ES2566628T3 - Fármacos de ácido nucleico ENA que modifican el corte y empalme en precursores de ARNm - Google Patents

Fármacos de ácido nucleico ENA que modifican el corte y empalme en precursores de ARNm Download PDF

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Makoto Koizumi
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Abstract

Un compuesto capaz de inducir el salto del exón 53 del gen de la distrofina, que es (a) un oligonucleótido que consiste en la secuencia de nucleótidos mostrada en una cualquiera de las SEC ID Nº 78, 77, 71, 72, 76, 68, 75, 69, 70, 73 y 74, donde al menos uno de los azúcares que constituyen el oligonucleótido está modificado, y donde dicho azúcar es D-ribofuranosa y al menos una modificación de dicho azúcar es 2'-O,4'-C-alquilenación de la Dribofuranosa o (b) un compuesto representado por una cualquiera de las fórmulas generales (XVI"), (XVII"), (XVIII"), (XIX"), (XX") and (XXI"), o una sal farmacológicamente aceptable del mismo, donde dichas fórmulas generales se definen del siguiente modo: BT''16-BM''16-BB''16 (XVI") donde BT"16 es un grupo representado por uno cualquiera de los siguientes (16a") a (16j"): (16a")HO-, (16b")HO-Bg-, (16c")HO-Bt-Bg-, (16d")HO-Bg-Bt-Bg-, (16e")HO-Bg-Bg-Bt-Bg-, (16f')HO-Ba-Bg-Bg-Bt-Bg-, (16g")HO-Ba-Ba-Bg-Bg-Bt-Bg-, (16h")HO-Bg-Ba-Ba-Bg-Bg-Bt-Bg-, (16i")HO-Bt-Bg-Ba-Ba-Bg-Bg-Bt-Bg-, o (16j")HO-Bc-Bt-Bg-Ba-Ba-Bg-Bg-Bt-Bg- BM"16 es un grupo representado por la siguiente fórmula (16"): -Bt-Bt-Bc-Bt-Bt-Bg-Bt-Ba-Bc-(16") BB"16 es un grupo representado por uno cualquiera de los siguientes (116a") a (116j"): (116a")-CH2CH2OH, (116b")-Bt-CH2CH2OH, (116c")-Bt-Bt-CH2CH2OH, (116d")-Bt-Bt-Bc-CH2CH2OH, (116e")-Bt-Bt-Bc-Ba-CH2CH2OH, (116f")-Bt-Bt-Bc-Ba-Bt-CH2CH2OH, (116g")-Bt-Bt-Bc-Ba-Bt-Bc-CH2CH2OH, (116h")-Bt-Bt-Bc-Ba-Bt-Bc-Bc-CH2CH2OH, (116i")-Bt-Bt-Bc-Ba-Bt-Bc-Bc-Bc-CH2CH2OH, o (116j")-Bt-Bt-Bc-Ba-Bt-Bc-Bc-Bc-Ba-CH2CH2OH donde Bg es un grupo representado por la siguiente fórmula (G1) o (G2); Ba es un grupo representado por la siguiente fórmula (A1) o (A2); Bc es un grupo representado por la siguiente fórmula (C1) o (C2); y Bt es un grupo representado por la siguiente fórmula (U1) o (T2):**Fórmula** donde X es individual e independientemente un grupo representado por la siguiente fórmula (XI) o (X2):**Fórmula** Y es individual e independientemente un átomo de hidrógeno, un grupo hidroxilo o un grupo alcoxi con 1-6 átomos de carbono y Z es individual e independientemente un enlace sencillo o un grupo alquileno con 1-5 átomos de carbono; con la condición de que al menos uno de los nucleósidos que constituyen el compuesto representado por la fórmula (XVI'') tenga un grupo 2'-O,4'-C-alquileno.**Fórmula**

Description

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dibenciletilendiamina, sales de cloroprocaína, sales de procaína, sales de dietanolamina, sales de N-bencilfenetilamina, sales de piperazina, sales de tetrametilamonio, sales de tris(hidroximetil)aminometano] y similares; sales de ácidos inorgánicos tales como sales de hidroácidos halogenados (por ejemplo, fluorhidratos, clorhidratos, bromhidratos, yodhidratos), nitratos, percloratos, sulfatos, fosfatos y similares; sales de ácidos orgánicos tales como
5 sulfonatos de alcano inferior (por ejemplo, metanosulfonatos, trifluorometanosulfonatos, etanosulfonatos), aril sulfonatos (por ejemplo, bencenosulfonatos, p-toluenosulfonatos), acetatos, malatos, fumaratos, succinatos, citratos, tartratos, oxalatos, maleatos y similares; y sales de aminoácidos (por ejemplo, sales de glicina, sales de lisina, sales de arginina, sales de ornitina, glutamatos, aspartatos). Estas sales pueden prepararse de acuerdo con métodos conocidos.
