ES2305204T3 - Compuestos constituidos por una molecula analgesica asociada a un vector. - Google Patents

Compuestos constituidos por una molecula analgesica asociada a un vector. Download PDF

Info

Publication number
ES2305204T3
ES2305204T3 ES02704883T ES02704883T ES2305204T3 ES 2305204 T3 ES2305204 T3 ES 2305204T3 ES 02704883 T ES02704883 T ES 02704883T ES 02704883 T ES02704883 T ES 02704883T ES 2305204 T3 ES2305204 T3 ES 2305204T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
vector
analgesic
compound according
molecule
morphine
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES02704883T
Other languages
English (en)
Inventor
Jamal Temsamani
Anthony R. Rees
Philippe Clair
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Synt EM SA
Original Assignee
Synt EM SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Synt EM SA filed Critical Synt EM SA
Application granted granted Critical
Publication of ES2305204T3 publication Critical patent/ES2305204T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P23/00—Anaesthetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Image Analysis (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Un compuesto caracterizado porque está constituido por una molécula analgésica que es morfina 6-glucurónido (M6G) unida a un vector capaz de transportar dicha molécula analgésica a través de la barrera hematoencefálica, siendo dicho vector un péptido lineal de secuencia RRLSYSRRRF (SynB3, SEQ ID Nº: 1 en el listado de secuencias).

