ES2564103T3 - Glicoproteína hialuronidasa soluble (sHASEGP), proceso para prepararla, usos y composiciones farmacéuticas que la comprenden - Google Patents

Glicoproteína hialuronidasa soluble (sHASEGP), proceso para prepararla, usos y composiciones farmacéuticas que la comprenden Download PDF

Info

Publication number
ES2564103T3
ES2564103T3 ES10183410.9T ES10183410T ES2564103T3 ES 2564103 T3 ES2564103 T3 ES 2564103T3 ES 10183410 T ES10183410 T ES 10183410T ES 2564103 T3 ES2564103 T3 ES 2564103T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
shasegp
polypeptide
dna
hyaluronidase
protein
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES10183410.9T
Other languages
English (en)
Inventor
Louis Bookbinder
Anirban Kundu
Gregory Frost
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Halozyme Inc
Original Assignee
Halozyme Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=32962713&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=ES2564103(T3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Halozyme Inc filed Critical Halozyme Inc
Application granted granted Critical
Publication of ES2564103T3 publication Critical patent/ES2564103T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/47—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2), e.g. cellulases, lactases
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/04—Amoebicides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/10—Antioedematous agents; Diuretics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
    • C07H21/04—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with deoxyribosyl as saccharide radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2474—Hyaluronoglucosaminidase (3.2.1.35), i.e. hyaluronidase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01035—Hyaluronoglucosaminidase (3.2.1.35), i.e. hyaluronidase
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)

Abstract

Una composición farmacéutica que comprende un polipéptido hialuronidasa soluble activo a pH neutro humano (sHASEGP) y un agente anticanceroso para uso en el tratamiento de un tumor, en la que; el agente anticanceroso es un anticuerpo o un vector de terapia génica; y el polipéptido hialuronidasa consiste en una secuencia de aminoácidos que tiene al menos el 98 % de identidad de secuencia de aminoácidos con la secuencia de aminoácidos que se expone como los aminoácidos 1-448 de la SEC ID Nº: 4, que corresponde a los aminoácidos 36-483 de la SEC ID Nº: 1, en el que: el polipéptido contiene al menos un resto de azúcar que está unido covalentemente a un resto asparragina (N) del polipéptido; y el polipéptido es catalíticamente activo.

