ES2273127T3 - Promotor alfa-tubulin 3-18 del maiz. - Google Patents
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Abstract
Una molécula aislada de ácido nucleico con una secuencia para un promotor capaz de iniciar la transcripción en una célula vegetal, donde dicha secuencia nucleótida se selecciona de: a) Una secuencia nucleótida que incluye la secuencia notada en SEQ ID NO: 1; b) Una secuencia nucleótida depositada como Accesión ATCC No. 207125; c) Una secuencia nucleótida que incluye al menos 40 nucleótidos contiguos de la secuencia notada en SEQ ID No. 1; d) Una secuencia nucleótida que se hibrida bajo condiciones severas a una secuencia de a), b) o c); y e) Una secuencia nucleótida que tiene al menos 70% de la identidad de la secuencia notadas en a) o b).
Description
Promotor alfa-tubulin
3-18 del maíz.
La presente invención tiene que ver con el campo
de la biología molecular vegetal, más particularmente con la
regulación de la expresión genética en las plantas.
La expresión de secuencias heteróloga de ADN en
una planta huésped depende de la presencia de un promotor que esté
unido en forma operacional y sea funcional dentro de la planta
huésped. La escogencia de la secuencia del promotor determinará
cuándo y dónde, dentro del organismo, se expresa la secuencia
heteróloga de ADN. Así, donde se desea una expresión continua a
través de las células de la planta, se utilizan promotores
constitutivos. En contraste, donde se desea una expresión genética
en respuesta a un estímulo, promotores inducibles son los elementos
regulatorios de escogencia. En cualquiera de los casos, secuencias
regulatorias adicionales corriente arriba y/o corriente abajo con
relación al núcleo de la secuencia promotora, pueden ser incluidas
en fragmentos artificiales de expresiones de vectores de
transformación con el fin de producir variados niveles de
expresiones constitutivas o inducibles de secuencias nucleótidas
heterólogas en una planta transgénica.
Con frecuencia es deseable tener la expresión
constitutiva de una secuencia de ADN a través de las células de un
organismo. Por ejemplo, la resistencia mejorada de una planta a
infecciones por patógenos presentes en el suelo y el aire puede
lograrse mediante manipulación genética del genoma de la planta con
el fin de incluir un promotor constitutivo unido en forma
operacional a un gen heterólogo que presente resistencia al
patógeno, de tal manera que las proteínas resistentes al patógeno
sean continuamente expresadas a través de los tejidos de la
planta.
En forma alternativa, puede ser deseable el
inhibir la expresión de una secuencia nativa de ADN dentro de los
tejidos de una planta con el fin de obtener un fenotipo deseado. En
este caso tal inhibición se puede llevar a cabo con la
transformación de la planta para que incluya un promotor
constitutivo unido en forma operacional a una secuencia nucleótida
antisentido, de tal forma que la expresión constitutiva de la
secuencia antisentido produzca una transcripción del ARN que
interfiera con la traducción del mARN de la secuencia ADN
nativa.
De ésta manera, el aislamiento y caracterización
de los promotores constitutivos que pueden servir como regiones
regulatorias para la expresión constitutiva de secuencias
nucleótidas heterólogas de interés son requeridos para la
manipulación genética de plantas que exhiban rasgos fenotípicos
específicos.
Se proveen composiciones y métodos para la
regulación de secuencias nucleótidas heterólogas en una planta.
La invención, por lo tanto, provee una molécula
de ácido nucleico aislada con una secuencia nucleótida para un
promotor capaz de iniciar la traducción en una célula vegetal donde
dicha secuencia nucleótida sea seleccionada de:
- a)
- una secuencia nucleótida que incluya la secuencia expuesta en SEQ ID NO: 1;
- b)
- una secuencia nucleótida depositada como adquisición ATCC No. 207125;
- c)
- una secuencia nucleótida que incluya, al menos, 40 nucleótidos contiguos de la secuencia expuesta en SEQ ID NO: 1;
- d)
- una secuencia nucleótida que se hibride, bajo condiciones estrictas, en una secuencia de a), b) o c); y
- e)
- una secuencia nucleótida que tenga, al menos, el 70% de identidad con una secuencia expuesta en a) o b).
La invención también provee un fragmento de ADN
artificial que incluye una secuencia nucleótida de la invención
unida en forma operacional a una secuencia nucleótida heteróloga de
interés.
La invención también provee un vector que
incluye el fragmento artificial de ADN de acuerdo a la
invención.
La invención también provee una célula huésped
que ha incorporado en su genoma, de una manera estable, el
fragmento artificial de ADN de la invención.
Se provee una composición que incluye una
secuencia nucleótida nueva para un promotor vegetal constitutivo
aislado del gen del maíz que codifica una
alfa-tubulina 3.
También se provee un método para expresar
constitutivamente una secuencia nucleótida heteróloga en una planta
utilizando la secuencia promotora revelada aquí. El método incluye
el transformar una célula vegetal con un vector de transformación
que incluye una secuencia nucleótida unida en forma operacional al
promotor vegetal de la presente invención y el regenerar una planta
transformada, de manera estable, a partir de la célula vegetal
transformada.
La invención también provee una célula vegetal o
planta transformada, de manera estable, con un segmento artificial
de ADN de acuerdo a la invención y una semilla de dicha planta.
La figura 1 muestra el vector plásmido PHP3953
que incluye el gen GUS unido en forma operacional al promotor
ubiquitina. Fragmentos promotores de la presente invención fueron
reclonados en éste plásmido en lugar del promotor ubiquitina y el
plásmido ADN resultante se puso a disposición para su uso en
estudios de transformación con el fin de probar la actividad del
promotor.
La composición de la presente invención es una
molécula de ácido nucleico que incluye una secuencia nucleótida
novedosa para un promotor vegetal, más particularmente el promotor
constitutivo para el gen del maíz que codifica a la
alfa-tubulina 3-18. La secuencia
nucleótida para éste promotor es dado en SEQ ID NO: 1. En
particular, la presente invención provee una molécula de ácido
nucleico aislada que incluye una secuencia nucleótida que codifica
a la secuencia de ADN depositada en una bacteria huésped como
Adquisición ATCC No. 207125, sus variantes y fragmentos de la
misma. El promotor para este gen del maíz fue aislado de la región
5' no traducida, flanqueando su respectivo sitio de inicio de la
traducción. Los métodos para aislar las regiones promotoras son
bien conocidos en el arte. El método específico utilizado para
obtener el promotor de la presente invención es descrito más
adelante en el ejemplo 1.
Un plásmido que contiene la secuencia nucleótida
promotora de la invención ha sido depositado con American Type
Culture Collection (ATCC), manassas, Virginia, y se le ha asignado
la Adquisición No. 207125. Este depósito será mantenido bajo los
términos del Tratado de Budapest sobre el Reconocimiento
Internacional de Depósitos de Microorganismos para Propósitos de
Procedimientos de Patentes.
La invención abarca una composición de ácido
nucleico aislado o substancialmente purificado. Una molécula de
ácido nucleico "aislada" o "purificada", o una porción
suya biológicamente activa, está substancialmente libre de otro
material celular, o de medio de cultivo cuando es producida mediante
técnicas recombinantes, o substancialmente libre de precursores
químicos u otros productos químicos, cuando se le sintetiza
químicamente. Preferiblemente, un ácido nucleico "aislado" es
libre de secuencias (preferiblemente de secuencias que codifican
proteínas) que flanquean de modo natural al ácido nucleico (por ej.,
secuencias localizadas en los extremos 5' y 3' del ácido nucleico)
en el ADN genómico del organismo del cual se deriva el ácido
nucleico. Por ejemplo, en varias modalidades, la molécula de ácido
nucleico aislado puede contener menos de cerca de 5 kb, 4 kb, 3 kb,
2 kb, 1 kb, 0,5 kb ó 0,1 kb de secuencias nucleótidas que en forma
natural flanquean la molécula de ácido nucleico en el ADN genómico
de la célula de la cual se deriva el ácido nucleico.
Por "promotor" se significa una región
reguladora de ADN, que usualmente incluye una caja TATA, capaz de
direccionar la ARN polimerasa II para que inicie la síntesis de
ARN en el sitio adecuado de transcripción para una secuencia
codificante en particular. Un promotor puede incluir adicionalmente
otras secuencias de reconocimiento, generalmente posicionadas
cadena arriba ó 5' respecto a la caja TATA, a las cuales se hace
referencia como elementos promotores corriente arriba, las cuales
influyen en la velocidad de iniciación de la transcripción. Es
reconocido que habiendo identificado la secuencia nucleótida para
la región promotora revelada aquí, está dentro del estado del arte
el aislar e identificar elementos reguladores adicionales en la
región 5' no traducida corriente arriba de la región promotora en
particular identificada aquí. De ésta manera la región promotora
revelada aquí puede incluir elementos reguladores corriente arriba
adicionales que confieren expresiones específicas de tejido de
cualquier secuencia nucleótida heteróloga operacionalmente unida a
la secuencia promotora revelada. Ver particularmente la Patente
Australiana No. AU-A-77751/94 y las
Patentes U.S Nos. 5`466.785 y 5`635.618.
Cuando la secuencia promotora del maíz de la
presente invención es ensamblada dentro de una secuencia artificial
de ADN de tal manera que el promotor quede operacionalmente unido a
una secuencia nucleótida heteróloga de interés, se habilita la
expresión constitutiva de la secuencia nucleótida heteróloga en las
células de una planta transformada en forma estable con ésta
secuencia artificial de ADN. Por "secuencia nucleótida
heteróloga" se entiende una secuencia que no esté ocurriendo en
forma natural con la secuencia del promotor. Mientras que ésta
secuencia nucleótida es heteróloga a la secuencia del promotor,
puede ser homóloga, o nativa, o heteróloga o foránea para la planta
huésped. Por "constitutiva" se entiende la expresión en las
células a lo largo de una planta, la mayor parte del tiempo y en la
mayoría de los tejidos.
La secuencia promotora aislada de la presente
invención puede ser clasificada como un promotor constitutivo
fuerte. Generalmente, por "promotor débil" se entiende un
promotor que conduce la expresión de una secuencia codificante a un
nivel bajo. Por "nivel bajo" se entiende niveles cercanos a,
entre aproximadamente 1/10.000 transcritos y aproximadamente
1/100.00 transcritos a aproximadamente 1/500.000 transcritos. Por
el contrario, un promotor fuerte conduce expresiones de una
secuencia codificante a un nivel alto o a cerca de, entre 1/10 de
transcritos a unos 1/100 transcritos a aproximadamente 1/1.000
transcritos.
La secuencia nucleótida para el promotor
constitutivo de la presente invención puede ser la secuencia que
ocurre en forma natural o cualquier secuencia que posea una
homología substancial. Por "homología substancial" se entiende
una secuencia que exhibe una equivalencia funcional y estructural
substancial con la secuencia nativa o de ocurrencia natural.
Cualquier diferencia natural o estructural entre secuencias
substancialmente homólogas no afecta la habilidad de la secuencia
para funcionar como promotora tal como se revela en la presente
invención. Así, cualquier secuencia que posea homología substancial
de secuencia con la secuencia del promotor constitutivo de la
presente invención va a dirigir la expresión constitutiva de una
secuencia nucleótida heteróloga unida en forma operacional. Dos
secuencias nucleótidas promotoras se consideran substancialmente
homólogas cuando presentan al menos desde cerca del 50%, 60% hasta
70%, generalmente alrededor del 80%, preferiblemente cerca del 85%,
90%, hasta el 98% homología de secuencia.
Las secuencias substancialmente homólogas de la
presente invención incluyen variantes de las secuencias reveladas,
tales como las que resultan de la mutagénesis específica puntual,
así como de secuencias sintéticamente derivadas. Los métodos para
mutagénesis y alteraciones de secuencias nucleótidas son bien
conocidos en el arte. Ver, por ejemplo, Kunkel (1985) Proc.
Natl. Acad Sci. USA 82: 488-492; Kunkel et
al. (1987) Methods Enzymol. 154:
367-382; Patente U.S No. 4'873.192; Walker et
al., eds. (1983) Techniques in Molecular Biology
(MacMillan Publishing Company, New York) y las referencias citadas
allí. De ésta forma, la secuencia nucleótida promotora de la
invención incluye ambas, la secuencia de ocurrencia natural, así
como las formas mutantes y derivadas sintéticamente. Generalmente,
las variantes de la secuencia nucleótida de la invención tendrán al
menos desde cerca del 50%, 60% hasta el 70%, generalmente al
rededor del 80%, preferiblemente desde cerca del 85%, 90% hasta el
98% de la identidad de la secuencia con relación a su respectiva
secuencia nucleótida nativa.
Los fragmentos de la secuencia nucleótida
promotora revelada aquí también están incluidos en la presente
invención. Por "fragmento" se entiende una porción de la
secuencia nucleótida promotora. Los fragmentos de una secuencia
nucleótida promotora pueden retener su actividad biológica. Así, por
ejemplo, menos de la secuencia promotora completa revelada aquí
puede ser utilizada para conducir la expresión de una secuencia
nucleótida de interés unida en forma operacional tal como una
secuencia nucleótida que codifique a una proteína heteróloga. Está
dentro del arte el determinar si tales fragmentos disminuyen los
niveles de expresión o alteran la naturaleza de la expresión, ej.,
expresión constitutiva. En forma alterna, los fragmentos de una
secuencia nucleótida promotora que son útiles como sondas de
hibridación generalmente no retienen esta actividad biológica.
Las moléculas de ácido nucleico que son
fragmentos de una secuencia nucleótida promotora constan de por lo
menos 40, 45, 50, 75 ó 100 nucleótidos, o hasta el número de
nucleótidos presentes en una secuencia nucleótida promotora
completa revelada aquí (p. ej., 166 para SEQ ID NO: 1).
Generalmente, los fragmentos de una secuencia promotora que
retienen su actividad biológica constan de al menos 40 nucleótidos
contiguos, preferiblemente de al menos 50 nucleótidos contiguos,
más preferiblemente de al menos 75 nucleótidos contiguos, aún más
preferiblemente de al menos 100 nucleótidos contiguos de la
secuencia nucleótida promotora contigua revelada aquí. Las
longitudes de fragmento preferidas dependen del objetivo y variarán
también dependiendo de la secuencia
promotora.
promotora.
Las secuencias nucleótidas de tales fragmentos
usualmente incluirán la secuencia de reconocimiento TATA de la
secuencia promotora. Tales fragmentos pueden ser obtenidos por uso
de enzimas de restricción para romper la secuencia nucleótida
promotora que ocurre naturalmente y que es revelada aquí;
sintetizando una secuencia nucleótida a partir de la secuencia de
ocurrencia natural de la secuencia de ADN promotora.; o puede ser
obtenida a través del uso de tecnología PCR. Ver, en particular,
Mullis et al. (1987) Methods Enzymol. 155:
335-350, y Erlich, ed. (1989) PCR Technology
(Stockton Press, New York). Variantes de estos fragmentos
promotores, tales como aquellos resultantes de mutagénesis dirigida
puntual, son abarcadas por las composiciones de la presente
invención.
La secuencia nucleótida promotora revelada puede
ser utilizada para aislar secuencias promotoras homólogas en otras
especies vegetales. Métodos para la hibridación de secuencias de
ácidos nucleicos se encuentran fácilmente disponibles en el arte.
Secuencias promotoras de otras plantas pueden ser aisladas de
acuerdo a técnicas bien conocidas basadas en sus homologías de
secuencia con relación a la secuencia promotora establecida aquí. En
estas técnicas parte o toda la secuencia nucleótida conocida se usa
como una sonda que se hibrida selectivamente a otras secuencias
nucleótidas promotoras presentes en una población de fragmentos de
ADN genómico clonados o fragmentos cADN (ej., librerías genómicas o
cADN) de un organismo seleccionado.