Debe apreciarse que los compuestos representados por las fórmulas generales (XVI"), (XVII"), (XVIII"), (XIX"), (XX") y (XXI") pueden existir como hidratos y que dichos hidratos también se incluyen en la presente invención.
El oligonucleótido de la invención, los compuestos representados por las fórmulas generales (XVI"), (XVII"), (XVIII"),
15 (XIX"), (XX") y (XXI") (a partir de ahora en este documento, mencionados como el "compuesto de la invención") y sales farmacológicamente aceptables de los mismos son eficaces como agentes farmacéuticos para tratar la distrofia muscular.
El compuesto de la invención puede sintetizarse en base al método descrito en la bibliografía (Nucleic Acids Research, 12: 4539 (1984)) usando un sintetizar comercial (por ejemplo, PerkinElmer Modelo 392 que emplea el método de fosforoamidita). En cuanto a los reactivos de fosforoamidita usados en la síntesis, están disponibles reactivos comerciales para nucleósidos naturales y 2'-O-metilnucleósidos (es decir 2'-O-metilguanosina, 2'-Ometiladenosina, 2'-O-metilcitosina y 2'-O-metiluridina). En cuanto a 2'-O-alquil-guanosina, -adenosina, -citosina y uridina donde el grupo alquilo tiene 2-6 átomos de carbono, pueden sintetizarse o adquirirse como se describe a
25 continuación.
2'-O-aminoetil-guanosina, -adenosina, -citosina y -uridina pueden sintetizarse de acuerdo con Blommers et al., Biochemistry (1998), 37: 17714-17725. 2'-O-propil-guanosina, -adenosina, -citosina y -uridina pueden sintetizarse de acuerdo con Lesnik, E.A. et al., Biochemistry (1993), 32: 7832-7838. 2'-O-alil-guanosina, -adenosina, -citosina y -uridina están disponibles en el mercado. 2'-O-metoxietil-guanosina, adenosina, -citosina y -uridina pueden sintetizarse de acuerdo con la patente de Estados Unidos Nº 6261840 o Martin, P., Helv. Chim. Acta. (1995) 78: 486-504. 2'-O-butil-guanosina, -adenosina, -citosina y -uridina pueden sintetizarse de acuerdo con Lesnik, E.A. et al.,
35 Biochemistry (1993), 32: 7832-7838. 2'-O-pentil-guanosina, -adenosina, -citosina y -uridina pueden sintetizarse de acuerdo con Lesnik, E.A. et al., Biochemistry (1993), 32: 7832-7838. 2'-O-propargil-guanosina, -adenosina, -citosina y -uridina están disponibles en el mercado. 2'-O,4'-C-metileno-guanosina, -adenosina, 5-metil-citosina y -timidina pueden sintetizarse de acuerdo con el método descrito en el documento WO99/14226. 2'-O,4'-C-alquileno-guanosina y -adenosina donde el grupo alquileno tiene 2-5 átomos de carbono, 5-metil-citosina y -timidina pueden sintetizarse de acuerdo con el método descrito en el documento WO00/47599.
En la tioación de grupos fosfato, los derivados tioato pueden obtenerse en base a los métodos descritos en
45 Tetrahedron Letters, 32, 3005 (1991) y J. Am. Chem. Soc., 112, 1253 (1990), usando azufre y un reactivo tal como disulfuro de tetraetiltiuram (TETD; Applied Biosystems) o reactivo de Beaucage (Glen Research) que reacciona con un fosfato trivalente para formar un tioato.
Con respecto al vidrio de poro controlado (DPG) usado en el sintetizador, el uso de un CPG modificado (descrito en el Ejemplo 12b de la publicación de patente japonesa no examinada Nº H7-87982) permite la síntesis de oligonucleótidos a los cuales se ha unido un grupo 2-hidroxietilfosfato en el extremo 3'. Además, el uso del modificador 3'-amino C3 CPG, modificador 3'-amino C7 CPG, Gliceril CPG (Glen Research), 3'-specer C3 SynBase CPG 1000 o 3'-specer C9 SynBase CPG 1000 (Link Technologies) permite la síntesis de oligonucleótidos a los cuales se ha unido un grupo hidroxialquilfosfato o grupo aminoalquilfosfato al extremo 3'.
