ES2319759T3 - Uso de un agente colorante para teñir la capsula del cristalino o para teñir las membranas epiretinales del ojo. - Google Patents
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Abstract
Uso de una solución acuosa, fisiológicamente compatible, en la que se disuelve un colorante de trifenilmetano biocompatible, para la producción de un agente colorante para la coloración de la cápsula del cristalino de un ojo o para la coloración de membranas que se deben retirar del ojo durante la cirugía de retina o del humor vítreo.
Description
Uso de un agente colorante para teñir la cápsula
del cristalino o para teñir las membranas epirretinales del ojo.
Uso de un agente colorante para la coloración de
la cápsula del cristalino o de membranas formadas en la retina del
ojo.
La invención se refiere al uso de una solución
acuosa, fisiológicamente compatible, en la que se disuelve un
colorante para la producción de un agente colorante para la
coloración de membranas en el ojo humano o animal.
A partir del documento WO 02/07693 A se conocen
composiciones para la coloración de células epiteliales mediante
colorantes mitocondriales, particularmente para el diagnóstico de
tejido epitelial canceroso o precanceroso. Como colorantes se
pueden utilizar disoluciones acuosas, tamponadas de Verde Malaquita
y Verde Brillante.
A partir del documento
GB-A-2.026.015 se conocen
composiciones para la coloración de células, que contienen, entre
otros, del 0,1 al 0,5% de un colorante de trifenilmetano,
pudiéndose producir estas composiciones como soluciones.
A partir del documento
EP-A-O 037 905 se conoce un método
para la identificación y determinación por diagnóstico diferencial
de células leucémicas, en el que se usa un colorante de
trifenilmetano.
Además, a partir del documento WO 99/58160 se
conoce el uso de azul de tripano como colorante. Este compuesto
conocido de la clase de los colorantes diazo se usa en una solución
acuosa para la coloración de la cápsula anterior en las
intervenciones de catarata en el ojo. Por la visualización de la
cápsula anterior, el cirujano reconoce el contorno de la
capsulorrexis, con lo que se simplifica la facoemulsificación.
El azul de tripano es una sustancia citotóxica,
tal como se conoce, por ejemplo, por Solomon K. D. et al.:
Protective effect of the anterior lens capsule during extracapsular
cataract extraction, OPHTHALMOLOGY, vol. 96, Nº 5, mayo de 1989
(1989-05), 591-597 y Veckener M.
et al.: Ocular toxicity study of trypan blue injected into
the vitreous cavity of rabit eyes, Graefe's Arch Clin Ex Ophthalmol
(2002) 239: 698-704. Por lo tanto, cuando se utiliza
azul de tripano es necesario efectuar un lavado completo, sobre
todo de la zona del ojo en la que se ha utilizado el azul de
tripano como agente colorante, inmediatamente después de la
operación de catarata, para evitar su permanencia más prolongada en
el cuerpo o en el ojo.
El documento
US-A-4.764.360 describe la
incorporación de un colorante con un peso molecular de al menos
10.000 a un polímero de alto peso molecular, que forma el medio de
soporte.
De este modo, se debe evitar que el colorante
penetre en el tejido corporal circundante. El colorante sólo debe
colorear el medio de soporte de alto peso molecular.
Además, se conoce (E. Kutchera, "Vitalfärbung
der abgehobenen Netzhaut und ihre Defekte", Albrecht v. Graefes
Arch. klin. exp. Ophthal. 178, 72, 87 (1969)) cómo inyectar el
colorante azul patente por vía intravítrea para hacer visibles los
defectos que afectan a toda la retina en casos de desprendimiento de
retina. Para la inyección intravítrea se usó una solución al 0,47%
de azul patente-ácido hialurónico. La visualización del
desprendimiento de retina requiere una cantidad de tiempo
extremadamente alta y sólo tiene lugar algunos días después de la
inyección.
