ES2332402T3 - Formulaciones de proteina concentradas de viscosidad reducida. - Google Patents
Formulaciones de proteina concentradas de viscosidad reducida. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2332402T3 ES2332402T3 ES01981824T ES01981824T ES2332402T3 ES 2332402 T3 ES2332402 T3 ES 2332402T3 ES 01981824 T ES01981824 T ES 01981824T ES 01981824 T ES01981824 T ES 01981824T ES 2332402 T3 ES2332402 T3 ES 2332402T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- formulation
- antibody
- immunoglobulin
- protein
- antibodies
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/02—Inorganic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
- A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/80—Elimination or reduction of contamination by undersired ferments, e.g. aseptic cultivation
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Formulación líquida estable que comprende una inmunoglobulina en una cantidad de por lo menos 80 mg/ml y una sal y/o tampón en una cantidad de por lo menos 100 mM, y que tiene una viscosidad cinemática de 50 mm 2 /s o menos a 25ºC.
Description
Formulaciones de proteína concentradas de
viscosidad reducida.
La presente invención pertenece a formulaciones
de proteínas concentradas con una viscosidad reducida, que son
particularmente adecuadas para la administración subcutánea. La
invención también se refiere a un procedimiento de reducción de la
viscosidad de las formulaciones de proteínas concentradas.
En los últimos diez años, los avances en la
biotecnología han hecho posible la producción de una variedad de
proteínas para aplicaciones farmacéuticas utilizando técnicas de ADN
recombinante. Como las proteínas son más grandes y más complejas
que los fármacos tradicionales orgánicos e inorgánicos (es decir,
poseen múltiples grupos funcionales además de las estructuras
tridimensionales complejas), la formulación de estas proteínas
presenta problemas especiales. Uno de los problemas es el elevado
valor de viscosidad de las formulaciones de proteínas,
especialmente a alta concentración. El suministro de una
concentración de proteínas es a menudo requerido para la
administración subcutánea debido a las limitaciones de volumen
(\leq 1,5 ml) y requerimientos de dosis (normalmente \geq 50
mg, preferiblemente \geq 100 mg). Por ejemplo, si una proteína
debe administrarse a pacientes a 2 mg/kg sobre una base semanal, la
dosis semanal promedio será de 130 mg considerando 65 kg como peso
promedio de los pacientes. Como volúmenes de inyección mayores de
1,5 mg no se toleran bien para la administración subcutánea, la
concentración de proteínas para una administración subcutánea
semanal será de aproximadamente 100 mg/ml (130 mg de proteínas en
menos de 1,5 ml de volumen). Sin embargo, las formulaciones de
proteínas muy concentradas presentan varios problemas. Un problema
es la tendencia de las proteínas a formar partículas durante su
procesamiento y/o almacenamiento, que hace difícil la manipulación
durante el procesamiento adicional. En el caso de formulaciones
líquidas reconstituidas, esto se soluciona normalmente añadiendo un
surfactante adecuado (por ejemplo, un polisorbato) durante la
liofilización o después de la liofilización mientras se
reconstituye la formulación. Aunque los surfactantes han mostrado
que reduce de manera significativa el grado de formación de
partículas de las proteínas, no solucionan otro problema asociado
con la manipulación y la administración de formulaciones de
proteínas concentradas. Las proteínas tienden a formar soluciones
viscosas en alta concentración debido a su naturaleza macromolecular
y potencial para interacciones intermoleculares. Además, muchas
proteínas a menudo se liofilizan en presencia de grandes cantidades
de lioprotectores, tal como azúcar para mantener su estabilidad. El
azúcar puede mejorar las interacciones intermoleculares y aumentar
la viscosidad. Formulaciones muy viscosas son difíciles de fabricar,
colocar en una jeringuilla e inyectar de manera subcutánea. La
utilización de fuerzas en la manipulación de las formulaciones
viscosas provoca una formación de espuma excesiva, y la acción
resultante a modo detergente de la formación de espuma tiene el
potencial de desnaturalizar y desactivar la proteína
terapéuticamente activa. Además, la solución viscosa aumenta la
presión trasera durante el proceso UF/DF y hace difícil la
recuperación de la proteína. Esto puede provocar una pérdida
considerable del producto de la proteína. No hay una solución
satisfactoria de este problema de la técnica anterior. Por lo
tanto, existe la necesidad de desarrollar un procedimiento de
reducción de la viscosidad de una formulación que contiene una alta
concentración de proteínas.
Formulaciones de proteínas liofilizadas
isotónicas estables se describen en la publicación PCT WO 97/04801,
publicada el 13 febrero de 1997. Las formulaciones liofilizadas
descritas se pueden reconstituir para generar formulaciones
líquidas con una alta concentración de proteínas sin una pérdida
aparente de estabilidad. Sin embargo, los aspectos potenciales
asociados con la alta viscosidad de las formulaciones reconstituidas
no se contemplan.
Los solicitantes han descubierto que la
preparación de una formulación proteinácea liofilizada con 100 mM
NaCl de diluyente puede producir una solución ligeramente
hipertónica. Se ha creído previamente que las formulaciones
farmacéuticas deben mantenerse en un pH fisiológico y ser
isotónicas. Esta creencia se basó por lo menos en parte en la
percepción que la administración de una formulación hipertónica
podría provocar la deshidratación y por lo tanto podría dañar el
tejido en el sitio de la inyección. Sin embargo, la creencia del
requerimiento de isotonicidad absoluta de una formulación
farmacéutica puede no estar bien fundada. Por ejemplo, Zietkiewicz
et al., Grzyby Drozdzopodobne 23: 869-870
(1971) han mostrado que la isotonicidad absoluta de los fármacos no
es necesaria. Se encontró que es suficiente evitar que las
soluciones del fármaco superen los límites críticos de
hipertonicidad. Por ejemplo, se observaron daños en los tejidos
solamente cuando se administró una solución hipertónica de 1300
mOsmol/Kg (\sim650 mM NaCl) o mayor de manera subcutánea o
intramuscular en animales experimentales. Como resultado, las
formulaciones que son ligeramente hipertónicas, o fuera del rango
del pH fisiológico no parecen presentar un riesgo de daños en el
tejido en el sitio de administración.
La patente EP 0 661 060 describe preparaciones
de inmunoglobulina concentrada que tienen una baja osmolaridad y
una baja viscosidad.
La patente WO 97/04-801 describe
formulaciones de anticuerpos liofilizados isotónicos estables.
\newpage
Los solicitantes también han encontrado que las
soluciones proteináceas que tienen un pH bajo
(4,0-5,3) o elevado (6,5-12,0)
también fueron efectivas en la reducción de la viscosidad de las
formulaciones de proteínas de alta concentración.
La presente invención se dirige a proporcionar
una formulación de inmunoglobulina de alta concentración con una
viscosidad reducida, que es fácil de manipular y que es adecuada
para la administración subcutánea. La presente invención también se
dirige a proporcionar un procedimiento de reducción de la viscosidad
de formulaciones de inmunoglobulina concentrada.
La presente invención se refiere a un
procedimiento de disminución de la viscosidad de una composición de
inmunoglobulina concentrada mediante: aumentar la resistencia iónica
total de la formulación a través de la visión de sales o
componentes de tampón tal como se define en las reivindicaciones sin
comprometer de manera significativa la estabilidad o actividad
biológica. En consecuencia, la invención se refiere a procedimientos
y medios para reducir la viscosidad de formulaciones de
inmunoglobulina concentrada, principalmente para asegurar una fácil
manipulación antes y durante la administración a un paciente.
En un aspecto, la presente invención proporciona
una formulación estable de viscosidad reducida que comprende
inmunoglobulina en una cantidad de por lo menos aproximadamente 80
mg/ml y una sal o un tampón en una cantidad de por lo menos
aproximadamente 100 mM, y que tiene una viscosidad cinemática de
aproximadamente 50 mm^{2}/s o menos a 25ºC. Las sales y/o
tampones son farmacéuticamente aceptables y se derivan de varios
ácidos conocidos (inorgánicos y orgánicos) o base que forman metales
y aminas. Alternativamente, las sales y/o tampones se pueden
derivar de aminoácidos. En un aspecto específico, las sales eligen
entre el grupo que consiste en cloruro de sodio, clorhidrato de
arginina, tiocianato de sodio, tiocianato de amonio, sulfato de
amonio, cloruro de amonio, cloruro de calcio, cloruro de zinc y
acetato de sodio. En otro aspecto, las sales o tampones son
monovalentes. En otro aspecto, la formulación contiene los
componentes de sal o tampón en una cantidad de aproximadamente
100-200 mM, y tiene una viscosidad de
aproximadamente 2 a 30 mm^{2}/s. En una realización particular,
la inmunoglobulina en la formulación tiene un peso molecular de por
lo menos aproximadamente 15-20 kD. Otra vez en
particular, la formulación es hipertónica. En otro aspecto
particular, la formulación también puede comprender un surfactante
tal como polisorbato. La invención también contempla una
formulación reconstituida que también comprende un lioprotector tal
como el azúcar. En otro aspecto, el azúcar lioprotector puede ser,
por ejemplo, sacarosa o trehalosa, y puede estar presente en una
cantidad de aproximadamente 60-300 mM. En otro
aspecto específico, la concentración de proteínas en la formulación
reconstituida es aproximadamente 2-40 veces mayor
que la concentración de proteínas en la mezcla antes de la
liofilización.
La invención proporciona una formulación que
contiene altas concentraciones de inmunoglobulinas. Las
inmunoglobulinas pueden, por ejemplo, ser anticuerpos dirigidos
contra un antígeno predeterminado particular. En un aspecto
específico, el antígeno es IgE (por ejemplo,
rhuMAbE-25, rhuMAbE-26 y
rhuMAbE-27 descritos en la patente WO 99/01556).
Alternativamente, el antígeno puede incluir: las proteínas CD CD3,
CD4, CD8, CD19, CD20 y CD34; elementos de la familia del receptor
HER tal como receptor EGF, HER2, HER3 o HER4; moléculas de adhesión
celular tal como LFA-1, Mol, p150,95,
VLA-4, ICAM-1, VCAM e integrina
\alpha\nu/\beta3 que incluyen las subunidades \alpha- y
\beta-de las mismas (por ejemplo,
anticuerpos anti-CD11a, anti-CD18 o
anti-CD11b); factores de crecimiento tales como
VEGF; antígenos de grupo sanguíneo; receptor flk2/flt3; receptor de
obesidad (OB); y proteína C.
Las formulaciones de la presente invención
pueden ser formulaciones farmacéuticas, en particular, formulaciones
para la administración subcutánea.
En otro aspecto, la invención proporciona un
procedimiento de reducción de la viscosidad de una formulación que
contiene inmunoglobulina en una cantidad de por lo menos
aproximadamente 80 mg/ml y mediante la adición de una sal o
componente de tampón en una cantidad de por lo menos aproximadamente
100 mM, donde la viscosidad cinemática se reduce a 50 mm^{2}/s o
menos. En un aspecto específico, la viscosidad se reduce dea
aproximadamente de 2 a 30 mm^{2}/s. En otro aspecto específico,
las sales o componentes de tampón se pueden añadir en una cantidad
de por lo menos aproximadamente 100 mM, preferiblemente
aproximadamente 100-200 mM, más preferiblemente
aproximadamente 150 mM. Las sales y/o tampones son farmacéuticamente
aceptables y se derivan de varios ácidos conocidos (inorgánicos y
orgánicos) con metales o aminas de "formación de base".
Alternativamente, las sales y/o tampones se pueden derivar de
aminoácidos. En otro aspecto específico, las sales y/o tampones son
monovalentes. En otro aspecto específico, las sales se seleccionan
entre el grupo que consiste en cloruro de sodio, clorhidrato de
arginina, tiocianato de sodio, tiocianato de amonio, sulfato de
amonio, cloruro de amonio, cloruro de calcio, cloruro de zinc y
acetato de sodio. En otro aspecto, la formulación contiene sal o
componentes de tampón anteriores en una cantidad de aproximadamente
100-200 mM, y tiene una viscosidad de
aproximadamente 2 a 30 mm^{2}/s. En otro aspecto, la
inmunoglobulina en la formulación tiene un peso molecular de por lo
menos aproximadamente 15-20 kD. En otra realización
particular, la formulación puede comprender también un surfactante
tal como polisorbato. La invención también contempla una
formulación reconstituida que también comprende un lioprotector tal
como el azúcar. En un aspecto particular, el azúcar lioprotector
puede ser, por ejemplo, sacarosa o trehalosa, y puede estar
presente en una cantidad de aproximadamente 60-300
mM. En un aspecto específico, la formulación se puede reconstituir
con un diluyente que comprende el tampón o la sal. En una
realización preferida, la concentración de proteína en la
formulación reconsti-
tuida es aproximadamente 2-40 veces mayor que la concentración de proteína en la mezcla anterior a la liofilización.
tuida es aproximadamente 2-40 veces mayor que la concentración de proteína en la mezcla anterior a la liofilización.
En otro aspecto, la invención proporciona un
procedimiento para reducir la viscosidad de una formulación de
inmunoglobulina que tiene un peso molecular de por lo menos
aproximadamente 15-20 kD, incluyendo específicamente
anticuerpos que se unen específicamente a un antígeno particular.
En un aspecto específico, el procedimiento se utiliza para preparar
una formulación reconstituible, especialmente las que se concentran
en una concentración de inmunoglobulina mucho mayor (por
ejemplo, 2-40 veces) después de la etapa de
concentración (por ejemplo, liofilización) comparada con antes.
Estas formulaciones son particularmente útiles
para administración subcutánea.
También se proporciona un artículo de
fabricación que comprende un recipiente que encierra una formulación
tal como se define en las reivindicaciones.
También se describe aquí un procedimiento para
evitar la autoasociación de proteínas en formulaciones líquidas
concentradas mediante (1) añadir una sal o un componente de tampón
en una cantidad de por lo menos 50 mM aproximadamente; o (2)
alterar el pH disminuyéndolo a (\approx4,0 a \approx5,3) o
elevándolo a (\approx6,5 a \approx12,0). En un aspecto
específico, la autoasociación que debe evitarse es la inducida o
exacerbada mediante la presencia de azúcares (por ejemplo, sacarosa
o trehalosa) que se utilizan comúnmente como lioprotectores. En
consecuencia, este procedimiento es particularmente útil para evitar
la autoasociación de formulaciones liofilizadas reconstituidas.
La figura 1 muestra los efectos de la
concentración de proteínas en la viscosidad de la formulación
reconstituida que contiene el anticuerpo anti-IgE
rhuMAb E25, 16 mM histidina, 266 mM sacarosa y 0,03% Polisorbato 20
a 25ºC.
La figura 2 muestra los efectos de la
concentración de NaCl sobre la viscosidad de la formulación
reconstituida que contiene 125 mg/ml del anticuerpo IgE rhuMAb E25,
16 mM histidina, 266 mM sacarosa, 0,03% Polisorbato 20 y varias
cantidades de NaCl a 25ºC.
La figura 3 muestra los efectos de varias sales
sobre la viscosidad de la formulación reconstituida que contiene 40
mg/ml del anticuerpo anti-IgE rhuMAb E25, 10 mM
histidina, 250 mM sacarosa, 0,01% Polisorbato 20 y varias
cantidades de sales a 25ºC.
La figura 4 muestra los efectos de la
concentración del tampón sobre la viscosidad de una formulación
líquida que contiene 80 mg/ml del anticuerpo
anti-IgE rhuMAb E25, 50 mM histidina, 150 mM
trehalosa, 0,05% Polisorbato 20 y varias cantidades de componentes
de histidina, acetato, o succinato a 25ºC.
La figura 5 muestra los efectos de la
concentración de NaCl sobre la viscosidad de una formulación
reconstituida que contiene 21 mg/ml rhuMAb E26, 5 mM histidina, 275
mM sacarosa a 6ºC.
La figura 6 muestra los efectos del pH sobre la
viscosidad de las formulaciones líquidas que contienen 130 mg/ml
rhuMAb E25, 2-17,5 mM de acetato o arginina con y
sin 150 mM NaCl a 25ºC.
La figura 7 muestra los efectos del pH sobre la
viscosidad de las formulaciones liofilizadas reconstituidas que
contienen 94 mg/ml rhuMAb E25, 250 mM trehalosa, 20 mM histidina, a
25ºC.
Mediante "proteína" se indica una secuencia
de aminoácidos para la cual la longitud de la cadena es suficiente
para producir los niveles mayores de estructura terciaria y/o
cuaternaria. Así, las proteínas se distinguen de los
"péptidos" que también son moléculas basadas en aminoácidos que
no tienen esta estructura. Típicamente, una inmunoglobulina para su
uso aquí tendrá un peso molecular de por lo menos aproximadamente
15-20 kD, preferiblemente por lo menos
aproximadamente 20 kD.
Ejemplos de proteínas incluyen proteínas de
mamífero, tales como, por ejemplo, hormona del crecimiento,
incluyendo hormona del crecimiento humana y hormona del crecimiento
bovina; factor de liberación de la hormona del crecimiento; hormona
paratiroide; hormona de estimulación tiroide; lipoproteínas;
\alpha-1-antitripsina; cadena A
de insulina; cadena B de insulina; proinsulina; hormona de
estimulación de folículos; calcitonina; hormona luteinizante;
glucagón; factores de coagulación tales como factor VIIIC, factor
IX, factor de tejido, y factor von Willebrands; factores
anticoagulantes tales como Proteína C; factor natriurético atrial;
surfactante de pulmón; un activador plasminogen, tal como
uroquinasa o activador plasminogen de tipo tejido
(t-PA, por ejemplo, Activase®, TNKase®,
Retevase®); bombazina; trombina; tumor necrosis
factor-\alpha y -\beta de necrosis tumoral;
enquefalinasa; RANTES (regulada bajo la activación normalmente de
células T expresadas y secretadas); proteína inflamatoria macrófaga
inflamatoria (MIP-1-\alpha);
albúmina de suero tal como albúmina de suero humano; sustancia de
inhibición mulleriana; cadena A de relaxina; cadena B de relaxina;
prorelaxina; péptido asociado a gonadotropina de ratón; DNasa;
inhibina; activina; factor de crecimiento endotelial vascular
(VEGF); receptores para hormonas o factores de crecimiento; una
integrina; proteína A o D; factores reumatoides; un factor
neurotrófico tal como factor neurotrófico derivado óseo (BDNF),
neurotrofina-3, -4, -5, o -6 (NT-3,
NT-4, NT-5, o NT-6),
o un factor de crecimiento nervioso tal como
NGF-\beta; factor de crecimiento derivado de
plaquetas (PDGF); factor de crecimiento de fibroblastos tal como
aFGF y bFGF; factor de crecimiento epidermal (EGF); factor de
crecimiento de transformación (TGF) tal como
TGF-\alpha y TGF-\beta,
incluyendo TGF-\beta1,
TGF-\beta2, TGF-\beta3,
TGF-\beta4, o TGF-\beta5; factor
de crecimiento similar a la insulina -I y -II
(IGF-I y IGF-II);
des(1-3)-IGF-I
(cerebro IGF-I); proteína de unión de factor de
crecimiento a modo de insulina; proteínas CD tal como CD3, CD4,
CD8, CD19 y CD20; critropoietina (EPO); trombopoietina (TPO);
factores osteoinductivos; inmunotoxinas; una proteína morfogenética
ósea (BMP); un interferón tal como
interferón-\alpha, -\beta, cualquier -\gamma,
factores de estimulación de colonias (CSFs), por ejemplo,
M-CSF, GM-CSF, y
G-CSF; interleucinas (ILs), por ejemplo,
IL-1 a IL-10; dismutasa superóxido;
receptores de células T; proteínas de membrana de superficie;
factor de aceleración de descomposición (DAF); un antígeno viral tal
como, por ejemplo, una porción de la cubierta de SIDA; proteínas de
transporte; receptores de guiado; adresinas; proteínas
regulatorias; inmunoadhesinas; anticuerpos; y fragmentos
biológicamente activos o variantes de cualquiera de los
polipéptidos indicados anteriormente.
La inmunoglobulina que se formula
preferiblemente es esencialmente pura y es deseable que sea
esencialmente homogénea (es decir, libre de proteínas
contaminantes). Proteína "esencialmente pura" significa una
composición que comprende por lo menos aproximadamente un 90% en
peso de la proteína, basado en el peso total de la composición,
preferiblemente por lo menos aproximadamente un 95% en peso.
Proteína "esencialmente homogénea" significa una composición
que comprende por lo menos un 99% en peso aproximadamente de
proteína, basado en el peso total de la composición.
En ciertas realizaciones, la inmunoglobulina es
un anticuerpo. El anticuerpo se puede unir a cualquiera de las
moléculas mencionadas anteriormente, por ejemplo. Las dianas
moleculares de ejemplo para los anticuerpos cubiertos por la
presente invención incluyen proteínas CD tales como CD3, CD4, CD8,
CD19, CD20 y CD34; elementos de la familia del receptor HER tales
como el receptor EGF, HER2, HER3 o HER4; moléculas de adhesión
celular tales como LFA-1, Mol, p150,95,
VLA-4, ICAM-1, VCAM e integrina
\alpha\nu/\beta3 que incluyen subunidades \alpha o \beta
de las mismas (por ejemplo anticuerpos
anti-CD11a, anti-CD18 o
anti-CD11b); factores de crecimiento tales como
VEGF; IgE; antígenos de grupo sanguíneo; receptor flk2/flt3;
receptor de obesidad (OB); proteína C, etc.
El término "anticuerpo" se utiliza en el
sentido más amplio y cubre específicamente anticuerpos monoclonales
(incluyendo anticuerpos de longitud completa que tienen una región
Fc de inmunoglobulina), composiciones de anticuerpo con
especificidad poliepitópica, anticuerpos biespecíficos, diacuerpos,
y moléculas de cadena simple, así como fragmentos de anticuerpos
(por ejemplo, Fab, F(ab')_{2}, y Fv).
La unidad de anticuerpo de 4 cadenas básica es
una glicoproteína heterotetramérica compuesta de dos cadenas
ligeras (L) idénticas y dos cadenas pesadas (H) idénticas. Un
anticuerpo IgM consiste en 5 de las unidades heterotetrámeras junto
con un polipéptido adicional llamado una cadena J, y contiene 10
sitios de unión del antígeno, mientras que los anticuerpos IgA
comprenden entre 2 y 5 de las unidades básicas de 4 cadenas que
pueden polimerizarse para formar conjuntos polivalentes en
combinación con la cadena J. En el caso de IgGs, la unidad de 4
cadenas es generalmente de aproximadamente 150.000 daltons. Cada
cadena L está enlazada con una cadena H mediante una unión de
disulfuro covalente, mientras que las dos cadenas H están enlazadas
entre sí mediante una o más uniones de disulfuro dependiendo del
isotipo de la cadena H. Cada cadena H y L tiene también puentes de
disulfuro entrecadenas separadas regularmente. Cada cadena H tiene
en el terminal N un dominio variable (V_{H}) seguido por tres
dominios constantes (C_{H}) para cada una de las cadenas \alpha
y \gamma y cuatro dominios C_{H} para los isotipos \mu y
\varepsilon. Cada cadena L tiene en el terminal N un dominio
variable (V_{L}) seguido por un dominio constante en su otro
extremo. El V_{L} está alineado con el V_{H} y el C_{L} está
alineado con el primer dominio constante de la cadena pesada
(C_{H}1). Se cree que los residuos de aminoácidos particulares
forman una interfaz entre los dominios variables de cadena ligera y
cadena pesada. El emparejado de un V_{H} y V_{L} juntos forman
un único sitio de unión del antígeno. Para la estructura y
propiedades de las diferentes clases de anticuerpos, ver por
ejemplo, Basic and Clinical Immunology, 8a Edición, Daniel P.
Sties, Abba I. Terr and Tristram G. Parsolw (eds), Appleton &
Lange, Norwalk, CT, 1994, página 71 y Capítulo 6.
La cadena L de cualquier especie vertebrada se
puede asignar a uno de dos tipos claramente distintos, llamados
kappa y lambda, basados en secuencias de aminoácidos de sus dominios
constantes. Dependiendo de la secuencia de aminoácidos del dominio
constante de sus cadenas pesadas (CH), se pueden asignar
inmunoglobulinas a diferentes clases o isotipos. Hay cinco clases
de inmunoglobulinas: IgA, IgD, IgE, IgG y IgM, que tienen cadenas
pesadas designadas \alpha, \delta, \varepsilon, \gamma y
\mu, respectivamente. Las clases \gamma y \mu también se
dividen en subclases sobre la base de diferencias relativamente
menores en la secuencia y función CH, por ejemplo, los humanos
expresan las siguientes subclases: IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 y
IgA2.