Description

imagen1
imagen2
imagen3
imagen4
imagen5
imagen6
imagen7
5
15
25
35
45
55
65
expone en la SEC ID Nº: 6 o una secuencia de nucleótidos que incluye nucleótidos que codifican los aminoácidos 1509 de la SEC ID Nº: 1; un polipéptido que codifica una secuencia de nucleótidos que hibrida en condiciones de rigurosidad baja, moderada o alta con la secuencia de nucleótidos que se expone en la SEC ID Nº: 6; un polipéptido que incluye la secuencia de aminoácidos que se expone como los aminoácidos 1-509 de la SEC ID Nº: 1; un polipéptido que incluye una secuencia de aminoácidos que tiene al menos aproximadamente el 60 %, 70 %, 75 %, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98 % o 99 % de identidad de secuencia con la secuencia de aminoácidos que se expone en la SEC ID Nº: 1 o como los aminoácidos 1-448 de la SEC ID Nº: 4.
En particular, se describe el polipéptido sHASEGP con los dominios hialuronidasa que se indican en la SEC ID Nº: 4. El polipéptido es un polipéptido de una o dos cadenas. También se proporcionan porciones más pequeñas del mismo que conservan la actividad hialuronidasa. Los dominios hialuronidasa de las sHASEGP varían en tamaño y constitución, incluyendo inserciones y deleciones en bucles superficiales. Por lo tanto, para los fines de este documento, el dominio catalítico es una porción de una sHASEGP, como se define en este documento, y es homólogo a un dominio de otras secuencias de tipo hialuronidasa, tales como HYAL1, HYAL2, HYAL3, que se han identificado previamente; no se reconoció sin embargo, que una forma de cadena sencilla aislada del dominio hialuronidasa humano pudiera funcionar en ensayos in vitro. Los restos aspartato y glutamato necesarios para la actividad están presentes en motivos conservados.
Como se usa en este documento, un “dominio hialuronidasa neutro de una sHASEGP soluble” se refiere a un dominio beta-1,4-endoglucosaminidasa de una sHASEGP que presenta actividad hialuronidasa a pH neutro, es soluble en condiciones como se describen y comparte homología y características estructurales con los dominios hialuronidasa de la familia de glicosil-hidrolasas pero contiene secuencias adicionales en el extremo carboxi teminal que son necesarias para la actividad a pH neutro. Por tanto, es al menos la porción mínima del dominio que presenta actividad hialuronidasa como se evalúa mediante ensayos in vitro convencionales y permanece soluble. Se contemplan en este documento dichos dominios hialuronidasa y porciones catalíticamente activas de los mismos. También se proporcionan formas truncadas del dominio hialuronidasa que incluyen el fragmento más pequeño del mismo que actúa catalíticamente como una forma de cadena sencilla.
Un dominio hialuronidasa de una sHASEGP, cada vez que se hace referencia al mismo en este documento, incluye al menos una o todas de o cualquier combinación de o una porción catalíticamente activa de: un polipéptido glicoproteico ligado a N que incluye la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEC ID Nº: 1; un polipéptido codificado por una secuencia de nucleótidos que hibrida en condiciones de rigurosidad reducida, moderada o elevada con la secuencia de nucleótidos expuesta en la SEC ID Nº: 6; un polipéptido que incluye la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEC ID N: 1; un polipéptido que incluye una secuencia de aminoácidos que tiene una identidad de secuencia de al menos aproximadamente el 70%, 75%, 80%, 81%, 82%, 83% , 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% o 99% con la secuencia de aminoácidos expuesta en la SEC ID Nº: 1; y/o un dominio hialuronidasa de un polipéptido codificado por una variante de corte y empalme de la sHASEGP.
Por lo tanto, para los fines de este documento, el dominio hialuronidasa es una porción de una sHASEGP, como se define en este documento, y es homólogo a un dominio de otras sHASEGP. Como con la clase más grande de enzimas de la familia de hialuronidasas, los dominios catalíticos de sHASEGP comparten un alto grado de identidad de secuencia de aminoácidos. Los restos Asp y Glu necesarios para la actividad están presentes en motivos conservados.
Por forma activa se entiende una forma activa in vivo y/o in vitro. Como se describe en este documento, el dominio hialuronidasa existe como una glicoproteína secretada soluble. Se muestra en este documento que, al menos in vitro, las formas de cadena sencilla de las sHASEGP y los dominios catalíticos o porciones enzimáticamente activas de las mismas (típicamente truncamientos C-terminales) presentan actividad hialuronidasa. Por lo tanto, se proporcionan en este documento formas aisladas de los dominios hialuronidasa de sHASEGP y su uso en ensayos de selección de fármacos in vitro para la identificación de agentes que modulen la actividad de las mismas.
Como se usa en este documento, el dominio catalíticamente activo de una sHASEGP se refiere al dominio endoglucosaminidasa activo a pH neutro como se define por la actividad in vitro hacia un sustrato de glicosaminoglicano.
Las sHASEGP de interés incluyen las que son activas frente a sulfatos de condroitina y proteoglicanos de sulfato de condroitina (CSPG) in vivo e in vitro; y las que son activas frente a hialuronano. Como se usa en este documento, una sHASEGP humana es una codificada por un ácido nucleico, tal como ADN, presente en el genoma de un ser humano, incluyendo todas las variantes alélicas y variaciones conservativas siempre que no sean variantes que se encuentren en otros mamíferos.
Como se usa en este documento, un ácido nucleico que codifica un dominio hialuronidasa o porción catalítica activa de una “sHASEGP” debe interpretarse que se refiere a un ácido nucleico que codifica sólo el dominio hialuronidasa de cadena sencilla detallado o una porción activa del mismo y no las otras porciones contiguas de la sHASEGP
9 5
15
25
35
45
55
65
como una secuencia continua.
Como se usan en este documento, los términos “enfermedad” o “trastorno” se refieren a una afección patológica en un organismo que es el resultado de, por ejemplo, una infección o defecto genético, y que se caracteriza por síntomas identificables.
Como se usa en este documento, una variante de corte y empalme se refiere a una variante producida por procesamiento diferencial de un transcrito primario de ácido nucleico genómico, tal como ADN, que da como resultado más de un tipo de ARNm. Se proporcionan en este documento variantes de corte y empalme de sHASEGP.
Como se usa en este documento, el dominio hialuronidasa de una proteína sHASEGP se refiere al dominio hialuronidasa de una sHASEGP que presenta una actividad endoglucosaminidasa a pH neutro. Por lo tanto, es al menos la porción mínima de la proteína que presenta actividad endoglucosaminidasa como se evalúa por ensayos convencionales in vitro. Los dominios hialuronidasa humanos de la invención incluyen al menos una porción suficiente de secuencias de aminoácidos expuestas en la SEC ID Nº: 4 que presentan actividad endoglucosaminidasa.
También se contemplan moléculas de ácido nucleico que codifican un polipéptido que tiene actividad endoglucosaminidasa en un ensayo hialuronidasa in vitro y que tienen una identidad de secuencia de al menos el 70%, 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86 %, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% o 99% con la longitud completa de un dominio hialuronidasa de un polipéptido sHASEGP, o que hibrida a lo largo de su longitud completa o a lo largo de al menos aproximadamente el 70%, 80% o 90% de la longitud completa con un ácido nucleico que codifica un dominio hialuronidasa, particularmente en condiciones de rigurosidad moderada, generalmente elevada.
Para los dominios hialuronidasa, los restos en la región N-terminal pueden ser críticos aunque no suficientes para su actividad. Se muestra en este documento que el dominio hialuronidasa de la sHASEGP es catalíticamente activo. Por lo tanto, el dominio hialuronidasa requiere generalmente los aminoácidos N-terminales del mismo para su actividad; la porción C-terminal puede estar truncada hasta el último resto cisteína aunque requiere aminoácidos adicionales para ser óptimamente activa. La cantidad que puede eliminarse puede determinarse empíricamente ensayando el polipéptido para determinar su actividad hialuronidasa en un ensayo in vitro que evalúe la escisión catalítica.
Por lo tanto, se contemplan porciones más pequeñas de los dominios hialuronidasa, particularmente los dominios de cadena sencilla de la misma que conservan actividad hialuronidasa. Dichas versiones más pequeñas son generalmente versiones truncadas C-terminales de los dominios hialuronidasa. Los dominios hialuronidasa varían en tamaño y constitución, incluyendo inserciones y deleciones en bucles superficiales. Dichos dominios presentan una estructura conservada, incluyendo al menos una característica estructural, tal como el donador de protones y/o otras características de dominios hialuronidasa de endoglucosaminidasas. Por lo tanto, para los fines de este documento, el dominio hialuronidasa es una porción de cadena sencilla de una sHASEGP, como se define en este documento, pero es homólogo en sus características estructurales y en la retención de una similitud u homología de secuencia con el dominio hialuronidasa de otras secuencias de tipo hialuronidasa. La glicoproteína presenta actividad hialuronidasa como una cadena sencilla.
Como se usa en este documento, por homólogo se entiende una identidad de secuencia de ácido nucleico superior al 25%, tal como del 25%, 40%, 60%, 70%, 80%, 90% o 95%. Si es necesario, se especificará el porcentaje de homología. Los términos “homología” e “identidad” se usan con frecuencia indistintamente. En general, las secuencias se alinean de modo que se obtenga el mayor orden de coincidencias (véase, por ejemplo, Computational Molecular Biology, Lesk, A. M., ed., Oxford University Press, Nueva York, 1988; Biocomputing: Informatics and Genome Projects, Smith, D. W., ed., Academic Press, Nueva York, 1993; Computer Analysis of Sequence Data, Part/, Griffin, A. M., y Griffin, H. G., eds., Humana Press, Nueva Jersey, 1994; Sequence Analysis in Molecular Biology, von Heinje, G., Academic Press, 1987; y Sequence Analysis Primer, Gribskov, M. y Devereux, J., eds., M Stockton Press, Nueva York, 1991; Carillo et al. (1988) et al. (1988) Slam J Applied Math 48]: 1073).
Mediante la identidad de secuencia, se determina el número de aminoácidos conservados mediante programas de algoritmos de alineamiento convencionales y se usan con las penalizaciones por huecos por defecto establecidas por cada proveedor. Las moléculas de ácido nucleico sustancialmente homólogas hibridarían típicamente a una rigurosidad moderada o a una rigurosidad elevada a todo lo largo de la longitud del ácido nucleico o a lo largo de al menos aproximadamente el 70%, 80% o 90% de la molécula de ácido nucleico de longitud completa de interés. También se contemplan moléculas de ácido nucleico que contienen codones degenerados en lugar de codones en la molécula de ácido nucleico que hibrida.
Puede determinarse si dos moléculas de ácido nucleico cualesquiera tienen secuencias de nucleótidos que tienen una “identidad” de al menos, por ejemplo, el 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% o 99% usando algoritmos informáticos conocidos tales como el programa “FASTA”, usando por ejemplo los parámetros por defecto como en
10
imagen8
imagen9
imagen10
5
15
25
35
45
55
65
nucleótidos contiguos, con frecuencia al menos 14 o 16 o 30 nucleótidos contiguos o nucleótidos modificados complementarios a la porción codificante de una molécula de ácido nucleico que codifica un gen de interés, por ejemplo, un ácido nucleico que codifica un dominio hialuronidasa de cadena sencilla de una sHASEGP.
Como se usa en este documento, una matriz se refiere a un grupo de elementos, tales como anticuerpos, que contiene tres o más miembros. Una matriz direccionable es una en la que los miembros de la matriz pueden identificarse, típicamente, por su posición en un soporte en fase sólida. Por lo tanto, en general los miembros de la matriz están inmovilizados en loci identificables separados en la superficie de una fase sólida.
Como se usa en este documento, un anticuerpo se refiere a una inmunoglobulina, ya sea natural o producida parcialmente o totalmente de forma sintética, que incluye cualquier derivado de la misma que conserve la capacidad de unión específica del anticuerpo. Por lo tanto, un anticuerpo incluye cualquier proteína que tenga un dominio de unión que sea homólogo o sustancialmente homólogo a un dominio de unión a inmunoglobulina. Los anticuerpos incluyen miembros de cualquier reivindicación de inmunoglobulina, incluyendo IgG, IgM, IgA, IgD e IgE.
Como se usa en este documento, un fragmento de anticuerpo se refiere a cualquier derivado de un anticuerpo que tiene una longitud inferior a la completa, que conserva al menos una porción de la capacidad de unión específica del anticuerpo de longitud completa. Los ejemplos de fragmentos de anticuerpo incluyen, pero sin limitación, Fab, Fab’, F(AB)2, Fv de cadena sencilla (scFV), FV, diacuerpos dsFV y fragmentos Fd. El fragmento puede incluir múltiples cadenas unidas entre sí, tal como mediante puentes disulfuro. Un fragmento de anticuerpo contiene generalmente al menos aproximadamente 50 aminoácidos y, típicamente, al menos 200 aminoácidos.
Como se usa en este documento, un fragmento de anticuerpo Fv está compuesto por un dominio pesado variable (VH) y un dominio ligero variable unidos por interacciones no covalentes.
Como se usa en este documento, un dsFV se refiere a un Fv con un enlace disulfuro intermolecular generado por ingeniería genética.
Como se usa en este documento, un fragmento F(AB)2 es un fragmento de anticuerpo que es el resultado de la digestión de una inmunoglobulina con pepsina a pH 4,0-4,5; puede expresarse de forma recombinante para producir el fragmento equivalente.
Como se usan en este documento, los fragmentos Fab son fragmentos de anticuerpo que son el resultado de la digestión de una inmunoglobulina con papaína; pueden expresarse de forma recombinante para producir el fragmento equivalente.
Como se usan en este documento, los scFV se refieren a fragmentos de anticuerpo que contienen una cadena ligera variable V y una cadena pesada variable (VH) conectadas covalentemente por un enlazador polipeptídico en cualquier orden. El enlazador es de una longitud tal que los dos dominios variables se enlazan sin una interferencia sustancial. Los enlazadores incluidos son restos (Gly-Ser)n con algunos restos Glu o Lys dispersados por todos los mismos para aumentar la solubilidad.
Como se usan en este documento, los anticuerpos humanizados se refieren a anticuerpos que están modificados para incluir secuencias de aminoácidos humanas de modo que la administración a un ser humano no provoque una respuesta inmune. Se conocen métodos para la preparación de dichos anticuerpos. Por ejemplo, para producir dichos anticuerpos, el hibridoma u otra célula procariota o eucariota tal como una E. coli o una célula CHO, que expresa ese anticuerpo monoclonal se altera mediante técnicas de ADN recombinante para expresar un anticuerpo en el que la composición de aminoácidos de la región no variable esté basada en anticuerpos humanos. Se han diseñado programas informáticos para identificar dichas regiones.
Como se usan en este documento, los diacuerpos son scFV diméricos; los diacuerpos tienen típicamente enlazadores peptídicos más cortos que los scFV y generalmente dimerizan.
Como se usa en este documento, la producción por medios recombinantes mediante el uso de métodos de ADN recombinante se refiere al uso de métodos bien conocidos de biología molecular para expresar proteínas codificadas por ADN clonado.
Como se usa en este documento, el término “evaluar” pretende incluir la determinación cuantitativa y cualitativa en el sentido de obtener un valor absoluto para la actividad de una sHASEGP, o un dominio de la misma, presente en la muestra, y también de obtener un índice, proporción, porcentaje, valor visual o de otro tipo indicativo del nivel de la actividad. La evaluación puede ser directa o indirecta y por supuesto no es necesario que las especies químicas detectadas realmente sean el propio producto de proteolisis, sino que pueden ser por ejemplo un derivado del mismo o alguna sustancia adicional.
Como se usa en este documento, la actividad biológica se refiere a las actividades in vivo de un compuesto o respuestas fisiológicas que son el resultado de la administración in vivo de un compuesto, composición u otra
14
imagen11
5
15
25
35
45
55
65
y de la metástasis pueden eliminarse, reducirse o prevenirse mediante el tratamiento. Los ejemplos no limitantes de los sellos característicos incluyen la degradación descontrolada de la membrana basal y de la matriz extracelular proximal, migración, división y organización de las células endoteliales en nuevos capilares funcionales y la persistencia de dichos capilares funcionales.
Como se usan en este documento, las sales farmacéuticamente aceptables, ésteres u otros derivados de los conjugados incluyen cualquier sal, éster o derivado que pueda prepararse fácilmente por los especialistas en esta técnica usando métodos conocidos para dicha derivatización y que producen compuestos que pueden administrarse a animales o seres humanos sin efectos tóxicos sustanciales y que son principios activos farmacéuticos o profármacos.
Como se usa en este documento, un profármaco es un compuesto que, tras la administración in vivo se metaboliza o convierte de otro modo en la forma biológicamente, farmacéuticamente o terapéuticamente activa del compuesto. Para producir un profármaco, el compuesto activo farmacéutico se modifica de modo que el compuesto activo se regenera mediante procesos metabólicos. El profármaco puede estar diseñado para alterar la estabilidad metabólica
o las características de transporte de un fármaco, para enmascarar efectos secundarios o toxicidad, para mejorar el sabor de un fármaco o para alterar otras características o propiedades de un fármaco. En virtud de los conocimientos de procesos farmacodinámicos y del metabolismo de fármacos in vivo, los especialistas en esta técnica, una vez conocido un compuesto farmacéuticamente activo, pueden diseñar profármacos del compuesto (véase, por ejemplo, Nogrady (1985) Medicinal Chemistry A Biochemical Approach, Oxford University Press, Nueva York, páginas 388-392).
Como se usa en este documento, un fármaco identificado mediante los métodos de selección proporcionados en este documento se refiere a cualquier compuesto que es un candidato para usar como compuesto terapéutico o candidato para el diseño de un compuesto terapéutico. Dichos compuestos pueden ser moléculas pequeñas, incluyendo moléculas orgánicas pequeñas, péptidos, peptidomiméticos, moléculas antisentido o ARNbc, tal como ARNi, anticuerpos, fragmentos de anticuerpos, anticuerpos recombinantes y otros compuestos de este tipo que pueden servir como candidatos a fármaco o compuestos candidato.
Como se usa en este documento, un peptidomimético es un compuesto que mimetiza la conformación y ciertas características estereoquímicas de la forma biológicamente activa de un péptido particular. En general, los peptidomiméticos están diseñados para mimetizar ciertas propiedades deseables de un compuesto, pero no las propiedades indeseables, tales como flexibilidad, que conducen a una pérdida de una conformación biológicamente activa y rotura de enlaces. Pueden prepararse peptidomiméticos a partir de compuestos biológicamente activos por sustitución de ciertos grupos o enlaces que contribuyen a las propiedades indeseables con bioisoésteres. Los especialistas en la técnica conocen bioisoésteres. Por ejemplo, el bioisoéster de metileno CH2S se ha usado como una sustitución de amida en análogos de enquefalina (véase, por ejemplo, Spatola (1983) págs. 267-357 en Chemistry and Biochemistry of Amino Acids, Peptides, and Proteins, Weistein, Ed. volumen 7, Marcel Dekker, Nueva York). La morfina, que puede administrarse por vía oral, es un compuesto que es un peptidomimético del péptido endorfina. Para los fines de este documento, los péptidos cíclicos se incluyen entre los peptidomiméticos.
Como se usa en este documento, una región promotora o elemento promotor se refiere a un segmento de ADN o ARN que controla la transcripción del ADN o ARN al que se une operativamente. La región promotora incluye secuencias específicas que son suficientes para el reconocimiento de una ARN polimerasa, su unión y el inicio de la transcripción.
Esta porción de la región promotora se denomina promotor. Además, la región promotora incluye secuencias que modulan esta actividad de reconocimiento, unión e inicio de la transcripción de la ARN polimerasa. Estas secuencias pueden actuar en cis o pueden ser sensibles a factores que actúan en trans. Los promotores, dependiendo de la naturaleza de la regulación, pueden ser constitutivos o estar regulados. Los promotores ejemplares contemplados para el uso en procariotas incluyen los promotores de bacteriófagos T7 y T3.
Como se usa en este documento, un receptor se refiere a una molécula que tiene una afinidad por un ligando dado. Los receptores pueden ser moléculas de origen natural o sintético. También puede hacerse referencia a los receptores en la técnica como antiligandos. Como se usan en este documento, los términos receptor y antiligando se usan indistintamente. Pueden usarse receptores en su estado no alterado o como agregados con otras especies. Pueden unirse receptores, covalentemente o no covalentemente, o en contacto físico con, a un miembro de unión, directa o indirectamente a través de una sustancia de unión específica o enlazador. Los ejemplos de receptores incluyen, pero sin limitación: anticuerpos, receptores de membrana celular, receptores de superficie y receptores de internalización, anticuerpos monoclonales y antisueros reactivos con determinantes antigénicos específicos tales como virus, células u otros materiales, fármacos, polinucleótidos, ácidos nucleicos, péptidos, factores, lectinas, azúcares, polisacáridos, células, membranas celulares y orgánulos.
Los ejemplos de receptores y aplicaciones que usan dichos receptores incluyen, pero sin limitación: a) enzimas: proteínas de transporte específicas o enzimas esenciales para la supervivencia de microorganismos que podrían servir como dianas para selección de antibióticos [ligando]; b) anticuerpos: puede investigarse la identificación de un
16 5
15
25
35
45
55
65
sitio de unión a ligando en una molécula de anticuerpo que se combine con el epítopo de un antígeno de interés; la determinación de una secuencia que mimetice un epítopo antigénico puede conducir al desarrollo de vacunas en las que el inmunógeno se basa en una o más de dichas secuencias o conducir al desarrollo de agentes de diagnóstico relacionados o compuestos útiles en tratamientos terapéuticos tales como enfermedades autoinmunes; c) ácidos nucleicos: identificación de ligandos, tales como proteínas o ARN, sitios de unión; d) polipéptidos catalíticos: polímeros, incluyendo polipéptidos que son capaces de promover una reacción química que implica la conversión de uno o más reactivos con uno o más productos; dichos polipéptidos incluyen generalmente un sitio de unión específico para al menos un reactivo o intermedio de reacción y una funcionalidad activa próxima al sitio de unión, en los que la funcionalidad es capaz de modificar químicamente el reactivo unido (véase, por ejemplo, Patente de Estados Unidos Nº 5.215.899); e) receptores de hormonas: la determinación de los ligandos que se unen con alta afinidad a un receptor es útil en el desarrollo de terapias de reemplazo de hormonas, por ejemplo, la identificación de ligandos que se unen a dichos receptores puede conducir al desarrollo de fármacos para controlar la presión sanguínea; y f) receptores de opiato: la determinación de ligandos que se unen a los receptores de opiato en el cerebro es útil en el desarrollo de sustitutos menos adictivos para la morfina y fármacos relacionados.
