ES2345746T3 - Metodos para la eliminacion de amiloide usando anticuerpos antiamiloide. - Google Patents
Metodos para la eliminacion de amiloide usando anticuerpos antiamiloide. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2345746T3 ES2345746T3 ES99923260T ES99923260T ES2345746T3 ES 2345746 T3 ES2345746 T3 ES 2345746T3 ES 99923260 T ES99923260 T ES 99923260T ES 99923260 T ES99923260 T ES 99923260T ES 2345746 T3 ES2345746 T3 ES 2345746T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- antibody
- fragment
- immunoglobulin
- polypeptide
- amyloid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
El uso de: a) una dosis terapéuticamente eficaz de al menos un anticuerpo o polipéptido de inmunoglobulina o un fragmento del mismo que se une a fibrilla de amiloide de IgLC humana; y b) un vehículo farmacéuticamente aceptable; para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad por deposición de amiloide en un paciente humano.
Description
Métodos para la eliminación de amiloide usando
anticuerpos antiamiloide.
La presente invención se refiere generalmente a
composiciones para el uso en el tratamiento de enfermedades
relacionadas con el amiloide. Específicamente, la presente invención
proporciona usos terapéuticos relacionados con anticuerpos para
efectuar la eliminación de fibrillas de amiloide por el propio
sistema inmunofagocitario del
paciente.
paciente.
Amiloidosis se refiere a la deposición
patológica de proteínas en forma de fibrillas birrefringentes verdes
congofílicas cuando se tiñen con rojo Congo, bien dispersadas o
bien en forma de amiloidomas localizados. Tales depósitos son
sintomáticos de varias enfermedades, por ejemplo la enfermedad de
Alzheimer, amiloide asociado con la inflamación, diabetes tipo II,
encefalopatía espongiforme bovina (BSE, por sus siglas en inglés),
enfermedad de Creutzfeld-Jakob (CJD, por sus siglas
en inglés), escrapie y amiloidosis primaria.
Las amiloidosis se clasifican generalmente en
tres grupos: amiloidosis sistémicas principales, amiloidosis
localizadas principales y amiloidosis heterogéneas. Las amiloidosis
sistémicas principales incluyen: afecciones inflamatorias crónicas
(p. ej., tuberculosis, osteomielitis, etc.); afecciones no
infecciosas tales como artritis reumatoide juvenil, espondilitis
anquilosante y enfermedad de Crohn, etc.; fiebre mediterránea
familiar, discrasia de células plasmáticas (amiloidosis primaria) y
diversas polineuropatías y cardiomiopatías familiares. Las
amiloidosis localizadas principales incluyen: diálisis crónica
habitualmente durante más de 8 años, enfermedad de Alzheimer,
síndrome de Down, hemorragia cerebral hereditaria (holandesa) y
hemorragia cerebral no traumática de la tercera edad. Las
amiloidosis heterogéneas incluyen: polineuropatía familiar (Iowa),
amiloidosis familiar (finlandesa), hemorragia cerebral hereditaria
(islandesa), CJD, carcinoma medular del tiroides, amiloide auricular
y diabetes mellitus (insulinomas). Otras amiloidosis incluyen las
mencionadas en Louis W. Heck, "The Amyloid Diseases" en
Cecil's Textbook of Medicine 1504-6 (W.B. Saunders
& Co., Filadelfia, PA; 1996).
Encefalopatías espongiformes trasmisibles que
provocan CJD y enfermedad de
Gerstmann-Strässler-Scheinker (GSS)
son descritas por B. Chesebro et ál., "Transmissible
Spongiform Encephalopathies: A Brief Introduction" en FIELD'S
VIROLOGY 2845-49 (3ª Edición; Raven Publishers,
Filadelfia, PA; 1996) y en D.C. Gajdusek, "Infectious amyloids:
Subacute Spongiform Encephalopathies as Transmissible Cerebral
Amyloidoses", 2851-2900 en FIELDS VIROLOGY
(1996). Muchas de estas enfermedades probablemente están mediadas
por priones, una proteína infecciosa. Véanse S.B. Prusiner,
"Prions" en FIELDS VIROLOGY 2901-50 (1996) y
las referencias contenidas allí. Las formas hereditarias de
amiloidosis se describen en Online Mendelian Inheritance in Man
(OMIM)
www.ncbi.nlm.nih.gov/htbin-post/Omim/dispmim?. Cada
una de las anteriores se incorpora en la presente memoria mediante
referencia.
Muy raramente los pacientes con amiloidosis
clínicamente probada alcanzan espontáneamente una remisión completa,
quizá debido a que las propias fibrillas de amiloide son no
inmunogénicas. Se han investigado diversas terapias para la
amiloidosis, tales como quimioterapia en altas dosis, esteroides,
doxorrubicina yodada y terapia de sustitución con células
pluripotenciales. Sin embargo, en solo un tipo de enfermedad
amiloidea, la amiloidosis mediterránea familiar, el tratamiento
farmacológico (con colchicina) ha resultado ser eficaz.
Se conoce el uso de anticuerpos monoclonales
(mAb) para inducir o modular la eliminación inmunológica de una
entidad por lo demás no reconocida. Se han usado satisfactoriamente
mAb para tratar linfoma no Hodgkins y cáncer de mama, por
ejemplo.
Previamente, una variedad de estudios han
caracterizado anticuerpos que se unen a proteínas amiloideas o
fibrillas de amiloide. Véanse, por ejemplo, las Patentes de EE. UU.
Nº 5.714.471, 5.693.478, 5.688.651, 5.652.092, 5.593.846,
5.536.640, 5.385.915, 5.348.963, 5.270.165, 5.262.332, 5.262.303,
5.164.295 y 4.782.014. Además, varias publicaciones han sugerido
que podrían usarse anticuerpos antiamiloide para estudiar el avance
de la beta-amiloidosis y para diversas opciones
terapéuticas. Véanse, por ejemplo, Bellottii et ál., Scand.
J. Immunol. (1992) 36(4):607-615; Bellotti
et ál, Ren. Fail. (1993)
15(3):365-371; Walker et ál J.
Neuropathol. Exp. Neurol. (1994)
53(4):377-383; y Bickel et ál.,
Bioconjug. Chem. (1994) 5(2):119-125. Sin
embargo, no se ha demostrado que ningún anticuerpo terapéutico
detenga o invierta la deposición de fibrillas de amiloide en un
paciente. Así, existe una necesidad de un método para tratar
amiloidosis usando formulaciones de anticuerpo que contengan
anticuerpos que se unan a fibrillas de amiloide.
WO 96/25435 divulga métodos in vitro para
marcar placas amiloideas presentes en el cerebro de un paciente
humano, usando técnicas inmunohistoquímicas que implican anticuerpos
monoclonales que se unen a péptido beta-A4.
"Bioconjugate Chem.: volumen 5, páginas
119-125, (1994)" divulga la unión in vitro
de anticuerpos monoclonales a capilares cerebrales aislados.
De acuerdo con la presente invención, se
proporciona el uso de:
- a)
- una dosis terapéuticamente eficaz de al menos un anticuerpo o polipéptido de inmunoglobulina o un fragmento del mismo, en donde el anticuerpo o polipéptido de inmunoglobulina o fragmento del mismo se une a fibrilla de amiloide de IgLC humana; y
- b)
- un vehículo farmacéuticamente aceptable; para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad por deposición de amiloide en un paciente humano.
Además, de acuerdo con la presente invención se
proporciona una composición farmacéutica que comprende una dosis
terapéuticamente eficaz de al menos un anticuerpo o polipéptido de
inmunoglobulina o fragmento del mismo, en la que el anticuerpo o
polipéptido de inmunoglobulina o fragmento del mismo se une a
fibrilla de amiloide de IgLC humana y es eficaz para potenciar la
respuesta inmunitaria celular de un paciente para eliminar depósitos
de amiloide del paciente.
Figuras 1A y 1B. Las figuras 1A y 1B son
fotografías reproducidas de un ratón Balb/c justo después de que se
realice una inyección de amiloide (1A) y 14 días después de la
inyección (1B). La zona se inyección estaba afeitada para ilustrar
mejor la "joroba" provocada por la inyección del material
amiloideo.
Figuras 2A-2B. Las Figuras 2A y
2B son fotografías reproducidas de neutrófilos humanos (núcleos
multilobulados) que se adhieren a amiloide humano opsonizado in
vitro.
Figuras 3A-3D. Las Figuras
3A-3D son fotografías reproducidas de muestras
tisulares cargadas de amiloide teñidas inmunohistoquímicamente (20
aumentos). La Figura 3A es una muestra tisular procedente de un
paciente con amiloidosis \kappa1 teñida con rojo Congo; los
depósitos de amiloide, observados bajo luz polarizada, aparecen como
partículas de color verde azulado. La Figura 3B es una muestra
tisular teñida con fosfatasa alcalina después de marcar con mAb
anti-\kappaI
(57-18-H12). La Figura 3C es una
muestra tisular teñida como en la Figura 3B, pero con mAb
anti-\kappaIV (11-1F4). La Figura
3D es una muestra tisular teñida como en la Figura 3B, pero con mAb
anti-\lambdaVIII (31-8c7).
Figura 4. La Figura 4 es una fotografía
reproducida que muestra un mAb \kappa4 fluoresceinado (FITC) unido
a amiloide humano implantado en un ratón Balb/c. El mAb se inyectó
en el muslo del ratón. El amiloidoma se extirpó 72 horas después de
la inyección y se observó usando un microscopio de epifluorescencia
(20 aumentos).
