sustituidos independientemente con uno o más grupos, tales como halo, carboxi, formilo, sulfo, sulfino, carbamoílo, amino e imino. Entre los grupos alquenilo ejemplares se incluyen etenilo, propenilo, carboxietenilo, carboxipropenilo, sulfinoetenilo y sulfoetenilo.
Según se utiliza aquí, alquinilo representa un grupo hidrocarbonado alifático que contiene un triple enlace carbono-carbono y que puede ser de cadena lineal o ramificada que tiene de aproximadamente 2 a 10 átomos de carbono en la cadena. Ramificado significa que uno o más grupos alquilo inferiores, alquenilo o alquinilo están anclados a una cadena alquinílica lineal. Un grupo alquinilo ejemplar es etinilo.
Según se utiliza aquí, arilo representa un sistema anular hidrocarbonado monocíclico o multicíclico aromático que contiene de 3 a 15 ó 16 átomos de carbono, preferiblemente de 5 a 10. Entre los grupos arilo se incluyen, pero no están limitados a, grupos tales como fenilo, fenilo sustituido, naftilo, naftilo sustituido, en los que el sustituyente es alquilo inferior, halógeno, o alcoxi inferior. Los grupos arilo preferidos son los grupos arilo inferiores que contienen menos de 7 carbonos en la estructura del anillo.
Según se utiliza aquí, la nomenclatura alquilo, alcoxi, carbonilo, etc. se utiliza como entienden generalmente los expertos en esta técnica. Por ejemplo, según se utiliza aquí alquilo hace referencia a cadenas carbonadas saturadas que contienen uno o más carbonos; las cadenas pueden ser lineales o ramificadas o incluyen porciones cíclicas o son cíclicas. Según se utiliza aquí, alicíclico hace referencia a grupos arilo que son cíclicos.
Según se utiliza aquí, cicloalquilo hace referencia a cadenas carbonadas cíclicas saturadas; cicloalquenilo y cicloalquinilo hacen referencia a cadenas carbonadas cíclicas que incluyen al menos un doble o triple enlace insaturado, respectivamente. Las porciones cíclicas de las cadenas carbonadas pueden incluir un anillo o dos o más anillos fusionados.
Según se utiliza aquí, cicloalquenilo representa un sistema anular monocíclico o multicíclico no aromático que contiene un doble enlace carbono-carbono y que tiene de aproximadamente 3 a aproximadamente 10 átomos de carbono. Entre los anillos de cicloalquenilo monocíclicos ejemplares se incluyen ciclopentenilo o ciclohexenilo; el preferido es ciclohexenilo. Un anillo de cicloalquenilo multicíclico ejemplar es norbornilenilo. El grupo cicloalquenilo puede estar sustituido independientemente con uno o más grupos halo o alquilo.
Según se utiliza aquí, "haloalquilo" hace referencia a un radical alquilo inferior en el que uno o más de los átomos de hidrógeno son remplazados por halógeno incluyendo, pero no limitados a, clorometilo, trifluorometilo, 1-cloro-2-fluoroetilo y similares.
Según se utiliza aquí, "haloalcoxi" hace referencia a RO- en el que R es un grupo haloalquilo.
Según se utiliza aquí, "carboxamida" hace referencia a grupos de fórmula R_{P}CONH_{2} en los que R se selecciona entre alquilo o arilo, preferiblemente alquilo inferior o arilo inferior y p es 0 ó 1.
Según se utiliza aquí, "alquilaminocarbonilo" hace referencia a -C(O)NHR en el que R es hidrógeno, alquilo, preferiblemente alquilo inferior o arilo, preferiblemente arilo inferior.
Según se utiliza aquí, "dialquilaminocarbonilo" hace referencia a -C(O)NR'R en el que R' y R se seleccionan independientemente entre alquilo o arilo, preferiblemente alquilo inferior o arilo inferior; "carboxamida" hace referencia a grupos de fórmula NR'COR.
Según se utiliza aquí, "alcoxicarbonilo" hace referencia a -C(O)OR en el que R es alquilo, preferiblemente alquilo inferior o arilo, preferiblemente arilo inferior.
Según se utiliza aquí, "alcoxi" y "tioalcoxi" hace referencia a RO- y RS-, en los que R es alquilo, preferiblemente alquilo inferior o arilo, preferiblemente arilo inferior.
Según se utiliza aquí, "haloalcoxi" hace referencia a RO- en el que R es un grupo haloalquilo.
Según se utiliza aquí, "aminocarbonilo" hace referencia a -C(O)NH_{2}.
Según se utiliza aquí, "alquilaminocarbonilo" hace referencia a -C(O)NHR en el que R es alquilo, preferiblemente alquilo inferior o arilo, preferiblemente arilo inferior.
Según se utiliza aquí, "alcoxicarbonilo" hace referencia a -C(O)OR en el que R es alquilo, preferiblemente alquilo inferior.
Según se utiliza aquí, cicloalquilo hace referencia a cadenas carbonadas cíclicas saturadas; cicloalquenilo y cicloalquinilo hacen referencia a cadenas carbonadas cíclicas que incluyen al menos un triple enlace insaturado. Las porciones cíclicas de las cadenas carbonadas pueden incluir un anillo o dos o más anillos fusionados.
Según se utiliza aquí, alquilendioxi representa un grupo -O-alquilo-O- en el que el grupo alquilo se describe como antes. Un análogo de reposición de alquilendioxi representa alquilendioxi en el que uno o ambos átomos de oxígeno son remplazados por un átomo o grupo de átomos que se comportan de un modo similar tales como S, N, NH, Se. Un grupo alquilendioxi de reposición ejemplar es etilenbis(sulfandiilo). Alquilentioxioxi es -S-alquilo-O-, -O-alquilo-S- y alquilenditioxi es -S-alquilo-S-.
Según se utiliza aquí, heteroarilo representa un sistema anular monocíclico o fusionado aromático en el que uno o más de los átomos de carbono del sistema anular es (o son) remplazado por uno o varios elemento distintos de carbono, por ejemplo nitrógeno, oxígeno o azufre. Los grupos cíclicos preferidos contienen uno o dos anillos fusionados e incluyen de aproximadamente 3 a aproximadamente 7 miembros en cada anillo. De uno similar a los "grupos arilo", los grupos heteroarilo pueden no estar sustituidos o estar sustituidos con uno o más sustituyentes. Entre los grupos heteroarilo ejemplares se incluyen pirazinilo, pirazolilo, tetrazolilo, furanilo, (2- o 3-)tienilo, (2-, 3- o 4-)piridilo, imidazolilo, pirimidinilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, quinolinilo, indolilo, isoquinolinilo, oxazolilo y 1,2,4-oxadiazolilo. Entre los grupos heteroarilo preferidos se incluyen los anillos que contienen nitrógeno de 5 a 6 miembros, tales como pirimidinilo.
Según se utiliza aquí, alcoxicarbonilo representa un grupo alquilo-O-CO-. Entre los grupos alcoxicarbonilo ejemplares se incluyen metoxi- y etoxicarbonilo.
Según se utiliza aquí, carbamoílo representa -CONH_{2}. Como con todos los grupos descritos aquí, estos grupos pueden no estar sustituidos o estar sustituidos. En carbamoílo sustituido se incluyen grupos tales como -CONY^{2}Y^{3} en los que Y^{2} e Y^{3} son independientemente hidrógeno, alquilo, ciano(alquilo inferior), arilalquilo, heteroaralquilo, carboxi(alquilo inferior), carboxi(alquilo inferior sustituido con arilo), carboxi(alquilo inferior sustituido con carboxi), carboxi(alquilo inferior sustituido con hidroxi), carboxi(alquilo inferior sustituido con heteroarilo), carbamoíl(alquilo inferior), alcoxicarbonil(alquilo inferior) o alcoxicarbonil(alquilo inferior sustituido con arilo), siempre que sólo uno de Y^{2} e Y^{3} pueda ser hidrógeno y cuando uno de Y^{2} e Y^{3} es carboxi(alquilo inferior), carboxi(alquilo inferior sustituido con arilo), carbamoíl(alquilo inferior), alcoxicarbonil(alquilo inferior) o alcoxicarbonil(alquilo inferior sustituido con arilo) el otro de Y^{2} e Y^{3} es hidrógeno o alquilo. Para Y^{2} e Y^{3} se prefieren independientemente hidrógeno, alquilo, ciano(alquilo inferior), arilalquilo, heteroaralquilo, carboxi(alquilo inferior), carboxi(alquilo inferior sustituido con arilo) y carbamoil(alquilo inferior).
Según se utiliza aquí, cualquier derivado N-(4-halo-3-metil-5-isoxazolilo), N-(4-halo-5-metil-3-isoxazolilo), N-(3,4-dimetil-5-isoxazolilo), N-(4-halo-5-metil-3-isoxazolilo), N-(4-halo-3-metil-5-isoxazolilo), N-(4,5-dimetil-3-isoxazolilo) del mismo hace referencia a compuestos en los que Ar^{2} es igual que el compuesto mostrado específicamente, pero Ar^{1} es N-(4-halo-3-metil-5-isoxazolilo), N-(4-halo-5-metil-3-isoxazolilo), N-(3,4-dimetil-5-isoxazolilo), N-(4-halo-5-metil-3-isoxazolilo), N-(4-halo-3-metil-5-isoxazolilo), o N-(4,5-dimetil-3-isoxazolilo) en el que halo es cualquier haluro, preferiblemente Cl o Br.
Según se utiliza aquí, las abreviaturas para cualquiera de los grupos protectores están, a menos que se indique de otro modo, de acuerdo con su uso común, las abreviaturas reconocidas o la IUPAC-IUB Comisión on Biochemical Nomenclature (ver, (1972) Biochem. 11:942-944).
A. Compuestos para su uso en el tratamiento de las enfermedades mediadas por endotelina
Se proporcionan los compuestos de fórmula V, y su uso en la preparación de un medicamento para tratar las enfermedades mediadas por endotelina. En particular, los compuestos proporcionados aquí son tienilsulfonamidas sustituidas con arilo, donde el grupo arilo está tetrasustituido. Las sulfonamidas son N-isoxazolil-tiofenosulfonamidas en las que el tiofeno está sustituido con un grupo arilo que tiene dos sustituyentes hidrógeno.
Las realizaciones preferidas de los compuestos de fórmula V son aquellas en las que Ar^{1} es 4-cloro-3-metil-5-isoxazolilo; W es NH; y R^{20} es CONH^{2}, COOH, o fenilo.
También son de interés cualquiera de los derivados farmacéuticamente aceptables, incluyendo sales, ésteres, ácidos y bases, solvatos, hidratos y profármacos de las sulfonamidas. Se prefieren las sales farmacéuticamente aceptables, concretamente las sales de metales alcalinos, muy preferiblemente las sales de sodio.
En todas las realizaciones, los sustituyentes preferidos también pueden ser determinados mediante la referencia a la Tabla 1, que expone los compuestos ejemplares. Los compuestos preferidos son aquellos de la Tabla 1 que tienen las actividades más elevadas, y los sustituyentes preferidos son aquellos de los compuestos con las actividades más elevadas (actividad a la concentración más baja). Algunos de los compuestos enumerados más abajo están fuera del alcance de la presente invención.
TABLA 1
4
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10
11
12
13
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15
16
17
18
19
20
21
22
23 
\newpage
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 * \+  \begin{minipage}[t]{150mm} resultados son generalmente la
media de 2 a 5 experimentos\end{minipage} \cr  ** \+
 \begin{minipage}[t]{150mm} resultados preliminares o resultados
en los que uno o más datos puntuales sólo se determinaban
aproximadamente\end{minipage} \cr   t  \+
 \begin{minipage}[t]{150mm} análisis realizado con incubación a
24ºC. Como se describe en los Ejemplos, la incubación a la
temperatura más alta reduce la actividad en una factor de 2 a
aproximadamente 10 en comparación con la actividad a
4ºC\end{minipage} \cr  - - \+  \begin{minipage}[t]{150mm}
datos no disponibles o medidos como % de inhibición @ 100
 \mu M\end{minipage} \cr  % \+  \begin{minipage}[t]{150mm}
% de inhibición @  100
 \mu M\end{minipage} \cr}
Se entiende que los grupos 4-bromo o 4-cloro pueden ser remplazados por otros sustituyentes 4-halo u otros sustituyentes adecuados para R^{1}, tal como alquilo. Entre los compuestos preferidos están:
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-[(2,3,4-trimetoxi-6-ciano)fenilaminocarbonil]tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(3-metoxi-carbonil-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(3-cianometil-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil]tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(3-carboxi-metil-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(3-acetoximetil-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(3-hidroximetil-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(3-metoxicarbonil-metil-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(3-dimetil-aminometil-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida, sal de ácido trifluoroacético,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(\alpha-metil-4,5-(metilendioxi)fenilacetil)-tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(\alpha-carboxilmetil-2-metil-4,5-(metilendioxi)fenilacetil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(3-metanosulfonil-amino-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfona-
mida,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(2-carbamoil-4,6-dimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(3-hidroxi-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(3-carboxi-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(2-carboxil-4,6-dimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(2-fenil-4,6-dimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(3-ciano-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(3-sulfamoil-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-5-metil-3-isoxazolil)-2-(3-cianometil-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-5-metil-3-isoxazolil)-2-(3-acetoximetil-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-5-metil-3-isoxazolil)-2-(3-hidroximetil-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida, -tri-
metilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(3,4-dimetil-5-isoxazolil)-2-(3-cianometil-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(3,4-dimetil-5-isoxazolil)-2-(3-acetoximetil-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(3,4-dimetil-5-isoxazolil)-2-(3-hidroximetil-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida,
N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(pentametilfenilamino-carbonil)tiofeno-3-sulfonamida.
\newpage
En la Tabla 2 se enumeran la vida media oral, la biodisponibilidad, y la actividad in vivo de los compuestos ejemplares seleccionados. La actividad in vivo fue medida en un modelo de hipertensión pulmonar y es una medida de la actividad de los compuestos a las dosis seleccionadas. Como se indica en la Tabla 2, los compuestos reivindicados aquí manifiestan una vida media oral, una biodisponibilidad, y/o una actividad in vivo mejoradas sobre los descritos previamente (ver, v.g., Publicación Internacional PCT Núm. WO 96/31492).
\vskip1.000000\baselineskip
TABLA 2
24
25
26
B. Preparación de los compuestos
La preparación de algunos de los compuestos anteriores y otros compuestos que poseen las actividades requisito se expone en los Ejemplos. Los compuestos cuya síntesis no se ejemplifica explícitamente pueden ser sintetizados mediante la modificación rutinaria de uno o más métodos descritos con detalle en los Ejemplos sustituyendo los reactivos fácilmente asequibles apropiados.
Muchos de los compuestos descritos aquí son derivados de 3-sulfamoil-2-arilaminocarboniltiofeno. En general, estos compuestos pueden ser preparados acoplando el ácido 3-sulfamoiltienilcarboxílico apropiado con una anilina sustituida o no sustituida.
Los ácidos 3-sulfamoiltienilcarboxílicos pueden ser preparados mediante una variedad de métodos conocidos por los expertos en la técnica. En general, la mayor parte de las síntesis implican la condensación de un cloruro de carboalcoxitienilsulfonilo con un aminoisoxazol en piridina seca o en tetrahidrofurano (THF) e hidruro de sodio. La posterior hidrólisis del grupo carboalcoxi proporciona los ácidos deseados. Los cloruros de sulfonilo y los aminoisoxazoles pueden ser obtenidos comercialmente o sintetizados según los métodos descritos en los Ejemplos o utilizando otros métodos asequibles para los expertos en la técnica (ver, v.g., las Patentes de los Estados Unidos Núms. 4.659.369, 4.861.366 y 4.753.672).
Por ejemplo, los cloruros de tienilsulfonilo pueden ser preparados mediante los siguientes métodos. Un precursor de 3-sulfamoiltiofeno puede ser bromado en la posición 2 mediante reacción, por ejemplo, con bromo o N-bromosuccinimida. El posterior intercambio metal-halógeno con un alquil litio, v.g., n-butil litio, y la reacción con dióxido de carbono, proporcionan el ácido deseado. Alternativamente, se puede sulfonar un derivado de ácido 2-tienilcarboxílico en la posición 3, v.g. mediante reacción con trióxido de azufre en ácido sulfúrico. La conversión del ácido sulfónico resultante en cloruro de sulfonilo (mediante reacción con pentacloruro fosforoso, tricloruro fosforoso, oxicloruro fosforoso, cloruro de tionilo, o cloruro de oxalilo) seguido de reacción con la amina apropiada proporciona el derivado de ácido sulfamoiltienilcarboxílico deseado. El cloruro de sulfonilo intermedio también puede ser preparado directamente mediante reacción del derivado de ácido tienilcarboxílico con ácido clorosulfónico.
Las N-(alquilisoxazolil)sulfonamidas pueden ser preparadas condensado un aminoisoxazol con un cloruro de sulfonilo en piridina seca con o sin el catalizador 4-(dimetilamino)piridina. Las N-(3,4-dimetil-5-isoxazol)-sulfonamidas y las N-(4,5-dimetil-3-isoxazolil)-sulfonamidas pueden ser preparadas a partir del correspondiente aminodimetilisoxazol, tal como 5-amino-3,4-dimetilisoxazol. Por ejemplo, la N-(3,4-dimetil-5-isoxazolil)-2-(carbometoxi)tiofeno-3-sulfonamida fue preparada a partir de cloruro de 2-metoxicarboniltiofeno-3-sulfonilo y 5-amino-3,4-dimetilisoxazol en piridina seca.
Las N-(4-haloisoxazolil)sulfonamidas pueden ser preparadas mediante condensación de amino-4-haloisoxazol con cloruro de sulfonilo en THF con hidruro de sodio como base. Por ejemplo, la N-(4-bromo-3-metil-5-isoxazolil)-tiofeno-2-sulfonamida fue preparada a partir de 5-amino-4-bromo-3-metilisoxazol y cloruro de tiofeno-2-sulfonilo en THF ehidruro de sodio.
Estas sulfonamidas también pueden ser preparadas a partir del correspondiente cloruro de sulfonilo y el aminoisoxazol en piridina con o sin una cantidad catalítica de 4-dimetilaminopiridina (DMAP). En algunos casos, el compuesto de bis-sulfonilo se obtiene como producto principal o exclusivo. Los productos bis-sulfonados pueden ser hidrolizados fácilmente a la sulfonamida utilizando hidróxido de sodio acuoso y un co-disolvente adecuado, tal como metanol o tetrahidrofurano, generalmente a la temperatura ambiente.
Las anilinas sustituidas pueden ser sintetizadas mediante nitración del benceno sustituido precursor apropiado v.g., con una mezcla de ácido nítrico y sulfúrico, o tetrafluoroborato de nitronio. La reducción del nitrocompuesto aromático resultante v.g., con polvo de cinc, hidrogenación catalítica, cloruro estannoso, o cualquier otro método conocido por los expertos en la técnica, proporciona la anilina deseada.
El acoplamiento del ácido tienilcarboxílico con la anilina puede ser completado mediante la conversión del ácido en el correspondiente acilimidazol (por reacción v.g., con carbonildiimidazol) o cloruro de acilo (mediante reacción v.g., con cloruro de oxalilo o cloruro de tionilo), seguido de reacción con la anilina para dar los compuestos de arilaminocarboniltiofeno deseados.
Algunos de los compuestos descritos aquí son derivados de 3-sulfamoil-2-bencilaminocarboniltiofeno. Al preparar estos compuestos, se remplaza la anilina de la preparación anterior por una bencilamina. Las bencilaminas apropiadas pueden ser sintetizadas mediante reacción del correspondiente haluro de bencilo con azida, seguido de reducción de la bencilazida resultante, v.g., mediante hidrogenación catalítica o tratamiento con trialquil- o triarilfosfina.