Como se usa en este documento, una muestra se refiere a cualquier cosa que puede contener un analito para el que se desee un ensayo de analito. La muestra puede ser una muestra biológica, tal como un fluido biológico o un tejido biológico. Los ejemplos de fluidos biológicos incluyen orina, sangre, plasma, suero, saliva, semen, heces, esputo, líquido cefalorraquídeo, lágrimas, moco, esperma, líquido amniótico o similares. Los tejidos biológicos son agregados de células, habitualmente de una clase particular junto con su sustancia intercelular que forma uno de los materiales estructurales de una estructura humana, animal, vegetal, bacteriana, fúngica o viral incluyendo tejidos conjuntivo, epitelial, muscular y nervioso. Los ejemplos de tejidos biológicos también incluyen órganos, tumores, ganglios linfáticos, arterias y células individuales.
Como se usa en este documento: la rigurosidad de hibridación en la determinación del porcentaje de emparejamientos erróneos es de la forma siguiente: 1) alta rigurosidad: SSPE 0,1x, SDS al 0,1%, 65ºC 2) rigurosidad media: SSPE 0,2x, SDS al 0,1% SDS, 50°C 3) rigurosidad baja: SSPE 1,0x, SDS al 0,1 %, 50°C. Los especialistas en esta técnica saben que la etapa de lavado selecciona híbridos estables y también conocen los ingredientes del SSPE (véase, por ejemplo, Sambrook, E, F, Fritsch, T, Maniatis, en: Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold spring Harbor Laboratory Press 1989 Vol 3, p. B. 13, véanse también numerosos catálogos que describen soluciones de laboratorio usadas comúnmente). El SSPE es NaCl 0,18 tamponado con fosfato a pH 7,4. Además, los especialistas en la técnica reconocen que la estabilidad de híbridos se determina por la Tm, que está en función de la concentración de ion sodio y la temperatura (Tm = 81,5ºC -16,6 + 0,41 (% G + C) -600/L)), de modo que los únicos parámetros en las condiciones de lavado críticos para la estabilidad del híbrido son la concentración de ion sodio en el SSPE (o SSC) y la temperatura.
Se entiende que pueden conseguirse rigurosidades equivalentes usando tampones, sales y temperaturas alternativas. A modo de ejemplo y no como limitación, los procedimientos que usan condiciones de baja rigurosidad son de la forma siguiente (véase también Shilo y Weinberg, Proc. Natl. Acad Sci USA 78: 6789-6792 (1981)): Filtros que contienen ADN se tratan previamente durante 6 horas a 40ºC en una solución que contiene formamida al 35%, SSC 5X, Tris-HCI 50 mM (pH 7,5), EDTA 5 mM, PVP al 0,1%, Ficoll al 0,1%, BSA al 1% y ADN de esperma de salmón desnaturalizado 500 g/ml. El SSC (10x) es cloruro sódico 1,5 M y citrato de sodio 0,15 M ajustado a un pH de 7.
Las hibridaciones se realizan en la misma solución con las siguientes modificaciones: PVP al 0,02%, Ficoll al 0,02%, BSA al 0,2%, ADN de esperma 100 VG/M, sulfato de dextrano al 10% (p/v) y se usa sonda marcada con 32P de 520 x 106 cpm. Los filtros se incubaron en mezcla de hibridación durante 18-20 horas a 40ºC y después se lavan durante 1,5 horas a 55ºC en una solución que contiene SSC 2X, Tris-HCI 25 mM (pH 7,4), EDTA 5 mM y SDS al 0,1%. La solución de lavado se sustituye con solución recién preparada y se incuban 1,5 horas adicionales a 60ºC. Los filtros se transfirieron en seco y se exponen a autorradiografía. Si es necesario, los filtros se lavan una tercera vez a 65-68ºC y se vuelven a exponer a película. Se conocen bien en la técnica otras condiciones de baja rigurosidad que pueden usarse, por ejemplo, como se emplean para hibridaciones cruzadas entre especies).
A modo de ejemplo, y no como limitación, los procedimientos que usan condiciones de rigurosidad moderada incluyen, por ejemplo, pero sin limitación, procedimientos que usan dichas condiciones de rigurosidad moderada de la forma siguiente: Filtros que contienen ADN se tratan previamente durante 6 horas a 55ºC en una solución que contiene SSC 6X, solución de Denhart 5X, SDS al 0,5% y ADN de esperma de salmón desnaturalizado 100 g/ml. Las hibridaciones se realizan en la misma solución y se usa sonda marcada con 32P 5-20 X 106. Los filtros se incuban en mezcla de hibridación durante 18-20 horas a 55ºC y después se lavan dos veces durante 30 minutos a 60ºC en una solución que contiene SSC 1X y SDS al 0,1%. Los filtros se transfieren en seco y se exponen a autorradiografía. Otras condiciones de rigurosidad moderada que pueden usarse son bien conocidas en la técnica. El lavado de los filtros se realiza a 37ºC durante 1 hora en una solución que contiene SSC 2X, SDS al 0,1%.
A modo de ejemplo y no como limitación, los procedimientos que usan condiciones de alta rigurosidad son de la forma siguiente: Se realiza una hibridación previa de filtros que contienen ADN durante de 8 horas a una noche a 65ºC en tampón compuestos por SSC 6X, Tris-HCI 50 mM (pH 7,5), EDTA 1 mM, PVP al 0,02%, Ficoll al 0,02%,
17 5
15
25
35
45
55
65
BSA al 0,02% y ADN de esperma de salmón desnaturalizado 500 g/ml. Los filtros hibridan durante 48 horas a 65ºC en mezcla de prehibridación que contiene ADN de esperma de salmón desnaturalizado 100 g/ml y sonda marcada con 32P de 5-20 X 106 CPM. El lavado de los filtros se realiza a 37ºC durante 1 hora en una solución que contiene SSC 2X, PVP al 0,01%, Ficoll al 0,01% y BSA al 0,01%. Esto se sigue de un lavado en SSC 0,1 X a 50ºC durante 45 minutos antes de la autorradiografía. Se conocen bien en la técnica otras condiciones de alta rigurosidad que pueden usarse.
El término sustancialmente idéntico o sustancialmente homólogo o similar varía con el contexto como entienden los especialistas en la técnica pertinente, y generalmente se refiere a una identidad de al menos el 60% o 70%, preferiblemente se refiere a de al menos el 80%, el 85% o más preferiblemente a de al menos el 90% y más preferiblemente de al menos el 95%.
Como se usa en este documento, sustancialmente idéntico a un producto significa sustancialmente similar de modo que la propiedad de interés permanece suficientemente sin cambios, de modo que el producto sustancialmente idéntico puede usarse en lugar del producto.
Como se usa en este documento, sustancialmente puro significa suficientemente homogéneo para parecer libre de impurezas fácilmente detectables como se determina por métodos de análisis convencionales, tales como cromatografía en capa fina (TLC), electroforesis en gel y cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC), usadas por los especialistas en la técnica para evaluar dicha pureza, o suficientemente puro de modo que una purificación adicional no alteraría de forma detectable las propiedades físicas y químicas, tales como actividades enzimáticas y biológicas de la sustancia. Los especialistas en la técnica conocen métodos para purificación de los compuestos para producir compuestos sustancialmente químicamente puros. Un compuesto sustancialmente químicamente puro puede ser sin embargo una mezcla de esteroisómeros o isómeros. En tales casos, una purificación adicional puede aumentar la actividad específica del compuesto.
Como se usa en este documento, una célula diana se refiere a una célula que expresa una sHASEGP in vivo.
Como se usa en este documento, una sustancia de ensayo (o compuesto de ensayo) se refiere a un compuesto químicamente definido (por ejemplo, moléculas orgánicas, moléculas inorgánicas, moléculas orgánicas/inorgánicas, proteínas, péptidos, ácidos nucleicos, oligonucleótidos, lípidos, polisacáridos, sacáridos o híbridos entre estas moléculas tales como glicoproteínas, etc.) o mezclas de compuestos (por ejemplo, una biblioteca de compuestos de ensayo, extractos naturales o sobrenadantes de cultivo, etc.) cuyo efecto sobre una sHASEGP, particularmente una forma de cadena sencilla que incluye el dominio hialuronidasa o una porción suficiente del mismo para la actividad, como se determina por un método in vitro, tal como los ensayos proporcionados en este documento.
Como se usan en este documento, las expresiones agente terapéutico, régimen terapéutico, radioprotector o quimioterápico se refieren a fármacos convencionales y terapias farmacológicas, incluyendo vacunas, que son conocidos por los especialistas en la técnica. Se conocen bien en la técnica agentes radioterápicos.
Como se usa en este documento, el tratamiento se refiere a cualquier forma en la que los síntomas de una afección, trastorno o enfermedad se mejoren o se alteren beneficiosamente de otro modo.
El tratamiento también incluye cualquier uso farmacéutico de las composiciones de este documento.
Como se usa en este documento, un vector (o plásmido) se refiere a elementos discretos que se usan para introducir un ácido nucleico heterólogo en células para la expresión o replicación del mismo. Los vectores permanecen típicamente episomales, pero pueden diseñarse para lograr la integración de un gen o porción del mismo en un cromosoma del genoma. También se contemplan vectores que sean cromosomas artificiales, tales como cromosomas artificiales de levadura y cromosomas artificiales de mamíferos. La selección y uso de dichos vehículos se conoce bien por los especialistas en la técnica. Un vector de expresión incluye vectores capaces de expresar ADN que está unido operativamente con secuencias reguladoras, tales como regiones promotoras, que son capaces de lograr la expresión de dichos fragmentos de ADN. Por lo tanto, un vector de expresión se refiere a una construcción de ADN o ARN recombinante, tal como un plásmido, un fago, virus recombinante u otro vector que, tras la introducción en una célula hospedadora apropiada, dé como resultado la expresión del ADN clonado. Los especialistas en la técnica conocen bien vectores de expresión apropiados e incluyen los que pueden replicarse en células eucariotas y/o células procariotas y los que permanecen episomales o los que se integran en el genoma de células hospedadoras.
Como se usa en este documento, una secuencia de unión a proteínas se refiere a una proteína o secuencia peptídica que es capaz de la unión específica a otra proteína o secuencias peptídicas, generalmente, a un conjunto de proteínas o secuencias peptídicas o a una proteína o secuencia peptídica particular.
Como se usa en este documento, un marcador epitópico se refiere a una extensión corta de restos aminoacídicos que se corresponde con un epítopo para facilitar el análisis bioquímico e inmunológico posterior de la proteína o péptido marcado con epítopo. El marcaje con epítopo se consigue incluyendo la secuencia del marcador epitópico
18
imagen12
5
15
25
35
45
55
65
abreviado como Neu5Ac, NeuAc, o NANA). Un segundo miembro de la familia es el ácido N-glicolil-neuramínico (Neu5Gc o NeuGc), en el que el grupo N-acetilo del NeuAc está hidroxilado. Un tercer miembro de la familia del ácido siálico es el ácido 2-ceto-3-desoxi-nonulosónico (KDN) (Nadano et al. (1986) J. Biol. Chem. 261: 11550-11557; Kanamori et al. (1990) J. Biol. Chem. 265:21811-21819. También se incluyen ácidos siálicos sustituidos en posición 9 tales como 9-O-C1-C6 acil-Neu5Ac como 9-O-lactil-Neu5Ac o 9-O-acetil-Neu5Ac, 9-desoxi-9-fluoro-Neu5Ac y 9azido-9-desoxi-Neu5Ac. Para una revisión de la familia del ácido siálico véase, por ejemplo, Varki (1992) Glycobiology 2: 25-40; Sialic Acids: Chemistry, Metabolism and Function, R. Schauer, Ed. (Springer-Verlag, N.Y. (1992)). La síntesis y uso de compuestos de ácido siálico en un procedimiento de sialación se describe en la solicitud internacional WO 92/16640, publicada el 1 de octubre de 1992.
Como se usa en este documento, la PNGasa se refiere a una N-glicosidasa F específica de Péptido de Asparragina, tal como la péptido-N-glicosidasa F de Flavobacterium maningoseptum. Las enzimas PNGasa se caracterizan por su especificidad hacia oligosacáridos ligados a N más que ligados a O. La caracterización de la eficacia de PNGasa puede definirse tanto por electroforesis de SDS PAGE o electroforesis de carbohidratos asistida por fluorescencia.
Como se usa en este documento, una sialación sustancialmente terminada se refiere a oligosacáridos ligados a N que terminan con resto ácido siálico como azúcar terminal. Pueden identificarse ácidos siálicos terminales mediante análisis FACE de carbohidratos liberados después del tratamiento con neuraminidasa.
La vida circulatoria de las glicoproteínas en sangre es altamente dependiente de la composición y estructura de sus grupos carbohidrato ligados a N. Este hecho es de una importancia directa para las glicoproteínas terapéuticas que pretenden administrarse por vía parenteral. En general, la semivida circulatoria máxima de una glicoproteína requiere que sus grupos carbohidrato ligados a N terminen en la secuencia NeuAc-Gal-GlcNAc. Sin el ácido siálico terminal (NeuAc) la glicoproteína se aclara rápidamente de la sangre mediante un mecanismo que implica el reconocimiento de los restos N-acetilgalactosamina (GalNAc) o galactosa (Gal) subyacentes (Goocheeetal. (1991) Biol/Technology 9:1347-1355). Por esta razón, asegurar la presencia de ácido siálico terminal en grupos carbohidrato ligados a N de glicoproteínas terapéuticas es una consideración importante para su desarrollo comercial.
Las glicoproteínas circulantes están expuestas a sialidasas (o neuraminidasa) que pueden eliminar los restos ácido siálico terminales. Típicamente, la eliminación del ácido siálico expone restos galactosa y estos restos se reconocen y se unen por receptores específicos de galactosa en los hepatocitos (revisado en Ashwell y Harford (1982) Ann. Rev. Biochem. 51: 531). El hígado también contiene otros receptores específicos de azúcar que median la eliminación de glicoproteínas de la circulación. Las especificidades de dichos receptores también incluyen Nacetilglucosamina, manosa, fucosa y fosfomanosa. Las glicoproteínas eliminadas por los receptores galactosa de los hepatocitos experimentan una degradación sustancial y después entran en la bilis; las glicoproteínas eliminadas por el receptor de manosa de células de Kupffer entran en el sistema reticuloendotelial (revisado en Ashwell y Harford (1982) Ann. Rev. Biochem. 51:53).
Como se usa en este documento, la expresión activa a pH Neutro se refiere a una glicoproteína sHASEGP con actividad catalítica hacia un sustrato de glicosaminoglicano in vitro a un pH de entre 5 y 8 en condiciones de sal menores de 150 mM y potencia tamponante menor de 50 mM.
Como se usa en este documento, una solución estabilizada se refiere a una sHASEGP que conserva más del 60% de su actividad inicial después del almacenamiento a temperatura ambiente durante 30 días.
Como se usa en este documento, a menos que se especifique otra cosa, una unidad se expresa en unidades reductoras de turbidez (TRU). Una TRU se define como la cantidad de actividad hiauloronidasa necesaria para reducir la turbidez de una solución acidificada de ácido hialurónico y es equivalente a las unidades U.S.P./National Formulary (NF XIII) (NFU). El ensayo enzimático de tipo ELISA descrito en este documento puede relacionarse con las unidades TRU, NFU y USP a través de una curva patrón de una muestra de hialuronidasa (por ejemplo, patrón de USP o WHO) estandarizada a través de la U.S.P. Por lo tanto, las actividades enzimáticas determinadas mediante el ensayo enzimático de tipo ELISA son en realidad TRU relativas, puesto que la actividad enzimática no se mide realmente usando el ensayo turbidimétrico (Dorfman et al., 1948, J. Biol. Chem. 172: 367).
Como se usa en este documento, la potencia se define por la cantidad de proteína sHASEGP necesaria para degradar un sustrato in vitro basándose en una Unidad Reductora de Turbidez o Unidad Reductora de Turbidez Relativa.
Como se usa en este documento, la actividad específica se refiere a unidades de actividad por mg de proteína. La cantidad de proteína sHASEGP se obtiene por la absorción de una solución de sHASEGP a 280 nm asumiendo un coeficiente de extinción molar de aproximadamente 1,7, en unidades de M-1 cm-1 .
El polietilenglicol (PEG) se ha usado ampliamente en biomateriales, en biotecnología y medicina principalmente debido a que el PEG es un polímero biocompatible, no tóxico, no inmunogénico y soluble en agua (Zhao y Harris, ACS Symposium Series 680: 458-72,1997). En el área de suministro de fármacos, se han usado ampliamente
20
imagen13
5
10
15
20
25
30
35
Las moléculas poliméricas preferidas son moléculas poliméricas no tóxicas tales como (m)polietilenglicol (mPEG), que requiere además una química relativamente simple para su acoplamiento covalente a grupos de unión en la superficie de la enzima.
Los óxidos de polialquileno (PAO) que se observan generalmente, tales como óxidos de polietileno, tales como PEG y especialmente mPEG son las moléculas poliméricas preferidas ya que estas moléculas poliméricas, en comparación con polisacáridos tales como dextrano, pululano y similares, tienen pocos grupos reactivos capaces de entrecruzarse, no siendo deseable.
B. PERFILES DE EXPRESIÓN TISULAR DE sHASEGP
Aunque anteriormente se pensaba que era específica de testículo, la sHASEGP humana se expresa en múltiples tejidos en seres humanos cuando se usan técnicas más sensibles tales como RT-PCR. El transcrito de sHASEGP se encuentra en médula (cerebro), endotelio microvascular, próstata, mama, retina, melanocitos humanos combinados, corazón fetal y útero gestante. La sHASEGP también se expresa en tumores de células germinales. Generalmente es necesaria la detección basada en RT-PCR de transcritos de sHASEGP para detectar niveles en tejidos distintos de testículo.
C. ENSAYOS PARA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE sHASEGP
ENSAYO DE MICROTITULACIÓN TURBIDOMÉTRICO PARA DETERMINAR LA ACTIVIDAD HIALURONIDASA
La actividad hialuronidasa puede detectarse por medio de un ensayo turbidimétrico modificado en solución de suero acidificado. Los reactivos necesarios son los siguientes:
Agua desionizada 2X esterilizada por UV o agua estéril para irrigación
Braun R5000-01
Hylumed Medical -Hialuronato Sódico, HA de Alto Peso Molecular
Genzyme Advanced Biomaterials 4876
Patrón de Referencia de Hialuronidasa
USP 31200
Acetato Potásico, Granular, USP, ACS
JTBaker 2914-01
Ácido Acético, Glacial, 99+ %
Sigma A-6283
Fosfato Sódico Monobásico Monohidrato, USP Granular
Mallinkrodt 7774
Fosfato Sódico Dibásico Anhidro, USP
Mallinkrodt 7771
Cloruro Sódico, Cristales, GR, ACS
EMScience SX0420-5
Hidrolizado Enzimático de Gelatina
Sigma G-0262
Suero de Caballo, rebaño donante, ensayo de cultivo celular, cultivo de hibridoma ensayado, origen de Estados Unidos
Sigma H-1270
Albúmina de Suero Humano al 20 %
Griffols
Ácido Clorhídrico, Reactivo ACS
Sigma H-7020
Cloruro de Calcio, Dihidrato, Granular USP, -FCC
JTBaker 1336-01
Se preparan los siguientes reactivos: Solución de Tampón Acetato-14,0 g de acetato potásico y 25,0 ml de ácido acético glacial en agua para hacer 1000 ml. Solución de Tampón Fosfato-2,5 g de fosfato sódico monobásico, 1,0 g de fosfato sódico dibásico anhidro y 8,2 g de cloruro sódico en agua para hacer 1000 ml. Solución Madre de Diluyente Enzimático-500 ml de Solución de Tampón Fosfato con 500 ml de agua. Solución de Trabajo de Diluyente Enzimático-33 mg de gelatina hidrolizada en 50 ml de solución madre de diluyente enzimático preparada en un intervalo de 2 horas antes del uso. Solución de Tampón de Estabilización de Muestras (Solución "SSB")-125 l de una Solución de Albúmina Sérica Humana al 20% y 50 l de una solución de Cloruro de Calcio 1 M en 50 ml de Solución de Trabajo de Diluyente Enzimático y se mezcla minuciosamente. Solución Madre de Suero-Diluir 1 volumen de Suero de Caballo con 9 volúmenes de Solución de Tampón Acetato. Ajustar con ácido clorhídrico 4 N a un pH de 3,1 y dejar la solución reposar a temperatura ambiente durante de 18 a 24 h. Almacenar la solución a 4ºC y usar en 30 días. Solución de Trabajo de Suero-10 ml de la Solución Madre de Suero en 30 ml de la Solución de Tampón Acetato ajustados a temperatura ambiente. Solución Madre de Ácido Hialurónico-Ácido Hialurónico Sódico
22
a una concentración de 5,0 mg/ml en agua. Solución de Trabajo de Ácido Hialurónico-0,75 ml de la Solución Madrede Ácido Hialurónico en 4,25 ml de la Solución de Tampón Fosfato. Solución Madre Convencional-Un recipiente de Hialuronidasa Patrón de Referencia USP a una concentración de 1000 Unidades/ml en agua, dividida en alícuotas en porciones de 50 l y almacenada a -20ºC. Solución de Trabajo Convencional-40 l de Solución Madre
5 Convencional en 960 l de Solución de Trabajo de Diluyente Enzimático fría para obtener una solución que tiene una concentración conocida de 40 Unidades/ml, preparada inmediatamente antes del uso en el ensayo.
Todas las muestras enzimáticas se diluyen en una placa de 96 pocillos de “Baja Unión a Proteína” de acuerdo con las siguientes directrices:
10 a) El intervalo de sensibilidad máxima de este ensayo está entre 10-30 Unidades/ml. Para minimizar el número de veces que debe repetirse un ensayo para obtener resultados que estén dentro del intervalo, se determina primero el número aproximado de unidades totales/ml para la muestra y después se selecciona una dilución (número absoluto) de modo que la concentración final sea de aproximadamente 20 Unidades/ml.
15 b) Los volúmenes de Muestra Mínimos necesarios para realizar un ensayo son los siguientes: Fracciones FPLC = 50 l, Sobrenadantes de Cultivo Tisular = 1 ml, Material Purificado/Concentrado/Etapa Final = 10 l.
c) Para muestras con diluciones seriadas, se realizan diluciones 1:10 en la placa de 96 pocillos de “Baja Unión a 20 Proteínas” por triplicado por pipeteo de 360 l de la solución “SSB” y 40 l de la muestra en cada pocillo.
Para la preparación de Patrón USP se prepara la Curva Patrón de USP en la placa de 96 pocillos de “Baja Unión a Proteína” de la forma siguiente:
Curva Patrón USP
Sol. de Diluente Enzimático Sol. de Trabajo Convencional Conc. Final (en Pocillos: Patrón: (en l):
Unidades/ml):(en l):
A1-A3 St01 0 100 40 B1-B3 St02 20 80 32 C1-C3 St03 40 60 24 D1-D3 St04 60 40 16 E1-E3 St05 80 20 8 F1-F3 St06 90 10 4 G1-G3 St07 100 0 0
25 Para la preparación del control de Ácido Hialurónico en las columnas 1-3, se prepara el Control de H.A. en la placa de 96 pocillos “de Fondo Plano” de la forma siguiente:
Controles de H.A.: Sol. de Trabajo de Ácido Hialurónico Sol. de Trabajo de Diluyente Enzimático Pocillos: Control: (en l):
(en l):
H1-H3 Co01 0 60
30 La Placa de Reacción: se pipetean 30 l por pocillo de Solución de Trabajo de Ácido Hialurónico usando una pipeta de transferencia de 8 canales de 50 l en una placa de microtitulación de 96 pocillos “de Fondo Plano”, dejando vacíos los pocillos H1-H3. Se pipetean 60 l/pocillo de Solución de Trabajo de Diluyente Enzimático en los pocillos H1-H3 de la misma placa como el control de HA.
35 Solución de Trabajo de Suero: se dispensan 40 ml de Solución de Trabajo de Suero en una cubeta de transferencia y próxima al termobloque.
Etapa de precalentamiento: Una vez que se han preparado ambas placas, la placa de 96 pocillos de Baja Unión a Proteína que contiene las muestras diluidas, patrones, controles y la placa de 96 pocillos de fondo plano que 40 contiene la Solución de Trabajo de Ácido Hialurónico se colocan en un termobloque y se deja que se calienten durante 5 min a 37ºC.
La Reacción se inicia mediante la adición de Enzima a Sustrato: 30 l de la placa de enzima en todos los pocillos de la columna nº 1 de la placa de fondo plano de 96 Pocillos (que contiene el sustrato) usando una pipeta de 8 canales 45 de 5-50 l. La mezcla de reacción de Enzima/Sustrato se aspira 5 veces (retirando la solución hacia arriba y hacia abajo con la transferencia durante los primeros 15 segundos para asegurar una mezcla de muestra completa. Después de mezclar la enzima y el sustrato, las puntas se expulsan y se carga un nuevo conjunto de puntas en la pipeta de transferencia para la siguiente columna. Se reinicia un temporizador y a tiempo (t) = 0:30, se repite este proceso para la columna 2. En el siguiente intervalo de 30 segundos (t) = 1:00, se repite este proceso para la