Para obtener otras secuencias promotoras
homólogas, se puede utilizar la secuencia nucleótida promotora
completa o porciones de la misma como sondas capaces de hibridarse
específicamente a secuencias promotoras correspondientes. Con el
fin de lograr una hibridación específica bajo una variedad de
condiciones, tales sondas incluyen secuencias que son únicas y que
preferiblemente se componen de al menos unos 10 nucleótidos en
longitud, y lo más preferiblemente de al menos 20 nucleótidos en
longitud. Tales sondas pueden ser usadas para amplificar las
secuencias promotoras de interés a partir de un organismo
seleccionado mediante el conocido proceso de la reacción de la
cadena de polimerasa (PCR). Esta técnica puede ser empleada para
aislar secuencias promotoras adicionales a partir de un organismo
deseado o como un ensayo diagnóstico para determinar la presencia de
secuencias promotoras en un organismo.
Tales técnicas incluyen hibridación preliminar
de librerías de ADN analizadas en placa (ya sea placas o colonias;
ver, por ej., Sambrook et al. (1989) Molecular Cloning: A
Laboratory Manual (2d ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press,
Plainview, New York) y amplificación por PCR utilizando
oligonucleótidos cebadores (ver, por ej., Innis et al., eds.
(1990) PCR Protocols, a Guide to Methods and Applications.
Academic Press. New York).
Por ejemplo, la hibridación de tales secuencias
puede efectuarse bajo condiciones de reducida restricción,
restricción mediana o aún condiciones restringidas (ej., condiciones
representadas por un lavado severo con formamida
35-40% con solución de Denhardt 5x, SDS 0,5% y SSPE
1x a 37ºC; condiciones representadas por un lavado severo con
formamida 40-45% con solución de Denhardt 5x, SDS
0,5% y SSPE 1x a 42ºC; y condiciones representadas por un lavado
severo con formamida 50% con solución de Denhardt 5x, SDS 0,5% y
SSPE 1x a 42ºC respectivamente) a ADN para la secuencia promotora
revelada aquí en un ensayo estándar de hibridación. Ver Sambrook
et al. (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual
(2d ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Plainview, New
York). En general, las secuencias homólogas que son secuencias
promotoras y se hibridan a la secuencia promotora revelada aquí,
serán al menos 70% homólogas, y aún 80%, 85%, 90%, 95% homólogas o
más con relación a la secuencia revelada. Esto es, la similitud de
secuencia de las secuencias puede variar, compartiendo al menos
cerca al 70%, y aún cerca al 80%, 85%, 90%, 95%, 98% de la similitud
de secuencia.
Los siguientes términos son empleados para
describir las relaciones de secuencia entre dos o más ácidos
nucléicos: (a) "secuencia de referencia", (b) "ventana de
comparación", (c) "identidad de secuencia", (d)
"porcentaje de identidad de secuencia" y (e) "identidad
substancial".
(a) Como se utiliza aquí, "secuencia de
referencia" es una secuencia definida usada como base para la
comparación de secuencias. Una secuencia de refencia puede ser
subconjunto de una secuencia completa especificada o la secuencia
completa; por ejemplo, como un segmento de una secuencia completa de
cADN o secuencia de gen, o como la secuencia completa cADN o
secuencia de gen.
(b) como se utiliza aquí, "ventana de
comparación" hace referencia a un segmento contiguo y
especificado de una secuencia polinucleótida, donde la secuencia
polinucleótida en la ventana de comparación puede incluir adiciones
o deleciones (ej., gaps) comparado con la secuencia de referencia
(la cual no incluye adiciones o deleciones) para alineación óptima
de las dos secuencias. Generalmente, la ventana de comparación tiene
una longitud de al menos 20 nucleótidos contiguos y, opcionalmente,
30, 40, 50, 100 o más. Los entendidos en el arte comprenden que con
el fin de evitar una alta similitud con una secuencia de referencia
debido a una inclusión de gaps en la secuencia polinucleótida,
generalmente se introduce una penalización de gap y se resta del
número de coincidencias.
Métodos de alineación de secuencias son bien
conocidos en el arte. Una alineación óptima de las secuencias que
se van a comparar puede ser efectuada mediante el algoritmo de
homología local de Smith et al. (1981) Adv. Appl.
Math. 2:482; mediante el algoritmo de alineación de Needleman
et al (1970) J. Mol. Biol. 48: 443; mediante el
método de búsqueda de similitudes de Pearson et al.(1988)
Proc. Natl. Acad. Sci. 85: 2444; mediante las
implementaciones computarizadas de estos algoritmos, incluyendo pero
no limitadas a: CLUSTAL en el programa PC/Gene de Intelligenetics,
Mountain View, California; GAP, BESTFIT, BLAST y TFASTA en el
paquete Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Computer
Group (GCG), 575 Science Drive, Madison, Wisconsin; el programa
CLUSTAL esta bien descrito por Higgins et al. (1988)
Gene 73: 237-244 (1988); Higgins et
al. (1988) Gene 73: 237-244 (1988);
Higgins et al. (1989) CABIOS 5:
151-153; Corpet et al. (1988) Nuc. Acids
Res. 16: 10881-90: Huang et al. (1992)
Computer Applications in the Biosciences 8:
155-65, y Person et al. (1994) Meth. Mol.
Biol. 24: 307-331; Los métodos preferidos de
alineación por computador también incluyen los algoritmos BLASTP,
BLASTN y BLASTX (ver Altschul et al. (1990) J. Mol.
Biol. 215: 403-410). La alineación también es a
menudo realizada por inspección y alineación manual.
(c) Como se utiliza aquí, "identidad de
secuencia" o "identidad" en el contexto de dos secuencias de
ácido nucleico, hace referencia a los residuos en las dos
secuencias que son iguales cuando se han alineado con la máxima
correspondencia sobre una ventana de comparación especificada.
(d) Como se utiliza aquí, "porcentaje de
identidad de secuencia" significa el valor determinado por
comparación de dos secuencias óptimamente alineadas sobre una
ventana de comparación, donde la porción de la secuencia
polinucleótida en la ventana de comparación puede incluir adiciones
o deleciones (ej., gaps) con relación a la secuencia de referencia
(que no incluye adiciones o eliminaciones) para una alineación
óptima de las dos secuencias. El porcentaje es calculado
determinando el número de posiciones en las cuales la base de ácido
nucleico ocurre en ambas secuencias con el fin de obtener el número
de posiciones de coincidencia, dividiendo el número de
coincidencias por el número total de posiciones en la ventana de
comparación, y multiplicando el resultado por 100 para obtener el
porcentaje de identidad de secuencia.
(e) (i) El término "identidad substancial"
de las secuencias polinucleótidas significa que un polinucleótido
incluye una secuencia que tiene al menos el 70% de identidad de
secuencia, preferiblemente al menos 80%, más preferiblemente al
menos 90% y, lo más preferiblemente, al menos 95%, comparado con una
secuencia de referencia que utiliza uno de los programas de
alineación descritos empleando parámetros estándares.
Otra indicación de que las secuencias
nucleótidas son substancialmente idénticas es si dos moléculas se
hibridan entre sí bajo condiciones restringidas. Generalmente las
condiciones restringidas son seleccionadas para que sean
aproximadamente desde 5ºC hasta cerca de 20ºC por debajo del punto
térmico de fusión (T_{m}) de la secuencia específica a una
fuerza iónica y pH definidos. El T_{m} es la temperatura (bajo
fuerza iónica y pH definidos) a la cual el 50% de la secuencia
objetivo se hibrida con una sonda perfectamente coincidente.
Típicamente, las condiciones severas de lavado son aquellas en las
cuales la concentración de la sal es de al rededor de 0,02 molar a
pH 7 y la temperatura es, al menos, aproximadamente 50, 55 o
60ºC.
La secuencia nucleótida para el promotor
constitutivo revelado en la presente invención, así como una
variante o fragmento suyo, es útil en la manipulación genética de
cualquier planta cuando se ensambla dentro de un fragmento
artificial de ADN, de tal forma que la secuencia promotora este
unida en forma operacional con una secuencia nucleótida heteróloga
cuya expresión constitutiva se va a controlar con el fin de lograr
una respuesta fenotípica deseada. Por "unido en forma
operacional" se significa que la trascripción o traducción de la
secuencia nucleótida heteróloga esta bajo la influencia de la
secuencia promotora. De esta manera, la secuencia nucleótida para
el promotor de la invención se provee en casetes de expresión junto
con secuencias nucleótidas heterólogas para expresión en la planta
de interés. Se reconoce que la secuencia promotora de la invención
puede también ser usada con su secuencia codificante nativa con el
fin de aumentar o disminuir la expresión de la secuencia codificante
nativa, resultando de ahí en un cambio de fenotipo en la planta
transformada.
Tales casetes de expresión van a incluir una
región de iniciación de la traducción la cual incluye la secuencia
nucleótida promotora de la presente invención o una variante o
fragmento suyo, unida en forma operacional a la secuencia
nucleótida heteróloga cuya expresión va a ser controlada por el
promotor constitutivo revelado aquí. Tal casete de expresión es
provisto con una pluralidad de sitios de restricción para la
inserción de la secuencia nucleótida que estará bajo la regulación
de trascripción de las regiones regulatorias. El casete de
expresión puede contener adicionalmente marcadores genéticos
seleccionables.
Con el fin de aumentar los niveles de
trascripción, se pueden utilizar potenciadores en combinación con la
región promotora de la invención. Los potenciadores son secuencias
nucleótidas que actúan para incrementar la expresión de una región
promotora. Los potenciadores son conocidos en el arte e incluyen la
región potenciadora SV40, el elemento potenciador 35S y los
afines.
El casete trascripcional incluirá, en la
dirección 5'a 3'de la trascripción, una región de iniciación
trascripcional y de traducción, una secuencia nucleótida heteróloga
de interés y una región terminal trascripcional y de traducción
funcional en las plantas. La región terminal puede ser nativa con la
región de iniciación trascripcional, incluyendo la secuencia
nucleótida promotora de la presente invención, puede ser nativa con
la secuencia de ADN de interés o puede ser derivada de otra fuente.
Regiones de terminación convenientes son disponibles a partir del
plásmido Ti del A. tumefaciens, tales como las regiones
terminales octopine sintasa y nopalin sintasa. Ver también
Guerineau et al. (1991) Mol. Gen. Genet. 262:
141-144; Proudfoot (1991) Cell 64:
671-674; Sanfacon et al. (1991) Genes
Dev. 5: 141-149; Mogen et al. (1990)
Plant Cell 2: 1261-1272; Munroe et al.
(1990) Gene 91: 151-158; Ballas et
al. (1989) Nuc. Acids Res. 15:
9627-9639.
El casete de expresión que incluye la secuencia
promotora de la presente invención, unida en forma operacional a
una secuencia nucleótida heteróloga, también puede contener al menos
una secuencia nucleótida adicional para que un gen sea
cotransformado en el organismo. En forma alternativa, la(s)
secuencia(s) adicional(es) pueden proveerse en otro
casete de expresión.
Donde sea apropiado, la secuencia nucleótida
heteróloga cuya expresión va a estar bajo el control de la secuencia
promotora de la presente invención, y cualquier secuencia(s)
adicional(es), puede ser optimizada para aumentar la
expresión en la planta transformada. Esto es, éstas secuencias
nucleótidas pueden ser sintetizadas utilizando codones preferidos
por las plantas con el fin de mejorar la expresión. En el arte hay
disponibles métodos para sintetizar secuencias nucleótidas
preferidas por las plantas. Ver, por ejemplo, U.S. Patent Nos.
5,380,831 y 5,436,391, y Murray et al. (1989) Nuc. Acids
Res. 17:477-498.
Se sabe que modificaciones adicionales a las
secuencias mejoran la expresión del gen en un huésped celular.
Estas incluyen eliminación de secuencias que codifican señales
espurias de poliadenilación, señales de sitio de empalme
exón-intrón, repeticiones tipo transposón y otras
secuencias bien caracterizadas que pueden ser dañinas a la
expresión génica. El contenido G-C de las secuencias
nucleótidas heterólogas puede ser ajustado a niveles promedio para
un huésped celular dado, como ha sido calculado por referencia a
genes conocidos expresados en la célula huésped. Cuando sea
posible, la secuencia es modificada para evitar estructuras
secundarias predichas de mARN en forma de horquilla.
Los casetes de expresión pueden contener
adicionalmente secuencias líderes 5' en la secuencia artificial del
casete de expresión. Tales secuencias líderes pueden actuar para
mejorar la traducción. Los lideres traductores se conocen en el
arte e incluyen: líderes picornavirus, por ejemplo el líder EMCV
(Región 5' encefalomiocarditis no codificante)
(Elroy-Stein et al. (1989) Proc. Nat.
Acad. Sci. USA 86:6126-6130); líderes potivirus,
por ejemplo, líder TEV (virus jaspeado del tabaco) (Allison et
al. (1986)); leader MDMV (virus del mosaico enano del maíz)
(Virology 154:9-20); proteína enlazante de
cadena pesada de la inmunoglobulina humana (BiP) (Macejak y Samow
(1991) Nature 353:90-94); líder no traducido
de la proteína de la cápside mARN del virus del mosaico de la
alfalfa (AMV RNA 4) (Jobling y Gehrke (1987) Nature 325:
622-625); líder virus del mosaico del tabaco (TMV)
(Gallie et al. (1989) Molecular Biology of RNA,
páginas 237-256); y líder virus del moteado
clorótico del maíz (MCMV) (Lommet et al. (1991) Virology 81:
382-385). Ver también Della-Cioppa
et al. (1987) Plant Physiology 84:
965-968. Se pueden utilizar también otros métodos
conocidos para mejorar la traducción y/o estabilidad del mARN, por
ejemplo intrónes y afines.
En aquellos casos donde es deseable tener en
forma constitutiva el producto expresado de la secuencia nucleótida
dirigido a un organelo en particular, tal como el cloroplasto o la
mitocondria, o secretado en la superficie de la célula o
extracelularmente, el casete de expresión puede incluir
adicionalmente una secuencia codificante para un péptido de
tránsito. Tales péptidos de tránsito son bien conocidos en el arte e
incluyen, pero no están limitados a, el péptido de tránsito para la
proteína transportadora del acilo, la pequeña subunidad del
RUBISCO, sintasa vegetal EPSP y las afines.
Al preparar los casetes de expresión se puede
manipular los diversos fragmentos de ADN de tal forma que se provea
las secuencias de ADN en la orientación adecuada y, como es debido,
en el marco de lectura adecuado. Hacia este fin se puede emplear
adaptadores o sitios de unión para unir los fragmentos de ADN u
otras manipulaciones pueden involucrarse con el fin de proveer
sitios convenientes de restricción, remoción de ADN superfluo,
remoción de sitios de restricción o afines. Para este propósito se
puede involucrar mutagénesis in vitro, reparación de
sebadores, restricción, hibridación, resubstituciones, por ejemplo,
transiciones y transversiones.
