ES2247245T3

ES2247245T3 - Composiciones farmeceuticas que contienen derivados de rapamicina.

Info

Publication number: ES2247245T3
Application number: ES02022256T
Authority: ES
Inventors: Harry Tiemessen
Original assignee: Novartis AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 1996-01-19
Filing date: 1997-01-20
Publication date: 2006-03-01
Anticipated expiration: 2017-01-20
Also published as: PT874621E; DK0874621T3; EP1273289A1; HK1054183B; EP1679064B1; EP0874621B1; WO1997025977A1; HK1015277A1; ATE310504T1; JP3763581B2; ATE304842T1; EP1679064A3; CA2240339A1; CA2240339C; ATE510532T1; HK1053973B; JP2007246543A; ATE239449T1; AU1543497A; HK1054183A1

Abstract

Procedimiento para la preparación de una composición en emulsión que contiene rapamicina o un derivado de la misma como agente activo, cuyo procedimiento comprende la etapa de mezclar, en una emulsión grasa de placebo, un concentrado que comprende: a) el agente activo, b) un estabilizante elegido entre un fosfolípido, un glicolípido, un esfingolípido, un diacilfosfatidilglicerol, un fosfatidilglicerol de huevo, un fosfatidilglicerol de soja, un diacilfosfatidilglicerol, o una sal de los mismos; o un ácido graso (C12-24) saturado, mono- o di-insaturado, o una sal del mismo, y c) un disolvente orgánico, en donde la relación en peso de agente activo a estabilizante está comprendida entre 400:1 y 0, 5:1.

Description

Composiciones farmacéuticas que contienen derivados de rapamicina.

Esta invención se refiere a una composición farmacéutica que contiene como ingrediente activo una rapamicina.

La rapamicina es un macrólido lactámico inmunosupresor que puede ser producido, por ejemplo, por Streptomyces hygroscopicus. La estructura de la rapamicina se ofrece en Kesseler, H., et al.; 1993; Helv. Chim. Acta; 76: 117. La rapamicina es un inmunosupresor extremadamente potente y se ha demostrado que también tiene actividad antitumoral y antifúngica. Sin embargo, su utilidad como producto farmacéutico queda limitada por su biodisponibilidad muy baja y variable. Además, la rapamicina es altamente insoluble en medios acuosos, por ejemplo agua, dificultando ello la formulación de composiciones galénicas estables. Se conocen numerosos derivados de rapamicina. Ciertas rapamicinas 16-O-sustituidas se describen en WO 94/09010, cuyo contenido se incorpora aquí sólo con fines de referencia. Rapamicinas 40-O-sustituidas se describen, por ejemplo, en US 5 258 389 y WO 93/11130 (O-aril- y O-alquilrapamicinas); WO 92/05179 (ésteres de ácidos carboxílicos), US 5 118 677 (ésteres de amidas), US 5 118 678 (carbamatos), US 5 100 883 (ésteres fluorados), US 5 151 413 (acetales), US 5 120 842 (sililéteres), WO 93/11130 (metilen-rapamicina y derivados), WO 94/02136 (derivados metoxi), WO 94/02385 y WO 95/14023 (derivados alquenílicos), incorporándose aquí todos estos documentos sólo con fines de referencia. En US 5 256 790, por ejemplo, se describen rapamicinas 32-O-dihidro o sustituidas.

Otros derivados de rapamicina se describen en la solicitud PCT número EP 96/02441, por ejemplo la 32-deoxo-rapamicina se describe en el Ejemplo 1 y la 16-pent-2-iniloxi-32(S)-dihidro-rapamicina se describe en los Ejemplos 2 y 3.

La rapamicina empleada en las composiciones de esta invención puede ser cualquier rapamicina o derivado de la misma, por ejemplo como se ha descrito anteriormente o en la solicitudes de patente antes mencionadas.

De este modo, la rapamicina empleada en las composiciones de esta invención puede ser rapamicina o un derivado O-sustituido en donde el grupo hidroxilo del anillo ciclohexilo de rapamicina está reemplazado por -OR_{1} en donde R_{1} es hidroxialquilo, hidroxialcoxialquilo, acilaminoalquilo y aminoalquilo; tal como se describe en WO 94/09010, por ejemplo 40-O-(2-hidroxi)etil-rapamicina, 40-O-(3-hidroxi)propil-rapamicina, 40-O-[2-(2-hidroxi)etoxi]etil-rapamicina y 40-O-(2-acetaminoetil)-rapamicina. El derivado de rapamicina puede ser un derivado 26- o 28-sustituido.

Rapamicinas preferidas para emplearse en las composiciones de esta invención incluyen rapamicina, 40-O-(2-hidroxi)etil-rapamicina, 32-deoxo-rapamicina y 16-pent-2-iniloxi-32(S)-dihidro-rapamicina. Una rapamicina más preferida es 40-O-(2-hidroxi)etil-rapamicina. La numeración de los derivados de rapamicina tal como aquí se emplea se refiere a la estructura descrita como la fórmula A en la página 4 de la solicitud PCT publicada WO 96/13273.

En otro aspecto, esta invención proporciona un procedimiento para preparar una composición en emulsión que comprende una rapamicina o un derivado de la misma como agente activo, cuyo procedimiento comprende la etapa de mezclar, en una emulsión grasa de placebo, un concentrado que comprende:

a) el agente activo,

b) un estabilizante elegido entre un fosfolípido, un glicolípido, un esfingolípido, un diacilfosfatidilglicerol, un fosfatidilglicerol de huevo, un fosfatidilglicerol de soja, un diacilfosfatidilglicerol, o una sal de los mismos; o un ácido graso (C_{12-24}) saturado, mono- o di-insaturado, o una sal del mismo, y

c) un disolvente orgánico,

en donde la relación en peso de agente activo a estabilizante está comprendida entre 400:1 y 0,5:1.