Es un objetivo de la invención proporcionar la
producción de un agente colorante exento de citotoxicidad, que sea
adecuado para hacer visibles las membranas que tienen una función
limitante o separadora o membranas de origen patológico en el ojo
humano o animal.
Este objetivo se resuelve de acuerdo con la
invención por las características de la reivindicación 1. Las
reivindicaciones dependientes contienen realizaciones ventajosas de
la invención.
En la invención, se prepara un agente colorante
para la coloración de las membranas en el ojo humano y animal
mediante el uso de un colorante de trifenilmetano biocompatible sin
medio de soporte en una solución acuosa fisiológicamente
compatible, particularmente de cloruro sódico, que puede estar
ajustada con un tampón a un pH de 6,8 a 7,8, en especial de
aproximadamente 7,8. El agente de coloración es un colorante no
polimérico, de bajo peso molecular y soluble en agua. El agente de
coloración que se usa en la invención se puede utilizar para la
detección de vitalidad, donde, sin embargo, y a diferencia de los
colorantes vitales convencionales, con el colorante biocompatible
que se usa en la invención, además de las células muertas para la
diferenciación del material vivo, también se pueden colorear las
células vivas.
Como colorante soluble en agua, de bajo peso
molecular, se utiliza un colorante de trifenilmetano. El colorante
se utiliza sin medio de soporte. Ejemplos de tales colorantes
adecuados son el azul patente y el azul brillante R, conociéndose
este último por la coloración de proteínas en la electroforesis en
gel.
El azul patente es preferiblemente un azul
patente V (C_{54}H_{62}CaN_{4}O_{14}S_{4}, PM: 1159,45)
admitido como colorante alimentario (L-azul 3 = E
131).
Como tampón se utiliza un tampón fosfato,
hidrógeno-carbonato o citrato, cuyo valor de pH se
puede ajustar mediante hidróxido sódico. La concentración del
colorante biocompatible, por ejemplo, de azul patente V, en solución
acuosa es, preferiblemente, de 0,6 a 2,5 g/l, en particular de
aproximadamente 1,2 g/l. Se consigue una coloración espontánea de
las zonas deseadas en el cuerpo humano o animal.
El agente colorante se puede usar para la
coloración de la cápsula del cristalino, particularmente de la
cápsula anterior del cristalino durante una operación de catarata.
La coloración se produce antes de la capsulorrexis y la
facoemulsificación.
Para la coloración, el humor acuoso se aspira
por una incisión de túnel corneal o escleral y, a continuación, la
cámara anterior se llena con un gas, en especial aire. Con una
cánula se administran aproximadamente 0,3 ml de solución de agente
colorante, por ejemplo, de azul patente V, a la cámara anterior. Se
produce la coloración de la cápsula del cristalino, que está
delimitada por el borde pupilar del iris. Después de algunos
segundos, para la eliminación por lavado del colorante innecesario,
la cámara anterior se enjuaga con una solución de cloruro
sódico.
A continuación, para la realización de la
operación de catarata se introduce de forma convencional una
solución viscoelástica en la cámara anterior del ojo. Debido a la
coloración azul de la cápsula anterior, el contorno de la
capsulorrexis destaca notoriamente y se puede diferenciar
claramente del tejido gris del núcleo del cristalino.
Además, el agente colorante se puede utilizar
para la coloración de la membrana limitante interna o, membranas
producidas, por ejemplo, como consecuencia de PVR
(vitreorretinopatía proliferativa), particularmente membranas
epirretinianas en la retina o en la superficie posterior de la
membrana limitante del humor vítreo, especialmente en la cirugía de
retina y del humor vítreo.
