ES2352088T3

ES2352088T3 - Composiciones y dispositivos hemostáticos.

Info

Publication number: ES2352088T3
Application number: ES05250487T
Authority: ES
Inventors: Sanyog M. Pendharkar; Anne J. Gorman; Thomas L. Craven
Original assignee: Ethicon Inc
Current assignee: Ethicon Inc
Priority date: 2004-01-30
Filing date: 2005-01-31
Publication date: 2011-02-15
Anticipated expiration: 2025-01-31
Also published as: JP5599846B2; EP1559438B1; DK1559438T3; US20050171001A1; CA2495048A1; ATE487501T1; JP2012210479A; JP5178992B2; CA2495048C; US7109163B2; DE602005024633D1; EP1559438A1; JP2005239713A

Abstract

Composición hemostática que comprende: un líquido biocompatible, partículas de un polímero biocompatible adecuado para su uso en hemostasia y que es insoluble en dicho líquido, cloruro de benzalconio, en el que dicho cloruro de benzalconio está presente en hasta el 1 por ciento en peso de dicho líquido, y glicerol, en el que dicho glicerol está presente en hasta el 20 por ciento en peso de dicho líquido, en la que dichas partículas, glicerol y cloruro de benzalconio están dispersados de manera sustancialmente homogénea en dicho líquido, y en la que la relación de dicho líquido con respecto a dichas partículas es efectiva para proporcionar propiedades hemostáticas a dicha composición; con la condición de que la composición no sea: (a) la composición obtenible mediante un procedimiento que consiste en reconstituir 20.000 unidades de trombina bovina liofilizada en 20 ml de salina que contiene 0,005% de cloruro de benzalconio y 5% de glicerol para proporcionar una muestra, y, a continuación, mezclar 5 ml de esa muestra con 1g de polvo Surgifoam®, y opcionalmente, cargar el producto en una jeringa de 10 cc y, a continuación, opcionalmente, esterilizarla a 25 kGy, o (b) la composición obtenible mediante un procedimiento que consiste en reconstituir 20.000 unidades de trombina bovina liofilizada en 20 ml de salina que contiene 0,005% de cloruro de benzalconio y 5% de glicerol para proporcionar una muestra, y, a continuación, mezclar 5 ml de esa muestra con 1 g de polvo Surgifoam®, y, opcionalmente, cargar el producto en una jeringa de 10 cc y, a continuación, como una etapa opcional: (i) esterilizarlo a 25 kGy, o (ii) espumarla con 3 ml de nitrógeno y, a continuación, esterilizarlo a 25 kGy.

Description

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a composiciones hemostáticas fluidas adecuadas para su uso en dispositivos hemostáticos que son adecuados para la aplicación de una composición hemostática fluida a una zona que requiere hemostasia, a dichos dispositivos hemostáticos que utilizan dichas composiciones y a procedimientos de realización de dichas composiciones y dispositivos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Los hemostáticos basados en gelatina, tanto en forma de polvo o esponja sólida, están disponibles comercialmente y son usados en procedimientos quirúrgicos. El polvo de gelatina, cuando es mezclado con fluido, puede formar una pasta o suspensión acuosa que es útil como hemostato fluido, extruíble e inyectable para hemorragia difusa, particularmente de superficies no homogéneas o zonas difíciles de alcanzar. La suspensión acuosa convencional se prepara en el punto de uso mediante agitación mecánica y mezclando el polvo y el líquido para proporcionar uniformidad a la composición. A continuación, la pasta es colocada en un medio de suministro o aplicador, por ejemplo, una jeringa, y es aplicada a la herida.

La principal desventaja de este enfoque es la necesidad de mezclar el polvo con el líquido, amasarlo en una pasta y rellenar con el mismo el dispositivo de suministro seleccionado, todo ello en el momento requerido y en el punto de uso. Las manipulaciones requieren tiempo y, potencialmente, pueden comprometer la esterilidad del producto suministrado. De esta manera, existe una necesidad de una composición hemostática moldeable, fluida, estéril que esté preparada para ser usada en el punto de uso o que pueda ser preparada con una mínima manipulación y sin riesgo de comprometer la esterilidad del producto.

Sería deseable que un dispositivo hemostático, por ejemplo, un medio de suministro, tal como una jeringa u otro aplicador, estuviera pre-llenado con una composición hemostática y estuviera disponible instantáneamente para el cirujano en el punto de uso, sin necesidad de manipulación adicional. La composición hemostática pre-llenada en el dispositivo o aplicador debería ser estéril y fluida y debería requerir un tiempo de preparación mínimo y una fuerza mínima cuando es extruída o inyectada a través del medio de suministro en el punto de uso. Las composiciones de la presente invención proporcionan dichas propiedades y dispositivos

pre-llenados.