La operación de mezcla se puede realizar convenientemente por inyección del concentrado en la emulsión grasa de placebo.

Esta composición proporciona una biodisponibilidad sorprendentemente alta y, por tanto, se puede disminuir la dosis a administrar de ingrediente activo. La composición es también de un uso conveniente. La composición resulta particularmente eficaz en el tratamiento del síndrome de resistencia a múltiples fármacos, por ejemplo, en pacientes con cáncer que están recibiendo quimioterapia.

El tamaño medio de la gotita de grasa está comprendido entre 250 nm y 500 nm. El material sólido que tiene una dimensión, por ejemplo, un diámetro >200 nm, por ejemplo, compuesto medicamentoso (agente activo) sin disolver es recogido y queda retenido por los poros del filtro. Sin embargo, las gotitas de grasa son flexibles y pasan a través de los poros del filtro. El diámetro medio de las gotitas en las composiciones en emulsión grasa de esta invención es sustancialmente similar al diámetro de las gotitas en la emulsión de placebo. Un filtro "Nucleopore" constituye un ejemplo de un filtro de alta calidad comercialmente disponible.

El término "emulsión grasa de placebo" ha de entenderse como una emulsión grasa sin agente activo. Las emulsiones grasas de placebo se pueden preparar por métodos conocidos y se encuentran disponibles en el comercio, por ejemplo, con las marcas registradas Intralipid o Lipofundin.

El término "emulsión farmacéutica" ha de entenderse aquí como una composición en donde los componentes o ingredientes individuales son por sí mismos farmacéuticamente aceptables y que, cuando se contempla una forma particular de administración, son adecuados o aceptables para dicha forma de administración.

La emulsión contiene 1-30, con preferencia 8 a 20, en particular 10 a 20 y especialmente 10 a 16% en peso de grasa. Las gotitas de grasa tienen preferentemente un diámetro de hasta 300 nanómetros (= 0,3 micrómetros).

Además de la administración oral, resulta especialmente interesante la administración intravenosa de rapamicina puesto que particularmente inmediatamente después del transplante de órganos o en combinación con la quimioterapia, puede que no sea posible la administración oral.

De acuerdo con la presente invención, se proporciona una solución para inyección o infusión que contiene rapamicina en donde la rapamicina está presente en una concentración que proporciona eficacia terapéutica en una mezcla aplicable intravenosamente con excipientes naturales.

La grasa usada en la emulsión grasa de placebo es preferentemente un acilglicerol o un acilglicerol que tiene un grupo-1-alquiléter o -1-\alpha,\beta-alqueniléter (C_{8-22}) en posición 1 de la parte glicerol. (Véase Albert L. Lehninger, Biochemie, Edition Chemie, Weinheim, New York 1979 página 230). La cantidad de grasa usada en la emulsión es con preferencia de 1-30, en particular 8-20% en peso. Preferentemente, el acilglicerol está libre de un grupo éter y, de este modo, se trata especialmente de un di- y/o triacilglicerol que tiene cadenas de ácido graso (C_{8-22}), particularmente una mezcla de di- y/o triacilglicerol que tiene una fracción (C_{8-12}) y una fracción (C_{18-22}) de cadenas de ácido graso.

De las cadenas de ácido graso, están insaturadas preferentemente el 40-60, más preferentemente el 45-55% en peso. Una grasa particularmente adecuada es el aceite de soja. Las emulsiones grasas de fácil preparación, adecuadas como componente para la emulsión grasa de la invención, incluyen productos comercialmente disponibles, tales como Lipofundin 10% MCT o Intralipid de Kabi o Abbolipid.

El producto Lipofundin MCT contiene, como fase oleosa, una mezcla 1:1 de triglicéridos de cadena larga (LCT) y triglicéridos de cadena media (MCT, Miglyol 810 o 812, consistiendo predominantemente en triglicérido caprílico/cáprico). Esta mezcla conduce a una absorción más rápida de las gotitas de grasa en la corriente sanguínea, evitando con ello el deterioro del sistema inmunológico de la función hepática. La vida media de LCT/MCT en la sangre está comprendida entre 10 y 30 minutos. La eliminación rápido del lípido usado como vehículo evita su acumulación en la sangre y, por tanto, cabe esperar que no tenga influencia alguna, o sólo una influencia mínima, sobre la cinética de eliminación del fármaco durante una infusión prolongada. La mezcla MCT/LCT puede tener mejores propiedades de solubilización que los LCT por sí solos.

La emulsión grasa de placebo contiene preferentemente un emulsionante, el cual es en particular un tensioactivo positiva o negativamente cargado o un tensioactivo polar que tiene grupos alquilo saturados o mono- o di-insaturados (C_{12-22}), especialmente una fosfatida cargada eléctricamente que no es zwitteriónica, siendo preferentemente un fosfatida cargada negativamente.

El emulsionante está presente preferentemente en una cantidad de 0,4 a 3% en peso con respecto al peso de la emulsión. Un buen representante de un emulsionante adecuado es lecitina de soja o de huevo. Esta contiene, además de su componente preponderante, fosfatidilcolina con una estructura zwitteriónica, también otros componentes cargados negativamente y polares.

También se puede utilizar un tensioactivo polar, por ejemplo, un poloxámero. Si está presente, se prefiere un agente de superficie activa natural, por ejemplo, una lecitina.

La emulsión grasa cargada de fármaco de esta invención contiene además un estabilizante, preferentemente un fosfolípido o aquel que tiene un grupo -1-alquiléter o -1-\alpha,\beta-alqueniléter (C_{12-22}) en posición 1 (en relación con tales estructuras especiales, véase: Karlson, Doenecke y Koolman, Kurzes Lehrbuch der Bliochemie fürMediziner und Naturwissenschaftler, 1994, página 306, figura 13.2, una plasmanil- o plameniletanolamina).

