ES3011282T3 - Imidazo[4,5-c]pyridine derivatives as toll-like receptor agonsits - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a compuestos de imidazo-piridinilo, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, a composiciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos y sales, y a métodos de uso de dichos compuestos, sales y composiciones para el tratamiento del crecimiento celular anormal, incluido el cáncer, en un sujeto. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Derivados de imidazo[4,5-C]piridina como agonistas de receptores tipo toll

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Los receptores tipo toll (TLR) son una familia de proteínas transmembrana que reconocen moléculas conservadas estructuralmente que derivan de y que son únicas para patógenos, denominados patrones moleculares asociados a patógenos (PAMPS). Como tales, los TLR funcionan en el sistema inmunitario de mamíferos como sensores de primera línea de patrones moleculares asociados a patógenos, detectando así la presencia de patógenos invasores (Takeuchi y Akira 2010 Cell 140:805-820). El acoplamiento de TLR a células inmunitarias centinelas produce la biosíntesis de citocinas seleccionadas (por ejemplo, interferones tipo I), inducción de moléculas coestimuladoras y capacidad de presentación de antígenos aumentada. Estos son mecanismos moleculares importantes que activan respuestas inmunitarias innatas y adaptivas. En consecuencia, los agonistas y antagonistas de TLR son útiles en la modulación de respuestas inmunitarias. Los agonistas de TRL se usan, en general, para estimular respuestas inmunitarias, mientras que los antagonistas de TRL se usan, en general, para inhibir respuestas inmunitarias (Gosu et al 2012. Molecules 17:13503-13529).

El genoma humano contiene 10 TLR conocidos, de los cuales TLR3, TLR7, TLR8 y TLR9 reconocen ácidos nucleicos y sus productos de degradación. La distribución de TLR7, TLR8 y TLR9 está restringida a los compartimentos endosomales de células y estos se expresan, preferentemente, en células del sistema inmunitario. En la configuración de receptores diméricos activados, TLR7 y TLR8 reconocen ARN monocatenario en un sitio de fijación al ligando y los productos de degradación de ribonucleósidos guanosina y uridina, respectivamente, (así como Iigandos de moléculas pequeñas con motivos estructurales relacionados) en un segundo sitio de fijación al ligando (Zhang et al 2016 Immunity 45(4);737-748: Tanji et al 2015 Nat Struct Mol Biol 22: 109-115).

Se identificaron algunos agonistas de TLR7 o TLR8 de moléculas pequeñas. Esos agonistas se pueden agrupar en moléculas tipo purina, tales como 7-tia-8-oxoguanosina (TOG, isatoribina) o los compuestos a base de imidazoquinolina tales como imiquimod. Imiquimod es, hasta el momento, el único agonista de TLR7 aprobado, comercializado como una crema al 5 % (Aldara). Este genera aproximadamente el 80 % de las depuraciones de 5 años de carcinomas de células basales superficiales, que es el tipo de cáncer más común a nivel mundial, demostrando así la importancia de agonistas de TLR7 en inmunoterapia contra el cáncer. La expresión funcional de TLR7 parece estar restringida a células inmunitarias específicas. El acoplamiento de TLR7 a células dendríticas plasmacitoides genera la inducción de interferón a/p, que cumple funciones esenciales en el control de la respuesta inmunitaria adaptativa (Bao y Liu 2013 Protein Cell 4:40-5).

El acoplamiento de TLR8 a células dendríticas mieloides, monocitos y células dendríticas derivadas de monocitos induce un perfil de citocina proinflamatoria prominente, caracterizado por la producción aumentada de factor de necrosis tumoral a, interleucina-12, y IL-18 (Eigenbrod et al J Immunol, 2015, 195,1092-1099).

También se investigaron los agonistas de moléculas pequeñas de TRL para su uso como adyuvantes de vacunas (Dowling,ImmunoHorizons2018, 2(6) 185-197).

Por lo tanto, prácticamente todos los tipos principales de células monocíticas y dendríticas se pueden activar por agonistas de TLR7 y TLR8 para convertirse en células que presentan antígenos altamente eficaces, promoviendo así una respuesta inmunitaria innata y adaptativa eficaz. La mayoría de los tipos de células que presentan antígenos expresan solo uno de estos dos receptores, en consecuencia las moléculas pequeñas con actividad agonista potente contra los receptores TLR7 y TLR8 son adyuvantes inmunitarios potencialmente más eficaces que los agonistas TLR7 solos.

Por lo tanto, un agonista de moléculas pequeñas de TLR7/TLR8 (TLR7/8) con bioactividad dual podría proporcionar un beneficio adicional sobre un agonista de TLR7 más selectivo y generaría respuestas inmunitarias innatas en un rango más amplio de células que presentan antígenos y otros tipos de células inmunitarias clave, incluidas las células dendríticas mieloides y plasmacitoides, monocitos y linfocitos B (van Haren et al 2016 J Immunol 197:4413-4424; Ganapathi et al 2015 Plos One 10(8).e0134640). Dichos agonistas de TLR7/8 duales potentes también pueden ser eficaces para estimular respuestas antitumorales eficaces en cáncer (Singh et al 2014 J. Immunol 1934722-4731: Sabado et al 2015 Cancer Immunol Res 3278-287, Spinetti et al 2016 Oncoimmunol 9;5(11):e1230578: Patil et al 2016 Mini Rev Med Chem 16:309-322).

A pesar del éxito de Imiquimod (Aldera) en el tratamiento de carcinoma de células basales superficial, no solo aún existe la necesidad de agonistas de TLR7 más potentes, sino también agonistas de TLR7/8 potentes y equilibrados para expandir las opciones de tratamiento para pacientes para varios tipos de cáncer. Estas opciones de tratamiento podrían ser administraciones locales que administran el fármaco directamente al tumor, a la vez que limitan los efectos secundarios sistémicos. De manera alternativa, los agonistas de TLR7 o agonistas de TLR7/8 administrados de manera sistémica tendrían la ventaja de poder alcanzar tumores que son difíciles de administrar así como tumores múltiples, a través de la circulación sistémica.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN

La presente invención proporciona, en parte, compuestos de la Fórmula (I), incluidas las Fórmulas (la) y (Ib), conjuntamente, un compuesto de la invención, o una sal de estos aceptables desde el punto de vista farmacéutico. Estos compuestos activan el TLR7 humano (hTLR7) y también activan el TLR8 humano (hTLR8), afectando así las funciones biológicas. En algunas formas de realización, la invención proporciona compuestos que son agonistas duales que son selectivos para TLR7 y TLR8 (agonistas de TLR7/8). En otra forma de realización, la invención proporciona compuestos que son agonistas que son selectivos para TLR7. Otra forma de realización proporciona composiciones farmacéuticas y medicamentos que comprenden los compuestos de la invención o una sal de estos aceptable desde el punto de vista farmacéutico, solos o en combinación con agentes terapéuticos antineoplásicos adicionales.

La presente invención también proporciona, en parte, procedimientos para preparar los compuestos, sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico y composiciones de la invención, y procedimientos de uso de estos, solos o en combinación con agentes terapéuticos antineoplásicos adicionales.

En un aspecto, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (I):

o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, donde

R1 y R2 son, independientemente, C1-3 alquilo; o

R1 y R2se unen para formar un anillo carbocíclico de 5 a 7 miembros, donde dicho anillo carbocíclico puede ser saturado o insaturado;

R3 es

R4 es alquilo C1-6, o (CH2)nO(CH2)mCH3, donde alquilo C1-6 o cualquier carbono del grupo (CH2)nO(CH2)mCH3 se sustituye con 0 a 3 halógenos, como lo permita la valencia;

R5 es C1-3 alquilo u OC1-3 alquilo, donde C1-3 alquilo se sustituye con 0 a 3 F;

R6 es H, o C1-3 alquilo, donde C1-3 alquilo se sustituye con 0 a 3 F;

m es 0 a 2 ; y

n es 1 a 3.

En otro aspecto, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención, de acuerdo con cualquiera de las fórmulas descritas en la presente, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, y un portador o excipiente aceptables desde el punto de vista farmacéutico. En algunas formas de realización, la composición farmacéutica comprende dos o más portadores y/o excipientes aceptables desde el punto de vista farmacéutico.

En otro aspecto, la invención también proporciona compuestos para uso en procedimientos terapéuticos. En otro aspecto, la invención proporciona compuestos y sus sales farmacéuticamente aceptables para su uso en un procedimiento para el tratamiento del crecimiento celular anormal, en particular, cáncer, en un sujeto que lo necesita. Los compuestos de la invención se pueden administrar como agentes únicos, o se pueden administrar en combinación con otros agentes terapéuticos antineoplásicos, que incluyen agentes de referencia adecuados para el tipo de cáncer particular. Esto también incluye el uso de un compuesto de la invención, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, en la elaboración de un medicamento para tratar el crecimiento celular anormal, en particular, cáncer, en un sujeto que lo necesita.

En otro aspecto, la invención proporciona un compuesto de la invención, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, para usar como un medicamento, en particular, un medicamento para el tratamiento del crecimiento celular anormal, tal como cáncer.

Aun en otro aspecto, la invención proporciona el uso de un compuesto de la invención, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento del crecimiento celular anormal, tal como cáncer, en un sujeto.

En otro aspecto, la invención incluye dentro de su alcance las sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico de los compuestos de la invención. En consecuencia, la expresión “o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico” está implícita en la descripción de todos los compuestos descritos en la presente, a menos que se indique explícitamente lo contrario.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

Como se proporciona en la presente, la invención se refiere a un compuesto de la Fórmula (I) como se indicó anteriormente.

La presente invención se puede comprender con mayor facilidad por referencia a la siguiente descripción detallada de formas de realización adicionales de la invención y los Ejemplos incluidos en la presente. Cabe destacar que la terminología que se usa en la presente se proporciona con la finalidad de describir solamente formas de realización específicas y no pretende limitarlas. Además, cabe destacar que a menos que se defina específicamente en la presente, la terminología usada en la presente tiene el fin de darle su significado tradicional como se conoce en el estado de la técnica.

Como se usan en la presente, la forma singular “un”, “una” y “el/la” incluye las referencias en plural, a menos que se indique lo contrario. Por ejemplo, "un" sustituyente incluye uno o más sustituyentes. La expresión "alrededor de" significa tener un valor que se encuentra dentro de un estándar de error aceptado de la media, cuando es considerado por una persona del oficio de nivel medio.

Como se usa en la presente, el término "alquilo” significa un grupo hidrocarburo monovalente de cadena lineal o ramificada de la Fórmula -CnH(2n+1). Los ejemplos no limitativos incluyen metilo, etilo, propilo, butilo, 2-metilpropilo, 1,1 -dimetiletilo, pentilo y hexilo.

En algunos casos, la cantidad de átomos de carbono en un grupo hidrocarburo (por ejemplo, alquilo) se indica mediante el prefijo “Cx-Cy” o “Cx-y”, donde x es la cantidad mínima e y es la cantidad máxima de átomos de carbono en el grupo. Por ende, por ejemplo, “alquilo (C1-C6)” o “alquilo C W se refiere a un sustituyente alquilo que contiene de 1 a 6 átomos de carbono.

El término “halógeno”, como se usa en la presente, se refiere a fluoruro, cloruro, bromuro o yoduro.

El término “haloalquilo”, como se usa en la presente, se refiere a un grupo alquilo que se sustituye con al menos un sustituyente halógeno. Donde se reemplaza más de un átomo de hidrógeno con un átomo de halógeno, los halógenos pueden ser iguales o diferentes. Los ejemplos no limitativos incluyen fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo y 2,2,2-trifluoroetilo.

Como se usa en la presente, un “agente bioterapéutico” significa una molécula biológica, tal como un anticuerpo o una proteína de fusión, que bloquea la señalización de ligando / receptor en cualquier vía biológica que soporta el mantenimiento y/o crecimiento del tumor o inhibe la respuesta inmunitaria antitumoral.

Como se usa en la presente, un "agente quimioterapéutica" es un compuesto químico útil para el tratamiento del cáncer. Los agentes quimioterapéuticos útiles en los procedimientos de tratamiento de la presente invención incluyen agentes citoestáticos y/o citotóxicos. Los agentes quimioterapéuticos incluyen el agente mismo o cualquier sal, cocristal o solvato de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico. Los agentes quimioterapéuticos se describen de manera adicional en la presente.

Como se usa en la presente, los siguientes términos se usan de manera indistinta y se refieren a uno o más agentes terapéuticos, distintos de algún compuesto de la invención, que se usan o pueden usarse en el tratamiento del cáncer: “agente terapéutico antineoplásico adicional” o “agente quimioterapéutico adicional” o “agente terapéutico adicional”.

Un agente bioterapéutico y un agente quimioterapéutico son ejemplos de un agente terapéutico antineoplásico adicional.

Como se usa en la presente, un “agente citotóxico” se refiere a un agente que tiene un efecto citotóxico y/o citoestático en una célula y un “efecto citoestático” se refiere a la inhibición de la proliferación celular.

Como se usa en la presente, un “agente citoestático” se refiere a un agente que tiene un efecto citoestático en una célula, inhibiendo así el crecimiento y/o la expansión de un subconjunto específico de células (es decir, células tumorales).

Como se usa en la presente, un “agente inmunomodulador” se refiere a un agente que estimula la respuesta inmunitaria a través de la producción de citocinas y/o anticuerpos y/o la modulación de la función de linfocitos T, por lo que se inhibe o reduce el crecimiento de un subconjunto de células (es decir, células tumorales) directa o indirectamente al permitir otro agente para que sea más eficaz.

“Consiste esencialmente en", y sus variantes tales como "consisten esencialmente en” o "que consiste esencialmente en", como se usan en la memoria descriptiva y las reivindicaciones, indica la inclusión de cualquier elemento o grupo de elementos mencionado, y la inclusión opcional de otros elementos, de naturaleza similar o diferente que los elementos mencionados, que no cambian materialmente las propiedades básicas o novedosas del régimen, procedimiento, o composición de dosis específica. Como un ejemplo no limitativo, un agonista OX40 que consiste esencialmente en una secuencia de aminoácidos mencionada también puede incluir uno o más aminoácidos, inclusive sustituciones de uno o más residuos de aminoácidos, que no afectan de manera material las propiedades del compuesto de fijación.

Como se usa en la presente, una “dosis eficaz” o “cantidad eficaz” de un fármaco, compuesto o composición farmacéutica es una cantidad suficiente para afectar cualquiera de uno o más síntomas beneficiosos o deseados, que incluyen los síntomas bioquímicos, histológicos y/o conductuales de la enfermedad, sus complicaciones y fenotipos patológicos intermedios que se producen durante el desarrollo de la enfermedad. Para uso terapéutico, una "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a la cantidad de un compuesto administrado que aliviará, en cierto grado, uno o más de los síntomas del trastorno que se trata. En referencia al tratamiento del cáncer, una cantidad terapéuticamente eficaz se refiere a la cantidad que tiene el efecto de (1) reducir el tamaño del tumor, (2) inhibir (es decir, ralentizar en cierta medida, preferentemente, detener) la metástasis tumoral, (3) inhibir, en cierta medida, (es decir, ralentizar en cierta medida, preferentemente, detener) el crecimiento tumoral o la capacidad de invasión tumoral, (4) aliviar en cierta medida (preferentemente, eliminar) uno o más signos o síntomas asociados al cáncer, y/o (5) disminuir la dosis de otros medicamentos que se requieren para tratar la enfermedad, (6) mejorar el efecto de otros medicamentos, y/o (7) retrasar la progresión de la enfermedad en un paciente.

Una dosis eficaz se puede proporcionar en una o más administraciones. A los fines de la presente invención, una dosis eficaz de un fármaco, un compuesto o una composición farmacéutica es una cantidad suficiente para lograr el tratamiento profiláctico o terapéutico, ya sea directa o indirectamente. Como se sabe en el ámbito clínico, una dosis eficaz de fármaco, compuesto o composición farmacéutica se puede lograr o no junto con otro fármaco, compuesto o composición farmacéutica.

Una “composición farmacéutica" se refiere a una mezcla de uno o más de los compuestos de la invención, o una sal, un solvato, un hidrato o un profármaco de estos aceptable desde el punto de vista farmacéutico como ingrediente activo, y al menos un portador o excipiente aceptables desde el punto de vista farmacéutico. En algunas formas de realización, la composición farmacéutica comprende dos o más portadores y/o excipientes aceptables desde el punto de vista farmacéutico. En otras formas de realización, la composición farmacéutica también comprende al menos un agente terapéutico antineoplásico adicional.

En un aspecto, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, y un portador o excipiente aceptables desde el punto de vista farmacéutico. En algunas formas de realización, la composición farmacéutica comprende dos o más portadores y/o excipientes aceptables desde el punto de vista farmacéutico.

En algunas formas de realización, la composición farmacéutica también comprende al menos un agente terapéutico antineoplásico adicional. En algunas de estas formas de realización, la combinación proporciona un efecto aditivo, mayor que el de un aditivo o antineoplásico sinérgico.

“Tumor”, cuando se aplica a un sujeto al que se le diagnosticó, o el cual se sospecha que tiene un tipo de cáncer, se refiere a un neoplasma o masa tisular malignos o potencialmente malignos de cualquier tamaño, e incluye tumores primarios y neoplasmas secundarios. Un tumor sólido es un crecimiento anormal o masa tisular que por lo general no contiene quistes o áreas líquidas. Ejemplos de tumores sólidos son los sarcomas, carcinomas y linfomas. Las leucemias (tipos de cáncer de la sangre) por lo general no forman tumores sólidos (National Cancer Institute, Dictionary of Cancer Terms).

“Carga tumoral” se refiere a la cantidad total de material tumoral distribuido a lo largo del cuerpo. La carga tumoral se refiere a la cantidad total de células cancerosas o el tamaño total de los tumores, a lo largo del cuerpo, incluidos los ganglios linfáticos y la médula ósea. La carga tumoral se puede determinar mediante una variedad de procedimientos conocidos en el estado de la técnica, tal como el uso de calibradores, o mientras está dentro del cuerpo, usando técnicas de diagnóstico por imágenes, por ejemplo, ultrasonido, gammagrafía ósea, tomografía computada (TC), o barridos de imágenes por resonancia magnética (IRM).

La expresión “tamaño tumoral” se refiere al tamaño total del tumor que se puede medir como el largo y ancho de un tumor. El tamaño tumoral se puede determinar mediante una variedad de procedimientos conocidos en la técnica, tales como la medición de las dimensiones de los tumores al retirarlos del sujeto, por ejemplo, con calibradores, o dentro del cuerpo con técnicas de diagnóstico por imágenes, por ejemplo, gammagrafía ósea, ultrasonido, CR o IRM.

Como se usa en la presente, "sujeto" se refiere a un ser humano o un animal. Cuando el sujeto es un ser humano, el sujeto también se puede denominar “paciente”.

