ES2329871T3

ES2329871T3 - Indoles sustituidos para la modulacion de la actividad de nfkb.

Info

Publication number: ES2329871T3
Application number: ES00974405T
Authority: ES
Inventors: Olaf Ritzeler; Hans Ulrich Stilz; Bernhard Neises; Gerhard Jaehne; Jorg Habermann
Original assignee: Sanofi Aventis Deutschland GmbH
Current assignee: Sanofi Aventis Deutschland GmbH
Priority date: 1999-10-26
Filing date: 2000-10-17
Publication date: 2009-12-02
Anticipated expiration: 2020-10-17
Also published as: DE50015700D1; NO323952B1; KR20030004302A; CZ20021413A3; RU2255087C2; EE200200217A; WO2001030774A1; NO20021808L; JP3843012B2; CZ304885B6; IL149272A0; US7342029B2; AU1272801A; ZA200203204B; PL200115B1; AU781553B2; US20050282866A1; ATE437867T1; PT1261601E; SI1261601T1

Abstract

Compuesto de la fórmula I **(Ver fórmula)** y/o una forma estereoisómera del compuesto de la fórmula I y/o una sal fisiológicamente tolerable del compuesto de la fórmula I, en donde R3 representa un radical de la fórmula II, **(Ver fórmula)** en donde D representa -C(O)- , R7 representa átomo de hidrógeno o alquilo (C1-C4), R8 representa 1. alquilo (C1-C4), en donde alquilo es lineal o ramificado y está mono- o disustituido, de manera independiente entre sí, con 1.1 heteroarilo con 5 a 14 miembros de anillo o heterociclo con 5 a 12 miembros de anillo, en donde heteroarilo y heterociclo han sido seleccionados del grupo de pirrol, piridina, pirazina, furano, tiofeno, imidazol, pirazol, oxazol, isoxazol, tiazol, isotiazol, tetrazol, triazolonas, 2-óxidos de 1,2,3,5-oxatiadiazol, oxadiazolonas, isoxazolonas, oxadiazolidindionas, triazoles, que están sustituidos con F, -CN, -CF3 ó -C(O)-O-alquilo (C1-C4), 3-hidroxipirrol-2,4-dionas, 5-oxo-1,2,4- tiadiazoles, pirimidina, indol, isoindol, indazol, ftalazina, quinoleína, isoquinoleína, quinoxalina, quinazolina, cinolina, carbolina, y derivados benzo-condensados, ciclopenta-, ciclohexa- y ciclohepta-condensados de estos heterociclos, 1.2 -O-R10, 1.3 -S(O)x-R10, en donde x es el número entero cero, 1 ó 2, 1.4 -N(R10)2, 1.5 radical de la fórmula **(Ver fórmula)** ó 1.6 radical de la fórmula **(Ver fórmula)** o bien 2. representa el radical característico de un aminoácido del grupo de glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, fenilalanina, tirosina, serina, triptófano, treonina, cisteína, metionina, asparagina, glutamina, lisina, histidina, arginina, ácido glutámico, ácido aspártico, ácido 2-aminoadípco, ácido 2-aminoisobutírico, ácido 2-aminobutírico, ácido 2,3-diamino-propiónico, ácido 2,4-diaminobutírico, ácido 1,2,3,4- tetrahidroisoquinolin-1-carboxílico, ácido 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-3-carboxílico, ácido 2-aminopimélico, fenilglicina, 3-(2-tienil)-alanina, 3-(3-tienil)-alanina, 2-(2-tienil)-glicina, ácido 2-amino-heptanoico, ácido pipecólico, hidroxilisina, sarcosina, N-metilisoleucina, 6-N-metillisina, N-metilvalina, norvalina, norleucina, ornitina, alo-isoleucina, alo-treonina, alo-hidroxilisina, 4-hidroxiprolina, 3-hidroxiprolina, 3-(2-naftil)-alanina, 3-(1-naftil-alanina), homofenilalanina, homocisteína, ácido homocisteínico, homotriptófano, ácido cisteínico, 3-(2-piridil)-alanina, 3-(3-piridil)-alanina, 3-(4-piridil)-alanina, ácido 2-amino-3-fenilaminopropiónico, ácido 2-amino-3-fenilamino-etilpropiónico, fosfinotricina, 4- fluorofenilalanina, 3-fluorofenil-alanina, 2-fluorofenilalanina, 4-clorofenilalanina, 4-nitrofenilalanina, 4-aminofenilalanina, citrulina, ciclohexilalanina, 5-fluorotriptófano, 5-metoxitriptófano, metionin-sulfona, metionin-sulfóxido y -NH-NR10-C(O)N(R10)2; R9 representa 1. R8, 2. alquilo (C1-C4), en donde alquilo es lineal o ramificado y está mono-, di- o trisustituido, de manera independiente entre sí, con 2.1 arilo, en donde arilo representa un radical del grupo de fenilo, naftilo, bifenililo, antrilo o fluorenilo y el radical arilo está sin sustituir o bien está mono-, di- o trisustituido con radicales, iguales o diferentes, de la serie de alquilo (C1-C8), alcoxi (C1-C8), halógeno, nitro, amino, trifluorometilo, hidroxi, hidroxi-alquilo (C1-C4) tales como hidroximetilo ó 1-hidroxietilo ó 2-hidroxietilo, metilendioxi, etilendioxi, formilo, acetilo, ciano, hidroxicarbonilo, aminocarbonilo, alcoxi-(C1- C4)-carbonilo, fenilo, fenoxi, bencilo, benciloxi o tetrazolilo, 2.2 halógeno, 2.3 -CN ó 2.4 -CF3, 3. arilo, en donde arilo es tal como se ha definido antes y no está sustituido o bien está sustituido como antes, R10 representa a) átomo de hidrógeno, b) alquilo (C1-C6), en donde alquilo no está sustituido o bien está sustituido de una a tres veces, de manera independiente entre sí, con 1. arilo, en donde arilo es tal como se ha definido antes , 2. heteroarilo con 5 a 14 miembros de anillo, en donde hetero-arilo es tal como se ha definido antes, 3. heterociclo con 5 a 12 miembros de anillo, en donde heterociclo es tal como se ha definido antes, 4. halógeno, 5. -N-alquilo (C1-C6)n, en donde n es el número entero cero, 1 ó 2 y alquilo no está sustituido o está mono-, di- o trisustituido, de manera independiente entre sí, con halógeno o con -C(O)OH, o bien 6. -C(O)-OH, c) arilo, en donde arilo es tal como se ha definido antes, d) heteroarilo con 5 con 14 miembros de anillo, en donde heteroarilo es tal como se ha definido antes, o bien e) heterociclo con 5 a 12 miembros de anillo, en donde heterociclo es tal como se ha definido antes, y para el caso de (R10)2, R10 tiene, de manera independiente entre sí, el significado de a) hasta e), Z representa 1. 1,3,4-oxadiazol, en donde 1,3,4-oxadiazol no está sustituido o bien está sustituido de una a tres veces con -NH2, OH ó alquilo-(C1-C4), o bien 2. representa -C(O)-R11, en donde R11 representa 1. -O-R10 o bien 2. representa -N(R10)2, o bien R7 y R8 forman, junto con el átomo de nitrógeno y el átomo de carbono a los cuales están respectivamente unidos, un anillo de la fórmula IIa **(Ver fórmula)** del grupo de pirrol, pirrolina, pirrolidina, piridina, piperidina, piperileno, piridazina, pirimidina, pirazina, piperazina, pirazol, imidazol, pirazolina, imidazolina, pirazolidina, imidazolidina, oxazol, tetrazol, 2-óxidos de 1,2,3,5-oxatiadiazol, triazolonas, oxadiazolonas, isoxazolonas, oxadiazolidindionas, triazoles que no están sustituidos o bien están sustituidos con F, -CN, -CF3 ó -C(O)-O-alquilo (C1-C4), 3-hidroxipirrol-2,4-dionas, 5-oxo-1,2,4-tiadiazoles, isoxazol, 2- isoxazolidina, isoxazolidina, morfolina, isotiazol, tiazol, isotiazolidina, tiomorfolina, indazol, tiadiazol, bencimidazol, quinoleína, triazol, ftalazina, quinazolina, quinoxalina, purina, pteridina, indol, isoquinoleína, tetrahidroquinoleína y tetrahidroisoquinoleína, o bien R8 y Z forman, junto con los átomos de carbono a los que en cada caso están unidos, un anillo de la fórmula IIc, **(Ver fórmula)** del grupo de pirrol, pirrolina, pirrolidina, piridina, piperidina, pirazolina, ftalazina, piperileno, piridazina, pirimidina, pirazina, piperazina, pirazol, imidazol, 1,3,4-oxadiazol, imidazolina, pirazolidina, imidazolidina, oxazol, isoxazol, 2- isoxazolidina, isoxazolidina, morfolina, isotiazol, tiazol, isotiazolidina, tiomorfolina, indazol, tiadiazol, bencimidazol, quinoleína, triazol, tetrazol, 2-óxidos de 1,2,3,5-oxatiadiazol, oxadiazolonas, isoxazolonas, triazolonas, oxadiazolidindionas, triazoles, que pueden estar sin sustituir o bien estar sustituidos con F, -CN, -CF3 ó -C(O)-O-alquilo (C1-C4), 3-hidroxipirrol-2,4-diona, 5-oxo-1,2,4-tiadiazoles, quinazolina, quinoxalina, purina, indol, pteridina, tetrahidroquinoleína, tetrahidroisoquinoleína e isoquinoleína, y R1, R2 y R4 representan átomo de hidrógeno, R5 representa átomo de hidrógeno, y R6 representa 1. fenilo, mono- o disustituido, de manera independiente entre sí, con 1.1 -CN, 1.2 -CF3, 1.3 halógeno, 1.4 -O-R10, 1.5 -N(R10)2, 1.6 -NH-C(O)-R11, 1.7 -S(O)x-R10, en donde x es el número entero cero, 1 ó 2, 1.8 -C(O)-R11 ó 1.9 alquil (C1-C4)-NH2, 2. heteroarilo con 5 a 14 miembros de anillo, en donde heteroarilo es tal como se ha definido antes y no está sustituido o bien está mono-, di- o trisustituido, de manera independiente entre sí, con los sustituyentes antes definidos en los apartados 1.1 a 1.9, o bien 3. heterociclo con 5 a 12 miembros de anillo, en donde heterociclo es tal como se ha definido antes y no está sustituido o bien está mono-, di- o trisustituido, de manera independiente entre sí, con los sustituyentes antes definidos en los apartados 1.1 a 1.9.

Description

Indoles sustituidos para la modulación de la actividad de NF\kappaB.

La invención se refiere a nuevos indoles sustituidos, a procedimientos para su preparación, y a su uso como medicamentos.

En la solicitud de patente WO 94/12478 se describen, entre otros, derivados de indol que inhiben la agregación plaquetaria.