Como estabilizante, queda también contemplado el uso de un glicolípido (véase también Karlson, página 289, la tabla y la página 303), un compuesto con una mitad mono- u oligo-sacárido en lugar de una variedad de fosfato, especialmente un esfingolípido (páginas 303, 308), por ejemplo esfingomielina (páginas 308, 309).

Sin embargo, con preferencia se usa un fosfolípido que está cargado negativamente, por ejemplo, un diacilfosfatidilglicerol, en especial aquel que tiene una mitad ácido graso insaturado (C_{12-22}), por ejemplo, palmitoiloleoil fosfatidilglicerol (de aquí en adelante POPG), fosfatidilglicerol de huevo, fosfatidilglicerol de soja o diacil-fosfatidilglicerol, o una sal del mismo, por ejemplo, sodio-, potasio- o amonio-POPG, más preferentemente NaPOPG.

Otro estabilizante preferido es un ácido graso saturado, mono- o di-insaturado (C_{12-22}), especialmente ácido oleico o una sal del mismo, por ejemplo oleato sódico, potásico o amónico, más preferentemente oleato sódico.

El estabilizante usado en la presente invención sirve para aumentar la concentración de agente activo en la emulsión grasa lista para usar y también para aumentar la velocidad de formación de la emulsión. De este modo, el agente activo se incorpora de forma estable y rápida dentro de las gotitas de grasa de la emulsión grasa de placebo. Una vez formada la emulsión lista para usar, no se produce precipitación del agente activo de modo que la emulsión puede ser administrada a un paciente de forma segura. La emulsión lista para usar se puede formar rápidamente, por ejemplo, en menos de o en alrededor de un segundo o en unos pocos segundos.

Por tanto, se ha podido comprobar que el uso del estabilizante en las composiciones de esta invención proporciona un incremento de dos veces, por ejemplo, un incremento de tres veces, cuatro veces, cinco veces o más de la solubilización del agente activo en las gotitas de grasa de la emulsión grasa de placebo, en comparación con una simple mezcla de agente activo con emulsión grasa de placebo. De este modo, se puede obtener una concentración de al menos 5 mg aproximadamente de PSC 833 por ml de emulsión grasa y de hasta 20 mg/ml aproximadamente. Por tanto, para rapamicinas, se puede obtener una concentración de agente activo de al menos 3 mmol/litro aproximadamente de emulsión grasa, por ejemplo, 4 mmol/litro, 5 mmol/litro o más y hasta 20 mmol/litro aproximadamente.

Se ha comprobado que, en ausencia del estabilizante, empleando, por ejemplo, una solución etanólica de agente activo, se obtiene una concentración de agente activo sustancialmente más baja en comparación con la concentración que puede obtenerse usando el estabilizante. Además, se produce una precipitación del agente activo lo cual es inaceptable cuando se contempla la administración intravenosa.

La emulsión grasa que contiene compuesto medicamentoso contiene además, para conseguir una carga más grande del compuesto medicamentoso, un disolvente orgánico, por ejemplo polietilenglicol, tal como polietilenglicol 300 o 400. También es posible el uso de etanol y propilenglicol, por ejemplo en una mezcla de 1:99 a 99:1 en peso, por ejemplo de 25:75 a 75:25, y preferentemente una mezcla de alrededor de 45:55 a 55:45, por ejemplo, una mezcla 50:50 en peso de etanol y propilenglicol, reconociendo con ello la buena eficacia de disolución del etanol y la inconveniencia de la presencia de una mayor concentración de alcohol en la sangre después de la administración de la emulsión.

En otro aspecto, esta invención proporciona un concentrado farmacéutico que contiene una rapamicina o un derivado de la misma, como compuesto medicamentoso, y un estabilizante en una relación en peso de fármaco a estabilizante del orden de 400:1 a 10:1, por ejemplo 200:1, más preferentemente de 100:1 a 10:1, por ejemplo 50:1, 40:1, 30:1, 20:1 o 10:1, como un componente para la emulsión grasa de la invención.

En otro aspecto, esta invención proporciona el uso de un estabilizante como antes se ha descrito para aumentar la concentración en una emulsión grasa lista para usar de una rapamicina o derivado de la misma como agente activo como aquí se describe, con respecto a la concentración que puede obtenerse con una emulsión grasa de placebo, y/o para acelerar la formación de la emulsión lista para usar.

En otro aspecto, esta invención proporciona un método para aumentar la concentración en una emulsión grasa lista para usar de una rapamicina o derivado de la misma como agente activo como aquí se describe, con respecto a la concentración que puede obtenerse con una emulsión grasa de placebo, y/o para acelerar la formación de la emulsión lista para usar mediante el empleo de un estabilizante como aquí se describe.

Un producto de aproximadamente la misma formación ha sido dado a conocer en general en la Patente GB 2 269 536 B, pero no como un producto de partida para su incorporación en una emulsión grasa. Tras la filtración del producto descrito en GB 2 269 536 a través de un filtro de poros de 200 nm, todo el producto que contiene agente activo, por ejemplo un péptido, queda retenido en el filtro.

Preferentemente, el concentrado de esta invención está presente en un disolvente orgánico en una cantidad de hasta 20%, por ejemplo 0,1 a 20% en peso del compuesto medicamentoso con respecto al peso del concentrado, cuyo disolvente hace que el concentrado sea aplicable al menos por vía intravenosa.

El estabilizante en el concentrado de esta invención puede ser el fosfolípido, el glicolípido o el ácido graso, si está presente, de la emulsión grasa de placebo.

