ES2553575T3 - Polinucleótidos que codifican polipéptidos antigénicos del VIH tipo C, polipéptidos y usos de los mismos - Google Patents

Polinucleótidos que codifican polipéptidos antigénicos del VIH tipo C, polipéptidos y usos de los mismos Download PDF

Info

Publication number
ES2553575T3
ES2553575T3 ES10183206.1T ES10183206T ES2553575T3 ES 2553575 T3 ES2553575 T3 ES 2553575T3 ES 10183206 T ES10183206 T ES 10183206T ES 2553575 T3 ES2553575 T3 ES 2553575T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
sequence
synthetic
polypeptides
sequences
env
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES10183206.1T
Other languages
English (en)
Inventor
Jan Zur Megede
Susan Barnett
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Novartis Vaccines and Diagnostics Inc
Original Assignee
Novartis Vaccines and Diagnostics Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novartis Vaccines and Diagnostics Inc filed Critical Novartis Vaccines and Diagnostics Inc
Application granted granted Critical
Publication of ES2553575T3 publication Critical patent/ES2553575T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
    • C12N2740/16111—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV env
    • C12N2740/16122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
    • C12N2740/16211—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV gagpol
    • C12N2740/16222—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
    • C12N2740/16311—Human Immunodeficiency Virus, HIV concerning HIV regulatory proteins
    • C12N2740/16322—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Un casete de expresión que comprende: (a) un polinucleótido que comprende al menos 480 nucleótidos contiguos de SEC ID Nº: 132; o (b) un polinucleótido que tiene más del 98 % de identidad de secuencias con (a).

