ES2226802T3

ES2226802T3 - Derivados de mevinolina.

Info

Publication number: ES2226802T3
Application number: ES00916832T
Authority: ES
Inventors: Rolf Baenteli; Wilfried Bauer; Sylvain Cottens; Claus Ehrhardt; Ulrich Hommel; Jirg Kallen; Josef Gottfried Meingassner; Francois Nuninger; Gabriele Weitz-Schmidt
Original assignee: Novartis Pharma GmbH Austria; Novartis AG
Current assignee: Novartis Pharma GmbH Austria; Novartis AG
Priority date: 1999-02-16
Filing date: 2000-02-14
Publication date: 2005-04-01
Anticipated expiration: 2020-02-14
Also published as: EP1154988A1; US6818638B2; PE20001495A1; CN1229335C; BR0008292A; AU763357B2; DK1154988T3; ATE273272T1; DE60012888D1; EP1154988B1; AU3804000A; WO2000048989A1; CO5140104A1; CA2361841C; SI1154988T1; JP2002537284A; CA2361841A1; JP4167806B2; DE60012888T2; CN1340044A

Abstract

Un compuesto de fórmula I **(Fórmula)** en la que cada uno de a---b y alfa---beta es, independientemente, un enlace sencillo o un doble enlace; R1 es **(Fórmula)** 1, 1 H, - alquilo con 1 a 4 átomos de carbono R2 es OH; -O-CO-R5 donde R5 es alquilo con 1 a 8 átomos de carbono, cicloalquilo con 3 a 7 átomos de carbono, cicloalquil con 3 a 7 átomos de carbono-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, arilo o aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; o -O-R6, donde R6 es el resto de un -aminoácido unido a O a través de su resto carbonilo o -CHR7-COR8 donde R7 es H, alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, heteroalquilo con 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo con 3 a 7 átomos de carbono, cicloalquil con 3 a 7 átomos de carbono-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, aril o aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono y R8 es OH, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono o NR9R10, donde cada uno de R9 y R10 es independientemente H, alquilo con 1 a 4 átomos de carbono o R9 y R10 forman, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, un grupo heteroarilo; R3 es una lactama substituida, piperidinilo, amino alcohol lineal o carbamato cíclico; R4 es H o OR19, donde R19 es alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, hidroxialquilo con 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono o alcoxicarbonil con 1 a 4 átomos de carbono-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, y donde aparece ¿arilo¿ tal cual o en los significados de ¿aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono¿ en la definición anterior, es ¿fenilo¿ o ¿naftilo¿ opcionalmente substituido con halógeno, OH, NR11R12, COOH, CF3, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono, alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, hidroxi-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, hidroxi-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-carbonilo, ciano o CONR11R12, donde cada uno de R11 y R12 es independientemente H, alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, naftilo, fenil-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono o naftil-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono o R11 y R12 junto con el átomo de carbono al que están unidos forman heteroarilo; y donde aparece ¿heteroarilo¿, es un resto heterocíclico de 5 o 6 miembros opcionalmente condensado a un anillo de benceno; en forma libre o en forma de sal.

Description

Derivados de mevinolina.

La presente invención se refiere a derivados de mevinolina, a procesos para su producción, a su uso como agentes farmacéuticos y a preparaciones farmacéuticas que los contienen.

Más particularmente, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula I

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en la que

cada uno de a- - -b y \alpha- - -\beta es, independientemente, un enlace sencillo o un doble enlace;

R_{1}: es

\rotatebox{180}{\lefttriangleline} H, \rotatebox{180}{\lefttriangleline} alquilo con 1 a 4 átomos de carbono o \rotatebox{180}{\lefttriangleblack} OR_{a}

\quad: donde R_{a} es H; alquilo con 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente substituido con OH o alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono; alquenilo con 2 a 6 átomos de carbono; o aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono;

R_{2}: es OH; -O-CO-R_{5} donde R_{5} es alquilo con 1 a 8 átomos de carbono, cicloalquilo con 3 a 7 átomos de carbono, cicloalquil con 3 a 7 átomos de carbono-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, arilo o aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; o -O-R_{6}, donde R_{6} es el resto de un \alpha-aminoácido unido a O a través de su resto carbonilo o -CHR_{7}-COR_{8} donde R_{7} es H, alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, heteroalquilo con 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo con 3 a 7 átomos de carbono, cicloalquil con 3 a 7 átomos de carbono-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, aril o aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono y R_{8} es OH, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono o NR_{9}R_{10}, donde cada uno de R_{9} y R_{10} es independientemente H, alquilo con 1 a 4 átomos de carbono o R_{9} y R_{10} forman junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos un grupo heteroarilo;

R_{3}: es una lactama substituida, piperidinilo, amino alcohol lineal o carbamato cíclico;

R_{4}: es H o OR_{19} donde R_{19} es alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, hidroxialquilo con 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono o alcoxicarbonil con 1 a 4 átomos de carbono-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono,

y donde aparece "arilo" tal cual o en los significados de "aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono" en la definición anterior, es "fenilo" o "naftilo" opcionalmente substituido con halógeno, OH, NR_{11}R_{12}, COOH, CF_{3}, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono, alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, hidroxi-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, hidroxi-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-carbonilo, ciano o CONR_{11}R_{12}, donde cada uno de R_{11} y R_{12} es independientemente H, alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, naftilo, fenil-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono o naftil-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono o R_{11} y R_{12} junto con el átomo de carbono al que están unidos forman heteroarilo; y donde aparece "heteroarilo", es un resto heterocíclico de 5 o 6 miembros opcionalmente condensado a un anillo de benceno;

en forma libre o en forma de sal.

Los grupos alquilo o restos alquilo pueden ser de cadena lineal o ramificada. Los grupos o restos cicloalquilo preferiblemente son ciclopentilo o ciclohexilo. Heteroalquilo incluye, por ejemplo, alquilo halogenado tal como CF_{3}. Polihidroxi-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono puede comprender hasta 6 grupos hidroxi.

Preferiblemente, el resto fenilo o naftilo en arilo o aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, cuando está substituido, lleva hasta 3 substituyentes como se ha descrito anteriormente, más preferiblemente, seleccionados entre alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono, por ejemplo, metoxi o etoxi, hidroxi-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono, hidroxi-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono y OH. Cuando el resto fenilo está disubstituido, los 2 substituyentes preferiblemente están en posición meta y para. Aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono preferiblemente es bencilo, fenetilo o naftil-CH_{2}-, estando el resto fenilo o naftilo opcionalmente substituido como se ha indicado anteriormente.

Los ejemplos de heteroarilo incluyen pirrolilo, imidazolilo, furilo, tienilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, morfolino, piridilo, indolilo o quinolilo. Heteroarilo cuando se forma por R_{9} y R_{10} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, puede comprender un heteroátomo adicional, por ejemplo, O o N, y preferiblemente es pirrolidinilo, piperidilo, piperazinilo o morfolino. En heteroaril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, el resto alquilo preferiblemente es alquilo con 1 a 2 átomos de carbono.

Los significados dados anteriormente para "arilo" y "heteroarilo" también comprenden los radicales de las fórmulas (a), (b), (c_{1}) o (c_{2}) mostradas más adelante en este documento.

Cuando R_{6} es el resto de un \alpha-aminoácido, puede ser el resto de un \alpha-aminoácido natural o no natural, por ejemplo, Ala, Leu, Ile, Val, Pro, donde el grupo amino terminal puede estar substituido o sin substituir, por ejemplo, con un grupo protector de amino.