Otros compuestos descritos aquí son los derivados de 3-sulfamoil-2-arilacetiltiofeno. Estos compuestos pueden ser generados mediante adición de un haluro de bencilmagnesio apropiado a un derivado de ácido 3-sulfamoil-2-tienilcarboxílico, tal como N-metil-N-metoxiamida. Esta amida puede ser preparada mediante reacción del ácido con carbonildiimidazol, seguido de reacción con N-metil-N-metoxiamina.
Los profármacos y otros derivados de los compuestos adecuados para la administración a humanos también pueden ser diseñados y preparados mediante métodos conocidos por los expertos en la técnica [ver, v.g., Norgrady (1.985) Medicinal Chemistry A Biochemical Approach, Oxford University Press, Nueva York, páginas 388-392).
Los compuestos descritos aquí han sido sintetizados y sometidos a ensayo en cuanto a la actividad en análisis in vitro y, en algunos casos, en modelos animales in vivo. Los análisis espectroscópico de resonancia magnética nuclear (RMN), espectrométrico de masas, espectroscópico infrarrojo y cromatográfico de líquidos de alta resolución indicaban que los compuestos analizados tienen estructuras que coinciden con las esperadas para tales compuestos y son generalmente al menos en aproximadamente un 98% puros. Todos los compuestos ejemplificados o descritos aquí manifestaban actividad como antagonistas de endotelina.
C. Evaluación de la bioactividad de los compuestos
Se encuentran disponibles procedimientos fisiológicos, farmacológicos y bioquímicos normalizados para someter a ensayo los compuestos para identificar aquellos que poseen cualquiera de las actividades biológicas de los péptidos de endotelina o la capacidad para interferir en o inhibir los péptidos de endotelina. Los compuestos que manifiestan actividades in vitro, tales como la capacidad de unirse a los receptores de endotelina o para competir con uno o más péptidos de endotelina para unirse a los receptores de endotelina pueden ser utilizados en los métodos de aislamiento de receptores de endotelina y los métodos para distinguir las especificidades de los receptores de endotelina, y son candidatos para el uso en los métodos de tratamiento de las alteraciones mediadas por endotelina.
Así, otros compuestos preferidos de fórmulas I y II, además de los identificados específicamente aquí, que son antagonistas o agonistas de endotelina pueden ser identificados utilizando tales análisis de rastreo.
1. Identificación de compuestos que modulan la actividad de un péptido de endotelina
Los compuestos son sometidos a ensayo en cuanto a la capacidad de modular la actividad de la endotelina 1. Los expertos en la técnica conocen numerosos análisis para evaluar la capacidad de los compuestos para modular la actividad de la endotelina (ver, v.g., la Patente de los Estados Unidos Núm. 5.114.918 de Ishikawa y col., EP A1 0.436.189 de BANYU PHARMACEUTICAL CO., LTD. (7 de Octubre de 1.991); Borges y col. (1989) Eur. J. Pharm. 165:223-230; Filep y col. (1991) Biochem. Biophys. Res. Commun. 177:171-176). Los estudios in vitro pueden ser corroborados con estudios in vivo (ver, v.g., la Patente de los Estados Unidos Núm. 5.114.918 de Ishikawa y col.: EP A1 0.436.189 de BANYU PHARMACEUTICAL CO., LTD. (7 de Octubre de 1.991)) y la actividad farmacéutica evaluada de ese modo. Tales análisis se describen aquí en los Ejemplos e incluyen la capacidad para competir por la unión a los receptores ET_{A} y ET_{B} presentes en membranas aisladas de líneas celulares que han sido diseñadas genéticamente para expresar los receptores ET_{A} o ET_{B} en sus superficies celulares.
Las propiedades de un antagonista potencial pueden ser evaluadas como una función de su capacidad para inhibir la actividad inducida por endotelina in vitro utilizando un tejido concreto, tal como vena porta y aorta de rata así como útero, tráquea y vaso deferente de rata (ver, v.g., Borges, R., Von Grafenstein, H. y Knight, D.E., "Tissue selectivity of endothelin", Eur. J. Pharmacol 165:223-230, (1.989)). La capacidad para actuar como antagonista de endotelina in vivo puede ser sometida a ensayo en ratas hipertensas, ratones ddy u otros modelos animales reconocidos (ver, Kaltenbronn y col. (1.990) J. Med. Chem. 33:838-845, ver, también, la Patente de los Estados Unidos Núm. 5.114.918 de Ishikawa y col.; y EP A1 0.436.189 de BANYU PHARMACEUTICAL CO., LTD. (7 de Octubre de 1.991); ver, también Bolger y col. (1.983) J. Pharmacol. Exp. Ther. 225 291-309). Utilizando los resultados de tales estudios en animales, se pueden evaluar la eficacia farmacéutica y determinar las dosis farmacéuticamente eficaces. Un agonista potencial también puede ser evaluado utilizando análisis in vitro e in vivo conocidos por los expertos en la técnica.
La actividad de la endotelina puede ser identificada por la capacidad de un compuesto de ensayo para estimular la constricción de aorta torácica de rata aislada (Borges y col. (1.989) "Tissue selectivity of endothelin" Eur. J. Pharmacol. 165:223-230). Para realizar el análisis, la endotelina es raspada y los segmentos anulares montados bajo tensión en un baño de tejidos y tratados con endotelina en presencia del compuesto de ensayo. Se registran los cambios en la tensión inducida por endotelina. Se pueden generar curvas dosis-respuesta y utilizarlas para proporcionar información referente a la potencia inhibidora relativa del compuesto de ensayo. Se pueden utilizar otros tejidos, incluyendo corazón, músculo esquelético, riñón, útero, tráquea y vaso deferente, para evaluar los efectos de un compuesto de ensayo concreto sobre la contracción del tejido.
Se pueden identificar antagonistas específicos del isotipo de endotelina mediante la capacidad de un compuesto de ensayo para interferir en la unión de endotelina a diferentes tejidos o células que expresan diferentes subtipos de receptores de endotelina, o para interferir en los efectos biológicos de la endotelina o un isotipo de endotelina (Takayanagi y col. (1.991) Req. Pep. 32:23-37, Panek y col. (1992) Biochem. Biophys. Res. Commun. 183:566-571). Por ejemplo, los receptores ET_{B} son expresados en células endoteliales vasculares, posiblemente mediando la liberación de prostaciclina y factor relajante derivado del endotelio (De Nucci y col. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:9797). Los receptores ET_{A} no son detectados en células endoteliales cultivadas, que expresan los receptores ET_{B}.
La unión de los compuestos o la inhibición de la unión de la endotelina a los receptores ET_{B} puede ser evaluada midiendo la inhibición de la liberación de prostaciclina mediada por endotelina 1, medida por su principal metabolito estable, 6-ceto PGF_{1\alpha} a partir de células endoteliales aórticas bovinas cultivadas (ver, v.g., Filep y col. (1991) Biochem. And Biophys Res. Commun. 177:171-176). Así, se puede evaluar la afinidad relativa de los compuestos por diferentes receptores de endotelina determinando las curvas dosis inhibidora-respuesta utilizando tejidos que difieran en el subtipo de receptor.
Utilizando tales análisis, han sido y pueden ser evaluadas las afinidades relativas de los compuestos por los receptores ET_{A} y los receptores ET_{B}. Se seleccionan aquellos que poseen las propiedades deseadas, tales como la inhibición específica de la unión de endotelina 1. Los compuestos seleccionados que manifiestan actividades deseables pueden ser terapéuticamente útiles y son sometidos a ensayo para tales usos utilizando los análisis descritos antes a partir de los cuales se puede evaluar la eficacia in vivo (ver, v.g., la Patente de los Estados Unidos Núm. 5.248.807; Patente de los Estados Unidos Núm. 5.240.910; Patente de los Estados Unidos Núm. 5.198.548; Patente de los Estados Unidos Núm. 5.187.195; Patente de los Estados Unidos Núm. 5.082.838; Patente de los Estados Unidos Núm. 5.230.999; Solicitudes Canadienses publicadas núms. 2.067-288 y 2071193; Solicitud Británica publicada Núm. 2.259.450; Solicitud Internacional PCT Publicada Núm. WO 93/08799; Benigi y col. (1993) (Kidney International 44:440-444; y Nirei y col. (1.993) Life Sciences 52:1869-1874). Los compuestos que manifiestan actividades in vitro que se corresponden con la eficacia in vivo serán formulados en composiciones farmacéuticas adecuadas y utilizados como agentes terapéuticos.
Los compuestos también pueden ser utilizados en métodos para identificar y aislar receptores específicos de endotelina y ayudar en el diseño de compuestos que sean antagonistas o agonistas de endotelina más potentes o que sean más específicos para un receptor de endotelina concreto.
2. Aislamiento de receptores de endotelina
Se proporciona un método para identificar receptores de endotelina. Al poner en práctica este método, se unen uno o más de los compuestos a un soporte y se utilizan en los métodos de purificación por afinidad de los receptores. Seleccionando compuestos con especificidades concretas, se pueden identificar distintas subclases de receptores ET.
Uno o más de los compuestos puede ser unido a una resina apropiada, tal como Affi-gel, covalentemente o mediante otra unión, mediante métodos conocidos por los expertos en la técnica para unir la endotelina a tales resinas (ver, Schvartz y col. (1990) Endocrinology 126:3218-3222). Los compuestos unidos pueden ser aquellos que sean específicos para los receptores ET_{A} o ET_{B} u otras subclases de receptores.
La resina es pre-equilibrada con un tampón adecuado generalmente a un pH fisiológico (7 a 8). Una composición que contiene receptores solubilizados de un tejido seleccionado se mezcla con la resina a la cual está unido el compuesto y los receptores se hacen eluir selectivamente. Los receptores pueden ser identificados sometiéndolos a ensayo en cuanto a la unión a un isopéptido de endotelina o un análogo o por otros métodos mediante los cuales las proteínas sean identificadas y caracterizadas. La preparación de los receptores, la resina y el método de elución se pueden llevar a cabo mediante la modificación de protocolos normalizados conocidos por los expertos en la técnica (ver, v.g. Schvartz y col. (1990) Endocrinology 126:32-3222).
Se proporcionan aquí otros métodos para distinguir el tipo de receptor basados en la afinidad diferencial para cualquiera de los compuestos. Cualquiera de los análisis descritos aquí para medir la afinidad de los compuestos seleccionados por los receptores de endotelina también puede ser utilizado para distinguir subtipos de receptores basándose en la afinidad por los compuestos concretos proporcionados aquí. En particular, se puede identificar un receptor desconocido como receptor ET_{A} o ET_{B} midiendo la afinidad del receptor desconocido por un compuesto proporcionado aquí que tenga una afinidad conocida por un receptor sobre el otro. Semejante interacción preferente es útil para determinar la enfermedad concreta que puede ser tratada con un compuesto preparado como se describe aquí. Por ejemplo, los compuestos con una elevada afinidad por los receptores ET_{A} y poca o ninguna afinidad por los receptores ET_{B} son candidatos al uso como agentes hipertensores; mientras, los compuestos que interaccionen preferentemente con los receptores ET_{B} son candidatos al uso como agentes anti-asmáticos.
D. Formulación y administración de las composiciones
Aquí se proporcionan formulaciones de las sulfonamidas. Las formulaciones son composiciones diseñadas para la administración de los derivados farmacéuticamente aceptables, concretamente sales de los compuestos de sulfonamida proporcionados aquí. Debido a las superiores características de estabilidad observadas de las sales, en comparación con las formas neutras, tales sales, concretamente las sales de sodio, son particularmente adecuadas para la administración oral y parenteral. Entre tales composiciones se incluyen soluciones, suspensiones, tabletas, tabletas dispersables, píldoras, cápsulas, polvos, formulaciones de liberación sostenida y cualquier otra formulación adecuada. Preferiblemente las composiciones tomarán la forma de una píldora o tableta. Los métodos para la fabricación de tabletas, cápsulas y otras formulaciones son conocidos por los expertos en la técnica (ver, v.g., Ansel, H.C. (1985) Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, 4ª Edición, págs. 126-163).
En las formulaciones, las concentraciones eficaces de uno o más derivados farmacéuticamente aceptables se mezclan con un portador o vehículo farmacéutico adecuado. Preferiblemente, los compuestos de sulfonamida son transformados en forma de las correspondientes sales, preferiblemente sales de sodio, antes de la formulación, como se ha descrito antes. Las concentraciones de las sales de los compuestos en las formulaciones son eficaces para la liberación de un compuesto, tras la administración, que alivie los síntomas de la enfermedad mediada por endotelina. Típicamente, las composiciones son formuladas para la administración de una dosificación sencilla. Para formular una composición, se disuelve, se suspende, se dispersa o se mezcla de otro modo la fracción en peso del compuesto en un vehículo seleccionado a una concentración eficaz de manera que la afección tratada resulte aliviada o mejorada.
Entre los portadores o vehículos farmacéuticos adecuados para la administración de los compuestos proporcionados aquí se incluyen cualquiera de los portadores conocidos por los expertos en la técnica por ser adecuados para el modo concreto de administración. Además, los compuestos pueden ser formulados como el único ingrediente farmacéuticamente activo de la composición o pueden ser combinados con otros ingredientes activos. Las suspensiones liposomales, incluyendo los liposomas dirigidos a tejidos, también pueden ser adecuadas como portadores farmacéuticamente aceptables. Estas pueden ser preparadas según métodos conocidos por los expertos en la técnica. Por ejemplo, se pueden preparar formulaciones de liposomas como se describe en la Patente de los Estados Unidos Núm. 4.522.811.
El compuesto activo en forma de sal, preferiblemente en forma de sal de sodio, es incluido en el portador farmacéuticamente aceptable en una cantidad suficiente para ejercer un efecto terapéuticamente útil en ausencia de efectos secundarios no deseables sobre el paciente tratado. La concentración terapéuticamente eficaz puede ser determinada empíricamente sometiendo a ensayo los compuestos en sistemas in vitro e in vivo conocidos (ver, v.g., la Patente de los Estados Unidos Núm. 5.114.918 de Ishikawa y col.; EP A1 0 436 189 de BANYU PHARMACEUTICAL CO., LTD (7 de Octubre de 1991); Borges y col. (1989) Eur. J. Pharm. 165:223-230; Filep y col. (1991) Biochem. Biophys. Res. Commun 177:171-176) y después extrapolada de allí para las dosificaciones para humanos.
La concentración de sal de sodio del compuesto activo en la composición fármaco dependerá de las velocidades de absorción, inactivación y excreción del compuesto activo, de las características fisicoquímicas del compuesto, del programa de dosificación, y de la cantidad administrada así como de otros factores conocidos para los expertos en la técnica. Por ejemplo, la cantidad que es liberada es suficiente para tratar los síntomas de la hipertensión. Se espera que las cantidades eficaces para tratar las alteraciones mediadas por endotelina sean superiores a la cantidad de compuesto de sulfonamida que se administraría para tratar infecciones bacterianas.
Típicamente una dosificación terapéuticamente eficaz producirá una concentración en suero de ingrediente activo de aproximadamente 0,1 ng/ml a aproximadamente 50-100 \mug/ml. Las composiciones farmacéuticas proporcionarán típicamente una dosificación de aproximadamente 0,001 mg a aproximadamente 2.000 mg de compuesto por kilogramo de peso corporal por día. Las formas de dosificación farmacéutica unitarias se preparan para proporcionar de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 1.000 mg y preferiblemente de aproximadamente 10 a aproximadamente 500 mg del ingrediente activo esencial o una combinación de ingredientes esenciales por forma unitaria de dosificación.
El ingrediente activo puede ser administrado de una vez, o puede ser dividido en numerosas dosis más pequeñas que se van a administrar a intervalos de tiempo. Se entiende que la dosificación precisa y la duración del tratamiento son una función de la enfermedad que esté siendo tratada y pueden ser determinadas empíricamente utilizando protocolos de ensayo conocidos o mediante extrapolación a partir de datos de ensayo in vivo o in vitro. Se debe observar que las concentraciones y los valores de dosificación también pueden variar con la gravedad de la afección que se vaya a aliviar. Se debe entender adicionalmente que para cualquier sujeto concreto, los regímenes de dosificación específicos deben ser ajustados a lo largo del tiempo según la necesidad del individuo y del criterio profesional de la persona que administre o supervise la administración de las composiciones, y que los intervalos de concentración mostrados aquí son sólo ejemplares y no se pretende limitar el alcance o la práctica de las composiciones reivindicadas.
Entre los derivados farmacéuticamente aceptables preferidos se incluyen ácidos, sales, ésteres, hidratos, solvatos y formas profármaco. El derivado se selecciona para que sea una forma más estable que el correspondiente compuesto neutro. Se prefieren las sales farmacéuticamente aceptables. Entre las sales más preferidas se incluyen las sales de metales alcalinos, concretamente sales de sodio, tales como, pero no limitadas a, una sal hidrogenofosfato de sodio y una sal de sodio, muy preferiblemente la sal de sodio.
Así, las concentraciones o las cantidades eficaces de uno o más de los compuestos proporcionados aquí o de los derivados farmacéuticamente aceptables de los mismos se mezclan con un portador o vehículo farmacéutico adecuado para la administración sistémica, tópica o local para formar composiciones farmacéuticas. Los compuestos están incluidos en una cantidad eficaz para mejorar o tratar la alteración mediada por endotelina para la cual se contempla el tratamiento. La concentración de compuesto activo en la composición dependerá de las velocidades de absorción, inactivación, excreción del compuesto activo, del programa de dosificación, de la cantidad administrada, de la formulación concreta así como de otros factores conocidos por los expertos en la técnica.
Se pretende que las composiciones sean administradas mediante una ruta adecuada, que incluye oralmente, parenteralmente, rectalmente y tópicamente y localmente dependiendo de la alteración que esté siendo tratada. Por ejemplo, para el tratamiento de las alteraciones oftálmicas, tales como el glaucoma, se contempla la formulación para inyección intraocular y también intravítrea. Para la administración oral, se prefieren en la actualidad cápsulas y tabletas. Para la administración parenteral se prefiere la reconstitución de un polvo liofilizado, preparado como se describe aquí. Los compuestos en forma líquida, semi-líquida o sólida y se formulan de una manera adecuada para cada ruta de administración. Entre los modos de administración preferidos se incluyen los modos de administración parenteral y oral.
Entre las soluciones o suspensiones utilizadas para aplicación parenteral, intradérmica, subcutánea o tópica se pueden incluir cualquiera de los siguientes componentes: un diluyente estéril, tal como agua para inyectables, solución salina, aceite fijado, polietilenglicol, glicerina, propilenglicol u otro disolvente sintético; agentes antimicrobianos, tales como alcohol bencílico y metilparabenos; antioxidantes, tales como ácido ascórbico y bisulfito de sodio; agentes quelantes, tales como ácido etilendiaminotetraacético (EDTA); tampones, tales como acetatos, citratos y fosfatos; y agentes para ajustar la tonicidad tales como cloruro de sodio o dextrosa. Las preparaciones parenterales pueden ser englobadas en ampollas, jeringas desechables o viales de una o múltiples dosis hechos de vidrio, plástico u otro material adecuado.
En los casos en los que los compuestos manifiestan una solubilidad insuficiente, se pueden utilizar métodos para solubilizar compuestos. Tales métodos son conocidos por los expertos en esta técnica, y entre ellos se incluyen, pero no están limitados a, el uso de co-disolventes, tales como dimetilsulfóxido (DMSO), el uso de tensioactivos, tales como tween, o la disolución en bicarbonato de sodio acuoso. También se pueden utilizar derivados de los compuestos, tales como profármacos de los compuestos al formular composiciones farmacéuticas eficaces.