El casete de expresión que incluye la secuencia
promotora de la presente invención unida en forma operacional a una
secuencia nucleótida heteróloga de interés puede ser utilizado para
transformar cualquier planta. De ésta manera se puede obtener
plantas genéticamente modificadas, células vegetales, tejidos
vegetales, semillas y afines. Los protocolos de transformación
pueden variar dependiendo del tipo de planta o célula vegetal, esto
es, monocotiledónea o dicotiledónea, escogida para la
transformación. Los métodos adecuados para transformar células
vegetales incluyen microinyección (Crossway et al. (1986)
Biotechniques 4: 320-334), electroporación
(Riggs et al. (1986) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83:
5602-5606), transformación mediada por agrobacterium
(Hinchee et al. (1988) Biotechnology 6:
915-921), transferencia directa de genes (Paszkowski
et al. (1984) EMBO J. 3: 2717-2722) y
aceleración balística de partículas (ver por ejemplo, Sanford et
al. U.S. Patent 4,945.050; Tomes et al. (1995) en
Plant Cell, Tissue, and Organ Culture: Fundamental Methods,
ed. Gamborg y Phillips (Springer-Verlag, Berlín); y
McCabe et al. (1988) Biotechnology 6:
923-926). Ver también Weissinger et al.
(1988) Annual Rev. Genet. 22: 421-477;
Sanford et al. (1987) Particulate Science and
Technology 5: 27-37 (cebolla); Christou et
al. (1988) Plant Physiol. 87: 671-674
(semilla de soya); McCabe et al. (1988) Biol
Technology 6: 923-926 (semilla de soya); Datta
et al. (1990) Biotechnology 8: 736-740
(arroz); Klein et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci.
USA 85: 4305-4309 (maiz); Klein et al. (1988)
Biotechnology 6: 559-563 (arroz); Klein et
al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:
4305-4309 (maiz); Klein et al. (1988)
Biotechnology 6: 559-563 (maiz); Klein et
al. (1988) Plant Physiol. 91: 440-444
(maiz); Fromm et al. (1990) Biotechnology 8:
833-839; Hooydaas-Van Slogteren and
Hooykaas (1984) Nature (Londres) 311:
763-764; Bytebier et al. (1987) Proc.
Natl. Acad. Sci. USA 84: 5345-5349 (liliacea);
De West et al. (1985) en The Experimental Manipulation of
Ovule Tissues, ed. G. P. Chapman et al. (Longman, New
York), pp. 197-209 (polen); Kaeppler et al.
(1990) Plant Cell Reports 9: 415-418; y
Kaeppler et al. (1992) Theor. Appl. Genet. 84:
560-566 (transformación mediada por Whiskers);
D'Halluin et al. (1992) Plant Cell 4:
1495-1505 (electroporación); Li et al. (1993)
Plant Cell Reports 12: 250-255 y Christou y
Ford (1995) Annals of Botany. 75: 407-413
(arroz); Osjoda et al. (1996) Nature Biotechnology 14:
745-750 (maíz vía Agrobacterium tumefaciens).
Las células que han sido transformadas pueden
ser crecidas en plantas en concordancia con vías convencionales.
Ver por ejemplo, McCormick et al. (1986) Plant Cell
Reports 5: 81-84. Estas plantas, entonces,
pueden ser cultivadas, y polinizadas, ya sea, con la misma cepa o
con cepas diferentes, y el híbrido resultante puede tener la
expresión constitutiva de la característica fenotípica deseable
identificada. Se puede cultivar dos o más generaciones para
asegurar que la expresión constitutiva de la característica
fenotípica deseable se mantiene y hereda en forma estable y
entonces se ha logrado semillas cultivadas para asegurar la
expresión constitutiva de la característica fenotípica
deseable.
La secuencia nucleótida promotora y los métodos
revelados aquí son útiles en la regulación de la expresión
constitutiva de cualquier secuencia nucleótida constitutiva
heteróloga en una planta huésped con el fin de variar el fenotipo
de una planta. Varios cambios en el fenotipo son de interés
incluyendo la modificación de la composición de ácidos grasos en
una planta, la alteración del contenido de aminoácidos de una
planta, la alteración del mecanismo de defensa contra patógenos de
una planta, y los similares. Estos resultados pueden ser obtenidos
suministrando la expresión de productos heterólogos o la expresión
aumentada de productos endógenos en plantas. En forma alternativa,
los resultados pueden ser obtenidos suministrando una reducción de
la expresión de uno o más productos endógenos, particularmente
enzimas o cofactores en la planta. Estos cambios dan como resultado
una variación en el fenotipo de la planta transformada.
Los genes de interés son reflectivos a los
mercados comerciales y a los intereses de aquellos involucrados en
el desarrollo de los cultivos. Los cultivos y mercados de interés
varían y, a medida que las naciones en desarrollo abren mercados
mundiales, nuevos cultivos y tecnologías también van a emerger.
Adicionalmente, a medida que nuestra comprensión de las tendencias
agrícolas y características tales como producción y heterosis
aumenta, la variedad de genes para transformación variará
igualmente. Las categorías generales de genes de interés incluyen,
por ejemplo, aquellos genes involucrados en la información, tales
como dedos de cinc, aquellos involucrados en la comunicación, tales
como quinasas y aquellos involucrados en la manutención de la casa
tales como las proteínas de choque térmico. Categorías más
específicas de transgenes, por ejemplo, incluyen genes que
codifican importantes características agronómicas, resistencia a los
insectos, resistencia a las enfermedades, resistencia a los
herbicidas, esterilidad, características de grano y productos
comerciales. Genes de interés incluyen, generalmente, aquellos
involucrados en el metabolismo de los aceites, almidón,
carbohidratos o nutrientes así como aquellos que afectan el tamaño
del grano, carga de sacarosa y similares.
Características agronómicas importantes como
contenido de aceite, almidón y proteína pueden ser alteradas
genéticamente en adición a la utilización de los métodos
tradicionales de cultivo. Las modificaciones incluyen contenido
incrementado de ácido oleico, aceites saturados e insaturados,
niveles incrementados de lisina y azufre, suministro de aminoácidos
esenciales y también la modificación del almidón. En la U.S. Patent
Application Serial Nos. 08/838,763, solicitada el 10 de abril de
1997, se describen modificaciones de la proteína hordotionina, de
donde se deriva la WO 94/16078 publicada el 21 de julio de 1994; la
08/824,379 solicitada el 26 de marzo de 1997, de la cual se deriva
la WO 96/38562, publicada el 5 de diciembre de 1996; la 08/824,382
solicitada el 26 de marzo de 1997 de la cual se deriva la WO
96/38563, publicada el 5 de diciembre de 1996 y la patente U.S.
No. 5,703,409. Otro ejemplo es la proteína rica en lisina y/o azufre
codificada por la albúmina 2S de la semilla de soya descrita en
U.S. Serial No. 08/618,911 Solicitada el 20 de marzo de 1996 de la
cual se deriva la WO 97/35023, publicada el 25 de septiembre de
1997; y el inhibidor quimotripsina de la cebada, Williamson et
al. (1987) Eur. J. Biochem. 165:
99-106.
Se puede hacer derivaciones de las secuencias
codificantes por mutagénesis dirigida de sitio para aumentar el
nivel de aminoácidos preseleccionados en el polipéptido codificado.
Por ejemplo, el gen que codifica el polipéptido alto de la lisina
en los cereales (BHL) se deriva del inhibidor de la quimotripsina en
los cereales, PCT/US97/20441, solicitada el 31 de octubre de 1997.
Otras proteínas incluyen proteínas vegetales ricas en metionina
tales como las obtenidas de la semilla de girasol (Lilley et
al. (1989) Proceedings of the World Congress on Vegetable
Protein Utilization in Human Foods and Animal Feedsuffs, ed.
Applewhite (American Oil Chemists Society, Champaign, Illinois, pp.
497-502); el maíz (Pedersen et al. (1986)
J. Biol. Chem. 261: 6279; Kirihara et al. (1988)
Gene 71: 359) y arroz (Musumura et al. (1989) Plant
Mol. Biol. 12: 123). Otros genes de importancia agronómica
codifican al látex, Floury 2, factores de crecimiento, factores de
almacenamiento de semilla y factores de transcripción.
Los genes con resistencia a los insectos pueden
codificar resistencia a plagas que tienen gran dispersión tales
como el gusano de la raíz, el gusano gris, la oruga taladradora del
maíz y similares. Tales genes incluyen, por ejemplo los genes de la
proteína tóxica Bacillus thuringiensis (U.S. Patent Nos.
5,366,892; 5,747,450; 5,737,514; 5,723,756; 5,593,881; Geiser et
al. (1986) Gene 48: 109); lectinas (Van Damme et
al. (1994) Plant Mol. Biol. 24: 825) y las
similares.
Los genes que codifican resistencia a
enfermedades incluyen genes de detoxificación tales como contra
fumonosin (U.S. Patent Application Serial No. 08/484,815,
solicitada el 7 de junio de 1995 de la cual se deriva la WO
96/06175 publicada el 29 de febrero de 1996); avirulencia (avr) y
genes con resistencia a enfermedades (R) (Jones et al.
(1994) Science 266: 789; Martin et al. (1993)
Science 262: 1432; Mindrinos et al. (1994) Cell
78: 1089; y los afines.
Las características de resistencia a herbicidas
pueden incluir genes que codifican para resistencia a los
herbicidas que actúan para inhibir la acción de la acetolactato
sintasa (ALS), en particular los herbicidas tipo sulfonilurea (ej.
el gen de la acetolactato sintasa (ALS) contiene mutaciones que
conducen a dicha resistencia, en particular las mutaciones S4 y/o
Hra), genes que codifican para la resistencia a herbicidas que
actúan para inhibir la acción de la glutamina sintasa tales como el
fosfinotricin o basta (ej. el gen de barra) u otros genes similares
conocidos en el arte. El gen de barra codifica resistencia al
herbicida basta, el gen nptll codifica resistencia a los
antibióticos kanamicina y geneticina, y el gen ALS codifica
resistencia al herbicida clorsulfuron.
Los genes de la esterilidad también pueden ser
codificados en un casete de expresión y proveer una alternativa al
despenachado físico. Ejemplos de genes utilizados de estas maneras
incluyen los genes con preferencia por tejidos masculinos y genes
con fenotipos de esterilidad masculina tales como el QM descrito en
la Patente U.S. No. 5,583,210. Otros genes incluyen quinasas y
aquellos que codifican compuestos tóxicos para, bien sea, el
desarrollo gametofítico masculino o femenino.
La calidad de grano se refleja en
características tales como niveles y tipos de aceites, saturados e
insaturados, calidad y cantidad de aminoácidos esenciales y niveles
de celulosa. En el maíz, proteínas modificadas de hordotionina,
descritas en las patentes U.S. Patent Application Serial Nos.
08/838,763, solicitada el 10 de abril de 1997, de la cual se deriva
la WO 94/16078, publicada el 21 de julio de 1994; la 08/824,379,
solicitada el 26 de marzo de 1997, de la cual se deriva la WO
96/38562, publicada el 5 de diciembre de 1996; la 08/824,382,
solicitada el 26 de marzo de 1997, de la cual se deriva la WO
96/38562, publicada en diciembre 5, 1996; de la cual se deriva la
WO 96/38563, publicada el 5 de diciembre de 1996 y la patente U.S.
Patent No. 5,703,409 expedida el 30 de diciembre de 1997, proveen
descripciones de modificaciones de proteínas para propósitos
deseados.
Las características comerciales también pueden
ser codificadas sobre un gene o genes que pudieran incrementar, por
ejemplo, el almidón para la producción de etanol o proveer
expresiones para proteínas. Otro uso comercial importante de las
plantas transformadas es la producción de polímeros y bioplásticos
tales como los descritos en la patente U.S. Patent No. 5,602,321
emitida el 11 de febrero de 1997. Genes tales como la
B-cetotiolasa, PHBase (polihidroxibutirato sintasa)
y acetoacetil-CoA reductasa (ver Schubert et
al. (1988) J. Bacteriol. 170: 5837-5847)
facilitan la expresión de los polihidroxialcanoatos (PHAs).
Los productos exógenos incluyen enzimas
vegetales y productos así como aquellos de otras fuentes incluyendo
los procariotes y otros eucariotes. Tales productos incluyen
enzimas, cofactores, hormonas y afines. Los niveles de proteínas,
particularmente las proteínas modificadas que tienen distribución
mejorada de aminoácidos con el fin de mejorar el valor nutritivo de
la planta, pueden ser incrementados. Esto se logra mediante la
expresión de tales proteínas que tienen contenido mejorado de
aminoácidos.
Así, la secuencia nucleótida heteróloga unida en
forma operable al promotor constitutivo revelado aquí puede ser un
gen estructural que codifica una proteína de interés. Ejemplos de
tales genes heterólogos incluyen, pero no están limitados a, genes
que codifican proteínas que confieren resistencia a estrés abiótico
como sequía, temperatura, salinidad y toxinas como pesticidas y
herbicidas, o a estrés biótico como ataque por hongos, virus,
bacterias, insectos y nemátodos, y desarrollo de enfermedades
asociadas con estos organismos.
Alternativamente, la secuencia nucleótida
heteróloga unida en forma operacional al promotor constitutivo
revelado aquí puede ser una secuencia antisentido para un gen
escogido. Por "secuencia nucleótida de ADN antisentido" se
significa una secuencia que está en orientación inversa a la
orientación normal 5' a 3' de la secuencia nucleótida. Cuando se
suministra a una célula vegetal, la expresión de la secuencia ADN
antisentido previene la expresión normal de la secuencia nucleótida
de ADN para el gen escogido. La secuencia nucleótida antisentido
codifica una secuencia artificial ARN que es complementario a, y
capaz de hibridarse al ARN mensajero endógeno (mARN) producido por
la transcripción de la secuencia nucleótida de ADN para el gen
escogido. En este caso, la producción de una proteína nativa
codificada por el gen escogido es inhibida para lograr una respuesta
fenotípica deseable. Así, la secuencia promotora revelada aquí
puede estar unida en forma operativa a las secuencias ADN
antisentido para reducir o inhibir la expresión de una proteína
nativa en la planta.
Los siguientes ejemplos se ofrecen a modo de
ilustración y no a modo de limitación.
La región promotora para el gen del maíz que
codifica la alfa-tubulina 3-18 fue
aislada de plantas de maíz y clonada. Este gen fue seleccionado
como una fuente de un promotor constitutivo basado en la expresión
desarrolladora y espacial de su producto génico. El método para su
aislamiento se describe abajo.
Las alfa-tubulinas juegan un
papel clave en el citoesqueleto de una planta, contribuyendo a la
formación de microtubulos. En el maíz estas proteínas están
codificadas por una familia de genes. Generalmente, estos genes
están cosntitutivamente expresados en todos los tejidos
merismáticos, aunque son expresados preferiblemente en ciertos
tejidos (ver Montoliu et al. (1989) Plant Mol. Biol.
14: 1-15; Montoliu et al (1990) Gene
94: 201.207). La novedosa secuencia promotora para un gen del maíz
que codifica a la alfa-tubulina es tratada en SEQ ID
NO: 1.
El procedimiento para el aislamiento del
promotor se describe en el Manual del Usuario del kit GenomeWalker
vendido por Clontech Laboratories, Inc., Palo Alto, California. El
ADN genómico de la línea del maíz A63 se extrajo moliendo en
nitrógeno líquido hojas de semillero de 10 días y el ADN fue
preparado como lo describen Chen y Dellaporta (1994) en The
Maize Handbook, ed. Freeling y Walbot
(Springer-Verlag, Berlín). Se adicionó RNasa A a 10
\mug/ml y luego se incubó a 37ºC durante 1 hr. El ADN fue entonces
extraído una vez con fenol-cloroformo, luego
cloroformo, luego etanol, fue precipitado y resuspendido en TE (10
mM Tris pH 8,0, 1 mM EDTA). El ADN fue entonces utilizado
exactamente como se describe en el Manual del Usuario del kit
GenomeWalker (Clontech PT3042-1 versión PR68687).
