ES2350858T3 - Tratamiento de trastornos neovasculares oculares tales como degeneración macular, estrías angioides, uveitis y edema macular. - Google Patents

Abstract

Una formulación farmacéutica tópica que comprende un compuesto de fórmula (I): **(Ver fórmula)**o sal o solvato del mismo, para uso en el tratamiento de trastornos neovasculares oculares mediante administración directa al ojo.

Description

CAMPO DE LA INVENCION

La presente invención se refiere a procedimientos de tratamiento de trastornos neovasculares oculares en mamíferos. Los procedimientos comprenden la administración de derivados de pirimidina, y composiciones farmacéuticas que los contienen.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION

La neovascularización, también denominada angiogénesis, es el proceso de formación de nuevos vasos sanguíneos. La neovascularización se produce durante el desarrollo normal, y también juega un papel importante en la curación de heridas después de lesión a un tejido. Sin embargo, a la neovascularización se la ha implicado también como una causa importante de un cierto número de estados patológicos incluyendo, por ejemplo, cáncer, artritis reumatoide, ateroesclerosis, psoriasis, y enfermedades oculares.

Las enfermedades oculares asociadas con fugas vasculares y/o neovascularización son responsables de la inmensa mayoría de morbilidad y ceguera visual en países desarrollados (Campochiaro, Expert. Opin. Biol. Ther., vol. 4, págs. 1393-402, (2004)). Un ejemplo de un trastorno de este tipo es la retinopatía diabética, una complicación común en individuos con diabetes mellitus y la quinta causa principal de nuevas cegueras. Los más importantes contribuyentes al desarrollo de retinopatía diabética son la hiperglucemia e hipoxemia que conducen a un incremento de vasopermeabilidad, proliferación de células endoteliales, y neovascularización patológica (Chorostowska-Wynimko y otros, J. Physiol. Pharmacol., vol. 56, supl. 4, págs 6570, (2005)). Estas anormalidades vasculares dan como resultados una fuga de fluido en la mácula, lo cual puede dar como resultado una pérdida de visón progresiva.

Otro trastorno ocular en el cual la neovascularización juega un papel es la degeneración macular relacionada con la edad (AMD), la cual es la causa principal de pérdida visual severa en las personas mayores. La pérdida de visión por AMD se produce como resultado de la neovascularización coroidal (CNV). La neovascularización se origina a partir de los vasos sanguíneos coroidales y se desarrolla a través de la membrana de Bruch, usualmente en sitios múltiples, dentro del espacio epitelial pigmentado sub-retiniano y/o la retina (véase, por ejemplo, Campochiaro y otros, Mol. Vis., vol. 5, pág. 34, (1999)). La fuga y hemorragia a partir de estos nuevos vasos sanguíneos da como resultado la pérdida de visión.

Los trastornos oculares asociados con la neovascularización ocular son una causa principal de pérdida de visión y ceguera. De acuerdo con ello, existe una necesidad de nuevos procedimientos de tratamiento de trastornos neovasculares oculares.

SUMARIO DE LA INVENCION

La presente invención está dirigida a nuevos procedimientos para el tratamiento de tras

tornos neovasculares oculares. Los procedimientos comprenden la etapa de administración de

derivados de pirimidina, y composiciones farmacéuticas que los contienen.

En un aspecto, la presente invención proporciona formulaciones farmacéuticas tópicas que comprenden un compuesto de fórmula (I):

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o sal o solvato del mismo, para uso en el tratamiento de un trastorno neovascular ocular mediante administración directa al ojo.

10 La invención abarca también el uso de un compuesto de fórmula (I), o sal o solvato del mismo para la fabricación de un medicamento útil en el tratamiento de trastornos neovasculares oculares mediante aplicación tópica directa al ojo.

Igualmente, se proporciona un compuesto de fórmula (I), o sal o solvato del mismo para uso en el tratamiento de trastornos neovasculares oculares mediante administración tópica di15 rectamente al ojo.

BREVE DESCRIPCION DE LOS DIBUJOS

La Figura 1 muestra el efecto del inhibidor del receptor VEGF descrito en el Ejemplo 1 en un modelo de regresión para neovascularización coroidal (CNV) en ratones. En este modelo 20 de regresión, la CNV se indujo en ratones mediante quemaduras por láser sobre el polo posterior de la retina. Siete días después de la lesión inducida por láser, los ratones empezaron un régimen en el cual se les administró o bien vehículo solamente o bien 5-[[4-[(2,3-dimetil-2Hindazol-6-il)metilamino]-2-pirimidinil]amino]-2-metilbencenosulfonamida a las dosis indicadas. Siete días después de iniciado este régimen, se cuantificó el tamaño de las lesiones CNV. Los 25 resultados se resumen gráficamente en la Figura 1. Para una información adicional, véase la sección Ejemplos. La Figura 2 muestra el efecto del pre-tratamiento con el inhibidor del receptor VEGF descrito en el Ejemplo 1, el antagonista del receptor de vitronectina descrito en le Ejemplo 3, o una combinación de los mismos sobre la CNV inducida por lesión en ratones en un modelo de prevención para CNV. Los resultados se resumen gráficamente en la Figura 1.

30 Para una información adicional, véase la sección Ejemplos.

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION

La presente invención proporciona nuevos procedimientos de tratamiento de trastornos neovasculares oculares en mamíferos. Los procedimientos comprenden la etapa de administración de derivados de pirimidina, y composiciones farmacéuticas que los contienen a un 5 mamífero. De acuerdo con un aspecto, el compuesto a administrar es pazopabid ((5-({[4-[(2,3dimetil-2H-indazol-6-il)(metil)amino]pirimidin-2-il}amino)-2-metilbencenosulfonamida) o una sal

o solvato del mismo. Los autores de la presente invención han demostrado que ratones que fueron tratados ocn pazopanib después de una lesión inducida por láser a la retina muestran una disminución

10 en el tamaño de las lesiones neovasculares coroidales resultantes cuando se comparan con ratones no tratados. Además, los autores de la presente invención muestran que ratones tratados con pazopanib, ácido (S)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)-1-propiloxi]-2-(2,2,2-triflruoroetil)2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepino-4-acético o una combinación de estos compuestos antes de la lesión inducida por láser a la retina muestran una disminución en el tamaño de las lesio

15 nes neovasculares coroidales resultantes. De acuerdo con ello, los autores de la presente invención han demostrado que el pazopanib, ácido (S)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)-1-propiloxi]2-(2,2,2-triflruoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepino-4-acético, y sus derivados, sales, y solvatos son útiles como agentes terapéuticos para el tratamiento de trastornos con neovascularización en el ojo.

20 En un aspecto, la invención proporciona una formulación farmacéutica tópica que comprende un compuesto de fórmula (I):

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o sal o solvato del mismo, para uso en el tratamiento de trastornos neovasculares oculares mediante administración directa al ojo.

25 En una realización particular, la invención proporciona una formulación farmacéutica tópica para uso en el tratamiento de trastornos neovasculares oculares mediante administración directa al ojo, que comprende un compuesto de fórmula (I’):

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una formulación farmacéutica tópica para uso en el tratamiento de trastornos neovasculares oculares mediante administración directa al ojo, que comprende un compuesto de fórmula (I’’):

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En otro aspecto, la invención abarca el uso de un compuesto de fórmula (I), o sal o sol

vato del mismo, para la preparación de un medicamento útil en el tratamiento de trastornos

neovasculares oculares.

Igualmente, se proporciona un compuesto de fórmula (I), mediante administración tópica 10 directa al ojo, o una sal o solvato del mismo para uso en el tratamiento de trastornos neovasculares oculares, mediante administración tópica directamente al ojo.

En algunas realizaciones de la invención, el trastorno neovascular ocular es un trastorno

neovascular coroidal o un trastorno neovascular retiniano. En realizaciones particulares, el tras

torno neovascular ocular está seleccionado entre degeneración macular relacionada con la

15 edad exudativa, estrías angioides, uveítis, y edema macular. El término “trastorno neovascular ocular” tal como se usa en la presente invención, significa un trastorno en el cual se generan nuevos vasos sanguíneos en el ojo de una manera patógena. Los trastornos neovasculares oculares que pueden tratarse de acuerdo con los procedimientos de la invención incluyen los caracterizados por la fuga vascular. Los trastornos

20 neovasculares oculares pueden dar como resultado una pérdida parcial o total de visión. Los trastornos neovasculares a tratarse en los procedimientos de la invención pueden producirse en cualquier parte del ojo incluyendo, por ejemplo, la córnea, iris, retina, vítreo, y coroide.

El término “trastorno neovascular coroidal” tal como se usa en la presente invención, significa un trastorno caracterizado por una invasión de nuevos vasos sanguíneos a través de 25 la membrana de Bruch, la capa más interna de la coroide. El término “trastorno neovascular retiniano” tal como se usa en la presente invención, se refiere a un trastorno asociado con el desarrollo de nuevos vasos sanguíneos que se originan a

partir de las venas retinianas y se extiende a lo largo de la superficie vítrea de la retina.

Los ejemplos no limitativos de trastornos vasculares oculares que pueden tratarse de acuerdo con los procedimientos de la invención incluyen degeneración macular relacionada con la edad (AMD) exudativa, estrías angioides, miopía patológica, síndrome de histoplasmosis ocular, roturas en la membrana de Bruch, edema macular (incluyendo edema macular diabético), sarcoidosis y uveítis. Los ejemplos adicionales de trastornos que pueden tratarse mediante los procedimientos descritos incluyen AMD atrófica, queratocono, síndrome de Sjogren, miopía, tumores oculares, rechazo de injerto corneal, lesión corneal, glaucoma neovascular, ulceración corneal, cicatrices corneales, vitreoretinopatía proliferativa, retinopatía de premadurez, degeneración retiniana, glaucoma crónico, desprendimiento retiniano, y retinopatía drepanocitaria.

La invención proporciona procedimientos para el tratamiento de trastornos neovasculares oculares. Tal como se usa en la presente invención, “tratamiento” significa cualquiera manera en la cual uno o más síntomas asociados con el trastorno son alterados de manera beneficiosa. De acuerdo con ello, el término incluye curación, prevención, o mejora de un síntoma o efecto secundario del trastorno o una disminución en la velocidad de avance del trastorno.

De acuerdo con los procedimientos de la invención, el tratamiento de un trastorno vascular ocular puede obtenerse mediante la administración de una cantidad eficaz de uno o más agentes terapéuticos al sujeto a tratar. Tal como se usa en la presente invención, el término “cantidad eficaz” significa la cantidad de un agente terapéutico que es suficiente para tratar, prevenir y/o mejorar uno o más síntomas del trastorno.

Tal como se usa en la presente invención, el término “solvato” se refiere a un complejo de estequiometria variable formado por un soluto (en la presente invención, compuestos de fórmula (I), o una sal de los mismos) y un disolvente. Dichos disolventes para el fin de la invención pueden no interferir con la actividad biológica del soluto. Los ejemplos de disolventes adecuados incluyen, pero sin limitarse a ellos, agua, metanol, etanol y ácido acético. Preferiblemente, el disolvente usado es un disolvente aceptable farmacéuticamente. Los ejemplos de disolventes aceptables farmacéuticamente adecuados incluyen, sin limitación, agua, etanol y ácido acético. En realizaciones particulares, el disolvente usado es agua.

En una realización, los procedimientos de prevención o tratamiento de trastornos neovasculares oculares divulgados en la presente invención incluyen la administración de un compuesto de fórmula (I):

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o una sal o solvato del mismo.

En cierta realización, la sal del compuesto de fórmula (I) es una sal hidrocloruro. En unas realizaciones particulares, la sal del compuesto de fórmula (I) es una sal monohidrocloruro tal como se ilustra por la fórmula (I’). El sal monohidrocloruro del compuesto de fórmula (I’) tiene el nombre químico de monohidrocloruro de 5-[[4-[(2,3-dimetil-2H-indazol-6-il)metilamino]2-pirimidinil]amino]-2-metilbencenosulfonamida.

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En otra realización, la sal del compuesto de fórmula (I) es un solvato monohidrato de

10 monohidrocloruro del compuesto de fórmula (I). El solvato monohidrato de monohidrocloruro del compuesto de fórmula (I) tiene el nombre químico de monohidrato de monohidrocloruro de 5-({4-[(2,3-dimetil-2H-indazol-6-il)metilamino]-2-pirimidinil}amino)-2-metilbencenosulfonamida, tal como se ilustra en la fórmula (I‘’).