Tras la mezcla o adición de la sal de sodio del compuesto o los compuestos de sulfonamida, la mezcla resultante puede ser una solución, suspensión, emulsión o similar. La forma de la mezcla resultante depende de numerosos factores, incluyendo el modo de administración pretendido y la solubilidad del compuesto en el portador o vehículo seleccionado. La concentración eficaz es suficiente para aliviar los síntomas de la enfermedad, alteración o afección tratada y puede ser determinada empíricamente.
Se proporcionan las formulaciones para la administración a humanos y animales en formas de dosificación unitarias, tales como tabletas, cápsulas, píldoras, polvos, gránulos, soluciones o suspensiones parenterales estériles, y soluciones o suspensiones orales, y emulsiones de aceite en agua que contienen cantidades adecuadas de los compuestos, concretamente las sales farmacéuticamente aceptables, preferiblemente las sales de sodio, de los mismos. Los compuestos terapéuticamente activos desde el punto de vista farmacéutico y los derivados de los mismos son formulados típicamente y administrados en formas de dosificación unitarias o formas de dosificación de múltiples dosis. Las formas de dosificación unitarias utilizadas aquí hacen referencia a unidades físicamente discretas adecuadas para sujetos humanos y animales y empaquetadas individualmente como es sabido en la técnica. Cada dosis unitaria contiene una cantidad predeterminada del compuesto terapéuticamente activo suficiente para producir el efecto terapéutico deseado, asociada con el portador, vehículo o diluyente farmacéutico requerido. Entre los ejemplos de las formas de dosificación unitarias se incluyen ampollas y jeringas individualmente empaquetadas tabletas o cápsulas. Las formas de dosificación unitarias pueden ser administradas en fracciones o múltiplos de las mismas. Una forma de dosificación de múltiples dosis es una pluralidad de formas de dosificación unitarias idénticas empaquetadas en un único recipiente que van a ser administradas en una forma de dosificación unitaria segregada. Entre los ejemplos de las formas de múltiples dosis se incluyen viales, frascos de tabletas o cápsulas o botellas de 0,57 litros o de 4,5 litros. Por tanto, la forma de múltiples dosis es un múltiplo de las dosis unitarias que no son segregadas al empaquetar.
La composición puede contener junto con el ingrediente activo: un diluyente tal como lactosa, sacarosa, fosfato dicálcico, o carboximetilcelulosa; un lubricante, tal como estearato de magnesio, estearato de calcio y talco; y un aglutinante tal como almidón, gomas naturales, tales como goma de acacia-gelatina, glucosa, melazas, polivinilpirrolidona, celulosas y derivados de la misma, povidona, crospovidonas y otros aglutinantes semejantes conocidos por los expertos en la técnica. Las composiciones administrables farmacéuticamente líquidas pueden ser preparadas, por ejemplo, disolviendo, dispersando, o mezclando de otro modo un compuesto activo como se ha definido antes y coadyuvantes farmacéuticos opcionales en un portador, tal como, por ejemplo, agua, solución salina, dextrosa acuosa, glicerol, glicoles, etanol, y similares, para formar de ese modo una solución o suspensión. Si se desea, la composición farmacéutica que se va a administrar puede contener también cantidades minoritarias de sustancias coadyuvantes no tóxicas tales como agentes humectantes, agentes emulsionantes, o agentes solubilizantes, agentes tamponadores del pH y similares, por ejemplo, acetato, citrato de sodio, derivados de ciclodextrina, monolaurato de sorbitán, sal de sodio de acetato de trietanolamina, oleato de trietanolamina, y otros agentes semejantes. Los métodos efectivos para preparar tales formas de dosificación son conocidos, o serán evidentes, para los expertos en la técnica; por ejemplo, ver Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 15ª Edición, 1975. La composición de la formulación que vaya a ser administrada contendrá, en cualquier caso, una cantidad del compuesto activo en una cantidad suficiente para aliviar los síntomas del sujeto tratado.
Se pueden preparar formas de dosificación o composiciones que contienen el ingrediente activo en un intervalo del 0,005% al 100% constituido el resto por el portador no tóxico. Para la administración oral, una composición farmacéuticamente aceptable no tóxica se forma mediante la incorporación de cualquiera de los excipientes empleados normalmente, tales como, por ejemplo calidades farmacéuticas de manitol, lactosa, almidón, estearato de magnesio, talco, derivados de celulosa, croscarmelosa sódica, glucosa, sacarosa, carbonato de magnesio o sacarina sódica. Entre tales composiciones se incluyen soluciones, suspensiones, tabletas, cápsulas, polvos y formulaciones de liberación sostenida, tales como, pero no limitadas a, implantes y sistemas de liberación microencapsulados, y polímeros biodegradables, biocompatibles, tales como colágeno, vinilacetato de etileno, polianhídridos, poli(ácido glicólico), poliortoésteres, poli(ácido láctico) y otros. Los métodos para la preparación de estas formulaciones son conocidos por los expertos en la técnica. Las composiciones contempladas aquí pueden contener el 0,001%-100% de ingrediente activo, preferiblemente el 0,1%-85%, típicamente el 75-95%.
Las sales, preferiblemente las sales de sodio, de los compuestos activos, pueden ser preparadas con portadores que protejan el compuesto de la rápida eliminación del organismo, tales como las formulaciones o los recubrimientos de liberación con el tiempo.
En las formulaciones se pueden incluir otros compuestos activos para obtener las combinaciones de propiedades deseadas. Los compuestos de fórmula I, o las sales y derivados farmacéuticamente aceptables de los mismos descritos aquí, también pueden ser administrados ventajosamente con fines terapéuticos o profilácticos junto con otro agente farmacológico conocido en la técnica general por ser valioso en el tratamiento de una o más de las enfermedades o afecciones médicas referidas antes, tal como un bloqueador beta-adrenérgico (por ejemplo atenolol), un bloqueador del canal del calcio (por ejemplo nifedipina), un inhibidor de la enzima conversora de angiotensina (ACE) (por ejemplo lisinopril), un diurético (por ejemplo furosemida o hidroclorotiazida), un inhibidor de la enzima conversora de endotelina (ECE) (por ejemplo fosforamidón), un inhibidor de endopeptidasa neutra (NEP), un inhibidor de la HMGCoA reductasa, un donador de óxido nítrico, un anti-oxidante, un vasodilatador, un agonista de dopamina, un agente neuroprotector, un esteroide, un beta-agonista, un anti-coagulante, o un agente trombolítico. Se debe entender que semejante terapia combinada constituye un aspecto adicional de las composiciones y métodos de tratamiento proporcionados aquí.
1. Formulaciones para la administración oral
Las formas de dosificación farmacéutica orales son sólidas, en gel o líquidas. Las formas de dosificación sólidas son tabletas, cápsulas, gránulos, y polvos a granel. Entre los tipos de tabletas orales se incluyen grageas comprimidas, masticables y tabletas que pueden tener un recubrimento entérico, un recubrimiento de azúcar o un recubrimiento de película. Las cápsulas pueden ser cápsulas de gelatina dura o blanda, mientras los gránulos y polvos pueden ser proporcionados en forma no efervescente o efervescente combinados con otros ingredientes conocidos por los expertos en la técnica.
En ciertas realizaciones, las formulaciones son formas de dosificación sólidas, preferiblemente cápsulas o tabletas. Las tabletas, píldoras, cápsulas, trociscos y similares pueden contener cualquiera de los siguientes ingredientes, o compuestos de una naturaleza similar: un aglutinante; un diluyente; un agente disgregante; un lubricante; un antiapelmazante; un agente edulcorante; y un agente aromatizante.
Entre los ejemplos de los aglutinantes se incluyen celulosa microcristalina, goma de tragacanto, solución de glucosa, mucílago de acacia, solución de gelatina, sacarosa y pasta de almidón. Entre los lubricantes se incluyen talco, almidón, estearato de magnesio o calcio, licopodio y ácido esteárico. Entre los diluyentes se incluyen, por ejemplo, lactosa, sacarosa, almidón, caolín, sal, manitol y fosfato dicálcico. Entre los antiapelmazantes se incluyen, pero no están limitados a, dióxido de silicio coloidal. Entre los agentes disgregantes se incluyen croscarmelosa sódica, sal de sodio de glicolato de almidón, ácido algínico, almidón de maíz, almidón de patata, bentonita, metilcelulosa, agar y carboximetilcelulosa. Entre los agentes colorantes se incluyen, por ejemplo, cualquiera de los colorantes FD y C solubles en agua certificados aprobados, y mezclas de los mismos; y los colorantes FD y C insolubles en agua suspendidos en hidrato de alúmina. Entre los agentes edulcorantes se incluyen sacarosa, lactosa, manitol y agentes edulcorantes artificiales tales como ciclamato de sodio y sacarina, y cualquier número de aromas sometido a secado de rocío. Entre los agentes aromatizantes se incluyen aromas naturales extraídos de plantas tales como frutas y combinaciones sintéticas de compuestos que producen una sensación agradable, tales como, pero no limitados a, menta y salicilato de metilo. Entre los agentes humectantes se incluyen monoestearato de propilenglicol, monooleato de sorbitán, monolaurato de dietilenglicol y polioxietilen-lauriléter. Entre los recubrimientos eméticos se incluyen ácidos grasos, grasas, goma laca, goma laca amoniacal y acetatoftalatos de celulosa. Entre los recubrimientos de película se incluyen hidroxietilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica, polietilenglicol 4000 y acetatoftalato de celulosa.
Si se desea la administración oral, la sal del compuesto podría ser proporcionada en una composición que la proteja el entorno ácido del estómago. Por ejemplo, la composición puede ser formulada en un recubrimiento entérico que mantenga su integridad en el estómago y libere el compuesto activo en el intestino. La composición también puede ser formulada en combinación con un antiácido u otro de tales ingredientes.
Cuando la forma unitaria de dosificación es una cápsula, ésta puede contener, además del material del tipo anterior, un portador líquido tal como un aceite graso. Además, las formas de dosificación unitarias pueden contener otros diversos materiales que modifiquen la forma física de la unidad de dosificación, por ejemplo, recubrimientos de azúcar y otros agentes entéricos. Los compuestos también pueden ser administrados en forma de un componente de un elixir, suspensión, jarabe, oblea, pulverización, chicle o similar. Un jarabe puede contener, además de los compuestos activos, sacarosa como agente edulcorante y ciertos conservantes, tintes y colorantes y aromas.
Los materiales activos también pueden ser mezclados con otros materiales activos que no deterioren la acción deseada, o con materiales que suplementen la acción deseada, tales como antiácidos, bloqueadores H2, y diuréticos. Por ejemplo, si se utiliza el compuesto para tratar el asma o la hipertensión, puede ser utilizado con otros agentes broncodilatadores y antihipertensores, respectivamente. El ingrediente activo es un compuesto o una sal del mismo como se describe aquí. Se pueden incluir concentraciones superiores, hasta de aproximadamente el 98% en peso del ingrediente activo.
Entre los portadores farmacéuticamente aceptables incluidos en las tabletas están los aglutinantes, lubricantes, diluyentes, agentes disgregantes, agentes colorantes, agentes aromatizantes, y agentes humectantes. Las tabletas con recubrimiento entérico, debido al recubrimiento entérico, resisten la acción del ácido del estómago y se disuelven o disgregan en el intestino neutro o alcalino. Las tabletas con recubrimiento de azúcar son tabletas comprimidas a las cuales se aplican diferentes capas de sustancias farmacéuticamente aceptables. Las tabletas recubiertas con película son tabletas comprimidas que han sido recubiertas con un polímero u otro recubrimiento adecuado. Las tabletas múltiplemente comprimidas son tabletas comprimidas elaboradas mediante más de un ciclo de compresión utilizando las sustancias farmacéuticamente aceptables mencionadas previamente. Los agentes colorantes también pueden ser utilizados en las formas de dosificación anteriores. Los agentes aromatizantes y edulcorantes se utilizan en las tabletas comprimidas, las tabletas recubiertas con azúcar, las tabletas múltiplemente comprimidas y masticables. Los agentes aromatizantes y edulcorantes son especialmente útiles en la formación de tabletas masticables y grageas.
Entre las formas de dosificación oral líquidas se incluyen soluciones, emulsiones, suspensiones acuosas, soluciones y/o suspensiones reconstituidas a partir de gránulos no efervescentes y preparaciones efervescentes reconstituidas a partir de gránulos efervescentes. Entre las soluciones acuosas se incluyen, por ejemplo, elixires y jarabes. Las emulsiones son de aceite en agua o de agua en aceite.
Los elixires son preparaciones hidroalcohólicas, edulcoradas. Entre los portadores farmacéuticamente aceptables utilizados en los elixires se incluyen los disolventes. Los jarabes son soluciones acuosas concentradas de un azúcar, por ejemplo, sacarosa, y pueden contener un conservante. Una emulsión es un sistema de dos fases en el que un líquido es dispersado en forma de pequeños glóbulos en otro líquido. Los portadores farmacéuticamente aceptables utilizados en las emulsiones son líquidos no acuosos, agentes emulsionantes y conservantes. En las suspensiones se utilizan agentes suspensores y conservantes farmacéuticamente aceptables. Entre las sustancias farmacéuticamente aceptables utilizadas en los gránulos no efervescentes, que van a ser reconstituidos en una forma de dosificación oral líquida, se incluyen, diluyentes, edulcorantes y agentes humectantes. Entre las sustancias farmacéuticamente aceptables utilizadas en los gránulos efervescentes, que van a ser reconstituidos en una forma de dosificación oral líquida, se incluyen, ácidos orgánicos y una fuente de dióxido de carbono. Los agentes colorantes y aromatizantes se utilizan en todas las formas de dosificación anteriores.
Entre los disolventes se incluyen, glicerina, sorbitol, alcohol etílico y jarabe. Entre los ejemplos de los conservantes se incluyen glicerina, metil- y propilparabeno, ácido benzoico, benzoato de sodio y alcohol. Entre los ejemplos de los líquidos no acuosos utilizados en las emulsiones se incluyen aceite mineral y aceite de semilla de algodón. Entre los ejemplos de los agentes emulsionantes se incluyen gelatina, acacia, tragacanto, bentonita, y tensioactivos tales como monooleato de polioxietilensorbitán. Entre los agentes suspensores se incluyen sal de sodio de carboximetilcelulosa, pectina, tragacanto, goma Vee y acacia. Entre los diluyentes se incluyen lactosa y sacarosa. Entre los agentes edulcorantes se incluyen sacarosa, jarabes, glicerina y agentes edulcorantes artificiales tales como ciclamato de sodio y sacarina. Entre los agentes humectantes se incluyen monoestearato de propilenglicol, monooleato de sorbitán, monolaurato de dietilenglicol y éter polioxietilenlaurílico. Entre los ácidos orgánicos se incluyen ácido cítrico y ácido tartárico. Entre las fuentes de dióxido de carbono se incluyen bicarbonato de sodio y carbonato de sodio. Entre los agentes colorantes se incluyen cualquiera de los tintes FD y C solubles en agua certificados aprobados, y las mezclas de los mismos. Entre los agentes aromatizantes se incluyen aromas naturales extraídos de plantas tales como frutas, y combinaciones sintéticas de compuestos que producen una sensación al paladar agradable.
Para una forma de dosificación sólida, la solución o suspensión, por ejemplo en propilencarbonato, aceites vegetales o triglicéridos, es preferiblemente encapsulada en una cápsula de gelatina. Tales soluciones, y la preparación de encapsulación de las mismas, se describen en las Patentes de los Estados Unidos núms. 4.328.245; 4.409,239; y 4.410.545. Para una forma de dosificación líquida, la solución, v.g., por ejemplo, en polietilenglicol, puede ser diluida con una cantidad suficiente de un portador líquido farmacéuticamente aceptable, v.g., agua, para que sea fácilmente medida para la administración.
Alternativamente, las formulaciones orales líquidas o semi-sólidas pueden ser preparadas disolviendo o dispersando el compuesto activo o la sal en aceites vegetales, glicoles, triglicéridos, ésteres de propilenglicol (v.g. propilencarbonato) y otros portadores semejantes, y encapsulando estas soluciones o suspensiones en cubiertas para cápsulas de gelatina dura o blanda. Entre otras formulaciones útiles se incluyen aquellas mostradas en las Patentes de los Estados Unidos Núms. Re 28.819 y 4.358.603.
En una realización, las formulaciones son formas de dosificación sólidas, preferiblemente cápsulas o tabletas. En una realización preferida, las formulaciones son formas de dosificación sólidas, preferiblemente cápsulas o tabletas, conteniendo el 10-100%, preferiblemente el 50-95%, más preferiblemente el 75-85%, muy preferiblemente el 80-85% en peso, de una o más sulfonamidas o sales de sulfonamida, preferiblemente hidrogenofosfato de sodio o sales de sodio, más preferiblemente las sales de sodio, de uno o más compuestos de sulfonamida de fórmula I; aproximadamente el 0-25%, preferiblemente el 8-15%, de un diluyente o un aglutinante, tal como lactosa o celulosa microcristalina; aproximadamente del 0 al 10%, preferiblemente aproximadamente el 0-7%, de un disgregante, tal como almidón modificado o polímero de celulosa, concretamente una sal de sodio de carboximetilcelulosa entrecruzada, tal como croscarmelosa sódica (Crosscarmellose sodium NF es asequible comercialmente con el nombre AC-DI-SOL, FMC Corporation, Filadelfia, PA) o sal sódica de glicolato de almidón; y el 0-2% de un lubricante; tal como estearato de magnesio, talco o estearato de calcio. El disgregante, tal como la croscarmelosa sódica o la sal de sodio de glicolato de almidón, proporciona una rápida rotura de la matriz celulósica para la liberación inmediata del agente activo después de la disolución del polímero de recubrimiento. En todas las realizaciones, la cantidad precisa de ingrediente activo e ingredientes coadyuvantes puede ser determinada empíricamente y es función de la ruta de administración y de la alteración que se trate.
En una realización ejemplar, las formulaciones son cápsulas que contienen aproximadamente el 50%-100%, preferentemente aproximadamente el 70-90%, más preferiblemente aproximadamente el 80-90%, muy preferiblemente aproximadamente el 83% de una o más sales de sodio de uno o más compuestos de sulfonamida de fórmula I; aproximadamente el 0-15%, preferiblemente aproximadamente el 11% de un diluyente o un aglutinante, tal como lactosa o celulosa microcristalina; aproximadamente el 0-10%, preferiblemente aproximadamente el 5% de disgregante, tal como croscarmelosa sódica o sal de sodio de glicolato de almidón; y aproximadamente del 0 al 5%, preferiblemente aproximadamente el 1% de un lubricante tal como estearato de magnesio. También se contemplan aquí las formas sólidas para la administración tales como las tabletas.
En una realización ejemplar preferida, las formulaciones son cápsulas que contienen el 83% de una o más sales de sodio de uno o más compuestos de sulfonamida; el 11% de celulosa cristalina; el 5% de un disgregante, tal como croscarmelosa sódica o sal de sodio de glicolato de almidón; y el 1% de estearato de magnesio.
Las realizaciones anteriores también pueden ser formuladas en forma de una tableta, que puede estar opcionalmente recubierta. Las tabletas contendrán las composiciones descritas aquí.
En todas las realizaciones, las formulaciones en tabletas y cápsulas pueden estar recubiertas como es sabido por los expertos en la técnica con el fin de modificar o mantener la disolución del ingrediente activo. Así, por ejemplo, pueden estar recubiertas con un recubrimiento entéricamente digestible convencional, tal como salicilato de fenilo, ceras y acetatoftalato de celulosa.