Brevemente, el ADN fue digerido en forma separada con enzimas de
restricción Dral, EcoRV, PvuII, ScaI y StuI, todas con cortadores
de punta roma. Los adaptadores GenomeWalker fueron entonces unidos
a los extremos del ADN restringido. Al ADN resultante se le refiere
como DL1-DL5, respectiva-
mente.
mente.
Para el aislamiento de la región promotora
específica, se designaron dos cebadores específicos del gen que no
se superponen (27 bp en longitud) de las secuencias de ESTs
abundantes en la base de datos Pioneer/HGS. Los cebadores fueron
designados para amplificar la región corriente arriba de la
secuencia codificante, esto es, la región 5'no traducida y la
región promotora del gen. Las secuencias de los cebadores se dan más
adelante. La primer ronda de PCR se realizó sobre cada muestra de
ADN (DL1-5) con primer Clontech AP1 (secuencia
5'-gtaatacgactcactatagggc-3'; SEQ
ID NO: 2) y el cebador de gen específico (gsp) 1 con la siguiente
secuencia:
| Secuencia alfa-tubulina gsp1: | 5'-ggtcttgtcaccgggcatctgaccatc-3' | (SEQ ID NO: 3). |
El PCR se realizó en un termociclador modelo
PTC-100 con HotBonnet de MJ Research (Watertown,
Massachusetts) utilizando reactivos suministrados con el kit
GenomeWalker. Se utilizaron los siguientes parámetros de ciclo: 7
ciclos de 94ºC durante 2 seg, luego 72ºC durante 3 min, seguido por
32 ciclos de 94ºC durante 2 seg y 67ºC durante 3 minutos.
Finalmente, las muestras se mantuvieron a 67ºC durante 4 min, luego
a 4ºC hasta posterior análisis.
Tal como se describe en el Manual del Usuario,
el ADN de la primera ronda de PCR fue entonces diluido y utilizado
como una plantilla en una segunda ronda de PCR usando cebador
Clontech AP2 (secuencia
5'-actatagggcacgcgtggt-3'; SEQ ID
NO: 4) y cebador de gen específico (gsp)2 con la siguiente
secuencia:
| Secuencia alfa-tubulina 3 gsp2: | 5'-cccagcacgctttccgacctggatac-3' | (SEQ ID NO: 5). |
Los parámetros del ciclo para la segunda ronda
fueron: 5 ciclos de 94ºC durante 2 seg, luego 72ºC durante 3 min,
seguido por 20 ciclos de 94ºC durante 2 seg y 67ºC durante 3 min.
Finalmente, las muestras se mantuvieron a 67ºC durante 4 min y
luego se mantuvieron a 4ºC.
Aproximadamente 10 \mul de cada reacción
fueron corridos en un gel agarosa 0,8%, y se eliminaron bandas
(usualmente de 500 bp o más largas), se purificaron con el kit
Sephaglas BandPrep (Pharmacia, Piscataway, New Jersey) y clonadas
en el vector TA pCR2.1 (Invitrogen, San Diego, California). Se
secuenciaron los clones para verificación y luego se diluyó el
mini-prep ADN 1:30 en agua y 1 \mul se amplificó
con cebador de gene específico (gsp)3 (secuencia más
adelante) y el cebador Clontech AP2 con los siguientes parámetros de
ciclo: cinco ciclos de 94ºC durante 2 seg, 46ºC durante 30 seg, 72ºC
durante min, seguido de 20 ciclos de 94ºC durante 2 seg, 67ºC
durante 3 min, luego 67ºC durante 4 min y se mantuvo a 4ºC.
| Secuencia alfa-tubulina gsp3: | 5'-gaccatggtgtcgtgtggatccggtgttgttgaacg-3' | (SEQ ID NO: 6). |
Diez \mul del ADN resultante amplificado
fueron corridos en un gel de agarosa 0,8%, se purificaron con
Sephaglas y se clonaron en el vector PCR2.1 TA. La secuencia final
fue determinada sobre los plásmidos resultantes.
Un ensayo de expresión de gen transciente fue
utilizado para probar la actividad promotora del ADN clonado. El
promotor fue reclonado en el plásmido PHP3953 (Figura 1), digerido
con BGlII y SphI o con BglII y PvuII con el fin de remover al
promotor ubiquitina. El nuevo fragmento promotor fue insertado en
lugar del promotor ubiquitina de tal forma que la región 5' no
traducida de la ubiquitina y el intrón estuvieran ahora entre el
promotor de prueba y el gen GUS reportero.
Se realizaron experimentos con embriones
inmaduros, esencialmente la superficie escutelar. Embriones
inmaduros de maíz GS3 fueron aislados de espigas
9-11 días luego de la polinización utilizando un
bisturí. Antes del aislamiento del embrión, a las espigas
polinizadas se les esterilizó la superficie con un microdetergente
y 25% de mezcla blanqueadora comercial, luego se lavaron con 3
intercambios de H_{2}O esterilizada. Los embriones inmaduros
aislados (1,4-1,7 mm) fueron colocados sobre medio
de bombardeo y alineados en una malla blanco en preparación para
bombardeo.
Los embriones inmaduros fueron entonces
tranformados mediante el método biolístico de partículas de
tungsteno (Tomes et al. (1995) en Plant Cell, Tissue, and
Organ Culture: Fundamental Methods, ed. Gamborg y Phillips
(Springer-Verlag, Berlin); Koziel et al.
(1993) Biol Technology 11: 194-200)
utilizando un sistema de suministro de partículas de alta presión
(Sistema de Suministro de Partículas Biolísticas Modelo
PDS-100 de Dupont). Se bombardeó sobre los
embriones inmaduros del maíz ADN plásmido que incluye la secuencia
promotora de la invención unido de forma operacional al gen GUS.
Luego de incubación durante 40 horas, los embriones bombardeados
fueron teñidos con solución de tinción X-Gluc
(McCabe et al. (1988) Biol Technology 6 (87):
923-926) durante 12 h a 37 C en la oscuridad. Se
midió entonces la actividad de GUS usando el promotor ubicuito como
un control, contando los puntos azules luego del teñido para la
actividad de GUS como se describe en otro trabajo (ver Jefferson
(1987) Plant Mol. Biol. Rep. 5: 387-405). Los
datos de la expresión transciente se muestran en la tabla 1.
La actividad promotora de la secuencia promotora
para el gen alfa-tubulina fue considerablemente más
fuerte que la del promotor ubiquitina, lo cual indica que este es
un promotor constitutivo fuerte.
Embriones inmaduros de maíz GS3 fueron
bombardeados con un plásmido que contenía la secuencia promotora
unida en forma operacional al gen GUS más un plásmido que contenía
el gen marcador seleccionable PAT (Wohlleben et al. (1988)
Gene 70: 25-37) que confiere resistencia al
herbicida Bialaphos. La transformación se realizó como se describe
en el ejemplo 1. Ver apéndice para ejemplos de bombardeo (560Y),
selección (560R), regeneración con contenido de hormonas (288J) y
medio libre de hormonas (272V).
Un día luego del bombardeo los embriones fueron
transferidos del medio de bombardeo al medio de selección el cual
contenía 3 mg/litro de Biolaphos y fueron
sub-encubados en medio de selección cada 2 semanas.
Luego de aproximadamente 10 semanas de selección, los clones callos
resistentes a la selección fueron transferidos a un medio que
contenía hormonas con el fin de iniciar la regeneración de la
planta. Luego de la maduración somática del embrión
(2-4 semanas), embriones somáticos bien
desarrollados fueron transferidos a un medio para su germinación y
transferidos al cuarto de incubación iluminado. Aproximadamente
7-10 días después, las plántulas en desarrollo
fueron transferidas a un medio libre de hormonas en tubos durante
7-10 días hasta que las plántulas estuvieron bien
establecidas. Las plantas fueron entonces transferidas a insertos en
planos (equivalentes a materas de 2,5'') que contenían suelo de
matera y se dejaron crecer durante 1 semana en una cámara de
crecimiento, se dejaron crecer subsecuentemente durante
1-2 semanas adicionales en un invernadero y luego
fueron transplantadas a pots 600 clásicos (1,6 galones) y se
dejaron crecer hasta su madurez.
La actividad promotora en los tejidos vegetales
transformados fue evaluada midiendo la expresión de GUS. Muestras
de tejido vegetal fueron colocadas en los agrupaciones de cultivo de
células de 12 pozos y se tiñeron con solución de tinción
X-Gluc durante 12 h a 37ºC en la oscuridad. A las
muestras entonces se les calificó la tinción de GUS. La
calificación de la tinción de GUS va desde 0 (negativo) hasta 6
(máximo). Estas calificaciones de teñido sirvieron como una
medición del nivel de expresión de GUS. Los resultados se muestran
en la Tabla 2.
Cinco eventos de transformación han sido
evaluados para el promotor tub3-18. En general, tres
eventos tuvieron puntaje correspondiente a una expresión de GUS
fuerte y dos eventos a una expresión mediana. La expresión de GUS
fue hallada en todos los tejidos vegetales incluyendo hoja, raíz,
cáscara, seda y bellota, estos tejidos tuvieron puntajes en su
mayoría entre 3-5. La tinsión de GUS en las semillas
se realizó con evento TC7406 y obtuvo una calificación muy
fuerte.
El promotor ubiquitina fue usado como control.
Cinco eventos de transformación han sido evaluados. En general, dos
eventos obtuvieron puntajes para la expresión de GUS fuerte y tres
para expresión débil. La expresión de GUS fue hallada en todos los
tejidos vegetales incluyendo hoja, raíz, cáscara, seda y bellota.
Con aquellos eventos de transformación que exhibían expresión débil
Gus fue expresado en hoja, raíz y bellota, el puntaje de tinsión
de estos tejidos estuvo en su mayoría entre 1 y 3. Se dio muy poca
expresión de GUS en los tejidos de cáscara y seda en aquellos
eventos de transformación que exhibían expresión débil.
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\newpage
Apéndice
- 272 V
\vskip1.000000\baselineskip
- 282 J
- 560 R
\vskip1.000000\baselineskip
- 560 Y
Todas las publicaciones y aplicaciones por
patente mencionadas en la especificación son indicativo del nivel
de aquellos expertos en el arte a quienes pertenece esta
invención.
Aunque la actual invención ha sido descrita en
algún detalle a modo de ilustración y ejemplo para propósitos de
claridad de entendimiento, será obvio que ciertos cambios y
modificaciones pueden ser practicadas dentro de las
reivindicaciones anexas.
<110> Pioneer Hi-Bred
International, Inc.
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\vskip0.400000\baselineskip
<120> Promotor de maíz
Alfa-tubulina 3-18
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<130> N80441B
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\vskip0.400000\baselineskip
<150> 60/076,075
\vskip0.400000\baselineskip
<151>
1998-02-26
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<160> 6
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<170> PatentIn Ver. 2.0
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 1
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 166
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Zea mays
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 1
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\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 2
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<211> 22
\vskip0.400000\baselineskip
<212> ADN
\vskip0.400000\baselineskip
<213> Secuencia artificial
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Descripción de la secuencia
artificial: Cebador PCR
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 2
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\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipgtaatacgac tcactatagg gc
\hfill22
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\vskip0.400000\baselineskip
<210> 3
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<211> 27
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<212> ADN
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<213> Secuencia artificial
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<223> Descripción de la secuencia
artificial: Cebador PCR de gen específico del maíz
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\vskip0.400000\baselineskip
<400> 3
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\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipggtcttgtca ccgggcatct gaccatc
\hfill27
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\vskip0.400000\baselineskip
<210> 4
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<211> 19
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<212> ADN
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<213> Secuencia artificial
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<223> Descripción de la secuencia
artificial: Cebador PCR de gen específico del maíz
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 4
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\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipactatagggc acgcgtggt
\hfill19
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<210> 5
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<211> 27
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<212> ADN
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<213> Secuencia artificial
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<223> Descripción de la secuencia
artificial: Cebador PCR de gen específico del maíz
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\vskip0.400000\baselineskip
<400> 5
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\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipcccagcacgc gtttccgacc tggatac
\hfill27
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<210> 6
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<211> 36
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<212> ADN
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<213> Secuencia artificial
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<223> Descripción de la secuencia
artificial: Cebador PCR de gen específico del maíz
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<400> 6
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\hskip-.1em\dddseqskipgaccatggtg tcgtgtggat ccggtgttgt tgaacg
\hfill36
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<110> Pioneer Hi-Bred
International, Inc.
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<120> Promotor de maíz
Alfa-tubulina 3-18
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<130> N80441B
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<150> 60/076,075
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<151>
1998-02-26
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<160> 6
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<170> PatentIn Ver. 2.0
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 1
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<211> 166
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<212> ADN
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<213> Zea mays
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<400> 1
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1998-02-26
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<223> Descripción de la Secuencia
Artificial; Cebador PCR de gen específico del maíz
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<223> Descripción de la Secuencia
Artificial; Cebador PCR de gen específico del maíz
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<223> Descripción de la Secuencia
Artificial; Cebador PCR de gen específico del maíz
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<223> Descripción de la Secuencia
Artificial; Cebador PCR de gen específico del maíz
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Artificial; Cebador PCR de gen específico del maíz
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Artificial; Cebador PCR de gen específico del maíz
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<212> ADN
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<220>
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<223> Descripción de la Secuencia
Artificial: Cebador PCR de gen específico del maíz
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<211> 26
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<212> ADN
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<213> Secuencia Artificial
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Artificial; Cebador PCR de gen específico del maíz
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<212> ADN
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<213> Secuencia Artificial
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<220>
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Artificial: Cebador PCR de gen específico del maíz
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<212> ADN
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<313> Secuencia Artificial
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Artificial; Cebador PCR de gen específico del maíz
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<212> ADN
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<212> ADN
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<213> Secuencia Artificial
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<212> ADN
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<220>
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Artificial: Cebador PCR de gen especifico del maíz
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\hfill34
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Claims (13)
1. Una molécula aislada de ácido nucleico con
una secuencia para un promotor capaz de iniciar la transcripción en
una célula vegetal, donde dicha secuencia nucleótida se selecciona
de:
- a)
- Una secuencia nucleótida que incluye la secuencia notada en SEQ ID NO: 1;
- b)
- Una secuencia nucleótida depositada como Accesión ATCC No. 207125;
- c)
- Una secuencia nucleótida que incluye al menos 40 nucleótidos contiguos de la secuencia notada en SEQ ID No. 1;
- d)
- Una secuencia nucleótida que se hibrida bajo condiciones severas a una secuencia de a), b) o c); y
- e)
- Una secuencia nucleótida que tiene al menos 70% de la identidad de la secuencia notadas en a) o b).
2. Una secuencia artificial de ADN que incluye
una secuencia nucleótida de la reivindicación 1 unida en forma
operacional a una secuencia nucleótida heteróloga de interés.
3. Un vector que incluye la secuencia artificial
de la reivindicación 2.
4. Una célula huésped que tiene incorporado en
su genoma el segmento artificial de la reivindicación 2.
5. Un método de expresar en forma constitutiva
una secuencia nucleótida heteróloga en una planta, dicho método
incluye el transformar una célula vegetal con una secuencia
artificial de ADN como se define en la reivindicación 2.
6. Un método de la reivindicación 5, donde dicha
planta es monocotiledónea o dicotiledónea.
7. El método de la reivindicación 6, donde dicha
monocotiledónea es maíz.
8. Una célula vegetal transformada en forma
estable con una secuencia artificial de ADN como se define en la
reivindicación 2.