Cuando R_{3} es un resto de lactama substituido, preferiblemente es un anillo de 6 miembros en el que el nitrógeno de la lactama puede estar substituido y/o comprender un substituyente adicional en el anillo, por ejemplo, en el átomo de carbono opuesto al nitrógeno. Preferiblemente, el resto de lactama está disubstituido. Un ejemplo adecuado de una lactama substituida como R_{3} incluye, por ejemplo, un radical de fórmula (a)

\vskip1.000000\baselineskip

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en la que

R_{30}: es alquilo con 1 a 8 átomos de carbono; cicloalquilo con 3 a 7 átomos de carbono; cicloalquil con 3 a 7 átomos de carbono-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; heteroarilo; o heteroaril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono;

R_{31}: es OH; alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono; alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-carbonil-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono; hidroxi-alcoxi con 1 a 5 átomos de carbono; alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-alcoxi con 1 a 5 átomos de carbono; alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-carbonil-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; amino-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono; HOOC-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono; HOOC-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; o NR_{9a}R_{10a}-alcoxi con 1 a 5 átomos de carbono, donde cada uno de R_{9a} y R_{10a} independientemente tiene uno de los significados dados para R_{9} y R_{10}.

Cuando R_{3} es un resto piperidinilo substituido, el nitrógeno del piperidinilo puede estar substituido y/o en el anillo puede estar presente un substituyente adicional, por ejemplo, en el átomo de carbono opuesto al nitrógeno. Preferiblemente, el resto piperidinilo está disubstituido. Un ejemplo adecuado de un resto piperidinilo substituido incluye, por ejemplo, un radical de fórmula (b).

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en la que

R_{40}: tiene uno de los significados dados para R_{30}; y

R_{41}: tiene uno de los significados dados para R_{31} o es -O-CO-alquilo con 1 a 8 átomos de carbono.

Cuando R_{3} es un resto aminoalcohol substituido, el grupo amino del mismo puede estar mono-substituido, por ejemplo, con un substituyente tal como aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono o aril-alquil con 1 a 4 átomos de carbono-carbonilo, y/o en la cadena puede estar presente un substituyente adicional, por ejemplo, en el átomo de carbono adyacente al grupo alcohol o amino. La ciclación del resto aminoalcohol substituido conduce al correspondiente carbamato cíclico substituido. Un ejemplo de un aminoalcohol substituido y del correspondiente carbamato cíclico substituido incluye, por ejemplo, un radical de fórmula (c_{1}) o (c_{2})

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en las que

cada uno de X e Y es H o X e Y forman conjuntamente 38

cada R_{50},: independientemente es H; alquilo con 1 a 8 átomos de carbono; cicloalquilo con 3 a 7 átomos de carbono; arilo; cicloalquil con 3 a 7 átomos de carbono-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; heteroarilo; heteroaril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; alquil con 1 a 4 átomos de carbono-carbonilo; aril-carbonilo; heteroaril-carbonilo; aril-alquil con 1 a 4 átomos de carbono-carbonilo o heteroaril-alquil con 1 a 4 átomos de carbono-carbonilo; y

cada R_{51},: independientemente es H; alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; hidroxi-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; amino-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-carbonil-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, donde alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono está opcionalmente substituido con amino, alquil con 1 a 4 átomos de carbono-amino o di-(alquil con 1 a 4 átomos de carbono)-amino; HOOC-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; o R_{23}R_{24}N-CO-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, donde R_{23} es H, alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, hidroxi-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, polihidroxi-alquilo con 1 a 8 átomos de carbono, heteroarilo, heteroaril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, amino-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, alquilamino con 1 a 4 átomos de carbono-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, di(alquil con 1 a 4 átomos de carbono)amino-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono o aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono y R_{24} es H, alquilo con 1 a 4 átomos de carbono o hidroxi-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, siendo al menos uno de R_{50} y R_{51} distintos de H.

Los compuestos preferidos de fórmula I son aquellos en los que R_{3} es una lactama substituida, amino alcohol lineal substituido, carbamato cíclico substituido, preferiblemente una lactama substituida o un carbamato cíclico substituido, por ejemplo, como se ha descrito anteriormente, más preferiblemente un radical de fórmula (a) o (c_{1}) o (c_{2}), donde X e Y son -CO-.

En los compuestos de fórmula I, se prefieren individualmente los siguientes significados o en cualquier sub-combinación:

1.: R_{1} es H o CH_{3}, preferiblemente CH_{3};

2.: R_{2} es -O-CO-R_{5}, preferiblemente donde R_{5} es alquilo con 4 a 8 átomos de carbono, particularmente -CH(CH_{3})-CH_{2}-CH_{3}, -CH(CH_{2}-CH_{2}-CH_{3})_{2}, -CH(CH_{2}-CH_{3})_{2}, -C(CH_{3})_{2}-CH_{2}-CH_{3} o -CH(CH_{2}-CH_{3})-CH_{2}-CH_{2}-CH_{3}.

3.: a- - -b es un doble enlace;

4.: \alpha- - -\beta es un doble enlace;

5.: R_{4} es H;

6.: R_{3} es un radical de fórmula (a);

7.: R_{30} en (a) es aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono o heteroaril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, preferiblemente bencilo o naftil-metilo, donde el anillo fenilo o naftilo está opcionalmente substituido con OH, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono, hidroxi-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono o hidroxi-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, o morfolino, piridilo, indolilo o quinolilo;

8.: R_{31} en (a) es OH, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono, hidroxi-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-carbonil-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono o HOOC-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono;

9.: R_{3} es un radical de fórmula (c_{1}) o (c_{2}) donde X e Y conjuntamente forman -CO-;

10.: R_{50} en (c_{1}) o (c_{2}) donde X e Y conjuntamente forman -CO-, es aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono o heteroaril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, preferiblemente bencilo o naftil-metilo, donde el anillo de fenilo o naftilo está opcionalmente substituido con OH, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono, hidroxi-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono o hidroxi-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono;

11.: R_{51} en (c_{1}) o (c_{2}) donde X e Y forman conjuntamente -CO-, es hidroxi-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; amino-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-carbonil-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; HOOC-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; o R_{23}R_{24}N-CO-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono.

Los compuestos de fórmula I pueden existir en forma libre o en forma de sal, por ejemplo, como sales de adición de ácidos con, por ejemplo, ácidos orgánicos o inorgánicos, por ejemplo, clorhidratos, o sales en las que está presente un grupo COOH, como sales con bases, por ejemplo, sales con compuestos alcalinos tales como sodio o potasio, o sales de amonio substituidas o no substituidas.

Se apreciará que los de las fórmulas (i), (a), (b), (c_{1}), y (c_{2}) pueden comprender al menos un átomo de carbono asimétrico, por ejemplo, el átomo de carbono que lleva R_{15} y R_{16}, R_{31}, R_{41} o R_{51}, respectivamente, por ejemplo

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Cuando la estereoquímica de cualquier parte de un compuesto de la invención no se específica, se entenderá que la presente invención incluye los enantiómeros individuales y sus mezclas. En relación a los materiales de partida que muestran átomos de carbono asimétricos, se aplican consideraciones similares a las mencionadas anteriormente. Cuando los compuestos de la invención están en forma isomérica como se ha mencionado anteriormente, los isómeros individuales pueden obtenerse de una forma similar, por ejemplo, empleando materiales de partida ópticamente activos o por separación de mezclas obtenidas inicialmente, por ejemplo, usando técnicas cromatográficas convencionales.