El término “tratar” o “que trata” un tipo de cáncer, como se usa en la presente, se refiere a administrar un compuesto de la presente invención a un sujeto que tiene cáncer, o está diagnosticado con cáncer, para lograr al menos un efecto terapéutico positivo, tal como, reducción de la cantidad de células cancerosas, reducción del tamaño tumoral, reducción de la tasa de infiltración de células cancerosas en órganos periféricos, o reducción de la tasa de metástasis tumoral o de crecimiento tumoral, reversión, alivio, inhibición del progreso, o prevención, del trastorno o afección a la cual se aplica el término, o uno o más síntomas de dicho trastorno o afección. Como se usa en la presente, el término "tratamiento", a menos que se indique lo contrario, se refiere al acto de tratar, tal como "tratar" se definió anteriormente. El término “tratar” también incluye el tratamiento de un sujeto con adyuvante o neoadyuvante.

A los fines de la presente invención, los resultados clínicos beneficios o deseados incluyen, entre otros, uno o más de los siguientes: reducción de la proliferación de (o destrucción) células neoplásicas o cancerosas; inhibición de la metástasis o células neoplásicas; reducción del tamaño de un tumor; remisión del cáncer; disminución de los síntomas que resultan del cáncer; aumento de la calidad de vida de aquellos que padecen cáncer; reducción de la dosis de otros medicamentos necesarios para tratar un cáncer; retraso de la progresión del cáncer; cura del cáncer; superación de uno o más mecanismos de resistencia del cáncer; y/o prolongación de la supervivencia de los pacientes que tienen cáncer. Se pueden medir efectos terapéuticos positivos en cáncer se puede de varias maneras (ver, por ejemplo, W. A. Weber, Assessing tumor response to therapy, J. Nucl. Med. 50 Suppl. 1:1S-10S (2009). Por ejemplo, con respecto a la inhibición del crecimiento tumoral (T/C), de acuerdo con las normas del Instituto Nacional del Cáncer (NCI), un T/C menor o igual a 42 % es el nivel mínimo de actividad antitumoral. Un T/C <10 % se considera un nivel alto de actividad antitumoral, con T/C (%) = mediana del volumen tumoral del tratado / mediana del volumen tumoral del control x 100.

En algunas formas de realización, el tratamiento que se logra mediante un compuesto de la invención se define por referencia a cualquiera de los siguientes: respuesta parcial (PR), respuesta completa (CR), respuesta general (o), supervivencia libre de progresión (PFS), supervivencia libre de enfermedad (DFS) y supervivencia general (OS). PFS, también denominado “tiempo hasta la progresión tumoral”, indica el período durante y después del tratamiento en el cual el cáncer no crece e incluye la cantidad de tiempo en que los pacientes han experimentado una CR o PR, así como la cantidad de tiempo en que los pacientes han experimentado una enfermedad estable (SD). DFS se refiere al período durante y después del tratamiento en el que el paciente permanece libre de la enfermedad. OS se refiere a una prolongación en la expectativa de vida en comparación con sujetos o pacientes sin tratamiento previo. En algunas formas de realización, la respuesta a una combinación de la invención es cualquiera de PR, CR, PFS, DFS, OR u OS que se evalúa usando los criterios de respuesta Criterios de evaluación de la respuesta en los tumores sólidos (RECIST) 1.1.

El término “aditivo” se usa para referirse a que el resultado de la combinación de dos compuestos, componentes o agentes diana no es mayor que la suma de cada compuesto, componente o agente diana individualmente.

Los términos “sinergia” o “sinérgico” se usan para referirse a que el resultado de la combinación de dos compuestos, componentes o agentes diana es mayor que la suma de cada compuesto, componente o agente diana individualmente. Esta mejora de la enfermedad, afección o trastorno en tratamiento es un efecto “sinérgico”. Una “cantidad sinérgica” es una cantidad de la combinación de los dos compuestos, componentes o agentes diana que resulta en un efecto sinérgico, “sinérgico” como se define en la presente.

Al determinar una interacción sinérgica entre uno o dos componentes, el rango óptimo para los rangos de dosis absoluta y efecto de cada componente para el efecto se debe medir de manera definitiva por la administración de los componentes en rangos de dosis y/o relaciones de dosis diferentes a pacientes que necesitan el tratamiento. Sin embargo, la observación de la sinergia en modelosin vitroo modelosin vivopuede predecir el efecto en seres humanos y otras especies y existen modelosin vitroo modelosin vivo,como se describen en la presente, para medir un efecto sinérgico. Los resultados de estos estudios también se pueden usar para predecir rangos de relación de concentración plasmática y dosis eficaz y las dosis absolutas y las concentraciones plasmáticas requeridas en seres humanos y otras especies, tal como mediante la aplicación de procedimientos farmacocinéticos y/o farmacodinámicos.

El régimen de tratamiento para un compuesto de la invención que es eficaz para tratar a un paciente con cáncer puede variar de acuerdo con factores, tales como el estado de la enfermedad, edad, y peso del paciente, y la capacidad del tratamiento para obtener una respuesta antineoplásica en el sujeto. Si bien una forma de realización de cualquiera de los aspectos de la invención puede no ser eficaz para lograr un efecto terapéutico positivo en todos los sujetos, debería lograrlo en una cantidad de sujetos estadísticamente significativa, como se determina mediante cualquier prueba estadística conocida en el estado de la técnica, tal como la prueba T Student, la prueba de chi2, la prueba U según Mann y Whitney, la prueba Kruskal-Wallis (prueba H), la prueba Jonckheere-Terpstra y la prueba Wilco on.

Las expresiones “régimen de tratamiento”, “protocolo de dosis” y “régimen de dosis” se usan de manera indistinta para referirse a la dosis e intervalo de administración de cada compuesto de la invención, solo o en combinación con otro agente terapéutico.

“Mejorar” significa una disminución o mejora de uno o más síntomas mediante el tratamiento con una combinación descrita en la presente, en comparación con la falta de administración de la combinación. “Mejorar” también incluye acortar o reducir la duración de un síntoma.

Como se usa en la presente, a menos que se indique lo contrario, "crecimiento celular anormal" se refiere al crecimiento celular que es independiente de los mecanismos reguladores normales (por ejemplo, pérdida de la inhibición por contacto). El crecimiento celular anormal puede ser benigno (no canceroso) o maligno (canceroso).

Los términos “cáncer” o “canceroso” se refieren a cualquier tumor o crecimiento maligno y/o invasivo causado por un crecimiento celular anormal. "Cáncer" incluye cáncer primario que se origina en un sitio específico del cuerpo, cáncer metastásico que se expande desde el lugar donde se originó a otras partes del cuerpo, una recidiva del cáncer original primario luego de una remisión, y un segundo cáncer primario que es un nuevo cáncer primario en un paciente con antecedentes de cáncer previo de un tipo diferente del segundo cáncer primario. "Cáncer" incluye tumores sólidos nombrados por el tipo de células que los forman, cáncer de sangre, médula ósea o sistema linfático. Los ejemplos de tumores sólidos incluyen sarcomas y carcinomas. Los tipos de cáncer de sangre incluyen leucemia, linfoma y mieloma. Los ejemplos adicionales de tipos de cáncer incluyen blastomas y queratosis actínica. “Cáncer” también incluye cáncer primario o metástasis de un sitio seleccionado del grupo que consiste en cavidad oral, sistema digestivo, sistema respiratorio, piel, mama, sistema genital, sistema urinario, sistema ocular, sistema nervioso, sistema endócrino, y linfoma.

A menos que se indique lo contrario, todas las referencias en la presente a los compuestos inventivos incluyen referencias a sales, solvatos, hidratos y complejos de estos, y a solvatos, hidratos y complejos de sales de estos, incluidos polimorfos, estereoisómeros, y versiones etiquetadas de manera isotópica de estos.

Los compuestos de la invención pueden existir en forma de sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico, tales como sales de adición ácida y sales de adición básica de los compuestos de una de las fórmulas que se proporcionan en la presente. Como se usa en la presente, la expresión “sal aceptable desde el punto de vista farmacéutico” se refiere a aquellas sales que retienen la eficacia y las propiedades biológicas del compuesto de origen. A menos que se indique lo contrario, la frase “sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico”, como se usa en la presente, incluye sales de grupos ácidos o básicos que pueden estar presentes en los compuestos de las fórmulas descritas en la presente.

Por ejemplo, los compuestos de la invención que son básicos en la naturaleza son capaces de formar una amplia variedad de sales con varios ácidos inorgánicos y orgánicos. Aunque tales sales deben ser aceptables desde el punto de vista farmacéutico para su administración a animales, en general, en la práctica, es conveniente aislar inicialmente el compuesto de la presente invención de la mezcla de reacción como una sal no aceptable desde el punto de vista farmacéutico para luego simplemente volver a convertirla en el compuesto de base libre mediante el tratamiento con un reactivo alcalino y, posteriormente, convertir la base libre en una sal de adición ácida aceptable desde el punto de vista farmacéutico. Las sales de adición ácida de los compuestos de base de la presente invención se pueden preparar tratando el compuesto de base con una cantidad sustancialmente equivalente del mineral o ácido orgánico seleccionado en un medio de solvente acuoso o en un solvente orgánico adecuado, tal como metanol o etanol. Después de la evaporación del solvente, se obtiene la sal sólida deseada. La sal ácida deseada también se puede precipitar de una solución de la base libre en un solvente orgánico mediante la adición de un mineral o ácido orgánico apropiado a la solución.

Los ácidos que se pueden usar para preparar sales de adición ácida aceptables desde el punto de vista farmacéutico de tales compuestos básicos de aquellos que forman sales de adición ácida no tóxica, es decir, sales que contienen aniones aceptables desde el punto de vista farmacológico, tales como las sales de clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, nitrato, sulfato, bisulfato, fosfato, fosfato ácido, isonicotinato, acetato, lactato, salicilato, citrato, citrato ácido, tartrato, pantotenato, bitartrato, ascorbato, succinato, maleato, gentisinato, fumarato, gluconato, glucuronato, sacarato, formiato, benzoato, glutamato, metansulfonato, etansulfonato, bencensulfonato, p-toluensulfonato y pamoato.

Los ejemplos de sales incluyen, entre otros, sales de acetato, acrilato, bencensulfonato, benzoato (tal como, clorobenzoato, metilbenzoato, dinitrobenzoato, hidroxibenzoato y metoxibenzoato), bicarbonato, bisulfato, bisulfito, bitartrato, borato, bromuro, butin 1,4 dioato, edetato de calcio, camsilato, carbonato, cloruro, caproato, caprilato, clavulanato, citrato, decanoato, diclorhidrato, dihidrogenofosfato, edetato, edisliato, estolato, esilato, etilsuccinato, formiato, fumarato, gluceptato, gluconato, glutamato, glucolato, glucolilarsanilato, heptanoato, hexin 1,6 dioato, hexilresorcinato, hidrabamina, bromhidrato, clorhidrato, y hidroxibutirato, yoduro, isobutirato, isotionato, lactato, lactobionato, laurato, malato, maleato, malonato, mandelato, mesilato, metafosfato, metansulfonato, metilsulfato, monohidrogenofosfato, mucato, napsilato, naftalen 1 sulfonato, naftalen 2 sulfonato, nitrato, oleato, oxalato, pamoato (embonato), palmitato, pantotenato, fenilacetatos, fenilbutirato, fenilpropionato, ftalato, fosfato/difosfato, poligalacturonato, propansulfonato, propionato, propiolato, pirofosfato, pirosulfato, salicilato, estearato, subacetato, suberato, succinato, sulfato, sulfonato, sulfito, tanato, tartrato, teoclato, tosilato y valerato.

Los ejemplos ilustrativos de sales adecuadas incluyen sales orgánicas derivadas de aminoácidos, tales como glicina y arginina, amoníaco, aminas primarias, secundarias y terciarias y aminas cíclicas, tales como piperidina, morfolina y piperazina, y sales inorgánicas derivadas de sodio, calcio, potasio, magnesio, manganeso, hierro, cobre, zinc, aluminio y litio.

Los compuestos de la invención que incluyen una porción básica, tal como un grupo amino, pueden formar sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico con varios aminoácidos, además de los ácidos antes mencionados.

De manera alternativa, aquellos compuestos útiles que son ácidos en la naturaleza puede ser capaces de formar sales básicas con distintos cationes aceptables desde el punto de vista farmacológico. Los ejemplos de tales sales incluyen las sales de metales alcalinos o metales alcalinotérreos y, en particular, las sales de sodio y potasio. Estas sales se preparan mediante técnicas convencionales. Las bases químicas que se usan como reactivos para preparar las sales básicas aceptables desde el punto de vista farmacéutico de la presente invención son aquellas que forman sales básicas no tóxicas con los compuestos ácidos en la presente. Estas sales se pueden preparar mediante cualquier procedimiento adecuado, por ejemplo, el tratamiento del ácido libre con una base orgánica o inorgánica, tal como una amina (primaria, secundaria o terciara), un hidróxido de metal alcalino, un hidróxido de metal alcalinotérreo o similares. Estas sales también se pueden preparar al tratar los compuestos ácidos correspondientes con una solución acuosa que contiene los cationes aceptables desde el punto de vista farmacéutico deseados, y luego al evaporar la solución resultante hasta secarse, preferentemente a presión reducida. En forma alternativa, también se pueden preparar mezclando soluciones de alcanoles inferiores de los compuestos ácidos con el alcóxido de metal alcalino deseado, y con la posterior evaporación de la solución resultante hasta secarse, de la misma manera que antes. En ambos casos, las cantidades estequiométricas de reactivos se emplean, preferentemente, con el fin de garantizar que se complete la reacción y que se obtengan rendimientos máximos del producto final deseado.

Las bases químicas que se pueden usar como reactivos para preparar sales básicas aceptables desde el punto de vista farmacéutico de los compuestos de la invención que son ácidas en la naturaleza son aquellas que forman sales básicas no tóxicas con tales compuestos. Dichas sales básicas no tóxicas incluyen, entre otras, aquellas derivadas de tales cationes aceptables desde el punto de vista farmacológico, tales como cationes de metales alcalinos (por ejemplo, potasio y sodio) y cationes de metales alcalinotérreos (por ejemplo, calcio y magnesio), amonio o sales de adición de amina hidrosolubles tales como N metilglucamina (meglumina), y el alcanolamonio menor y otras sales básicas de aminas orgánicas aceptables desde el punto de vista farmacéutico.

También se pueden formar hemisales de ácidos y bases, por ejemplo, sales de hemisulfato y hemicalcio.

Para obtener una reseña de sales adecuadas, ver Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, de Stahl y Wermuth (Wiley VCH, 2002). Los procedimientos para fabricar sales aceptables desde el punto de vista farmacéutico de compuestos de la invención, y de interconvertir formas de base libre y sal, son conocidos para la persona del oficio de nivel medio.

Las sales de la presente invención se pueden preparar de acuerdo con los procedimientos conocidos por las personas del oficio de nivel medio. Una sal aceptable desde el punto de vista farmacéutico de los compuestos inventivos se puede preparar fácilmente mezclando soluciones del compuesto y el ácido o base deseados, según corresponda. La sal puede precipitar de la solución y recolectarse por filtración o puede recuperarse por evaporación del solvente. El grado de ionización de la sal puede variar de totalmente ionizada a casi no ionizada.

Las personas del oficio de nivel medio comprenderán que los compuestos de la invención en forma de base libre que tienen una funcionalidad básica se pueden convertir en las sales de adición ácida mediante el tratamiento con un exceso estequiométrico del ácido adecuado. Las sales de adición ácida de los compuestos de la invención se pueden reconvertir a la base libre correspondiente al tratar con un exceso estequiométrico de una base adecuada, tal como carbonato de potasio o hidróxido de sodio, en general, en presencia de un solvente acuoso, y a una temperatura de entre alrededor de 0 °C y 100 °C. La forma de base libre se puede aislar mediante medios convencionales, tal como extracción con un solvente orgánico. Además, las sales de adición ácida de los compuestos de la invención se pueden intercambiar aprovechando la solubilidad diferencial de las sales, la volatilidad o la acidez de los ácidos, o mediante el tratamiento con la resina de intercambio de iones cargada adecuadamente. Por ejemplo, el intercambio puede verse afectado por la reacción de una sal de los compuestos de la invención con un leve exceso estequiométrico de un ácido de un pK menor que el compuesto ácido de la sal de inicio. En general, esta conversión se lleva a cabo a una temperatura de alrededor de 0 °C al punto de ebullición del solvente que se usa como medio para el procedimiento. Es posible lograr intercambios similares con sales de adición básica, en general, empleando la forma de base libre.

Los compuestos de la invención pueden existir en forma no solvatada y solvatada. Cuando el solvente o el agua se fijan estrechamente, el complejo tiene una estequiometría bien definida que es independiente de la humedad. Sin embargo, cuando el solvente o el agua se fijan débilmente, como en solvatos de canales y compuestos higroscópicos, el contenido de agua/solvente dependerá de la humedad y de las condiciones de secado. En estos casos, la norma será la no estequiometría. El término 'solvato' se usa en la presente para describir un complejo molecular que comprende el compuesto de la invención y una o más moléculas de solvente aceptables desde el punto de vista farmacéutico, por ejemplo, etanol. El término "hidrato" se usa cuando el solvente es agua. Los solvatos aceptables desde el punto de vista farmacéutico de acuerdo con la invención incluyen hidratos y solvatos donde el solvente de cristalización se puede sustituir isotópicamente, por ejemplo, D2O, d6-acetona, d6-DMSO.

Dentro del alcance de la invención también se incluyen complejos, tales como clatratos, complejos de inclusión de fármaco huésped, donde, a diferencia de los solvatos mencionados anteriormente, el fármaco y el huésped están presentes en cantidades estequiométricas o no estequiométricas. También se incluyen complejos del fármaco que contienen dos o más componentes orgánicos y/o inorgánicos, que pueden estar en cantidades estequiométricas o no estequiométricas. Los complejos resultantes pueden ser ionizados, parcialmente ionizados o no ionizados. Para obtener una reseña de dichos complejos, ver J Pharm Sci, 64 (8), 1269 1288 por Haleblian (agosto de 1975), cuya divulgación se incorpora en la presente por referencia en su totalidad.

Se describen profármacos de los compuestos de las fórmulas que se proporcionan en la presente. Por lo tanto, ciertos derivados de compuestos de la invención que, en sí, pueden no tener o tener poca actividad farmacéutica, se pueden convertir, al administrarse a un paciente, en compuestos inventivos, por ejemplo, mediante escisión hidrolítica. Esos derivados se denominan "profármacos". Se puede encontrar más información sobre el uso de profármacos en 'Pro drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14, ACS Symposium Series (T Higuchi y W Stella); 'Bioreversible Carriers in Drug Design', Pergamon Press, 1987 (ed. E B Roche, American Pharmaceutical Association), y Guarino, V.R; Stella, V.J.:Biotech Pharm. Aspects20075 (Pt2) 133 - 187.