Las rapamicinas preferidas son aquellas descritas anteriormente. El concentrado se prepara mezclando el fármaco y el estabilizante en un disolvente orgánico, preferentemente un disolvente que también está presente en la emulsión grasa que contiene fármaco descrita anteriormente, hasta lograr la disolución completa. El concentrado puede estar en forma líquida o sólida. La forma sólida se puede obtener separando el disolvente orgánico usado en la producción. Si se emplea etanol, este puede ser separado por evaporación, por ejemplo mediante secado por congelación o aspersión.

El término "disolvente orgánico" ha de entenderse aquí como incluyendo un disolvente orgánico de un solo componente o una mezcla de dos o más disolventes orgánicos.

La emulsión grasa que contiene fármaco se prepara mezclando, preferentemente por inyección, el concentrado en forma líquida o sólida, preferentemente en forma líquida (para facilitar la incorporación del fármaco y del estabilizante en las gotitas de grasa disuelta) en la emulsión grasa de placebo, tras lo cual la emulsión grasa que contiene fármaco, preferentemente hasta 24 horas después de su preparación, puede ser administrada a un paciente.

La solución de concentrado y la emulsión grasa de placebo se pueden guardar en ampollas separadas y son estables bajo condiciones normales durante un largo período, por ejemplo, meses o años.

La invención proporciona así también un conjunto de ampollas que contienen el concentrado y frascos que contienen una emulsión grasa de placebo, cuyos contenidos se pueden mezclar adecuadamente en proporciones que satisfacen las necesidades de un paciente en relación con la cantidad requerida de fármaco de un tamaño de partícula farmacéuticamente seguro.

Además de la administración intravenosa, la entidad solicitante contempla la administración oral de un concentrado o emulsión de esta invención, por ejemplo en una solución de bebida aromatizada o en leche; la administración nasal, la administración por inhalación; o la administración tópica, por ejemplo la administración por vía dérmica.

Las emulsiones grasas farmacéuticas que contienen rapamicina se emplean para las mismas indicaciones que las formulaciones conocidas para la ciclosporina o macrólido, respectivamente, y de la misma manera.

La dosificación exacta a utilizar puede ser determinada de manera convencional, por ejemplo en ensayos estándar de biodisponibilidad en animales, por ejemplo perros. En general, las dosificaciones son del orden de 100% a 200% aproximadamente respecto de las usadas en las formulaciones conocidas.

Las composiciones de esta invención son útiles para las indicaciones conocidas de la rapamicina, por ejemplo para los siguientes estados o condiciones:

a) Tratamiento y prevención de rechazo de transplantes, por ejemplo, rechazo de alo- o xeno-transplantes de órganos o tejidos, por ejemplo para el tratamiento de receptores de, por ejemplo, transplantes de corazón, pulmón, corazón-pulmón combinados, hígado, riñón, páncreas, piel o córnea. También están indicadas para la prevención de la enfermedad de injerto-versus-hospedante, tal como después del transplante de médula ósea.

b) Tratamiento y prevención de enfermedades autoinmunes y de estados inflamatorios, en particular estados inflamatorios con una etiología que incluye una componente autoinmune tal como artritis (por ejemplo, artritis reumatoide, artritis crónica progresiva y artritis deformante) y enfermedades reumáticas. Enfermedades autoinmunes específicas para las cuales se pueden emplear los compuestos de la invención incluyen: trastornos hematológicos autoinmunes (incluyendo, por ejemplo, anemia hemolítica, anemia aplástica, anemia de células rojas puras y trombocitopenia idiopática), lupus eritematoso sistémico, policondritis, esclerodoma, granulomatosis de Wegener, dermatomiositis, hepatitis crónica activa, miastenia grave, psoriasis, síndrome de Steven-Johnson, diarrea idiopática, enfermedad inflamatoria autoinmune del intestino (incluyendo, por ejemplo, colitis ulcerativa y enfermedad de Crohn), oftalmopatía endocrina, enfermedad de Graves, sarcoidosis, esclerosis múltiple, cirrosis biliar primaria, diabetes juvenil (diabetes mellitus de tipo I), uveitis (anterior y posterior), queratoconjuntivitis seca y queratoconjuntivitis vernal, fibrosis pulmonar intersticial, artritis psoríatica, glomerulonefritis (con y sin síndrome nefrótico, incluyendo por ejemplo, síndrome nefrótico idiopático o nefropatía de cambio mínimo) y dermatomiositis juvenil.

c) Tratamiento y prevención de asma.

d) Tratamiento de resistencia a múltiples fármacos (MDR). Por tanto, las composiciones son útiles para mejorar la eficacia de otros agentes quimioterapéuticos en el tratamiento y control de estado de resistencia a múltiples fármacos, tales como cáncer resistente a múltiples fármacos o SIDA resistente a múltiples fármacos.

e) Tratamiento de trastornos proliferativos, por ejemplo, tumores, trastorno hiperproliferativo de la piel y similares.

f) Tratamiento de infecciones fúngicas.

g) Tratamiento y prevención de estados inflamatorios, especialmente a la hora de potenciar la acción de esteroides.

h) Tratamiento y prevención de infecciones, especialmente infecciones por patógenos que tienen Mip o factores de tipo Mip.

i) Tratamiento de sobredosis de FK-506 y de otros inmunosupresores que se unen a macrofilina.