La presente invención también incluye un proceso para la producción de un compuesto de fórmula I, que comprende:

a): para la producción de un compuesto de fórmula I en la que R_{3} es un resto de fórmula (i) someter mevinolina o compactina o la correspondiente tetrahidro-mevinolina o -compactina a la apertura del anillo, por ejemplo, por reacción con la amina correspondiente, por ejemplo, arilamina; o

b): para la producción de un compuesto de fórmula I en la que R_{3} es un radical de fórmula (C_{1}) en la que cada uno de X e Y es H, someter a aminación reductora la función carbonilo en R''_{3} en un compuesto de fórmula IV

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en la que R_{1}, R_{2}, R_{4}, a- - -b y \alpha- - -\beta y R_{1} son como se han definido anteriormente, y R''_{3} es un radical de fórmula (c_{1A})

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en la que R_{51} es como se ha definido anteriormente; o

c): para la producción de un compuesto de fórmula I en la que R_{3} es un resto de fórmula (c_{2}) donde cada uno de X e Y es H, someter la mevinolina o compactina en las que el anillo de lactona se ha convertido en una lactona \alpha,\beta insaturada, a una 1,4-adición, por ejemplo, con una amina, por ejemplo, veratrilamina, y a la apertura simultánea del anillo con un alcohol, por ejemplo metanol; o

d): para la producción de un compuesto de fórmula I en la que R_{3} es un resto de fórmula (c_{1}) o (c_{2}) donde cada uno de X e Y es -CO-, someter a ciclación un compuesto de fórmula I en la que R_{3} es un resto de fórmula (c_{1}) o (c_{2}) donde cada uno de X e Y es H, o

e): para la producción de un compuesto de fórmula I en la que R_{3} es una lactama substituida, por ejemplo, un resto de fórmula (a), someter un compuesto de fórmula I en la que R_{3} es un resto de fórmula (i) en la que R_{13} es OH oxidado a una cetona y R_{16} es CONHR_{18}, a una aminación reductora y al cierre simultáneo del anillo; o

: convertir el grupo OH libre en R_{3} en un compuesto de fórmula I en la que R_{3} es un resto de fórmula (i) en la que R_{16} es CONHR_{18}, en un grupo saliente, por ejemplo, por mesilación, y después someter el compuesto resultante a un tratamiento básico; o

f): para la producción de un compuesto de fórmula I en la que R_{3} es un piperidilo substituido, por ejemplo, un resto de fórmula (b), reducir un compuesto de fórmula I en la que R_{3} es una lactama substituida, por ejemplo, un resto de fórmula (a);

y, cuando se requiera, retirar el grupo protector cuando esté presente, y convertir el compuesto resultante de fórmula I en forma libre o en forma de sal.

Cuando están presentes grupos OH en los productos de partida que no participan en la reacción, pueden protegerse de acuerdo con métodos conocidos. En la técnica se conocen grupos protectores de OH, por ejemplo, terc-butil-dimetil-silanilo.

Las etapas de proceso (a) a (f) pueden realizarse de forma análoga a métodos conocidos en la técnica o como se describe en los ejemplos mostrados a continuación. La etapa de ciclación (d) puede realizarse convenientemente en presencia de un agente de ciclación, pro ejemplo, carbonil diimidazol.

Los compuestos de fórmula IV pueden prepararse por la apertura del anillo del anillo de lactona OH protegido de acuerdo con procedimientos conocidos, por ejemplo, por reacción con una amina y después mediante la oxidación del grupo hidroxi resultante en una cetona. En la medida en la que la producción de los materiales de partida no se describe particularmente, los compuestos son conocidos o pueden prepararse de una forma similar a métodos conocidos en la técnica o como se describe en el documento WO 99/11258, por ejemplo, a partir de mevinolina o compactina o tetrahidro-mevinolina o -compactina-. El grupo -O-CO-CH(CH_{3})-C_{2}H_{5} de mevinolina, compactina o tetrahidro-mevinolina o -compactina también puede reducirse a OH y después esterificarse en otro grupo -O-CO-R_{5}.

Los siguientes ejemplos son ilustrativos de la invención. Se usan las siguientes abreviaturas:

Boc = terc-butoxi-carbonilo

ta = temperatura ambiente

OMe= metoxi

THF = tetrahidrofurano

DMF = dimetilformamida

DCC = N,N'-diciclohexilcarbodiimida

Pro = prolina

TBDMS = terc-butildimetilsililo

DMAP = dimetilaminopiridina

CDI = carbonildiimidazol

TBME = terc-butilmetil éter

CHX = ciclohexano

Ejemplo 1 (S)-(3R,7S,8aR)-8-{(S)-2-[(4R,6R)-3-(4-hidroxi-3-metoxi-bencil)-4-[(2-hidroxi-etilcarbamoil)-metil]-2-oxo-[1,3] oxazinan-6-il]-etil}-3,7-dimetil-1,2,3,7,8,8a-hexahidro-naftalen-1-il éster del ácido (S)-2-metil-butírico

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a): A una solución de 40,4 g de mevinolina ((1S,3R,7A,8S,8aR)-8-[2-((1R,3R)-4-hidroxi-6-oxo-tetrahidro-piran-2-il)-etil]-3,7-dimetil-1,2,3,7,8,8a-hexahidro-naftalen-1-il éster del ácido (S)-2-metil-butírico) en 100 ml de CH_{2}Cl_{2} se le añaden 24,4 g de DMAP y después lentamente 15,0 g de Ac_{2}O. La mezcla se agita a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se controla por TLC, TBME/CHX, 3:2. La mezcla de reacción se diluye con TBME, se lava sucesivamente con agua, ácido cítrico a aproximadamente el 15% y salmuera y después se seca sobre sulfato sódico. La fase orgánica se concentra y el producto cristaliza por la adición de éter diisopropílico. El precipitado se filtra, se lava con éter diisopropílico y se seca, produciendo el derivado de lactona \alpha, \beta-insaturado, (S)-(3R,7S,8aR)-7-metil-8-[(S)-2-(R)-6-oxo-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-etil]-1,2,3,7,8,8a-hexahidro-naftalen-1-il éster del ácido (S)-2-metil-butírico.

: MS (FAB-MS), 387 (MH+).

b): A 15,5 g del compuesto a) en 250 ml de MeOH se le añaden 14,4 g de la 4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-3-metoxi-bencilamina y la mezcla se agita durante una noche. Control por TLC en TBME. La mezcla de reacción se evapora completamente y el producto bruto se separa por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (CHX \rightarrow TMBE \rightarrow MeOH). Se obtiene el éster metílico deseado, (S)-(3R,7S,8aR)-8-{(S)-2-[(4R,6R)-3-(4-hidroxi-3-metoxi-bencil)-4-[(2-hidroxi-etilcarbamoil)-metil]-2-oxo-[1,3]oxazizan-6-il]-etil}-3,7-di- metil-1,2,3,7,8,8a-hexahidro-naftalen-1-il éster del ácido (S)-2-metil-butírico.

: MS, (ESI), 686,5 (MH+).

c): Una solución de 12,5 g del compuesto obtenido en b), en 25 ml de DMF se trata con 4,1 g de CDI y se agita durante aproximadamente 5 h a temperatura ambiente. Control por TLC en TBME/CHX, 3:2. La mezcla de reacción se diluye con TBME, se extrae con agua y después con salmuera, la fase orgánica se seca sobre sulfato sódico y se evapora. El producto bruto se purifica por cromatografía RP-18, MeOH/H_{2}O \rightarrow MeOH. Después de la recromatografía sobre gel de sílice, TBME/CHX \rightarrow TBME, se obtiene el carbamato cíclico, (S)-(3R,7S,8aR)-8-((S)-2-{(4R,6R)-3-[4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-3-metoxi-bencil]-4-metilcarbamoilmetil-2-oxo-[1,3]oxazinan-6-il}-etil)-7-metil-3-metil-1,2,3,7,8,8a-hexahidro-naftalen-1-il éster del ácido (S)-2-metoxi-butírico en forma de una espuma.