2. Inyectables, soluciones y emulsiones
Asimismo se contempla aquí la administración parenteral, caracterizada generalmente por la inyección, ya sea subcutáneamente, intramuscularmente o intravenosamente. Los inyectables pueden ser preparados en formas convencionales, como soluciones o suspensiones líquidas, como formas sólidas adecuadas para su solución o suspensión en líquido antes de la inyección, o como emulsiones. Los excipientes adecuados son, por ejemplo, agua, solución salina, dextrosa, glicerol o etanol. Además, si se desea, las composiciones farmacéuticas que van a ser administradas también pueden contener cantidades minoritarias de sustancias coadyuvantes no tóxicas tales como agentes humectantes o emulsionantes, agentes tamponadores del pH, estabilizadores, intensificadores de la solubilidad, y otros agentes semejantes, tales como por ejemplo, acetato de sodio, monolaurato de sorbitán, oleato de trietanolamina y ciclodextrinas. La implantación de los sistemas de liberación lenta o de liberación sostenida, de manera que se mantenga un nivel de dosificación constante (ver, v.g. la Patente de los Estados Unidos Núm. 3.710.795) también se contempla aquí. El porcentaje de compuesto activo contenido en tales composiciones orales depende en gran manera de la naturaleza específica de las mismas, así como de la actividad del compuesto y de las necesidades del sujeto.
En la administración parenteral de las formulaciones se incluyen las administraciones intravenosa, subcutánea e intramuscular. Entre las preparaciones para la administración parenteral se incluyen soluciones estériles listas para la inyección, productos solubles secos estériles, tales como los polvos liofilizados descritos aquí, listos para ser combinados con un disolvente inmediatamente antes de su uso, incluyendo tabletas hipodérmicas, suspensiones estériles listas para la inyección, productos insolubles secos estériles listos para ser combinados con un vehículo inmediatamente antes de su uso y emulsiones estériles. Las soluciones pueden ser acuosas o no acuosas.
Si se administran intravenosamente, entre los portadores estériles se incluyen solución salina fisiológica o solución salina taponada con fosfato (PBS), y soluciones que contienen agentes espesantes y solubilizantes, tales como glucosa, polietilenglicol, y polipropilenglicol y mezclas de los mismos.
Entre los portadores farmacéuticamente aceptables utilizados en las preparaciones parenterales se incluyen vehículos acuosos, vehículos no acuosos, agentes antimicrobianos, agentes para conferir isotonicidad, tampones, antioxidantes, anestésicos locales, agentes suspensores y dispersantes, agentes emulsionantes, agentes secuestradores o quelantes, y otras sustancias farmacéuticamente aceptables.
Entre los ejemplos de los vehículos acuosos se incluyen Inyectable de Cloruro de Sodio, Inyectable de Solución de Ringer, Inyectable de Dextrosa Isotónica, Inyectable de Agua Estéril, Inyectable de Dextrosa y Solución de Ringer con Lactato añadido. Entre los vehículos parenterales no acuosos se incluyen los aceites fijados de origen vegetal, aceite de semilla de algodón, aceite de maíz, aceite de sésamo y aceite de cacahuete. Los agentes antimicrobianos a concentraciones bacteriostáticas o fungistáticas deben ser añadidos a las preparaciones parenterales envasadas en recipientes de múltiples dosis que incluyen fenoles o cresoles, productos mercuriales, alcohol bencílico, clorobutanol, ésteres de ácido metil- y propil- p-hidroxibenzoico, timerosal, cloruro de benzalconio y cloruro de benzetonio. Entre los agentes isotónicos se incluyen cloruro de sodio y dextrosa. Entre los tampones se incluyen fosfato y citrato. Entre los antioxidantes se incluye el bisulfato de sodio. Entre los anestésicos locales se incluye hidrocloruro de procaína. Entre los agentes suspensores y dispersantes se incluyen sal de sodio de carboximetilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa y polivinilpirrolidona. Entre los agentes emulsionantes se incluye Polysorbate 80 (Tween 80). Entre los agentes secuestradores o quelantes de iones metálicos incluye EDTA. Entre los portadores farmacéuticos se incluyen también alcohol etílico, polietilenglicol y propilenglicol para vehículos miscibles con agua e hidróxido de sodio, ácido clorhídrico, ácido cítrico o ácido láctico para el ajuste del pH.
La concentración del compuesto farmacéuticamente activo se ajusta de manera que una inyección proporcione una cantidad eficaz para producir el efecto farmacológico deseado. La dosis exacta depende de la edad, el peso y el estado del paciente o animal como es sabido en la técnica.
Las preparaciones parenterales de dosis unitaria son empaquetadas en una ampolla, un vial o una jeringa con una aguja. Todas las preparaciones para la administración parenteral deben ser estériles, como es sabido en la técnica.
Ilustrativamente, la infusión intravenosa o intraarterial de una solución acuosa estéril que contiene un compuesto activo es un modo de administración eficaz. Otra realización es una solución o suspensión acuosa u oleosa estéril que contiene una sustancia activa inyectada necesaria para producir el efecto farmacológico deseado.
Los inyectables son diseñados para la administración local y sistémica. Típicamente una dosificación terapéuticamente eficaz se formula para que contenga una concentración de al menos aproximadamente el 0,1% p/p hasta aproximadamente el 90% p/p o más, preferiblemente más del 1% p/p del compuesto activo en el tejido o los tejidos tratados. El ingrediente activo puede ser administrado de una vez, o puede ser dividido en numerosas dosis más pequeñas a administrar a intervalos de tiempo. Se entiende que la dosificación y la duración del tratamiento precisas son una función del tejido que esté siendo tratado y pueden ser determinadas empíricamente utilizando protocolos de ensayo conocidos o mediante extrapolación a partir de datos de ensayo in vivo o in vitro. Se debe observar que las concentraciones y los valores de dosificación también pueden variar con la edad del individuo tratado. Se debe entender adicionalmente que para cualquier sujeto concreto, los regímenes de dosificación específicos deben ser ajustados a lo largo del tiempo según la necesidad del individuo y el juicio profesional de la persona que administra o supervisa la administración de las formulaciones, y que los intervalos de concentración mostrados aquí son solamente ejemplares y no se pretende que limiten el alcance o la práctica de las formulaciones reivindicadas.
El compuesto puede ser suspendido en una forma micronizada u otra forma adecuada o puede ser transformado para producir un producto activo más soluble o para producir un profármaco. La forma de la mezcla resultante depende de numerosos factores, incluyendo el modo de administración pretendido y la solubilidad del compuesto en el portador o vehículo seleccionado. La concentración eficaz es suficiente para aliviar los síntomas de la afección y puede ser determinada empíricamente.
En muchos casos, las soluciones de las sales de sodio, incluyendo la sal de sodio y las sales de hidrogenofosfato de sodio manifiestan en comparación con el compuesto neutro. Estas sales también manifiestan una solubilidad mejorada sobre el compuesto neutro en medio acuoso. Se encontró que la sal de sodio, en ciertas formulaciones acuosas, es tan estable como la sal hidrogenofosfato de sodio.
3. Polvos liofilizados
Son de particular interés aquí los polvos liofilizados, que pueden ser reconstituidos para su administración en forma de soluciones, emulsiones y otras mezclas. También pueden ser reconstituidos y formulados en forma de sólidos o geles.
En realizaciones concretas, se proporcionan formulaciones de sales de hidrogenofosfato de sodio o sodio, preferiblemente sodio, de los compuestos de sulfonamida, que poseen una estabilidad incrementada con relación a las formulaciones de las sulfonamidas neutras. Específicamente, se proporcionan formulaciones de sales de sodio de sulfonamidas en forma de un polvo estéril, liofilizado. Se ha encontrado que estos polvos tienen una estabilidad incrementada en relación con las formulaciones de las sulfonamidas neutras.
El polvo liofilizado, estéril se prepara disolviendo la sal de sodio en una solución de tampón fosfato de sodio conteniendo dextrosa u otro excipiente adecuado. La posterior filtración estéril de la solución seguida de liofilización en condiciones normalizadas conocidas por los expertos en la técnica proporciona la formulación deseada. Brevemente, el polvo liofilizado se prepara disolviendo dextrosa, sorbital, fructosa, jarabe de maíz, xilitol, glicerina, glucosa, sacarosa u otro agente adecuado, aproximadamente el 1-20%, preferiblemente aproximadamente del 5 al 15%, en un tampón adecuado, tal como citrato, fosfato de sodio o potasio u otro tampón semejante conocido por los expertos en la técnica, típicamente, a un pH aproximadamente neutro. Después, se añade una sal seleccionada, preferiblemente la sal de sodio de la sulfonamida (aproximadamente 1 g de la sal por 10-100 g de solución tampón, típicamente aproximadamente 1 g/30 g), a la mezcla resultante, preferiblemente por encima de la temperatura ambiente, más preferiblemente a aproximadamente 30-35ºC, y se agita hasta que se disuelve. La mezcla resultante se diluye añadiendo más tampón (de manera que la concentración resultante de la sal disminuya aproximadamente un 50%, típicamente aproximadamente un 15-25%). La mezcla resultante se somete a filtración estéril o se trata para eliminar los productos particulados y para asegurar la esterilidad, y se distribuye en porciones en viales para su liofilización. Cada vial contendrá una única dosis (100-500 mg, preferiblemente 250 mg) o múltiples dosis de la sal de sulfonamida. El polvo liofilizado puede ser almacenado en condiciones apropiadas, tales como aproximadamente de 4ºC a la temperatura ambiente. Los detalles de un procedimiento ejemplar se exponen en los Ejemplos.
La reconstitución de este polvo liofilizado con agua para inyectables proporciona una formulación para su uso en la administración parenteral de sales de sodio de lassulfonamidas. Para la reconstitución se añaden aproximadamente 1-50 mg, preferiblemente 5-35, más preferiblemente aproximadamente 9-30 por ml de agua estéril u otro portador adecuado. La cantidad precisa depende de la indicación tratada y del compuesto seleccionado. Semejante cantidad puede ser determinada empíricamente.
En una realización, las formulaciones contienen sólidos liofilizados conteniendo una o más sales hidrogenofosfato de sodio o sodio, preferiblemente sodio, de uno o más compuestosde sulfonamida de fórmula I, y también contienen uno o más de los siguientes:
un tampón, tal como fosfato de sodio o potasio, o citrato;
un agente solubilizante, tal como LABRASOL, DMSO, bis(trimetilsilil)acetamida, etanol, propilenglicol (PG), o polivinilpirrolidona (PVP); y
un azúcar, tal como sorbitol o dextrosa.
En realizaciones más preferidas, las formulaciones contienen una o más sales hidrogenofosfato de sodio o sodio, preferiblemente sodio, de uno o más compuestos de sulfonamida de fórmula I, un tampón, tal como fosfato de sodio o potasio, o citrato; y un azúcar, tal como sorbitol o dextrosa.
En las realizaciones más preferidas, las formulaciones contienen una o más sales de sodio de uno o más compuestos sulfonamida de fórmula I; un tampón fosfato de sodio; y dextrosa.
4. Administración tópica
Las mezclas tópicas se preparan como se ha descrito para la administración local y sistémica. La mezcla resultante puede ser una solución, suspensión, emulsiones o similares y se formulan en forma de cremas, geles, pomadas, emulsiones, soluciones, elixires, lociones, suspensiones, tinturas, pastas, aerosoles, irrigaciones, pulverizaciones, supositorios, vendajes, parches dérmicos o cualquier formulación adecuada para la administración tópica.
Las sales de sodio y otros derivados de los compuestos pueden ser formulados en forma de aerosoles para la aplicación tópica, por ejemplo mediante inhalación (ver, v.g. las Patentes de los Estados Unidos Núms. 4.044.126, 4.414.209, y 4.364.923, que describen aerosoles para la liberación de un esteroide útil para el tratamiento de las enfermedades inflamatorias, concretamente el asma). Estas formulaciones para la administración en el tracto respiratorio pueden estar en forma de un aerosol o una solución para nebulizador, o en forma de un polvo microfino para insuflación, solo o combinado con un portador inerte tal como lactosa. En tal caso, las partículas de la formulación tendrán típicamente diámetros de menos de 50 micras, preferiblemente menos de 10 micras.
Las sales de sodio de los compuestos pueden ser formuladas para la aplicación local o tópica, por ejemplo para la aplicación tópica a la piel y las membranas mucosas, tal como el ojo, en forma de geles, cremas, y lociones y para la aplicación al ojo o para la aplicación intracisternal o intraespinal. La administración tópica se contempla para la liberación transdérmica y también para la administración a los ojos o la mucosa, o para terapias de inhalación. También se pueden administrar soluciones nasales del compuesto activo solo o combinado con otros excipientes farmacéuticamente aceptables.
Estas soluciones, concretamente aquellas destinadas a uso oftálmico, pueden ser formuladas en forma de soluciones isotónicas al 0,01%-10%, pH aproximadamente 5-7, con sales apropiadas.
5. Artículos de manufactura
Finalmente, los derivados, concretamente las sales, ácidos, ésteres y profármacos, preferiblemente las sales de sodio, de los compuestos pueden ser envasados en forma de artículos de manufactura conteniendo material de envasado, una sal, ácido, éster o profármaco, preferiblemente una sal de sodio, de un compuesto proporcionado aquí, que sea eficaz para ejercer una acción antagónica sobre los efectos de la endotelina, aliviar los síntomas de una alteración mediada por endotelina, o inhibir la unión de un péptido de endotelina a un receptor ET con una CI_{50} menor de aproximadamente 10 \muM, en el material de envasado, y una etiqueta que indique que el compuesto o la sal del mismo se utiliza para ejercer una acción antagónica sobre los efectos de la endotelina, tratar alteraciones mediadas por endotelina o inhibir la unión de un péptido de endotelina a un receptor ET.
6. Formulaciones para otras rutas de administración
Dependiendo de la afección tratada también se contemplan aquí otras rutas de administración, tales como la aplicación tópica, los parches transdérmicos, la administración rectal.
Por ejemplo, las formas de dosificación farmacéutica para la administración rectal son los supositorios rectales, las cápsulas y las tabletas para efecto sistémico. Los supositorios rectales utilizados aquí representan cuerpos sólidos para la inserción en el recto que se funden o reblandecen a la temperatura corporal liberando uno o más ingrediente farmacológicamente o terapéuticamente activos. Las sustancias farmacéuticamente aceptables utilizadas en los supositorios rectales son bases o vehículos y agentes para elevar el punto de fusión. Entre los ejemplos de las bases se incluyen manteca de cacao (aceite de teobroma), glicerina-gelatina, Carbowax, (polioxietilenglicol) y mezclas apropiadas de mono-, di- y tri-glicéridos de ácidos grasos. Se pueden utilizar combinaciones de diversas bases. Entre los agentes para elevar el punto de fusión de los supositorios se incluye espermaceti y cera. Los supositorios rectales pueden ser preparados o bien mediante el método de compresión o bien por moldeo. El peso típico de un supositorio rectal es de aproximadamente 2 a 3 g.
Las tabletas y cápsulas para la administración rectal son fabricadas utilizando la misma sustancia farmacéuticamente aceptable y mediante los mismos métodos que para las formulaciones para la administración oral.
Los siguientes ejemplos se incluyen con fines ilustrativos solamente y no se pretende que limiten el alcance de la invención.
Ejemplo de referencia 1
2-(3-(3-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tienilcarboxamido)-2,4,6-trimetilfenil)acetato de metilo A. 3-Amino-2,4,6-trimetilfenilacetato de metilo
A una solución de 3-cianometil-2,4,6-trimetilanilina (ver Ejemplo 14, procedimiento C) (5 g, 28,7 mmoles) en metanol (30 ml) se añadió ácido sulfúrico concentrado (30 ml) enfriando. La mezcla resultante se calentó a reflujo durante 8 horas antes de permitir que se enfriara a la temperatura ambiente y se diluyó con agua (100 ml). La mezcla se separó mediante evaporación de metanol y el residuo se alcalinizó con carbonato de sodio y después se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se elaboró y se concentró como es habitual para dar el compuesto deseado en forma de un aceite (5,2 g, 88%).
B. 2-(3-(3-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tienilcarboxamido)-2,4,6-trimetilfenil)acetato de metilo
A una solución de ácido N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-3-sulfamoiltiofeno-2-carboxílico (1 g, 3,1 mmoles) en N,N-dimetilformamida anhidra (20 ml) se añadió 1,1'-carbonildiimidazol (553 mg, 3,41 mmoles). Una vez que hubo cesado la evolución de gas, se añadió 3-amino-2,4,6-trimetilfenilacetato de metilo (3,1 g, 15 mmoles) y la mezcla resultante se calentó a 80ºC durante 24 horas. Se dejó que la mezcla se enfriara a la temperatura ambiente y se vertió en HCl 0,5 M frío (100 ml). El producto precipitado resultante se filtró y después se purificó mediante HPLC para dar el compuesto deseado en forma de un sólido (p.f. 75-78ºC, 238 mg, 15%).
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Ejemplo de referencia 2
Acido 2-(3-(3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tienilcarboxamido)-2,4,6-trimetilfenil)acético
Una solución de 2-(3-(3-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tienilcarboxamido)-2,4,6-trimetil-fenil)acetato de metilo (100 mg, 0,195 mmoles) (Ejemplo deReferencia 1) en NaOH 1N (50 ml) se agitó a la temperatura ambiente durante 4 horas antes de acidularla con HCl concentrado a pH 1-2. El producto precipitado de color blanco resultante se filtró y se secó en un liofilizador para dar ácido 2-(3-(3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tienilcarboxamido)-2,4,6-trimetil-fenil)acético en forma de un sólido de color blanco (p.f. 110-113ºC, 74 mg, 76%).
Ejemplo de referencia 3
Trifluoroacetato de N^{2}-(3-dimetilaminometil-2,4,6-trimetilfenil)-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tiofenocarboxamida A. 3-Dimetilaminometil-2,4,6-trimetilanilina
A una mezcla de THF (20 ml) y dimetilamina (20 ml, 40% en peso en agua) a 0ºC se añadió cloruro de 2,4,6-trimetilbencilo (5 g, 29,64 mmoles). Se dejó que la mezcla se templara a la temperatura ambiente y se agitó durante 4 horas antes de evaporar el THF y se extrajo el residuo acuoso con éter. La capa orgánica se elaboró y se concentró como es habitual para dar 2,4,6-trimetilfenil-dimetilamina con un rendimiento cuantitativo. Este compuesto se sometió después a nitración y el nitro compuesto resultante se redujo a la correspondiente anilina como se demuestra en el Ejemplo de Referencia 14.
B. Trifluoroacetato de N^{2}-(3-dimetilaminometil)-2,4,6-trimetilfenil)-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil-sulfamoil)-2-tiofenocarboxamida
Se sintetizó trifluoroacetato de N^{2}-(3-dimetil-aminometil)-2,4,6-trimetilfenil)-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tiofenocarboxamida y se purificó de la misma manera que en el Ejemplo de Referencia 1 en forma de un polvo (p.f. 92-94ºC, rendimiento 18%).
Ejemplo de referencia 4
N^{2}-(3-Metanosulfonamido-2,4,6-trimetil)fenil-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-tiofenocarboxamida A. 3-Metanosulfonamido-2,4,6-trimetilanilina
A una solución de 2,4,6-trimetil-1,3-fenilendiamina (5,82 g, 38,76 mmoles) y trietilamina (3,6 ml, 25,84 mmoles) en acetato de etilo (100 ml) a 0ºC se añadió cloruro de metanosulfonilo (2 ml, 25,84 mmoles) gota a gota. La mezcla se agitó durante la noche. El producto precipitado resultante se separó por filtración y el producto filtrado se concentró. El sólido resultante se recristalizó en MeOH para dar el producto deseado (3 g, rendimiento 50%).