El documento US 4.655.211 divulga un “agente hemostático que comprende un portador en la forma de una fibra o escama individual, separada que tiene trombina y Factor XIII fijados a la misma, en el que dicho portador está compuesto de un material biodegradable que tiene una capacidad de absorción de agua de aproximadamente el 50 por ciento o superior, dicha escama tiene una dimensión mayor de aproximadamente 5.000 micrómetros o inferior, una dimensión menor de aproximadamente 3.000 micrómetros o inferior, y un grosor de aproximadamente 2.000 micrómetro o inferior, y dicha fibra tiene una finura de hilo único de aproximadamente 30 deniers o inferior, y una longitud de hilo de aproximadamente 10 mm o inferior”.

El resumen Derwent para JP62228009 divulga una preparación externa compuesta de una base termoplástica que contiene fármacos o cosméticos. En un ejemplo, se indica que la base es gelatina 3%, glicerina 69,95%, agua 27% y cloruro de benzalconio 0,05%.

El documento WO 2005/016256 divulga una “composición hemostática estéril, que comprende:

una fase líquida continua, biocompatible que comprende trombina estéril; y una fase sólida que comprende partículas de un polímero biocompatible adecuado para su uso en hemostasia y que es sustancialmente insoluble en dicha fase líquida, comprendiendo dicha fase líquida continua dicha fase sólida y dicha trombina estéril dispersada de manera sustancialmente homogénea en la misma, en la que la relación de dicha fase líquida y dicha fase sólida es efectiva para proporcionar propiedades hemostáticas a dicha composición y dicha trombina estéril comprende actividad enzimática”.

El documento WO 2005/016256 divulga un “procedimiento de realización de una composición hemostática fluida, que comprende:

introducir un volumen de un líquido biocompatible en un recipiente de mezclado equipado con un medio para mezclar dicho líquido, introducir un volumen de un gas biocompatible en dicho volumen de líquido, mientras dicho medio de mezclado está funcionando bajo condiciones efectivas para mezclar conjuntamente dicho líquido y dicho gas, para formar una espuma que comprende una fase gaseosa discontinua que comprende dicho gas dispersado de manera sustancialmente homogénea en una fase líquida continua que comprende dicho líquido, introducir en dicha espuma una cantidad de partículas sólidas de un polímero biocompatible adecuado para su uso en hemostasia, y que es sustancialmente insoluble en dicho líquido; y mezclar dicha espuma y dichas partículas sólidas conjuntamente bajo condiciones efectivas para formar una composición sustancialmente homogénea que comprende dicha fase gaseosa discontinua y dichas partículas dispersadas de manera sustancialmente homogénea en dicha fase líquida continua.

en la que la relación de dicho volumen de líquido, dicho volumen de gas y dicha cantidad de partículas sólidas es efectiva para proporcionar propiedades hemostáticas a dicha composición sustancialmente homogénea, formando, de esta manera, dicha composición hemostática fluida”.

Los documentos WO 2005/016256 y WO 2005/016257 formar la técnica anterior bajo el Artículo 54(3) EPC solo en DE, ES, FR, GB e IT y, de esta manera, se aplican diferentes reivindicaciones para esos estados/países. En particular, debido a que los ejemplos 1f y 1g del documento WO 2005/016256 y los ejemplos 9g, 9h y 9i del documento WO 2005/016257 son destructores de novedad, el tema principal de estos ejemplos ha sido eliminado de las reivindicaciones en DE, ES, FR, GB e IT, hasta el punto en que esos ejemplos habrían sido destructores de novedad.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

La presente invención está dirigida a una composición hemostática, tal como se expone en la reivindicación 1. Las composiciones son adecuadas para su uso en la preparación de dispositivos hemostáticos para la aplicación de una composición hemostática fluida a una zona que requiere hemostasia. La composición comprende una suspensión acuosa o pasta sustancialmente homogénea, que contiene un líquido biocompatible, partículas sólidas, porosas o no porosas de un polímero biocompatible adecuado para su uso en hemostasia y las cuales son sustancialmente insolubles en el líquido, hasta aproximadamente el 20 por ciento en peso de glicerol, en base al peso de líquido, y hasta aproximadamente el 1 por ciento en peso de cloruro de benzalconio, en base al peso del líquido. Las partículas sólidas, el glicerol y el cloruro de benzalconio están dispersados de manera sustancialmente homogénea en el líquido. La relación del líquido con respecto a las partículas sólidas es efectiva para proporcionar propiedades hemostáticas a la composición, tanto antes como después de la esterilización. Las composiciones de la presente invención pueden ser preparadas mucho tiempo antes del momento de uso y no necesitan ser preparadas en el punto de uso, aun así, mantienen las propiedades físicas efectivas para proporcionar fluidez, extrudabilidad o inyectabilidad en el punto y en el momento de uso. La presente invención incluye también procedimientos de realización de composiciones hemostáticas, dispositivos médicos que contienen las composiciones esterilizadas dispuestas en los mismos y procedimientos de realización de dichos dispositivos.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

Ambas composiciones esterilizadas y no esterilizadas de la presente invención contienen partículas sólidas, porosas o no porosas de un polímero biocompatible adecuado para su uso en hemostasia, un líquido biocompatible, glicerol y cloruro de benzalconio. Los componentes de las composiciones son combinados y mezclados bajo condiciones efectivas para proporcionar una composición hemostática sustancialmente homogénea. La cantidad y el diámetro medio de las partículas contenidas en la composición y las cantidades relativas del sólido y el líquido son efectivos para proporcionar propiedades hemostáticas y físicas a la composición, tal como se describe más adelante, en la presente memoria.