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15 La base libre, sales y solvatos del compuesto de fórmula (I) pueden prepararse, por ejemplo, de acuerdo con los procedimientos de la Solicitud de Patente Internacional No. PT/US01149367 presentada el 19 de Diciembre de 2001, y publicada como WO 02/0591110 el 1 de Agosto de 2002, y la Solicitud de Patente Internacional No. PT/US03/19211 presentada el 17 de Junio de 2003, y publicada como WO 03/106416 el 24 de Diciembre de 2003, o de

20 acuerdo con los procedimientos proporcionados en la presente invención. Típicamente, las sales de la presente invención son sales aceptables farmacéuticamente. Las sales abarcadas dentro del término “sales aceptables farmacéuticamente” se refieren a sales no tóxicas de los compuestos de la presente invención. Las sales de los compuestos de

la presente invención pueden comprender sales de adición de ácido obtenidas de un nitrógeno sobre un substituyente en un compuesto de la presente invención. Las sales representativas incluyen las sales siguientes: acetato, bencenosulfonato, benzoato, bicarbonato, bisulfato, bitartrato, borato, bromuro, edelato cálcico, camsilato, carbonato, cloruro, clavulanato, citrato, dihidrocloruro, edetato, edisilato, estolato, esilato, fumarato, gluceptato, gluconato, glutamato, gicolilarsanilato, hexilresordnato, hidrabamina, hidrobromuro, hidrocloruro, hidroxinaftanoato, yoduro, isetionato, lactato, lactobionato, laurato, malato, maleato, mandelato, mesilato, metilbromuro, metilnitrato, metilsulfato, maleato monopotásico, mucato, napsilato, nitrato, Nmetilglucamina, oxalato, pamoato (embonato), palmitato, pantotenato, fosfato/difosfato, poligalacturonato, potasio, salicilato, sodio, estearato, subacetato, succinato, tannato, tartrato, teoclato, tosilato, trietiyoduro, trimetilamonio y valerato. Otras sales, las cuales no son aceptables farmacéuticamente, pueden ser útiles en la preparación de compuestos de la presente invención y estas forman un aspecto adicional de la invención.

Los compuestos usados en los procedimientos de la invención pueden administrarse solos, o pueden administrarse en una composición farmacéutica. De acuerdo con ello, la invención proporciona además el uso de composiciones farmacéuticas en los procedimientos de tratamiento de la presente invención. Las composiciones farmacéuticas incluyen un compuesto de fórmula (I), y sales o solvatos del mismo, y uno o más vehículos, diluyentes o excipientes aceptables farmacéuticamente. El vehículo(s), diluyente(s), o excipiente(s) debe de ser aceptable en el sentido de ser compatible con los otros ingredientes de la formulación y no perjudiciales para el receptor de los mismos.

Las formulaciones farmacéuticas pueden presentarse en formas de dosis unitarias conteniendo una cantidad predeterminada de ingrediente activo por dosis unitaria. Una unidad de este tipo puede contener, por ejemplo, 1 µg a 1 g, tal como 5 µg a 500 µg, 10 µg-250 µg, 0,5 mg a 700 mg, 2 mg a 350 mg, ó 5 mg a 100 mg de un compuesto de fórmula (I),o sales o solvatos del mismo dependiendo del estado a tratar, la vía de administración y la edad, peso y estado del paciente, o las formulaciones farmacéuticas pueden presentarse en formas de dosis unitarias conteniendo una cantidad predeterminada de ingrediente activo por dosis unitaria. En ciertas realizaciones, las formulaciones de dosificaciones unitarias son aquellas que contienen una dosis o sub-dosis diaria, tal como anteriormente se han citado en la presente invención, o una fracción apropiada de la misma, de un ingrediente activo. Además, dichas formulaciones farmacéuticas pueden prepararse mediante cualquiera de los procedimientos bien conocidos en la técnica farmacéutica.

El compuesto de fórmula (I), o sales o solvatos del mismo, puede administrarse por cualquier vía apropiada. Las vías adecuadas incluyen oral, rectal, nasal, tópica (incluyendo bucal, sublingual, y ocular), vaginal, y parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular, intravenosa, intradérmica, extraocular, intraocular (incluyendo, por ejemplo, intravítrea, subretiniana, subesclerótica, intracoroidal, e intraconjuntival), intratecal, y epidural). Es de observar que la vía preferida puede variar, por ejemplo, con el estado del receptor.

Los procedimientos de la presente invención pueden usarse también en combinación con otros procedimientos para el tratamiento de trastornos neovasculares oculares. En algunas realizaciones, los procedimientos de la invención abarcan una terapia de combinación en la cual un compuesto de la fórmula (I), o una sal o solvato del mismo se administra conjuntamente con uno o más agentes terapéuticos adicionales para el tratamiento de trastornos neovasculares oculares. Los ejemplos no limitativos de agentes terapéuticos adicionales que pueden usarse en una terapia de combinación incluyen pegaptanib, ranibizumad, PKC412, nepafenac, y antagonistas del receptor de integrina (incluyendo agonistas del receptor de vitronectina). Véase, por ejemplo, Takahashi y otros, Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., vol. 44, págs. 409-15, (2003); Campochiaro y otros, Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., vol. 45, págs. 922-31, (2004); van Wijngaarden y otros, JAMA, vol. 293, págs. 1509-13, (2005); Patente de EE.UU. No. 6.825.188 de Callahan y otros, y Patente de EE.UU. No. 6.861.738 de Manley y otros.

En el caso de usar una terapia de combinación, los agentes terapéuticos pueden administrarse conjuntamente o separadamente. Pueden usarse los mismos medios de administración para más de un agente terapéutico de la terapia de combinación; como alternativa, pueden administrarse por diferentes medios los diferentes agentes terapéuticos de la terapia de combinación. Cuando los agentes terapéuticos se administran separadamente, estos pueden administrarse simultáneamente o secuencialmente en cualquier orden, tanto en tiempos próximos como remotos. Las cantidades del compuesto de fórmula (I), y/o el otro agente o agentes activos farmacéuticamente y los intervalos de tiempo relativos de administración se seleccionarán con el fin de lograr el efecto terapéutico combinado deseado.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración oral pueden presentarse como unidades discretas tales como cápsulas o comprimidos; polvos o gránulos; soluciones

o suspensiones en líquidos acuosos o no acuosos; espumas o batidos comestibles; o emulsiones líquidas de aceite en agua o emulsiones líquidas de agua en aceite.

Por ejemplo, para administración oral en la forma de un comprimido o cápsula, el componente de fármaco activo puede combinarse con un vehículo inerte aceptable farmacéutica-mente no tóxico, oral, tal como etanol, glicerol, agua y similares. Los polvos pueden prepararse pulverizando el compuesto hasta un tamaño fino adecuado y mezclando con un vehículo farmacéutico pulverizado de manera similar tal como un carbohidrato comestible, como, por ejemplo, almidón o manitol. Igualmente, pueden estar presentes agentes aromatizantes, con

servantes, dispersantes y colorantes.

Pueden hacerse cápsulas preparando una mezcla en polvo tal como se descrito anteriormente, y rellenando con ella vainas conformadas de gelatina. Antes de la operación de rellenado pueden agregarse a la mezcla en polvo deslizantes y lubricantes tales como sílice coloidal, talco, estearato magnésico, estearato cálcico o polietileno glicol sólido. Igualmente, puede agregarse un agente desintegrante o solubilizante tal como agar-agar, carbonato cálcico o carbonato sódico para mejorar la disponibilidad del medicamento cuando se ingiere la cápsula.

Más aún, cuando se desea o es necesario, pueden incorporarse igualmente dentro de la mezcla aglomerantes, lubricantes, agentes desintegrantes y agentes colorantes adecuados. Los aglomerantes adecuados incluyen almidón, gelatina, azúcares naturales tales como glucosa o beta-lactosa, adulcorantes de maíz, gomas naturales y sintéticas tales como goma arábiga, goma tragancanto o alginato sódico, carboximetilcelulosa, polietileno glicol, ceras y similares. Los lubricantes usados en estas formas de dosificación incluyen oleato sódico, estearato sódico, estearato magnésico, benzoato sódico, acetato sódico, cloruro sódico y similares. Los desintegradores incluyen, sin limitación, almidón, metil celulosa, agar, bentonita, goma xantano y similares. Los comprimidos pueden formularse, por ejemplo, mediante la preparación de una mezcla en polvo, granulación o amasado, adición de un lubricante y desintegrante y prensado en comprimidos. Una mezcla en polvo se prepara mezclando el compuesto, adecuadamente pulverizado, con un diluyente o base tal como se ha descrito anteriormente, y opcionalmente, con un aglomerante tal como carboximetilcelulosa, un alginato, gelatina, o polivinil pirrolidona, un retardante de la solución tal como parafina, un acelerador de la resorción tal como una sal cuaternaria y/o un agente de absorción tal como bentonita, caolín o fosfato dicálcico. La mezcla en polvo puede granularse mediante humectación con un aglomerante tal como jarabe, pasta de almidón, mucílago de goma arábiga o soluciones de materiales celulósicos o poliméricos y forzándola a través de un tamiz. Como una alternativa a la granulación, la mezcla en polvo puede pasarse a través de la máquina de formar comprimidos y el resultado son trozos imperfectamente formados rotos en gránulos. Los gránulos pueden lubricarse para prevenir el pegado a los moldes que forman los comprimidos mediante la adición de ácido esteárico, una sal estearato, talco o aceite mineral. A continuación, la mezcla lubricada se prensa en comprimidos. Los compuestos de la presente invención pueden igualmente combinarse con vehículo inerte de libre fluidez y prensarse directamente en comprimidos sin pasar a través de las etapas de granulación o troceado. Puede proporcionarse un recubrimiento protector transparente u opaco constituido por un recubrimiento de sellado de shellac, un recubrimiento de azúcar o de material polimérico y un recubrimiento de pulimento de cera. A estos recubrimientos pueden agregarse colorantes para distinguir dosificaciones unitarias diferentes.

Pueden prepararse fluidos orales tales como solución, jarabes y elixires en forma unitaria de dosificación de manera tal que una cantidad dada contenga una cantidad predeterminada del compuesto. Los jarabes pueden prepararse disolviendo el compuesto en una solución acuosa adecuadamente aromatizada, en tanto que los elixires pueden prepararse mediante el uso de un vehículo alcohólico no tóxico. Pueden formularse suspensiones dispersando el compuesto en un vehículo no tóxico. Igualmente, pueden agregarse solubilizadores y emulsificadores tales como alcoholes isoestearilo etoxilados y éteres de polioxi etileno sorbitol, conservantes, aditivo de aroma tal como aceite de menta piperita o edulcorantes naturales o sacarina u otros edulcorantes artificiales, y similares.

Cuando sea apropiado, las formulaciones unitarias de dosificación para administración oral pueden microencapsularse. Igualmente, la formulación puede prepararse para prolongar o sostener la liberación, tal como, por ejemplo, recubriendo o embebiendo el material en partículas en polímeros, cera o similares.

Los agentes para uso de acuerdo con la presente invención, pueden igualmente administrarse en la forma de sistemas de suministro de liposomas, tales como vesículas unilamelares pequeñas, vesículas unilamelares grandes y vesículas multilamelares. Las liposomas pueden formarse a partir de una diversidad de fosfolípidos, tales como colesterol, estearilamina o fosfatidilcolinas.

Los agentes para uso de acuerdo con la presente invención pueden suministrarse igualmente mediante el uso de anticuerpos monoclonales como vehículos individuales a los cuales están acopladas las moléculas del compuesto. Los compuestos pueden igualmente acoplarse con polímeros solubles como vehículos de fármaco diana. Dichos polímeros pueden incluir polivinilpirrolidona, copolímero de pirano, polihidroxipropilmetacrilamida-fenol, polihidroxietilespartamida-fenol o polióxido de etileno-polilisina substituida con restos palmitoilo. Además, los compuestos pueden acoplarse a una clase de polímeros biodegradables útiles para la lograr la liberación controlada de un fármaco, por ejemplo, ácido poliláctico, poli-épsilon caprolactona, ácido polihidroxi butírico, poliortoésteres, poliacetales, polidihidropiranos, policianoacrilatos y copolímeros de bloque anfipáticos o reticulados de hidrogeles.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración transdérmica pueden presentarse como parches discretos destinados a mantenerse en íntimo contacto con la epidermis del receptor durante un período prolongado de tiempo. Por ejemplo, el ingrediente activo puede suministrarse a partir del parche mediante iontoforesis tal como se describe de manera general en Pharmaceutical Research, vol. 3, (no. 6), pág. 318, (1986).

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración tópica pueden formularse como ungüentos, cremas, suspensiones, lociones, polvos, soluciones, pastas, geles, es

pray, aerosoles o aceites.