Description

imagen1
imagen2
imagen3
imagen4
imagen5
5
15
25
35
45
55
65
transcripción, señales de terminación de la transcripción, secuencias de poliadenilación, secuencias para la optimización del inicio de la traducción, y secuencias de terminación de la traducción. Promotores de la transcripción a modo de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, aquellos derivados de CMV, CMV+intrón A, SV40, RSV, VIH-Ltr, MML V-1tr y metalotioneína.
En otro aspecto, la invención incluye células que comprenden uno o más de los casetes de expresión de la presente invención en las que las secuencias de polinucleótidos están operativamente enlazadas a elementos de control compatibles con la expresión en la célula seleccionada. En una realización, tales células son células de mamífero. Células de mamífero a modo de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, células BHK, VERO, HT1080,293, RD, COS7 y CHO. Otras células, tipos de células, tipos de tejido, etc., que pueden ser útiles en la práctica de la presente invención incluyen, pero no se limitan a, aquellos obtenidos de lo siguiente: insectos (por ejemplo, Trichoplusia ni (Tn5) y Sf9), bacterias, levadura, plantas, células presentadoras de antígeno (por ejemplo, macrófago, monocitos, células dendríticas, linfocitos B, linfocitos T, citoblastos, y células progenitoras de los mismos), células primarias, células inmortalizadas, células derivadas de tumor.
En otro aspecto, la presente invención incluye composiciones para generar una respuesta inmunológica, en la que la composición normalmente comprende al menos uno de los casetes de expresión de la presente invención y puede, por ejemplo, contener combinaciones de casetes de expresión (tales como uno o más casetes de expresión que llevan un polinucleótido que codifica polipéptidos Pol, uno o más casetes de expresión que llevan un polinucleótido que codifica polipéptidos Gag, uno o más casetes de expresión que llevan polinucleótidos que codifican polipéptidos auxiliares (por ejemplo, vpu, vpr, nef, vif, tat, rev nativos o sintéticos), además de uno o más casetes de expresión que llevan un polinucleótido que codifica polipéptidos Env como se define en las reivindicaciones. Tales composiciones pueden contener adicionalmente un adyuvante o adyuvantes. Las composiciones también pueden contener uno o más polipéptidos del VIH tipo C. Los polipéptidos del VIH tipo C pueden corresponderse con los polipéptidos codificados por el (los) casete(s) de expresión en la composición, o pueden ser diferentes de aquellos codificados por los casetes de expresión. Un ejemplo del polinucleótido en el casete de expresión que codifica el mismo polipéptido que está siendo proporcionado en la composición es del siguiente modo: el polinucleótido en el casete de expresión codifica el polipéptido Gag de la Figura 1 (SEC ID Nº: 3) y el polipéptido (SEC ID Nº: 17) es el polipéptido codificado por la secuencia mostrada en la Figura 1. Un ejemplo del polinucleótido en el casete de expresión que codifica un polipéptido diferente del que está siendo proporcionado en la composición es del siguiente modo: un casete de expresión que tiene un polinucleótido que codifica un polipéptido Gag-polimerasa, y el polipéptido proporcionado en la composición puede ser un polipéptido Gag y/o Gag-proteasa. Si las composiciones contienen ambos casetes de expresión (o polinucleótidos) y polipéptidos, diversos casetes de expresión de la presente divulgación pueden mezclarse y/o hacerse coincidir con diversos polipéptidos del VIH tipo C descritos en el presente documento.
En otro aspecto, la presente divulgación incluye métodos de inmunización de un sujeto. En el método, cualquiera de las composiciones anteriormente descritas se en el sujeto en condiciones que son compatibles con la expresión del (de los) casete(s) de expresión en el sujeto. En una realización, los casetes de expresión (o polinucleótido) pueden introducirse usando un vector de administración génica. El vector de administración génica puede, por ejemplo, ser un vector no viral o un vector viral. Vectores virales a modo de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, vectores derivados del virus de Sindbis, vectores retrovirales y vectores lentivirales. También pueden administrarse composiciones útiles para generar una respuesta inmunológica usando un vehículo en partículas. Además, tales composiciones pueden recubrirse sobre, por ejemplo, partículas de oro o de tungsteno y administrarse las partículas recubiertas al sujeto usando, por ejemplo, una pistola de genes. Las composiciones también pueden formularse como liposomas. El sujeto puede ser un mamífero y puede, por ejemplo, ser un ser humano.
En otro aspecto, la divulgación incluye métodos de generación de una respuesta inmunitaria en un sujeto. Cualquiera de los casetes de expresión descritos en el presente documento puede expresarse en una célula adecuada para proporcionar la expresión de polipéptidos del VIH tipo C codificados por los polinucleótidos de la presente divulgación. El (Los) polipéptido(s) se aíslan entonces (por ejemplo, se purifican sustancialmente) y se administran al sujeto en una cantidad suficiente para provocar una respuesta inmunitaria. Los métodos pueden comprender la administración de uno o más de los casetes de expresión o polinucleótidos de la presente divulgación, usando cualquiera de las técnicas de administración génica descritas en el presente documento. Los métodos pueden comprender la co-administración de uno o más de los casetes de expresión o polinucleótidos de la presente divulgación y uno o más polipéptidos, en los que los polipéptidos pueden expresarse a partir de de estos polinucleótidos o pueden ser otros polipéptidos del VIH subtipo C. Por tanto, los métodos pueden comprender la coadministración de múltiples casetes de expresión o polinucleótidos de la presente divulgación. Además, los métodos pueden comprender la co-administración de múltiples polipéptidos, por ejemplo, polipéptidos expresados a partir de los polinucleótidos de la presente divulgación y/u otros polipéptidos del VIH subtipo C.
La divulgación incluye adicionalmente métodos de generación de una respuesta inmunitaria en un sujeto, en los que células de un sujeto se transfectan con cualquiera de los casetes de expresión o polinucleótidos anteriormente descritos, en condiciones que permiten la expresión de un polinucleótido seleccionado y la producción de un polipéptido de interés (por ejemplo, codificado por cualquier casete de expresión de la presente divulgación). Por este método se provoca una respuesta inmunológica al polipéptido en el sujeto. La transfección de las células puede
7
imagen6
imagen7
imagen8
imagen9
imagen10
imagen11
imagen12
imagen13
imagen14
imagen15
imagen16
imagen17
imagen18
imagen19
imagen20
imagen21
imagen22
imagen23
imagen24
imagen25
imagen26
imagen27
imagen28
imagen29
imagen30
imagen31
imagen32
imagen33
imagen34
imagen35
imagen36
imagen37
imagen38
imagen39
imagen40
imagen41
imagen42
imagen43
Tabla C
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
Nombre
SEQ ID Descripción
C4_Env_TV1_C_ZA_opt short
46 secuencia sintética de corta Env "región común"
C4_Env_TV1_C_ZA_opt
47 secuencia sintética de Env "región común"
C4_Env_TV1_C_ZA_wt
48 tipo salvaje secuencia 8_5_TV1_C.ZA Env
Envgp160_TV1_C_ZAopt
49 gp160 sintético Env
Envgp160_TV1_C_ZAwt
50 tipo salvaje secuencia gp160 8_5_TV1_C.ZA Env
Gag_TV1_C_ZAopt
51 secuencia sintética de la mordaza
Gag_TV1_C_ZAwt
52 tipo salvaje secuencia 8_5_TV1_C.ZA Gag
Gag_TV1_ZA_MHRopt
53 secuencia sintética de Gag principales regiones de homología
Gag_TV1_ZA_MHRwt
54 Gag_TV1_ZA_MHRwt 54 de tipo salvaje 8_5_TV1_C.ZA Gag importante secuencia de la región
Nef_TV1_C_ZAopt
55 secuencia sintética de Nef
Nef_TV1_C_ZAwt
56 tipo salvaje secuencia 8_5_TV1_C.ZA Nef
NefD125G_TVI_C_ZAopt
57 secuencia sintética de Nef, incluyendo mutación en la posición 125 resultante en producto del gen no funcional
p15RNaseH_TV1_C_ZAopt
58 secuencia sintética de RNAseH (p15 de Pol)
p15RNaseH_TV1_C_ZAwt
59 tipo salvaje secuencia 8_5_TV1_C.ZA RNAseH
p31Int_TV1_C_ZAopt
60 secuencia sintética de la integrasa (p31 de Pol)
p31Int_TV1_C_ZAwt
61 tipo salvaje secuencia 8_5_TV1_C.ZA integrasa
Po1_TV1_C_ZAopt
62 secuencia sintética de Pol
Pol_TV1_C_ZAwt
63 tipo salvaje secuencia 8_5_TV1_C.ZA Pol
Prot_TV1_C_ZAopt
64 secuencia sintética de Prot
Prot_TV1_C_ZAwt
65 tipo salvaje secuencia 8_5_TV1_C.ZA Prot
Protina_TV1_C_ZAopt
66 secuencia sintética de Prot incluyendo mutación que resulta en la inactivación de la proteasa
Protma_TV1_C_ZAwt
67 tipo salvaje secuencia 8_5_TV1_C.ZA Prot, incluyendo la mutación que resulta en la inactivación de la proteasa.
ProtinaRTmut_TV1_C_ZAo p
68 secuencia sintética de Prot y la transcriptasa inversa (RT), incluyendo la mutación que resulta en la inactivación de la proteasa y la mutación que resulta en la inactivación de RT.
ProtinaRTmut_TV1_C_ZA wt
69 tipo salvaje 8_5_TV1_C.ZA Prot y RT, la mutación que resulta en la inactivación de la proteasa y la mutación que resulta en la inactivación de RT.
ProtwtRTwt_TV1_C_ZAopt
70 secuencias sintéticas de Prot y RT
ProtwtRTwt_TV1_C_ZAwt
71 tipo salvaje 8_5_TV1_C.ZA Prot y RT
RevExon1_TV1_C_ZAopt
72 secuencia sintética del exón 1 de Rev
RevExon1_TV1_C_ZAwt
73 tipo salvaje 8_5_TV1_C.ZA del exón 1 de Rev
RevExon2_TV1_C_ZAopt-2
74 secuencia sintética del exón 2 de Rev
RevExon2_TV1_C_ZAwt
75 tipo salvaje 8_5_TV1_C.ZA del exón 2 de Rev
RT_TV1_C_ZAopt
76 secuencia sintética de RT
RT_TV1_C_ZAwt
77 tipo salvaje 8_5_TV1_C.ZA RT
RTmut_TV1_C_ZAopt
78 secuencia sintética de RT, incluyendo la mutación que resulta en la inactivación de RT
RTmut_TV1_C_ZAwt
79 tipo salvaje 8_5_TV1_C.ZA RT, incluyendo la mutación que resulta en la inactivación de RT
TatC22Exon1_TV1_C_ZAo pt