La composición hemostática formada de esta manera es una suspensión acuosa o una pasta hemostática, que exhibe propiedades mejoradas cuando se compara con pastas que no contienen cloruro de benzalconio y glicerol. Las composiciones de la presente invención pueden ser preparadas, rellenadas en un dispositivo médico, tal como una jeringa u otros aplicadores conocidos usados para dispensar composiciones hemostáticas convencionales, y ser esterilizadas mediante irradiación ionizante, mucho antes del momento de su uso deseado. Las composiciones pueden incluir adicionalmente aditivos para facilitar la preparación de la composición, mejorar las propiedades físicas y mecánicas, mejorar las propiedades hemostáticas de la composición y proporcionar propiedades antimicrobianas.

Tal como se usa en la presente memoria, “sustancialmente homogéneo” indica el estado físico de las composiciones o pastas en las que el sólido está dispersado uniformemente en el líquido de manera que la relación de sólido:líquido es sustancialmente la misma.

Tal como se usa en la presente memoria, “estéril” significa sustancialmente libre de gérmenes y/o microorganismos vivos y, tal como se reconoce y describe adicionalmente en los estándares gubernamentales en relación a composiciones y dispositivos médicos descritos y reivindicados en la presente memoria.

Tal como se usa en la presente memoria, “hemostático” o “propiedades hemostáticas”,

significa capacidad de detener o minimizar una hemorragia, tal como una persona con conocimientos en la materia de hemostasia entendería que significan estos términos, tal como se ejemplifica adicionalmente en los ejemplos de la solicitud y tal como se reconoce y describe adicionalmente en los estándares gubernamentales en relación a composiciones y dispositivos médicos descritos y reivindicados en la presente memoria.

Tal como se usa en la presente memoria, “Pico de Expresión de Fuerza” es el valor pico de la fuerza requerida para extruir las composiciones desde una jeringa de tipo luer Becton Dickinson (BD) de 10 cc, equipada con una punta de angiocatéter de calibre 14 , tal como se describe en los ejemplos de la solicitud.

Pueden usarse una variedad de polímeros naturales, semi-sintéticos o sintéticos biocompatibles para preparar las partículas sólidas usadas en las composiciones de la presente invención. El polímero seleccionado debe ser sustancialmente insoluble en el líquido seleccionado para la composición particular. Preferentemente, se usan polímeros biodegradables, insolubles en agua, que proporcionan actividad hemostática mecánica, química y/o biológica. Los polímeros que pueden ser usados incluyen, sin limitación, proteínas y polisacáridos. Los polisacáridos que pueden ser usados incluyen celulosa oxidada, chitosán, chitina, alginato, alginato oxidado y almidón oxidado. El polímero biocompatible usado para preparar las partículas es preferentemente, una proteína reticulada o desnaturalizada, tal como gelatina, colágeno, fibrinógeno o fibronectina. Un polvo de gelatina preferente es el polvo de gelatina hemostático Surgifoam®, disponible en Johnson & Johnson Wound Management, una división de Ethicon, Inc. El polvo Surgifoam® es un polvo de gelatina parcialmente reticulado preparado moliendo esponja de gelatina en partículas que tienen un diámetro medio de aproximadamente 40 µm a aproximadamente 1200 µm, más preferentemente de aproximadamente 100 µm a aproximadamente 1000 µm, tal como se determina mediante difracción láser.

La composición de la presente invención comprende una fase líquida continua en la que se dispersan las partículas sólidas, el glicerol y el cloruro de benzalconio. Dependiendo del dispositivo médico particular y del uso del mismo, el líquido puede ser acuoso o no acuoso. Preferentemente, el líquido es acuoso. Los líquidos acuosos pueden incluir, sin limitación, soluciones acuosas biocompatibles, tales como cloruro de calcio y salina. Más preferentemente, el líquido comprende salina. El líquido y las partículas sólidas están presentes en cantidades relativas efectivas para proporcionar una pasta o una solución acuosa adecuada para su uso en la provisión de hemostasia. Una dilución excesiva de la fase particulada sólida, aunque beneficiosa para reducir adicionalmente el valor pico de expresión de fuerza, afectará negativamente a las propiedades hemostáticas del material y, por lo tanto, no es deseable. La relación en peso de las partículas sólidas con respecto al líquido es, generalmente, de aproximadamente 1:2 a aproximadamente 1:12. Una relación en peso preferente de las partículas de gelatina sólida con respecto a la salina es de aproximadamente 1:3 a aproximadamente 1:6.