: MS (ESI), 712,5 (MH+).

d): A una solución de 6,0 g del compuesto obtenido en c) en 25 ml de MeOH se le añaden un total de 5,5 g de 2-amino-etanol y la mezcla se calienta a reflujo durante aprox. 40 horas hasta que se completa (control por TLC en acetato de etilo acuoso). La mezcla de reacción se diluye con acetato de etilo, se extrae con ácido cítrico y salmuera, después se seca sobre sulfato sódico y se evapora. El producto bruto se purifica como se ha descrito anteriormente, primero por cromatografía RP-18 y después sobre gel de sílice. El producto del título se obtiene en forma de una espuma blanca.

: MS (ESI): 627,4 (MH+).

Ejemplo 2 (S)-(3R,7S,8aR)-8-{(S)-2-[(4R,6R)-3-(4-hidroxi-3-metoxi-bencil)-4-metilcarbamoilmetil-2-oxo-[1,3]oxazinan-6-il]- etil}-7-metil-3-metil-1,2,3,7,8,8a-hexahidro-naftalen-1-il éster del ácido (S)-2-metil-butírico

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Se disuelven 3,6 g del compuesto obtenido en el ejemplo 1c) en 100 ml de una solución de metilamina a aproximadamente al 30% en MeOH y se agita a temperatura ambiente durante aproximadamente 24 horas. (Control por TLC en acetato de etilo acuoso). La mezcla de reacción se evapora y el producto bruto se purifica por cromatografía sobre gel de sílice (TMBE/CHX \rightarrow acetato de etilo). Las fracciones puras se combinan y se evaporan y el compuesto del título se obtiene en forma de una espuma.

MS (ESI): 597,4 (MH+) [\alpha]^{20}_{D} = +234,7º (c = 1 en metanol).

Siguiendo el mismo procedimiento, pero usando el material de partida apropiado, también se obtiene el diastereómero en el que el anillo de carbamato tiene la configuración

10

Siguiendo el procedimiento descrito en los ejemplos 1 y 2, pueden prepararse los compuestos de fórmula X

11

en la que R_{50} y R_{51} son como se definen en la tabla 1 mostrada a continuación.

TABLA 1

12

13

14

\vskip1.000000\baselineskip

también se prepara siguiendo el mismo procedimiento.

Siguiendo el procedimiento mostrado a continuación, pueden prepararse los compuestos de fórmula X_{1}. El anillo de lactona OH protegido de mevinolina o compactina también puede someterse a la apertura del anillo, por ejemplo, por reacción con una amina, y después a tratamiento de la hidroxiamina resultante con carbonil-diimidazol para dar el carbamato.

15

donde R_{50} y R_{51} son como se definen en la tabla 2 mostrada a continuación.

TABLA 2

Ej.	\hskip1cm R_{50}	\hskip1cm R_{51}	MS (ESI)
25*	3,4-di-OMe-bencilo	-CH_{2}-CO-NHCH_{3}	611 (M+H)
26	3,4-di-OMe-bencilo	-CH_{2}-CO-O-(CH_{2})_{2}-N(CH_{3})_{2}	668 (M+H)
* También puede prepararse por el mismo procedimiento el diastereómero del compuesto del ejemplo 25,
donde el resto de carbamato cíclico tiene la configuración

16

Ejemplo 27 (S)-(3S,4aS,7S,5S,8S,8aS)-8-{(S)-2-[(4R,6R)-3-(4-hidroxi-3-metoxi-bencil)-4-[(2-hidroxi-etilcarbamoil)-metil]-2- oxo-[1,3]oxazinan-6-il]-etil}-3,7-dimetil-decahidro-naftalen-1-il éster del ácido (S)-2-metil-butírico

Siguiendo la primera etapa del procedimiento utilizado para preparar el ejemplo 28 (para obtener trans tetrahi-
dro mevinolina) y después el procedimiento (etapa a) a d) descrito en el ejemplo 1, se obtiene el compuesto de fórmula

17

MS (ESI): 629 [M-H].

Ejemplo Comparativo 28

(S)-(3S,4aS,7S,8S,8aS)-8-[(3R,5R)-6-(3,4-dimetoxi-bencilcarbamoil)-3,5-dihidroxi-hexil]-3,7-dimetil-decahidro-naftalen-1-il éster del ácido (S)-2-metil-butírico

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18

a): A una solución de 40 g (0,098 mol) de mevinolina en 3 l de acetato de etilo se le añaden 10 g de Pt/Al_{2}O_{3}. La mezcla se hidrogena en una atmósfera de H_{2} a una presión de 2,6 bar durante 16 h. La mezcla se filtra y el disolvente se evapora. El residuo se purifica por cromatografía sobre gel de sílice usando acetato de etilo/ciclohexano 8/2 como disolvente. El primer eluido es el isómero cis deseado, seguido de un producto secundario con un doble enlace. Finalmente se eluye el isómero trans deseado. Varias cristalizaciones producen la trans-tetrahidro-mevinolina deseada ((S)-(3S,4aS,7S,5S,8S,8aS)-8-[2-((2R,4R)-4-hidroxi-6-oxo-tetrahidro-piran-2-il)-etil]-3-metil-7-metil-decahidro-naftalen-1-il éster del ácido (S)-2-metil-butírico).

b): A una solución de 2 g (5,0 mmol) de la trans tetrahidro mevinolina obtenida en a) en 12 ml de etanol se le añaden 3,7 ml (25,0 mmol) de 3,4-dimetoxibencilamina. Después, la mezcla de reacción se agita durante 20 h a temperatura ambiente, después se diluye con 300 ml de éter dietílico y se lava con 100 ml de agua. El extracto orgánico se seca con MgSO_{4} y se evapora. El residuo se purifica por cromatografía sobre gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para dar el compuesto del título.

: MS (ESI): 598 (M+Na), 574 (M-H).

El compuesto 29 se obtiene por sililación de mevinolina, siguiendo la etapa b) del procedimiento del ejemplo 28, haciendo reaccionar con isocianato de etilo y desililando de acuerdo con métodos convencionales. El compuesto del ejemplo 30 se obtiene por reacción de mevinolina con diazoacetato de etilo y acetato de rodio y después siguiendo la etapa b) del procedimiento del ejemplo comparativo 28.

19

El compuesto del ejemplo 31 se prepara siguiendo la etapa a) y b) del procedimiento del ejemplo 1 y desililando el compuesto resultante de la etapa b). Los compuestos de los ejemplos 32 y 33 se obtienen sometiendo los apropiados materiales de partida a la etapa a) y a una versión modificada de la etapa b) (en ausencia de metanol):

20

Ejemplo 34 (1S,3R,7S,8S,8aR)-8-{2-[(2S,4R)-4-hidroxi-1-(5-hidroximetil-6-metoxi-naftalen-2-ilmetil)-6-oxo-piperidin-2-il]-etil}-3,7-dimetil-1,2,3,7,8,8a-hexahidro-naftalen-1-il éster del ácido (S)-2-metil-butírico

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a): A una solución agitada de 22 g (37 mmol) de mevinolina sililada (obtenida por sililación convencional de mevinolina en la posición 4) ((3R,7S,8S,8aR)-8-{2-[(2R,4R)-4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-6-oxo-tetrahidro-piran-2-il]-etil}-3,7-dimetil-1,2,3,7,8,8a-hexahidro-naftalen-1-il éster del ácido (S)-2-metil-butírico) en 65 ml de THF a temperatura ambiente se le añaden 18 g (56 mmol) de C-[5-(terc-butil-dimetil-silaniloximetil)-6-metoxi-naftalen-2-il]-metilamina (preparada a partir de 2-bromo-6-metoxi-naftaleno). Después de 18 horas, la mezcla de reacción se diluye con 250 ml de metil-t-butil éter y se lava sucesivamente con ácido cítrico acuoso al 10%, bicarbonato sódico acuoso saturado y salmuera.. La fase orgánica se seca sobre sulfato sódico y el disolvente se evapora. El producto bruto se purifica por cromatografía sobre gel de sílice (hexano/acetato de etilo 4/1 a 3/2) para producir el 8-(5-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-6-{[5-(terc-butil-dimetil-silaniloximetil)-6-metoxi-naftalen-2-ilmetil]-carbamoil}-3-hidroxi-hexil)-3,7-dimetil-1,2,3,7,8,8a-hexahidro-naftalen-1-il éster del ácido hidroxiamida 2-metil-butírico en forma de una espuma blanca.