NF\kappaB es un factor de transcripción heterodímero que puede activar un gran número de genes que codifican, entre otros, citocinas proinflamatorias tales como IL-1, IL-2, TNF\alpha o IL-6. NF\kappaB está presente en el citosol de células complejado con su inhibidor natural l\kappaB. La estimulación de células, por ejemplo por citocinas, lleva a la fosforilación y posterior degradación proteolítica de I\kappaB. Esta degradación proteolítica lleva a la activación de NF\kappaB, que después migra al núcleo de la célula y allí activa un gran número de genes proinflamatorios.

En enfermedades tales como artritis reumatoide (en la inflamación), osteoartritis, asma, infarto de miocardio, enfermedad de Alzheimer o aterosclerosis, NF\kappaB está activado en mayor grado de lo normal. La inhibición de NF\kappaB también es útil en la terapia contra el cáncer, ya que se emplea allí para reforzar la terapia con citostáticos. Se ha podido demostrar que medicamentos tales como los glucocorticoides, salicilatos o sales de oro, que se emplean en la terapia contra el reuma, atacan de forma inhibidora en distintos puntos de la cadena de señales activante de NF\kappaB o bien interfieren directamente con la transcripción de los genes.

La primera etapa en la cascada de señales mencionada es la degradación de l\kappaB. Esta fosforilación es regulada por la I\kappaB-cinasa específica. Hasta ahora no se conocen inhibidores que inhiban específicamente I\kappaB-cinasa.

En la búsqueda de compuestos eficaces para el tratamiento de artritis reumatoide (en caso de inflamación), osteoartritis, asma, infarto de miocardio, enfermedad de Alzheimer, enfermedades cancerosas (potenciación de terapias con citotóxicos) o aterosclerosis, se ha hallado ahora que los derivados de indol de acuerdo con la invención son inhibidores potentes y muy específicos de la I\kappaB-cinasa.

Por ello, la invención se refiere al compuesto de la fórmula I

\vskip1.000000\baselineskip

1

y/o una forma estereoisómera del compuesto de la fórmula I y/o una sal fisiológicamente tolerable del compuesto de la fórmula I, en donde

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R^{3} representa un radical de la fórmula II,

2

en donde

D representa -C(O)- ,

R^{7} representa átomo de hidrógeno o alquilo (C_{1}-C_{4}),

\newpage

R^{8} representa 1.: alquilo (C_{1}-C_{4}), en donde alquilo es lineal o ramificado y está mono- o disustituido, de manera independiente entre sí, con

1.1: heteroarilo con 5 a 14 miembros de anillo o heterociclo con 5 a 12 miembros de anillo, en donde heteroarilo y heterociclo han sido seleccionados del grupo de pirrol, piridina, pirazina, furano, tiofeno, imidazol, pirazol, oxazol, isoxazol, tiazol, isotiazol, tetrazol, triazolonas, 2-óxidos de 1,2,3,5-oxatiadiazol, oxadiazolonas, isoxazolonas, oxadiazolidindionas, triazoles, que están sustituidos con F, -CN, -CF_{3} ó -C(O)-O-alquilo (C_{1}-C_{4}), 3-hidroxipirrol-2,4-dionas, 5-oxo-1,2,4-tiadiazoles, pirimidina, indol, isoindol, indazol, ftalazina, quinoleína, isoquinoleína, quinoxalina, quinazolina, cinolina, carbolina, y derivados benzo-condensados, ciclopenta-, ciclohexa- y ciclohepta-condensados de estos heterociclos,

1.2: -O-R^{10},

1.3: -S(O)_{x}-R^{10}, en donde x es el número entero cero, 1 ó 2,

1.4: -N(R^{10})_{2},

1.5: radical de la fórmula

3

\quad: ó

1.6: radical de la fórmula

4

\quad: o bien

2.: representa el radical característico de un aminoácido del grupo de glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, fenilalanina, tirosina, serina, triptófano, treonina, cisteína, metionina, asparagina, glutamina, lisina, histidina, arginina, ácido glutámico, ácido aspártico, ácido 2-amino-adípco, ácido 2-aminoisobutírico, ácido 2-aminobutírico, ácido 2,3-diamino-propiónico, ácido 2,4-diaminobutírico, ácido 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-1-carboxílico, ácido 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-3-carboxílico, ácido 2-aminopimélico, fenilglicina, 3-(2-tienil)-alanina, 3-(3-tienil)-alanina, 2-(2-tienil)-glicina, ácido 2-amino-heptanoico, ácido pipecólico, hidroxilisina, sarcosina, N-metilisoleucina, 6-N-metillisina, N-metilvalina, norvalina, norleucina, ornitina, alo-isoleucina, alo-treonina, alo-hidroxilisina, 4-hidroxiprolina, 3-hidroxiprolina, 3-(2-naftil)-alanina, 3-(1-naftil-alanina), homofenilalanina, homocisteína, ácido homocisteínico, homotriptófano, ácido cisteínico, 3-(2-piridil)-alanina, 3-(3-piridil)-alanina, 3-(4-piridil)-alanina, ácido 2-amino-3-fenilaminopropiónico, ácido 2-amino-3-fenilamino-etilpropiónico, fosfinotricina, 4-fluorofenilalanina, 3-fluorofenil-alanina, 2-fluorofenilalanina, 4-clorofenilalanina, 4-nitrofenilalanina, 4-aminofenilalanina, citrulina, ciclohexilalanina, 5-fluorotriptófano, 5-metoxitriptófano, metionin-sulfona, metionin-sulfóxido y -NH-NR^{10}-C(O)N(R^{10})_{2},

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R^{9} representa 1.: R^{8},

2.: alquilo (C_{1}-C_{4}), en donde alquilo es lineal o ramificado y está mono-, di- o trisustituido, de manera independiente entre sí, con

2.1: arilo, en donde arilo representa un radical del grupo de fenilo, naftilo, bifenililo, antrilo o fluorenilo y el radical arilo está sin sustituir o bien está mono-, di- o trisustituido con radicales, iguales o diferentes, de la serie de alquilo (C_{1}-C_{8}), alcoxi (C_{1}-C_{8}), halógeno, nitro, amino, trifluorometilo, hidroxi, hidroxi-alquilo (C_{1}-C_{4}) tales como hidroximetilo ó 1-hidroxietilo ó 2-hidroxietilo, metilendioxi, etilendioxi, formilo, acetilo, ciano, hidroxicarbonilo, aminocarbonilo, alcoxi-(C_{1}-C_{4})-carbonilo, fenilo, fenoxi, bencilo, benciloxi o tetrazolilo,

2.2: halógeno,

2.3: -CN ó

2.4: -CF_{3},

3.: arilo, en donde arilo es tal como se ha definido antes y no está sustituido o bien está sustituido como antes,

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R^{10} representa a): átomo de hidrógeno,

b): alquilo (C_{1}-C_{6}), en donde alquilo no está sustituido o bien está sustituido de una a tres veces, de manera independiente entre sí, con

1.: arilo, en donde arilo es tal como se ha definido antes,

2.: heteroarilo con 5 a 14 miembros de anillo, en donde hetero-arilo es tal como se ha definido antes,

3.: heterociclo con 5 a 12 miembros de anillo, en donde heterociclo es tal como se ha definido antes,

4.: halógeno,

5.: -N-alquilo (C_{1}-C_{6})_{n}, en donde n es el número entero cero, 1 ó 2 y alquilo no está sustituido o está mono-, di- o trisustituido, de manera independiente entre sí, con halógeno o con -C(O)OH, o bien

6.: -C(O)-OH,

c): arilo, en donde arilo es tal como se ha definido antes,

d): heteroarilo con 5 con 14 miembros de anillo, en donde heteroarilo es tal como se ha definido antes, o bien

e): heterociclo con 5 a 12 miembros de anillo, en donde heterociclo es tal como se ha definido antes,

\quad: para el caso de (R^{10})_{2}, R^{10} tiene, de manera independiente entre sí, el significado de a) hasta e),

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Z representa 1.: 1,3,4-oxadiazol, en donde 1,3,4-oxadiazol no está sustituido o bien está sustituido de una a tres veces con -NH_{2}, OH ó alquilo-(C_{1}-C_{4}), o bien

2.: representa -C(O)-R^{11}, en donde

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R^{11} representa 1.: -O-R^{10} o bien

2.: representa -N(R^{10})_{2}, o bien

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R^{7} y R^{8}: forman, junto con el átomo de nitrógeno y el átomo de carbono a los cuales están respectivamente unidos, un anillo de la fórmula IIa

5

\quad: del grupo de pirrol, pirrolina, pirrolidina, piridina, piperidina, piperileno, piridazina, pirimidina, pirazina, piperazina, pirazol, imidazol, pirazolina, imidazolina, pirazolidina, imidazolidina, oxazol, tetrazol, 2-óxidos de 1,2,3,5-oxatiadiazol, triazolonas, oxadiazolonas, isoxazolonas, oxa-diazolidindionas, triazoles, que no están sustituidos o bien están sustituidos con F, -CN, -CF_{3} ó C(O)-O-alquilo (C_{1}-C_{4}), 3-hidroxipirrol-2,4-dionas, 5-oxo-1,2,4-tiadiazoles, isoxazol, 2-isoxazolidina, isoxazolidina, morfolina, isotiazol, tiazol, isotiazolidina, tiomorfolina, indazol, tiadiazol, bencimidazol, quinoleína, triazol, ftalazina, quinazolina, quinoxalina, purina, pteridina, indol, isoquinoleína, tetrahidroquinoleína y tetrahidroisoquinoleína, o bien

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R^{8} y Z: forman, junto con los átomos de carbono a los que en cada caso están unidos, un anillo de la fórmula IIc,

6

\quad: del grupo de pirrol, pirrolina, pirrolidina, piridina, piperidina, pirazolina, ftalazina, piperileno, piridazina, pirimidina, pirazina, piperazina, pirazol, imidazol, 1,3,4-oxadiazol, imidazolina, pirazolidina, imidazolidina, oxazol, isoxazol, 2-isoxazolidina, isoxazolidina, morfolina, isotiazol, tiazol, isotiazolidina, tiomorfolina, indazol, tiadiazol, bencimidazol, quinoleína, triazol, tetrazol, 2-óxidos de 1,2,3,5-oxatiadiazol, oxadiazolonas, isoxazolonas, triazolonas, oxadiazolidindionas, triazoles, que no están sustituidos o bien están sustituidos con F, -CN, -CF_{3} ó -C(O)-O-alquilo (C_{1}-C_{4}), 3-hidroxipirrol-2,4-dionas, 5-oxo-1,2,4-tiadiazoles, quinazolina, quinoxalina, purina, indol, pteridina, tetrahidroquinoleína, tetrahidroisoquinoleína e isoquinoleína, y

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R^{1}, R^{2} y R^{4} representan átomo de hidrógeno,

R^{5} representa átomo de hidrógeno, y

R^{6} representa 1.: fenilo, mono- o disustituido, de manera independiente entre sí, con

1.1: -CN,

1.2: -CF_{3},

1.3: halógeno,

1.4: -O-R^{10},

1.5: -N(R^{10})_{2},

1.6: -NH-C(O)-R^{11},

1.7: -S(O)_{x}-R^{10}, en donde x es el número entero cero, 1 ó 2,

1.8: -C(O)-R^{11} ó

1.9: alquil (C_{1}-C_{4})-NH_{2},

2.: heteroarilo con 5 a 14 miembros de anillo, en donde heteroarilo es tal como se ha definido antes y no está sustituido o bien está sustituido una, dos o tres veces, de manera independiente entre sí, con los sustituyentes antes definidos en los apartados 1.1 a 1.9, o bien

3.: heterociclo con 5 a 12 miembros de anillo, en donde heterociclo es tal como se ha definido antes y no está sustituido o bien está mono-, di- o trisustituido, de manera independiente entre sí, con los sustituyentes antes definidos en los apartados 1.1 a 1.9.