Para tratamientos para el ojo u otros tejidos externos, por ejemplo boca y piel, las formulaciones pueden aplicarse como un ungüento tópico o crema. Cuando se formulan en forma de un ungüento, el ingrediente activo puede usarse o bien con una base de ungüento parafínico o bien miscible en agua. Como alternativa, el ingrediente activo puede formularse en una crema con una base de crema de aceite en agua o una base de agua en aceite.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administraciones tópicas al ojo incluyen gotas para ojos en las que el ingrediente activo está disuelto o suspendido en un vehículo adecuado, especialmente un disolvente acuoso. Las formulaciones a administrar al ojo tendrán pH y osmolalidad compatibles oftalmológicamente. Pueden incluirse uno o más agentes de ajuste del pH y/o agentes de tamponación aceptables oftálmicamente en una composición de la invención, incluyendo ácidos tales como ácido acético, bórico, cítrico, láctico, fosfórico y clorhídrico; bases tales como hidróxido sódico, fosfato potásico, borato sódico, citrato sódico, acetato sódico, y lactato sódico; y tampones tales como citrato/dextrosa, bicarbonato sódico y cloruro amónico. Dichos ácidos, bases, y tampones pueden incluirse en una cantidad requerida para mantener el pH de la composición en un intervalo aceptable oftálmicamente. Puede incluirse una o más sales aceptables oftálmicamente en la composición en una cantidad suficiente para meter la osmolalidad de la composición dentro de un intervalo aceptable oftálmicamente. Dichas sales incluyen aquellas que tienen cationes sodio, potasio o amonio y aniones cloruro, citrato, ascorbato, borato, fosfato, bicarbonato, sulfato, tiosulfato o bisulfito.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración tópica en la boca incluyen tabletas, pastillas y colutorios.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración nasal en las que el vehículo es un sólido incluyen un polvo grueso que tiene un tamaño de partícula, por ejemplo, dentro del intervalo de 20 a 500 micrómetros que se administra de manera esnifada, es decir, mediante inhalación rápida a través del orificio nasal a partir de un envase del polvo mantenido cerrado a la nariz. Las formulaciones adecuadas, en las que el vehículo es un líquido, para administración tal como un espray nasal o como gotas nasales, incluyen soluciones acuosas o aceitosas del ingrediente activo.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración por inhalación incluyen polvos o nieblas de partículas que pueden generarse mediante diversos tipos de aerosoles, nebulizadores o insufladores presurizados de dosis medida.

Las formulaciones farmacéuticas adaptadas para administración parenteral incluyen soluciones para inyección estériles acuosas y no acuosas, las cuales pueden contener antioxidantes, tampones, bacterioestatos y solutos que hacen que la formulación sea isotónica con la sangre del receptor al que se le destina; y suspensiones estériles acuosas y no acuosas, las cuales pueden incluir agentes de suspensión y agentes espesantes. Las formulaciones pueden presentarse en envases uni-dosis o multi-dosis, por ejemplo ampollas y viales sellados, y pueden almacenarse en un estado criodesecado (liofilizado) que únicamente requiere la adición del vehículo líquido estéril, por ejemplo agua para inyecciones, inmediatamente antes de su uso. Las soluciones y suspensiones para inyecciones extemporáneas pueden prepararse a partir de polvos estériles, gránulos y comprimidos.

En algunas realizaciones de la presente invención, las formulaciones farmacéuticas están adaptadas para administración intraocular mediante inyección intraocular u otro dispositivo para suministro ocular. Los ejemplos de dispositivos oculares que pueden usarse en los procedimientos de la presente invención incluyen dispositivos perioculares o intravítreales, lentes de contacto y liposomas. Véanse, por ejemplo, las Patentes de EE.UU. Nos. 3.416.530; 3.828.777; 4.014.335; 4.300.557; 4.327.725; 4.853.224; 4.946.450; 4.997.652; 5.147.647; 5.164.188; 5.178.635; 5.300.114; 5,322.691; 5.403.901; 5.443.505; 5.466.466; 5.476.511; 5.516.522; 5.632.984; 5.679.666; 5.710.165; 5.725.493; 5.743.274; 5.766.242; 5.766.619; 5.770.592; 5.773.019; 5.824.072; 5.824.073; 5.830.173; 5.836.935; 5.869.079; 5.902.598; 5.904.144; 5.916.584; 6.001.386; 6.074.661; 6.110.485; 6.126.687; 6.146.366; 6.251.090; 6.299.895; 6.331.313; 6.416.777; 6.649.184; 6.719.750; 6.660.960; y Solicitudes de Publicación de Patentes de EE.UU. Nos. 2003/0064088, 2004/0247645, y 2005/0113806.

El dispositivo de suministro ocular puede diseñarse para la liberación controlada de uno

o más agentes terapéuticos con múltiples velocidades de liberación definidas y cinéticas y permeabilidad de dosis sostenida. La liberación controlada puede obtenerse mediante el diseño de matrices poliméricas que incorporan diferentes clases y propiedades de polímeros biodegradables/bioconsumibles (por ejemplo, acetato de poli(etileno vinilo) (EVA), PVA superhidrolizado), hidroxialquil celulosa (HPC), metil celulosa (MC), hidroxipropilmetil celulosa (HPMC), policaprolactona, ácido poli(glicólico), ácido poli(láctico), polianhídrido, de pesos moleculares de polímeros, cristalinidad de polímeros, relaciones de copolímeros, condiciones de transformación, acabado superficial, geometría, adición de excipientes y recubrimientos políméricos que potenciarán la difusión, erosión, disolución y ósmosis del fármaco.

Las formulaciones para el suministro de fármacos usando dispositivos oculares pueden combinar uno o más agentes activos y adyuvantes apropiados para la vía indicada de administración. Por ejemplo, los agentes activos pueden mezclarse con cualquier excipiente aceptable farmacéuticamente; lactosa, sacarosa, almidón en polvo, ésteres de celulosa de ácidos alcanoicos, ácido esteárico, talco, estearato magnésico, óxido de magnesio, sales de sodio y calcio de ácidos fosfórico y sulfúrico, goma arábiga, gelatina, alginato sódico, polivinilpirrolidina, y/o alcohol polivinílico, comprimidos o encapsulados para administración convencional. Como alternativa, los compuestos pueden disolverse en polietileno glicol, propileno glicol, soluciones de carboximetil celulosa coloidal, etanol, aceite de maíz, aceite de cacahuete, aceite de semilla de algodón, aceite de sésamo, goma tragacanto, y/o diversos tampones. Igualmente, los compuestos pueden mezclarse con composiciones tanto de polímeros biodegradables como no biodegradables, y un vehículo o diluyente que tenga una propiedad de retardo en el tiempo. Los ejemplos representativos de composiciones biodegradables pueden incluir albúmina, gelatina, almidón, celulosa, dextranos, polisacáridos, poli(D.L-láctido), poli(D,L-láctido-co-glicólido), poli(glicólido), poli(hidroxibutirato), poli(alquilcarbonato), y poli(ortoésteres) y mezclas de los mismos. Los ejemplos representativos de polímeros no biodegradables pueden incluir copolímeros EVA, caucho de silicona y poli(metacrilato), y mezclas de los mismos.

Las composiciones farmacéuticas para suministro ocular pueden incluir igualmente una composición acuosa gelificable in situ. Una composición de este tipo comprende un agente gelificante en una concentración eficaz para promover la gelificación tras el contacto con el ojo

o con el fluido lacrimal. Los agentes gelificantes adecuados incluyen, pero sin limitarse a ellos, polímeros termoestables. El ´termino “gelificable in situ” tal como se usa en la presente invención, incluye no solamente líquidos de baja viscosidad que forman geles tras el contacto con el ojoo con el fluido lacrimal, sino también incluye líquidos más viscosos tales como geles semi-fluidos y tixotrópicos que muestran viscosidad substancialmente incrementada o endurecimiento del gel tras administración al ojo. Véase, por ejemplo, Ludwig, Adv. Drug Deliv. Rev., vol. 3, (no. 57), págs. 1595-639, (2005), el cual se incorpora en la presente invención como referencia con fines de enseñanza de ejemplos de polímeros para uso en el suministro de fármaco ocular.

Se da por entendido por los expertos en la técnica que, además de los ingredientes particularmente mencionados anteriormente, las formulaciones pueden incluir otros agentes convencionales en la técnica teniendo en cuenta el tipo de formulación en cuestión. Por ejemplo, los adecuados para administración oral pueden incluir agentes aromatizantes.

De acuerdo con los procedimientos de la invención, se administra a un mamífero un compuesto específico de fórmula (I). Típicamente, la cantidad de uno de los agentes administrados de la presente invención dependerá de un cierto número de factores incluyendo, por ejemplo, la edad y peso del mamífero, el estado preciso que requiere tratamiento, la severidad del estado, la naturaleza de la formulación, y la vía de administración. Finalmente, la cantidad quedará a la discreción del médico o veterinario que lo esté atendiendo.

Típicamente, el compuesto de fórmula (I), o sal o solvato del mismo se administrará dentro del intervalo de 0,1 a 100 mg/kg de peso corporal del receptor (mamífero) por día y más usualmente dentro del intervalo de 1 a 10 mg/kg de peso corporal por día. En realizaciones particulares, el compuesto se administra localmente (por ejemplo, al ojo) y la cantidad total de un compuesto administrado puede ser de 1 µg a 10 mg, tal como 5 µg a 500 µg, ó 10 µg-250 µg.

Los ejemplos siguientes están únicamente destinados como ilustración.

EJEMPLOS

Tal como se usan en la presente invención, los símbolos y convenciones usados en estos procedimientos, esquemas y ejemplos están de acuerdo con los usados en la literatura científica contemporánea, por ejemplo, el Journal of the American Chemical Society o el Journal of Biological Chemistry. Generalmente, se usan abreviaturas de dos o tres letras normales para designar restos de aminoácidos, los cuales se supone que están en la configuración L, salvo que se indique lo contrario. Salvo que se indique lo contrario, todos los materiales de partida se obtuvieron a suministradores comerciales y se usaron sin purificación adicional. Específicamente, pueden usarse las abreviaturas siguientes en los ejemplos y a lo largo de la memo

ria descriptiva:

g (gramos);

mg (miligramos);

l (litros);

ml (mililitros);

µl (microlitros);

kPa (kilopascales);

M (molar);

mM (milimolar);

N (normal);

Kg (kilogramo);

i.v. (intravenoso);

Hz (Herzios);

MHz (megaherzios);

mol (moles);

mmol (milimoles);

T.A. (temperatura ambiente);

min (minutos);

h (horas);

p.fus. (punto de fusión);

TLC (cromatografía de capa fina);

Tr (tiempo de retención);

RP (fase inversa);

DCM (diclorometano)

DCE (dicloroetano);

DMF (N,N-dimetilformamida);

HOAc (ácido acético);

TMSE (2-trimetilsilil)etilo);

TMS (trimetilsililo);

TIPS (triisopropilsililo);

TBS (t -butildimetilsililo);

HPLC (cromatografía líquida de alta presión);

THF (tetrahidrofurano);

DMSO (dimetilsulfóxido);

EtOAc (acetato de etilo);

DME (1,2-dimetoxietano);

EDTA

ácido etilenodiaminotetraacético

FBS

suero bovino fetal

IMDM medio de Dulbecco modificado de Iscove PBS solución salina tamponada con fosfato RPMI Roswell Park Memorial Institute tampón RIPA *

5 T.A. Temperatura ambiente

*NaCl 150 mM, Tris-HCl 50 mM, pH 7,5, 0,25% (p/v) de desoxicolato, 1% de NP-40, ortovanadato sódico 5 mM, fluoruro sódico 2 mm, y un cóctel inhibidor de proteasa.

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Salvo que se indique lo contrario, todas las temperaturas están expresadas en ºC (grados Centígrados). Salvo que se indique lo contrario, todas las reacciones se han llevado a cabo bajo una atmósfera inerte a temperatura ambiente.

Los ejemplos siguientes describen las síntesis de productos intermedios particularmente 15 útiles en la síntesis de compuestos de fórmula (I):

Ejemplo de producto intermedio 1

Preparación de 2,3-dimetil-6-nitro-2H-indazol

imagen1

20 Procedimiento 1: A una solución agitada de 18,5 g (0,11 mol) de 3-metil-6-nitro-1H-indazol en 350 ml de acetona, a temperatura ambiente, se agregaron 20 g (0,14 mol) de tetrafluoroborato de trimetiloxonio. Después de dejar en agitación la solución bajo argón durante 3 horas, se eliminó el disolvente bajo presión reducida. Al sólido resultante se agregó NaHCO3 acuoso saturado (600

25 ml) y una mezcla 4:1 de cloroformo-isopropanol (200 ml), la mezcla se agitó y las capas se separaron .La fase acuosa se lavó con cloroformo:isopropanol adicional (4x200 ml) y la fase orgánica combinada se secó (Na2SO4). La filtración y eliminación del disolvente proporcionó un sólido de color tostado. El sólido se lavó con éter (200 ml), proporcionando 2,3-dimetil-6-nitro2H-indazol en forma de un sólido de color amarillo (15,85 g, 73%). RMN 1H (300 MHz, DMSO

30 d6) δ 8,51 (s, 1H), 7,94 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 4,14 (s, 3H), 2,67 (s, 3H). MS (ES+, m/z) 192 (M+H).