: MS (ESI, -Q1MS) 894,6; 884,3; 848,5.

b): A una solución agitada y fría (0ºC) de 4,3 g (5,0 mmol) del compuesto obtenido en 34a) anterior y 1,4 ml (10 mmol) de trietilamina en 40 ml de THF se le añaden 0,51 ml (6,6 mmol) de cloruro de metanosulfonilo. Después de 30 minutos, se añaden 6,5 ml (13 mmol) de una solución 2 M de bis(trimetilsilil)amida sódica en THF. La mezcla se agita durante 1 hora a 0ºC, la reacción se interrumpe con ácido cítrico acuoso al 10% y se diluye con metil-t-butil éter. Las fases se separan y la fase acuosa se extrae dos veces con metil-t-butil éter. Las fases orgánicas se combinan, se lavan sucesivamente con bicarbonato sódico acuoso saturado, se secan sobre sulfato sódico y el disolvente se evapora. El producto bruto se purifica por cromatografía sobre gel de sílice (hexano/acetato de etilo 95/5 a 4/1) para producir el 8-(2-{4-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-1-[5-(terc-butil-dimetil-silanilximetil)-6-metoxi-naftalen-2-ilmetil]-6-oxo-piperidin-2-il}-etil)-3,7-dimetil-1,2,3,7-8-8a-hexahidro-naftalen-1-il éster del ácido lactama 2-metil-butírico en forma de una espuma blanca.

: MS (ESI, Q1MS) 832,6; 598,4.

c): A una solución agitada de 106 mg (0,13 mmol) del compuesto obtenido en 34b) anterior en 2 ml de THF a temperatura ambiente se le añadieron 606 \mul (0,62 mmol) de una solución acuosa 1 N de HCl. Después de 18 horas, la reacción se interrumpe con bicarbonato sódico acuoso saturado y se diluye con metil-t-butil éter. Las fases se separan y la fase acuosa se extrae dos veces con metil-t-butil éter. Las fases orgánicas combinadas se lavan con salmuera, se secan sobre sulfato sódico y el disolvente se evapora. El producto bruto se purifica por cromatografía sobre gel de sílice (hexano:acetato de etilo 1:1 a 1:4) para producir el compuesto del título puro en forma de una espuma blanca.

MS (ESI, -Q1MS) 648,4; 602,5 [\alpha]^{20}_{D} = +119,3º (c = 1 en metanol)

p.f. = 145ºC

Los compuestos de fórmula X_{2}

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22

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en la que R_{30} y R_{31} tienen los significados dados en la tabla 3, se preparan de una forma análoga al procedimiento descrito en el ejemplo 34.

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(Tabla pasa a página siguiente)

TABLA 3

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24

25

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**Se obtienen los dos diastereosiómeros y se aísla cada uno de ellos.

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La síntesis de los compuestos de los ejemplos 61 a 64* comprende adicionalmente un tratamiento con diazocetato de etilo y acetato de rodio, seguido para los compuestos de los ejemplos 62* y 63*, de una reducción.

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 34 pero usando como material de partida el derivado tetrahidro-mevinolina correspondiente y 3,4-dimetoxi bencilamina, se obtiene el siguiente compuesto:

Ejemplo 65

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26

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Los compuestos de los ejemplos 66 y 67 pueden obtenerse a partir de mevinolina como se indica a continuación: escisión del éster de mevinolina y oxidación de la posición hidroxi recién generada al compuesto oxo. El substituyente de hidroxi situado al lado se introduce después mediante la formación del sililenolato y tratamiento con ácido meta-cloroperbenzoico. La alquilación selectiva de la posición hidroxi recién formada se consigue por tratamiento con sal de Meerwein. El grupo éster se introduce mediante su anhídrido. Después, se sigue el procedimiento como se ha descrito para el ejemplo 34.

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27

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Ejemplo 68 (1S,3R,7S,8S,8aR)-8-[2-((R)-1-bencil-4-metil-6-oxo-piperidin-2-il)-etil]-3,7-dimetil-1,2,3,7,8,8a-hexanohidronafta- len-1-il éster del ácido (S)-2-metil-butírico

Se trata mevinolina con anhídrido acético para dar la lactona \alpha,\beta-insaturada. Ésta se trata con complejo de bromuro cuproso y dimetilsulfuro y metillitio para afectar en la adición del conjugado. El compuesto de lactona metilado se trata con metanol y diazabicicloundecano para dar el hidroxi éster metilado con anillo abierto. Su grupo hidroxi se oxida posteriormente con complejo trióxido de azufre y piridina a la cetona correspondiente.

La cetona se amina en condiciones reductoras (como se describe para el ejemplo 76b) para dar el compuesto del título. MS (EI): 491 (M)

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 68, pero usando los materiales de partida apropiados, pueden preparase los compuestos de fórmula X_{3}

28

en la que R_{1} y Y-Z son como se definen en la tabla 4 a continuación:

TABLA 4

29

Ejemplo 71 (1S,3R,7S,8S,8aR)-8-{2-[(2S,4S)-1-(3,4-dimetoxi-bencil)-4-hidroxi-6-oxo-piperidin-2-il]-etil}-3,7-dimetil-1,2,3,7,8, 8a-hexahidro-naftalen-1-il éster del ácido (S)-2-metil-butírico

a): A una solución agitada de 600 mg (1,1 mmol) de 8-{2-[1-(3,4-dimetoxi-bencil)-4-hidroxi-6-oxo-piperidin-2-il]-etil}-3,7-dimetil-1,2,3,7,8,8a-hexahidro-naftalen-1-il éster del ácido 2-metil-butírico en 15 ml de THF a temperatura ambiente se le añaden 2 ml de una solución de RedAl® al 65% en tolueno. Tres horas después, la reacción se interrumpe por la adición de 1 ml de metanol. La fase orgánica se extrae dos veces con 15 ml de HCl 2 N. Las fases acuosas se combinan, se llevan a pH 12 con NaOH 1 N y se extraen tres veces con acetato de etilo. Las fases orgánicas se combinan, se secan sobre sulfato sódico y el disolvente se evapora. El residuo se purifica por cromatografía sobre gel de sílice (t-butil metil éter/metanol 9/1) para producir 1-(3,4-dimetoxi-bencil)-2-[2-(8-hidroxi-2,6-dimetil-1,2,6,7,8,8a-hexahidro-naftalen-1-il)-etil]-piperidin-4-ol puro en forma de una espuma blanca.

: MS (ESI) 456 (M+H)

b): El compuesto anterior se trata con anhídrido dietilacético en presencia de cantidades catalíticas de 4-dimetilaminopiridina en diclorometano a temperatura ambiente durante 16 h para dar un compuesto diacilado. El grupo acilo indeseado en el resto lactona se escinde por transesterificación con metanol a 55ºC durante 5 h para dar el compuesto del título.

: MS (ESI): 554 (M+H). Véase la fórmula a continuación en la tabla 5.

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 71, pero usando los materiales de partida apropiados, pueden preparase compuestos de fórmula X_{4}

30

en la que R_{1}-R_{3} e Y-Z son como se definen en la tabla 5 mostrada a continuación

TABLA 5

31

El compuesto del ejemplo 73 se obtiene a partir del compuesto del ejemplo 71 partiendo del ejemplo del compuesto 47. El compuesto del ejemplo 74 se obtiene a partir del compuesto del ejemplo 72 partiendo del diastereoisómero del ejemplo 50**.