La presente invención utiliza polipéptidos de
inmunoglobulina para modular y para potenciar la degradación y la
eliminación de depósitos no deseados de fibrillas de amiloide en un
huésped o paciente. Se prevé que la invención se use, por ejemplo,
para tratar a seres humanos que sufren una enfermedad o afección
caracterizada por una deposición no deseada de fibrillas de
amiloide. Sin pretender limitarse a ningún mecanismo de acción
particular, se cree que la administración de péptidos de
inmunoglobulina usada en la presente invención opsoniza las
fibrillas de amiloide depositadas en un paciente que sufre
amiloidosis, ayudando de ese modo a su eliminación del paciente por
el propio sistema inmunitario del paciente. Se cree que el sistema
inmunitario del paciente solo es incapaz de eliminar las fibrillas
de amiloide en condiciones moduladas por fibrillas de amiloide sin
tal intervención terapéutica, presumiblemente debido a que las
fibrillas de amiloide son por sí mismas relativamente no
inmunogénicas.
Para tratar a un paciente con amiloidosis, una
dosis terapéuticamente eficaz de polipéptido de inmunoglobulina o
fragmento del mismo se administra junto con un vehículo o excipiente
farmacéuticamente adecuado. Al unirse o adherirse tales
polipéptidos de inmunoglobulina a depósitos no deseados de fibrillas
de amiloide, se cree que las últimas se opsonizan.
Pueden llevarse a cabo administraciones simples
o múltiples de las composiciones de la presente invención en
dosificaciones y mediante protocolos de administración conocidos por
los expertos en la especialidad para la administración de otros
productos terapéuticos de anticuerpo. Estos parámetros pueden ser
seleccionados y/u optimizados por el médico que trata a un paciente
particular.
Preferiblemente, una dosis terapéuticamente
eficaz de una formulación farmacéutica de la presente invención
debe aportar una cantidad de polipéptido de inmunoglobulina
anti-amiloide de IgLC suficiente para inhibir
sustancialmente la deposición no deseada de fibrillas de amiloide o
para inhibir sustancialmente el grado de cualquier deposición no
deseada de fibrillas de amiloide. Más preferiblemente, las
formulaciones deben reducir la carga global de fibrillas de
amiloide depositadas en un paciente. Además, la administración de
tales formulaciones debe comenzar poco después de la diagnosis de
amiloidosis y continuar hasta que los síntomas se reduzcan
sustancialmente y durante un período posteriormente. En casos bien
establecidos de enfermedad, pueden requerirse dosis en exceso
seguidas por dosis de mantenimiento.
Los términos "péptido", "polipéptido"
o "proteína" se usan intercambiablemente en la presente
memoria. El término "identidad sustancial", cuando se refiere
a polipéptidos, indica que el polipéptido o la proteína en cuestión
es al menos aproximadamente 30% idéntico a una proteína completa
presente en la naturaleza o una porción de la misma, habitualmente
al menos aproximadamente 70% idéntico, y preferiblemente al menos
aproximadamente 95% idéntico.
Según se usan en la presente memoria, los
términos "aislada", "sustancialmente pura" y
"sustancialmente homogénea" se usan intercambiablemente y
describen un proteína que se ha separado de componentes que la
acompañan en la naturaleza. Una proteína sustancialmente purificada
comprenderá típicamente por encima de aproximadamente 85% a 90% de
una muestra de proteína, más habitualmente aproximadamente 95%, y
preferiblemente será por encima de aproximadamente 99% pura. La
pureza u homogeneidad de la proteína puede indicarse mediante un
número de medios bien conocidos en la especialidad, tales como una
electroforesis en gel de poliacrilamida de una muestra de proteína,
seguido por visualizar una sola banda de polipéptido en un gel de
poliacrilamida al teñir. Para ciertos propósitos, se necesitará
alta resolución y se utilizará HPLC o un medio similar para la
purificación.
Las proteínas pueden purificarse hasta
homogeneidad sustancial mediante técnicas estándar bien conocidas en
la especialidad, incluyendo precipitación selectiva con sustancias
tales como sulfato amónico, cromatografía en columna, métodos de
inmunopurificación y otros. Véase, por ejemplo, Scopes, Protein
Purification: Principles and Practice,
Springer-Verlag: Nueva York (1982).
Las técnicas de purificación de anticuerpos son
bien conocidas en la especialidad. Harlow et ál., Antibodies:
A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold
Spring Harbor (1988), 288-318 describe, por
ejemplo, la purificación usando precipitación con sulfato amónico,
ácido caprílico, DEAE, cromatografía con hidroxiapatita,
cromatografía de filtración en gel, cuentas de proteína A e
inmunoafinidad.
Los ácidos nucleicos, según se usan en la
presente memoria, pueden ser DNA o RNA. Cuando se hace referencia a
ácidos nucleicos, el término "identidad sustancial" indica que
las secuencias de dos ácidos nucleicos, o porciones indicadas de
los mismos, cuando se alinean óptimamente y se comparan, son
idénticas, con inserciones o deleciones de nucleótidos apropiadas,
en al menos aproximadamente 80% de los nucleótidos, habitualmente
al menos aproximadamente de 90% a 95%, y más preferiblemente al
menos aproximadamente de 98% a 99,5% de los nucleótidos.
Alternativamente, existe una identidad de
secuencias de ácidos nucleicos sustancial cuando un segmento de
ácido nucleico se hibrida bajo condiciones de hibridación selectivas
a un complemento de otra hebra de ácido nucleico.
De forma similar, "sustancialmente
complementario" significa que un ácido nucleico se hibrida
selectivamente a, o es idéntico a, otro ácido nucleico.
Típicamente, la hibridación selectiva se producirá cuando haya al
menos aproximadamente 55% de identidad a lo largo de un tramo de al
menos 14-25 nucleótidos, preferiblemente al menos
aproximadamente 65% de identidad, más preferiblemente al menos
aproximadamente 75%, y lo más preferiblemente al menos
aproximadamente 90% de identidad. Véase M. Kanehisa Nucleic Acids
Res. 12:203 (1984).
Condiciones de hibridación restrictivas
incluirán típicamente concentraciones de sal de menos de
aproximadamente 1 M, más habitualmente menos de aproximadamente 500
mM y preferiblemente menos de aproximadamente 200 mM. Las
condiciones de temperatura serán típicamente mayores de 22ºC,
típicamente mayores de aproximadamente 30ºC y preferiblemente por
encima de aproximadamente 37ºC. Puesto que otros factores pueden
afectar drásticamente a la restricción de la hibridación,
incluyendo la composición de bases y el tamaño de las hebras
complementarias, la presencia de disolventes orgánicos y la
extensión de la discordancia de bases, la combinación de parámetros
es más importante que la medida absoluta de uno cualquiera solo.
"Aislados" o "sustancialmente puros",
cuando se hace referencia a ácidos nucleicos, se refieren a los que
se han purificado de otros componentes celulares u otros
contaminantes, p. ej., otros ácidos nucleicos o proteínas
celulares, mediante técnicas estándar, incluyendo tratamiento
alcalino/con SDS, formación de bandas con CsCl, cromatografía en
columna y otras bien conocidas en la especialidad. Véase F. Ausubel,
et ál., ed. Current Protocols in Molecular Biology, Greene
Publishing and Wiley-Interscience, Nueva York
(1987), incorporada en la presente memoria mediante referencia.
Un ácido nucleico está "conectado
operativamente" cuando está situado en una relación funcional con
otra secuencia de ácido nucleico. Por ejemplo, un promotor o
potenciador está conectado operativamente a una secuencia de
codificación si afecta a la transcripción de la secuencia.
Generalmente, conectadas operativamente significa que las
secuencias de ácido nucleico que están conectadas son contiguas y,
cuando es necesario enlazar dos regiones de codificación de
proteína, contiguas y en el marco de lectura.
Técnicas para la manipulación de ácidos
nucleicos, tales como subclonar secuencias de ácido nucleico que
codifican polipéptidos en vectores de expresión, marcaje de sondas,
hibridación de DNA, etc., se describen generalmente, por ejemplo,
en Sambrook et ál., (1989) Molecular Cloning: A Laboratory
Manual (2ª ed.), Vols. 1-3, Cold Spring Harbor
Laboratory, o Ausubel et ál., ed. (1987) ob. cit., las cuales
se incorporan ambas en la presente memoria mediante referencia.
Los "vectores de expresión", "vectores de
clonación" o "vectores" son a menudo plásmidos u otras
moléculas de ácido nucleico que son capaces de replicarse en una
célula huésped dada. Los vectores de expresión pueden replicarse
autónomamente, o pueden replicarse al ser insertados en un genoma de
la célula huésped, mediante métodos bien conocidos en la
especialidad. Los vectores que se replican autónomamente tendrán un
origen de replicación o secuencia de replicación autónoma
("ARS", por sus siglas en inglés) que es funcional en la célula
o las células elegidas. A menudo, es deseable que un vector sea
utilizable en más de una célula huésped, p. ej., en E. coli
para clonación y construcción, y en una célula de mamífero para la
expresión.
Se usan a menudo líneas celulares de mamífero
como células huésped para la expresión de polipéptidos derivados de
eucariotas. La propagación de células de mamífero en cultivo es
conocida de por sí. Véase Tissue Culture, Academic Press, Kruse and
Patterson, ed. (1973). Líneas de células huésped también pueden
incluir organismos tales como bacterias (p. ej., E. coli o
B. subtilis), levaduras, hongos filamentosos, células
vegetales o células de insecto, entre otros.
"Transformación" se refiere a la
introducción de vectores que contienen los ácidos nucleicos de
interés directamente en células huésped mediante métodos bien
conocidos. Métodos de transformación, que varían dependiendo del
tipo de célula huésped, incluyen electroporación; transfección
empleando cloruro cálcico, cloruro de rubidio, fosfato cálcico,
DEAE-dextrano u otras sustancias; bombardeo con
microproyectiles; lipofección; infección (donde el vector es un
agente infeccioso); y otros métodos. Véase generalmente Sambrook
et ál., (1989) ob. cit. La referencia a células en las que
se han introducido los ácidos nucleicos descritos anteriormente
pretende incluir además la progenie de tales células.