Description

Compuestos constituidos por una molécula analgésica asociada a un vector.
El presente invento se refiere a compuestos constituidos por una molécula analgésica vectorizada mediante su unión a un vector de manera que dicha molécula analgésica atraviesa la barrera hematoencefálica, de modo que tiene una utilización de dichos compuestos para la preparación de medicamentos útiles para el tratamiento del dolor.
La morfina constituye uno de los compuestos más utilizados en el tratamiento de los dolores de media y alta intensidad. Desgraciadamente, el tratamiento con morfina va frecuentemente acompañado por efectos indeseables tales como: euforia o somnolencia, depresión respiratoria, inhibición del tránsito intestinal, náuseas, vómitos y sobretodo síndromes de dependencia e inducción de tolerancia (Cherny y otros, 1996). Tras su administración en animales o en pacientes, la morfina experimenta un efecto importante de primer paso hepático, lo cual tiene por consecuencia una biodisponibilidad baja y variable según la vía de administración. La morfina experimenta principalmente una glucuronidación enantioselectiva catalizada por la enzima UDP-glucuroniltransferasa (UGT) y el hígado aparece como el sitio principal de su biotransformación. Uno de los principales derivados de la morfina es su metabolito, la morfina 6-glucurónido (M6G).
Este metabolito posee también una actividad analgésica. Estudios de unión ligando-receptor a los opiáceos realizados in vitro han mostrado que la M6G se une a los receptores opioides y que es de 3 a 5 veces menos afin a los receptores \mu que la morfina (Christensen y Jorgensen 1987, Frances y otros, 1992). Los receptores \mu son de dos tipos: receptores \mu1 de muy alta afinidad y débil capacidad, y receptores \mu2 de baja afinidad y fuerte capacidad (Pasternak y Wood, 1986). La unión a los receptores \mu1 implica una reacción analgésica de tipo supraespinal y la disminución del ciclo de renovación de la acetilcolina, mientras que la unión a los receptores \mu2 produce una reacción analgésica de tipo espinal y es responsable de la depresión respiratoria, de la inhibición del tránsito intestinal y de más signos asociados a la dependencia.
La morfina y su metabolito activo, la M6G, deben franquear la barrera hematoencefálica (BHE) antes de distribuirse en el cerebro, lugar de acción principal de sus efectos analgésicos. La morfina es una base en la que el pKa se sitúa entre 8 y 9, por tanto débilmente ionizada a pH sanguíneo, y por tanto la penetración cerebral a estado descrita como una simple difusión. Su metabolito, la M6G, es un ácido (pKa entre 2 y 3), fuertemente ionizada a un pH sanguíneo. A causa de su hidrofilia, la penetración de la M6G es muy limitada en el cerebro.
Ha sido demostrado que la administración intracerebroventricular, a igual dosis, de morfina y de M6G produce un efecto analgésico que es de 50 a 100 veces más importante para la M6G que para la morfina (Pasternak y otros, 1987; Frances y otros, 1982; Satín y otros 1995). Por el contrario, mediante inyección sistémica, las dos moléculas tienen aproximadamente la misma actividad analgésica. Estos resultados indican claramente que la penetración de la M6G en el cerebro está muy limitada con respecto a la de la morfina.
La barrera hematoencefálica está constituida por células endoteliales que son un obstáculo, de diversas maneras, para las moléculas que intentan franquearlas. Ellas constituyen una barrera física representada por las uniones estrechas que se forman entre ellas e impiden todo paso por la vía paracelular y hace por tanto que la actividad sea más débil. Todo esto limita fuertemente el pase de las moléculas del plasma hacia el espacio extracelular cerebral.
Así, en el marco de sus trabajos de investigación, la solicitante ha puesto en evidencia que los vectores, como los péptidos lineales derivados de los péptidos naturales tales como la Protegrina y la Taquiplesina transportan moléculas activas a través de la BHE. La Protegrina y la Tachiplesina son péptidos naturales tales que la protegrina y la taquiplesina transportan moléculas activas a través de la BHE. La Protegrina y la Taquiplesina son péptidos naturales en los que la estructura es del tipo horquilla mantenida por puentes disulfuro. Estos puentes juegan un papel importante en la actividad citolítica observada sobre células humanas. La reducción irreversible de estos puentes permiten obtener péptidos lineales, no citotóxicos, que tienen la capacidad de atravesar rápidamente las membranas de las células de mamíferos mediante un mecanismo pasivo que no necesita de un receptor de membrana.
Los trabajos y resultados concernientes a estos péptidos lineales y su utilización como vectores de moléculas activas a través de la barrera hematoencefálica han sido descritos en las solicitudes de patente francesa Nº 98/15074 depositada el 30 de Noviembre de 1998 y Nº 99/02938 depositada el 26 de Noviembre de 1999 por la solicitante.
La solicitud de patente PCT WO 0032236 muestra un aumento de la actividad analgésica de la delargina vectorizada con ayuda de SynB1 y ensaya el conjugado de SynB3 con la doxorubicina.
El artículo de Rouselle C y otros ("New Advances in the transport of doxorubicin through the Blood-Brain Barrier by a peptide vector-mediated strategy", Molecular Pharmacology, vol 578, nº 4, abril 2000 (2000-04), páginas 679-686, ISSN: 0026-895X) describe que la doxorubicina conjugada con SynB1 atraviesa la barrera hematoencefálica.
El artículo de Derossi D y otros ("Trojan Peptides: The penetrating system for intraocular delivery", Trends in Cell Biology, vol 8, febrero de 1998 (1998-02), páginas 84-87, ISSN: 0982-8924) describe otros péptidos.
\newpage
La solicitud de patente PCT WO 9907728 describe conjugados con péptidos antibióticos, en el que un péptido designado SM2195 corresponde a SynB3.
La solicitud de patente PCT WO 00 32237 describe el mismo péptido acoplado a la doxorubicina.
El artículo de Rouselle Christophe y otros (Enhanced delivery of doxorubicin into the brain via a peptide-vector-mediated strategy: Saturation kinetics and specificity- Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, vol. 296 nº 1, Enero 2001 (2001-01) páginas 124-131, ISSN: 0022-3565) describe el transporte aumentado del conjugado SynB3 y de la doxorubicina a través de la barrera hematomeningeal.