Más concretamente, las composiciones de esta invención son útiles como agentes antiinflamatorios y como agentes inmunosupresores y antiproliferativos para utilizarse en la prevención y tratamiento de estados inflamatorios y de estados que requieren inmunosupresión, tal como:

a) la prevención y tratamiento de:

- rechazo de transplantes de órganos o tejidos, por ejemplo de corazón, riñón, hígado, médula ósea y piel,

- enfermedad del injerto-versus-hospedante, tal como después de transplantes de médula ósea,

\newpage

- enfermedades autoinmunes tales como artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico, tiroiditis de Hashimoto, esclerosis múltiple, miastenia grave, diabetes de tipo I y uveitis,

- manifestaciones cutáneas de enfermedades de mediación inmunológica;

b) el tratamiento de enfermedades inflamatorias e hiperproliferativas de la piel, tales como psoriasis, dermatitis atópica, dermatitis de contacto y otras dermatitis con eczemas, dermatitis seborreica, liquen plano, penfigo, penfigoide ampolloso, epidermolisis ampollosa, urticaria, angioedemas, vasculitis, eritemas, eosinofilias cutáneas, lupos eritematoso y acné; y

c) alopecia areata.

La cantidad exacta de las composiciones a administrar depende de varios factores, por ejemplo, de la duración deseada del tratamiento y de la velocidad de liberación del ingrediente activo.

La utilidad de las composiciones farmacéuticas se puede observar en pruebas clínicas estándar, por ejemplo, en indicaciones conocidas de las dosis del agente activo que proporcionan niveles equivalentes en sangre del agente activo; por ejemplo, usando dosis del orden de 1 mg a 1000 mg, por ejemplo de 5 mg a 100 mg, de agente activo por día para un adulto de 75 kilogramos y en modelos estándar realizados en animales. La mayor biodisponibilidad del fármaco proporcionada por las composiciones se puede observar en ensayos estándar con animales y en pruebas clínicas. Por ejemplo, una dosis diaria indicada para un adulto, después de un transplante renal, es de 50 a 200 mg/día.

Las ventajas del procedimiento y composiciones de esta invención incluyen:

- pocos excipientes en el concentrado de agente activo;

- formación rápida de la emulsión lista para usar;

- ausencia de precipitación de agente activo en la emulsión lista para usar;

- estrecha distribución del tamaño de las gotitas en la emulsión lista para usar;

- alta concentración de agente activo en la emulsión; y

- la emulsión grasa queda lista para ser utilizada después de agitar suavemente la mezcla previa de emulsión de placebo con concentrado de agente activo.

A continuación se ofrece una descripción, sólo a título de ejemplo, de composiciones de la invención. Tomen nota que los Ejemplos 1-13 no forman parte de la invención.

Ejemplos

Los Ejemplos 1-13 son composiciones que comprenden una ciclosporina como agente activo, con lo que de este modo no forman parte de la invención. Sin embargo, los mismo se ofrecen debido a que resultan necesarios para entender los Ejemplos 15-54, los cuales si están de acuerdo con la invención.

1. Concentrado conteniendo PSC 833 para ser introducido en una emulsión grasa de placebo

	mg/ml
PSC 833	100	10,87% en peso
Oleato sódico	10	1,09% en peso
Etanol	410	44,56% en peso
Propilenglicol	400	43,48% en peso
	920	\hskip1,3cm 100,00

\newpage

2. Emulsión grasa conteniendo PSC 833

El concentrado del Ejemplo 1 se puede introducir en Lipofundin® MCT 10%, una emulsión grasa de placebo, por ejemplo, por inyección a un factor de dilución de alrededor de 17, para proporcionar la siguiente composición:

	mg/ml
PSC 833	5,9
Oleato sódico	0,59
Etanol	24,4
Propilenglicol	23,8
Lipofundin MCT 10%
componentes:
MCT/LCT	94,3
Fosfatidilcolina de hueco	11,3
Glicerol	23,6
Oleato sódico	0,28

\vskip1.000000\baselineskip

Para un paciente de 70 kg de peso corporal, una dosis suficiente es la de 107 ml de la emulsión grasa que contiene PSC 833 (obtenida a partir de 7 ml del concentrado y 100 ml de Lipofundin® MCT 10%, conduciendo a una carga moderada de 10 g de grasa, 2,6 g de etanol, 2,5 g de propilenglicol y 631 mg de PSC 833 por día, puesto que la dosis necesaria por inyección es de 9 mg de PSC 833 por kg de peso corporal, lo cual es de 630 mg para un paciente con un peso corporal de 70 kg. Para uso oral, se necesitan 20 mg de PSC 833 por kg de peso corporal por día. De este modo, un paciente de 70 kg de peso corporal necesita aproximadamente 1400 mg de PSC 833 para uso oral, en una emulsión grasa, la cual se puede preparar mezclando 14 ml del concentrado del Ejemplo 1 con 100 ml o más de Lipofundin® 10% MCT.

Para uso médico, la cantidad requerida de solución de fármaco puede tomarse de una ampolla de 5 ml que contiene 500 mg de concentrado de PSC 833 y/o de una ampolla de 2,5 mg que contiene 250 mg de PSC 833 y se puede introducir mediante inyección en 100 ml de Lipofundin®, tras lo cual la mezcla combinada puede ser administrada a un paciente mediante aplicación por infusión o por vía oral.

Dado que las emulsiones grasas convencionales con ciclosporinas carecen de la estabilidad física necesaria para un fármaco (formación de cristales en la carga de fármaco al nivel requerido), se investigó la carga de una emulsión grasa de placebo convencional (destinada a nutrición parenteral) con PSC 833, en ausencia y en presencia de estabilizantes, en el plazo de 24 horas, que ha de ser administrada a un paciente. La eficacia de solubilización se determinó filtrando la emulsión grasa cargada con fármaco a través de un filtro Nuclepore de 0,2 micrómetros. El fármaco que no se solubilizó se mantuvo retenido en el filtro y se determinó gravimétricamente y/o mediante mediciones de
HPLC.