Según se usa en la presente memoria,
"polipéptido de inmunoglobulina" se refiere a moléculas que se
derivan de inmunoglobulinas naturales (p. ej., anticuerpos) que
tienen una actividad inmunorreactiva específica contra una diana
particular, p. ej., contra fibrillas de amiloide. Los anticuerpos
son típicamente tetrámeros de polipéptidos de inmunoglobulina.
Según se usa en la presente memoria, el término "anticuerpo"
también se refiere a una proteína que consiste en uno o más
polipéptidos sustancialmente codificados por genes de
inmunoglobulina. Genes de inmunoglobulina incluyen los que
codifican para las cadenas ligeras, que pueden ser de los tipos
kappa o lambda, y los que codifican para las cadenas pesadas. Tipos
de cadena pesada son alfa, gamma, delta, épsilon y mu. Las
porciones carboxiterminales de las cadenas pesadas y ligeras de
inmunoglobulina son regiones constantes, mientras que las porciones
aminoterminales son codificadas por los múltiples genes de regiones
variables de inmunoglobulina. Las regiones variables de una
inmunoglobulina son las porciones que proporcionan especificidad de
reconocimiento de antígenos. En particular, la especificidad reside
en las regiones que determinan la complementariedad ("CDR",
por sus siglas en inglés), también conocidas como regiones
hipervariables, de las inmunoglobulinas.
Las inmunoglobulinas pueden existir en una
variedad de formas fragmentarias incluyendo, por ejemplo, Fv, Fab,
F(ab''), F(ab')_{2}, SvFv y otros fragmentos, así
como cadenas simples (p. ej., Huston, et ál., Proc. Nat.
Acad. Sci. U.S.A., 85:5879-5883 (1988) y Bird, et
ál., Science 242: 423-426 (1988). (Véase,
generalmente, Hood, et ál., "Immunology", Benjamin,
N.Y., 2ª ed. (1984), y Hunkapiller y Hood, Nature,
323:15-16 (1986)). También pueden usarse
anticuerpos monocatenarios, en los que los genes para una cadena
pesada y una cadena ligera se combinan en una sola secuencia de
codificación. Polipéptido de inmunoglobulina también abarca una
cadena de inmunoglobulina truncada, por ejemplo, una cadena que
contiene menos dominios de región constante que en el polipéptido
natural. Tales polipéptidos truncados pueden producirse mediante
métodos estándar tales como introducir un codón de parada en la
secuencia génica 5' de las secuencias de dominio que han de
someterse a deleción. Los polipéptidos truncados pueden ensamblarse
a continuación en anticuerpos truncados. Anticuerpos, según se usa
en la presente memoria, también incluye anticuerpos biespecíficos
que pueden producirse tal como mediante los métodos descritos en
las siguientes referencias: Glennie et ál., J. Immunol.,
139:2367-2375 (1987); Segal et ál., Biologic
Therapy of Cancer Therapy of Cancer Updates
2(4):1-12 (1992); y Shalaby et ál., J.
Exp. Med. 175: 217-225 (1992).
Los "anticuerpos monoclonales" pueden
obtenerse mediante diversas técnicas familiares para los expertos en
la especialidad. En resumen, células de bazo procedentes de un
animal inmunizado con un antígeno deseado se inmortalizan,
comúnmente mediante fusión con una célula de mieloma (véase, Kohler
y Milstein, Eur. J. Immunol, 6:511-519 (1976)).
Métodos alternativos de inmortalización incluyen transformación con
virus de Epstein Barr, oncogenes o retrovirus, u otros métodos bien
conocidos en la especialidad. Colonias que surgen de células
inmortalizadas simples se rastrean con respecto a la producción de
anticuerpos de la especificidad y afinidad deseadas para el
antígeno, y el rendimiento de los anticuerpos monoclonales
producidos por tales células puede potenciarse mediante diversas
técnicas, incluyendo inyección en la cavidad peritoneal de un
huésped vertebrado.
Inmunoglobulinas monoespecíficas y biespecíficas
también pueden producirse mediante técnicas recombinantes en
células huésped procarióticas o eucarióticas.
Los anticuerpos "quiméricos" son
codificados por genes de inmunoglobulina que se han sometido a
ingeniería genética de modo que los genes de las cadenas ligeras y
pesadas estén compuestos por segmentos de gen de inmunoglobulina
pertenecientes a diferentes especies. Por ejemplo, los segmentos
variables (V) de los genes procedentes de un anticuerpo monoclonal
de ratón pueden enlazarse a segmentos constantes (C) humanos. Es
probable que tal anticuerpo quimérico sea menos antigénico para un
ser humano que anticuerpos con regiones constantes de ratón así
como regiones variables de ratón.
Según se usa en la presente memoria, el término
anticuerpo quimérico también se refiere a un anticuerpo que incluye
una inmunoglobulina que tiene un armazón humanoide y en el que
cualquier región constante presente tiene al menos aproximadamente
85%-90%, y preferiblemente aproximadamente 95% de identidad de
secuencia de polipéptidos con una región constante de
inmunoglobulina humana, la llamada inmunoglobulina "humanizada"
(véase, por ejemplo, la Publicación PCT WO 90/07861). De ahí que
todas las partes de tal inmunoglobulina "humanizada", excepto
posiblemente las regiones de determinan la complementariedad (CDR),
sean sustancialmente idénticas a partes correspondientes de una o
más secuencias de inmunoglobulina humana natural. Cuando sea
necesario, los residuos del armazón también pueden reemplazarse por
aquellos dentro o a través de especies, especialmente si se
encuentra que ciertos residuos del armazón afectan a la estructura
de las CDR. Un anticuerpo quimérico también puede contener regiones
variables o constantes truncadas.
El término "región de armazón", según se
usa en la presente memoria, se refiere a aquellas porciones de las
regiones variables de las cadenas ligeras y pesadas de
inmunoglobulina que están relativamente conservadas (es decir,
distintas de las CDR) entre diferentes inmunoglobulinas en una sola
especie, según se definió por Kabat, et ál., (1987);
Sequences of Proteins of Immunologic Interest, 4ª Ed., U.S. Dept.
Health and Human Services). Según se usa en la presente memoria,
una "región de armazón humanoide" es una región de armazón que
en cada cadena existente comprende al menos aproximadamente 70 o más
residuos de aminoácido, típicamente de 75 a 85 o más residuos,
idénticos a los de una inmunoglobulina humana.
Secuencias de DNA de la región constante humanas
pueden aislarse de acuerdo con procedimientos bien conocidos a
partir de una variedad de células humanas, pero preferiblemente a
partir de células B inmortalizadas. Las regiones variables o CDR
para producir las inmunoglobulinas quiméricas de la presente
invención pueden derivarse de forma similar de anticuerpos
monoclonales capaces de unirse al amiloide tipo humano, y se
producirán en cualquier sistema mamífero conveniente, incluyendo
ratones, ratas, conejos, líneas celulares humanas o cualesquiera
otros vertebrados capaces de producir anticuerpos mediante métodos
bien conocidos. Las regiones variables o CDR pueden producirse
sintéticamente, mediante métodos recombinantes estándar, incluyendo
la reacción en cadena de la polimerasa ("PCR", por sus siglas
en inglés) o a través de bibliotecas de presentación en fagos. Para
los métodos de presentación en fagos, véanse, por ejemplo,
McCafferty et ál., Nature 348:552-554 (1990);
Clackson et ál., Nature 352:624-628 y Marks
et ál., Biotechnology 11:1145-1149 (1993).
Pueden emplearse sistemas procarióticos adecuados, tales como una
bacteria, una levadura y un fago.
Células originarias adecuadas para las
secuencias de DNA y células huésped para la expresión y secreción de
inmunoglobulinas pueden obtenerse de un número de fuentes, tales
como the American Type Culture Collection ("Catalogue of Cell
Lines and Hybridomas", Quinta edición (1985) Rockville, Maryland,
EE. UU. de A.).
Además de las inmunoglobulinas quiméricas y
"humanizadas" descritas específicamente en la presente memoria,
otras inmunoglobulinas modificadas esencialmente idénticas pueden
diseñarse y fabricarse fácilmente utilizando diversas técnicas de
DNA recombinante bien conocidas por los expertos en la especialidad.
En general, pueden efectuarse fácilmente modificaciones de los
genes mediante una variedad de técnicas bien conocidas, tales como
PCR y mutagénesis dirigida al sitio (véanse Gillman y Smith, Gene
8:81-97 (1979) y S. Roberts et ál., Nature
328:731-734 (1987)).
Alternativamente, pueden producirse fragmentos
de polipéptido que comprenden solo una porción de la estructura
primaria de inmunoglobulina. Por ejemplo, puede ser deseable
producir fragmentos de polipéptido de inmunoglobulina que posean
una o más actividades de inmunoglobulina además del, o distintas
del, reconocimiento de antígenos (p. ej., fijación del
complemento).
Los genes de inmunoglobulina, enteros o en
parte, también pueden combinarse con regiones funcionales
procedentes de otros genes (p. ej., enzimas), o con otras moléculas
tales como toxinas, marcadores y restos orientadores para producir
proteínas de fusión (p. ej., "inmunotoxinas") que tienen nuevas
propiedades. En estos casos de fusión génica, los dos componentes
están presentes dentro de la misma cadena polipeptídica.
Alternativamente, la inmunoglobulina o el fragmento de la misma
puede unirse químicamente a la toxina o el marcador mediante
cualquiera de una variedad de procedimientos químicos bien
conocidos. Por ejemplo, cuando el marcador o el agente citotóxico
es una proteína y el segundo componente es una inmunoglobulina
intacta, la conexión puede ser por medio de reticuladores
heterobifuncionales, p. ej., SPDP, carbodiimida, glutaraldehído o
similares.