Los profármacos se pueden producir, por ejemplo, al reemplazar las funcionalidades adecuadas que están presentes en los compuestos inventivos con determinadas porciones conocidas para las personas del oficio de nivel medio como “porciones pro” como se describen, por ejemplo, en "Design of Prodrugs" de H Bundgaard (Elsevier, 1985).

Algunos ejemplos no limitativos de profármacos incluyen:

(i) donde el compuesto contiene una funcionalidad del ácido carboxílico (COOH), un éster de este, por ejemplo, el reemplazo del hidrógeno con (C-i-C6)alquilo;

(ii) donde el compuesto contiene una funcionalidad del alcohol (OH), un éter de este, por ejemplo, el reemplazo del hidrógeno con (C1-C6)alcanoiloximetilo, o con un grupo éter de fosfato; y

(iii) donde el compuesto contiene una funcionalidad del amino primaria o secundaria (NH2 o NHR donde R t H), una amida de este, por ejemplo, el reemplazo de uno o ambos hidrógenos por un grupo lábil metabólicamente adecuado, tal como una amida, carbamato, urea, fosfonato, sulfonato, etc.

Se pueden hallar otros ejemplos de grupos de reemplazo de acuerdo con los ejemplos anteriores y ejemplos de otros tipos de profármaco en las referencias antes mencionadas.

Finalmente, determinados compuestos inventivos pueden, en sí, actuar como profármacos de otros de los compuestos inventivos.

También se describe metabolitos de los compuestos de las fórmulas descritas en la presente, es decir, los compuestos que se formanin vivoal administrarse el fármaco.

Los compuestos de las fórmulas que se proporcionan en la presente pueden tener átomos de carbono asimétricos. Los enlaces de los átomos de carbono de los compuestos de la invención se pueden representar en la presente usando una línea continua ( ----------), una cuña continua ( ) o cuña punteada ( .........). El uso de una línea continua para representar enlaces con átomos de carbono asimétricos tiene como fin indicar que están incluidos todos los estereoisómeros posibles (por ejemplo, enantiómeros específicos, mezclas racémicas, etc.) en ese átomo de carbono. El uso de una cuña continua o punteada para representar enlaces con átomos de carbono asimétricos tiene como fin indicar que solo se incluye el estereoisómero que se muestra. Es posible que los compuestos de la invención contengan más de un átomo de carbono asimétrico. En esos compuestos, el uso de una línea continua para representar enlaces con átomos de carbono asimétricos tiene como fin indicar que se incluyen todos los estereoisómeros posibles y el estereocentro unido. Por ejemplo, a menos que se indique lo contrario, los compuestos de la invención pueden existir como enantiómeros y diastereómeros o como racematos y mezclas de estos. El uso de una línea continua para representar enlaces con uno o más átomos de carbono asimétricos en un compuesto de la invención y el uso de una línea en forma de cuña continua o punteada para representar enlaces con otros átomos de carbono asimétricos en el mismo compuesto tiene como fin indicar la presencia de una mezcla de diastereómeros.

Los compuestos de la invención que tienen centros quirales pueden existir como estereoisómeros, tales como racematos, enantiómeros o diastereómeros.

Los estereoisómeros de los compuestos de las fórmulas en la presente pueden incluir los isómeros cis y trans, isómeros ópticos, tales como los enantiómeros (R) y (S), diastereómeros, isómeros geométricos, isómeros de rotación, atropisómeros, isómeros conformacionales y tautómeros de los compuestos de la invención, incluso los compuestos que muestran más de un tipo de isomerismo; y mezclas de estos (tales como racematos y pares diastereoméricos).

También se incluyen sales de adición ácida o sales de adición básica, donde el contraión es ópticamente activo, por ejemplo, d-lactato o l-lisina, o racémico, por ejemplo, dl-tartrato o dl-arginina.

Cuando se cristaliza un racemato, es posible que se produzcan dos tipos diferentes de cristales. El primer tipo es el compuesto racémico (racemato verdadero) mencionado anteriormente, donde se produce una forma homogénea de cristal que contiene ambos enantiómeros en cantidades equimolares. El segundo tipo es la mezcla racémica o conglomerado, donde se producen dos formas de cristal en cantidades equimolares, cada una de las cuales comprende un enantiómero simple.

Los compuestos de la invención pueden exhibir los fenómenos de tautomerismo e isomerismo estructural. Por ejemplo, los compuestos pueden existir en numerosas formas tautoméricas, incluso las formas enol e imina, las formas ceto y enamina y los isómeros geométricos y las mezclas de estos. Todas esas formas tautoméricas se incluyen en el alcance de los compuestos de la invención. Los tautómeros existen como mezclas de un conjunto tautomérico en solución. En forma sólida, generalmente predomina un tautómero. Si bien se puede describir un tautómero, la presente invención incluye todos los tautómeros de los compuestos de las fórmulas que se proporcionan.

Además, algunos de los compuestos de la invención pueden formar atropisómeros (por ejemplo, biarilos sustituidos). Los atropisómeros son estereoisómeros conformacionales que ocurren cuando se previene, o se reduce en gran parte, la rotación alrededor de un enlace simple en la molécula, como resultado de interacciones estéricas con otras partes de la molécula, y los sustituyentes en ambos extremos del enlace simple son asimétricos. La interconversión de atropisómeros es lo bastante lenta como para permitir la separación y el aislamiento en condiciones predeterminadas. La barrera de energía para la racemización térmica se puede determinar mediante la inhibición estérica de la rotación libre de uno o más enlaces que forman un eje quiral.

Si un compuesto de la invención contiene un grupo alquenilo o alquenileno, los isómeroscis/trans(o Z/E) geométricos son posibles. Los isómeroscis/transse pueden separar mediante técnicas convencionales conocidas por las personas del oficio de nivel medio, por ejemplo, cromatografía y cristalización fraccional.

Las técnicas convencionales para la preparación/el aislamiento de enantiómeros individuales incluyen la síntesis quiral de un precursor adecuado ópticamente puro o la resolución del racemato (o el racemato de una sal o derivado) mediante el uso, por ejemplo, de cromatografía de líquidos de alta presión quiral (HPLC) o cromatografía de fluido supercrítico (SFC).

De manera alternativa, el racemato (o un precursor racémico) se puede hacer reaccionar con un compuesto ópticamente activo adecuado, por ejemplo, un alcohol, o, en el caso de que el compuesto contenga una porción ácida o básica, un ácido o una base, tal como ácido tartárico o 1 -feniletilamina. La mezcla diastereomérica resultante se puede separar mediante cromatografía y/o cristalización fraccional, y uno o los dos diastereoisómeros se pueden convertir en los enantiómeros puros correspondientes por medios conocidos por las personas del oficio de nivel medio.

Los compuestos quirales de la invención (y precursores quirales de estos) se pueden obtener en forma enantioméricamente enriquecida usando cromatografía, en general HPLC, en una resina asimétrica con una fase móvil que consiste en un hidrocarburo, en general, heptano o hexano, que contiene de 0 a 50 % de isopropanol, en general de 2 a 20 %, y de 0 a 5 % de una alquilamina, en general, 0,1 % de dietilamina. La concentración del eluato produce la mezcla enriquecida.

Los conglomerados estereoisoméricos se pueden separar mediante técnicas convencionales conocidas por las personas del oficio del nivel medio; ver, por ejemplo, “Stereochemistry of Organic Compounds”, de E L Eliel (Wiley, Nueva York, 1994), cuya divulgación se incorpora en la presente por referencia en su totalidad.

La pureza enantiomérica de los compuestos descritos en la presente se puede describir en cuanto a los excesos enantiómericos (ee), que indican el grado en el cual una muestra contiene mayor cantidad de enantiómeros en comparación con la otra. Una mezcla racémica tiene un ee de 0 %, mientras que un solo enantiómero completamente puro tiene un ee de 100 %. De manera similar, la pureza diastereomérica se puede describir en cuanto a los excesos diasterioméricos (de).

La presente invención también incluye compuestos etiquetados de manera isotópica, que son idénticos a aquellos enumerados en una de las fórmulas que se proporcionan, excepto que uno o más átomos se reemplazan por un átomo que tiene una masa atómica o número másico diferente de la masa atómica o del número másico que se halla habitualmente en la naturaleza.

Por lo general, los compuestos de la invención etiquetados de manera isotópica se pueden preparar mediante técnicas convencionales conocidas por las personas del oficio de nivel medio o mediante procesos análogos a los que se describen en la presente, usando un reactivo adecuado etiquetado de manera isotópica en lugar de un reactivo no etiquetado.

Los ejemplos de isótopos que se pueden incorporar en compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, azufre, flúor y cloro, tales como, entre otros, 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 32P, 35S, 18F y 36Cl. Determinados compuestos etiquetados de manera isotópica de la invención, por ejemplo, aquellos en los que se incorporan isótopos radioactivos tales como 3H y 14C, son útiles en ensayos de distribución de tejidos de sustrato y/o fármaco. Los isótopos titulados, es decir, 3H, y del carbono 14, es decir, 14C, se prefieren particularmente por su sencilla preparación y detectabilidad. Además, la sustitución con isótopos más pesados, tales como deuterio, es decir, 2H, puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas que son el resultado de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, mayor semividain vivoo menos requisitos de dosificación y, por ello, se pueden preferir en algunas circunstancias. Los compuestos etiquetados de manera isotópica de la invención se pueden preparar, en general, llevando a cabo los procedimientos divulgados en los esquemas y/o en los siguientes Ejemplos y preparaciones más adelante, sustituyendo un reactivo etiquetado de manera no isotópica por un reactivo etiquetado de manera isotópica.

Los compuestos de la invención previstos para uso farmacéutico se pueden administrar como productos cristalinos o amorfos, o mezclas de estos. Por ejemplo, pueden obtenerse como tapones sólidos, polvos o películas mediante procedimientos tales como precipitación, cristalización, liofilización, secado por pulverización o secado evaporativo. Se puede usar secado por microondas o radiofrecuencia.

En otra forma de realización, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (Ia)

o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, donde

R1 y R2 son, independientemente, alquilo C1-2; o

R1 y R2se unen para formar un anillo carbocíclico de 5 a 7 miembros, donde dicho anillo carbocíclico puede ser saturado o insaturado;

R3 es

R4 es C3-5 alquilo, o (CH2)nO(CH2)mCH3;

R5 es alquilo C1-2;

m es 1; y

n es 1.

En otra forma de realización, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (la), o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, donde R1 y R2 son, independientemente, alquilo C1-2.

En otra forma de realización, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (Ia), o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, donde, R1 y R2 se unen para formar un anillo carbocíclico de 5 a 7 miembros, donde dicho anillo carbocíclico puede ser saturado o insaturado.

En otra forma de realización, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (II), o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, donde

R1 y R2se unen para formar un anillo carbocíclico de 5 a 7 miembros, donde dicho anillo carbocíclico puede ser saturado; y

R4 es (CH2)nO(CH2)mCH3.

En otra forma de realización, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (Ia), o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, donde el anillo carbocíclico es ciclopentilo.

En otra forma de realización, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (Ia), o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, donde el anillo carbocíclico es ciclohexilo.

En otra forma de realización, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (Ia), o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, donde

R1 y R2 se unen para formar un anillo carbocíclico de 5 a 7 miembros, donde dicho anillo carbocíclico puede ser insaturado; y

R4 es C3-5 alquilo.

En otra forma de realización, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (Ia), o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, donde el anillo carbocíclico es fenilo.

En otra forma de realización, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (Ib)

o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, donde

R1 y R2 son, independientemente, C1-3 alquilo; o

R1 y R2 se unen para formar un anillo carbocíclico de 5 a 7 miembros, donde dicho anillo carbocíclico puede ser saturado o insaturado;

R3 es

R4 es alquilo C1-6, o (CH2)nO(CH2)mCH3, donde dicho alquilo C1-6 o cualquier carbono del grupo (CH2)nO(CH2)mCH3 se sustituye con 0 a 3 halógenos, como lo permita la valencia, donde halógeno es F; R5 es C1-3 alquilo, u OC1-3 alquilo, donde C1-3 alquilo se sustituye con 0 a 3 F;

R6 es H, o C1-3 alquilo, donde C1-3 alquilo se sustituye con 0 a 3 F;

m es 0 a 2 ; y

n es 1 a 3.

En otra forma de realización, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (Ib), o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, donde

R1 y R2 son, independientemente, alquilo C1-2; o

R1 y R2se unen para formar un anillo carbocíclico de 5 a 7 miembros, donde dicho anillo carbocíclico puede ser saturado o insaturado;

R3 es

R5 es C1-3 alquilo, u OC1-3 alquilo, donde C1-3 alquilo se sustituye con 0 a 2 F; y

R6 es H.

En otra forma de realización, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (Ib), o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, donde R5 es alquilo C1-2.

En otra forma de realización, la invención proporciona un compuesto de las Fórmulas (I), (la), (Ib), o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, donde R4 es n-propilo, n-butilo, o n-pentilo.

En otra forma de realización, la invención proporciona un compuesto de las Fórmulas (I), (Ia), (Ib), o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, donde R4 es -CH2-O-CH2CH3.

En otra forma de realización, la invención proporciona un compuesto de las Fórmulas (I), (Ia), (Ib), o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, donde R5 es metilo o etilo.

En otra forma de realización, la invención proporciona un compuesto de las Fórmulas (I), (Ia), (Ib), o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, donde R6 es H.

Otra forma de realización de la invención es uno o más de cada Ejemplo descrito en la presente, e incluye, entre otros, los compuestos seleccionados de:

2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol;

2-((4-amino-2-(etoximetil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol;

2-((4-amino-2-(etoximetil)-7,8-dihidrociclopenta[b]imidazo[4,5-d]piridin-1(6H)-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol; 2- ((4-amino-2-(etoximetil)-6,7,8,9-tetrahidro-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol; 3- (4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)-2-(metoximetil)-2-metilpropan-1-ol;

(R) -3-(4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)-2-(metoximetil)-2-metilpropan-1-ol; (S) -3-(4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)-2-(metoximetil)-2-metilpropan-1-ol; 2-((4-amino-6,7-dimetil-2-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol;

2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-etilpropan-1,3-diol;

2-((4-amino-2-butil-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol;

2-((4-amino-2-butil-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol; y 2-((4-amino-2-pentil-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol;

o una sal de estos aceptable desde el punto de vista farmacéutico,

Otra forma de realización de la invención es uno o más de cada Ejemplo descrito en la presente, e incluye, entre otros, los compuestos seleccionados de:

2-((4-amino-2-butil-6,7,8,9-tetrahidro-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol;

2-((4-amino-2-butil-7,8-dihidrociclopenta[b]imidazo[4,5-d]piridin-1(6H)-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol;

2-((4-amino-2-etil-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol; y

2-((4-amino-2-propil-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol;

o una sal de estos aceptable desde el punto de vista farmacéutico,

Otra forma de realización de la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende los compuestos de Fórmula (I) y cualquier forma de realización de esta, o una sal de estos aceptable desde el punto de vista farmacéutico, y un portador o excipiente aceptables desde el punto de vista farmacéutico. Otra forma de realización de la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (I) y cualquier forma de realización de esta, o una sal de estos aceptable desde el punto de vista farmacéutico para uso en el procedimiento para el tratamiento del cáncer en un sujeto que lo necesita.

Los tipos de cáncer que se deben tratar incluyen carcinoma de células escamosas, carcinomas de células basales, mieloma, cáncer pulmonar de células pequeñas, cáncer pulmonar de células no pequeñas, glioma, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, leucemia mieloide aguda (AML), mieloma múltiple, cáncer (de tubo) gastrointestinal, cáncer renal, cáncer de ovario, cáncer de hígado, leucemia linfoblástica, leucemia linfocítica, cáncer colorrectal, cáncer de endometrio, cáncer de riñón, cáncer de próstata, cáncer de tiroides, melanoma, condrosarcoma, neuroblastoma, cáncer pancreático, glioblastoma multiforme, cáncer de cuello uterino, cáncer cerebral, cáncer de estómago, cáncer de útero, cáncer de vejiga, que incluye cáncer de vejiga invasivo no muscular, hepatoma, cáncer de mama y cáncer de cabeza y cuello.

Los ejemplos más particulares de tipos de cáncer que se deben tratar incluyen carcinomas de células basales, cáncer pulmonar de células pequeñas, cáncer pulmonar de células no pequeñas, linfoma no Hodgkin, cáncer de ovario, cáncer colorrectal, cáncer de riñón, cáncer de próstata, cáncer de tiroides, melanoma, cáncer pancreático, cáncer de vejiga (cáncer de vejiga invasivo no muscular), hepatoma, cáncer de mama y cáncer de cabeza y cuello.

Otra forma de realización se refiere al tratamiento de tipos de cáncer seleccionados de carcinomas de células basales, cáncer de ovario, melanoma, cáncer de vejiga invasivo no muscular, cáncer de mama, y cáncer de cabeza y cuello.

Otra forma de realización se refiere al tratamiento de melanoma, cáncer (de tubo) gastrointestinal, cáncer de mama, cáncer de ovario y cáncer de cabeza y cuello.

Otra forma de realización se refiere al tratamiento de tipos de cáncer de tubo gastrointestinal. Estos tipos de cáncer gastrointestinal incluyen cáncer de boca, esófago, estómago, sistema biliar, páncreas, intestino delgado, intestino grueso, recto y ano.

Otra forma de realización se refiere al tratamiento de cáncer de vejiga invasivo no muscular.

Otra forma de realización de la invención se refiere a los compuestos de la Fórmula (I) y cualquier forma de realización de esta, o una sal de estos aceptable desde el punto de vista farmacéutico, para usar en el tratamiento de cáncer en un sujeto que lo necesita.

Otra forma de realización de la invención se refiere a los compuestos de la Fórmula (I) y cualquier forma de realización de esta, o una sal de estos aceptable desde el punto de vista farmacéutico, para usar en el tratamiento de cáncer, donde dicho tratamiento comprende la administración de un agente terapéutico adicional.

En otro aspecto, se describe un procedimiento para inhibir la proliferación de células cancerosas en un sujeto, que comprende administrar al sujeto un compuesto de la invención, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, en una cantidad eficaz para inhibir la proliferación celular.

En otro aspecto, se describe un procedimiento para inhibir la capacidad de invasión de células cancerosas en un sujeto, que comprende administrar al sujeto un compuesto de la invención, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, en una cantidad eficaz para inhibir la capacidad de invasión celular.

