ES2539504T3 - Composición de subtilisina estabilizada - Google Patents

Composición de subtilisina estabilizada Download PDF

Info

Publication number
ES2539504T3
ES2539504T3 ES12733657.6T ES12733657T ES2539504T3 ES 2539504 T3 ES2539504 T3 ES 2539504T3 ES 12733657 T ES12733657 T ES 12733657T ES 2539504 T3 ES2539504 T3 ES 2539504T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
so3m
nhch
ch2ch
cbz
amino acid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES12733657.6T
Other languages
English (en)
Inventor
Lise Munch Mikkelsen
Francesco Ponzini
Roberto BISACCIA
Renato Canevotti
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Novozymes AS
Original Assignee
Novozymes AS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=46506345&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=ES2539504(T3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Novozymes AS filed Critical Novozymes AS
Application granted granted Critical
Publication of ES2539504T3 publication Critical patent/ES2539504T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C07K5/06043—Leu-amino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C07K5/06052—Val-amino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06086—Dipeptides with the first amino acid being basic
    • C07K5/06095—Arg-amino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38663—Stabilised liquid enzyme compositions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38618—Protease or amylase in liquid compositions only
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Abstract

Composición que comprende una subtilisina y un aducto de hidrosulfito de péptido aldehído con la fórmula X-B1-NHCHR- CHOH-SO3M, donde: A) M es H (hidrógeno) o un metal alcalino; B) R es un grupo de manera que NH-CHR-CO es un residuo de L o D-aminoácido; C) B1 es un residuo de aminoácido; y D) X consiste en uno o más residuos de aminoácidos, que comprenden opcionalmente un grupo de protección N-terminal.