9. Una planta transformada en forma estable con
una secuencia artificial de ADN como se define en la reivindicación
2.
10. Una célula vegetal de la reivindicación 8
donde dicha célula vegetal es de una monocotiledónea o de una
dicotiledónea.
11. Una planta de la reivindicación 9 donde
dicha planta es monocotiledónea o dicotiledónea
12. Una célula vegetal de la reivindicación 10 o
planta de la reivindicación 11, donde dicha monocotiledónea es
maíz.
13. Semilla de la planta de la reivindicación 9,
11 o 12 incluyendo un segmento artificial ADN de la reivindicación
2.
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| US20040121360A1 (en) * | 2002-03-31 | 2004-06-24 | Hagai Karchi | Methods, platforms and kits useful for identifying, isolating and utilizing nucleotide sequences which regulate gene exoression in an organism |
| DE10224889A1 (de) * | 2002-06-04 | 2003-12-18 | Metanomics Gmbh & Co Kgaa | Verfahren zur stabilen Expression von Nukleinsäuren in transgenen Pflanzen |
| AU2004215592B2 (en) * | 2003-02-27 | 2008-02-07 | Cropdesign N.V. | Arabidopsis promoters |
| WO2004081173A2 (en) * | 2003-03-12 | 2004-09-23 | Evogene Ltd. | Nucleotide sequences regulating gene expression and constructs and methods utilizing same |
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| AU2004265250C1 (en) | 2003-06-23 | 2008-05-01 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Engineering single-gene-controlled staygreen potential into plants |
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| PL1658364T3 (pl) * | 2003-08-25 | 2017-10-31 | Monsanto Technology Llc | Elementy regulatorowe tubuliny do stosowania w roślinach |
| US20130117881A1 (en) * | 2003-10-14 | 2013-05-09 | Ceres, Inc. | Promoter, promoter control elements, and combinations, and uses thereof |
| US11634723B2 (en) | 2003-09-11 | 2023-04-25 | Ceres, Inc. | Promoter, promoter control elements, and combinations, and uses thereof |
| US11739340B2 (en) | 2003-09-23 | 2023-08-29 | Ceres, Inc. | Promoter, promoter control elements, and combinations, and uses thereof |
| WO2005033319A2 (en) | 2003-10-02 | 2005-04-14 | Monsanto Technology Llc | Stacking crop improvement traits in transgenic plants |
| US20050120415A1 (en) | 2003-10-09 | 2005-06-02 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Gene silencing |
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| US20070169227A1 (en) | 2003-12-16 | 2007-07-19 | Pioneer Hi-Bred International Inc. | Dominant Gene Suppression Transgenes and Methods of Using Same |
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| WO2006028495A2 (en) | 2004-02-20 | 2006-03-16 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Lipases and methods of use |
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| US20060041961A1 (en) | 2004-03-25 | 2006-02-23 | Abad Mark S | Genes and uses for pant improvement |
| CA2571585C (en) | 2004-06-30 | 2011-11-08 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Methods of protecting plants from pathogenic fungi |
| EP1763536B1 (en) | 2004-07-02 | 2010-09-08 | Pioneer-Hi-Bred International, Inc. | Antifungal polypeptides |
| US20060075522A1 (en) | 2004-07-31 | 2006-04-06 | Jaclyn Cleveland | Genes and uses for plant improvement |
| CN101495507B (zh) * | 2004-09-24 | 2013-07-17 | 巴斯福植物科学有限公司 | 编码与非生物性胁迫反应相关的蛋白质的核酸序列和具有增加的环境胁迫抗性的植物细胞和植物 |
| AU2006204997B2 (en) | 2005-01-12 | 2011-09-01 | Monsanto Technology, Llc | Genes and uses for plant improvement |
| EP2147977A1 (en) * | 2005-02-09 | 2010-01-27 | BASF Plant Science GmbH | Expression cassettes for regulation of expression in monocotyledonous plants |
| EP2338905B1 (en) | 2005-02-23 | 2017-11-29 | North Carolina State University | Alteration of tobacco alkaloid content through modification of specific cytochrome p450 genes |
| EP3581024A1 (en) | 2005-03-02 | 2019-12-18 | Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria | Herbicide-resistant rice plants, polynucleotides encoding herbicide-resistant acetohydroxyacid synthase large subunit proteins, and methods of use |
| US20070124833A1 (en) | 2005-05-10 | 2007-05-31 | Abad Mark S | Genes and uses for plant improvement |
| CN101287836B (zh) | 2005-07-01 | 2013-02-20 | 巴斯福股份公司 | 抗除草剂的向日葵植物、编码抗除草剂的乙酰羟酸合酶大亚基蛋白的多核苷酸和使用方法 |
| AU2006287553A1 (en) | 2005-09-08 | 2007-03-15 | Chromatin, Inc. | Plants modified with mini-chromosomes |
| WO2007041419A1 (en) | 2005-10-03 | 2007-04-12 | Monsanto Technology Llc | Transgenic plant seed with increased lysine |
| EP2112223A3 (en) | 2005-11-10 | 2010-01-27 | Pioneer Hi-Bred International Inc. | DOF (DNA binding with one finger) sequences and method of use |
| EP2251349A1 (en) | 2006-04-19 | 2010-11-17 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Isolated polynucleotide molecules corresponding to mutant and wild-type alleles of the maize D9 gene and methods of use |
| EP2316957B1 (en) | 2006-05-12 | 2014-09-10 | Monsanto Technology LLC | Methods and compositions for obtaining marker-free transgenic plants |
| EP2803728B1 (en) | 2006-05-16 | 2018-11-21 | Monsanto Technology LLC | Use of non-agrobacterium bacterial species for plant transformation |
| ATE497539T1 (de) | 2006-05-16 | 2011-02-15 | Pioneer Hi Bred Int | Antimykotische polypeptide |
| WO2007137114A2 (en) | 2006-05-17 | 2007-11-29 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Artificial plant minichromosomes |
| US7855326B2 (en) | 2006-06-06 | 2010-12-21 | Monsanto Technology Llc | Methods for weed control using plants having dicamba-degrading enzymatic activity |
| CA2663811A1 (en) | 2006-10-05 | 2008-04-17 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Maize microrna sequences |
| AR063316A1 (es) | 2006-10-16 | 2009-01-21 | Monsanto Technology Llc | Metodos y composiciones para mejorar el estado sanitario de plantas |
| US7939721B2 (en) | 2006-10-25 | 2011-05-10 | Monsanto Technology Llc | Cropping systems for managing weeds |
| US7838729B2 (en) | 2007-02-26 | 2010-11-23 | Monsanto Technology Llc | Chloroplast transit peptides for efficient targeting of DMO and uses thereof |
| EP2118289B1 (en) | 2007-03-09 | 2013-12-11 | Monsanto Technology, LLC | Preparation and use of plant embryo explants for transformation |
| CA2682349C (en) | 2007-04-04 | 2017-08-22 | Basf Plant Science Gmbh | Ahas mutants |
| NZ597327A (en) | 2007-04-04 | 2014-02-28 | Basf Se | Herbicide-resistant brassica plants and methods of use |
| US20100154076A1 (en) | 2007-05-25 | 2010-06-17 | Cropdesign N.V. | Yield Enhancement In Plants By Modulation of Maize Alfins |
| CN101849010A (zh) | 2007-06-29 | 2010-09-29 | 先锋高级育种国际公司 | 用于改变单子叶植物细胞的基因组的方法 |
| BRPI0818941A2 (pt) | 2007-08-29 | 2014-10-07 | Pioneer Hi Bred Int | "planta, métodos de alteração da arquitetura de raízes em plantas, de avaliação da arquitetura de raízes em plantas, de determinação de alteração de uma característica agronômica em uma planta, de transformação de células, de produção de plantas, polinucleotídeo, vetor e reconstrução de dna recombinante" |
| RU2010122899A (ru) | 2007-11-07 | 2011-12-20 | Е.И. Дюпон Де Немур Энд Компани (Us) | Растения, имеющие измененные агрономические характеристики в условиях ограничения азота, и родственные конструкты и способы вовлечения генов, кодирующих полипептиды lnt2 и их гомологи |
| US8124851B2 (en) | 2007-11-12 | 2012-02-28 | North Carolina State University | Alteration of tobacco alkaloid content through modification of specific cytochrome P450 genes |
| MX2010005578A (es) | 2007-11-20 | 2010-06-02 | Du Pont | Plantas con alteraciones en la arquitectura radicular, constructos y metodos relacionados que requieren genes que codifican polipeptidos de cinasa rica en repeticiones de leucina y homologos de estos. |
| EP2215238A2 (en) | 2007-11-20 | 2010-08-11 | Pioneer Hi-Bred International Inc. | Maize ethylene signaling genes and modulation of same for improved stress tolerance in plants |
| US8115055B2 (en) | 2007-12-18 | 2012-02-14 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Down-regulation of gene expression using artificial microRNAs |
| US8937217B2 (en) | 2007-12-18 | 2015-01-20 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Down-regulation of gene expression using artificial microRNAs |
| US8847013B2 (en) | 2008-01-17 | 2014-09-30 | Pioneer Hi Bred International Inc | Compositions and methods for the suppression of target polynucleotides from lepidoptera |
| US8367895B2 (en) | 2008-01-17 | 2013-02-05 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Compositions and methods for the suppression of target polynucleotides from the family aphididae |
| US20120124701A1 (en) | 2008-02-01 | 2012-05-17 | Ceres, Inc. | Promoter, promoter control elements, and combinations, and use thereof |
| US12331304B2 (en) | 2008-02-01 | 2025-06-17 | Ceres, Inc. | Promoter, promoter control elements, and combinations, and uses thereof |
| WO2009155950A1 (en) | 2008-06-27 | 2009-12-30 | King Faisal Specialist Hospital And Research Centre | Cloning-free method of generating transcriptionally and post-transcriptionally controllable expression active linear reporter constructs |
| RS54868B1 (sr) | 2008-07-31 | 2016-10-31 | Anglo Netherlands Grain Bv | Biljke suncokreta rezistentne na herbicide |
| EP2733212B1 (en) | 2008-09-26 | 2018-09-05 | BASF Agrochemical Products, B.V. | Herbicide-resistant ahas-mutants and methods of use |
| CA2743707A1 (en) | 2008-12-04 | 2010-06-10 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Methods and compositions for enhanced yield by targeted expression of knotted1 |
| WO2010077890A1 (en) | 2008-12-17 | 2010-07-08 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Plants having altered agronomic characteristics under nitrogen limiting conditions and related constructs and methods involving genes encoding lnt9 polypeptides |
| WO2010075143A1 (en) | 2008-12-22 | 2010-07-01 | Monsanto Technology Llc | Genes and uses for plant enhancement |
| US20120004114A1 (en) | 2008-12-22 | 2012-01-05 | E. I. Du Pont De Nemours And Company And Pioneer Hi-Bred International | Nucleotide sequences encoding gsh1 polypeptides and methods of use |
| US20110239315A1 (en) | 2009-01-12 | 2011-09-29 | Ulla Bonas | Modular dna-binding domains and methods of use |
| EP2206723A1 (en) | 2009-01-12 | 2010-07-14 | Bonas, Ulla | Modular DNA-binding domains |
| US8269068B2 (en) | 2009-01-22 | 2012-09-18 | Syngenta Participations Ag | Mutant hydroxyphenylpyruvate dioxygenase polypeptides and methods of use |
| WO2010104848A1 (en) | 2009-03-09 | 2010-09-16 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Drought tolerant plants and methods involving genes encoding type c3hc4 ring finger zinc-finger family polypeptides |
| US9085633B2 (en) | 2009-03-27 | 2015-07-21 | E I Du Pont De Nemours And Company | Plants having altered agronomic characteristics under nitrogen limiting conditions and related constructs and methods involving genes encoding SNF2 domain-containing polypeptides |
| EA201171245A1 (ru) | 2009-04-14 | 2012-05-30 | Пайонир Хай-Бред Интернешнл, Инк. | Модуляция acc-синтазы, улучшающая урожайность растений при условиях низкого содержания азота |
| MX2011011678A (es) | 2009-05-04 | 2011-12-06 | Pioneer Hi Bred Int | Mejora de la produccion en plantas mediante la modulacion del factor de transcripcion ap2. |
| US20120047603A1 (en) | 2009-06-09 | 2012-02-23 | Allen Stephen M | Drought tolerant plants and related constructs and methods involving genes encoding fatty acid desaturase family polypeptides |
| BRPI1008189A2 (pt) | 2009-06-30 | 2015-08-25 | Du Pont | Planta transgenica semente transgenica obtida a partir da planta transgencia semente transgencia metodo de produção de uma planta transgenica metodo de produção de sementes transgenicas metodo de produto e ou subproduto da semente transgenica e semente transgenica obtida pelo metodo |
| EP2451946B2 (en) | 2009-07-10 | 2018-08-29 | Syngenta Participations AG | Novel hydroxyphenylpyruvate dioxygenase polypeptides and methods of use |
| US20120157512A1 (en) | 2009-08-21 | 2012-06-21 | Monsanto Technology Llc | Preventing and Curing Beneficial Insect Diseases Via Plant Transcribed Molecules |
| WO2011025860A1 (en) | 2009-08-28 | 2011-03-03 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Compositions and methods to control insect pests |
| WO2011046772A1 (en) | 2009-10-15 | 2011-04-21 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Drought tolerant plants and related constructs and methods involving genes encoding self-incompatibility protein related polypeptides |
| AR078829A1 (es) | 2009-10-30 | 2011-12-07 | Du Pont | Plantas y semillas con niveles alterados de compuesto de almacenamiento, construcciones relacionadas y metodos relacionados con genes que codifican proteinas similares a las aldolasas bacterianas de la clase ii del acido 2,4- dihidroxi-hept-2-eno-1,7-dioico |
| AR078828A1 (es) | 2009-10-30 | 2011-12-07 | Du Pont | Plantas tolerantes a la sequia y constructos y metodos relacionados que involucran genes que codifican a los polipeptidos dtp21 |
| WO2011062748A1 (en) | 2009-11-23 | 2011-05-26 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Sucrose transporter genes for increasing plant seed lipids |
| US8704041B2 (en) | 2009-12-30 | 2014-04-22 | Pioneer Hi Bred International Inc | Methods and compositions for targeted polynucleotide modification |
| AU2010339404B2 (en) | 2009-12-30 | 2016-01-28 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Methods and compositions for the introduction and regulated expression of genes in plants |
| US20110191903A1 (en) | 2009-12-31 | 2011-08-04 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Engineering plant resistance to diseases caused by pathogens |