El presente invento intenta proporcionar un medicamento analgésico que presente menos efectos secundarios que la morfina. Este objetivo es obtenido según el invento gracias a un conjugado de la morfina-6-glucurónido, metabolito de la morfina, con el péptido SynB3, que es un péptido vector lineal derivado del péptido antibiótico.
De manera preferente, el vector capaz de vectorizar dicha molécula analgésica a través de la barrera hematoencefálica es un péptido lineal derivado de la familia de la Protegrina o de la Taquiplesina.
Se entiende por péptido derivado de la familia de la Protegrina todo péptido que responda a la fórmula siguiente:
(I)BXXBXXXXBBBXXXXXXB
Y por péptido derivado de la familia de la Taquiplesina todo péptido que responda a la fórmula II siguiente:
(II)BXXXBXXXBXXXXBBXB
En las que:
- los grupos B, idénticos o diferentes, representan un residuo de ácido aminado cuya cadena lateral lleva un grupo básico, y
los grupos X, idénticos o diferentes, representan un residuo de ácido aminado alifático o aromático
o dichos péptidos de fórmulas (I) o (II), bajo la forma retro, constituidos por ácidos aminados de configuración D y/o L, o un fragmento de estos constituido por una secuencia de al menos 5 y preferiblemente de al menos 7 ácidos aminados sucesivos de péptidos de fórmulas (I) o (II).
A título de ejemplo de los derivados de la morfina, se pueden citar los que tienen un actividad analgésica pero que, en tanto que tales, no atraviesan la barrera hematoencefálica, como los metabolitos de la morfina y notablemente la M6G.
Preferentemente, la molécula analgésica utilizada en el marco del presente invento es la M6G.
Las posiciones de unión para la molécula analgésica pueden ser a nivel de los extremos N-terminal o C-terminal o bien al nivel de cadenas laterales del péptido vector.
Grupos funcionales tales como -OH, -SH, -COOH, -NH_{2} pueden estar naturalmente presentes o pueden ser introducidos, bien sobre el vector, bien sobre la molécula analgésica, bien sobre los dos.
La unión entre el vector y la molécula analgésica puede ser realizada por todo medio de unión aceptable tenida cuenta de la naturaleza química y del tamaño. Tanto del vector como de la molécula analgésica. Las uniones pueden ser covalente, hidrófobas o iónicas, separables o no separables en los medios fisiológicos o en el interior de las células.
Esta unión entre el vector y la molécula analgésica puede ser efectuadas de manera directa o indirecta.
Cuando la unión es efectuada de manera indirecta, se puede utilizar ventajosamente un agente de unión. A título de ejemplo no limitante, agentes de unión utilizables en el marco del invento, se pueden citar agentes bi- o multifuncionales que contienen grupos alquilo, arilo, aralquilo o peptídico, ésteres, aldehídos o ácidos de alquilo, arilo o aralquilo, grupos anhídridos, sulfhidrilo, o carboxilos tales como los derivados del ácido maleimil benzoico, del ácido maleimil propiónico y los derivados succinimidilo, los grupos derivados del bromuro o cloruro de cianógeno, carbonildiimidazol, ésteres de succinimida o de halogenuros sulfónicos.
Ventajosamente, se utilizan uniones que implican al menos un puente disulfuro, los cuales se caracterizan por su estabilidad en el plasma tras la inyección del compuesto, después una vez que los compuestos del invento han atravesado la barrera hematoencefálica, dicho puente disulfuro es reducido liberando la molécula analgésica activa. La unión puede ser efectuada en cualquier parte del vector.
\newpage
El compuesto analgésico vectorizado está constituido por un derivado de la morfina acoplado por su posición 6 al vector.
Más preferiblemente, cuando la molécula analgésica es la morfina, el vector se fija a nivel de la posición 6 de dicha molécula de morfina.
Aún más preferible, cuando la molécula analgésica es la morfina-6-glucurónido, el vector es fijado a nivel del ácido carboxílico del residuo glucurónido de dicha molécula de morfina-6-glucurónido.
El presente invento tiene también por objeto la utilización de dichos compuestos vectorizados de una molécula analgésica en una composición farmacéutica para la preparación de un medicamento útil para el tratamiento del dolor.
De preferencia, la composición farmacéutica se presenta bajo una forma apropiada para una administración por vía sistémica, por vía parenteral, por vía oral, por vía rectal, por vía nasal, por vía transdérmica, por vía pulmonar.
El invento tiene igualmente por objeto un método de tratamiento del dolor que consiste en administrar a un paciente una composición farmacéutica que comprende al menos un compuesto vectorizado constituido por una molécula analgésica unida a un vector, siendo dicho vector un derivado de la familia de la Protegrina o de la Taquiplesina.
Las figuras presentadas en el anexo ilustran diferentes resultados obtenidos por la solicitante como resultado de los trabajos experimentales que le han permitido obtener los compuestos vectorizados del invento:
- la figura 1 representa esquemáticamente la síntesis química de un compuesto vectorizado de la morfina 6-glucurónido (M6G), metabolito de la morfina.
- la figura 2 ilustra los resultados de un estudio comparativo de la eficacia analgésica entre el compuesto 1 (morfina) y el compuesto 2 (M6G vectorizado).
- la figura 3 ilustra los resultados de un estudio comparativo de la eficacia analgésica entre el compuesto 1 (morfina), el compuesto 2 (M6G vectorizado) y el compuesto 3 (M6G libre).
- la figura 4 ilustra un estudio comparativo de la penetración en la BHE de la M6G libre (compuesto 1) con la de la M6G vectorizada.
- la figura 5 ilustra los resultados de un estudio comparativo del efecto de la morfina, de la M6G vectorizada y de la M6G libre sobre las depresiones respiratorias. Los compuestos han sido utilizados a la dosis ED50 (Figura 5, A), a la dosis 5x ED50 (Figura 5, B) y a la dosis 10x ED50 (Figura 5, C).
El presente invento será mejor comprendido con la lectura de la descripción de los trabajos experimentales efectuados en el marco de las investigaciones llevadas a cabo por la solicitante.
I. Preparación de los compuestos a ensayar I.1 Síntesis química de la M6G vectorizada a) Síntesis del péptido vector
El péptido SynB3 está ensamblado sobre la fase sólida según una estrategia Foc/tu, cortado Y desprotegido por el ácido trifluoroacético, después purificado mediante cromatografía de alta presión preparativa en fase inversa y liofilizada. Su pureza (>95%) y su identidad son confirmadas mediante HPLC analítica y mediante espectrometría de masas.