El término "variable" se refiere al hecho
de que ciertos segmentos de los dominios variables difieren de
manera extensiva en secuencia entre anticuerpos. El dominio V MEDIA
en la unión del antígeno y define la especificidad de un anticuerpo
particular para su antígeno particular. Sin embargo, la variabilidad
no está distribuida de manera uniforme a través de toda la
separación de los dominios variables. Por el contrario, las
regiones V consisten en tramos relativamente invariantes llamados
regiones de marco (FRs) de aproximadamente 15-30
residuos de aminoácidos separados mediantes regiones más cortas de
variabilidad extrema llamadas "regiones hipervariables" o a
veces "regiones de determinación de complementariedad" (CDRs)
que tienen cada una aproximadamente 9-12 residuos
de aminoácidos de longitud. Los dominios variables que las cadenas
pesadas y ligeras nativas comprenden cada uno cuatro FRs, adoptando
en gran medida una configuración de lámina \beta, conectada
mediante tres regiones hipervariables, que forman bucles que
conectan, en algunos casos forman parte de, la estructura de la
lámina \beta. Las regiones hipervariables en cada cadena se
mantienen juntas en proximidad cercana mediante las FRs y, con las
regiones hipervariables de la otra cadena, contribuyen a la
formación del sitio de unión del antígeno de los anticuerpos (ver
Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological
Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of
Health, Bethesda, MD (1991). Los dominios constantes no están
implicados directamente en la unión del anticuerpo a un antígeno,
pero presentan varias funciones efectoras, tal como la
participación de la citotoxicidad celular dependiente del anticuerpo
(ADCC).
El término "región hipervariable" (también
conocido como "regiones de determinación de la
complementariedad" o CDRs) cuando se utiliza aquí se refiere a
los residuos de aminoácidos de un anticuerpo que están (normalmente
tres o cuatro regiones cortas de variabilidad de secuencia extrema)
en el dominio de la región V de una inmunoglobulina que forman
sitios de unión del antígeno y son los principales determinantes de
la especificidad del antígeno. Hay por lo menos dos procedimientos
para identificar los residuos CDR: (1) una aproximación basada en la
variabilidad de secuencia de especies cruzadas (es decir, Kabat
et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest
(National Institute of Health, Bethesda, MS 1991); y (2) una
aproximación basada en estudios cristalográficos de complejos
antígeno-anticuerpo (Chothia, C. et al., J.
Mol. Biol. 196: 901-917 (1987)). Sin embargo, en la
extensión que dos técnicas de identificación de residuos definen
regiones de solapado, pero no regiones idénticas, se pueden
combinar para definir una CDR híbrida.
El término "anticuerpo monoclonal" tal como
se usa aquí se refiere un anticuerpo obtenido a partir de una
población de anticuerpos sustancialmente homogéneos, es decir, los
anticuerpos individuales que comprenden la población son idénticos
excepto por posibles mutaciones que se produce naturalmente que
pueden estar presentes en cantidades menores. Los anticuerpos
monoclonales son muy específicos, estando dirigidos contra un único
sitio antigénico. Además, en contraste con las preparaciones de
anticuerpos convencionales (policlonales) y típicamente incluyen
diferentes anticuerpos dirigidos contra diferentes determinantes
(epítopes), cada anticuerpo monoclonal está dirigido contra un
único determinante en el antígeno. Además de su especificidad, los
anticuerpos monoclonales son ventajosos en que se sintetizan
mediante cultivos de hibridoma, sin contaminar por parte de otras
inmunoglobulinas. El modificador "monoclonal" indica el
carácter del anticuerpo que se obtiene a partir de una población de
anticuerpos socialmente homogénea, y no se construye para que
requiera una producción del anticuerpo mediante cualquier
procedimiento particular. Por ejemplo, los anticuerpos monoclonales
que se pueden utilizar según la presente invención se pueden hacer
mediante el procedimiento de hibridoma descrito primero por parte
de by Kohler et al., Nature, 256: 495 (1975), pueden hacer
mediante procedimientos de ADN recombinante (ver, por ejemplo, la
patente US 4.816.567). Los "anticuerpos monoclonales" también
se pueden aislar de las librerías de anticuerpos de fagos
utilizando las técnicas descritas en Clackson et al., Nature,
352:624-628 (1991) y Marks et al., J. Mol.
Biol., 222:581-597 (1991), por ejemplo.
Los anticuerpos monoclonales incluyen aquí
específicamente anticuerpos "quiméricos" (inmunoglobulinas) en
los cuales una porción de la cadena pesada y/o ligera es idéntica u
homóloga a las secuencias correspondientes en anticuerpos derivados
de una especie particular pertenecen a una clase o subclase de
anticuerpo particular, mientras que el resto de las cadenas son
idénticas u homólogas con las secuencias correspondientes en los
anticuerpos derivados de otras especies o que pertenecen a otra
clase o subclase de anticuerpos, así como fragmentos de estos
anticuerpos, mientras presenten la actividad biológica deseada
(patente US 4.816.567; Morrison et al., Proc. Natl. Acad.
Sci. USA, 81:6851-6855 (1984)).
Un anticuerpo "intacto" es uno que
comprende un sitio de unión y antígeno, así como un CL Y por lo
menos los dominios de cadena pesada, C_{H}1, C_{H}2 y
C_{H}3.
Un "fragmento de anticuerpo" comprende una
porción de un anticuerpo intacto, preferiblemente la región de
unión del antígeno y/o la región variable del anticuerpo intacto.
Ejemplos de fragmentos anticuerpos incluyen fragmentos Fab, Fab',
F(ab')_{2} y Fv; diacuerpos; anticuerpos lineales (ver la
patente US 5.641.870, ejemplo 2; Zapata et al., Protein Eng.
8(10): 1057-1062 [1995]); moléculas de
anticuerpos de cadena simple y anticuerpos multiespecíficos
formados a partir de fragmentos de anticuerpos.
La digestión Papain de los anticuerpos produjo
dos fragmentos de unión de antígeno idénticos, llamados fragmentos
"Fab", y un fragmento residual "Fc", una designación que
refleja la capacidad de cristalizarse fácilmente. El fragmento Fab
consiste en una cadena L entera a lo largo del dominio de región
variable de la cadena H (V_{H}), y el primer dominio constante de
una cadena pesada (C_{H}1). Cada fragmento Fab es monovalente
respecto a la unión del antígeno, es decir, tiene un único sitio de
unión con el antígeno. El tratamiento con pepsina de un anticuerpo
produce un único fragmento grande F(ab')_{2} que
corresponde aproximadamente a dos fragmentos Fab enlazados con
disulfuro que tienen una actividad de unión de antígeno diferente y
que es todavía capaz de articular el antígeno. Los fragmentos Fab'
difieren de los fragmentos Fab porque tienen unos pocos residuos
adicionales en el terminal carboxi del dominio C_{H}1, incluyendo
una o más cisteínas de la región de articulación del anticuerpo.
Fab'-SH es la designación aquí para Fab', del cual
los residuos de cisteína de los dominios constantes soportan un
grupo tiol libre. Los fragmentos anticuerpo F(ab')_{2} se
produjeron originalmente como pares de fragmentos Fab' que tienen
cisteínas de articulación entre los mismos. Otros acoplamientos
químicos de fragmentos anticuerpo también son conocidos.
El fragmento Fc comprende las porciones de
terminal carboxi de las dos cadenas H mantenidas juntas mediante
disulfuros. Las funciones efectoras de los anticuerpos se determinan
mediante secuencias en la región Fc, la región que también se
reconoce mediante los receptores Fc (FcR) encontrados en ciertos
tipos de células.
"Fv" es el fragmento de anticuerpo mínimo
que contiene un sitio de reconocimiento de antígeno completo y de
unión. Este fragmento consiste en un dímero de un dominio de región
variable de una cadena pesada y una cadena ligera en asociación
tensa no covalente. A partir del plegado de estos dos dominios se
emanan seis bucles hipervariables (3 bucles cada uno a partir de la
cadena H y L) que contribuyen a los residuos de aminoácidos para la
unión del antígeno y confieren especificidad de unión al antígeno
con el anticuerpo. Sin embargo, incluso un único dominio variable
(o la mitad de un Fv que comprende solamente tres CDRs específicas
para un antígeno) tienen la capacidad de reconocer y unirse al
antígeno, aunque con una afinidad menor que el sitio de unión
completo.
"Fv de cadena simple", también abreviado
como "sFv" o "scFv" son fragmentos anticuerpo que
comprenden los dominios de anticuerpo VH y VL, conectados en una
única cadena de polipéptido. Preferiblemente, el polipéptido sFv
también comprende un enlace de polipéptido entre los dominios
V_{H} y V_{L}, que permite que el sFv forme la estructura
deseada por la unión del antígeno. Para una revisión del sFv, ver
Pluckthun en The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113,
Rosenburg and Moore eds., Springer-Verlag, Nueva
York, pp. 269-315 (1994).
El término "diacuerpos" se refiere a
pequeños fragmentos anticuerpos preparados mediante la construcción
de fragmentos sFv (ver párrafo anterior) mediante enlaces cortos
(aproximadamente 5- 10 residuos) entre los dominios V_{H} y
V_{L}, de manera que se consigue la cadena intermedia pero no la
cadena intermedia que perjudica los dominios V, resultando así en
un fragmento bivalente, es decir, un fragmento que tiene dos sitios
de unión del antígeno. Los diacuerpos biespecíficos son
heterodímeros de los fragmentos sFv "cruzados" en los cuales
los dominios V_{H} y V_{L} de los dos anticuerpos están
presentes en diferentes cadenas de polipéptidos. Los diacuerpos se
describen en mayor detalle en, por ejemplo, los documentos EP
404,097; WO 93/11161; Hollinger et al., Proc. Natl. Acad.
Sci. USA 90: 6444-6448 (1993).
Un anticuerpo que "se une específicamente
a" o es "específico para" un polipéptido particular o un
epítope sobre un polipéptido particular es aquel que se une a ese
polipéptido o epítope particular sobre un polipéptido particular
sin unirse sustancialmente a ningún otro polipéptido o epítope de
polipéptido.
Las formas "humanizadas" de anticuerpos no
humanos (por ejemplo, murina) son inmunoglobulinas quiméricas,
cadenas de inmunoglobulina o fragmentos de las mismas (tales como
Fv, Fab, Fab', F(ab')_{2} u otras subsecuencias de
anticuerpos de unión del antígeno) de secuencias casi humanas, que
contienen una secuencia mínima derivada de inmunoglobulina no
humana. Para la mayor parte, los anticuerpos humanizados son
inmunoglobulinas humanas (anticuerpo recipiente) en las cuales los
residuos de una región hipervariable (también CDR) recipiente se
reemplazan mediante residuos de una región hipervariable de una
especie no humana (anticuerpo donador) tal como ratón, rata o
conejo que tiene la especificidad, afinidad y capacidad deseadas. En
algunos casos, los residuos de la región del marco (FR) Fv de la
inmunoglobulina humana se reemplazan mediante correspondientes
residuos humanos. Además, "anticuerpos humanizados" tal como se
usa aquí pueden también comprender residuos que no se encuentran ni
en el anticuerpo recipiente ni en el anticuerpo donador. Estas
modificaciones se hacen para refinar y utilizar más el rendimiento
del anticuerpo. El anticuerpo humanizado comprenderá también de
manera óptima por lo menos una porción de una región constante de
inmunoglobulina (Fc), típicamente la de una inmunoglobulina humana.
Para detalles adicionales, ver Jones et al., Nature,
321:522-525 (1986); Reichmann et al.,
Nature, 332:323-329 (1988); and Presta, Curr. Op.
Struct. Biol., 2:593-596 (1992).
Las "funciones efectoras" del anticuerpo se
refieren a aquellas actividades biológicas atribuibles a la región
Fc (una región Fc de secuencia nativa o región Fc variante de
secuencia de aminoácidos) de un anticuerpo, y varía con el isotipo
del anticuerpo. Ejemplos de las funciones efectoras del anticuerpo
incluyen: unión C1q y citotoxicidad dependiente del complemento;
unión de receptor Fc; citotoxicidad mediada por células
dependientes del anticuerpo (ADCC); fagocitosis; regulación
descendente de receptores de la superficie celular (por ejemplo,
receptores de células B); y activación de células B.
"Citotoxicidad mediada por células
dependientes de anticuerpos" o ADCC se refiere a una forma de
citotoxicidad en la cual Ig secretado se une sobre receptores Fc
(FcRs) presentes en ciertas células citotóxicas (por
ejemplo, las células resinas naturales (NK), neutrófilos y
macrófagos) que permite que estas células efectoras citotóxicas se
unan específicamente a una célula objetivo que soporta el antígeno y
subsiguientemente mate la célula objetivo con citotoxinas. Los
anticuerpos "arman" las células citotóxicas y son requeridas
para matar la célula objetivo mediante este mecanismo. Las células
primarias para mediar ADCC, células NK, expresan sólo
Fc\gammaRIII, mientras que en los monocitos expresan Fc\gammaRI,
Fc\gammaRII y Fc\gammaRIII. La expresión Fc sobre células
hematopoyéticas se resume en la Tabla 3 en la página en 464 de
Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:
457-92 (1991). Para determinar la actividad ADCC de
una molécula de interés, puede realizarse un ensayo ACDD in
vitro, tal como se describe en Patente U.S. No. 5.500.362 o
5.821.337. Las células efectoras útiles para dichos ensayos
incluyen células mononucleares sanguíneas periféricas (PBMC) y
células asesinas naturales (NK). Alternativamente, o adicionalmente,
la actividad ADCC de la molécula de interés puede ser determinada
in vivo, por ejemplo, en un modelo animal tal como el
descrito en Clynes et al., PNAS USA
95:652-656 (1998).
"Receptor Fc" o "FcR" describe un
receptor que se une a la región Fc de un anticuerpo. El FcR
preferido es un FcR humano de secuencia nativa. Además, un FcR
preferido es el que se une a un anticuerpo IgG (un receptor gamma)
e incluye receptores de las subclases Fcc\gammaI, Fc\gammaRII, y
Fc\gammaRIII, incluyendo variantes alélicas y alternativamente
formas empalmadas de estos receptores, los receptores Fc\gammaRII
incluyen Fc\gammaRIIA (un "receptor activador") y
Fc\gammaRIIB (un "receptor inhibidor"), que tienen secuencias
de aminoácidos similares que difieren primariamente en los dominios
citoplásmicos del mismo. El receptor activador Fc\gammaRIIA
contiene un motivo de activación basado en tiroxina inmunoreceptor
(ITAM) en su dominio citoplásmico. El receptor inhibidor
Fc\gammaRIIB contiene un motivo inhibidor basado en tiroxina
inmunoreceptor (ITIM) en su dominio citoplásmico. (Ver M. Daëron,
Annu. Rev. Immunol. 15:203-234 (1997). Los FcRs son
revisados en Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:
457-92 (1991); Capel et al., Immunomethods 4:
25-34 (1994); y de Haas et al., J. Lab.
Clin. Med. 126: 330-41 (1995). Otros FcRs,
incluyendo aquellos a ser identificados en el futuro, son abarcados
aquí mediante el término "FcR". El término también incluye el
receptor neonatal, FcRn, que es responsable para la transferencia
de IgGs maternos al feto. Guyer et al., J. Immunol. 117: 587
(1976) and Kim et al., J. Immunol. 24: 249 (1994).
"Células efectoras humanas" son leucocitos
que expresan uno o más FcRs y realizan funciones efectoras.
Preferentemente, las células expresan al menos Fc\gammaRIII y
realizan funciones de efector ADCC. Ejemplos de leucocitos humanos
que median ADCC incluyen células mononucleares sanguíneas
periféricas (PBMC), células asesinas naturales (NK), monocitos,
células T citotóxicas y neutrófilos, con células PBMCs y MNK siendo
preferidas. Las células efectoras pueden ser aisladas a partir de
una fuente nativa, por ejemplo, sangre.
"Citotoxicidad dependiente del complemento"
o "CDC" se refiere a la lisis de una célula objetivo en
presencia del complemento. La activación de la trayectoria se inicia
mediante la unión del primer componente del sistema de complemento
(C1q) a los anticuerpos (de la subclase apropiada) que están unidos
a su antígeno cognado. Para determinar la activación del
complemento, puede realizarse un ensayo CDC, por ejemplo, como se
describió en Gazzano-Santoro et al., J.
Immunol. Methods 202: 163 (1996).
Una formulación "estable" es una en la cual
la proteína esencialmente retiene su estabilidad física y química e
integridad durante almacenamiento. Distintas técnicas analíticas
para medir la estabilidad de la proteína están disponibles en la
técnica y son revisadas en Peptide and Protein Drug Delivery,
247-301, Vincent Lee Ed., Marcel Dekker, Inc., New
York, New York, Pubs. (1991) y Jones, A. Adv. Drug Delivery Rev.
10: 29-90 (1993). La estabilidad puede medirse a una
temperatura seleccionada durante un período de tiempo seleccionado.
Para una investigación rápida, la formulación puede mantenerse a
40ºC durante de 2 semanas a 1 mes, en cuyo momento se mide la
estabilidad. Si la formulación debe almacenarse a
2-8ºC, generalmente la formulación debe ser estable
a 30ºC o 40ºC durante al menos 1 mes y/o estable a
2-8ºC durante al menos 2 años. Si la formulación
debe almacenarse a 30ºC, generalmente la formulación debe ser
estable durante al menos 2 años a 30ºC y/o estable a 40ºC durante
al menos 6 meses. Por ejemplo, la extensión de la agregación a
continuación de la liofilización y almacenamiento puede utilizarse
como un indicador de estabilidad de proteína. Por lo tanto, una
formulación "estable" puede ser una donde menos de
aproximadamente el 10% y preferentemente menos de aproximadamente
el 5% de la proteína están presentes como un agregado en la
formulación. En otras realizaciones, se puede determinar cualquier
incremento en la formación de agregados a continuación de la
liofilización y almacenamiento de la formulación liofilizada. Por
ejemplo, una formulación liofilizada "estable" puede ser una
donde el incremento en el agregado en la formulación liofilizada es
menos de aproximadamente 5% y preferentemente menos de
aproximadamente 3%, cuando la formulación liofilizada es almacenada
a 2-8ºC durante al menos un año. En otras
realizaciones, la estabilidad de la formulación de proteína puede
medirse utilizando un ensayo de actividad biológica.
Una formulación "reconstituida" es una que
se ha preparado disolviendo formulaciones de proteína liofilizada
en un diluyente de tal forma que la proteína se dispersa en la
formulación reconstituida. La formulación reconstituida es adecuada
para la administración (por ejemplo administración
parenteral) a un paciente a ser tratado con la inmunoglobulina de
interés y, en ciertas realizaciones de la invención, puede ser una
que es adecuada para la administración subcutánea.
Una formulación "isotónica" es una que
esencialmente posee la misma presión osmótica que la sangre humana.
Las formulaciones isotónicas generalmente tienen una presión
osmótica de aproximadamente 250 a 350 mOsm. El término
"hipotónica" describe una formulación con una presión osmótica
inferior a la de la sangre humana. De forma correspondiente, el
término "hipertónica" se utiliza para describir una
formulación con una presión osmótica por encima de la sangre humana.
La isotonicidad puede utilizarse usando un osmómetro de presión de
vapor o de tipo de congelación por hielo, por ejemplo. Las
formulaciones de la presente invención son hipertónicas con un
resultado de la adición de sal y/o tampón.
Un "ácido farmacéuticamente aceptable"
incluye ácidos inorgánicos y orgánicos que son no tóxicos en la
concentración y forma en la cual son formulados. Por ejemplo, ácidos
inorgánicos adecuados incluyen hidroclórico, perclórico,
hidrobrómico, hidroyódico, nítrico, sulfúrico, sulfónico, sulfínico,
sulfanilico, fosfórico, carbónico, etc. Ácidos orgánicos
adecuados incluyen alquil recto y de cadena ramificada, aromático,
cíclico, cicloalifático, arilalifático, heterocíclico, saturado,
insaturado, mono, di- y tri-carboxílico, incluyendo
por ejemplo, fórmico, acético, 2-hidroxiacético,
trifluoroacético, fenilacético, trimetilacético,
t-butil acético, antranilico, propanoico,
2-hidroxipropanoico,
2-oxopropanoico, propandioico,
ciclopentanepropiónico, ciclopentano propiónico,
3-fenilpropiónico, butanoico, butandioico, benzoico,
3-(4-hidroxibenzoil)benzoico,
2-acetoxi-benzoico, ascórbico,
cinámico, lauril sulfúrico, esteárico, muconico, mandelico,
succínico, embonico, fumarico, málico, maleico, hidroximaleico,
malonico, láctico, cítrico, tartárico, glicólico, gliconico;
gluconico, piruvico, glioxalico, oxálico, mesílico, succínico,
salicílico, ftálico, palmoico, palmeico, tiocianico,
metanesulfónico, etanesulfónico,
1,2-etanedisulfónico,
2-hidroxietanesulfónico, benzenesulfónico,
4-clorobenzenesulfónico,
naptaleno-2-sulfónico,
p-toluenesulfónico, camforsulfónico,
4-metilbiciclo[2.2.2]-oct-2-ene-1-carboxílico,
glucoheptonico,
4,4'-metilenebis-3-(hidroxi-2-ene-1-ácido
carboxílico), hidroxinaptoico.
"Bases farmacéuticamente aceptables"
incluyen en bases inorgánicas y orgánicas que son no tóxicas en la
concentración y forma en la cual son formuladas. Por ejemplo, bases
adecuadas incluyen aquellas formadas a partir de base inorgánica
que forma metales tales como el litio, sodio, potasio, magnesio,
calcio, amonio, hierro, zinc, cobre, manganeso, aluminio,
N-metilglucamina, morfolina, piperidina y bases
orgánicas no tóxicas incluyendo, amina primaria, secundaria y
terciaria, a minas sustituidas, a minas cíclicas y resinas básicas
de intercambio de iones, [por ejemplo,
N(R')_{4}^{+} (donde R' es independientemente H o
C_{1-4} alquil, por ejemplo, amonio,
Tris)], por ejemplo, isopropilamina, trimetilamina, dietilamina,
trietilamina, tripropilamina, etanolamina,
2-dietilaminoetanol, trimetamina, diciclohexilamina,
lisina, arginina, histidina, cafeína, procaina, hidrabamina,
colina, betaina, etilenediamina, glucosamina, metilglucamina,
theobromina, purinas, piperazina, piperidina,
N-etilpiperidina, poliamina resinas y similares.
Particularmente las bases orgánicas no tóxicas preferidas son
isopropilamina, dietilamina, etanolamina, trimetamina,
diciclohexilamina, colina, y cafeína.
Ácidos y bases adicionales farmacéuticamente
aceptables utilizables con la presente invención incluyen aquellos
que son derivados a partir de aminoácidos, por ejemplo, histidina,
glicina, fenilalanina, ácido aspártico, ácido glutámico, lisina y
asparagina.
Tampones y sales "farmacéuticamente
aceptables" incluyen aquellos derivados de ambas sales de
adición ácidas y básicas de los ácidos y bases anteriormente
indicados. Tampones y/o sales específicas incluyen histidina,
succinato y acetato.
Un "lioprotector" es una molécula que,
combinada con una proteína de interés, evita o reduce
significativamente la inestabilidad química y/o física de la
proteína durante la liofilización y almacenaje posterior.
Lioprotectores ejemplares incluyen azúcares y sus correspondientes
alcoholes de azúcar; un aminoácido tal como glutamato monosódico o
histidina; una metilamina tal como un betaina; una sal liotrópica
tal como sulfato de magnesio; un poliol tal como alcoholes de
azúcar trihídrico o de mayor peso molecular, por ejemplo
glicerina, dextrano, eritritol, glicerol, arabitol, xilitol,
sorbitol, y manitol; propileno glicol; polietileno glicol;
Pluronics®; y combinaciones de los mismos. Lioprotectores
ejemplares adicionales incluyen glicerina y gelatina, y los azúcares
mellibiosa, melezitosa, rafinosa, mannotriosa y estaquiosa.