Marcadores adecuados incluyen, por ejemplo,
radionúclidos, enzimas, sustratos, cofactores, inhibidores,
sustancias fluorescentes, sustancias quimioluminiscentes,
partículas magnéticas. Véanse, para ejemplos de patentes que
muestran el uso de tales marcadores, las Patentes de EE. UU. Nº
3.817.837, 3.850.752, 3.939.350, 3.996.345, 4.277.437, 4.275.149 y
4.366.241.
Las inmunotoxinas, incluyendo las moléculas
monocatenarias, también pueden producirse por medios recombinantes.
La producción de diversas inmunotoxinas es bien conocida en la
especialidad, y pueden encontrarse métodos, por ejemplo, en
"Monoclonal Antibody-Toxin Conjugates: Aiming the
Magic Bullet", Thorpe et ál., Monoclonal Antibodies in
Clinical Medicine, Academic Press, pp. 168-190
(1982); E. Vitetta, Science (1987) 238:1098-1104; y
G. Winter y C. Milstein, Nature (1991)
349:293-299.
\newpage
Técnicas adicionales para preparar
inmunoglobulinas y fragmentos de inmunoglobulina se describen en
V.S. Malik et ál., Antibody Techniques (Academic Press,
1994); C.A.K. Borrebaeck, Antibody Engineering: Breakthroughs in
Molecular Biology (Oxford Univ. Press, 1995); y P.J. Delves et
ál., Antibody Production: Essential Techniques (John Wiley
& Sons, 1997).
"Opsonizar", según se usa en la presente
memoria, se refiere a la unión de un polipéptido de inmunoglobulina
a una diana particular, particularmente epítopos encontrados en
depósitos de fibrillas de amiloide, de modo que el anticuerpo y las
dianas juntos son reconocidos como "extraños" por el sistema
inmunitario celular del huésped. En otras palabras, la unión de la
inmunoglobulina de la presente invención potencia la fagocitación
de las fibrillas de amiloide.
"Amiloidosis", según se usa en la presente
memoria, pretende referirse a cualquier afección que esté
caracterizada por la presencia de material amiloideo. Tal material
puede estar en la forma de un amiloidoma o depósitos de amiloide
más dispersos o fibrillas.
\vskip1.000000\baselineskip
Las composiciones farmacéuticas para el
tratamiento terapéutico de acuerdo con la presente invención están
destinadas a la administración parenteral, oral o local.
Preferiblemente, las composiciones farmacéuticas se administran
parenteralmente, p. ej., intravenosamente, subcutáneamente,
intradérmicamente o intramuscularmente. Como la barrera
sangre-cerebro es impermeable a IgG (véase U. Bickel
et ál., 1994 Bioconjug. Chem. 5: 119-25), el
aporte de anticuerpos para vencer la barrera
sangre-cerebro (BBB, por sus siglas en inglés) puede
alcanzarse a través de aporte liposómico o micelar del anticuerpo a
la zona deseada. Alternativamente, los agentes de esta invención
pueden aportarse directamente al fluido cerebroespinal (véase, por
ejemplo, L.C. Walker et ál., 1994 J. Neuropathol. Exp.
Neurol. 53: 377-83). Para otros mecanismos de
aporte, se hace referencia a P.M. Friden, 1996 Patente de EE. UU.
Nº 5.527.527 y W.M. Pardridge, 1991 Patente de EE. UU. Nº
5.004.697.
Así, la invención proporciona composiciones para
administración parenteral que comprenden una solución del
polipéptido de inmunoglobulina anti-fibrilla de
amiloide de IgLC humana disuelto o suspendido en un vehículo
farmacéuticamente aceptable, preferiblemente un vehículo acuoso.
Puede usarse una variedad de vehículos acuosos, p. ej., agua, agua
tamponada, solución salina al 0,4%, glicina al 0,3%, ácido
hialurónico y similares. Estas composiciones pueden esterilizarse
mediante técnicas de esterilización convencionales bien conocidas, o
pueden filtrarse estérilmente. Las soluciones acuosas resultantes
pueden envasarse para usar según están, o pueden liofilizarse,
combinándose la preparación liofilizada con una solución estéril
antes de la administración. Las composiciones pueden contener
sustancias auxiliares farmacéuticamente aceptables, según se
requiera para aproximarse a las condiciones fisiológicas, tales
como agentes de ajuste del pH y tamponadores, agentes de ajuste de
la tonicidad, agentes humectantes y similares, por ejemplo, acetato
sódico, lactato sódico, cloruro sódico, cloruro potásico, cloruro
cálcico, monolaurato de sorbitán, oleato de trietanolamina, etc.
La concentración de polipéptidos de
inmunoglobulina antiamiloide en las formulaciones farmacéuticas
puede variar ampliamente, es decir, de menos de aproximadamente 1%,
habitualmente a o al menos aproximadamente 10-15%,
hasta tanto como 50% en peso o más, y se seleccionará principalmente
por los volúmenes de fluido, las viscosidades, etc., de acuerdo con
el modo de administración particular seleccionado.
Sin una experimentación excesiva, un experto
normal en la técnica podría determinar la cantidad de polipéptidos
de inmunoglobulina que sería eficaz para opsonizar adecuadamente un
amiloidoma. Las cantidades eficaces para este uso dependerán, p.
ej., de la naturaleza de la composición de polipéptido de
inmunoglobulina antiamiloide, el modo de administración, el estadio
y la gravedad de la enfermedad que se trata, el peso y el estado de
salud general del paciente y el juicio del médico que prescribe.
Podría usarse generalmente una dosis simple típica de 0,5 mg/kg.
Debe tenerse en cuenta que el polipéptido de inmunoglobulina
antiamiloide y las composiciones peptídicas derivadas del mismo
pueden emplearse en estados patológicos graves, esto es, situaciones
que amenazan la vida o que potencialmente amenazan la vida. En
tales casos, es posible y puede ser considerado deseable por el
médico que trata administrar excesos sustanciales de estas
composiciones.
El tratamiento de seres humanos con amiloidosis
también podría aplicarse a animales susceptibles de amiloidosis,
tales como vacas o pollos. Así, las referencias a pacientes humanos
en la presente memoria se aplican también a pacientes no
humanos.
Los polipéptidos de inmunoglobulina, según se
definen en la presente memoria, son mAb antiamiloide dirigidos
hacia un amiloidoma o componentes o precursores del mismo. Los mAb
también pueden producirse contra dominios de la región variable de
IgLC o, preferiblemente, contra los subconjuntos de IgLC \kappa1,
\kappa4, \lambda8 o combinaciones de los mismos. La
administración a seres humanos de polipéptidos de inmunoglobulina
que son sustancialmente humanos puede provocar respuestas
antianticuerpo. Así, puede ser deseable preparar polipéptidos de
inmunoglobulina anti-IgLC que sean sustancialmente
humanos. Por "sustancialmente humano" se entiende un
anticuerpo o fragmento de unión del mismo comprendido por secuencias
de aminoácidos que son al menos aproximadamente 50% de origen
humano, al menos de 70 a 80% más preferiblemente, y aproximadamente
95-99% o más humanos, lo más preferiblemente,
particularmente para administraciones repetidas durante un período
prolongado, según pueda ser necesario para tratar casos
establecidos de amiloidosis. Según se usa en la presente memoria, se
entiende que anticuerpo humano incluye anticuerpos de origen
totalmente humano así como los que son sustancialmente humanos, a
no ser que el contexto indique otra cosa.
Los anticuerpos monoclonales también pueden
producirse contra fibrillas de amiloide sintéticas. Péptidos de la
región variable de una cadena ligera recombinantes se aíslan y se
purifican in vitro usando técnicas estándar. Se preparan a
continuación fibrillas sintéticas a partir de los péptidos usando
técnicas tales como las descritas por Wall et ál., "In
vitro Immunoglobulin Light Chain Fibrillogenesis", METHODS IN
ENZYMOLOGY, Vol. 309 (En prensa). Se producen a continuación
anticuerpos contra las fibrillas sintéticas usando técnicas de
inmunización estándar, típicamente en ratones o conejos. Líneas
celulares monoclonales que secretan anticuerpos antifibrillas se
producen usando técnicas de hibridoma estándar.
Los polipéptidos de inmunoglobulina antiamiloide
pueden prepararse mediante cualquiera de un número de técnicas bien
conocidas. Por ejemplo, pueden prepararse inmunizando a un animal
con amiloide humano purificado o parcialmente purificado. Los
animales inmunizados pueden ser uno de una variedad de especies que
son capaces de reconocer inmunológicamente epítopos característicos
del dominio extracelular de amiloide de tipo humano, tales como
múridos, lagomorfos, equinos, etc.
Los anticuerpos monoclonales pueden prepararse
inmortalizando células que comprenden secuencias de ácido nucleico
que codifican polipéptidos de inmunoglobulina o porciones de los
mismos que se unen específicamente a determinantes antigénicos
característicos del dominio extracelular del amiloide de tipo
humano. El procedimiento de inmortalización puede llevarse a cabo
mediante técnicas de fusión de hibridomas, mediante transformación
viral de linfocitos productores de anticuerpos, técnicas de DNA
recombinante o mediante técnicas que combinan fusión celular,
transformación viral y/o metodologías de DNA recombinante.
Inmunógenos para producir los anticuerpos monoclonales incluyen
fibrillas de amiloide sintéticas como las descritas, por ejemplo,
por A. Lomakin et ál., 1997 Proc. Nat'l Acad. Sci. USA 94:
7942-7.