Procedimiento 2:

Se agregó ortoformiato de trimetilo (11 mmol, 1,17 g) a lo largo de un período de 2 minutos a una solución de trifluoruro etearato de boro (12,5 mmol, 1,77 g) en cloruro de metileno (2,0 ml) que habían sido enfriados a -30ºC. La mezcla se calentó a 0ºC durante 15 minutos y, a continuación, se enfrió a -70ºC. Se formó una suspensión de nitro indazol (10 mmol, 1,77 g) en cloruro de metileno (30 ml) y se agregó todo ello de una sola vez a la mezcla enfriada. La mezcla se agitó a -70ºC durante 15 minutos y a temperatura ambiente durante 17 horas. Después de 17 horas, la mezcla se volvió de color rojo y heterogénea. La mezcla de reacción se interrumpió con solución de bicarbonato sódico saturado (20 ml) y la capa orgánica se separó. La capa acuosa se extrajo con cloruro de metileno (30 ml). Las capas de cloruro de metileno se combinaron y se extrajeron con agua (30 ml). La capa de cloruro de metileno se destiló bajo presión reducida hasta que quedaron ~10 ml. Se agregó propanol (10 ml) y el resto del cloruro de metileno se eliminó bajo presión reducida, dando como resultado una suspensión de color amarillo. El producto se aisló mediante filtración, proporcionando 2,3-dimetil-6-nitro-2H-indazol (65%, 7 mmol, 1,25 g) en forma de un polvo de color amarillo claro. RMN 1H (300 MHz, DMSOd6) δ 8,51 (s, 1H), 7,94 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 4,14 (s, 3H), 2,67 (s, 3H). MS (ES+, m/z) 192 (M+H).

Procedimiento 3:

En un matraz de fondo redondo de 25 ml se disolvió 3-metil-6-nitroindazol (7,27 mmol, 1,28 g) con agitación en DMSO (4,0 ml) y se trató con ácido sulfúrico concentrado (7,27 mmol, 0,73 g) para proporcionar una suspensión espesa. La suspensión se trató con sulfato de dimetilo (21,1 mmol, 2,66 g). La mezcla se calentó bajo nitrógeno a 50ºC durante 72 horas. Después de 72 horas se obtuvo una suspensión de color amarillo espesa. La suspensión se enfrió y se trató lentamente con solución de bicarbonato sódico saturado (10 ml). La mezcla se extrajo con cloruro de metileno (2x20 ml). Las capas de cloruro de metileno se combinaron y se volvieron a extraer con agua (20 ml). La capa de cloruro de metileno se trató con propanol (10 ml) y el cloruro de metileno se eliminó mediante destilación bajo presión reducida. El sólido se aisló mediante filtración y el sólido de color amarillo se lavó con heptano (5 ml) y se secó al aire. El producto de 2,3-dimetil-6-nitro-2H-indazol (70%, 0,97 g) se obtuvo en forma de un sólido de color amarillo claro. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,51 (s, 1H), 7,94 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 4,14 (s, 3H), 2,67 (s, 3H). MS (ES+, m/z) 192 (M+H).

Procedimiento 4:

Dentro de un matraz de fondo redondo de 3 bocas de 250 ml se introdujo sal de ácido

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sulfúrico de 3-metil-6-nitro-1H-indazol (5,0 g, 18,2 mmol) y cloruro de metileno (25 ml). La mezcla se agitó a 25ºC y se trató con DMSO (5 ml). Se agregó sulfato de dimetilo (6,7 g, 5,0 ml, 53,0 mmol) mediante una jeringuilla y la reacción se calentó a reflujo a un baño a 70ºC. Después de 7 horas, el análisis mediante HPLC mostró un 9% del material de partida. Al llegar a este punto se interrumpió la transformación y comenzó el agotamiento del material de partida. Se agregó solución de bicarbonato sódico saturado (35 ml) a la mezcla de reacción a T.A. Las capas se dejaron separar y la capa acuosa se extrajo con cloruro de metileno (25 ml). Las capas de cloruro de metileno se combinaron y se lavaron con agua (2x25 ml). La capa de cloruro de metileno se destiló bajo presión reducida hasta que se eliminó la mitad del volumen. Se agregó propanol (25 ml) y se continuó la destilación bajo presión reducida hasta que se eliminó la totalidad del cloruro de metileno. Esto dio como resultado una suspensión de color amarillo, la cual se dejó agitar a 25ºC durante 1 hora. El producto se aisló mediante filtración y el sólido de color amarillo resultante se lavó con heptano (10 ml). Esto proporcionó 2,3-dimetil-6-nitro2H-indazol (70%, 2,43 g) se en forma de un sólido de color amarillo. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,51 (s, 1H), 7,94 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 4,14 (s, 3H), 2,67 (s, 3H). MS (ES+, m/z) 192 (M+H).

Ejemplo de producto intermedio 2

Preparación de 2,3-dimetil-6-amino-2H-indazol

imagen1

Procedimiento 1:

A una solución agitada de 2,3-dimetil-6-nitro-2H-indazol (1,13 g) en 2-metoxietil éter (12 ml), a 0ºC, se agregó una solución de 4,48 g cloruro de estaño(II) en 8,9 ml de HCl concentrado, gota a gota, durante 5 minutos. Después de completar la adición, se retiró el baño de hielo y la solución se dejó agitar durante un tiempo adicional de 30 minutos. Aproximadamente se agregaron 40 ml de éter dietílico a la reacción, dando como resultado la formación de un precipitado. El precipitado resultante se aisló mediante filtración y se lavó con éter dietílico, proporcionado un sólido de color amarillo (1,1 g, 95%), la sal HCl de 2,3-dimetil-2H-indazol-6-amina. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,77 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,18 (s, 1H), 7,88 (m, 1H), 4,04 (s, 3H), 2,61 (s, 3H). MS (ES+, m/z) 162 (M+H).

Procedimiento 2:

A un matraz de fondo redondo de 3 bocas de 2 litros se le incorporó una entrada y sali

da de nitrógeno y agitación mecánica. Se inició un flujo moderado de nitrógeno y el reactor se cargó con Pd al 10%/C (50% humedad de agua, 6,0 g). Se inició la agitación y el reactor se cargó con metanol (750 ml) y el producto del Ejemplo de producto intermedio 1 (50 g). Se disolvió formiato amónico (82,54 g) en agua (120 ml). La solución en agua de formiato amónico 5 se agregó a la solución de reacción a una velocidad de adición tal que mantuvo la temperatura de reacción a, o entre, 25 y 30ºC. La reacción se dejó desarrollar a 25ºC. Después de 6 horas, se consideró que había acabado en base al análisis mediante HPLC. La mezcla se filtró y el catalizador se lavó con metanol (50 ml). Las capas de metanol se combinaron y el disolvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se disolvió en agua (200 ml) y se extrajo con cloru10 ro de metileno (3x250 ml). Las capas de cloruro de metileno se combinaron y el disolvente se eliminó bajo vacío para eliminar aproximadamente la mitad del disolvente. Se agregó heptano (400 ml) y se continuó la destilación en vacío hasta que aproximadamente quedaron 300 ml de suspensión del producto de reacción. El producto se aisló mediante filtración y se secó bajo vacío a 50ºC durante 4 horas, proporcionando 2,3-dimetil-6-amino-2H-indazol como la base 15 libre. (40,76 g, 96,7%). RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,31 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 6,45 (d, J = 8,9

Hz, 1H), 6,38 (s, 1H), 4,95 (s ancho, 2H), 3,85 (s, 3H), 2,44 (s, 3H). MS (ES+, m/z) 162 (M+H).

Ejemplo de producto intermedio 3

imagen2

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Procedimiento 1

A una solución agitada del producto del Ejemplo de producto intermedio 2 (2,97 g, 0,015

mol) y NaHCO3 (5,05 g, 0,06 mol) en THF (15 ml) y etanol (60 ml) se agregó 2,4

dicloropirimidina (6,70 g, 0,045 mol) a T.A. Después de agitar la reacción durante cuatro horas

25 a 85ºC, la suspensión se enfrió a T.A., se filtró y se lavó intensamente con acetato de etilo. El filtrado se concentró bajo presión reducida y el sólido resultante se trituró con acetato de etilo, proporcionando N-(2-cloropirimidin-4-il)-2,3-dimetil-2H-indazol-6-amina (89%, 3,84 g). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,28 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 6,42 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,37 (s, 1H), 5,18 (s ancho, 1H), 3,84 (s, 3H), 2,43 (s, 3H). MS (ES+, m/z) 274 (M+H).

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Procedimiento 2

Un matraz de 3 bocas de 1 litro equipado con agitador mecánico accionado por aire, termómetro y entrada/salida de nitrógeno se cargó con una solución del producto del Ejemplo de producto intermedio 2 (32,89 g, 0,204 mol, 1,0 equiv.) en 425 ml (13 volúmenes) de EtOH/THF (4/1), bicarbonato sódico (51,42 g, 0,612 mol, 3,0 equiv.) y, a continuación, 2,4dicloropirimidina (45,59 g, 0,306 mol, 1,5 equiv.). Los contenidos del matraz se calentaron a 75ºC y se mantuvieron a 74-76ºC durante 6-7 horas. El progreso de la reacción se comprobó mediante HPLC (<2% del producto del Ejemplo de producto intermedio 2). Los contenidos de la reacción se enfriaron a 20-25ºC durante 30 minutos, y se mantuvieron a 20-25ºC durante 30 minutos. A continuación, los contenidos de la reacción se enfriaron adicionalmente a 10-12ºC durante 30 minutos, y se mantuvieron a dicha temperatura durante un tiempo adicional de 10 minutos. Los contenidos se filtraron y la torta del filtro se lavó con EtOAc (2x100 ml, 3,0 volúmenes), y agua desionizada (514 ml, 15,6 volúmenes). A continuación, la torta del filtro se secó en una estufa de vacío a 35ºC durante una noche, proporcionando 44,75 g del producto deseado en forma de un sólido de color blanco (80,1%). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,28 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 6,42 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,37 (s, 1H), 5,18 (s ancho, 2H), 3,84 (s, 3H), 2,43 (s, 3H). MS (ES+, m/z) 274 (M+H).

Procedimiento 3

Un reactor encamisado de 2 litros se cargó con IMS (1000 ml), el producto del Ejemplo de producto intermedio 2 (100 g, 0,620 mol, 1 equiv.), bicarbonato sódico (107 g, 1,27 mol, 2,05 equiv.) y 2,4-dicloropirimidina (101 g, 0,682 mol, 1,1 equiv.). La solución se agitó y se calentó a reflujo con una temperatura de la camisa de 85ºc durante 8 horas. A continuación, la suspensión resultante se enfrió a 50ºC, y se agregó agua (500 ml) para mantener la temperatura entre 40 y 50ºC. A continuación, la reacción se agitó a una temperatura interna de 50ºC durante una hora y, a continuación, se enfrió a 20ºC. El producto sólido se recogió mediante filtración, se lavó con agua (750x2 ml), seguido de con EtOAc (450x1 ml). Después de secado durante una noche, bajo vacío a 60ºC, proporcionó 135 g (80%) de N-(2-cloropirimidin-4-il)-2,3-dimetil-2Hindazol-6-amina.

Ejemplo de producto intermedio 4

Preparación de N-(2-cloropirimidin-4-il)-N,2,3-trimetil-2H-indazol-6-amina

imagen1

Procedimiento 1

A una solución agitada del producto del Ejemplo de producto intermedio 3 (7,37 g) en DMF (50 ml) se agregó Cs2CO3 (7,44 g, 2 equiv.) y yodometano (1,84 ml, 1,1 equiv.) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó a T.A. durante una noche. A continuación, la mezcla de reacción se vertió dentro de un baño de agua-hielo, y el precipitado se recogió mediante filtración y se lavó con agua. El precipitado se secó al aire, proporcionando N-(2-cloropirimidin-4-il)N,2,3-trimetil-2H-indazol-6-amina en forma de un sólido de color blanco (6,43 g, 83%). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,94 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 6,88 (m, 1H), 6,24 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 4,06 (s, 3H), 3,42 (s, 3H), 2,62 (s, 3H). MS (ES+, m/z) 288 (M+H).