Ejemplos de azúcares reductores incluyen glucosa, maltosa, lactosa,
maltulosa, iso-maltulosa y lactulosa. Ejemplos de
azúcares reductores incluyen glucósidos no reductores de compuestos
polihidroxi seleccionados a partir de alcoholes de azúcar y otros
polialcoholes de cadena recta. Los alcoholes de azúcares preferidos
son monoglicosidos, especialmente aquellos compuestos obtenidos
mediante reducción de disacáridos tales como lactosa, maltosa,
lactulosa y maltulosa. El grupo lateral glicosídico puede ser tanto
glucosídico o galactosidico. Ejemplos adicionales de alcoholes de
azúcar son glucitol, maltitol, lactitol e
iso-maltulosa. Los lioprotectores preferidos son los
azúcares no reductores trehalosa o sacarosa.
Al preparar las formulaciones de viscosidad
reducida de la invención, debe tenerse cuidado utilizando los
excipientes enumerados anteriormente así como otros aditivos,
especialmente cuando se añaden en alta concentración, para no
incrementar la viscosidad de la formulación.
El lioprotector se añade a la formulación
pre-liofilizada en una "cantidad lioprotectora"
que significa que, a continuación de la liofilización de la
proteína en presencia de la cantidad lioprotectora del lioprotector,
la proteína esencialmente retiene estabilidad física y química e
integridad ante la liofilización y el almacenamiento.
El "diluyente" de interés aquí es uno que
es farmacéuticamente aceptable (seguro y no tóxico para la
administración a un humano) y es útil para la preparación de una
formulación líquida, tal como una formulación reconstituida después
de la liofilización. Los dirigentes ejemplares incluyen agua
estéril, agua bacteriostática para inyección (BWFI), una solución
de pH tamponado (por ejemplo salino tamponado con fosfato),
solución salina estéril, solución de Ringer o fusión de dextrosa.
En una realización alternativa, los diluyentes pueden incluir
soluciones acuosas de sales y/o tampones.
Un "preservativo" es un compuesto que puede
ser aquí añadido a las formulaciones para reducir la acción
bacteriana. La adición de un preservativo puede, por ejemplo,
facilitar la producción de una formulación multi-uso
(dosis múltiples). Ejemplos de preservativos potenciales incluyen
octadecildimetilbenzil amonio cloruro, hexametonio cloruro,
benzalkonio cloruro (una mezcla de cloruro alquilbenzildimetilamonio
en los cuales los grupos alquil son compuestos de cadena larga), y
benzetonio cloruro. Otros tipos de preservativos incluyen alcoholes
aromáticos tales como fenol, butil y benzil alcohol, alquil
parabenos tales como metil o propil parabeno, catecol, resorcinol,
ciclohexanol, 3-pentanol, y m-cresol. El
preservativo más preferido aquí es benzil alcohol.
Un "agente de carga" es un compuesto que
añade masa a una mezcla liofilizada y contribuye a la estructura
física de la masa liofilizada (por ejemplo facilita la
producción de una torta liofilizada esencialmente uniforme que
mantienen una estructura de puro abierto). Agentes de carga
ejemplares incluyen manitol, glicina, polietileno glicol y
sorbitol. Las formulaciones líquidas de la presente invención
obtenidas mediante reconstitución de una formulación liofilizada
pueden contener dichos agentes de carga.
"Tratamiento" se refiere tanto al
tratamiento terapéutico y profiláctico o a medidas preventivas.
Aquellos en necesidad de tratamiento incluyen aquellos que ya tienen
el trastorno así como aquellos en los cuales el trastorno debe
prevenirse.
"Mamífero" para los propósitos de
tratamiento se refiere a cualquier animal clasificado como un
mamífero, incluyendo humanos, animales domésticos y de granja, y
animales del zoológico, deportes, o mascotas, tales como perros,
caballos, conejos, ganando, cerdos, hámsteres, ratones, gatos,
etc. preferentemente, el mamífero es humano.
Un "trastorno" es cualquier condición que
se beneficiará del tratamiento con la proteína. Este incluye
trastornos crónicos y agudos o enfermedades incluyendo aquellas
condiciones patológicas que predisponen al mamífero al trastorno en
cuestión. Ejemplos no limitantes de trastornos a tratar aquí
incluyen carcinomas y alergias.
Una "cantidad terapéuticamente efectiva" es
al menos la concentración mínima requerida para efectuar una mejora
medible o prevención de un trastorno particular. Cantidades
terapéuticamente efectivas de proteínas conocidas son bien
conocidas en la técnica, mientras que cantidades efectivas de
proteínas descubiertas más adelante pueden ser determinadas
mediante técnicas estándar están correctamente dentro de las
habilidades de un operario entendido, tal como un médico
ordinario.
"Viscosidad" como se utiliza aquí puede ser
"viscosidad cinemática" o "viscosidad absoluta."
"Viscosidad cinemática" es una medida del flujo resistente de
un fluido bajo la influencia de la gravedad. Cuando dos fluidos de
igual volumen se colocan en viscosímetros de capilaridad idéntica y
se permiten fluir por gravedad, un fluido viscoso demora más que un
fluido menos viscoso para fluir a través del capilar. Si un fluido
tarda 200 segundos en completar su flujo y otro fluido tarda 400
segundos, el segundo fluido es dos veces más viscoso que el primero
en una escala de viscosidad cinemática. "Viscosidad absoluta",
algunas veces llamada viscosidad dinámica o simple, es el producto
de la viscosidad cinemática y la densidad del fluido:
Viscosidad
Absoluta = Viscosidad Cinemática x
Densidad
La dimensión de la viscosidad cinemática es
L^{2}/T donde L es una longitud y T es un tiempo. Comúnmente, la
viscosidad cinemática expresa en centistokes (cSt). La unidad SI de
viscosidad cinemática es mm^{2}/s, que es 1 cSt. La viscosidad
absoluta se expresa en unidades de centipoise (cP). La unidad SI de
viscosidad absoluta es el milliPascal-segundo
(mPa-s), donde 1 cP = I mPa-s.
La proteína inmunoglobulina a formular puede ser
producida mediante cualquier técnica conocida, como cultivando
células transformadas o transfectadas con un vector que contiene
ácido nucléico que codifica la proteína, como es bien conocido en
la técnica, o a través de técnicas sintéticas (tales como técnicas
recombinantes y síntesis de péptidos o una combinación de estas
técnicas) o puede ser aislado a partir de una fuente endógena de la
proteína.
La preparación de la proteína inmunoglobulina a
formular mediante el procedimiento de la invención a través de
medios recombinantes puede lograrse mediante la transfección o
transformación de células huésped adecuadas con vectores de
expresión o clonados y cultivadas en un medio nutriente convencional
modificado según sea apropiado para inducir promotores, seleccionar
transformantes, o amplificar los genes que codifican las secuencias
deseadas. Las condiciones de cultivo, tales como medio, temperatura,
pH y similares, pueden seleccionarse por parte del operario
entendido sin experimentación desproporcionada. En general,
principios, protocolos, y técnicas prácticas para maximizar la
productividad de cultivos celulares puede encontrarse en en
Mammalian Cell Biotechnology: A Practical Approach, M. Butter, Ed.
(IRL Press, 1991) y Sambrook et al., Molecular Cloning: A
Laboratory Manual, New York: Cold Spring Harbor Press.
Procedimientos de transfección son conocidos para él operario
ordinariamente hábil, e incluyen por ejemplo, transfección
CaPO_{4} y CaCl_{2}, electroporación, micro inyección,
etc. técnicas adecuadas también son descritas en Sambrook
et al., supra. Técnicas adicionales de transfección son
descritas en Shaw et al., Gene 23: 315 (1983); WO 89/05859;
Graham et al., Virology 52: 456-457 (1978) y
la patente US 4.399.216.
El ácido nucléico que codifica la proteína
inmunoglobulina deseada para la formulación según el presente
procedimiento puede ser insertado en un vector replicable para el
clonado por la expresión. Vectores adecuados están públicamente
disponibles y pueden tomar la forma de un plásmido, cósmido,
partícula viral o fago. La secuencia de ácido nucléico apropiada
puede ser insertada dentro del vector a través de una variedad de
procedimientos. En general, DNA se inserta en un sitio(s) de
restricción de endonucleasa apropiado utilizando técnicas conocidas
en la técnica. Los componentes vector generalmente incluyen, pero no
están limitados a, uno o más de una ser social de señal, un origen
de replicación, uno o más genes marcadores, y un elemento mejorador,
un promotor, y una secuencia de terminación de la transcripción. La
construcción de vectores adecuados que contienen uno o más de estos
componentes emplea técnicas de ligado estándar que son conocidas
para el operario entendido.
Formas de inmunoglobulina de la proteína a ser
formulada pueden ser recuperadas del medio de cultivo o a partir de
lisados de células huéspedes. Si está unido a la membrana, puede
liberarse de la membrana utilizando un detergente adecuado o a
través de división enzimática. Las células empleadas para la
expresión también pueden ser rotas a través de varios medios
físicos o químicos, tales como ciclo de
congelación-descongelación, sonicación, rotura
mecánica o agentes de lisado de células.
La purificación de la proteína inmunoglobulina a
formular puede realizarse mediante cualquier técnica adecuada
conocida en la técnica, tal como por ejemplo, fraccionado sobre una
columna de intercambio de iones, precipitación con etanol, HPLC de
fase reversa, cromatografía sobre sílice o resinas de intercambio de
cationes (por ejemplo, DEAE), cromatofocalización,
SDS-PAGE, precipitación con sulfato de amonio,
filtración con gel utilizando columnas proteína A Sefarosa (por
ejemplo, Sephadex® G-75) para extraer
contaminantes tales como IgG, y columnas quelantes de metal para
unir las formas etiquetadas con epitope.
En ciertas realizaciones de la invención, la
proteína inmunoglobulina de elección es un anticuerpo. A
continuación se detallan técnicas para la producción de anticuerpos,
incluyendo anticuerpos policlonales, monoclonales, humanizados,
biespecíficos y heteroconjugados.
Los anticuerpos policlonales generalmente son
aumentados en animales mediante múltiples inyecciones subcutáneas
(sc) o intraperitoneales (ip) del antígeno relevante y un adyuvante.
Puede ser útil conjugar el antígeno relevante a una proteína que
inmunogénica en la especie a ser inmunizada, por ejemplo,
hemocianina de lapa, albumina de suero, tiroglobulina bovina, o
inhibidor de tripsina de soja. Ejemplos de adyuvantes que puede ser
empleado incluyen adyuvante completo de Freund y adyuvantes
MPL-TDM (monofosforil Lipid A, trehalosa
dicorinomicolato sintético). El protocolo de inmunización puede
seleccionarse por un entendido en la técnica sin
experimentación
desproporcionada.
desproporcionada.
Un mes más tarde los animales son reforzados con
1/5 a 1/10 de la cantidad original de péptido o conjugado en
adyuvante completo de Freund mediante inyección cutánea en múltiples
sitios. De 7 a 14 días más tarde se hace sangrar a los animales y
se realiza un ensayo con el suero para el título del anticuerpo. Se
estimula a los animales hasta que los títulos alcanzan niveles
adecuados. Preferentemente, el animal es estimulado con el
conjugado del mismo antígeno, pero conjugado a una proteína
diferente y/o a través de un reactivo de reticulación diferente.
Los conjugados también pueden hacerse en cultivo de células
recombinantes como fusiones de proteína. También, agentes de
agregación tales como el alumbre se utilizan de forma apropiada para
mejorar la respuesta inmune.
Los anticuerpos monoclonales se obtienen a
partir de una población de anticuerpos sustancialmente homogéneos,
es decir, la población comprende anti-post
individuales idénticos excepto por las posibles mutaciones
producidas naturalmente que pueden estar presentes en cantidades
menores. Por lo tanto, el modificador "monoclonal" indica que
el carácter de anticuerpo no es una mezcla de anticuerpos
discretos.
Por ejemplo, los anticuerpos monoclonales pueden
hacerse utilizando el procedimiento del hibridoma descrito primero
por Kohler et al., Nature, 256:495 (1975), o pueden hacerse
mediante procedimientos de DNA recombinante (patente US
4.816.567).
En el procedimiento del hibridoma, un ratón u
otro animal huésped apropiado, tal como un hámster, es inmunizado
como se describió anteriormente para extraer linfocitos que producen
o son capaces de producir anticuerpos que se unirán específicamente
a la proteína utilizada para la inmunización. Alternativamente, los
linfocitos pueden ser inmunizados in vitro. Los linfocitos se
fusionan entonces con células mieloma utilizando un agente de
fusión adecuado, tal como polietileno glicol, para formar una célula
hibridoma (Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice,
pp.59-103 (Academic Press, 1986).
El agente de inmunización incluirá típicamente
la proteína a ser formulada. Generalmente se utilizan tanto
linfocitos de sangre periférica ("PBLs") si se desean células
de origen humano, como células del bazo o células del nodo
linfático si se desean fuentes mamíferas no humanas. Los linfocitos
se fusionan entonces con una línea celular inmortalizada utilizando
un agente de fusión adecuado, tal como polietileno glicol, para
formar una célula hibridoma. Goding, Monoclonal antibodies:
Principles and Practice, Academic Press (1986), pp.
59-103. Las líneas celulares inmortalizadas son
usualmente células de mamífero transformadas, particularmente
células mieloma de roedor, bovino y origen humano. Usualmente, se
emplean líneas celulares mieloma de rata o de ratón. Las células
hibridoma así preparadas son sembradas y cultivadas en un medio de
cultivo adecuado que preferentemente contiene una o más sustancias
que inhiben el crecimiento o la supervivencia de las células
mieloma no fusionadas, parentales. Por ejemplo, si las células
mieloma parentales carece del enzima hipoxantina guanina
fosforibosil transferasa (HGPRT o HPRT), el medio de cultivo para
los hibridomas incluirá típicamente hipoxantina, aminopterina, y
timidina (medio HAT), dichas sustancias emite el crecimiento de
células deficientes en HGPRT.
Las células de mieloma preferidas son aquellas
que se fusionan eficientemente, soportan un alto nivel de
producción estable de anticuerpos por parte de las células
productoras de anticuerpos seleccionadas, y son sensibles a un
medio tal como el medio HAT. Entre estas, las líneas celulares
mieloma preferidas son líneas mieloma murina, tales como aquellas
derivadas de tumores de ratón MOPC-21 y
MPC-11 disponibles en el Salk Institute Cell
Distribution Center, San Diego, California USA, y células
SP-2 disponibles en American Type Culture
Collection, Rockville, Maryland USA. También se han descrito líneas
celulares de mieloma humano y heteromieloma
ratón-humano para la producción de anticuerpos
monoclonales humanos (Kozbor, J. Immunol., 133:3001 (1984); Brodeur
et al., Monoclonal Antibody Production Techniques and
Applications, pp. 51-63 (Marcel Dekker, Inc., New
York, 1987)).
Se realiza un ensayo del medio de cultivo en el
cual las células hibridoma son cultivadas para la producción de
anticuerpos monoclonales dirigidos contra el antígeno.
Preferentemente, la especificidad de unión de los anticuerpos
monoclonales producidos mediante células hibridoma se determina
mediante inmunoprecipitación o mediante un ensayo de unión in
vitro, tal como ensayo radioinmune (RIA) o ensayo
inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA).
La afinidad de unión del anticuerpo monoclonal
puede, por ejemplo, ser determinada mediante el análisis Scatchard
de Munson et al., Anal. Biochem., 107:220 (1980).
Después de que las células hibridoma
identificadas que producen anticuerpos de la especificidad,
afinidad, y/o actividad deseadas, los clones pueden ser subclonados
mediante procedimientos de dilución limitada y crecimiento mediante
procedimientos estándar (Goding, supra). El medio de cultivo
adecuado para este propósito incluye, por ejemplo,
D-MEM o medio RPMI-1640. Además, las
células hibridoma pueden ser cultivadas in vivo como tumores
ascites en un animal.
El agente de inmunización típicamente incluirá
la proteína epitope a la cual se une el anticuerpo. Generalmente,
se utilizan linfocitos sanguíneos periféricos ("PBLs") si se
desean células de origen humano, o se utilizan células del bazo o
células del nodo linfático si se desean fuentes de mamíferos no
humanos. Los linfocitos fusionan entonces con una línea celular
inmortalizada utilizan un agente de fusión adecuado, tal como
polietileno glicol, para formar una célula hibridoma. Goding,
Monoclonal Antibodies: Principals and Practice, Academic Press
(1986), pp. 59-103.
Las líneas celulares inmortalizadas usualmente
son células mamíferos transformadas, particularmente células
mieloma de roedor, bovino y origen humano. Usualmente, se emplean
líneas celulares mieloma de rata o ratón. Las células hibridoma
pueden ser cultivadas en un medio de cultivo adecuado que
preferentemente contienen uno más sustancias que inhiben el
crecimiento o la supervivencia de las células no fusionadas,
inmortalizadas. Por ejemplo, si las células parentales carecen del
enzima hipoxantina guanina fosforibosil transferasa (HGPRT o HPRT),
el medio de cultivo para los hibridomas típicamente incluirá
hipoxantina, aminopterina y timidina ("medio HAT"), dichas
sustancias evitan el crecimiento de células y sientes en HGPRT.
Las líneas celulares inmortalizadas preferidas
son aquellas que funcionan eficientemente, soportan un alto nivel
de expresión estable de anticuerpo mediante las células productoras
de anticuerpos seleccionadas y son sensibles a un medio tal como el
medio HAT. Las líneas celulares inmortalizadas más preferidas son
líneas de mieloma murino, que pueden ser obtenidas, por ejemplo, en
el Salk Institute Cell Distribution Center, San Diego, California y
en la American Type Culture Collection, Rockville, Maryland. Las
líneas celulares del mieloma humano y del heteromieloma
ratón-humano también se han descrito para la
producción de anticuerpos monoclonales humanos. Kozbor, J.
Immunol., 133:3001 (1984); Brodeur et al., Monoclonal
Antibody Production Techniques and Applications, Marcel Dekker,
Inc., New York, (1987) pp. 51-63.
El medio de cultivo en el cual las células
hibridoma son cultivadas puede ser ensayado entonces para la
presencia de anticuerpos monoclonales dirigidos contra la proteína
a formular. Preferentemente, la especificidad de unión de los
anticuerpos monoclonales producidos mediante células hibridoma en
determinada mediante inmunoprecipitación o mediante un ensayo de
unión in vitro, tal como un radioinmunoensayo (RIA) o ensayo
inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA). Dichas técnicas y
ensayos son conocidos en la técnica. La afinidad de unión del
anticuerpo monoclonal puede, por ejemplo, ser determinada mediante
el análisis Scatchard de Munson y Pollard, Anal. Biochem., 107:220
(1980).
Después de que células hibridoma deseadas sean
identificadas, los clones pueden ser subclonados mediante
procedimientos de limitación de la dilución y cultivados mediante
procedimientos estándar. Goding, supra. Medios de cultivo
adecuados para este propósito incluyen, por ejemplo, Dulbecco's
Modified Eagle's Medium y medio RPMI-1640.
Alternativamente, las células hibridoma pueden ser cultivadas in
vivo como ascitas en un mamífero.
Los anticuerpos monoclonales secretados por los
subclones son adecuadamente separados del medio de cultivo, fluido
de ascitas, o suero mediante procedimientos convencionales de
purificación de inmunoglobulina tales como, por ejemplo, proteína
A-Sefarosa, cromatografía de hidroxilapatita,
electroforesis en gel, diálisis, o cromatografía de afinidad.
El DNA que codifica los anticuerpos monoclonales
es fácilmente aislado y secuenciado utilizando procedimientos
convencionales (por ejemplo, utilizando sondas
oligonucleótido que son capaces de unirse específicamente a genes
que codifican las cadenas pesada y liviana de anticuerpos murina).
Las células hibridoma sirven como una fuente preferida de dicho
DNA. Una vez aislado, el DNA puede ser colocado en vectores de
expresión, que son entonces transfectados en células huésped tales
como células E. coli, células COS de simios, células de
ovario de hámster chino (CHO), o células mieloma que no producen de
otra manera proteína inmunoglobulina, para obtener la síntesis de
anticuerpos monoclonales en las células huéspedes recombinantes. La
revisión de artículos sobre expresión recombinante en baterías de
DNA que codifica el anticuerpo incluye Skerra et al., Curr.
Opinion in Immunol., 5:256-262 (1993) y Plückthum,
Immunol. Revs. 130:151-188 (1992).
En una realización adicional, los anticuerpos
pueden ser aislados de bibliotecas de fagos de anticuerpos
generadas realizando las técnicas descritas en McCafferty et
al., Nature, 348:552-554 (1990). Clackson et
al., Nature, 352:624-628 (1991) and Marks et
al., J. Mol. Biol., 222:581-597 (1991) describe
el aislamiento de murina y anticuerpos humanos, respectivamente,
utilizando bibliotecas de fagos. Publicaciones subsiguientes
describen la producción de anticuerpos humanos de alta afinidad
(rango nM) mediante mezclado de cadenas (Marks et al.,
Biol/Technology, 10:779-783 (1992)), así como
infección combinatoria y recombinación in vivo como
estrategia para construir bibliotecas muy grandes de fagos
(Waterhouse et al., Nuc. Acids. Res.,
21:2265-2266 (1993)). Por lo tanto, estas técnicas
son alternativas viables a las técnicas tradicionales de hibridoma
de anticuerpos monoclonales.
El ADN también puede ser modificado, por
ejemplo, sustituyendo la secuencia de codificación para los niños
constantes humanos de cadenas pesada y liviana en lugar de las
secuencias murina homólogas (Patente US 4.816.567; Morrison, et
al., Proc. Natl Acad. Sci. USA, 81:6851 (1984)), o uniendo de
forma covalente a la secuencia de codificación de inmunoglobulina
toda o parte de la secuencia de codificación para un polipéptido no
inmunoglobulina.
Típicamente, dichos polipéptidos no
inmunoglobulina son sustituidos por dominios constantes de un
anticuerpo, son sustituidos por los dominios variables de un sitio
de combinación de un antígeno de un anticuerpo para crear un
anticuerpo bivalente quimérico que comprende combinación del
antígeno que tiene especificidad para un antígeno y otro sitio de
combinación del antígeno que tiene especificidad para un antígeno
diferente.
Anticuerpos quiméricos o híbridos también pueden
prepararse in vitro utilizando procedimientos conocidos en
la química de la proteína sintética, incluyendo aquellos que
implican agentes de reticulación. Por ejemplo, las inmunotoxinas
pueden ser construidas utilizando una reacción de intercambio de
bisulfuro o mediante la formación de un enlace tioéter. Ejemplos de
reactivos adecuados para este propósito incluyen iminotiolato y
metil-4-mercaptobutirimidato.
Los anticuerpos objeto del procedimiento de
formulación pueden comprender además anticuerpos humanizados o
humanos. Las formas humanizadas de anticuerpos no humanos (por
ejemplo, murina) son inmunoglobulinas quiméricas, cadenas
inmunoglobulina o fragmentos de las mismas (como Fv, Fab, Fab',
F(ab')_{2} u otra subsecuencia de unión de antígeno de
anticuerpos) que contiene secuencia mínima derivada de
inmunoglobulina no humana. Anticuerpos humanizados incluyen
inmunoglobulinas humanas (anticuerpo receptor) en el cual residuos
de una región determinante de complementariedad (CDR) del receptor
son reemplazados por residuos de un CDR de una especie no humana
(anticuerpo donante) tal como un ratón, rata o conejo que tiene la
especificidad, afinidad y capacidad deseada. En algunos ejemplos,
los residuos de marco Fv de la inmunoglobulina humana son
reemplazados por correspondientes residuos no humanos. Los
anticuerpos humanizados también pueden comprender residuos que no
se encuentran en el anticuerpo receptor ni en el CDR importado o en
la secuencia de marco. En general, el anticuerpo humanizado
comprenderá sustancialmente todo de al menos un, y típicamente dos,
dominios variables, en los cuales todas o sustancialmente todas las
regiones CDR corresponden a aquellas de una inmunoglobulina no
humana y todas esencialmente todas las regiones FR son aquellas de
una secuencia de consenso de inmunoglobulina humana. El anticuerpo
humanizado óptimamente también comprenderá al menos una porción de
una región constante inmunoglobulina (Fc), típicamente aquella de
una inmunoglobulina humana. Jones et al., Nature 321:
522-525 (1986); Riechmann et al., Nature
332: 323-329 (1988) and Presta, Curr. Opin. Struct.