Durante la eliminación, por ejemplo, de una
membrana epirretiniana de la retina, se suministra el colorante,
por ejemplo, azul patente V, en aproximadamente 0,3 ml de la
solución de tampón indicada, de forma selectiva a través de una
cánula insertada en la pars plana a la membrana que se debe
retirar. Previamente, el humor vítreo se puede sustituir completa o
parcialmente por una carga de gas, como se utiliza de forma
convencional en la cirugía de humor vítreo o de retina,
particularmente de la mácula. Al colorear la membrana epirretiniana
se puede producir, eventualmente, una coloración del tejido
retiniano adyacente con un grado de coloración más débil. Entonces,
al eliminar la membrana del tejido retiniano subyacente, no
coloreado, se produce un buen contraste. Después de la coloración,
el exceso de solución de agente colorante se elimina por lavado y el
espacio libre se llena con el sustituto de humor vítreo en forma
del gas que se ha indicado. Por medio de la coloración es posible
trabajar con un instrumento no iluminado o iluminado solamente de
forma débil durante la retirada de la membrana. De este modo,
gracias a la percepción suficiente de contraste se disminuye
considerablemente la fototoxicidad. Particularmente con el uso en
relación con membranas epirretinianas (gliosis epirretiniana,
"macular pucker", "surface wrinkling"), la
utilización de la solución de agente colorante representa una ayuda
valiosa para la detección y eliminación de las
membranas.
membranas.
Cuando, en el caso de forámenes maculares con un
tamaño de orificio creciente, se requiere la retirada de la
membrana limitante interna, la coloración de esta membrana con la
solución de agente colorante resulta ser una ayuda ventajosa para
la búsqueda y eliminación de esta membrana durante la cirugía del
humor vítreo.
Adicionalmente, es posible colorear un material
viscoelástico, por ejemplo, ácido hialurónico, que se utiliza como
ayuda durante la cirugía oftalmológica, con la solución acuosa de
agente colorante. De esta forma, resulta posible obtener,
especialmente durante la operación de catarata, una mejora del
contraste del adyuvante viscoelástico con respecto al tejido
intraocular, en particular del iris del ojo y del reflejo del
fondo.
En comparación con el azul de tripano
convencional, que tiene acción teratógena o mutágena (Cahen RL:
Evaluation of the teratogenicity of drugs, Clin Pharmacol. Ther,
1964, 5, 480-514 e información del producto de
BLUR-HEX^{TM}, Dr. Agarwal's Pharma Ltd. Chennal
(India)), la solución biocompatible de acuerdo con la invención,
por ejemplo, de azul patente V o azul brillante R, no es
citotóxica.
Para la comprobación de la ausencia de
citotoxicidad se trataron células de ratón L 929 y células
ARPE-19 con el agente colorante azul patente V,
según la invención, a diferentes concentraciones durante 68 a 72
horas en la incubadora. La vitalidad de las células y la
citotoxicidad derivada se determinaron cuantitativamente por
determinación del contenido proteico de los cultivos celulares
tratados, con respecto a cultivos de control no tratados. El
contenido proteico se determina colorimétricamente mediante un
método convencional.
Se demuestra que no existe citotoxicidad en un
nivel significativo correspondiente a una inhibición del
crecimiento superior al 30%.
La invención es particularmente ventajosa
durante la realización de operaciones de catarata con cataratas
opacas y/o fondos intensamente pigmentados, en los que el reflejo
del fondo es débil o está ausente. Con ayuda del agente de
coloración se consigue un buen contraste entre la cápsula anterior
coloreada y el tejido subyacente.
A continuación se indican ejemplos de
realización del agente colorante en diferentes soluciones de
tampón.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
1
Azul patente V con una concentración de 1,2 g/l
en una solución de tampón fosfato.
200 ml de solución contienen:
0,240 g de azul patente V
0,380 g de hidrógeno-fosfato
disódico (Na_{2}HPO_{4} x 2 H_{2}O)
0,060 g de dihidrógeno-fosfato
sódico (NaH_{2}PO_{4} x 2 H_{2}O)
1,640 g de cloruro sódico (NaCl)
hidróxido sódico para el ajuste del pH.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
2
Azul patente V con una concentración de 1,2 g/l
en una solución de tampón de
hidrógeno-carbonato.