80 secuencia sintética del exón 1 de Tat, incluyendo la mutación que resulta en producto del gen Tat no funcional
TatExon1_TV1_C_ZAopt
81 secuencia sintética del exón 1 de Tat
TatExon1_TV1_C_ZAwt
82 tipo salvaje 8_5_TV1_C.ZA exón 1 de Tat
TatExon2_TV1_C_ZAopt
83 secuencia sintética del exón 2 de Tat
TatExon2_TV1_C_ZAwt
84 tipo salvaje 8_5_TV1_C.ZA exón 2 de Tat
Vif_TV1_C_ZAopt
85 secuencia sintética de Vif
VifTV1_C_ZAwt
86 tipo salvaje 8_5_TV1_C.ZA Vif
Vpr_TV1_C_ZAopt
87 secuencia sintética de VPR
Vpr_TV1_C_ZAwt
88 tipo salvaje 8_5_TV1_C.ZA VPR
Vpu_TV1_C_ZAopt
89 secuencia sintética de Vpu
Vpu_TV1_C_ZAwt
90 tipo salvaje 8_5_TV1_C.ZA Vpu
revexon1_2 TV1 C ZAopt
91 secuencia sintética de los exones 1 y 2 de Rev
RevExon1_2_TV1_C_ZAwt
92 tipo salvaje 8_5_TV1_C.ZA Rev (exones 1 y 2)
TatC22Exon1_2_TV1_C_Z Aopt
93 secuencia sintética de los exones 1 y 2 de Tat, incluyendo la mutación en el exón 1 que resulta en producto del gen Tat no funcional
46
(continuación)
Nombre
SEQ ID Descripción
TatExon1_2_TV1_C_ZAopt
94 secuencia sintética de los exones 1 y 2 de Tat
TatExon1_2_TV1_C_ZAwt
95 tipo salvaje 8_5_TV1_C.ZA Tat (exones 1 y 2)
NefD125G-Myr_TV1_C_ZAopt
96 secuencia sintética de Nef, incluyendo la eliminación de la mutación sitio de miristoilación.
Tabla D
Nombre
SEQ ID Descripción
gp120mod.TV1.delV2
119 secuencia sintética de gp120 Env, incluido el borrado V2 y secuencias líder modificados derivados de secuencias 8_2_TV1_C.ZA de tipo salvaje
gp140mod.TV1.delV2
120 secuencia sintética de gp140 Env, incluido el borrado V2 y secuencias líder modificados derivados de secuencias 8_2_TV1_C.ZA de tipo salvaje
gp140mod.TV1.mut7.delV2
121 secuencia sintética de gp140 Env, incluido el borrado V2 y mutación en sitio de corte y secuencias líder modificados derivados de secuencias 8_2_TV1_C.ZA de tipo salvaje
gp160mod.TV1.delV1V2
122 secuencia sintética de Env gp160, incluyendo V1 / V2 eliminación y líder modificado derivado de secuencias 8_2_TV1_C.ZA de tipo salvaje
gp160mod.TV1.delV2
123 secuencia sintética de gp160 Env, incluido el borrado V2 y secuencias líder modificados derivados de secuencias 8_2_TV1_C.ZA de tipo salvaje
gp160mod.TV1.mut7.delV2
124 secuencia sintética de Env gp 160, incluido el borrado V2; una mutación en sitio de escisión; y secuencias líder modificados derivados de secuencias 8_2_TV1_C.ZA de tipo salvaje
gp160mod.TV1.tpa1
125 secuencia sintética de Env gp160, líder TPA1
gp160mod.TV1
126 Secuencia sintética de Env gp160, TPA1 Líder
gp160mod.TV1.wtLnative
127 secuencia sintética de Env gp160, incluyendo tipo salvaje 8_2_TV1_C.ZA (sin modificar) líder
gp140.mod.TV1.tpa1
131 secuencia sintética de Env gp140, líder TPA1
gp140mod.TV1
132 secuencia sintética de gp140 Env, incluyendo secuencias líder modificados derivados de secuencias 8_2_TV1_C.ZA de tipo salvaje
gp140mod.TV1.wtLnative
133 secuencia sintética de Env gp120, incluyendo tipo salvaje 8_2_TV1_C.ZA (sin modificar) secuencia líder.
15
25
35
Como se observa anteriormente, las construcciones que codifican Env pueden prepararse usando cualquiera de la longitud completa de las construcciones de gp160. Por ejemplo, se preparó una forma de gp140 (SEC ID Nº: 132)
45 truncando gp160 (SEC ID Nº: 126) en el nucleótido 2064; se preparó gp120 truncando gp160 (SEC ID Nº: 126) en el nucleótido 1551 (SEC ID Nº: 126). Pueden prepararse formas de gp140 y gp120 adicionales usando los métodos descritos en el presente documento. Normalmente se añaden uno o más codones de terminación (por ejemplo, nucleótidos 2608 a 2610 de SEC ID Nº: 126). Además, la secuencia conductora no mutante puede modificarse y/o sustituirse con otras secuencias conductoras (por ejemplo, secuencias conductoras de TPA1).
Así, el polipéptido gp160 incluye las secuencias codificantes para gp120 y gp41. El polipéptido gp41 comprende varios dominios que incluyen un dominio de oligomerización (OD) y un dominio que atraviesa la membrana de un lado a otro (TM). En la envuelta nativa, el dominio de oligomerización se requiere para la asociación no covalente de tres polipéptidos gp41 para formar una estructura trímera: mediante interacciones no covalentes con el trímero gp41 55 (y consigo mismo), los polipéptidos gp120 también están organizados en una estructura trimérica. Existe un sitio de escisión (o sitios de escisión) aproximadamente entre las secuencias de polipéptidos para gp 120 y las secuencias de polipéptidos correspondientes a gp41. Este (Estos) sitio(s) de escisión puede(n) mutarse para prevenir la escisión en el sitio. El polipéptido resultante gp140 se corresponde con una forma truncada de gp160 en la que se ha delecionado el dominio que atraviesa la membrana de un lado a otro de gp41. Este polipéptido gp140 puede existir en tanto formas monoméricas como oligoméricas (es decir, trímeras) en virtud de la presencia del dominio de oligomerización en el resto de gp41. En la situación en la que el sitio de escisión se ha mutado para prevenir la escisión y la porción transmembranaria de gp41 se ha delecionado, el producto de polipéptido resultante se designa gp140 “mutado” (por ejemplo, gp140.mut). Como será evidente para aquellos en el campo, el sitio de escisión puede mutarse en una variedad de formas. En las construcciones a modo de ejemplo descritas en el presente documento
65 (por ejemplo, SEC ID Nº: 121 y SEC ID Nº: 124), la mutación en el sitio de escisión de gp120/gp41 cambia la secuencia de aminoácidos no mutante IKR_R_WQREKR (SEC ID Nº: 129) a ISSWQSEKS (SEC ID Nº: 130).
47 5
15
25
35
45
55
65
En todavía otros aspectos, se delecionaron región (regiones) hipervariable(s), se eliminaron sitios de N-glicosilación y/o se mutaron sitios de escisión. Construcciones a modo de ejemplo que tienen deleciones de la región variable (V1 y/o V2), se construyeron deleciones V2 delecionando nucleótidos de aproximadamente 499 a aproximadamente 593 (con respecto a SEC ID Nº: 128) y se construyeron deleciones V1/V2 delecionando nucleótidos de aproximadamente 375 a aproximadamente 602 (con respecto a SEC ID Nº: 128). Las localizaciones relativas de las regiones V1 y/o V2 también pueden determinarse fácilmente por el alineamiento con las regiones mostradas en la Tabla A. La Tabla E muestra secuencias no mutantes y sintéticas derivadas de la cepa del VIH tipo C sudafricana 12-5_1_TV2_C.ZA.
Tabla E
Nombre
SEQ ID Descripción
Envgp160_TV2_C_ZAopt
97 secuencia sintética de gp160 Env
Envgp160_TV2_C_ZAwt
98 tipo salvaje 12-5_1_TV2_C.ZA Env gp160.
Gag_TV2_C_ZAopt
99 secuencia sintética de la mordaza
Gag_TV2_C_ZAwt
100 tipo salvaje 12-5_1_TV2_C.ZA Gag
Nef _V2_C_ZAopt
101 secuencia sintética de Nef
Nef_TV2_C_ZAwt
102 tipo salvaje 12-5_1_TV2_C.ZA Nef
Pol_TV2_C_ZAopt
103 secuencia sintética de Pol
Pol_TV2_C_ZAwt
104 tipo salvaje 12-5_1_TV2_C.ZA de Pol
RevExon1TV2_C_ZAopt
105 secuencia sintética del exón 1 de Rev
RevExonl_TV2_C_ZAwt
106 tipo salvaje 12-5_1_TV2_C.ZA del exón 1 de Rev
RevExon2_TV2_C_ZAopt
107 secuencia sintética del exón 2 de Rev
RevExon2_TV2_C_ZAwt
108 tipo salvaje 12-5_1_TV2_C.ZA del exón 2 de Rev
TatExon1_TV2_C_ZAopt
109 secuencia sintética del exón 1 de Tat
TatExon1_TV2_C_ZAwt
110 tipo salvaje 12-5_1_TV2_C.ZA del exón 1 de Tat
TatExon2_TV2_C_ZAopt
111 secuencia sintética del exón 2 de Tat
TatExon2_TV2_C_ZAwt
112 tipo salvaje 12-5_1_TV2_C.ZA del exón 2 de Tat
Vif_TV2_C_ZAopt
113 secuencia sintética de Vif
Vif_TV2_C_ZAwt
114 tipo salvaje 12-5_1_TV2_C.ZA de Vif
Vpr_TV2_C_ZAopt
115 secuencia sintética de VPR
Vpr_TV2_C_ZAwt
116 tipo salvaje 12-5_1_TV2_C.ZA de VPR
Vpu_TV2_C_ZAopt
117 secuencia sintética de Vpu
Vpu_TV2_C_ZAwt
118 tipo salvaje 12-5_1_TV2_C.ZA de Vpu
Será rápidamente evidente que pueden modificarse secuencias derivadas de cualquier cepa del VIH tipo C o clon como se describe en el presente documento con el fin de lograr modificaciones deseables en esa cepa. Adicionalmente, pueden construirse poliproteínas fusionando en marco dos o más secuencias de polinucleótidos que codifican productos de polipéptido o de péptido. Además, pueden producirse secuencias codificantes policistrónicas disponiendo dos o más secuencias de polinucleótidos que codifican productos de polipéptido adyacentes entre sí, normalmente bajo el control de un promotor, en las que cada secuencia codificante de polipéptidos puede modificarse para incluir secuencias para sitios internos de unión a ribosoma.
Las secuencias de la presente divulgación, por ejemplo, las secuencias de polinucleótidos (sintéticas) modificadas que codifican polipéptidos del VIH, pueden modificarse por deleciones, mutaciones puntuales, sustituciones, desplazamiento del marco, y/u otras modificaciones genéticas (por ejemplo, mutaciones que conducen a la inactivación de una actividad asociada a un polipéptido, por ejemplo, mutaciones que inactivan proteasa, tat, o actividad de transcriptasa inversa). Tales modificaciones se enseñan generalmente en la materia y pueden aplicarse en el contexto de las enseñanzas de la presente invención. Por ejemplo, sitios correspondientes a las “Regiones del genoma del VIH” enumeradas en la Tabla A pueden modificarse en las regiones correspondientes de las novedosas secuencias desveladas en el presente documento con el fin de lograr modificaciones deseables. Además, las secuencias de polinucleótidos (sintéticas) modificadas de la presente invención puede combinarse para su uso, por ejemplo, en una composición para generar una respuesta inmunitaria en un sujeto, en una variedad de formas, que incluyen, pero no se limitan a, las siguientes formas: múltiples casetes de expresión individuales que comprenden cada uno una secuencia de polinucleótidos de la presente invención (por ejemplo, un casete de expresión de gag, un casete de expresión de env y un casete de expresión de rev, o un casete de expresión de pol, un casete de expresión de vif y un casete de expresión de vpr, etc.); poliproteínas producidas por fusiones en el marco de múltiples polinucleótidos de la presente invención, y polinucleótidos policistrónicos producidos usando múltiples polinucleótidos de la presente divulgación.