Biol. 2: 593-596 (1992).
Los procedimientos para humanizar anticuerpos no
humanos son bien conocidos en la técnica. Generalmente, un
anticuerpo humanizado tiene uno o más residuos aminoácidos
introducidos en él desde una fuente que es no humana. Estos
residuos aminoácidos no humanos con frecuencia son referidos como
residuos "importados", que son típicamente tomados a partir de
un dominio variable "importado". La humanización esencialmente
puede realizarse siguiendo el procedimiento de Winter y
colaboradores, Jones et al., Nature
321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature
332:323-327 (1988); Verhoeyen et al., Science
239:1534-1536 (1988), o a través de la sustitución
de secuencias de roedor CDRs o CDR por las correspondientes
secuencias de un anticuerpo humano. Por consiguiente, dichos
anticuerpos "humanizados" son anticuerpos quiméricos (Patente
US 4.816.567), donde sustancialmente menos de un dominio variable
humano intacto ha sido sustituido por la secuencia correspondiente
de una especie no humana. En la práctica, los anticuerpos
humanizados son típicamente anticuerpos humanos en los cuales
algunos residuos CDR y posiblemente algunos residuos FR son
sustituidos por residuos de sitios análogos en anticuerpos de
roedores.
La elección de dominios variables humanos, tanto
livianos como pesados, a utilizar en la realización de anticuerpos
humanizados es muy importante para reducir antigenicidad. Según el
procedimiento llamado "mejor ajuste", la secuencia de dominio
variable de un anticuerpo de roedor es revisada contra la biblioteca
completa de secuencias de dominio variable humanas. La secuencia
humana que es más próxima a la del roedor se acepta entonces como
el marco humano (FR) para el anticuerpo humanizado. Sims et
al., J. Immunol., 151:2296 (1993); Chothia et al., J.
Mol. Biol., 196:901 (1987). Otro procedimiento utiliza un marco
particular derivado de la secuencia de consenso de todos los
anticuerpos humanos de un subgrupo particular de cadenas livianas o
pesadas. El mismo marco puede ser utilizado para varios anticuerpos
humanizados diferentes. Carter et al., Proc. Natl. Acad.
Sci. USA, 89:4285 (1992); Presta et al., J. Immnol., 151:2623
(1993).
Es importante además que los anticuerpos sean
humanizados con retención de alta afinidad para el antígeno y otras
propiedades biológicas favorables. Para lograr este objetivo, según
un procedimiento preferido, se preparan anticuerpos humanizados
mediante un procedimiento de análisis de las secuencias parentales y
varios productos humanizados conceptuales utilizando modelos
tridimensionales de las secuencias parental y humanizada. Los
modelos inmunoglobulina tridimensionales tan comúnmente disponibles
y son familiares para aquellos entendidos en la técnica. Están
disponibles programas de ordenador que ilustran y muestran probables
estructuras conformacionales tridimensionales de secuencias
inmunoglobulina candidatas seleccionadas. La inspección de estas
muestras permite el análisis de la probabilidad del rol de los
residuos en el funcionamiento de la secuencia inmunoglobulina
candidata, es decir, el análisis de residuos que influencian
la habilidad de la inmunoglobulina candidata para unir su antígeno.
De esta forma, los residuos FR pueden ser seleccionados combinados a
partir del receptor y las secuencias importadas de forma tal que se
logra la característica del anticuerpo deseada, tal como afinidad
incrementada para el antígeno(s) objetivo. En general, los
residuos CDR están directamente y más sustancialmente implicados
influenciando la unión del antígeno.
Alternativamente, ahora es posible producir
animales transgénicos (por ejemplo, ratones) que son
capaces, mediante inmunización, de producir un repertorio completo
de anticuerpos humanos en la ausencia de producción de
inmunoglobulina endógena. Por ejemplo, se ha descrito que la
eliminación homocigótica del gen de la región de unión de cadena
pesada del anticuerpo (J_{H}) en ratones mutantes quiméricos y la
línea germinal resulta en la inhibición completa de la producción
de anticuerpos endógenos. La transferencia del gen inmunoglobulina
de línea germinal humana puesto en dicho ratón de línea germinal
mutante resultará en la producción de anticuerpos humanos ante la
amenaza del antígeno. De, por ejemplo, Jakobovits et
al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:2551 (1993); Jakobovits
et al., Nature, 362:255-258 (1993);
Bruggermann et al., Year in Immuno., 7:33 (1993). Los
anticuerpos humanos también pueden ser derivados a partir de
bibliotecas de exhibición de fagos (Hoogenboom et al., J.
Mol. Biol., 227:381 (1991); Marks et al., J. Mol. Biol.,
222:581-597 (1991)).
Los anticuerpos humanos también pueden ser
producidos utilizando diferentes técnicas conocidas en la técnica,
incluyendo bibliotecas de exhibición de fagos. Hoogenboom and
Winter, J. Mol. Biol. 227: 381 (1991); Marks et al., J. Mol.
Biol. 222: 581 (1991). Las técnicas de Cole et al., y Boerner
et al., también están disponibles para la preparación de
anticuerpos monoclonales humanos (Cole et al., Monoclonal
Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77 (1985) and
Boerner et al., J. Immunol. 147(1):
86-95 (1991). De forma similar, anticuerpos humanos
pueden hacerse mediante la introducción de loci de inmunoglobulina
humana en animales transgénicos, por ejemplo, ratones en los
cuales los genes inmunoglobulina endógenos han sido parcial
completamente inactivados. Ante el desafío, se observa la producción
de cuerpos humanos, que se asemeja mucho a la vista en humanos en
todos los aspectos, incluyendo reacomodamiento de genes, montaje y
repertorio de anticuerpos. Esta aproximación se describe, por
ejemplo, en las Patentes de Estados Unidos N.º 5.545.807;
5.545.806. 5.569.825. 5.625.126. 5.633.425. 5.661.016 y en las
siguientes publicaciones científicas: Marks et al.,
Bio/Technology 10: 779-783 (1992); Lonberg et
al., Nature 368: 856-859 (1994); Morrison,
Nature 368: 812-13 (1994), Fishwild et al.,
Nature Biotechnology 14: 845-51 (1996), Neuberger,
Nature Biotechnology 14: 826 (1996) and Lonberg and Huszar, Intern.
Rev. Immunol. 13: 65-93 (1995).
Los anticuerpos de la presente invención también
se pueden usar en ADEPT mediante la conjugación del anticuerpo en
una enzima de activación del profármaco que convierten un profármaco
(por ejemplo, un agente quimioterapéutico de peptidilo, ver la
patente WO 81/01145) en un fármaco contra el cáncer activo. Ver, por
ejemplo, la patente WO 88/07378 y la patente US 4.975.278.
El componente de la enzima del inmunoconjugado
útil para ADEPT incluye cualquier enzima capaz de actuar sobre un
profármaco de tal manera que lo convierte en su forma citotóxica más
activa.
Las enzimas que son útiles en el procedimiento
de esta invención incluyen, pero no están limitadas a, glicosidasa,
glucosa oxidasa, lisozima humana, glucuronidasa humana, alcalina
fosfatasa útil para convertir profármacos que contienen fosfato en
fármacos libres; arilsulfatasa útil para convertir profármacos que
contienen sulfato en fármacos libres; citosina deaminasa útil para
convertir 5-fluorocitosina no tóxica en el fármaco
contra el cáncer 5-fluorouracil; proteasas, tales
como serratia proteasa, termolisina, subtilisina, carboxipeptidasas
(por ejemplo, carboxipeptidasa G2 y carboxipeptidasa A) y
catepsinas (tales como catepsinas B y L), que son útiles para
convertir profármacos que contienen péptidos en fármacos libres;
D-alanilcarboxipeptidasas, útiles para convertir
profármacos que contienen sustituyentes de aminoácidos D; enzimas de
separación de carbohidratos tales como
\beta-galactosidasa y neuraminidasa útil para
convertir profármacos glicosilatados en fármacos libres;
\beta-lactamasa útiles para compartir fármacos
derivados con \beta-lactamos en fármacos libres;
y amidasas de penicilina, tal como penicilina Vamidasa o penicilina
G amidasa, útil para convertir fármacos derivados en sus
electrógenos de amina con grupos fenoxiacetil o fenilacetil,
respectivamente, en fármacos libres. Alternativamente, los
anticuerpos con actividad enzimática, también conocidos en la
técnica como "abzimas" se pueden utilizar para convertir los
profármacos de la invención en fármacos activos libres (ver, por
ejemplo Massey, Nature 328: 457-458 (1987)). Los
conjugados anticuerpo-abzima se pueden preparar tal
como se ha descrito aquí para el suministro de la abzima con una
población celular tumoral.
Las enzimas de esta invención se pueden unir de
manera covalente a los anticuerpos
anti-IL-17 o
anti-LIF mediante técnicas bien conocidas en la
técnica, tal como la utilización de los agentes de reticulación
heterobifuncionales descritos anteriormente. Alternativamente, se
pueden construir proteínas de fusión que comprenden por lo menos la
región de unión del antígeno del anticuerpo de la invención enlazado
con por lo menos una porción funcionalmente activa de una enzima de
la invención utilizando técnicas de ADN recombinante conocidas en la
técnica (ver, por ejemplo Neuberger et al., Nature 312:
604-608 (1984)).
Los anticuerpos biespecíficos (BsAbs) son
anticuerpos que tienen especificidades de unión para por lo menos
dos epítopes diferentes. Estos anticuerpos se pueden derivar a
partir de anticuerpos de longitud completa o fragmentos de
anticuerpos (por ejemplo, anticuerpos biespecíficos
F(ab')_{2}).
Los procedimientos para hacer anticuerpos
biespecíficos son conocidos en la técnica. La producción
tradicional de anticuerpos biespecíficos de longitud completa se
basa en la coexpresión de postales de cadena
pesada-cadena ligera de inmunoglobulina, donde las
dos cadenas tienen diferentes especificidades. Millstein et
al., Nature, 305:537-539 (1983). Debido a la
distribución aleatoria de las cadenas pesadas y ligeras de
inmunoglobulina, estos hibridomas (cuadromas) producen una mezcla
potencial de 10 diferentes moléculas de anticuerpos, de las cuales
solamente una tiene la estructura biespecífica correcta. La
purificación de la molécula correcta, que se realiza usualmente
mediante etapas de cromatografía de afinidad, es bastante
complicada, y los rendimientos de productos son bajos.
Procedimientos similares se describen en la patente WO 93/08829 y
en Traunecker et al., EMBO J., 10:3655-3659
(1991).
Los dominios variables de anticuerpo con las
especificidades de unión deseadas (sitios de combinación
anticuerpo-antígeno) se pueden fusionar
consecuencias de dominio constante de inmunoglobulina. Confusión
preferiblemente es un dominio constante de cadena pesada de
inmunoglobulina, que comprende por lo menos parte de la
articulación, regiones CH2 y CH3. Se prefiere tener la primera
región constante de cadena pesada (CH1) que contiene el sitio
necesario para la unión de cadena ligera presente en por lo menos
una de las fusiones. Los ADNs que codifica las fusiones de cadena
pesada de la inmunoglobulina y, si se desea la cadena ligera de
inmunoglobulina, se insertan en vectores de expresión separados, y
se cotransfectan en un organismo huésped adecuado. Para detalles
adicionales de la generación de anticuerpos biespecíficos ver, por
ejemplo, Suresh et al., Methods in Enzymology 121: 210
(1986).
Según una aproximación diferente, los dominios
variables de anticuerpo con las especificidades de unión deseadas
(sitios de combinación anticuerpo-antígeno) se
funden consecuencias de dominio constante de inmunoglobulina. La
fusión es preferiblemente con un dominio constante de cadena pesada
de inmunoglobulina, que comprende por lo menos parte de la
articulación, las regiones CH2, y CH3. Se prefiere tener la primera
región constante de cadena pesada (CH1) que contienen sitio
necesario para la unión de la cadena ligera, presente en por lo
menos una de las fusiones. Los ADNs que codifica las fusiones de
cadena pesada de inmunoglobulina y, si se desea, la cadena ligera
de inmunoglobulina, se insertan en vectores de expresión separados,
y se cotransfectan en un organismo huésped adecuado. Esto
proporciona una mayor flexibilidad en el ajuste de las proporciones
mutuas de los tres fragmentos de polipéptido en realizaciones cuando
relaciones diferentes de las tres cadenas de polipéptido usadas en
la construcción proporcionan los rendimientos óptimos. Sin embargo,
es posible insertar las secuencias de codificación para dos o las
tres cadenas de polipéptido en un vector de expresión cuando la
expresión de por lo menos dos cadenas de polipéptido en relaciones
iguales resulta en altos rendimientos o cuando las relaciones no
tienen una significación particular.
Según otra aproximación descrita en la patente
WO 96/27011, se puede realizar la interfaz entre un par de
moléculas de anticuerpo para maximizar el porcentaje de
heterodímeros que están recubiertos a partir de cultivo de células
recombinantes. La interfaz preferida comprende por lo menos una
parte de la región CH3 de un dominio constante de anticuerpo. En
este procedimiento, una o más pequeñas cadenas laterales de
aminoácidos de la interfaz de la primera molécula del anticuerpo se
reemplazan con cadenas laterales mayores (por ejemplo, tirosina o
triptófano). Se crean "cavidades" compensatorias de tamaño
idéntico o similar que las cadenas laterales mayores en la interfaz
de la segunda molécula del anticuerpo reemplazando grandes cadenas
laterales de aminoácidos con menores (por ejemplo, alanina o
treonina). Esto proporciona un mecanismo para aumentar la producción
del heterodímero sobre productos finales no deseados tales como
homodímeros.
En una realización preferida de esta
aproximación, los anticuerpos biespecíficos están compuestos de una
cadena pesada de inmunoglobulina híbrida con una primera
especificidad de unión en un brazo, y un par de cadena
pesada-cadena ligera de inmunoglobulina híbrida (que
proporciona una segunda especificidad de unión) en el otro brazo.
Se ha encontrado que esta estructura asimétrica facilita la
separación del componente biespecífico deseado de las combinaciones
de cadenas de inmunoglobulina no deseadas, ya que la presencia de
una cadena ligera de inmunoglobulina en solamente una mitad de la
molécula biespecífica proporciona una manera fácil de separación.
Esta aproximación se describe en la patente WO 94/04690, publicada
el 3 marzo 1994. Para detalles adicionales de la generación de
anticuerpos biespecíficos ver, por ejemplo, Suresh et al.,
Methods in Enzymology, 121:210 (1986).
Los anticuerpos biespecíficos incluyen
anticuerpos reticulados o "heteroconjugados". Por ejemplo, uno
de los anticuerpos en el heteroconjugado se puede acoplar con
avidina, el otro con biotina. Estos anticuerpos se han propuesto,
por ejemplo, para marcar las células del sistema inmune con células
no deseadas (patente US 4.676.980), y para el tratamiento de
infección VIH (WO 91/00360, WO 92/200373). Los anticuerpos
heteroconjugados se pueden hacer utilizando cualquier procedimiento
de reticulación conveniente. Agentes de reticulación adecuados son
bien conocidos en la técnica, y se describen en la patente US
4.676.980, junto con una pluralidad de técnicas de
reticulación.
También se han descrito en la literatura
técnicas para generar anticuerpos específicos a partir de
fragmentos de anticuerpos. Las siguientes técnicas también se pueden
utilizar para la producción de fragmentos de anticuerpos bivalentes
que no son necesariamente biespecíficos. Por ejemplo, fragmentos
Fab' recuperados a partir de E. coli se pueden acoplar
químicamente in vitro para formar anticuerpos bivalentes. Ver
Shalaby et al., J. Exp. Med., 175:217-225
(1992).
Los anticuerpos biespecíficos se pueden preparar
como anticuerpos de longitud completa o fragmentos de anticuerpos
(por ejemplo anticuerpos biespecíficos F(ab')_{2}). Las
técnicas para generar anticuerpos biespecíficos a partir de
fragmentos de anticuerpos se han descrito en la literatura. Por
ejemplo, se pueden preparar anticuerpos biespecíficos utilizando
enlace químico. Brennan et al., Science 229: 81 (1985)
describe un procedimiento en el cual los anticuerpos intactos se
separan de manera proteolítica para generar fragmentos
F(ab')_{2}. Estos fragmentos o reducen en presencia de la
arsenita de sodio del agente complejante de ditiol para estabilizar
los ditioles vecinales y evitar la formación de disulfuro
intermolecular. Los fragmentos Fab' generados se convierten a
continuación a derivados de tionitrobenzoato (TNB). Uno de los
derivados Fab'-TNB se reconvierte a continuación en
el derivado Fab'-TNB para formar el anticuerpo
biespecífico. Los anticuerpos biespecíficos producidos pueden
utilizar como agentes para la inmovilización selectiva de las
enzimas.
Los fragmentos Fab' se pueden recuperar
directamente a partir de E. coli y acoplarse químicamente
para formar anticuerpos biespecíficos. Shalaby et al., J.
Exp. Med. 175: 217-225 (1992) describe la producción
de moléculas de anticuerpo biespecífico F(ab')_{2}
completamente humanizadas. Cada fragmento Fab' se secretó por
separado a partir de E. coli y se sometió a acoplamiento
químico directo in vitro para formar el anticuerpo
biespecífico. El anticuerpo biespecífico así formado era capaz de
unirse a las células que sobreexpresan el receptor ErbB2 y las
células T humanas normales, así como activan la actividad lítica de
los linfocitos citotóxicos humanos contra las dianas de tumores de
mama humanos.
Varias técnicas para hacer y aislar fragmentos
de anticuerpo bivalentes directamente a partir del cultivo de
células recombinantes también se han descrito. Por ejemplo, se han
producido heterodímeros bivalentes utilizando cremalleras de
Lucina. Kostelny et al., J. Immunol.,
148(5):1547-1553 (1992). Los péptidos de
cremallera de leucina de las proteínas Fos y Jun se enlazaron a las
porciones Fab' de dos anticuerpos diferentes mediante fusión
génica. Los homodímeros de anticuerpo se redujeron a la región de
articulación para formar monóremos de continuación y se volvieron a
oxidar para formar heterodímeros del cuerpo. La tecnología
"diacuerpo" descrita por parte de Hollinger et al.,
Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90: 6444-6448 (1993) ha
proporcionado un mecanismo alternativo para hacer fragmentos de
anticuerpo biespecíficos/bivalentes. Los fragmentos comprenden un
dominio de cadena pesada variable (V_{H}) conectado con un
dominio de cadena ligera variable (V_{L}) mediante un enlace que
es demasiado corto para permitir el emparejado entre los dos
dominios en la misma cadena. En consecuencia, los dominios V_{H}
y V_{L} del fragmento son forzados a emparejarse con los dominios
V_{L} y V_{H} complementarios del otro fragmento, formando así
dos sitios de unión del antígeno. Otra estrategia para hacer
fragmentos de anticuerpo biespecíficos/bivalentes mediante la
utilización de dímeros de cadena simple Fv (sFv) también se han
indicado. Ver Gruber et al., J. Immunol., 152:5368
(1994).
Se contemplan anticuerpos con más de dos
valencias. Por ejemplo, se pueden preparar anticuerpos
triespecíficos. Tutt et al., J. Immunol. 147: 60 (1991).
Anticuerpos biespecíficos de ejemplo se pueden
unir a dos epítopes diferentes en una molécula dada.
Alternativamente, un brazo anti-proteína se puede
combinar con un brazo que se une a una molécula de activación sobre
un leucocito tal como una molécula receptora de células T (por
ejemplo, CD2, CD3, CD28 o B7), o receptores Fc para IgG
(Fc\gammaR), tal como Fc\gammaRI (CD64), Fc\gammaRII (CD32) y
Fc\gammaRIII (CD16) para focalizar los mecanismos de defensa
celular en la célula que expresa la proteína particular. Los
anticuerpos biespecíficos también se pueden utilizar para localizar
agentes citotóxicos en células que expresan una proteína
particular. Estos anticuerpos poseen un brazo de unión a la proteína
timbrazo que se une a un agente citotóxico o un quelador
radionúclido, tal como EOTUBE, DPTA, DOTA o TETA. Otro anticuerpo
biespecífico de interés se une a la proteína de interés y también
se une al factor de tejido (TF).
Los anticuerpos heteroconjugados están también
dentro del alcance de la presente invención. Los anticuerpos
heteroconjugados están compuestos de los anticuerpos unidos de
manera covalente. Estos anticuerpos se han propuesto, por ejemplo,
para marcar células del sistema inmune con células no deseadas,
patente US 4.676.980, y para el tratamiento de infección VIH.
Documentos WO 91/00360, WO 92/200373 y EP 03089. Se contempla que
los anticuerpos se preparan in vitro utilizando
procedimientos conocidos en química de proteínas sintéticas,
incluyendo los que incluyen agentes de reticulación. Por ejemplo, se
pueden construir inmunotoxinas utilizando una reacción de
intercambio de disulfuro o mediante la formación de una unión
tioéter. Ejemplos de reactivos adecuados para este propósito
incluyen iminotiolato y
metil-4-mercaptobutirimidato los
descritos, por ejemplo, en la patente US 4.676.980.
Aunque las formulaciones aquí no están limitadas
a formulaciones liofilizadas reconstituidas, en una realización
particular, las proteínas de inmunoglobulina se liofilizaron y a
continuación se reconstituyen para producir las formulaciones
líquidas estables de viscosidad reducida de la invención. En esta
realización particular, después de la preparación de la proteína de
inmunoglobulina de interés tal como se ha descrito anteriormente,
se produce una "formulación pre-liofilizada".
La cantidad de proteína de inmunoglobulina presente en la
formulación pre-liofilizada se determina teniendo en
cuenta los volúmenes de dosis deseados, el modo de administración,
etc. Por ejemplo, la concentración inicial de un anticuerpo intacto
puede ser de aproximadamente 2 mg/ml a aproximadamente 50 mg/ml,
preferiblemente entre aproximadamente 5 mg/ml y aproximadamente 40
mg/ml y más preferiblemente entre aproximadamente
20-30 mg/ml.
La proteína de inmunoglobulina a formular está
generalmente presente en solución. Por ejemplo, en las
formulaciones de viscosidad reducida insistencia y resistencia
iónica elevada de la invención, la proteína puede estar presente en
una solución de pH tamponado en un pH de aproximadamente
4-8, y preferiblemente entre aproximadamente
5-7. La concentración de tampón puede ser entre
aproximadamente 1 mM y aproximadamente 20 mM, alternativamente
entre aproximadamente 3 mM y aproximadamente 15 mM, dependiendo como
por ejemplo, el tampón y de la tonicidad deseada de la formulación
(por ejemplo, de la formulación reconstituida). Tampones y/o sales
de ejemplo son aquellos que son farmacéuticamente aceptables y se
pueden crear a partir de ácidos, bases y sales adecuados de los
mismos, tal como los que se definen bajo ácidos, bases o tampones
"farmacéuticamente aceptables".
En una realización, un lioprotector se añade a
la formulación pre-liofilizada. La cantidad de
lioprotector en la formulación pre-liofilizada es
generalmente tal que, bajo la reconstitución, la formulación
resultante será isotónica. Sin embargo, también pueden ser
adecuadas formulaciones reconstituidas hipertónicas. Además, la
cantidad de lioprotector no debe ser demasiado baja, de manera que
se produzca una cantidad inaceptable de degradación/agregación de
la proteína en la liofilización. Sin embargo, las concentraciones de
lioprotector de ejemplo en la formulación
pre-liofilizada son entre aproximadamente 10 mM y
aproximadamente 400 mM, alternativamente entre aproximadamente 30
mM y aproximadamente 300 mM, alternativamente entre aproximadamente
50 mM y aproximadamente 100 mM. Los lioprotectors de ejemplo
incluyen azúcares y alcoholes de azúcar tales como sacarosa, manosa,
trehalosa, glucosa, sorbitol, manitol. Sin embargo, bajo
circunstancias particulares, ciertos lioprotectors también pueden
contribuir a un aumento en la viscosidad de la formulación. Como
tal, debe tenerse cuidado para seleccionar lioprotectors
particulares que minimicen o neutralicen este efecto. Lioprotectors
adicionales se describen posteriormente bajo la definición de
"lioprotectors".