Ejemplo 76 (1S,3R,7S,8S,8aR)-8-{2-[(3R,5R)-3-(3,4-dimetoxi-bencilamino)-5-hidroxi-6-metilcarbamoil-hexil]-3,7-dimetil-1,2,3, 7,8,8a-hexahidro-naftalen-1-il éster del ácido (S)-2-metil-butírico

a): A una solución de 900 mg (1,65 mmol) de 8-[5-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-6-metilcarbamoil-3-oxo-hexil]-3,7-dimetil-1,2,3,7,8,8a-hexahidronaftalen-1-il éster del ácido 2-metil-butírico en 5 ml de THF se le añaden 700 mg (11,7 mmol) de ácido acético y 1,0 g (3,2 mmol) de fluoruro de tetrabutilamonio trihidrato. La mezcla de reacción se agita durante 3 h a temperatura ambiente. Después se diluye con 30 ml de acetato de etilo y se lava sucesivamente con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico y agua. La fase orgánica se seca sobre sulfato sódico y el disolvente se evapora. El residuo se cristaliza en éter dietílico para dar el producto deseado, 8-(5-hidroxi-6-metilcarbamoil-3-oxo-hexil)-3,7-dimetil-1,2,3,7,8,8a-hexahidro-naftalen-1-il éster del ácido 2-metil-butírico en forma de cristales blancos.

: MS (FAB) 440 (M+Li)

b): A una disolución de 300 mg (0,69 mmol) del compuesto de fórmula 76a) en 2 ml de dicloroetano se le añaden 200 mg (1,2 mmol) de veratrilamina, 244 mg (1,15 mmol) de triacetoxiborohidruro sódico y 60 mg (1,0 mmol) de ácido acético. La mezcla de reacción se agita durante una noche a temperatura ambiente. Después se diluye con 20 ml de acetato de etilo y se lava sucesivamente con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico, agua y salmuera. La fase orgánica se seca sobre sulfato sódico y el disolvente se evapora. El residuo se purifica por cromatografía sobre gel de sílice (terc-butilmetil éter/metanol/NH_{4}OH_{ac}90/9/1) para dar el compuesto del título en forma de una espuma blanca.

: MS (ESI) 585 (M+H)

Siguiendo el procedimiento del ejemplo 76, pero usando los materiales de partida apropiados, pueden prepararse los compuestos de fórmula X_{5}

32

en la que R_{1} y R_{2} son como se definen en la tabla 6 mostrada a continuación.

TABLA 6

33

Los compuestos de fórmula I, en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, presentan propiedades farmacológicas valiosas, por ejemplo inhibiendo la actividad de interacciones de LFA-1/ICAM-3 o de ICAM-3 o inhibiendo la inflamación, por ejemplo, como se indica en ensayos in vitro e in vivo y, por lo tanto, están indicados para terapia.

A.In vitro i) Ensayo Sin Células

El ensayo mide la unión de ICAM-1 humana soluble a LFA-1 humana inmovilizada. La LFA-1 se purifica a partir de células JY, una línea de células B linfoblastoide humana, por cromatografía de inmunoafinidad como se describe por Dustin et al. (J. Immunol. 148, 2654-2663,1992). La proteína de fusión de C_{\kappa} de ratón ICAM-1 (ICAM-1) se produce usando el sistema de baculovirus descrito en Weitz-Schmidt et al. (Anal. Biochem. 238, 184-190, 1996).

La LFA-1 purificada se diluye 1:20 en solución salina tamponada con fosfato (PBS) que contiene MgCl_{2} 2 mM, pH 7,4 y se aplica como un recubrimiento sobre placas de microtitulación (Nunc) a 37ºC durante 3 horas. Las placas se bloquean con BSA al 1% tratada térmicamente en PBS durante 2 horas a 37ºC seguido de una etapa de lavado usando PBS, MgCl_{2} 2 mM, y suero de ternero fetal al 1%, pH 7,4 (tampón de ensayo). Los compuestos disueltos a 10 mM en DMSO se diluyen en tampón de ensayo y se añaden a las placas. Se añade ICAM-1 recombinante biotinilada en tampón de ensayo (6 \mug/ml) y se deja que se una a 37ºC durante una hora. Después de la incubación, los pocillos se lavan con tampón de ensayo. Se añade estreptavidina-peroxidasa diluida 1:5000 en tampón de ensayo y se incuba durante 45 minutos a 37ºC. Después, las placas se lavan con tampón de ensayo y se añade solución de substrato de sal de diamonio de 2,2'-azino-bis(ácido 3-etilbenzotiazolina-6 sulfónico) a cada pocillo. La reacción se detiene después de 20 minutos y se determina la ICAM-1 unida midiendo la densidad óptica a 405 nm en un lector de microplacas.

En este ensayo, los compuestos de fórmula I inhiben la adhesión de LFA-1 a ICAM-1 con una IC_{50}\leq 30 \muM, preferiblemente de 0,05 a 30 \muM.

ii) Reacción de Linfocitos Mixtos Humanos (MLR)

Se aíslan células mononucleares de sangre periférica (PBMC) a partir de buffy coats (capa rica en leucocitos entre los glóbulos rojos y el plasma obtenido por centrifugación de sangre anticoagulada) humana. En cada experimento, las PBMC de tres donantes diferentes (A, B y C) se preparan en tres reacciones individuales de 2 vías (A-B, A-C, B-C). Las células se cocultivan durante seis días y se determina la proliferación sometiendo las células a pulsos de ^{3}H-timidina. Se calcula la concentración de los compuestos de fórmula I que tiene como resultado una inhibición del 50% de la proliferación celular (IC_{50}). En este ensayo, los compuestos de fórmula I inhiben la MLR con una IC_{50} en el intervalo de 0,02 a 4 \muM.

B.In vivo i) Peritonitis Inducida con Tioglicolato en Ratones

Se inyecta tioglicolato i.p. a ratones e inmediatamente después se administra el compuesto a ensayar s.c. Los ratones se sacrifican 4 horas después, se lava la cavidad peritoneal y se determina el número total de neutrófilos en el fluido de lavado.

En este ensayo, los compuestos de fórmula I inhiben la migración de neutrófilos inducida por tioglicolato cuando se administran por vía s.c. a una dosis de 0,001-50 \mug/kg.

ii) Dermatitis Alérgica de Contacto (ACD)

Se exponen grupos de ratones sensibilizados a oxazolona a 10 \mul de oxazolona al 0,2 o al 2,0% sobre la superficie interna del lado derecho para inducir ACD. La baja concentración de oxazolona se usa para los ensayos de los compuestos con respecto a la actividad sistémica, mientras que la alta concentración se aplica para ensayos tópicos. Los oídos izquierdos no estimulados sirven como controles normales y la dermatitis se evalúa a partir de diferencias individuales en el peso del pabellón de la oreja, que se considera una medida del aumento del hinchamiento inflamatorio 24 horas después de la exposición. La dermatitis se evalúa durante el ensayo y con fines comparativos en los grupos de control. Los grupos de ensayo se tratan con los compuestos de ensayo por vía oral (dos veces, 2 horas e inmediatamente antes de la exposición), por vía subcutánea (inmediatamente antes de la exposición) o tópica (30 minutos después de la exposición en el sitio de inducción de la ACD); los controles se tratan de manera similar con los vehículos solos. Para administración oral y subcutánea los compuestos se administran en una emulsión de aceite en agua, para administración tópica los compuestos se preparan en una mezcla de etanol, acetona y dimetilacetamida. Los datos de los grupos de ensayo y de control tratados con el vehículo se analizan estadísticamente mediante ANOVA seguido ensayo T de Dunnet (distribución normal de datos) o mediante un ensayo H y U, respectivamente. Cuando se administran p.o. a una dosis de 0,1 a 10 mg/kg, los compuestos de fórmula I inhiben la fase de inducción de dermatitis alérgica de contacto.