Las composiciones de la presente invención incluyen las composiciones descritas en la presente memoria que son estériles, en el sentido de que han sido irradiadas con irradiación ionizante. Dicha irradiación puede incluir haz de electrones o irradiación gamma. El nivel de irradiación y las condiciones de esterilización, incluyendo el tiempo durante el cual son irradiadas las composiciones, son aquellos que proporcionan composiciones estériles, tal como se define en la presente memoria. Una vez que se dispone del beneficio de esta divulgación, una persona con conocimientos en la materia sería capaz de determinar fácilmente el nivel de irradiación necesario para proporcionar composiciones estériles.

El glicerol es añadido a las composiciones de la invención para mejorar la extrudabilidad

o inyectabilidad de la composición. El glicerol está presente en las composiciones entre aproximadamente el 0% y aproximadamente el 20% en peso del líquido. Preferentemente, la composición comprende de aproximadamente el 1% a aproximadamente el 10% en peso de glicerol, en base al peso del líquido. Más preferentemente, las composiciones comprenden de aproximadamente el 1% a aproximadamente el 5% en peso de glicerol, en base al peso del líquido.

Además, aminas cuaternarias, tales como cloruro de benzalconio, Polybrene u Onamer M, son usadas para proporcionar propiedades mejoradas a las composiciones. Preferentemente, el cloruro de benzalconio es usado a niveles de hasta aproximadamente el 1 por ciento en peso de las composiciones, en base al peso del líquido. Más preferentemente, el cloruro de benzalconio es usado a niveles de aproximadamente el 0,001% a aproximadamente el 0,01% en peso de las composiciones, en base al peso del líquido. Incluso más preferentemente, las composiciones comprenden de aproximadamente el 0,002 a aproximadamente el 0,006% en peso de cloruro de benzalconio, en base al peso del líquido. Se cree que el cloruro de benzalconio realiza múltiples funciones en las composiciones, actuando como un agente antimicrobiano, un agente espumante, un captador de radicales y como un neutralizador de heparina.

Dichas composiciones hemostáticas pueden comprender además neutralizadores de heparina, agentes hemostáticos o procoagulantes, tales como trombina, fibrinógeno, fibrina, Factor Xa o Factor VIIa. Con “cantidad efectiva”, se hace referencia a aquella cantidad necesaria para proporcionar a las composiciones aquellas propiedades para las cuales se añade el aditivo. La cantidad efectiva está limitada también por la cantidad máxima que puede

añadirse sin causar efectos biológicos adversos.

Las composiciones de la presente invención son particularmente ventajosas para su uso en composiciones hemostáticas, donde se utilizan aditivos que son sensibles a irradiación. Por ejemplo, se ha encontrado que la trombina, en una solución acuosa, pierde toda la actividad procoagulante cuando es expuesta a irradiación para esterilización. Por el contrario, la trombina retuvo aproximadamente el 40% de su actividad enzimática original y toda su actividad hemostática después de la esterilización cuando fue formulada en composiciones según la presente invención, tal como se muestra en el Ejemplo 3. Aunque en la presente memoria se ejemplifica la trombina bovina, la trombina derivada de seres humanos puede ser usada también en las composiciones de la presente invención.

Los dispositivos médicos, en los que las composiciones hemostáticas de la presente invención pueden ser utilizadas, incluyen cualquier dispositivo usado en la actualidad para aplicar una pasta o una suspensión acuosa hemostática, fluida o inyectable, a una zona o una herida que requiere hemostasia. La zona que requiere hemostasia puede ser el resultado de una herida o un procedimiento quirúrgico. Los ejemplos de dispositivos o aplicadores incluyen jeringas, tales como jeringas Becton Dickinson de tipo luer o Monoject. Otros dispositivos se divulgan en detalle en la patente US No. 6.045.570, cuyo contenido se incorpora, por referencia, en su totalidad.

En una realización para la preparación de las composiciones de la invención, se prepara una pasta sustancialmente homogénea mezclando primero el cloruro de benzalconio y glicerol en salina, para formar una solución. La solución salina puede incluir cantidades efectivas de otros aditivos disueltos en la misma, tal como se ha descrito anteriormente. A continuación, se incorporan las partículas a la solución, mezclando hasta que estén dispersadas de manera sustancialmente homogénea en el líquido, proporcionando, de esta manera, la pasta o suspensión acuosa sustancialmente homogénea. El mezclado puede ser realizado mediante extrusión o mezclado en un espacio reducido, bajo condiciones efectivas para proporcionar una dispersión uniforme de las partículas sólidas y en la solución. Una relación preferente (p/v) de las partículas sólidas con respecto al líquido es de aproximadamente 1:12 a aproximadamente

1:2 (g/ml).