Como la generación de anticuerpos monoclonales
antiamiloide humanos puede ser difícil con técnicas de
inmortalización convencionales, puede ser deseable elaborar en
primer lugar anticuerpos no humanos y a continuación transferir a
través de técnicas de DNA recombinante las regiones que se unen a
antígeno de los anticuerpos no humanos, p. ej., el Fab, regiones
que determinan la complementariedad (CDR) o regiones hipervariables,
a regiones constantes humanas (Fc) o regiones de armazón según sea
apropiado para producir moléculas sustancialmente humanas. Tales
métodos se conocen generalmente en la especialidad y se describen,
por ejemplo, en U.S. 4.816.397, la publicación PCT WO 90/07861 y
las publicaciones EP 173494 y 239400. Sin embargo, pueden producirse
anticuerpos completamente humanos en animales transgénicos. Los
genes o segmentos génicos de inmunoglobulina humana deseados pueden
aislarse, por ejemplo mediante PCR, de células B humanas, el DNA
puede clonarse en vectores apropiados para la expresión en células
eucarióticas y el DNA clonado puede introducirse en animales para
producir transgénicos. Animales adecuados para la producción de
transgénicos que expresan inmunoglobulina humana incluyen ratones,
ratas, conejos y cerdos. Con los roedores, los transgénicos que
expresan inmunoglobulinas humanas deben tener preferiblemente uno o
más de sus loci de inmunoglobulina endógenos inactivados o
"noqueados" para facilitar la identificación y el aislamiento
de los anticuerpos humanos (Véase, p. ej., Lonberg, et ál.
Nature 368:856-859
(1994)).
(1994)).
Los anticuerpos quiméricos o polipéptidos de
inmunoglobulina quiméricos resultantes que se unen a amiloide
humano también están dentro del alcance de la presente invención. Un
anticuerpo quimérico terapéutico típico sería una proteína híbrida
que consiste en el dominio variable (V) o de unión a antígeno
procedente de una inmunoglobulina de ratón específica para un
determinante antigénico de amiloide humano y el dominio constante
(C) o efector procedente de una inmunoglobulina humana, aunque
pueden usarse dominios procedentes de otras especies de mamífero
para los dominios tanto variable como constante. Según se usa en la
presente memoria, el término "anticuerpo quimérico" también se
refiere a anticuerpos codificados por genes de inmunoglobulina en
los que solo las CDR se transfieren desde la inmunoglobulina que
reconoce específicamente los determinantes antigénicos, derivándose
el resto del gen de inmunoglobulina de un gen de inmunoglobulina
humano (o de otro mamífero, según se desee). Según se analiza
anteriormente, este tipo de anticuerpo quimérico se denomina un
anticuerpo "humanizado" (en caso de que se esté usando un gen
de inmunoglobulina humano). También se consideran anticuerpos
humanos recombinantes que no contienen secuencias de otras
especies.
Las regiones hipervariables de los dominios
variables de los polipéptidos de inmunoglobulina antiamiloide
comprenden un aspecto relacionado de la invención. Las regiones
hipervariables, o CDR, junto con las regiones de armazón (aquellas
porciones de regiones variables de cadenas ligeras y pesadas de
inmunoglobulina que están relativamente conservadas entre
diferentes inmunoglobulinas en una sola especie), permiten que los
polipéptidos de inmunoglobulina antiamiloide reconozcan y así se
unan a amiloide humano. Las regiones hipervariables pueden clonarse
y someterse a secuenciación. Una vez identificadas, estas regiones
que confieren reconocimiento específico de amiloide humano pueden
clonarse a continuación en un vector para la expresión en un huésped
como parte de otra molécula de inmunoglobulina o como una proteína
de fusión, p. ej., una molécula portadora que funciona para
potenciar la inmunogenicidad del idiotipo clonado.
Los polipéptidos de inmunoglobulina antiamiloide
se usarán generalmente intactos, o como fragmentos inmunogénicos,
tales como fragmentos Fv, Fab, F(ab')_{2}. Los fragmentos
pueden obtenerse a partir de anticuerpos mediante técnicas
convencionales, tales como mediante digestión proteolítica del
anticuerpo usando, p. ej., pepsina, papaína u otras enzimas
proteolíticas, o mediante técnicas de DNA recombinante en las que un
gen o una porción del mismo que codifica el fragmento deseado se
clona o se sintetiza, y se expresa en una variedad de huéspedes.
Los expertos en la especialidad apreciarán que
pueden producirse anticuerpos "antiidiotípicos" usando una
inmunoglobulina específica como un inmunógeno de acuerdo con
técnicas estándar. Por ejemplo, la infección o inmunización con una
fibrilla de amiloide o fragmento de la misma induce una
inmunoglobulina neutralizadora, que tiene en su sitio de
combinación de la región variable de Fab una imagen del amiloide que
es única para esa inmunoglobulina particular, es decir, un
idiotipo. La inmunización con tal inmunoglobulina antiamiloide
induce un anticuerpo antiidiotípico, que tiene una conformación en
su sitio de combinación que imita la estructura del antígeno
amiloideo original. Por lo tanto, pueden usarse estos anticuerpos
antiidiotípicos en lugar del antígeno amiloideo. Véase, por
ejemplo, Nisonoff (1991) J. Immunol.
147:2429-2438.
Los siguientes ejemplos de trabajo apuntan
específicamente a realizaciones preferidas de la presente invención,
y no debe considerarse que limiten de ningún modo el resto de la
divulgación. Otras configuraciones genéricas serán evidentes para
un experto en la especialidad.
Amiloide de IgLC humana se extrajo y se purificó
de órganos infectados obtenidos durante una autopsia. Los primeros
experimentos implicaban trasplantar 50-200 mg de
este material amiloideo a un ratón Balb/c. La masa amiloidea, o
"amiloidoma", se preparó en PBS estéril mediante etapas de
sonicación y trituración en serie para producir una suspensión fina
de fibrillas de amiloide completadas con las moléculas auxiliares
encontradas in vivo. Este procedimiento se realizó para
permitir que el amiloide se inyectara en los ratones a través de
una aguja hipodérmica de calibre ancho.
El material amiloideo, equivalente a 10% del
peso corporal del animal, se inyectó en los ratones (bajo anestesia)
entre la escápula, lo que daba como resultado que era visible una
masa grande (véase la Figura 1A). El ratón requería
15-18 días para alcanzar la eliminación completa del
amiloidoma (véase la Figura 1B), después de lo cual el animal
parecía sano y vivía una vida normal. La eliminación del amiloidoma
fue determinada subjetivamente por el experimentador; simplemente
palpando la zona de inyección, un amiloidoma, como un guisante duro,
puede apreciarse fácilmente bajo la piel.
\vskip1.000000\baselineskip
La implicación de los anticuerpos antiamiloide
en la eliminación de amiloidomas se observó rastreando suero
procedente de un ratón previamente inyectado con material amiloideo
contra una muestra del material inyectado. Esto se realizó mediante
análisis por transferencia Western usando diluciones adecuadas del
suero de ratón como el anticuerpo primario. Se observó que había
anticuerpos para cada componente de la matriz amiloidea, es decir,
cada banda del gel era teñida por el suero del ratón, incluso con
una dilución del suero de 10.000 veces (datos no mostrados).
La implicación de un componente celular se
demostró mediante ensayos de unión a neutrófilos in vitro
(véanse las Figuras 2A y 2B) y usando estirpes de ratones mutantes
por noqueo (datos no mostrados). Las Figuras 2A y 2B muestran
neutrófilos humanos que se adhieren a amiloide humano después de que
el amiloide se trate con mAb anti-(IgLC humana) de ratón. Esto
muestra que el mAb de ratón puede unirse a amiloide humano así como
atraer neutrófilos humanos.
Estudios de estirpes de ratones mutantes por
noqueo apoyan adicionalmente el hallazgo de la implicación de
anticuerpos en la eliminación de amiloide. En primer lugar, ratones
scid/scid, que careces de linfocitos B y T, eran incapaces de
eliminar un amiloidoma inyectado incluso después de tres meses
(datos no mostrados). En segundo lugar, los animales noqueados en
CD18 eran incapaces de eliminar el amiloidoma tan rápidamente como
los animales normales. Los animales noqueados en CD18 eran 97%
deficientes en CD 18, una integrina de la superficie celular
encontrada en linajes de granulocitos/macrófagos. Aunque estas
células no pueden abandonar la circulación, los animales son
competentes en células B y T y por lo tanto pueden montar una
respuesta de anticuerpos. En tercer lugar, los ratones desnudos,
que no tienen glóbulos blancos, eran incapaces de eliminar el
amiloidoma.
Por otra parte, un amiloide que ha sido incubado
con suero reactivo con amiloide procedente de otro ratón, cuando se
implantaba en el segundo ratón, se eliminaba en 4 días. En este
experimento, un ratón Balb/c fue inyectado con 50 mg de amiloide de
HIG y se dejó durante 1 semana, después de lo cual se sangró
mediante pinzamiento en la vena de la cola. La sangre se centrifugó
a 1500 rpm y las células se eliminaron mediante aspiración. El
plasma se almacenó a 4ºC hasta que se usaba. Otra preparación de
amiloide de HIG (100 mg) se preparó suspendiendo en PBS estéril a
la que se añadía 1 ml de plasma procedente del ratón previo. Esta
preparación se inyectó a continuación en un segundo ratón (Balb/c)
y el amiloide se eliminó en 4 días. Así, se concluyó que el
procedimiento podía acelerarse opsonizando el material antes de la
inyección.