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Se prefiere en especial un compuesto de la fórmula I, en donde R^{3} representa un radical de la fórmula II, en donde

D representa -C(O)- ,

R^{8} representa átomo de hidrógeno,

Z representa -C(O)-OH ó -C(O)-NH_{2},

1.1: -S(O)-R^{10}, siendo R^{10} tal como se define más abajo,

1.2: -N(R^{10})_{2}, siendo R^{10} tal como se define más abajo, o bien

1.3: pirrol, o bien

2.: representa el radical característico de un aminoácido del grupo de histidina, triptófano, serina, treonina, cisteína, metionina, asparagina, glutamina, lisina, arginina, ácido glutámico y ácido aspártico,

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R^{9} representa 1.: átomo de hidrógeno,

2.: alquilo (C_{1}-C_{4}), en donde alquilo es lineal o ramificado y está mono-, di- o trisustituido, de manera independiente entre sí, con -C(O)-OH, -OH ó -C(O)-NH_{2}, o bien

3.: fenilo, en donde fenilo no está sustituido o bien está sustituido de una a tres veces, de manera independiente entre sí, con halógeno o alquilo (C_{1}-C_{4}),

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R^{10} representa a): átomo de hidrógeno,

b): alquilo (C_{1}-C_{6}), en donde alquilo no está sustituido o bien está sustituido de una a tres veces, de manera independiente entre sí, con halógeno,

c): fenilo, en donde fenilo no está sustituido o bien está sustituido de una a tres veces, de manera independiente entre sí, con halógeno o alquilo (C_{1}-C_{4}),

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R^{1}, R^{2} y R^{4} representan átomo de hidrógeno,

R^{5} representa átomo de hidrógeno, y

R^{6} representa fenilo o piridina.

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Por el término "halógeno" se entienden flúor, cloro, bromo o yodo. Por las expresiones "alquilo (C_{1}-C_{8})", "alquilo (C_{1}-C_{6})" o "alquilo (C_{1}-C_{4})" se entienden radicales hidrocarbonados, cuyas cadenas de carbono son lineales o ramificadas, y contienen de 1 a 8, de 1 a 6, o bien de 1 a 4 átomos de carbono. Son radicales alquilo cíclicos, por ejemplo, monociclos de 3 a 6 miembros, tales como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo o ciclohexilo.

Por la expresión "R^{7} y R^{8} forman, junto con el átomo de nitrógeno y el átomo de carbono a los cuales están respectivamente unidos, un anillo heterocíclico de la fórmula IIa" se entienden radicales que se derivan de pirrol, pirrolina, pirrolidina, imidazol, pirazol, oxazol, isoxazol, tetrazol, isoxazolina, isoxazolidina, morfolina, tiazol, isotiazol, isotiazolina, purina, isotiazolidina, tiomorfolina, piridina, piperidina, pirazina, piperazina, pirimidina, piridazina, indol, isoindol, indazol, bencimidazol, ftalazina, quinoleína, isoquinoleína, quinoxalina, quinazolina, cinolina, pteridina, triazolona, tetrazol, 2-óxidos de 1,2,3,5-oxatiadiazol, oxadiazolonas, isoxazolonas, oxadiazolidindionas, triazoles, que están sustituidos con F, -CN, -CF_{3} ó -C(O)-O-alquilo (C_{1}-C_{4}), 3-hidroxipirrol-2,4-dionas, 5-oxo-1,2,4-tiadiazoles, imidazolidina, carbolina, y derivados benzo-condensados de estos heterociclos.

Por el término "arilo" se entienden radicales hidrocarbonados aromáticos con 6 a 14 átomos de carbono en el anillo. Son radicales arilo (C_{6}-C_{14}), por ejemplo, fenilo, naftilo, por ejemplo 1-naftilo, 2-naftilo, bifenililo, por ejemplo 2-bifenililo, 3-bifenililo y 4-bifenililo, antrilo o fluorenilo. Son radicales arilo preferidos los radicales bifenililo, radicales naftilo, y en especial radicales fenilo. Los radicales arilo, en especial los radicales fenilo, pueden estar mono- o polisustituidos, con preferencia mono-, di- o trisustituidos, con radicales iguales o diferentes, preferiblemente con radicales de la serie de alquilo (C_{1}-C_{8}), en especial alquilo (C_{1}-C_{4}), alcoxi (C_{1}-C_{8}), en especial alcoxi (C_{1}-C_{4}), halógeno, nitro, amino, trifluorometilo, hidroxi, hidroxi-alquilo (C_{1}-C_{4}) tales como hidroximetilo o 1-hidroxietilo o 2-hidroxietilo, metilendioxi, etilendioxi, formilo, acetilo, ciano, hidroxicarbonilo, aminocarbonilo, alcoxi (C_{1}-C_{4})-carbonilo, fenilo, fenoxi, bencilo, benciloxi, tetrazolilo. Lo mismo rige, por ejemplo, para radicales como arilalquilo o arilcarbonilo. Los radicales arilalquilo son en especial bencilo, así como 1- y 2-naftilmetilo, 2-, 3- y 4-bifenililmetilo y 9-fluorenilmetilo. Son radicales arilalquilo sustituidos, por ejemplo, radicales bencilo y radicales naftilmetilo sustituidos en la parte arílica con uno o varios radicales alquilo (C_{1}-C_{8}), en especial radicales alquilo (C_{1}-C_{4}), por ejemplo 2-, 3- y 4-metilbencilo, 4-isobutilbencilo, 4-terc.-butilbencilo, 4-octilbencilo, 3,5-dimetilbencilo, pentametilbencilo, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- y 8-metil-1-naftilmetilo, 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- y 8-metil-2-naftilmetilo, radicales bencilo y naftilmetilo sustituidos en la parte arílica con uno o varios radicales alcoxi (C_{1}-C_{8}), en especial radicales alcoxi (C_{1}-C_{4}), por ejemplo 4-metoxibencilo, 4-neopentiloxibencilo, 3,5-dimetoxibencilo, 3,4-metilendioxibencilo, 2,3,4-trimetoxibencilo, radicales nitrobencilo, por ejemplo 2-, 3- y 4-nitrobencilo, radicales halobencilo, por ejemplo 2-, 3- y 4-cloro- y 2-, 3-, y 4-fluorobencilo, 3,4-diclorobencilo, pentafluorobencilo, radicales trifluorometilbencilo, por ejemplo 3- y 4-trifluorometilbencilo o 3,5-bis(trifluorometil)bencilo.

En radicales fenilo monosustituidos, el sustituyente se puede hallar en la posición 2, en la posición 3 o en la posición 4. El fenilo disustituido puede estar sustituido en la posición 2,3, en la posición 2,4, en la posición 2,5, en la posición 2,6, en la posición 3,4 o en la posición 3,5. En radicales fenilo trisustituidos, los sustituyentes pueden encontrarse en la posición 2,3,4, en la posición 2,3,5, en la posición 2,4,5, en la posición 2,4,6, en la posición 2,3,6 o en la posición 3,4,5.

Las explicaciones respecto de los radicales arilo rigen análogamente para radicales arileno divalentes, por ejemplo para radicales fenileno que, por ejemplo, pueden estar presentes como 1,4-fenileno o como 1,3-fenileno.

El fenilen-alquilo (C_{1}-C_{6}) es, en especial, fenilenmetilo (-C_{6}H_{4}-CH_{2}-) y fenilen-etilo, alquilen (C_{1}-C_{6})-fenilo, en especial metilenfenilo (-CH_{2}-C_{6}H_{4}-). El fenilen-alquenilo (C_{2}-C_{6}) es, en especial, fenilenetenilo y fenilenpropenilo.

La expresión "heteroarilo con 5 a 14 miembros de anillo" significa un radical de un sistema aromático monocíclico o policíclico con 5 a 14 miembros de anillo, que contiene 1, 2, 3, 4 ó 5 heteroátomos como miembros de anillo. Son ejemplos de heteroátomos el N, O y S. Si están contenidos varios heteroátomos, éstos pueden ser iguales o diferentes. Los radicales heteroarilo también pueden estar mono- o polisustituidos, con preferencia mono-, di- o trisustituidos con radicales iguales o diferentes de la serie de alquilo (C_{1}-C_{8}), en especial alquilo (C_{1}-C_{4}), alcoxi (C_{1}-C_{8}), en especial alcoxi (C_{1}-C_{4}), halógeno, nitro, -N(R^{10})_{2}, trifluorometilo, hidroxi, hidroxi-alquilo (C_{1}-C_{4}) tal como hidroximetilo o 1-hidroxietilo o 2-hidroxietilo, metilendioxi, formilo, acetilo, ciano, hidroxicarbonilo, aminocarbonilo, alcoxi (C_{1}-C_{4})-carbonilo, fenilo, fenoxi, bencilo, benciloxi, tetrazolilo. Con preferencia, heteroarilo con 5 a 14 miembros de anillo representa un radical aromático monocíclico o bicíclico que contiene 1, 2, 3 ó 4, en especial 1, 2 ó 3 heteroátomos, iguales o diferentes, de la serie de N, O y S y que puede estar sustituido con 1, 2, 3 ó 4, en especial 1 a 3 sustituyentes, iguales o diferentes, de la serie de alquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), flúor, cloro, nitro, -N(R^{10})_{2}, trifluorometilo, hidroxi, hidroxi-alquilo (C_{1}-C_{4}), alcoxi (C_{1}-C_{4})-carbonilo, fenilo, fenoxi, benciloxi y bencilo. Con preferencia especial, heteroarilo representa un radical aromático monocíclico o bicíclico con 5 a 10 miembros de anillo, en especial un radical aromático monocíclico de 5 ó 6 miembros que contiene 1, 2 ó 3, en especial 1 ó 2 heteroátomos, iguales o diferentes, de la serie de N, O y S, y que puede estar sustituido con 1 ó 2 sustituyentes, iguales o diferentes, de la serie de alquilo (C_{1}-C_{4}), halógeno, hidroxi, -N(R^{10})_{2}, alcoxi (C_{1}-C_{4}), fenilo, fenoxi, benciloxi y bencilo.