Como alternativa, puede utilizarse un mezclador planetario dual en la preparación de las composiciones de la presente invención. La solución salina es preparada tal como se ha indicado anteriormente y es añadida al mezclador. Las partículas sólidas, más comúnmente en forma de un polvo, son añadidas, a continuación, a la solución en el mezclador, con el tiempo, con un mezclado continuo hasta el momento en el que se forma una composición sustancialmente homogénea, que contiene las partículas sólidas dispersadas uniformemente en la solución. Si se desea, el polvo puede ser compactado o comprimido previamente a ser añadido a la solución, para mejorar la manipulación y para minimizar el polvo; a condición de que su porosidad o el diámetro de las partículas no se vean afectados.

Las composiciones hemostáticas, preparadas tal como se ha indicado anteriormente, son transferidas a un dispositivo médico, tal como se ha descrito anteriormente, y el dispositivo que contiene la composición hemostática es esterilizado, preferentemente mediante radiación ionizante. Más preferentemente, esterilización es mediante irradiación gamma, tal como se ejemplifica en la presente memoria.

Aunque los ejemplos siguientes muestran ciertas realizaciones de la invención, las mismas no deben ser interpretadas como limitativas del alcance de la invención, sino como una contribución a una descripción completa de la invención.

Ejemplos

Ejemplo 1:

Un total de diez muestras fueron preparadas tal como se indica a continuación. Se colocó 1 gramo de Surgifoam® seco en un contenedor de plástico y se mezcló con 4 ml de salina. El contenedor fue tapado y los contenidos fueron agitados hasta que se obtuvo una pasta sustancialmente homogénea, de consistencia uniforme. La pasta fue conformada en una forma cilíndrica y fue colocada en una jeringa de tipo luer, de polipropileno BD, de 10cc, desechable. A continuación, las jeringas fueron tapadas y cinco de las jeringas rellenadas fueron esterilizadas mediante irradiación gamma, a una dosis de 25 kGy. El Pico de Expresión de Fuerza fue determinado y se presenta en la Tabla 1. Las muestras no esterilizadas se designaron como 1a y las muestras esterilizadas se designaron como 1b.

Ejemplo 2:

Un total de diez muestras fueron preparadas tal como se indica a continuación. Se preparó una solución salina que contenía 0,005% en peso de cloruro de benzalconio y 5% en peso de glicerol. Esta solución fue usada para preparar pastas de polvo de gelatina homogéneas, tal como se ha descrito en el Ejemplo 1. La pasta fue conformada en una forma cilíndrica y fue colocada en una jeringa de tipo luer, de polipropileno BD, de 10 cc, desechable. A continuación, las jeringas fueron tapadas y cinco de las jeringas rellenadas fueron esterilizadas mediante irradiación, a una dosis de 25 kGy. El Pico de Expresión de Fuerza fue determinado y se presenta en la Tabla 1. Las muestras no esterilizadas se designaron como 2a y las muestras esterilizadas se designaron como 2b.

Determinación del Pico de Expresión de Fuerza:

5

Las muestras preparadas en los Ejemplos siguientes fueron ensayadas para el pico de expresión de fuerza, tal como se determina usando un dispositivo Chatillon TCD 200, usando una celda de carga de 22,68 kg (50 lb) [DFG 550] a una velocidad de 5,08 cm/min (2 pulgadas/min). Una vaina de catéter permanente (calibre 12-14) fue fijada a la jeringa de

10 muestra a ensayar. A continuación, la jeringa fue insertada en un aparato portador, que fue cargado, a continuación, en el instrumento de ensayo. Se anotó el pico de expresión de fuerza.

Tabla 1

Muestras: Pico de Expresión

de Fuerza (n=5)

kg (libras)

Muestras 1a: 9,89 (21,8)

Muestras 1b: 11,98 (26,4)

Muestras 2a: 7,80 (17,2)

Muestras 2b: 10,16 (22,4)

15 Tal como indican los datos en la Tabla 1, la inclusión de glicerol y cloruro de benzalconio, dispersados homogéneamente en la pasta, reduce considerablemente el pico de expresión de fuerza de la composición antes de la esterilización en comparación con las pastas que no incluyen el glicerol y el cloruro de benzalconio. Consecuentemente, la composición esterilizada de la presente invención exhibe un pico de expresión de fuerza considerablemente menor que

20 el de una pasta esterilizada que no incluye estos componentes. De hecho, el pico de expresión de fuerza de la composición esterilizada de la presente invención se aproxima al pico de expresión de fuerza de la pasta pre-esterilizada que no contiene glicerol ni cloruro de benzalconio.