Ejemplo 2
Ensayos de expresión para las secuencias codificantes sintéticas
A. Secuencias codificantes del VIH tipo C
48
Se clonan las secuencias codificantes del VIH subtipo C no mutantes (por ejemplo, de AF110965, AF110967, AF110968, AF110975, además de novedosas cepas sudafricanas 8_5_TV1_C.ZA, 8_2_TV1_C.ZA y 12-5_1_TV2_C.ZA) en vectores de expresión que tienen las mismas características que los vectores en los que se
5 clonan las secuencias sintéticas.
Las eficiencias de expresión para diversos vectores que llevan las secuencias no mutantes y sintéticas se evalúan del siguiente modo. Células de varias líneas celulares de mamífero (293, RD, COS-7 y CHO; todas obtenidas de la Colección Americana de Cultivos Tipo, 10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209) se transfectan con 2
10 µg de ADN en reactivo de transfección LT1 (PanVera Corporation, 545 Science Dr., Madison, WI). Las células se incuban durante 5 horas en medio de suero reducido (Opti-MEM, Gibco-BRL, Gaithersburg, MD). El medio se sustituye entonces por medio normal del siguiente modo: células 293, IMDM, 10 % de suero de ternero fetal, 2 % de glutamina (BioWhittaker, Walkersville, MD); células RD y COS-7, D-MEM, 10 % de suero de ternero fetal, 2 % de glutamina (Opti-MEM, Gibco-BRL, Gaithersburg, MD); y células CHO, Ham's F-12, 10 % de suero de ternero fetal, 2
15 % de glutamina (Opti-MEM, Gibco-BRL, Gaithersburg, MD). Las células se incuban durante tanto 48 como 60 horas. Se recogen los lisados celulares como se describe más adelante en el Ejemplo 3. Se recogen los sobrenadantes y se filtran a través de filtros de jeringa de 0,45 µm. Los sobrenadantes se evalúan usando placas de 96 pocillos recubiertas con un anticuerpo monoclonal murino dirigido contra el antígeno del VIH, por ejemplo, un ensayo p24 de Coulter (Coulter Corporation, Hialeah, FL, US). El antígeno del VIH-1 se une a los pocillos recubiertos. Anticuerpos
20 biotinilados contra el VIH reconocen el antígeno unido. La estreptavidina-peroxidasa de rábano picante conjugada reacciona con la biotina. El color se desarrolla de la reacción de peroxidasa con el sustrato TMB. La reacción se termina mediante la adición de H2SO4 4 N. La intensidad del color es directamente proporcional a la cantidad de antígeno del VIH en una muestra.
25 Casetes de expresión del VIH tipo C sintéticos proporcionan un espectacular aumento en la producción de sus productos de proteína, con respecto a las secuencias nativas (subtipo C no mutante), cuando se expresan en una variedad de líneas celulares.
B. Secuencias conductoras del péptido señal
30 Se probó la capacidad de diversas secuencias conductoras para conducir la expresión transfectando células con casetes de expresión que codifican Env no mutantes o sintéticos operativamente enlazados a diferentes secuencias conductoras y evaluar la expresión del polipéptido Env por ELISA o transferencia Western. La secuencia de aminoácidos y de nucleótidos de diversas secuencias conductoras de péptido señal se muestran en la Tabla 4.
35 Tabla 4
40
45
50
55
60
Líder
Secuencia de Aminoácidos Secuencia ADN
WTnative (8_2_TV 1_C.ZA)
MRVMGTQKNCQQWWIWGILGFWMLMIC imagen44
WTmod (8_2_TV 1_C.ZA)
MRVMGTQKNCQQWWIWGILGFWMLMIC
Tpa1
MDAMKRGLCCVLLLCGAVFVSPS AS
Tpa2
MDAMKRGLCCVLLLCGAVFVSPS imagen45
49
Se transfectaron células 293 transitoriamente usando métodos convencionales con construcciones nativas y modificadas en la secuencia que codifican las formas de gp120 y gp140 de la envoltura de 8_2_TV1_C.ZA (TV1c8.2). La proteína Env se midió en lisados celulares y sobrenadantes usando un ELISA de captura de Env interno. Los resultados se muestran en la Tabla 5 más adelante e indican que la secuencia conductora de péptido señal no mutante de TV1c8.2 puede usarse para expresar eficazmente la proteína de la envuelta codificada a niveles que son mejores o comparables a aquellos observados usando las secuencias conductoras de tpa heterólogo. Además, el conductor TV1c8.2 trabaja en sus formas nativas o modificadas en la secuencia y puede usarse con genes env nativos o modificados en la secuencia. Todas las construcciones se probaron después de clonar los casetes de gen en los sitios EcoR1 y Xho1 del vector de expresión pCMVlink.
Tabla 5
imagen46
Se subclonaron los casetes del gen de variante de la envoltura TV1c8.2 modificado en la secuencia en un vector de
35 expresión pCMV de Chiron para la derivación de líneas celulares de mamífero estables. Se derivaron líneas celulares CHO estables que expresan las proteínas de la envuelta TV1c8.2 usando métodos estándar de transfección, amplificación con metotrexato y cribado. Se encontró que estas líneas celulares secretaban niveles de proteína de la envuelta que fueron comparables a aquellos observados para proteínas expresadas usando las secuencias conductoras de tpa. Resultados representativos se muestran en la Tabla 6 para dos clones de la línea celular que expresan gp120 TV1c8.2; se comparan con dos clones de referencia que expresan gp120 subtipo B SF162 derivado de un modo similar, pero usando el conductor tpa. Las concentraciones de proteína se determinaron siguiendo densitometría de geles escaneados de proteínas semi-purificadas. Se generaron curvas patrón usando una preparación altamente purificada y bien caracterizada de la proteína gp120 SF2 y se determinaron las concentraciones de las proteínas de prueba.
45 Tabla 6
Línea celular CHO
Clon # Expresión (ng/ml)
gp120 SF162
Clon 65 921
Clon 71
972
gp120TV1.C8.2
Clon 159 1977
Clon 210
1920
55 Los resultados también se confirmaron por análisis de transferencia Western, esencialmente como se describe en el Ejemplo 3. Ejemplo 3 Análisis de transferencia Western de la expresión
A. Secuencias codificantes del VIH tipo C
Se transfectan células 293 humanas como se describe en el Ejemplo 2 con vectores basados en pCMV que 65 contienen casetes de expresión del VIH tipo C nativos o sintéticos. Las células se cultivan durante 60 horas después de la transfección. Se preparan sobrenadantes como se ha descrito. Se preparan lisados celulares del siguiente
50
imagen47
5
15
25
35
45
55
65
Tabla 1
Grupo
Gag o Env Expresión Casete La concentración de ADN plásmido Gag o Env (µg) Imnunizado tiempo (semanas)
1
Sintético 20 01,4
2
Sintético 2 0.4
3
Sintético 0.2 0.4
4
Sintético 0.02 0.4
5
Sintético 0.002 0.4
6
Sintético 20 0
7
Sintético 2 0
8
Sintético 0.2 0
9
Sintético 0.02 0
10
Sintético 0.002 0
11
Nativo 20 0.4
12
Nativo 2 0.4
13
Nativo 0.2 0.4
14
Nativo 0.02 0.4
15
Nativo 0.002 0.4
16
Nativo 20 0
17
Nativo 2 0
18
Nativo 0.2 0
19
Nativo 0.02 0
20
Nativo 0.002 0
1 = inmunización inicial en "semana 0"
Se extrae sangre de los grupos 1-5 y 11-15 en la semana 0 (antes de la inmunización), semana 4, semana 6, semana 8 y semana 12. Se extrae sangre de los grupos 6-20 y 16-20 en la semana 0 (antes de la inmunización) y en la semana 4.
B. Respuesta inmunitaria humoral
La respuesta inmunitaria humoral se comprueba con ELISA de anticuerpos anti-VIH (enzimoinmunoanálisis de adsorción) de los sueros de ratones 0 y 4 semanas después de la inmunización (grupos 5-12) y, además, 6 y 8 semanas después de la inmunización, respectivamente, 2 y 4 semanas después de la segunda inmunización (grupos 1-4).
Los títulos de anticuerpos de los sueros se determinan usando ELISA de anticuerpos anti-polipéptidos VIH apropiados (por ejemplo, anti-Pol, anti-Gag, anti-Env, anti-Vif, anti-Vpu, etc.). Brevemente, sueros de ratones inmunizados se criban para anticuerpos dirigidos contra las proteínas del VIH (por ejemplo, proteína Gag p55, una proteína Env, por ejemplo, gp160 o gp120 o una proteína Pol, por ejemplo, p6, prot o RT, etc). Se recubren placas de microtitulación de ELISA con 0,2 µg de proteína del VIH por pocillo durante la noche y se lavan cuatro veces; posteriormente, el bloqueo se hace con PBS-0,2 % de Tween (Sigma) durante 2 horas. Después de eliminar la disolución de bloqueo, se añaden 100 µl de suero de ratón diluido. Lo sueros se prueban a 1/25 diluciones y por diluciones triples sucesivas, a partir de aquí. Las placas de microtitulación se lavan cuatro veces y se incuban con un anticuerpo secundario anti-IgG de ratón acoplado a peroxidasa (Pierce, Rockford, IL). Las placas de ELISA se lavan y se añade 100 µl de 3,3',5,5'-tetrametilbencidina (TMB; Pierce) por pocillo. La densidad óptica de cada pocillo se mide después de 15 minutos. Los títulos informados son el recíproco de la dilución de suero que dieron una densidad óptica al 50 % (D.O.).
Los casetes de expresión sintéticos proporcionarán una clara mejora de la inmunogenicidad con respecto a los casetes de expresión nativos.
C. Respuesta inmunitaria celular
La frecuencia de linfocitos T citotóxicos específicos (CTL) se evalúa por un ensayo de liberación de cromo estándar de células CD4 (Balb/c, CB6F1 y/o C3H) de ratón pulsadas con péptidos. Se usan células CD-8 infectadas con virus de la variolovacuna que expresan polipéptidos del VIH (por ejemplo, Pol, Gag o Env) como control positivo. Brevemente, se obtienen células del bazo (células efectoras, E) de los ratones inmunizados como se ha descrito anteriormente, se cultivan, se re-estimulan y se ensayan para actividad de CTL contra células diana pulsadas con péptidos Gag como se ha descrito (Doe, B., y Walker, C.M., AIDS 10(7):793-794, 1996). La actividad citotóxica se mide en un ensayo de liberación de 51Cr patrón. Se cultivan células diana (T) con células efectoras (E) a diversas relaciones E:T durante 4 horas y se usan las cpm promedio de los pocillos por duplicado para calcular el porcentaje de liberación de 51Cr específica.
52
imagen48
imagen49
imagen50
imagen51
imagen52
imagen53