B. N^{2}-(3-Metanosulfonamido-2,4,6-trimetil)fenil-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-tiofenocarboxamida
Se sintetizó N^{2}-(3-metanosulfonamido-2,4,6-trimetil)fenil-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-tiofenocarboxamida y se purificó de la misma manera que en el Ejemplo de Referencia 1 en forma de un polvo (p.f. 130-133ºC, rendimiento 19%).
Ejemplo 5 N-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(2,4-dimetil-6-aminocarbonilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida A. 2-Ciano-4,6-dimetilanilina
A una solución de 2,4-dimetilanilina (9,80 g, 80,9 mmoles) en diclorometano (200 ml) a 0ºC se añadió N-bromosuccinimida (15,1 g, 84,9 mmoles) lentamente. Se dejó que la mezcla se templara a la temperatura ambiente y se agitó a la temperatura ambiente durante la noche antes de lavarla con NaOH 1N. La capa orgánica se elaboró y se concentró de la manera habitual. El residuo se disolvió en N,N-dimetilformamida (120 ml) seguido de la adición de cianuro cuproso (14,5 g, 161,8 mmoles). La mezcla se calentó a reflujo durante 8 horas y después se dejó enfriar a la temperatura ambiente y se vertió en agua (1 litro). La mezcla se trató con etilendiamina en exceso y el producto precipitado se filtró, se redisolvió en acetato de etilo, se secó con MgSO_{4} y después se concentró para dar el compuesto deseado en forma de un aceite (6,7 g, 55%).
B. N-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(2,4-dimetil-6-aminocarbonilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida
Se sintetizó N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(2,4-dimetil-6-aminocarbonilfenilaminocarbonil)-tiofeno-3-sulfonamida y se purificó de la misma manera que en el Ejemplo de Referencia 14. El grupo ciano se hidrolizó a la correspondiente amida durante la desprotección del grupo MOM. Se obtuvo N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(2,4-dimetil-6-aminocarbonilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida en forma de un sólido (p.f. 40-43ºC, 61%).
Ejemplo de referencia 6
N^{2}-(3-Hidroxi-2,4,6-trimetil)fenil-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)sulfamoil-2-tiofenocarboxamida A. 3-Acetoxi-2,4,6-trimetilanilina
A una solución de 2,4,6-trimetilfenol (10 g, 73,5 mmoles) y trietilamina (11,1 g, 110/3 mmoles) en acetato de etilo (200 ml) se añadió cloruro de acetilo (7,5 g, 95,6 mmoles) gota a gota a 0ºC. La mezcla se agitó durante la noche. La reacción se sofocó con agua y la capa orgánica se lavó con HCl 1N. La capa orgánica se secó y se concentró como es habitual. El residuo se sometió a nitración como en el Ejemplo de Referencia 14 (procedimiento B) y se redujo como se demuestra en el Ejemplo de Referencia 14 (procedimiento C) para dar 3-acetoxi-2,4,6-trimetilanilina.
B. N^{2}-(3-Hidroxi-2,4,6-trimetil)fenil-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)sulfamoil-2-tiofenocarboxamida
Se sintetizó N^{2}-(3-hidroxi-2,4,6-trimetil)fenil-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)sulfamoil-2-tiofeno-carboxamida y se purificó de la misma manera que en el Ejemplo de Referencia 14. El grupo acetoxi fue hidrolizado al correspondiente hidroxilo durante la desprotección del grupo MOM. Se obtuvo N^{2}-(3-hidroxi-2,4,6-trimetil)fenil-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-sulfamoil-2-tiofeno-carboxamida en forma de un sólido (p.f. 75-78ºC, 54%).
Ejemplo de referencia 7
3-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolil)sulfamoil-N^{2}-(3-carboxil-2,4,6-trimetilfenil)-2-tiofenocarboxamida A. 3-Amino-2,4,6-trimetilbenzoato de alilo
A una solución de ácido 2,4,6-trimetilbenzoico (10 g, 61 mmoles) en DMF (100 ml) se añadieron sucesivamente carbonato de potasio (17 g, 122 mmoles) y bromuro de alilo (11 g, 91,5 mmoles). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante la noche antes de verterla en agua (\sim1 litro). El producto precipitado resultante se filtró y se lavó con agua, después se secó a vacío para dar 2,4,6-trimetilbenzoato de alilo en forma de un sólido (10,2 g, 82%) que se sometió a nitración y después se redujo como se muestra para el Ejemplo 14 (procedimiento B y C) para dar 3-amino-2,4,6-trimetilbenzoato de alilo.
B. 3-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolil)sulfamoil-N^{2}-(3-carboxil-2,4,6-trimetilfenil)-2-tiofeno-carboxamida
Se sintetizó 3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-sulfamoil-N^{2}-(3-carboxil-2,4,6-trimetilfenil)-2-tiofeno-carboxamida y se purificó de la misma manera que en el Ejemplo de Referencia 14. El grupo alilo fue desprotegido utilizando un procedimiento de la literatura. Se obtuvo 3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)sulfamoil-N^{2}-(3-carboxil-2,4,6-trimetilfenil)-2-tiofenocarboxamida en forma de un sólido (p.f. 179-181ºC, 24%).
Ejemplo 8 3-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolil)sulfamoil-N^{2}-(2-carboxil-4,6-dimetil)fenil-2-tiofenocarboxamida
Se sintetizó 3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-sulfamoil-N^{2}-(2-carboxil-4,6-dimetil)fenil-2-tiofeno-carboxamida y se purificó de la misma manera que en el Ejemplo de Referencia 14 utilizando ácido 2-amino-3,4-dimetibenzoico. Se obtuvo 3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)sulfamoil-N^{2}-(2-carboxil-4,6-dimetil)fenil-2-tiofenocarboxamida en forma de un sólido (p.f. 171-174ºC, 66%).
Ejemplo 9 3-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolil)sulfamoil-N^{2}-(2-fenil-4,6-dimetil)fenil-2-tiofenocarboxamida A. 2-Amino-3,5-dimetilbifenilo
Se acopló 2-bromo-4,6-dimetilanilina con ácido fenilborónico en las condiciones de Suzuki para dar 2-amino-3,5-dimetilbifenilo con un rendimiento del 68%.
B. 3-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolil)sulfamoil-N^{2}-(2-fenil-4,6-dimetil)fenil-2-tiofenocarboxamida
Se sintetizó 3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-sulfamoil-N^{2}-(2-fenil-4,6-dimetil)fenil-2-tiofeno-carboxamida y se purificó de la misma manera que en el Ejemplo de Referencia 14. Se obtuvo 3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)sulfamoil-N^{2}-(2-fenil-4,6-dimetil)fenil-2-tiofenocarboxamida en forma de un sólido (p.f. 178-181ºC, 59%).
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Ejemplo de referencia 10
3-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolil)sulfamoil-N^{2}-(3-sulfamoil-2,4,6-trimetil)fenil-2-tiofenocarboxamida A. 3-Sulfamoil-2,4,6-trimetilanilina
A una solución de cloruro de mesitilensulfonilo (5 g, 22,9 mmoles) en THF (50 ml) a 0ºC se añadió hidróxido de amonio (20 ml). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 30 minutos antes de que toda la materia volátil se hubiera evaporado. Del sólido de color blanco resultante se separó por filtración el agua y se sometió a nitración y se redujo como se demuestra en el Ejemplo de Referencia 14 (procedimiento B y C) para dar 3-sulfamoil-2,4,6-trimetilanilina con un rendimiento del 47%.
B. 3-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolil)sulfamoil-N^{2}-(3-sulfamoil-2,4,6-trimetil)fenil-2-tiofenocarboxamida
Se sintetizó 3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-sulfamoil-N^{2}-(3-sulfamoil-2,4,6-trimetil)fenil-2-tiofeno-carboxamida y se purificó de la misma manera que en el Ejemplo de Referencia 14. Se obtuvo 3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)sulfamoil-N^{2}-(3-sulfamoil-2,4,6-trimetil)-fenil-2-tiofenocarboxamida en forma de un sólido (p.f. 214-217ºC,
69%).
Ejemplo de referencia 11
N-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(pentametilfenil-aminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida A. Pentametilanilina
A una solución de pentametilbenceno (5 g, 33,8 mmoles) en diclorometano (250 ml) a 0ºC se añadió rápidamente tetrafluoroborato de nitronio (5 g). La mezcla se agitó durante 4 horas antes de sofocarla con agua fría. La capa orgánica se concentró y el residuo se redujo (Ejemplo de Referencia 14, procedimiento C) para dar pentametilenanilina con un rendimiento del 52%.
B. N-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(pentametil-fenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida
Se sintetizó N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(pentametilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida y se purificó de la misma manera que en el Ejemplo de Referencia 14. Se obtuvo N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(pentametil-
fenilaminocarbonil)tiofeno-3- sulfonamida en forma de un sólido (p.f. 196-198ºC, 69%).
Ejemplo de referencia 12
N-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(2,4,6-trimetil-fenilmetilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida A. 2,4,6-Trimetilbencilamina
A una solución de cloruro de 2,4,6-trimetilbencilo (5 g, 29,7 mmoles) en DMSO (20 ml) se añadió azida de sodio (2,9 g, 44,6 mmoles). La mezcla se calentó a 60ºC durante 3 horas antes de dejarla enfriar a la temperatura ambiente y verterla en agua (200 ml). El producto precipitado resultante se filtró disuelto en THF húmedo (50 ml) seguido de la adición de trifenilfosfina (15,6, 59,4 mmoles). La mezcla se calentó reflujo durante 3 horas y la materia volátil se evaporó. El residuo se añadió a HCl 1N (200 ml) y los sólidos se separaron por filtración, se secaron a vacío para dar 2,4,6-trimetilbencilamina (2,7 g, rendimiento 61%).
B. N-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(2,4,6-trimetil-fenilmetilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida
Se sintetizó N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(2,4,6-trimetilfenilmetilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida y se purificó de la misma manera que en el Ejemplo de Referencia 14. Se obtuvo N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(2,4,6- trimetilfenilmetilaminocarbonil)-tiofeno-3-sulfonamida en forma de un sólido (p.f. 175-177ºC, 73%).
Ejemplo de referencia 13
N-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(3-cianometil-2,4,6-trimetilfenilmetilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida A. 3-Cianometil-2,4,6-trimetilbencilamina
A una solución de 1,3-bis(clorometil)-2,4,6-trimetilbenceno (10 g, 46 mmoles) en DMSO (30 ml) se añadió cianuro de sodio (2,25 g, 46 mmoles). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante la noche antes de añadir azida de sodio (4,5 g, 69 mmoles). La mezcla se calentó a 80ºC durante 3 horas antes de verterla en agua (300 ml). El producto precipitado resultante se filtró para dar 2:1:1,5 de 3 cianometil-2,4,6-trimetilbencilazida, 1,3-bis(cianometil)-2,4,6-trimetilbenceno y 1,3-bis(azidometil)-2,4,6-trimetilbenceno. Esta mezcla no se separó pero se trató con trifenilfosfina (18 g, 69 mmoles) en THF húmedo. La reacción se llevó a cabo y se elaboró como en el Ejemplo de Referencia 12 (procedimiento A) solo que la solución de HCl fue alcalinizada con K_{2}CO_{3} hasta que no se observó más evolución de gas. La mezcla se extrajo con diclorometano y se concentró para dar solamente la 3-cianometil-2,4,
6-trimetilbencilamina deseada (2 g, rendimiento 25%).
B. N-(4-Cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(3-cianometil-2,4,6-trimetilfenilmetilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida
Se sintetizó N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(3-cianometil-2,4,6-trimetilfenilmetilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida y se purificó de la misma manera que en el Ejemplo de Referencia 14. Se obtuvo N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(3-cianometil-2,4,6-trimetilfenilmetil-aminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida en forma de un sólido (p.f. 76-79ºC, 53%).
Ejemplo de referencia 14
N-(3-Cianometil-2,4,6-trimetilfenil)-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tiofenocarboxamida, N(sulfonami-da)-sal de Na A. 2,4,6-Trimetilfenilacetonitrilo
A una mezcla de \alpha-cloroisodureno (5 g, 29,64 mmoles) y cianuro de sodio (5,8 g, 118,6 mmoles) se añadió DMSO anhidro (16 ml). La reacción exotérmica se agitó hasta que la mezcla de reacción estuvo a la temperatura ambiente de nuevo, después se calentó a 80ºC durante 30 minutos. Para elaborarla, la mezcla de reacción se vertió en agua (200 ml). El producto precipitado de color blanco resultante se filtró, se lavó con agua, se secó para dar 2,4,6-trimetilfenilacetonitrilo en forma de un polvo de color blanco (4,5 g, 95%).
B. 3-Cianometil-1-nitro-2,4,6-trimetilbenceno
A una suspensión de 2,4,6-trimetilfenilacetonitrilo (4,5 g) en ácido acético (40 ml) a la temperatura ambiente se añadió gota a gota HNO_{3} al 70% y H_{2}SO_{4} concentrado (5 ml). La mezcla de reacción de color pardo se agitó durante 1 hora, se vertió en agua con hielo (500 ml). El producto se extrajo en acetato de etilo, el extracto se lavó con agua, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró para dar 3-cianometil-1-nitro-2,4,6-trimetilbenceno en forma de un aceite (5,8 g, rendimiento cuantitativo).
C. 3-Cianometil-2,4,6-trimetilanilina
A una solución de 3-cianometil-1-nitro-2,4,6-trimetilbenceno (5,8 g en metanol (150 ml) se añadieron sucesivamente cloruro de amonio (6 g en 50 ml de agua), polvo de cinc (6 g). La reacción exotérmica se agitó vigorosamente hasta que volvió a la temperatura ambiente (2 horas). Para la elaboración la mezcla bruta se separó por filtración y la torta se lavó con metanol. Las soluciones metanólicas fueron concentradas y el residuo repartido entre acetato de etilo y NaOH 1N. La capa orgánica se secó sobre MgSO_{4} y se concentró para dar 3-cianometil-2,4,6-trimetilanilina en forma de un sólido de color pardo claro (3,4 g, 69%).
D. 5-Amino-4-cloro-3-metilisoxazol
A una solución de 5-amino-3-metilisoxazol (9,8 g, 100 mmoles) en cloruro de metileno (200 ml) se añadió N-clorosuccinimida (14,7g, 110 mmoles) a 0ºC a lo largo de un período de 20 minutos. La mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a la temperatura ambiente. Para elaborar la mezcla de reacción se concentró y se repartió entre NaOH 1N (150 ml)/acetato de etilo (400 ml). La capa orgánica se lavó con NaOH 1N, agua, salmuera, se secó sobre MgSO_{4} después se concentró hasta un sólido de color pardo. Para la purificación el producto se hizo precipitar de nuevo en cloroformo/hexano después se recristalizó en acetato de etilo/hexano para dar 5-amino-4-cloro-3-metilisoxazol en forma de un sólido de color parduzco (5,5 g, 41%).
E. 2-Carbometoxi-3-[N-(4-cloro-3-metilisoxazol-5-il)]tiofenosulfonamida
A una suspensión de suspensión en aceite mineral al 60% de NaH (8,5 g, 0,21 moles) en THF (100 ml) a -20ºC se añadió una solución de 5-amino-4-cloro-3-metilisoxazol (12,4 g, 92,4 mmoles) en THF anhidro (65 ml) en nitrógeno a lo largo de un período de 20 minutos. Tras agitar durante 10 minutos se añadió una solución de cloruro de 2-carbometoxi-3-tiofenosulfonilo (22,2 g, 92,4 mmoles) en THF (65 ml) a -20ºC a lo largo de 15 minutos. La mezcla de reacción se agitó durante 10 minutos después se sofocó con H_{2}O (5 ml) a la misma temperatura. Para la elaboración la mezcla de reacción se vertió en HCl 4N y el producto se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua después el compuesto se extrajo con NaHCO_{3} semisaturado. Las soluciones alcalinas combinadas se decoloraron con carbón activado, se enfriaron a 0ºC y se acidularon con HCl 4N. El producto se aisló por filtración, se lavó con agua, se secó para dar 2-carbometoxi-3-[N-(4-cloro-3-metilisoxazol-5-il)tiofenosulfonamida en forma de un polvo de color blanco (23,4 g, 75%).
F. 2-Carbometoxi-3-[N-(4-cloro-3-metilisoxazol-5-il)-N-MOM]tiofenosulfonamida
A una solución de 2-carbometoxi-3-[N-(4-cloro-3-metilisoxazol-5-il]tiofenosulfonamida (3,3 g, 10,0 mmoles) en THF (50 ml) se añadió diisopropiletilamina (1,9 g, 15,0 mmoles) a 0ºC seguido de la adición de éter bromometilmetílico (1,5 g, 12,0 mmoles). La mezcla se reacción se agitó durante la noche a la temperatura ambiente. Para la elaboración la mezcla de reacción se concentró y se repartió entre agua y acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se concentró para dar 2-carbometoxi-3-[N-(4-cloro-3-metilisoxazol-5-il)-N-MOM]tiofeno-sulfonamida en forma de un aceite verdoso (3,5 g, 90%).
G. 2-Carboxi-3-[N-(4-cloro-3-metilisoxazol-5-il)-N-MOM]tiofenosulfonamida
Se agitó durante 3 horas a la temperatura ambiente 2-carbometoxi-3-[N-(4-cloro-3-metilisoxazol-5-il)-N-MOM]-tiofenosulfonamida (3,0 g, 7,8 mmoles) en una mezcla de THF (30 ml) y NaOH 1N (30 ml). La mezcla de reacción se diluyó con agua (20 ml) y se extrajo con acetato de etilo (5 ml). La solución acuosa se aciduló con HCl 1N después se extrajo con acetato de etilo. La materia orgánica se lavó con agua, salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró para dar 2-carboxi-3-[N-(4-cloro-3-metilisoxazol-5-il)-N-MOM]tiofenosulfonamida en forma de un aceite (rendimiento cuantitativo).
H. Cloruro de 3-[N-MOMO-N-(4-cloro-3-metilisoxazol-5-il)aminosulfonil]tiofeno-2-carbonilo
A una solución de 2-carboxi-3-[N-(4-cloro-3-metilisoxazol-5-il)-N-MOM]tiofenosulfonamida (1,5 g, 4,1 mmoles) en una mezcla de THF (10 ml) y cloroformo (5 ml) se añadió piridina (5 ml) a 0ºC seguido de la adición de 2M/L solución de cloruro de oxalilo (4,5 ml, 9,0 mmoles). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a la temperatura ambiente. Para la elaboración la mezcla de reacción se concentró a presión reducida para separar toda la materia volátil. Se obtuvo el producto deseado en forma de un aceite pegajoso que solidifica al dejarlo reposar.
I. Acido 3-[N-MOM-N-(4-cloro-e-metilisoxazol-5-il)-aminosulfonil]tiofeno-2-carboxílico, 3-cianometil-2,4,6-trimetilanilida
A una solución de 3-cianometil-2,4,6-trimetilanilina (1,2 g, 6,9 mmoles) en THF (20 ml) en nitrógeno se añadió una solución de cloruro de 3-[N-MOMO-N-(4-cloro-3-metil-isoxazol-5-il)aminosulfonil]tiofeno-2-carbonilo (1,3 mg, 3,3 mmoles) en THF (10 ml) a 0ºC. La mezcla de reacción se dejó calentar a la temperatura ambiente y se agitó durante 2 horas. Para la elaboración la mezcla de reacción se vertió en HCl 0,05N y el producto se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos se lavaron con HCl 0,05N, agua, NaHCO_{3} semisaturado, agua, salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se concentró. La purificación por medio de cromatografía en columna (sílice, acetato de etilo/hexano al 40%) dio ácido 3-[N-MOM-N-(4-cloro-3-metilisoxazol-5-il)aminosulfonil]tiofeno-2-carboxílico, 3-cianometil-2,4,6-trimetilanilida en forma de un aceite claro (1,3 g, 76%).