Procedimiento 2

Un matraz de 3 bocas de 3 litros equipado con agitador mecánico impulsado por aire, termómetro, embudo de adición y entrada/salida de nitrógeno se cargó con DMF (272 ml, 5 volúmenes) y el producto del Ejemplo de producto intermedio 3 (54,4 g, 0,20 mol, 1,0 equiv.) con agitación. La mezcla de reacción se cargó además con carbonato de cesio (194,5 g, 0,60 mol, 3,0 equiv.) mientras se mantenía la temperatura de reacción entre 20-25ºC. La mezcla de reacción se agitó a 20-25ºC durante 10 minutos. Se cargó yodometano (45,1 g, 0,32 mol, 1,6 equiv.) durante ~10 minutos mientras se mantenía la temperatura a 20-30ºC. La mezcla de reacción se agitó a 20 ~ 30ºC (típicamente la reacción se completó en 1-2 horas). Se agregó H2O desionizada (925 ml, 17 volúmenes) durante ~30 minutos mientras se mantenía la temperatura a 25-40ºC. La mezcla de reacción se agitó a 20-25ºC durante 40 minutos. El producto de reacción se aisló mediante filtración y, a continuación, y la torta del filtro se lavó con H2O/DMF (6:1, 252 ml, 4,6 volúmenes). La torta húmeda se secó bajo vacío a 40-45ºC, aislándose N-(2cloropirimidin-4-il)-N,2,3-trimetil-2H-indazol-6-amina (51,7 g, 90,4%) en forma de un sólido de color amarillo. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,94 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 6,88 (m, 1H), 6,24 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 4,06 (s, 3H), 3,42 (s, 3H), 2,62 (s, 3H). MS (ES+, m/z) 288 (M+H).

Procedimiento 3

Un reactor encamisado de 2 litros se cargó con DMF (383 ml), carbonato de dimetilo (192 ml), el producto del Ejemplo de producto intermedio 3 (115 g, 0,420 mol, 1 equiv.) y carbonato potásico (174 g, 1,26 mol, 3 equiv.). La suspensión se agitó y se calentó a reflujo con

5 una temperatura de la camisa de 135ºc durante 6 horas. A continuación, la suspensión resultante se enfrió a 60ºC, y se agregó agua (1150 ml) lentamente manteniendo la temperatura de reacción entre 50 y 65ºC. A continuación, la reacción se enfrió a 20ºC y se agitó a una temperatura interna de 20ºC durante dos horas y, a continuación, se enfrió a 10ºC y se mantuvo durante una noche, después de lo cual se filtró. El sólido se lavó con agua (230x2 ml) a tempera

10 tura ambiente y se enjuagó con la mezcla IMS:agua (1:1) (230x1 ml). Después de secado durante una noche, bajo vacío a 60ºC, proporcionó 101 g (83%) de N-(2-cloropirimidin-4-il)-N,2,3dimetil-2H-indazol-6-amina.

Ejemplo de producto intermedio 5

15 Preparación de 5-amino-2-metibencenosulfonamida

imagen1

Procedimiento 1

A una solución agitada de 2-metil-5-nitrobencenosulfonamida (4,6 g, 0,021 mol) en 2metoxietil éter (43 ml), a 0ºC, se agregó una solución de 16,1 g de cloruro de estaño(II) en 32 20 ml de HCl concentrado, gota a gota, durante 15 minutos. Una vez completada la adición, se retiró el baño de hielo y la solución se dejó agitar durante un tiempo adicional de 30 minutos. Se agregaron aproximadamente 130 ml de éter dietílico a la reacción. La mezcla se agitó vigorosamente durante 1 hora. La mezcla se basificó con una solución de NaOH y NaHCO3 y se extrajo con acetato de etilo (3x). Las capas de acetato de etilo combinadas se secaron sobre

25 MgSO4 anhidro, se filtraron y se concentraron, proporcionando el producto bruto. La trituración del producto bruto con metanol proporcionó 2,4 g 5-amino-2-metilbencenosulfonamida pura en forma de un sólido de color pardo claro. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,11-7,10 (m, 3H), 6,95 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,60 (dd, J = 8,1 y 2,4 Hz, 1H), 5,24 (s, 2H), 2,36 (s, 3H). MS (ES+, m/z) 187 (M+H).

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imagen3

Procedimiento 1

Se combinó bromuro de 4-nitrobencilo (40 g, 0,185 mol) y ácido metanosulfínico sódico

(19,5 g, 1 equiv.) en etanol (460 ml, ~0,4 M). La mezcla se agitó y calentó a 80ºC bajo reflujo.

Después de 3 horas, la mezcla de reacción se enfrió a T.A. y se filtró, recogiéndose sólido de

10 color blanquecino. El sólido se lavó con EtOH dos veces y se secó al aire, proporcionando 37 g de metil 4-nitrobencil sulfona. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,27 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,69 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 4,71 (s, 2H), 2,96 (s, 3H). MS (ES+, m/z) 216 (M+H).

Se combinó metil 4-nitrobencil sulfona (9,5 g, 0,044 mol) y Pd al 10%/C (0,95 g, 0,1 p/p) en acetato de etilo (220 ml, ~0,2 M). La mezcla se colocó bajo un agitador Parr con 276 kPa de 15 hidrógeno. Después de ~3 horas, la mezcla de reacción se vertió dentro de MeOH/EtOAc al 50% (400 ml) y se agitó vigorosamente durante 30 minutos. La mezcla se filtró a través de un lecho de Celite y gel de sílice. El material de color negro de la parte superior del lecho se separó e introdujo en MeOH al 80%/EtOAc (200 ml) y se agitó vigorosamente durante 30 minutos. La mezcla se filtró nuevamente a través de un lecho de Celite y gel de sílice. El procedimiento

20 se repitió un par de veces. Se combinaron todos los filtrados. Se evaporaron y se secaron. La trituración con EtOAc proporcionó 4-[(metilsulfonil)metil]anilina pura. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,03 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,54 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 5,20 (s, 2H), 4,20 (s, 2H), 2,79 (s, 3H). MS (ES+, m/z) 186 (M+H).

25 Procedimiento 2 Se cargó un matraz de fondo redondo (1,0 l) equipado con varilla de agitación magnética y condensador de reflujo, con bromuro de 4-nitrobencilo (40 g, 0,185 mol, 1,0 equiv.), ácido metanosulfínico sódico (21,7 g, 0,213 mol, 1,15 equiv.) y etanol (400 ml, graduación 200, 10 vol.). La mezcla se agitó y calentó a 80ºC bajo reflujo durante 2 horas. El progreso de la reac

30 ción se comprobó mediante HPLC rápida (la reacción se consideró completada cuando la HPLC indicó <0,5% de bromuro de 4-nitrobencilo). La mezcla se enfrió a temperatura ambiente. Se filtró y la torta se lavó con etanol (40 ml). La torta húmeda (15 g, 46,2 mmol) se usó para la etapa siguiente de hidrogenación sin secado adicional.

Se cargó un matraz de hidrogenación de 500 ml con la torta húmeda anterior de metil 4nitrobencil sulfona (15 g, 46,2 mmol, usada “tal cual”), Pd al 10%/C (0,1 g, 1% p/p) y etanol (120 ml, graduación 200) y agua (40 ml). La atmósfera del reactor se cambió por hidrógeno (3

5 veces). El reactor se agitó bajo H2 (448,5 kPa) a temperatura ambiente durante 30 minutos y a 50ºC durante dos horas. El progreso de la reacción se comprobó mediante HPLC (la reacción se consideró completada cuando la HPLC indicó <0,2% de metil 4-nitrobencil sulfona). La mezcla se calentó a 80ºC. La solución caliente se filtró a través de un lecho de Celite (2,0 g) y el lecho se enjuagó con EtOH (10 ml). El filtrado se transfirió dentro de un matraz de fondo re

10 dondo (500 ml) para cristalización. La suspensión se destiló bajo un vacío suave a 60ºC hasta que quedó un volumen de 60 ml. La suspensión se enfrió a 0ºC durante una hora. Los cristales se aislaron mediante filtración en vacío y el recipiente y los cristales se lavaron con etanol (10 ml). El producto se secó bajo un vacío suave a 50ºC hasta peso constante. Se obtuvo un sólido de color blanquecino (7,3 g). El rendimiento fue del 85% para las dos etapas combinadas con

15 un 99% de pureza de producto mediante HPLC.

Ejemplo de producto intermedio 7

Preparación de 4-[(isopropilsulfonil)metil]fenilamina

imagen1

20 A una solución de 1-(bromometil)-4-nitrobenceno (3,0 g, 17,4 mmol) en etanol (50 ml) se agregó 2-tiopropiolato sódico (2,7 g, 17,4 mmol). Después de 12 horas, se eliminó el disolvente bajo presión reducida, el residuo remanente se diluyó con EtOAc y se filtró para eliminar las sales residuales. El disolvente se secó sobre MgSO4 y se eliminó bajo presión reducida y el producto se continuó tratando sin purificación adicional. A continuación, el sulfuro se diluyó con

25 CH2Cl2 (50 ml) y se agregó ácido m-cloroperoxibenzoico (~70%) (6,6 g, 38,4 mmol) en porciones. La reacción se consideró completada mediante tlc y el disolvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo remanente se diluyó con EtOAc y se lavó con NaOH 1 M (2x100 ml). El disolvente se secó sobre MgSO4 y se eliminó bajo presión reducida y el producto se continuó tratando sin purificación adicional. A continuación, el residuo se diluyó con glima (8,0ml) y se

30 agregó una solución de SnCl2 (13,8 g, 69 mmol) en HCl (8,0 ml), gota a gota. La solución se dejó agitar durante 2 horas, considerándose la reducción completada mediante tlc. La mezcla de reacción se diluyó con Et2O, lo cual dio como resultado la precipitación del producto en forma de la sal HCl. Los sólidos se recogieron y se lavaron con Et2O (2x100 ml), proporcionando anilina pura (~2,4 g, 65%). RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6 + NaHCO3) δ 7,37 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,21 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,41 (s, 2H), 3,18-3,09 (m, 1H), 1,21 (d, J = 6,9 Hz, 6H).

Ejemplo de producto intermedio 8

Preparación de 4-[2-(metilsulfonil)etil]anilina

imagen1

A una solución de 1-(bromoetil)-4-nitrobenceno (3,0 g, 13,0 mmol) en etanol (70 ml) se

10 agregó tiometóxido sódico (1,0 g, 14,0 mmol). Después de 12 horas, se eliminó el disolvente bajo presión reducida, el residuo remanente se diluyó con EtOAc y se filtró para eliminar las sales residuales. El disolvente se secó sobre MgSO4 y se eliminó bajo presión reducida y el producto se continuó tratando sin purificación adicional. A continuación, el sulfuro se diluyó con CH2Cl2 (100 ml) y se agregó ácido m-cloroperoxibenzoico (~70%) (8,2 g, 48,8 mmol) en porcio

15 nes. La reacción se consideró completada mediante tlc y el disolvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo remanente se diluyó con EtOAc y se lavó con NaOH 1 M (2x100 ml). El disolvente se secó sobre MgSO4 y se eliminó bajo presión reducida y el producto se continuó tratando sin purificación adicional. A continuación, el residuo se agregó a una suspensión de paladio sobre carbón (10% en moles) en EtOAc (50 ml) en un recipiente agitador Parr. A conti

20 nuación, la reacción se trató bajo 3.943 kPa de gas hidrógeno. La solución se dejó agitar durante 2 horas, considerándose la reducción completada mediante tlc. La mezcla de reacción se filtró sobre un lecho de Celite y se lavó con EtOAc y el disolvente se eliminó bajo presión reducida, proporcionando un sólido bruto. La mezcla se recristalizó en EtOAc caliente, proporcionando anilina pura (~1,8 g, 69%). RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6 + NaHCO3) δ 6,93 (d, J = 8,2

25 Hz, 2H), 6,87 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 5,09 (s ancho, 2H), 3,31-3,26 (m, 2H), 2,92 (s, 3H), 2,84-2,79 (m, 2H).