\vskip1.000000\baselineskip
Se realizó un estudio sistemático usando
técnicas de ELISA para rastrear un gran número de muestras de
amiloide extraídas de seres humanos usando mAb producidos contra
los subconjuntos de IgLC (\lambda1, \lambda2, \lambda3,
\lambda4, \lambda5, \lambda6, \kappa1, \kappa2, \kappa3,
\kappa4, \kappa y \lambda libres y \kappa y \lambda
totales). De forma interesante, se encontró que, más a menudo que
no, los amiloides daban positivo con mAb específicos para su propio
subtipo, los anticuerpos \kappa o \lambda totales y un mAb
\kappa1(57-18H12),
\kappa4(11-1F4) y
\lambda8(31-8C7). Se encontró que estos
tres últimos agentes reaccionaban de un modo no específico para el
subgrupo, es decir, \kappa1 reaccionaba con amiloides comprendidos
por IgLC distintas de \kappa1; y los otros dos mAb exhiben la
misma calidad. Esto muestra que el epítopo reconocido por estos
anticuerpos puede ser un rasgo general de fibrillas de amiloide,
indicando la posibilidad de un epítopo de amiloide compartido que
puede elegirse como diana.
\vskip1.000000\baselineskip
Muestras tisulares procedentes de pacientes con
amiloide se tiñeron usando técnicas inmunoquímicas estándar y se
observó un fenómeno de unión similar. Las Figuras
3A-3D muestran que anti-\kappa1 se
une al amiloide de \kappa1 y, sorprendentemente, que el
anti-\kappa4 reacciona con el amiloide de
\kappa1, sugiriendo un epítopo de amiloide que estos anticuerpos
pueden reconocer. Adicionalmente, el anti-\kappa4
reacciona con amiloide que contiene \lambda (no ilustrado). Este
es un ejemplo de reactividad isotípica cruzada. Sin embargo, los
resultados procedentes del ELISA y la inmunohistoquímica no siempre
eran concordantes. Esto se debe probablemente a la diferencia
inherente en lo que se está observando, es decir, el ELISA es un
ensayo de unión en fase líquida que usa amiloide purificado
extraído, mientras que la inmunohistoquímica se realiza sobre
secciones de tejido fijadas sobre un portaobjetos.
\vskip1.000000\baselineskip
0,1 mg de uno de tres anticuerpos -\kappa1,
\kappa4 o \lambda8, identificados anteriormente- se inyectó en
el muslo de un ratón en el que se había introducido amiloide en la
forma de un amiloidoma según se describe anteriormente. Los
reaccionantes \kappa1 y \kappa4 daban como resultado la
eliminación completa por el huésped de la mayoría de las especies
de fibrillas de amiloide probadas en menos de 7 días (tan poco como
4 días para ciertas fuentes de amiloide). La Figura 4 muestra mAb
\kappa4 tratado con fluoresceína que se une a amiloide
humano.
El reaccionante \lambda8, que es reactivo en
ciertos caso en ambos estudios in vitro (anteriormente),
incrementaba la resolución de los amiloidomas en hasta
aproximadamente 10% en los experimentos in vivo.
\vskip1.000000\baselineskip
Se aisló amiloide humano de un paciente con
amiloide AA asociado con la inflamación y se preparó para la
inyección en ratones Balb/C mediante sonicación y trituración
repetidas para permitir su inyección en el ratón (véase el Ejemplo
1). Inmediatamente después de la inyección de 100 mg de extracto de
amiloide AA humano, los ratones se trataron con 100 \mug de mAb
\kappa4, mAb anti-AA, sin mAb y mAb de control no
específico (anti-\kappa libre). La resolución
competa del material se observó con 48 horas en los animales que
habían sido tratados con los mAb \kappa4 y
anti-AA. En contraste, los animales de control
tenían una masa grande de amiloide que permanecía en la zona de
inyección.
\vskip1.000000\baselineskip
Se prepararon fibrillas de amiloide sintéticas
in vitro y se usaron como un inmunógeno en ratones para
producir una primera generación de mAb
anti-fibrilla de amiloide. En resumen, se produjeron
péptidos de la región variables de la cadena ligera \lambda6
recombinantes, se aislaron y se purificaron usando un sistema de
expresión bacteriano y técnicas de purificación de proteínas
estándar. Se prepararon fibrillas sintéticas a partir de estos
péptidos mediante períodos prolongados de agitación en solución,
según se describe, por ejemplo, en Wall et ál., "In
vitro Immunoglobulin Light Chain Fibrillogenesis", METHODS IN
ENZYMOLOGY, Vol. 309 (En Prensa). Las fibrillas se concentraron
mediante centrifugación a 17.000 x g durante 20 minutos a
temperatura ambiente.
Las fibrillas concentradas se usaron a
continuación para inmunizar ratones Balb/c durante un período de
varias semanas. Líneas celulares monoclonales que secretan
anticuerpos antifibrillas se produjeron usando técnicas de
hibridoma estándar. Los anticuerpos resultantes tienen una actividad
antifibrillas demostrable basada en ensayos de ELISA, descritos en
el Ejemplo 3. Estos anticuerpos reaccionaban con 99% de todos los
extractos de amiloide de IgLC humana probados hasta la fecha
independientemente de la naturaleza del isotipo o subgrupo de la
proteína precursora cuando se ensayaban mediante ELISA. De forma
similar, los anticuerpos reaccionaban en un formato de ELISA con
amiloide AA múrido aislado y fibrillas sintéticas compuestas de un
péptido derivado de la proteína de Alzheimer A\beta
[A\beta(25-35)].
Debe entenderse que el análisis y los ejemplos
precedentes presentan meramente una descripción detallada de
ciertas realizaciones preferidas.
Claims (33)
1. El uso de:
- a)
- una dosis terapéuticamente eficaz de al menos un anticuerpo o polipéptido de inmunoglobulina o un fragmento del mismo que se une a fibrilla de amiloide de IgLC humana; y
- b)
- un vehículo farmacéuticamente aceptable;
- para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad por deposición de amiloide en un paciente humano.
\vskip1.000000\baselineskip
2. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en
el que el anticuerpo o polipéptido de inmunoglobulina o fragmento
del mismo se produce contra una cadena ligera de
inmunoglobulina.
3. El uso de acuerdo con la reivindicación 1 ó
2, en el que el anticuerpo o polipéptido de inmunoglobulina o
fragmento del mismo es un anticuerpo monoclonal.
4. El uso de acuerdo con la reivindicación 3, en
el que el anticuerpo monoclonal es un anticuerpo completamente
humano.
5. El uso de acuerdo con la reivindicación 3, en
el que el anticuerpo monoclonal es un anticuerpo humanizado.
6. El uso de acuerdo con la reivindicación 3, en
el que el anticuerpo monoclonal es un anticuerpo quimérico.
7. El uso de acuerdo con la reivindicación 6, en
el que el anticuerpo quimérico es un anticuerpo humanizado.
8. El uso de acuerdo con la reivindicación 3, en
el que el anticuerpo es un anticuerpo marcado.
9. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en
el que el fragmento de anticuerpo o inmunoglobulina es un fragmento
Fv, un fragmento Fab, un fragmento F(ab''), un fragmento
F(ab')_{2} o un fragmento SvFv.
10. El uso de acuerdo con la reivindicación 1,
en el que el anticuerpo o polipéptido de inmunoglobulina o
fragmento es un anticuerpo monocatenario.
11. El uso de acuerdo con la reivindicación 1,
en el que el anticuerpo o polipéptido de inmunoglobulina o
fragmento tiene reactividad isotípica cruzada.
12. El uso de acuerdo con la reivindicación 1,
en el que el anticuerpo o polipéptido de inmunoglobulina o
fragmento del mismo se ha producido contra fibrillas de amiloide
sintéticas.
13. Una composición que comprende una dosis
terapéuticamente eficaz de al menos un anticuerpo o polipéptido de
inmunoglobulina o fragmento del mismo que se une a fibrilla de IgLC
humana; y
b) un vehículo farmacéuticamente aceptable;
para el uso en el tratamiento de cualquier
enfermedad por deposición de amiloide en un paciente humano.
\vskip1.000000\baselineskip
14. La composición de acuerdo con la
reivindicación 13, en la que el anticuerpo o polipéptido de
inmunoglobulina o fragmento del mismo se produce contra una cadena
ligera de inmunoglobulina.
15. La composición de acuerdo con la
reivindicación 13 ó 14, en la que el anticuerpo o polipéptido de
inmunoglobulina o fragmento del mismo es un anticuerpo
monoclonal.
16. La composición de acuerdo con la
reivindicación 15, en la que el anticuerpo monoclonal es un
anticuerpo completamente humano.
17. La composición de acuerdo con la
reivindicación 15, en la que el anticuerpo monoclonal es un
anticuerpo humanizado.
18. La composición de acuerdo con la
reivindicación 15, en la que el anticuerpo monoclonal es un
anticuerpo quimérico.
19. La composición de acuerdo con la
reivindicación 18, en la que el anticuerpo quimérico es un
anticuerpo humanizado.
20. La composición de acuerdo con la
reivindicación 15, en la que el anticuerpo es un anticuerpo
marcado.
21. La composición de acuerdo con la
reivindicación 13, en la que el fragmento de anticuerpo o
inmunoglobulina es un fragmento Fv, un fragmento Fab, un fragmento
F(ab''), un fragmento F(ab')_{2} o un fragmento
SvFv.
22. La composición de acuerdo con la
reivindicación 13, en la que the anticuerpo o polipéptido de
inmunoglobulina o fragmento es un anticuerpo monocatenario.
23. La composición de acuerdo con la
reivindicación 13, en la que el anticuerpo o polipéptido de
inmunoglobulina o fragmento tiene reactividad isotípica
cruzada.
24. La composición de acuerdo con la
reivindicación 13, en la que el anticuerpo o polipéptido de
inmunoglobulina o fragmento del mismo se ha producido contra
fibrillas de amiloide sintéticas.