b) Acoplamiento de un eslabón CyA-3MP sobre el péptido vector
El péptido SynB3 de secuencia RRLSYSRRRF (SEQ ID Nº 1 en el listado de secuencias en el anexo) (un equivalente molar) es incubado durante 30 minutos con un equivalente molar del reactivo SPDP (S-piridinio succinimidil-mercaptopropionato) en el disolvente DMF (Dimetilformamida) en presencia de dos equivalente molares de DIEA (Diisopropiletilamina). El péptido resultante Py-SS-3MP-SynB3 es precipitado con éter, después purificado mediante cromatografía de alta presión preparativa en fase inversa y liofilizada. Su pureza (>95%) y su identidad son confirmadas mediante HPLC analítica y mediante espectrometría de masas.
Un equivalente molar del péptido Py-SS-3MP-SynB3 es incubada durante 30 minutos con cuatro equivalente molares de CyA, HC1 (Clorhidrato de cisteamina) en el disolvente DMF (Dimetilformamida) en presencia de cuatro equivalentes molares de DIEA. El péptido resultante, CyA-SS-3MP-SynB3 es precipitado con éter, después purificado mediante cromatografía de alta presión preparativa en fase inversa y liofilizada. Su pureza (>95%) y su identidad son confirmadas mediante HPLC analítica y por espectrometría de masas.
c) Acoplamiento de M6G sobre CyA-SS-3MP-SynB3
Un equivalente molar de M6G es incubado con dos equivalente molares de PyBOP, en presencia de cuatro equivalentes molares de DIEA en el disolvente DMF.
Un equivalente molar de péptido CyA-SS-3MP-SynB3 disuelto en DMF es añadido enseguida a la mezcla de reacción, después incubado durante 30 minutos. El producto formado M6G-CyA-SS-3MP-SynB3 es precipitado con éter, después purificado mediante cromatografía de alta presión preparativa en fase inversa y liofilizada. Su pureza (>95%) y su identidad son confirmadas mediante HPLC analítica y mediante espectrometría de masas.
1.2 Compuestos a ensayar
La tabla 1 a continuación recapitula los diferentes compuestos ensayados.
TABLA 1
3
II. Comparación del efecto analgésico II.1. Ensayo utilizado: ensayo de la placa calefactora a) Condiciones experimentales
El ensayo de la placa calefactora es realizado siguiendo el protocolo experimental descrito por Eddy NB y otros. Synthetic analgesics. 1- Methadone isomers and derivatives J. Pharmacol. Exp. Ther. 1950 (98): 121-137.
El ratón depositado sobre una placa calentada a 55ºC manifiesta el dolor lamiéndose las patas anteriores o más raramente mediante un salto. El tiempo de reacción es entonces anotado. Los compuestos estudiados son administrados por vía intravenosa al nivel de la vena caudal del ratón a una dosis de 1 mg/kg. El tiempo de reacción es entonces medido tras 5 a 90 minutos (los resultados presentados en la figura 2) y de 5 a 180 minutos (resultados presentados en la figura 3).
b) Resultados
En un primer momento, los inventores han comparado la actividad analgésica del compuesto MG6 libre con respecto al del compuesto obtenido mediante vectorización de la M6G con el péptido SynB3. Los resultados obtenidos son representados en la figura 2 y muestran claramente que el efecto analgésico de la M6G vectorizada (compuesto 2) es bastante más significativo que el obtenido con la M6G libre (compuesto 1). Este efecto analgésico es lento y dura aún tras 90 minutos después de la administración.
En otra experiencia, el efecto de la M6G vectorizada (compuesto 2) ha sido comparado con el de la morfina (compuesto 3) a la misma dosis de 1 mg/kg. Los resultados de este experimento (Figura 3) muestran claramente que la M6G vectorizada (compuesto 2) tiene un efecto analgésico bastante más importante que el de la morfina y esté a un tiempo que va hasta 120 minutos tras la administración.
11.2. Ensayo utilizado: Ensayo "Tail Flick" (movimiento de cola) a) Condiciones experimentales
La cola del ratón es colocada delante de una fuente de rayos infrarrojos. La luz es focalizada sobre la superficie ventral de la cola a modo de producir una temperatura de la superficie de 55ºC. Cuando el ratón mueve la cola, el tiempo de reacción es entonces medido. Los compuesto estudiados son administrados por vía subcutánea. Tres medidas son echas antes de la administración del producto para tener un tiempo de base. El porcentaje de ratones analgesiados se representa a continuación por el número de ratones que tienen un tiempo de reacción que es menos del doble del tiempo de base dividido por el número de ratones totales. La dosis ED50 representa la concentración que da el 50% de ratones analgesiados.
b) Resultados
En un primer tiempo, hemos comparado el efecto analgésico de compuestos de morfina o M6G libre con respecto al del compuesto obtenido mediante vectorización de la M6G con el péptido SynB3, este por dos vías de administración: intravenosa o subcutánea. Los autores han determinado en el modelo "Tail Flick", que para cada producto, la ED50 representa la dosis que da un efecto analgésico en el 50% de los ratones. La tabla 2 muestra que la dosis necesaria para inducir un efecto analgésico en el 50% de los ratones es bastante más débil para la M6G vectorizada (compuesto 2) que para la morfina (compuesto 3) o el M6G libre (compuesto 1). Esto indica claramente que el efecto analgésico de la M6G vectorizada es bastante más significativo que el de los otros productos ensayados.
\vskip1.000000\baselineskip
TABLA 2 Comparación de la actividad analgésica
4
En un segundo tiempo, los autores han medido la duración del efecto analgésico en estos ratones. La tabla 3 muestra que no solamente la M6G vectorizada tiene un efecto más analgésico sino que este efecto dura más largo tiempo que el de la M6G o la morfina.
\vskip1.000000\baselineskip
TABLA 3 Comparación del tiempo del efecto analgésico
5
III. Comparación de la afinidad a los receptores a) Condiciones experimentales
Los homogenados de tejido son preparados a partir de cerebros de ternera (tálamo para \mu1 y \mu2 y el córtex frontal para delta). [3H] [D-Ala^{2}, D-Leu^{5}] encefalina (DADLE) (0,7 nM) es incubada con 3 ml de homogenado de tejido (15 mg de tejido por ml) en presencia de 10 nM de [D-Pen^{2}, D-Pen^{5}) encefalina (DPDPE) y de concentraciones crecientes de M6G libre o vectorizada. En estas condiciones, se observa una unión específica en los sitios de unión del \mu1. Para el receptor \mu2, [D-Ala^{2}, MePhe^{4}, Gly (ol)^{5}]encefalina (DAMGO) (1 nM) es incubado con 3 ml de homogenado de tejido en presencia de 5 nM (D-Ser^{2}, Leu^{5})encefalina-Thr6 (DSLET) y de concentraciones crecientes de M6G libre o vectorizada. Para el receptor delta, el tejido es incubado con la [3H][D-Pen^{2}, D-Pen^{5}] encefalina en presencia de M6G libre o vectorizada. La unión no específica es determinada gracias a la adición a los ligandos marcados de 1 \muM de levalorfano.