50 columna 3. Este proceso se repite desplazándose de izquierda a derecha a través de la placa, cada 30 segundos hasta que todos los pocillos contengan tanto enzima como sustrato.
23
imagen14
5
15
25
35
45
55
65
identificadas como cebadores para amplificar por PCR secuencias a partir de una muestra de ácido nucleico (ARN o ADN, generalmente una genoteca de ADNc) a partir de una fuente apropiada (por ejemplo, testículo, próstata, mama).
Puede realizarse una PCR, por ejemplo, mediante el uso de un termociclador Perkin-Elmer Cetus y Taq polimerasa (Gene Amp). El ADN que se amplifica puede incluir ARNm, o ADNc o ADN genómico de cualquier especie eucariota. Se puede elegir sintetizar varios cebadores degenerados diferentes para el uso en las reacciones de PCR.
También es posible variar la rigurosidad de las condiciones de hibridación usadas en el cebado de las reacciones de PCR para amplificar homólogos de ácido nucleico (por ejemplo, para obtener secuencias de polipéptido sHASEGP de especies distintas de seres humanos o para obtener secuencias humanas con homología con polipéptido sHASEGP), permitiendo mayores o menores grados de similitud de secuencia de nucleótidos entre la secuencia de nucleótidos conocida y el homólogo de ácido nucleico que se está aislando. Para hibridación cruzada entre especies, se usan condiciones de baja rigurosidad a rigurosidad moderada. Para hibridación en la misma especie, se usan condiciones de moderadamente rigurosas a altamente rigurosas. Las condiciones pueden determinarse empíricamente.
Después de la amplificación con éxito del ácido nucleico que contiene toda o una porción de la secuencia polipeptídica de sHASEGP identificada o de un ácido nucleico que codifica toda o una porción de un homólogo polipeptídico de sHASEGP, ese segmento puede clonarse molecularmente y secuenciarse, y usarse como sonda para aislar un clon de ADNc o genómico completo. Esto a su vez permite la determinación de la secuencia de nucleótidos completa del gen, el análisis de su expresión y la producción de su producto proteico para su análisis funcional. Una vez que se determina la secuencia de nucleótidos, puede determinarse una fase de lectura abierta que codifica el producto proteico del gen de polipéptido sHASEGP por cualquier método bien conocido en la técnica para determinar fases de lectura abiertas, por ejemplo, usando programas informáticos disponibles públicamente para el análisis de secuencias de nucleótidos. Una vez que se define una fase de lectura abierta, es rutinario determinar la secuencia de aminoácidos de la proteína codificada por la fase de lectura abierta. De este modo, pueden identificarse las secuencias de nucleótidos de los genes de polipéptidos sHASEGP completos, así como las secuencias de aminoácidos de proteínas polipeptídicas sHASEGP y análogos.
Cualquier célula eucariota puede servir potencialmente como la fuente de ácido nucleico para la clonación molecular del gen de polipéptido sHASEGP. Los ácidos nucleicos pueden aislarse a partir de vertebrados, mamíferos, seres humanos, porcinos, bovinos, felinos, aves, equinos, caninos, así como fuentes de primates adicionales, insectos, plantas y otros organismos. El ADN puede obtenerse mediante procedimientos convencionales conocidos en la técnica a partir de ADN clonado (por ejemplo, una “genoteca” de ADN), por síntesis química, por clonación de ADNc
o mediante la clonación de ADN genómico o fragmentos del mismo, purificados a partir de la célula deseada (véase, por ejemplo, Sambrook et al. 1989, Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 2ª Ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, Nueva York; Glover, D. M. Ed., 1985, DNA Cloning : A Practical Approach, MRL Press, Ltd., Oxford, Reino Unido Vol. 1,11. Los clones derivados de ADN genómico pueden contener regiones de ADN reguladoras e intrónicas además de las regiones codificantes; los clones derivados de ADNc contendrán solamente secuencias exónicas. Para cualquier fuente, el gen se clona en un vector adecuado para la propagación del mismo.
En la clonación molecular del gen a partir de ADN genómico, se generan fragmentos de ADN, algunos de los cuales codificarán el gen deseado.
El ADN puede escindirse en sitios específicos usando diversas enzimas de restricción.
Como alternativa, se puede usar ADNasa en presencia de manganeso para fragmentar el ADN o el ADN puede romperse físicamente, por ejemplo, por sonicación. Los fragmentos de ADN lineal pueden separarse después de acuerdo con el tamaño mediante técnicas convencionales, incluyendo pero sin limitación, electroforesis en gel de agarosa y poliacrilamida y cromatografía en columna.
Una vez que se generan los fragmentos de ADN, la identificación del fragmento de ADN específico que contiene el gen deseado puede conseguirse de varias formas.
Por ejemplo, una porción del gen de polipéptido sHASEGP (de cualquier especie) (por ejemplo, un producto de amplificación de PCR obtenido como se ha descrito anteriormente o un oligonucleótido que tiene una secuencia de una porción de la secuencia de nucleótidos conocida) o su ARN específico, o un fragmento del mismo, puede purificarse y marcarse y los fragmentos de ADN generados pueden explorarse mediante hibridación de ácido nucleico con la sonda marcada (Benton y Davis, Science 196: 180 (1977); Grunstein y Hogness, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 72: 3961 (1975)). Los fragmentos de ADN con una homología sustancial con la sonda hibridarán. También es posible identificar el fragmento apropiado mediante digestión o digestiones con enzimas de restricción y la comparación de los tamaños de fragmento con los esperados de acuerdo con un mapa de restricción conocido, si dicho mapa está disponible, o por análisis de secuencia de ADN y comparación con la secuencia de nucleótidos conocida de polipéptido sHASEGP. Puede realizarse una selección adicional en base a las propiedades del gen. Como alternativa, la presencia del gen puede detectarse mediante ensayos basados en las propiedades físicas,
25 5
15
25
35
45
55
65
químicas o inmunológicas de su producto expresado. Por ejemplo, pueden seleccionarse clones de ADNc o clones de ADN que seleccionen por hibridación el ARNm apropiado que produce una proteína que, por ejemplo, tiene una migración electroforética, un comportamiento de concentración isoeléctrica, mapas de digestión proteolítica, propiedades antigénicas, actividad hialuronidasa similares o idénticas. Si está disponible un anticuerpo antipolipéptido sHASEGP, la proteína puede identificarse por unión de anticuerpo marcado con los clones que sintetizan supuestamente el polipéptido sHASEGP en un procedimiento de tipo ELISA (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas).
Las alternativas para aislar el ADN genómico de polipéptido sHASEGP incluyen, pero sin limitación, sintetizar químicamente la secuencia génica a partir de una secuencia conocida o convertir el ADNc en el ARNm que codifique el polipéptido sHASEGP.
Por ejemplo, el ARN para clonar ADNc del gen de polipéptido sHASEGP puede aislarse de células que expresan la proteína. Los ácidos nucleicos identificados y aislados pueden insertarse después en un vector de clonación apropiado. Pueden usarse un gran número de sistemas de vector-hospedador conocidos en la técnica. Los vectores posibles incluyen, pero sin limitación, plásmidos o virus modificados, pero el sistema vector debe ser compatible con la célula hospedadora usada. Dichos vectores incluyen, pero sin limitación, bacteriófagos tales como derivados de lambda o plásmidos tales como derivados de plásmidos pBR322 o pUC o el vector Bluescript (Stratagene, La Jolla, CA). La inserción en un vector de clonación puede conseguirse, por ejemplo, por ligación del fragmento de ADN en un vector de clonación que tenga extremos terminales cohesivos complementarios.
Si los sitios de restricción complementarios usados para fragmentar el ADN no están presentes en el vector de clonación, los extremos de las moléculas de ADN pueden modificarse enzimáticamente. Como alternativa, puede producirse cualquier sitio deseado por ligación de secuencias de nucleótidos (enlazadores) en los extremos terminales del ADN; estos enlazadores ligados pueden incluir oligonucleótidos sintetizados químicamente específicos que codifican secuencias de reconocimiento de endonucleasas de restricción. En un método alternativo, el vector escindido y el gen de polipéptido sHASEGP pueden modificarse por formación de colas homopoliméricas.
Las moléculas recombinantes pueden introducirse en células hospedadoras por transformación, transfección, infección, electroporación, precipitación con calcio y otros métodos, de modo que se generen muchas copias de la secuencia génica.
En realizaciones específicas, la transformación de células hospedadoras con moléculas de ADN recombinante que incorporan el gen de polipéptido sHASEGP aislado, ADNc o secuencias de ADN sintetizadas, permite la generación de múltiples copias del gen.
Por lo tanto, el gen puede obtenerse en grandes cantidades por cultivo de transformantes, aislamiento de las moléculas de ADN recombinante a partir de los transformantes y, cuando sea necesario, recuperación del gen insertado a partir del ADN recombinante aislado.
E. VECTORES, PLÁSMIDOS Y CÉLULAS QUE CONTIENEN ÁCIDOS NUCLEICOS QUE CODIFICAN UN POLIPÉPTIDO SHASEGP O DOMINIO HIALURONIDASA DEL MISMO Y EXPRESIÓN DE VECTORES DE POLIPÉPTIDOS SHASEGP Y CÉLULAS
Para la expresión recombinante de uno o más de los polipéptidos sHASEGP, el ácido nucleico que contiene toda o una porción de la secuencia de nucleótidos que codifica el polipéptido sHASEGP puede insertarse en un vector de expresión apropiado, es decir, un vector que contenga los elementos necesarios para la transfección y traducción de la secuencia codificante de proteína insertada. Las señales de transcripción y traducción necesarias también pueden suministrarse mediante el promotor nativo para genes de sHASEGP y/o sus regiones flanqueantes.
También se proporcionan vectores que contienen un ácido nucleico que codifica las sHASEGP que pueden introducirse en un sistema de expresión capaz de producir una sHASEGP soluble activa a pH neutro.
También se proporcionan células que contienen los vectores. Las células incluyen células eucariotas y procariotas y los vectores adecuados para el uso en las mismas.
Se proporcionan células eucariotas, incluyendo Células de Ovario de Hámster Chino deficientes en dihidrofolato reductasa (DG44), que contienen los vectores. Las células adecuadas incluyen células de levadura, células fúngicas, células vegetales, células de insecto y células animales. Las células se usan para producir un polipéptido sHASEGP
o dominio Hialuronidasa del mismo mediante (a) cultivo de las células descritas anteriormente en condiciones por las que el polipéptido sHASEGP codificado o dominio hialuronidasa del polipéptido sHASEGP se expresa por la célula y, después (b) recuperación de la proteína de dominio hialuronidasa expresada. En las realizaciones ejemplificadas, el dominio hialuronidasa se secreta en el medio.
En una realización, se proporcionan vectores que incluyen una secuencia de nucleótidos que codifica un polipéptido que tiene actividad Hialuronidasa y contiene toda o una porción de sólo el dominio hialuronidasa, o múltiples copias
26
imagen15
imagen16
5
15
25
35
45
55
65
PURIFICACIÓN DE SHASEGP
Pueden cultivarse células hospedadoras transformadas con una secuencia de nucleótidos de sHASEGP en condiciones adecuadas para la expresión y recuperación de la proteína purificada a partir del cultivo celular. La proteína producida mediante una célula recombinante se secreta. Como se entenderá por los especialistas en la técnica, pueden diseñarse vectores de expresión que contienen sHASEGP con secuencias señal que faciliten la secreción directa de sHASEGP a través de una membrana celular procariota o eucariota. Otras construcciones recombinantes pueden unir la sHASEGP a una secuencia de nucleótidos que codifica un dominio polipeptídico que facilitará la purificación de proteínas solubles (Kroll D J et al (1993) DNA Cell Biol 12: 441-53; consúltese la discusión de vectores a continuación que contienen proteínas de fusión).
La sHASEGP también puede expresarse como proteína recombinante con uno o más dominios polipeptídicos adicionales añadidos para facilitar la purificación de proteína. Dichos dominios de facilitación de la purificación incluyen, pero sin limitación, péptidos de quelación de metales tales como módulos de histidina-triptófano que permiten la purificación sobre metales inmovilizados, dominios de proteína A que permiten la purificación sobre inmunoglobulina inmovilizada, y el dominio utilizado en el sistema de extensión/purificación por afinidad FLAGS (Immunex Corp, Seattle Wash). La inclusión de secuencias enlazadoras escindibles tales como Factor XA o enteroquinasa (Invitrogen, San Diego Calif.) entre el dominio de purificación y la sHASEGP es útil para facilitar la purificación. Un vector de expresión de este tipo proporciona la expresión de una proteína de fusión que comprende una sHASEGP y contiene un ácido nucleico que codifica 6 restos histidina seguido de tiorredoxina y un sitio de escisión de enteroquinasa. Los restos histidina facilitan la purificación sobre IMIAC (cromatografía de afinidad de iones metálicos inmovilizados, como se describe en Porath et al (1992) Protein Expression and Purification 3: 263281), mientras que el sitio de escisión enteroquinasa proporciona un medio para purificar la quimiocina a partir de la proteína de fusión.
Además de la producción recombinante, pueden producirse fragmentos de sHASEGP mediante síntesis peptídica directa usando técnicas en fase sólida (consúltese Stewart et al (1969) Solid-Phase Peptide Synthesis, W H Freeman Co, San Francisco; Merrifield J (1963) J Am Chem Soc 85: 2149-2154). La síntesis de proteínas in vitro puede realizarse usando técnicas manuales o mediante automatización. Puede conseguirse una síntesis automática, por ejemplo, usando un sintentizador de péptidos Applied Biosystems 431A (Perkin Elmer, Foster City Calif.) de acuerdo con las instrucciones proporcionadas por el fabricante. Diversos fragmentos de sHASEGP pueden sintetizarse químicamente por separado y combinarse usando métodos químicos para producir la molécula de longitud completa.
Se generan vectores de expresión que contienen las secuencias codificantes, o porciones de los mismos de un polipéptido sHASEGP, por ejemplo, subclonando las porciones codificantes en el sitio de restricción de EcoR1 de cada uno de los tres vectores PGEX (vectores de expresión de glutatión S-transferasa (Smith y Johnson, Gene 7: 31-40 (1988)). Esto permite la expresión de productos en la fase de lectura correcta. Los vectores y sistemas ejemplares para la expresión de los dominios hialuronidasa de los polipéptidos sHASEGP incluyen los vectores de Pichia bien conocidos (disponibles, por ejemplo, en Invitrogen, San Diego, CA), particularmente los diseñados para la secreción de las proteínas codificadas. La proteína también puede expresarse citoplásmicamente, tal como en los cuerpos de inclusión. Se describe en los ejemplos un vector ejemplar.
Los plásmidos para la transformación de células de E. coli, incluyen, por ejemplo, los vectores de expresión pET (véase, la patente de Estados Unidos 4.952.496; disponibles en Novagen, Madison, WI; véase también la bibliografía publicada por Novagen que describe el sistema).
Dichos plásmidos incluyen pET 11a, que contiene el promotor lac de T7, el terminador de T7, el operador lac de E. coli inducible y el gen represor de lac; pET 12A-C, que contiene el promotor de T7, el terminador de T7 y la señal de secreción OMPT de E. coli; y pET 15B y PET19B (Novagen, Madison, Wi), que contienen una secuencia líder marcada con His para uso en la purificación con una columna de His y un sitio de escisión de trombina que permite la escisión después de la purificación sobre la columna; la región promotora lac de T7 y el terminador de T7.
Los vectores se introducen en células hospedadoras, tales como células de Pichia y células bacterianas, tales como
E. coli, y las proteínas se expresan en las mismas. Las cepas de Pichia ejemplares incluyen, por ejemplo, GS115. Los hospedadores bacterianos ejemplares contienen copias cromosómicas de ADN que codifica la ARN polimerasa de T7 unida operativamente a un promotor inducible, tal como el promotor LACUV (véase, la Patente de Estados Unidos Nº 4.952.496). Dichos hospedadores incluyen, pero sin limitación, la cepa de E. coli lisogénica BL21 (DE3).
Los dominios, derivados y análogos de sHASEGP pueden producirse mediante diversos métodos conocidos en la técnica. Por ejemplo, una vez que se identifica una célula recombinante que expresa un polipéptido sHASEGP o un dominio, fragmento o derivado del mismo, el producto génico individual puede aislarse y analizarse. Esto se consigue mediante ensayos basados en las propiedades físicas y/o funcionales de la proteína, incluyendo, pero sin limitación, marcaje radioactivo del producto seguido de análisis mediante electroforesis en gel, inmunoensayo, entrecruzamiento con producto marcado con marcador y ensayos de actividad proteolítica.
29
imagen17
imagen18
5
15
25
35
45
55
65
182, 1-8). Se pueden resolver ciertos isómeros de oligosacáridos usando HPAEC. Los restos fucosa desplazarán las posiciones de elución antes en el cromatograma de HPAEC, mientras que los restos ácido siálico adicionales aumentarán el tiempo de retención. El tratamiento simultáneo de glicoproteínas cuyas estructuras de oligosacáridos se conocen (por ejemplo, fetuína bovina, glicoproteína ácida -1, ovoalbúmina, ARNasa B, transferrina) puede facilitar la asignación de los picos de oligosacáridos. Los oligosacáridos recogidos pueden caracterizarse por una combinación de análisis de composición y de enlaces por metilación (Waegheet. al; (1983), Carbohydr Res. 123, 281-304), asignándose las configuraciones anoméricas mediante espectroscopía de RMN (Van Halbeek (1993) en Methods Enzymol 230).
Como alternativa, pueden identificarse oligosacáridos mediante electroforesis de carbohidratos asistida por fluorescencia (FACE) Callewaert et al. (2001) Glycobiology 11, 275-281.
G. DETECCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE RESTOS DE AZÚCARES LIGADOS A N EN sHASEGP
La determinación de si una proteína está de hecho glicosilada es la etapa inicial en el análisis de glicanos de glicoproteínas. La electroforesis en gel de poliacrilamida en presencia de dodecilsulfato sódico (SDS-PAGE) se ha convertido en el método de elección como la etapa final antes de la secuenciación de proteínas. Las proteínas glicosiladas migran con frecuencia como bandas difusas mediante SDS-PAGE. Una disminución marcada en el ancho de banda y un cambio en la posición de migración después del tratamiento con péptido-N4-(N-acetil-Dglucosaminil)asparragina amidasa (PNGasa F) se considera diagnóstico de glicosilación ligado a N. Si los otros tipos de glicosilación son predominantes deben usarse otras estrategias. Los métodos de transferencia de lectina proporcionan una estrategia que es independiente de la clase de glicosilación (N frente a O). Las lectinas, proteínas de unión a carbohidratos de diversos tejidos vegetales, tienen tanto una alta afinidad como una estrecha especificidad por un amplio intervalo de epítopos de azúcares definidos que se encuentran en glicanos de glicoproteínas (Cummings, R. D. (1994) Methods in Enzymol. 230, 66-86). Cuando se conjugan con biotina o digoxigenina, pueden identificarse fácilmente sobre transferencias de membrana a través de una reacción colorimétrica que utiliza avidina o anticuerpos anti-digoxigenina conjugados con fosfatasa alcalina (Haselbeck, et al. (1993) Methods in Mol. Biol. 141, 161-173), análoga a las reacciones de anticuerpo secundario-fosfatasa alcalina empleadas en transferencias de Western. La exploración con un panel de lectinas con una especificidad bien definida puede proporcionar una información considerable acerca del complemento de carbohidratos de una glicoproteína. De forma importante, la amplificación del desarrollo de color es lo bastante alta para que puedan observarse fácilmente 10-50 ng de una glicoproteína en una transferencia de membrana de un SDS-PAGE. Aunque las lectinas presentan una afinidad muy elevada por sus ligandos afines, algunas ponen de manifiesto una avidez significativa por epítopos estructuralmente relacionados. Por lo tanto, es importante señalar cuidadosamente la posibilidad de reactividad cruzada cuando se selecciona un panel de lectinas y aplicar las que tengan la mayor probabilidad de diferenciar individualmente glicanos ligados a N complejos, híbridos y ricos en manosa de estructuras ligadas a O.
También puede usarse el análisis de monosacáridos para determinar si la sHASEGP está glicosilada y, como en el caso del análisis de lectina, proporciona información adicional sobre características estructurales. El análisis cuantitativo de la composición de monosacáridos i) identifica proteínas glicosiladas, ii) proporciona la proporción molar de azúcares individuales respecto a proteína, iii) sugiere, en algunos casos, la presencia de clases de oligosacáridos, iv) es la primera etapa en el diseño de una estrategia de elucidación estructural y v) proporciona una medida de la consistencia de producción para compuestos terapéuticos de glicoproteína recombinante. En los últimos años se ha usado ampliamente la cromatografía de intercambio aniónico a alto pH con detección amperométrica pulsada (HPAEC-PAD) para determinar la composición de monosacáridos (Townsend, et al. (1995) en Carbohydrate Analysis: High-performance liquid chromatography and capillary electrophoresis (Z. E1 Rassi ed.) págs. 181-209). Más recientemente, se han introducido métodos de marcaje basados en fluoróforos y muchos están disponibles en forma de kit. Una ventaja diferente de los métodos fluorescentes es un aumento en la sensibilidad (50 veces). Una desventaja potencial es que diferentes monosacáridos pueden demostrar diferente selectividad por el fluoróforo durante la reacción de acoplamiento, en el hidrolizado o en la mezcla patrón externa. Sin embargo, el aumento en la sensibilidad y la capacidad para identificar qué monosácaridos están presentes a partir de una pequeña porción de la cantidad total de glicoproteína disponible, así como el potencial de una mayor sensibilidad usando fluorescencia inducida por láser hace que esta estrategia sea atractiva.
El análisis de la composición de monosacáridos de pequeñas cantidades de sHASEGP se realiza mejor sobre membranas de PVDF (PSQ) después de electrotransferencia (Weitzhandleret al, (1993) J. Biol. Chem. 268, 51215130) o si se van a analizar alícuotas más pequeñas sobre transferencias puntuales. El PVDF es una matriz ideal para análisis de carbohidratos puesto que ni los mono-ni los oligosacáridos se unen a la membrana, una vez liberados por hidrólisis ácida o enzimática.
El análisis de FACE es un medio eficaz para detectar perfiles de glicosilación de sHASEGP. La generación de perfiles de oligosacáridos ligados a N FACE® (Prozyme) con geles de oligosacáridos al 30% es un mecanismo de este tipo. Los oligosacáridos escindidos a partir de 100 g de glicoproteínas por digestión enzimática con N-Glicanasa (también conocida como PNGasa), marcados usando el fluoróforo ANTS y separados por electroforesis pueden usarse para la detección de perfiles de glicosilación de sHASEGP. Las posiciones relativas de las bandas
32
imagen19
imagen20
imagen21
imagen22
imagen23
imagen24
imagen25
imagen26
imagen27
imagen28
imagen29
imagen30
imagen31
imagen32
imagen33
imagen34
imagen35
imagen36
imagen37
imagen38
imagen39
imagen40
imagen41
imagen42
imagen43
imagen44
imagen45
imagen46
imagen47
imagen48
imagen49
imagen50
imagen51
imagen52
imagen53
imagen54
imagen55