La relación de proteína y lioprotector puede
variar para cada proteína de inmunoglobulina particular o la
combinación de anticuerpo y lioprotector. En el caso de un
anticuerpo como la proteína de elección y un azúcar (por ejemplo,
sacarosa o trehalosa) como lioprotector para generar una formulación
reconstituida isotónica con una alta concentración de proteínas, la
relación molar de lioprotector y anticuerpo puede ser de
aproximadamente 100 a aproximadamente 1500 moles de liprotectante
por 1 mol de anticuerpo, y preferiblemente entre aproximadamente
200 y aproximadamente 1000 moles de lioprotector por 1 mol de
anticuerpo, por ejemplo entre aproximadamente 200 y aproximadamente
600 moles de lioprotector por 1 mol de anticuerpo.
En una realización preferida, puede ser deseable
añadir un surfactante a la formulación
pre-liofilizada. Alternativamente, o además, el
surfactante se puede añadir a la formulación liofilizada y/o a la
formulación reconstituida. Los surfactantes incluyen surfactantes
no iónicos tales como polisorbatos (por ejemplo polisorbatos
20 u 80); polioxámeros (por ejemplo polioxámero 188); Triton;
sodio octyl glucósido; lauril-, miristil-, linoleil-, o
estearil-sulfobetaína; lauril-, miristil-, linoleil-
o estearil-sarcosina; linoleil-, miristil-, o
cetil-betaína; lauroamidopropil-, cocamidopropil-,
linoleamidopropil-, miristamidopropil-, palmidopropil-, o
isostearamidopropil-betaína (por ejemplo
lauroamidopropil); miristamidopropil-, palmidopropil-, o
isostearamidopropil-dimetilamina; sodio metil
cocoil-, o disodio metil oleil-taurato; y las series
MONAQUA^{TM} (Mona Industries, Inc., Paterson, New Jersey),
polyetil glicol, polipropil glicol, y copolímeros de etileno y
propileno glicol (por ejemplo Pluronics, PF68 etc).
La cantidad de surfactante añadido es tal que reduce la formación de
partículas de la proteína reconstituida y minimiza la formaciónde
partículas después de la reconstitución. Por ejemplo, el
surfactante puede estar presente en la formulación
pre-liofilizada en una cantidad de entre
0,001-0,5%, alternativamente entre aproximadamente
0,005-0,05%.
Una mezcla del lioprotector (tal como sacarosa o
trehalosa) y un agente de carga (por ejemplo manitol o
glicina) se pueden utilizar en la preparación de la formulación
previa a la liofilización. El agente de carga puede permitir la
producción de una masa liofilizada uniforme sin bolsas excesivas en
su interior, etc. Otros portadores, incipientes o estabilizadores
farmacéuticamente aceptables, tal como los descritos en Remington's
Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980) se pueden
incluir en la formulación antes de la liofilización (y/o la
formulación liofilizada y/o la formulación reconstituida) previendo
que no afecten adversamente a las características deseadas de la
formulación. Los portadores, incipientes o estabilizadores
aceptables son no tóxicos para los recipientes en las dosis y las
concentraciones utilizadas e incluyen agentes de tampón
adicionales, preservativos, co-solventes,
antioxidantes se incluyen ácido ascórbico y metionina, agentes
quelantes tales como EDTA, complejos metálicos (por ejemplo,
complejos de proteína de Zn), polímeros biodegradables tales como
poliésteres, y/o contraiones formadores de sales tales como
sodio.
La formulación aquí también puede contener
también más de una proteína de inmunoglobulina, tal como es
necesario para la indicación particular se trata, preferiblemente
aquellas con actividades complementarias que no afectan
adversamente a la otra proteína. Por ejemplo, puede ser deseable
proporcionar dos o más anticuerpos que se unen al receptor HER2 o
IgE en una única formulación. Estas proteínas están adecuadamente
presentes en combinación en cantidades que son efectivas para el
propósito deseado.
Las formulaciones que se utilizan para
administración in vivo deben ser estériles. Esto se consigue
fácilmente mediante filtración a través de membranas de filtración
estériles, antes o después de la liofilización y reconstitución.
Alternativamente, la esterilidad de toda la mezcla se puede realizar
mediante el autoclave de los ingredientes, excepto para la
proteína, aproximadamente 120ºC durante 30 minutos, por ejemplo.
Después de que la proteína de inmunoglobulina,
lioprotector opcional y otros componentes opcionales se mezclan
juntos, la formulación se liofiliza. Muchos liofilizadores
diferentes están disponibles para este propósito, tal como los
liofilizadores Hull50^{TM} (Hull, Estados Unidos) o GT20^{TM}
(Leybold-Heraeus, Alemania). La liofilización se
realiza congelando la formulación y sublimando posteriormente el
hielo del contenido congelado a una temperatura adecuada para
secado primario. Bajo esta condición, la temperatura del producto
está por debajo del punto eutéctico o la temperatura de colapso de
la formulación. Típicamente, la temperatura de almacenamiento del
secado primario variará entre aproximadamente -30 a 25ºC (previendo
que el producto permanece congelado durante el secado primario) una
presión adecuada, que varía típicamente entre aproximadamente 50 y
250 mTorr. La formulación, el tamaño y el tipo de recipiente que
contiene la muestra (por ejemplo, vial de vidrio) y el volumen del
líquido dictarán principalmente el tiempo requerido para el secado,
que puede variar entre unas pocas horas a varios días (por ejemplo,
40-60 horas). Opcionalmente, también se puede
realizar una etapa de secado secundaria entendiendo el nivel de
humedad residual deseado en el producto. La temperatura a la cual
el secado secundario se realiza varía entre aproximadamente
0-40ºC, dependiendo principalmente del tipo y el
tamaño del recipiente y del tipo de proteína utilizada. Por ejemplo,
la temperatura de almacenamiento lo largo de toda la fase de
retirada de agua de la liofilización puede estar entre
aproximadamente 15-30ºC (por ejemplo,
aproximadamente 20ºC). El tiempo y la presión requeridos para secado
secundario serán las que producen una masa liofilizada adecuada
dependiendo, por ejemplo, de la temperatura y otros parámetros. El
tiempo de secado secundario se dicta mediante el nivel de humedad
residual deseado en el producto y típicamente dura aproximadamente
cinco horas (por ejemplo, 10-15 horas). La presión
puede ser la misma que la utilizada durante la etapa de secado
primario. Las condiciones de liofilización pueden variar dependiendo
de la formulación y el tamaño del vial.
Antes de la administración al paciente, la
formulación liofilizada se reconstituye con un diluyente éticamente
aceptable, de manera que la concentración de proteína de
inmunoglobulina en la formulación reconstituida es por lo menos
aproximadamente 80 mg/ml, por ejemplo entre aproximadamente 80 mg/ml
aproximadamente 300 mg/ml, alternativamente entre aproximadamente
90 mg/ml y aproximadamente 150 mg/ml. Estas altas concentraciones de
proteínas en la formulación reconstituida se consideran que son
particularmente útiles como se pretende el suministro subcutáneo de
la formulación reconstituida. En ciertas realizaciones, la
concentración de proteína en la formulación reconstituida es
significativamente mayor que en la formulación antes de la
liofilización. Por ejemplo, la concentración de proteína en la
formulación reconstituida puede ser aproximadamente
2-40 veces, alternativamente 3-10
veces, alternativamente 3-6 veces (por ejemplo, por
lo menos tres veces o por lo menos cuatro veces) la de la
formulación antes de la liofilización.
La reconstitución generalmente se realiza a una
temperatura de aproximadamente 25ºC para asegurar una hidratación
completa, aunque otras temperaturas se pueden utilizar como se
desee. El tiempo requerido para la reconstitución dependerá, por
ejemplo, del tipo de diluyente, la cantidad de excipientes y la
proteína. Los diluyentes ejemplo incluyen agua estéril, agua
bacteriostática para inyección (BWFI), una solución de pH tamponado
(por ejemplo, salino tamponado con fosfato), solución salina
estéril, solución de Ringer o solución de dextrosa. El diluyente
contiene opcionalmente un preservativo. Preservativos de ejemplo se
han descrito anteriormente, con alcoholes aromáticos como benzil o
fenil alcohol siendo los preservativos preferidos. La cantidad de
preservativo utilizado se determina mediante la determinación de
diferentes concentraciones de preservativo para su compatibilidad
con la proteína y probando la eficacia de preservativo. Por ejemplo,
si el preservativo es un alcohol aromático (tal como benzil
alcohol), puede estar presente en una cantidad de entre
aproximadamente 0,1-2,0% y preferiblemente entre
aproximadamente 0,5-1,5%, pero más preferiblemente
aproximadamente 1,0-1,2%.
Preferiblemente, la formulación reconstituida
tiene menos de 6000 partículas por vial, que son de un tamaño
\geq 10 \mum.
Las formulaciones de la presente invención,
incluyendo pero no estando limitadas a formulaciones reconstituidas,
se puede administrar al mamífero que necesita tratamiento con
proteína de inmunoglobulina, preferiblemente un humano, según
procedimientos conocidos, tal como administración intravenosa como
un bolo o mediante infusión continua durante un periodo tiempo,
mediante rutas intramuscular, intraperitoneal, intracerobrospinal,
subcutánea, intra-articular, intrasinovial,
intratecal, oral, tópica o inhalación.
Tal como se describe aquí, las formulaciones se
pueden administrar al mamífero mediante administración subcutánea
(es decir, por debajo de la piel). Para estos propósitos, la
formulación se puede intentar utilizando una jeringuilla. Sin
embargo, otros dispositivos para la administración de la formulación
están disponibles, tal como dispositivos de inyección (por
ejemplo los dispositivos Inject-ease^{TM} y
Genject^{TM}); lápices inyectores (tal como el GenPen^{TM}),
dispositivo sin agujas (por ejemplo MediJector^{TM} y
BioJector^{TM}); y sistemas de suministro de parche
subcutáneo.
La dosis apropiada ("cantidad terapéuticamente
efectiva") de la proteína de inmunoglobulina dependerá, por
ejemplo, de la condición a tratar, la severidad y el transcurso de
la condición, de si la proteína se administra para propósitos
preventivos o terapéuticos, de la previa terapia, de la historia
clínica del paciente y la respuesta la proteína, del tipo de
proteína utilizada, y de la discreción del médico que lo atiende.
La proteína de inmunoglobulina se administra adecuadamente al
paciente de una vez o a lo largo de una serie de tratamientos y se
podrá administrar al paciente en cualquier momento para diagnóstico.
La proteína de inmunoglobulina se pueda administrar como el único
tratamiento con conjunción con otros fármacos o terapias útiles en
el tratamiento de la condición en cuestión.
Si la proteína de la inmunoglobulina de elección
es un anticuerpo, entre aproximadamente 0,1-20 mg/kg
es la dosis candidata inicial para administración al paciente, por
ejemplo, en una o más administraciones separadas. Sin embargo,
otros regímenes de dosis pueden ser útiles. El progreso de esta
terapia se monitoriza fácilmente mediante técnicas
convencionales.
Las utilizaciones de una formulación
anti-IgE (por ejemplo,
rhuMAbE-25, rhMAbE-26) incluyen el
tratamiento o la profilaxis de trastornos alérgicos, infecciones de
parásitos, cistitis intersticial y asma mediadas con IgE, por
ejemplo. Dependiendo de la enfermedad o trastorno a tratar, se
administra una cantidad terapéutica mente efectiva (por
ejemplo entre aproximadamente 1-15 mg/kg) del
anticuerpo anti-IgE al paciente.
En otra realización de la invención, se
proporciona un artículo de fabricación que contiene la formulación
tal como se define en las reivindicaciones y proporciona
preferiblemente instrucciones para su uso. El artículo de
fabricación comprende un recipiente. Recipientes adecuados incluyen,
por ejemplo, botellas, viales (por ejemplo viales de doble cámara),
jeringuillas (tal como jeringuillas de doble cámara) y tubos de
prueba. El recipiente puede estar formado a partir una variedad de
materiales, tal como vidrio o plástico. El recipiente mantiene la
formulación tal como se definen las reivindicaciones y la etiqueta
en, o asociada con, el recipiente puede indicar las instrucciones
de uso. La etiqueta también puede indicar que la formulación es útil
o está pensada para administración subcutánea. El recipiente que
contiene la formulación puede ser un vial de uso múltiple, que
permite administraciones repetidas (por ejemplo, entre
2-6 administraciones) de la formulación. El
artículo de fabricación también puede incluir otros materiales
deseables desde un punto de vista comercial y del usuario,
incluyendo otros tampones, diluyentes, filtros, agujas, jeringuillas
e inserciones de empaquetado con instrucciones de uso.
La invención se entenderá de manera más completa
mediante la referencia a los siguientes ejemplos. Sin embargo, no
debe construirse como limitativos del alcance de la invención.
Los efectos de las concentraciones de proteínas
sobre la viscosidad de una formulación de anticuerpo monoclonal
anti-IgE recombinante (rhuMAb E25) se estudiaron a
25ºC. Es anticuerpo es un anticuerpo monoclonal
anti-IgE humanizado que se ha desarrollado por parte
de Genentech Inc. como un agente terapéutico potencial para el
tratamiento de rinitis alérgica y asma alérgico (Presta et
al., J. Immunol. 151(5): 2623-2632
(1993)(PCT/US92/06860). El rhuMAb E25 formulado se formuló en una
concentración final de 40 mg/ml, 85 mM Sacarosa, 5 mM Histidina,
0,01% Polisorbato 20 y siguiendo en viales de 5 cc. Las muestras se
congelaron a continuación entre 5ºC y -50ºC en 45 minutos y se
siguió mediante un aumento secuencial en la temperatura de
almacenamiento del liofilizador dedicados centígrados por hora
desde -50ºC a 25ºC. Se realizó una etapa de secado a una temperatura
de almacenamiento de 25ºC y una presión de cámara de 50 mTorr
durante 39 horas. El rhuMAb E25 liofilizado se reconstituyó con
SWFI para producir una solución con rhuMAb E25 a 125 mg/ml, 266 mM
sacarosa, 16 mM histidina, 0,03% polisorbato 20.
La viscosidad de las muestras reconstituidas se
midió en un viscosímetro capilar Cannon-Fenske
Routine (Industrial Research Glassware LTD). Las muestras se
midieron aproximadamente en 8 ml con una pipeta de vidrio y se
cargaron en un viscosímetro capilar de tamaño 50 para muestras del
líquido con viscosidad cinemática entre 0,8 y 4 cs o tamaño 200
para las de entre 20 y 100 cs. La temperatura de la muestra se
mantuvo a 25ºC en un baño de agua con un sistema de control de
temperatura digital. El viscosímetro se colocó en soporte
verticalmente y se insertó en el baño de agua, se mantuvo a una
temperatura fija. Se midió el tiempo de emanación permitiendo que
la muestra del líquido fluyera libremente hacia abajo pasadas las
marcas. Se calculó la viscosidad cinemática de la muestra líquida
en centistokes mediante la multiplicación del tiempo de emanación en
segundos mediante las constantes del viscosímetro (0,004 para el
tamaño 50 y 0,015 para el tamaño 100). La viscosidad de la solución
E25 depende mucho de la concentración de las moléculas de proteína
(figura 1). Aumenta de manera exponencial con el aumento de la
concentración de rhuMAb E25. A 25ºC, el rhuMAb E25 reconstituido a
125 mg/ml es aproximadamente 80 veces más viscoso que el agua.
\vskip1.000000\baselineskip
El rhuMAb E25 liofilizado del ejemplo 1 se
reconstituyó con diferentes concentraciones de solución de NaCl. La
viscosidad de la solución reconstituida se midió a 25ºC en un
viscosímetro capilar Cannon-Fenske Routine
utilizando el mismo procedimiento que el descrito en el ejemplo
1.
Los resultados tal como se muestran en la figura
2 se muestran que la adición de NaCl puede reducir
significativamente la viscosidad de la formulación de proteína. El
rhuMAb E25 reconstituido con 100 mM NaCl proporcionará la solución
que es aproximadamente cuatro veces menos viscosa que la
reconstituida con SWFI.
La preparación de una formulación liofilizada de
rhuMAb E25 con 100 mM NaCl resultó en una solución ligeramente
hipertónica. Sin embargo, tal como se indicó anteriormente, una
isotonicidad estricta no es absolutamente necesaria porque el daño
en el tejido se detectó solamente en niveles de tonicidad
extremadamente altos (1300 mOsmol/Kg).
Así, la administración de una formulación que
contiene una concentración mayor de sal (100 mM a 200 mM NaCl
resultante en una osmolaridad de \sim600 a \sim700 mOsmol/Kg
para los materiales liofilizados de rhuMAb E25 actuales) tal como
se contempla aquí, para reducir la viscosidad de la formulación, no
parece que presente un riesgo de daños en el tejido el sitio de
administración.
\vskip1.000000\baselineskip
Los efectos de las diferentes sales sobre la
viscosidad de la solución rhuMAb E25 se estudiaron a 25ºC. El
rhuMAb E25 liofilizado se reconstituyó primero con SWFI para
producir una solución con rhuMAb E25 a 125 mg/ml, 266 mM sacarosa,
16 mM histidina, 0,03% Polisorbato 20. Las muestras se diluyeron a
continuación con 10 mM histidina, 250 mM sacarosa, pH 6,0 con una
concentración final de 40 mg/ml. A continuación se añadieron varias
salas concentradas a la solución para llevar la concentración de sal
final entre 0-200 mM. La viscosidad de la solución
se determinó en un viscosímetro capilar
Cannon-Fenske Routine utilizando el mismo
procedimiento que el descrito en el ejemplo 1.
Los resultados se muestran en la figura 3.
Aunque cada sal muestra un impacto ligeramente diferente sobre el
cambio de viscosidad, parece que siguen una tendencia similar
mediante la cual la viscosidad de la solución disminuye con el
aumento en la concentración del tampón y resistencia iónica.
\vskip1.000000\baselineskip
También se estudiaron los efectos de diferentes
tampones sobre la viscosidad de la solución de rhuMAbE25 a 25ºC.
Una formulación líquida que contiene 80 mg/ml de rhuMAb E25, 50 mM
histidina, 150 mM trehalosa y 0,05% de Polisorbato 20 se añadió con
diferentes cantidades de componentes de histidina, acetato o tampón
de succinato. El pH de la muestra se mantuvo a \sim6,0 para toda
la preparación. La viscosidad de la solución se determinó en un
viscosímetro capilar Cannon-Fenske Routine
utilizando el mismo procedimiento tal como se describe en el
Ejemplo 1.
Tal como se muestra en la Figura 4, la
viscosidad de la solución que contiene tampones de histidina o
acetato disminuye al aumentar la concentración del tampón hasta 200
mM. Sin embargo, para el tampón de succinato, la viscosidad de la
solución disminuye solamente en baja concentración del tampón
(<100 mM), pero no en alta concentración del tampón (>200
mM). Similares resultados también se han observado en otros tampones
que contienen componentes de tampón multivalentes cargados
negativamente, tal como fosfato, citrato y carbonato.
\vskip1.000000\baselineskip
Este ejemplo usó una segunda generación de
anticuerpo monoclonal anti-IgE, rhuMAb E26. Este
anticuerpo monoclonal es un homólogo del rhuMAb E25 con cinco
diferencia de residuos de aminoácidos en la región CDR I en la
cadena ligera y se describe en la patente WO 99/01556. El rhuMAb E26
recombinante también se expresó en la línea celular CHO y se
purificó con procedimientos de cromatografía similares tal como se
describen anteriormente para rhuMAb E25. Las muestras se formularon
en 5 mM histidina y 275 mM sacarosa con una concentración de rhuMAb
E25 a 21 mg/ml. La viscosidad de las muestras se midió a 6ºC en un
viscosímetro capilar Cannon-Fenske Routine
utilizando el mismo procedimiento que el descrito en el Ejemplo
1.
Los efectos del NaCl sobre la viscosidad del
rhuMAb E26 se muestran en la figura 5. El resultado demuestra que
el aumento de la concentración de NaCl puede reducir de manera
efectiva la viscosidad de la solución de rhuMAb E26.
\vskip1.000000\baselineskip
Los efectos del pH sobre la viscosidad de un
anticuerpo monoclonal anti-IgE muy concentrado,
rhuMAb E25 en formulaciones líquidas se ha examinado en condiciones
hipotónicas e isotónicas. Las soluciones hipotónicas se prepararon
mediante la adición de pequeñas cantidades de 10% ácido acético o
0,5 M arginina en una solución de rhuMAb E25 no tamponada que se
concentró a \sim130 mg/ml en agua Milli-Q. Las
concentraciones finales del tampón y la sal totales se mantuvieron
a 17,5 mM. Las soluciones hipotónicas se mezclaron a continuación
con un pequeño volumen de 5 M NaCl para producir las soluciones
isotónicas con una concentración final de NaCl de aproximadamente
150 mM NaCl. La viscosidad de la solución se determinó a 25ºC en un
viscosímetro capilar Cannon-Fenske Routine
utilizando el mismo procedimiento que se describe en el Ejemplo 1.
Tal como se muestra en la figura 6, la viscosidad de la solución
rhuMAb E25 depende mucho del pH del tampón, especialmente en
soluciones muy hipotónicas. La adición de especies iónicas, tal como
NaCl, puede reducir significativamente estos efectos del pH.
\vskip1.000000\baselineskip
Los efectos del pH sobre la viscosidad de un
anticuerpo monoclonal anti-IgE reconstituido, rhuMAb
E25 también se han examinado en presencia de otros excipientes, tal
como trehalosa. El rhuMAb E25 liofilizado se reconstituyó con SWFI
y a continuación se dializó contra 20 mM Histidina, 250 mM
Trehalosa, a pH 5. La concentración de proteína es aproximadamente
94 mg/ml. El pH de la solución se ajustó con 1 M NaOH. La viscosidad
de la solución se determinó a 25ºC en un viscosímetro capilar
Cannon-Fenske Routine utilizando el mismo
procedimiento tal como se describe en el Ejemplo 1. Los resultados,
tal como se muestra en la figura 7, demostraron que la viscosidad
del anticuerpo se puede alterar significativamente mediante el pH de
la solución.
\vskip1.000000\baselineskip
Esta lista de referencias citadas por el
solicitante está prevista únicamente para ayudar al lector y no
forma parte del documento de patente europea. Aunque se ha puesto
el máximo cuidado en su realización, no se pueden excluir errores u
omisiones y la OEP declina cualquier responsabilidad en este
respecto.
\bullet WO 9704801 A [0003] [0006]
\bullet EP 0661060 A [0005]
\bullet WO 9901556 A [0011] [0142]
\bullet US 4816567 A [0028] [0029] [0071]
[0086] [0090]
\bullet US 5641870 A [0031]
\bullet EP 404097 A [0036]
\bullet WO 9311161 A [0036]
\bullet US 5500362 A [0040]
\bullet US 5821337 A [0040]
\bullet WO 8905859 A [0063]
\bullet US P4399216 A [0063]
\bullet US 5545807 A [0094]
\bullet US 5545806 A [0094]
\bullet US 5569825 A [0094]
\bullet US 5625126 A [0094]
\bullet US 5633425 A [0094]
\bullet US 5661016 A [0094]
\bullet WO 8101145 A [0095]
\bullet WO 8807378 A [0095]
\bullet US 4975278 A [0095]
\bullet WO 9308829 A [0100]
\bullet WO 9627011 A [0103]
\bullet WO 9404690 A [0104]
\bullet US 4676980 A [0105] [0105] [0112]
\bullet WO 9100360 A [0105] [0112]
\bullet WO 92200373 A [0105] [0112]
\bullet US P4676980 A [0112]
\bullet EP 03089 A [0112]
\bullet US 9206860 W [0132]
\bulletZietkiewicz et al.
Grzyby Drozdzopodobne, 1971, vol. 23,
869-870 [0004]
\bullet Basic and Clinical Immunology.
Appleton & Lange, 1994, 71 [0024]
\bulletKabat et al. Sequences
of Proteins of Immunological Interest. National Institutes of
Health, 1991 [0026]
\bulletKabat et al. Sequences
of Proteins of Immunological Interest. National Institute of
Health, 1991 [0027]
\bulletChothia, C. et al. J. Mol.
Biol., 1987, vol. 196, 901-917 [0027]
\bulletKohler et al. Nature,
1975, vol. 256, 495 [0028] [0071]
\bulletClackson et al. Nature,
1991, vol. 352, 624-628 [0028] [0085]
\bulletMarks et al. J. Mol.