El término "heterociclo con 5 a 12 miembros de anillo" es un anillo heterocíclico monocíclico o bicíclico de 5 a 12 miembros que está parcial o totalmente saturado. Son ejemplos de heteroátomos el N, O y S. El heterociclo no está sustituido o bien está sustituido en uno o varios átomos de carbono o en uno o varios heteroátomos con sustituyentes iguales o diferentes. Estos sustituyentes ya han sido definidos antes en el caso del radical heteroarilo. En especial, el anillo heterocíclico está mono- o polisustituido, por ejemplo mono-, di-, tri- o tetrasustituido en átomos de carbono con radicales, iguales o diferentes, de la serie de alquilo (C_{1}-C_{8}), por ejemplo alquilo (C_{1}-C_{4}), alcoxi (C_{1}-C_{8}), por ejemplo alcoxi (C_{1}-C_{4}) tales como metoxi, fenil-alcoxi (C_{1}-C_{4}), por ejemplo benciloxi, hidroxi, oxo, halógeno, nitro, amino o trifluorometilo y/o está sustituido en los átomos de nitrógeno del anillo en el anillo heterocíclico con alquilo (C_{1}-C_{8}), por ejemplo alquilo (C_{1}-C_{4}) tal como metilo o etilo, con fenilo o fenil-alquilo (C_{1}-C_{4}) eventualmente sustituidos, por ejemplo bencilo. Los heterociclos de nitrógeno también pueden estar presentes como N-óxidos o como sales cuaternarias.

Son ejemplos de los términos heteroarilo con 5 a 14 miembros de anillo o heterociclo con 5 a 12 miembros de anillo los radicales que se derivan de pirrol, furano, tiofeno, imidazol, pirazol, oxazol, isoxazol, tiazol, isotiazol, tetrazol, 2-óxidos de 1,2,3,5-oxatiadiazol, triazolonas, oxadiazolonas, isoxazolonas, oxadiazolidindionas, triazoles, que están sustituidos con F, -CN, -CF_{3} o -C(O)-O-alquilo (C_{1}-C_{4}), 3-hidroxipirrol-2,4-diona, 5-oxo-1,2,4-tiadiazoles, piridina, pirazina, pirimidina, indol, isoindol, indazol, ftalazina, quinoleína, isoquinoleína, quinoxalina, quinazolina, cinolina, carbolina, y derivados benzo-condensados, ciclopenta-, ciclohexa- o ciclohepta-condensados de estos heterociclos. Se prefieren especialmente los radicales 2- ó 3-pirrolilo, fenilpirrolilo tal como 4- ó 5-fenil-2-pirrolilo, 2-furilo, 2-tienilo, 4-imidazolilo, metil-imidazolilo, por ejemplo 1-metil-2-, -4- ó -5-imidazolilo, 1,3-tiazol-2-ilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, N-óxido de 2-, 3- ó 4-piridilo, 2-pirazinilo, 2-, 4- ó 5-pirimidinilo, 2-, 3- o 5-indolilo, 2-indolilo sustituido, por ejemplo 1-metil-, 5-metil-, 5-metoxi-, 5-benciloxi-, 5-cloro- ó 4,5-dimetil-2-indolilo, 1-bencil-2- ó -3-indolilo, 4,5,6,7-tetrahidro-2-indolilo, ciclohepta[b]-5-pirrolilo, 2-, 3- ó 4-quinolilo, 1-, 3- ó 4-isoquinolilo, 1-oxo-1,2-dihidro-3-isoquinolilo, 2-quinoxalinilo, 2-benzofuranilo, 2-benzotienilo, 2-benzoxazolilo o benzotiazolilo o dihidropiridinilo, pirrolidinilo, por ejemplo 2- ó 3-(N-metilpirrolidinilo), piperazinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, tetrahidrotienilo o benzodioxolanilo.

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La fórmula estructural general de los \alpha-aminoácidos es la siguiente:

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Los \alpha-aminoácidos se distinguen entre sí por el radical R, que en el marco de la presente solicitud se denomina "radical característico" de un aminoácido.

Para el caso de que R^{8} sea el radical característico de un aminoácido, se aplican preferentemente los radicales característicos de los siguientes \alpha-aminoácidos naturales: glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, fenilalanina, tirosina, triptófano, serina, treonina, cisteína, metionina, asparagina, glutamina, lisina, histidina, arginina, ácido glutámico y ácido aspártico. Se prefieren en especial histidina, triptófano, serina, treonina, cisteína, metionina, asparagina, glutamina, lisina, arginina, ácido glutámico y ácido aspártico. Además, son radicales característicos preferidos de un aminoácido que se emplean como radical R^{8} también los aminoácidos no naturales tales como ácido 2-aminoadípico, ácido 2-aminobutírico, ácido 2-aminoisobutírico, ácido 2,3-diamino-propiónico, ácido 2,4-diaminobutírico, ácido 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-1-carboxílico, ácido 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-3-carboxílico, ácido 2-aminopimélico, fenilglicina, 3-(2-tienil)-alanina, 3-(3-tienil)-alanina, 2-(2-tienil)-glicina, ácido 2-amino-heptanoico, ácido pipecólico, hidroxilisina, sarcosina, N-metilisoleucina, 6-N-metil-lisina, N-metilvalina, norvalina, norleucina, ornitina, alo-isoleucina, alo-treonina, alo-hidroxilisina, 4-hidroxiprolina, 3-hidroxiprolina, 3-(2-naftil)-alanina, 3-(1-naftil-alanina), homofenilalanina, homocisteína, ácido homocisteínico, homotriptófano, ácido cisteínico, 3-(2-piridil)-alanina, 3-(3-piridil)-alanina, 3-(4-piridil)-alanina, ácido 2-amino-3-fenilaminopropiónico, ácido 2-amino-3-fenilaminoetilpropiónico, fosfinotricina, 4-fluorofenilalanina, 3-fluorofenilalanina, 4-fluorofenilalanina, 3-fluorofenilalanina, 3-fluorofenilalanina, 2-fluorofenilalanina, 4-clorofenilalanina, 4-nitrofenilalanina, 4-aminofenilalanina, ciclohexilalanina, citrulina, 5-fluorotriptófano, 5-metoxitriptófano, metionin-sulfona, metionin-sulfóxido ó -NH-NR^{10}-C(O)N(R^{10})_{2}, que eventualmente también están sustituidos. En el caso de aminoácidos, tanto naturales como no naturales, que tienen un grupo funcional tal
como amino, hidroxi, carboxi, mercapto, guanidilo, imidazolilo o indolilo, este grupo también puede estar protegido.

Como grupo protector apropiado se usan, para ello, preferentemente los grupos N-protectores de uso habitual en la química de los péptidos, por ejemplo grupos protectores del tipo uretano, benciloxicarbonilo (Z), t-butiloxicarbonilo (Boc), 9-fluoreniloxicarbonilo (Fmoc), aliloxicarbonilo (Aloc) o del tipo de amida de ácido, en especial formilo, acetilo o trifluoroacetilo, así como del tipo alquilo, por ejemplo bencilo. Para el caso de un radical de imidazol en R^{8} sirve, por ejemplo, el derivado de ácido sulfónico de la fórmula IV aplicado para la formación de sulfonamida como grupo protector del nitrógeno de imidazol que se puede eliminar, en especial, en presencia de bases tales como lejía de sosa.

Las sustancias de partida de las reacciones químicas son conocidas o bien se pueden preparar fácilmente de acuerdo con métodos conocidos en la bibliografía.

La invención también se refiere a un procedimiento para preparar el compuesto de la fórmula I y/o una forma estereoisómera del compuesto de la fórmula I y/o una sal fisiológicamente tolerable del compuesto de la fórmula I, que se caracteriza porque se hace reaccionar en disolución

a): un compuesto de la fórmula IV,

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: en donde Pg representa un grupo protector apropiado (por ejemplo el éster metílico), un grupo amida o un grupo hidroxi y Z, R^{7} y R^{8} son tales como han sido definidos en la fórmula I, con un cloruro de ácido o un éster activado del compuesto de la fórmula III,

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: en donde D1 significa -COOH o sulfonil-halógeno y R^{5}, R^{6} y R^{9} son tales como han sido definidos en la fórmula I, en presencia de una base o eventualmente un agente deshidratante, y tras eliminar el grupo protector se transforma en un compuesto de la fórmula I, o bien

b): se copula un compuesto de la fórmula IVa,

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: en donde R^{7} y R^{8} son tales como han sido definidos en la fórmula I y E representa un grupo protector de N-amino, con su grupo carboxilo acoplado a través de una cadena intermediaria L a una resina polímera de la fórmula general PS, produciéndose un compuesto de la fórmula V

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: que después de la eliminación selectiva del grupo protector E se hace reaccionar con un compuesto de la fórmula III, en donde R^{5}, R^{6} y R^{9} son tales como han sido definidos en la fórmula I, en presencia de una base o eventualmente un agente deshidratante, para proporcionar un compuesto de la fórmula VI

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: y el compuesto de la fórmula VI se convierte, después de la separación del material de soporte, en un compuesto de la fórmula I, o bien

c): se convierte un compuesto de la fórmula I en una sal fisiológicamente tolerable.

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Según la variante de procedimiento a) se provee a las funciones ácidas de los compuestos de la fórmula IVa de un grupo protector Pg, efectuándose esta derivatización selectiva de ácidos carboxílicos según métodos tales como los descritos en Houben-Weyl "Methoden der Org. Chemie", volumen 15/1. En la variante de procedimiento b) se provee de un grupo protector E a las funciones amino de los compuestos de partida de las fórmulas, efectuándose esta derivatización selectiva de grupos amino de acuerdo con métodos tales como los descritos en Houben-Weyl "Methoden der Org. Chemie", volumen 15/1. Como grupo protector Pg apropiado se usan para ello, con preferencia, los grupos protectores de carboxi corrientes en la química de péptidos, por ejemplo grupos protectores del tipo éster de alquilo, tales como metilo, etilo, terc.-butilo, iso-propilo, bencilo, fluorenilmetilo, alilo, de tipo éster de arilo, tales como fenilo, de tipo amida, tales como amida o benzhidrilamina. Como grupo protector E apropiado se usa para ello preferentemente los grupos N-protectores habituales en la química de los péptidos, por ejemplo del tipo uretano, tales como benciloxicarbonilo (Z), t-butiloxicarbonilo (Boc), 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc) y aliloxicarbonilo (Aloc), o de tipo amida de ácido, en especial formilo, acetilo o trifluoroacetilo de tipo alquilo, tal como bencilo.