J. N-(3-Cianometil-2,4,6-trimetilfenil)-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tiofenocarboxamida, N(sulfonamida)-sal de Na
Una solución de ácido 3-[N-MOM-N-(4-cloro-3-metilisoxazol-5-il)aminosulfonil]tiofeno-2-carboxílico, 3-cianometil-2,4,6-trimetilanilida en forma de un aceite claro (500 mg, 0,95 mmoles) en THF (4 ml) y HCl concentrado (2 ml) se agitó a 65-72ºC durante 3,5 horas. Para la elaboración la mezcla de reacción se enfrió y se vertió en agua (50 ml). El producto se recogió en acetato de etilo. El extracto se lavó con agua, salmuera, NaHCO_{3} saturado, salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se concentró en forma de aceite. El aceite se recristalizó en acetato de etilo/hexano para dar N-(3-cianometil-2,4,6-trimetilfenil)-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tiofenocarboxamida en forma de un sólido de color blanco (410 mg, 91%). El producto (300 mg, 0,63 mmoles) se disolvió en acetato de etilo (70 ml). La solución se lavó con NaHCO_{3} saturado, salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se concentró a presión reducida. Se añadió cloruro de metileno (10 ml) agitando seguido de la adición de éter. Se hizo precipitar la sal Na de N-(3-cianometil-2,4,6-trimetilfenil)-3-(4-cloro-3- metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tiofenocarboxamida en forma de un sólido de color blanco que se aisló mediante filtración (292 mg, 92%). RMN H^{1} (DMSO-d_{6}): 1,99 (s, 3H); 2,13 (s, 3h); 2,21 (s, 3H); 2,33 (s, 3H); 3,90 (s, 2H); 7,03 (s, 1H); 7,43 (d, 2H); 7,72 (d, 1H); 11,15 (s, 1H). IR (KBr); 3445, 2977, 2258, 1602, 1417, 1292, 1132, 1090 cm^{-1}. Análisis elemental encontrado: C, 44,68; H, 3,92; N, 10,18. C_{20}H_{18}ClN_{4}NaO_{4}S_{2} \cdot 2,0 H_{2}O requiere: C, 44,73; H, 4,13; N, 10,43.
Ejemplo de referencia 15
2-(3-Acetoximetil-2,4,6-trimetilfenil)-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tiofenocarboxamida, N(sulfonami-da)-sal de Na A. Acido 3-nitro-2,4,6-trimetilbenzoico
A una suspensión de ácido 2,4,6-trimetilbenzoico (4,6 g, 28 mmoles) en HNO_{3} al 70% (85 ml) se añadió gota agota a la temperatura ambiente H_{2}SO_{4} concentrado (5 ml). La mezcla de reacción de color pardo se agitó durante 1 hora, se vertió en agua con hielo (500 ml). El producto se extrajo en acetato de etilo, el extracto se lavó con agua, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró para dar ácido 3-nitro-2,4,6-trimetilbenzoico en forma de un sólido de color amarillo (6,7 g, 94%).
B. Alcohol 3-nitro-2,4,6-trimetilbencilo
A una solución de ácido 3-nitro-2,4,6-trimetilbenzoico (6,7 g, 31,9 mmoles) en THF anhidro (100 ml) se añadió gota a gota a 0ºC una solución 1M/litro de BH3\cdotTHF en THF (63,8 ml, 63,8 mmoles). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a la temperatura ambiente, se enfrió a 0ºC y se sofocó con agua. El producto se extrajo en acetato de etilo, el extracto se lavó con agua, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró para dar 1-acetoximetil-3-nitro-2,4,6-trimetilbenceno en forma de un aceite de color amarillo claro (6,3 g, 89%).
C. 3-Acetoximetil-2,4,6-trimetilanilina
A una solución de 1-acetoximetil-3-nitro-2,4,6-trimetilbenceno (6,0 g, 25,2 mmoles) en metanol (100 ml) se añadieron sucesivamente cloruro de amonio (2,7 g en 25 ml de agua), polvo de cinc (11 g). La reacción exotérmica se agitó vigorosamente hasta que regresó a la temperatura ambiente (2 horas). Para la elaboración la mezcla bruta se separó por filtración y la torta se lavó con metanol. Las soluciones metanólicas se concentraron hasta un volumen de 20 ml, se añadió HCl 1N (300 ml). La materia insoluble se separó por filtración, la solución se alcalinizó con NaHCO_{3} sólido. El producto precipitado semicristalino se recogió en acetato de etilo. El extracto se concentró y el producto residual se purificó mediante cromatografía en columna (acetato de etilo/hexano al 25%) para dar 3-acetoximetil-2,4,6-trimetilanilina en forma de un aceite de color rosa (3,8 g, 75%).
D. Acido 3-[N-MOM-N-(4-Cloro-3-metilisoxazol-5-il)-aminosulfonil]tiofeno-2-carboxílico, 3-acetoxi-metil-2,4,6-trimetilanilida
Este compuesto fue sintetizado de la misma manera que el ácido 3-[N-MOMO-N-(4-cloro-3-metilisoxazol-5-il)aminosulfonil]tiofeno-2-carboxílico, 3-cianometil-2,4,6-trimetilanilida.
E. 2-(3-Acetoximetil-2,4,6-trimetilfenil)-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tiofenocarboxamida, N(sulfonamida)-sal de Na
A una solución de ácido 3-[N-MOM-N-(4-cloro-5-metilisoxazol-3-il)aminosulfonil]tiofeno-2-carboxílico,
3-acetoximetilanilida (400 mg, 0,90 mmoles) en ácido acético (4 ml) a 50ºC se añadieron agua (2 ml) y H_{2}SO_{4} 2N (2 gotas) después de eso la mezcla de reacción se agitó durante 3,0 horas a 75-80ºC. Para la elaboración la mezcla de reacción se enfrió y se vertió en agua (20 mL). El producto se recogió en acetato de etilo. El extracto se lavó con agua, salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se concentró hasta un aceite. La cromatografía en columna (metanol/cloruro de metileno al 10%) seguida de trituración del material oleoso obtenido con acetato de etilo/hexano proporcionó 2-(3-acetoximetil-2,4,6-trimetilfenil)-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tiofenocarboxamida en forma de un polvo de color blanco (180 mg, 49%). El material anterior (240 mg, 0,47 mmoles) se disolvió en acetato de etilo (70 ml). La solución se lavó con NaHCO_{3} saturado, salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se concentró a presión reducida. Se añadió cloruro de metileno (10 ml) agitando seguido de la adición de éter. La sal de Na de 2-(3-acetoximetil-2,4,6-trimetilfenil)-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tiofeno-carboxamida precipitó en forma de un sólido de color blanco que fue aislado mediante filtración (209 mg, 83%). RMN H^{1} (DMSO-d_{6}): 1,98 (s, 3H); 2,02 (s, 3H); 2,13 (s, 3H); 2,17 (s, 3H); 2,31 (s, 3H); 5,11 (s, 2H); 6,99 (s, 1H); 7,41 (d, 2H); 7,71 (d, 1H); 11,09 (s, 1H). IR (KBr); 3447, 2963, 1730, 1602, 1497, 1417, 1261, 1133, 1089 cm^{-1}. Análisis elemental encontrado: C, 44,94; H, 4,20; N, 7,12. C_{21}H_{21}ClN_{3}NaO_{6}S_{2} \cdot 1,5 H_{2}O requiere: C, 44,96; H, 4,31; N, 7,44.
Ejemplo de referencia 16
2-(3-Hidroximetil-2,4,6-trimetilfenil)-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tiofenocarboxamida
Una solución de 2-(3-acetoximetil-2,4,6-trimetilfenil)-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tiofenocarboxamida (Ejemplo de Referencia 15) (250 mg, 0,49 mmoles) en MeOH anhidro (5 ml) se enfrió a 0ºC y se cargó con una solución al 25% de metóxido de sodio en MeOH (1,08 g, 5,0 mmoles) Se agitó durante 30 minutos a 0ºC después se separó el metanol. Se añadió HCl 1N (10 ml). El compuesto se recogió en acetato de etilo. El extracto se disolvió en acetato de etilo después el producto se hizo precipitar mediante la adición de hexano. Esto dio 2-(3-hidroximetil-2,4,6-trimetilfenil)-3-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolilsulfamoil)-2-tiofenocarboxamida en forma de un polvo de color blanco (205 mg, 90%). RMN H^{1} (DMSO-d_{6}): 1,99 (s, 3H); 2,11 (s, 3H); 2,22 (s, 3H); 2,31 (s, 3H); 4,47 (s, 2H); 6,91 (s, 1H); 7,41 (d, 2H); 7,73 (d, 1H); 10,83 (s, 1H). IR (KBr); 3424, 2963, 1637, 1527, 1492, 1411, 1267, 1186, 1151, 1109 cm^{-1}. Análisis elemental encontrado: C, 48,50; H, 4,10; N, 8,63. C_{19}H_{20}ClN_{3}O_{5}S_{2} requiere: C, 48,56; H, 4,29; N, 8,94.
Ejemplo de referencia 17
Acido 3-(4-cloro-3-metilisoxazolil-3-aminosulfonil)-tiofeno-2-carboxílico, N-(3-cianometil-2,4,6-trimetil)-anilida, sal de Na A. 3-Cianometil-2,4,6-trimetilanilina
Se sintetizó 3-cianometil-2,4,6-trimetilanilina y se purificó como en el Ejemplo 14.
B. 3-Amino-4-cloro-5-metilisoxazol
A una solución de 3-amino-5-metilisoxazol (9,8 g, 100 mmoles) en cloruro de metileno (200 ml) se añadió N-clorosuccinimida (14,6 g, 110 mmoles) a 0ºC a lo largo de un período de 20 minutos. La mezcla de reacción se agitó durante la noche. Para la elaboración la mezcla de reacción se concentró y se repartió entre NaOH 1N (150 ml/acetato de etilo (400 ml). La capa orgánica se lavó con NaOH 1N, agua, salmuera, se secó sobre MgSO_{4} después se concentró hasta un sólido de color pardo. Para la purificación el producto se hizo precipitar en cloroformo/hexano para dar 3-amino-4-cloro-5-metilisoxazol en forma de un sólido de color parduzco (9,5 g, 71%).
C. 2-Carbometoxi-3-[N-(4-cloro-5-metilisoxazol-3-il)]-tiofenosulfonamida
A una solución de 3-amino-4-cloro-5-metilisoxazol (6,1 g, 45,4 mmoles) en piridina anhidra (7 ml) en nitrógeno se añadió cloruro de 2-carbometoxi-3-tiofenosulfonilo (1,42 g, 59,0 mmoles) a 0ºC. Se dejó que la mezcla de reacción se templara a la temperatura ambiente y se agitó durante 2 horas. Para la elaboración la mezcla de reacción se vertió en HCl 1N y el producto se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con HCl 1N, agua después el compuesto se extrajo con NaHCO_{3} semi-saturado, las soluciones alcalinas combinadas se enfriaron a 0ºC y se acidularon con HCl 4N. El producto se aisló mediante filtración, se lavó con agua, se secó para dar 2-carbometoxi-3-[N-(4-cloro-5-metilisoxazol-3-il)]tiofeno-sulfonamida en forma de un polvo de color blanco (5,3 g, 34%).
D. Cloruro de 3-[N-MOM-N-(4-cloro-5-metilisoxazol-3-il)aminosulfonil]tiofeno-2-carbonilo
Se sintetizó cloruro de 3-[N-MOM-N-(4-cloro-5-metilisoxazol-3-il)aminosulfonil]tiofeno-2-carbonilo de lamisma manera que el cloruro de 3-[N-MOM-N-(4-cloro-3-metilisoxazol-5-il)aminosulfonil]tiofeno-2-carbonilo (Ejemplo de Referencia 14).
E. Acido 3-[N-MOM-N-(4-cloro-5-metilisoxazol-3-il)-aminosulfonil]tiofeno-2-carboxílico, 3-cianometil-2,4,6-trimetilanilida
Se sintetizó Acido 3-[N-MOM-N-(4-cloro-5-metilisoxazol-3- il)aminosulfonil]tiofeno-2-carboxílico, 3-cianometil-2,4,6-trimetilanilida de la misma manera que el ácido 3-[N-MOM-N-(4-cloro-3-metilisoxazol-5-il)amino- sulfonil]tiofeno-2-carboxílico, 3-cianometil-2,4,6-trimetilanilida (ver Ejemplo de Referencia 14).
Ejemplo de referencia 18
Acido 3-(4-cloro-5-metilisoxazolil-3-aminosulfonil)-tiofeno-2-carboxílico, N-(3-acetoximetil-2,4,6-trimetil)-anilida
Se sintetizó ácido 3-(4-cloro-5-metilisoxazolil-3-aminosulfonil)tiofeno-2-carboxílico, N-(3-acetoximetil-2,4,6-trimetil)anilida en forma de un ácido libre de la misma manera que en el Ejemplo 15. RMN H^{1} (DMSO-d_{6}): 2,02 (s, 3H); 2,17 (m, 9H); 2,33 (s, 3H); 5,12 (s, 2H); 6,97 (s, 1H); 7,35 (d, 2H); 7,62 (d, 1H); 11,38 (s, 1H). IR (KBr); 3444, 2963, 1734, 1634, 1544, 1485, 1412, 1256, 1159, 1112 cm^{-1}. Análisis elemental encontrado: C, 45,03; H, 4,27; N, 7,16. C_{21}H_{22}ClN_{3}O_{6}S_{2} \cdot 1,5 H_{2}O requiere: C, 44,96; H, 4,31; N, 7,44.
Ejemplo de referencia 19
Acido 3-(4-cloro-5-metilisoxazolil-3-aminosulfonil)-tiofeno-2-carboxílico, N-(3-hidroximetil-2,4,6-trimetil)-anilida
Se sintetizó ácido 3-(4-cloro-5-metilisoxazolil-3-aminosulfonil)tiofeno-2-carboxílico, N-(3-hidroximetil-2,4,6-trimetil)anilida en forma de un ácido libre de la misma manera que en el Ejemplo 16. RMN H^{1} (DMSO-d_{6}): 2,15 (s, 3H); 2,24 (s, 3H); 2,33 (m, 6H); 4,48 (s, 2H); 6,92 (s, 1H); 7,43 (d, 2H); 7,80 (d, 1H). IR (KBr); 3443, 2963, 1641, 1522, 1490, 1184 cm^{-1}. Análisis elemental encontrado: C, 47,69; H, 4,24; N, 8,63. C_{19}H_{20}ClN_{3}O_{5}S_{2} \cdot 0,5 H_{2}O requiere: C, 47,65; H, 4,42; N, 8,77.
Ejemplo de referencia 20
Acido 3-(N-benzo-1,2,7-tiadiazol-4-il)aminosulfonil]-tiofeno-2-carboxílico, 3-cianometil-2,4,6-trimetil-anilida A. 3-Cianometil-2,4,6-trimetilanilina
Se sintetizó 3-cianometil-2,4,6-trimetilanilina y se purificó como en el Ejemplo de Referencia 14.
B. 4-Aminobenzo-1,2,7-tiadiazol
A una solución de 4-nitrobenzo-1,2,7-tiadiazol en una mezcla de dioxano (22 ml) y etanol (22 ml) a la temperatura ambiente se añadió SnCl_{2} sólido seguido de la adición de agua (1 ml). La mezcla de reacción se templó hasta 50ºC y se agitó durante 10 minutos, se enfrió a la temperatura ambiente, se concentró y se repartió entre acetato de etilo/NaOH 1N. La capa orgánica se lavó con NaOH 1N, agua, salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y carbón. La evaporación del disolvente dio 4-aminobenzo-1,2,7-tiadiazol en forma de un polvo de color amarillo (3,0 g, 88%).
C. 2-Carbometoxi-3-[N-(benzo-1,2,7-tiadiazol-4-il)-tiofenosulfonamida
Se sintetizó 2-carbometoxi-3-[N-(benzo-1,2,7-tiadiazol-4-il)tiofenosulfonamida de la misma manera que la 2-carbometoxi-3-[N-(4-cloro-5-metilisoxazol-3-il)-tiofenosulfonamida (Ejemplo de Referencia 17).
D. Cloruro de 3-[N-MOM-N-(benzo-1,2,7-tiadiazol-4-il)aminosulfonil]-2-tiofenocarbonilo
Se sintetizó cloruro de 3-[N-MOM-N-(benzo-1,2,7-tiadiazol-4-il)aminosulfonil]-2-tiofenocarbonilo de la misma manera que el cloruro de 3-[N-MOM-N-(4-cloro-5-metilisoxazol-3-il)aminosulfonil]tiofeno-2-carbonilo (Ejemplo de Referencia 14).
E. Acido 3-[N-(benzo-1,2,7-tiadiazol-4-il)-aminosulfonil]tiofeno-2-carboxílico, 3-cianometil-2,4,6-trimetilanilida
A una solución de 3-cianometil-2,4,6-trimetilanilina (400 mg, 2,27 mmoles) en THF (3 ml) a 0ºC se añadió una solución de cloruro de 3-[N-MOM-N-(benzo-1,2,7-tiadiazol-4-il)aminosulfonil]-2-tiofenocarbonilo (442 mg, 1,08 mmoles) en THF (5 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a la temperatura ambiente. La mezcla de reacción se vertió en HCl 1N y se extrajo con acetato de etilo. El extracto se lavó con HCl 1N, agua, salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se concentró. La cromatografía en columna (acetato de etilo/hexano al 25% sobre Gel de Sílice) seguida de recristalización del material obtenido del acetato de etilo/hexano dio ácido 3-[N-(benzo-1,2,7-tiadiazol-4-il)aminosulfonil]tiofeno-2-carboxílico, 3-cianometil-2,4,6-trimetilanilida en forma de un sólido de color blanco (19 mg, 3,5%). RMN H^{1} (DMSO-d_{6}): 2,21 (s, 3H); 2,26 (s, 3H); 2,34 (s, 3H); 3,93 (s, 2H); 7,06 (s,1H); 7,48 (d, 2H); 7,55 (m, 1H); 7,72 (m, 1H); 7,82 (d, 1H); 7,99 (m, 1H); 10,18 (s, 1H); 10,80 (s, 1H). IR (KBr); 3447, 3240, 2974, 1651, 1529, 1458, 1271, 1187, 1145 cm^{-1}.
Ejemplo de referencia 21
N^{2}-(3-Cianometil-2,4,6-trimetilfenil)-3-[(3,4-dimetil-5-isoxazolil)sulfamoil]-2-tiofenocarboxamida, sal de Na A. 5-[N-(2-Carbometoxitienil-3-sulfonil)amino]-3,4-dimetilisoxazol
A una solución de 5-amino-3,4-dimetilisoxazol (2,0 g, 17,83 mmoles) en diclorometano (60 ml) se añadierontrietilamina (5,5 ml, 39,24 mmoles) y 4-dimetilamino-piridina (0,2 g, 0,89 mmoles), después se enfrió a 0ºC. Se añadió cloruro de 2-(metoxicarbonil)tiofenosulfonilo (9,44 g, 39,22 mmoles). La mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante la noche, después se mezcló con agua (60 ml). El material orgánico se separó, y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 30 ml). Los extractos se combinaron y se lavaron con agua (60 ml) y cloruro de sodio saturado (60 ml), se secaron (MgSO_{4}), después se concentraron para dar 5-[N,N-bis(2-carbometoxitienil-3-sulfonil)amino]-3,4-dimetilisoxazol (10,02 g, >100%) en forma de un aceite de color pardo. Este producto bruto (10,02 g, 19,25 mmoles) se disolvió en metanol anhidro (64 ml). Se añadió hidróxido de potasio (1,1 g, 19,25 mmoles) a 0ºC, y se agitó a 0ºC durante 15 minutos. La mezcla se aciduló a pH 2 con ácido clorhídrico concentrado, se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 ml), se lavó con agua (250 ml) y cloruro de sodio saturado (250 ml), se secó (MgSO_{4}), después se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea (SiO_{2}, hexano/acetato de etilo /3:1) para dar 5-[N-(2-carbometoxitienil-3-sulfonil)amino]-3,4-dimetilisoxazol (5,43 g, 84%) en forma de un aceite de color amarillo.