Ejemplo de producto intermedio 9

Preparación de 4-[1-(metilsulfonil)etil]anilina

imagen1

A una solución de 4-nitrofenilcarbonol (3,0 g, 17,9 mmol) y trietilamina (3,5 ml, 21,0 mmol) en CH2Cl2 (100 ml) se agregó cloruro de metanosulfonilo (1,7 ml, 21,0 mmol), gota a gota. La reacción se consideró completada mediante tlc después de 1 hora y se interrumpió con NaHCO3 acuoso saturado. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y la capa orgánica se separó, se secó sobre MgSO4 y el disolvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo resultante se disolvió en etanol (100 ml) y se agregó tiometóxido sódico (1,5 g, 21,0 mmol) en porciones. Después de 12 horas, el disolvente se eliminó bajo presión reducida, el residuo remanente se diluyó con EtOAc y se filtró para eliminar las sales residuales. El disolvente se secó sobre MgSO4 y se eliminó bajo presión reducida y el producto se continuó tratando sin purificación adicional. A continuación, el sulfuro se diluyó con CH2Cl2 (100 ml) y se agregó ácido mcloroperoxibenzoico (~70%) (10,8 g, 62 mmol) en porciones. La reacción se consideró completada mediante tlc y el disolvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo remanente se diluyó con EtOAc y se lavó con NaOH 1 M (2x100 ml). El disolvente se secó sobre MgSO4 y se eliminó bajo presión reducida y el producto continuó tratando sin purificación adicional. A continuación, el residuo se agregó a una suspensión de paladio sobre carbón (10% en moles) en EtOAc (50 ml) en un recipiente agitador Parr. A continuación, la reacción se trató bajo 3.943 kPa de gas hidrógeno. La solución se dejó agitar durante 2 horas, considerándose la reducción completada mediante tlc. La mezcla de reacción se filtró sobre un lecho de Celite y se lavó con EtOAc y el disolvente se eliminó bajo presión reducida, proporcionando un sólido bruto. La mezcla se recristalizó en EtOAc caliente, proporcionando anilina pura (~2,0 g, 57%). RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6 + NaHCO3) δ 7,06 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 6,53 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 5,21 (s, 2H), 4,23 (q, J = 7,1 Hz, 1H), 2,70 (s, 3H), 1,21 (d, J = 7,1 Hz, 3H).

Ejemplo de producto intermedio 10

Preparación de 4-[1-metil-1-(metilsulfonil)etil]anilina

imagen1

A una solución agitada de t-butóxido (5,76 g, 0,051 mol) en THF se agregó metil 4nitrobencil sulfona (5 g, 0,023 mol) seguido de yodometano (2,89 ml, 0,046 mol). La mezcla se agitó a T.A. durante 1 hora. Se agregaron t-butóxido (2,9 g) y yodometano (0,5 ml) adicionales. La mezcla se agitó a T.A. durante un tiempo adicional de 1 hora. La mezcla se diluyó con EtO

5 Ac y se acidificó con HCl 6 N. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (x3). Las capas de acetato de etilo combinadas se secaron sobre MgSO4 anhidro, se filtraron y se evaporaron. El sólido se trituró con etanol, proporcionando 1-[1-metil-1-(metilsulfonil)etil]-4-nitrobenceno puro.

A una solución agitada de 1-[1-metil-1-(metilsulfonil)etil]-4-nitrobenceno (3,32 g, 0,014 mol) en 2-metoxietil éter (70 ml), a 0ºC, se agregó una solución de 10,35 g de cloruro de esta10 ño(II) en 20,5 ml de HCl concentrado, gota a gota, durante 15 minutos. Una vez completada la adición, se retiró el baño de hielo y la solución se dejó agitar durante un tiempo adicional de 30 minutos. Aproximadamente, se agregaron a la reacción 70 ml de éter dietílico. La mezcla se agitó vigorosamente durante 1 hora. Se formó un precipitado, el cual se recogió mediante filtración. El sólido se disolvió en CH2Cl2 y se lavó con NaOH 1 N. La mezcla se extrajo con CH2Cl2

15 (x3). Las capas de CH2Cl2 combinadas se secaron sobre MgSO4 anhidro, se filtraron y se evaporaron, proporcionando 4-[1-metil-1-(metilsulfonil)etil]anilina en forma de un sólido de color blanquecino. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6 ) δ 7,21 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,55 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 5,23 (s, 2H), 2,58 (s, 3H), 1,64 (s, 6H).

20 Ejemplo 1: Preparación de pazopanib (5-({4-[(2,3-dimetil-2H-indazol-6-il)(metil)amino]pirimidin-2-il}amino)-2-metilbencenosulfonamida) y sales y solvatos del mismo

Ejemplo 1a

Preparación de 5-({4-[(2,3-dimetil-2H-indazol-6-il)(metil)amino]pirimidin-2-il}amino)-2-metilben25 cenosulfonamida

imagen1

Procedimiento 1

A una solución del Ejemplo de producto intermedio 4 (200 mg, 0,695 mmol) y 5-amino2-metilbencenosulfonamida (129,4 mg, 0,695 mmol) en isopropanol (6 ml), se agregaron 4 go30 tas de HCl concentrado. La mezcla se calentó a reflujo durante una noche. La mezcla se enfrió

a T.A. y se diluyó con éter (6 ml). El precipitado se recogió mediante filtración y se lavó con éter. Se aisló la sal hidrocloruro de 5-({4-[(2,3-dimetil-2H-indazol-6-il)(metil)amino]pirimidin-2il}amino)-2-metilbencenosulfonamida en forma de un sólido de color blanquecino. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6 + NaHCO3) δ 9,50 (s ancho, 1H), 8,55 (s ancho, 1H), 7,81 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,69 (m, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,23 (s, 2H), 7,15 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,86 (m, 1H), 5,74 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 4,04 (s, 3H), 3,48 (s, 3H), 2,61 (s, 3H), 2,48 (s, 3H). MS (ES+, m/z) 438 (M+H).

Procedimiento 2

Un matraz de 3 bocas de 250 ml equipado con una varilla de agitación magnética, termómetro, condensador de reflujo y entrada/salida de nitrógeno se cargó con etanol (60 ml, 10 volúmenes), el producto del Ejemplo de producto intermedio 4 (6,00 g, 20,85 mol, 1,0 equiv.) y 5-amino-2-metilbencenosulfonamida (4,00 g, 21,48 mmol, 1,03 equiv.) con agitación. La mezcla de reacción se calentó a 70ºC. Después de agitar la mezcla de reacción a 68-72ºC durante 3 horas, se cargó con HCl 4 M en dioxano (0,11 ml, 0,44 mmol, 0,02 equiv.) durante aproximadamente 2 minutos. La mezcla de reacción se calentó a 68-72ºC hasta que <1,5% del área del producto de partida del Ejemplo de producto intermedio 4 permaneció mediante HPLC (Típicamente, esta reacción se completa en >8 horas). La mezcla de reacción se enfrió a 20ºC durante aproximadamente 30 minutos y se agitó a 20-22ºC durante 40 minutos. A continuación, el producto se aisló mediante filtración y la torta del filtro se lavó con etanol (20 ml, 3,3 volúmenes). La torta húmeda se secó bajo vacío a 45-50ºC. La sal hidrocloruro de 5-({4-[(2,3-dimetil2H-indazol-6-il)(metil)amino]pirimidin-2-il}amino)-2-metilbencenosulfonamida (9,52 g, 96,4%) se aisló en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6 + NaHCO3) δ 9,50 (s ancho, 1H), 8,55 (s ancho, 1H), 7,81 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,69 (m, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,23 (s, 2H), 7,15 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,86 (m, 1H), 5,74 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 4,04 (s, 3H), 3,48 (s, 3H), 2,61 (s, 3H), 2,48 (s, 3H). MS (ES+, m/z) 438 (M+H).

Procedimiento 3

A una suspensión agitada del producto del Ejemplo de producto intermedio 4 (1,1 g, 3,8 mmol) en 14 ml de MeOH, se agregó 5-amino-2-metilbencenosulfonamida (0,78 g, 4,2 mmol, 1,1 equiv.) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 3 horas y, a continuación, se agregó HCl 4 M en 1,4-dioxano (19 µl, 0,076 mmol), en una porción. Después de 4 horas, la suspensión se enfrió a temperatura ambiente y se filtró. El sólido resultante se lavó con 10 ml de MeOH y se secó en vacío, proporcionando 1,3 g (72%) de monohidrocloruro de 5-({4-[(2,3-dimetil-2H-indazol-6-il)(metilamino]pirimidinil}amino)-2-metilbencenosulfonamida en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,95 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 7,86 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,64-7,59 (m, 2H), 7,40 (m, 3H), 6,93 (dd, J = 8,8, 2,0 Hz, 1H), 5,92 (s, 1H), 4,08 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 2,65 (s, 3H), 2,56 (s, 3H).

Procedimiento 4

A una suspensión agitada del producto del Ejemplo de producto intermedio 4 (1,1 g, 3,7 mmol) en 10 ml de THF, se agregó 5-amino-2-metilbencenosulfonamida (0,70 g, 3,8 mmol, 1,0 equiv.) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 3 horas y, a continuación, se agregó HCl 4 M en 1,4-dioxano (18 µl, 0,072 mmol), en una porción. Después de 5 horas, la suspensión se enfrió a temperatura ambiente y se filtró. El sólido resultante se lavó con 16 ml de THF y se secó al aire, proporcionando 1,6 g (92%) de monohidrocloruro de 5-({4-[(2,3-dimetil-2H-indazol-6-il)(metilamino]-2-pirimidinil}amino)-2-metilbencenosulfonamida en forma de un sólido de color amarillo claro.

Procedimiento 5

A una suspensión agitada del producto del Ejemplo de producto intermedio 4 (1,0 g, 3,6 mmol) en 10 ml de CH3CN, se agregó 5-amino-2-metilbencenosulfonamida (0,70 g, 3,8 mmol, 1,0 equiv.) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 3 horas y, a continuación, se agregó HCl 4 M en 1,4-dioxano (18 µl, 0,076 mmol), en una porción. Después de 20 horas, la suspensión se enfrió a temperatura ambiente y se filtró. El sólido resultante se lavó con 10 ml de CH3CN y se secó al aire, proporcionando 1,3 g (73%) de monohidrocloruro de 5-({4-[(2,3-dimetil-2H-indazol-6-il)(metilamino]-2-pirimidinil}amino)-2-metilbencenosulfonamida en forma de un sólido de color blanquecino.

Procedimiento 6

Un reactor encamisado de 2 litros se cargó con MeOH (1005 ml), el producto del Ejemplo de producto intermedio 4 (84 g, 0,292 mol, 1 equiv.) y 5-amino-2-metilbencenosulfonamida (60 g, 0,320 mol, 1,1 equiv.). La solución se agitó y se calentó a 50ºC y se agregó HCl 4 M en dioxano (1,46 ml, 2% en moles), A continuación, la solución se agitó y calentó a reflujo con una temperatura de la camisa de 85ºC durante 10 horas. A continuación, la suspensión resultante se enfrió a 20-25ºC y se filtró. El sólido filtrado se lavó con acetonitrilo (293x2 ml) a temperatura ambiente. Después de secado durante una noche, bajo vacío a 60ºC, proporcionó 116 g (81%) de monohidrocloruro de 5-({4-[(2,3-dimetil-2H-indazol-6-il)(metilamino]-2-pirimidinil}amino)-2metilbencenosulfonamida.

Ejemplo 1b

Preparación de monohidrato de monohidrocloruro de 5-({4-[(2,3-dimetil-2H-indazol-6-il)metilamino]-2-pirimidin-2-il}amino)-2-metilbencenosulfonamida

imagen1

5 A un matraz de fondo redondo, se agregaron 2,6 g de la sal monohidrocloruro del Ejemplo 1a, Procedimiento 1, en cualquier forma. A continuación, se agregaron 39 ml de isopropanol (15 volúmenes). La mezcla se calentó a 75ºC en un baño de aceite y, a continuación, se agregaron 14 ml de HCl acuoso 0,05 N (5,4 volúmenes). La solución transparente se enfrió a 65ºC y, a continuación, se sembró con el monohidrato de la sal monohidrocloruro del Ejemplo 1,

10 Procedimiento 1 (0,05-0,1% en peso). La solución turbia se agitó a 65ºC durante 60 minutos y, a continuación, se enfrió a 0ºC a una velocidad de ~0,25-0,5ºC/minuto. El sólido de color blanco resultante se filtró y se secó hasta peso constante bajo vacío a T.A., proporcionando 85% de rendimiento de monohidrato de monohidrocloruro de 5-({4-[(2,3-dimetil-2H-indazol-6-il)metilamino]-2-pirimidin-2-il}amino)-2-metilbencenosulfonamida.

15

Ejemplo 1c

Preparación de anhidrato de monohidrocloruro de 5-({4-[(2,3-dimetil-2H-indazol-6-il)metilamino]-2-pirimidin-2-il}amino)-2-metilbencenosulfonamida

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20 Un reactor encamisado de 1 litro se cargó con acetonitrilo (563 ml), agua (188 ml) y la sal monohidrocloruro del Ejemplo 1, Procedimiento 6 (50 g, 0,105 mol). La solución se agitó y calentó a la temperatura de la camisa a 85ºC, obteniéndose una solución transparente. A continuación, la solución se enfrió a 45ºC y se mantuvo durante 90 minutos para provocar la cristalización del hidrato. Después de mantenerla durante 90 minutos, la solución se enfrió a 0ºC, se

25 mantuvo durante una hora y, a continuación, se filtró a través de un filtro-secador. A continuación, los sólidos filtrados se lavaron con acetonitrilo (200x1 ml) a 0ºC. Los sólidos se soplaron con nitrógeno en el filtro-secador a 25ºC hasta que la LOD fue menor del 25%. Se agregó acetonitrilo (300 ml) a los sólidos en el filtro-secador y se agitaron a 60ºC durante al menos 8 horas

o hasta que se completó la conversión de la forma (no quedaba monohidrato residual) tal como se observó mediante DATR, formándose anhidrato de monohidrocloruro de 5-({4-[(2,3-dimetil2H-indazol-6-il)metilamino]-2-pirimidinil}amino)-2-metilbencenosulfonamida. Los contenidos del

5 filtro-secador se enfriaron a ~30ºC, y el filtrado se separó usando presión de nitrógeno. La torta del filtro se sopló con nitrógeno a -60ºC bajo vacío hasta que la LOD fue menor del 0,5%. Los contenidos se enfriaron a 20ºC, proporcionando 37,5 g (75%) de anhidrato de monohidrocloruro de 5-({4-[(2,3-dimetil-2H-indazol-8-il)metilamino]-2-pirimidinil}amino)-2-metilbencenosulfonamida.