Ha resultado especialmente adecuado para ello, además, el grupo (trimetil-silil)etoxicarbonilo (Teoc) (P. Kociénski, Protecting Groups, Thieme Verlag 1994).

La obtención de los derivados de ácido indolcarboxílico se realiza según un método tal como los descritos en Houben-Weyl "Methoden der Org. Chemie", volumen E6-2A o volumen E6-2B. Así, para obtener los derivados de ácido indolcarboxílico de la fórmula III se pueden hacer reaccionar preferiblemente ácidos hidrazinobenzoicos y aril- o heteroarilcetonas, en presencia de ácido polifosfórico como disolvente a 145ºC. La obtención de los ácidos hidrazinobenzoicos necesarios se realiza según métodos habituales para un técnico, por ejemplo a partir de las anilinas de ácido benzoico correspondientes, y las aril- o heteroarilcetonas se preparan así mismo según métodos habituales para un técnico, por ejemplo a partir de los correspondientes cloruros de ácido o nitrilos, por ejemplo por reacción con compuestos organometálicos.

Para condensar los compuestos de la fórmula IV con aquellos de la fórmula III, se usan ventajosamente los métodos de copulación de la química de péptidos, bien conocidos en sí por el especialista (ver, por ejemplo, Houben-Weyl, Methoden der Organischen Chemie, volúmenes 15/1 y 15/2, Editorial Georg Thieme, Stuttgart, 1974). Como agentes de condensación o reactivos de copulación entran en consideración compuestos tales como carbonildiimidazol, carbodiimidas tales como diciclohexilcarbodiimida o diisopropilcarbodiimida (DIC), el tetrafluoroborato de O-((ciano(etoxi-carbonil)-metilen)amino)-N,N,N',N'-tetrametiluronio (TOTU) o el anhídrido de ácido propanofosfónico (PPA).

Las condensaciones pueden ser realizadas en condiciones estándar. En la condensación es necesario, por regla general, que los grupos amino existentes, que no reaccionan, sean protegidos con grupos protectores reversibles. Lo mismo rige para grupos carboxilo que no participan en la reacción, que están presentes durante la condensación preferentemente como ésteres de alquilo (C_{1}-C_{6}), ésteres bencílicos o ésteres terc.-butílicos. No es necesaria una protección de grupos amino cuando los grupos amino aún están presentes en forma de precursores, tales como grupos nitro o grupos ciano, y sólo después de la condensación recién se originan por hidrogenación. Después de la condensación, los grupos protectores existentes se eliminan de forma apropiada. Por ejemplo, los grupos NO_{2} (protección de guanidino en aminoácidos), grupos benciloxicarbonilo y grupos bencilo de ésteres bencílicos se pueden eliminar por hidrogenación. Los grupos protectores del tipo terc.-butilo se eliminan con ácidos, mientras que el radical 9-fluorenilmetiloxicarbonilo se elimina por medio de aminas secundarias.

El soporte polímero designado con PS en las fórmulas V y VI es una resina de poliestireno reticulada con un ligador designado como cadena intermediaria L. Este ligador lleva un grupo funcional apropiado, por ejemplo amina, siendo entonces conocido como resina de Rink-amida, por ejemplo, o un grupo OH, siendo entonces conocido como resina de Wang o resina de oxima de Kaiser, por ejemplo. De modo alternativo, se pueden emplear otros soportes polímeros, tales como vidrio, algodón o celulosa con diversas cadenas intermediarias L.

La cadena intermediaria designada con L está unida covalentemente al soporte polímero, y permite una unión reversible, de tipo amida o de tipo éster, con el compuesto de la fórmula IVa, que permanece estable durante las sucesivas reacciones que tienen lugar en el compuesto de la fórmula IVa unido; aunque en condiciones de reacción fuertemente ácidas, por ejemplo en mezclas con ácido trifluoroacético, los grupos que se encuentran en el ligador quedan nuevamente libres.

La liberación del compuesto de la fórmula general I deseada del ligador puede suceder en diversos lugares de la secuencia de reacción.

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A. Procedimiento general para la copulación de ácidos aminocarboxílicos protegidos de la fórmula IVa al soporte sólido

La síntesis se llevó a cabo en reactores con un volumen de reacción de 15 ml cada uno.

En cada uno de los reactores se dispusieron 0,179 g de resina Rink-Amid-AM (Fmoc-Rink-Amid AM/Nova-Biochem; carga: 0,56 mmol/g; lo que significa 0,1 mmol/reactor). Para eliminar el grupo protector de Fmoc de la resina, se añadió a cada reactor una disolución al 30% de piperidina/DMF y se agitó la mezcla durante 45 minutos. Luego se filtró, y la resina se lavó 3 veces con dimetilformamida (DMF).

Para copular el aminoácido protegido se añadieron a cada una de las resinas así preparadas una disolución 0,5 molar del correspondiente Fmoc-aminoácido (0,3 mmol en DMF); disolución de HOBt (0,33 mmol en DMF) y una disolución de DIC (0,33 mmol en DMF), y se agitó la mezcla durante 16 horas a 35ºC. Luego se lavó la resina varias veces con DMF.

Para comprobar la copulación, se extrajeron algunas esferitas de resina y se sometieron a un ensayo de KAISER; el ensayo fue negativo en todos los casos.

La eliminación del grupo protector de Fmoc, tal como se mencionó con anterioridad, con disolución al 30% de piperidina/DMF.

Para copular los ácidos indol-carboxílicos se añadieron una disolución 0,1 molar del correspondiente ácido sustituido en posición 4 ó 5 (0,4 mmol en DMF); una disolución 0,5 molar del reactivo copulante TOTU (0,44 mmol en DMF) y una disolución 0,5 molar de DIPEA (0,6 mmol en DMF), y se agitó la mezcla durante 16 horas a 40ºC. Luego se lavó la resina varias veces con DMF.

Para controlar la reacción, se extrajeron nuevamente algunas esferitas de resina y se sometieron a un ensayo de Kaiser.

Para separar las sustancias deseadas del soporte sólido, se lavó la resina varias veces con diclorometano. Luego se añadió la disolución de separación (50% de diclorometano y 50% de una mezcla de 95 % de TFA, 2% de H_{2}O, 3% de triisopropil-silano), y se agitó la mezcla durante 1 hora a temperatura ambiente. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró hasta sequedad. El residuo se precipitó con éter dietílico y se filtró.

Los residuos sólidos contenían los productos deseados, la mayoría de las veces con gran pureza, o bien se fraccionaron, por ejemplo mediante cromatografía líquida de alta presión en fase invertida, preparativa (eluyentes: a: H_{2}O/0,1% de TFA, B: acetonitrilo/0,1% de TFA). La liofilización de las fracciones obtenidas proporcionó los productos deseados.

La preparación de sales fisiológicamente tolerables a partir de los compuestos de la fórmula I aptos para la formación de sales, incluyendo sus formas estereoisómeras, se lleva a cabo de una manera en sí conocida. Los ácidos carboxílicos forman con reactivos básicos, tales como hidróxidos, carbonatos, hidrogenocarbonatos, alcoholatos, y amoníaco o bases orgánicas, por ejemplo trimetil- o trietilamina, etanolamina o trietanolamina o también aminoácidos básicos, por ejemplo lisina, ornitina o arginina, sales alcalinas, alcalinotérreas o de amonio eventualmente sustituidas, estables. Siempre que los compuestos de la fórmula I presenten grupos básicos, con ácidos fuertes también se pueden preparar sales por adición de ácidos estables. Para ello entran en consideración ácidos tanto inorgánicos como orgánicos, tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido metanosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido p-toluenosulfónico, ácido 4-bromo-bencenosulfónico, ácido ciclohexilamidosulfónico, ácido trifluorometilsulfónico, ácido acético, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido succínico o ácido trifluoroacético.

La invención también se refiere a medicamentos, caracterizados por un contenido eficaz de al menos un compuesto de la fórmula I y/o de una sal fisiológicamente tolerable del compuesto de la fórmula I y/o una forma eventualmente estereoisómera del compuesto de la fórmula I, junto con un excipiente, aditivo y/u otras sustancias activas y auxiliares, farmacéuticamente apropiados y fisiológicamente tolerables.

Debido a sus propiedades farmacológicas, los compuestos de acuerdo con la invención son apropiados para la prevención y la terapia de todas aquellas enfermedades en cuyo desarrollo está implicada una mayor actividad de I\kappaB-cinasa. Se cuentan entre estas, por ejemplo, enfermedades crónicas del aparato locomotor tales como artritis agudas y crónicas de origen inflamatorio, inmunológico o metabólico, artropatías, artritis reumatoide, o enfermedades degenerativas de las articulaciones tales como osteoartrosis, espondilosis, atrofia del cartílago a consecuencia de traumas de la articulación o prolongada inmovilidad de la articulación resultante de lesiones del menisco o de la rótula, o desmorrexis o enfermedades del tejido conjuntivo tales como colagenosis y enfermedades periodontales, mialgias y trastornos del metabolismo óseo, o bien enfermedades que están causadas por una sobre-expresión del factor alfa de necrosis tumoral (TNF\alpha) o por una concentración elevada de TNF\alpha, tales como caquexia, esclerosis múltiple, trauma craneoencefálico, enfermedad de Crohn y úlceras intestinales, o enfermedades tales como aterosclerosis, estenosis, ulceración, enfermedades de Alzheimer, degeneración muscular, enfermedades cancerosas (potenciación de terapias con citotóxicos), infarto de miocardio, gota, sepsis, choque séptico, choque endotóxico, infecciones víricas tales como gripe, hepatitis, infecciones por VIH, SIDA, o enfermedades causadas por adenovirus o herpesvirus, infecciones parasitarias tales como malaria o lepra, infecciones por hongos o levaduras, inflamaciones de las meninges, afecciones pulmonares inflamatorias crónicas tales como bronquitis crónica o asma, síndrome de dificultad respiratoria aguda, sinovitis aguda, tuberculosis, psoriasis, diabetes, tratamiento de reacciones de rechazo, agudas o crónicas, del receptor de un órgano contra el órgano trasplantado, enfermedades crónicas de injerto contra huésped, y enfermedades vasculares inflamatorias.

Los medicamentos según la invención se administran, por lo general, por vía oral o parenteral. También es posible la aplicación rectal o transdérmica.

La invención se refiere también a un procedimiento para preparar un fármaco, que se caracteriza porque comprende llevar a una forma de administración adecuada al menos un compuesto de la fórmula I junto con un excipiente farmacéuticamente adecuado y fisiológicamente tolerable y, eventualmente, otras sustancias activas, aditivas o auxiliares.