B. 5-[N-Metoximetil-(2-carbometoxitienil-3-sulfonil)-amino]-3,4-dimetilisoxazol
A una solución de 5-[N-(2-carbometoxitienil-3-sulfonil)amino]-3,4-dimetilisoxazol (5,43 g, 17,16 mmoles) en diclorometano (50 ml) a 0ºC se añadió N,N-diisopropiletilamina (9,0 ml, 51,49 mmoles) seguido de éster bromometilmetílico (1,5 ml, 18,88 mmoles). La mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 15 minutos, después se sofocó con bicarbonato de sodio saturado. El material orgánico se separó, y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 25 ml). Los extractos se combinaron y se lavaron con agua (50 ml) y cloruro de sodio saturado (50 ml), se secaron (MgSO_{4}), después se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea (SiO_{2}, hexano:acetato de etilo/6:1, después 3:1) para dar 5-[N-metoximetil-(2-carbometoxitienil-3-sulfonil)amino]-3,4-dimetilisoxazol (5,71 g, 92%) en forma de un aceite de color amarillo.
C. 5-[N-Metoximetil-(2-carboxitienil-3-sulfonil)amino]-3,4-dimetilisoxazol
A una solución de 5-[N-metoximetil-(2-carbometoxitienil-3-sulfonil)amino]-3,4-dimetilisoxazol (5,71 g, 15,84 mmoles) en THF (30 ml) se añadió una solución de hidróxido de sodio (0,95 g, 23,77 mmoles) en agua (15 ml). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante la noche. La reacción se aciduló a pH 3 con ácido clorhídrico 2N mientras se enfriaba a 0ºC, después se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 ml). La capa orgánica se lavó con cloruro de sodio saturado (100 ml), se secó (MgSO_{4}), y se concentró para dar 5-[N-metoximetil-(2-carboxitienil-3-sulfonil)amino]-3,4-dimetilisoxazol (3,50 g, 64%) en forma de un sólido de color amarillo.
D. Cloruro de 3-[N-3,4-dimetilisoxazol-5-il)-N-metoxi-metilaminosulfonil]-2-tiofenocarbonilo
A una solución de 5-[N-metoximetil-(2-carboxitienil-3-sulfonil)amino]-3,4-dimetilisoxazol (3,49 g, 10,08 mmoles) en diclorometano (20 ml) a 0ºC se añadió piridina (3 gotas) seguido de cloruro de oxalilo (11 ml, 22,17 mmoles). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante la noche, después se concentró hasta sequedad para dar cloruro de 3-[N-(3,4-dimetilisoxazol-5-il)-N-metoximetilaminosulfonil]-2-tiofenocarbonilo (4,01 g, >100%) en forma de un aceite de color amarillo.
E. N^{2}-(3-Cianometil-2,4,6-trimetilfenil)-3-[N-(3,4-dimetilisoxazol-5-il)-N-metoximetilaminosulfonil]-2-tiofeno-carboxamida
A una solución de 3-[N-(3,4-dimetilisoxazol-5-il)-N-metoximetilaminosulfonil]-2-tiofenocarbonilo (0,49 g, 1,34 mmoles) en diclorometano (4 ml) se añadió 3-cianometil-2,4,6-trimetilanilina (0,24 g, 1,34 mmoles) a 0ºC. Se añadieron trietilamina (0,21 ml, 1,47 mmoles) y 4-dimetilaminopiridina (16 mg, 0,13 mmoles). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 2 horas, después se mezcló con agua (10 ml). El material orgánico se separó, y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 5 ml). Los extractos se combinaron y se lavaron con agua (10 ml) y cloruro de sodio saturado (10 ml), se secaron (MgSO_{4}),después se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea (SiO_{2}, hexano:acetato de etilo / 3:1, después 1:1) para dar N^{2}-(3-cianometil-2,4,6-trimetilfenil)-3-[N-(3,4-dimetil-isoxazol-5-il)-N-metoximetilaminosulfonil]-2-tiofeno-carboxamida (0,28 g, 41%) en forma de un aceite de color amarillo.
F. N^{2}-(3-Cianometil-2,4,6-trimetilfenil)-3-[(3,4-dimetil-5-isoxazolil)sulfamoil]-2-tiofeno-carboxamida, sal de Na
A una solución de N^{2}-(3-cianometil-2,4,6-trimetilfenil)-3-[N-(3,4-dimetilisoxazol-5-il)-N-metoximetilaminosulfonil]-2-tiofenocarboxamida (2,29 g, 4,56 mmoles) en THF (10 ml) se añadió ácido clorhídrico concentrado (5 ml). La reacción se calentó a 65ºC durante 2 horas, después se dejó enfriar a la temperatura ambiente. La mezcla se vertió en agua con hielo (100 ml), se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 ml), se lavó con cloruro de sodio saturado (150 ml), se secó (MgSO_{4}), después se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC en fase reversa (acetonitrilo en agua al 20-80%). El acetonitrilo se separó a vacío. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 ml). Los extractos se combinaron y se lavaron con cloruro de sodio saturado (200 ml), después con bicarbonato de sodio saturado (3 x 200 ml). La capa orgánica se lavó con cloruro de sodio saturado (200 ml), se secó (MgSO_{4}), después se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC en fase reversa (acetonitrilo en agua al 20-80%). El acetonitrilo se separó a vacío. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 ml). Los extractos se combinaron y se lavaron con cloruro de sodio saturado (200 ml), después con bicarbonato de sodio saturado (3 x 200 ml). La capa orgánica se lavó con cloruro de sodio saturado (200 ml), se secó (MgSO_{4}), después se concentró. El residuo se disolvió en agua (300 ml) y se liofilizó para dar N^{2}-(3-cianometil-2,4,6-trimetilfenil)-3-[(3,4-dimetil-5-isoxazolil)sulfamoil]-2-tiofenocarboxamida, sal de Na (0,45 g, 21%) en forma de un polvo de color blanco, p.f. 153-173ºC. RMN H^{1} (DMSO-d_{6}): 7,69 (d, J=4,76 Hz, 1H); 7,35 (d, J=5,16 Hz, 1H); 7,02 (s, 1H); 3,90 (s, 2H); 2,32 (s, 3H); 2,20 (s, 3H); 2,13 (s, 3H); 1,95 (s, 3H), 1,55 (s, 3H) ppm. IR (KBr); 3449, 2249, 1623, 1421, 1121 cm^{-1}.
Ejemplo de referencia 22
N^{2}-(3-Acetoximetil-2,4,6-trimetilfenil)-3-[(3,4-dimetil-5-isoxazolil)sulfamoil]-2-tiofenocarboxamida, y N^{2}-(3-Hidroximetil-2,4,6-trimetilfenil)-3-[(3,4-dimetil-5-isoxazolil)sulfamoil]-2-tiofenocarboxamida A. N^{2}-(3-Acetoximetil-2,4,6-trimetilfenil)-3-[N-(3,4-dimetilisoxazol-5-il)-N-metoximetilaminosulfonil]-2-tiofenocarboxamida
A una solución de cloruro de 3-[N-(3,4-dimetilisoxazol-5-il)-N-metoximetilaminosulfonil]-2-tiofenocarbonilo
(1,1 g, 2,97 mmoles) en diclorometano (9 ml) se añadió 3-acetoximetil-2,4,6-trimetilanilina (0,6 g, 2,97 mmoles) a 0ºC. Se añadieron trietilamina (0,46 ml, 3,26 mmoles) y 4-dimetilaminopiridina (36 mg, 0,30 mmoles). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante la noche, después se mezcló con agua (10 ml). La materia orgánica se separó, y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 10 ml). Los extractos se combinaron y se lavaron con agua (20 ml) y cloruro de sodio saturado (20 ml), se secaron (MgSO_{4}), después se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía (SiO_{2}, hexano:acetato de etilo / 2:1) para dar N^{2}-(3-acetoximetil-2,4,6-trimetilfenil)-3-[N-(3,4-dimetil-isoxazol-5-il)-N-metoximetilaminosulfonil]-2-tiofeno-carboxamida (0,79 g, 50%) en forma de un aceite de color amarillo.
B. N^{2}-(3-Acetoximetil-2,4,6-trimetilfenil)-3-[(3,4-dimetil-5-isoxazolil)sulfamoil]-2-tiofeno-carboxamida, y N^{2}-(3-Hidroximetil-2,4,6-trimetil-fenil)-3-[(3,4-dimetil-5-isoxazolil)sulfamoil]-2-tiofenocarboxamida
A una solución de N^{2}-(3-acetoximetil-2,4,6-trimetilfenil)-3-[N-(3,4-dimetilisoxazol-5-il)-N-metoxi-metilaminosulfonil]-2-tiofenocarboxamida (0,78 g, 1,46 mmoles) en ácido acético (7 ml) y agua (3 ml) se añadió ácido sulfúrico 2N (3 gotas). La reacción se calentó a 80ºC durante 4 horas, después se permitió que se enfriara a la temperatura ambiente. La mezcla se vertió en agua con hielo (50 mL), se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 ml), se lavó con cloruro de sodio saturado (50 ml), se secó (MgSO_{4}), después se concentró. El residuo se purificó mediante HPLC en fase reversa (acetonitrilo en agua al 20-80%) que dio N^{2}-(3-acetoximetil-2,4,6-trimetilfenil)-3-[(3,4-dimetil-5-isoxazolil)sulfamoil]-2-tiofenocarboxamida (0,2 g, 28%) en forma de un polvo de color blanquecino, p.f. 75-77ºC. RMN H^{1} (400 MHz, DMSO-d_{6}): 7,85 (d, J=5,12 Hz, 1H), 7,34 (d, J=5,12 Hz, 1H), 7,00 (s, 1H), 5,12 (s, 2H), 2,30 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 2,07 (s, 3H), 2,02 (s, 3H), 1,65 (s, 3H) ppm. IR (KBr); 3458, 1738, 1646, 1356, 1181 cm^{-1}. Y N^{2}-(3-hidroximetil-2,4,6-trimetilfenil)-3-[(3,4-dimetil-5-isoxazolil)sulfamoil]-2-tiofenocarboxamida (45 mg, 6,9%), razón 4:1 respectivamente, en forma de un polvo de color blanco, p.f. 100-115ºC. RMN H^{1} (400 MHz, DMSO-d_{6}): 7,84 (3, J=5,12 Hz, 1H), 7,34 (d, J=5,16 Hz, 1H), 6,92 (s, 1H), 4,48 (s, 2H), 2,33 (s, 3H), 2,23 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 2,07 (s, 3H), 1,65 (s, 3H) ppm. IR (KBr); 3439, 1651, 1341, 1181 cm^{-1}.
Ejemplo 23 Formulaciones de sales de sodio de sulfonamida A. Formulación de sales de sodio de sulfonamida para la administración intravenosa
Se prepara tampón fosfato añadiendo 3.200 ml de agua estéril para inyectables, USP, a un cilindro graduado de 4 litros. Se añade fosfato de sodio dibásico heptahidratado, USP (21,44 g) al agua estéril y la mezcla se agita durante 5 minutos o hasta que el sólido se haya disuelto. Se añade fosfato de sodio monobásico, USP (11,04 g) y la mezcla se agitó hasta que los sólidos se hubieron disuelto. La solución se diluyó a 4,0 litros y se agitó. Se añaden 3.000 g del tampón fosfato de sodio a un vaso de precipitados de ocho litros. Se añade dextrosa, USP (200,0 g), y la mezcla se calienta a 30-35ºC en un baño de agua y se agita hasta formar una solución completa. Se añade una sal de sodio de sulfonamida (100,0 g) con un mezclado eficiente. Esta mezcla se agita durante un mínimo de diez minutos o hasta que se forma una solución. La solución se separó del baño de agua una vez que la sal de sodio se hubo disuelto. La solución se diluyó a 4.000 g con tampón fosfato de sodio y se agitó durante cinco minutos. Esta solución se filtra para esterilizar utilizando un filtro Durapore Milipak 200 con un tamaño predeterminado de 0,22 micras estéril. La solución filtrada se carga en viales estériles y se liofiliza en condiciones normalizadas. Los viales se taponan. El producto liofilizado fue reconstituido después con 9,4 ml o 19,4 ml de agua para inyectables, para dar una concentración final de 25 mg/ml o 12,5 mg/ml, respectivamente.
B. Formulación de sales de sodio de sulfonamida para la administración oral
Estas formulaciones pueden ser preparadas mediante métodos conocidos por los expertos en la técnica (ver, v.g., Ansel Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms (4th Edition) 1985 (Lea & Febiger)). En general, las tabletas pueden ser preparadas mediante granulación en mojado o en seco de los ingredientes, seguido de compresión. Alternativamente, los ingredientes combinados pueden ser formados en tabletas mediante compresión directa. En la preparación de cápsulas, la sal de sodio de sulfonamida combinada, el excipiente (diluyente), el aglutinante, el agente disgregante y el lubricante se cargan directamente en la envuelta de la cápsula. La cantidad óptima de los ingredientes activos e inertes en estas formulaciones puede ser determinada empíricamente mediante métodos conocidos por los expertos en la técnica. En general, la cantidad de ingrediente eficaz (es decir, sal de sodio de sulfonamida) será suficiente para proporcionar una dosis terapéuticamente eficaz del ingrediente activo. La dosis terapéuticamente eficaz puede ser determinada empíricamente sometiendo a ensayo los compuestos en sistemas in vitro e in vivo conocidos (ver, v.g., Patente de los Estados Unidos Núm. 5.114.918 de Ishikawa y col.; EP A1 0 436 189 de BANYU PHARMACEUTICAL CO., LTD (Octubre 7, 1991); Borges y col. (1989) Eur. J. Pharm. 165:223-230; Filep y col. (1.991) Biochem. Biophys. Res. Commun. 177:171-176) y extrapolada después para sus dosificaciones en humanos.
Ejemplo 24 Análisis para identificar compuestos que manifiestan actividad antagónica y/o agonística de endotelina
Los compuestos que son antagonistas de endotelina potenciales son identificados sometiendo a ensayo su capacidad para competir con ET-1 marcada con I^{125} por la unión a los receptores ET_{A} o receptores ET_{B} humanos presentes en membranas celulares aisladas. La eficacia del compuesto de ensayo como antagonista o agonista de la respuesta de la endotelina del tejido biológico también puede ser evaluada midiendo el efecto sobre la contracción inducida por endotelina de anillo aórticos torácicos de rata aislados. La capacidad de los compuestos para actuar como antagonistas o agonistas para los receptores ET_{B} puede ser evaluada sometiendo a ensayo la capacidad de los compuestos para inhibir la liberación de prostaciclina inducida por endotelina 1 a partir de células endoteliales aórticas bovinas cultivadas.
A. Inhibición de la unión de endotelina - Ensayo de Unión # 1:Inhibición de la unión a los receptores ET_{A}
Las células TE 671 (Núm. de Acceso ATCC HTB 139) expresan los receptores ET_{A}. Estas células se hicieron crecer hasta la confluencia en matraces T-175. Las células de múltiples matraces fueron recogidas raspando, reunidas y centrifugadas durante 10 minutos a 190 x g. Las células fueron resuspendidas en solución salina tamponada con fosfato (PBS) conteniendo EDTA 10 mM utilizando un homogeneizador Tenbroeck. La suspensión fue centrifugada a 4ºC a 57.800 x g durante 15 minutos, el sedimento fue resuspendido en 5 ml de tampón A (tampón HEPES 5 mM, pH 7,4 conteniendo aprotinina (100 KIU/ml)) y después congelada y descongelada una vez. Se añadieron 5 ml de Tampón B (Tampón HEPES 5 mM, pH 7,4 conteniendo MnCl_{2} 10 mM y desoxirribonucleasa de Tipo 1 al 0,001%), la suspensión se mezcló mediante inversión y después se incubó a 37ºC durante 30 minutos. La mezcla se centrífugo a 57.800 x g como se ha descrito antes, el sedimento se lavó dos veces con tampón A y después se resuspendió en tampón C (tampón HEPES 30 mM, pH 7,4 conteniendo aprotinina (100 KIU/ml) para dar una concentración de 2 mg/ml y se almacenó a -70ºC hasta su uso.
La suspensión de membrana se diluyó con tampón de unión (tampón HEPES 30 mM, pH 7,4 conteniendo NaCl 150 mM, MgCl_{2} 5 mM, Bacitracina al 0,5%) a una concentración de 8 \mug/50 \mul. Se añadió endotelina-I^{125} (3.000 cpm, 50 ml) a 50 \mul de: (A) endotelina-1 (para la unión no específica) para dar una concentración final de 80 nM); (B) tampón de unión (para la unión total); o (C) un compuesto de ensayo (concentración final 1 nM a 100 \muM). La suspensión de membrana (50 \mul), conteniendo hasta 8 \mug de proteína de membrana, fue añadida a cada uno de (A),(B), o (C). Las mezclas se sacudieron, y se incubaron a 4ºC durante 16-18 horas, y después se centrifugaron a 4ºC durante 25 minutos a 2.500 x g. Alternativamente, se realizó la incubación a 24ºC. Cuando se incubaba a 24ºC, las concentraciones CI_{50} son 2-10 veces mayores que cuando la incubación se realiza a 4ºC. Esto debe ser tenido en cuenta cuando se comparen las concentraciones entre los compuestos proporcionados aquí.
El sobrenadante, conteniendo la radiactividad no unida, fue decantado y el sedimento sometido a recuento en un contador gamma de múltiples pocillos Génesis. El grado de inhibición de la unión (D) fue calculado según la siguiente ecuación:
% \ D = 100 - \frac{(C) - (A)}{(B) - (A)}\ X \ 100
Cada compuesto de ensayo se realizó generalmente por triplicado.
B. Inhibición de la Unión de endotelina - Ensayo de Unión # 2: Inhibición de la unión a los receptoresET_{B}
Se transfectaron células COS7 con ADN que codificaba el receptor ET_{B}. Las células resultantes, que expresan el receptor ET_{B} humano, se hicieron crecer hasta la confluencia en matraces T-150. La membrana fue preparada como se ha descrito antes. El análisis de unión se realizó como se ha descrito antes utilizando la preparación de membrana diluida con tampón de unión a una concentración de 1 \mug/50 \mul.
En resumen, las células COS7, descritas antes, que habían sido transfectadas con ADN que codificaba el receptor ET_{B} y expresaban el receptor ET_{B} humano sobre sus superficies se hicieron crecer hasta la confluencia en matraces T-175. Se recogieron células de múltiples matraces raspando, se reunieron y se centrifugaron durante 10 minutos a 190 x g. Las células fueron resuspendidas en solución salina tamponada con fosfato (PBS) conteniendo EDTA 10 mM utilizando un homogenizador Tenbroeck. La suspensión se centrifugó a 4ºC, 57.800 x g durante 15 minutos, el sedimento se resuspendió en 5 ml de tampón A (tampón HEPES 5 mM, pH 7,4 conteniendo aprotinina (100 KIU/ml)) y después se congeló y se descongeló una vez. Se añadieron 5 ml de Tampón B (Tampón HEPES 5 mM, pH 7,4 conteniendo MnCl_{2} 10 mM y desoxirribonucleasa de Tipo 1 al 0,001%), la suspensión se mezcló por inversión y después se incubó a 37ºC durante 30 minutos. La mezcla se centrífugo a 57.800 x g como se ha descrito antes, el sedimento se lavó dos veces con tampón A y después se resuspendió en tampón C (tampón HEPES 30 mM, pH 7,4 conteniendo aprotinina (100 KIU/ml) para dar una concentración final de proteína de 2 mg/ml.