25

Rendimiento hemostático de diferentes materiales en un modelo porcino de sacabocados para biopsia de bazo:

Se usó un modelo porcino de sacabocados para biopsia de bazo para la evaluación de

5 las propiedades hemostáticas de las muestras preparadas en los Ejemplos 1 y 2. Un sacabocados para biopsia de 6 mm fue usado para cortar un colgajo de tejido de 3 mm de profundidad. El colgajo de tejido fue extraído y 0,4 ml de los materiales de ensayo fueron aplicados a la zona de la herida. Se mantuvo compresión manual sobre la zona de la herida durante 2 minutos. A continuación, la zona de la herida fue observada durante 3 minutos para

10 señales de hemorragia. Si se observaba hemorragia adicional, se usaban aplicaciones adicionales de compresión manual durante 30 segundos cada vez, hasta que se consiguió una hemostasia completa. La Tabla 2 expone los resultados de la evaluación. Los resultados para las muestras no esterilizadas o esterilizadas se representan como valores medios para todas las muestras ensayadas.

15

TABLA 2

Rendimiento in vivo de hemostasia

Muestras: Número de compresiones Tiempo hasta hemostasia (mins:segundos)

Muestras 1a: 3 3:35 (n=2)

Muestras 2a: 3 3:33 (n=2)

Muestras 1b: 1 2:00 (n=3)

Muestras 2b: 2 3:00 (n=6)

Ejemplo 3: Los Ejemplos 3f y 3g son ejemplos de referencia para los países DE, ES, FR, GB e IT.

20 Dos frasquitos de trombina bovina liofilizada (20.000 unidades Thrombogen JJMI) fueron reconstituidos en 20 ml de salina, para proporcionar una solución de trabajo de 1000 u/ml. Se midió la actividad coagulante en un ensayo in vitro, tal como se describe en el Ejemplo 3. Un frasquito de este material fue almacenado a 4-8ºC y la actividad coagulante se midió en el día

25 1, día 8 y día 30, respectivamente. El segundo frasquito fue esterilizado mediante irradiación gamma (25 kGy) y la actividad coagulante se midió tal como se indica más adelante. Las muestras no esterilizadas y las esterilizadas fueron designadas como muestras 3a y 3b, respectivamente. Ambas muestras esterilizadas y no esterilizadas fueron almacenadas a 4-8ºC

5

10

15

20

25

30

35

11

entre las mediciones.

Otros dos frasquitos de 20.000 unidades de trombina bovina liofilizada fueron reconstituidos en salina que contenía 0,005% de cloruro de benzalconio y 5% de glicerol. Un frasquito fue almacenado a 4-8ºC y la actividad coagulante fue medida en el día 0, día 1, día 8 y día 30. El segundo vial fue esterilizado mediante irradiación gamma (25 kGy) y la actividad coagulante fue medida tal como se indica más adelante. Entre las mediciones, ambas muestras esterilizada y no esterilizada fueron almacenadas a 4-8ºC. Las muestras no esterilizadas y las esterilizadas fueron designadas como muestras 3c y 3d, respectivamente.

Pastas de gelatina, que contenían la trombina indicada anteriormente, fueron preparadas mezclado 1 gramo de polvo de gelatina Surgifoam con 5 ml de solución de trombina, tal como se ha descrito anteriormente. La muestra 3e fue preparada mezclado polvo Surgifoam con 5 ml de solución no esterilizada de la muestra 3a. La muestra 3f fue preparada mezclando polvo Surgifoam con 5 ml de muestra 3c, no esterilizada. La muestra 3g fue preparada mezclado polvo Surgifoam con 5 ml de muestra 3c. Las pastas resultantes fueron cargadas en jeringas de 10 cc. A continuación, las jeringas fueron esterilizadas mediante irradiación gamma (25 kGy) y la actividad coagulante fue medida tal como se indica más adelante.

Medición de actividad de la trombina mediante un ensayo de coagulación in vitro en un instrumento Fibrómetro (BBL)

Procedimiento: Diluciones en serie de la muestra de ensayo que contenía trombina fueron preparadas en tampón Veronal pH 7,2. Se calentaron 0,2 ml de plasma normal recogido (plasma de control Citrol Nivel 1 -Dade Diagnostics) a 37ºC en el bloque incubador del fibrómetro. Se añadieron 0,1 ml de dilución de muestra al plasma y, simultáneamente, se puso en marcha el temporizador. Se registró el tiempo hasta la formación del coágulo. Todas las muestras fueron ensayadas por duplicado y se calculó un tiempo medio de coagulación. Los datos fueron representados como el log10 dilución vs. log10 tiempo de coagulación y se realizó un análisis de regresión. Se consideró que la trombina recién preparada tenía un 100% de actividad y todas las otras muestras fueron calculadas como un porcentaje de la actividad en relación a la trombina recién preparada. Los resultados se representan en las Tablas 3 y 4.