En otro aspecto, se describe un procedimiento para inducir apoptosis en células cancerosas en un sujeto, que comprende administrar al sujeto un compuesto de la invención, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, en una cantidad eficaz para inducir la apoptosis.

En otro aspecto, se describe un procedimiento para inhibir la metástasis de células cancerosas en un sujeto, que comprende administrar al sujeto un compuesto de la invención, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, en una cantidad eficaz para inhibir la metástasis de células.

En otro aspecto, se describe un procedimiento para inhibir la angiogénesis en un sujeto, que comprende administrar al sujeto un compuesto de la invención, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, en una cantidad eficaz para inhibir la angiogénesis.

En otro aspecto, se describe un procedimiento para el tratamiento del cáncer en un sujeto que lo necesita, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de la invención, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico. Dicho procedimiento también incluye administrar el compuesto de la invención con al menos un agente terapéutico adicional.

También se describen procedimientos para prevenir una enfermedad infecciosa en un sujeto que lo necesita, que comprenden administrar una composición farmacéutica en una cantidad suficiente para prevenir una enfermedad infecciosa en dicho sujeto. Es decir, en algunas formas de realización, la presente descripción proporciona vacunas profilácticas. En algunas formas de realización, el sujeto mamífero está en riesgo de exponerse a un agente infeccioso. “Prevenir" una enfermedad infecciosa significa proteger a un sujeto del desarrollo de una enfermedad infecciosa. En algunas formas de realización, prevenir una enfermedad infecciosa también comprende proteger a un sujeto de una infección con un agente infeccioso (por ejemplo, proteger a un sujeto del desarrollo de una infección aguda o crónica). De manera adicional, la presente descripción proporciona procedimientos para mejorar un síntoma de una enfermedad infecciosa en un sujeto mamífero que lo necesita, que comprenden administrar una composición farmacéutica en una cantidad suficiente para mejorar un síntoma de una enfermedad infecciosa en dicho sujeto. Es decir, en algunas formas de realización, la presente divulgación proporciona vacunas terapéuticas. En algunas formas de realización, el sujeto está infectado de manera aguda o crónica con un agente infeccioso. La enfermedad infecciosa puede ser una enfermedad causada por virus (por ejemplo, virus de hepatitis, herpes o papiloma humano), bacterias, hongos o parásitos. En algunas formas de realización, la composición farmacéutica también comprende un antígeno viral, bacteriano, fúngico o parasitario. "Mejorar” un síntoma de una enfermedad infecciosa significa mejorar un síntoma, preferentemente, disminuir la extensión de la enfermedad.

Procedimientos y usos terapéuticos

La descripción también proporciona procedimientos y usos terapéuticos que comprenden la administración de los compuestos de la invención, o sales de estos aceptables desde el punto de vista farmacéutico, solos o en combinación con otros agentes terapéuticos o agentes paliativos.

En un aspecto, la descripción proporciona un procedimiento para el tratamiento del crecimiento celular anormal en un sujeto que lo necesita, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la invención, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico.

En otro aspecto, se describe un procedimiento para el tratamiento del crecimiento celular anormal en un sujeto que lo necesita, que comprende administrar al sujeto una cantidad de un compuesto de la invención, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, en combinación con una cantidad de un agente terapéutico adicional (por ejemplo, un agente terapéutico antineoplásico), cuyas cantidades son, en conjunto, eficaces para tratar el crecimiento celular anormal.

En otro aspecto, se describe un compuesto de la invención, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, para usar en el tratamiento del crecimiento celular anormal en un sujeto.

En otro aspecto, se describe el uso de un compuesto de la invención, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, para el tratamiento del crecimiento celular anormal en un sujeto.

En otro aspecto, la invención proporciona una composición farmacéutica para usar en el tratamiento del crecimiento celular anormal en un sujeto que lo necesita, cuya composición farmacéutica comprende un compuesto de la invención, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, y un portador o excipiente aceptables desde el punto de vista farmacéutico.

En otro aspecto, la invención proporciona un compuesto de la invención, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, para usar como un medicamento, en particular, un medicamento para el tratamiento del crecimiento celular anormal.

Aun en otro aspecto, la invención proporciona el uso de un compuesto de la invención, o una sal de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento del crecimiento celular anormal en un sujeto.

En formas de realización frecuentes de los procedimientos que se proporcionan en la presente, el crecimiento celular anormal es cáncer. Los compuestos de la invención se pueden administrar como agentes únicos, o se pueden administrar en combinación con otros agentes terapéuticos antineoplásicos, en particular, con agentes de referencia adecuados para el tipo de cáncer particular.

En algunas formas de realización, los procedimientos que se proporcionan dan como resultado uno o más de los siguientes efectos: (1) inhibición de la proliferación de células cancerosas; (2) inhibición de la capacidad de invasión de células cancerosas; (3) inducción de la apoptosis de células cancerosas; (4) inhibición de la metástasis de células cancerosas; (5) inhibición de la angiogénesis.

En algunas formas de realización, el compuesto de la invención se administra como tratamiento de primera línea. En otras formas de realización, el compuesto de la invención se administra como tratamiento de segunda línea (o posterior).

Forma de dosificación y regímenes

La administración de los compuestos de la invención se puede realizar mediante cualquier procedimiento que permita la administración de los compuestos al sitio de acción. Estos procedimientos incluyen la administración por vías orales, vías intraduodenales, inyección parenteral (lo que incluye intravenosa, subcutánea, intramuscular, intravascular o por infusión), tópica y rectal.

Los regímenes de dosis se pueden ajustar para proporcionar la respuesta óptima deseada. Por ejemplo, se puede administrar un solo bolo, se pueden administrar varias dosis divididas con el tiempo, o la dosis se puede reducir o aumentar proporcionalmente, según lo requiera la situación terapéutica. En especial, resulta conveniente formular composiciones parenterales en forma de dosis unitaria para facilitar la administración y la uniformidad de la dosis. Como se usa en la presente, la forma de dosis unitaria se refiere a unidades físicamente diferenciadas útiles como dosis unitarias para los sujetos mamíferos que deben tratarse; cada unidad contiene una cantidad predeterminada de compuesto activo, calculada para producir el efecto terapéutico deseado junto con el portador farmacéutico requerido. La especificación de las formas de dosis unitaria de la invención está determinada y depende directamente de (a) las características únicas del agente quimioterapéutico y el efecto terapéutico o profiláctico particular que se desee lograr, y (b) las limitaciones inherentes en el estado de la técnica para formar un compuesto activo para el tratamiento de la sensibilidad en individuos.

De este modo, la persona del oficio de nivel medio tendrá en cuenta, en función de la divulgación proporcionada en la presente, que la dosis y el régimen de dosificación se ajustan de acuerdo con los procedimientos conocidos en el ámbito terapéutico. Es decir, se puede determinar con facilidad la dosis máxima tolerable, la cantidad eficaz que proporciona un beneficio terapéutico detectable a un paciente y los requisitos temporales para administrar cada agente a fin de proporcionar un beneficio terapéutico detectable al paciente. En consecuencia, si bien ciertas dosis y regímenes de administración se ejemplifican en la presente, estos ejemplos no limitan de modo alguno la dosis y el régimen de administración que se pueden proporcionar a un paciente al poner en práctica la presente invención.

Debe tenerse en cuenta que los valores de la dosificación pueden variar según el tipo y la gravedad de la afección que se desee aliviar y pueden incluir dosis únicas o múltiples. También debe entenderse que, para cualquier sujeto particular, los regímenes de dosis específicos se deben ajustar en el tiempo de acuerdo con la necesidad del individuo y el criterio profesional de la persona que administra o supervisa la administración de las composiciones, y que los rangos de dosis que se indican en la presente son únicamente de ejemplo y no pretenden limitar el alcance o la práctica de la composición que se reivindica. Por ejemplo, las dosis se pueden ajustar según los parámetros farmacocinéticos o farmacodinámicos, que pueden incluir efectos clínicos, tales como efectos tóxicos y/o valores de laboratorio. De este modo, la presente invención abarca el aumento de la dosis intrapaciente según lo determine una persona del oficio de nivel medio. La determinación de dosis adecuadas y de regímenes de administración del agente quimioterapéutico es conocida en el ámbito pertinente, y se entiende que la persona del oficio de nivel medio podrá efectuarla una vez proporcionadas las explicaciones de la presente.

La cantidad de compuesto de la invención administrado dependerá del sujeto que está en tratamiento, la gravedad del trastorno o de la afección, la velocidad de administración, la eliminación del compuesto y el criterio del médico tratante. Sin embargo, una dosis eficaz está en el rango de alrededor de 0,001 a alrededor de 100 mg por kg de peso corporal por día, preferentemente, alrededor de 1 a alrededor de 35 mg/kg/día, en dosis únicas o divididas. Para un ser humano de 70 kg, esto representa alrededor de 0,05 a alrededor de 7 g/día, preferentemente, alrededor de 0,1 a alrededor de 2,5 g/día. En algunos casos, los niveles de dosis que están por debajo del límite más bajo del rango mencionado anteriormente pueden ser más adecuados, mientras que, en otros casos, se pueden emplear dosis aún más altas sin que esto resulte en efectos secundarios dañinos, siempre que dichas dosis más altas primero se dividan en varias dosis pequeñas para administrarlas durante el día.

Formulaciones y vías de administración

Como se usa en la presente, un "portador aceptable desde el punto de vista farmacéutico" se refiere a un portador o diluyente que no produce irritación significativa a un organismo y que no anula las propiedades y la actividad biológicas del compuesto administrado.

El portador aceptable desde el punto de vista farmacéutico puede comprender cualquier portador o excipiente convencional aceptable desde el punto de vista farmacéutico. La elección de portador y/o excipiente dependerá, en gran medida, de factores tales como el modo de administración particular, el efecto del portador o excipiente en la solubilidad y estabilidad, y la naturaleza de la forma de dosificación.

Los portadores farmacéuticos adecuados incluyen diluyentes inertes o agentes de relleno, agua y diversos solventes orgánicos (tales como hidratos y solvatos). Si resulta conveniente, las composiciones farmacéuticas pueden contener ingredientes adicionales, tales como saborizantes, aglutinantes, excipientes y similares. Por lo tanto, para la administración oral, los comprimidos que contienen varios excipientes, tales como ácido cítrico, se pueden usar junto con varios desintegrantes, tales como almidón, ácido algínico y ciertos silicatos complejos, y con agentes aglutinantes, tales como sacarosa, gelatina y acacia. Los ejemplos de excipientes incluyen, entre otros, carbonato de calcio, fosfato de calcio, diversos azúcares y tipos de almidón, derivados de celulosa, gelatina, aceites vegetales y polietilenglicoles. Asimismo, los agentes lubricantes, tales como estearato de magnesio, laurilsulfato de sodio y talco suelen ser útiles para elaborar comprimidos. Las composiciones sólidas de tipo similar también se pueden usar en cápsulas de gelatina blanda y dura. Los ejemplos no limitativos de materiales, por lo tanto, incluyen lactosa o azúcar de la leche y polietilenglicoles de alto peso molecular. Cuando se desean suspensiones o elíxires acuosos para administración oral, el compuesto activo que contienen se puede combinar con diversos agentes endulzantes o saborizantes, materias colorantes o tinturas y, de ser conveniente, emulgentes o agentes de suspensión, junto con diluyentes tales como agua, etanol, propilenglicol, glicerina o combinaciones de estos.

La composición farmacéutica puede estar, por ejemplo, en una forma adecuada para administración oral como un comprimido, una cápsula, una píldora, un polvo, formulaciones de liberación controlada, suspensión de solución, para inyección parenteral como una solución, suspensión o emulsión estéril, para administración tópica como una pomada o crema, o para administración rectal como un supositorio.

Los ejemplos de formas de administración parenteral incluyen soluciones o suspensiones de compuestos activos en soluciones acuosas estériles, por ejemplo, soluciones acuosas de dextrosa o propilenglicol. Si resulta conveniente, tales formas de dosis pueden amortiguarse de manera adecuada.

La composición farmacéutica puede ser en formas de dosis unitarias adecuadas para la administración única de dosis precisas.

Las composiciones farmacéuticas adecuadas para la administración de los compuestos de la invención y los procedimientos para su preparación serán evidentes para las personas del oficio de nivel medio. Las composiciones y los procedimientos para su preparación se pueden encontrar, por ejemplo, en 'Remington's Pharmaceutical Sciences', 19.° edición (Mack Publishing Company, 1995), cuya divulgación se incorpora a la presente en su totalidad a modo de referencia.

Los compuestos de la invención se pueden administrar por vía oral. La administración oral puede incluir tragar, de modo que el compuesto ingresa en el tubo gastrointestinal o se puede usar la administración bucal o sublingual, mediante las cuales el compuesto ingresa en el torrente sanguíneo directamente desde la boca.

Las formulaciones adecuadas para la administración oral incluyen formulaciones sólidas tales como comprimidos, cápsulas que contienen partículas, líquidos, o polvos, pastillas (incluidas pastillas rellenas de líquido), caramelos masticables, multi y nanopartículas, geles, solución sólida, liposoma, películas (incluidas películas mucoadhesivas), óvulos, pulverizadores y formulaciones líquidas.

Las formulaciones líquidas incluyen suspensiones, soluciones, jarabes y elíxires. Las formulaciones se pueden usar como agentes de relleno en cápsulas blandas o duras y, en general, incluyen un portador, por ejemplo, agua, etanol, polietilenglicol, propilenglicol, metilcelulosa o un aceite adecuado, y uno o más agentes emulgentes y/o agentes de suspensión. Las formulaciones líquidas también se pueden preparar mediante la reconstitución de un sólido, por ejemplo, de un sachet.

Los compuestos de la invención también se pueden usar en formas de dosis de rápida disolución y fácil desintegración, tales como aquellas que se describen en Expert Opinion in Therapeutic Patents, 11 (6), 981 986 por Liang y Chen (2001), cuya divulgación se incorpora en la presente por referencia en su totalidad.

En las formas de dosis en comprimidos, según la dosis, el fármaco puede comprender de 1 % en peso a 80 % en peso de la forma de dosis, más comúnmente de 5 % en peso a 60 % en peso de la forma de dosis. Además de la droga, los comprimidos, en general, contienen un desintegrante. Los ejemplos de desintegrantes incluyen glicolato de almidón sódico, carboximetilcelulosa de sodio, carboximetilcelulosa de calcio, croscarmelosa de sodio, crospovidona, polivinilpirrolidona, metilcelulosa, celulosa microcristalina, hidroxipropilcelulosa sustituida con alquilo inferior, almidón, almidón pregelatinizado y alginato de sodio. En general, el desintegrante comprenderá de 1 % en peso a 25 % en peso, preferentemente de 5 % en peso a 20 % en peso de la forma de dosis.

Los aglutinantes, en general, se usan para impartir características cohesivas a una formulación en comprimidos. Los aglutinantes adecuados incluyen celulosa microcristalina, gelatina, azúcares, polietilenglicol, gomas naturales y sintéticas, polivinilpirrolidona, almidón pregelatinizado, hidroxipropilcelulosa e hidroxipropilmetilcelulosa. Los comprimidos también pueden contener diluyentes, tales como lactosa (monohidrato, monohidrato secado por pulverización, anhidro y similares), manitol, xilitol, dextrosa, sacarosa, sorbitol, celulosa microcristalina, almidón y fosfato de calcio dibásico dihidrato.

Los comprimidos también pueden incluir, de manera opcional, agentes tensioactivos, tales como lauril sulfato de sodio y polisorbato 80, y agentes deslizantes, tales como dióxido de silicio y talco. Si estos están presentes, los agentes tensioactivos lo están, en general, en cantidades de 0,2 % en peso a 5 % en peso del comprimido, y los agentes deslizantes, en general, de 0,2 % en peso a 1 % en peso del comprimido.

Los comprimidos también contienen, en general, lubricantes tales como estearato de magnesio, estearato de calcio, estearato de zinc, estearil fumarato de sodio, y mezclas de estearato de magnesio con lauril sulfato de sodio. Los lubricantes, en general, están presentes en cantidades de 0,25% en peso a 10% en peso, preferentemente, de 0,5 % en peso a 3 % en peso del comprimido.

Otros ingredientes convencionales incluyen antioxidantes, colorantes, agentes saborizantes, conservantes y agentes enmascaradores del sabor.

Los comprimidos de ejemplo contienen hasta alrededor de 80 % en peso de fármaco, de alrededor de 10 % en peso a alrededor de 90 % en peso de aglutinante, de alrededor de 0 % en peso a alrededor de 85 % en peso de diluyente, de alrededor de 2 % en peso a alrededor de 10 % en peso de desintegrante, y de alrededor de 0,25 % en peso a alrededor de 10 % en peso de lubricante.

Las mezclas de comprimidos se pueden comprimir directamente o con rodillo para formar comprimidos. Las mezclas de comprimidos o porciones de mezclas, de manera alternativa, se pueden granular en húmedo, en seco o por fusión, solidificar por fusión, o extruir antes de formar comprimidos. La formulación final puede incluir una o más capas y puede estar recubierta o sin recubrir; o encapsulada.

La formulación de los comprimidos se discute con detalle en “Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1”, de H. Lieberman y L. Lachman, Marcel Dekker, N.Y., N.Y., 1980 (ISBN 08247 6918 X), cuya divulgación se incorpora en la presente por referencia en su totalidad.

Las formulaciones sólidas para la administración oral se pueden formular para que la liberación sea inmediata y/o modificada. Las formulaciones de liberación modificada incluyen liberación retardada, sostenida, pulsátil, controlada, dirigida y programada.

Las formulaciones de liberación modificada adecuadas se describen en la patente estadounidense No.

6.106.864. Los detalles de otras tecnologías de liberación adecuadas, tales como dispersiones de alta energía y partículas osmóticas y recubiertas, se pueden encontrar en Verma et al, Pharmaceutical Technology On line, 25(2), 114 (2001). El uso de goma de mascar para lograr la liberación controlada se describe en WO 00/35298. Las divulgaciones de estas referencias se incorporan a la presente en su totalidad por referencia.

Los compuestos de la invención también se pueden administrar directamente en el torrente sanguíneo, en músculos o en un órgano interno. Los medios adecuados para la administración parenteral incluyen las vías intravenosa, intraarterial, intraperitoneal, intratecal, intraventricular, intrauretral, intraesternal, intracraneal, intramuscular y subcutánea. Los dispositivos adecuados para la administración parenteral incluyen inyecciones con aguja (que incluyen microagujas), inyectores sin aguja y técnicas de infusión.

En general, las formulaciones parenterales son soluciones acuosas que pueden contener excipientes, tales como sales, hidratos de carbono y agentes amortiguadores (preferentemente, a un pH de 3 a 9), pero, para algunas aplicaciones, se pueden formular de manera más adecuada como una solución estéril no acuosa o en forma seca para usar junto con un vehículo adecuado, tal como agua estéril libre de pirógeno.