Formas de preparación sólidas o galénicas apropiadas son, por ejemplo, granulados, polvos, grageas, comprimidos, (micro)cápsulas, supositorios, jarabes, zumos, suspensiones, emulsiones, gotas o disoluciones inyectables, así como preparados con liberación retardada de la sustancia activa, en cuya preparación se emplean los coadyuvantes usuales, tales como excipientes, disgregantes, aglutinantes, agentes de revestimiento, agentes de hinchamiento, agentes deslizantes o lubricantes, saborizantes, edulcorantes y solubilizantes. Como coadyuvantes empleados frecuentemente se mencionarán carbonato de magnesio, dióxido de titanio, lactosa, manita y otros azúcares, talco, lactoproteína, gelatina, almidón, celulosa y sus derivados, aceites animales y vegetales, tales como aceite de hígado de bacalao, aceite de girasol, aceite de maní o aceite de sésamo, polietilenglicol y disolventes, tales como, por ejemplo, agua esterilizada y alcoholes mono- o polihidroxílicos, tales como glicerina. Con preferencia, las preparaciones farmacéuticas se preparan y administran en unidades de dosificación, en donde cada unidad contiene como componente activo una dosis determinada del compuesto de la fórmula I de acuerdo con la invención. En el caso de unidades de dosificación sólidas, tales como comprimidos, cápsulas, grageas o supositorios, esta dosis puede ascender hasta aproximadamente 1000 mg, con preferencia de aproximadamente 50 mg a 300 mg, y en el caso de soluciones inyectables en forma de ampolla, hasta aproximadamente 300 mg, con preferencia de aproximadamente 10 mg a 100 mg. Para el tratamiento de un paciente adulto de aproximadamente 70 kg, están indicadas, dependiendo de la eficacia del compuesto según la fórmula I, dosis diarias de aproximadamente 20 mg a 1000 mg de sustancia activa, con preferencia de aproximadamente 100 mg a 500 mg. En ciertas circunstancias, sin embargo, también pueden ser adecuadas dosis diarias mayores o menores. La administración de la dosis diaria se puede realizar mediante una administración aislada en forma de una unidad de dosificación individual o en forma de diversas unidades de dosificación menores o por la administración repetida de dosis subdivididas a intervalos específicos.

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Los productos finales se elucidan, por lo general, por medio de métodos de espectroscopia de masa (abreviada EM) (FAB, ESI-EM). Los datos de temperatura se encuentran en grados centígrados, t.a. significa temperatura ambiente (de 22ºC a 26ºC). Las abreviaturas utilizadas están explicadas o bien responden a las convenciones usuales.

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Ejemplos Obtención de ácidos indolcarboxílicos sustituidos Variante de procedimiento A) - Ácido 2,3-difenil-1H-indol-5-carboxílico

Se desmenuzaron en un mortero 1,96 g (10 mMol) de deoxibenzoína y 1,52 g de ácido 4-hidrazinobenzoico, y a continuación se fundieron en un horno abierto, durante 15 minutos a 160ºC. A la masa fundida enfriada se añadieron 100 ml de ácido acético y 30 ml de ácido clorhídrico concentrado, y se calentó a reflujo durante 3 horas. Al mezclar con agua la disolución enfriada precipitó el producto ácido 2,3-difenil-1H-indol-5-carboxílico. Se filtró con succión, se lavó abundantemente con agua el residuo, y se secó. Para purificarlo, se agitó el producto bruto con tolueno caliente, se filtró con succión, y se secó de nuevo. Se obtuvo ácido 2,3-difenil-1H-indol-5-carboxílico.

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Variante de procedimiento B) - Ácido 2-piridin-4-il-1H-indol-5-carboxílico

Se añadieron 12,5 ml de H_{3}PO_{4} (del 85%) a 20 g de P_{2}O_{5}, con lo que la mezcla de reacción se calentó fuertemente. Después de haber enfriado la mezcla de reacción a 60ºC, se añadieron 8,90 g (65,84 mmol) de 4-propionilpiridina y 4,20 g (27,60 mMol) de ácido 4-hidrazinobenzoico. Después se agitó durante 45 minutos a 145ºC. Se vertió sobre agua la mezcla de reacción, con lo cual precipitó el producto 2-piridin-4-il-1H-indol-5-carboxílico, de color amarillo. Se filtró con succión este precipitado, y se lavó con agua hasta neutralidad. El ácido 2-piridin-4-il-1H-indol-5-carboxílico así obtenido, con rendimiento cuantitativo, se utilizó sin más purificación para la copulación con derivados de aminoácido.

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Copulación de derivados de aminoácido con derivados de ácido indolcarboxílico sustituidos Variante de procedimiento C) Ejemplo 1 (1-Carbamoil-3-fenil-propil)-amida de ácido 2,3-difenil-1H-indol-5-carboxílico

A temperatura ambiente se disolvieron 0,16 g (0,5 mMol) de ácido 2,3-difenil- -1H-indol-5-carboxílico (véase la variante de procedimiento A) en 10 ml de dimetilformamida (DMF) seca, y se añadieron sucesivamente 0,11 g (0,5 mMol) de hidrocloruro de L-homofenilalaninamida, 0,16 g de TOTU (tetrafluoroborato de O-[(ciano(etoxi-carbonil)metiliden)amino-1,1,3,3-tetrametil]uronio) y 0,14 ml (1 mMol) de diisopropil-amina. Se agitó durante 6 horas a temperatura ambiente. Se concentró la mezcla de reacción bajo presión reducida, y se disolvió en acetato de etilo el residuo. Se lavó sucesivamente la fase orgánica con agua, disolución saturada de carbonato sódico, agua, y disolución saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico, se filtró, y se concentró bajo presión reducida. Se obtuvo (1-carbamoil-3-fenil-propil)-amida de ácido 2,3-difenil-1H-indol-5-carboxílico con punto de fusión de 120ºC a 125ºC.

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Ejemplo 7 (1-Carbamoil-3-pirrol-1-il-propil)-amida de ácido 3-metil-2-piridin-4-il-1H-indol-5-carboxílico

A temperatura ambiente se disolvieron 0,13 g (0,5 mMol) de ácido 3-metil-2-piridin-4-il-1H-indol-5-carboxílico (véase la variante de procedimiento A) en 10 ml de dimetilformamida (DMF) seca, y se añadieron sucesivamente 0,083 g (0,5 mMol) de amida de ácido 4-(1-pirrolil)-L-2-benciloxicarbonilamino-butírico, 0,16 g (0,5 g mMol) de TOTU (tetrafluoroborato de O-[(ciano(etoxicarbonil)metiliden)amino-1,1,3,3-tetrametil]-uronio) y 0,14 ml (1 mMol) de etil-diisopropilamina. Se agitó durante 6 horas a temperatura ambiente. Se concentró la mezcla de reacción bajo presión reducida, y se disolvió en acetato de etilo el residuo. Se lavó sucesivamente la fase orgánica con agua, disolución saturada de carbonato sódico, agua, y disolución saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico, se filtró, y se concentró bajo presión reducida. La purificación se efectuó mediante HPLC preparativa.

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a: Ácido 4-(1-pirrolil)-L-2-benciloxicarbonilamino-butírico

A una disolución, barrida con argón, de 1,25 g (5,0 mMol) de ácido N_{\alpha}-Z-L-2,4-diaminobutírico en 60 ml de agua, se añadieron 0,66 g (5,0 mMol) de 2,5-dimetoxitetrahidrofurano, seguidos de 1,7 ml de ácido acético glacial, y se agitó durante 12 horas a 20ºC. Se extrajo la mezcla de reacción varias veces con acetato de etilo, se reunieron las fases orgánicas, se secaron con sulfato sódico, y se concentró el filtrado bajo presión reducida. El producto bruto se purificó mediante cromatografía rápida sobre gel de sílice (CH_{2}Cl_{2}/CH_{3}OH/CH_{3}COOH : 100/5/1). Tras eliminar el eluyente se obtuvieron 1,3 g (87%) de ácido 4-(1-pirrolil)-L-2-benciloxicarbonilamino-butírico.

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b: Amida de ácido 4-(1-pirrolil)-L-2-benciloxicarbonilamino-butírico

En 10 ml de DMF se disolvieron juntos 1,2 g (4,0 mMol) de ácido 4-(1-pirrolil)-L-2-benciloxicarbonilamino-butírico y 0,61 g (4,0 mMol) de sal amónica de N-hidroxibenzotriazol, se añadieron, a 0ºC, 0,82 g (4,0 mMol) de N,N'-diciclohexilcarbodiimida y 0,68 ml (4,0 mMol) de N-etil-diisopropilamina, y se agitó durante 30 minutos a 0ºC y durante 3 horas a 20ºC. Se filtró con succión la urea precipitada, y se concentró en vacío el filtrado, hasta sequedad. El producto bruto se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (CH_{2}Cl_{2}/CH_{3}OH/CH_{3}COOH: 100/5/1). Rendimiento: 0,89 g (74%).

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c: Amida de ácido 4-(1-pirrolil)-L-2-amino-butírico

A 0,80 g (2,65 mMol) de amida de ácido 4-(1-pirrolil)-L-2-benciloxicarbonil-amino-butírico disueltos en 20 ml de metanol se añadieron, bajo gas inerte, 80 mg de catalizador (Pd-C al 10%), y a continuación se introdujo hidrógeno hasta la completa eliminación del grupo protector Z. Tras separar por filtración el catalizador y concentrar el filtrado por evaporación, se obtuvieron 0,4 g (90,5%) de amida de ácido 4-(1-pirrolil)-L-2-amino-butírico.

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2. Variante de procedimiento D) Ejemplo 3 (1-Carbamoil-2-fenilsulfanil-etil)-amida de ácido 2-piridin-4-il-1H-indol-5-carboxílico

A 0,20 g (0,84 mMol) de ácido 2-piridin-4-il-1H-indol-5-carboxílico se añadieron 0,21 g (1,07 mMol) de ácido 2-amino-3-fenilsulfanil-propiónico en 40 ml de DMF, se añadieron, a 0ºC, 0,66 g (1,27 mMol) de hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi-tripirrolidino-fosfonio y 0,37 ml (2,12 mMol) de N-etil-N,N-diisopropilamina, y se agitó durante 2 horas a 20ºC. Se concentró la disolución bajo presión reducida, y se purificó mediante cromatografía en columna a presión media (CH_{2}Cl_{2}/CH_{3}OH en proporción 9 : 1). Se obtuvieron de este modo 0,19 g (54%) de (1-carbamoil-2-fenilsulfanil-etil)-amida de ácido 2-piridin-4il-1H-indol-5-carboxílico.