TABLA 3

Efecto del tiempo de almacenamiento sobre la actividad de la trombina: Estabilización mediante la pasta de gelatina formulada

Solución de almacenamiento (almacenada a 6ºC): Porcentaje de pérdida en actividad de la trombina

Tiempo 0: Día 1 Día 8 Día 30

3a: 0 0 53,3 90,8

3c: 0 NA 41,1 82,9

3g: 0 0 0,8 0

TABLA 4

Efecto de la Irradiación gamma sobre la actividad de la trombina: Estabilización mediante la pasta de gelatina formulada

Media para la trombina esterilizada * Muestras (5 ml/g polvo de gelatina – dosis 25 kGy): % de pérdida de actividad de la trombina

Día 6

3b: 100

3d: 96,0

3e: 72,6

3h: 79,2

Claims

REIVINDICACIONES

1. Composición hemostática que comprende:

un líquido biocompatible, partículas de un polímero biocompatible adecuado para su uso en hemostasia y que es insoluble en dicho líquido, cloruro de benzalconio, en el que dicho cloruro de benzalconio está presente en hasta el 1 por ciento en peso de dicho líquido, y glicerol, en el que dicho glicerol está presente en hasta el 20 por ciento en peso de dicho líquido,

en la que dichas partículas, glicerol y cloruro de benzalconio están dispersados de manera sustancialmente homogénea en dicho líquido, y en la que la relación de dicho líquido con respecto a dichas partículas es efectiva para proporcionar propiedades hemostáticas a dicha composición; con la condición de que la composición no sea:

(a)

la composición obtenible mediante un procedimiento que consiste en reconstituir
20.000 unidades de trombina bovina liofilizada en 20 ml de salina que contiene 0,005% de cloruro de benzalconio y 5% de glicerol para proporcionar una muestra, y, a continuación, mezclar 5 ml de esa muestra con 1g de polvo Surgifoam®, y opcionalmente, cargar el producto en una jeringa de 10 cc y, a continuación, opcionalmente, esterilizarla a 25 kGy, o

(b)

la composición obtenible mediante un procedimiento que consiste en reconstituir
20.000 unidades de trombina bovina liofilizada en 20 ml de salina que contiene 0,005% de cloruro de benzalconio y 5% de glicerol para proporcionar una muestra, y, a continuación, mezclar 5 ml de esa muestra con 1 g de polvo Surgifoam®, y, opcionalmente, cargar el producto en una jeringa de 10 cc y, a continuación, como una etapa opcional: (i) esterilizarlo a 25 kGy, o (ii) espumarla con 3 ml de nitrógeno y, a continuación, esterilizarlo a 25 kGy.
2.

Dispositivo médico adecuado para aplicar una composición hemostática fluida a una zona que requiere hemostasia, teniendo dicho dispositivo dispuesta en el mismo una composición hemostática sustancialmente homogénea según la reivindicación 1; en el que, cuando el dispositivo médico no es una jeringa de 10 cc, no se aplica la condición

de la reivindicación 1.
3.

Composición según la reivindicación 1 o dispositivo según la reivindicación 2, en la/el que dicho líquido es acuoso.
4.

Composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3 o dispositivo según una cualquiera de las reivindicaciones 2-3, en la/el que dicho líquido comprende una solución salina.
5.

Composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3-4 o dispositivo según una cualquiera de las reivindicaciones 2-4, en la/el que dicho polímero biocompatible es una proteína seleccionada de entre el grupo que consiste en gelatina, colágeno, fibrinógeno y fibronectina.
6.

Composición o dispositivo según la reivindicación 5, en la/el que dicha proteína comprende gelatina.
7.

Composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3-6 o dispositivo según una cualquiera de las reivindicaciones 2-6, en la/el que el diámetro medio de dicha partícula es de 40 a 1200 µm.
8.

Composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3-7 o dispositivo según una cualquiera de las reivindicaciones 2-7, en la/el que dichas partículas y dicho líquido están presentes en dicha composición hemostática en una relación de 1:2 a 1:12, en base a g:ml.
9.

Composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3-8 o dispositivo según una cualquiera de las reivindicaciones 2-8, en la/el que dicha composición comprende además una cantidad funcionalmente efectiva de un aditivo seleccionado de entre el grupo que consiste en agentes antimicrobianos, agentes espumantes, estabilizadores de espuma, tensoactivos, antioxidantes, humectantes, espesantes, lubricantes, diluyentes, agentes humectantes, estabilizadores de irradiación, plastificantes, neutralizadores de heparina, procoagulantes y agentes hemostáticos.
10.

Composición o dispositivo según la reivindicación 9, en la/el que dicho aditivo funcional es fibrinógeno.
11.

Composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3-10 o dispositivo según una cualquiera de las reivindicaciones 2-10, en la/el que dicha composición comprende del 1 al 10 por ciento en peso de glicerol, en base al peso de líquido.
12.

Composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3-10 o dispositivo según una cualquiera de las reivindicaciones 2-10, en la/el que dicha composición comprende del 0,001 al 0,01 por ciento en peso de cloruro de benzalconio, en base al peso de líquido.
13.

Composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 3-12 en la que dicha composición es estéril.
14.

Dispositivo según una cualquiera de las reivindicaciones 2-12, en el que dicha composición y dicho dispositivo son estériles.
15.