b) Resultados
La M6G es un metabolito activo de la morfina que se une a lo receptores \mu con un muy alta afinidad. Los autores han comparado la afinidad de la M6G libre (compuesto 1) con la de la M6G vectorizada (compuesto 2) con los receptores \mu1, \mu2 y delta.
Los resultados muestran que el hecho de añadir un péptido de unión y un péptido vector (SynB3) a la M6G aumenta su afinidad alrededor de 3 veces al receptor \mu1 y de 10 veces al receptor \mu2. Por el contrario, la unión al receptor delta permanece la misma.
\vskip1.000000\baselineskip
TABLA 4 Afinidad a los receptores \mu1 y \mu2 (Ki expresada en nM)
6
IV. Comparación de la penetración en el cerebro a) Condiciones experimentales: Perfusión cerebral in situ
Los ratones son anestesiados (20-25 g, Iffa-Credo; L'Arbresle, Francia). Tras la exposición de la carótida común, la arteria carótida extrema derecha es unida a nivel de la bifurcación con la carótida interna y la carótida común se une entre el corazón y el sitio de implantación del catéter (catéter polietileno, ID:0,76). Este, previamente relleno con una disolución de heparina (100 unidades/ml) es insertada en la carótida común. Los ratones son prefundidos con el tampón de perfusión (128 mM NaCl, 24 mM NaHCO_{3}, 4,2 mM KCl, 2,4 mM NaH_{2}PO_{4}, 1,5 mM CaCl_{2}, 0,9 mM MgSO_{4} y 9 mM de D-Glucosa). Este tampón es filtrado y después hecho burbujear por una mezcla que contiene 95% O_{2}/5% CO_{2} a modo de mantener el pH próximo a 7,4 y de alimentar el cerebro con oxígeno en el curso de la perfusión.
Los ratones son prefundidos con el tampón que contiene la M6G libre (compuesto 1, actividad específica 84 mCi/mg) o la M6G vectorizada (compuesto 2; actividad específica 14,3 mCi/mg). Justo antes del inicio de la perfusión, el corazón se para mediante la sección de los ventrículos, esto a fin de evitar en el curso de la perfusión un reflujo del prefundido. El hemisferio derecho es entonces perfundido a una velocidad de 10 ml/min durante 60 segundos tras lo cual el ratón es decapitado. La cantidad de radioactividad en el hemisferio derecho es entonces medida y el índice de penetración cerebral (Kin) es calculado.
b. Resultados
En este estudio, los autores han comparado la penetración en la BHE de la M6G libre (compuesto 1) con la de la M6G vectorizada (compuesto 2). Los dos productos han sido prefundidos en el cerebro del ratón. Tras 60 segundos de perfusión en el tampón, la penetración de los productos es estimada por la constante de flujo o Kin en \mul/seg/g. La figura 4 muestra que la vectorización de la M6G por el vector SynB3 aumenta su paso en el cerebro alrededor de 100 veces tras una perfusión de 60 segundos en el tampón.
V. Comparación de la depresión respiratoria a. Condiciones experimentales
La depresión respiratoria ha sido estudiada en ratas. El producto es inyectado en los animales por vía subcutánea y tras un cierto tiempo, una alícuota de sangre es tomada de la arteria femoral vía un catéter implantado previamente. Durante el estudio, los animales son colocados en un lugar tranquilo. Tras la toma sanguínea, la saturación del oxígeno (SO_{2}) y la presión de CO_{2} (PCO_{2}) son medidas. Los valores de SO_{2} son medidos en % de O_{2}. Las ratas han sido inyectadas con 3 dosis de cada producto que corresponde a ED50, 5x ED50, 10x ED50, (ver Tabla 5). Tras el tiempo que va desde 0 a 150 min (30, 60, 90, 120, 150 min), la sangre es tomada y la saturación en O_{2} (SO_{2}) y la presión de CO_{2} son medidas.
TABLA 5 Dosis utilizadas para el estudio de la depresión respiratoria
7
b. Resultados
Aunque la morfina sea la sustancia más utilizada en el tratamiento de dolores de media y gran intensidad, su utilización induce una depresión respiratoria en los pacientes. Hemos por tanto comparado el efecto de M6G vectorizada a la de la morfina y de la M6G libre.
A la dosis ED50 (Figura 5), ningún efecto ha sido observado para la M6G vectorizada o la M6G. Los autores han observado, sin embargo, una pequeña disminución entre 30 y 90 min de la saturación en O_{2} para la morfina.
A las dosis 5x ED50 y 10x ED50 (Figura 5 B y C), la morfina y la M6G han inducido una disminución muy significativa de la saturación de oxígeno. La tasa de oxígenos descendió hasta aproximadamente 50% entre 30 y 90 min. Por el contrario, para el M6G vectorizados, ninguna disminución notable ha sido obtenida.
A la dosis 10x ED50 (Figura 5 C), la fuerte disminución observada con la M6G libre provocó la muerte de algunos animales al tiempo de 60 min.
Los resultados presentados en la figura 5 demuestran que el producto vectorizado M6G tiene no sólo un efecto analgésico mejor que la M6G libre o la morfina sino que permite también disminuir de forma significativa los efectos secundarios asociados con la morfina.
<110> SYNT:EM
\vskip0.400000\baselineskip
<120> COMPUESTOS CONSTITUIDOS POR UNA MOLÉCULA ANALGÉSICA UNIDA A UN VECTOR CAPAZ DE VECTORIZAR DICHA MOLÉCULA A TRAVÉS DE LA BARRERA HEMATOENCEFÁLICA Y COMPOSICIONES FARMACÉUTICAS QUE LOS CONTIENEN.
\vskip0.400000\baselineskip
<130> 12054PCT
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<140> PCT/FR02/XXXXXX
\vskip0.400000\baselineskip
<141> 2002-02-22
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<150> FR 01/02504
\vskip0.400000\baselineskip
<151> 2001-02-23
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<160> 1
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<170> PatenIn version 3.1
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<210> 1
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 10
\vskip0.400000\baselineskip
<212> PRT
\vskip0.400000\baselineskip
<213> sin identificar
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip0.400000\baselineskip
<221> PÉPTIDO
\vskip0.400000\baselineskip
<222> (1)..(10)
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Péptido SynB3
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<400> 1
8