Biol., 1991, vol. 222, 581-597 [0028]
[0085] [0093]
\bulletMorrison et al. Proc. Natl.
Acad. Sci. USA, 1984, vol. 81, 6851-6855
[0029]
\bulletZapata et al. Protein
Eng., 1995, vol. 8 (10), 1057-1062
[0031]
\bulletPluckthun. The Pharmacology of
Monoclonal Antibodies. Springer-Verlag,
1994, vol. 113, 269-315 [0035]
\bulletHollinger et al. Proc. Natl.
Acad. Sci. USA, 1993, vol. 90, 6444-6448
[0036] [0109]
\bulletJones et al. Nature,
1986, vol. 321, 522-525 [0038] [0089]
[0090]
\bulletReichmann et al. Nature,
1988, vol. 332, 323-329 [0038]
\bulletPresta. Curr. Op. Struct.
Biol., 1992, vol. 2, 593-596 [0038]
\bulletClynes et al. PNAS USA,
1998, vol. 95, 652-656 [0040]
\bullet M. Daëron. Annu. Rev.
Immunol., 1997, vol. 15, 203-234
[0041]
\bulletRavetch; Kinet. Annu.
Rev. Immunol., 1991, vol. 9, 457-92
[0041]
\bulletCapel et al.
Immunomethods, 1994, vol. 4, 25-34
[0041]
\bullet de Haas et al. J. Lab. Clin.
Med., 1995, vol. 126, 330-41 [0041]
\bulletGuyer et al. J.
Immunol., 1976, vol. 117, 587 [0041]
\bulletKim et al. J. Immunol.,
1994, vol. 24, 249 [0041]
\bulletGazzano-Santoro et al. J. Immunol. Methods, 1996, vol. 202, 163
[0043]
\bullet Peptide and Protein Drug Delivery.
Marcel Dekker, Inc, 1991, 247-301
[0044]
\bulletJones, A. Adv. Drug Delivery
Rev., 1993, vol. 10, 29-90 [0044]
\bullet Mammalian Cell Biotechnology: A
Practical Approach. IRL Press, 1991 [0063]
\bulletSambrook et al.
Molecular Cloning: A Laboratory Manual. Cold Spring Harbor
Press [0063]
\bulletShaw et al. Gene,
1983, vol. 23, 315 [0063]
\bulletGraham et al. Virology,
1978, vol. 52, 456-457 [0063]
\bulletGoding. Monoclonal Antibodies:
Principles and Practice. Academic Press, 1986,
59-103 [0072]
\bulletGoding. Monoclonal antibodies:
Principles and Practice. Academic Press, 1986,
59-103 [0073]
\bulletKozbor. J. Immunol.,
1984, vol. 133, 3001 [0074] [0080]
\bulletBrodeur et al.
Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications.
Marcel Dekker, Inc, 1987, 51-63 [0074]
[0080]
\bulletMunson et al. Anal.
Biochem., 1980, vol. 107, 220 [0076]
\bulletGoding. Monoclonal Antibodies:
Principals and Practice. Academic Press, 1986,
59-103 [0078]
\bulletMunson; Pollard.
Anal. Biochem., 1980, vol. 107, 220 [0081]
\bulletSkerra et al. Curr. Opinion
in Immunol., 1993, vol. 5, 256-262
[0084]
\bulletPlückthum. Immunol.
Revs., 1992, vol. 130, 151-188 [0084]
\bulletMcCafferty et al.
Nature, 1990, vol. 348, 552-554
[0085]
\bulletMarks et al.
Biol/Technology, 1992, vol. 10, 779-783
[0085]
\bulletWaterhouse et al. Nuc.
Acids. Res., 1993, vol. 21, 2265-2266
[0085]
\bulletMorrison et al. Proc. Natl
Acad. Sci. USA, 1984, vol. 81, 6851 [0086]
\bulletRiechmann et al. Nature,
1988, vol. 332, 323-329 [0089]
\bulletPresta. Curr. Opin. Struct.
Biol., 1992, vol. 2, 593-596 [0089]
\bulletRiechmann et al. Nature,
1988, vol. 332, 323-327 [0090]
\bulletVerhoeyen et al.
Science, 1988, vol. 239, 1534-1536
[0090]
\bulletSims et al. J. Immunol.,
1993, vol. 151, 2296 [0091]
\bulletChothia et al. J. Mol.
Biol., 1987, vol. 196, 901 [0091]
\bulletCarter et al. Proc. Natl.
Acad. Sci. USA, 1992, vol. 89, 4285 [0091]
\bulletPresta et al. J.
Immnol., 1993, vol. 151, 2623 [0091]
\bulletJakobovits et al. Proc.
Natl. Acad. Sci. USA, 1993, vol. 90, 2551 [0093]
\bulletJakobovits et al.
Nature, 1993, vol. 362, 255-258
[0093]
\bulletBruggermann et al. Year in
Immuno., 1993, vol. 7, 33 [0093]
\bulletHoogenboom et al. J. Mol.
Biol., 1991, vol. 227, 381 [0093]
\bulletHoogenboom; Winter.
J. Mol. Biol., 1991, vol. 227, 381 [0094]
\bulletMarks et al. J. Mol.
Biol., 1991, vol. 222, 581 [0094]
\bulletCole. Monoclonal Antibodies and
Cancer Therapy. Alan R. Liss, 1985, 77 [0094]
\bulletBoerner et al. J.
Immunol., 1991, vol. 147 (1), 86-95
[0094]
\bulletMarks. Bio/Technology,
1992, vol. 10, 779-783 [0094]
\bulletLonberg et al. Nature,
1994, vol. 368, 856-859 [0094]
\bulletMorrison. Nature,
1994, vol. 368, 812-13 [0094]
\bulletFishwild et al. Nature
Biotechnology, 1996, vol. 14, 845-51
[0094]
\bulletNeuberger. Nature
Biotechnology, 1996, vol. 14, 826 [0094]
\bulletLonberg; Huszar.
Intern. Rev. Immunol., 1995, vol. 13,
65-93 [0094]
\bulletMassey. Nature,
1987, vol. 328, 457-458 [0097]
\bulletNeuberger et al. Nature,
1984, vol. 312, 604-608 [0098]
\bulletMillstein et al. Nature,
1983, vol. 305, 537-539 [0100]
\bulletTraunecker et al. EMBO
J., 1991, vol. 10, 3655-3659 [0100]
\bulletSuresh et al. Methods in
Enzymology, 1986, vol. 121, 210 [0101] [0104]
\bulletShalaby et al. J. Exp.
Med., 1992, vol. 175, 217-225 [0108]
\bulletBrennan et al. Science,
1985, vol. 229, 81 [0107]
\bulletKostelny. J. Immunol.,
1992, vol. 148 (5), 1547-1553 [0109]
\bulletGruber. J. Immunol.,
1994, vol. 152, 5368 [0109]
\bulletTutt et al. J. Immunol.,
1991, vol. 147, 60 [0110]
\bulletRemington's Pharmaceutical
Sciences. 1980 [0118]
\bulletPresta et al. J.
Immunol., 1993, vol. 151 (5), 2623-2632
[0132]
Claims (32)
1. Formulación líquida estable que comprende una
inmunoglobulina en una cantidad de por lo menos 80 mg/ml y una sal
y/o tampón en una cantidad de por lo menos 100 mM, y que tiene una
viscosidad cinemática de 50 mm^{2}/s o menos a 25ºC.
2. Formulación según la reivindicación 1, que
comprende:
(a) dicha sal y/o tampón en una cantidad de
100-200 mM; o
(b) dicha sal y/o tampón en una cantidad de 200
mM.
\vskip1.000000\baselineskip
3. Formulación según la reivindicación 1, en la
que dicha sal y/o tampón deriva de:
(a) un ácido orgánico o inorgánico y un metal o
una amina que forman una base; o
(b) un aminoácido.
\vskip1.000000\baselineskip
4. Formulación según la reivindicación 3, en la
que:
(a) el metal que forma la base se selecciona
entre el grupo que consiste en metales alcalinos, metales
alcalinotérreos, Al, Zn y Fe; o
(b) la amina que forma la base es
NR_{4}^{+}, donde R es independientemente H o
C_{1-4} alquilo.
\vskip1.000000\baselineskip
5. Formulación según la reivindicación 1, en la
que la sal y/o tampón derivan de un aminoácido.
6. Formulación según la reivindicación 1, en la
que dicha sal se selecciona entre el grupo que consiste en cloruro
de sodio, tiocianato de sodio, tiocianato de amonio, sulfato de
amonio, cloruro de amonio, cloruro de calcio, clorhidrato de
arginina, cloruro de zinc y acetato de sodio.
7. Formulación según la reivindicación 1,
que:
(a) tiene una viscosidad cinemática de 40
mm^{2}/s o menos a 25ºC; o
(b) tiene una viscosidad cinemática de 30
mm^{2}/s o menos a 25ºC; o
(c) tiene una viscosidad cinemática de 20
mm^{2}/s o menos a 25ºC; o
(d) tiene una viscosidad cinemática de 10 a 30
mm^{2}/s a 25ºC.
\vskip1.000000\baselineskip
8. Formulación según la reivindicación 1, que
también comprende un lioprotector.
9. Formulación según la reivindicación 8, en la
que dicho lioprotector es un azúcar.
10. Formulación según la reivindicación 9, en la
que dicho azúcar es sacarosa o trehalosa.
11. Formulación según la reivindicación 9, que
comprende dicho azúcar en una cantidad de 60-300
mM.
12. Formulación según la reivindicación 1, que
también comprende un tensoactivo.
13. Formulación según la reivindicación 1, que
es hipertónica.
14. Formulación según la reivindicación 1, que
es una formulación reconstituida.
15. Formulación según la reivindicación 14, en
la que la concentración de proteína inmunoglobulina en la
formulación reconstituida es 2-40 veces mayor que
la concentración de proteína inmunoglobulina en la mezcla antes de
la liofilización.
16. Formulación según la reivindicación 1, en la
que dicha inmunoglobulina tiene un peso molecular de por lo menos
15-20 kD.
\newpage
17. Formulación según la reivindicación 1, en la
que dicha inmunoglobulina es un anticuerpo dirigido contra un
antígeno específico.
18. Formulación según la reivindicación 17, en
la que dicho anticuerpo está dirigido contra IgE, un elemento de la
familia de receptores HER, una molécula de adhesión celular o una
subunidad de la misma, o un factor de crecimiento.
19. Formulación según la reivindicación 18, en
la que el anticuerpo es rhuMAb-E25,
rhuMAb-E26 o rhuMAb-E27.
20. Formulación según la reivindicación 1, que
es una formulación farmacéutica líquida.
21. Formulación según la reivindicación 20, que
es para administración subcutánea.
22. Procedimiento de reducción de la viscosidad
cinemática de una formulación que contiene una inmunoglobulina en
una cantidad de por lo menos 80 mg/ml, que comprende la adición de
una sal y/o tampón en una cantidad de por lo menos 100 mM.
23. Procedimiento según la reivindicación 22, en
el que dicha sal se selecciona entre el grupo que consiste en
cloruro de sodio, tiocianato de sodio, tiocianato de amonio, sulfato
de amonio, cloruro de amonio, cloruro de calcio e clorhidrato de
arginina.
24. Procedimiento según la reivindicación 22, en
el que dicha inmunoglobulina es un anticuerpo dirigido contra un
antígeno específico.
25. Procedimiento según la reivindicación 24, en
el que dicho anticuerpo está dirigido contra IgE.
26. Procedimiento según la reivindicación 25, en
el que el anticuerpo es rhuMAb-E25,
rhuMAb-E26 o rhuMAb-E27.
27. Procedimiento según la reivindicación 22, en
el que dicha formulación es una formulación reconstituida.
28. Procedimiento según la reivindicación 22, en
el que la formulación es hipertónica.
29. Procedimiento según la reivindicación 27, en
el que la concentración de proteína en dicha formulación
reconstituida es 2-40 veces mayor que la
concentración de proteína en la mezcla antes de la
liofilización.
30. Procedimiento según la reivindicación 22, en
el que la viscosidad cinemática de dicha formulación se reduce a 50
mm^{2}/s o menos tal como se determina a 25ºC.
31. Artículo de fabricación que comprende un
recipiente que contiene la formulación según una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 21.
32. Artículo de fabricación según la
reivindicación 31, que también comprende instrucciones para la
administración de dicha formulación.
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US24010700P | 2000-10-12 | 2000-10-12 | |
| US240107P | 2000-10-12 | ||
| US29383401P | 2001-05-24 | 2001-05-24 | |
| US293834P | 2001-05-24 | ||
| PCT/US2001/042487 WO2002030463A2 (en) | 2000-10-12 | 2001-10-04 | Reduced-viscosity concentrated protein formulations |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2332402T3 true ES2332402T3 (es) | 2010-02-04 |
| ES2332402T5 ES2332402T5 (es) | 2018-05-14 |
Family
ID=26933147
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES01981824.4T Expired - Lifetime ES2332402T5 (es) | 2000-10-12 | 2001-10-04 | Formulaciones de proteína concentradas de viscosidad reducida |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US6875432B2 (es) |
| EP (2) | EP2116265B1 (es) |
| JP (2) | JP4340062B2 (es) |
| AT (1) | ATE442862T2 (es) |
| AU (2) | AU2002213441B2 (es) |
| CA (1) | CA2423227C (es) |
| CY (1) | CY1110547T1 (es) |
| DE (1) | DE60139944D1 (es) |
| DK (1) | DK1324776T4 (es) |
| ES (1) | ES2332402T5 (es) |
| IL (3) | IL155002A0 (es) |
| PT (1) | PT1324776E (es) |
| SI (1) | SI1324776T2 (es) |
| WO (1) | WO2002030463A2 (es) |
Families Citing this family (257)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2312184T3 (es) | 1997-03-21 | 2009-02-16 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Agentes preventivos terapeuticos para el tratamiento de esclerosis multiple, que contienen anticuerpos anti-receptores de il-6 antagonistas. |
| JP4813660B2 (ja) | 1998-11-27 | 2011-11-09 | ダーウィン ディスカバリー リミテッド | 骨鉱化作用を増加するための組成物および方法 |
| CN1245216C (zh) * | 1999-10-04 | 2006-03-15 | 希龙公司 | 稳定化的含多肽的液体药物组合物 |
| JP4340062B2 (ja) * | 2000-10-12 | 2009-10-07 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 粘度の減少した濃縮タンパク質製剤 |
| US8703126B2 (en) | 2000-10-12 | 2014-04-22 | Genentech, Inc. | Reduced-viscosity concentrated protein formulations |
| UA80091C2 (en) | 2001-04-02 | 2007-08-27 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Remedies for infant chronic arthritis-relating diseases and still's disease which contain an interleukin-6 (il-6) antagonist |
| EP2340849A1 (en) * | 2001-05-30 | 2011-07-06 | Genentech, Inc. | Anti-NGF antibodies for the treatment of various disorders |
| AU2006202688B2 (en) * | 2001-05-31 | 2009-01-22 | Genentech, Inc. | Stable liquid formulations of antibodies |
| GB0113179D0 (en) * | 2001-05-31 | 2001-07-25 | Novartis Ag | Organic compounds |
| US20080026068A1 (en) * | 2001-08-16 | 2008-01-31 | Baxter Healthcare S.A. | Pulmonary delivery of spherical insulin microparticles |
| ES2392073T3 (es) * | 2001-11-08 | 2012-12-04 | Abbott Biotherapeutics Corp. | Formulación farmacéutica líquida estable de anticuerpos IGG |
| NZ536475A (en) | 2002-05-24 | 2008-06-30 | Schering Corp | Neutralizing human anti-igfr antibody |
| US7425618B2 (en) * | 2002-06-14 | 2008-09-16 | Medimmune, Inc. | Stabilized anti-respiratory syncytial virus (RSV) antibody formulations |
| US20040002451A1 (en) * | 2002-06-20 | 2004-01-01 | Bruce Kerwin | Compositions of pegylated soluble tumor necrosis factor receptors and methods of preparing |
| EP1551875A4 (en) * | 2002-06-21 | 2006-06-28 | Biogen Idec Inc | TAMPON PREPARATIONS FOR CONCENTRATING ANTIBODIES AND METHODS FOR USE THEREOF |
| US20040033228A1 (en) | 2002-08-16 | 2004-02-19 | Hans-Juergen Krause | Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders |
| MY150740A (en) * | 2002-10-24 | 2014-02-28 | Abbvie Biotechnology Ltd | Low dose methods for treating disorders in which tnf? activity is detrimental |
| US20040191243A1 (en) * | 2002-12-13 | 2004-09-30 | Bei Chen | System and method for stabilizing antibodies with histidine |
| WO2004060343A1 (en) * | 2002-12-31 | 2004-07-22 | Nektar Therapeutics | Antibody-containing particles and compositions |
| DK1599222T3 (da) | 2003-01-08 | 2009-04-27 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Stabiliserede vandige pr parater omfattende v vsfaktorvej-inhibitor (TFPI) eller v vsfaktorvej-inhibitorvariant |
| US20040208870A1 (en) * | 2003-01-30 | 2004-10-21 | Medimmune, Inc. | Stabilized high concentration anti-integrin alphanubeta3 antibody formulations |
| US20050158303A1 (en) * | 2003-04-04 | 2005-07-21 | Genentech, Inc. | Methods of treating IgE-mediated disorders comprising the administration of high concentration anti-IgE antibody formulations |
| AU2004229335C1 (en) | 2003-04-04 | 2010-06-17 | Genentech, Inc. | High concentration antibody and protein formulations |
| GB2401040A (en) * | 2003-04-28 | 2004-11-03 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Method for treating interleukin-6 related diseases |
| US7381409B2 (en) | 2003-06-16 | 2008-06-03 | Celltech R&D, Inc. | Antibodies specific for sclerostin and methods of screening and use therefor |
| US7736644B2 (en) * | 2003-06-27 | 2010-06-15 | Amgen Fremont Inc. | Antibodies directed to the deletion mutants of epidermal growth factor receptor and uses thereof |
| DE10348550A1 (de) * | 2003-10-20 | 2005-06-16 | Hexal Biotech Forschungsgmbh | Stabile wässrige G-CSF-haltige Zusammensetzungen |
| CN1878570B (zh) * | 2003-11-04 | 2010-10-06 | 力奇制药公司 | 包含粒细胞集落形成刺激因子的稳定的药物组合物 |
| US20050136055A1 (en) * | 2003-12-22 | 2005-06-23 | Pfizer Inc | CD40 antibody formulation and methods |
| EP1712240B1 (en) * | 2003-12-25 | 2015-09-09 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Stable water-based medicinal preparation containing antibody |
| WO2005072772A1 (en) * | 2004-01-30 | 2005-08-11 | Suomen Punainen Risti Veripalvelu | Pharmaceutical compositions |
| EP1753404A1 (en) * | 2004-05-12 | 2007-02-21 | Baxter International Inc. | Microspheres comprising protein and showing injectability at high concentrations of said agent |
| US8728525B2 (en) * | 2004-05-12 | 2014-05-20 | Baxter International Inc. | Protein microspheres retaining pharmacokinetic and pharmacodynamic properties |
| WO2005112885A2 (en) * | 2004-05-12 | 2005-12-01 | Baxter International Inc. | Oligonucleotide-containing microspheres, their use for the manufacture of a medicament for treating diabetes type 1 |
| CA2566079A1 (en) * | 2004-05-12 | 2005-12-01 | Terrence L. Scott | Nucleic acid microspheres, production and delivery thereof |
| MX2007000891A (es) * | 2004-07-23 | 2007-04-18 | Genentech Inc | Cristalizacion de anticuerpos o fragmentos de ellos. |
| US7772182B2 (en) * | 2004-08-05 | 2010-08-10 | Alza Corporation | Stable suspension formulations of erythropoietin receptor agonists |
| US20060029551A1 (en) * | 2004-08-05 | 2006-02-09 | Kui Liu | Stable particle formulations of erythropoietin receptor agonists |
| TW200621282A (en) * | 2004-08-13 | 2006-07-01 | Wyeth Corp | Stabilizing formulations |
| US7572893B2 (en) * | 2004-08-17 | 2009-08-11 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | IL-1 antagonist formulations |
| US7655758B2 (en) | 2004-08-17 | 2010-02-02 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Stable liquid IL-1 antagonist formulations |
| US20060051347A1 (en) | 2004-09-09 | 2006-03-09 | Winter Charles M | Process for concentration of antibodies and therapeutic products thereof |
| JO3000B1 (ar) | 2004-10-20 | 2016-09-05 | Genentech Inc | مركبات أجسام مضادة . |
| HUE034109T2 (en) | 2005-03-25 | 2018-01-29 | Regeneron Pharma | VEGF antagonist formulations |
| CN101198698B (zh) | 2005-03-31 | 2014-03-19 | 中外制药株式会社 | 通过调节多肽缔合制备多肽的方法 |
| US20060233810A1 (en) * | 2005-04-15 | 2006-10-19 | Yaolin Wang | Methods and compositions for treating or preventing cancer |
| US7592429B2 (en) | 2005-05-03 | 2009-09-22 | Ucb Sa | Sclerostin-binding antibody |
| EP1888637A2 (en) | 2005-05-19 | 2008-02-20 | Amgen Inc. | Compositions and methods for increasing the stability of antibodies |
| WO2006138181A2 (en) | 2005-06-14 | 2006-12-28 | Amgen Inc. | Self-buffering protein formulations |
| US20070135343A1 (en) * | 2005-11-01 | 2007-06-14 | Wyeth | Sodium chloride solution for drug reconstitution or dilution |
| US9309316B2 (en) | 2005-12-20 | 2016-04-12 | Bristol-Myers Squibb Company | Stable subcutaneous protein formulations and uses thereof |
| JP5405122B2 (ja) * | 2005-12-21 | 2014-02-05 | ワイス・エルエルシー | 低粘度のタンパク質製剤およびその用途 |
| JP5231810B2 (ja) * | 2005-12-28 | 2013-07-10 | 中外製薬株式会社 | 抗体含有安定化製剤 |
| AR059066A1 (es) | 2006-01-27 | 2008-03-12 | Amgen Inc | Combinaciones del inhibidor de la angiopoyetina -2 (ang2) y el inhibidor del factor de crecimiento endotelial vascular (vegf) |
| JP2009525986A (ja) * | 2006-02-03 | 2009-07-16 | メディミューン，エルエルシー | タンパク質製剤 |
| EP2009101B1 (en) | 2006-03-31 | 2017-10-25 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Antibody modification method for purifying bispecific antibody |
| CN104761637B (zh) | 2006-03-31 | 2021-10-15 | 中外制药株式会社 | 调控抗体血液动力学的方法 |
| JP2009534390A (ja) * | 2006-04-21 | 2009-09-24 | アムジェン インコーポレイテッド | 生物医薬品製剤のための緩衝剤 |
| SI2944306T1 (sl) | 2006-06-16 | 2021-04-30 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Formulacije antagonista VEGF, primerne za intravitrealno dajanje |
| EP2647712A3 (en) * | 2006-08-04 | 2013-11-20 | Baxter International Inc | Microsphere-based composition for preventing and/or reversing new-onset autoimmune diabetes |
| JP5623743B2 (ja) | 2006-10-20 | 2014-11-12 | アムジエン・インコーポレーテツド | 安定なポリペプチド製剤 |
| EP2106261A4 (en) * | 2006-11-07 | 2010-05-26 | Merck Sharp & Dohme | ANTAGONISTS OF PCSK9 |
| WO2008057459A2 (en) * | 2006-11-07 | 2008-05-15 | Merck & Co., Inc. | Antagonists of pcsk9 |
| WO2008086395A2 (en) * | 2007-01-09 | 2008-07-17 | Wyeth | Anti-il-13 antibody formulations and uses thereof |
| MX2009010179A (es) * | 2007-03-22 | 2010-03-15 | Imclone Llc | Formulaciones estables de anticuerpo. |
| BRPI0809435A2 (pt) | 2007-03-27 | 2014-09-09 | Sea Lane Biotechnologies, Llc | Constructos e bibliotecas que compreendem sequências de cadeia leve substituida de anticorpos |
| NZ598881A (en) | 2007-03-29 | 2013-11-29 | Abbvie Inc | Crystalline anti-human il-12 antibodies |