La preparación de formulaciones parenterales en condiciones estériles, por ejemplo, mediante liofilización, se pueden alcanzar fácilmente mediante el uso de técnicas farmacéuticas estándares conocidas para las personas del oficio de nivel medio.

La solubilidad de los compuestos de la invención usados en la preparación de soluciones parenterales se puede incrementar mediante el uso de técnicas de formulación adecuadas, tales como la incorporación de agentes mejoradores de la solubilidad.

Las formulaciones para la administración parenteral se pueden formular para que la liberación sea inmediata y/o modificada. Las formulaciones de liberación modificada incluyen liberación retardada, sostenida, pulsátil, controlada, dirigida y programada. Por lo tanto, los compuestos de la invención se pueden formular como un líquido sólido, semisólido, o tixotrópico para la administración como un depósito implantado que proporciona la liberación modificada del compuesto activo. Los ejemplos de dichas formulaciones incluyenstentsrecubiertos de fármaco y microesferas de PGLA.

Los compuestos de la invención también se puede administrar de manera tópica a la piel o mucosa, es decir, por vía dérmica o transdérmica. Las formulaciones típicas para este fin incluyen geles, hidrogeles, lociones, soluciones, cremas, pomadas, polvos, recubrimientos, espumas, películas, parches de piel, obleas, implantes, esponjas, fibras, vendas y microemulsiones. También se pueden usar liposomas. Los portadores típicos incluyen alcohol, agua, aceite mineral, petrolato líquido, petrolato blanco, glicerina, polietilenglicol y propilenglicol. Se pueden incorporar mejoradores de la penetración; ver, por ejemplo, J Pharm Sci, 88 (10), 955 958 de Finnin y Morgan (octubre de 1999). Otros medios de administración tópica incluyen administración mediante electroporación, iontoforesis, fonoforesis, sonoforesis e inyección sin agujas o con microagujas (por ejemplo Powderject™, Bioject™, etc.). Las divulgaciones de estas referencias se incorporan a la presente en su totalidad por referencia.

Las formulaciones para la administración tópica se pueden formular para que la liberación sea inmediata y/o modificada. Las formulaciones de liberación modificada incluyen liberación retardada, sostenida, pulsátil, controlada, dirigida y programada.

Los compuestos de la invención también pueden administrarse en forma intranasal o por inhalación, en general, en forma de polvo seco (ya sea solo, como una mezcla, por ejemplo, en una mezcla seca con lactosa, o como una partícula con componentes mezclados, por ejemplo, mezclados con fosfolípidos, tales como fosfatidilcolina) de un inhalador de polvo seco o como un pulverizador de aerosol de un recipiente presurizado, bomba, pulverizador, atomizador (preferentemente, un atomizador que usa la electrohidrodinámica para producir una fina bruma) o nebulizador, con o sin el uso de un propulsor adecuado, tal como 1,1,1,2-tetrafluoroetano o 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropano. Para el uso intranasal, el polvo puede incluir un agente bioadhesivo, por ejemplo, quitosano o ciclodextrina.

El recipiente presurizado, bomba, pulverizador, atomizador, o nebulizador contiene una solución o suspensión de los compuestos de la invención que comprende, por ejemplo, etanol, etanol acuoso, o un agente alternativo adecuado para dispersar, solubilizar, o extender la liberación del activo, un propulsor como solvente y un tensioactivo opcional, tal como trioleato de sorbitán, ácido oleico, o un ácido oligoláctico.

Antes de usar en un polvo seco o formulación de suspensión, el producto farmacológico se microniza hasta tamaño adecuado para la administración mediante inhalación (en general, menos de 5 micrones). Esto se puede lograr mediante cualquier procedimiento de desmenuzamiento, tal como molino de chorro en espiral, molino de chorro de lecho fluidizado, procesamiento de fluido supercrítico para formar nanopartículas, homogeneización de alta presión, o secado por pulverización.

Las cápsulas (hechas, por ejemplo, de gelatina o HPMC), ampollas y cartuchos para usar en un inhalador o insuflador se pueden formular para contener una mezcla de polvo del compuesto de la invención, una base de polvo adecuada tal como lactosa o almidón y un modificador del rendimiento tal como l-leucina, manitol o estearato de magnesio. La lactosa puede ser anhidra o en forma del monohidrato, preferentemente, la última. Otros excipientes adecuados incluyen dextrano, glucosa, maltosa, sorbitol, xilitol, fructosa, sacarosa y trehalosa.

Una formulación de solución adecuada para usar en un atomizador que usa electrohidrodinámica para producir una fina bruma puede contener de 1|jg a 20 mg del compuesto de la invención por accionamiento y el volumen de accionamiento puede variar de 1 jl a 100jl. Una formulación típica incluye un compuesto de la invención, propilenglicol, agua estéril, etanol y cloruro de sodio. Los solventes alternativos que se pueden usar en lugar de propilenglicol incluyen glicerol y polietilenglicol.

Los sabores adecuados, tales como mentol y levomentol, o endulzantes, tales como sacarina o sacarina sódica, se pueden agregar a aquellas formulaciones de la invención previstas para la administración por inhalación/intranasal.

Las formulaciones para la administración por inhalación/intranasal se pueden formular para ser de liberación inmediata y/o modificada usando, por ejemplo, poli(ácido DL láctico coglicólico (PGLA). Las formulaciones de liberación modificada incluyen liberación retardada, sostenida, pulsátil, controlada, dirigida y programada.

En el caso de inhaladores de polvo seco y de aerosoles, la unidad de dosis se determina mediante una válvula que administra una cantidad medida. Las unidades de acuerdo con la invención, en general, se disponen para administrar una dosis medida o‘‘puff’que contiene una cantidad deseada del compuesto de la invención. La dosis diaria general se puede administrar en una dosis única o, más comúnmente, como dosis dividas a lo largo

del día.

Los compuestos de la invención se pueden administrar por vía rectal o vaginal, por ejemplo, en forma de supositorio, pesario, o enema. Una base tradicional del supositorio es manteca de cacao, pero se pueden usar diversas alternativas según corresponda.

Las formulaciones para la administración rectal/vaginal se pueden formular para que la liberación sea inmediata

y/o modificada. Las formulaciones de liberación modificada incluyen liberación retardada, sostenida, pulsátil, controlada, dirigida y programada.

Los compuestos de la invención también pueden administrarse directamente en el ojo u oído, en general en

forma de gotas de una suspensión o solución micronizada en solución salina estéril, con pH ajustado e isotónica. Otras formulaciones adecuadas para administración al ojo o al oído incluyen pomadas, implantes biodegradables (por ejemplo, esponjas de gel absorbibles, colágeno) y no biodegradables (por ejemplo, silicona), obleas, lentes y sistemas particulados o vesiculares, tales como niosomas o liposomas. Un polímero

tal como ácido poliacrílico reticulado, alcohol de polivinilo, ácido hialurónico, un polímero celulósico, por ejemplo, hidroxipropilmetilcelulosa, hidroxietilcelulosa o metilcelulosa, o un polímero heteropolisacárido, por ejemplo, Goma gellan, se puede incorporar junto con un conservante, tal como cloruro de benzalconio. Tales formulaciones también se pueden administrar mediante iontoforesis.

Las formulaciones para la administración al ojo o al oído se pueden formular para que la liberación sea inmediata y/o modificada. Las formulaciones de liberación modificada incluyen liberación retardada, sostenida, pulsátil, controlada, dirigida o programada.

Otras tecnologías

Los compuestos de la invención se pueden combinar con entidades macromoleculares solubles, tales como ciclodextrina y derivados adecuados de esta o polímeros que contienen polietilenglicol, a fin de mejorar su solubilidad, velocidad de disolución, disimulación del sabor, biodisponibilidad y/o estabilidad para usar en cualquiera de los modos de administración mencionados anteriormente.

Por ejemplo, los complejos de fármaco-ciclodextrina generalmente son útiles para la mayoría de las formas de

dosis y vías de administración. Se pueden usar los complejos de inclusión y los de no inclusión. Como una alternativa a la formación directa de complejos con el fármaco, la ciclodextrina se puede usar como un aditivo auxiliar, es decir, como un portador, diluyente o solubilizante. Para ello, se usan frecuentemente las ciclodextrinas alfa, beta y gamma, cuyos ejemplos se pueden encontrar en las publicaciones PCT N.os WO 91/11172, WO 94/02518 y WO 98/55148.

La cantidad de compuesto activo dependerá del sujeto que está en tratamiento, la gravedad del trastorno o de

la afección, la velocidad de administración, la eliminación del compuesto y el criterio del médico tratante. Sin embargo, una dosis eficaz generalmente está en el rango de alrededor de 0,001 a alrededor de 100 mg por kg

de peso corporal por día y, frecuentemente, alrededor de 0,01 a alrededor de 35 mg/kg/día, en dosis únicas o divididas. Para un ser humano de 70 kg, esto representa alrededor de 0,07 mg/día a alrededor de 7000 mg/día, más comúnmente, de alrededor de 10 mg/día a alrededor de 1000 mg/día. A veces, la dosis es alrededor de

10, 20, 30, 40, 50, 60, 75, 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 350, 375, 400, 425, 450, 475, 500,

525, 550, 575, 600, 625, 650, 675, 700, 750, 800, 900 o 1000 mg/día. A veces, la dosis es de alrededor de 10

mg/día a alrededor de 1000 mg/día, de alrededor de 10 mg/día a alrededor de 750 mg/día, de alrededor de 10

mg/día a alrededor de 600 alrededor de 10 mg/día a alrededor de 300 mg/día, de alrededor de 10 mg/día a alrededor de 150 alrededor de 20 mg/día a alrededor de 750 mg/día, de alrededor de 20 mg/día a alrededor de 600 alrededor de 20 mg/día a alrededor de 300 mg/día, de alrededor de 20 mg/día a alrededor de 150 alrededor de 50 mg/día a alrededor de 750 mg/día, de alrededor de 50 mg/día a alrededor de 600 alrededor de 50 mg/día a alrededor de 300 mg/día, de alrededor de 50 mg/día a alrededor de 150 alrededor de 75 mg/día a alrededor de 750 mg/día, de alrededor de 75 mg/día a alrededor de 600 mg/día, de alrededor de 75 mg/día a alrededor de 300 mg/día o de alrededor de 75

mg/día a alrededor de 150 mg/día.

En algunos casos, los niveles de dosis que están por debajo del límite más bajo del rango mencionado anteriormente pueden ser más adecuados, mientras que, en otros casos, se pueden usar dosis aún más altas

sin que esto resulte en efectos secundarios dañinos, donde dichas dosis más altas en general se dividen en

varias dosis más pequeñas para administrarlas durante el día.

Kit de piezas

En la medida en que se considere deseable administrar una combinación de compuestos activos, por ejemplo, para tratar una enfermedad o afección particular, se encuentra dentro del alcance de la presente invención que

dos o más composiciones farmacéuticas, al menos una de las cuales contiene un compuesto de acuerdo con

la invención, se puedan combinar de manera conveniente en forma de un kit adecuado para la coadministración

de las composiciones. Por lo tanto, el kit de la invención incluye dos o más composiciones farmacéuticas separadas, al menos una de las cuales contiene un compuesto de la invención, y medios para retener dichas composiciones de forma separada, tal como un recipiente, botella dividida, o envoltorio de papel aluminio dividido. Un ejemplo de dicho kit es el conocido blíster que se usa para envasar los comprimidos, cápsulas y similares.

El kit de la invención es particularmente adecuado para administrar diversas formas de dosificación, por ejemplo, oral y parenteral, para administrar las composiciones separadas en distintos intervalos de dosificación, o para titular las composiciones entre sí. Para facilitar el cumplimiento, en general, el kit incluye instrucciones para la administración y se puede proporcionar con un prospecto.

Tratamiento conjunto

Como se usa en la presente, la expresión “tratamiento conjunto” se refiere a la administración de un compuesto de la invención junto con al menos un agente farmacéutico o medicinal adicional (por ejemplo, un agente terapéutico antineoplásico), de manera secuencial o simultánea.

Como se indica en la presente, los compuestos de la invención se pueden usar en combinación con uno o más agentes terapéuticos antineoplásicos adicionales. La eficacia de los compuestos de la invención en determinados tumores puede aumentarse mediante la combinación con otros tratamientos contra el cáncer aprobados o experimentales, por ejemplo, radiación, cirugía, agentes quimioterapéuticos, tratamientos dirigidos, agentes que inhiben otras vías de señalización que están desreguladas en tumores, y agentes mejoradores del sistema inmunitario, tales como antagonistas de PD 1 o PD L1 y similares.

Si se usa un tratamiento conjunto, el uno o más agentes terapéuticos antineoplásicos adicionales se pueden administrar de manera secuencial o simultánea con el compuesto de la invención. En una forma de realización, el agente terapéutico antineoplásico adicional se administra a un mamífero (por ejemplo, un ser humano) antes de que se administre el compuesto de la invención. En otra forma de realización, el agente terapéutico antineoplásico adicional se administra a un mamífero después de que se administra el compuesto de la invención. En otra forma de realización, el agente terapéutico antineoplásico adicional se administra a un mamífero (por ejemplo, un ser humano) y esto se realiza de manera simultánea con la administración del compuesto de la invención.

La invención también se refiere a una composición farmacéutica para el tratamiento del crecimiento celular anormal en un mamífero, que incluye un ser humano, donde la composición comprende una cantidad de un compuesto de la invención, como se definió anteriormente (que incluye hidratos, solvatos y polimorfos de dicho compuesto o sales de este aceptable desde el punto de vista farmacéutico), en combinación con uno o más (preferentemente de 1 a 3) agentes terapéuticos antineoplásicos adicionales.

Las clases de agentes quimioterapéuticos adicionales, que se pueden administrar en combinación con un compuesto de la presente invención, incluyen, entre otras: agentes alquilantes, antimetabolitos, inhibidores de quinasa, alcaloides antimitóticos de origen vegetal, antibióticos citotóxicos/antitumorales, inhibidores de topoisomerasa, fotosensibilizantes, antiestrógenos y moduladores selectivos de los receptores de estrógenos (SERM), antiprogesteronas, reguladores descendentes de receptores de estrógenos (<e>R<d>), antagonistas del receptor de estrógeno, agonistas de la hormona leutinizante-hormona de liberación; agonista del receptor de IL-2 (citocinas recombinantes o agonistas para receptores de citocina); y oligonucleótidos antisentido o derivados de oligonucleótidos que inhiben la expresión de genes involucrados en proliferación celular anormal o crecimiento tumoral.

Otros agentes quimioterapéuticos adicionales incluyen no solo agentes de taxanos o platino, sino también agentes que actúan sobre HER2, por ejemplo, trastuzumab.

En otra forma de realización, tales agentes terapéuticos antineoplásicos adicionales incluyen compuestos derivados de las siguientes clases: inhibidores mitóticos, agentes alquilantes, antimetabolitos, antibióticos antitumorales, agentes antiangiogénicos, inhibidores de topoisomerasa I y II, alcaloides vegetales, alcaloides antimitóticos de origen vegetal, inhibidores de KRAS; inhibidores de MCT4; inhibidores MAT2a; inhibidores de alk/c-Met/ROS (que incluyen crizotinib o lorlatinib); inhibidores de mTOR (que incluyen temsirolimus o gedatolisib); inhibidores de src/abl (que incluyen bosutinib); inhibidores de quinasas dependientes de ciclina (CDK) (que incluyen palbociclib, PF-06873600); inhibidores de erb (que incluyen dacomitinib); inhibidores de PARP (que incluyen talazoparib); inhibidores de SMO (que incluyen glasdegib); inhibidores de EGFR T790M; inhibidores de PRMT5; inhibidores de TGFpRI; inhibidores del factor de crecimiento; inhibidores del ciclo celular, modificadores de respuesta biológica, inhibidores enzimáticos; y citotóxicos.

En otra forma de realización, tales agentes terapéuticos antineoplásicos adicionales incluyen compuestos derivados de un agente antiangiogénico, que incluye, por ejemplo, inhibidores de tirosina quinasa/receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) (VEGF<r>) (que incluyen sunitinib, axitinib, sorafenib y tivozanib), inhibidores de TIE-2, inhibidores de PDGFR, inhibidores de angiopoyetina, inhibidores de PKCp, inhibidores de COX-2 (ciclooxigenasa II), integrinas (alfa-v/beta-3), inhibidores de MMP-2 (metaloproteinasa 2 de la matriz) e inhibidores de MMP-9 (metaloproteinasa 9 de la matriz). Los agentes antiangiogénicos preferidos incluyen sunitinib (Sutent™), bevacizumab (Avastin™), axitinib (Inlyta™), SU 14813 (Pfizer) y A<g>13958 (Pfizer). Los agentes antiangiogénicos adicionales incluyen vatalanib (CGP 79787), pegaptanib octasodio (Macugen™), vandetanib (Zactima™), PF-0337210 (Pfizer), SU 14843 (Pfizer), AZD 2171 (AstraZeneca), ranibizumab (Lucentis™), Neovastat™ (AE 941), tetratiomolibdato (Coprexa™),<a>M<g>706 (Amgen), VEGF Trap (AVE 0005), CEP 7055 (Sanofi-Aventis), XL 880 (Exelixis), telatinib (BAY 57-9352) y CP-868,596 (Pfizer). Otros agentes antiangiogénicos incluyen enzastaurin (LY 317615), midostaurin (CGP 41251), perifosine (KRX 0401), teprenone (Selbex™) y UCN 01 (Kyowa Hakko). Otros ejemplos de agentes antiangiogénicos incluyen celecoxib (Celebrex™), parecoxib (Dynastat™), deracoxib (SC 59046), lumiracoxib (Preige™), valdecoxib (Bextra™), rofecoxib (Vioxx™), iguratimod (Careram™), IP 751 (Invedus), SC-58125 (Pharmacia) y etoricoxib (Arcoxia™). Aun otros agentes antiangiogénicos incluyen exisulind (Aptosyn™), salsalato (Amigesic™), diflunisal (Dolobid™), ibuprofeno (Motrin™), cetoprofeno (Orudis™), nabumetona (Relafen™), piroxicam (Feldene™), naproxeno (Aleve™, Naprosyn™), diclofenac (Voltaren™), indometacina (Indocin™), sulindac (Clinoril™), tolmetín (Tolectin™), etodolac (Lodine™), cetorolac (Toradol™) y oxaprozín (Daypro™). Aun otros agentes antiangiogénicos incluyen ABT 510 (Abbott), apratastat (TMI 005), a Zd 8955 (AstraZeneca), inciclinida (Metastat™) y PCK 3145 (Procyon). Aun otros agentes antiangiogénicos incluyen acitretina (Neotigason™), plitidepsina (aplidine™), cilengtida (EMD 121974), combretastatina A4 (CA4P), fenretinida (4 HPR), halofuginona (Tempostatin™), Panzem™ (2-metoxiestradiol), PF-03446962 (Pfizer), rebimastat (BMS 275291), catumaxomab (Removab™), lenalidomida (Revlimid™), escualamina (EVIZON™), talidomida (Thalomid™), Ukrain™ (NSC 631570), Vitaxin™ (MEDI 522) y ácido zoledrónico (Zometa™).