Claims (12)

1. Un compuesto caracterizado porque está constituido por una molécula analgésica que es morfina 6-glucurónido (M6G) unida a un vector capaz de transportar dicha molécula analgésica a través de la barrera hematoencefálica, siendo dicho vector un péptido lineal de secuencia RRLSYSRRRF (SynB3, SEQ ID Nº: 1 en el listado de secuencias).
2. Un compuesto según la reivindicación 1, caracterizado porque las posiciones de unión de la molécula analgésica sobre el vector se sitúa al nivel de los extremos N-terminal o C-terminal o bien al nivel de las cadenas laterales de dicho vector.
3. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 ó 2, caracterizado porque la unión entre la molécula analgésica y el vector está efectuado en medio de un grupo funcional presente de manera natural o introducido bien sobre el vector, bien sobre la molécula analgésica, bien sobre los dos.
4. Un compuesto según la reivindicación 3, caracterizado porque el grupo funcional es elegido entre los grupos:
-OH, -SH, -COOH, o -NH_{2}.
5. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque la unión entre la molécula analgésica y el vector es una unión elegida entre una unión covalente, una unión hidrofóbica, una unión iónica, una unión separable o una unión no separable en medios fisiológicos o en el interior de las células.
6. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizada porque la unión entre la molécula analgésica y el vector es una unión directa.
7. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque la unión entre la molécula analgésica y el vector es una unión indirecta llevada a cabo por medio de un agente de unión.
8. Un compuesto según la reivindicación 7, caracterizado porque el agente de unión es elegido entre agentes bi- o multifuncionales que contienen grupos alquilo, arilo, aralquilo o peptídico, ésteres, aldehídos o ácidos de alquilo, de arilo o de aralquilo, grupos anhídridos, sulfhidrilos, o carboxilos tales como los derivados del ácido maleimil benzoico, del ácido maleimil propiónico y derivados succinimidil, grupos derivados de bromuro o cloruro de cianógeno, carbonildiimidazol, ésteres de succinimida o halógenos sulfónicos.
9. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, caracterizado porque la unión entre la molécula analgésica y el vector implica por lo menos un puente disulfuro.
10. Un compuesto según la reivindicación 1, caracterizado en que el vector está fijado a un nivel de ácido carboxílico de un residuo glucurónico de dicha molécula de morfina 6-glucurónido.
11. La utilización de un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en una composición farmacéutica para la preparación de un medicamento útil para el tratamiento del dolor.
12. La utilización según la reivindicación 11, caracterizada porque la composición farmacéutica se presenta sobre una forma apropiada para una administración por vía sistémica, por vía parenteral, por vía oral, por vía rectal, por vía nasal, por vía transdérmica, por vía pulmonar.
ES02704883T 2001-02-23 2002-02-22 Compuestos constituidos por una molecula analgesica asociada a un vector. Expired - Lifetime ES2305204T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0102504A FR2821272B1 (fr) 2001-02-23 2001-02-23 Composes constitues d'une molecule analgesique liee a un vecteur capable de vectoriser ladite molecule a travers la barriere hematoencephalique et compositions pharmaceutiques les contenant
FR0102504 2001-02-23