Description

15
25
35
45
55
65
E12733657
12-06-2015
DESCRIPCIÓN
Composición de subtilisina estabilizada
Referencia a un listado de secuencias
[0001] Esta solicitud contiene un listado de secuencias en forma legible por ordenador.
Campo técnico
[0002] La presente invención se refiere a una composición que comprende una subtilisina que es estabilizada por un derivado de péptido-aldehído. También se refiere a un método para preparar la composición y a un compuesto para su uso en la composición.
Antecedentes de la invención
[0003] La WO 98/13458, WO 94/04651, WO 98/13460, WO 95/25791 y WO 2009/118375 divulgan detergentes líquidos con una proteasa tipo subtilisina estabilizada por un péptido-aldehído. La WO 2011/036153 divulga que la adición de un péptido-aldehído a un detergente que contiene subtilisina granuloso puede mejorar la detergencia.
[0004] Se conoce bien que los aldehídos pueden formar aductos solubles con NaHSO3 (aductos de bisulfito o hidrosulfito) y que los péptido-aldehídos tienden a ser moderadamente solubles en agua.
[0005] La WO 98/47523 y la US 6.500.802 revelan ácidos peptidil-2-amino-1-hidroxialcanosulfónicos y su uso como inhibidores de proteasa. La US 5.436.229 divulga aductos de bisulfito de derivados de L-arginina aldehído y su uso como inhibidores de trombina. La US 4.691.007 divulga aductos de bisulfito de tetrapéptido aldehídos útiles como inhibidores de leucocito elastasa humana.
[0006] La US 4.703.036, la US 4.478.745 y la US 5.578.574 divulgan métodos para preparar péptido aldehídos en forma seca.
Resumen de la invención
[0007] En la producción a gran escala de composiciones de subtilisina estabilizada es muy preferible manejar materias primas líquidas, tanto por seguridad como por consideraciones de proceso. Los péptido aldehídos tienden a ser moderadamente solubles en agua, lo que hace la preparación de soluciones acuosas concentradas difícil o imposible y es necesario el uso de producto bien secos o soluciones acuosas altamente diluidas cuando se hacen soluciones de subtilisina estabilizada para el uso en formulaciones líquidas o para granulación para hacer composiciones granulosas.
[0008] La conversión del péptido aldehído en un aducto de hidrosulfito puede utilizarse para aumentar la solubilidad acuosa en la purificación de los péptido aldehídos. Ventajosamente, hemos descubierto que este aducto de hidrosulfito es en sí eficaz como inhibidor y estabilizador de subtilisina y que puede también estabilizar una segunda enzima (no subtilisina) si está presente. Hemos descubierto que el aducto de hidrosulfito es eficaz como inhibidor de subtilisina, y hemos descubierto que mantiene su efecto inhibitorio y estabilizante en un detergente líquido durante el almacenamiento. Así, el uso del aducto de hidrosulfito puede evitar el coste y el tiempo de convertirlo de nuevo en el péptido aldehído y el secado posterior del péptido aldehído se puede ahorrar, y se puede evitar el inconveniente de manipulación del péptido aldehído en polvo o como solución acuosa altamente diluida. Además, la adición de un aducto de bisulfito de péptido aldehído también puede mejorar la detergencia (rendimiento de lavado) de un detergente que contiene subtilisina.
[0009] Por consiguiente, la invención proporciona una composición que comprende una subtilisina y un aducto de hidrosulfito de péptido aldehído, que tiene la fórmula X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3M. Los grupos de la fórmula tienen el siguiente significado:
a) M es H (hidrógeno) o un metal alcalino, preferiblemente Na o K;
b) R es un grupo de manera que NH-CHR-CO es un residuo de L o D-aminoácido (en el siguiente denominado B0);
c) B1 es un residuo de aminoácido; y
d) X consiste en uno o varios residuos de aminoácidos (preferiblemente uno o dos), opcionalmente incluyen un grupo de protección N-terminal.
[0010] La invención proporciona además un método para preparar la composición, este método comprende la mezcla de una subtilisina, una solución acuosa que comprende un aducto de hidrosulfito de péptido aldehído con la fórmula X-B1NH-CHR-CHOH-SO3M (donde M, R, B1 y X se definen como por encima), y opcionalmente un surfactante.
15
25
35
45
55
65
E12733657
12-06-2015
[0011] Adicionalmente, la invención proporciona un compuesto para su uso en la composición, este compuesto es un aducto de hidrosulfito de péptido aldehído con la fórmula X-B1-NH-CHR-CHOH SO3M. R puede ser p-hidroxi-bencilo y M, B1 y X se definen como por encima.
Descripción detallada de la invención
Composición de subtilisina estabilizada
[0012] La composición de la invención comprende una subtilisina y un aducto de hidrosulfito de péptido aldehído, y éste puede opcionalmente comprender una segunda enzima. La composición puede ser en forma líquida o granulosa. Puede ser una composición de detergente que comprenda además un surfactante.
[0013] En una composición tal como un líquido o detergente granuloso, la cantidad de cada enzima (subtilisina y segunda enzima opcional) será típicamente de 0,04-80 micro-M (o micromol/kg), en particular 0,2-30 micro-M, especialmente 0,4-20 micro-M (generalmente 1-2000 mg/l o mg/kg, en particular 5-750 mg/l, especialmente 10-500 mg/l) calculado como proteína enzimática pura. En una composición tal como un concentrado enzimático la cantidad de cada enzima será típicamente 0,01-20 mM, en particular 0,04-10 mM, especialmente 0,1-5 mM (generalmente 0,3-500 g/l, en particular 1-300 g/l, especialmente 3-150 g/l) calculado como proteína enzimática pura.
[0014] La proporción molar de estabilizador o inhibidor de enzima según la invención en subtilisina es al menos 1:1 o 1,5:1, y es menor que 1000:1, más preferido menor que 500:1, más preferido incluso de 100:1 a 2:1 o de 20:1 a 2:1, o más preferido, la proporción molar es de 10:1 a 3:1.
Péptido aldehído
[0015] El aducto bisulfito usado en el método se puede derivar de un péptido aldehído con la fórmula X-B1-B0-H donde los grupos se definen como arriba con B0 siendo un residuo de aminoácido único con configuración L o D con la fórmula: NH-CHR-CO.
[0016] NH-CHR-CO (B0) es un residuo de L o D-aminoácido, donde R puede ser una cadena lateral alifática o aromática, por ejemplo, aralquilo tal como bencilo, donde R se puede sustituir opcionalmente. Más particularmente, el residuo B0 puede ser voluminoso, neutro, polar, hidrofóbico y/o aromático, opcionalmente sustituido. Ejemplos son la L o D-forma de Tyr (p-tirosina), m-tirosina, 3,4-dihidroxifenilalanina, Phe, Val, Met, norvalina (Nva), Leu, Ile o norleucina (Nle); particularmente Tyr, m-tirosina, 3,4-dihidroxifenilalanina, Phe, Val, Met, Nva o Nle.
[0017] En la fórmula anterior, X-B1-B0-H, el residuo B1 puede ser particularmente pequeño, alifático hidrofóbico y/o neutro. Ejemplos son alanina (Ala), cisteína (Cys), glicina (Gly), prolina (Pro), serina (Ser), treonina (Thr), valina (Val), norvalina (Nva) y norleucina (Nle); particularmente Ala, Cys, Gly, Ser, Thr, Val, Nva y Nle.
[0018] X puede en particular ser uno o dos residuos de aminoácidos con un grupo de protección N-terminal opcional (es decir, el compuesto es un tri-o tetrapéptido aldehído con o sin un grupo de protección). Así, X puede ser B2, B3-B2, Z-B2, Z-B3-B2donde B3y B2cada uno representa un residuo de aminoácido, y Z es un grupo de protección N-terminal.
[0019] El residuo B2 puede en particular ser pequeño, alifático y/o neutro, por ejemplo, Ala, Gly, Thr, Arg, Leu, Phe o Val; particularmente Gly, Thr o Val.
[0020] El residuo B3 puede en particular ser voluminoso, hidrofóbico, neutro y/o aromático, opcionalmente sustituido, por ejemplo, Phe, Tyr, Trp, fenilglicina, Leu, Val, Nva, Nle o Ile.
[0021] El grupo Z de protección N-terminal (si está presente) se puede seleccionar de formilo, acetilo (Ac), benzoilo, trifluoroacetilo, fluorometoxi carbonilo, metoxisuccinilo, grupos protectores de uretano aromáticos y alifáticos, benciloxicarbonilo Cbz), t-butiloxicarbonilo, adamantiloxicarbonilo, p-metoxibencil carbonilo (MOZ), bencilo (Bn), pmetoxibencilo (PMB) o p-metoxifenilo (PMP), metoxicarbonilo (Moc); metoxiacetilo (Mac); metil carbamato o un grupo de urea de metilamino carbonil/metil. En el caso de un tetrapéptido aldehído con un grupo de protección (es decir X = Z-B3-B2), Z es preferiblemente un grupo alifático pequeño, por ejemplo, formilo, acetilo, fluorometoxi carbonilo, tbutiloxicarbonilo, metoxicarbonilo (Moc), metoxiacetilo (Mac), metil carbamato o un grupo de urea de metilamino carbonil/metil. En el caso de un tripéptido aldehído con un grupo de protección (es decir X = Z-B2), Z es preferiblemente un grupo aromático voluminoso tal como, benzoilo, benciloxicarbonilo, p-metoxibencilo carbonilo (MOZ), bencilo (Bn), pmetoxibencilo (PMB) o p-metoxifenilo (PMP).
[0022] Péptido aldehídos adecuados se describen en WO 94/04651, WO 95/25791, WO 98/13458, WO 98/13459, WO 98/13460, WO 98/13461, WO 98/13461, WO 98/13462, WO 2007/141736, WO 2007/145963, WO 2009/118375, WO 2010/055052 y WO 2011/036153. Más particularmente, el péptido aldehído puede ser Z-RAY-H, Ac-GAY-H, Z-GAY-H, Z-GAL-H, Z-VAL-H, Z-GAF-H, Z-GAV-H, Z-GGY-H, Z-GGF-H, Z-RVY-H, Z-LVY-H, Ac-LGAY-H, Ac-FGAY-H, Ac-YGAY-H, Ac-FGAL-H, Ac-FGAF-H, Ac-FGVY-H, Ac-FGAM-H, Ac-WLVY-H, MeO-CO-VAL-H, MeNCO-VAL-H, MeO-CO-FGAL
15
25
35
45
55
65
E12733657
12-06-2015
H, MeO-CO-FGAF-H, MeSO2-FGAL-H, MeSO2-VAL-H, PhCH2O(OH)(O)P-VAL-H, EtSO2-FGAL-H, PhCH2SO2-VAL-H, PhCH2O(OH)(O)P-LAL-H, PhCH2O(OH)(O)P-FAL-H o MeO(OH)(O)P-LGAL-H. Aquí, Z es benciloxicarbonilo, Me es metilo, Et es etilo, Ac es acetilo, H es hidrógeno y las demás letras representan residuos de aminoácidos denominados por notificación de letra única estándar (por ejemplo, F = Phe, Y = Tyr, L = Leu). Alternativamente, el péptido aldehído puede tener la fórmula como se describe en la WO 2010/055052:
P-O-(Ai -X')n-An+1-Q
donde Q es hidrógeno, CH3, CX3, CHX2 o CH2X, donde X es un átomo de halógeno; donde un X' es el "grupo N-cubierto doble" CO, CO-CO, CS, CS-CS o CS-CO, más preferido urido (CO), y el otro X' es nada, donde n = 1-10, preferiblemente 2-5, de la forma más preferible 2, donde cada uno de Ai y An+1 es un residuo de aminoácido que tiene la estructura:
NH-CR-CO para un residuo a la derecha de X= -CO-, o
-CO-CR-NH-para un residuo a la izquierda de X= -CO
donde R es H-o un alquilo opcionalmente sustituido o grupo de alquilaril que puede incluir opcionalmente un heteroátomo y puede estar opcionalmente enlazado al N átomo, y donde P es hidrógeno o cualquier grupo de protección C-terminal. Ejemplos de tales péptido aldehídos incluyen α-MAPI, β-MAPI, F-urea-RVY-H, F-urea-GGY-H, F-urea-GAF-H, F-urea-GAY-H, F-urea-GAL-H, F-urea-GA-Nva-H, F-urea-GA-Nle-H, Y-urea-RVY-H, Y-urea-GAY-H, F-CS-RVF-H, F-CS-RVY-H, F-CS-GAY-H, antipaína, GE20372A, GE20372B, quimostatina A, quimostatina B y quimostatina C.
[0023] Otros ejemplos de péptido aldehídos se describe en WO 2010/055052 y WO 2009/118375, WO 94/04651, WO 98/13459, WO 98/13461, WO 98/13462, WO 2007/145963, (P&G).
Aducto de hidrosulfito de péptido aldehído
[0024] El aducto de hidrosulfito de péptido aldehído se puede derivar de los péptido aldehídos anteriormente descritos.
[0025] Ejemplos Particulares son Cbz-RA-NHCH(CH2C6H40H)C(OH)(SO3M)-H, Ac-GA-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-GA-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-GA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, Cbz-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, Cbz-GA-NHCH(CH2Ph)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-GA-NHCH(CH(CH3)2)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-GG-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-GG-NHCH(CH2Ph)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-RV-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-LV-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Ac-LGA-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Ac-FGA-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Ac-YGA-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Ac-FGA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, Ac-FGA-NHCH(CH2Ph)C(OH)(SO3M)-H, Ac-FGV-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Ac-FGA-NHCH(CH2CH2SCH3)(SO3M)-H, Ac-WLV-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, MeO-CO-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, MeNCO-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, MeO-CO-FGA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, MeO-CO-FGA-NHCH(CH2Ph)-C(OH)(SO3M)-H, MeSO2-FGA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, MeSO2-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, PhCH2O(OH)(O)P-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))-C(OH)(SO3M)-H, EtSO2-FGA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, PhCH2SO2-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, PhCH2O(OH)(O)P-LA-NHCH(CH2CH(CH3)2))-C(OH)(SO3M)-H, PhCH2O(OH)(O)P-FA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, MeO(OH)(O)PLGA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H y F-urea-RV-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H donde M=carga negativa, H, Na o K u otro contraión.
Subtilisina
[0026] Las subtilisinas son un subgrupo de serina proteasas. Una serina proteasa es una enzima que cataliza la hidrólisis de los enlaces peptídicos, y en la que hay un residuo de serina esencial en el sitio activo (White, Handler y Smith, 1973 "Principles of Biochemistry," Fifth Edition, McGraw-Hill Book Company, NY, pp. 271-272). Las subtilisinas incluyen, preferiblemente consisten en, los subgrupos I-S1 e I-S2 tal y como son definidos por Siezen et al., Protein Engng. 4 (1991) 719-737; y Siezen et al., Protein Science 6 (1997) 501-523. Debido a la estructura altamente conservada del sitio activo de las serina proteasas, la subtilisina según la invención puede ser funcionalmente equivalente al subgrupo propuesto designado subtilasa por Siezen et al. (supra).