La inyección de una solución pura de PSC 833 en etanol en una emulsión grasa conduce a una solubilización incompleta: sólo se solubiliza el 87% después de 30 minutos (véase la tabla). El motivo de esta solubilización incompleta es la rápida precipitación del fármaco antes de que todas las moléculas de PSC 833 hayan alcanzado a las gotitas de aceite. En otro experimento, de acuerdo con la invención, se intentó estabilizar estos precipitados de PSC 833 en la emulsión grasa con la sal sódica de palmitoil-oleoil fosfatidilglicerol (POPG.Na). Además, en lugar de POPG.Na se utilizó oleato sódico.

La adición de POPG.Na (Nippon Fine Chemical) o de oleato sódico (Fluka, pureza > 99%) condujo sorprendentemente a una solubilización completa de PSC 833. Después de 5 minutos, quedó retenido en el filtro menos de 0,1%, tal como se determinó por HPLC. El oleato sódico y el POPG.Na resultaron ser muy adecuados por igual a la hora de obtener la solubilización completa de PSC 833 . Se utilizó entonces propilenglicol para reemplazar una parte del contenido en etanol.

Al utilizar Lipofundin® 10% MCT se comprobó que la parte grasa puede ser cargada con PSC 833 hasta 20%. Esto significa que hasta 2 g de PSC 833 pueden ser solubilizados por 100 ml de una emulsión grasa al 10%.

\newpage

\begin{minipage}[t]{145mm} Determinación de la solubilización de PSC 833 en emulsiones grasas*: influencia de los excipientes en el concentrado. \end{minipage}
	Mezclas con relación en peso de compuestos	PSC 833 no solubilizado recuperado en el filtro de
		0,2 micrómetros (tiempo de filtración), % en peso
		de la cantidad inicial
	1 PSC 833/EtOH-90^{#} 10/90	13% (30 min)
1	+
	20 Intralipid 10%
	1 PSC 833/ácido oleico/EtOH-90^{#} 10/1/89	20% (5 min), 12,3 (30 min)
2	+
	20 Intralipid 10%
	1 PSC 833/POPG.NaEtOH-90^{#} 10/1/89	0,6% (3 min), 0,2% (6 min)
3	+	0,06% (15 min, 24 horas, 12 días TA)
	20 Intralipid 10%
	1 PSC 833/Na.OL/EtOH-90^{#} 10/1/89	0,05% (5 min)
4	+
	20 Intralipid 10%
	1 PSC 833//NaOL/PG/EtAbs 10/1/40/41	0,06%, 0,2% (3 min)
5	+ (inyección lenta)
	20 Lipofundin® MCT 10%
	1 PSC 833//NaOL/PG/EtAbs 10/1/40/41	0,1%, 0,1% (3 min)
6	+ (inyección lenta)
	10 Lipofundin® MCT 10%
	1 PSC 833//NaOL/PG/EtAbs 10/1/40/41	0,13%, 0,1% (30 min)
7	+ (inyección lenta)
	5 Lipofundin® MCT 10%

2

El tamaño medio de partícula (250 mm) y la distribución de tamaños de partícula (distribución unimodal, todas las partículas por debajo de 500 mm) se determinaron mediante espectroscopia de correlación fotónica.

Cuando, por ejemplo, se inyectan rápidamente 5 o 10 ml del concentrado de esta invención en 100 ml de
Lipofundin® MCT 10% y se mezclan a continuación, la mezcla resultante es estable físico-químicamente a temperatura ambiente durante 48 horas (mezclas 5 y 6).

Ejemplo 13 Estudio en perros

Se llevó a cabo un estudio farmacocinético con perros sabuesos, usando como referencia una forma oral con el fin de determinar si los vehículos usados en las emulsiones grasas, aplicados intravenosamente, tienen o no influencia sobre la cinética de eliminación. Se prepararon las siguientes composiciones:

13a	(forma de "bajo contenido en grasa")
	\begin{minipage}[t]{93mm} 100 mg de PSC 833 en una emulsión grasa: se diluyó 1 ml de la composición de concentrado descrita como los números 5 y 6 anteriormente con 10 partes de Lipofundin MCT 10%. \end{minipage}
13b	(forma de "bajo contenido en grasa")
	\begin{minipage}[t]{93mm} 100 mg de PSC 833 en una emulsión grasa: se diluyó 1 ml de la composición de concentrado descrita como los números 5 y 6 anteriormente con 20 partes de Lipofundin MCT 10%. \end{minipage}
13c	\begin{minipage}[t]{93mm} Se administran 200 mg de PSC 833 en forma de una bebida oral que tiene la siguiente composición \end{minipage}
Propilenglicol	\hskip0,15cm 96 mg
Labrafil M2125 CS	150 mg
\hskip05mm (aceite de maíz inter-esterificado)
Cremophor RH40	524 mg
\hskip05mm (polioxil-40 aceite de ricino hidrogenado)
PSC	100 mg
DL-alfa-tocoferol	\hskip0,35cm 1 mg
Etanol absoluto	104 mg

mediante administración usando 2 cápsulas de gelatina dura.

Se llevó a cabo un estudio cruzado con 4 perros y las formulaciones se administraron a perros en ayunas bien mediante infusión lenta (composiciones 13a y 13b: duración 2 horas) o bien por vía oral (13c). No se observaron efectos secundarios importantes dependientes de las formulaciones. Se determina la concentración en sangre mediante radioinmunoanálisis (RIA) y los resultados de las tres composiciones administradas se muestran gráficamente en la figura 1.