| US20100209434A1 (en) * | 2007-03-30 | 2010-08-19 | Medimmune, Llc | Antibody formulation |
| CA2682135A1 (en) * | 2007-04-17 | 2008-10-30 | Baxter International Inc. | Nucleic acid microparticles for pulmonary delivery |
| EP2152233A1 (en) | 2007-05-02 | 2010-02-17 | Novo Nordisk Health Care AG | High concentration factor vii polypeptide formulations comprising an aromatic preservative and an antioxidant |
| US8198237B2 (en) * | 2007-05-15 | 2012-06-12 | Stryker Corporation | Concentrated protein preparations of bone morphogenetic proteins and methods of use thereof |
| MX2009012786A (es) * | 2007-06-01 | 2009-12-10 | Hoffmann La Roche | Purificacion de inmunoglobulina. |
| JOP20080381B1 (ar) | 2007-08-23 | 2023-03-28 | Amgen Inc | بروتينات مرتبطة بمولدات مضادات تتفاعل مع بروبروتين كونفيرتاز سيتيليزين ككسين من النوع 9 (pcsk9) |
| CL2008002775A1 (es) | 2007-09-17 | 2008-11-07 | Amgen Inc | Uso de un agente de unión a esclerostina para inhibir la resorción ósea. |
| CN101874042B9 (zh) | 2007-09-26 | 2019-01-01 | 中外制药株式会社 | 利用cdr的氨基酸取代来改变抗体等电点的方法 |
| US8637021B2 (en) * | 2007-11-12 | 2014-01-28 | Ares Trading S.A. | Formulations for TACI-immunoglobulin fusion proteins |
| US8883146B2 (en) | 2007-11-30 | 2014-11-11 | Abbvie Inc. | Protein formulations and methods of making same |
| PE20091174A1 (es) | 2007-12-27 | 2009-08-03 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Formulacion liquida con contenido de alta concentracion de anticuerpo |
| WO2009086400A2 (en) * | 2007-12-28 | 2009-07-09 | Baxter International Inc. | Recombinant vwf formulations |
| US11197916B2 (en) | 2007-12-28 | 2021-12-14 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Lyophilized recombinant VWF formulations |
| AR070315A1 (es) | 2008-02-07 | 2010-03-31 | Merck & Co Inc | Anticuerpos 1b20 antagonistas de pcsk9 |
| AR070316A1 (es) | 2008-02-07 | 2010-03-31 | Merck & Co Inc | Antagonistas de pcsk9 (proproteina subtilisina-kexina tipo 9) |
| WO2009141418A1 (en) * | 2008-05-23 | 2009-11-26 | Novo Nordisk A/S | Formulations of peg-functionalised serine proteases with high concentrations of an aromatic preservative |
| JP5642065B2 (ja) * | 2008-05-23 | 2014-12-17 | ノボ ノルディスク ヘルス ケア アーゲー | ペグ化されたｇｌａ−ドメイン含有タンパク質を含む低粘度組成物 |
| RU2011101969A (ru) * | 2008-06-30 | 2012-08-10 | Ново Нордиск А/С (DK) | Антитела к человеческому интерлейкину-20 |
| DK2349314T3 (da) * | 2008-10-21 | 2013-05-27 | Baxter Int | Lyofiliserede præparater af rekombinant VWF |
| MX2011005672A (es) * | 2008-11-28 | 2011-06-20 | Abbott Lab | Composiciones de anticuerpo estables y metodos para estabilizar a las mismas. |
| DK2373681T3 (en) | 2008-12-10 | 2017-04-24 | Glaxosmithkline Llc | PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS OF ALBIGLUTID |
| JO3672B1 (ar) | 2008-12-15 | 2020-08-27 | Regeneron Pharma | أجسام مضادة بشرية عالية التفاعل الكيماوي بالنسبة لإنزيم سبتيليسين كنفرتيز بروبروتين / كيكسين نوع 9 (pcsk9). |
| US20130064834A1 (en) | 2008-12-15 | 2013-03-14 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating hypercholesterolemia using antibodies to pcsk9 |
| WO2010100135A1 (en) | 2009-03-05 | 2010-09-10 | Ablynx N.V. | Novel antigen binding dimer-complexes, methods of making/avoiding and uses thereof |
| US9265834B2 (en) | 2009-03-05 | 2016-02-23 | Ablynx N.V. | Stable formulations of polypeptides and uses thereof |
| BRPI1006519A2 (pt) | 2009-03-06 | 2016-08-09 | Genentech Inc | formulação de anticorpos |
| NZ595694A (en) * | 2009-05-04 | 2013-09-27 | Abbvie Biotechnology Ltd | Stable high protein concentration formulations of human anti-tnf-alpha-antibodies |
| JP2012526839A (ja) | 2009-05-13 | 2012-11-01 | シー レーン バイオテクノロジーズ， エルエルシー | インフルエンザウイルスに対する中和分子 |
| MX2012000100A (es) * | 2009-07-01 | 2012-04-02 | Fresenius Med Care Hldg Inc | Dispositivos de suministro de farmaco y sistemas y metodos relacionados. |
| US9345661B2 (en) | 2009-07-31 | 2016-05-24 | Genentech, Inc. | Subcutaneous anti-HER2 antibody formulations and uses thereof |
| WO2011017330A1 (en) * | 2009-08-04 | 2011-02-10 | Genentech Inc | Concentrated polypeptide formulations with reduced viscosity |
| US8221753B2 (en) | 2009-09-30 | 2012-07-17 | Tracon Pharmaceuticals, Inc. | Endoglin antibodies |
| US8454956B2 (en) * | 2009-08-31 | 2013-06-04 | National Cheng Kung University | Methods for treating rheumatoid arthritis and osteoporosis with anti-IL-20 antibodies |
| LT2805731T (lt) | 2009-09-03 | 2019-02-11 | Ablynx N.V. | Stabilios polipeptidų kompozicijos ir jų panaudojimas |
| AR078161A1 (es) | 2009-09-11 | 2011-10-19 | Hoffmann La Roche | Formulaciones farmaceuticas muy concentradas de un anticuerpo anti cd20. uso de la formulacion. metodo de tratamiento. |
| CN104928336B (zh) | 2009-10-26 | 2020-05-08 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 用于生产糖基化免疫球蛋白的方法 |
| JP6139885B2 (ja) * | 2009-10-26 | 2017-05-31 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | 治療的抗ＩｇＥ抗体に特異的な抗体を検出するためのアッセイ及びアナフィラキシーにおけるそれらの使用 |
| EP3409289B1 (en) * | 2010-02-26 | 2020-09-30 | Novo Nordisk A/S | Stable antibody containing compositions |
| RS59830B1 (sr) | 2010-03-01 | 2020-02-28 | Bayer Healthcare Llc | Optimizovana monoklonska antitela protiv inhibitora puta faktora tkiva (tfpi) |
| BR112012022223B1 (pt) * | 2010-03-01 | 2022-08-09 | Cytodyn Inc | Formulação de proteína concentrada, uso e método de preparação da mesma |
| US20110223208A1 (en) | 2010-03-09 | 2011-09-15 | Beth Hill | Non-Aqueous High Concentration Reduced Viscosity Suspension Formulations |
| US9072668B2 (en) | 2010-03-09 | 2015-07-07 | Janssen Biotech, Inc. | Non-aqueous high concentration reduced viscosity suspension formulations of antibodies |
| CA2792125C (en) | 2010-03-22 | 2019-02-12 | Genentech, Inc. | Compositions and methods useful for stabilizing protein-containing formulations |
| CN102958538A (zh) * | 2010-05-03 | 2013-03-06 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 用于降低含有蛋白质的制剂的粘度的组合物和方法 |
| JP2013525491A (ja) | 2010-05-04 | 2013-06-20 | グラクソスミスクライン・リミテッド・ライアビリティ・カンパニー | 心血管障害を治療または予防し心血管保護を提供する方法 |
| SMT202000095T1 (it) | 2010-05-14 | 2020-03-13 | Amgen Inc | Formulazioni di anticorpi anti-sclerostina ad alta concentrazione |
| RU2012153786A (ru) | 2010-05-28 | 2014-07-10 | Ново Нордиск А/С | Стабильные многодозовые композиции, содержащие антитело и консервант |
| AU2011274363A1 (en) * | 2010-07-02 | 2013-01-24 | Medimmune, Llc | Antibody formulations |
| EP2787007A3 (en) | 2010-11-08 | 2015-03-11 | F. Hoffmann-La Roche AG | Subcutaneously administered ANTI-IL-6 receptor antibody |
| CN103458926B (zh) | 2010-11-11 | 2016-10-26 | 艾伯维生物技术有限公司 | 改进的高浓度抗TNF α 抗体液体制剂 |
| KR101962483B1 (ko) | 2010-11-17 | 2019-03-29 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 혈액응고 제viii 인자의 기능을 대체하는 기능을 갖는 다중특이성 항원 결합 분자 |
| MX385311B (es) | 2011-01-28 | 2025-03-18 | Sanofi Biotechnology | Anticuerpos humanos frente a pcsk9 para su uso en métodos de tratamiento de grupos concretos de pacientes. |
| EP2671176B1 (en) | 2011-01-31 | 2019-01-09 | Fresenius Medical Care Holdings, Inc. | Preventing over-delivery of drug |
| EP2673018B1 (en) | 2011-02-08 | 2019-04-10 | Fresenius Medical Care Holdings, Inc. | Magnetic sensors and related systems and methods |
| EP2681242B1 (en) | 2011-03-01 | 2018-01-24 | Amgen Inc. | Sclerostin and dkk-1 bispecific binding agents |
| EP2688910B1 (en) | 2011-03-25 | 2019-05-29 | Amgen Inc. | Anti-sclerostin antibody crystals and formulations thereof |
| SG193964A1 (en) * | 2011-04-07 | 2013-11-29 | Glaxosmithkline Llc | Formulations with reduced viscosity |
| WO2012138958A1 (en) * | 2011-04-07 | 2012-10-11 | Glaxosmithkline Llc | Formulations with reduced viscosity |
| JO3283B1 (ar) | 2011-04-26 | 2018-09-16 | Sanofi Sa | تركيب يتضمن أفليبيرسيبت, حمض فولينيك, 5- فلورويوراسيل (5- Fu) وإرينوسيتان (FOLFIRI) |
| JOP20200043A1 (ar) | 2011-05-10 | 2017-06-16 | Amgen Inc | طرق معالجة أو منع الاضطرابات المختصة بالكوليسترول |
| AR087305A1 (es) | 2011-07-28 | 2014-03-12 | Regeneron Pharma | Formulaciones estabilizadas que contienen anticuerpos anti-pcsk9, metodo de preparacion y kit |
| EP2736928B1 (en) | 2011-07-28 | 2019-01-09 | i2 Pharmaceuticals, Inc. | Sur-binding proteins against erbb3 |
| SI2739311T1 (en) | 2011-08-04 | 2018-07-31 | Amgen Inc. | Method for the treatment of bone defect defects |
| KR101993488B1 (ko) | 2011-09-01 | 2019-06-26 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 한외여과에 의해 고도로 농축된 항체를 포함하는 조성물의 제조 방법 |
| HUE069234T2 (hu) | 2011-09-16 | 2025-02-28 | Regeneron Pharma | Eljárások lipoprotein(a)-szint csökkentésére proprotein-konvertáz szubtilizin/kexin 9 (PCSK9) inhibitorának beadásával |
| CA2853112C (en) | 2011-10-25 | 2018-08-21 | Onclave Therapeutics Limited | Antibody formulations and methods |
| WO2013063510A1 (en) * | 2011-10-28 | 2013-05-02 | Integritybio Inc. | Protein formulations containing amino acids |
| AR088579A1 (es) | 2011-10-31 | 2014-06-18 | Genentech Inc | Formulaciones de anticuerpos |
| KR20140097256A (ko) | 2011-11-02 | 2014-08-06 | 할사이온, 인크. | 상처 치료를 위한 방법들 및 조성물들 |
| EP3854433A3 (en) | 2011-11-07 | 2021-10-27 | Battelle Memorial Institute | Processes for delivery of viscous drug therapies |
| RS53135B (sr) | 2011-11-24 | 2014-06-30 | Quimera Ingenieria Biomedica, S.L. | Kompleks dobijen iz hijaluronske kiseline ili njene soli i smeša hondroitin sulfata |
| EP2793940B1 (en) | 2011-12-22 | 2018-11-14 | i2 Pharmaceuticals, Inc. | Surrogate binding proteins |
| EP2797953B1 (en) | 2011-12-28 | 2020-06-03 | Amgen Inc. | Method of treating alveolar bone loss through the use of anti-sclerostin antibodies |
| NZ627859A (en) | 2012-01-23 | 2015-09-25 | Regeneron Pharma | Stabilized formulations containing anti-ang2 antibodies |
| US9144646B2 (en) | 2012-04-25 | 2015-09-29 | Fresenius Medical Care Holdings, Inc. | Vial spiking devices and related assemblies and methods |
| EA039663B1 (ru) | 2012-05-03 | 2022-02-24 | Амген Инк. | Применение антитела против pcsk9 для снижения сывороточного холестерина лпнп и лечения связанных с холестерином расстройств |
| PL2849723T3 (pl) | 2012-05-18 | 2018-10-31 | Genentech, Inc. | Formulacje o wysokim stężeniu przeciwciał monoklonalnych |
| AR092325A1 (es) | 2012-05-31 | 2015-04-15 | Regeneron Pharma | Formulaciones estabilizadas que contienen anticuerpos anti-dll4 y kit |
| JP6226966B2 (ja) | 2012-06-01 | 2017-11-08 | フェリング ベスローテン フェンノートシャップ | デガレリクスの製造 |
| JP6629069B2 (ja) | 2012-06-06 | 2020-01-15 | ゾエティス・エルエルシー | イヌ化抗ｎｇｆ抗体およびその方法 |
| MX2014014717A (es) * | 2012-06-21 | 2015-03-06 | Ucb Pharma Sa | Formulacion farmaceutica. |
| US9925260B2 (en) | 2012-07-05 | 2018-03-27 | Ucb Pharma S.A. | Treatment for bone diseases |
| US9221904B2 (en) | 2012-07-19 | 2015-12-29 | National Cheng Kung University | Treatment of osteoarthritis using IL-20 antagonists |
| US8603470B1 (en) | 2012-08-07 | 2013-12-10 | National Cheng Kung University | Use of IL-20 antagonists for treating liver diseases |
| US8852588B2 (en) | 2012-08-07 | 2014-10-07 | National Cheng Kung University | Treating allergic airway disorders using anti-IL-20 receptor antibodies |
| FR2994390B1 (fr) | 2012-08-10 | 2014-08-15 | Adocia | Procede d'abaissement de la viscosite de solutions de proteines a concentration elevee |
| US9592297B2 (en) | 2012-08-31 | 2017-03-14 | Bayer Healthcare Llc | Antibody and protein formulations |
| US8613919B1 (en) | 2012-08-31 | 2013-12-24 | Bayer Healthcare, Llc | High concentration antibody and protein formulations |
| UA115789C2 (uk) | 2012-09-05 | 2017-12-26 | Трейкон Фармасутікалз, Інк. | Композиція антитіла до cd105 та її застосування |
| MX2015003007A (es) | 2012-09-07 | 2015-06-05 | Coherus Biosciences Inc | Formulaciones acuosas estables de adalimumab. |
| FR2995214B1 (fr) | 2012-09-10 | 2014-11-21 | Adocia | Solution a viscosite reduite de proteine a concentration elevee |
| UY35148A (es) | 2012-11-21 | 2014-05-30 | Amgen Inc | Immunoglobulinas heterodiméricas |
| US9474803B2 (en) * | 2012-11-27 | 2016-10-25 | Alteogen Inc. | Composition for stabilizing fusion protein in which protein and FC domain are fused |
| UA117466C2 (uk) | 2012-12-13 | 2018-08-10 | Мерк Шарп Енд Доме Корп. | СТАБІЛЬНИЙ СКЛАД У ВИГЛЯДІ РОЗЧИНУ АНТИТІЛА ДО IL-23p19 |
| ME03326B (me) | 2013-03-15 | 2019-10-20 | Shire Viropharma Inc | C1-inh kompozicije i postupci za prevenciju i liječenje poremećaja koji su povezani sa deficijencijom inhibitora c1 esteraze |
| WO2014141149A1 (en) * | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Glaxosmithkline Intellectual Property (No.2) Limited | Formulations with reduced viscosity |
| US10111953B2 (en) | 2013-05-30 | 2018-10-30 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for reducing remnant cholesterol and other lipoprotein fractions by administering an inhibitor of proprotein convertase subtilisin kexin-9 (PCSK9) |
| BR112015032960B1 (pt) | 2013-07-04 | 2021-01-05 | F. Hoffmann-La Roche Ag | imunoensaio suprimido por interferência para detectar anticorpos anti-fármaco em amostras de soro |
| CR20160132A (es) | 2013-08-12 | 2016-08-25 | Genentech Inc | Composiciones y método para tratar condiciones asociadas con el complemento |
| IL312865B2 (en) | 2013-09-11 | 2025-06-01 | Eagle Biologics Inc | Liquid protein formulations containing viscosity-lowering agents |
| CN105764922B (zh) | 2013-09-27 | 2020-07-17 | 中外制药株式会社 | 多肽异源多聚体的制备方法 |
| EP3068803B1 (en) | 2013-11-12 | 2021-01-20 | Sanofi Biotechnology | Dosing regimens for use with pcsk9 inhibitors |
| US9051378B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-06-09 | Kymab Limited | Targeting rare human PCSK9 variants for cholesterol treatment |
| US9017678B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-04-28 | Kymab Limited | Method of treating rheumatoid arthritis using antibody to IL6R |
| US9034332B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-05-19 | Kymab Limited | Precision medicine by targeting rare human PCSK9 variants for cholesterol treatment |
| US8986691B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-03-24 | Kymab Limited | Method of treating atopic dermatitis or asthma using antibody to IL4RA |
| US9023359B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-05-05 | Kymab Limited | Targeting rare human PCSK9 variants for cholesterol treatment |
| US8986694B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-03-24 | Kymab Limited | Targeting human nav1.7 variants for treatment of pain |
| US9045545B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-06-02 | Kymab Limited | Precision medicine by targeting PD-L1 variants for treatment of cancer |
| US8883157B1 (en) | 2013-12-17 | 2014-11-11 | Kymab Limited | Targeting rare human PCSK9 variants for cholesterol treatment |
| US9914769B2 (en) | 2014-07-15 | 2018-03-13 | Kymab Limited | Precision medicine for cholesterol treatment |
| US8992927B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-03-31 | Kymab Limited | Targeting human NAV1.7 variants for treatment of pain |
| US8980273B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-03-17 | Kymab Limited | Method of treating atopic dermatitis or asthma using antibody to IL4RA |
| US9045548B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-06-02 | Kymab Limited | Precision Medicine by targeting rare human PCSK9 variants for cholesterol treatment |
| US8945560B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-02-03 | Kymab Limited | Method of treating rheumatoid arthritis using antibody to IL6R |
| US9067998B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-06-30 | Kymab Limited | Targeting PD-1 variants for treatment of cancer |
| GB201403775D0 (en) | 2014-03-04 | 2014-04-16 | Kymab Ltd | Antibodies, uses & methods |
| EP3119490B1 (en) | 2014-03-21 | 2021-09-08 | F. Hoffmann-La Roche AG | In vitro prediction of in vivo half-life of antibodies |
| KR20160147855A (ko) | 2014-05-01 | 2016-12-23 | 제넨테크, 인크. | 항-인자 d 항체 변이체 및 이의 용도 |
| US10478498B2 (en) | 2014-06-20 | 2019-11-19 | Reform Biologics, Llc | Excipient compounds for biopolymer formulations |
| US20160074515A1 (en) * | 2014-06-20 | 2016-03-17 | Reform Biologics, Llc | Viscosity-reducing excipient compounds for protein formulations |
| US11357857B2 (en) * | 2014-06-20 | 2022-06-14 | Comera Life Sciences, Inc. | Excipient compounds for protein processing |
| US9150660B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-10-06 | Kymab Limited | Precision Medicine by targeting human NAV1.8 variants for treatment of pain |
| US9139648B1 (en) | 2014-07-15 | 2015-09-22 | Kymab Limited | Precision medicine by targeting human NAV1.9 variants for treatment of pain |
| CN107206068A (zh) | 2014-07-16 | 2017-09-26 | 赛诺菲生物技术公司 | 用于治疗杂合型家族性高胆固醇血症(heFH)患者的方法 |
| WO2016008975A1 (en) | 2014-07-18 | 2016-01-21 | Sanofi | Method for predicting the outcome of a treatment with aflibercept of a patient suspected to suffer from a cancer |
| WO2016019969A1 (en) | 2014-08-08 | 2016-02-11 | Ludwig-Maximilians-Universität München | Subcutaneously administered bispecific antibodies for use in the treatment of cancer |
| TWI700300B (zh) | 2014-09-26 | 2020-08-01 | 日商中外製藥股份有限公司 | 中和具有第ｖｉｉｉ凝血因子（ｆｖｉｉｉ）機能替代活性的物質之抗體 |
| TWI701435B (zh) | 2014-09-26 | 2020-08-11 | 日商中外製藥股份有限公司 | 測定ｆｖｉｉｉ的反應性之方法 |
| SG11201702614SA (en) | 2014-10-01 | 2017-04-27 | Eagle Biolog Inc | Polysaccharide and nucleic acid formulations containing viscosity-lowering agents |
| TW201628649A (zh) | 2014-10-09 | 2016-08-16 | 再生元醫藥公司 | 減少醫藥調配物中微可見顆粒之方法 |
| KR20170065662A (ko) * | 2014-10-18 | 2017-06-13 | 화이자 인코포레이티드 | 항-il-7r 항체 조성물 |
| EP3215528B1 (en) | 2014-11-06 | 2019-08-07 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Fc-region variants with modified fcrn-binding and methods of use |
| WO2016077451A1 (en) | 2014-11-12 | 2016-05-19 | Tracon Pharmaceuticals, Inc. | Anti-endoglin antibodies and uses thereof |
| US9926375B2 (en) | 2014-11-12 | 2018-03-27 | Tracon Pharmaceuticals, Inc. | Anti-endoglin antibodies and uses thereof |
| MA41142A (fr) | 2014-12-12 | 2017-10-17 | Amgen Inc | Anticorps anti-sclérostine et utilisation de ceux-ci pour traiter des affections osseuses en tant qu'élements du protocole de traitement |
| AU2016210918A1 (en) | 2015-01-28 | 2017-07-13 | Pfizer Inc., | Stable aqueous anti- vascular endothelial growth factor (VEGF) antibody formulation |
| AR103726A1 (es) | 2015-02-27 | 2017-05-31 | Merck Sharp & Dohme | Cristales de anticuerpos monoclonales anti-pd-1 humanos |
| US9139653B1 (en) | 2015-04-30 | 2015-09-22 | Kymab Limited | Anti-human OX40L antibodies and methods of treatment |
| US11142587B2 (en) | 2015-04-01 | 2021-10-12 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Method for producing polypeptide hetero-oligomer |
| US20170007690A1 (en) * | 2015-07-07 | 2017-01-12 | Nanobio Corporation | Methods and compositions for the stabilization of anthrax recombinant protective antigen |
| EP3319930A4 (en) * | 2015-07-07 | 2019-04-10 | NanoBio Corporation | METHOD AND COMPOSITIONS FOR STABILIZING PROTEINS |
| US11173197B2 (en) * | 2015-07-07 | 2021-11-16 | Bluewillow Biologics, Inc. | Methods and compositions for nanoemulsion vaccine formulations |
| MA42613A (fr) | 2015-08-13 | 2018-06-20 | Amgen Inc | Filtration en profondeur chargée de protéines de liaison à un antigène |
| KR20240172758A (ko) | 2015-08-18 | 2024-12-10 | 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. | 지단백질 분리반출술을 경험하고 있는 고지혈증을 갖는 환자를 치료하기 위한 항-pcsk9 억제성 항체 |
| US11229702B1 (en) | 2015-10-28 | 2022-01-25 | Coherus Biosciences, Inc. | High concentration formulations of adalimumab |
| EP3368074A2 (en) | 2015-10-30 | 2018-09-05 | Hoffmann-La Roche AG | Anti-factor d antibodies and conjugates |
| HK1257422A1 (zh) | 2015-10-30 | 2019-10-18 | 豪夫迈‧罗氏有限公司 | 抗-因子d抗体变体缀合物及其用途 |