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Ejemplo 9 Amida de ácido 3-fenilaminoetil-2-[(2-piridin-4-il-1H-indol-5-carbonil)-amino]-propiónico

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a) Ácido L-2-amino-3-fenilaminoetilpropiónico

Se suspendieron 54,8 g (0,209 mol) de trifenilfosfina en 600 ml de acetonitrilo y, excluyendo la humedad, se enfriaron a una temperatura de -35ºC hasta -45ºC. Luego se añadieron a esta temperatura, en el transcurso de 50 minutos y gota a gota, 36,4 g (0,209 mol) de éster dietílico de ácido azodicarboxílico. Se agitó durante 15 minutos a -35ºC. A esta mezcla se añadió gota a gota una disolución de 50 g (0,209 mol) de N-benciloxicarbonil-L-serina en 500 ml de acetonitrilo, sin dejar que la temperatura superase -35ºC. Después se dejó reaccionar durante 12 horas a 5ºC y se calentó hasta la temperatura ambiente. La disolución de reacción se liberó del disolvente a presión reducida y el producto en bruto se purificó con cromatografía a presión media en gel de sílice. (DCM/AcCN : 25/1) Después de eliminar el disolvente se obtuvieron 20,8 g (rendimiento 45%) de N-benciloxi-carbonil-L-serin-\beta-lactona pura (véase también Org. Synth. 1991 (70) páginas 1 y siguientes) en agujas finas. Fórmula empírica C_{11}H_{11}NO_{4}; peso molecular = 221,2; EM (M+H) 222,1.

A 7,3 ml (57,36 mmol) de N-etilanilina en 250 ml de acetonitrilo se añadieron, bajo atmósfera protectora de argón, 15,5 ml (63,51 mmol) de N,O-bis-(trimetilsilil)acetamida, y se agitó durante 3 horas a 50ºC. Después se añadió, a 20ºC, una disolución de la lactona precedente (10,7 g, 48,37 mmol) disuelta en 250 ml de acetonitrilo, y se calentó a reflujo durante 17 horas. Tras eliminar el disolvente, se mezcló el residuo con disolución saturada de carbonato de sodio, sin que el valor de pH de la disolución superase 9. Se lavó la suspensión acuosa con una pequeña cantidad de éter dietílico, y después de acidificó con ácido clorhídrico concentrado hasta un valor de pH de 6 a 7, y con tampón de NaHPO_{4} se ajustó a un valor pH de 5. Después se extrajo varias veces con acetato de etilo la disolución acuosa. Tras evaporar los disolventes, se obtuvo el producto deseado con un rendimiento del 45% (7,4 g). Fórmula empírica C_{19}H_{22}N_{2}O_{4}; p. mol. = 342,4; EM (M+H) 343,2.

A 75 ml de metanol se añadieron gota a gota, a -10ºC, 6,5 ml (89,1 mmol) de cloruro de tionilo, y se agitó durante 30 minutos. Después se añadieron 8,6 g (25,12 mmol) de ácido L-2-aminoetil-3-fenilaminopropiónico disueltos en 75 ml de metanol, y se agitó durante 30 minutos a -10ºC y otras 3 horas a temperatura ambiente. Tras evaporar el disolvente, se tomó el residuo en acetato de etilo y se lavó con disolución de carbonato de sodio. Tras evaporar el disolvente y purificar por medio de cromatografía rápida (n-heptano/acetato de etilo 7:3) se obtuvieron 4,43 g (rendimiento 50%) de éster metílico de ácido L-2-aminoetil-3-fenilaminopropiónico. Fórmula empírica C_{20}H_{24}N_{2}O_{4}; p. mol. = 356,4; EM (M+H) 357,3.

Para eliminar el grupo protector, se disolvieron 4,4 g (12,35 mmol) del derivado Z-protegido en 500 ml de metanol, se añadieron bajo gas inerte 100 mg de catalizador (Pd(OH)_{2}-C al 10%) y se introdujo hidrógeno hasta eliminar por completo el grupo protector Z. Tras filtrar el catalizador y concentrar por evaporación el filtrado, se obtuvieron 2,8 g de ácido L-2-aminoetil-3-fenilamino-propiónico (cuantitativo). Fórmula empírica C_{12}H_{18}N_{2}O_{2}; p. mol. = 223,3; EM (M+H) 223,1.

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Etapa de procedimiento b)

Se suspendieron 0,63 g (2,64 mmol) de ácido 2-piridin-4-il-1H-indol-5-carboxílico, preparado como en la Variante de procedimiento B),en 150 ml de DMF y se añadieron sucesivamente 1,01 g (3,08 mmol) de TOTU y 0,63 ml (3,71 mmol) de etildiisopropilamina. Se agitó durante 20 min a temperatura ambiente, y a la disolución transparente resultante se añadieron 0,73 g (3,28 mmol) de éster metílico de ácido (S)-2-amino-3-fenilaminetilpropiónico preparado según a). Después de agitar durante 15 horas, se concentró a presión reducida y se aisló el éster metílico del compuesto del título mediante cromatografía rápida en gel de sílice (DCM:MeOH=19:1). Rendimiento: 0,44 g, Fórmula empírica C_{26}H_{26}N_{4}O_{3}; p. mol. = 442,2; EM (M+H) 443,3.

Se disolvieron en 100 ml de metanol 0,22 g (0,497 mmol) del éster metílico así obtenido, se enfriaron a 0ºC, y a continuación se introdujo amoníaco durante 1,5 horas. Se dejó reposar la disolución durante una noche a temperatura ambiente, y después se evaporó el metanol. El producto bruto se se purificó mediante cromatografía rápida en gel de sílice (DCM:MeOH= 19:1). Rendimiento: 0,096 g (45,2%) de C_{25}H_{25}N_{5}O_{2}; p. mol. = 427,2; EM (M+H) 428,3.

En la Tabla 1 siguiente los compuestos han sido preparados de manera análoga a los procedimientos A) hasta D).

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TABLA 1

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Ejemplos de farmacología ELISA de l\kappaB-cinasa

La actividad de l\kappaB-cinasa se determinó con un ELISA, compuesto de un péptido sustrato biotinilado, que contenía la secuencia aminoacídica de la proteína l\kappaB de la serina 32 a 36, y un anticuerpo poli o monoclonal específico (por ejemplo de New England Biolabs, Beverly, MA, USA, referencia: 9240), que sólo se une a la forma fosforilada del péptido l\kappaB. Se inmovilizó este complejo a una placa fijadora de anticuerpos (revestida de proteína A) y se detectó con un conjugado de una proteína fijadora de biotina y HRP (por ejemplo estreptoavidina-HRP). Se pudo cuantificar la actividad por medio de una curva patrón con fosfopéptido sustrato.

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Realización

Para obtener el complejo de cinasa se diluyeron 10 ml de extracto celular HeLa S3 S100 con 40 ml de HEPES 50mM, pH 7,5, se aplicaron sobre sulfato amónico al 40%, y se incubaron en hielo durante 30 minutos. La pella precipitada se disolvió en 5 ml de tampón SEC (HEPES 50 mM, pH 7,5, DTT 1 mM, EDTA 0,5 mM, 2-glicerofosfato 10 mM), se centrifugó a 20,000 x g durante 15 minutos, y se filtró a través de un filtro de 0,22 \mum. Se aplicó la muestra sobre una columna de 320 ml de Superose-6 FPLC (Amersham Pharmacia Biotech AB, Uppsala, Suecia), que había sido equilibrada con tampón SEC, y se hizo trabajar con un caudal de 2 ml/minuto a 4ºC. Se reunieron para la activación las fracciones que presentaron el tiempo de elución del patrón de peso moleclar de 670 kDa. La activación se realizó mediante la incubación durante 45 minutos con MEKK1\Delta 100 nM, MgATP 250 \muM, MgCl_{2} 10 mM, ditiotreitol (DTT) 5 mM, 2-glicerofosfato 10 mM, Microcystin-LR 2,5 \muM, a 37ºC. Se conservó a -80ºC la enzima activada.

Se preincubaron durante 30 minutos a 25ºC las sustancias de prueba, disueltas en DMSO (2 \mul), con 43 \mul de enzima activada (diluida 1:25 en tampón de reacción HEPES 50 mM, pH 7,5, MgCl_{2} 10 mM, DTT 5 mM, \beta-glicerofosfato 10 mM, Microcystin-LR 2,5 \muM). Después se añadieron 5 \mul de péptido sustrato (biotina-(CH_{2})_{6}-DRHDSGLDSMKD-CONH_{2}) (200 \muM), se incubó durante una hora, y se detuvo con 150 \mul de HEPES 50 mM pH 7,5, BSA al 0,1%, EDTA 50 mM, anticuerpo [1:200]. Después se trasladaron 100 \mul de la mezcla de reacción detenida, o bien de una serie de diluciones de fosfopéptido patrón (biotina-(CH_{2})_{6}-DRHDS[PO_{3}]GLDSMKD-CONH_{2}) a una placa con proteína-A (Pierce Chemical Co., Rockford, IL, USA), y se incubaron, con agitación por sacudidas, durante 2 horas. Después de tres pasos de lavado con PBS, se añadieron 100 \mul de estreptoavidina-HRP (peroxidasa de rábano picante) 0,5 \mug/ml (diluida en HEPES 50 mM/BSA al 0,1%) durante 30 minutos. Después de 5 pasos de lavado con PBS, se añadieron 100 \muL de TMB-Substrat (Kirkegaard & Perry Laboratories, Gaithersburg, MD, USA), y se detuvo el desarrollo del color mediante la adición de 100 \muL de ácido sulfúrico 0,18 M. Se midió la absorción a 450 nm. La curva patrón se construyó mediante regresión lineal correspondiente a una relación dosis-efecto de cuatro parámetros. Mediante esta curva patrón se cuantificó la actividad enzimática o, en su caso, la inhibición de la misma por las sustancias de prueba.

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Método PKA, PKC, CK II

Se determinaron la proteína-cinasa dependiente de cAMP (PKA), la proteína-cinasa C (PKC) y la caseína-cinasa II (CK II) con los correspondientes kits de ensayo de Upstate Biotechnology de acuerdo con las indicaciones del fabricante, a una concentración de ATP de 50 \muM. Como diferencia, en lugar de filtros de fosfocelulosa se utilizaron placas de múltiples tamices (Millipore; Phosphocellulose MS-PH, referencia MAPHNOB10) con el correspondiente sistema de filtración por succión. Después se midieron las placas en un contador de centelleo Wallac MicroBeta. Se emplearon en cada caso 100 \muM de la sustancia de ensayo. Cada sustancia se ensayó por determinación doble. De los valores medios (enzima con y sin sustancias) se sustrajo el valor medio del blanco (sin enzima) y se calculó el porcentaje de inhibición. Se realizaron cálculos de la CI_{50} son el paquete de software GraFit 3.0. La siguiente Tabla 2 muestra los resultados.