En otra forma de realización, tales agentes terapéuticos antineoplásicos adicionales incluyen compuestos derivados de agentes hormonales y antagonistas. Los ejemplos incluyen aquellos donde los agentes antihormonales actúan para regular o inhibir la acción hormonal en tumores tales como antiestrógenos y moduladores selectivos de los receptores de estrógenos (SERM), y un degradador del receptor de estrógeno selectivo (SERD) que incluye tamoxifén, raloxifeno, droloxifeno, 4-hidroxitamoxifén, trioxifeno, keoxifeno, LY117018, onapristona, toremifeno (Fareston) y fulvestrant. Los ejemplos también incluyen inhibidores de aromatasa que inhiben la enzima aromatasa, que regula la producción de estrógeno en las glándulas suprarrenales, e incluyen compuestos como 4(5)-imidazoles, aminoglutetimida, acetato de megestrol, exemestano, formestano, fadrozol, vorozol, letrozol, y anastrozol; y antiandrógenos tales como flutamida, nilutamida, bicalutamida, leuprolida, fluridil, apalutamida, enzalutamida, cimetidina y goserelín.

En otra forma de realización, tales agentes terapéuticos antineoplásicos adicionales incluyen compuestos derivados de inhibidores de la transducción de señal, tales como inhibidores de proteínas tirosina quinasas y/o serina/treonina quinasas: un inhibidor de la transducción de señal (por ejemplo, que inhibe los medios por los que las moléculas reguladoras que manejan los procesos fundamentales de crecimiento celular, diferenciación y supervivencia se comunican dentro de la célula). Los inhibidores de transducción de señal incluyen moléculas pequeñas, anticuerpos y moléculas antisentido. Los inhibidores de la transducción de señal incluyen, por ejemplo, los inhibidores de la quinasa (por ejemplo, inhibidores de la tirosina quinasa o inhibidores de la serina/treonina quinasa) e inhibidores del ciclo celular. Más específicamente, los inhibidores de la transducción de señal incluyen, por ejemplo, inhibidores de la proteína farnesil transferasa, inhibidor de EGF, ErbB-1 (EGFR), ErbB-2, pan erb, inhibidores de IGF1R, MEK (que incluye binimetinib (Mektovi™)), inhibidores de c-Kit, inhibidores de FLT-3 , inhibidores de K-Ras, inhibidores de PI3 quinasa, inhibidores de JAK, inhibidores de STAT, inhibidores de Raf quinasa, BRAF (que incluye encorafenib (Braftovi™)), inhibidores de Akt, inhibidor de mTOR, inhibidores de P70S6 quinasa, inhibidores de la vía WNT y los inhibidores de quinasa multidiana.

En otra forma de realización, tales agentes terapéuticos antineoplásicos adicionales incluyen docetaxel, paclitaxel, partículas unidas a la proteína paclitaxel, cisplatino, carboplatino, oxaliplatino, capecitabina, gemcitabina o vinorelbina.

En otra forma de realización, tales agentes terapéuticos antineoplásicos adicionales incluyen compuestos derivados de un modulador epigenético, cuyos ejemplos incluyen un inhibidor de EZH2 (que incluye PF-06821497), SMARCA4, PBRM1, ARID1A, ARID2, ARID1B, DNMT3A, TET2, MLL1/2/3, NSD1/2, SETD2, BRD4, DOT1L, HKMTsanti, PRMT1-9, LSD1, UTX, IDH1/2 o BCL6.

En otra forma de realización, tales agentes terapéuticos antineoplásicos adicionales incluyen compuestos que son agentes inmunooncológicos, que incluyen agentes inmunomoduladores.

En otra forma de realización, se contemplan las combinaciones con receptores de reconocimiento de patrones (PRR). Los PRR son receptores expresados por células del sistema inmunitario y que reconocen una variedad de moléculas asociadas a patógenos y/o al daño o la muerte celular. Los PRR participan en la respuesta inmunitaria innata y en la respuesta inmunitaria adaptativa. Los agonistas de PRR se pueden usar para estimular la respuesta inmunitaria en un sujeto. Existen múltiples clases de moléculas PRR, que incluyen receptores tipo Toll (TLR), receptores tipo RIG (RLR), receptores tipo dominio de oligomerización de fijación a nucleótidos (NLR), receptores de lectina tipo C (CLR) y proteína estimulador de los genes de interferón (STING).

La proteína STING funciona como un sensor de ADN citosólico y una proteína adaptadora en la señalización de interferón tipo 1. Las expresiones “STING” y “estimulador de los genes de interferón” se refieren a cualquier forma de la proteína STING, y a las variantes, las isoformas y los homólogos de especies que conservan al menos una parte de la actividad de STING. A menos que se indique lo contrario, por ejemplo, mediante referencia específica a STING humano, STING incluye todas las especies de mamíferos de STING de secuencia nativa, por ejemplo, de ser humano, mono y ratón; STING también se denomina - TMEM173.

Como se usa en la presente, “agonista de STING” significa cualquier molécula que, al fijarse a STING, (1) estimula o activa el STING, (2) mejora, aumenta, promueve, induce o prolonga una actividad, función o presencia de STING, o (3) mejora, aumenta, promueve o induce la expresión de STING. Los agonistas de STING útiles en cualquiera de los procedimientos de tratamiento, medicamentos y usos de la presente invención incluyen, por ejemplo, ligandos de ácidos nucleicos que se fijan a STING.

Los ejemplos de agonistas de STING útiles en los procedimientos de tratamiento, medicamentos y usos de la presente invención incluyen distintos ácidos nucleicos inmunoestimuladores, tales como ADN bicatenario sintético, di-GMP cíclico, GMP-AMP cíclico (cGAMP), dinucleótidos cíclicos sintéticos (CDN), tales como MK-1454 y ADU-S100 (MIW815), y moléculas pequeñas, tales como WO2019027858, WO20180093964, WO2017175156, WO2017175147.

Los anticuerpos terapéuticos pueden tener especificidad contra una variedad de diferentes antígenos. Por ejemplo, los anticuerpos terapéuticos pueden dirigirse a un antígeno asociado a un tumor, de modo que la fijación del anticuerpo al antígeno promueva la muerte de la célula que expresa el antígeno. En otro ejemplo, los anticuerpos terapéuticos pueden dirigirse a un antígeno sobre una célula inmunitaria, de modo que la fijación del anticuerpo evite la regulación descendente de la actividad de la célula que expresa el antígeno (y, por ende, promueva la actividad de la célula que expresa el antígeno). En algunas situaciones, un anticuerpo terapéutico puede funcionar a través de múltiples mecanismos diferentes (por ejemplo, puede tanto i) promover la muerte de la célula que expresa el antígeno, como ii) evitar que el antígeno cause la regulación descendente de la actividad de células inmunitarias en contacto con la célula que expresa el antígeno).

En otra forma de realización, tales agentes terapéuticos antineoplásicos adicionales incluyen anticuerpos que bloquearían o inhibirían en la diana: CTLA-4 (que incluye ipilimumab o tremelimumab), PD-1 o PD-L1 (que incluyen atezolizumab, avelumab, cemiplimab, durvalumab, nivolumab o pembrolizumab), LAG-3, TIM-3 o TIGIT.

En otra forma de realización, tales agentes terapéuticos antineoplásicos adicionales incluyen anticuerpos que son agonistas de 4-1BB, OX40, GITR, ICOS o C<d>40.

En otra forma de realización el tratamiento contra el cáncer puede ser un tratamiento de linfocitos T con CAR.

Los ejemplos de un anticuerpo terapéutico incluyen: un anticuerpo anti-OX40, un anticuerpo anti-4-1BB, un anticuerpo anti-HER2 (que incluye un conjugado anticuerpo anti-HER2-fármaco (ADC)), un anticuerpo biespecífico anti-CD47 / anti-PD-L1, y un anticuerpo biespecífico anti-P-cadherina/anti-CD3. Los ejemplos de agentes citotóxicos que se pueden incorporar en un ADC incluyen una antraciclina, auristatina, dolastatina, combretastatina, duocarmicina, dímero de pirrolobenzodiazepina, dímero de indolino-benzodiazepina, enediina, geldanamicina, maitansina, puromicina, taxano, alcaloide de la vinca, camptotecina, tubulisina, hemiasterlina, spliceostatin, pladienolide y estereoisómeros, isósteros, análogos o derivados de estos. Los ejemplos de agentes inmunomoduladores que se pueden incorporar en un ADC incluyen ganciclovier, etanercept, tacrolimus, sirolimus, voclosporina, ciclosporina, rapamicina, ciclofosfamida, azatioprina, micofenolgato de mofetilo, metotrextrato, glucocorticoide y sus análogos, citocinas, factores de crecimiento de células madre, linfotixinas, factores de necrosis tumoral (TNF), factores hematopoyéticos, interleucinas (por ejemplo, interleucina-1 (IL-1), IL-2, IL-3, IL-6, IL-10, IL-12, IL-15, IL-18, y IL-21), factores estimulantes de colonias (por ejemplo, factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF) y factores estimulantes de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-CSF)), interferones (por ejemplo, interferones-.alfa., -.beta. y -.gamma), el factor de crecimiento de las células madre designado “factor S 1”, eritropoyetina y trombopoyetina, o una combinación de estos.

Los ejemplos adicionales de anticuerpos terapéuticos pueden incluir los siguientes antígenos, donde los anticuerpos de ejemplo dirigidos al antígeno también se incluyen a continuación (entre paréntesis, después del antígeno). En la presente, los siguientes antígenos también se pueden denominar “antígenos diana” o similares. Los antígenos diana para los anticuerpos terapéuticos de la presente incluyen, por ejemplo: 4-1BB (por ejemplo, utomilumab); 5T4; A33; receptor alfa-folato 1 (por ejemplo, mirvetuximab soravtansina); Alk-1; BCMa [por ejemplo, ver US9969809]; BTN1A1 (por ejemplo, ver WO2018222689); CA-125 (por ejemplo, abagovomab); Carboanhidrasa IX; CCR2; CCR4 (por ejemplo, mogamulizumab); CCR5 (por ejemplo, leronlimab); CCR8; CD3 [por ejemplo, blinatumomab (biespecífico contra CD3/CD19), biespecífico contra CD3/P-cadherina, biespecífico contra CD3/BCMA] CD19 (por ejemplo, blinatumomab, m Or 208); CD20 (por ejemplo, ibritumomab tiuxetán, obinutuzumab, ofatumumab, rituximab, ublituximab); CD22 (inotuzumab ozogamicín, moxetumomab pasudotox); CD25; CD28; CD30 (por ejemplo, brentuximab vedotín); CD33 (por ejemplo, gemtuzumab ozogamicín); CD38 (por ejemplo, daratumumab, isatuximab), CD40; CD-40L; CD44v6; CD47 (por ejemplo, Hu5F9-G4, CC-90002, SRF23 I, B6H12); CD52 (por ejemplo, alemtuzumab); CD56; CD63; CD79 (por ejemplo, polatuzumab vedotín); CD80; CD123; CD276 / b 7-H3 (por ejemplo, omburtamab); CDH17; CEA; ClhCG; CTLA-4 (por ejemplo, ipilimumab, tremelimumab), CXCR4; desmogleína 4; DLL3 (por ejemplo, rovalpituzumab tesirina); DLL4; E-cadherina; EDA; EDB; EFNA4; EGFR (por ejemplo, cetuximab, depatuxizumab mafodotín, necitumumab, panitumumab); EGFRvIII; Endosialina; EpCAM (por ejemplo, oportuzumab monatox); FAP; receptor de acetilcolina fetal; FLT3 (por ejemplo, ver WO2018/220584); GD2 (por ejemplo, dinutuximab, 3F8); GD3; GITR; GloboH; GM1; GM2; HER2/neu [por ejemplo, margetuximab, pertuzumab, trastuzumab; adotrastuzumab emtansina, trastuzumab duocarmazina, [ver US8828401]; HER3; HER4; ICOS; IL-10; ITG-AvB6; LAG-3 (por ejemplo, relatlimab); Lewis-Y; LG; Ly-6; M-CSF [ver US7326414]; MCSP; mesotelina; MUC1; MUC2; MUC3; MUC4; MUC5AC; MUC5B; MUC7; MUC16; Notch1; Notch3; Nectina-4 (por ejemplo, enfortumab vedotín); OX40 [ver US7960515]; P-Cadherina [ver WO2016/001810]; PCDHB2; PDGFRA (por ejemplo, olaratumab); antígeno de células plasmáticas; PolySA; PSCA; PSMA; PTK7 [ver US9409995]; Ror1; SAS; SCRx6; SLAMF7 (por ejemplo, elotuzumab); SHH; SIRPa (por ejemplo, ED9, Effi-DEM); STEAP; TGF-beta; TIGIT; TIM-3; Tm Pr SS3; precursor de TNF-alfa; TROP-2 (por ejemplo, sacituzumab govitecán); TSPAN8; VEGF (por ejemplo, bevacizumab, brolucizumab); VEGFR1 (por ejemplo, ranibizumab); VEGFR2 (por ejemplo, ramucirumab, ranibizumab); Wue-1.

Los ejemplos de agentes formadores de imágenes que se pueden incluir en un ADC incluyen fluoresceína, rodamina, fósforos de lantánidos y sus derivados, o un radioisótopo unido a un quelante. Los ejemplos de fluoróforos incluyen, entre otros, isotiocianato de fluoresceína (FITC) (por ejemplo, 5-FITC), amida de fluoresceína (FAM) (por ejemplo, 5-FAM), eosina, carboxifluoresceína, eritrosina, Alexa Fluor® (por ejemplo, Alexa 350, 405, 430, 488, 500, 514,532, 546, 555, 568, 594, 610, 633, 647, 660, 680, 700, o 750), carboxitetrametilrodamina (TAMRA) (por ejemplo, 5,-TAMRA), tetrametilrodamina (TMR) y sulforhodamina (SR) (por ejemplo, SR101). Los ejemplos de quelantes incluyen, entre otros, 1,4,7,10-tetraazaciclododecano-N,N',N",N'"-ácido tetraacético (DOTA), 1,4,7-triazaciclononano-1,4,7-ácido triacético (NOTA), 1,4,7-triazaciclononano,1-ácido glutárico-4,7-ácido acético (deferoxamina), ácido dietilentriaminpentaacético (DTPA) y ácido 1,2-bis(o-aminofenoxi)etan-N,N,N',N'-tetraacético) (BAPTA).

Las proteínas terapéuticas de ejemplo que se pueden incluir en un ADC incluyen una toxina, una hormona, una enzima y un factor de crecimiento.

Los ejemplos de polímeros biocompatibles que se pueden incorporar en un ADC incluyen polímeros hidrosolubles, tales como polietilenglicol (PEG) o derivados de estos, y polímeros que contienen zwitteriones biocompatibles (por ejemplo, un polímero que contiene fosforilcolina).

Los ejemplos de polímeros biocompatibles que se pueden incorporar en un ADC incluyen oligonucleótidos antisentido.

La invención también se refiere al uso de radiación en combinación con cualquier agente terapéutico antineoplásico administrado en la presente. Más específicamente, los compuestos de la invención se pueden administrar en combinación con tratamientos adicionales, tales como radioterapia y/o quimioterapia.

Síntesis química

Los siguientes esquemas y descripciones escritas proporcionan detalles generales sobre la preparación de los compuestos de la invención.

Los compuestos de la invención se pueden preparar mediante cualquier procedimiento conocido en el estado de la técnica para la preparación de compuestos de estructura análoga. En particular, los compuestos de la invención se pueden preparar mediante los procedimientos descritos con referencia a los siguientes esquemas, mediante los procedimientos específicos descritos en los ejemplos o mediante procesos similares a estos.

La persona del oficio de nivel medio comprenderá que las condiciones experimentales indicadas en los siguientes esquemas son ilustrativas de las condiciones adecuadas para realizar las transformaciones que se muestran, y que puede ser necesario o conveniente variar las condiciones precisas que se usan para la preparación de los compuestos de la Fórmula (I), y compuestos dentro de la Fórmula (I), por ejemplo, compuestos de las Fórmulas (I), (la) o (Ib), y similares.

Además, la persona del oficio de nivel medio comprenderá que puede ser necesario o conveniente, en cualquier etapa de la síntesis de los compuestos de la invención, proteger uno o más grupos sensibles a fin de evitar las reacciones secundarias no deseadas. En particular, puede ser necesario o conveniente proteger grupos alcohol o amino. Los grupos protectores (PG) que se usan en la preparación de los compuestos de la invención se pueden emplear de manera convencional. Ver, por ejemplo, los descritos en 'Greene's Protective Groups in Organic Synthesis' de Theodora W Greene y Peter G M Wuts, tercera edición, (John Wiley and Sons, 1999), en particular, los capítulos 7 (“Protection for the Amino Group”) y 2 (“Protection for the Hidroxyl Group, Including 1,2- and 1,3-Diols”), que también describe procedimientos para retirar esos grupos.

Todos los derivados de la Fórmula (I)se pueden preparar mediante los procedimientos descritos en los procedimientos generales que se indican a continuación o mediante modificaciones rutinarias de estos. La presente invención también abarca uno o más de estos procesos para preparar los derivados de la Fórmula (I), además de cualquier intermediario novedoso que se use en la presente. La persona del oficio de nivel medio apreciará que las siguientes reacciones se pueden calentar de manera térmica o en irradiación en microondas o en condiciones de química de flujo.

También se tendrá en cuenta que puede ser necesario o conveniente realizar las transformaciones en un orden diferente del descrito en los esquemas o modificar una o más de las transformaciones para obtener el compuesto deseado de la invención.

De acuerdo con un primer proceso, los compuestos de la Fórmula (I) se pueden preparar de los compuestos del Intermediario (i), como se ilustra en elEsquema 1.

Esquema 1

Los PG posibles incluyen 4-metoxibencilo, N,N-bis-(4-metoxibencilo), ter-octilo u otro grupo protector de amina adecuado; N,N-bis-(4-metoxibencilo) se usó con mayor frecuencia para compuestos de la Fórmula (I).