Claims (1)

  1. imagen1
ES10183206.1T 2000-07-05 2001-07-05 Polinucleótidos que codifican polipéptidos antigénicos del VIH tipo C, polipéptidos y usos de los mismos Expired - Lifetime ES2553575T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US09/610,313 US7935805B1 (en) 1998-12-31 2000-07-05 Polynucleotides encoding antigenic HIV Type C polypeptides, polypeptides and uses thereof
US610313 2000-07-05

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2553575T3 true ES2553575T3 (es) 2015-12-10

Family

ID=24444529

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES10183206.1T Expired - Lifetime ES2553575T3 (es) 2000-07-05 2001-07-05 Polinucleótidos que codifican polipéptidos antigénicos del VIH tipo C, polipéptidos y usos de los mismos

Country Status (10)

Country Link
US (4) US7935805B1 (es)
EP (3) EP2281832A3 (es)
JP (2) JP2004502445A (es)
AT (1) ATE478955T1 (es)
AU (1) AU2001273179A1 (es)
CA (1) CA2414374C (es)
DE (1) DE60142922D1 (es)
ES (1) ES2553575T3 (es)
WO (1) WO2002004493A2 (es)
ZA (2) ZA200403143B (es)

Families Citing this family (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2360347C (en) 1998-12-31 2013-05-07 Chiron Corporation Improved expression of hiv polypeptides and production of virus-like particles
US8623379B2 (en) * 2000-03-02 2014-01-07 Emory University Compositions and methods for generating an immune response
US6783939B2 (en) 2000-07-07 2004-08-31 Alphavax, Inc. Alphavirus vectors and virosomes with modified HIV genes for use in vaccines
KR100815888B1 (ko) * 2000-07-14 2008-03-21 더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실바니아 Ｈｉｖ 보조 단백질을 암호화하는 ｄｎａ 백신
MXPA03002640A (es) * 2000-09-28 2003-06-19 Chiron Corp Microparticulas para la distribucion de acidos nucleicos heterologos.
WO2003004657A1 (en) 2001-07-05 2003-01-16 Chiron Corporation Polynucleotides encoding antigenic hiv type b and/or type c polypeptides, polypeptides and uses thereof
AU2002320314A1 (en) * 2001-07-05 2003-01-21 Chiron, Corporation Polynucleotides encoding antigenic hiv type c polypeptides, polypeptides and uses thereof
GB0118367D0 (en) * 2001-07-27 2001-09-19 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel use
WO2003020876A2 (en) * 2001-08-31 2003-03-13 Chiron Corporation Polynucleotides encoding antigenic hiv type b polypeptides, polypeptides and uses thereof
WO2003023026A1 (en) 2001-09-06 2003-03-20 Alphavax, Inc. Alphavirus replicon vector systems
CN1606625A (zh) * 2001-10-31 2005-04-13 南非医学研究会 Hiv－1亚型分离株调节/附加基因及其修饰物和衍生物
US20030228327A1 (en) * 2001-11-05 2003-12-11 Lasher Alfred W. DNA-based plasmid formulations and vaccines and prophylactics containing the same
SI1506223T1 (sl) 2002-05-16 2006-04-30 Bavarian Nordic As Fuzijski protein HIV regulatornih/akcesorskih proteinov
CA2823937A1 (en) 2002-10-07 2004-04-22 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Hiv vaccine formulations
CN1791678A (zh) 2003-03-20 2006-06-21 阿尔法瓦克斯公司 改进的甲病毒复制子和辅助构建体
CA2525825A1 (en) * 2003-05-15 2005-01-27 Chiron Corporation Hiv polynucleotides and polypeptides derived from botswana mj4
PT1651666E (pt) 2003-07-11 2009-08-28 Alphavax Inc Vacinas de citomegalovírus à base de alfavírus
US7622125B2 (en) 2004-05-05 2009-11-24 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Polycistronic HIV vector constructs
EP2975139B1 (en) 2004-09-30 2019-11-06 Gen-Probe Incorporated Assay for detecting and quantifying hiv-1
AU2011253599B2 (en) * 2004-09-30 2013-12-12 Gen-Probe Incorporated Assay for detecting and quantifying HIV-1
CA2585672A1 (en) 2004-11-01 2006-05-11 Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. Combination approaches for generating immune responses
US7951377B2 (en) 2005-08-23 2011-05-31 Los Alamos National Security, Llc Mosaic clade M human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) envelope immunogens
GB0706914D0 (en) 2007-04-10 2007-05-16 Isis Innovation Novel adenovirus vectors
NZ582495A (en) 2007-06-21 2012-05-25 Alphavax Inc Promoterless cassettes for expression of alphavirus structural proteins
US20130052221A1 (en) 2010-02-26 2013-02-28 The Govt. of the U.S, as represented by The Sec. of The Dept. of Health and Human Services Dna-protein vaccination protocols
EP2780035A1 (en) 2011-11-14 2014-09-24 Novartis AG Immunogenic complexes of polyanionic carbomers and env polypeptides and methods of manufacture and use thereof
CN104853770A (zh) 2012-07-06 2015-08-19 诺华股份有限公司 免疫原性组合物及其应用
WO2016196471A1 (en) 2015-06-02 2016-12-08 Cooper Human Systems Llc Methods and compositions for treatment of hiv infection
GB201716181D0 (en) * 2017-10-04 2017-11-15 Univ Cape Town Recombinant mva with modified hiv-1 env
CA3145791A1 (en) 2019-07-16 2021-01-21 Gilead Sciences, Inc. Hiv vaccines and methods of making and using
KR20230131481A (ko) 2021-01-14 2023-09-13 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Hiv 백신 및 이의 사용 방법