55 Los compuestos de la presente invención y sales farmacológicamente aceptables de los mismos tienen un efecto de inducir el salto del exón 53 del gen de la distrofina. Los compuestos de la invención representados por las fórmulas generales (XVI"), (XVII"), (XVIII"), (XIX"), (XX") y (XXI") y sales farmacológicamente aceptables de los mismos tienen elevada fuerza de unión a ARN y elevada resistencia a nucleasa. Por lo tanto, los compuestos de la invención y sales farmacológicamente aceptables de los mismos son útiles como agentes farmacéuticos para tratar la distrofia muscular.
Cuando el compuesto de la invención o una sal farmacológicamente aceptable del mismo se usa como agente terapéutico para la distrofia muscular, el compuesto o una sal farmacológicamente aceptable o éster del mismo
65 puede administrarse por sí mismo. Como alternativa, el compuesto o una sal farmacológicamente aceptable o éster del mismo puede mezclarse con excipientes o diluyentes farmacológicamente aceptables apropiados, preparados en
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acetonitrilo al 25%, TEAA 0,1 M B%: 20%  80% (10 min, gradiente lineal); 60ºC; 2 ml/min; 254 nm], el presente compuesto se eluyó a 5,68 min. El compuesto se identificó por análisis espectrométrico de masas ESI de iones negativos (valor calculado: 6274,27; valor medido: 6274,42).
5 La secuencia de nucleótidos del presente compuesto es complementaria a los nucleótidos Nº 8033-8050 del ADNc de la distrofina (Nº de acceso a Gene Bank NM_004006.1).
(EJEMPLO 8)
Síntesis de HO-Ce2p-Te2p-Cmp-Ce2p-Te2p-Ump-Ce2p-Ce2p-Amp-Te2p-Gmp-Amp-Ce2p-Te2p-Ce2p-Amp-Amp-Gmp-CH2CH2OH (AO72)
El compuesto del Ejemplo 8 que tiene una secuencia de interés se sintetizó del mismo modo que se sintetizó el compuesto del Ejemplo de referencia 4. Después de la desprotección, el producto resultante se purificó por HPLC de
15 fase inversa [Shimadzu modelo LC-10VP; columna: Merck, Chromolith Performance RP-18e (4,6 x 100 mm); solución A: acetonitrilo al 5%, acetato de trietilamina acuoso 0,1 M (TEAA), pH 7,0; solución B: acetonitrilo B%: 10%  46% (8 min, gradiente lineal); 60ºC; 2 ml/min; 254 nm]. Se recogió la fracción eluida a 6,09 min. Después de retirar el disolvente por destilación a presión reducida, se añadió solución acuosa de ácido acético al 80% al residuo, que después se dejó durante 20 min para retirar el grupo DMTr. Después de retirar por destilación el disolvente, el residuo resultante se disolvió en 0,5 ml de agua y se filtró con Ultrafree-MC (Millipore: producto Nº UFC4 OHV 25). El disolvente se retiró por destilación para obtener de este modo el compuesto de interés (10,1 unidades A260) (max (H2O) = 264 nm). Cuando se analizó por HPLC de fase inversa [columna: Merck, Chromolith Performance RP-18e (4,6 x 100 mm); solución A: acetonitrilo al 5%, acetato de trietilamina acuoso 0,1 M (TEAA), pH 7,0; solución B: acetonitrilo al 25%, TEAA 0,1 M B%: 20%  60% (10 min, gradiente lineal); 60ºC; 2 ml/min; 254 nm], el presente
25 compuesto se eluyó a 8,33 min. El compuesto se identificó por análisis espectrométrico de masas ESI de iones negativos (valor calculado: 6249,31; valor medido: 6249,21).
La secuencia de nucleótidos del presente compuesto es complementaria a los nucleótidos Nº 8051-8068 del ADNc de la distrofina (Nº de acceso a Gene Bank NM_004006.1).