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2305204T3 true ES2305204T3 (es) 2008-11-01

Family

ID=8860381

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES02704883T Expired - Lifetime ES2305204T3 (es) 2001-02-23 2002-02-22 Compuestos constituidos por una molecula analgesica asociada a un vector.

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20040248806A1 (es)
EP (1) EP1397161B1 (es)
JP (1) JP2004529886A (es)
AT (1) ATE393633T1 (es)
AU (1) AU2002238687B2 (es)
CA (1) CA2438824A1 (es)
DE (1) DE60226319T2 (es)
ES (1) ES2305204T3 (es)
FR (1) FR2821272B1 (es)
IL (1) IL157214A0 (es)
WO (1) WO2002067994A2 (es)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2864082B1 (fr) * 2003-12-22 2006-03-10 Synt Em Nouveau derive de la morphine-6-glucuronide, composition pharmaceutique le contenant et son utilisation pour le traitement de la douleur
FR2907121B1 (fr) * 2006-10-12 2012-05-04 Neorphys Nouveaux derives morphiniques
UY32099A (es) 2008-09-11 2010-04-30 Enanta Pharm Inc Inhibidores macrocíclicos de serina proteasas de hepatitis c
FR2968662B1 (fr) 2010-12-10 2013-11-22 Roussy Inst Gustave Nouveaux derives d'oxazaphosphorines pre-activees, utilisation et methode de preparation
CN103534256B (zh) 2010-12-30 2016-08-10 益安药业 大环丙型肝炎丝氨酸蛋白酶抑制剂
KR20140003521A (ko) 2010-12-30 2014-01-09 이난타 파마슈티칼스, 인코포레이티드 페난트리딘 매크로사이클릭 ｃ형 간염 세린 프로테아제 억제제
US10201584B1 (en) 2011-05-17 2019-02-12 Abbvie Inc. Compositions and methods for treating HCV
CN103012596B (zh) * 2012-12-28 2014-12-03 兰州大学 具有血脑屏障通透性的内吗啡肽衍生肽及其合成和应用
WO2015103490A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 Abbvie, Inc. Solid antiviral dosage forms