Claims (1)

  1. imagen1
ES10183410.9T 2003-03-05 2004-03-05 Glicoproteína hialuronidasa soluble (sHASEGP), proceso para prepararla, usos y composiciones farmacéuticas que la comprenden Expired - Lifetime ES2564103T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US45236003P 2003-03-05 2003-03-05
US452360P 2003-03-05

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2564103T3 true ES2564103T3 (es) 2016-03-17

Family

ID=32962713

Family Applications (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES10183410.9T Expired - Lifetime ES2564103T3 (es) 2003-03-05 2004-03-05 Glicoproteína hialuronidasa soluble (sHASEGP), proceso para prepararla, usos y composiciones farmacéuticas que la comprenden
ES09012670.7T Expired - Lifetime ES2532399T3 (es) 2003-03-05 2004-03-05 Glicoproteína hialuronidasa soluble (sHASEGP), proceso para prepararla, usos y composiciones farmacéuticas que la comprenden
ES09012669.9T Expired - Lifetime ES2526536T3 (es) 2003-03-05 2004-03-05 Glicoproteína hialuronidasa soluble (sHASEGP), proceso para prepararla, usos y composiciones farmacéuticas que la comprenden
ES04717941T Expired - Lifetime ES2335005T5 (es) 2003-03-05 2004-03-05 Glicoproteína hialuronidasa soluble (shasegp), proceso para prepararla, usos y composiciones farmacéuticas que la comprenden

Family Applications After (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES09012670.7T Expired - Lifetime ES2532399T3 (es) 2003-03-05 2004-03-05 Glicoproteína hialuronidasa soluble (sHASEGP), proceso para prepararla, usos y composiciones farmacéuticas que la comprenden
ES09012669.9T Expired - Lifetime ES2526536T3 (es) 2003-03-05 2004-03-05 Glicoproteína hialuronidasa soluble (sHASEGP), proceso para prepararla, usos y composiciones farmacéuticas que la comprenden
ES04717941T Expired - Lifetime ES2335005T5 (es) 2003-03-05 2004-03-05 Glicoproteína hialuronidasa soluble (shasegp), proceso para prepararla, usos y composiciones farmacéuticas que la comprenden

Country Status (26)

Country Link
US (14) US7767429B2 (es)
EP (7) EP2177620B1 (es)
JP (3) JP4464395B2 (es)
KR (4) KR20130135986A (es)
CN (2) CN1942588B (es)
AT (1) ATE448323T1 (es)
AU (2) AU2004218354B2 (es)
BR (1) BRPI0408116B1 (es)
CA (1) CA2517145C (es)
CY (6) CY1109750T1 (es)
DE (1) DE602004024041D1 (es)
DK (4) DK2405015T3 (es)
EA (1) EA009383B1 (es)
ES (4) ES2564103T3 (es)
FR (1) FR16C0030I1 (es)
HU (2) HUE027661T2 (es)
IL (2) IL170300A (es)
LU (2) LU92780I2 (es)
MX (1) MXPA05009429A (es)
NZ (1) NZ542873A (es)
PL (4) PL1603541T5 (es)
PT (3) PT1603541E (es)
SG (2) SG177008A1 (es)
SI (4) SI2177620T1 (es)
WO (1) WO2004078140A2 (es)
ZA (1) ZA200507978B (es)