[0027] La subtilisina puede ser de origen animal, vegetal o microbiano, incluyendo mutantes química o genéticamente modificados (variantes diseñadas de proteína). Ejemplos de subtilisinas son las derivadas de Bacillus, por ejemplo, subtilisina Novo, subtilisina Carlsberg, subtilisina BPN', subtilisina 309, subtilisina 147 y subtilisina 168 (descrita en la WO 89/06279) y proteasa PD138 (WO 93/18140). Se describen ejemplos en WO 98/020115, WO 01/44452, WO 01/58275, WO 01/58276, WO 03/006602 y WO 04/099401. Otros ejemplos son las variantes descritas en WO 92/19729, WO 98/20115, WO 98/20116, WO 98/34946, WO 2011/036263 y mezclas de proteasas.
E12733657
12-06-2015
[0028] Ejemplos de subtilisinas disponibles comercialmente incluyen Kannase™, Everlase™, Relase™, Esperase™, Alcalase™, Durazym™, Savinase™, Ovozyme™, Liquanase™, Coronase™, Polarzyme™, Pyrase™, tripsina pancreática NOVO (PTN), Bio-Feed™ Pro y Clear-Lens™ Pro; Blaze (todos disponibles de Novozymes A/S,
5 Bagsvaerd, Dinamarca). Otras subtilisinas disponibles comercialmente incluyen Ronozyme™ Pro, Maxatase™, Maxacal™, Maxapem™, Opticlean™, Properase™, Purafast™, Purafect™, Purafect Ox™, Purafact Prime™, Excellase™, FN2™, FN3™ y FN4™ (disponible de Genencor International Inc., Gist-Brocades, BASF o DSM). Otros ejemplos son Primase™ y Duralase™. Blap R, Blap S y Blap X disponibles de Henkel.
10 Segunda enzima
[0029] Además de la subtilisina, la composición de detergente puede comprender opcionalmente una segunda enzima tal como una lipasa, una cutinasa, una amilasa, una carbohidrasa, una celulasa, una pectinasa, una pectato liasa, una mananasa, una arabinasa, una galactanasa, una xilanasa, una oxidasa, una lacasa y/o peroxidasa. La composición
15 puede contener una, dos o más enzimas que no sean subtilisina.
Lipasa y cutinasa
[0030] Lipasas y cutinasas adecuadas incluyen aquellas de origen bacteriano o fúngico. Mutantes químicamente
20 modificados o creados genéticamente de proteína están incluidos. Los ejemplos incluyen lipasa de Thermomyces, por ejemplo, de T. lanuginosus (anteriormente conocido como Humicola lanuginosa) como se describe en la EP 258 068 y EP 305 216, cutinasa de Humicola, por ejemplo H. insolens como se describe en la WO 96/13580, una lipasa de Pseudomonas, por ejemplo, de P. alcaligenes o P. pseudoalcaligenes (EP 218 272), P. cepacia (EP 331 376), P. stutzeri (GB 1,372,034), P. fluorescens, Pseudomonas sp. cepa SD 705 (WO 95/06720 y WO 96/27002), P. wisconsinensis (WO
25 96/12012), una lipasa de Bacillus, por ejemplo, de B. subtilis (Dartois et al., 1993, Biochemica et Biophysica Acta, 1131: 253-360), B. stearothermophilus (JP 64/744992) o B. pumilus (WO 91/16422).
[0031] Otros ejemplos son variantes de lipasa tales como los descritos en WO 92/05249, WO 94/01541, EP 407 225, EP 260 105, WO 95/35381, WO 96/00292, WO 95/30744, WO 94/25578, WO 95/14783, WO 95/22615, WO 97/04079, WO
30 97/07202, WO 00/060063, WO 2007/087508 y WO 2009/109500.
[0032] Enzimas de lipasa disponibles comercialmente preferidas incluyen Lipolase™, Lipolase Ultra™ y Lipex™, Lecitase™, Lipolex™, Lipoclean™, Lipoprime™ (Novozymes A/S). Otras lipasas disponibles comercialmente incluyen Lumafast (Genencor Int Inc); Lipomax (Gist-Brocades/Genencor Int Inc) y lipasa de la especie Bacillus de Solvay.
35 Amilasa
[0033] Amilasas adecuadas (α y/o β ) incluyen aquellas de origen bacteriano o fúngico. Mutantes químicamente modificados o creados genéticamente de proteína están incluidos. Las amilasas incluyen, por ejemplo, α-amilasas 40 obtenidas de Bacillus, por ejemplo, una cepa especial de Bacillus licheniformis, descrita con más detalle en la GB
1.296.839.
[0034] Ejemplos de amilasas útiles son las variantes descritas en WO 94/02597, WO 94/18314, WO 96/23873 y WO 97/43424, especialmente las variantes con sustituciones en una o más de las siguientes posiciones: 15, 23, 105, 106,
45 124, 128, 133, 154, 156, 181, 188, 190, 197, 202, 208, 209, 243, 264, 304, 305, 391, 408 y 444.
[0035] Amilasas disponibles comercialmente son Stainzyme, Stainzyme Plus, Duramyl™, Termamyl™, Termamyl Ultra, Natalase, Fungamyl™ y BAN™ (Novozymes A/S), Rapidase™ y Purastar™ (de Genencor International Inc.).
50 Liasas
[0036] La pectato liasa puede ser una enzima de tipo salvaje derivada de Bacillus, particularmente B. licherniformis o B. agaradhaerens, o una variante derivada de cualquiera de estos, por ejemplo, como se describe en US 6.124.127, WO 1999/027083, WO 1999/027084, WO 2002/006442, WO 2002/092741, WO 2003/095638, una pectato liasa disponible
55 comercialmente es XPect, Pectawash y Pectaway (Novozymes A/S).
Mananasa
[0037] La mananasa puede ser una mananasa alcalina de la familia 5 o 26. Puede ser un tipo salvaje de Bacillus o
60 Humicola, particularmente B. agaradhaerens, B. licheniformis, B. halodurans, B. clausii o H. insolens. Mananasas adecuadas se describen en la WO 1999/064619. Una mananasa disponible comercialmente es Mannaway (Novozymes A/S).
Celulasa 65
15
25
35
45
55
65
E12733657
12-06-2015
[0038] Celulasas adecuadas incluyen aquellas de origen bacteriano o fúngico. Mutantes químicamente modificados o creados genéticamente de proteína están incluidos. Celulasas adecuadas incluyen celulasas de los géneros Bacillus, Pseudomonas, Humicola, Fusarium, Thielavia, Acremonium, por ejemplo, las celulasas fúngicas producidas a partir de Humicola insolens, Myceliophthora thermophila y Fusarium oxysporum descritas en la US 4.435.307, US 5.648.263, US 5.691.178, US 5.776.757 y WO 89/09259.
[0039] Celulasas especialmente adecuadas son las celulasas alcalinas o neutras que tienen beneficios de cuidado del color. Ejemplos de tales celulasas son las celulasas descritas en la EP 0 495 257, EP 0 531 372, WO 96/11262, WO 96/29397, WO 98/08940. Otros ejemplos son variantes de celulasa tales como las descritas en WO 94/07998, EP 0 531 315, US 5,457,046, US 5,686,593, US 5,763,254, WO 95/24471, WO 98/12307 y WO 99/01544.
[0040] Celulasas disponibles comercialmente son Celluzyme, Celluclean, Endloase, Carezyme, Renozyme, Whitezyme (Novozymes A/S).
Preparación de péptido aldehído y aducto de hidrosulfito/bisulfito
[0041] El péptido aldehído se puede convertir en un aducto de hidrosulfito hidrosoluble por reacción con bisulfito sódico, como se describe en los libros, por ejemplo March, J. Advanced Organic Chemistry, fourth edition, Wiley-Interscience, US 1992, p 895.
[0042] La conversión en un aducto de hidrosulfito es reversible (Ex J. Am. Chem. Soc. 1978, 100, 1228). Así, el aducto se puede revertir parcial o completamente para liberar el péptido aldehído en un detergente líquido, en una formulación de subtilisina líquida o en el agua de lavado.
[0043] El péptido aldehído en cuestión se puede preparar por métodos conocidos, por ejemplo, como se describe en la US 4.703.036, US 4.478.745 o US 5.578.574 omitiendo un paso final de secado, o se puede preparar por cualquiera de los métodos revistos en J. Pept. Sci. 2007, 13,1-15 o ejemplificados en Synthesis 1983, 676. El péptido aldehído puede ser crudo o purificado, aislado como un sólido o mantenido en solución por un solvente orgánico.
[0044] Una solución acuosa del aducto de bisulfito se puede preparar al reaccionar el péptido aldehído correspondiente con una solución acuosa de bisulfito sódico (sulfito de hidrógeno de sodio, NaHSO3); potasio bisulfito (KHSO3) por métodos conocidos, por ejemplo, como se describe en WO 98/47523; US 6.500.802; US 5.436.229; J. Am. Chem. Soc. 1978, 100, 1228; Org. Synth., Coll. Vol. 7: 361.
Composición de detergente
[0045] El detergente podría ser detergente granuloso o líquido. El detergente líquido es en forma física, que no es sólida (o gas); puede ser un líquido vertible, un gel vertible o un gel no vertible. Puede ser bien isotrópico o estructurado, preferiblemente isotrópico. Incluye formulaciones útiles para el lavado en lavadoras automáticas o para el lavado a mano. El detergente contiene al menos un surfactante. El detergente también puede incluir un constructor.
[0046] La composición de detergente granulosa puede ser un granulado o polvo, o un polvo/granulado prensado en una tableta, briqueta. La composición puede ser en forma de tableta, barra o bolsa, incluyendo bolsas multicompartimiento. La composición puede ser en forma de polvo, por ejemplo un polvo de flujo libre, tal como un aglomerado, polvo secado por atomización, encapsulado, extruido, aguja, tallarín, copo o cualquier combinación de los mismos.
[0047] Ingredientes detergentes se pueden separar físicamente entre sí por compartimentos en bolsas disolubles en agua o en diferentes estratos de tabletas (véase dosis unitaria por debajo). Por lo tanto, se puede evitar la interacción de almacenamiento negativa entre componentes. Diferentes perfiles de disolución de cada uno de los compartimentos también pueden dar lugar a disolución retardada de componentes seleccionados en la solución de lavado.
[0048] Las bolsas pueden ser de cualquier configuración, forma y material que sea adecuado para contener la composición, por ejemplo, sin permitir la liberación de la composición de la bolsa antes del contacto con el agua. La bolsa está hecha de una película soluble en agua que incluye un volumen interno. Dicho volumen interno se puede dividir en compartimentos de la bolsa. Las películas preferidas son materiales poliméricos preferiblemente polímeros que se forman en una película u hoja. Los polímeros preferidos, copolímeros o derivados de los mismos se seleccionan de poliacrilatos, y copolímeros acrilados solubles en agua, metilcelulosa, carboximetilcelulosa, dextrina de sodio, etilcelulosa, hidroxietilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, maltodextrina, polimetacrilato, de la forma más preferible copolímeros de alcohol polivinílico y, hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC). Preferiblemente el nivel de polímero en la película por ejemplo PVA es al menos aproximadamente del 60%. El peso molecular medio preferido estará típicamente de aproximadamente 20.000 a aproximadamente 150.000.
Las películas también pueden ser composiciones de mezcla que comprendan mezclas de polímeros hidrolíticamente degradables y solubles en agua tales como poliactida y alcohol polivinílico (conocido bajo la referencia comercial M8630 como lo vende Chris Craft In. Prod. Of Gary, Ind., US) más plastificantes tales como glicerol, etilenglicerol, propilenglicol, sorbitol y sus mezclas derivadas. Las bolsas pueden comprender una composición de limpieza de lavandería sólida o
15
25
35
45
55
65
E12733657
12-06-2015
componentes en parte y/o una composición de limpieza líquida o componentes en parte separada por la película soluble en agua. El compartimento para componentes líquidos puede ser diferente en la composición de los compartimentos que contienen sólidos (véase por ejemplo, US 2009/0011970).
[0049] La elección de componentes de detergente pueden incluir, para cuidado textil, la consideración del tipo de textil que se va a limpiar, el tipo y/o el grado de suciedad, la temperatura a la que se realiza la limpieza y la formulación del producto detergente. Aunque los componentes mencionados más abajo están categorizados por encabezado general según una funcionalidad particular, esto no se debe interpretar como una limitación, ya que un componente puede comprender funciones adicionales como apreciará el experto en la materia.
[0050] En una forma de realización, la composición de subtilisina estabilizada de la invención se puede añadir a una composición de detergente en una cantidad que corresponda a 0,001-100 mg de proteína, tal como 0,01-100 mg de proteína, preferiblemente 0,005-50 mg de proteína, de forma más preferible 0,01-25 mg de proteína, incluso de forma más preferible 0,05-10 mg de proteína, de la forma más preferible 0,05-5 mg de proteína, e incluso de la forma más preferible 0,01-1 mg de proteína por litro de solución de lavado.
Dosis unitaria
[0051] Un producto de dosis unitaria es el embalaje de una única dosis en un contenedor no reutilizable. Cada vez es más usado en detergentes para lavado de ropa y de vajilla. Un producto de dosis unitaria de detergente es el embalaje (por ejemplo, en una bolsa hecha de una película soluble en agua) de la cantidad de detergente usada para un único lavado.
[0052] En un aspecto, la composición de detergente está en forma de dosis unitaria. Productos detergentes en forma de dosis unitaria incluyen tabletas, cápsulas, sobres, bolsas, etc. En un aspecto, para su uso aquí son tabletas envueltas en una película hidrosoluble y bolsas hidrosolubles. El peso de la composición de detergente de la invención es de aproximadamente 10 a aproximadamente 25 gramos, de aproximadamente 12 a aproximadamente 24 gramos o incluso de 14 a 22 gramos. Estos pesos son extremadamente adecuados para encajar en el dispensador de producto de detergente de lavado de la vajilla automático. En los casos de productos de dosis unitaria que tienen un material hidrosoluble envolvente de la composición de detergente, el material hidrosoluble no se considera como parte de la composición. En un aspecto, la forma de dosis unitaria es una bolsa hidrosoluble (es decir, película hidrosoluble envolvente de una composición de detergente), en un aspecto, una bolsa multicompartimiento con una pluralidad de películas que forman una pluralidad de compartimentos. Esta configuración contribuye a la flexibilidad y optimización de la composición. Permite la separación y liberación controlada de diferentes ingredientes. En un aspecto, un compartimento contiene una composición de detergente en forma sólida y otro compartimento contiene una composición de detergente en forma líquida.