| EP2519639A1 (en) | 2009-12-31 | 2012-11-07 | Pioneer Hi-Bred International Inc. | Direct and continuous root alone or root/shoot production from transgenic events derived from green regenerative tissues and its applications |
| NZ600546A (en) | 2010-01-22 | 2014-08-29 | Dow Agrosciences Llc | Excision of transgenes in genetically modified organisms |
| BR112012018616A2 (pt) | 2010-01-26 | 2017-01-10 | Pioneer Hi Bred Int | marcador de polinucleotídeo, polinucleotídeo isolado, polipeptídeo transportador abc isolado, planta, célula, semente, método para seleção de uma planta ou germoplasma de soja, método de introgressão de um alelo de resistência a herbicida em uma planta de soja, método para conferir tolerância ou tolerância melhorada a um ou mais herbicidas, método para controlar de modo seletivo plantas daninhas em um campo contendo uma cultura |
| BR112012018601A2 (pt) | 2010-02-02 | 2015-09-01 | Du Pont | Planta, semente de planta, método e polinucleotídeo isolado |
| CA2790836A1 (en) | 2010-03-03 | 2011-09-09 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Plant seeds with altered storage compound levels, related constructs and methods involving genes encoding oxidoreductase motif polypeptides |
| US20110277183A1 (en) | 2010-04-30 | 2011-11-10 | Olga Danilevskaya | Alteration of plant architecture characteristics in plants |
| WO2011145015A1 (en) | 2010-05-04 | 2011-11-24 | Basf Se | Plants having increased tolerance to herbicides |
| AR080745A1 (es) | 2010-05-06 | 2012-05-02 | Du Pont | Gen y proteina acc (acido 1-aminociclopropano-1-carboxilico) sintasa 3 de maiz y sus usos |
| CN102933712A (zh) | 2010-06-09 | 2013-02-13 | 纳幕尔杜邦公司 | 用于在植物中调节转基因表达的调控序列 |
| WO2011163590A1 (en) | 2010-06-25 | 2011-12-29 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Compositions and methods for enhancing resistance to northern leaf blight in maize |
| CN103080320A (zh) | 2010-07-01 | 2013-05-01 | 纳幕尔杜邦公司 | 涉及编码pae以及pae样多肽的基因并具有改变的贮藏化合物水平的植物种子、相关的构建体和的方法 |
| UA112969C2 (uk) | 2010-08-03 | 2016-11-25 | Сібас Юс Ллс | Рослина, стійка до одного або більше ррх-інгібуючих гербіцидів, яка містить мутантний ген протопорфіриноген ix оксидази (ррх) |
| US20120122223A1 (en) | 2010-08-03 | 2012-05-17 | Cibus Us Llc | Mutated protoporphyrinogen ix oxidase (ppx) genes |
| CN103237894A (zh) | 2010-08-13 | 2013-08-07 | 先锋国际良种公司 | 包含具有羟基苯丙酮酸双加氧酶(hppd)活性的序列的组合物和方法 |
| BR112013003223A2 (pt) | 2010-08-23 | 2016-06-07 | Pioneer Hi Bred Int | "polinucleotídeo isolado, cassete de expressão, célula hospedeira, micro-organismo, planta ou parte de planta, método de obtenção de uma planta transformada, composição antipatogênica, método para proteger uma planta contra um patógeno ou uso de um polinucleotídeo isolado" |
| CN103080127A (zh) | 2010-09-01 | 2013-05-01 | 先锋国际良种公司 | 液泡靶向肽及使用方法 |
| US9624504B2 (en) | 2010-10-28 | 2017-04-18 | E I Du Pont De Nemours And Company | Drought tolerant plants and related constructs and methods involving genes encoding DTP6 polypeptides |
| WO2012080975A1 (en) | 2010-12-16 | 2012-06-21 | Basf Se | Plants having increased tolerance to herbicides |
| EP4059342A1 (en) | 2010-12-17 | 2022-09-21 | Monsanto Technology LLC | Methods for improving competency of plant cells |
| PH12013501283A1 (en) | 2010-12-20 | 2013-07-15 | Du Pont | Drought tolerant plants and related constructs and methods involving genes encoding mate-efflux polypeptides |
| BR112013015515A2 (pt) | 2010-12-28 | 2018-04-24 | Pioneer Hi Bred Int | molécula de ácido nucleico isolada, construto de dna, célula hospedeira, planta transgênica, semente transformada da planta, polipeptídeo isolado com atividade pesticida, composição, método para controlar uma população de praga de lepidóptero, método para matar uma praga de lepidóptero, método para produzir um polipeptídeo com atividade pesticida, planta que tem incorporado de maneira estável em seu genoma um construto de dna, método para proteger uma planta contra uma praga |
| AU2011351946B2 (en) | 2010-12-30 | 2017-05-18 | Dow Agrosciences Llc | Nucleic acid molecules that target the vacuolar ATPase C subunit and confer resistance to coleopteran pests |
| UY33853A (es) | 2010-12-30 | 2012-07-31 | Dow Agrosciences Llc | ?moléculas de ácido nucleico que se dirigen a la subunidad h de la atpasa vacuolar y confieren resistencia a plagas de coleópteros?. |
| RU2013135491A (ru) | 2010-12-30 | 2015-02-10 | Дау Агросайенсиз Ллс | Молекулы нуклеиновых кислот, которые нацелены на малый gtp-связывающий белок rho1 и сообщают устойчивость к вредителям отряда жесткокрылых |
| RU2639549C2 (ru) | 2010-12-30 | 2017-12-21 | ДАУ АГРОСАЙЕНСИЗ ЭлЭлСи | Молекулы нуклеиновых кислот, которые придают устойчивость к насекомым-вредителям отряда жесткокрылых |
| US9109231B2 (en) | 2011-02-11 | 2015-08-18 | Pioneer Hi Bred International Inc | Synthetic insecticidal proteins active against corn rootworm |
| US8878007B2 (en) | 2011-03-10 | 2014-11-04 | Pioneer Hi Bred International Inc | Bacillus thuringiensis gene with lepidopteran activity |
| MX2013010911A (es) | 2011-03-23 | 2015-03-03 | Pioneer Hi Bred Int | Metodos para producir un locus de rasgo transgenico complejo. |
| BR112013030638A2 (pt) | 2011-03-30 | 2018-08-07 | Univ Mexico Nac Autonoma | polipeptídeo cry mutante, polinucleotídeo, cassete de expressão, célula hospedeira, planta, semente transgênica, método para proteger uma planta contra uma praga de inseto, composição pesticida, micro-organismo, método para controlar uma praga de inseto de uma área de cultivo |
| US20120266324A1 (en) | 2011-04-15 | 2012-10-18 | Pioneer Hi Bred International Inc. | Self-Reproducing Hybrid Plants |
| US9062317B2 (en) | 2011-05-09 | 2015-06-23 | E I Du Pont De Nemours And Company | Methods and compositions for silencing gene families using artificial microRNAs |
| US9150625B2 (en) | 2011-05-23 | 2015-10-06 | E I Du Pont De Nemours And Company | Chloroplast transit peptides and methods of their use |
| BR112013033176A2 (pt) | 2011-06-21 | 2018-06-12 | E I Du Pont De Nemouras And Company | método para produzir uma modificação direcionada em um gene de fertilidade masculina, planta, molécula de ácido nucleio isolada, construto de expressão |
| AR087167A1 (es) | 2011-07-12 | 2014-02-26 | Two Blades Foundation | Genes de resistencia al tizon tardio |
| WO2013019456A1 (en) | 2011-08-02 | 2013-02-07 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Method for high-throughput screening of transgenic plants |
| US9951346B2 (en) | 2011-08-03 | 2018-04-24 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Methods and compositions for targeted integration in a plant |
| AU2012301912A1 (en) | 2011-08-31 | 2014-03-06 | E. I. Dupont De Nemours & Company | Methods for tissue culture and transformation of sugarcane |
| US20140298544A1 (en) | 2011-10-28 | 2014-10-02 | Pioneer Hi Bred International Inc | Engineered PEP carboxylase variants for improved plant productivity |
| AR088562A1 (es) | 2011-10-28 | 2014-06-18 | Du Pont | Metodos y composiciones para silenciar genes usando micro arn artificiales |
| US20130180005A1 (en) | 2012-01-06 | 2013-07-11 | Pioneer Hi Bred International Inc | Method to Screen Plants for Genetic Elements Inducing Parthenogenesis in Plants |
| AU2013209738A1 (en) | 2012-01-17 | 2014-08-07 | Australian Center For Plant Functional Genomics, Pty, Ltd | Plant transcription factors, promoters and uses thereof |
| EP2807258B1 (en) | 2012-01-23 | 2017-04-26 | E. I. du Pont de Nemours and Company | Down-regulation of gene expression using artificial micrornas for silencing fatty acid biosynthestic genes |
| BR112014018294B1 (pt) | 2012-01-26 | 2022-01-11 | Norfolk Plant Sciences, Ltd | Método para produzir uma planta, cassete de expressão, e, célula bacteriana |
| AR089793A1 (es) | 2012-01-27 | 2014-09-17 | Du Pont | Metodos y composiciones para generar locus de rasgos transgenicos complejos |
| AU2013205606B2 (en) | 2012-02-01 | 2015-05-21 | Corteva Agriscience Llc | Synthetic Brassica-derived chloroplast transit peptides |
| CN107556389B (zh) | 2012-02-02 | 2021-10-26 | 陶氏益农公司 | 植物反式激活互作基序及其用途 |
| WO2013138309A1 (en) | 2012-03-13 | 2013-09-19 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Genetic reduction of male fertility in plants |
| EA201491670A1 (ru) | 2012-03-13 | 2015-07-30 | Пайонир Хай-Бред Интернэшнл, Инк. | Генетическое снижение мужской репродуктивной функции у растений |
| AU2013205557B2 (en) | 2012-04-17 | 2016-04-21 | Corteva Agriscience Llc | Synthetic brassica-derived chloroplast transit peptides |
| BR112014027468A2 (pt) | 2012-05-04 | 2017-06-27 | Du Pont | polinucleotídeo isolado ou recombinante, construção de dna recombinante, célula, planta, explante vegetal, semente transgênica, polipeptídeo isolado, composição, métodos de produção de meganuclease, de introdução de rompimento e de integração de um polinucleotídeo. |
| US9347105B2 (en) | 2012-06-15 | 2016-05-24 | Pioneer Hi Bred International Inc | Genetic loci associated with resistance of soybean to cyst nematode and methods of use |
| WO2013188291A2 (en) | 2012-06-15 | 2013-12-19 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Methods and compositions involving als variants with native substrate preference |
| AR091489A1 (es) | 2012-06-19 | 2015-02-11 | Basf Se | Plantas que tienen una mayor tolerancia a herbicidas inhibidores de la protoporfirinogeno oxidasa (ppo) |
| CA2877496A1 (en) | 2012-06-20 | 2013-12-27 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Terminating flower (tmf) gene and methods of use |
| WO2014036048A1 (en) | 2012-08-30 | 2014-03-06 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Long intergenic non-coding rnas in maize |
| CA2884162C (en) | 2012-09-07 | 2020-12-29 | Dow Agrosciences Llc | Fad3 performance loci and corresponding target site specific binding proteins capable of inducing targeted breaks |
| UA118090C2 (uk) | 2012-09-07 | 2018-11-26 | ДАУ АГРОСАЙЄНСІЗ ЕлЕлСі | Спосіб інтегрування послідовності нуклеїнової кислоти, що представляє інтерес, у ген fad2 у клітині сої та специфічний для локусу fad2 білок, що зв'язується, здатний індукувати спрямований розрив |
| US9816102B2 (en) | 2012-09-13 | 2017-11-14 | Indiana University Research And Technology Corporation | Compositions and systems for conferring disease resistance in plants and methods of use thereof |
| CA2887575A1 (en) | 2012-10-15 | 2014-04-24 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Methods and compositions to enhance activity of cry endotoxins |
| US20140123339A1 (en) | 2012-10-31 | 2014-05-01 | Pioneer Hi Bred International Inc | Transformed Plants Having Increased Beta-Carotene Levels, Increased Half-Life and Bioavailability and Methods of Producing Such |
| EP2922398A4 (en) | 2012-11-23 | 2016-05-04 | Hexima Ltd | ANTI-PATHOGENIC METHODS |
| US20140173781A1 (en) | 2012-12-13 | 2014-06-19 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Methods and compositions for producing and selecting transgenic wheat plants |
| CA2894213A1 (en) | 2012-12-21 | 2014-06-26 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Compositions and methods for auxin-analog conjugation |
| EP2951308A2 (en) | 2013-01-31 | 2015-12-09 | E. I. du Pont de Nemours and Company | Slm1, a suppressor of lesion mimic phenotypes |
| BR112015022742A2 (pt) | 2013-03-11 | 2018-11-27 | Pionner Hi Bred Int Inc | métodos e composições que empregam um domínio de estabilização dependente de sulfonilureia |
| US20160002658A1 (en) | 2013-03-11 | 2016-01-07 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Compositions and methods to enhance mechanical stalk strength in plants |
| BR112015022737A2 (pt) | 2013-03-11 | 2018-04-24 | Pioneer Hi-Bred International, Inc | construto de polinucleotídeo recombinante, célula vegetal, planta, semente, método para regular expressão |
| US9803214B2 (en) | 2013-03-12 | 2017-10-31 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Breeding pair of wheat plants comprising an MS45 promoter inverted repeat that confers male sterility and a construct that restores fertility |
| RU2694686C2 (ru) | 2013-03-12 | 2019-07-16 | Е.И.Дюпон Де Немур Энд Компани | Способы идентификации вариантных сайтов распознавания для редкощепящих сконструированных средств для индукции двунитевого разрыва, и композиции с ними, и их применения |
| US9416368B2 (en) | 2013-03-13 | 2016-08-16 | E I Du Pont De Nemours And Company | Identification of P. pachyrhizi protein effectors and their use in producing Asian soybean rust (ASR) resistant plants |
| WO2014160383A1 (en) | 2013-03-13 | 2014-10-02 | E. I. Dupont De Nemours & Company | Production of small interfering rnas in planta |
| BR112015023286A2 (pt) | 2013-03-14 | 2018-03-06 | Arzeda Corp | polipeptídeo recombinante com atividade da dicamba descarboxilase, construto de polinucleotídeo, célula, método de produção de uma célula hospedeira compreendendo um polinucleotídeo heterólogo que codifica um polipeptídeo tendo atividade da dicamba descarboxilase, método para descarboxilar dicamba, um derivado de dicamba ou um metabolito de dicamba, método para a detecção de um polipeptideo e método para a detecção da presença de um polinucleotideo que codifica um polipeptideo tendo atividade da dicamba descarboxilase |
| UA119745C2 (uk) | 2013-03-14 | 2019-08-12 | Сібас Юс Ллс | Мутований ген аленоксидсинтази 2 (aos2) |
| BR112015023285B1 (pt) | 2013-03-14 | 2022-03-03 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Cassete de expressão, célula hospedeira bacteriana e método para controlar uma praga de planta do tipo coleóptero |
| BR112015023304A2 (pt) | 2013-03-14 | 2017-07-18 | Pioneer Hi Bred Int | método para melhorar a tolerância ao estresse abiótico de uma planta, planta e semente |
| AU2014236154A1 (en) | 2013-03-14 | 2015-09-17 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Compositions having dicamba decarboxylase activity and methods of use |