Families Citing this family (290)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030212021A1 (en) * 2001-01-25 2003-11-13 Frost Gregory I. Myeloid colony stimulating factor and uses thereof
EP2218779A1 (en) 2002-12-16 2010-08-18 Halozyme, Inc. Human chondroitinase glycoprotein (chasegp), process for preparing the same, and pharmaceutical compositions comprising thereof
DE10303974A1 (de) 2003-01-31 2004-08-05 Abbott Gmbh & Co. Kg Amyloid-β(1-42)-Oligomere, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
US20090123367A1 (en) * 2003-03-05 2009-05-14 Delfmems Soluble Glycosaminoglycanases and Methods of Preparing and Using Soluble Glycosaminoglycanases
KR20130135986A (ko) 2003-03-05 2013-12-11 할로자임, 아이엔씨 가용성 하이알우로니다제 당단백질 (ｓＨＡＳＥＧＰ), 이를 제조하는 방법, 용도 및 이를 포함하는 약학 조성물
US20060104968A1 (en) 2003-03-05 2006-05-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases
US7871607B2 (en) 2003-03-05 2011-01-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminoglycanases
US7572613B2 (en) * 2004-06-25 2009-08-11 Klein Jeffrey A Drug delivery system for accelerated subcutaneous absorption
HUE025255T2 (en) * 2004-12-30 2016-03-29 Genzyme Corp Intraarticular viscosity implementation schemes
NZ596992A (en) 2005-06-30 2013-07-26 Abbott Lab Il-12/p40 binding proteins
EP2500355A3 (en) 2005-08-19 2012-10-24 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
KR20140053410A (ko) 2005-08-19 2014-05-07 아보트 러보러터리즈 이원 가변 도메인 면역글로불린 및 이의 용도
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
EP1928905B1 (de) 2005-09-30 2015-04-15 AbbVie Deutschland GmbH & Co KG Bindungsdomänen von proteinen der repulsive guidance molecule (rgm) proteinfamilie und funktionale fragmente davon sowie deren verwendung
US8168206B1 (en) * 2005-10-06 2012-05-01 Allergan, Inc. Animal protein-free pharmaceutical compositions
EP2289909B1 (en) 2005-11-30 2014-10-29 AbbVie Inc. Screening method, process for purifying of non-diffusible a-beta oligomers, selective antibodies against said non-diffusible a-beta oligomers and a process for manufacturing of said antibodies
KR101667623B1 (ko) 2005-11-30 2016-10-19 애브비 인코포레이티드 아밀로이드 베타 단백질에 대한 모노클로날 항체 및 이의 용도
MX2008012601A (es) * 2006-03-31 2009-02-10 Qlt Plug Delivery Inc Metodos de suministro de farmaco, estructuras, y composiciones para un sistema nasolagrimal.
ES2661032T3 (es) 2006-09-08 2018-03-27 Abbvie Bahamas Ltd. Proteínas de unión a interleucina-13
CL2007002926A1 (es) 2006-10-12 2008-05-16 Genentech Inc Anticuerpo antilinfotoxina alfa (lt-alfa); composicion con el anticuerpo; hibridoma pta-7538; acido nucleico codificante del anticuerpo; vector y celula huesped que comprenden el acido nucleico; metodo para inhibir la proliferacion celular activada p
US20080160003A1 (en) * 2006-10-31 2008-07-03 University Of Delaware Fertility Enhancement Using Lipid Carriers and Bioactive Molecules
US8455626B2 (en) 2006-11-30 2013-06-04 Abbott Laboratories Aβ conformer selective anti-aβ globulomer monoclonal antibodies
EP2486928A1 (en) 2007-02-27 2012-08-15 Abbott GmbH & Co. KG Method for the treatment of amyloidoses
WO2009037566A2 (en) * 2007-06-19 2009-03-26 Uvarkina Tamara P Hyaluronidase and method of use thereof
WO2009035571A2 (en) * 2007-09-07 2009-03-19 Qlt Plug Delivery, Inc Lacrimal implant detection
AU2008325089A1 (en) * 2007-11-06 2009-05-14 Stuart L. Weg Anesthetic composition, formulation and method of use
US8962803B2 (en) 2008-02-29 2015-02-24 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Antibodies against the RGM A protein and uses thereof
FI4269578T3 (fi) 2008-03-06 2024-06-07 Halozyme Inc Liukoisen hyaluronidaasin suurimittainen tuotanto
TWI395593B (zh) 2008-03-06 2013-05-11 Halozyme Inc 可活化的基質降解酵素之活體內暫時性控制
TWI489994B (zh) 2008-03-17 2015-07-01 Baxter Healthcare Sa 供免疫球蛋白及玻尿酸酶之皮下投藥之用的組合及方法
WO2009128918A1 (en) * 2008-04-14 2009-10-22 Halozyme, Inc. Combination therapy using a soluble hyaluronidase and a bisphosphonate
KR101647932B1 (ko) 2008-04-14 2016-08-11 할로자임, 아이엔씨 히알루로난 관련 질환 및 상태 치료용 변형된 히알루로니다제 및 그 용도
TWI394580B (zh) 2008-04-28 2013-05-01 Halozyme Inc 超快起作用胰島素組成物
AU2009241589B2 (en) 2008-04-29 2013-10-10 Abbvie Inc. Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
KR101649168B1 (ko) 2008-05-09 2016-08-18 애브비 인코포레이티드 최종 당화 산물의 수용체(ｒａｇｅ)에 대한 항체 및 이의 용도
RU2010153580A (ru) 2008-06-03 2012-07-20 Эбботт Лэборетриз (Us) Иммуноглобулины с двумя вариабельными доменами и их применение
UY31861A (es) 2008-06-03 2010-01-05 Abbott Lab Inmunoglobulina con dominio variable dual y usos de la misma
WO2010006060A2 (en) 2008-07-08 2010-01-14 Abbott Laboratories Prostaglandin e2 dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
US8624002B2 (en) 2008-07-08 2014-01-07 Abbvie, Inc. Prostaglandin E2 binding proteins and uses thereof
AR077718A1 (es) * 2008-07-15 2011-09-21 Genentech Inc Metodos para tratar enfermedades autoinmunes usando anticuerpos anti cd4. formulacion farmaceutica
ES2413492T3 (es) * 2008-10-14 2013-07-16 Burgard, Gunther, Dr. Uso de hialuronidasa para la prevención o el tratamiento de la hipertensión arterial
GB0819883D0 (en) 2008-10-29 2008-12-03 Azyme Res As Product and uses
AU2013202000B2 (en) * 2008-12-09 2015-07-30 Halozyme, Inc. Extended soluble PH20 polypeptides and uses thereof
SI3037529T1 (sl) * 2008-12-09 2019-06-28 Halozyme, Inc. Razširjeni topni polipeptidi PH20 in njihove uporabe
US20100209558A1 (en) * 2009-02-19 2010-08-19 General Nutrition Corporation Dietary ingredient with enhanced bioavailability
EP3235509A1 (en) 2009-03-05 2017-10-25 AbbVie Inc. Il-17 binding proteins
JP5649589B2 (ja) * 2009-03-06 2015-01-07 ハロザイム インコーポレイテッド マトリックスメタロプロテアーゼ１の温度感受性突然変異体およびその使用
US8283162B2 (en) 2009-03-10 2012-10-09 Abbott Laboratories Antibodies relating to PIVKAII and uses thereof
ES2385251B1 (es) 2009-05-06 2013-05-06 Fundació Privada Institut D'investigació Biomèdica De Bellvitge Adenovirus oncolíticos para el tratamiento del cáncer.
DE102009003291A1 (de) * 2009-05-20 2010-12-30 Henkel Ag & Co. Kgaa Kosmetische Zusammensetzung und Verformungsverfahren für keratinische Fasern
US20100305500A1 (en) * 2009-05-29 2010-12-02 Pacira Pharmaceuticals, Inc. Hyaluronidase as an adjuvant for increasing the injection volume and dispersion of large diameter synthetic membrane vesicles containing a therapeutic agent
WO2010146059A2 (en) 2009-06-16 2010-12-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Biomarkers for igf-1r inhibitor therapy
SG177424A1 (en) * 2009-06-29 2012-02-28 Univ Singapore Synthesis and use of fluorophore-tagged antimalarials
US8513259B2 (en) 2009-07-03 2013-08-20 Jdp Therapeutics, Inc. Non-sedating antihistamine injection formulations and methods of use thereof
US8263581B2 (en) 2009-07-03 2012-09-11 Jdp Therapeutics, Inc. Non-sedating antihistamine injection formulations and methods of use thereof
US9345661B2 (en) 2009-07-31 2016-05-24 Genentech, Inc. Subcutaneous anti-HER2 antibody formulations and uses thereof
SG178602A1 (en) 2009-09-01 2012-04-27 Abbott Lab Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
AR078161A1 (es) 2009-09-11 2011-10-19 Hoffmann La Roche Formulaciones farmaceuticas muy concentradas de un anticuerpo anti cd20. uso de la formulacion. metodo de tratamiento.
IN2012DN03219A (es) * 2009-09-17 2015-10-23 Baxter Healthcare Sa
KR20140015139A (ko) 2009-10-15 2014-02-06 애브비 인코포레이티드 이원 가변 도메인 면역글로불린 및 이의 용도
UY32979A (es) 2009-10-28 2011-02-28 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
US8420083B2 (en) 2009-10-31 2013-04-16 Abbvie Inc. Antibodies to receptor for advanced glycation end products (RAGE) and uses thereof
BR112012013734A2 (pt) 2009-12-08 2017-01-10 Abbott Gmbh & Co Kg anticorpos monoclonais contra a proteína rgm a para uso no tratamento da degeneração da camada de fibras nervosas da retina.
EP2558494B1 (en) 2010-04-15 2018-05-23 AbbVie Inc. Amyloid-beta binding proteins
MY161302A (en) 2010-05-14 2017-04-14 Abbvie Inc IL-1 binding proteins
US20120009196A1 (en) 2010-07-08 2012-01-12 Abbott Laboratories Monoclonal antibodies against hepatitis c virus core protein
UY33492A (es) 2010-07-09 2012-01-31 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
MX348420B (es) 2010-07-20 2017-06-12 Halozyme Inc Efectos secundarios adversos asociados con la administracion de agentes anti-hialuronano y metodos para mejorar o prevenir los efectos secundarios.
US9120862B2 (en) 2010-07-26 2015-09-01 Abbott Laboratories Antibodies relating to PIVKA-II and uses thereof
CA2807014A1 (en) 2010-08-03 2012-02-09 Abbvie Inc. Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
MX358739B (es) 2010-08-14 2018-09-03 Abbvie Inc Star Proteinas de union a amiloide beta.
SG187938A1 (en) 2010-08-26 2013-04-30 Abbvie Inc Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
JP6121904B2 (ja) 2010-09-08 2017-04-26 ハロザイム インコーポレイテッド 条件的活性治療用タンパク質を評価および同定する、または発展させる方法
US8404268B2 (en) 2010-10-26 2013-03-26 Kyphon Sarl Locally targeted anti-fibrotic agents and methods of use
US8740982B2 (en) 2010-10-26 2014-06-03 Kyphon Sarl Devices containing a chemonucleolysis agent and methods for treating an intervertebral disc or spinal arachnoiditis
US9414930B2 (en) 2010-10-26 2016-08-16 Kyphon SÀRL Activatable devices containing a chemonucleolysis agent
JP6194248B2 (ja) 2010-10-28 2017-09-06 パシラ ファーマシューティカルズ インコーポレーテッド 非ステロイド性抗炎症薬の徐放性処方物
KR102116202B1 (ko) 2010-11-08 2020-05-28 제넨테크, 인크. 피하 투여용 항―ｉｌ―6 수용체 항체
MY163368A (en) 2010-12-21 2017-09-15 Abbvie Inc Il-1-alpha and -beta bispecific dual variable domain immunoglobulins and their use
EP2670434B1 (en) 2011-01-31 2018-12-26 Tau Bio-Logic Corp. Treatment of tauopathies
ES2634669T3 (es) 2011-02-08 2017-09-28 Halozyme, Inc. Composición y formulación lipídica de una enzima de degradación de hialuronano y uso de la misma para el tratamiento de la hiperplasia benigna de próstata
WO2012174478A2 (en) 2011-06-17 2012-12-20 Halozyme, Inc. Stable formulations of a hyaluronan-degrading enzyme
WO2012174480A2 (en) 2011-06-17 2012-12-20 Halozyme, Inc. Continuous subcutaneous insulin infusion methods with a hyaluronan degrading enzyme
US20130011378A1 (en) 2011-06-17 2013-01-10 Tzung-Horng Yang Stable formulations of a hyaluronan-degrading enzyme
HK1198328A1 (zh) 2011-07-13 2015-04-02 Abbvie Inc. 使用抗il-13抗體治療哮喘的方法和組合物
US20130071394A1 (en) 2011-09-16 2013-03-21 John K. Troyer Compositions and combinations of organophosphorus bioscavengers and hyaluronan-degrading enzymes, and methods of use
AU2012328917B2 (en) 2011-10-24 2017-05-25 Abbvie Inc. Bispecific immunobinders directed against TNF and IL-17
MX342735B (es) 2011-10-24 2016-10-07 Halozyme Inc Diagnostico acompañante para terapia con agente anti-hialuronano y metodos de uso del mismo.
US8999331B2 (en) 2011-10-24 2015-04-07 Abbvie Inc. Immunobinders directed against sclerostin
MX356933B (es) 2011-12-14 2018-06-20 Abbvie Deutschland Composicion y metodo para el diagnostico y tratamiento de trastornos relacionados con hierro.
EP3800200A1 (en) 2011-12-14 2021-04-07 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Composition and method for the diagnosis and treatment of iron-related disorders
ES2609582T3 (es) 2011-12-30 2017-04-21 Halozyme, Inc. Variantes de polipéptidos de PH20, formulaciones y usos de los mismos
CN104159920A (zh) 2011-12-30 2014-11-19 艾伯维公司 针对il-13和/或il-17的双重可变结构域免疫球蛋白
RS57603B1 (sr) 2012-01-27 2018-11-30 Abbvie Deutschland Sastav i metod za dijagnozu i tretiranje bolesti povezanih sa degeneracijom neurita
BR112014024848A2 (pt) 2012-04-04 2017-07-11 Halozyme Inc terapia de combinação com um agente antihialuronano e um taxano direcionamento ao tumor
WO2013161814A1 (ja) 2012-04-23 2013-10-31 ジーンフロンティア株式会社 抗ヒトｃｄ６９抗体、及びその医薬用途
UY34905A (es) 2012-07-12 2014-01-31 Abbvie Inc Proteínas de unión a il-1
EP4397768A3 (en) 2012-07-26 2024-12-18 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Glycoproteins with anti-inflammatory properties
WO2014062856A1 (en) 2012-10-16 2014-04-24 Halozyme, Inc. Hypoxia and hyaluronan and markers thereof for diagnosis and monitoring of diseases and conditions and related methods
PE20151179A1 (es) 2012-11-01 2015-09-12 Abbvie Inc Inmunoglobulinas de dominio variable dual anti-vegf/dll4 y usos de las mismas
KR101454646B1 (ko) * 2012-11-05 2014-10-27 (주)한국비엠아이 히알루로니다아제의 안정화 제제 및 이를 포함하는 액상제제
US9845364B2 (en) 2012-11-09 2017-12-19 Genefrontier Corporation Anti-ADAM28 antibody for treating cancer
US20150196625A9 (en) 2013-01-07 2015-07-16 Rudolph D. Paladini Metal Sensitive Mutants of Matrix Metalloproteases and uses thereof
JP6397477B2 (ja) 2013-03-14 2018-09-26 ザ ユニバーシティ オブ マサチューセッツＴｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｏｆ Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ 白内障及び老眼を阻害する方法
US9062108B2 (en) 2013-03-15 2015-06-23 Abbvie Inc. Dual specific binding proteins directed against IL-1 and/or IL-17
US9469686B2 (en) 2013-03-15 2016-10-18 Abbott Laboratories Anti-GP73 monoclonal antibodies and methods of obtaining the same
TWI476203B (zh) 2013-03-18 2015-03-11 Ind Tech Res Inst 醣類的分離方法
CA2907586A1 (en) 2013-04-03 2014-10-09 Cedars-Sinai Medical Center Treatment of inflammatory conditions by modulation of hyaluronan and hyaluronidase activity
EP2996772B1 (en) 2013-05-13 2018-12-19 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Methods for the treatment of neurodegeneration
JP6581572B2 (ja) 2013-06-07 2019-09-25 デューク ユニバーシティ 補体因子ｈ阻害薬
WO2014200018A1 (ja) 2013-06-11 2014-12-18 独立行政法人 国立精神・神経医療研究センター 再発寛解型多発性硬化症（ｒｒｍｓ）患者の治療予後予測方法、及び新規治療適応判断方法
TW201534726A (zh) 2013-07-03 2015-09-16 Halozyme Inc 熱穩定ｐｈ２０玻尿酸酶變異體及其用途
KR20160027971A (ko) 2013-07-03 2016-03-10 시티 오브 호프 항암 병용제
US9579257B2 (en) 2013-08-20 2017-02-28 Anutra Medical, Inc. Haptic feedback and audible output syringe
US9968623B2 (en) * 2013-08-29 2018-05-15 Lanny Leo Johnson Prepackaged sterile syringe or containers with various substance concentrations with or without bioactive reagent
IL312865B2 (en) 2013-09-11 2025-06-01 Eagle Biologics Inc Liquid protein formulations containing viscosity-lowering agents
PL3057992T3 (pl) 2013-10-15 2024-08-26 Genefrontier Corporation Przeciwciało ludzkie przeciwko gatunkom ADAMTS typu agrekanazy do leczenia chorób związanych z agrekanazą
EP3058084A4 (en) 2013-10-16 2017-07-05 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Sialylated glycoproteins
JP2016540761A (ja) 2013-12-02 2016-12-28 アッヴィ・インコーポレイテッド 変形性関節症を治療するための組成物及び方法
US9732154B2 (en) 2014-02-28 2017-08-15 Janssen Biotech, Inc. Anti-CD38 antibodies for treatment of acute lymphoblastic leukemia
US9603927B2 (en) 2014-02-28 2017-03-28 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies with anti-CD38 antibodies
WO2015138337A1 (en) 2014-03-09 2015-09-17 Abbvie, Inc. Compositions and methods for treating rheumatoid arthritis
TW202330606A (zh) 2014-03-21 2023-08-01 美商艾伯維有限公司 抗-egfr抗體及抗體藥物結合物
US10117886B2 (en) 2014-05-30 2018-11-06 Hao Cheng Hyaluronidase and a low density second PEG layer on the surface of therapeutic-encapsulated nanoparticles to enhance nanoparticle diffusion and circulation
USD774182S1 (en) 2014-06-06 2016-12-13 Anutra Medical, Inc. Anesthetic delivery device
USD750768S1 (en) 2014-06-06 2016-03-01 Anutra Medical, Inc. Fluid administration syringe
USD763433S1 (en) 2014-06-06 2016-08-09 Anutra Medical, Inc. Delivery system cassette
US20160002326A1 (en) 2014-06-10 2016-01-07 Abbvie Inc. Compositions and methods for treating rheumatoid arthritis
EP3169351B1 (en) * 2014-07-16 2020-02-26 New York University Use of hyaluronidase for treatment of muscle stiffness
PL3186281T3 (pl) 2014-08-28 2019-10-31 Halozyme Inc Terapia skojarzona enzymem rozkładającym hialuronian i inhibitorem punktu kontrolnego odpowiedzi immunologicznej
EP3191187B1 (en) 2014-09-09 2021-07-28 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies with anti-cd38 antibodies
ES2729301T3 (es) * 2014-09-18 2019-10-31 Chondronest Sa Composición que contiene glucosaminoglicanos y proteínas
CN106999510B (zh) 2014-10-01 2021-04-30 伊格尔生物制品有限公司 含有粘度降低剂的多糖和核酸制剂
EA201700181A1 (ru) 2014-10-14 2017-09-29 Галозим, Инк. Композиции аденозиндеаминазы-2 (ада-2), их варианты и способы использования
TWI721959B (zh) 2014-12-04 2021-03-21 美商健生生物科技公司 治療急性骨髓性白血病之抗ｃｄ３８抗體
US10093733B2 (en) 2014-12-11 2018-10-09 Abbvie Inc. LRP-8 binding dual variable domain immunoglobulin proteins
WO2016137471A1 (en) * 2015-02-26 2016-09-01 Nantpharma, Llc Method for enhanced heparin quality
US9981021B1 (en) 2015-04-09 2018-05-29 Kinetiq, Inc. Subcutaneous therapeutic enzyme formulations, uses, and methods for generating thereof
MX389805B (es) 2015-05-20 2025-03-11 Janssen Biotech Inc Anticuerpos anti-cd38 para el tratamiento de amiloidosis de cadena ligera y otras enfermedades malignas hematológicas positivas para cd38.
EP3303395B1 (en) 2015-05-29 2019-12-11 AbbVie Inc. Anti-cd40 antibodies and uses thereof
TW201710286A (zh) 2015-06-15 2017-03-16 艾伯維有限公司 抗ｖｅｇｆ、ｐｄｇｆ及／或其受體之結合蛋白
MA46315A (fr) * 2015-06-22 2019-08-07 Janssen Biotech Inc Polythérapies pour malignités hématologiques avec des anticorps anti-cd38 et des inhibiteurs de la survivine
EP4385569A3 (en) 2015-06-24 2024-09-25 Janssen Biotech, Inc. Immune modulation and treatment of solid tumors with antibodies that specifically bind cd38
US20170044265A1 (en) 2015-06-24 2017-02-16 Janssen Biotech, Inc. Immune Modulation and Treatment of Solid Tumors with Antibodies that Specifically Bind CD38
BR112018004867A2 (pt) 2015-09-11 2018-10-16 Abbvie Deutschland métodos para tratamento das formas recorrentes de esclerose múltipla
MA43187B1 (fr) 2015-11-03 2021-02-26 Janssen Biotech Inc Formulations sous-cutanée d'anticorps anti-cd38 et leurs utilisations
US10781261B2 (en) 2015-11-03 2020-09-22 Janssen Biotech, Inc. Subcutaneous formulations of anti-CD38 antibodies and their uses
EP3373921B1 (en) 2015-11-13 2019-08-28 The University of Massachusetts Bifunctional molecules containing peg for use in inhibiting cataracts and presbyopia
ITUB20159209A1 (it) 2015-12-21 2017-06-21 Fidia Farm Spa Nanosistemi per il trasporto controllato di molecole attive a fini diagnostici, prognostici e terapeutici
US10493247B2 (en) 2016-03-15 2019-12-03 Medtronic Holding Company Sàrl Devices for delivering a chemical denervation agent and methods of use
WO2017161206A1 (en) 2016-03-16 2017-09-21 Halozyme, Inc. Conjugates containing conditionally active antibodies or antigen-binding fragments thereof, and methods of use
AU2017238172B2 (en) 2016-03-21 2024-06-27 Marengo Therapeutics, Inc. Multispecific and multifunctional molecules and uses thereof
CN118403155A (zh) 2016-06-01 2024-07-30 艾伯维公司 用于治疗脊髓损伤和疼痛的抗反义导向分子a（rgma）拮抗性抗体
MX2018015274A (es) 2016-06-08 2019-10-07 Abbvie Inc Anticuerpos anti-cd98 y conjugados de anticuerpo y farmaco.
CN109563167A (zh) 2016-06-08 2019-04-02 艾伯维公司 抗b7-h3抗体和抗体药物偶联物
PL3458479T4 (pl) 2016-06-08 2021-07-26 Abbvie Inc. Przeciwciała anty-b7-h3 i koniugaty przeciwciało-lek
WO2018002181A1 (en) 2016-06-28 2018-01-04 Umc Utrecht Holding B.V. TREATMENT OF IgE-MEDIATED DISEASES WITH ANTIBODIES THAT SPECIFICALLY BIND CD38
WO2018053004A2 (en) 2016-09-13 2018-03-22 Allergan, Inc. Non-protein clostridial toxin compositions
TWI788307B (zh) 2016-10-31 2023-01-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 用於擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之工程化人造抗原呈現細胞
ES2827012T3 (es) * 2016-11-17 2021-05-19 Vcn Biosciences Sl Uso de vectores virales oncolíticos en el tratamiento del retinoblastoma
WO2018094167A1 (en) 2016-11-17 2018-05-24 Iovance Biotherapeutics, Inc. Remnant tumor infiltrating lymphocytes and methods of preparing and using the same
EP3541815A4 (en) 2016-11-18 2020-07-15 Pacira Pharmaceuticals, Inc. ZINC MELXICAM COMPLEX MICROPARTICLE MULTIVESICULAR LIPOSOME FORMULATIONS AND METHODS OF MAKING THE SAME
JP7274417B2 (ja) 2016-11-23 2023-05-16 イミュノア・セラピューティクス・インコーポレイテッド ４－１ｂｂ結合タンパク質及びその使用
KR20210134432A (ko) 2017-01-17 2021-11-09 제넨테크, 인크. 피하 her 2 항체 제형
WO2018183928A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
EP3620531A4 (en) 2017-05-02 2021-03-17 National Center of Neurology and Psychiatry METHOD OF PREDICTION AND EVALUATION OF THERAPEUTIC EFFECT IN DISEASES RELATING TO IL-6 AND NEUTROPHILS
US10865238B1 (en) 2017-05-05 2020-12-15 Duke University Complement factor H antibodies
RU2651756C1 (ru) * 2017-05-10 2018-04-23 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение Высшего Образования Кубанский Государственный Медицинский Университет Министерства Здравоохранения Российской Федерации, КубГМУ Препарат для предотвращения образования глиальных рубцов
US20200239577A1 (en) 2017-10-15 2020-07-30 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
WO2019089832A1 (en) 2017-10-31 2019-05-09 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating high risk multiple myeloma
KR20200084880A (ko) 2017-11-06 2020-07-13 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 종양을 치료하는 방법
US12042528B2 (en) 2017-12-29 2024-07-23 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Hyaluronidase for the prevention, treatment, reduction and/or abolishment of cerebral edema and intracranial pressure
US12247060B2 (en) 2018-01-09 2025-03-11 Marengo Therapeutics, Inc. Calreticulin binding constructs and engineered T cells for the treatment of diseases
ES2973728T3 (es) 2018-03-13 2024-06-24 Fundacion Para La Investigacion Biomedica Del Hospital Univ La Paz Anticuerpo anti-CXCR4 combinado con linfocitos citolíticos naturales activados y expandidos para inmunoterapia contra el cáncer
WO2019178362A1 (en) 2018-03-14 2019-09-19 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to calreticulin and uses thereof
US20210009711A1 (en) 2018-03-14 2021-01-14 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules and uses thereof
WO2019182745A1 (en) 2018-03-19 2019-09-26 Bryn Pharma, LLC Epinephrine spray formulations
BR112020018539A2 (pt) 2018-03-23 2020-12-29 Bristol-Myers Squibb Company Anticorpos contra mica e/ou micb e usos dos mesmos
KR20200139724A (ko) 2018-03-30 2020-12-14 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 종양을 치료하는 방법
WO2019195452A1 (en) 2018-04-04 2019-10-10 Bristol-Myers Squibb Company Anti-cd27 antibodies and uses thereof
CA3162141A1 (en) 2018-04-24 2019-10-31 Allergan, Inc. Presbyopia treatments
WO2019222435A1 (en) 2018-05-16 2019-11-21 Halozyme, Inc. Methods of selecting subjects for combination cancer therapy with a polymer-conjugated soluble ph20
US12012461B2 (en) 2018-05-16 2024-06-18 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating cancers and enhancing efficacy of T cell redirecting therapeutics
EP3802624A4 (en) * 2018-06-01 2022-03-23 Musc Foundation for Research Development GLYCAN ANALYSIS OF PROTEINS AND CELLS
US11884729B2 (en) 2018-06-29 2024-01-30 ApitBio, Inc Anti-L1CAM antibodies and uses thereof
JP7554742B2 (ja) 2018-07-03 2024-09-20 マレンゴ・セラピューティクス，インコーポレーテッド 抗ｔｃｒ抗体分子およびその使用
CN118773171B (zh) 2018-07-25 2026-03-13 阿特根公司 新型透明质酸水解酶突变体和包含其的药物组合物
US20210395392A1 (en) 2018-10-09 2021-12-23 Bristol-Myers Squibb Company Anti-mertk antibodies for treating cancer
BR112021007227A2 (pt) 2018-10-17 2021-08-10 Janssen Biotech, Inc. método para fornecer administração subcutânea de anticorpos anti-cd38
EP3870609A1 (en) 2018-10-23 2021-09-01 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
WO2020092546A1 (en) 2018-10-30 2020-05-07 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Co-administration of a hyaluronidase and anti-c5 antibody for treatment of complement-associated conditions
KR20210091763A (ko) 2018-11-13 2021-07-22 얀센 바이오테크 인코포레이티드 항-cd38 항체의 생성 동안 미량 금속의 제어
CN109679823B (zh) * 2018-11-19 2022-03-15 江苏汇先医药技术有限公司 一种用于生物分子、细胞或细菌的捕获材料及捕获筛
SG11202109122SA (en) 2019-02-21 2021-09-29 Marengo Therapeutics Inc Anti-tcr antibody molecules and uses thereof
GB2597851B (en) 2019-02-21 2024-05-29 Marengo Therapeutics Inc Antibody molecules that bind to NKP30 and uses thereof
AU2020226893B2 (en) 2019-02-21 2025-02-27 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to T cell related cancer cells and uses thereof
SG11202110512WA (en) * 2019-03-25 2021-10-28 Alteogen Inc Pharmaceutical composition, comprising human hyaluronidase ph20 variant and drug, for subcutaneous injection
EP3946625A1 (en) 2019-03-28 2022-02-09 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
CN113891748A (zh) 2019-03-28 2022-01-04 百时美施贵宝公司 治疗肿瘤的方法
CN113874078B (zh) 2019-04-05 2025-05-06 Tauc3生物制品有限公司 抗tauc3抗体及其应用
PL3966343T3 (pl) * 2019-05-07 2025-08-04 Genzyme Corporation Sposoby ilościowego oznaczania stężenia leku w kompozycji proleku
WO2020232389A1 (en) * 2019-05-16 2020-11-19 City Of Hope Compositions and methods for targeting tumor-associated extracellular matrix components to improve drug delivery
WO2020241340A1 (ja) * 2019-05-24 2020-12-03 株式会社糖鎖工学研究所 新規な人工タンパク質触媒
JP2022534981A (ja) 2019-05-30 2022-08-04 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 細胞局在化シグネチャーおよび組み合わせ治療
CN114174538A (zh) 2019-05-30 2022-03-11 百时美施贵宝公司 适合于免疫肿瘤学疗法的多肿瘤基因特征
CN114127315A (zh) 2019-05-30 2022-03-01 百时美施贵宝公司 鉴定适合于免疫肿瘤学(i-o)疗法的受试者的方法
EP4028413A1 (en) 2019-09-10 2022-07-20 Obsidian Therapeutics, Inc. Ca2-il15 fusion proteins for tunable regulation
CA3152263A1 (en) 2019-09-25 2021-04-01 Julia SANTUCCI PEREIRA DEL BUONO Composite biomarker for cancer therapy
US20240156920A1 (en) * 2019-10-15 2024-05-16 Standard Of Care Corporation Compositions comprising hyaluronidase and/or collagenase and/or 4-methylumbelliferone (4-mu) and methods of treatment using same
WO2021092220A1 (en) 2019-11-06 2021-05-14 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject with a tumor suitable for a checkpoint inhibitor therapy
WO2021092221A1 (en) 2019-11-06 2021-05-14 Bristol-Myers Squibb Company Methods of identifying a subject with a tumor suitable for a checkpoint inhibitor therapy
AU2020380384A1 (en) 2019-11-08 2022-05-26 Bristol-Myers Squibb Company LAG-3 antagonist therapy for melanoma
JP2023504748A (ja) 2019-12-09 2023-02-06 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｐｄ－ｌ１抗体製剤
GB2609554B (en) 2020-01-03 2025-08-20 Marengo Therapeutics Inc Anti-TCR antibody molecules and uses thereof
WO2021138407A2 (en) 2020-01-03 2021-07-08 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to cd33 and uses thereof
US20230190881A1 (en) 2020-02-17 2023-06-22 Biotest Ag Subcutaneous administration of factor viii
PE20230821A1 (es) 2020-03-23 2023-05-19 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos anti-ccr8 para el tratamiento del cancer
CN111529685A (zh) * 2020-04-21 2020-08-14 厦门诺康得生物科技有限公司 抗呼吸道病毒感染的鼻腔喷雾制剂
WO2021231798A1 (en) 2020-05-13 2021-11-18 Disc Medicine, Inc. Anti-hemojuvelin (hjv) antibodies for treating myelofibrosis
IL299376A (en) 2020-06-29 2023-02-01 Genentech Inc Fixed dose combination of pertuzumab plus transtuzumab
BR112023000707A2 (pt) 2020-07-14 2023-01-31 Hoffmann La Roche Ensaio de ligação para uma combinação de dose fixa, proteína, kits, composições e métodos para avaliar uma composição de dose fixa, fazer uma composição e para analisar o teor de proteína de uma combinação de dose fixa
EP4182031A4 (en) * 2020-07-17 2024-08-21 Geron Corporation SUBCUTANEOUS TELOMERASIS INHIBITOR COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF
CN120738156A (zh) * 2020-08-07 2025-10-03 阿特根公司 制备重组玻尿酸酶的方法
CN111759732B (zh) * 2020-08-12 2024-12-06 河南省人民医院 一种用于外周血造血干细胞冻存的多通道连接管路及方法
JP2023542080A (ja) 2020-08-26 2023-10-05 マレンゴ・セラピューティクス，インコーポレーテッド カルレティキュリンに結合する多機能性分子およびその使用
GB2616354A (en) 2020-08-26 2023-09-06 Marengo Therapeutics Inc Methods of detecting TRBC1 or TRBC2
KR20230058442A (ko) 2020-08-28 2023-05-03 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 간세포성 암종에 대한 lag-3 길항제 요법
MX2023002326A (es) 2020-08-31 2023-03-21 Bristol Myers Squibb Co Firma de localizacion celular e inmunoterapia.
IL301907A (en) 2020-10-23 2023-06-01 Bristol Myers Squibb Co LAG-3 antagonist therapy for lung cancer
CN112168838A (zh) * 2020-10-23 2021-01-05 中国科学院动物研究所 透明质酸及其盐的治疗用途
US20220133861A1 (en) * 2020-10-30 2022-05-05 Standard Of Care Corporation Hyaluronidase compositions and methods of using same to treat edema
US20230405001A1 (en) * 2020-11-17 2023-12-21 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Treatment or prevention of hiv infection
UY39520A (es) 2020-11-17 2022-05-31 Janssen Sciences Ireland Unlimited Co Tratamiento o prevención de la infección por vih
IL302860A (en) 2020-11-17 2023-07-01 Janssen Sciences Ireland Unlimited Co Treatment or prevention of a disease or disorder
WO2022120179A1 (en) 2020-12-03 2022-06-09 Bristol-Myers Squibb Company Multi-tumor gene signatures and uses thereof
EP4267105B1 (en) 2020-12-28 2025-03-26 Bristol-Myers Squibb Company Antibody compositions and methods of use thereof
CA3196999A1 (en) 2020-12-28 2022-07-07 Masano HUANG Methods of treating tumors
UY39610A (es) 2021-01-20 2022-08-31 Abbvie Inc Conjugados anticuerpo-fármaco anti-egfr
US20220275090A1 (en) 2021-02-22 2022-09-01 Janssen Biotech, Inc. Combination Therapies with Anti-CD38 Antibodies and PARP or Adenosine Receptor Inhibitors
CN114350639B (zh) * 2021-03-05 2023-06-02 华熙生物科技股份有限公司 一种密码子优化的透明质酸水解酶基因及其表达
US20240376224A1 (en) 2021-04-02 2024-11-14 The Regents Of The University Of California Antibodies against cleaved cdcp1 and uses thereof
CN113025599B (zh) * 2021-04-02 2023-09-12 重庆科润生物医药研发有限公司 一种重组溶组织梭菌i型胶原酶及其制备方法和应用
TW202305009A (zh) 2021-04-08 2023-02-01 美商默沙東有限責任公司 以皮下投予抗pd1抗體治療癌症之方法
AU2022255506A1 (en) 2021-04-08 2023-11-09 Marengo Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules binding to tcr and uses thereof
US20220332822A1 (en) 2021-04-16 2022-10-20 Tiziana Life Sciences Plc Subcutaneous administration of antibodies for the treatment of disease
TW202308689A (zh) 2021-04-21 2023-03-01 美商健生生物科技公司 高濃度的雙特異性抗體調配物
WO2022251645A1 (en) 2021-05-27 2022-12-01 Steiner Ventures Llc Hyaluronidase composition for intravenous administration and method of using the same
CN115671267A (zh) 2021-07-23 2023-02-03 上海宝济药业有限公司 一种皮下抗生素药物组合物
TW202320849A (zh) 2021-08-02 2023-06-01 比利時商阿根思公司 皮下用單位劑型
WO2023011502A1 (zh) * 2021-08-02 2023-02-09 甘李药业股份有限公司 含有抗il-4r抗体的稳定制剂
CN118139636A (zh) 2021-09-14 2024-06-04 武田药品工业株式会社 使用透明质酸酶的经促进的浓缩抗体制剂的递送
IL309227A (en) 2021-10-29 2024-02-01 Bristol Myers Squibb Co LAG-3 antagonist therapy for hematological cancer
MX2024005173A (es) * 2021-10-29 2024-05-29 Alteogen Inc Composicion farmaceutica que comprende hialuronidasa humana ph20 y farmaco.
MX2024005392A (es) 2021-11-03 2024-08-06 Janssen Biotech Inc Métodos para tratar cánceres y potenciar la eficacia de anticuerpos biespecíficos para bcmaxcd3.
CA3237175A1 (en) 2021-11-03 2023-05-11 Janssen Biotech, Inc. Corticosteriod reduction in treatment with anti-cd38 antibodies
KR20240137597A (ko) * 2022-01-14 2024-09-20 젠켐 테크놀로지 컴퍼니 리미티드 (티엔진) 히알루론산 유도체 또는 이의 염, 이의 제조 방법 및 응용
EP4469477A1 (en) 2022-01-26 2024-12-04 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for hepatocellular carcinoma
JP2025507694A (ja) 2022-02-25 2025-03-21 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 結腸直腸癌に対する組み合わせ療法
EP4469586A1 (en) 2022-03-01 2024-12-04 Exuma Biotech Corp. Viral particles with membrane-bound hyaluronidase
WO2023168404A1 (en) 2022-03-04 2023-09-07 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating a tumor
CN114634920B (zh) * 2022-03-24 2024-02-27 江南大学 一种产人源透明质酸酶ph20的重组毕赤酵母及其构建方法
US20260042840A1 (en) 2022-04-07 2026-02-12 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumor
WO2023203255A1 (en) 2022-04-22 2023-10-26 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Freeze dried compositions
WO2023203258A1 (en) 2022-04-22 2023-10-26 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Liquid compositions
US20260028409A1 (en) 2022-05-24 2026-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies that bind to human ccr8
CN119562830A (zh) 2022-06-02 2025-03-04 百时美施贵宝公司 抗体组合物及其使用方法
CN120282797A (zh) 2022-11-02 2025-07-08 詹森生物科技公司 治疗癌症的方法
CN120731228A (zh) 2022-12-21 2025-09-30 百时美施贵宝公司 肺癌的组合疗法
JP2026501982A (ja) 2022-12-22 2026-01-20 ハロザイム，インコーポレイティド 高容量投与のためのヒアルロニダーゼ酵素製剤
CN120936385A (zh) 2023-03-13 2025-11-11 海德堡医药研究有限责任公司 用于在癌症治疗中使用的皮下施用的抗体-药物缀合物
CN116253809B (zh) * 2023-04-19 2024-11-05 广州润虹医药科技股份有限公司 一种去除壳聚糖中内毒素的方法
WO2025059266A1 (en) * 2023-09-12 2025-03-20 Sentrimed, Inc. Soluble recombinant human podoplanin receptor
AU2024351533A1 (en) 2023-09-26 2026-03-19 Takeda Pharmaceutical Company Limited IMMUNOGLOBULIN FORMULATIONS DEPLETED IN IgA
WO2025080911A1 (en) 2023-10-12 2025-04-17 Janssen Biotech, Inc. Methods for treating multiple myeloma comprising an anti-cd38 antibody combined with bortezomib, lenalidomide and dexamethasone
WO2025096611A1 (en) * 2023-11-02 2025-05-08 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Reagent compositions for immunoassays and use of the same in detection of cancer antigen 19-9
CN117887691B (zh) * 2023-12-27 2024-07-12 山东福瑞达医药集团有限公司 一种透明质酸酶融合蛋白、酵母工程菌及构建方法与应用
WO2025155877A2 (en) 2024-01-18 2025-07-24 The Regents Of The University Of California Antibodies binding to pad4 and uses thereof
WO2025158277A1 (en) 2024-01-22 2025-07-31 Janssen Biotech, Inc. Use of amivantamab to treat head and neck cancer
WO2025191459A1 (en) 2024-03-11 2025-09-18 Janssen Biotech, Inc. Use of bispecific anti-egfr/c-met antibodies to treat solid tumors
KR102687341B1 (ko) * 2024-04-09 2024-07-23 주식회사 휴온스랩 온전한 형태의 히알루로니다제의 생산방법
WO2025245489A1 (en) 2024-05-24 2025-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Treatment of tumors in subjects having fgl-1 positive samples
WO2025248465A1 (en) 2024-05-29 2025-12-04 Janssen Biotech, Inc. Treatment of locally advanced or metastatic egfr-mutated non-small cell lung cancer
WO2025262427A1 (en) 2024-06-19 2025-12-26 Levicept Limited Injectable formulation
WO2025264972A1 (en) 2024-06-21 2025-12-26 Apogee Therapeutics, Inc. Antibodies that bind il-4r alpha and antibodies that bind
WO2025264960A1 (en) 2024-06-21 2025-12-26 Apogee Therapeutics, Inc. Antibodies that bind il-13 and antibodies that bind ox40l
WO2026022733A1 (en) 2024-07-23 2026-01-29 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies for the treatment of colorectal cancer
WO2026022739A1 (en) 2024-07-23 2026-01-29 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies for the treatment of colorectal cancer
WO2026028164A1 (en) 2024-08-01 2026-02-05 Janssen Biotech, Inc. Daratumumab.bortezomib, lenalidomide and dexamethasone for treating multiple myeloma
WO2026028163A1 (en) 2024-08-01 2026-02-05 Janssen Biotech, Inc. Methods for treating high-risk smoldering multiple myeloma
CN118969102B (zh) * 2024-10-18 2025-02-18 南京汉卫公共卫生研究院有限公司 一种基于数据融合分析的肿瘤组织分子智能分析识别系统