[0053] En un aspecto, en las formas de realización de bolsa de multicompartimiento dos compartimentos diferentes podrían contener dos agentes de limpieza diferentes. En un aspecto, las películas de estos dos compartimentos tienen perfiles de disolución diferentes, permitiendo la liberación de los mismos o diferentes agentes en momentos diferentes. Por ejemplo, el agente de un compartimento (primer compartimento) se puede entregar pronto en el proceso de lavado para ayudar a la eliminación de la suciedad y un segundo agente de otro compartimento (segundo compartimento) se puede entregar al menos dos minutos, o incluso al menos cinco minutos más tarde que el agente del primer compartimento.
[0054] En un aspecto, se describe una bolsa de multicompartimiento que comprende dos compartimentos superpuesto contiguamente sobre otro compartimento donde al menos dos compartimentos diferentes contienen dos composiciones de detergente diferentes.
[0055] Un paquete multicompartimientos está formado por una pluralidad de materiales envolventes hidrosolubles que forman una pluralidad de compartimentos, uno de los compartimentos contendrá alguno o todos los ingredientes de la composición de detergente, otro compartimento puede contener una composición líquida, la composición líquida puede ser acuosa (es decir comprender más del 10 por ciento de agua en peso de la composición líquida) y el compartimento puede estar hecho de material soluble en agua caliente. En una forma de realización, un compartimento está hecho de un material soluble en agua fría. Permite la separación y la liberación controlada de diferentes ingredientes. En otras formas de realización todos los compartimentos están hechos de material soluble de agua caliente.
[0056] Paquetes adecuados comprenden al menos dos compartimentos superpuestos contiguamente (es decir, colocados por encima) sobre otro compartimento, especialmente adecuadas son las bolsas. Esta disposición contribuye a la compacidad, robustez y fuerza del paquete, adicionalmente, minimiza la cantidad de material hidrosoluble necesario. Solo son necesarias tres piezas de material para formar tres compartimentos. La robustez del paquete permite también el uso de películas muy finas sin comprometer la integridad física del paquete. El paquete es también muy fácil de usar debido a que los compartimentos no necesitan ser plegados para usarse en los dispensadores de la máquina para adaptarse a la geometría. Al menos dos de los compartimentos del paquete contienen dos composiciones de detergente diferentes. Por "composiciones diferentes" aquí se entiende composiciones de detergente que difieran en al menos un ingrediente.
15
25
35
45
55
65
E12733657
12-06-2015
[0057] En un aspecto, al menos uno de los compartimentos contiene una composición de detergente sólida y otro compartimento una composición de detergente líquida acuosa, las composiciones son típicamente en una proporción en peso de sólido a líquido de aproximadamente 20:1 a aproximadamente 1:20, de aproximadamente 18:1 a aproximadamente 2:1 o de aproximadamente 15:1 a aproximadamente 5:1. Este tipo de paquete es muy versátil porque puede alojar composiciones con un amplio espectro de valores de proporción sólido:líquido. Las bolsas tienen una alta proporción sólido:líquido porque muchos de los ingredientes detergentes son especialmente adecuados para su uso en forma sólida, en un aspecto en forma de polvo. La proporción sólido:líquido definida aquí se refiere a la relación entre el peso de todas las composiciones sólidas y el peso de todas las composiciones líquidas en el paquete.
[0058] Las proporciones en peso adecuadas sólido:líquido son de aproximadamente 2:1 a aproximadamente 18:1, o de aproximadamente 5:1 a aproximadamente 15:1. Estas proporciones en peso son adecuadas en casos en los que la mayor parte de los ingredientes del detergente están en forma líquida.
[0059] En un aspecto, los dos compartimentos contiguos contienen composiciones de detergente líquido, que pueden ser iguales o diferentes y otro compartimento contiene una composición de detergente sólido, por ejemplo en polvo, en un aspecto, un polvo densificado. La composición sólida contribuye a la fuerza y robustez del paquete.
[0060] Por motivos de adaptación al dispensador, especialmente en un lavavajillas automático, los productos en forma de dosis unitaria aquí tienen una base cuadrada o rectangular y una altura de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 cm, o de aproximadamente 1 a aproximadamente 4 cm. En un aspecto, el peso de la composición sólida es de aproximadamente 5 a aproximadamente 20 gramos, o de aproximadamente 10 a aproximadamente 15 gramos y el peso de las composiciones líquidas es de aproximadamente 0,5 a aproximadamente 4 gramos, o de aproximadamente 0,8 a aproximadamente 3 gramos. En un aspecto, al menos dos de las películas que forman compartimentos diferentes tienen solubilidades diferentes, bajo las mismas condiciones. Esto permite liberar las composiciones que están parcialmente o totalmente revestidas en tiempos diferentes.
[0061] La liberación controlada de los ingredientes de una bolsa multicompartimiento se pueden conseguir modificando el espesor de la película y/o la solubilidad de la película. La solubilidad de la película se puede retardar mediante, por ejemplo, reticulación la película como se describe en la WO 2002/102955. Otras películas hidrosolubles diseñadas para liberación en el aclarado se describen en la US 4.765.916 y US 4.972.017. El recubrimiento ceroso (véase US 5.453.216) de películas pueden ayudar a la liberación en el aclarado. Los medios de liberación controlada por pH se describen en la US 5.453.216, en particular polisacárido aminoacetilado que tiene grado selectivo de acetilación.
[0062] Otros medios para obtener liberación retardada por bolsas multicompartimiento con compartimentos diferentes, donde los compartimentos se han hecho a partir de películas que tienen solubilidad diferente se muestran en la US
6.727.215.
Surfactantes
[0063] La composición de detergente puede comprender uno o varios surfactantes, que pueden ser aniónicos y/o catiónicos y/o no iónicos y/o semipolares y/o zwitteriónicos, o una mezcla de los mismos. En una forma de realización particular, la composición de detergente incluye una mezcla de uno o varios surfactantes no iónicos y uno o más surfactantes aniónicos, pero también pueden usarse individualmente.
[0064] El surfactante(s) está típicamente presente a un nivel de aproximadamente 0,1% a 60% en peso, tal como aproximadamente 1% a aproximadamente 40%, o aproximadamente 3% a aproximadamente 20%, o aproximadamente 3% a aproximadamente 10%. El surfactante(s) se elige basado en la aplicación de limpieza deseada, e incluye cualquier surfactante(s) convencional conocido en la técnica. Cualquier surfactante conocido en la técnica para su uso en detergentes se puede utilizar.
[0065] Ejemplos no limitativos de surfactantes aniónicos incluyen sulfatos y sulfonatos, en particular, alquilbencenosulfonatos lineales (LAS), isómeros de LAS, alquilbencenosulfonatos ramificados (BABS), fenilalcanosulfonatos, alfa-olefinsulfonatos (AOS), sulfonatos de olefina, sulfonatos de alqueno, alcano-2,3diilbis(sulfatos), hidroxialcanosulfonatos y disulfonatos, sulfatos de alquilo (AS) tal como dodecil sulfato de sodio (SDS), sulfatos de alcohol graso (FAS), sulfatos de alcohol primario (PAS), etersulfatos de alcohol (AES o AEOS o FES, también conocido como etoxisulfatos alcohólicos o sulfatos de éter de alcohol graso, incluyendo lauril éter sulfato de sodio (SLES), jabones o ácidos grasos; alcanosulfonatos secundarios (SAS), sulfonatos de parafina (PS), sulfonatos de éster, ésteres de glicerol de ácido graso sulfonatado, ésteres de metilo de ácido graso alfa-sulfo (alfa-SFMe o SES) incluyendo sulfonato de éster metílico (MES), ácido alquil-o alquenilsuccínico, ácido dodecenil/tetradecenil succínico (DTSA), derivados de ácido graso de aminoácidos, diésteres y monoésteres de ácido sulfo-succínico o jabón, y combinaciones de los mismos.
[0066] Cuando está incluido en esto el detergente contendrá normalmente de aproximadamente 1% a aproximadamente 40% en peso, tal como de aproximadamente 5% a aproximadamente 30%, incluyendo de aproximadamente 5% a aproximadamente 15%, o de aproximadamente 20% a aproximadamente 25% de un surfactante aniónico.
15
25
35
45
55
65
E12733657
12-06-2015
[0067] Ejemplos no limitativos de surfactantes no iónicos incluyen alcohol etoxilatos (AE o AEO), propoxilatos alcohólicos, alcoholes grasos propoxilados (PFA), ésteres alquílicos de ácido graso alcoxilado, tales como ésteres alquílicos de ácido graso etoxilado y/o propoxilado, etoxilatos de alquilofenol (APE), etoxilatos de nonilfenol (NPE), alquilpoliglucósidos (APG), aminos alcoxilados, monoetanolamidas de ácido graso (FAM), dietanolamidas de ácido graso (FadA), monoetanolamidas de ácido graso etoxilado (EFAM), monoetanolamida de ácido graso propoxilado (PFAM), amidas de ácido graso de polihidroxi alquilo, o derivados de N-acilo N-alquilo de glucosamina (glucamidas, GA, o glucamida de ácido graso, FAGA), al igual que productos disponibles bajo los nombres comerciales SPAN y TWEEN, y combinaciones de los mismos.
[0068] Cuando está incluido en esto, el detergente contendrá normalmente de aproximadamente 0,2% a aproximadamente 40% en peso de un surfactante no iónico, por ejemplo de aproximadamente 0,5% a aproximadamente 30%, en particular de aproximadamente 1% a aproximadamente 20%, de aproximadamente 3% a aproximadamente 10%, tal como de aproximadamente 3% a aproximadamente 5%, o de aproximadamente 8% a aproximadamente 12%.
Constructores
[0069] La composición de detergente puede contener aproximadamente 0-65% en peso de un constructor de detergente
o co-constructor, o una mezcla de los mismos. En un detergente de lavavajillas, el nivel de constructor es típicamente 40-65%, particularmente 50-65%. El constructor y/o co-constructor puede particularmente ser un agente quelante que forme complejos hidrosolubles con Ca y Mg. Cualquier constructor y/o co-constructor conocido en la técnica para su uso en los detergentes de lavado de ropa se puede utilizar. Ejemplos no limitativos de constructores incluyen zeolitas, difosfatos (pirofosfatos), trifosfatos tales como trifosfato de sodio (STP o STPP), ácido nitrilotriacético, ácido etilenodiaminatetraacético (EDTA), ácido dietilenotriaminopentaacético, ácido alquil-o alquenilsuccínico, carbonatos tales como carbonato de sodio, silicatos solubles tales como metasilicato de sodio, silicatos estratificados (por ejemplo, SKS-6 de Hoechst), etanolaminas tales como 2-aminoetan-1-ol (MEA), iminodietanol (DEA) y 2,2',2"-nitrilotrietanol (TEA), y carboximetilinulina (CMI), y combinaciones de los mismos.
[0070] El constructor puede ser un constructor fuerte tal como ácido metil-glicina-diacético ("MGDA") o sal tetrasódica de ácido N,N-dicarboximetil glutámico (GLDA); puede ser un constructor medio tal como tri-poli-fosfato de sodio (STPP), o puede ser un constructor débil tal como citrato sódico.
Sistema blanqueante
[0071] La composición de detergente puede contener 0-50% en peso de un sistema blanqueante. Cualquier sistema blanqueante conocido en la técnica para su uso en los detergentes de lavado de ropa se puede utilizar. Componentes de sistema blanqueante adecuados incluyen catalizadores de blanqueo, fotoblanqueadores, activadores de blanqueador, fuentes de peróxido de hidrógeno tales como percarbonato de sodio y perboratos de sodio, perácidos preformados y sus mezclas derivadas. Los perácidos preformados adecuados incluyen, pero de forma no limitativa, ácidos peroxicarboxílicos y sales, ácidos percarbónicos y sales, ácidos perimídicos y sales, ácidos peroximonosulfúricos y sales, por ejemplo, oxona (R), y sus mezclas derivadas. Ejemplos no limitativos de sistemas blanqueantes incluyen sistemas blanqueantes basados en peróxido, que pueden comprender, por ejemplo, una sal inorgánica, incluyendo sales de metal alcalino tales como sales de sodio de perborato (normalmente mono-o tetrahidrato), percarbonato, persulfato, perfosfato, sales de persilicato, en combinación con un activador blanqueante de formación de perácido. Por activador blanqueante se entiende aquí un compuesto que reacciona con el blanqueador de peroxígeno tipo peróxido de hidrógeno para formar un perácido. El perácido formado de este modo constituye el blanqueador activado. Activadores de blanqueador adecuados para su uso aquí incluyen aquellos de la clase de amidas, imidas o anhídridos de ésteres, ejemplos adecuados son tetracetiloatilenodiamina (TAED), sodio 3,5,5 trimetil hexanoiloxibenceno sulfonato, ácido dodecanoico de diperóxido, 4-(dodecanoiloxi)bencenosulfonato (LOBS), 4-(decanoiloxi)bencenosulfonato, 4(decanoiloxi)benzoato (DOBS), 4-(3,5,5-trimetilhexanoiloxi)bencenosulfonato (ISONOBS), tetraacetiletilenodiamina (TAED) y 4-(nonanoiloxi)bencenosulfonato (NOBS), y/o aquellos descritos en la WO98/17767. Una familia particular de activadores de blanqueador de interés fue descrita en la EP624154 y se prefiere particularmente en esa familia el acetil trietil citrato (ATC). ATC o un triglicérido de cadena corta como Triacin tiene la ventaja de que es respetuoso con el medioambiente ya que se degrada en ácido cítrico y alcohol. Además, el acetil trietil citrato y la triacetina tiene una buena estabilidad hidrolítical en el producto tras almacenamiento y es un activador blanqueante eficaz. Por último, el ATC proporciona una buena capacidad de construcción al aditivo de lavado de ropa. Alternativamente, el sistema blanqueante puede comprender peroxiácidos del tipo, por ejemplo, amida, imida o sulfona. El sistema blanqueante también puede comprender perácidos tales como ácido 6-(ftaloilamino)percaprónico (PAP). El sistema blanqueante también puede incluir un catalizador de blanqueador.