| WO2017110980A1 (ja) | 2015-12-25 | 2017-06-29 | 中外製薬株式会社 | 増強された活性を有する抗体及びその改変方法 |
| SG11201803989WA (en) | 2015-12-28 | 2018-06-28 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Method for promoting efficiency of purification of fc region-containing polypeptide |
| GB201604124D0 (en) | 2016-03-10 | 2016-04-27 | Ucb Biopharma Sprl | Pharmaceutical formulation |
| WO2017184880A1 (en) | 2016-04-20 | 2017-10-26 | Coherus Biosciences, Inc. | A method of filling a container with no headspace |
| ES3055961T3 (en) | 2016-04-28 | 2026-02-17 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Antibody-containing preparation |
| ES2770674T3 (es) | 2016-06-10 | 2020-07-02 | Octapharma Ag | Composición de inmunoglobulinas de alta concentración para aplicaciones farmacéuticas |
| JP7461741B2 (ja) | 2016-06-20 | 2024-04-04 | カイマブ・リミテッド | 抗ｐｄ－ｌ１およびｉｌ－２サイトカイン |
| CN109415444B (zh) | 2016-07-29 | 2024-03-01 | 中外制药株式会社 | 显示增加的备选fviii辅因子功能活性的双特异性抗体 |
| US20190175683A1 (en) | 2016-08-05 | 2019-06-13 | Csl Behring Gmbh | Pharmaceutical formulations of c1 esterase inhibitor |
| KR20230041834A (ko) | 2016-08-16 | 2023-03-24 | 리제너론 파아마슈티컬스, 인크. | 혼합물로부터 개별 항체들을 정량하는 방법 |
| EP3509637B1 (en) | 2016-09-06 | 2024-11-27 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Methods of using a bispecific antibody that recognizes coagulation factor ix and/or activated coagulation factor ix and coagulation factor x and/or activated coagulation factor x |
| ES3064802T3 (en) | 2016-10-21 | 2026-04-29 | Amgen Inc | Pharmaceutical formulations and methods of making the same |
| CN119492842A (zh) | 2016-10-25 | 2025-02-21 | 里珍纳龙药品有限公司 | 用于色谱数据分析的方法和系统 |
| US11779604B2 (en) | 2016-11-03 | 2023-10-10 | Kymab Limited | Antibodies, combinations comprising antibodies, biomarkers, uses and methods |
| EP3603670A4 (en) | 2017-03-31 | 2021-03-10 | Public University Corporation Nara Medical University | MEDICAL COMPOSITION FOR THE PREVENTION AND / OR TREATMENT OF BLOOD CLOG FACTOR IX ANOMALY WITH A MULTI-SPECIFIC ANTIGIBINDING MOLECULAR FUNCTION OF BLOOD CLOTHING FACTOR VIII |
| JOP20190260A1 (ar) | 2017-05-02 | 2019-10-31 | Merck Sharp & Dohme | صيغ ثابتة لأجسام مضادة لمستقبل الموت المبرمج 1 (pd-1) وطرق استخدامها |
| RU2019138507A (ru) | 2017-05-02 | 2021-06-02 | Мерк Шарп И Доум Корп. | Составы антител против lag3 и совместные составы антител против lag3 и антител против pd-1 |
| WO2018211517A1 (en) | 2017-05-16 | 2018-11-22 | Bhami's Research Laboratory, Pvt. Ltd. | High concentration protein formulations with reduced viscosity |
| AU2018321335B2 (en) | 2017-08-22 | 2025-08-14 | Biogen Ma Inc. | Pharmaceutical compositions containing anti-beta amyloid antibodies |
| CN118416215A (zh) | 2017-09-19 | 2024-08-02 | 里珍纳龙药品有限公司 | 减少粒子形成的方法以及由其形成的组合物 |
| JP6496095B1 (ja) | 2017-09-29 | 2019-04-03 | 中外製薬株式会社 | 血液凝固第ｖｉｉｉ因子（ｆｖｉｉｉ）補因子機能代替活性を有する多重特異性抗原結合分子および当該分子を有効成分として含有する薬学的製剤 |
| TW202600611A (zh) | 2017-11-01 | 2026-01-01 | 日商中外製藥股份有限公司 | 生物活性降低之抗體變異體與同功型 |
| HRP20260414T1 (hr) | 2018-03-30 | 2026-05-08 | Amgen Inc. | C-terminalne varijante protutijela |
| CN111989121B (zh) * | 2018-04-16 | 2024-08-13 | 默克专利股份有限公司 | 高浓缩蛋白质制剂的粘度降低 |
| TW202016125A (zh) * | 2018-05-10 | 2020-05-01 | 美商再生元醫藥公司 | 用於定量及調節蛋白質黏度之系統與方法 |
| JP7235770B2 (ja) | 2018-05-10 | 2023-03-08 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | 高濃度ｖｅｇｆ受容体融合タンパク質を含む製剤 |
| TWI853823B (zh) | 2018-07-02 | 2024-09-01 | 美商里珍納龍藥品有限公司 | 自混合物製備多肽之系統及方法 |
| TW202011995A (zh) * | 2018-07-03 | 2020-04-01 | 比利時商葛萊伯格有限公司 | 高濃度液體抗體配製物 |
| IL267923B2 (en) | 2018-08-02 | 2023-06-01 | Grifols Worldwide Operations Ltd | The composition containing the most concentrated alpha-1 type protein inhibitor and a method for obtaining it |
| CN113056482A (zh) | 2018-10-18 | 2021-06-29 | 默沙东公司 | 抗rsv抗体的制剂及其使用方法 |
| CN120842406A (zh) | 2018-10-31 | 2025-10-28 | 默沙东有限责任公司 | 抗人pd-1抗体晶体及其使用方法 |
| KR20210089215A (ko) | 2018-11-07 | 2021-07-15 | 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 | 항-lag3 항체 및 항-pd-1 항체의 공동-제제 |
| EP3934620A1 (en) | 2019-03-05 | 2022-01-12 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Human serum albumin in formulations |
| CA3152838A1 (en) * | 2019-08-30 | 2021-03-04 | Kashiv Biosciences, Llc | Novel formulation of highly concentrated pharmacologically active antibody |
| EP3808777A1 (en) | 2019-10-16 | 2021-04-21 | Glenmark Specialty S.A. | Stable liquid antibody formulations |
| IL299671A (en) | 2020-07-13 | 2023-03-01 | Merck Patent Gmbh | Viscosity-reducing excipients and their combinations for high-concentration protein formulations |
| IL300133A (en) | 2020-07-31 | 2023-03-01 | Genentech Inc | Anti-integrin antibody compositions in cell 7 and devices |
| CA3254142A1 (en) * | 2022-03-15 | 2023-09-21 | Adrenomed Ag | STABLE AQUEOUS FORMULATION OF AN ANTI-ADRENOMEDULLIN (ADM) ANTIBODY OR AN ANTI-ADM ANTIBODY FRAGMENT |
| CN121568965A (zh) * | 2023-07-28 | 2026-02-24 | 诺华股份有限公司 | 奥马珠单抗的新用途 |
| CA3237624A1 (en) * | 2023-07-28 | 2025-04-24 | Genentech, Inc. | NEW USES FOR OMALIZUMAB |
| WO2025131987A1 (en) | 2023-12-18 | 2025-06-26 | Merck Patent Gmbh | Viscosity reducing excipients and combinations thereof for liquid compositions comprising a protein |
| DE202024000928U1 (de) | 2024-05-10 | 2024-05-16 | Genentech, Inc. | Omalizumab-Spritze |
Family Cites Families (100)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US55571A (en) * | 1866-06-12 | Improvement in screw-cutters | ||
| US92607A (en) * | 1869-07-13 | hamilton | ||
| CA1064396A (en) | 1975-02-18 | 1979-10-16 | Myer L. Coval | Fractional precipitation of gamma globulin with polyethylene glycol |
| US4075193A (en) * | 1976-11-26 | 1978-02-21 | Parke, Davis & Company | Process for producing intravenous immune globulin |
| FR2413974A1 (fr) | 1978-01-06 | 1979-08-03 | David Bernard | Sechoir pour feuilles imprimees par serigraphie |
| AT359641B (de) | 1978-09-19 | 1980-11-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung eines intravenoes ver- abreichbaren antikoerperhaeltigen immunglobulin- praeparates |
| US4374763A (en) * | 1979-09-17 | 1983-02-22 | Morishita Pharmaceutical Co., Ltd. | Method for producing gamma-globulin for use in intravenous administration and method for producing a pharmaceutical preparation thereof |
| WO1981001145A1 (en) | 1979-10-18 | 1981-04-30 | Univ Illinois | Hydrolytic enzyme-activatible pro-drugs |
| US4399216A (en) | 1980-02-25 | 1983-08-16 | The Trustees Of Columbia University | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
| US4499073A (en) | 1981-08-24 | 1985-02-12 | Cutter Laboratories, Inc. | Intravenously injectable immune serum globulin |
| AU2353384A (en) | 1983-01-19 | 1984-07-26 | Genentech Inc. | Amplification in eukaryotic host cells |
| US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
| JPH063994B2 (ja) | 1984-10-05 | 1994-01-12 | 株式会社日立製作所 | 複数台デイジタルサーボの制御方法 |
| US4597966A (en) | 1985-01-09 | 1986-07-01 | Ortho Diagnostic Systems, Inc. | Histidine stabilized immunoglobulin and method of preparation |
| US4676980A (en) | 1985-09-23 | 1987-06-30 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Target specific cross-linked heteroantibodies |
| IL85035A0 (en) | 1987-01-08 | 1988-06-30 | Int Genetic Eng | Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same |
| GB8705477D0 (en) | 1987-03-09 | 1987-04-15 | Carlton Med Prod | Drug delivery systems |
| US4940782A (en) | 1987-06-08 | 1990-07-10 | G. D. Searle & Co. | Monoclonal antibodies against IgE-associated determinants, hybrid cell lines producing these antibodies, and use therefore |
| US4975278A (en) | 1988-02-26 | 1990-12-04 | Bristol-Myers Company | Antibody-enzyme conjugates in combination with prodrugs for the delivery of cytotoxic agents to tumor cells |
| ATE82506T1 (de) | 1987-08-21 | 1992-12-15 | Imcera Group Inc | Stabilisierung von wachstumshormonen. |
| DE3850542T2 (de) | 1987-09-23 | 1994-11-24 | Bristol Myers Squibb Co | Antikörper-Heterokonjugate zur Töting von HIV-infizierten Zellen. |
| US4877608A (en) | 1987-11-09 | 1989-10-31 | Rorer Pharmaceutical Corporation | Pharmaceutical plasma protein formulations in low ionic strength media |
| KR0154872B1 (ko) | 1987-12-21 | 1998-10-15 | 로버트 에이. 아미테이지 | 발아하는 식물종자의 아크로박테리움 매개된 형질전환 |
| CA1331133C (en) | 1988-03-01 | 1994-08-02 | Michael Jon Pikal | Pharmaceutical growth hormone formulations |
| EP0365685B1 (en) | 1988-03-30 | 1995-01-18 | Toray Industries, Inc. | Freeze-dried composition comprising a horseradish peroxidase-labelled Fab' fragment of an anti-human interferon-beta monclonal antibody and trehalose; EIA kit containing the composition |
| US5215743A (en) | 1988-04-13 | 1993-06-01 | Maninder Singh | Tumor necrosis factor formulations |
| US5096885A (en) | 1988-04-15 | 1992-03-17 | Genentech, Inc. | Human growth hormone formulation |
| GB2218703B (en) | 1988-05-10 | 1992-10-28 | Sumitomo Chemical Co | Human monoclonal antibody to p.aeruginosa: its production and use |
| WO1989011297A1 (en) | 1988-05-27 | 1989-11-30 | Centocor, Inc. | Freeze-dried formulation for antibody products |
| GB8823869D0 (en) | 1988-10-12 | 1988-11-16 | Medical Res Council | Production of antibodies |
| US5036050A (en) * | 1989-01-12 | 1991-07-30 | Immunobiology Research Institute, Inc. | Compositions containing thymopentin for topical treatment of skin disorders |
| CA2049342A1 (en) | 1989-03-27 | 1990-09-28 | Sally Bolmer | Formulations for stabilizing of igm antibodies |
| ZA902663B (en) | 1989-04-07 | 1991-12-24 | Syntex Inc | Interleukin-1 formulation |
| DE3920358A1 (de) | 1989-06-22 | 1991-01-17 | Behringwerke Ag | Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung |
| EP0479909B1 (en) | 1989-06-29 | 1996-10-30 | Medarex, Inc. | Bispecific reagents for aids therapy |
| DE4001451A1 (de) | 1990-01-19 | 1991-08-01 | Octapharma Ag | Stabile injizierbare loesungen von faktor viii und faktor ix |
| ATE204902T1 (de) | 1990-06-29 | 2001-09-15 | Large Scale Biology Corp | Melaninproduktion durch transformierte mikroorganismen |
| AU8507191A (en) | 1990-08-29 | 1992-03-30 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
| US5661016A (en) | 1990-08-29 | 1997-08-26 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
| US5625126A (en) | 1990-08-29 | 1997-04-29 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
| US5633425A (en) | 1990-08-29 | 1997-05-27 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
| US5545806A (en) | 1990-08-29 | 1996-08-13 | Genpharm International, Inc. | Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
| JPH0565233A (ja) | 1991-03-08 | 1993-03-19 | Mitsui Toatsu Chem Inc | モノクローナル抗体含有凍結乾燥製剤 |
| WO1992017207A1 (en) | 1991-03-26 | 1992-10-15 | Tanox Biosystems, Inc. | MONOCLONAL ANTIBODIES WHICH BIND TO SECRETED AND MEMBRANE-BOUND IgE, BUT NOT TO IgE ON BASOPHILS |
| WO1992020373A1 (en) | 1991-05-14 | 1992-11-26 | Repligen Corporation | Heteroconjugate antibodies for treatment of hiv infection |
| ATE255131T1 (de) | 1991-06-14 | 2003-12-15 | Genentech Inc | Humanisierter heregulin antikörper |
| JP2966592B2 (ja) | 1991-07-20 | 1999-10-25 | 萩原 義秀 | 安定化されたヒトモノクローナル抗体製剤 |
| US6329509B1 (en) | 1991-08-14 | 2001-12-11 | Genentech, Inc. | Anti-IgE antibodies |
| US6699472B2 (en) | 1991-08-14 | 2004-03-02 | Genentech, Inc. | Method of treating allergic disorders |
| DK0602126T3 (da) | 1991-08-14 | 2003-06-16 | Genentech Inc | Immunoglobulinvarianter til specifikke FC epsilon-receptorer |
| GB9120304D0 (en) | 1991-09-24 | 1991-11-06 | Erba Carlo Spa | Stable pharmaceutical compositions containing a granulocyte macrophage colony stimulating factor |
| WO1993008829A1 (en) | 1991-11-04 | 1993-05-13 | The Regents Of The University Of California | Compositions that mediate killing of hiv-infected cells |
| DE69233528T2 (de) | 1991-11-25 | 2006-03-16 | Enzon, Inc. | Verfahren zur Herstellung von multivalenten antigenbindenden Proteinen |
| US5849700A (en) | 1991-12-20 | 1998-12-15 | Novo Nordisk A/S | Pharmaceutical formulation |
| CH684164A5 (de) | 1992-01-10 | 1994-07-29 | Rotkreuzstiftung Zentrallab | Intravenös anwendbare Immunglobulinlösung. |
| DE69333928T2 (de) | 1992-04-30 | 2006-08-17 | Probitas Pharma Inc., Los Angeles | Verbesserte solubilisierung und stabilisierung des faktor viii-komplexes |
| EP0656064B1 (en) | 1992-08-17 | 1997-03-05 | Genentech, Inc. | Bispecific immunoadhesins |
| US5445017A (en) | 1993-08-24 | 1995-08-29 | Mita Industrial Co., Ltd. | Motor start examining device and method |
| DE4344824C1 (de) | 1993-12-28 | 1995-08-31 | Immuno Ag | Hochkonzentriertes Immunglobulin-Präparat und Verfahren zu seiner Herstellung |
| ATE401394T1 (de) | 1994-03-04 | 2008-08-15 | Genentech Inc | Verbesserte dnase flüssige lösungen |
| US5580856A (en) | 1994-07-15 | 1996-12-03 | Prestrelski; Steven J. | Formulation of a reconstituted protein, and method and kit for the production thereof |
| GB9418092D0 (en) * | 1994-09-08 | 1994-10-26 | Red Cross Found Cent Lab Blood | Organic compounds |
| US5783738A (en) | 1994-12-28 | 1998-07-21 | Rhone-Poulenc Chimie | Optically active diphosphines, preparation thereof according to a process for the resolution of the racemic mixture and use thereof |
| US5731168A (en) | 1995-03-01 | 1998-03-24 | Genentech, Inc. | Method for making heteromultimeric polypeptides |
| US6037453A (en) | 1995-03-15 | 2000-03-14 | Genentech, Inc. | Immunoglobulin variants |
| US5641870A (en) | 1995-04-20 | 1997-06-24 | Genentech, Inc. | Low pH hydrophobic interaction chromatography for antibody purification |
| US6685940B2 (en) | 1995-07-27 | 2004-02-03 | Genentech, Inc. | Protein formulation |
| US6267958B1 (en) * | 1995-07-27 | 2001-07-31 | Genentech, Inc. | Protein formulation |
| CA2226575C (en) | 1995-07-27 | 2011-10-18 | Genentech, Inc. | Stabile isotonic lyophilized protein formulation |
| ZA966075B (en) * | 1995-07-27 | 1998-01-19 | Genentech Inc | Protein formulation. |
| US6686191B1 (en) | 1995-09-22 | 2004-02-03 | Bayer Healthcare Llc | Preparation of virally inactivated intravenously injectable immune serum globulin |
| JP2904071B2 (ja) | 1995-10-04 | 1999-06-14 | 日本電気株式会社 | 半導体装置 |
| PL328199A1 (en) * | 1996-01-25 | 1999-01-18 | Schering Ag | Improved concentrated intravascular injection and infusion solutions |
| US5770700A (en) | 1996-01-25 | 1998-06-23 | Genetics Institute, Inc. | Liquid factor IX formulations |
| KR100236393B1 (ko) | 1996-02-02 | 1999-12-15 | 나까니시 히로유끼 | 사람성장호르몬을 함유하는 의약제제 |
| CA2244664C (en) | 1996-02-09 | 2008-06-03 | Amgen Inc. | Composition comprising interleukin-1 inhibitor and controlled release polymer |
| TW518219B (en) | 1996-04-26 | 2003-01-21 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Erythropoietin solution preparation |
| GB9610992D0 (en) * | 1996-05-24 | 1996-07-31 | Glaxo Group Ltd | Concentrated antibody preparation |
| US5994511A (en) | 1997-07-02 | 1999-11-30 | Genentech, Inc. | Anti-IgE antibodies and methods of improving polypeptides |
| US6172213B1 (en) | 1997-07-02 | 2001-01-09 | Genentech, Inc. | Anti-IgE antibodies and method of improving polypeptides |
| US6096872A (en) * | 1997-10-14 | 2000-08-01 | Ortho Diagnostic Systems, Inc. | Viral clearance process |
| US6057505A (en) * | 1997-11-21 | 2000-05-02 | Ortabasi; Ugur | Space concentrator for advanced solar cells |
| US6541606B2 (en) | 1997-12-31 | 2003-04-01 | Altus Biologics Inc. | Stabilized protein crystals formulations containing them and methods of making them |
| WO2000015260A1 (en) | 1998-09-16 | 2000-03-23 | Tanox, Inc. | Anti-ige gene therapy |
| GB9820525D0 (en) | 1998-09-21 | 1998-11-11 | Allergy Therapeutics Ltd | Formulation |
| JP2000247903A (ja) | 1999-03-01 | 2000-09-12 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | 長期安定化製剤 |
| CN1245216C (zh) | 1999-10-04 | 2006-03-15 | 希龙公司 | 稳定化的含多肽的液体药物组合物 |
| GB0023383D0 (en) | 2000-09-23 | 2000-11-08 | Synprotec Ltd | 3,5-Bis (Trifluormethyl)Benzene derivatives |
| JPWO2002030464A1 (ja) | 2000-10-11 | 2004-02-19 | 江頭 健輔 | 新規肝疾患用薬 |
| JP4340062B2 (ja) | 2000-10-12 | 2009-10-07 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 粘度の減少した濃縮タンパク質製剤 |
| KR20100031769A (ko) | 2000-12-28 | 2010-03-24 | 알투스 파마슈티컬스 인코포레이티드 | 전항체 및 이의 단편의 결정과 이의 제조 및 사용 방법 |
| GB0113179D0 (en) * | 2001-05-31 | 2001-07-25 | Novartis Ag | Organic compounds |
| AU2002324556A1 (en) | 2001-07-25 | 2003-02-17 | Protein Design Labs, Inc. | Stable lyophilized pharmaceutical formulation of igg antibodies |
| JP2005523882A (ja) * | 2001-10-16 | 2005-08-11 | アールエックスキネティックス，インコーポレイテッド | 高濃度タンパク質製剤および製造の方法 |
| ES2392073T3 (es) | 2001-11-08 | 2012-12-04 | Abbott Biotherapeutics Corp. | Formulación farmacéutica líquida estable de anticuerpos IGG |
| US20040191243A1 (en) | 2002-12-13 | 2004-09-30 | Bei Chen | System and method for stabilizing antibodies with histidine |
| AU2004229335C1 (en) | 2003-04-04 | 2010-06-17 | Genentech, Inc. | High concentration antibody and protein formulations |
| US20050158303A1 (en) | 2003-04-04 | 2005-07-21 | Genentech, Inc. | Methods of treating IgE-mediated disorders comprising the administration of high concentration anti-IgE antibody formulations |
| US20060051347A1 (en) * | 2004-09-09 | 2006-03-09 | Winter Charles M | Process for concentration of antibodies and therapeutic products thereof |
| JP6044754B2 (ja) | 2012-01-19 | 2016-12-14 | 株式会社ジェイテクト | クラッチプレートおよびその製造方法 |
-
2001
- 2001-10-04 JP JP2002533902A patent/JP4340062B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2001-10-04 US US09/971,511 patent/US6875432B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-10-04 AT AT01981824T patent/ATE442862T2/de active
- 2001-10-04 CA CA2423227A patent/CA2423227C/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-10-04 AU AU2002213441A patent/AU2002213441B2/en not_active Expired
- 2001-10-04 WO PCT/US2001/042487 patent/WO2002030463A2/en not_active Ceased
- 2001-10-04 ES ES01981824.4T patent/ES2332402T5/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-10-04 PT PT01981824T patent/PT1324776E/pt unknown
- 2001-10-04 AU AU1344102A patent/AU1344102A/xx active Pending
- 2001-10-04 EP EP09010433.2A patent/EP2116265B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-10-04 DK DK01981824.4T patent/DK1324776T4/en active
- 2001-10-04 DE DE60139944T patent/DE60139944D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-10-04 EP EP01981824.4A patent/EP1324776B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-10-04 IL IL15500201A patent/IL155002A0/xx unknown
- 2001-10-04 SI SI200130952T patent/SI1324776T2/en unknown
-
2003
- 2003-03-19 IL IL155002A patent/IL155002A/en active IP Right Grant
-
2005
- 2005-02-28 US US11/068,553 patent/US7666413B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2006
- 2006-12-15 US US11/611,751 patent/US8142776B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2009
- 2009-02-26 JP JP2009044568A patent/JP2009167190A/ja not_active Withdrawn
- 2009-11-10 CY CY20091101163T patent/CY1110547T1/el unknown
-
2014
- 2014-03-24 IL IL231675A patent/IL231675A/en active IP Right Grant
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6875432B2 (en) | Reduced-viscosity concentrated protein formulations | |
| US10166293B2 (en) | Reduced-viscosity concentrated protein formulations | |
| AU2002213441A1 (en) | Reduced-viscosity concentrated protein formulations | |
| EP1610820B1 (en) | High concentration antibody and protein formulations | |
| ES2435462T3 (es) | Formulación de proteína liofilizada isotónica estable | |
| CA2751188A1 (en) | Reduced-viscosity concentrated protein formulations | |
| HK1135918A (en) | Reduced-viscosity concentrated protein formulations | |
| HK1085933B (en) | High concentration antibody and protein formulations | |
| HK1158981B (en) | High concentration antibody and protein formulations |