Family Cites Families (178)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US305500A (en) * 1884-09-23 Window-bead fastener
US53247A (en) * 1866-03-13 Improved process for disintegrating fibers
US172892A (en) * 1876-02-01 Improvement in restaurant check-boxes
US345770A (en) * 1886-07-20 Halp to nathan s
US8309A (en) * 1851-08-26 Washing-machine
US3536809A (en) * 1969-02-17 1970-10-27 Alza Corp Medication method
US3598123A (en) 1969-04-01 1971-08-10 Alza Corp Bandage for administering drugs
US3630200A (en) 1969-06-09 1971-12-28 Alza Corp Ocular insert
US3639200A (en) * 1969-12-19 1972-02-01 Armin Elmendorf Textured wood panel
US3710795A (en) 1970-09-29 1973-01-16 Alza Corp Drug-delivery device with stretched, rate-controlling membrane
US3847770A (en) 1972-04-10 1974-11-12 Continental Can Co Photopolymerizable compositions prepared from beta hydroxy esters and polyitaconates
US4044126A (en) 1972-04-20 1977-08-23 Allen & Hanburys Limited Steroidal aerosol compositions and process for the preparation thereof
GB1429184A (en) 1972-04-20 1976-03-24 Allen & Hanburys Ltd Physically anti-inflammatory steroids for use in aerosols
US3845770A (en) 1972-06-05 1974-11-05 Alza Corp Osmatic dispensing device for releasing beneficial agent
USRE28819E (en) 1972-12-08 1976-05-18 Syntex (U.S.A.) Inc. Dialkylated glycol compositions and medicament preparations containing same
US3916899A (en) 1973-04-25 1975-11-04 Alza Corp Osmotic dispensing device with maximum and minimum sizes for the passageway
US4179337A (en) 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
US4002531A (en) * 1976-01-22 1977-01-11 Pierce Chemical Company Modifying enzymes with polyethylene glycol and product produced thereby
US4008719A (en) 1976-02-02 1977-02-22 Alza Corporation Osmotic system having laminar arrangement for programming delivery of active agent
JPS6033474B2 (ja) 1978-05-11 1985-08-02 藤沢薬品工業株式会社 新規なヒアルロニダ−ゼｂｍｐ−８２３１およびその製造法
US4573994A (en) 1979-04-27 1986-03-04 The Johns Hopkins University Refillable medication infusion apparatus
US4328245A (en) 1981-02-13 1982-05-04 Syntex (U.S.A.) Inc. Carbonate diester solutions of PGE-type compounds
US4410545A (en) 1981-02-13 1983-10-18 Syntex (U.S.A.) Inc. Carbonate diester solutions of PGE-type compounds
US4358603A (en) 1981-04-16 1982-11-09 Syntex (U.S.A.) Inc. Acetal stabilized prostaglandin compositions
US4409239A (en) * 1982-01-21 1983-10-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Propylene glycol diester solutions of PGE-type compounds
US4522811A (en) 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
US4952496A (en) 1984-03-30 1990-08-28 Associated Universities, Inc. Cloning and expression of the gene for bacteriophage T7 RNA polymerase
EP0162007A1 (de) * 1984-04-18 1985-11-21 Geriaco AG Stabiles, lagerungsfähiges Insulinpräparat zur Behandlung von Akne vulgaris
US4769027A (en) 1984-08-15 1988-09-06 Burroughs Wellcome Co. Delivery system
GB8504025D0 (en) 1985-02-16 1985-03-20 Biopharm Ltd Hyaluronidase
US4980286A (en) 1985-07-05 1990-12-25 Whitehead Institute For Biomedical Research In vivo introduction and expression of foreign genetic material in epithelial cells
US4687610A (en) 1986-04-30 1987-08-18 E. I. Du Pont De Neumours And Company Low crystallinity polyester yarn produced at ultra high spinning speeds
US4902505A (en) 1986-07-30 1990-02-20 Alkermes Chimeric peptides for neuropeptide delivery through the blood-brain barrier
EP0263417A1 (de) 1986-09-30 1988-04-13 BIOCHEMIE Gesellschaft m.b.H. Verwendung von Hyaluronidase
US5116742A (en) 1986-12-03 1992-05-26 University Patents, Inc. RNA ribozyme restriction endoribonucleases and methods
US5723147A (en) 1987-02-23 1998-03-03 Depotech Corporation Multivesicular liposomes having a biologically active substance encapsulated therein in the presence of a hydrochloride
US4904582A (en) 1987-06-11 1990-02-27 Synthetic Genetics Novel amphiphilic nucleic acid conjugates
US5052558A (en) 1987-12-23 1991-10-01 Entravision, Inc. Packaged pharmaceutical product
US5073543A (en) 1988-07-21 1991-12-17 G. D. Searle & Co. Controlled release formulations of trophic factors in ganglioside-lipsome vehicle
US5041292A (en) 1988-08-31 1991-08-20 Theratech, Inc. Biodegradable hydrogel matrices for the controlled release of pharmacologically active agents
US5033352A (en) 1989-01-19 1991-07-23 Yamaha Corporation Electronic musical instrument with frequency modulation
IT1229203B (it) 1989-03-22 1991-07-25 Bioresearch Spa Impiego di acido 5 metiltetraidrofolico, di acido 5 formiltetraidrofolico e dei loro sali farmaceuticamente accettabili per la preparazione di composizioni farmaceutiche in forma a rilascio controllato attive nella terapia dei disturbi mentali organici e composizioni farmaceutiche relative.
US5122614A (en) * 1989-04-19 1992-06-16 Enzon, Inc. Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides
US5324844A (en) * 1989-04-19 1994-06-28 Enzon, Inc. Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides
EP0400472B1 (en) 1989-05-27 1996-04-03 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited Process for preparing polyethylene glycol derivatives and modified protein.
DE3921528A1 (de) * 1989-06-30 1991-01-10 Draegerwerk Ag Messzelle fuer den elektrochemischen gasnachweis
US5120548A (en) 1989-11-07 1992-06-09 Merck & Co., Inc. Swelling modulated polymeric drug delivery device
US5215899A (en) 1989-11-09 1993-06-01 Miles Inc. Nucleic acid amplification employing ligatable hairpin probe and transcription
US6552170B1 (en) * 1990-04-06 2003-04-22 Amgen Inc. PEGylation reagents and compounds formed therewith
ZA912770B (en) 1990-04-16 1992-01-29 Bethesda Eye Inst Enzymatic disinsertion of vitreous body
US5733566A (en) 1990-05-15 1998-03-31 Alkermes Controlled Therapeutics Inc. Ii Controlled release of antiparasitic agents in animals
US5401629A (en) 1990-08-07 1995-03-28 The Salk Institute Biotechnology/Industrial Associates, Inc. Assay methods and compositions useful for measuring the transduction of an intracellular signal
WO1992006180A1 (en) 1990-10-01 1992-04-16 University Of Connecticut Targeting viruses and cells for selective internalization by cells
US5721348A (en) 1990-12-14 1998-02-24 University Of Connecticut DNA encoding PH-20 proteins
EP0497189B1 (en) * 1991-01-23 1997-04-09 Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. Water- and oil-repelling absorbed film and method of manufacturing the same
DE69231127D1 (de) 1991-03-18 2000-07-06 Scripps Research Inst La Jolla Oligosaccharide als enzymsubstrate und -inhibitoren: verfahren und zusammensetzungen
JPH06510524A (ja) 1991-05-14 1994-11-24 ユニバーシティ オブ コネチカット 免疫原性タンパク質をコードする遺伝子の標的への配達
AU2160992A (en) 1991-06-05 1993-01-12 Board Of Regents Acting For And On Behalf Of The University Of Michigan, The Targeted delivery of genes encoding secretory proteins
US5580578A (en) 1992-01-27 1996-12-03 Euro-Celtique, S.A. Controlled release formulations coated with aqueous dispersions of acrylic polymers
AU3434393A (en) 1992-01-17 1993-08-03 Regents Of The University Of Michigan, The Targeted virus
JPH07505773A (ja) 1992-04-03 1995-06-29 ヤング　アレキサンダー　ティー 標的化されたウイルスベクターを用いた遺伝子治療
US5323907A (en) 1992-06-23 1994-06-28 Multi-Comp, Inc. Child resistant package assembly for dispensing pharmaceutical medications
US5496718A (en) * 1992-06-26 1996-03-05 Seikagaku Kogyo Kabushiki Kaisha (Seikagaku Corporation) Chondroitinase ABC isolated from proteus vulgaris ATCC 6896
JP3980657B2 (ja) 1992-06-26 2007-09-26 生化学工業株式会社 コンドロイチナーゼａｂｃ、その製造法及び医薬組成物
PT671923E (pt) 1992-10-09 2001-10-30 Advanced Tissue Sciences Inc Celulas de reserva do figado
US5591767A (en) 1993-01-25 1997-01-07 Pharmetrix Corporation Liquid reservoir transdermal patch for the administration of ketorolac
US5395619A (en) 1993-03-03 1995-03-07 Liposome Technology, Inc. Lipid-polymer conjugates and liposomes
US5354566A (en) 1993-06-02 1994-10-11 Kraft General Foods, Inc. Preparation of yeast-leavened dough crusts
US5643575A (en) * 1993-10-27 1997-07-01 Enzon, Inc. Non-antigenic branched polymer conjugates
US5919455A (en) * 1993-10-27 1999-07-06 Enzon, Inc. Non-antigenic branched polymer conjugates
US5446090A (en) * 1993-11-12 1995-08-29 Shearwater Polymers, Inc. Isolatable, water soluble, and hydrolytically stable active sulfones of poly(ethylene glycol) and related polymers for modification of surfaces and molecules
US5766627A (en) 1993-11-16 1998-06-16 Depotech Multivescular liposomes with controlled release of encapsulated biologically active substances
FI955320L (fi) 1994-03-07 1995-11-24 Dow Chemical Co Bioaktiivisia ja/tai kohdennettuja dendriimikonjugaatteja
EP0675201A1 (en) * 1994-03-31 1995-10-04 Amgen Inc. Compositions and methods for stimulating megakaryocyte growth and differentiation
US5795569A (en) * 1994-03-31 1998-08-18 Amgen Inc. Mono-pegylated proteins that stimulate megakaryocyte growth and differentiation
IT1270594B (it) 1994-07-07 1997-05-07 Recordati Chem Pharm Composizione farmaceutica a rilascio controllato di moguisteina in sospensione liquida
US5824784A (en) 1994-10-12 1998-10-20 Amgen Inc. N-terminally chemically modified protein compositions and methods
US5932462A (en) * 1995-01-10 1999-08-03 Shearwater Polymers, Inc. Multiarmed, monofunctional, polymer for coupling to molecules and surfaces
US5747027A (en) * 1995-04-07 1998-05-05 The Regents Of The University Of California BH55 hyaluronidase
US5672662A (en) * 1995-07-07 1997-09-30 Shearwater Polymers, Inc. Poly(ethylene glycol) and related polymers monosubstituted with propionic or butanoic acids and functional derivatives thereof for biotechnical applications
NZ322686A (en) * 1995-10-19 2000-01-28 Univ Washington Discrete-length polyethene glycols
US6610292B2 (en) 1995-11-22 2003-08-26 Ista Pharmaceuticals, Inc. Use of hyaluronidase in the manufacture of an ophthalmic preparation for liquefying vitreous humor in the treatment of eye disorders
US6828431B1 (en) * 1999-04-09 2004-12-07 Corixa Corporation Compositions and methods for the therapy and diagnosis of breast cancer
US6784023B2 (en) * 1996-05-20 2004-08-31 Micron Technology, Inc. Method of fabrication of stacked semiconductor devices
CN1219872A (zh) 1996-05-24 1999-06-16 血管技术药物公司 治疗或预防身体通道疾病的组合物和方法
US5958750A (en) 1996-07-03 1999-09-28 Inctye Pharmaceuticals, Inc. Human hyaluronidase
US5665069A (en) * 1996-07-19 1997-09-09 Cumer; Patricia Lynn Pressure-directed peribulbar anesthesia delivery device
US6214966B1 (en) * 1996-09-26 2001-04-10 Shearwater Corporation Soluble, degradable poly(ethylene glycol) derivatives for controllable release of bound molecules into solution
US6193963B1 (en) * 1996-10-17 2001-02-27 The Regents Of The University Of California Method of treating tumor-bearing patients with human plasma hyaluronidase
US6103525A (en) * 1996-10-17 2000-08-15 The Regents Of The University Of California Hybridoma cell lines producing monoclonal antibodies that bind to human plasma hyaluronidase
US6123938A (en) * 1996-10-17 2000-09-26 The Regents Of The University Of California Human urinary hyaluronidase
US6331289B1 (en) * 1996-10-28 2001-12-18 Nycomed Imaging As Targeted diagnostic/therapeutic agents having more than one different vectors
US6258351B1 (en) * 1996-11-06 2001-07-10 Shearwater Corporation Delivery of poly(ethylene glycol)-modified molecules from degradable hydrogels
US5990237A (en) 1997-05-21 1999-11-23 Shearwater Polymers, Inc. Poly(ethylene glycol) aldehyde hydrates and related polymers and applications in modifying amines
KR100566451B1 (ko) * 1997-05-22 2006-03-31 이스타 파마슈티칼스, 인크. 안질환 치료에서 초자체액의 액화를 위한 안과용 제제의 제조에 있어서의 히알루로니다제의 용도
FR2763958A1 (fr) 1997-05-29 1998-12-04 Transgene Sa Produit de combinaison associant un acide nucleique a une substance desorganisant la matrice extracellulaire pour la therapie genique
SE512633C2 (sv) * 1997-07-09 2000-04-17 Cecilia Johnsson Användning av hyaluronidas för reduktion av inflammatoriska cellinfiltrat
US6448369B1 (en) * 1997-11-06 2002-09-10 Shearwater Corporation Heterobifunctional poly(ethylene glycol) derivatives and methods for their preparation
US5985263A (en) 1997-12-19 1999-11-16 Enzon, Inc. Substantially pure histidine-linked protein polymer conjugates
US6506559B1 (en) 1997-12-23 2003-01-14 Carnegie Institute Of Washington Genetic inhibition by double-stranded RNA
US6362254B2 (en) * 1998-03-12 2002-03-26 Shearwater Corporation Poly(ethylene glycol) derivatives with proximal reactive groups
US6420339B1 (en) * 1998-10-14 2002-07-16 Amgen Inc. Site-directed dual pegylation of proteins for improved bioactivity and biocompatibility
HUP0103660A2 (hu) 1998-12-23 2002-01-28 Id-Pharma Gmbh Mikróbaeredetű hialuronsavbontó enzimet tartalmazó gyógyászati készítmény
US6528797B1 (en) * 1999-04-16 2003-03-04 The Regents Of The University Of Michigan Method and system for determining depth distribution of radiation-emitting material located in a source medium and radiation detector system for use therein
WO2000066139A2 (en) * 1999-04-29 2000-11-09 Ista Pharmaceuticals, Inc. Biochemical methods that eliminate corneal scars, opacification and haze
PE20010288A1 (es) * 1999-07-02 2001-03-07 Hoffmann La Roche Derivados de eritropoyetina
US6461802B1 (en) * 1999-08-02 2002-10-08 Agfa-Gevaert Adhesive layer for polyester film
AU1086501A (en) 1999-10-15 2001-04-30 Carnegie Institution Of Washington Rna interference pathway genes as tools for targeted genetic interference
EP1259562B1 (en) * 1999-12-22 2006-02-15 Nektar Therapeutics Al, Corporation Sterically hindered derivatives of water soluble polymers
US6413507B1 (en) * 1999-12-23 2002-07-02 Shearwater Corporation Hydrolytically degradable carbamate derivatives of poly (ethylene glycol)
US20030212021A1 (en) * 2001-01-25 2003-11-13 Frost Gregory I. Myeloid colony stimulating factor and uses thereof
JP2004500079A (ja) 2000-01-25 2004-01-08 シドニー　キンメル　キャンサー　センター 骨髄性コロニー刺激因子およびその用途
US6602498B2 (en) 2000-02-22 2003-08-05 Shearwater Corporation N-maleimidyl polymer derivatives
DE10013735A1 (de) * 2000-03-23 2001-10-11 Bakelite Ag Härter für Epoxidverbindungen, Verfahren zu ihrer Herstellung und Verwendung
TWI246524B (en) * 2001-01-19 2006-01-01 Shearwater Corp Multi-arm block copolymers as drug delivery vehicles
US6745776B2 (en) 2001-04-10 2004-06-08 David B. Soll Methods for reducing postoperative intraocular pressure
FR2827377B1 (fr) * 2001-07-13 2003-12-05 Poudres & Explosifs Ste Nale Dispositif d'allumage pour microcharges pyrotechniques
US20040224012A1 (en) 2001-10-05 2004-11-11 Pichit Suvanprakorn Topical application and methods for administration of active agents using liposome macro-beads
US6908963B2 (en) * 2001-10-09 2005-06-21 Nektar Therapeutics Al, Corporation Thioester polymer derivatives and method of modifying the N-terminus of a polypeptide therewith
MXPA04004336A (es) * 2001-11-07 2005-05-16 Nektar Therapeutics Al Corp Polimeros ramificados y sus conjugados.
JP2005510229A (ja) * 2001-11-28 2005-04-21 ネオーズ テクノロジーズ， インコーポレイテッド アミダーゼを用いる糖タンパク質のリモデリング
US7064110B2 (en) * 2002-05-13 2006-06-20 Enanta Pharmaceuticals, Inc. 6-11 bicycle ketolide derivatives
US7049483B1 (en) 2002-07-15 2006-05-23 Bruce Eric Hudkins Transgenic bioluminescent plants
US6682904B1 (en) * 2002-08-15 2004-01-27 Deliatroph Pharmaceuticals, Inc. Specific inhibitors of hyaluronidase 2, and methods of identifying and using same
KR20040040782A (ko) * 2002-11-08 2004-05-13 선바이오(주) 신규한 헥사-암 폴리에틸렌글리콜과 유도체 및 그의합성방법
EP2218779A1 (en) * 2002-12-16 2010-08-18 Halozyme, Inc. Human chondroitinase glycoprotein (chasegp), process for preparing the same, and pharmaceutical compositions comprising thereof
US6969514B2 (en) * 2003-02-05 2005-11-29 Soll David B Method for treating elevated intraocular pressure, including glaucoma
KR20130135986A (ko) * 2003-03-05 2013-12-11 할로자임, 아이엔씨 가용성 하이알우로니다제 당단백질 (ｓＨＡＳＥＧＰ), 이를 제조하는 방법, 용도 및 이를 포함하는 약학 조성물
US20090123367A1 (en) * 2003-03-05 2009-05-14 Delfmems Soluble Glycosaminoglycanases and Methods of Preparing and Using Soluble Glycosaminoglycanases
US20060104968A1 (en) 2003-03-05 2006-05-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases
US7871607B2 (en) 2003-03-05 2011-01-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminoglycanases
JP2007525166A (ja) 2003-03-28 2007-09-06 ザ・スクリップス・リサーチ・インスティテュート 樹状細胞に対する感染性が増大したアデノウイルス粒子と、肝細胞に対する感染性が低下した粒子
US7610156B2 (en) * 2003-03-31 2009-10-27 Xencor, Inc. Methods for rational pegylation of proteins
WO2004092361A1 (en) 2003-04-15 2004-10-28 Ista Pharmaceuticals, Inc. Process for isolating and purifing ovine hyaluronidase
JP2006525340A (ja) * 2003-04-30 2006-11-09 トライン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド カルバセフェムβ−ラクタム系抗生物質
KR100512483B1 (ko) 2003-05-07 2005-09-05 선바이오(주) 신규한 폴리에틸렌글리콜-말레이미드 유도체의 합성방법
EP3211084B1 (en) 2003-05-16 2019-03-27 Acorda Therapeutics, Inc. Proteoglycan degrading mutants for treatment of cns
US7785594B2 (en) 2003-08-14 2010-08-31 Life Sciences Research Partners Vzw Factor VIII inhibitory antibodies with reduced glycosylation
WO2005030927A2 (en) 2003-09-23 2005-04-07 Uab Research Foundation Methods and compositions for in vivo inflammation monitoring
WO2005118799A1 (en) 2004-04-15 2005-12-15 Ista Pharmaceuticals, Inc. Ovine hyaluronidase
US20050287180A1 (en) 2004-06-15 2005-12-29 Chen Andrew X Phospholipid compositions and methods for their preparation and use
US7572613B2 (en) 2004-06-25 2009-08-11 Klein Jeffrey A Drug delivery system for accelerated subcutaneous absorption
JP3912395B2 (ja) 2004-07-12 2007-05-09 セイコーエプソン株式会社 半導体集積回路、検査装置および半導体集積回路の検査方法
US20060292682A1 (en) 2004-07-22 2006-12-28 Hawkins Lynda K Addition of transgenes into adenoviral vectors
US20060181032A1 (en) * 2005-02-11 2006-08-17 Riggs Robert A Hybrid gasket
WO2007047242A2 (en) 2005-10-14 2007-04-26 Soll David B Ophthalmic surgical irrigating solutions containing hyaluronidase
WO2007059473A2 (en) 2005-11-12 2007-05-24 Introgen Therapeutics, Inc. Methods for the production and purification of adenoviral vectors
US7763582B2 (en) 2006-02-21 2010-07-27 University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey Localized insulin delivery for bone healing
US8170830B2 (en) 2006-08-22 2012-05-01 Jacobs James P Method and system for providing tolerance to interference and obstructions of line of sight
US20100179286A1 (en) 2007-06-05 2010-07-15 Teijin Limited Polycarbonate resin composition
WO2009037566A2 (en) * 2007-06-19 2009-03-26 Uvarkina Tamara P Hyaluronidase and method of use thereof
JP4931230B2 (ja) 2007-06-22 2012-05-16 新菱冷熱工業株式会社 クリーンルームの空調方法及び空調装置
US8956412B2 (en) 2007-06-22 2015-02-17 Axiomed, LLC Artificial disc
US20080314349A1 (en) 2007-06-25 2008-12-25 Robert Bosch Gmbh Green start engine control systems and methods
WO2009001455A1 (ja) 2007-06-27 2008-12-31 Hitachi, Ltd. プラズマディスプレイ装置
TWI395593B (zh) * 2008-03-06 2013-05-11 Halozyme Inc 可活化的基質降解酵素之活體內暫時性控制
FI4269578T3 (fi) 2008-03-06 2024-06-07 Halozyme Inc Liukoisen hyaluronidaasin suurimittainen tuotanto
TWI489994B (zh) 2008-03-17 2015-07-01 Baxter Healthcare Sa 供免疫球蛋白及玻尿酸酶之皮下投藥之用的組合及方法
WO2009128918A1 (en) 2008-04-14 2009-10-22 Halozyme, Inc. Combination therapy using a soluble hyaluronidase and a bisphosphonate
KR101647932B1 (ko) 2008-04-14 2016-08-11 할로자임, 아이엔씨 히알루로난 관련 질환 및 상태 치료용 변형된 히알루로니다제 및 그 용도
TWI394580B (zh) 2008-04-28 2013-05-01 Halozyme Inc 超快起作用胰島素組成物
US8315366B2 (en) * 2008-07-22 2012-11-20 Shoretel, Inc. Speaker identification and representation for a phone
SI3037529T1 (sl) 2008-12-09 2019-06-28 Halozyme, Inc. Razširjeni topni polipeptidi PH20 in njihove uporabe
JP5649589B2 (ja) 2009-03-06 2015-01-07 ハロザイム インコーポレイテッド マトリックスメタロプロテアーゼ１の温度感受性突然変異体およびその使用
ES2385251B1 (es) 2009-05-06 2013-05-06 Fundació Privada Institut D'investigació Biomèdica De Bellvitge Adenovirus oncolíticos para el tratamiento del cáncer.
US20100305500A1 (en) 2009-05-29 2010-12-02 Pacira Pharmaceuticals, Inc. Hyaluronidase as an adjuvant for increasing the injection volume and dispersion of large diameter synthetic membrane vesicles containing a therapeutic agent
IN2012DN03219A (es) 2009-09-17 2015-10-23 Baxter Healthcare Sa
MX348420B (es) 2010-07-20 2017-06-12 Halozyme Inc Efectos secundarios adversos asociados con la administracion de agentes anti-hialuronano y metodos para mejorar o prevenir los efectos secundarios.
JP6121904B2 (ja) 2010-09-08 2017-04-26 ハロザイム インコーポレイテッド 条件的活性治療用タンパク質を評価および同定する、または発展させる方法
ES2634669T3 (es) 2011-02-08 2017-09-28 Halozyme, Inc. Composición y formulación lipídica de una enzima de degradación de hialuronano y uso de la misma para el tratamiento de la hiperplasia benigna de próstata
WO2012174480A2 (en) 2011-06-17 2012-12-20 Halozyme, Inc. Continuous subcutaneous insulin infusion methods with a hyaluronan degrading enzyme
US20130011378A1 (en) 2011-06-17 2013-01-10 Tzung-Horng Yang Stable formulations of a hyaluronan-degrading enzyme
DK2768521T3 (en) 2011-10-18 2016-10-24 Csl Behring Gmbh Combined use of a sulfated glykosamin glycan and a Hyaluronidase to improve bio-availability of factor VIII
MX342735B (es) 2011-10-24 2016-10-07 Halozyme Inc Diagnostico acompañante para terapia con agente anti-hialuronano y metodos de uso del mismo.
ES2609582T3 (es) 2011-12-30 2017-04-21 Halozyme, Inc. Variantes de polipéptidos de PH20, formulaciones y usos de los mismos
BR112014024848A2 (pt) 2012-04-04 2017-07-11 Halozyme Inc terapia de combinação com um agente antihialuronano e um taxano direcionamento ao tumor
CN105727267B (zh) 2016-02-05 2020-05-26 苏州康聚生物科技有限公司 一种重组人透明质酸酶冻干制剂及其制备方法和应用
CN118773171B (zh) 2018-07-25 2026-03-13 阿特根公司 新型透明质酸水解酶突变体和包含其的药物组合物