[0072] Otros ingredientes de la composición de detergente, que son bien conocido en la técnica, incluyen hidrotropos, agentes de matizado de tejido, agentes anti-espumado, polímeros de liberación de suciedad, agentes antireposición, etc.
Métodos y composiciones
15
25
35
45
55
65
E12733657
12-06-2015
[0073] En un primer aspecto, la presente invención proporciona una composición, que comprende una subtilisina y un aducto de hidrosulfito de péptido aldehído que tiene la fórmula X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3M, donde:
a) M es H (hidrógeno) o un metal alcalino;
b) R es un grupo de manera que NH-CHR-CO es un residuo de L o D-aminoácido;
c) B1 es un residuo de aminoácido; y
d) X consiste en uno o más residuos de aminoácidos, opcionalmente que incluyen un grupo de protección Nterminal.
[0074] En una forma de realización, R es un grupo tal que NH-CHR-CO es un residuo de L o D-aminoácido de Tyr, mtirosina, 3,4-dihidroxifenilalanina, Phe, Val, Met, Nva, Leu, Ile o Nle.
[0075] En una forma de realización, B1 es un residuo de Ala, Cys, Gly, Pro, Ser, Thr, Val, Nva o Nle.
[0076] En una forma de realización, X es B2, B3-B2, Z-B2 o Z-B3-B2, donde B2 y B3 cada uno representa un residuo de aminoácido, y Z es un grupo de protección N-terminal. Preferiblemente, B2 es un residuo de Val, Gly, Ala, Arg, Leu, Phe
o Thr. Preferiblemente, B3 es un residuo de Phe, Tyr, Trp, fenilglicina, Leu, Val, Nva, Nle o Ile.
[0077] En una forma de realización, Z es benciloxicarbonilo (Cbz), p-metoxibencilo carbonilo (MOZ), bencilo (Bn), benzoilo (Bz), p-metoxibencilo (PMB), p-metoxifenilo (PMP), formilo, acetilo (Ac), metiloxi, o metiloxicarbonilo.
[0078] En una forma de realización, la composición está en forma líquida o granulosa. Preferiblemente, la composición es un detergente que comprende además un surfactante.
[0079] En una forma de realización, la composición comprende además una segunda enzima, particularmente una lipasa, una cutinasa, una amilasa, una carbohidrasa, una celulasa, una pectinasa, una pectato liasa, una mananasa, una arabinasa, una galactanasa, una xilanasa, una oxidasa, una lacasa o una peroxidasa.
[0080] En otro aspecto, la invención proporciona un método de preparación de la composición de la invención, como se ha descrito anteriormente, este método comprende mezcla de una subtilisina, una solución acuosa que comprende un aducto de hidrosulfito de péptido aldehído con la fórmula X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3M, como se ha descrito anteriormente, y opcionalmente un surfactante.
[0081] En otro aspecto, la invención proporciona un compuesto para su uso en la composición de la invención, este compuesto es un aducto de hidrosulfito de péptido aldehído con la fórmula X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3M, donde M y X se definen como se ha descrito anteriormente, B1 es un residuo de aminoácido que es diferente de prolina (Pro), y R es un grupo de manera que NH-CHR-CO es un residuo de L o D-aminoácido de Tyr, m-tirosina, 3,4-dihidroxifenilalanina, Phe, Val, Met, Nva o Nle.
[0082] En una forma de realización, el compuesto es Cbz-RA-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Ac-GA-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-GA-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-GG-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-RV-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-LV-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Ac-LGA-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Ac-FGA-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Ac-YGA-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Ac-FGV-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H o Ac-WLV-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, donde Ac es acetilo y Cbz es benciloxicarbonilo.
[0083] En otro aspecto, la invención proporciona un compuesto para su uso en la composición de la invención, este compuesto es un aducto de hidrosulfito de péptido aldehído con la fórmula X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3M, donde M, R y X se definen como se ha descrito anteriormente, y donde B1 es un residuo de aminoácido de alanina (Ala), cisteína (Cys), glicina (Gly), serina (Ser), treonina (Thr), valina (Val), norvalina (Nva) y norleucina (Nle).
[0084] En una forma de realización, el compuesto es Cbz-GA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, Cbz-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, Cbz-GA-NHCH(CH2Ph)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-GA-NHCH(CH(CH3)2)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-GG-NHCH(CH2Ph)C(OH)(SO3M)-H, Ac-FGA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, Ac-FGA-NHCH(CH2Ph)C(OH)(SO3M)-H, Ac-FGA-NHCH(CH2CH2SCH3)(SO3M)-H, MeO-CO-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, MeNCO-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, MeO-CO-FGA-NHCH(CH2CH(CH3)2))-C(OH)(SO3M)-H, MeO-CO-FGA-NHCH(CH2Ph)C(OH)(SO3M)-H, MeSO2-FGA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, MeSO2-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, PhCH2O(OH)(O)P-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, EtSO2-FGA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, PhCH2SO2-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, PhCH2O(OH)(O)P-LA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, PhCH2O(OH)(O)P-FA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H y MeO(OH)(O)PLGA-NHCH(CH2CH(CH3)2))-C(OH)(SO3M)-H, donde Ac es acetilo y Cbz es benciloxicarbonilo.
E12733657
12-06-2015
[0085] En otro aspecto, la invención proporciona un compuesto para su uso en la composición de la invención, este compuesto es un aducto de hidrosulfito de péptido aldehído con la fórmula X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3M; donde R y M se definen como se ha descrito anteriormente; B1 representa un residuo de aminoácido que es diferente de prolina (Pro); X
5 es B2, B3-B2, Z-B2, Z-B3-B2, donde B3y B2cada uno representa un residuo de aminoácido, y Z es un grupo de protección N-terminal; y donde B2 es Gly, Thr o Val.
[0086] En otro aspecto, la invención proporciona un compuesto para su uso en la composición de la invención, este compuesto es un aducto de hidrosulfito de péptido aldehído con la fórmula X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3M; donde R y M se
10 definen como se ha descrito anteriormente; B1 representa un residuo de aminoácido que es diferente de prolina (Pro); X es B3-B2, Z-B3-B2, donde B3y B2cada representa un residuo de aminoácido, y Z es un grupo de protección N-terminal; y donde B3es Phe, Tyr, Trp, fenilglicina, Leu, Val, Nva, Nle o Ile.
Ejemplos
15 [0087] Los productos químicos usados como tampones y sustratos fueron productos comerciales de al menos calidad reactiva.
Ejemplo 1
20 Preparación de un aducto de hidrosulfito de un péptido aldehído
[0088] Un péptido aldehído con la fórmula X-B1-B0-H, como se ha descrito anteriormente, se convierte en el aducto bisulfito correspondiente. A una suspensión agitada de 1 mmol X-B1-B0-H en 8 ml de acetato de etilo a temperatura
25 ambiente se añade gota a gota 1,06 mmol de bisulfito sódico (114 mg) en 6 ml de agua y luego la reacción se agita durante 2 horas. La fase acuosa se aísla y la capa orgánica se lava con 2 x 2 ml de agua. Las fases acuosas combinadas son liofilizadas dando X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3Na (rendimiento predicho 66%) como un polvo blanco.
Ejemplo 2
30 Preparación de una formulación líquida de un aducto de hidrosulfito de péptido aldehído.
[0089] 4 mmol de X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3Na sólido se disuelve en 6 g de agua desmineralizada y agitada durante 30 min a 35°C y posteriormente enfriada dando un 25% de solución acuosa de X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3Na.
35 Alternativamente, la fase acuosa como la síntesis anterior podría usarse fácilmente para estabilizar la enzima en el siguiente paso y esta solución es aprox. 3% (en peso).
Ejemplo 3
40 Preparación de una formulación de subtilisina estabilizada que comprende subtilisina y aducto de hidrosulfito de péptido aldehído.
[0090] A un Savinase 16L™ (Novozymes A/S, Bagsvaerd, Dinamarca) disponible comercialmente se añade 0,9% de X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3Na usando 3,6% del anterior 25% de solución acuosa.
45 Ejemplo 4
Estabilización de subtilisina por aducto de hidrosulfito
50 [0091] Detalles experimentales generales: detergentes con una subtilisina (Savinase 16L) y una lipasa (Lipex 100L) con
o sin X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3Na (el aducto de hidrosulfito de péptido aldehído se puede añadir separadamente al detergente que contiene la subtilisina) se colocan en cristales cerrados a -18°C; 35°C y 40°C. Actividades residuales de proteasa y lipasa se miden después de diferentes tiempos usando métodos analíticos estándar (proteasa por hidrólisis de N,N-dimetilcaseína a 40°C, pH 8,3 y lipasa por hidrólisis de pNp-valerato a 40°C, pH 7,7). Ensayos similares se
55 pueden hacer con adición de subtilisina a un detergente que ya contiene cantidades adecuadas del aducto de hidrosulfito de péptido aldehído. Resultados similares se pueden obtener con todos los aductos de bisulfito de péptido aldehído mencionados.
[0092] Como un ejemplo de composición de detergente con una formulación de subtilisina estabilizada, se hizo la 60 composición descrita en tabla 1.
E12733657
12-06-2015
Tabla 1. Composición de detergente.
Componente
% (en peso)
Sodio alquiletoxi sulfato (C9-15, 2EO)
6,0
Sodio dodecil benceno sulfonato
3,0
Sodio tolueno sulfonato
3,0
Ácido oleico
2,0
Etoxilato de alcohol primario (C12-15, 7EO)
3,0
Etoxilato de alcohol primario (C12-15, 3EO)
2,5
Etanol
0,5
Monopropilenglicol
2,0
Tri-sodio citrato 2H2O
4,0
Trietanolamina
0,4
pH ajustado a 8,5 con NaOH
Formulación de Savinase estabilizada con X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3Na; o Savinase 16L para comparación
0,5
Lipex 100L™ (disponible de Novozymes A/S)
0,5
Agua
hasta 100%
5 [0093] En la tabla 2 se muestran los resultados obtenidos con X= Cbz-Gly; B1= Ala; R=-CH2-p(C6H4)-OH; estabilidad medida después de una semana de incubación a 40°C en el detergente descrito en la tabla 1.
Tabla 2. Actividad de proteasa restante después de incubación de una semana a 40°C en el detergente descrito en la 10 tabla 1.
Cantidad de inhibidor añadida al detergente
Estabilidad de proteasa (actividad restante)
ninguna
12%
7 ppm
52%
14 ppm
77%
18 ppm
80%
[0094] Los resultados demuestran estabilización de la subtilisina por la adición de un aducto de hidrosulfito de un péptido aldehído.
15 Ejemplo 5
Estabilización de subtilisina y lipasa 20 [0095] Como un ejemplo de una composición de detergente con una formulación de subtilisina estabilizada, se hizo la composición descrita en la tabla 3. Tabla 3. Composición de detergente.
Componente
% (peso)
Sodio dodecil benceno sulfonato
6,0
NaOH
1,4
Ácido graso de soja (Edenor SJ)
3,0
Ácido graso de coco (Radiacid 0631)
2,5
Etoxilato de alcohol primario (C13, 8EO)
5,0
Etanol
5,0
Monopropilenglicol
5,0
Tri-sodio citrato 2H2O
0,5
Trietanol amina
2,0
Fosfonato-Dequest 2066 C2
3,0
E12733657
12-06-2015
pH ajustado a 8,4 con NaOH adicional si es necesario
Subtilisina: Savinase, estabilizado con X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3Na; o con ácido 4-formilfenil borónico; o con estabilizador para comparación
0,75
Lipasa: Lipex 100L ™ (disponible de Novozymes A/S)
0,15
Agua
hasta 100%
[0096] En la tabla 4 se muestran los resultados medidos después de dos semanas de incubación a 35°C en el detergente descrito en la tabla 3.
Tabla 4. Actividad restante de subtilisina (proteasa) y lipasa después de 2 semanas de incubación a 35°C en el detergente descrito en la tabla 3.
Inhibidor
Inhibidor en detergente Subtilisina Lipasa
ninguno
- 2% 1%
ácido 4-formilfenil borónico (técnica anterior)
128 ppm 8% 2%
X = Cbz-Gly; B1 = Ala R = -CH2-p(C6H4)-OH
21 ppm 63% 18%
10 [0097] Los resultados demuestran que la adición de un aducto de hidrosulfito de un péptido aldehído puede estabilizar la subtilisina y la segunda enzima (lipasa), y que es mucho más eficaz que el estabilizador del estado de la técnica.
Ejemplo 6
15 Estabilización de subtilisina y lipasa
[0098] Como otro ejemplo de un detergente con una formulación de subtilisina estabilizada, se hizo la composición descrita en la tabla 5. 20 Tabla 5. Composición de detergente.
Componente
% (en peso)
Detergente no enzimático comercial. Líquido EU 2x dosificado. Comprado en el Reino Unido, 2009
98,2
Subtilisina
1,4
Lipasa: Lipoclean 2000L (disponible de Novozymes A/S)
0,4
25 [0099] En la tabla 6 se muestran los resultados medidos después de 4 semanas de incubación a 37°C, y después de 8 semanas de incubación a 30°C, en el detergente descrito en la tabla 5.
Tabla 6. Actividad restante de subtilisina (proteasa) y lipasa después de 4 semanas de incubación a 37°C, o después de 8 semanas de incubación a 30°C en el detergente descrito en la tabla 5. 30
Inhibidor
Subtilisina Cantidad of inhibidor añadida al detergente Subtilisina Lipasa
4 semanas a 37ºC
8 semanas a 30ºC
ninguno
Coronase 48L 0 69% 28%
X = Cbz-Gly; B1 = Ala R = -CH2-p(C6H4)-OH
Coronase 48L 59 ppm 80% 61%
ninguno
Liquanase 2,5L 0 43% 0%
X = Cbz-Gly; B1 = Ala; R = -CH2-p(C6H4)-OH
Liquanase 2,5L 34 ppm 83% 27%
E12733657
12-06-2015
[0100] Los resultados confirman que la adición de un aducto de hidrosulfito de un péptido aldehído puede estabilizar la subtilisina y la segunda enzima (lipasa) para varias subtilisinas.