Procedimiento para la realización de una composición hemostática sustancialmente homogénea adecuada para su uso en la preparación de dispositivos hemostáticos para aplicar una composición hemostática fluida a una zona que requiere hemostasia, comprendiendo dicho procedimiento:

preparar una solución que comprende un líquido biocompatible que contiene glicerol hasta el 20 por ciento en peso y cloruro de benzalconio hasta el 1 por ciento, en base al peso de dicho líquido, combinar dicha solución con partículas de un polímero biocompatible adecuado para su uso en hemostasia y que es sustancialmente insoluble en dicha solución; y mezclar dicha solución y dichas partículas bajo condiciones efectivas para dispersar de manera sustancialmente homogénea dichas partículas en dicha solución, formando, de esta manera, dicha composición hemostática sustancialmente homogénea, en el que la relación de dicho líquido con respecto a dichas partículas es efectiva para proporcionar propiedades hemostáticas a dicha composición, con la condición de que el procedimiento no sea:

(a)

el procedimiento que consiste en reconstituir 20.000 unidades de trombina bovina liofilizada en 20 ml de salina que contiene 0,005% de cloruro de benzalconio y 5% de glicerol, para proporcionar una muestra, y, a continuación, mezclar 5 ml de esa muestra con 1g de polvo Surgifoam®, y opcionalmente, cargar el producto en una jeringa de 10 cc y a continuación, opcionalmente, esterilizarla a 25 kGy, o

(b)

el procedimiento que consiste en reconstituir 20.000 unidades de trombina bovina liofilizada en 20 ml de salina que contiene 0,005% de cloruro de benzalconio y 5% de glicerol para proporcionar una muestra, y, a continuación, mezclar 5 ml de esa muestra con 1 g de polvo Surgifoam®, y, opcionalmente, cargar el producto en una jeringa de 10 cc y, a continuación, como una etapa opcional: (i) esterilizarla a 25 kGy, o (ii) espumarla con 3 ml de nitrógeno y, a

continuación, esterilizarla a 25 kGy.
16.

Procedimiento según la reivindicación 15, que comprende además irradiar dicha composición sustancialmente homogénea con una cantidad de irradiación ionizante y durante un tiempo efectivo para proporcionar una composición estéril, sustancialmente homogénea.
17.

Procedimiento para la fabricación de un dispositivo médico adecuado para aplicar una composición hemostática fluida a una zona que requiere hemostasia, comprendiendo el procedimiento:

proporcionar una composición hemostática sustancialmente homogénea según la reivindicación 1, en la que la condición de la reivindicación 1 no se aplica; y dispensar dicha composición hemostática sustancialmente homogénea en dicho dispositivo médico; con la condición de que el procedimiento no sea:

(a)

el procedimiento que consiste en reconstituir 20.000 unidades de trombina bovina liofilizada en 20 ml de salina que contiene 0,005% de cloruro de benzalconio y 5% de glicerol para proporcionar una muestra, y, a continuación, mezclar 5 ml de esa muestra con 1g de polvo Surgifoam® y, a continuación, cargar el producto en una jeringa de 10 cc y, a continuación, opcionalmente, esterilizarla a 25 kGy, o

(b)

el procedimiento que consiste en reconstituir 20.000 unidades de trombina bovina liofilizada en 20 ml de salina que contiene 0,005% de cloruro de benzalconio y 5% de glicerol para proporcionar una muestra, y, a continuación, mezclar 5 ml de esa muestra con 1 g de polvo Surgifoam® y, a continuación, cargar el producto en una jeringa de 10 cc y, a continuación, como una etapa opcional: (i) esterilizarla a 25 kGy, o (ii) espumarla con 3 ml de nitrógeno y, a continuación, esterilizarla a 25 kGy.
18.

Procedimiento según la reivindicación 17, que comprende además irradiar dicho dispositivo, que tiene dicha composición sustancialmente homogénea dispensada en su interior, con una cantidad de irradiación ionizante y durante un tiempo efectivo para proporcionar un dispositivo estéril que tiene una composición hemostática estéril, sustancialmente homogénea, dispensada en su interior.
19.

Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 15-18, en el que dicho líquido comprende salina.
20.

Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 15-19, en el que dicho polímero biocompatible es una proteína seleccionada de entre el grupo que consiste en gelatina, colágeno, fibrinógeno y fibronectina.
21.

Procedimiento según la reivindicación 20, en el que dicha proteína comprende gelatina.

5 22. Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 15-21, en el que el diámetro medio de dichas partículas es de 40 a 1200 µm.
23. Procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 15-22, en el que la composición comprende además una cantidad funcionalmente efectiva de un aditivo seleccionado de entre el grupo que consiste en agentes antimicrobianos, agentes

10 espumantes, estabilizadores de espuma, tensoactivos, antioxidantes, humectantes, lubricantes, espesantes, diluyentes, agentes humectantes, estabilizadores de irradiación, neutralizadores de heparina, procoagulantes y agentes hemostáticos.
24. Procedimiento según la reivindicación 23, en el que dicho aditivo es fibrinógeno.