200 ml de solución contienen:
0,240 g de azul patente V
0,420 g de hidrógeno-carbonato
sódico (NaHCO_{3})
1,640 g de cloruro sódico (NaCl)
hidróxido sódico para el ajuste del pH
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
3
Azul patente V con una concentración de 1,2 g/l
en una solución de tampón citrato.
200 ml de solución contienen:
0,240 g de azul patente V
0,216 g de citrato trisódico
(C_{6}H_{5}Na_{3}O_{7} X 2 H_{2}O)
1,640 g de cloruro sódico (NaCl)
hidróxido sódico para el ajuste del pH
También se pueden producir ejemplos de
realización idénticos de acuerdo con los Ejemplos 1, 2 y 3 con azul
brillante R con una concentración de 1,2 g/l.
Preferiblemente, en las soluciones de tampón el
valor del pH se ajusta con hidróxido sódico. Sin embargo, también
es posible ajustar la propia solución hasta el valor de pH deseado
(neutro, débilmente ácido o débilmente alcalino) dentro del
intervalo preferido de 6,8 a 7,8. El ajuste de la concentración de
azul patente a preferiblemente 0,6 hasta 2,5 g/l, en particular de
aproximadamente 1,2 g/l, se alcanza por medio de la cantidad
correspondiente de azul patente V.
\vskip1.000000\baselineskip
Esta lista de referencias citadas por el
solicitante es únicamente para la comodidad del lector. No forma
parte del documento de la patente europea. A pesar del cuidado
tenido en la recopilación de las referencias, no se pueden excluir
errores u omisiones y la EPO niega toda responsabilidad en este
sentido.
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\bullet GB 2026015 A [0003]
\bullet EP 0037905 A [0004]
\bullet WO 9958160 A [0005]
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\bulletSOLOMON K.D. et al.
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cataract extraction. OPHTHALMOLOGY, Mai 1999, vol. 96
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\bullet Produktinformation BLURHEX. Dr.
Agarwal's Pharma Ltd, [0023]
Claims (11)
1. Uso de una solución acuosa, fisiológicamente
compatible, en la que se disuelve un colorante de trifenilmetano
biocompatible, para la producción de un agente colorante para la
coloración de la cápsula del cristalino de un ojo o para la
coloración de membranas que se deben retirar del ojo durante la
cirugía de retina o del humor vítreo.
2. Uso de acuerdo con la reivindicación 1,
en el que el agente colorante se produce para la
coloración de la cápsula anterior del cristalino durante una
operación de catarata en el ojo.
3. Uso de acuerdo con la reivindicación 1,
en el que el agente colorante se produce para la
coloración de membranas de origen patológico en la retina del
ojo.
4. Uso de acuerdo con la reivindicación 3,
en el que el agente colorante se produce para la
coloración de membranas epirretinianas.
5. Uso de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 a 3, en el que el agente colorante se produce
para la coloración de una solución viscoelástica utilizada en la
cirugía oftalmológica.
6. Uso de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 a 4, en el que el colorante se disuelve en un
tampón neutro o débilmente ácido o débilmente alcalino.
7. Uso de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 a 5,
en el que el colorante se disuelve en un tampón
con un valor de pH de 6,8 a 7,8.
8. Uso de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 a 7,
en el que se usa un tampón fosfato,
hidrógeno-carbonato o citrato.
9. Uso de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 a 8,
en el que la concentración del colorante en la
solución de tampón es de 0,3 a 2,5 g/l, en particular de
aproximadamente 1,2 g/l.
10. Uso de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 a 9, en el que como colorante se usa azul
patente V.
11. Uso de acuerdo con una de las
reivindicaciones 1 a 10, en el que como colorante se usa azul
brillante R.
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