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2767323B1 (fr) * 1997-08-12 2001-01-05 Synt Em Peptides lineaires derives de peptides antibiotiques, leur preparation et leur utilisation pour vectoriser des substances actives
US6258774B1 (en) * 1998-03-19 2001-07-10 University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey Carrier for in vivo delivery of a therapeutic agent
FR2786398B1 (fr) * 1998-11-30 2002-12-27 Synt Em Composition pharmaceutique anti-cancereuse et anti-chimioresistance comprenant un agent anticancereux et au moins un peptide
FR2786397B1 (fr) * 1998-11-30 2003-01-10 Synt Em Vecteurs peptidiques de substances a travers la barriere hematoencephalique pour etre utilises dans le diagnostic ou la therapie d'une affection du snc

Also Published As

Publication number Publication date
FR2821272A1 (fr) 2002-08-30
EP1397161A2 (fr) 2004-03-17
IL157214A0 (en) 2004-02-19
AU2002238687B2 (en) 2006-10-05
DE60226319T2 (de) 2009-07-09
ATE393633T1 (de) 2008-05-15
WO2002067994A2 (fr) 2002-09-06
DE60226319D1 (de) 2008-06-12
US20040248806A1 (en) 2004-12-09
CA2438824A1 (fr) 2002-09-06
FR2821272B1 (fr) 2004-12-17
EP1397161B1 (fr) 2008-04-30
WO2002067994A3 (fr) 2003-12-24
JP2004529886A (ja) 2004-09-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2725805T3 (es) Un conjugado de GLP-2 de sitio específico que usa un fragmento de inmunoglobulia
ES2275561T3 (es) Neuropeptidos estabilizados por polimeros.
ES2330115T3 (es) Composicion antibacteriana, mas particilarmente contra las bacterias gram-negativas, que comprende un peptido y un agente antibacteriano ventajosamente hidrofobo.
ES2249933T3 (es) Formulacion autoestable de peptido 1 tipo glucagon.
ES2242453T3 (es) Vectores peptidicos de sustancias a traves de la barrera hematoencefalica.
ES2637265T3 (es) Derivados peptídicos, su preparación y sus usos como vectores
ES2500117T3 (es) Novedosos compuestos farmacéuticos de liberación sostenida para prevenir el abuso de sustancias controladas
BR112012014721B1 (pt) Composições de hormônio do crescimento, seus métodos de fabricação, recipiente e kit
KR20010072472A (ko) 혈뇌장벽 치료제
US7846893B2 (en) Drug-polymer conjugates coupled to a peptidic carrier
ES2705323T3 (es) Miméticos de apelina lineales sintéticos para el tratamiento de la insuficiencia cardíaca
ES2896971T3 (es) Formas de administración de hormona del crecimiento de acción prolongada
US20080090771A1 (en) Abuse-resistant hydrocodone compounds, compositions and methods of using the same
ES2435769T3 (es) Preparación y utilización de una vacuna bivalente contra la adicción a la morfina y la heroína
ES2713979T3 (es) Formulación líquida de conjugado de hormona de crecimiento humana altamente concentrada de acción prolongada
AU2002238687B2 (en) Compounds comprising an analgesic molecule linked to a vector that can vectorise said molecule through the hematoencephalic barrier and pharmaceutical compositions containing same
Franssen et al. Low molecular weight proteins as carriers for renal drug targeting: naproxen coupled to lysozyme via the spacer L-lactic acid
ES2337663T3 (es) Compuestos peptidicos que se unen selectivamente a p-selectina.
ES2876404T3 (es) Liofilizado que contiene un péptido cíclico de fórmula X1-GQRETPEGAEAKPWY-X2 para el tratamiento de edemas pulmonares
JP6005732B2 (ja) 非ペプチド性重合体−インスリン多量体及びその製造方法
US20130072438A1 (en) Opioid peptide esters and methods of use
ES2343917T3 (es) Pth pegilados como moduladores del receptor pth y uso de los mismos.
Bickel et al. Vector-mediated delivery of opioid peptides to the brain
BR122022003324B1 (pt) Composições de hormônio do crescimento