Family Cites Families (179)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US604763A (en) * 1898-05-31 Brooch
US5326859A (en) 1979-10-30 1994-07-05 Juridical Foundation, Japanese Foundation For Cancer Research DNA and recombinant plasmid
US4405712A (en) 1981-07-01 1983-09-20 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services LTR-Vectors
AU561343B2 (en) 1981-10-19 1987-05-07 Genentech Inc. Human immune interferon by recombinant dna
US5364773A (en) 1991-03-07 1994-11-15 Virogenetics Corporation Genetically engineered vaccine strain
DE3377363D1 (en) 1982-03-31 1988-08-18 Ajinomoto Kk Gene coding for interleukin-2 polypeptide, recombinant dna carrying said gene, cell lines possessing the recombinant dna,and method for producing interleukin-2 using said cells
US4652639A (en) 1982-05-06 1987-03-24 Amgen Manufacture and expression of structural genes
US4853332A (en) 1982-10-19 1989-08-01 Cetus Corporation Structural genes, plasmids and transformed cells for producing cysteine depleted muteins of biologically active proteins
US4966843A (en) 1982-11-01 1990-10-30 Cetus Corporation Expression of interferon genes in Chinese hamster ovary cells
US4876197A (en) 1983-02-22 1989-10-24 Chiron Corporation Eukaryotic regulatable transcription
US4518584A (en) 1983-04-15 1985-05-21 Cetus Corporation Human recombinant interleukin-2 muteins
US4892743A (en) 1983-12-21 1990-01-09 Schering Corporation Novel hybrid interferon species
EP0165942A1 (en) 1983-12-23 1986-01-02 Monash University PRODUCTION OF HUMAN INTERFERON-$g(a)
AU594014B2 (en) 1984-03-21 1990-03-01 Research Corporation Technologies, Inc. Recombinant DNA molecules
US7815916B1 (en) 1984-08-22 2010-10-19 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Health And Human Services Cloning and expression of HTLV-III DNA
US5032510A (en) 1984-09-26 1991-07-16 Eli Lilly And Company Method for expression and secretion in bacillus
CA1341423C (en) 1984-10-31 2003-03-04 Paul A. Luciw Recombinant proteins of viruses associated with lymphadenopathy syndrome and/or acquired immune deficiency syndrome
US5036006A (en) 1984-11-13 1991-07-30 Cornell Research Foundation, Inc. Method for transporting substances into living cells and tissues and apparatus therefor
US5100792A (en) 1984-11-13 1992-03-31 Cornell Research Foundation, Inc. Method for transporting substances into living cells and tissues
US4945050A (en) 1984-11-13 1990-07-31 Cornell Research Foundation, Inc. Method for transporting substances into living cells and tissues and apparatus therefor
EP0203177A4 (en) 1984-11-29 1987-04-28 Scripps Clinic Res POLYPEPTIDES AND ANTIBODIES ASSOCIATED WITH VIRAL GLUCOPROTEINS WITHOUT GLUCOSE.
EP0187041B1 (en) 1984-12-24 1996-05-15 Genentech, Inc. Fusions of AIDS-related polypeptides
US4847201A (en) 1985-02-05 1989-07-11 Cetus Corporation DNA encoding for CSF-1 and accompanying recombinant systems
US5185444A (en) 1985-03-15 1993-02-09 Anti-Gene Deveopment Group Uncharged morpolino-based polymers having phosphorous containing chiral intersubunit linkages
AU5661386A (en) 1985-03-15 1986-10-13 Stirchak, E. Stereoregular polynucleotide-binding polymers
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
DK171119B1 (da) 1985-04-19 1996-06-17 Hoffmann La Roche AIDS-viruskappeprotein, ekspressionsvektor bærende viruskappeproteinet, transformanter transformeret med ekspressionsvektoren, fremgangsmåde til fremstilling af viruskappeproteinet, fremgangsmåde til detektion af AIDS-antistoffer, fremgangsmåde til bestemmelse af AIDS-virus, vaccine mod AIDS, antistoffer mod viruskappeproteinet samt anvendelse af dette til fremstilling af en vaccine og til testnin
US4871488A (en) 1985-04-22 1989-10-03 Albany Medical College Of Union University Reconstituting viral glycoproteins into large phospholipid vesicles
US4663161A (en) 1985-04-22 1987-05-05 Mannino Raphael J Liposome methods and compositions
US4810643A (en) 1985-08-23 1989-03-07 Kirin- Amgen Inc. Production of pluripotent granulocyte colony-stimulating factor
JPS63500636A (ja) 1985-08-23 1988-03-10 麒麟麦酒株式会社 多分化能性顆粒球コロニー刺激因子をコードするｄｎａ
US4777127A (en) 1985-09-30 1988-10-11 Labsystems Oy Human retrovirus-related products and methods of diagnosing and treating conditions associated with said retrovirus
EP0245362B1 (en) 1985-10-24 1994-06-29 Ronald C. Kennedy Synthetic peptides and use for diagnosis and vaccination for aids and arc
US5139941A (en) 1985-10-31 1992-08-18 University Of Florida Research Foundation, Inc. AAV transduction vectors
US5017691A (en) 1986-07-03 1991-05-21 Schering Corporation Mammalian interleukin-4
US4800159A (en) 1986-02-07 1989-01-24 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences
EP0242216A1 (en) 1986-04-16 1987-10-21 THE UNITED STATES OF AMERICA as represented by the Secretary United States Department of Commerce Non-cytopathic clone of Human T-Cell Lymphotropic Virus type III
US4861719A (en) 1986-04-25 1989-08-29 Fred Hutchinson Cancer Research Center DNA constructs for retrovirus packaging cell lines
US4879227A (en) 1986-05-06 1989-11-07 Genetics Institute, Inc. Production of a recombinant human colony stimulating factor
WO1988000471A1 (en) 1986-07-21 1988-01-28 Southwest Foundation For Biomedical Research Composition of matter and method of immunizing against viral causative agents of aids and arc
US5135855A (en) 1986-09-03 1992-08-04 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Rapid, versatile and simple system for expressing genes in eukaryotic cells
US4861707A (en) 1987-02-02 1989-08-29 E. I. Du Pont De Nemours And Company Human immunodeficiency virus antigen
GB8702816D0 (en) 1987-02-07 1987-03-11 Al Sumidaie A M K Obtaining retrovirus-containing fraction
US5219740A (en) 1987-02-13 1993-06-15 Fred Hutchinson Cancer Research Center Retroviral gene transfer into diploid fibroblasts for gene therapy
US4980289A (en) 1987-04-27 1990-12-25 Wisconsin Alumni Research Foundation Promoter deficient retroviral vector
US5256767A (en) 1987-06-10 1993-10-26 The Immune Response Corporation Retroviral antigens
CA1341074C (en) 1987-06-22 2000-08-08 Hans A. Thoma Hbv surface antigen particles, prepared by recombinant dna processes, composed of different epitopes, selected from the pre-s and s-peptides as a new vaccine
US5637677A (en) 1987-07-16 1997-06-10 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Biologically active compounds and methods of constructing and using the same
WO1989002277A2 (en) 1987-08-28 1989-03-23 Board Of Regents, The University Of Texas System Prophylaxis and therapy of acquired immunodeficiency syndrome
US5128319A (en) 1987-08-28 1992-07-07 Board Of Regents, The University Of Texas System Prophylaxis and therapy of acquired immunodeficiency syndrome
DE10399032I1 (de) 1987-08-28 2004-01-29 Health Research Inc Rekombinante Viren.
JPH02501192A (ja) 1987-09-04 1990-04-26 バイオジェン インコーポレイテッド 可溶性ｔ４蛋白を製造するためのｄｎａ配列、組換ｄｎａ分子および方法
JP3015383B2 (ja) 1987-09-11 2000-03-06 ホワイトヘツド・インスチチユート・フオー・バイオメデイカル・リサーチ 形質導入した線維芽およびそれらの使用
US5879907A (en) 1987-09-14 1999-03-09 Skandigen Ab Artificial gene coding for authentic human serum albumin, use thereof and method
PT88641B (pt) 1987-10-02 1993-04-30 Genentech Inc Metodo para a preparacao de uma variante de adesao
IL87902A0 (en) 1987-10-08 1989-03-31 Dana Farber Cancer Inst Inc Soluble human cd4 fragments and applications thereof
US4965195A (en) 1987-10-26 1990-10-23 Immunex Corp. Interleukin-7
US5683864A (en) 1987-11-18 1997-11-04 Chiron Corporation Combinations of hepatitis C virus (HCV) antigens for use in immunoassays for anti-HCV antibodies
US5714596A (en) 1987-11-18 1998-02-03 Chiron Corporation NANBV diagnostics: polynucleotides useful for screening for hepatitis C virus
US5712088A (en) 1987-11-18 1998-01-27 Chiron Corporation Methods for detecting Hepatitis C virus using polynucleotides specific for same
WO1989005349A1 (en) 1987-12-09 1989-06-15 The Australian National University Method of combating viral infections
US5179022A (en) 1988-02-29 1993-01-12 E. I. Du Pont De Nemours & Co. Biolistic apparatus for delivering substances into cells and tissues in a non-lethal manner
WO1989009271A1 (en) 1988-03-21 1989-10-05 Viagene, Inc. Recombinant retroviruses
US5204259A (en) * 1988-05-06 1993-04-20 Pharmacia Genetic Engineering, Inc. Methods and systems for producing HIV antigens
AP129A (en) 1988-06-03 1991-04-17 Smithkline Biologicals S A Expression of retrovirus gag protein eukaryotic cells
CA1340748C (en) 1988-07-13 1999-09-14 Stephen Oroszlan Synthetic hiv protease gene and method for its expression
JP3082204B2 (ja) 1988-09-01 2000-08-28 ホワイトヘッド・インスティチュート・フォー・バイオメディカル・リサーチ 両栄養性および環境栄養性宿主域を持つ組換え体レトロウイルス
ATE112687T1 (de) 1988-09-13 1994-10-15 Chiron Corp Mutanten des hiv-1 hüllproteins mit fehlenden hypervariabelen domänen.
KR900701836A (ko) 1988-10-03 1990-12-04 라메쉬 엘. 라탄 신규 hiv 단백질 및 aids의 진단, 예방 또는 치료에 유용한 펩티드
CA2003383A1 (en) 1988-11-23 1990-05-23 Sushil G. Devare Synthetic dna derived recombinant hiv antigens
AU639428B2 (en) 1988-12-01 1993-07-29 Imclone Systems, Inc. Synthetic interleukin-6
WO1990007936A1 (en) 1989-01-23 1990-07-26 Chiron Corporation Recombinant therapies for infection and hyperproliferative disorders
US5858646A (en) * 1989-02-23 1999-01-12 University Of Ottawa Modified HIV-pol polypeptide having immunological activity for use as diagnostic reagent
US5082767A (en) 1989-02-27 1992-01-21 Hatfield G Wesley Codon pair utilization
US6214804B1 (en) 1989-03-21 2001-04-10 Vical Incorporated Induction of a protective immune response in a mammal by injecting a DNA sequence
ATE240401T1 (de) 1989-03-21 2003-05-15 Vical Inc Expression von exogenen polynukleotidsequenzen in wirbeltieren
US5703055A (en) 1989-03-21 1997-12-30 Wisconsin Alumni Research Foundation Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery
JPH0832638B2 (ja) 1989-05-25 1996-03-29 カイロン コーポレイション サブミクロン油滴乳剤を含んで成るアジュバント製剤
US5399346A (en) 1989-06-14 1995-03-21 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Gene therapy
EP0487587A1 (en) 1989-08-18 1992-06-03 Chiron Corporation Recombinant retroviruses delivering vector constructs to target cells
GB8919607D0 (en) 1989-08-30 1989-10-11 Wellcome Found Novel entities for cancer therapy
US5130247A (en) 1989-09-19 1992-07-14 Merck & Co., Inc. Expression of fusion protein of HIV envelope and HBsAG
ES2072346T3 (es) 1989-10-23 1995-07-16 Hoffmann La Roche Peptidos sinteticos de la cubierta del htlv-i.
FR2658432B1 (fr) 1990-02-22 1994-07-01 Medgenix Group Sa Microspheres pour la liberation controlee des substances hydrosolubles et procede de preparation.
US5876724A (en) 1990-03-19 1999-03-02 Institut Pasteur Induction of neutralizing antibody against viral infection by synergy between virus envelope glycoprotein and peptides corresponding to neutralization epitopes of the glycoprotein
ATE183235T1 (de) 1990-03-21 1999-08-15 Wolf Hans Joachim Prof Dr Für abgeänderte retrovirale gag-polypeptide kodierende dna-sequenzen und diese enthaltende impfstoffe oder aggregate davon
WO1992001070A1 (en) 1990-07-09 1992-01-23 The United States Of America, As Represented By The Secretary, U.S. Department Of Commerce High efficiency packaging of mutant adeno-associated virus using amber suppressions
WO1992001800A1 (en) 1990-07-20 1992-02-06 Chiron Corporation Method for integrative transformation of yeast using dispersed repetitive elements
MY109299A (en) 1990-08-15 1996-12-31 Virogenetics Corp Recombinant pox virus encoding flaviviral structural proteins
US5840313A (en) 1990-09-27 1998-11-24 Syntello Vaccine Development Kb Peptides for use in vaccination and induction of neutralizing antibodies against human immunodeficiency virus