La concentración en sangre de agente activo (PSC 833 abreviado con "PSC") se representa en escala log en el eje vertical. El tiempo en horas después del inicio de la administración se representa en el eje horizontal. Como resulta evidente a partir del gradiente de cada gráfico de la figura 1, no se observan diferencias importantes en la cinética de eliminación entre las tres formas. Puede apreciarse que los gradientes de cada uno de los gráficos son similares entre sí a partir de 2 horas aproximadamente, es decir, el término de la infusión. De manera sorprendente, no parece que exista una influencia importante de la emulsión grasa sobre la cinética de eliminación del compuesto lipófilo PSC. La cinética de eliminación de las formas inyectable es similar a la de la forma oral.

Ejemplo 14

Se preparan emulsiones grasas empleando como agente activo el compuesto (compuesto A) descrito en los Ejemplos 6d y 71 de la solicitud de Patente Europea publicada EP 566 337.

Concentrado que contiene compuesto A como agente activo

	mg/ml
Compuesto A	100	10,87% en peso
Oleato sódico	10	1,09% en peso
Etanol	410	44,56% en peso
Propilenglicol	400	43,48% en peso
	920	\hskip1,3cm 100,00

3

Ejemplos 15 a 54

Se preparan composiciones análogas a las composiciones 3 a 12 anteriores para otros agentes activos reemplazando el agente activo PSC por 40-O-(2-hiroxi)etil-rapamicina (Ejemplos 15 a 24), 32-deoxo-rapamicina (Ejemplos 25 a 34), 16-pent-2-iniloxi-32(S)-dihidro-rapamicina (Ejemplos 35 a 44) y 33-epi-cloro-33-desoxi-ascomicina (Ejemplos 45 a 54). Se obtienen composiciones en emulsión estables rápidamente tras mezclar, por inyección, el respectivo concentrado de agente activo en la emulsión grasa de placebo.

Las composiciones que, en un cierto grado, son comparables con las emulsiones grasas que contienen fármaco según la invención y con los concentrados, se describen en la bibliografía al respecto.

El documento EP 0 648 494 A1 describe la preparación de soluciones que comprenden rapamicina como agente activo, la cual se disuelve en un sistema disolvente que comprende un surfactante, opcionalmente un disolvente inerte y un fosfolípido.

El documento DE 44 18 115 A1 describe la preparación de emulsiones que comprenden macrólidos, tal como una rapamicina, que se pueden administrar en cápsulas o en una solución bebible, en donde la fase hidrófila puede comprender preferentemente 1,2-propilenglicol y posiblemente etanol, y la fase lipófila comprende preferentemente triglicéridos, una mezcla de mono-, di- y tri-glicéridos, o aceites vegetales etoxilados y transesterificados.

De acuerdo con EP 0 570 829 A1, se describe una emulsión grasa aplicable por vía intravenosa que contiene una ciclosporina, un aceite natural, una fosfatidilcolina, una fosfatidiletanolamina y agua más, opcionalmente, una sal alcalina de un ácido graso. Según el Ejemplo 5, se prepara una emulsión que contiene 4% en peso de una ciclosporina con respecto al peso de aceite mediante disolución de la ciclosporina en la fase oleosa y posterior emulsificación en la fase acuosa que contiene todos los otros excipientes antes mencionados. Un inconveniente de la emulsión grasa es que si se emplean mayores concentraciones de ciclosporina, sólo se disuelve una parte de la cantidad de ciclosporina. La otra parte está presente en forma sólida en la parte interior de la partícula grasa (véase página líneas 41-46).

La composición del Ejemplo 5 se filtra a través de un filtro que tiene un diámetro de poros de 5 micrómetros (véase página 5 línea 38). Por tanto, se permite que el tamaño de partícula de las partículas sólidas que pueden estar presentes (véase página 8, tabla) sea más grande que el tamaño de partícula de la composición de la presente invención, cuyas partículas, sin residuo de la filtración, se filtran a través de un filtro que tiene un diámetro de poros de 0,2 micrómetros. De este modo, la posibilidad de aplicar por vía intravenosa las emulsiones de EP 0 570 829 A1no deja de presentar un peligro. Otro inconveniente es que, particularmente cuando se realiza una carga más elevada de fármaco en la fase oleosa, el fármaco tiende a precipitar durante un almacenamiento superior a 3 meses.

De acuerdo con EP 0 331 755 B1 se describe una emulsión grasa que contiene un fármaco que, en contraste con las composiciones de la presente invención, no contiene POPG.Na, oleato sódico u otros estabilizantes, lo cual hace imposible la preparación de ciclosporinas incorporadas en un porcentaje satisfactorio en las gotitas de grasa, sin que exista un cierto porcentaje presente en la fase acuosa debido a su precipitación antes de incorporarse en las gotitas de grasa.

De este modo, las emulsiones grasas, al igual que la emulsión descrita anteriormente, contienen partículas que no pueden ser administradas sin que ello suponga un peligro potencial, especialmente en el caso de que la emulsión tenga una concentración más grande de carga de fármaco.

El Derwent Abstract 92-352740 (JP 042253907-A) está relacionado con una emulsión grasa que contiene una ciclosporina como fármaco, una fosfatidilcolina (lecitina), oleato sódico, aceite de soja, glicerol y agua y que está destinada a aplicarse por vía intravenosa. La emulsión grasa contiene 0,2% en peso de la ciclosporina con respecto al peso de la emulsión y 2% de ciclosporina con respecto a la grasa, por ejemplo, aceite de soja.

De acuerdo con la presente invención se proporciona una emulsión grasa que tiene, con una cantidad comparable de fármaco, una carga de excipiente, con respecto a la cantidad de grasa, de un décimo de la cantidad presente en las composiciones conocidas hasta ahora.