Los Intermediarios (i), (iv), (vi), (ix), (x) están disponibles en el comercio o pueden ser sintetizados por las personas del oficio de nivel medio de acuerdo con la literatura o preparaciones descritas en la presente. Para los Esquemas analizados en la presente, cuando los compuestos de la Fórmula (I) tienen centros quirales, los enantiómeros respectivos se pueden separar mediante separación quiral del racemato según se requiera. Además, cuando R3 contiene un grupo protector tal como un cetal o sililo, se pueden usar condiciones de desprotección adecuadas según se requiera, tales como ácido metansulfónico en diclorometano/metanol/agua.

El Intermediario (ii) se puede preparar del Intermediario (i) de acuerdo con la etapa (a), una reacción de nitración. Los procedimientos típicos usan un agente nitrante adecuado y solvente orgánico o inorgánico adecuado. Las condiciones preferidas comprenden el uso de ácido nítrico en ácido sulfúrico a 10 °C.

El Intermediario (iii) se puede preparar del Intermediario (ii) de acuerdo con la etapa (b), una reacción que forma triflato. Los procedimientos típicos usan anhídrido trifluorometansulfónico con una base orgánica o inorgánica adecuada en un solvente orgánico adecuado a temperaturas reducidas. Las condiciones preferidas comprenden el uso de trietilamina en dicloroetano a 0 °C.

El Intermediario (v) se puede preparar del Intermediario (iii) de acuerdo con la etapa (c), una reacción de sustitución aromática nucleofílica con el Intermediario (iv). Los procedimientos típicos usan una base orgánica o inorgánica adecuada en un solvente orgánico adecuado a temperatura ambiente o temperaturas elevadas, ya sea de manera térmica, en irradiación de microondas o condiciones de química de flujo. Las condiciones preferidas comprenden el uso de trietilamina en dicloroetano.

El Intermediario (vii) se puede preparar del Intermediario (v) de acuerdo con la etapa (d), una reacción de sustitución aromática nucleofílica con el Intermediario (vi). Los procedimientos típicos usan una base orgánica o inorgánica adecuada en un solvente orgánico adecuado a temperatura ambiente o temperaturas elevadas, ya sea de manera térmica, en irradiación de microondas o condiciones de química de flujo. Por ejemplo, el uso de bis(4-metoxibencil)amina con trietilamina en dicloroetano a 50 °C calentado de forma térmica o el uso de ter-octilamina con trietilamina en tolueno a 75 °C.

El Intermediario (viii) se puede preparar del Intermediario (vii) de acuerdo con la etapa (e), una etapa de reducción de nitrógeno. Los procedimientos típicos usan condiciones de hidrogenación con una fuente de hidrógeno adecuada y un catalizador de hidrogenación en un solvente orgánico adecuado a temperatura ambiente o a temperaturas elevadas con calentamiento de manera térmica, en irradiación de microondas, o condiciones de química de flujo o el uso de un metal adecuado y donante de protones o hidrógeno adecuado en un solvente orgánico adecuado. Las condiciones preferidas comprenden el uso de polvo de zinc y formiato de amonio en metanol.

El Intermediario (xi) se puede preparar del Intermediario (viii) de acuerdo con la etapa (f), una etapa que forma enlace de amida con el Intermediario (ix) o (x). Los procedimientos típicos usan el Intermediario (ix) con una base orgánica o inorgánica adecuada en un solvente orgánico adecuado o usan el Intermediario (x) con un reactivo de acoplamiento de amida adecuado y una base orgánica o inorgánica adecuada en un solvente orgánico adecuado. Las condiciones típicas usan trietilamina y diclorometano cuando se usa el Intermediario (ix). Las condiciones típicas usan 50 % en peso de solución de ácido propilfosfónico anhídrido en etilacetato, trietilamina y acetato de etilo cuando se usa el Intermediario (x).

El Intermediario (xii) se puede preparar del Intermediario (xi) de acuerdo con la etapa (g), una formación de anillo de imidazol. Los procedimientos típicos usan condiciones básicas usando una base orgánica o inorgánica adecuada a temperaturas elevadas de manera térmica o en irradiación de microondas o condiciones de química de flujo; de manera alternativa, condiciones ácidas usando un ácido adecuado orgánico o inorgánico a temperaturas elevadas de manera térmica o en irradiación de microondas o condiciones de química de flujo. De manera alternativa, un agente de deshidratación adecuado en un solvente orgánico adecuado a temperaturas elevadas, ya sea de manera térmica o en irradiación de microondas o condiciones de química de flujo. Las condiciones preferidas comprenden el uso de hidróxido de sodio en etanol a 80 °C calentado de manera térmica o trifenilfosfina y trietilamina en tetracloruro de carbono a 80 °C calentado de manera térmica.

Los compuestos de la Fórmula (I) se pueden preparar del Intermediario (xii) de acuerdo con la etapa (h), una eliminación de PG y aquellos contenidos en R3, si estuviesen presentes, por ejemplo, sililo o cetal. Los procedimientos de desprotección típicos comprenden un ácido orgánico o inorgánico adecuado en un solvente orgánico adecuado a temperatura ambiente o a temperaturas elevadas, ya sea de manera térmica o en irradiación de microondas o condiciones de química de flujo. Las condiciones preferidas comprenden ácido metansulfónico en diclorometano a 45 °C calentado de manera térmica seguido de adición de metanol y agua.

De manera alternativa, los compuestos de la Fórmula (I) se pueden preparar del Intermediario (iii), como se ilustra en elEsquema 2.

Esquema 2

Los PG de amino posibles incluyen 4-metoxibencilo, N,N-bis(4-metoxibencilo), ter-octilo, donde ter-octilo se usó con mayor frecuencia en los ejemplos.

Un grupo saliente (LG) es un grupo funcional para asistir en una reacción específica e incluye OH, Cl, Br, I, OMs, OTs y OTf, donde OH se usó con mayor frecuencia en los ejemplos.

Los Intermediarios (ix), (x), (xiii), (xv) están disponibles en el comercio o pueden ser sintetizados por las personas del oficio de nivel medio de acuerdo con la literatura o preparaciones descritas en la presente.

El Intermediario (xiv) se puede preparar del Intermediario (iii) de acuerdo con la etapa (i), una reacción de sustitución aromática nucleofílica con el Intermediario (xiii). Los procedimientos típicos usan una base orgánica o inorgánica adecuada en un solvente orgánico adecuado a temperatura ambiente o temperaturas elevadas, ya sea de manera térmica, en irradiación de microondas o condiciones de química de flujo. Las condiciones preferidas comprenden el uso de trietilamina en dicloroetano.

El Intermediario (xvi) se puede preparar del Intermediario (xiv) de acuerdo con la etapa (j), una reacción de sustitución aromática nucleofílica con el Intermediario (xv). Los procedimientos típicos usan una base orgánica o inorgánica adecuada en un solvente orgánico adecuado a temperatura ambiente o temperaturas elevadas, ya sea de manera térmica, en irradiación de microondas o condiciones de química de flujo. Las condiciones preferidas comprenden el uso de bis(4-metoxibencil)amina con trietilamina en dicloroetano a 50 °C calentado de forma térmica o el uso de ter-octilamina con trietilamina en tolueno a 75 °C.

El Intermediario (xvii) se puede preparar del Intermediario (xvi) de acuerdo con la etapa (k), una etapa en tándem de reducción de nitrógeno y desbencilación. Los procedimientos típicos usan condiciones de hidrogenación con una fuente de hidrógeno adecuada y catalizador de hidrogenación adecuado en un solvente orgánico adecuado a temperatura ambiente o a temperaturas elevadas con calentamiento de manera térmica, en irradiación de microondas o condiciones de química de flujo. Las condiciones preferidas comprenden el uso de formiato de amonio y 30 % de paladio sobre carbón en etanol a 55 °C.

El Intermediario (xviii) se puede preparar del Intermediario (xvii) de acuerdo con la etapa (l), una etapa que forma enlace de amida con el Intermediario (ix) o (x). Los procedimientos típicos usan el Intermediario (ix) con una base orgánica o inorgánica adecuada en un solvente orgánico adecuado o usan el Intermediario (x) con un reactivo de acoplamiento de amida adecuado y una base orgánica o inorgánica adecuada en un solvente orgánico adecuado. Las condiciones preferidas comprenden el uso del Intermediario (ix) con trietilamina y diclorometano a 0 °C.

El Intermediario (xix) se puede preparar del Intermediario (xviii) de acuerdo con la etapa (m), una formación de anillo de imidazol. Los procedimientos típicos usan condiciones básicas usando una base orgánica o inorgánica adecuada a temperaturas elevadas de manera térmica, en irradiación de microondas o condiciones de química de flujo; condiciones ácidas usando un ácido orgánico o inorgánico adecuado a temperaturas elevadas de manera térmica, en irradiación de microondas o condiciones de química de flujo, o un agente de deshidratación adecuado en un solvente orgánico adecuado a temperaturas elevadas de manera térmica, en irradiación de microondas o condiciones de química de flujo. Las condiciones preferidas comprenden el uso de hidróxido de sodio en etanol a 75 °C calentado de manera térmica.

El Intermediario (xxi) se puede preparar del Intermediario (xix) de acuerdo con la etapa (n), una reacción de sustitución nucleofílica o reacción de Mitsunobu con el Intermediario (xx). Los procedimientos típicos comprenden una base orgánica o inorgánica adecuada en un solvente orgánico adecuado a temperatura ambiente o temperaturas elevadas, ya sea de manera térmica, en irradiación de microondas o condiciones de química de flujo. De manera alternativa, cuando el LG es un grupo hidroxilo mediante tratamiento con una fosfina adecuada y azodicarboxilato adecuado (o una combinación de ambos en un único reactivo) en un solvente orgánico adecuado a temperatura ambiente o temperaturas elevadas ya sea de manera térmica, en irradiación de microondas o condiciones de química de flujo. Las condiciones preferidas, donde LG es un grupo hidroxilo, comprenden el uso de cianometilentributilfosforano en tolueno a 90 °C o 100 °C calentado de manera térmica.

Los compuestos de la Fórmula (I) se pueden preparar del Intermediario (xxi) de acuerdo con la etapa (o), una eliminación de PG y cualquier PG contenido en R3, si estuviesen presentes, por ejemplo, un cetal o silano. Los procedimientos típicos comprenden un ácido orgánico o inorgánico adecuado en un solvente orgánico adecuado a temperatura ambiente o temperaturas elevadas, ya sea de manera térmica, en irradiación de microondas o condiciones de química de flujo. Las condiciones preferidas comprenden ácido metansulfónico en hexafluoroisopropanol o ácido trifluoroacético en diclorometano seguido de adición de metanol.

Al llevar a cabo la síntesis de los compuestos de la invención, una persona del oficio de nivel medio controlará las reacciones con procedimientos comunes que incluyen cromatografía de capa delgada (TLC), cromatografía de líquidos-espectrometría de masa (LCMS) y resonancia magnética nuclear (RMN).

Una persona del oficio de nivel medio también reconocerá que los compuestos de la invención se pueden preparar como mezclas de diastereómeros o isómeros geométricos (por ejemplo, sustitución cis y trans en un anillo de cicloalcano). Estos isómeros se pueden separar mediante técnicas cromatográficas estándares, tales como cromatografía de gel de sílice de fase normal, cromatografía de líquidos de alta resolución de fase inversa o cromatografía de fluido supercrítico. Una persona del oficio de nivel medio también reconocerá que algunos compuestos de la invención son quirales y, por ende, se pueden preparar como mezclas racémicas o escalémicas de enantiómeros. Hay varios procedimientos disponibles que son conocidos por las personas del oficio de nivel medio para la separación de enantiómeros.

EJEMPLOS

A menos que se indique lo contrario, las reacciones se llevaron a cabo en una atmósfera de nitrógeno. La cromatografía de gel de sílice se llevó a cabo usando gel de sílice de 250-400 mallas con nitrógeno presurizado (~10-15 psi) para guiar el solvente a través de la columna (“cromatografía flash”). Cuando se indicó, las soluciones y mezclas de reacción se concentraron mediante evaporación giratoria al vacío.

Los espectros de resonancia magnética nuclear (RMN) 1H y 19F fueron, en todos los casos, coherentes con las estructuras propuestas. Los desplazamientos químicos característicos (8) se expresan en partes por millón campo abajo con respecto al tetrametilsilano (para 1H-RMN), usando abreviaturas convencionales para la designación de picos importantes: por ejemplo, s, singulete; d, doblete; t, triplete; q, cuarteto; m, multipleto; br, amplio. Se usaron las siguientes abreviaturas para los solventes de comunes: cD ch, deuterocloroformo; d6-DMSO, deuterodimetilsulfóxido; y CD3OD, deuterometanol. Cuando sea adecuado, los tautómeros se pueden registrar dentro de los datos de RMN; y algunos protones intercambiables pueden no estar visibles.

Los espectros de masa, MS (m/z), se registraron usando ionización por electrospray (ESI) o ionización química a presión atmosférica (APCI). Cuando sea relevante y a menos que se indique lo contrario, los datos de m/z proporcionados son para los isótopos 19F, 35Cl, 79Br y 127I.

La nomenclatura está escrita como se describe en IUPAC (Unión International de Química Pura y Aplicada) generada dentro de Chemdraw 18.0 de Perkin Elmer.

En los Ejemplos y preparaciones no limitativos que se mencionan en la presente, se aplican las siguientes abreviaturas:

AcOH es ácido acético;

ac. es acuoso;

Bn es bencilo;

br es amplio;

tBu es ter-butilo;

°C es grados Celsius;

CO2 es dióxido de carbono

CMBP es cianometilentributilfosforano;

Cs2COa es carbonato de cesio;

DCE es dicloroetano;

DCM es diclorometano; cloruro de metileno;

DIPEA/DIEA es N-etildiisopropilamina, N,N-diisopropiletilamina;

DMA es dimetilacetamida;

DMF es N,N-dimetilformamida;

DMSO es sulfóxido de dimetilo;

ee es exceso enantiomérico;

EtOAc es acetato de etilo;

EtOH es etanol;

Et3N es trietilamina;

g es gramo;

HCO2NH4 es formiato de amonio;

HCl es ácido clorhídrico;

HFIP es 1,1,1,3,3,3-hexafluoroisopropanol;

HNO3 es ácido nítrico;

HPLC es cromatografía de líquidos de alta presión;

H2O es agua;

H2SO4 es ácido sulfúrico;

Hr o h es hora;

IPA/iPrOH es isopropanol;

l es litro;

LCMS es cromatografía de líquidos-espectrometría de masa;

LiAlH4 es hidruro de litio y aluminio;

LiOH es hidróxido de litio;

M es molar;

MeCN es acetonitrilo;

MeI es yoduro de metilo;

MeOH es metanol;

mg es miligramo;

MgSO4 es sulfato de magnesio;

MHz es megahertz;

min es minutos;

ml es mililitros;

mmol es milimol;

mol es moles;

MS m/z es pico de espectro de masa;

MsOH es ácido metansulfónico;

NaH es hidruro de sodio;

NaHCO3 es hidrogenocarbonato de sodio;

NaOH es hidróxido de sodio;

Na2SO4 es sulfato de sodio;

NH3 es amoníaco;

NH4OH es hidróxido de amonio;

NH(PMB)2 es bis(4-metoxibencil)amina;

RMN es resonancia magnética nuclear;

Pd/C es paladio sobre carbón;

pH es potencia de hidrógeno;

ppm es partes por millón;

psi es libra por pulgada cuadrada;

Rt es tiempo de retención;

RT es temperatura ambiente

TBDMS es terbutildimetilsililo;

TBSCl es cloruro de terbutidimetilsililo;

TBME/MTBE es ter-butil dimetiléter;

TEA es trietilamina;

Tf2O es anhídrido trifluorometansulfónico;

TFA es ácido trifluoroacético;

TFAA es anhídrido trifluoroacético;

THF es tetrahidrofurano;

TLC es cromatografía de capa delgada;

TsOH es ácido p-toluensulfónico;

Zn es zinc;

|jl es microlitro;

|jmol es micromol;

Se usaron separaciones quirales para separar enantiómeros de algunos intermediarios durante la preparación de los compuestos de la invención. Cuando se llevó a cabo tal separación, los enantiómeros separados se denominaron ENT-1 o ENT-2, de acuerdo con su orden de elución. Para los compuestos con dos centros quirales, los estereoisómeros en cada estereocentro se separaron en momentos distintos. La denominación de ENT-1 o ENT-2 de un intermediario o un ejemplo se refiere al centro quiral para la separación llevada a cabo en esa etapa. Se reconoce que, cuando los estereoisómeros en un centro quiral se separan en un compuesto con dos o más centros, los enantiómeros separados son diastereómeros entre sí. La denominación de ENT-1 o ENT-2 se usa en la presente para mantener la consistencia y se refiere al centro quiral separado. A modo de ejemplo, pero no limitativo, los Ejemplos 6 y 7 tienen un centro quiral. Los enantiómeros se separaron como la etapa final. El centro quiral se ilustra como las dos posibilidades, pero no se conoce qué ejemplo es qué enantiómero. Por lo tanto, la denominación (R) y (S) no se asocia a ninguno de los Ejemplos 6 o 7. Si la separación ocurre en un intermediario en estas preparaciones, luego de que una mezcla se somete a procedimientos de separación, el centro quiral se identifica con “abs” cerca de ese centro, con el entendimiento de que los enantiómeros separados pueden no ser enantioméricamente puros y la orientación específica de ese enlace no se ilustra porque el enantiómero no fue confirmado. En general, el enantiómero enriquecido en cada centro quiral es >90 % del material aislado. También se llevaron a cabo esfuerzos para enriquecer la pureza enantiomérica en un centro para que sea >98 % de la mezcla e incluso >99 %.

La rotación óptica de un enantiómero se puede medir usando un polarímetro. De acuerdo con los datos de su rotación observada (o los datos de su rotación específica), un enantiómero con una rotación en sentido horario se designó como el (+)-enantiómero, y un enantiómero con una rotación en sentido antihorario se designó como el (-)-enantiómero. Los compuestos racémicos se indican por la ausencia de estereoquímica representada o descrita, o por la presencia de (+/-) adyacente a la estructura; en este último caso, la estereoquímica indicada representa la configuración relativa (en lugar de la absoluta) de los sustituyentes del compuesto.

Cuando se usa TLC preparativa o cromatografía en gel de sílice, una persona del oficio de nivel medio puede elegir cualquier combinación de solventes para purificar el compuesto deseado.