(EJEMPLO 9)
Síntesis de HO-Ce2p-Te2p-Gmp-Amp-Amp-Gmp-Gmp-Te2p-Gmp-Te2p-Te2p-Ce2p-Te2p-Te2p-Gmp-Te2p-Amp-Ce2p-CH2CH2OH (AO95)
35 El compuesto del Ejemplo 9 que tiene una secuencia de interés se sintetizó del mismo modo que se sintetizó el compuesto del Ejemplo de referencia 4. Después de la desprotección, el producto resultante se purificó por HPLC de fase inversa [Shimadzu modelo LC-10VP; columna: Merck, Chromolith Performance RP-18e (4,6 x 100 mm); solución A: acetonitrilo al 5%, acetato de trietilamina acuoso 0,1 M (TEAA), pH 7,0; solución B: acetonitrilo B%: 10%  45% (8 min, gradiente lineal); 60ºC; 2 ml/min; 254 nm]. Se recogió la fracción eluida a 7,22 min. Después de retirar el disolvente por destilación a presión reducida, se añadió solución acuosa de ácido acético al 80% al residuo, que después se dejó durante 20 min para retirar el grupo DMTr. Después de retirar por destilación el disolvente, el residuo resultante se disolvió en 0,5 ml de agua y se filtró con Ultrafree-MC (Millipore: producto Nº UFC4 OHV 25). El disolvente se retiró por destilación para obtener de este modo el compuesto de interés (10,6 unidades A260) (max
45 (H2O) = 259 nm). Cuando se analizó por HPLC de fase inversa [columna: Merck, Chromolith Performance RP-18e (4,6 x 100 mm); solución A: acetonitrilo al 5%, acetato de trietilamina acuoso 0,1 M (TEAA), pH 7,0; solución B: acetonitrilo al 25%, TEAA 0,1 M B%: 15%  100% (10 min, gradiente lineal); 60ºC; 2 ml/min; 254 nm], el presente compuesto se eluyó a 8,31 min. El compuesto se identificó por análisis espectrométrico de masas ESI de iones negativos (valor calculado: 6347,33; valor medido: 6347,50).
La secuencia de nucleótidos del presente compuesto es complementaria a los nucleótidos Nº 7934-7951 del ADNc de la distrofina (Nº de acceso a Gene Bank NM_004006.1).
(EJEMPLO 10)
55 Síntesis de HO-Te2p-Te2p-Cmp-Ce2p-Amp-Gmp-Ce2p-Ce2p-Amp-Te2p-Te2p-Gmp-Te2p-Gmp-Te2p-Te2p-Gmp-Amp-CH2CH2OH (AO96)
El compuesto del Ejemplo 10 que tiene una secuencia de interés se sintetizó del mismo modo que se sintetizó el compuesto del Ejemplo de referencia 4. Después de la desprotección, el producto resultante se purificó por HPLC de fase inversa [Shimadzu modelo LC-10VP; columna: Merck, Chromolith Performance RP-18e (4,6 x 100 mm); solución A: acetonitrilo al 5%, acetato de trietilamina acuoso 0,1 M (TEAA), pH 7,0; solución B: acetonitrilo B%: 10%  45% (8 min, gradiente lineal); 60ºC; 2 ml/min; 254 nm]. Se recogió la fracción eluida a 7,09 min. Después de retirar el disolvente por destilación a presión reducida, se añadió solución acuosa de ácido acético al 80% al residuo,
65 que después se dejó durante 20 min para retirar el grupo DMTr. Después de retirar por destilación el disolvente, el
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etapa de oxidación con yodo-H2O. Después de la desprotección, el producto resultante se purificó por HPLC de fase inversa [Shimadzu modelo LC-10VP; columna: Merck, Chromolith Performance RP-18e (4,6 x 100 mm); solución A: acetonitrilo al 5%, acetato de trietilamina acuoso 0,1 M (TEAA), pH 7,0; solución B: acetonitrilo B%: 10%  45% (8 min, gradiente lineal); 60ºC; 2 ml/min; 254 nm]. Se recogió la fracción eluida a 6,65 min. Después de retirar el
5 disolvente por destilación a presión reducida, se añadió solución acuosa de ácido acético al 80% al residuo, que después se dejó durante 20 min para retirar el grupo DMTr. Después de retirar por destilación el disolvente, el residuo resultante se disolvió en 0,5 ml de agua y se filtró con Ultrafree-MC (Millipore: producto Nº UFC4 OHV 25). El disolvente se retiró por destilación para obtener de este modo el compuesto de interés (15,1 unidades A260). Cuando se analizó por HPLC de intercambio iónico [columna: Tosoh TSK-gel DEAE-5PW (7,5 x 75 mm); solución A: acetonitrilo al 20%; solución B: acetonitrilo al 20%, tampón fosfato 67 mM (pH 6,8), KBr 1,5 M; gradiente: solución B 20  80% (10 min, gradiente lineal); 40ºC; 2 ml/min], el presente compuesto se eluyó a 6,47 min. La secuencia de nucleótidos del presente compuesto es complementaria a los nucleótidos Nº 8002-8019 del ADNc de la distrofina (Nº de acceso a Gene Bank NM_004006.1).