El análisis de unión se realizó como se ha descrito antes utilizando la preparación de membrana diluida para dar 1 \mug/50 \mul de tampón de unión.
C. Ensayo para la actividad contra la contracción de anillos aórticos de rata aislados inducida por endotelina
La eficacia del compuesto de ensayo como antagonista o agonista de la respuesta del tejido biológico de endotelina también es evaluada midiendo el efecto sobre la contracción inducida por endotelina de anillos aórticos torácicos de rata aislados (ver, v.g., Borges y col. (1989) Eur. J. Pharmacol. 165:223-230) o midiendo la capacidad para contraer el tejido cuando se añade solo.
Los compuestos a someter a ensayo se preparan como soluciones de partida 100 \muM. Si es necesario realizar la disolución, los compuestos se disuelven primero en una cantidad mínima de DMSO y se diluyen con NaCl 150 mM. Debido a que el DMSO puede causar la relajación del anillo aórtico, se sometieron a ensayo soluciones de control conteniendo concentraciones variables de DMSO.
La porción torácica de la aorta de rata adulta es escindida, el endotelio es raspado mediante un suave frotamiento y después cortado en segmentos anulares de 3 mm. Los segmentos se suspenden bajo una carga previa de 2 g en un baño de órganos de 10 ml lleno de solución de Krebs-Henseleit saturada con una mezcla gaseosa de O_{2} al 95% y CO_{2} al 5% (NaCl 118 mM, KCl 4,7 mM, MgSO_{4} 1,2 mM, KH_{2}PO_{4} 1,2 mM, NaHCO_{3} 25 mM, CaCl_{2} 2,5 mM, D-glucosa 10 mM).
Existe una correlación entre la actividad como antagonista de la contracción de anillo aórtico torácico inducida por endotelina y la actividad como inhibidor de la unión de endotelina a receptores de endotelina. La pA_{2} es una función lineal del log de la CI_{50}.
D. Análisis para identificar los compuestos que tienen actividad agonística y/o antagónica de los receptores ET_{B} 1. Estimulación de la liberación de Prostaciclina
Puesto que la endotelina 1 estimula la liberación de prostaciclina de células endoteliales aórticas bovinas cultivadas, los compuestos que tienen actividad agonística o antagónica son identificados por su capacidad para inhibir la liberación de prostaciclina inducida por endotelina 1 a partir de tales células endoteliales midiendo la 6-ceto-PGF_{1\alpha} sustancialmente como describen (Filep y col. (1991) Biochem. Biophys. Res. Commun. 177 171-176. Las células aórticas bovinas se obtienen a partir de aorta bovina tratada con colagenasa, se siembran en placas de cultivo, se hacen crecer en medio 199 suplementado con suero de ternera fetal inactivado con calor al 15%, y L-glutamina (2 mM), penicilina, estreptomicina y fungizona, y se subcultivan al menos cuatro veces. Después las células se siembran en placas de seis pocillos en el mismo medio. Ocho horas antes del análisis, una vez que las células han alcanzado la confluencia, se remplaza el medio. Después las células son incubadas con a) medio solo, b) medio conteniendo endotelina 1 (10 nM), c) compuesto de ensayo solo, y d) compuesto de ensayo + endotelina 1 (10 nM).
Tras una incubación de 15 minutos, el medio se separa de cada pocillo y se miden las concentraciones de 6-ceto-PGF_{1\alpha} mediante inmunoanálisis directo. La producción de prostaciclina se calcula como la diferencia entre la cantidad de 6-ceto-PGF_{1\alpha} liberada por las células sensibilizadas con la endotelina 1 menos la cantidad liberada por células no sensibilizadas tratadas de un modo idéntico. Los compuestos que estimulan la liberación de 6-ceto-PGF_{1\alpha} poseen actividad agonística y los que inhiben la liberación de 6-ceto-PGF_{1\alpha} por endotelina 1 poseen una actividad antagónica.
2. Inhibición de la contracción inducida por sarafotoxina 6c
La sarafotoxina 6c es un antagonista de ET_{B} específico que contrae tiras de estómago fúndico de rata. La eficacia de los compuestos de ensayo para inhibir esta contracción inducida de tiras de estómago fúndico de rata por sarafotoxina 6c se utiliza como una medida de la actividad antagonista de ET_{B}. Se suspenden dos tiras de estómago fúndico de rata aisladas bajo una carga de 1 g en un baño de órganos de 10 ml lleno de solución de Krebs-Henseleit conteniendo ciclo(D-Asp-Pro-D-Val-Leu-D-Trp) 10 \muM (BQ-123; ver, Patente de los Estados Unidos Núm. 5.114.918 de Ishikawa y col.), indometacina 5 \muM, y saturado con una mezcla gaseosa de O_{2} al 95%/CO_{2} al 5%. Los cambios de tensión se miden isométricamente y se registran utilizando un Grass Polygraph acoplado a un transductor de fuerza. Se añade sarafotoxina 6c cumulativamente a una tira mientras la segunda tira se preincuba durante 15 minutos con un compuesto de ensayo antes de la adición de dosis cumulativas de sarafotoxina 6c. Se examinan los efectos de los compuestos de ensayo en la curva concentración-respuesta para la sarafotoxina 6c.
E. Modelo de rata hipertensa por sal acetato de desoxicorticosterona (DOCA) para evaluar la actividad in vivo de los compuestos seleccionados
Los compuestos seleccionados descritos aquí han sido sometidos a ensayo en cuanto a la actividad en el modelo de rata hipertensa por sal acetato de desoxicorticosterona (DOCA). Para realizar estos ensayos, se prepararon implantes de elastómero MDX4-4210 silástico conteniendo 47 mg (DOCA) según el método de Ornmsbee y col. (1973) J. Pharm. Sci. 62:255-257). En resumen, se incorpora DOCA a implantes de caucho de silicona para la liberación sostenida. Para preparar los implantes se incorpora DOCA al caucho de silicona no polimerizado, se añade catalizador y la mezcla se moldea en forma semicilíndrica.
Se sometieron a nefrectomía unilateral ratas Sprague Dawley (7-8 semanas de edad) bajo anestesia con cetamina y se colocó el implante de DOCA en el abdomen dorsal lateral izquierdo del animal. Se dejó que las ratas se recuperaran durante 3 semanas. Durante la recuperación se les permitió libre acceso a pienso para ratas normal y solución de bebida con NaCl al 0,9% en lugar de agua potable. Las ratas desarrollaron hipertensión en 3 semanas.
Todos los animales fueron utilizados en los ensayos entre los días 21 y 30 después de la operación. La presión sanguínea arterial media en estos animales oscilaba entre 165-200 mm Hg.
El día del experimento, se insertaron los catéteres bajo anestesia con brevital en la arteria femoral derecha para la medida de la presión sanguínea, y en la vena femoral derecha para la administración de un compuesto seleccionado. Los animales fueron confinados y se dejó que se recuperaran durante un mínimo de 60 minutos o hasta que se registró una presión sanguínea arterial media estacionaria. En ese momento, se administró el compuesto seleccionado o el vehículo de control intravenosamente, en forma de una infusión de 60 minutos, u oralmente mediante gavage oral. Se registró la presión sanguínea continuamente durante 10 horas más.
F. Efecto de la administración intravenosa sobre respuestas presoras inducidas por ET-1 en ratas bloqueadas autónomamente, conscientes; un modelo para evaluar la actividad in vivo de los compuestos seleccionados
Se anestesiaron ratas Sprague Dawley (250-450 g) (Brevital 50 mg/kg, IP) y se colocaron cánulas en la arteria femoral para medir la presión arterial media (MAP) y en la vena femoral para la administración intravenosa del fármaco. Los animales se confinaron y se dejó que recobraran la consciencia. Treinta minutos más tarde se administró el bloqueo autonómico (metilnitrato de atropina, 3 mg/kg, IV, seguido de propranolol, 2 mg/kg, IV). Una hora más tarde los animales recibieron una inyección de bolo de vehículo (0,5 ml) seguida treinta minutos más tarde de administración de bolo intravenoso de ET-1 (Control, 1 \mug/kg). Tras la recuperación de esta sensibilización, se administraron los compuestos de ensayo mediante administración de bolo intravenoso (0,5 ml) y después se volvió a sensibilizar con ET-1 treinta minutos más tarde. Los resultados se expresan como el porcentaje de inhibición de la respuesta presora inducida por ET-1 tras la administración del compuesto de ensayo en comparación con la respuesta presora inducida por el control de la sensibilización de ET-1. En algunos casos se administraba una tercera sensibilización con ET-1 noventa minutos después de la administración del compuesto de ensayo.
G. Resultados 1.In vitro
Se ha medido la CI_{50} para cada uno de los compuestos de ensayo de los Ejemplos anteriores para los receptores ET_{A} y receptores ET_{B}. Casi todos los compuestos tienen una CI_{50} de menos de 10 \muM para cualquiera o ambos receptores ET_{A} y ET_{B}. Muchos de los compuestos tienen una CI_{50} menor de aproximadamente 10 \muM, otros tienen una CI_{50} menor de aproximadamente 1 \muM y algunos de los compuestos tienen una CI_{50} menor de aproximadamente 0,1 \muM. Numerosos compuestos tienen una CI_{50} para los receptores ET_{A} que es sustancialmente menor (10 a 100 veces o más) que para los receptores ET_{B}, y, de ese modo, son selectivos para los receptores ET_{A}. Otros compuestos son selectivos para ET_{B}.
2.In vivo
Los compuestos seleccionados, tales como N-(4-cloro-3-metil-5-isoxazolil)-2-(3-hidroxi-2,4,6-trimetilfenilaminocarbonil)tiofeno-3-sulfonamida, han sido sometidos a ensayo en modelo de rata hipertensa, y eran eficaces al disminuir la presión sanguínea.
Puesto que las modificaciones serán evidentes para los expertos en la técnica, se pretende que esta invención está limitada solo por el alcance de las reivindicaciones adjuntas.

Claims (25)

1. Una sulfonamida o una sal, ácido o éster de la misma farmacéuticamente aceptable de fórmula (V):
27
28
donde:
Ar^{1}tiene la fórmula:
29
en la que R^{A} y R^{B} son (i), (ii) o (iii) como sigue:
(i) R^{A} y R^{B} se seleccionan cada uno independientemente entre H, NH_{2}, NO_{2}, haluro, pseudohaluro, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, arilalquilo, heteroarilo, alcoxi, alquilamino, alquiltio, alquiloxi, haloalquilo, alquilsulfinilo, alquilsulfonilo, ariloxi, arilamino, ariltio, arilsulfinilo, arilsulfonilo, haloalquilo, haloarilo, alcoxicarbonilo, alquilcarbonilo, aminocarbonilo, arilcarbonilo, formilo, amido sustituido o no sustituido, ureido sustituido o no sustituido, donde las porciones alquílicas, alquenílicas y alquinílicas contienen de 1 a aproximadamente 14 átomos de carbono y son cadenas lineales o ramificadas o cíclicas, y las porciones arílicas contienen de aproximadamente 4 a aproximadamente 16 carbonos, excepto que R^{B} no es haluro o pseudohaluro; o
(ii) R^{A} y R^{B} forman juntos -(CH_{2})_{n}, donde n es de 3 a 6; o,
(iii) R^{A} y R^{B} forman juntos 1,3-butanodiilo;
W es -NH-; y
R^{20} se selecciona del grupo formado por arilo, heteroarilo, heterociclilo, OH, CN, C(O)R^{16}, CO_{2}R^{16}, SH, S(O)_{n}R^{16} donde n es 0-2, un aminoácido D, L o racémico, una ribosa o hexosa, un O-glicósido, un cloruro de sulfonilo, -(CH_{2})_{x}
OH, NHOH, NR^{12}R^{16}, NO_{2}, N_{3}, OR^{16}, R^{12}NCOR^{16} y CONR^{12}R^{16};
R^{16} es hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, alquilarilo, heterociclo, aralquilo, aralcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo o cicloalquinilo;
R^{12} se selecciona entre hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, alquilarilo, heterociclo, aralquilo, aralcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo, cicloalquinilo, C(O)R^{17} y S(O)_{n}R^{17} donde n es 0-2;
R^{17} es hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, alquilarilo, heterociclo, aralquilo, aralcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo o cicloalquinilo; y
cada uno de R^{12}, R^{15} y R^{16} puede estar adicionalmente sustituido con cualquiera de los grupos mostrados para Z;
Z es hidrógeno, haluro, pseudohaluro, alquilo, alcoxi, alquenilo, alquinilo, arilo, aminoácidos, aminas primarias y secundarias, O-glicósidos, hexosas, ribosas, alquilarilo, alquilheteroarilo, heterociclo, aralquilo, aralcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo, cicloalquinilo, OH, CN, C(O)R^{16}, OC(O)R^{16}, CO_{2}R^{16}, OCO_{2}R^{16}, SH, S(O)_{n}R^{16} donde n es 0-2, NHOH, NR^{12}R^{16}, NO_{2}, N_{3}, OR^{16}, R^{12}NCOR^{16} y CONR^{12}R^{16}; R^{16} es hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, alquilarilo, heterociclo, aralquilo, aralcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo, cicloalquinilo, cloruro, NHR^{50}, alquilarilo, alquilheteroarilo, o -(CH_{2})_{x}OH; R^{50} es un sustituyente tal como hidrógeno, alquilo inferior, o alcoxi inferior; R^{12}, que se selecciona independientemente entre R^{11} y Z, se selecciona entre hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, alquilarilo, heterociclo, aralquilo, aralcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo, cicloalquinilo, C(O)R^{17} y S(O)_{n}R^{17} donde n es 0-2; R^{17} es hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, alquilarilo, heterociclo, aralquilo, aralcoxi, cicloalquilo, cicloalquenilo o cicloalquinilo; R^{12} y R^{16} pueden formar juntos alquileno.
2. Una sulfonamida o una sal, ácido o éster de la misma farmacéuticamente aceptable de la reivindicación 1, donde:
Ar^{1} es 4-cloro-3-metil-5-isoxazolilo;
W es -NH-; y
R^{20} es CONH_{2}, o fenilo.
3. Los compuestos de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2 que son sales de sodio farmacéuticamente aceptables.
4. Un compuesto de sulfonamida o una sal, ácido o éster del mismo farmacéuticamente aceptable de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde R^{A} y R^{B} se seleccionan cada uno independientemente entre alquilo, alquenilo inferior, alquinilo inferior, haloalquilo inferior, haluro, pseudohaluro o H, excepto que R^{B} no es haluro.
5. Una composición farmacéutica, que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 o una sal, ácido o éster del mismo farmacéuticamente aceptable en un portador farmacéuticamente aceptable, donde la cantidad es eficaz para aliviar los síntomas de una enfermedad mediada por endotelina.
6. La composición de la reivindicación 5 que está formulada para la administración en una única dosis o en múltiples dosis.
7. Un artículo de manufactura, que comprende material de envasado y un compuesto o una sal, ácido o éster del mismo farmacéuticamente aceptable de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 contenido en el material de envasado, donde el compuesto es eficaz para ejercer una acción antagónica sobre los efectos de la endotelina, aliviar los síntomas de una alteración mediada por endotelina, o inhibir la unión de un péptido de endotelina a un receptor ET con una CI_{50} de menos de aproximadamente 10 \muM, y en el material de envasado se incluye una etiqueta que indica que la sulfonamida o la sal de la misma se utiliza para ejercer una acción antagónica sobre los efectos de la endotelina, inhibir la unión de endotelina a un receptor de endotelina o tratar una alteración mediada por
endotelina.
8. El uso de un compuesto o una sal, ácido o éster del mismo farmacéuticamente aceptable de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la preparación de un medicamento para inhibir la unión de un péptido de endotelina a los receptores de endotelina_{A} (ET_{A}) o endotelina_{B} (ET_{B}).
9. El uso de un compuesto o una sal, ácido o éster del mismo farmacéuticamente aceptable de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la preparación de un medicamento para alterar la actividad mediada por receptores de endotelina.
10. La composición farmacéutica de la reivindicación 5, que comprende una solución de tampón fosfato de sodio que contiene un azúcar y una sulfonamida de la reivindicación 1 disuelta en ella.
11. La formulación farmacéutica de la reivindicación 5, donde la sulfonamida es una sal farmacéuticamente aceptable que es un metal alcalino.
12. Un polvo liofilizado, que comprende una sal de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4.
13. El polvo liofilizado de la reivindicación 12 producido mediante un procedimiento, que comprende:
(a) disolver una sal farmacéuticamente aceptable del compuesto de sulfonamida en una solución de tampón fosfato de sodio que contiene un azúcar o carbohidrato;
(b) filtrar para esterilizar la solución resultante; y
(c) liofilizar la solución filtrada en condiciones normalizadas para producir un polvo estéril.
14. El polvo de la reivindicación 13, donde el azúcar o carbohidrato que contiene es dextrosa.
15. Un artículo de manufactura, que comprende material de envasado y el polvo de la reivindicación 12, contenido en el material de envasado, donde el polvo es eficaz para ejercer una acción antagónica sobre los efectos de la endotelina, aliviar los síntomas de una alteración mediada por endotelina, o inhibir la unión de un péptido de endotelina a un receptor ET con una CI_{50} de menos de aproximadamente 1 \muM, y en el material de envasado se incluye una etiqueta que indica que el polvo se utiliza para ejercer una acción antagónica sobre los efectos de la endotelina, inhibir la unión de endotelina a un receptor de endotelina o tratar una alteración mediada por endotelina.
16. La combinación que comprende:
un vial estéril que contiene la formulación farmacéutica de la reivindicación 12.
17. La combinación de la reivindicación 16, donde el vial estéril contiene una cantidad del polvo que es para la administración de una única dosis.
18. La combinación de la reivindicación 17, donde el vial estéril también contiene una cantidad de agua estéril para inyectables; y la concentración final de la sal de sodio de sulfonamida está entre aproximadamente 1 y 250 mg/ml.
19. La composición farmacéutica de la reivindicación 5, que está formulada en forma de tableta o cápsula.
20. Una composición de la reivindicación 19, que comprende adicionalmente un recubrimiento entérico.
21. La composición de la reivindicación 19, donde el recubrimiento se selecciona entre acetatoftalato de celulosa, polietilenglicol, polioxietilensorbitán, aceite de ricino, pseudolátex de etilcelulosa, salicilato de fenilo, estearato de n-butilo, ácido esteárico y cera carnauba.
22. El uso de una sulfonamida o una sal, ácido o éster farmacéuticamente aceptable de la misma de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para la formulación de un medicamento para el tratamiento de alteraciones mediadas por endotelina.
23. Una sulfonamida o una sal, ácido o éster farmacéuticamente aceptable de la misma de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para su uso en el tratamiento de alteraciones mediadas por endotelina.
24. El uso de la reivindicación 22 o la reivindicación 23, donde la alteración mediada por endotelina se selecciona entre hipertensión, enfermedad cardiovascular, asma, hipertensión pulmonar, enfermedades inflamatorias, enfermedades oftálmicas, glaucoma, alteraciones menstruales, estados obstétricos, heridas, enfermedad gastroentérica, insuficiencia renal, vasoconstricción renal mediada por inmunosupresores, vasoconstricción mediada por eritropoyetina, choque por endotoxinas, choque anafiláctico y choque hemorrágico.
25. El uso de la reivindicación 22 o la reivindicación 23, donde la alteración mediada por endotelina es el asma o una enfermedad inflamatoria.
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