Also Published As

Publication number Publication date
US8765685B2 (en) 2014-07-01
US20210023184A1 (en) 2021-01-28
EP2405015A3 (en) 2012-03-07
CA2517145C (en) 2017-08-01
DK1603541T4 (da) 2013-04-15
CA2517145A1 (en) 2004-09-16
US8431380B2 (en) 2013-04-30
EP2163643A1 (en) 2010-03-17
SI1603541T1 (sl) 2010-03-31
JP5756785B2 (ja) 2015-07-29
US7767429B2 (en) 2010-08-03
EP2330213A1 (en) 2011-06-08
KR20050118273A (ko) 2005-12-16
EP2163643B1 (en) 2015-01-21
AU2009245838A1 (en) 2010-01-07
IL170300A (en) 2016-06-30
US8202517B2 (en) 2012-06-19
DE602004024041D1 (de) 2009-12-24
US20090253175A1 (en) 2009-10-08
US10286044B2 (en) 2019-05-14
DK1603541T3 (da) 2010-03-29
US20110152359A1 (en) 2011-06-23
BRPI0408116A (pt) 2006-03-01
EP1603541A2 (en) 2005-12-14
PL2163643T3 (pl) 2015-06-30
HK1138883A1 (en) 2010-09-03
US8450470B2 (en) 2013-05-28
US9677061B2 (en) 2017-06-13
EP1603541A4 (en) 2006-11-22
ES2335005T3 (es) 2010-03-18
US10898551B2 (en) 2021-01-26
HUS1600031I1 (hu) 2016-08-29
PT2177620E (pt) 2015-02-16
FR16C0030I1 (fr) 2016-08-26
PT1603541E (pt) 2010-02-19
WO2004078140A2 (en) 2004-09-16
EP2405015A2 (en) 2012-01-11
HUE027661T2 (en) 2016-10-28
CY2015033I2 (el) 2016-06-22
US9677062B2 (en) 2017-06-13
US20090181032A1 (en) 2009-07-16
NZ542873A (en) 2008-07-31
PL2177620T3 (pl) 2015-05-29
HK1138885A1 (en) 2010-09-03
KR101363658B1 (ko) 2014-02-14
ES2526536T3 (es) 2015-01-13
SG2012041067A (en) 2014-08-28
CY2016024I2 (el) 2017-06-28
ZA200507978B (en) 2007-03-28
SI1603541T2 (sl) 2013-04-30
ATE448323T1 (de) 2009-11-15
ES2335005T5 (es) 2013-04-17
SI2177620T1 (sl) 2015-02-27
WO2004078140A3 (en) 2005-11-17
CN1942588B (zh) 2013-06-12
MXPA05009429A (es) 2005-12-12
EP2405015B1 (en) 2016-01-06
US20190224286A1 (en) 2019-07-25
US11723959B2 (en) 2023-08-15
PL2405015T3 (pl) 2016-09-30
CN1942588A (zh) 2007-04-04
DK2405015T3 (en) 2016-03-21
JP2013031446A (ja) 2013-02-14
US20230321203A1 (en) 2023-10-12
KR101233457B1 (ko) 2013-02-15
SG177008A1 (en) 2012-01-30
US20140199282A1 (en) 2014-07-17
EA009383B1 (ru) 2007-12-28
US8772246B2 (en) 2014-07-08
JP2010029190A (ja) 2010-02-12
ES2532399T3 (es) 2015-03-26
BRPI0408116B1 (pt) 2022-09-20
EP2311973A1 (en) 2011-04-20
EP1603541B1 (en) 2009-11-11
PT2163643E (pt) 2015-05-18
AU2004218354B2 (en) 2009-10-01
CY1109750T1 (el) 2014-09-10
US9562223B2 (en) 2017-02-07
EP3009517A1 (en) 2016-04-20
US20120251620A1 (en) 2012-10-04
US20130058893A1 (en) 2013-03-07
SI2405015T1 (sl) 2016-04-29
KR20110114692A (ko) 2011-10-19
PL1603541T3 (pl) 2010-04-30
KR20120094493A (ko) 2012-08-24
US20090181013A1 (en) 2009-07-16
JP4464395B2 (ja) 2010-05-19
SI2163643T1 (sl) 2015-03-31
HK1165834A1 (en) 2012-10-12
EP2177620A1 (en) 2010-04-21
US20040268425A1 (en) 2004-12-30
AU2009245838B2 (en) 2013-05-09
CN102943067B (zh) 2016-06-22
CY1116110T1 (el) 2017-02-08
US20120148555A1 (en) 2012-06-14
CY1117358T1 (el) 2017-04-26
DK2163643T3 (en) 2015-03-23
IL227867A (en) 2015-09-24
LU92780I2 (fr) 2015-09-21
LU93138I2 (fr) 2016-09-05
HK1086746A1 (en) 2006-09-29
US8431124B2 (en) 2013-04-30
US20090214505A1 (en) 2009-08-27
AU2004218354A1 (en) 2004-09-16
JP5538770B2 (ja) 2014-07-02
LU92780I9 (es) 2024-05-13
CY2016024I1 (el) 2017-06-28
CN102943067A (zh) 2013-02-27
EA200501384A1 (ru) 2006-06-30
EP2177620B1 (en) 2014-11-19
IL227867A0 (en) 2013-09-30
CY2015033I1 (el) 2016-06-22
KR20130135986A (ko) 2013-12-11
CY1116370T1 (el) 2016-06-22
US20170246264A1 (en) 2017-08-31
PL1603541T5 (pl) 2013-06-28
DK2177620T3 (en) 2015-01-26
EP1603541B2 (en) 2013-01-23
JP2006524507A (ja) 2006-11-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2564103T3 (es) Glicoproteína hialuronidasa soluble (sHASEGP), proceso para prepararla, usos y composiciones farmacéuticas que la comprenden
ES2887219T3 (es) Producción a gran escala de hialuronidasa soluble
US8815558B2 (en) Human chondroitinase glycoprotein (CHASEGP), process for preparing the same, and pharmaceutical compositions comprising thereof
KR100230156B1 (ko) 종양괴사인자 억제제 및 그 제조방법
KR101275949B1 (ko) 면역 글로불린 및 히알루로니다아제의 피하 투여를 위한 조합 및 방법
US20090292110A1 (en) Enzymatic modification of glycopeptides
PL185484B1 (pl) Sposób kontroli sialowania białek wytwarzanych przez hodowle komórek ssaków
US10407479B2 (en) Mutant FGF-21 peptide pegylated conjugates and uses thereof
Chapman et al. The role of carbohydrate in sperm-ZP3 adhesion
KR102227919B1 (ko) 당쇄 부가 링커, 당쇄 부가 링커와 생리 활성 물질을 포함하는 화합물 또는 그 염, 및 그것들의 제조 방법
US20250381246A1 (en) Liquid formulations comprising mutant fgf-21 peptide pegylated conjugates
KR940005799A (ko) 거핵구 분화 인자
WO2008143944A2 (en) Methods of glycosylation and bioconjugation
ES2254759T3 (es) Aislamiento de lectinas.
CN117120070B (zh) 包含突变型fgf-21肽peg化缀合物的液体制剂
CA2585156A1 (en) Duffy antigen receptor for chemokines and use thereof
Enders et al. Binding activity of recombinant human L-selectin-Fcγ is modified by sialylation
WO2004039405A1 (ja) Ｓｇｌｔホモログ用途
ES2362244T3 (es) Conjugados polímeros de la caja a de hmgb1 y variantes de la caja a de hmgb1.
Ma The generation of monoclonal antibodies to investigate perlecan turnover in cells and tissues
WO1993001214A1 (fr) Interleukine 6 humaine de recombinaison avec terminaison n homogene et production de cette interleukine
Id et al. J. Macdermot
KR20190005239A (ko) Tgf-베타 슈퍼패밀리의 ab6 패밀리 디자이너 리간드를 포함하는 간질환 치료용 조성물 및 그의 이용