15 (EJEMPLO DE ENSAYO) Método para el análisis de la capacidad de inducción del salto de exón por ENA antisentido
Preparación de cultivo primario de células mioblásticas
Se estableció un cultivo primario de células mioblásticas como se describe a continuación.
1. Se cortaron muestras de tejido muscular tomadas del músculo recto del muslo de pacientes con distrofia muscular de Duchenne en trozos finos y se lavaron con PBS dos veces.
2. El tejido muscular de 1 anterior se trató con Difco Bacto™ triptona 250 (solución al 5% en PBS) a 37ºC 25 durante 30 min para obtener de este modo células libres enzimáticamente.
3.
Las células libres de 2 anterior se lavaron con DMEM (que contenía FBS al 20%) dos veces.
4.
Las células de 3 anterior se suspendieron en DMEM (que contenía FBS al 20% y ultroser G al 4%).
5.
Las células en suspensión de 4 se pasaron a través de una malla (Becton Dickinson: filtro celular 35-2360) para recuperar solamente células libres.
6.
Las células recuperadas de 5 anterior se sembraron en placas recubiertas con gelatina.
7.
Las células se cultivaron a 37ºC en una atmósfera de CO2 al 5% en aire.
Inducción de diferenciación
35 La diferenciación de las células musculares se indujo como se describe a continuación.
1.
Las células cultivadas obtenidas anteriormente se sembraron en placas de 6 pocillos (recubiertas con gelatina). Cuando las células se hicieron confluyentes, se intercambió el medio con DMEM (que contenía suero de caballo al 2% (HS)).
2.
Después de un cultivo de 4 días, las células se transfectaron con los compuestos preparados en los Ejemplos (ENA) como se describe a continuación.
Transfección de ENA
45 Las células mioblásticas se transfectaron con los compuestos preparados en los Ejemplos (ENA) como se describe a continuación.
1.
Se disolvieron 200 pmol de cada uno de los compuestos preparados en los Ejemplos (10 g/20 l de milliQ) en 100 l de Opti-MEM (GIBCO-BRL).
2.
Se añadieron 6 l de reactivo Plus (GIBCO-BRL) a la solución de 1 anterior, que después se dejó a temperatura ambiente durante 15 min.
3.
En otro tubo, se disolvieron 8 l de Lipofectamina (GIBCO-BRL) en 100 l de Opti-MEM.
4.
Después de completar el tratamiento de 2 anterior, la solución de 3 anterior se añadió a la solución de 2 anterior. La solución resultante se dejó a temperatura ambiente durante otros 15 min.
55 5. Las células mioblásticas 4 días después del inicio de la inducción de diferenciación se lavaron con PBS una vez. Después, se añadieron 800 l de Opti-MEM a las mismas.
6.
Después de completar el tratamiento de 4 anterior, la solución tratada se añadió a las células de 5 anterior.
7.
Las células de 6 anterior se cultivaron a 37ºC en una atmósfera de CO2 al 5% en aire durante 3 h. Después, se añadieron 500 l de DMEM (que contenía HS al 6%) a cada pocillo.
8.
Las células se cultivaron adicionalmente.
Extracción de ARN
Se extrajo el ARN como se describe a continuación. 65
25
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Families Citing this family (66)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001083740A2 (en) 2000-05-04 2001-11-08 Avi Biopharma, Inc. Splice-region antisense composition and method
US7902160B2 (en) * 2002-11-25 2011-03-08 Masafumi Matsuo ENA nucleic acid drugs modifying splicing in mRNA precursor
PL1766010T3 (pl) 2004-06-28 2011-07-29 Univ Western Australia Antysensowne oligonukleotydy do indukcji pominięcia egzonu i sposoby ich zastosowania
USRE48960E1 (en) 2004-06-28 2022-03-08 The University Of Western Australia Antisense oligonucleotides for inducing exon skipping and methods of use thereof
US20090312532A1 (en) * 2005-04-22 2009-12-17 Van Deutekom Judith Christina Modulation of exon recognition in pre-mrna by interfering with the binding of sr proteins and by interfering with secodary rna structure
WO2007123391A1 (en) 2006-04-20 2007-11-01 Academisch Ziekenhuis Leiden Therapeutic intervention in a genetic disease in an individual by modifying expression of an aberrantly expressed gene.