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TABLA 2 Inhibición de la cinasa con una concentración de sustancia de 100 \muM o IC_{50} en \muM

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Claims

1. Compuesto de la fórmula I

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R^{3} representa un radical de la fórmula II,

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en donde

D representa -C(O)- ,

R^{7} representa átomo de hidrógeno o alquilo (C_{1}-C_{4}),

R^{8} representa

1.: alquilo (C_{1}-C_{4}), en donde alquilo es lineal o ramificado y está mono- o disustituido, de manera independiente entre sí, con

1.2: -O-R^{10},

1.3: -S(O)_{x}-R^{10}, en donde x es el número entero cero, 1 ó 2,

1.4: -N(R^{10})_{2},

1.5: radical de la fórmula

21

\quad: ó

1.6: radical de la fórmula

22

\quad: o bien

2.: representa el radical característico de un aminoácido del grupo de glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, fenilalanina, tirosina, serina, triptófano, treonina, cisteína, metionina, asparagina, glutamina, lisina, histidina, arginina, ácido glutámico, ácido aspártico, ácido 2-aminoadípco, ácido 2-aminoisobutírico, ácido 2-aminobutírico, ácido 2,3-diamino-propiónico, ácido 2,4-diaminobutírico, ácido 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-1-carboxílico, ácido 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-3-carboxílico, ácido 2-aminopimélico, fenilglicina, 3-(2-tienil)-alanina, 3-(3-tienil)-alanina, 2-(2-tienil)-glicina, ácido 2-amino-heptanoico, ácido pipecólico, hidroxilisina, sarcosina, N-metilisoleucina, 6-N-metillisina, N-metilvalina, norvalina, norleucina, ornitina, alo-isoleucina, alo-treonina, alo-hidroxilisina, 4-hidroxiprolina, 3-hidroxiprolina, 3-(2-naftil)-alanina, 3-(1-naftil-alanina), homofenilalanina, homocisteína, ácido homocisteínico, homotriptófano, ácido cisteínico, 3-(2-piridil)-alanina, 3-(3-piridil)-alanina, 3-(4-piridil)-alanina, ácido 2-amino-3-fenilaminopropiónico, ácido 2-amino-3-fenilamino-etilpropiónico, fosfinotricina, 4-fluorofenilalanina, 3-fluorofenil-alanina, 2-fluorofenilalanina, 4-clorofenilalanina, 4-nitrofenilalanina, 4-aminofenilalanina, citrulina, ciclohexilalanina, 5-fluorotriptófano, 5-metoxitriptófano, metionin-sulfona, metionin-sulfóxido y -NH-NR^{10}-C(O)N(R^{10})_{2};

R^{9} representa

1.: R^{8},

2.2: halógeno,

2.3: -CN ó

2.4: -CF_{3},

R^{10} representa

a): átomo de hidrógeno,

1.: arilo, en donde arilo es tal como se ha definido antes ,

4.: halógeno,

6.: -C(O)-OH,

c): arilo, en donde arilo es tal como se ha definido antes,

e): heterociclo con 5 a 12 miembros de anillo, en donde heterociclo es tal como se ha definido antes, y

para el caso de (R^{10})_{2}, R^{10} tiene, de manera independiente entre sí, el significado de a) hasta e),

Z representa

1.: 1,3,4-oxadiazol, en donde 1,3,4-oxadiazol no está sustituido o bien está sustituido de una a tres veces con -NH_{2}, OH ó alquilo-(C_{1}-C_{4}), o bien

2.: representa -C(O)-R^{11}, en donde

R^{11} representa

1.: -O-R^{10} o bien

2.: representa -N(R^{10})_{2}, o bien

R^{7} y R^{8} forman, junto con el átomo de nitrógeno y el átomo de carbono a los cuales están respectivamente unidos, un anillo de la fórmula IIa

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del grupo de pirrol, pirrolina, pirrolidina, piridina, piperidina, piperileno, piridazina, pirimidina, pirazina, piperazina, pirazol, imidazol, pirazolina, imidazolina, pirazolidina, imidazolidina, oxazol, tetrazol, 2-óxidos de 1,2,3,5-oxatiadiazol, triazolonas, oxadiazolonas, isoxazolonas, oxadiazolidindionas, triazoles que no están sustituidos o bien están sustituidos con F, -CN, -CF_{3} ó -C(O)-O-alquilo (C_{1}-C_{4}), 3-hidroxipirrol-2,4-dionas, 5-oxo-1,2,4-tiadiazoles, isoxazol, 2-isoxazolidina, isoxazolidina, morfolina, isotiazol, tiazol, isotiazolidina, tiomorfolina, indazol, tiadiazol, bencimidazol, quinoleína, triazol, ftalazina, quinazolina, quinoxalina, purina, pteridina, indol, isoquinoleína, tetrahidroquinoleína y tetrahidroisoquinoleína, o bien

R^{8} y Z forman, junto con los átomos de carbono a los que en cada caso están unidos, un anillo de la fórmula IIc,

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del grupo de pirrol, pirrolina, pirrolidina, piridina, piperidina, pirazolina, ftalazina, piperileno, piridazina, pirimidina, pirazina, piperazina, pirazol, imidazol, 1,3,4-oxadiazol, imidazolina, pirazolidina, imidazolidina, oxazol, isoxazol, 2-isoxazolidina, isoxazolidina, morfolina, isotiazol, tiazol, isotiazolidina, tiomorfolina, indazol, tiadiazol, bencimidazol, quinoleína, triazol, tetrazol, 2-óxidos de 1,2,3,5-oxatiadiazol, oxadiazolonas, isoxazolonas, triazolonas, oxadiazolidindionas, triazoles, que pueden estar sin sustituir o bien estar sustituidos con F, -CN, -CF_{3} ó -C(O)-O-alquilo (C_{1}-C_{4}), 3-hidroxipirrol-2,4-diona, 5-oxo-1,2,4-tiadiazoles, quinazolina, quinoxalina, purina, indol, pteridina, tetrahidroquinoleína, tetrahidroisoquinoleína e isoquinoleína, y

R^{1}, R^{2} y R^{4} representan átomo de hidrógeno,

R^{5} representa átomo de hidrógeno, y

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R^{6} representa

1.: fenilo, mono- o disustituido, de manera independiente entre sí, con

1.1: -CN,

1.2: -CF_{3},

1.3: halógeno,

1.4: -O-R^{10},

1.5: -N(R^{10})_{2},

1.6: -NH-C(O)-R^{11},

1.7: -S(O)_{x}-R^{10}, en donde x es el número entero cero, 1 ó 2,

1.8: -C(O)-R^{11} ó

1.9: alquil (C_{1}-C_{4})-NH_{2},

2.: heteroarilo con 5 a 14 miembros de anillo, en donde heteroarilo es tal como se ha definido antes y no está sustituido o bien está mono-, di- o trisustituido, de manera independiente entre sí, con los sustituyentes antes definidos en los apartados 1.1 a 1.9, o bien

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2. Compuesto de la fórmula I según la reivindicación 1, caracterizado porque

R^{3} representa un radical de la fórmula II, en donde

D representa -C(O)-,

R^{7} representa átomo de hidrógeno,

Z representa -C(O)-OH ó -C(O)-NH_{2},

R^{8} representa

1.1: -S(O)-R^{10}, siendo R^{10} tal como se define más abajo,

1.2: -N(R^{10})_{2}, siendo R^{10} tal como se define más abajo, o bien

1.3: pirrol, o bien

R^{9} representa

1.: átomo de hidrógeno,

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R^{10} representa

a): átomo de hidrógeno,

R^{1}, R^{2} y R^{4} representan átomo de hidrógeno,

R^{5} representa átomo de hidrógeno, y

R^{6} representa fenilo o piridina.

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3. Procedimiento para preparar el compuesto de la fórmula I según las reivindicaciones 1 ó 2, caracterizado porque

a): se hace reaccionar en disolución un compuesto de la fórmula IV,

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: en donde Pg representa un grupo protector adecuado (por ejemplo el éster metílico), un grupo amida o un grupo hidroxi, y Z, R^{7} y R^{8} son tales como han sido definidos en la fórmula I,

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: con un cloruro de ácido o un éster activado del compuesto de la fórmula III, en donde D1 significa -COOH ó sulfonil-halógeno y R^{5}, R^{6} y R^{9} son tales como han sido definidos en la fórmula I, en presencia de una base o, eventualmente, de un agente deshidratante, y tras eliminar el grupo protector se transforma en un compuesto de la fórmula I, o bien

b): se copula un compuesto de la fórmula IVa,

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4. Medicamentos caracterizados por un contenido eficaz de al menos un compuesto de la fórmula I según las reivindicaciones 1 ó 2 junto con un excipiente, aditivo y/u otras sustancias activas y auxiliares farmacéuticamente apropiados y fisiológicamente tolerables.

5. Empleo de al menos un compuesto de la fórmula I según las reivindicaciones 1 ó 2, para preparar medicamentos para la profilaxis y terapia de enfermedades en cuyo curso está implicada una actividad incrementada de NF\kappaB.

6. Empleo según la reivindicación 5, para el tratamiento de enfermedades crónicas del aparato locomotor tales como artritis agudas y crónicas de origen inflamatorio, inmunológico o metabólico, artropatías, artritis reumatoide, o enfermedades degenerativas de las articulaciones tales como osteoartrosis, espondilosis, atrofia del cartílago a consecuencia de traumas de la articulación o prolongada inmovilidad de la articulación resultante de lesiones del menisco o de la rótula, o desmorrexis o enfermedades del tejido conjuntivo tales como colagenosis y enfermedades periodontales, mialgias y trastornos del metabolismo óseo, o bien enfermedades que están causadas por una sobre-expresión del factor alfa de necrosis tumoral (TNF\alpha) o por una concentración elevada de TNF\alpha, tales como caquexia, esclerosis múltiple, trauma craneoencefálico, enfermedad de Crohn y úlceras intestinales, o enfermedades tales como aterosclerosis, estenosis, ulceración, enfermedades de Alzheimer, degeneración muscular, enfermedades cancerosas (potenciación de terapias con citotóxicos), infarto de miocardio, gota, sepsis, choque séptico, choque endotóxico, infecciones víricas tales como gripe, hepatitis, infecciones por VIH, SIDA, o enfermedades causadas por adenovirus o herpesvirus, infecciones parasitarias tales como malaria o lepra, infecciones por hongos o levaduras, inflamaciones de las meninges, afecciones pulmonares inflamatorias crónicas tales como bronquitis crónica o asma, síndrome de dificultad respiratoria aguda, sinovitis aguda, tuberculosis, psoriasis, diabetes, tratamiento de reacciones de rechazo, agudas o crónicas, del receptor de un órgano contra el órgano trasplantado, enfermedades crónicas de injerto contra huésped, y enfermedades vasculares inflamatorias.

7. Procedimiento para preparar un medicamento, caracterizado porque se lleva a una forma de administración adecuada al menos un compuesto de la fórmula I según las reivindicaciones 1 y 2 junto con un excipiente farmacéuticamente apropiado y fisiológicamente tolerable y, eventualmente, otras sustancias activas, aditivas o auxiliares.