| CA2901316A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-25 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Phi-4 polypeptides and methods for their use |
| US9957515B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-05-01 | Cibus Us Llc | Methods and compositions for targeted gene modification |
| CA2903555A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Compositions and methods of use of acc oxidase polynucleotides and polypeptides |
| US12331303B2 (en) | 2013-03-15 | 2025-06-17 | Cibus Us Llc | Methods and compositions for increasing efficiency of targeted gene modification using oligonucleotide-mediated gene repair |
| WO2014151213A2 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-25 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Drought tolerant plants and related constructs and methods involving genes encoding dtp32 polypeptides |
| HRP20220803T1 (hr) | 2013-03-15 | 2022-09-30 | Cibus Us Llc | Postupci i kompozicije za povećanje efikasnosti modifikacije ciljanog gena korištenjem genske reparacije posredovane oligonukleotidom |
| BR112015032956B1 (pt) | 2013-07-09 | 2022-09-13 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Método para produzir uma planta transgênica e cassete de expressão |
| US11459579B2 (en) | 2013-07-09 | 2022-10-04 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Transgenic plants produced with a K-domain, and methods and expression cassettes related thereto |
| BR122022020536B1 (pt) | 2013-08-08 | 2023-11-21 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Molécula de ácido nucleico isolada, construto de dna, célula hospedeira bacteriana, polipeptídeo isolado, composição, método para controlar uma população, método para matar uma praga, método para produzir um polipeptídeo, método para produzir uma planta ou célula vegetal, método para proteger uma planta |
| MX359026B (es) | 2013-08-16 | 2018-09-12 | Pioneer Hi Bred Int | Proteinas insecticidas y metodos de uso. |
| CA3109801C (en) | 2013-08-22 | 2024-01-09 | Andrew Cigan | Plant genome modification using guide rna/cas endonuclease systems and methods of use |
| CA3223359A1 (en) | 2013-09-13 | 2015-03-19 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Insecticidal proteins and methods for their use |
| BR102014025574A2 (pt) * | 2013-10-15 | 2015-09-29 | Dow Agrosciences Llc | elementos regulatórios de zea mays e usos dos mesmos |
| US10329578B2 (en) | 2013-10-18 | 2019-06-25 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Glyphosate-N-acetyltransferase (GLYAT) sequences and methods of use |
| CA2928830A1 (en) | 2013-10-29 | 2015-05-07 | Shai J. Lawit | Self-reproducing hybrid plants |
| BR102014031844A2 (pt) | 2013-12-20 | 2015-10-06 | Dow Agrosciences Llc | ras oposto (rop) e moléculas de ácido nucleico relacionadas que conferem resistência a pragas de coleópteros e hemípteros |
| RU2016129435A (ru) | 2013-12-20 | 2018-01-25 | ДАУ АГРОСАЙЕНСИЗ ЭлЭлСи | Молекулы нуклеиновой кислоты phkп ii-140, которые придают устойчивость к жестококрылым насекомым-вредителям |
| WO2015102999A1 (en) | 2013-12-30 | 2015-07-09 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Drought tolerant plants and related constructs and methods involving genes encoding dtp4 polypeptides |
| TW201531480A (zh) * | 2014-01-23 | 2015-08-16 | Dow Agrosciences Llc | 玉米調控因子及其用途 |
| WO2015116680A1 (en) | 2014-01-30 | 2015-08-06 | Two Blades Foundation | Plants with enhanced resistance to phytophthora |
| WO2015120270A1 (en) | 2014-02-07 | 2015-08-13 | Pioneer Hi Bred International, Inc. | Insecticidal proteins and methods for their use |
| CA3290904A1 (en) | 2014-02-07 | 2026-03-02 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Insecticidal proteins and methods for their use |
| EA201691581A1 (ru) | 2014-03-14 | 2017-02-28 | Кибус Юс Ллс | Способы и композиции для повышения эффективности направленной модификации генов с применением опосредованной олигонуклеотидами репарации генов |
| US9719101B2 (en) * | 2014-03-19 | 2017-08-01 | E I Du Pont De Nemours And Company | Soybean GAPD promoter and its use in constitutive expression of transgenic genes in plants |
| WO2015150465A2 (en) | 2014-04-03 | 2015-10-08 | Basf Se | Plants having increased tolerance to herbicides |
| WO2015171603A1 (en) | 2014-05-06 | 2015-11-12 | Two Blades Foundation | Methods for producing plants with enhanced resistance to oomycete pathogens |
| AU2015255995B2 (en) | 2014-05-07 | 2018-05-10 | Dow Agrosciences Llc | Dre4 nucleic acid molecules that confer resistance to coleopteran pests |
| WO2016000237A1 (en) | 2014-07-03 | 2016-01-07 | Pioneer Overseas Corporation | Plants having enhanced tolerance to insect pests and related constructs and methods involving insect tolerance genes |
| AU2015288157A1 (en) | 2014-07-11 | 2017-01-19 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Compositions and methods for producing plants resistant to glyphosate herbicide |
| CN108064129A (zh) | 2014-09-12 | 2018-05-22 | 纳幕尔杜邦公司 | 玉米和大豆中复合性状基因座的位点特异性整合位点的产生和使用方法 |
| CA2961733A1 (en) | 2014-09-17 | 2016-03-24 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Compositions and methods to control insect pests |
| WO2016048891A1 (en) | 2014-09-26 | 2016-03-31 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Wheat ms1 polynucleotides, polypeptides, and mehtods of use |
| RU2737538C2 (ru) | 2014-10-16 | 2020-12-01 | Пайонир Хай-Бред Интернэшнл, Инк. | Инсектицидные полипептиды, обладающие улучшенным спектром активности, и их применения |
| CN106852153B (zh) | 2014-10-16 | 2023-06-06 | 先锋国际良种公司 | 具有广谱活性的杀昆虫多肽和其用途 |
| CA2963558C (en) | 2014-10-16 | 2023-04-04 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Insecticidal proteins and methods for their use |
| CN107406838A (zh) | 2014-11-06 | 2017-11-28 | 纳幕尔杜邦公司 | Rna引导的内切核酸酶向细胞中的肽介导的递送 |
| US20170369902A1 (en) | 2014-12-16 | 2017-12-28 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Restoration of male fertility in wheat |
| WO2016099918A1 (en) | 2014-12-17 | 2016-06-23 | Pioneer Hi Bred International Inc | Modulation of yep6 gene expression to increase yield and other related traits in plants |
| US10947556B2 (en) | 2014-12-19 | 2021-03-16 | AgBiome, Inc. | Sequences to facilitate incorporation of DNA into the genome of an organism |
| WO2016106184A1 (en) | 2014-12-22 | 2016-06-30 | AgBiome, Inc. | Methods for making a synthetic gene |
| CN107635396B (zh) | 2015-01-15 | 2021-12-24 | 先锋国际良种公司 | 杀昆虫蛋白及其使用方法 |
| MX384801B (es) | 2015-01-21 | 2025-04-01 | Basf Se | Plantas que tienen una mayor tolerancia a herbicidas. |
| WO2016137774A1 (en) | 2015-02-25 | 2016-09-01 | Pioneer Hi-Bred International Inc | Composition and methods for regulated expression of a guide rna/cas endonuclease complex |
| CN107529763B (zh) | 2015-03-11 | 2021-08-20 | 先锋国际良种公司 | Pip-72的杀昆虫组合及使用方法 |
| WO2016149352A1 (en) | 2015-03-19 | 2016-09-22 | Pioneer Hi-Bred International Inc | Methods and compositions for accelerated trait introgression |
| EP3283504A1 (en) | 2015-04-17 | 2018-02-21 | Agbiome, Inc. | Pesticidal genes and methods of use |
| AU2016252027B9 (en) | 2015-04-22 | 2022-07-14 | AgBiome, Inc. | Insecticidal genes and methods of use |
| EP3292205B1 (en) | 2015-05-06 | 2023-08-02 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Methods and compositions for the production of unreduced, non-recombined gametes and clonal offspring |
| CN107709564B (zh) | 2015-05-09 | 2021-11-02 | 双刃基金会 | 来自少花龙葵的抗晚疫病基因及使用方法 |
| CN107873057B (zh) | 2015-05-11 | 2022-08-05 | 双刃基金会 | 用于转移对亚洲大豆锈病抗性的多核苷酸和方法 |
| CN107849546A (zh) | 2015-05-15 | 2018-03-27 | 先锋国际良种公司 | 对cas内切核酸酶系统、pam序列和指导rna元件的快速表征 |
| CN116333064A (zh) | 2015-05-19 | 2023-06-27 | 先锋国际良种公司 | 杀昆虫蛋白及其使用方法 |
| BR102016012010A2 (pt) | 2015-05-29 | 2020-03-24 | Dow Agrosciences Llc | Molécula de ácido nucleico, de ácido ribonucleico (rna) e de ácido ribonucleico de filamento duplo (dsrna), usos de célula, planta e semente, produto primário, bem como métodos para controlar uma população de pragas coleópteras e/ou hemípteras, para melhorar o rendimento de uma cultura, e para produzir uma célula vegetal transgênica e uma planta transgênica |
| CN114805503A (zh) | 2015-06-03 | 2022-07-29 | 农业生物群落股份有限公司 | 杀虫基因和使用方法 |
| AU2016278142A1 (en) | 2015-06-16 | 2017-11-30 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Compositions and methods to control insect pests |
| CA2989531A1 (en) | 2015-06-17 | 2016-12-22 | BASF Agro B.V. | Plants having increased tolerance to herbicides |
| BR112017027821A2 (pt) | 2015-06-22 | 2019-05-14 | AgBiome, Inc. | genes pesticidas e métodos de uso |
| CA3268091A1 (en) | 2015-08-06 | 2026-03-02 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Plant derived insecticidal proteins and methods for their use |
| JP2018525037A (ja) | 2015-08-24 | 2018-09-06 | ハロー−バイオ・アールエヌエーアイ・セラピューティックス、インコーポレイテッド | 遺伝子発現の調節のためのポリヌクレオチドナノ粒子及びその使用 |
| CN108513584A (zh) | 2015-08-28 | 2018-09-07 | 先锋国际良种公司 | 苍白杆菌介导的植物转化 |
| WO2017059341A1 (en) | 2015-10-02 | 2017-04-06 | Monsanto Technology Llc | Recombinant maize b chromosome sequence and uses thereof |
| WO2017062790A1 (en) | 2015-10-09 | 2017-04-13 | Two Blades Foundation | Cold shock protein receptors and methods of use |
| EP4400597A3 (en) | 2015-10-09 | 2024-10-16 | Monsanto Technology LLC | Novel rna-guided nucleases and uses thereof |
| AU2016338785B2 (en) | 2015-10-12 | 2022-07-14 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Protected DNA templates for gene modification and increased homologous recombination in cells and methods of use |
| EP3365440B1 (en) | 2015-10-20 | 2022-09-14 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Restoring function to a non-functional gene product via guided cas systems and methods of use |
| CA3001979A1 (en) | 2015-10-22 | 2017-04-27 | Basf Se | Plants having increased tolerance to herbicides |
| WO2017068543A1 (en) | 2015-10-22 | 2017-04-27 | Basf Se | Plants having increased tolerance to herbicides |
| WO2017079286A1 (en) | 2015-11-03 | 2017-05-11 | Two Blades Foundation | Wheat stripe rust resistance genes and methods of use |
| WO2017079026A1 (en) | 2015-11-06 | 2017-05-11 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Generation of complex trait loci in soybean and methods of use |
| WO2017105987A1 (en) | 2015-12-18 | 2017-06-22 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Insecticidal proteins and methods for their use |
| BR112018012893A2 (pt) | 2015-12-22 | 2018-12-04 | AgBiome, Inc. | genes pesticidas e métodos de uso |
| AU2016380351B2 (en) | 2015-12-29 | 2023-04-06 | Monsanto Technology Llc | Novel CRISPR-associated transposases and uses thereof |
| KR20250117482A (ko) | 2016-02-09 | 2025-08-04 | 시버스 유에스 엘엘씨 | 올리고뉴클레오타이드 매개된 유전자 보수를 사용한 표적화된 유전자 변형의 효율을 증가시키기 위한 방법 및 조성물 |
| US9896696B2 (en) | 2016-02-15 | 2018-02-20 | Benson Hill Biosystems, Inc. | Compositions and methods for modifying genomes |
| CA3010628A1 (en) | 2016-03-11 | 2017-09-14 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Novel cas9 systems and methods of use |
| WO2017155715A1 (en) | 2016-03-11 | 2017-09-14 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Novel cas9 systems and methods of use |
| AU2017234920B2 (en) | 2016-03-18 | 2023-08-17 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Methods and compositions for producing clonal, non-reduced, non-recombined gametes |
| CN108699117B (zh) | 2016-04-14 | 2023-06-23 | 先锋国际良种公司 | 具有改善的活性谱的杀昆虫多肽及其用途 |
| CA3021391A1 (en) | 2016-04-19 | 2017-10-26 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Insecticidal combinations of polypeptides having improved activity spectrum and uses thereof |
| MX387077B (es) | 2016-05-04 | 2025-03-19 | Pioneer Hi Bred Int | Proteinas insecticidas y metodos para sus usos. |
| CR20180597A (es) | 2016-05-20 | 2019-05-07 | Basf Agro Bv | Péptidos de tránsito dual para el direccionamiento a polipéptidos |
| KR20250057139A (ko) | 2016-05-27 | 2025-04-28 | 더 보드 오브 트러스티즈 오브 더 유니버시티 오브 일리노이 | 광합성 효율 및 성장이 증가된 형질전환 식물 |
| WO2017218207A1 (en) | 2016-06-16 | 2017-12-21 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Compositions and methods to control insect pests |
| CN109642235B (zh) | 2016-06-28 | 2023-12-29 | 孟山都技术公司 | 用于植物中的基因组修饰的方法和组合物 |
| CA3026113A1 (en) | 2016-07-01 | 2018-01-04 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Insecticidal proteins from plants and methods for their use |
| WO2018013333A1 (en) | 2016-07-12 | 2018-01-18 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Compositions and methods to control insect pests |
| AU2017294685B2 (en) | 2016-07-15 | 2023-10-26 | Basf Se | Plants having increased tolerance to herbicides |
| WO2018019860A1 (en) | 2016-07-27 | 2018-02-01 | BASF Agro B.V. | Plants having increased tolerance to herbicides |
| EP4219528A3 (en) | 2016-09-06 | 2023-09-13 | AgBiome, Inc. | Pesticidal genes and methods of use |
| MX387927B (es) | 2016-11-01 | 2025-03-19 | Pioneer Hi Bred Int | Proteinas insecticidas y metodos para su uso. |
| EP3555118B1 (en) | 2016-12-14 | 2021-08-18 | Pioneer Hi-Bred International Inc. | Insecticidal proteins and methods for their use |
| WO2018112356A1 (en) | 2016-12-16 | 2018-06-21 | Two Blades Foundation | Late blight resistance genes and methods of use |
| CN110382702A (zh) | 2016-12-20 | 2019-10-25 | 巴斯夫农业公司 | 具有增加的除草剂耐性的植物 |
| WO2018118811A1 (en) | 2016-12-22 | 2018-06-28 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Insecticidal proteins and methods for their use |
| EP3342780A1 (en) | 2016-12-30 | 2018-07-04 | Dow AgroSciences LLC | Pre-mrna processing factor 8 (prp8) nucleic acid molecules to control insect pests |
| WO2018140214A1 (en) | 2017-01-24 | 2018-08-02 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Nematicidal protein from pseudomonas |