La emulsión grasa del estado de la técnica se obtiene a partir de todos los componentes diferentes, los cuales se mezclan en una homogeneizador a elevada presión. Puesto que se produce en una sola etapa, la misma es comparable con la emulsión de EP 0 570 829 A1 descrita anteriormente y presenta el mismo inconveniente de tender a exhibir la precipitación del ingrediente activo.

La composición de la presente invención presenta la ventaja de ser segura, se prepara poco antes de la administración, por ejemplo en unos pocos minutos o en alrededor de una hora y se formula mezclando dos unidades separadas, es decir, concentrado y emulsión grasa de placebo, los cuales son estables durante largos períodos, particularmente en ampollas, y que pueden mezclarse simplemente por inyección del concentrado en la emulsión grasa sin utilizar un homogeneizador.

De acuerdo con EP 0 317 120 A1, se transforma Amphotericin en un complejo soluble en agua, con un fosfatidilglicerol en un medio ácido, opcionalmente en presencia de fosfatidilcolina y de colesterol. En el Ejemplo representativo 1, la relación molar es de 0,4 partes de Amphotericin: 0,8 partes de diestearoil fosfatidilglicerol: 2,0 partes de fosfatidilcolina de huevo hidrogenada: 1,0 parte de colesterol (véase página 7, tabla y también la reivindicación 7). El pH es de 4,5. Las cantidades de excipiente son tan grandes que, tras la adición de una fase acuosa a este preparado farmacéutico intermedio, se forman liposomas (véase página 2, línea 5) que incorporan el fármaco. De acuerdo con la presente invención, el pH no se encuentra preferentemente en el intervalo ácido. A partir de esta mezcla farmacéutica que simplemente es un preparado intermedio, para posteriores etapas de elaboración, las cuales son diferentes de aquellas de la invención, se producen liposomas que pueden ser estabilizados por liofilización para garantizar una duración de conservación adecuada.

De acuerdo con el Ejemplo 3 de la solicitud PCT WO 88/06438, se preparan partículas coloidales del fármaco ciclosporina A, que es muy pobremente soluble en agua, junto con un estabilizantes, en una relación en peso de sustancia activa: estabilizante de 2:1 y con diámetros de alrededor de 1,0 micrómetro y, de este modo, se encuentra dentro de la relación en peso de fármaco: estabilizante del concentrado usado como un componente para la emulsión grasa según la invención. Una solución de la ciclosporina y del estabilizante en etanol absoluto y polietilenglicol 400 se inyecta en agua conteniendo dextrosa, para obtener una suspensión de partículas coloidales estabilizadas y no, como en la presente invención, en una emulsión grasa. Sin embargo, el estabilizante consistente en fosfatidilcolina no tiene actividad estabilizante de forma electrostática, puesto que es un zwitterión. El estabilizante contiene una porción de fosfolípidos insolubles que llegan a cargarse en presencia de agua en el intervalo del pH fisiológico de la sangre. Para permitir su disolución en la solución orgánica citada, se desalifica el estabilizante. Esto significa (véase página 4, líneas 28-32 de la referencia anterior) que su mitad cargada se convierte en ácido o base libre soluble y se separa su carga. La distribución de tamaños de partículas sólidas de la suspensión de ciclosporina no es muy favorable. Se ha encontrado algunas partículas que tienen un diámetro de hasta 40 micrómetros, las cuales son demasiado grandes para aplicarse por vía intravenosa.

Claims

1. Procedimiento para la preparación de una composición en emulsión que contiene rapamicina o un derivado de la misma como agente activo, cuyo procedimiento comprende la etapa de mezclar, en una emulsión grasa de placebo, un concentrado que comprende:

a) el agente activo,

c) un disolvente orgánico,

2. Procedimiento según la reivindicación 1, en donde el disolvente orgánico comprende etanol y/o propilenglicol.

3. Procedimiento según la reivindicación 1 ó 2, en donde el estabilizante es oleato sódico o POPG sódico.

4. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el agente activo comprende rapamicina, 40-O-(2-hidroxi)etil-rapamicina, 32-desoxo-rapamicina o 16-pent-2-iniloxi-32(S)-dihidro-rapamicina.

5. Un concentrado para administración intravenosa de una emulsión, que comprende:

a) rapamicina o un derivado de la misma,

c) un disolvente orgánico,

6. Un concentrado según la reivindicación 5, en donde el disolvente orgánico comprende etanol y/o propilenglicol.

7. Un concentrado según la reivindicación 5 ó 6, en donde el estabilizante comprende oleato sódico o POPG sódico.

8. Un concentrado según cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, en donde la relación en peso de agente activo a estabilizante es de 400:1 a 10:1.

9. Un concentrado según cualquiera de las reivindicaciones 5 a 8, en donde el concentrado comprende rapamicina, 40-O-(2-hidroxi)etil-rapamicina, 32-desoxo-rapamicina o 16-pent-2-iniloxi-32(S)-dihidro-rapamicina.

10. Una emulsión para administración intravenosa que comprende el concentrado según cualquiera de las reivindicaciones 5 a 9 y una emulsión grasa de placebo.

11. Un conjunto de ampollas que contienen el concentrado según cualquiera de las reivindicaciones 5 a 9 y frascos que contienen una emulsión grasa de placebo, cuyos respectivos contenidos se pueden mezclar adecuadamente para formar una emulsión lista para usar, en proporciones que satisfacen las necesidades de un paciente en relación con la cantidad requerida de agente activo de un tamaño de partícula farmacéuticamente seguro.

12. Uso de un estabilizante según cualquiera de las reivindicaciones 1, 3, 5 ó 7 para aumentar la concentración de rapamicina o un derivado de la misma en una emulsión grasa lista para usar, con respecto a la concentración que puede obtenerse con una emulsión grasa de placebo, o para acelerar la formación de una emulsión grasa lista para usar que comprende rapamicina o un derivado de la misma.