Claims (17)

  1. 5
    15
    25
    35
    45
    55
    65
    REIVINDICACIONES
    1.
    Composición que comprende una subtilisina y un aducto de hidrosulfito de péptido aldehído con la fórmula X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3M, donde:
    A) M es H (hidrógeno) o un metal alcalino; B) R es un grupo de manera que NH-CHR-CO es un residuo de L o D-aminoácido; C) B1 es un residuo de aminoácido; y D) X consiste en uno o más residuos de aminoácidos, que comprenden opcionalmente un grupo de protección Nterminal.
  2. 2.
    Composición según la reivindicación precedente, donde R es un grupo de manera que NH-CHR-CO es un residuo de L o D-aminoácido de Tyr, m-tirosina, 3,4-dihidroxifenilalanina, Phe, Val, Met, Nva, Leu, Ile o Nle.
  3. 3.
    Composición según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, donde B1 es un residuo de Ala, Cys, Gly, Pro, Ser, Thr, Val, Nva o Nle.
  4. 4.
    Composición según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, donde X es B2, B3-B2, Z-B2 o Z-B3-B2, donde B2 y B3 cada uno representa un residuo de aminoácido, y Z es un grupo de protección N-terminal.
  5. 5.
    Composición según la reivindicación precedente, donde B2 es un residuo de Val, Gly, Ala, Arg, Leu, Phe o Thr.
  6. 6.
    Composición según la reivindicación 4, donde B3 es un residuo de Phe, Tyr, Trp, fenilglicina, Leu, Val, Nva, Nle o Ile.
  7. 7.
    Composición según cualquiera de las reivindicaciones precedentes donde Z es benciloxicarbonilo (Cbz), pmetoxibencilocarbonilo (MOZ), bencilo (Bn), benzoilo (Bz), p-metoxibencilo (PMB), p-metoxifenilo (PMP), formilo, acetilo (Ac), metiloxi o metiloxicarbonilo.
  8. 8.
    Composición según cualquiera de las reivindicaciones precedentes que está en forma líquida o granulosa.
  9. 9.
    Composición según cualquiera de las reivindicaciones precedentes que es un detergente que comprende además un surfactante.
  10. 10.
    Composición según cualquiera de las reivindicaciones precedentes que comprende además una segunda enzima, particularmente una lipasa, una cutinasa, una amilasa, una carbohidrasa, una celulasa, una pectinasa, una pectato liasa, una mananasa, una arabinasa, una galactanasa, una xilanasa, una oxidasa, una lacasa o una peroxidasa.
  11. 11.
    Método para preparar la composición según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, dicho método comprende la mezcla de una subtilisina, una solución acuosa que comprende un aducto de hidrosulfito de péptido aldehído que tiene la fórmula X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3M, donde M, R, B1 y X se definen como en la reivindicación 1, y opcionalmente un surfactante.
  12. 12.
    Compuesto para su uso en la composición según cualquiera de las reivindicaciones 1-10, este compuesto es un aducto de hidrosulfito de péptido aldehído que tiene la fórmula X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3M, donde M y X se definen como en la reivindicación 1, B1 es un residuo de aminoácido que es diferente de prolina (Pro), y R es un grupo de manera que NH-CHR-CO es un residuo de L o D-aminoácido de Tyr, m-tirosina, 3,4-dihidroxifenilalanina, Phe, Val, Met, Nva o Nle.
  13. 13.
    Compuesto según la reivindicación 12, que es Cbz-RA-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Ac-GA-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-GA-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-GG-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-RV-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-LV-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Ac-LGA-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Ac-FGA-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Ac-YGA-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, Ac-FGV-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H o Ac-WLV-NHCH(CH2C6H4OH)C(OH)(SO3M)-H, donde Ac es acetilo y Cbz es benciloxicarbonilo.
  14. 14.
    Compuesto para su uso en la composición según cualquiera de las reivindicaciones 1-10, este compuesto es un aducto de hidrosulfito de péptido aldehído que tiene la fórmula X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3M, donde M, R y X se definen como en la reivindicación 1, y donde B1 es un residuo de aminoácido de alanina (Ala), cisteína (Cys), glicina (Gly), serina (Ser), treonina (Thr), valina (Val), norvalina (Nva) y norleucina (Nle).
  15. 15.
    Compuesto de la reivindicación 14, que es Cbz-GA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, Cbz-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, Cbz-GA-NHCH(CH2Ph)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-GA-NHCH(CH(CH3)2)C(OH)(SO3M)-H, Cbz-GG-NHCH(CH2Ph)C(OH)(SO3M)-H, Ac-FGA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, Ac-FGA-NHCH(CH2Ph)C(OH)(SO3M)-H, Ac-FGA-NHCH(CH2CH2SCH3)(SO3M)-H, MeO-CO-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, MeNCO-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, MeO-CO
    15
    FGA-NHCH(CH2CH(CH3)2))-C(OH)(SO3M)-H, MeO-CO-FGA-NHCH(CH2Ph)C(OH)(SO3M)-H, MeSO2-FGA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, MeSO2-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, PhCH2O(OH)(O)P-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, EtSO2-FGA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, PhCH2SO2-VA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H, PhCH2O(OH)(O)P-LA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H,
    5 PhCH2O(OH)(O)P-FA-NHCH(CH2CH(CH3)2))C(OH)(SO3M)-H y MeO(OH)(O)P-LGA-NHCH(CH2CH(CH3)2))-C(OH)(SO3M)-H, donde Ac es acetilo y Cbz es benciloxicarbonilo.
  16. 16. Compuesto para su uso en la composición según cualquiera de las reivindicaciones 1-10, este compuesto es un aducto de hidrosulfito de péptido aldehído que tiene la fórmula X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3M; donde R y M se definen
    10 como en la reivindicación 1; B1 representa un residuo de aminoácido que es diferente de prolina (Pro); X es B2, B3-B2, Z-B2, Z-B3-B2, donde B3y B2 cada uno representa un residuo de aminoácido, y Z es un grupo de protección N-terminal; y donde B2 es Gly, Thr o Val.
  17. 17. Compuesto para su uso en la composición según cualquiera de las reivindicaciones 1-10, este compuesto es un
    15 aducto de hidrosulfito de péptido aldehído que tiene la fórmula X-B1-NH-CHR-CHOH-SO3M; donde R y M se definen como en la reivindicación 1; B1 representa un residuo de aminoácido que es diferente de prolina (Pro); X es B3-B2, Z-B3-B2, donde B3 y B2cada uno representa un residuo de aminoácido, y Z es un grupo de protección N-terminal; y donde B3 es Phe, Tyr, Trp, fenilglicina, Leu, Val, Nva, Nle o Ile.
    16
ES12733657.6T 2011-07-01 2012-06-29 Composición de subtilisina estabilizada Active ES2539504T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP11172357 2011-07-01
EP11172357 2011-07-01
PCT/EP2012/062760 WO2013004636A1 (en) 2011-07-01 2012-06-29 Stabilized subtilisin composition