iii)Trasplante: Aloinjerto cardíaco en ratones heterotópicos

La combinación de cepas usadas: BALB/c \Rightarrow C3H (H-2d \Rightarrow H-2k) comprende desajustes de MHC y no-MHC. Se anestesian animales hembra usando isofluorano de inhalación. Después de la heparinización del ratón BALB/c donante a través de la vena cava inferior abdominal con extracción de sangre simultánea a través de la aorta, se abre el pecho y se enfría rápidamente el corazón. La aorta se liga y se divide distalmente con respecto a la primera ramificación y el tronco braquiocefálico se divide en la primera bifurcación. La arteria pulmonar izquierda se liga y se divide y el lado derecho se divide pero se deja abierto. Se diseccionan todos los demás vasos, se ligan y se dividen y el corazón del donante se retira en solución salina enfriada con hielo.

El C3H del receptor se prepara por disección y sujeción cruzada de la aorta abdominal infra-renal y la vena cava. El injerto se implanta con anastomosis de extremo a lado usando una sutura monofilamento 11/0 entre el tronco braquiocefálico del donante y la aorta del receptor y la arteria pulmonar derecha del donante y la vena cava del receptor. Se retiran las sujeciones, el injerto se ata retroabdominalmente, el contenido abdominal se lava con solución salina templada y el animal se cierra y se deja recuperar bajo una lámpara calefactora. La supervivencia del injerto se controla mediante palpación diaria de los latidos del corazón del donante a través de la pared abdominal. El rechazo se considera completo cuando el corazón deja de latir. Las mejoras en la función del injerto se obtienen en animales tratados con un compuesto de fórmula I administrado por vía oral a una dosis diaria de 30 mg/kg. Se obtiene una mejora significativa cuando el compuesto de fórmula I se administra con un agente inmunosupresor, por ejemplo ciclosporina A, a una dosis diaria de 10 mg/kg.

Por lo tanto, los compuestos de fórmula I son útiles en el tratamiento y/o prevención de enfermedades o trastornos mediados por interacciones de LFA-1/ICAM-1 o ICAM-3, por ejemplo, lesión de isquemia/reperfusión, por ejemplo, infarto de miocardio, apoplejía, isquemia intestinal, insuficiencia renal o choque hemorrágico, rechazo agudo o crónico de alo- o xenoinjertos de órganos o tejidos, por ejemplo de corazón, pulmón, combinación corazón-pulmón, riñón, hígado, intestino, médula ósea o islotes pancreáticos, enfermedades infecciosas tales como choque séptico, síndrome de insuficiencia respiratoria en adultos o choque traumático. Los compuestos de fórmula I también son útiles en el tratamiento y/o prevención de enfermedades o trastornos inflamatorios agudos o crónicos o enfermedades autoinmunes, por ejemplo, artritis reumatoide, lupus sistémico eritematoso, tiroiditis de Hashimoto, esclerosis múltiple, miastenia grave, diabetes de tipo I y uveítis, manifestaciones cutáneas de enfermedades mediadas inmunológicamente, enfermedades de la piel inflamatorias e hiperproliferativas (tales como psoriasis, dermatitis atópica, alopecia areata, dermatitis alérgica de contacto, dermatitis irritante de contacto y otras dermatitis eccematosas, dermatitis seborreica, liquen plano, pénfigo, penfigoide bulloso, epidermolisis bullosa, urticaria, angioedemas, vasculitis, eritema multiforme, eosinofilias cutáneas, lupus eritematoso, acné, granuloma anular, pioderma gangrenosa, quemaduras solares o necrolisis epidérmica tóxica) enfermedad inflamatoria del intestino, enfermedades inflamatorias oftálmicas o afecciones mediadas inmunológicamente del ojo, tales como enfermedades autoinmunes, por ejemplo queratoplastia y queratitis crónica, afecciones alérgicas, por ejemplo conjuntivitis vernal, afecciones inflamatorias y trasplantes de córnea. Los compuestos de fórmula I son útiles como agentes inmunosupresores.

Para los usos anteriores, por supuesto, la dosificación necesaria variará dependiendo del modo de administración, de la afección particular a tratar y del efecto deseado. En general, se indica que se obtienen resultados satisfactorios sistémicamente a dosificaciones diarias de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 10 mg/kg de peso corporal. Como se indica, la dosificación diaria en un mamífero superior está en el intervalo de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 80 mg, administrados convenientemente, por ejemplo, en dosis divididas hasta cuatro veces al día o de forma retardada.

Para uso tópico, se obtienen resultados satisfactorios con la administración local de una concentración del 1-3% de substancia activa varias veces al día, por ejemplo de 2 a 5 veces al día.

Los compuestos de fórmula I pueden administrarse por vía sistémica o tópica, por cualquier vía convencional, en particular por vía entérica, por ejemplo oral, por ejemplo en forma de comprimidos o cápsulas, tópica, por ejemplo en forma de lociones, geles, pomadas o cremas, o en una forma nasal o de supositorio. La administración percutánea mediante parches u otros sistemas de liberación también puede ser una vía posible para prevenir o tratar las enfermedades anteriores.

Pueden fabricarse composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de fórmula I en asociación con al menos un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable de una manera convencional por medio de mezcla con un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable. Las formas de dosificación unitarias contienen, por ejemplo, de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 40 mg de substancia activa.

La administración tópica es, por ejemplo, la administración en la piel. Otra forma de administración tópica es en el ojo.

Los compuestos de fórmula I pueden administrarse en forma libre o en forma de una sal farmacéuticamente aceptable, por ejemplo, como se ha indicado anteriormente. Estas sales pueden prepararse de una manera convencional y presentan el mismo orden de actividad que los compuestos libres.

De acuerdo con lo anterior, la presente invención también proporciona:

1.1: Un método para prevenir o tratar trastornos o enfermedades mediadas por interacciones de LFA-1/ICAM-1, por ejemplo, tales como las indicadas anteriormente, en un sujeto en necesidad de dicho tratamiento, comprendiendo dicho método administrar a dicho sujeto una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

1.2: Un método para prevenir o tratar enfermedades o trastornos inflamatorios agudos o crónicos o enfermedades autoinmunes, por ejemplo, como los indicados anteriormente, en un sujeto en necesidad de dicho tratamiento, comprendiendo dicho método administrar a dicho sujeto una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

2.: Un compuesto de fórmula I, en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable para uso como un producto farmacéutico, por ejemplo, en cualquiera de los métodos indicados en los puntos 1.1 y 1.2 anteriores.

3.: Una composición farmacéutica para uso en cualquiera de los métodos indicados en 1.1 y 1.2 anteriormente, que comprende un compuesto de fórmula I en forma libre o en forma de una sal farmacéuticamente aceptable en asociación con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable para el mismo.

4.: Un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en la preparación de una composición farmacéutica para uso en cualquiera de los métodos indicados en los puntos 1.1. y 1.2 anteriormente.