EP1857548A1 (en) * 2006-05-19 2007-11-21 Academisch Ziekenhuis Leiden Means and method for inducing exon-skipping
JP6047270B2 (ja) 2006-08-11 2016-12-21 バイオマリン テクノロジーズ ベー．フェー． Ｄｎａリピートの不安定性に関連した遺伝的障害を治療するための方法及び手段
CN103212085A (zh) 2007-07-12 2013-07-24 普罗森那技术公司 用于使化合物靶向多种选定器官或组织的分子
CA2693742A1 (en) * 2007-07-12 2009-01-15 Prosensa Technologies B.V. Molecules for targeting compounds to various selected organs, tissues or tumor cells
EP2203173B1 (en) 2007-10-26 2015-12-23 Academisch Ziekenhuis Leiden Means and methods for counteracting muscle disorders
USRE48468E1 (en) 2007-10-26 2021-03-16 Biomarin Technologies B.V. Means and methods for counteracting muscle disorders
WO2009099326A1 (en) 2008-02-08 2009-08-13 Prosensa Holding Bv Methods and means for treating dna repeat instability associated genetic disorders
EP2119783A1 (en) 2008-05-14 2009-11-18 Prosensa Technologies B.V. Method for efficient exon (44) skipping in Duchenne Muscular Dystrophy and associated means
CN105779453A (zh) * 2008-10-24 2016-07-20 萨雷普塔治疗公司 用于dmd的多外显子跳跃组合物
EP2421971B1 (en) 2009-04-24 2016-07-06 BioMarin Technologies B.V. Oligonucleotide comprising an inosine for treating dmd
BR122023023194A2 (pt) 2009-11-12 2023-12-26 The University Of Western Australia Oligonucleotídeo antissentido, composição e respectivo uso
KR101605932B1 (ko) 2009-12-18 2016-03-24 노파르티스 아게 Ｈｓｆ1-관련 질환을 치료하기 위한 유기 조성물
AU2014280918B2 (en) * 2009-12-18 2016-11-17 Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. Organic compositions to treat HSF1-related diseases
EP2516647B1 (en) 2009-12-24 2016-12-14 BioMarin Technologies B.V. Molecule for treating an inflammatory disorder
TWI541024B (zh) 2010-09-01 2016-07-11 日本新藥股份有限公司 反義核酸
EP2750715B1 (en) 2011-08-30 2018-10-31 The Regents of The University of California Identification of small molecules that enhance therapeutic exon skipping
CA3132111A1 (en) * 2011-12-28 2013-07-04 Nippon Shinyaku Co., Ltd. Antisense nucleic acids for skipping of exon 55 of human dystrophin gene
US9382542B2 (en) * 2012-01-04 2016-07-05 Quark Pharmaceuticals, Inc. Double-stranded RNA compounds to CASP2 and uses thereof
CN118581086A (zh) * 2012-01-27 2024-09-03 比奥马林技术公司 用于治疗杜兴型肌营养不良症和贝克型肌营养不良症的具有改善特性的rna调节性寡核苷酸
JP6928025B2 (ja) * 2012-01-27 2021-09-01 バイオマリン テクノロジーズ ベー．フェー． デュシェンヌ型及びベッカー型筋ジストロフィーの治療のための改善された特徴を有するｒｎａ調節オリゴヌクレオチド
WO2013191129A1 (ja) * 2012-06-18 2013-12-27 第一三共株式会社 ヌクレオシド類縁体の製造中間体及びその製造方法
EA202090946A3 (ru) 2013-03-14 2021-07-30 Сарепта Терапьютикс, Инк. Композиции, обеспечивающие пропускание экзонов, для лечения мышечной дистрофии
NZ631289A (en) 2013-03-15 2017-08-25 Sarepta Therapeutics Inc Improved compositions for treating muscular dystrophy
RU2730681C2 (ru) * 2014-03-12 2020-08-24 Ниппон Синяку Ко., Лтд. Антисмысловые нуклеиновые кислоты
AU2015277924B2 (en) 2014-06-17 2021-02-25 National Center Of Neurology And Psychiatry Antisense nucleic acids
HRP20201125T1 (hr) 2015-09-15 2020-10-30 Nippon Shinyaku Co., Ltd. Antisens nukleinska kiselina
KR102775461B1 (ko) 2016-04-01 2025-02-28 어비디티 바이오사이언시스 인크. 핵산-폴리펩타이드 조성물 및 이의 용도
AU2017290231A1 (en) 2016-06-30 2019-02-07 Sarepta Therapeutics, Inc. Exon skipping oligomers for muscular dystrophy
CN117298290A (zh) 2016-12-19 2023-12-29 萨勒普塔医疗公司 用于肌肉萎缩症的外显子跳跃寡聚体缀合物
EP3554552B1 (en) 2016-12-19 2022-08-17 Sarepta Therapeutics, Inc. Exon skipping oligomer conjugates for muscular dystrophy