US5173414A (en) 1990-10-30 1992-12-22 Applied Immune Sciences, Inc. Production of recombinant adeno-associated virus vectors
DE69129154T2 (de) 1990-12-03 1998-08-20 Genentech, Inc., South San Francisco, Calif. Verfahren zur anreicherung von proteinvarianten mit geänderten bindungseigenschaften
PT100090A (pt) 1991-02-04 1993-07-30 Univ Saskatchewan Metodo de preparacao de uma composicao capz de libertar um agente biologicamente activo para um alvo, e de encapsulacao do referido agente em esferas da proteina vp6
EP0721340A1 (en) 1991-03-07 1996-07-17 Seragen, Inc. Use of cell surface receptor targeted molecules for the treatment of viral diseases
US6139843A (en) 1991-04-02 2000-10-31 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University Peptide compositions for the treatment of HIV
IL101715A (en) 1991-05-02 2005-06-19 Amgen Inc Recombinant dna-derived cholera toxin subunit analogs
AU663725B2 (en) 1991-08-20 1995-10-19 United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services, The Adenovirus mediated transfer of genes to the gastrointestinal tract
WO1994004574A1 (en) 1991-08-22 1994-03-03 Nissin Shokuhin Kabushiki Kaisha Hiv immunotherapeutics
ATE228564T1 (de) 1991-09-13 2002-12-15 Chiron Corp Zusammensetzung aus mehreren immunreaktiven hepatitis-c-virus-polypeptiden
WO1993010218A1 (en) 1991-11-14 1993-05-27 The United States Government As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Vectors including foreign genes and negative selective markers
GB9125623D0 (en) 1991-12-02 1992-01-29 Dynal As Cell modification
IT1253009B (it) 1991-12-31 1995-07-10 Sclavo Ricerca S R L Mutanti immunogenici detossificati della tossina colerica e della tossina lt, loro preparazione ed uso per la preparazione di vaccini
US5174666A (en) * 1992-02-12 1992-12-29 Smith Corona Corporation Printing device having printwheel coupling means
US6174666B1 (en) 1992-03-27 2001-01-16 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Method of eliminating inhibitory/instability regions from mRNA
JPH07507689A (ja) 1992-06-08 1995-08-31 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 特定組織のターゲティング方法及び組成物
JPH09507741A (ja) 1992-06-10 1997-08-12 アメリカ合衆国 ヒト血清による不活性化に耐性のあるベクター粒子
WO1994002951A1 (en) 1992-07-27 1994-02-03 New York University High field magnets for medical applications
GB2269175A (en) 1992-07-31 1994-02-02 Imperial College Retroviral vectors
US5519021A (en) 1992-08-07 1996-05-21 Merck & Co., Inc. Benzoxazinones as inhibitors of HIV reverse transcriptase
DE4228458A1 (de) 1992-08-27 1994-06-01 Beiersdorf Ag Multicistronische Expressionseinheiten und deren Verwendung
US6004763A (en) 1992-09-11 1999-12-21 Institut Pasteur Antigen-carrying microparticles and their use in the induction of humoral or cellular responses
FR2695563B1 (fr) 1992-09-11 1994-12-02 Pasteur Institut Microparticules portant des antigènes et leur utilisation pour l'induction de réponses humorales ou cellulaires.
US5686078A (en) 1992-09-14 1997-11-11 Connaught Laboratories, Inc. Primary and secondary immunization with different physio-chemical forms of antigen
CA2105629A1 (en) 1992-09-14 1994-03-15 Robert S. Becker Potentiation of immunogenic response
US5831005A (en) 1992-09-24 1998-11-03 Chiron Corporation Synthesis of N-substituted oligomers
US5304472A (en) 1992-11-20 1994-04-19 Genentech, Inc. Method of controlling polypeptide production in bacterial cells
DK0672142T3 (da) 1992-12-04 2001-06-18 Medical Res Council Multivalente og multispecifikke bindingsproteiner samt fremstilling og anvendelse af disse
DK0679187T4 (da) 1993-01-16 2001-09-17 Manfred Schawaller Fremgangsmåde til udvinding af native, oligomere, glycosylerede ektodomæner fra virale membranproteiner, og deres anvendelse, især som vaccine mod HIV
US5593972A (en) 1993-01-26 1997-01-14 The Wistar Institute Genetic immunization
WO1994023069A1 (en) 1993-03-26 1994-10-13 Gen-Probe Incorporated Detection of human immunodeficiency virus type 1
AU6816194A (en) * 1993-04-20 1994-11-08 Robinson, William S. Methods and materials for treatment of individuals infected with intracellular infectious agents
US5591601A (en) 1993-05-14 1997-01-07 Ohio University Edison Animal Biotechnology Institute DNA polymerase gene expression system utilizing an RNA polymerase co-delivered with the gene expression vector system
US5419900A (en) 1993-05-19 1995-05-30 The United States Of America As Represented By The Department Of Of Health And Human Services Immunologic enhancement with intermittent interleukin-2 therapy
AU700371B2 (en) 1993-06-07 1999-01-07 Genentech Inc. Hiv envelope polypeptides
RU2201421C2 (ru) 1993-06-09 2003-03-27 Коннот Лабораториз Лимитед Синтетический пептид hiv (варианты), иммуногенная композиция для индукции иммунного ответа против пептидов hiv, диагностический набор для определения hiv-специфичных антител
US5614413A (en) 1993-07-01 1997-03-25 The Uab Research Foundation Encapsidated recombinant poliovirus nucleic acid and methods of making and using same
CA2125344A1 (en) * 1993-07-01 1995-01-02 Casey D. Morrow Encapsidated recombinant poliovirus nucleic acid and methods of making and using same
US5834441A (en) 1993-09-13 1998-11-10 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Adeno-associated viral (AAV) liposomes and methods related thereto
US6015686A (en) 1993-09-15 2000-01-18 Chiron Viagene, Inc. Eukaryotic layered vector initiation systems
US6291157B1 (en) 1998-02-23 2001-09-18 Connaught Laboratories Limited Antigenically-marked non-infectious retrovirus-like particles
US5955342A (en) 1994-08-15 1999-09-21 Connaught Laboratories Limited Non-infectious, replication-defective, self-assembling HIV-1 viral particles containing antigenic markers in the gag coding region
US6080408A (en) 1994-08-22 2000-06-27 Connaught Laboratories Limited Human immunodeficiency virus type 1 nucleic acids devoid of long terminal repeats capable of encoding for non-infectious, immunogenic, retrovirus-like particles
US5795737A (en) * 1994-09-19 1998-08-18 The General Hospital Corporation High level expression of proteins
US5786464C1 (en) 1994-09-19 2012-04-24 Gen Hospital Corp Overexpression of mammalian and viral proteins
US5676950A (en) 1994-10-28 1997-10-14 University Of Florida Enterically administered recombinant poxvirus vaccines
AU4594996A (en) 1994-11-30 1996-06-19 Chiron Viagene, Inc. Recombinant alphavirus vectors
US5550280A (en) 1994-11-30 1996-08-27 Uniroyal Chemical Ltd./ Uniroyal Chemical Ltee Hindered aromatic ester compounds useful as anti-viral agents
ES2176360T3 (es) 1994-12-30 2002-12-01 Chiron Corp Combinacion de vehiculos de administracion de genes.
EP0817854A2 (en) 1995-03-31 1998-01-14 Wolf, Hans, Prof. Dr. Antigen presentation system based on retrovirus-like particles
US5797870A (en) 1995-06-07 1998-08-25 Indiana University Foundation Pericardial delivery of therapeutic and diagnostic agents
CU22559A1 (es) 1996-01-17 1999-05-03 Ct Ingenieria Genetica Biotech Sistema de expresión de antígenos heterologos en e. coli como proteínas de fusión
US5741492A (en) 1996-01-23 1998-04-21 St. Jude Children's Research Hospital Preparation and use of viral vectors for mixed envelope protein vaccines against human immunodeficiency viruses
US6060587A (en) 1996-01-29 2000-05-09 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Cellular receptor for HIV-1 VPR essential for G2/M phase transition of the cell cycle
US6087486A (en) 1996-01-29 2000-07-11 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Nucleotide sequences encoding vpr receptor protein
US5649652A (en) * 1996-02-16 1997-07-22 Sackett; Eleanor L. Clothes hanger with storage hook
HRP970092A2 (en) 1996-02-22 1998-04-30 Merck & Co Inc Synthetic hiv genes
US6451592B1 (en) * 1996-04-05 2002-09-17 Chiron Corporation Recombinant alphavirus-based vectors with reduced inhibition of cellular macromolecular synthesis
EP1997900A3 (en) 1996-04-05 2010-10-06 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Recombinant alphavirus-based vectors with reduced inhibition of cellular macromolecular synthesis
US5951975A (en) 1996-06-28 1999-09-14 University Of Pittsburgh Induction of CTLs specific for natural antigens by cross priming immunization
AU4181897A (en) 1996-09-06 1998-03-26 Regents Of The University Of California, The E25a protein, methods for production and use thereof
US6114148C1 (en) 1996-09-20 2012-05-01 Gen Hospital Corp High level expression of proteins
US6139833A (en) 1997-08-08 2000-10-31 Lexicon Genetics Incorporated Targeted gene discovery
FR2756843B1 (fr) * 1996-12-09 1999-01-22 Inst Nat Sante Rech Med Souches de vih-1 non-m non-o, fragments et applications
US5830697A (en) * 1997-01-21 1998-11-03 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University P-glycoprotein mutant resistant to cyclosporin modulation
EP0969862B1 (en) 1997-02-07 2006-10-18 Merck & Co., Inc. Synthetic hiv gag genes
US5990091A (en) 1997-03-12 1999-11-23 Virogenetics Corporation Vectors having enhanced expression, and methods of making and uses thereof
US5858675A (en) 1997-05-13 1999-01-12 Incyte Pharmaceuticals, Inc. Double-stranded RNA-binding protein
US6099847A (en) 1997-05-15 2000-08-08 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Chimeric Gag pseudovirions
US5932442A (en) 1997-09-23 1999-08-03 Incyte Pharmaceuticals, Inc. Human regulatory molecules
US5932445A (en) 1997-11-07 1999-08-03 Incyte Pharmaceuticals, Inc. Signal peptide-containing proteins
US6228128B1 (en) * 1997-11-10 2001-05-08 Charlotte Johansen Antimicrobial activity of laccases
GB9803351D0 (en) * 1998-02-17 1998-04-15 Oxford Biomedica Ltd Anti-viral vectors
JP2002511257A (ja) 1998-04-14 2002-04-16 カイロン コーポレイション 目的の遺伝子を発現するための非クローニング技術
US6090388A (en) 1998-06-20 2000-07-18 United Biomedical Inc. Peptide composition for prevention and treatment of HIV infection and immune disorders
WO2000015819A1 (en) * 1998-09-11 2000-03-23 The Children's Medical Center Corporation Packaging cell lines for hiv-derived retroviral vector particles
US6489542B1 (en) * 1998-11-04 2002-12-03 Monsanto Technology Llc Methods for transforming plants to express Cry2Ab δ-endotoxins targeted to the plastids
CA2360347C (en) * 1998-12-31 2013-05-07 Chiron Corporation Improved expression of hiv polypeptides and production of virus-like particles
JP4776075B2 (ja) 1998-12-31 2011-09-21 ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス，インコーポレーテッド 改変ｈｉｖｅｎｖポリペプチド
AU2487300A (en) * 1998-12-31 2000-07-31 Chiron Corporation Polynucleotides encoding antigenic hiv type c polypeptides, polypeptides and uses thereof
US6280989B1 (en) 1999-06-17 2001-08-28 Dmitri Kapitonov Sialyltransferases
CA2389633A1 (en) 1999-11-01 2001-05-10 Chiron Corporation Expression vectors, transfection systems, and method of use thereof
JP2003523188A (ja) * 2000-02-18 2003-08-05 ユニバーシティ・オブ・ワシントン Ａｉｄｓ先祖ウイルスおよびワクチン
MXPA03002640A (es) 2000-09-28 2003-06-19 Chiron Corp Microparticulas para la distribucion de acidos nucleicos heterologos.
AU2002320314A1 (en) * 2001-07-05 2003-01-21 Chiron, Corporation Polynucleotides encoding antigenic hiv type c polypeptides, polypeptides and uses thereof
WO2003020876A2 (en) * 2001-08-31 2003-03-13 Chiron Corporation Polynucleotides encoding antigenic hiv type b polypeptides, polypeptides and uses thereof
WO2008086329A2 (en) 2007-01-08 2008-07-17 Continental Automotive Systems Us, Inc. Dc/dc converter
CN102847538B (zh) 2007-07-06 2016-07-06 M技术株式会社 由球碳形成的结晶的制造方法及制造装置
EP2510962A1 (en) 2011-04-12 2012-10-17 F. Hoffmann-La Roche AG Infusion pump device with re-filling scheme for cylinder-piston dosing unit