Los compuestos de fórmula I pueden administrarse como el ingrediente activo solo o junto con, por ejemplo, un adyuvante, otros fármacos en regímenes inmunomoduladores u otros agentes anti-inflamatorios, para el tratamiento o prevención del rechazo agudo o crónico de alo- o xenoinjertos o de trastornos inflamatorios o autoinmunes. Por ejemplo, los compuestos de fórmula I pueden usarse en combinación con ciclosporinas, rapamicinas o ascomicinas, o sus análogos inmunosupresores, por ejemplo ciclosporina A, ciclosporina G, FK-506, ABT-281, ASM981, rapamicina, 40-O-(2-hidroxi)etil-rapamicina etc.; corticosteroides; ciclofosfamida; azatiopreno; metotrexato; FTY720; leflunomida; mizoribina; ácido micofenólico; micofenolato mofetil; 15-desoxispergualina; anticuerpos monoclonales inmunosupresores, por ejemplo, anticuerpos monoclonales para receptores de leucocitos, por ejemplo, MHC, CD2, CD3, CD4, CD7, CD25, CD28, B7, CD40, CD45 o CD58 o sus ligandos; u otros compuestos inmunomoduladores, por ejemplo CTLA4Ig, u otros inhibidores de moléculas de adhesión, por ejemplo mAbs o inhibidores de bajo peso molecular incluyendo antagonistas de selectina y antagonistas de VLA-4. Una composición preferida es con ciclosporina A, FK506, rapamicina o 40-O-(2-hidroxi)etil-rapamicina.

Cuando los compuestos de fórmula de I se administran junto con otra terapia inmunosupresora/inmunomoduladora o anti-inflamatoria, por ejemplo, para prevenir o tratar el rechazo crónico como se ha especificado anteriormente, por supuesto, las dosificaciones del compuesto inmunosupresor, inmunomodulador o anti-inflamatorio coadministrado variarán dependiendo del tipo de co-fármaco empleado, por ejemplo, si es un esteroide o una ciclosporina, o del fármaco específico empleado, de la afección a tratar y similares. De acuerdo con lo anterior, la presente invención proporciona en otro aspecto más:

5.: Un método como se ha definido anteriormente, que comprende la co-administración, por ejemplo simultáneamente o en secuencia, de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula I en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, y una segunda substancia farmacéutica, siendo dicha segunda substancia farmacéutica un fármaco inmunosupresor, inmunomodulador o anti-inflamatorio, por ejemplo, como se ha indicado anteriormente.

6.: Una combinación terapéutica, por ejemplo un kit, para uso en cualquier método como se ha definido en los puntos 1.1 o 1.2 anteriormente, que comprende un compuesto de fórmula I, en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, con al menos una composición farmacéutica que comprende un fármaco inmunosupresor, inmunomodulador o anti-inflamatorio. El kit puede comprender instrucciones para su administración.

Los compuestos de los ejemplos 2, 28 y 34 son preferidos, particularmente para uso en tratamiento de enfermedades inflamatorias de la piel, por ejemplo, como se ha indicado anteriormente. En un ensayo, se obtuvieron los siguientes resultados: una IC_{50} de 0,05, 0,79 y 0,19 \muM, respectivamente, para los compuestos de los ejemplos 2, 28 y 34, en el ensayo Ai); una IC_{50} de 0,2 \muM para el compuesto del ejemplo 2 en el ensayo MLR Aii); una ED_{50} de 0,1 \mug/kg p.o. para el compuesto del ejemplo 2 en el ensayo Bi); en Bii) el compuesto del ejemplo 2 tiene un efecto inhibidor del 41% cuando se administra p.o. a una dosis de 2 x 3 mg/kg y el compuesto del ejemplo 34 inhibe el hinchamiento inflamatorio en un 41% a 2 x 1 mg/kg p.o.

Son compuestos preferidos de fórmula I los que inhiben la actividad HMG CoA reductasa con una IC_{50} \geq 1 \muM, por ejemplo \geq 50 \muM, en el ensayo Microsomal in vitro como se describe en el documento WO 99/11258.

Claims

1. Un compuesto de fórmula I

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en la que

R_{1}: es

R_{2}: es OH; -O-CO-R_{5} donde R_{5} es alquilo con 1 a 8 átomos de carbono, cicloalquilo con 3 a 7 átomos de carbono, cicloalquil con 3 a 7 átomos de carbono-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, arilo o aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; o -O-R_{6}, donde R_{6} es el resto de un \alpha-aminoácido unido a O a través de su resto carbonilo o -CHR_{7}-COR_{8} donde R_{7} es H, alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, heteroalquilo con 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo con 3 a 7 átomos de carbono, cicloalquil con 3 a 7 átomos de carbono-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, aril o aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono y R_{8} es OH, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono o NR_{9}R_{10}, donde cada uno de R_{9} y R_{10} es independientemente H, alquilo con 1 a 4 átomos de carbono o R_{9} y R_{10} forman, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, un grupo heteroarilo;

R_{4}: es H o OR_{19}, donde R_{19} es alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, hidroxialquilo con 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-alquilo con 1 a 6 átomos de carbono, aril-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono o alcoxicarbonil con 1 a 4 átomos de carbono-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono,

en forma libre o en forma de sal.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, donde R_{3} es un radical de fórmula (a), (b), (c_{1}) o (c_{2})

35

36

en las que

R_{31}: es OH; alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono; alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-carbonil-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono; hidroxi-alcoxi con 1 a 5 átomos de carbono; alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-alcoxi con 1 a 5 átomos de carbono; alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-carbonil-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; amino-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono; HOOC-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono; HOOC-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; o NR_{9a}R_{10a}-alcoxi con 1 a 5 átomos de carbono, donde cada uno de R_{9a} y R_{10a} independientemente es H, alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, o R_{9a} y R_{10a} forman, junto con el nitrógeno al que están unidos, un grupo heteroarilo;

R_{40}: tiene uno de los significados dados para R_{30};

R_{41}: tiene uno de los significados dados para R_{31} o es -O-CO-alquilo con 1 a 8 átomos de carbono;

cada uno de X e Y es H o X e Y forman conjuntamente 37

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2 en el que R_{3} es un radical de fórmula (a);

R_{30}: es bencilo o naftil-metilo, donde el anillo de fenilo o naftilo está opcionalmente substituido con OH, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono, hidroxi-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono o hidroxi-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, o morfolino, piridilo, indolilo o quinolilo; y

R_{31}: es OH, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono, hidroxi-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-carbonil-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono o HOOC-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono.

4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 2, en el que R_{3} es un radical de fórmula (c_{1}) o (c_{2}), donde X e Y conjuntamente forman -CO-;

R_{50}: es bencilo o naftil-metilo, donde el anillo de fenilo o naftilo está opcionalmente substituido con OH, alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono, hidroxi-alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono o hidroxi-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; y

R_{51}: es hidroxi-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, amino-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; alcoxi con 1 a 4 átomos de carbono-carbonil-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; HOOC-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono; o R_{23}R_{24}N-CO-alquilo con 1 a 4 átomos de carbono, donde R_{23} y R_{24} son como se han definido en la reivindicación 2.

5. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que es (S)-(3R,7S,8aR)-8-{(S)-2-[(4R,6R)-3-(4-hidroxi-3-metoxi-bencil)-4-metilcarbamoilmetil-2-oxo-[1,3]oxazinan-6-il]-etil}-3,7-dimetil-1,2,3,7,8,8a-hexahidro-naftalen-1-il éster del ácido (S)-2-metil-butírico o (1S,3R,7S,8S,8aR)-8-{2-[(2S,4R)-4-hidroxi-1-(5-hidroximetil-6-metoxi-naftalen-2-ilmetil)-6-oxo-piperidin-2-il]etil}-3,7-dimetil-1,2,3,7,8,8a-hexahidro-naftalen-1-il éster del ácido (S)-2-metil-butírico.

6. Un compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, para uso como producto farmacéutico.

7. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula I de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en forma libre o en forma de sal farmacéuticamente aceptable, en asociación con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable para el mismo.

8. Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 7, para uso en combinación con al menos una composición farmacéutica que comprende un fármaco inmunosupresor, inmunomodulador o anti-inflamatorio.