| WO2018140859A2 (en) | 2017-01-30 | 2018-08-02 | AgBiome, Inc. | Pesticidal genes and methods of use |
| MX2019009371A (es) | 2017-02-08 | 2019-09-23 | Pionner Hi Bred Int Inc | Combinaciones insecticidas de proteinas insecticidas derivadas de plantas y metodos para su uso. |
| BR112019021380A2 (pt) | 2017-04-11 | 2020-05-05 | AgBiome, Inc. | genes pesticidas e métodos de uso |
| WO2018202800A1 (en) | 2017-05-03 | 2018-11-08 | Kws Saat Se | Use of crispr-cas endonucleases for plant genome engineering |
| MX2019013321A (es) | 2017-05-11 | 2020-02-10 | Pioneer Hi Bred Int | Proteinas insecticidas y metodos para su uso. |
| WO2018209209A1 (en) | 2017-05-12 | 2018-11-15 | Two Blades Foundation | Methods for screening proteins for pattern recognition receptor function in plant protoplasts |
| CA3064884A1 (en) | 2017-05-26 | 2018-11-29 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Insecticidal polypeptides having improved activity spectrum and uses thereof |
| EP3658675A1 (en) | 2017-07-28 | 2020-06-03 | Two Blades Foundation | Potyvirus resistance genes and methods of use |
| AR112465A1 (es) | 2017-07-31 | 2019-10-30 | Reynolds Tobacco Co R | Métodos y composiciones para la edición de genes de base viral en plantas |
| CN111247164A (zh) | 2017-08-03 | 2020-06-05 | 农业生物群落股份有限公司 | 杀有害生物基因及其使用方法 |
| JP7355730B2 (ja) | 2017-08-09 | 2023-10-03 | ベンソン ヒル，インコーポレイティド | ゲノムを修飾するための組成物及び方法 |
| CN111263810A (zh) | 2017-08-22 | 2020-06-09 | 纳匹基因公司 | 使用多核苷酸指导的核酸内切酶的细胞器基因组修饰 |
| EP3682012A1 (en) | 2017-09-11 | 2020-07-22 | R. J. Reynolds Tobacco Company | Methods and compositions for increasing expression of genes of interest in a plant by co-expression with p21 |
| US20200165626A1 (en) | 2017-10-13 | 2020-05-28 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Virus-induced gene silencing technology for insect control in maize |
| US11578334B2 (en) | 2017-10-25 | 2023-02-14 | Monsanto Technology Llc | Targeted endonuclease activity of the RNA-guided endonuclease CasX in eukaryotes |
| WO2019108619A1 (en) | 2017-11-28 | 2019-06-06 | Two Blades Foundation | Methods and compositions for enhancing the disease resistance of plants |
| WO2019106568A1 (en) | 2017-11-29 | 2019-06-06 | Basf Se | Plants having increased tolerance to herbicides |
| WO2019125651A1 (en) | 2017-12-19 | 2019-06-27 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Insecticidal polypeptides and uses thereof |
| WO2019126479A1 (en) | 2017-12-22 | 2019-06-27 | AgBiome, Inc. | Pesticidal genes and methods of use |
| WO2019140009A1 (en) | 2018-01-09 | 2019-07-18 | Cibus Us Llc | Shatterproof genes and mutations |
| EP3737226A1 (en) | 2018-01-12 | 2020-11-18 | Two Blades Foundation | Stem rust resistance genes and methods of use |
| AU2019210093B2 (en) | 2018-01-17 | 2025-03-20 | Basf Se | Plants having increased tolerance to herbicides |
| WO2019157522A1 (en) | 2018-02-12 | 2019-08-15 | Curators Of The University Of Missouri | Small auxin upregulated (saur) gene for the improvement of plant root system architecture, waterlogging tolerance, drought resistance and yield |
| CA3087861A1 (en) | 2018-03-02 | 2019-09-06 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Plant health assay |
| CN111867377B (zh) | 2018-03-14 | 2023-05-23 | 先锋国际良种公司 | 来自植物的杀昆虫蛋白及其使用方法 |
| AU2019234566B2 (en) | 2018-03-14 | 2024-09-26 | Hexima Limited | Insecticidal proteins from plants and methods for their use |
| CN111954462A (zh) | 2018-04-04 | 2020-11-17 | 希博斯美国有限公司 | Fad2基因和突变 |
| US11021717B2 (en) | 2018-04-20 | 2021-06-01 | AgBiome, Inc. | Pesticidal genes and methods of use |
| BR112020024863A2 (pt) | 2018-06-05 | 2022-02-01 | Lifeedit Inc | Nucleases guiadas por rna, fragmentos ativos e variantes das mesmas e métodos de uso |
| US11878999B2 (en) | 2018-08-29 | 2024-01-23 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Insecticidal proteins and methods for their use |
| ES2970169T3 (es) | 2018-12-27 | 2024-05-27 | Lifeedit Therapeutics Inc | Polipéptidos útiles para edición génica y métodos de uso |
| CA3130789A1 (en) | 2019-03-07 | 2020-09-10 | The Regents Of The University Of California | Crispr-cas effector polypeptides and methods of use thereof |
| BR112021026248A2 (pt) | 2019-06-27 | 2022-03-03 | Two Blades Found | Molécula de ácido nucleico isolada que codifica uma proteína atrlp23 engenheirada, proteína atrlp23 engenheirada, cassete de expressão, vetor, célula hospedeira, planta ou célula vegetal, métodos para fazer uma proteína atrlp23 engenheirada, para fazer uma molécula de ácido nucleico que codifica uma proteína atrlp23 engenheirada e para intensificar a resistência de uma planta |
| WO2021011348A1 (en) | 2019-07-12 | 2021-01-21 | The Regents Of The University Of California | Plants with enhanced resistance to bacterial pathogens |
| KR20220062289A (ko) | 2019-08-12 | 2022-05-16 | 라이프에디트 테라퓨틱스, 인크. | Rna-가이드된 뉴클레아제 및 그의 활성 단편 및 변이체 및 사용 방법 |
| CA3153301A1 (en) | 2019-09-05 | 2021-03-11 | Benson Hill, Inc. | Compositions and methods for modifying genomes |
| US20230203463A1 (en) | 2019-12-30 | 2023-06-29 | LifeEDIT Therapeutics, Inc. | Rna-guided nucleases and active fragments and variants thereof and methods of use |
| WO2021202513A1 (en) | 2020-03-31 | 2021-10-07 | Elo Life Systems | Modulation of endogenous mogroside pathway genes in watermelon and other cucurbits |
| TW202208626A (zh) | 2020-04-24 | 2022-03-01 | 美商生命編輯公司 | Rna引導核酸酶及其活性片段與變體，以及使用方法 |
| CA3173882A1 (en) | 2020-05-11 | 2021-11-18 | Alexandra Briner CRAWLEY | Rna-guided nucleic acid binding proteins and active fragments and variants thereof and methods of use |
| CA3175936A1 (en) | 2020-06-12 | 2021-12-16 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Alteration of seed composition in plants |
| US12168774B2 (en) | 2020-07-14 | 2024-12-17 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Insecticidal proteins and methods for their use |
| JP2023534693A (ja) | 2020-07-15 | 2023-08-10 | ライフエディット セラピューティクス，インコーポレイティド | ウラシル安定化タンパク質並びにその活性断片及びバリアント並びに使用方法 |
| WO2022035653A2 (en) | 2020-08-10 | 2022-02-17 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Compositions and methods for enhancing resistance to northern leaf blight in maize |
| EP4210475A4 (en) | 2020-09-10 | 2025-03-05 | Monsanto Technology LLC | ENHANCING GENE EDITING AND SITE-SPECIFIC INTEGRATION EVENTS USING MEIOTIC AND GERMLINE PROMOTERS |
| TWI910226B (zh) | 2020-09-11 | 2026-01-01 | 美商生命編輯治療學公司 | Ｄｎａ修飾酶及活性片段，及其變異體與使用方法 |
| US20240060079A1 (en) | 2020-10-23 | 2024-02-22 | Elo Life Systems | Methods for producing vanilla plants with improved flavor and agronomic production |
| CN116829707A (zh) | 2020-11-11 | 2023-09-29 | 孟山都技术公司 | 提高定点整合频率的方法 |
| WO2022115524A2 (en) | 2020-11-24 | 2022-06-02 | AgBiome, Inc. | Pesticidal genes and methods of use |
| CN112852810B (zh) * | 2021-01-28 | 2022-10-21 | 中国医学科学院血液病医院(中国医学科学院血液学研究所) | 一种真核基因表达启动子及其表达载体和应用 |
| EP4297565A1 (en) | 2021-02-26 | 2024-01-03 | Signalchem Plantech Corporation | Methods of high production of polyphenols from red lettuces and uses thereof |
| CN117295817A (zh) | 2021-03-22 | 2023-12-26 | 生命编辑制药股份有限公司 | Dna修饰酶及其活性片段和变体以及使用方法 |
| WO2022226316A1 (en) | 2021-04-22 | 2022-10-27 | Precision Biosciences, Inc. | Compositions and methods for generating male sterile plants |
| CA3214227A1 (en) | 2021-05-06 | 2022-11-10 | Rebekah Deter Kelly | Pesticidal genes and methods of use |
| BR112023023667A2 (pt) | 2021-05-11 | 2024-01-30 | Two Blades Found | Métodos para preparar uma biblioteca de genes de resistência à doença de planta e à praga de planta, para identificar um gene de resistência à doença de planta e à praga de planta, para produzir uma planta com resistência aprimorada a uma doença de planta e para limitar uma doença de planta na produção de safras agrícolas, biblioteca de genes de resistência candidatos, planta transgênica, coleção de plantas transgênicas, planta ou célula de planta resistente compreendendo um gene de resistência, gene de resistência isolado, célula hospedeira, molécula de ácido nucleico, cassete de expressão, vetor, planta de trigo, semente de trigo ou célula de trigo, planta ou semente transgênica, planta, semente da planta, uso da planta ou semente, produto alimentício humano ou animal, e, polipeptídeo |
| AU2022290278A1 (en) | 2021-06-11 | 2024-01-04 | LifeEDIT Therapeutics, Inc. | Rna polymerase iii promoters and methods of use |
| AU2022340861A1 (en) | 2021-09-03 | 2024-03-14 | BASF Agricultural Solutions Seed US LLC | Plants having increased tolerance to herbicides |
| AU2022356378A1 (en) | 2021-09-30 | 2024-05-02 | Two Blades Foundation | Plant disease resistance genes against stem rust and methods of use |
| AU2021470884A1 (en) | 2021-11-01 | 2024-05-02 | The University Of Manchester | Error prone dna polymerase for organelle mutation |
| GB202116307D0 (en) | 2021-11-12 | 2021-12-29 | Syngenta Crop Protection Ag | Herbicide resistance |
| US20250354160A1 (en) | 2021-12-07 | 2025-11-20 | AgBiome, Inc. | Pesticidal genes and methods of use |
| US20250304982A1 (en) | 2021-12-21 | 2025-10-02 | Benson Hill, Inc. | Compositions and methods for modifying genomes |
| WO2023141464A1 (en) | 2022-01-18 | 2023-07-27 | AgBiome, Inc. | Method for designing synthetic nucleotide sequences |
| CN119317713A (zh) | 2022-01-24 | 2025-01-14 | 生命编辑制药股份有限公司 | Rna引导核酸酶、其活性片段与变体，及使用方法 |
| WO2023154887A1 (en) | 2022-02-11 | 2023-08-17 | Northeast Agricultural University | Methods and compositions for increasing protein and/or oil content and modifying oil profile in a plant |
| EP4562168A1 (en) | 2022-07-28 | 2025-06-04 | Institut Pasteur | Hsc70-4 in host-induced and spray-induced gene silencing |
| CA3264752A1 (en) | 2022-08-12 | 2024-02-15 | Life Edit Therapeutics, Inc. | RNA-GUIDED NUCLEASE AND ACTIVE FRAGMENTS, ASSOCIATED VARIANTS AND METHODS OF USE |
| WO2024044596A1 (en) | 2022-08-23 | 2024-02-29 | AgBiome, Inc. | Pesticidal genes and methods of use |
| TW202424186A (zh) | 2022-08-25 | 2024-06-16 | 美商生命編輯治療學公司 | Rna引導核酸酶中介基因編輯用之具鎖核酸引導 rna之化學修飾 |
| EP4612284A2 (en) | 2022-11-04 | 2025-09-10 | Life Edit Therapeutics, Inc. | Evolved adenine deaminases and rna-guided nuclease fusion proteins with internal insertion sites and methods of use |
| AU2023398330A1 (en) | 2022-12-12 | 2025-06-19 | Basf Agricultural Solutions Us Llc | Plants having increased tolerance to herbicides |
| WO2024129674A1 (en) | 2022-12-13 | 2024-06-20 | AgBiome, Inc. | Pesticidal genes and methods of use |
| EP4658770A1 (en) | 2023-02-03 | 2025-12-10 | Syngenta Crop Protection AG | Herbicide resistant plants |
| EP4698556A1 (en) | 2023-04-19 | 2026-02-25 | Syngenta Crop Protection AG | Herbicide resistant plants |
| WO2025019283A1 (en) | 2023-07-14 | 2025-01-23 | Two Blades Foundation | Methods of improving the thermostability of plant immune receptors |
| WO2025019221A1 (en) | 2023-07-15 | 2025-01-23 | Two Blades Foundation | Broad-spectrum polerovirus resistance gene |
| WO2025022367A2 (en) | 2023-07-27 | 2025-01-30 | Life Edit Therapeutics, Inc. | Rna-guided nucleases and active fragments and variants thereof and methods of use |
| WO2025052302A1 (en) | 2023-09-05 | 2025-03-13 | Mazen Animal Health, Inc. | Methods and compositions for the production of mannanase in plants |
| GB202314578D0 (en) | 2023-09-22 | 2023-11-08 | Univ Manchester | Methods of producing homoplasmic modified plants or parts thereof |
| WO2025074304A1 (en) | 2023-10-03 | 2025-04-10 | Mazen Animal Health, Inc. | Compositions and methods for in planta production of a porcine circovirus vaccine |
| WO2025083619A1 (en) | 2023-10-18 | 2025-04-24 | Life Edit Therapeutics, Inc. | Rna-guided nucleases and acive fragments and variants thereof and methods of use |
| WO2025153657A2 (en) | 2024-01-17 | 2025-07-24 | Basf Se | Plants having increased tolerance to herbicides |
| WO2025153595A1 (en) | 2024-01-17 | 2025-07-24 | Basf Se | Plants having increased tolerance to herbicides |
| TW202546224A (zh) | 2024-02-12 | 2025-12-01 | 美商生命編輯治療學公司 | 新穎的ｒｎａ引導之核酸酶及用於聚合酶編輯之蛋白質 |
| WO2026003754A1 (en) | 2024-06-25 | 2026-01-02 | Life Edit Therapeutics, Inc. | Novel reverse transcriptases and uses thereof |
| WO2026003150A1 (en) | 2024-06-28 | 2026-01-02 | Basf Se | Plants with mutated tubulin polypeptide having increased tolerance to herbicides |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2060765T3 (es) | 1988-05-17 | 1994-12-01 | Lubrizol Genetics Inc | Sistema promotor de ubiquitina en plantas. |
| GB8818706D0 (en) | 1988-08-05 | 1988-09-07 | Ici Plc | Dna constructs & plants incorporating them |
| AU4210389A (en) | 1988-08-18 | 1990-03-23 | Calgene, Inc. | Plant elongation factor, promoters, coding sequences and uses |
| US5639952A (en) * | 1989-01-05 | 1997-06-17 | Mycogen Plant Science, Inc. | Dark and light regulated chlorophyll A/B binding protein promoter-regulatory system |
| EP0452269B1 (en) | 1990-04-12 | 2002-10-09 | Syngenta Participations AG | Tissue-preferential promoters |
| US5321936A (en) | 1992-10-05 | 1994-06-21 | Joseph Sendldorfer | Method and apparatus for folding cartons to consistently square the cartons |
| FR2712302B1 (fr) | 1993-11-10 | 1996-01-05 | Rhone Poulenc Agrochimie | Eléments promoteurs de gènes chimères de tubuline alpha. |
| AU695325B2 (en) | 1994-06-17 | 1998-08-13 | Scottish Crop Research Institute | Expression control polynucleotides derived from spliceosomal protein gene promoters |
| US5750866A (en) | 1994-09-08 | 1998-05-12 | American Cyanamid Company | AHAS promoter useful for expression of introduced genes in plants |
| DE69633568T2 (de) * | 1995-07-26 | 2005-12-22 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Expressionskontrollesequenz zur allgemeinen und effektiven genexpression in pflanzen |
-
1999
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