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2539504T3 true ES2539504T3 (es) 2015-07-01

Family

ID=46506345

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES12733657.6T Active ES2539504T3 (es) 2011-07-01 2012-06-29 Composición de subtilisina estabilizada

Country Status (14)

Country Link
US (1) US9085750B2 (es)
EP (1) EP2726592B1 (es)
JP (2) JP6334396B2 (es)
KR (1) KR101956895B1 (es)
CN (2) CN103649292B (es)
AU (1) AU2012280414B2 (es)
BR (1) BR112013033811A2 (es)
DK (1) DK2726592T3 (es)
ES (1) ES2539504T3 (es)
IN (1) IN2014CN00700A (es)
MX (1) MX346246B (es)
RU (1) RU2635355C2 (es)
WO (1) WO2013004636A1 (es)
ZA (1) ZA201400692B (es)

Families Citing this family (74)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2970830B1 (en) 2013-03-14 2017-12-13 Novozymes A/S Enzyme and inhibitor contained in water-soluble films
EP3569611A1 (en) 2013-04-23 2019-11-20 Novozymes A/S Liquid automatic dish washing detergent compositions with stabilised subtilisin
EP2799533A1 (en) * 2013-04-30 2014-11-05 Novozymes A/S Protease and inhibitor containing water-soluble films
WO2016001319A1 (en) 2014-07-03 2016-01-07 Novozymes A/S Improved stabilization of non-protease enzyme
WO2016097352A1 (en) * 2014-12-19 2016-06-23 Novozymes A/S Protease variants and polynucleotides encoding same
DE102015210828A1 (de) 2015-06-12 2016-12-15 Henkel Ag & Co. Kgaa Phosphatfreies flüssiges Geschirrspülmittel
WO2016205755A1 (en) 2015-06-17 2016-12-22 Danisco Us Inc. Bacillus gibsonii-clade serine proteases
CA3175255A1 (en) 2015-07-01 2017-01-05 Novozymes A/S Methods of reducing odor
US10760037B2 (en) * 2015-07-03 2020-09-01 Novozymes A/S Sulfite compositions
EP3320089B1 (en) 2015-07-06 2021-06-16 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
CN108367251A (zh) 2015-10-14 2018-08-03 诺维信公司 滤水膜的清洁
EP3408366B1 (en) * 2016-01-28 2021-12-08 Novozymes A/S Method for cleaning a medical or dental instrument
EP3464538A1 (en) 2016-05-31 2019-04-10 Novozymes A/S Stabilized liquid peroxide compositions
CN109477112B (zh) 2016-05-31 2024-09-06 丹尼斯科美国公司 蛋白酶变体及其用途
DE102016209406A1 (de) 2016-05-31 2017-11-30 Henkel Ag & Co. Kgaa Stabilisierte Enzym-haltige Wasch- und Reinigungsmittel
CA3027745A1 (en) 2016-06-17 2017-12-21 Danisco Us Inc. Protease variants and uses thereof
EP3309244A1 (en) 2016-10-11 2018-04-18 Basf Se Low temperature protease
WO2018069158A1 (en) 2016-10-11 2018-04-19 Basf Se Protease resistant to natural inhibitors
US20190264138A1 (en) 2016-11-07 2019-08-29 Danisco Us Inc. Laundry detergent composition
CN110312794B (zh) 2016-12-21 2024-04-12 丹尼斯科美国公司 吉氏芽孢杆菌进化枝丝氨酸蛋白酶
EP4520820A3 (en) 2016-12-21 2025-04-16 Danisco Us Inc Protease variants and uses thereof
CN110621778A (zh) 2017-03-15 2019-12-27 丹尼斯科美国公司 胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶及其用途
CN110651038B (zh) 2017-05-05 2025-02-18 诺维信公司 包含脂肪酶和亚硫酸根的组合物
EP3645692B1 (en) 2017-06-30 2025-12-31 Novozymes A/S ENZYMATIC SUSPENSION COMPOSITION
CN111479919A (zh) 2017-11-01 2020-07-31 诺维信公司 多肽以及包含此类多肽的组合物
BR112020008737A2 (pt) 2017-11-01 2020-10-13 Novozymes A/S polipeptídeos e composições que compreendam tais polipeptídeos
DE102017219993A1 (de) 2017-11-09 2019-05-09 Henkel Ag & Co. Kgaa Enzymhaltiges Wasch- oder Reinigungsmittel
EP3717643A1 (en) 2017-11-29 2020-10-07 Danisco US Inc. Subtilisin variants having improved stability
WO2019245704A1 (en) 2018-06-19 2019-12-26 Danisco Us Inc Subtilisin variants
US20210363470A1 (en) 2018-06-19 2021-11-25 Danisco Us Inc Subtilisin variants
EP3856882A1 (en) 2018-09-27 2021-08-04 Danisco US Inc. Compositions for medical instrument cleaning
ES2981999T3 (es) 2018-10-31 2024-10-14 Henkel Ag & Co Kgaa Composiciones limpiadoras que contienen dispersinas V
EP3647397A1 (en) 2018-10-31 2020-05-06 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning compositions containing dispersins iv
DE102018129277A1 (de) 2018-11-21 2020-05-28 Henkel Ag & Co. Kgaa Mehrkomponenten Wasch- oder Reinigungsmittel enthaltend eine Chinon-Oxidoreduktase
EP3887515A1 (en) 2018-11-28 2021-10-06 Danisco US Inc. Subtilisin variants having improved stability
CN114174504B (zh) 2019-05-24 2026-04-17 丹尼斯科美国公司 枯草杆菌蛋白酶变体和使用方法
WO2020247582A1 (en) 2019-06-06 2020-12-10 Danisco Us Inc Methods and compositions for cleaning
EP3994148A1 (en) 2019-07-01 2022-05-11 Basf Se Peptide acetals for stabilising enzymes
WO2021009067A1 (en) 2019-07-12 2021-01-21 Novozymes A/S Enzymatic emulsions for detergents
EP4077617B1 (en) 2019-12-20 2026-03-18 Novozymes A/S Stabilized liquid boron-free enzyme compositions
EP4077656A2 (en) 2019-12-20 2022-10-26 Novozymes A/S Polypeptides having proteolytic activity and use thereof
US20240034960A1 (en) 2020-08-27 2024-02-01 Danisco Us Inc Enzymes and enzyme compositions for cleaning
WO2022063699A1 (en) 2020-09-22 2022-03-31 Basf Se Improved combination of protease and protease inhibitor with secondary enzyme
WO2023288294A1 (en) 2021-07-16 2023-01-19 Novozymes A/S Compositions and methods for improving the rainfastness of proteins on plant surfaces
EP4032966A1 (en) 2021-01-22 2022-07-27 Novozymes A/S Liquid enzyme composition with sulfite scavenger
EP4284906A1 (en) 2021-01-29 2023-12-06 Danisco US Inc. Compositions for cleaning and methods related thereto
EP4305146A1 (en) 2021-03-12 2024-01-17 Novozymes A/S Polypeptide variants
JP7411607B2 (ja) * 2021-06-17 2024-01-11 花王株式会社 洗剤用酵素安定化剤
WO2023278297A1 (en) 2021-06-30 2023-01-05 Danisco Us Inc Variant lipases and uses thereof
KR20240027617A (ko) 2021-06-30 2024-03-04 헨켈 아게 운트 코. 카게아아 폴리에스테라제 활성을 갖는 지질분해 효소를 포함하는 세정 조성물
WO2023274925A1 (en) 2021-06-30 2023-01-05 Henkel Ag & Co. Kgaa Cleaning composition with improved anti-gray performance and/or anti-pilling performance
EP4363543A1 (en) 2021-06-30 2024-05-08 Henkel AG & Co. KGaA Composition with improved moisture management performance
WO2023034486A2 (en) 2021-09-03 2023-03-09 Danisco Us Inc. Laundry compositions for cleaning
EP4448751A2 (en) 2021-12-16 2024-10-23 Danisco US Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2023114932A2 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2023114939A2 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2023168234A1 (en) 2022-03-01 2023-09-07 Danisco Us Inc. Enzymes and enzyme compositions for cleaning
US20250311734A1 (en) 2022-05-14 2025-10-09 Novozymes A/S Compositions and Methods for Preventing, Treating, Suppressing and/or Eliminatting Phytopathogenic Infestations and Infections
CN119487167A (zh) 2022-06-21 2025-02-18 丹尼斯科美国公司 用于清洁的包含具有嗜热菌蛋白酶活性的多肽的组合物和方法
US20260078362A1 (en) 2022-09-02 2026-03-19 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods related thereto
JP2025530749A (ja) 2022-09-02 2025-09-17 ダニスコ・ユーエス・インク 洗剤組成物及びそれに関連する方法
WO2024102698A1 (en) 2022-11-09 2024-05-16 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
EP4634219A1 (en) 2022-12-14 2025-10-22 Novozymes A/S High strength liquid protease formulations
JP2026501223A (ja) 2022-12-23 2026-01-14 ノボザイムス アクティーゼルスカブ カタラーゼ及びアミラーゼを含む洗剤組成物
WO2024163584A1 (en) 2023-02-01 2024-08-08 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
EP4414443A1 (en) 2023-02-09 2024-08-14 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning composition comprising polyesterase
CN120712348A (zh) 2023-03-06 2025-09-26 丹尼斯科美国公司 枯草杆菌蛋白酶变体和使用方法
CN120813242A (zh) 2023-03-16 2025-10-17 营养与生物科学美国第四公司 用于清洁和臭味控制的短芽孢杆菌发酵物提取物及其用途
CN121909283A (zh) 2023-09-28 2026-04-21 丹尼斯科美国公司 具有改善的溶解度的变体角质酶及其用途
WO2025085351A1 (en) 2023-10-20 2025-04-24 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2025093368A1 (en) 2023-11-02 2025-05-08 Basf Se Enzyme stabilization in compositions containing a protease inhibitor
WO2025217017A1 (en) 2024-04-08 2025-10-16 Novozymes A/S Compositions and methods for increasing phosphorous availability
WO2026024922A1 (en) 2024-07-25 2026-01-29 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2026050315A1 (en) 2024-08-29 2026-03-05 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use