25. Una composición farmacéutica para el uso en
terapia, que comprende una dosis terapéuticamente eficaz de al
menos un anticuerpo o polipéptido de inmunoglobulina o un fragmento
del mismo, en la que el anticuerpo o polipéptido de inmunoglobulina
o fragmento del mismo se une a fibrilla de amiloide de IgLC humana y
es eficaz para potenciar la respuesta inmunitaria celular de un
paciente para eliminar depósitos de fibrillas de amiloide del
paciente.
26. La composición farmacéutica de acuerdo con
la reivindicación 25, en la que el anticuerpo o polipéptido de
inmunoglobulina o fragmento del mismo es un anticuerpo monoclonal o
un fragmento del mismo.
27. La composición farmacéutica de acuerdo con
la reivindicación 26, en la que el anticuerpo monoclonal es un
anticuerpo completamente humano.
28. La composición farmacéutica de acuerdo con
la reivindicación 26, en la que el anticuerpo monoclonal es un
anticuerpo humanizado.
29. La composición farmacéutica de acuerdo con
la reivindicación 26, en la que el anticuerpo es un anticuerpo
marcado.
30. La composición farmacéutica de acuerdo con
la reivindicación 25, en la que el fragmento de anticuerpo o
inmunoglobulina es un fragmento Fv, un fragmento Fab, un fragmento
F(ab''), un fragmento F(ab')_{2} o un fragmento
SvFv.
31. La composición farmacéutica de acuerdo con
la reivindicación 25, en la que el anticuerpo o polipéptido de
inmunoglobulina o fragmento del mismo es un anticuerpo
monocatenario.
32. La composición farmacéutica de acuerdo con
la reivindicación 25, en la que el anticuerpo o polipéptido de
inmunoglobulina o fragmento del mismo tiene reactividad isotípica
cruzada.
33. La composición farmacéutica de acuerdo con
una cualquiera de las reivindicaciones 25 a 32, en donde la
composición comprende además un vehículo.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US8619898P | 1998-05-21 | 1998-05-21 | |
| US86198P | 1998-05-21 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2345746T3 true ES2345746T3 (es) | 2010-09-30 |
Family
ID=22196938
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES99923260T Expired - Lifetime ES2345746T3 (es) | 1998-05-21 | 1999-05-21 | Metodos para la eliminacion de amiloide usando anticuerpos antiamiloide. |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP1078005B1 (es) |
| JP (2) | JP2002515235A (es) |
| KR (1) | KR100701580B1 (es) |
| CN (2) | CN1589903A (es) |
| AT (1) | ATE465178T1 (es) |
| AU (1) | AU4007599A (es) |
| CA (1) | CA2325600A1 (es) |
| DE (1) | DE69942274D1 (es) |
| DK (1) | DK1078005T3 (es) |
| ES (1) | ES2345746T3 (es) |
| IL (1) | IL139095A0 (es) |
| MX (1) | MXPA00011348A (es) |
| NZ (1) | NZ507727A (es) |
| PT (1) | PT1078005E (es) |
| RU (1) | RU2004107695A (es) |
| WO (1) | WO1999060024A1 (es) |
| ZA (1) | ZA200007811B (es) |
Families Citing this family (66)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1997021728A1 (en) | 1995-12-12 | 1997-06-19 | Karolinska Innovations Ab | PEPTIDE BINDING THE KLVFF-SEQUENCE OF AMYLOID $g(b) |
| US7179892B2 (en) | 2000-12-06 | 2007-02-20 | Neuralab Limited | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
| US6913745B1 (en) | 1997-12-02 | 2005-07-05 | Neuralab Limited | Passive immunization of Alzheimer's disease |
| TWI239847B (en) | 1997-12-02 | 2005-09-21 | Elan Pharm Inc | N-terminal fragment of Abeta peptide and an adjuvant for preventing and treating amyloidogenic disease |
| US6761888B1 (en) | 2000-05-26 | 2004-07-13 | Neuralab Limited | Passive immunization treatment of Alzheimer's disease |
| US7588766B1 (en) | 2000-05-26 | 2009-09-15 | Elan Pharma International Limited | Treatment of amyloidogenic disease |
| US6750324B1 (en) | 1997-12-02 | 2004-06-15 | Neuralab Limited | Humanized and chimeric N-terminal amyloid beta-antibodies |
| US20080050367A1 (en) | 1998-04-07 | 2008-02-28 | Guriq Basi | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
| US6923964B1 (en) | 1997-12-02 | 2005-08-02 | Neuralab Limited | Active immunization of AScr for prion disorders |
| US7790856B2 (en) | 1998-04-07 | 2010-09-07 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
| US6787523B1 (en) | 1997-12-02 | 2004-09-07 | Neuralab Limited | Prevention and treatment of amyloidogenic disease |
| US6905686B1 (en) | 1997-12-02 | 2005-06-14 | Neuralab Limited | Active immunization for treatment of alzheimer's disease |
| US20030147882A1 (en) | 1998-05-21 | 2003-08-07 | Alan Solomon | Methods for amyloid removal using anti-amyloid antibodies |
| US7060670B1 (en) | 1999-05-05 | 2006-06-13 | Neurochem (International) Limited | Stereoselective antifibrillogenic peptides and peptidomimetics thereof |
| US6787637B1 (en) | 1999-05-28 | 2004-09-07 | Neuralab Limited | N-Terminal amyloid-β antibodies |
| UA81216C2 (en) | 1999-06-01 | 2007-12-25 | Prevention and treatment of amyloid disease | |
| DE1257584T1 (de) | 2000-02-24 | 2003-05-28 | Lilly Co Eli | Humanisierte antikörper, die amyloid beta peptid demarkieren |
| AU2001253158A1 (en) | 2000-04-05 | 2001-10-23 | University Of Tennessee Research Corporation | Methods of investigating, diagnosing, and treating amyloidosis |
| PE20020574A1 (es) | 2000-12-06 | 2002-07-02 | Wyeth Corp | Anticuerpos humanizados que reconocen el peptido amiloideo beta |
| US7700751B2 (en) | 2000-12-06 | 2010-04-20 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized antibodies that recognize β-amyloid peptide |
| EP2165714B1 (en) | 2001-04-30 | 2013-10-23 | Eli Lilly And Company | Humanized antibodies recognizing the beta-amyloid peptide |
| EP1385544B1 (en) | 2001-04-30 | 2008-09-24 | Eli Lilly And Company | Humanized antibodies |
| PT1944040E (pt) | 2001-08-17 | 2012-10-31 | Univ Washington | Método de avaliação para a doença de alzheimer |
| EP1820806A1 (en) * | 2006-02-16 | 2007-08-22 | Crossbeta Biosciences B.V. | Affinity regions |
| MY139983A (en) | 2002-03-12 | 2009-11-30 | Janssen Alzheimer Immunotherap | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
| RU2353389C2 (ru) * | 2002-10-09 | 2009-04-27 | Ринат Ньюросайенс Корп. | Способы лечения болезни альцгеймера с использованием антител, направленных против пептида амилоида-бета, и их композиций |
| US20040146512A1 (en) * | 2002-10-09 | 2004-07-29 | Arnon Rosenthal | Methods of treating Alzheimer's disease using antibodies directed against amyloid beta peptide and compositions thereof |
| US8697082B2 (en) | 2002-11-01 | 2014-04-15 | Neotope Biosciences Limited | Prevention and treatment of synucleinopathic and amyloidogenic disease |
| US9034337B2 (en) | 2003-10-31 | 2015-05-19 | Prothena Biosciences Limited | Treatment and delay of outset of synucleinopathic and amyloidogenic disease |
| US20080014194A1 (en) | 2003-10-31 | 2008-01-17 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | Prevention and Treatment of Synucleinopathic and Amyloidogenic Disease |
| TW200509968A (en) | 2002-11-01 | 2005-03-16 | Elan Pharm Inc | Prevention and treatment of synucleinopathic disease |
| US8506959B2 (en) | 2002-11-01 | 2013-08-13 | Neotope Biosciences Limited | Prevention and treatment of synucleinopathic and amyloidogenic disease |
| ATE468886T1 (de) | 2003-02-10 | 2010-06-15 | Applied Molecular Evolution | Abeta-bindende moleküle |
| US7732162B2 (en) | 2003-05-05 | 2010-06-08 | Probiodrug Ag | Inhibitors of glutaminyl cyclase for treating neurodegenerative diseases |
| US7358331B2 (en) | 2003-05-19 | 2008-04-15 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | Truncated fragments of alpha-synuclein in Lewy body disease |
| TWI306458B (en) | 2003-05-30 | 2009-02-21 | Elan Pharma Int Ltd | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
| WO2005047860A2 (en) | 2003-11-08 | 2005-05-26 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | Antibodies to alpha-synuclein |
| EP1838348B1 (en) | 2004-12-15 | 2013-06-26 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized amyloid beta antibodies for use in improving cognition |
| US7625560B2 (en) | 2004-12-15 | 2009-12-01 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide |
| SI1954718T1 (sl) * | 2005-11-30 | 2015-01-30 | Abbvie Inc. | Protitelesa proti globulomeru A, njihovi antigen vezavni deli, ustrezni hibridomi, nukleinske kisline, vektorji, gostiteljske celice, postopki za izdelavo teh protiteles, sestavki, ki obsegajo ta protitelesa, uporaba teh protiteles in postopki uporabe teh protiteles |
| US8784810B2 (en) | 2006-04-18 | 2014-07-22 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Treatment of amyloidogenic diseases |
| DK2121754T3 (en) | 2007-01-18 | 2015-02-23 | Lilly Co Eli | Pegylated amyloid BETA FAB |
| US8147833B2 (en) | 2007-02-23 | 2012-04-03 | Neotope Biosciences Limited | Prevention and treatment of synucleinopathic and amyloidogenic disease |
| PL2583978T3 (pl) | 2007-02-23 | 2016-07-29 | Prothena Biosciences Ltd Co | Profilaktyka i leczenie chorób synukleinopatycznych i amyloidogennych |
| JP5930573B2 (ja) | 2007-03-01 | 2016-06-15 | プロビオドルグ エージー | グルタミニルシクラーゼ阻害剤の新規使用 |
| US8003097B2 (en) | 2007-04-18 | 2011-08-23 | Janssen Alzheimer Immunotherapy | Treatment of cerebral amyloid angiopathy |
| EP2142514B1 (en) | 2007-04-18 | 2014-12-24 | Probiodrug AG | Thiourea derivatives as glutaminyl cyclase inhibitors |
| DK2182983T3 (da) | 2007-07-27 | 2014-07-14 | Janssen Alzheimer Immunotherap | Behandling af amyloidogene sygdomme med humaniserede anti-abeta antistoffer |
| JO3076B1 (ar) | 2007-10-17 | 2017-03-15 | Janssen Alzheimer Immunotherap | نظم العلاج المناعي المعتمد على حالة apoe |
| EP2106802A1 (en) | 2008-04-02 | 2009-10-07 | SIGMA-TAU Industrie Farmaceutiche Riunite S.p.A. | Modified peptides as synthetic vaccines in amyloid-associated disease |
| AT506820B1 (de) * | 2008-06-12 | 2011-07-15 | Affiris Forschungs Und Entwicklungs Gmbh | Vakzine gegen alzheimer-krankheit |
| US9067981B1 (en) | 2008-10-30 | 2015-06-30 | Janssen Sciences Ireland Uc | Hybrid amyloid-beta antibodies |
| JP5934645B2 (ja) | 2009-09-11 | 2016-06-15 | プロビオドルグ エージー | グルタミニルシクラーゼ阻害剤としてのヘテロ環式誘導体 |
| JP6026284B2 (ja) | 2010-03-03 | 2016-11-16 | プロビオドルグ エージー | グルタミニルシクラーゼの阻害剤 |
| NZ602312A (en) | 2010-03-10 | 2014-02-28 | Probiodrug Ag | Heterocyclic inhibitors of glutaminyl cyclase (qc, ec 2.3.2.5) |
| WO2011131748A2 (en) | 2010-04-21 | 2011-10-27 | Probiodrug Ag | Novel inhibitors |
| EP2686313B1 (en) | 2011-03-16 | 2016-02-03 | Probiodrug AG | Benzimidazole derivatives as inhibitors of glutaminyl cyclase |
| US9683017B2 (en) | 2014-07-17 | 2017-06-20 | University Tennessee Research Foundation | Inhibitory peptides of viral infection |
| US10213506B2 (en) | 2014-08-26 | 2019-02-26 | University Of Tennessee Research Foundation | Targeting immunotherapy for amyloidosis |
| GB201708262D0 (en) * | 2017-05-23 | 2017-07-05 | Binding Site Group Ltd | Assay for plasma cell associated disease |
| US11530257B2 (en) * | 2017-06-29 | 2022-12-20 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Chimeric antibodies for treatment of amyloid deposition diseases |
| US11382974B2 (en) | 2017-08-01 | 2022-07-12 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Methods and compositions for treatment of amyloid deposition diseases |
| ES2812698T3 (es) | 2017-09-29 | 2021-03-18 | Probiodrug Ag | Inhibidores de glutaminil ciclasa |
| US12018069B2 (en) | 2018-06-28 | 2024-06-25 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Methods and compositions for imaging amyloid deposits |
| CN115298214A (zh) * | 2019-11-15 | 2022-11-04 | 田纳西大学研究基金会 | 用于靶向淀粉样蛋白沉积物的经修饰的免疫球蛋白 |
| JP2024521082A (ja) | 2021-05-18 | 2024-05-28 | ユニバーシティ オブ テネシー リサーチ ファウンデーション | アミロイド障害を処置するための抗体－ペプチド融合タンパク質 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5004697A (en) * | 1987-08-17 | 1991-04-02 | Univ. Of Ca | Cationized antibodies for delivery through the blood-brain barrier |
| US5786180A (en) | 1995-02-14 | 1998-07-28 | Bayer Corporation | Monoclonal antibody 369.2B specific for β A4 peptide |
| TWI239847B (en) * | 1997-12-02 | 2005-09-21 | Elan Pharm Inc | N-terminal fragment of Abeta peptide and an adjuvant for preventing and treating amyloidogenic disease |
-
1999
- 1999-05-21 DE DE69942274T patent/DE69942274D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-05-21 JP JP2000549642A patent/JP2002515235A/ja active Pending
- 1999-05-21 KR KR1020007013040A patent/KR100701580B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1999-05-21 ES ES99923260T patent/ES2345746T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-05-21 NZ NZ507727A patent/NZ507727A/en active IP Right Revival
- 1999-05-21 CA CA002325600A patent/CA2325600A1/en not_active Abandoned
- 1999-05-21 CN CNA2004100636511A patent/CN1589903A/zh active Pending
- 1999-05-21 AT AT99923260T patent/ATE465178T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-05-21 IL IL13909599A patent/IL139095A0/xx unknown
- 1999-05-21 PT PT99923260T patent/PT1078005E/pt unknown
- 1999-05-21 AU AU40075/99A patent/AU4007599A/en not_active Abandoned
- 1999-05-21 EP EP99923260A patent/EP1078005B1/en not_active Revoked
- 1999-05-21 MX MXPA00011348A patent/MXPA00011348A/es active IP Right Grant
- 1999-05-21 CN CN99808844A patent/CN1344275A/zh active Pending
- 1999-05-21 DK DK99923260.6T patent/DK1078005T3/da active
- 1999-05-21 WO PCT/US1999/011200 patent/WO1999060024A1/en not_active Ceased
-
2000
- 2000-12-21 ZA ZA200007811A patent/ZA200007811B/en unknown
-
2004
- 2004-03-15 RU RU2004107695/14A patent/RU2004107695A/ru not_active Application Discontinuation
-
2010
- 2010-03-24 JP JP2010068108A patent/JP2010159284A/ja not_active Withdrawn
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ATE465178T1 (de) | 2010-05-15 |
| AU4007599A (en) | 1999-12-06 |
| IL139095A0 (en) | 2001-11-25 |
| KR100701580B1 (ko) | 2007-03-30 |
| EP1078005A1 (en) | 2001-02-28 |
| EP1078005B1 (en) | 2010-04-21 |
| JP2010159284A (ja) | 2010-07-22 |
| WO1999060024A9 (en) | 2000-02-10 |
| NZ507727A (en) | 2003-11-28 |
| ZA200007811B (en) | 2002-06-21 |
| PT1078005E (pt) | 2010-08-30 |
| MXPA00011348A (es) | 2003-04-22 |
| WO1999060024A1 (en) | 1999-11-25 |
| HK1035542A1 (en) | 2001-11-30 |
| JP2002515235A (ja) | 2002-05-28 |
| CA2325600A1 (en) | 1999-11-25 |
| RU2004107695A (ru) | 2005-08-27 |
| CN1344275A (zh) | 2002-04-10 |
| DK1078005T3 (da) | 2010-08-09 |
| CN1589903A (zh) | 2005-03-09 |
| DE69942274D1 (de) | 2010-06-02 |
| KR20010052374A (ko) | 2001-06-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2345746T3 (es) | Metodos para la eliminacion de amiloide usando anticuerpos antiamiloide. | |
| US8105594B2 (en) | Methods for amyloid removal using anti-amyloid antibodies | |
| ES2141467T5 (es) | Anticuerpos anti-cd30 que evitan la escision proteolitica y liberacion del antigeno cd30 fijado a la membrana. | |
| ES2312569T3 (es) | Anticuerpos humanizados. | |
| ES2318006T3 (es) | Anticuerpos humanizados que reconocen el peptido beta-amiloide. | |
| ES2407429T3 (es) | Vacuna terapéurica | |
| ES2346205T3 (es) | Anticuerpo humanizado (h14.18) del anticurpo 14.18 de raton que se enlaza con gd2 y su fusion con la il-2. | |
| US5969109A (en) | Chimeric antibodies comprising antigen binding sites and B and T cell epitopes | |
| ES2352180T3 (es) | Anticuerpo monoclonal de anti-tenascina humana. | |
| ES2549362T3 (es) | Antígenos asociados a endometriosis | |
| HU230768B1 (hu) | Aß peptidet kiválasztó humanizált ellenanyagok | |
| JP2017518958A (ja) | 免疫原性グリコペプチドに対する抗体、それを含む組成物、及びそれらの使用 | |
| ES2855973T3 (es) | Nuevo anticuerpo útil en trastornos neurológicos o neurodegenerativos | |
| ES2325492T3 (es) | Fragmentos de anticuerpos especificos para el antigeno carcinoembrionario (ace) humano. | |
| AU2003262458B2 (en) | Methods for amyloid removal using anti-amyloid antibodies | |
| ES2270598T3 (es) | Anticuerpos humanizados que reconocen la verotoxina ii y linea celular que produce los mismos. | |
| ES2274649T3 (es) | Influencia sobre la angiogenesis mediante cd66a. | |
| HK1035542B (en) | Methods for amyloid removal using anti-amyloid antibodies | |
| ES2285755T3 (es) | Material biologico para el tratamiento de un mamifero por transferencia de genes de anticuerpos y composicion farmaceutica que lo contiene. | |
| WO2022186164A1 (ja) | 関節リウマチの遺伝子治療用ベクター | |
| JP5822407B2 (ja) | 軟骨・骨破壊抑制剤 | |
| CN116688115A (zh) | 一种PD-L1/TGF-β双功能融合蛋白制剂及其用途 | |
| Hengartner | Monovalent single-chain Fv fragments and-* t | |
| JP2014091687A (ja) | 軟骨又は骨の破壊の診断薬 |