LT3554553T (lt) 2016-12-19 2022-08-25 Sarepta Therapeutics, Inc. Egzoną šalinantys oligomero konjugatai nuo raumenų distrofojos
CA3047894A1 (en) * 2016-12-28 2018-07-05 Daiichi Sankyo Company, Limited Therapeutic drug for alport's syndrome
CN110381980A (zh) 2017-01-06 2019-10-25 艾维迪提生物科学有限责任公司 核酸-多肽组合物以及诱导外显子跳读的方法
CN110536964A (zh) 2017-03-10 2019-12-03 国立研究开发法人国立成育医疗研究中心 反义寡核苷酸和糖原贮积病Ia型预防或治疗用组合物
GB201711809D0 (en) 2017-07-21 2017-09-06 Governors Of The Univ Of Alberta Antisense oligonucleotide
EA201991450A1 (ru) 2017-09-22 2019-12-30 Сарепта Терапьютикс, Инк. Конъюгаты олигомеров для пропуска экзона при мышечной дистрофии
EP3687577A1 (en) 2017-09-28 2020-08-05 Sarepta Therapeutics, Inc. Combination therapies for treating muscular dystrophy
JP2020536060A (ja) 2017-09-28 2020-12-10 サレプタ セラピューティクス， インコーポレイテッド 筋ジストロフィーを処置するための併用療法
EP3763815A4 (en) 2018-03-09 2021-12-15 Daiichi Sankyo Company, Limited THERAPEUTIC FOR GLYCOGEN STORAGE DISEASE OF TYPE IA
US10758629B2 (en) 2018-05-29 2020-09-01 Sarepta Therapeutics, Inc. Exon skipping oligomer conjugates for muscular dystrophy
BR112020026542A2 (pt) 2018-06-26 2021-04-06 Nippon Shinyaku Co., Ltd. Composição que compreende oligonucleotídeo antissenso e uso da mesma para tratamento de distrofia muscular de duchenne
JP7611825B2 (ja) 2018-08-02 2025-01-10 ダイン セラピューティクス，インコーポレーテッド ジストロフィン異常症を処置するための筋標的化複合体およびそれらの使用
US20220193250A1 (en) 2018-08-02 2022-06-23 Dyne Therapeutics, Inc. Muscle targeting complexes and uses thereof for treating facioscapulohumeral muscular dystrophy
US12018087B2 (en) 2018-08-02 2024-06-25 Dyne Therapeutics, Inc. Muscle-targeting complexes comprising an anti-transferrin receptor antibody linked to an oligonucleotide and methods of delivering oligonucleotide to a subject
US11168141B2 (en) 2018-08-02 2021-11-09 Dyne Therapeutics, Inc. Muscle targeting complexes and uses thereof for treating dystrophinopathies
WO2021049504A1 (ja) 2019-09-10 2021-03-18 第一三共株式会社 肝臓送達用ＧａｌＮＡｃ－オリゴヌクレオチドコンジュゲートおよび製造方法
IL292286A (en) 2019-10-18 2022-06-01 Daiichi Sankyo Co Ltd Production method for bicyclic phosphoramidite
EP4079329A4 (en) 2019-12-19 2024-04-17 Nippon Shinyaku Co., Ltd. ANTISENSE NUCLEIC ACID ENABLING EXON SKIPPING
CA3165961A1 (en) 2019-12-26 2021-07-01 Nippon Shinyaku Co., Ltd. Antisense nucleic acid that induces skipping of exon 50
AU2021226089A1 (en) 2020-02-28 2022-09-15 National Center Of Neurology And Psychiatry Antisense nucleic acid inducing skipping of exon 51
US11987795B2 (en) 2020-11-24 2024-05-21 The Broad Institute, Inc. Methods of modulating SLC7A11 pre-mRNA transcripts for diseases and conditions associated with expression of SLC7A11
CA3216839A1 (en) 2021-04-30 2022-11-03 Sarepta Therapeutics, Inc. Treatment methods for muscular dystrophy
AU2022298028A1 (en) 2021-06-23 2023-12-21 National Center Of Neurology And Psychiatry Combination of antisense oligomers
US11638761B2 (en) 2021-07-09 2023-05-02 Dyne Therapeutics, Inc. Muscle targeting complexes and uses thereof for treating Facioscapulohumeral muscular dystrophy
US11969475B2 (en) 2021-07-09 2024-04-30 Dyne Therapeutics, Inc. Muscle targeting complexes and uses thereof for treating facioscapulohumeral muscular dystrophy
US11771776B2 (en) 2021-07-09 2023-10-03 Dyne Therapeutics, Inc. Muscle targeting complexes and uses thereof for treating dystrophinopathies
CN117980006A (zh) 2021-07-09 2024-05-03 达因疗法公司 用于治疗肌养蛋白病的肌肉靶向复合物和制剂