10

Ejemplo 2 (EJEMPLO DE REFERENCIA)

Preparación de N4-(2,3-dimetil-2H-indazol-6-il)-N4-metil-N2-{4-[(metilsulfanil)metil]fenil}pirimidino-2,4-diamina

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15 El Ejemplo 2 se preparó de acuerdo con el procedimiento general establecido anteriormente en el Ejemplo 1 usando el Ejemplo del producto intermedio 4 y la anilina apropiada. Las anilinas apropiadas se prepararon usando procedimientos similares a los descritos para los Ejemplos de productos intermedios 5-10. RMN 1H (300 MHz, DMSO-d5 + NaHCO3) δ 9,37 (s ancho, 1H), 7,88 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 7,78 (m, 3H), 7,47 (s, 1H), 7,22 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 6,91

20 (dd, J = 8,8, 1,5 Hz, 1H), 5,84 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 4,37 (s, 2H), 4,09 (s, 3H), 3,51 (s, 3H), 2,88 (s, 3H), 2,65 (s, 3H). MS (ES+, m/z) 437 (M+H), 435 (M+H).

Ejemplo 3 (EJEMPLO DE REFERENCIA)

Preparación de anhidrato de monohidrocloruro de 5-({4-[(2,3-dimetil-2H-indazol-6-il)metil25 amino]-2-pirimidinil}amino)-2-metilbencenosulfonamida

imagen1

Preparación 1

Preparación de (±)-8-hidroxi-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepino-4-acetato de metilo

a) 3-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-metilamino]metil-4-bromoanisol

Se agregó metilamina acuosa al 40% (49 ml, 563 mmol) rápidamente a una solución de 4-bromo-3-bromometilanisol (15,75 g, 56,29 mmol) en THF (280 ml) a T.A. Después de 2,5 horas, la reacción se concentró, y el residuo se repartió entre Et2O (560 ml) y NaOH 1,0 N (100 ml). Las capas se separaron y la capa orgánica se secó (MgSO4) y concentró hasta un aceite de color amarillo: TLC (MeOH al 5%/CHCl3) Rf 0,32. El aceite se disolvió en CHCl3 (280 ml), y se agregó dicarbonato de di-terc-butilo (1,29 g, 56,29 mmol). La reacción se agitó a T.A. durante 45 minutos y, a continuación, se concentró. La cromatografía de gel de sílice (EtOAc al 5%/tolueno) proporcionó el compuesto del epígrafe (16,81 g, 90%) en forma de un aceite de color amarillo claro: TLC (EtOAc al 5%/tolueno) Rf 0,43; RMN 1H (400, CDCl3) mezcla de rotámeros; δ 7,42 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,65-6,80 (m, 2H), 4,40-4,55 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 2,81-2,97 (m, 3H), 1,37-1,60 (m, 9H). MS (ES) m/e 352/354 (M+Na)+.

b) (±)-3-carbometoxi-4-[2-[N-terc-butoxicarbonil)-N-metilamino]metil-4-metoxifenil]butanoato de metilo

Una solución de 3-[N-(terc-butoxicarbonil)-N-metilamino]metil-4-bromoanisol (4,95 g, 15 mmol), itaconato de dimetilo (3,08 g, 19,5 mmol), acetato de paladio (168 mg, 0,75 mmol), tri-otolilfosfina (457 mg, 1,5 mol) y diisopropiletilamina (5,2 ml, 30 mmol) en propionitrilo (75 ml) se calentó a reflujo durante 45 minutos y, a continuación, se concentró sobre un rotavapor. El residuo se diluyó con Et2O (150 ml) y la mezcla se filtró a través de Celite® para eliminar los materiales insolubles. El filtrado se concentró y el residuo se volvió a concentrar a partir de xilenos. La cromatografía sobre gel de sílice (gradiente: EtOAc al 20%/hexanos y, a continuación, EtOAc/hexanos al 1:1) eliminó la fosfina y los materiales de la línea basal; todos los otros materiales con Rf 0,40-0.70 se recolectaron conjuntamente y se concentraron, proporcionando un aceite de color amarillo, turbio: TLC (EtOAc al 30%/hexanos) Rf 0,41 (producto principal).

El aceite se disolvió en MeOH (75 ml), y se agregó cuidadosamente Pd al 10%/C. La mezcla se agitó bajo hidrógeno (345 kPa) durante 2,5 horas y, a continuación, se filtró a través de Celite®, para eliminar el catalizador. El filtrado se concentró y el residuo se volvió a someter a las condiciones de reacción. Después de otras 2,5 horas, la mezcla se filtró a través de Celite®, para eliminar el catalizador, y el filtrado se concentró, proporcionando un aceite de color amarillo claro. Este se volvió a concentrar a partir de CHCl3/hexanos y, a continuación, se cromatografió sobre gel de sílice (gradiente: EtOAc al 20%/hexanos y, a continuación, EtOAc/hexanos al 1:1), proporcionado el compuesto del epígrafe (4,53 g, 74%) en forma de un aceite de color amarillo claro: TLC (EtOAc al 30%/tolueno) Rf 0,46; RMN 1H (400, CDCl3) mezcla de rotámeros; δ 7,03 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,65-6,80 (m, 2H), 4,46 (s ancho, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,64 (s, 3H), 3,63 (s, 3H), 2,62-3,12 (m, 7H), 2,35-2,50 (m, 1H), 1,47 (s ancho, 9H). MS (ES) m/e 432 (M+Na)+.

c) (±)-3-carbometoxi-4-[2-(metilamino)metil-4-metoxifenil]butanoato de metilo

Se agregó TFA (55 ml) de una sola vez a una solución de (±)-3-carbometoxi-4-[2-[Nterc-butoxicarbonil)-N-metilamino]metil-4-metoxifenil]butanoato de metilo (4,53 g, 110,06 mmol) en CH2Cl2 (55 ml) anhidro a 0ºC, y la reacción se calentó a T.A. Después de 1 hora, la reacción se concentró, y el residuo se volvió a concentrar a partir de tolueno (2x100 ml), proporcionando el compuesto del epígrafe (11,06 mmol, cuantitativo) en forma de un aceite de color amarillo claro: MS (ES) m/e 310 (M+H)+.

d) (±)-8-metoxi-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepino-4-acetato de metilo

Una solución de (±)-3-carbometoxi-4-[2-(metilamino)metil-4-metoxifenil]butanoato de metilo (11,06 mmol) y diisopropiletilamina (5,8 ml, 33,18 mmol) en tolueno (110 ml) se calentó a reflujo durante 25 horas, se agitó a T.A. durante 4 días y, a continuación, se calentó a reflujo durante otras 24 horas. La concentración y cromatografía de gel de sílice (MeOH al 5% en EtOAC/CHCl3 al 1:1) proporcionó el compuesto del epígrafe (2,88 g, 94%) en forma de un sólido de color amarillo claro: TLC (MeOH al 5% en EtOAc/CHCl3 al 1:1) Rf 0,63; RMN 1H (250, CDCl3) δ 7,02 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,78 (dd, J = 8,4, 2,7 Hz, 1H), 6,63 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 5,29 (d, J = 16,3 Hz, 1H), 3,50-3,90 (m, 2H), 3,79 (s, 3H), 3,71 (s, 3H), 2,73-3,16 (m, 3H), 3,04 (s, 3H), 2,41 (dd, J = 16,7, 5,4 Hz, 1H); MS (ES) m/e 300 (M+Na)+, 278 (M+H)+.

e) (±)-8-hidroxi-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepino-4-acetato de metilo

Se agregó cloruro de aluminio anhidro (1,35 g, 10,15 mmol) de una sola vez a una solución de (±)-8-metoxi-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepino-4-acetato de metilo (562 mg, 2,03 mmol) y etanotiol (0,75 ml, 10,15 mmol) en CH2Cl2 anhidro (20 ml) a 0ºC bajo argón. La mezcla se calentó a T.A. y se agitó durante 4,5 horas y, a continuación, se volvió a enfriar a 0ºC. Se agregó H2O (20 ml) enfriada con hielo, y la mezcla se agitó vivamente durante 5 minutos y, a continuación, se extrajo con CHCl3 (3x20 ml). Las capas de CHCl3 combinadas se secaron (MgSO4) y se concentraron, proporcionando un residuo. La capa acuosa se filtró por succión para recoger un precipitado sólido. Este precipitado y el residuo procedente de la capa de CHCl3 se combinaron en MeOH/CHCl3 1:1, y la solución se concentró, proporcionando un sólido de color blanquecino. Este se trituró con MeOH caliente, y la mezcla se dejó enfriar a

T.A. El sólido se recogió mediante filtración por succión y se lavó secuencialmente con MeOH frío y Et2O. El secado en alto vacío a 40ºC proporcionó el compuesto del epígrafe (467,9 mg, 88%) en forma de un sólido incoloro: TLC (MeOH al 5%/CHCl3) Rf 0,17; RMN 1H (250, DMSOd6) δ 9,29 (s, 1H), 6,89 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,50-6,70 (m, 2H), 5,16 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 3,84 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 3,60-3,85 (m, 1H), 3,56 (s, 3H), 2,30-3,00 (m, 4H), 2,86 (s, 3H); MS (ES) m/e 286 (M+Na)+, 264 (M+H)+.

Preparación 2

Separación mediante HPLC de los enantiómeros de (±)-8-hidroxi-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2benzazepino-4-acetato de metilo

a) (R)-(+)-8-hidroxi-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepino-4-acetato de metilo y (S)(-)-8-hidroxi-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepino-4-acetato de metilo

Se volvió a disolver (±)-8-hidroxi--3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepino-4-acetato de metilo en sus enantiómeros mediante HPLC quiral usando las condiciones siguientes: columna Diacel Chiralpak AS® (21,2x250 mm), fase móvil de EtOH, velocidad de flujo 7 ml/min, detección ultravioleta a 254 nm, inyección 70 mg; tR para (R)-(+)-8-hidroxi--3-oxo-2,3,4,5tetrahidro-1H-2-benzazepino-4-acetato de metilo = 21,5 min; tR para (S)-(-)-8-hidroxi--3-oxo2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepino-4-acetato de metilo = 39,1 min.