Family Cites Families (92)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1296839A (es) 1969-05-29 1972-11-22
GB1372034A (en) 1970-12-31 1974-10-30 Unilever Ltd Detergent compositions
DK187280A (da) 1980-04-30 1981-10-31 Novo Industri As Ruhedsreducerende middel til et fuldvaskemiddel fuldvaskemiddel og fuldvaskemetode
HU184368B (en) 1981-01-13 1984-08-28 Gyogyszerkutato Intezet Process for preparing d-phenyl-alanyl-l-propyl-l-arginine-ald ehyde-shulphate
EP0124317B1 (en) * 1983-04-27 1990-04-11 Ici Americas Inc. Proline derivatives
HU192646B (en) 1984-12-21 1987-06-29 Gyogyszerkutato Intezet Process for preparing new n-alkyl-peptide aldehydes
WO1987000859A1 (en) 1985-08-09 1987-02-12 Gist-Brocades N.V. Novel lipolytic enzymes and their use in detergent compositions
EP0258068B1 (en) 1986-08-29 1994-08-31 Novo Nordisk A/S Enzymatic detergent additive
NZ221627A (en) 1986-09-09 1993-04-28 Genencor Inc Preparation of enzymes, modifications, catalytic triads to alter ratios or transesterification/hydrolysis ratios
US4765916A (en) 1987-03-24 1988-08-23 The Clorox Company Polymer film composition for rinse release of wash additives
US4972017A (en) 1987-03-24 1990-11-20 The Clorox Company Rinse soluble polymer film composition for wash additives
DE3854249T2 (de) 1987-08-28 1996-02-29 Novonordisk As Rekombinante Humicola-Lipase und Verfahren zur Herstellung von rekombinanten Humicola-Lipasen.
JPS6474992A (en) 1987-09-16 1989-03-20 Fuji Oil Co Ltd Dna sequence, plasmid and production of lipase
DK6488D0 (da) 1988-01-07 1988-01-07 Novo Industri As Enzymer
JP3079276B2 (ja) 1988-02-28 2000-08-21 天野製薬株式会社 組換え体ｄｎａ、それを含むシュードモナス属菌及びそれを用いたリパーゼの製造法
JP2728531B2 (ja) 1988-03-24 1998-03-18 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ セルラーゼ調製品
US5648263A (en) 1988-03-24 1997-07-15 Novo Nordisk A/S Methods for reducing the harshness of a cotton-containing fabric
GB8915658D0 (en) 1989-07-07 1989-08-23 Unilever Plc Enzymes,their production and use
DK0528828T4 (da) 1990-04-14 1998-08-31 Genencor Internat Gmbh Alkaliske bacillus-lipaser, DNA-sekvenser, der koder herfor, og bacilli der producerer sådanne lipaser
DK115890D0 (da) 1990-05-09 1990-05-09 Novo Nordisk As Enzym
CA2082279C (en) 1990-05-09 2007-09-04 Grethe Rasmussen Cellulase preparation comprising an endoglucanase enzyme
DK0548228T3 (da) 1990-09-13 1999-05-10 Novo Nordisk As Lipasevarianter
DE69133035T2 (de) 1991-01-16 2003-02-13 The Procter & Gamble Company, Cincinnati Kompakte Waschmittelzusammensetzungen mit hochaktiven Cellulasen
ES2121014T3 (es) 1991-05-01 1998-11-16 Novo Nordisk As Enzimas estabilizadas y composiciones detergentes.
WO1993012067A1 (en) 1991-12-13 1993-06-24 The Procter & Gamble Company Acylated citrate esters as peracid precursors
DK28792D0 (da) 1992-03-04 1992-03-04 Novo Nordisk As Nyt enzym
DK88892D0 (da) 1992-07-06 1992-07-06 Novo Nordisk As Forbindelse
KR100294361B1 (ko) 1992-07-23 2001-09-17 피아 스타르 돌연변이체알파-아밀라제,세정제,접시세척제,및액화제
DK0583534T3 (da) 1992-08-14 1997-06-16 Procter & Gamble Flydende detergenter, der indeholder et peptidaldehyd
US5792641A (en) 1992-10-06 1998-08-11 Novo Nordisk A/S Cellulase variants and detergent compositions containing cellulase variants
HU219675B (hu) 1993-02-11 2001-06-28 Genencor International Inc. Oxidatívan stabil alfa-amiláz
DE69434242T2 (de) 1993-04-27 2006-01-12 Genencor International, Inc., Palo Alto Neuartige Lipasevarianten zur Verwendung in Reinigungsmitteln
CA2165155C (en) 1993-06-14 1999-06-29 Hal Ambuter Concentrated nil-phosphate liquid automatic dishwashing detergent compositions containing enzyme
GB9314350D0 (en) 1993-07-12 1993-08-25 Zeneca Ltd Armide derivatives
JP2859520B2 (ja) 1993-08-30 1999-02-17 ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ リパーゼ及びそれを生産する微生物及びリパーゼ製造方法及びリパーゼ含有洗剤組成物
JPH07143883A (ja) 1993-11-24 1995-06-06 Showa Denko Kk リパーゼ遺伝子及び変異体リパーゼ
MX9603542A (es) 1994-02-22 1997-03-29 Novo Nordisk As Metodo para preparar una variante de una enzima lipolitica.
CA2143533A1 (en) 1994-03-04 1995-09-05 Kenneth D. Kurz Antithrombotic agents
US5436229A (en) * 1994-03-04 1995-07-25 Eli Lilly And Company Bisulfite adducts of arginine aldehydes
DE69536145D1 (de) 1994-03-08 2011-04-07 Novozymes As Neuartige alkalische Zellulasen
JPH09510363A (ja) 1994-03-22 1997-10-21 ザ、プロクター、エンド、ギャンブル、カンパニー 非タンパク質プロテアーゼ抑制剤を使用するプロテアーゼ酵素の製造
US5453216A (en) 1994-04-28 1995-09-26 Creative Products Resource, Inc. Delayed-release encapsulated warewashing composition and process of use
WO1995030744A2 (en) 1994-05-04 1995-11-16 Genencor International Inc. Lipases with improved surfactant resistance
AU2884595A (en) 1994-06-20 1996-01-15 Unilever Plc Modified pseudomonas lipases and their use
AU2884695A (en) 1994-06-23 1996-01-19 Unilever Plc Modified pseudomonas lipases and their use
US5919691A (en) 1994-10-06 1999-07-06 Novo Nordisk A/S Enzyme and enzyme preparation with endoglucanase activity
BE1008998A3 (fr) 1994-10-14 1996-10-01 Solvay Lipase, microorganisme la produisant, procede de preparation de cette lipase et utilisations de celle-ci.
CN1167503A (zh) 1994-10-26 1997-12-10 诺沃挪第克公司 一种具有脂解活性的酶
AR000862A1 (es) 1995-02-03 1997-08-06 Novozymes As Variantes de una ó-amilasa madre, un metodo para producir la misma, una estructura de adn y un vector de expresion, una celula transformada por dichaestructura de adn y vector, un aditivo para detergente, composicion detergente, una composicion para lavado de ropa y una composicion para la eliminacion del
JPH08228778A (ja) 1995-02-27 1996-09-10 Showa Denko Kk 新規なリパーゼ遺伝子及びそれを用いたリパーゼの製造方法
CN1182451A (zh) 1995-03-17 1998-05-20 诺沃挪第克公司 新的内切葡聚糖酶
EP0839186B1 (en) 1995-07-14 2004-11-10 Novozymes A/S A modified enzyme with lipolytic activity
JP4068142B2 (ja) 1995-08-11 2008-03-26 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 新規の脂肪分解酵素
US5763385A (en) 1996-05-14 1998-06-09 Genencor International, Inc. Modified α-amylases having altered calcium binding properties
AU3938997A (en) 1996-08-26 1998-03-19 Novo Nordisk A/S A novel endoglucanase
BR9711479B1 (pt) 1996-09-17 2009-08-11 variante de celulase tendo uma resistência aumentada a tensìdeo de ánion.
EP0929639B1 (en) * 1996-09-24 2002-11-13 The Procter & Gamble Company Liquid detergents containing proteolytic enzyme, peptide aldehyde and calcium ions
CN1238002A (zh) 1996-09-24 1999-12-08 普罗格特-甘布尔公司 含有蛋白水解酶、肽醛和硼酸源的液体洗涤剂
CN1238003A (zh) 1996-09-24 1999-12-08 普罗格特-甘布尔公司 含有蛋白酶和蛋白酶抑制剂的液体洗衣洗涤剂组合物
CA2266497C (en) 1996-09-24 2002-12-31 John Mcmillan Mciver Liquid detergents containing proteolytic enzyme and protease inhibitors
BR9713470A (pt) * 1996-09-24 2000-04-11 Procter & Gamble Detergentes lìquidos contendo enzima proteolìtica e inibidores da protease
EP0934389B1 (en) 1996-10-18 2003-12-10 The Procter & Gamble Company Detergent compositions
CN1530443A (zh) 1996-11-04 2004-09-22 ŵ����÷�����޹�˾ 枯草杆菌酶变异体和组合物
AU4772697A (en) 1996-11-04 1998-05-29 Novo Nordisk A/S Subtilase variants and compositions
WO1998034946A1 (en) 1997-02-12 1998-08-13 Massachusetts Institute Of Technology Daxx, a novel fas-binding protein that activates jnk and apoptosis
NZ500045A (en) 1997-04-18 2001-02-23 Cephalon Inc Peptidyl-2-amino-1-hydroxyalkanesulfonic acid cysteine protease inhibitors
EP1002061A1 (en) 1997-07-04 2000-05-24 Novo Nordisk A/S FAMILY 6 ENDO-1,4-$g(b)-GLUCANASE VARIANTS AND CLEANING COMPOSIT IONS CONTAINING THEM
WO1999027083A1 (en) 1997-11-24 1999-06-03 Novo Nordisk A/S PECTIN DEGRADING ENZYMES FROM $i(BACILLUS LICHENIFORMIS)
AU1482599A (en) 1997-11-24 1999-06-15 Novo Nordisk A/S Novel pectate lyases
US6124127A (en) 1997-11-24 2000-09-26 Novo Nordisk A/S Pectate lyase
EP2284272B1 (en) 1998-06-10 2014-08-13 Novozymes A/S Mannanases
KR20010108379A (ko) 1999-03-31 2001-12-07 피아 스타르 리파제 변이체
CA2394971C (en) 1999-12-15 2016-01-19 Novozymes A/S Subtilase variants having an improved wash performance on egg stains
KR20020077421A (ko) 2000-02-08 2002-10-11 에프. 호프만-라 로슈 아게 동물 사료에서 산-안정성 서브틸리신 프로테아제의 사용
DE60137510D1 (de) 2000-07-19 2009-03-12 Novozymes As Zellwandabbauende enzymvarianten
GB2365018A (en) 2000-07-24 2002-02-13 Procter & Gamble Water soluble pouches
EP1389228B1 (en) 2001-05-14 2009-03-11 Novozymes A/S Detergent compositions comprising bacillus subtilis pectate lyases
GB0114847D0 (en) 2001-06-18 2001-08-08 Unilever Plc Water soluble package and liquid contents thereof
DK200101090A (da) 2001-07-12 2001-08-16 Novozymes As Subtilase variants
GB0207430D0 (en) 2002-03-28 2002-05-08 Unilever Plc Liquid cleaning compositionsand their use
CN100482791C (zh) 2002-05-14 2009-04-29 诺和酶股份有限公司 果胶酸裂解酶变体
CN102766545B (zh) 2003-05-07 2014-08-06 诺维信公司 变体枯草杆菌蛋白酶（枯草杆菌酶）
ES2629332T3 (es) 2006-01-23 2017-08-08 Novozymes A/S Variantes de lipasa
US20080009431A1 (en) 2006-06-05 2008-01-10 Jean-Pol Boutique Enzyme stabilization
BRPI0712344A2 (pt) 2006-06-05 2012-01-31 Procter & Gamble estabilização de enzimas
ATE503826T1 (de) 2007-07-02 2011-04-15 Procter & Gamble Mehrkammerbeutel enthaltend waschmittel
EP2250259B1 (en) 2008-02-29 2016-08-31 Novozymes A/S Polypeptides having lipase activity and polynucleotides encoding same
MX2010010348A (es) 2008-03-26 2010-11-09 Novozymes As Composiciones de enzimas liquidas estabilizadas.
PL2310483T3 (pl) 2008-07-07 2016-09-30 Kompozycja enzymatyczna zawierająca cząstki polimerowe zawierające enzym
WO2010055052A1 (en) 2008-11-13 2010-05-20 Novozymes A/S Detergent composition
US20120149625A1 (en) 2009-09-25 2012-06-14 Novozymes A/S Detergent Composition
MX339581B (es) 2009-09-25 2016-06-01 Novozymes As Variantes de subtilasa.

Also Published As

Publication number Publication date
CN107858217A (zh) 2018-03-30
EP2726592A1 (en) 2014-05-07
KR101956895B1 (ko) 2019-03-12
US20140336098A1 (en) 2014-11-13
KR20140053102A (ko) 2014-05-07
JP6927920B2 (ja) 2021-09-01
WO2013004636A1 (en) 2013-01-10
JP2018139598A (ja) 2018-09-13
DK2726592T3 (en) 2015-07-06
ZA201400692B (en) 2015-05-27
MX2014000060A (es) 2014-05-01
BR112013033811A2 (pt) 2017-02-14
US9085750B2 (en) 2015-07-21
CN107858217B (zh) 2021-03-23
AU2012280414B2 (en) 2015-06-25
IN2014CN00700A (es) 2015-04-03
RU2014103501A (ru) 2015-08-10
RU2635355C2 (ru) 2017-11-13
AU2012280414A1 (en) 2014-01-16
CN103649292B (zh) 2017-11-28
MX346246B (es) 2017-03-13
EP2726592B1 (en) 2015-04-01
JP6334396B2 (ja) 2018-05-30
CN103649292A (zh) 2014-03-19
JP2014525739A (ja) 2014-10-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2012280414B2 (en) Stabilized subtilisin composition
EP2726590B1 (en) Liquid detergent composition
EP3725797B1 (en) Stabilized liquid enzyme compositions
AU2010299953B2 (en) Detergent composition
ES2419234T3 (es) Composiciones detergentes y uso de combinaciones de enzimas en las mismas
JP2016516452A (ja) 多酵素組成物を用いた産業用および施設用の洗濯
EP2970830A1 (en) Enzyme and inhibitor containing water-soluble films
CN106471110A (zh) 改进的非蛋白酶类酶稳定化
CN110268053A (zh) 包封的固体酶产品
US12570931B2 (en) Dishwashing agent with bleaching catalyst and Bacillus gibsonii protease
EP2799533A1 (en) Protease and inhibitor containing water-soluble films