US20240390508A1 (en) 2021-08-21 2024-11-28 Takeda Pharmaceutical Company Limited Human transferrin receptor binding peptide-drug conjugate
EP4215614A1 (en) 2022-01-24 2023-07-26 Dynacure Combination therapy for dystrophin-related diseases
JP2025509438A (ja) 2022-03-17 2025-04-11 サレプタ セラピューティクス， インコーポレイテッド ホスホロジアミデートモルホリノオリゴマーコンジュゲート

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2544164B2 (ja) 1987-11-28 1996-10-16 新明工業株式会社 ピストンリング組み付け装置
JPH07505293A (ja) * 1992-03-31 1995-06-15 アボツト・ラボラトリーズ 多重リガーゼ連鎖反応方法
US6436635B1 (en) * 1992-11-06 2002-08-20 Boston University Solid phase sequencing of double-stranded nucleic acids
JPH0787982A (ja) 1993-01-29 1995-04-04 Sankyo Co Ltd 修飾オリゴデオキシリボヌクレオチド
US5525470A (en) * 1994-01-26 1996-06-11 Hybridon, Inc. Method of sequencing [short] oligonucleotides
US5563255A (en) * 1994-05-31 1996-10-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotide modulation of raf gene expression
US5853990A (en) * 1996-07-26 1998-12-29 Edward E. Winger Real time homogeneous nucleotide assay
CA2303299C (en) 1997-09-12 2016-02-23 Exiqon A/S Oligonucleotide analogues
JPH11140930A (ja) 1997-11-13 1999-05-25 Matsushita Electric Works Ltd シャワー装置
PT1152009E (pt) 1999-02-12 2005-03-31 Sankyo Co Novos analogos de nucleosidos e oligonucleotidos
JP2000325085A (ja) 1999-05-21 2000-11-28 Masafumi Matsuo デュシェンヌ型筋ジストロフィー治療剤
US6165728A (en) * 1999-11-19 2000-12-26 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense modulation of NCK-2 expression
US6261840B1 (en) 2000-01-18 2001-07-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of PTP1B expression
US6653467B1 (en) 2000-04-26 2003-11-25 Jcr Pharmaceutical Co., Ltd. Medicament for treatment of Duchenne muscular dystrophy
EP1287125B1 (en) * 2000-04-28 2009-07-29 Asklepios Biopharmaceutical, Inc. Dna sequences encoding dystrophin minigenes and methods of use thereof
RU2165149C1 (ru) 2000-07-03 2001-04-20 Шапошников Валерий Геннадьевич Система формования и упаковки изделий из сахарной ваты
US6920153B2 (en) * 2000-07-17 2005-07-19 Nortel Networks Limited Architecture and addressing scheme for storage interconnect and emerging storage service providers
US6727355B2 (en) * 2000-08-25 2004-04-27 Jcr Pharmaceuticals Co., Ltd. Pharmaceutical composition for treatment of Duchenne muscular dystrophy
JP4836366B2 (ja) 2000-08-25 2011-12-14 雅文 松尾 デュシェンヌ型筋ジストロフィー治療剤
EP1191097A1 (en) * 2000-09-21 2002-03-27 Leids Universitair Medisch Centrum Induction of exon skipping in eukaryotic cells
JP3781687B2 (ja) 2001-02-23 2006-05-31 松下電器産業株式会社 遺伝子診断装置及び遺伝子診断方法
US20030219770A1 (en) * 2001-11-08 2003-11-27 Eshleman James R. Methods and systems of nucleic acid sequencing
JP2003204381A (ja) 2002-01-04 2003-07-18 Hitachi Ltd 情報通信端末装置
US7902160B2 (en) * 2002-11-25 2011-03-08 Masafumi Matsuo ENA nucleic acid drugs modifying splicing in mRNA precursor
AU2003225410A1 (en) 2003-03-21 2004-10-11 Academisch Ziekenhuis Leiden Modulation of exon recognition in pre-mrna by interfering with the secondary rna structure

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EP2386636B1 (en) 2016-01-27
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JP2012135314A (ja) 2012-07-19
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JP2015180208A (ja) 2015-10-15
EP2135948A3 (en) 2010-03-17
CA2942791A1 (en) 2004-06-10
ES2566632T3 (es) 2016-04-14
ES2561851T3 (es) 2016-03-01
US9243026B2 (en) 2016-01-26
EP2530153B1 (en) 2016-03-16
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