Preparación 3

Preparación de ácido (S)-3-oxo-8-[3-piridin-2-ilamino)-1-propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5tetrahidro-1H-2-benzazepino-4-acético

a) (S)-3-oxo-8-[3-(1-oxopiridin-2-ilamino)-1-propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H2-benzazepino-4-acetato de metilo

A una solución agitada de (S)-8-hidroxi-2-metil-3-oxo-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2benzazepino-4-acetato de metilo (19,5g, 57,4 mmol) en THF (400 ml) seco y DMF (200 ml) seco bajo argón, se agregó N-óxido de 2-(3-hidroxipropilamino)piridina (11,6 g, 69 mmol) y trifenifosfina (18,0 g, 69 mml). Después de disolverse completamente todos los sólidos (~30 minutos), la reacción se enfrió a 0ºC en un baño de hielo y se agregó azodicarboxilato de diisopropilo (14,3 ml, 69 mmol) mediante una jeringuilla. La reacción se dejó calentar lentamente hasta

T.A. y se agitó durante 18 horas. La concentración y cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (CHCl3/EtOAc/EtOH 8:2:1) proporcionó el compuesto del epígrafe (20,83 g, 75%) en forma de una espuma sólida. Puede obtenerse una cantidad adicional de 5,73 g del producto reciclando el material de partida recuperado a partir de la reacción anterior, proporcionando un total de 26,56 (96%) del compuesto del epígrafe: MS (ES) m/e 482,2 (M+H)+; RMN 1H (400, DMSO-d6) δ 8,09 (dd, J = 6,5, 1,3 Hz, 1H), 7,29 (t, 1H), 7,18 (t, 1H), 7,02 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 6,84-6,79 (m, 3H), 6,59 (t, 1H), 5,32 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 4,28-4,14 (m, 2H), 4,16 (d, J =16,5 Hz, 1H), 4,02 (t, 2H), 3,84 (m, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,40 (dd, 2H), 3,01(dd, 1H), 2,73 (dd, 1H), 2,70 (dd, 1H), 2,52 (dd, 1H), 2,02 (ddd, 2H).

b) (S)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)-1-propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepino-4-acetato de metilo

A una solución agitada de (S)-3-oxo-8-[3-(1-oxopiridin-2-ilamino)-1-propiloxi]-2-(2,2,2trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepino-4-acetato de metilo (26,56 g, 55 mmol) en isopropanol (500 ml) se agregó paladio al 10% sobre carbón activado (8 g, 7,5 mmol, re-humedecido cuidadosamente en isopropanol bajo argón) y ciclohexeno (55,7 ml, 550 mml). A continuación, la reacción se calentó a reflujo bajo argón en un baño de aceite fijado a 90ºC. Después de 6 horas, se agregó una cantidad adicional de paladio al 10% sobre carbón activado (8 g, 7,5 mmol, re-humedecido cuidadosamente en isopropanol bajo argón) y ciclohexeno (55,7 ml, 550 mml). Después de un tiempo adicional de 18 horas, la reacción se filtró en caliente a través de Celite®, y el lecho del filtro se lavó con MeOH/CHCl3 1:1 (400 ml). El filtrado se concentró bajo vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (CHCl3/MeOH 95:5) proporcionado el compuesto del epígrafe (19,50 g, 76%) en forma de una espuma pegajosa de color blanco: TLC (sílice, MeOH al 5% en CHCl3) Rf 0,52; MS (ES) m/e 466,3 (M+H)+; RMN 1H (400, DMSO-d6) δ 7,94 (dd, 1H), 7,34 (t, 1H),7,02 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 6,81 (m, 2H), 6,54 (t, 1H), 6,46 (m, 2H), 5,31 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 4,23-4,13 (m, 2H), 4,17 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 4,02 (t, 2H), 3,82 (m, 1H), 3,58 (s, 3H), 3,36 (m, 2H), 3,01 (dd, H), 2,72 (dd, 1H), 2,68 (dd, 1H), 2,50 (dd, 1H), 1,96 (ddd, 2H).

c) Acido (S)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)-1-propiloxi]-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H2-benzazepino-4-acético

A una solución agitada de (S)-3-oxo-8-[3-(piridin-2-ilamino)-1-propiloxi]-2-(2,2,2trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepino-4-acetato de metilo (19,50 g, 42 mmol) en dioxano (150 ml) se agregó NaOH 1N acuoso (75 ml, 75 mmol). La reacción turbia se agitó a

T.A. durante 2 horas y, a continuación, la solución homogénea resultante se neutralizó con HCl 1 N acuoso (75 ml, 75 mmol). La solución se concentró hasta casi sequedad mediante evaporación rotatoria para separar por precipitación el producto. El sobrenadante se separó por decantación y el sólido gomoso remanente se redisolvió en metanol. A continuación, la solución transparente se volvió a concentrar mediante evaporación rotatoria. El sólido remanente se trituró con un pequeño volumen de agua, se filtró y se secó bajo vacío, proporcionando el compuesto del epígrafe (16,38 g, 86%) en forma de un polvo de color blanco: HPLC (Hamilton PRP-1®, CH3CN al 25%/H2O conteniendo TFA al 0,1%) k’ = 3,1; [α]D -112,3ºs(c, 1,0, MeOH); MS (ES) m/e 452,3 (M+H)+; RMN 1H (400, DMSO-d6) δ 7,95 (dd, 1H), 7,34 (dt, 1H), 7,02 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 6,81 (m, 2H), 6,58 (t, 1H), 6,47 (m, 2H), 5,30 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 4,27-4,13 (m, 2H), 4,15 (d, J = 16,5 Hz, 1H), 4,02 (t, 1H), 3,78 (m, 1H), 3,37 (m, 2H), 3,00 (dd, 1H), 2,69 (dd, 1H), 2,65 (dd, 1H), 2,41 (dd, 1H), 1,96 (ddd, 2H). Análisis calculado para C22H24F3N3O4: C, 58,53; H, 5,36; N, 9,31. Encontrado: C, 58,37; H, 5,42; N, 9,20.

Datos biológicos: Efecto de los compuestos descritos en los Ejemplos 1 y 3 sobre la neovascularización coroidal (CNV) en un modelo de ratón para CNV

Los ratones en los ejemplos siguientes se trataron de acuerdo con la declaración ARVO para el Uso de Animales en Investigación Oftálmica y de Visión.

Ejemplo 4: Modelo de regresión para CNV

Los ratones se anestesiaron y las pupilas se dilataron. Se produjeron en las retinas quemaduras de fotocoagulación por láser de kriptón. La administración del compuesto descrito en el Ejemplo 1 se inició siete días después de la lesión inducida por láser. Se administraron dosis orales de o bien el vehículo solamente o bien de vehículo conteniendo el compuesto de fórmula (I) (designado como VEGF R en la Figura 1) a una dosis de ó 4 mg/kg, 20 mg/kg, ó 100 mg/kg, dos veces al día, durante siete días. Después de siete días de tratamiento, los ratones se perfundieron con dextrano marcado con fluoresceína, y se cuantificó el área de neovascularización coroidal. El pazopanib disminuyó el área de CNV de una manera específica de la dosis. Véase Figura 1.

Ejemplo 5: Modelo de prevenión para CNV

En este experimento, se administró el compuesto descrito en el Ejemplo 1 (designado como VEGF R en la Figura 2), el Ejemplo 3 (designado como vitronectina en la Figura 2), o una combinación de los compuestos descritos en el Ejemplo 1 y el Ejemplo (designado como “ambos” en la Figura 2) a cada ratón comenzando un día antes llevar a cabo el quemado de la retina de acuerdo con los procedimientos descritos en el Ejemplo 4. Los compuestos se administraron oralmente dos veces al día a una dosificación de 100 mg/kg para el compuesto del Ejemplo 1 o de 45 mg/kg para el compuesto del Ejemplo 3. Catorce días después del quemado de la retina, se cuantificó el área de CNV tal como se ha descrito anteriormente. Los resultados se muestran en la Figura 2.

Aunque en la presente invención se ilustran y describen en detalle realizaciones específicas de la presente invención, la invención no está limitada a las mismas. Las descripciones anteriormente detalladas se proporcionan como ejemplos de la presente invención y no deberían considerarse como constitutivas de ninguna limitación de la invención. Las modificaciones

5 resultarán obvias para los expertos en la técnica, y todas las modificaciones que no se aparten del espíritu de la invención están destinadas a ser incluidas dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas.

10

Claims (27)

1. Reivindicaciones

   1. Una formulación farmacéutica tópica que comprende un compuesto de fórmula (I):

   imagen1

   o sal o solvato del mismo, para uso en el tratamiento de trastornos neovasculares oculares mediante administración directa al ojo.

2. 2.

   Una formulación tópica para uso de acuerdo con la reivindicación 1, en el que dicho compuesto es el compuesto de fórmula (I’):

3. 3.

   Una formulación tópica para uso de acuerdo con las reivindicaciones 1 y 2, en el que dicho compuesto es el compuesto de fórmula (I’’):

   imagen1

   imagen1
4. 4. Una formulación tópica para uso de acuerdo con las reivindicaciones 1-3 en la forma

   de gotas para ojos, en el que el compuesto fórmula 1, 1’ o 1’’ está disuelto o suspendido en un 15 vehículo adecuado.
5. 5. Una formulación tópica para uso de acuerdo con las reivindicaciones 1-4 para administración conjuntamente con uno o más agentes terapéuticos adicionales para el tratamiento de trastornos neovasculares.
6. 6. Una formulación tópica para uso de acuerdo con la reivindicación 5, en el que el uno 20 o más agentes terapéuticos adicionales es pegaptanib y/o ranibizumab.
7. 7. Una formulación tópica para uso de acuerdo con las reivindicaciones 5-6, en el que el uno o más agentes terapéuticos adicionales se administran separadamente.
8. 8. Una formulación tópica para uso de acuerdo con la reivindicación 7, en el que el uno o más agentes terapéuticos adicionales se administran por medios diferentes.
9. 9. Una formulación tópica para uso de acuerdo con las reivindicaciones 1-8, en el que el trastorno neovascular ocular es un trastorno neovascular coroidal o un trastorno neovascular retiniano.

   5 10. Una formulación tópica para uso de acuerdo con la reivindicación 9, en el que el trastorno neovascular ocular es degeneración macular relacionada con la edad (AMD) exudativa, estrías angioides, miopía patológica, síndrome de histoplasmosis ocular, roturas en la membrana de Bruch, edema macular (incluyendo edema macular diabético), sarcoidosis, uveítis, AMD atrófica, queratocono, síndrome de Sjogren, miopía, tumores oculares, rechazo de

   10 injerto corneal, lesión corneal, glaucoma neovascular, ulceración corneal, cicatrices corneales, vitreoretinopatía proliferativa, retinopatía de premadurez, degeneración retiniana, glaucoma crónico, desprendimiento retiniano, y retinopatía drepanocitaria.
10. 11. Una formulación tópica para uso de acuerdo con la reivindicación 10, en el que el

    trastorno neovascular ocular es degeneración macular relacionada con la edad (AMD) exudati15 va.

11. 12.

    Una formulación tópica para uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-11, para la prevención de trastornos neovasculares oculares.

12. 13.

    Una formulación tópica para uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-11, para la curación de trastornos neovasculares oculares.

    20 14. Una formulación tópica para uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-11, para la disminución de la velocidad de avance del trastorno.
13. 15. Uso de un compuesto de fórmula (I):

    imagen1

    o sal o solvato del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de trastor25 nos neovasculares ocular mediante aplicación tópica directa al ojo.

14. 16.

    Uso de acuerdo con la reivindicación 15, en el que dicho compuesto es el compuesto de fórmula (I’):

15. 17.

    Uso de acuerdo con las reivindicaciones 15-16, en el que dicho compuesto es el compuesto de fórmula (I’’):

    5 18. Uso de acuerdo con las reivindicaciones 15-17 en el que el medicamento está en la forma de gotas para ojos, en el que el compuesto fórmula 1, 1’ o 1’’ está disuelto o suspendido en disolvente adecuado.

    imagen1

    imagen1
16. 19. Uso de acuerdo con las reivindicaciones 15-18 en el que el medicamento se admi

    nistra conjuntamente con uno o más agentes terapéuticos adicionales para el tratamiento de 10 trastornos neovasculares.

17. 20.

    Uso de acuerdo con la reivindicación 19, en el que el uno o más agentes terapéuticos adicionales es pegaptanib y/o ranibizumab.

18. 21.

    Uso de acuerdo con las reivindicaciones 19-20, en el que el uno o más agentes terapéuticos adicionales se administran separadamente.

    15 22. Uso de acuerdo con la reivindicación 21, en el que el uno o más agentes terapéuticos adicionales se administran por medios diferentes.
19. 23. Uso de acuerdo con las reivindicaciones 15-22, en el que el trastorno neovascular ocular es un trastorno neovascular coroidal o un trastorno neovascular retiniano.
20. 24. Uso de acuerdo con la reivindicación 23, en el que el trastorno neovascular ocular

    20 es degeneración macular relacionada con la edad (AMD) exudativa, estrías angioides, miopía patológica, síndrome de histoplasmosis ocular, roturas en la membrana de Bruch, edema macular (incluyendo edema macular diabético), sarcoidosis, uveítis, AMD atrófica, queratocono, síndrome de Sjogren, miopía, tumores oculares, rechazo de injerto corneal, lesión corneal, glaucoma neovascular, ulceración corneal, cicatrices corneales, vitreoretinopatía proliferativa,

    25 retinopatía de premadurez, degeneración retiniana, glaucoma crónico, desprendimiento retiniano, y retinopatía drepanocitaria.
21. 25. Uso de acuerdo con la reivindicación 24, en el que el trastorno neovascular ocular es degeneración macular relacionada con la edad (AMD) exudativa.

22. 26.

    Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 15-25, en el que el tratamiento es la prevención de trastornos neovasculares oculares.

23. 27.

    Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 15-25, en el que el tratamiento es la curación de trastornos neovasculares oculares.

24. 28.

    Uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 15-25, en el que el tratamiento es la disminución de la velocidad de avance del trastorno.

25. 29. Un compuesto de fórmula (I) o una sal o solvato del mismo:

    imagen1

    10 para uso en el tratamiento de trastornos neovasculares oculares mediante administración tópica directamente al ojo.

26. 30.

    Un compuesto para uso de acuerdo con la reivindicación 29 de fórmula (I’):

27. 31.

    Un compuesto para uso de acuerdo con las reivindicaciones 29-30 de fórmula (I’’):