Also Published As

Publication number Publication date
JP2004502445A (ja) 2004-01-29
DE60142922D1 (de) 2010-10-07
EP1339738A2 (en) 2003-09-03
WO2002004493A2 (en) 2002-01-17
JP2012147792A (ja) 2012-08-09
CA2414374A1 (en) 2002-01-17
EP2311958A3 (en) 2011-08-10
EP2311958B1 (en) 2015-08-19
US20110212164A1 (en) 2011-09-01
WO2002004493A3 (en) 2003-06-26
EP2281832A2 (en) 2011-02-09
EP1339738B1 (en) 2010-08-25
US7935805B1 (en) 2011-05-03
ZA200300839B (en) 2004-07-30
EP2281832A3 (en) 2011-12-14
US7618642B2 (en) 2009-11-17
US20030223961A1 (en) 2003-12-04
CA2414374C (en) 2014-01-21
ATE478955T1 (de) 2010-09-15
EP2311958A2 (en) 2011-04-20
ZA200403143B (en) 2005-04-26
US20100316698A1 (en) 2010-12-16
AU2001273179A1 (en) 2002-01-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2553575T3 (es) Polinucleótidos que codifican polipéptidos antigénicos del VIH tipo C, polipéptidos y usos de los mismos
Lu et al. Immunogenicity of DNA vaccines expressing human immunodeficiency virus type 1 envelope glycoprotein with and without deletions in the V1/2 and V3 regions
US7008784B1 (en) Non-infectious, non-replicating, immunogenic human immunodeficiency virus-like particles
US10946090B2 (en) Consensus/ancestral immunogens
JP5033303B2 (ja) 抗原性ｃ型ｈｉｖポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、ポリペプチドおよびそれらの使用
WO1993000103A1 (en) Chimeric envelope proteins for viral targeting
Kang et al. Modified HIV envelope proteins with enhanced binding to neutralizing monoclonal antibodies
JP2009082136A (ja) 抗原性ｂ型ｈｉｖポリペプチドおよび／または抗原性ｃ型ｈｉｖポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、それらのポリペプチドおよびそれらの使用
WO1996030523A2 (en) Antigen presentation system based on retrovirus-like particles
JP2009254383A (ja) 抗原性ｂ型ｈｉｖポリペプチドをコードするポリヌクレオチド、そのポリペプチドおよびそれらの使用
US11814413B2 (en) Compositions comprising modified HIV envelopes
US5912338A (en) Nucleic acids encoding self-assembled, non-infectious, non-replicating, immunogenic retrovirus-like particles comprising modified HIV genomes and chimeric envelope glycoproteins
US8048431B2 (en) Modified HIV-1 clade C envelope glycoprotein immunogens comprising deletions in the gp120/gp41 cleavage site and gp41 fusion domain
Si et al. Effects of HIV type 1 envelope glycoprotein proteolytic processing on antigenicity
EP1038001B1 (en) Constitutive expression of non-infectious hiv-like particles
Haynes et al. Production of immunogenic HIV-1 viruslike particles in stably engineered monkey cell lines
Corbet et al. Construction, biological activity, and immunogenicity of synthetic envelope DNA vaccines based on a primary, CCR5-tropic, early HIV type 1 isolate (BX08) with human codons
Vogt et al. Heterologous HIV-2 challenge of rhesus monkeys immunized with recombinant vaccinia viruses and purified recombinant HIV-2 proteins
US20020127238A1 (en) HIV-1 vaccines and screening methods therefor
Gallinaro Integrase defective lentiviral vector as a vaccine platform for delivering HIV-1 antigens
HK1097446B (en) Consensus/ancestral immunogens
HK1155758A (en) Consensus/ancestral immunogens