Ejemplo (1): 2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)propan-1,3-diol, sal de trifluoroacetato

Etapa 1:Síntesis de 4-(bencilamino)-5,6-dimetil-3-nitropiridin-2-il trifluorometansulfonato

A un matraz de fondo redondo en nitrógeno se agregó 5,6-dimetil-3-nitropiridin-2,4-diol (7,56 g, 41,05 mmol) en diclorometano (300 ml). A esto se agregó trietilamina (12,5 g, 123 mmol, 17,2 ml) y la reacción se enfrió hasta 0 °C. Anhídrido tríflico (23,2 g, 82,1 mmol, 13,8 ml) se agregó por goteo durante 8 min. La reacción se agitó a 0 °C durante 1,5 h. A esto se agregó amina de bencilo (4,84 g, 45,2 mmol, 4,93 ml) y la reacción se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante 3 h. La mezcla de reacción se lavó con agua (2 x 100 ml) y salmuera (1 x 100 ml). Los orgánicos se secaron en sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (heptano: acetato de etilo, gradiente 0-50 %) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 12,4 g, 30,5 mmol, 74,3 %. LCMSm/z406,2 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 87,34-7,44 (m, 3H), 7,28-7,31 (m, 2H), 5,24 (br, s., 1H), 4,31 (d, J=5,07 Hz, 2H), 2,47 (s, 3H), 2,12-2,20 (m, 3H).

Etapa 2:Síntesis de N4-bencil-5,6-dimetil-3-nitro-N2-(2,4,4-trimetilpentan-2-il)piridin-2,4-diamina

Un matraz de fondo redondo se cargó con el agregado de 4-(bencilamino)-5,6-dimetil-3-nitropiridin-2-il trifluorometansulfonato (12,4 g, 30,5 mmol) y tolueno (100 ml). Se agregó trietilamina (4,63 g, 45,7 mmol, 6,38 ml), y luego ter-octilamina (5,91 g, 45,7 mmol, 7,34 ml). La reacción se calentó a 75 °C durante 16 h. Se agregó ter-octilamina (5,91 g, 45,7 mmol, 7,34 ml) y la reacción se calentó a 75 °C durante 48 h. La solución se concentró en Celite®, y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (heptano:acetato de etilo, gradiente 0-50 %) para proporcionar el compuesto del título como un aceite rojo. Rendimiento: 8,93 g, 23,2 mmol, 76,2 %. LCMSm/z386,4 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 88,76 (s, 1H), 8,38 (br, s., 1H), 7,32-7,39 (m, 2H), 7,27 7,31 (m, J=3,12, 3,12 Hz, 3H), 4,46 (d, J=4,29 Hz, 2H), 2,33 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 1,99 (s, 2H), 1,56 (s, 6H), 0,98 (s, 9H).

Etapa 3:Síntesis de 5,6-dimetil-N2-(2,4,4-trimetilpentan-2-il)piridin-2,3,4-triamina

A un matraz de fondo redondo con N4-bencil-5,6-dimetil-3-nitro-N2-(2,4,4-trimetilpentan-2-il)piridin-2,4-diamina (8,90 g, 23,2 mmol) y etanol (150 ml) se agregó formiato de amonio (14,6 g, 231 mmol). Se agregó paladio sobre carbón (200 mg, 30 % de Pd) y la reacción se agitó a 55 °C durante 2 h. La mezcla de reacción luego se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró a través de Celite® y el filtrado se concentró. El residuo se agitó en acetato de etilo durante 1 h, luego los sólidos se retiraron mediante filtración a través de Celite®. El filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título como una goma naranja. Rendimiento: 5,6 g, 21,2 mmol, 91,5 %. LCMSm/z265,3 [M+H]+. 1H RMN (600 MHz, CDCla) 88,62 (s, 1H), 2,40 (s, 3H), 1,98 (s, 3H), 1,66 (s, 2H), 1,29 (s, 6H), 1,05 (s, 9H).

Etapa 4:Síntesis de 2-(etoximetil)-6,7-dimetil-N-(2,4,4-trimetilpentan-2-il)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina

Una solución de 5,6-dimetil-N2-(2,4,4-trimetilpentan-2-il)piridin-2,3,4-triamina (5,60 g, 21,2 mmol) y diclorometano (100 ml) se enfrió hasta 0 °C. A esto se agregó cloruro de 2-etoxiacetilo (2,73 g, 22,2 mmol, 2,44 ml) seguido de trietilamina (3,21 g, 31,8 mmol, 4,43 ml). La reacción se agitó a 0 °C durante 1,5 h. La reacción se diluyó con diclorometano (100 ml) y los orgánicos se lavaron con agua (2 x 50 ml). Los orgánicos se secaron en sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se diluyó con etanol (100 ml) y se agregó hidróxido de sodio (5,08 g, 127 mmol, 8,47 ml, 15 N). La mezcla de reacción se calentó a 75°C durante 16 h. La reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua (2 x). Los acuosos combinados se lavaron con acetato de etilo. Los orgánicos combinados se secaron en sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (heptano:acetato de etilo, gradiente 0-100 %) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 1,40 g, 4,21 mmol, 19,8 %. LCMSm/z333,1 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 89,10 (br, s., 1H), 4,96 (br, s., 1H), 4,73 (s, 2H), 3,65 (q, J=7,02 Hz, 2H), 2,42 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,07 (s, 2H), 1,59 (s, 6H), 1,29 (t, J=7,02 Hz, 3H), 0,99 (s, 9H).

Etapa 5:Síntesis de 1-((2,2-dimetiM,3-dioxan-5-il)metil)-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-N-(2,4,4-trimetilpentan-2-il)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina

A una solución de 2-(etoximetil)-6,7-dimetil-N-(2,4,4-trimetilpentan-2-il)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina (125 mg, 0,376 mmol), (2,2-dimetil-1,3-dioxan-5-il)metanol (68,7 mg, 0,470 mmol) en tolueno (2 ml) se agregó cianometilentributilfosforano (136 mg, 0,564 mmol, 0,564 ml, 1M en tolueno) y la reacción se calentó a 90 °C durante 1.5 h, luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se agitó durante 16 h. Cianometilentributilfosforano (136 mg, 0,564 mmol, 0,564 ml, 1 M en tolueno) se agregó y la reacción se agitó a 90°C durante 1,5 h. La mezcla de reacción se absorbió en gel de sílice y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (heptano:acetato de etilo, gradiente 0-100 %) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 72 mg, 0,156 mmol, 42%. LCMSm/z461,3 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 85,13 (s, 1H), 4,79 (s, 2H), 4,62 (d, J=7,81 Hz, 2H), 4,02 (dd, J=2,93, 12,29 Hz, 2H), 3,60 (q, J=7,02 Hz, 2H), 3,51 (d, J=10,93 Hz, 2H), 2,43 (s, 3H), 2,38 (s, 3H), 2,06 (s, 2H), 1,90-1,98 (m, 1H), 1,58 (s, 6H), 1,47 (s, 6H), 1,24 (t, J=7,02 Hz, 3H), 0,99 (s, 9H).

Etapa6:Síntesis del Ejemplo1:2-((4-ammo-2-(etoximetM)-6,7-dimetiMH-imidazo[4,5-c]piridm-1-il)metil)propan-1,3-diol, sal de trifluoroacetato

Una solución de 1-((2,2-dimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-N-(2,4,4-trimetilpentan-2-il)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina (72 mg, 0,16 mmol) en una mezcla 4:1 de diclorometano:ácido trifluoroacético (5 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. Metanol (10 ml) se agregó y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. La reacción se concentró y el residuo se disolvió en dimetilsulfóxido (1 ml) y se purificó mediante HPLC de fase inversa. (Columna: Waters Sunfire C18 19x100, 5u; fase móvil A: 0,05 % de TFA en agua (v/v); fase móvil B: 0,05 % de TFA en acetonitrilo (v/v); gradiente: mantenimiento a 95.0 % de H2O/5,0 % de acetonitrilo durante 1,0 min, 95,0 % de H2O/5,0 % de acetonitrilo lineal a 0 % de H2O/100 % de acetonitrilo en 9,0 min, mantenimiento a 0 % de H2O/100 % de acetonitrilo a 10,0 min. Flujo: 25 ml/min.). Rendimiento: 18,1 mg, 0,043 mmol, 27 %; tiempo de retención de HPLC: 1,17 min (Columna: Waters Atlantis® dc184,6x50, 5u; fase móvil A: 0,05 % de TFA en agua (v/v); fase móvil B: 0,05 % de TFA en acetonitrilo (v/v); gradiente: 95,0 % de H2O/5,0 % de acetonitrilo lineal a 5 % de H2O/95 % de acetonitrilo en 4.0 min, mantenimiento a 5 % de H2O/95 % de acetonitrilo a 5,0 min. Flujo: 2 ml/min.); HPLCm/z309,4 [M+H]+.

Ejemplo (2): 2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol

Etapa 1:Síntesis de 5,6-dimetil-3-nitropiridin-2,4-diol

A 5,6-dimetilpiridin-2,4-diol (40,0 g, 287 mmol)(Org. Lett.,2003,5 (25),pp 4779-4782) a 18 °C se agregó ácido sulfúrico concentrado (174 ml). La reacción se enfrió hasta 0 °C, momento en el que se agregó ácido nítrico (68-70 %, 45,8 ml) durante 1,5 h, manteniendo la temperatura interna por debajo de 10 °C. Luego de que se completó la adición, la reacción se agitó a 10 °C durante 30 min. Esta reacción se combinó con una segunda reacción de 40 g de 5,6-dimetilpiridin-2,4-diol. La mezcla de reacción combinada se vertió en agua y hielo (2 l). El precipitado amarillo se recolectó mediante filtración y se lavó con agua (5 x 200 ml) y MTBE (5 x 100 ml). Los sólidos recolectados se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido amarillo. Rendimiento combinado: 50 g, 271,7 mmol, 47 % de rendimiento en función de 80 g de piridina de inicio. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 12,34 (br s, 1H), 11,90 (br s, 1H), 2,21 (s, 3H), 1,90 (s, 3H).

Etapa 2:Síntesis de N2,N2-bis(4-metoxibencil)-5,6-dimetil-3-nitro-N4-((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)piridin-2,4-diamina

A una solución de 5,6-dimetil-3-nitropiridin-2,4-diol (70,0 g, 380,1 mmol) en dicloroetano (1,4 l) que se enfrió hasta 0 °C se agregó trietilamina (80,8 g, 798 mmol). Se agregó anhídrido trifluorometansulfónico (220 g, 779 mmol) durante 30 min a 0 °C. La reacción se agitó a 0 °C durante 1,5 h. Trietilamina (42,3 g, 418 mmol) se agregó, seguido de adición en porciones de (2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metanamina (72,6 g, 456 mmol) (se preparó deOrganic & Biomolecular Chemistry,14(2), 483-494; 2016). La reacción se agitó a 0 °C durante 20 min, luego se agitó a 15 °C durante 18 h. La reacción se enfrió hasta 0 °C, momento en el que se agregó trietilamina (115 g, 1,14 mol), y luego bis(4-metoxibencil)amina (127 g, 494 mmol). La reacción luego se agitó a 50° C durante 12 h. El solvente se retiró y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (éter de petróleo:acetato de etilo, gradiente 0-10 %). Las fracciones del producto se recolectaron y se evaporaron a 10 % de volumen. Los sólidos se recolectaron mediante filtración y la torta de filtro se lavó con éter de petróleo (3 x 50 ml). El filtrado se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (éter de petróleo:acetato de etilo, gradiente 0-10 %). Las fracciones del producto se recolectaron y se evaporaron a 10 % de volumen. Los sólidos se recolectaron mediante filtración y la torta de filtro se lavó con éter de petróleo (3 x 20 ml), para proporcionar el compuesto del título como un sólido amarillo. Rendimiento: 98 g, 173,6 mmol, 45,7%. LCMSm/z564,9 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 87,05 (d, J=8,78 Hz, 4H), 6,80 (d, J=8,78 Hz, 4H), 6,47 (t, J=6,15 Hz, 1H), 4,34 (s, 4H), 3,79 (s, 6H), 3,54-3,67 (m, 4H), 3,42 (d, J=6,02 Hz, 2H), 2,35 (s, 3H), 2,21 (s, 3H), 1,43 (s, 3H), 1,41 (s, 3H), 0,83 (s, 3H).

Etapa 3:Síntesis de N2,N2-bis(4-metoxibencil)-5,6-dimetil-N4-((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)piridin-2,3,4-triamina

A una solución de N2,N2-bis(4-metoxibencil)-5,6-dimetil-3-nitro-N4-((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)piridin-2,4-diamina (57,0 g, 100,9 mmol) en metanol (673 ml) se agregó formiato de amonio (63,7 g, 1,01 mol) y luego polvo de zinc (66,0 g, 1,01 mol). La reacción se agitó durante 10 min a 15 °C. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite®y el filtrado se concentró. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se agregó agua lentamente para formar un precipitado blanco. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron en sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron para proporcionar el compuesto del título como un aceite marrón. Se usó sin purificación adicional. Rendimiento: 50,0 g, 96,4 mmol, 95,5 %. LCMSm/z535,0 [M+H]+.

Etapa 4:Síntesis de N-(2-(bis(4-metoxibencil)amino)-5,6-dimetil-4-(((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)amino)piridin-3-il)-2-etoxiacetamida

A una solución de N2,N2-bis(4-metoxibencil)-5,6-dimetil-N4-((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)piridin-2,3,4-triamina (100 g, 192,8 mmol) en diclorometano (1 l) se agregó trietilamina (97,5 g, 964 mmol, 134 ml). La reacción se enfrió hasta 0 °C, momento en el que se agregó cloruro de 2-etoxiacetilo (37,8 g, 308 mmol) por goteo. El baño de hielo se retiró y la reacción se agitó a 25 °C durante 16 h. El solvente se retiró, y el producto se usó sin purificación adicional. Rendimiento: 150 g, 192,8 mmol, cuantitativo asumido.

Etapa 5:Síntesis de 2-(etoximetil)-N,N-bis(4-metoxibencil)-6,7-dimetil-1-((2,2,5-trimetiM,3-dioxan-5-il)metil)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina

A una solución de N-(2-(bis(4-metoxibencil)amino)-5,6-dimetil-4-(((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)amino)piridin-3-il)-2-etoxiacetamida cruda de la reacción anterior en etanol (3,45 l enfriados hasta 0 °C) se agregó hidróxido de sodio (64,4 ml, acuoso 15 N). Luego de la adición, la reacción se calentó a reflujo durante 16 h. La reacción se enfrió hasta 15 °C, momento en el que se formó un precipitado blanco. Los sólidos se filtraron, y la torta de filtro se lavó con agua y MTBE. Los sólidos blancos se disolvieron en acetato de etilo (1 l), y la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó en sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (acetato de etilo: éter de petróleo, gradiente 0-45 %.) para proporcionar producto. Este material se combinó con 7,2 g adicionales de producto de un lote diferente y se agitó durante 20 min en una solución 2:1 de éter de petróleo:MTBE. Los sólidos se filtraron y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco. Rendimiento combinado: 94,52 g, 157 mmol, 76 % de rendimiento. LCMSm /z603,0 [M+H]+. 1H RMN (600 MHz, DMSO-d6) 87,16 (d, J=8,22 Hz, 4H), 6,83 (d, J=8,80 Hz, 4H), 4,82-5,27 (m, 6H), 4,36-4,80 (m, 4H), 3,70 (s, 6H), 3,51-3,68 (m, 2H), 3,40-3,46 (m, 2H), 2,41 (s, 3H), 2,34 (s, 3H), 1,39 (s, 3H), 1,34 (s, 3H), 1,07 (t, J=7,04 Hz, 3H), 0,56 (s, 3H).

Etapa6:Síntesis del Ejemplo(2): 2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2metilpropan-1,3-diol

A una solución de 2-(etoximetil)-N,N-bis(4-metoxibencil)-6,7-dimetil-1-((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina (477 mg, 0,791 mmol) y diclorometano (3 ml) en un vial se agregó ácido clorhídrico concentrado (7,91 mmol, 0,66 ml) por goteo. El vial se tapó, y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, luego se calentó a 50 °C durante 1 h. Se agregó ácido clorhídrico concentrado (4,8 mmol, 0,40 ml) adicional y la reacción se continuó calentando a 50 °C durante 30 min. La reacción luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se agitó durante 16 h. Se agregó agua (2 ml), y el acuoso se lavó con diclorometano (2 x 3 ml). El acuoso se llevó hasta pH 9 con carbonato de sodio sólido. La reacción luego se calentó a reflujo y se enfrió hasta 4 °C. Los sólidos se filtraron, se lavaron con agua (5 ml) y éter (5 ml) y se secaron al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco. Rendimiento. 194 mg, 0,602 mmol, 76,0 %. LCMSm /z323,3 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DIVISOR)85,76 (s, 2H), 4,91-5,09 (m, 1H), 4,69 4,90 (m, 2H), 4,27-4,59 (m, 3H), 3,39-3,56 (m, 2H), 3,29-3,37 (m, 1H, asumido; parcialmente oculto por H2O), 3,14-3,29 (m, 2H), 2,95-3,13 (m, 1H), 2,41 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 1,06-1,14 (m, 3H), 0,48 (s, 3H).

Ejemplo (3): 2-((4-ammo-2-(etox¡met¡l)-1H-¡m¡dazo[4,5-c]qumolm-1-¡l)met¡l)-2-met¡lpropan-1,3-d¡ol

Se preparó de manera similar a 2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol a partir de quinolin-2,4-diol. Se prepararon 18,5 mg. LCMSm /z345,4 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe)8ppm 0,58 (s, 3 H) 1,15 (t, J=7,02 Hz, 3 H) 3,07 - 3,77 (m, 7 H) 4,58 - 5,26 (m, 5 H) 7,52 (t, J=8,0 Hz, 1 H) 7,71 (t, J=8,0 Hz, 1 H) 7,79 (d, J=8,0 Hz, 1 H) 8,74 (d, J=8,0 Hz, 1 H) 9,19 (br s, 1 H)

Ejemplo (4): 2-((4-ammo-2-(etox¡met¡l)-7,8-d¡h¡droc¡clopenta[b]¡m¡dazo[4,5-d]pmdm-1(6H)-¡l)met¡l)-2-metilpropan-1,3-diol

Se preparó de manera similar a 2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol a partir de 6,7-dihidro-5H-ciclopenta[b]piridin-2,4-diol, se prepararon60mg. Tiempo de retención de LCMS 0,715 min (Columna: ACQUITY Up LC b Eh C1850*2,1mm*1,7um; fase móvil A: 0,05 % de NH4OH en agua (v/v); fase móvil B: acetonitrilo; gradiente: mantenimiento a 100 % de H2O durante 0,10 min, 100 % de H2O a 0 % de H2O/100% de acetonitrilo en 0,90 min, mantenimiento a 0 % de H2O/100% de acetonitrilo durante 0,2 min. Flujo: 1,0 ml/min.). LCMSm /z335,3 [M+H]+.1H RMN (CDCh, 400 MHz), picos característicos:85,1-5,3 (m, 2H), 4,8-5,0 (m, 2H), 4,1-4,8 (m, 3H), 3,5-3,8 (m,6H), 3,1-3,3 (m, 2H), 2,9-3,0 (m, 2H), 2,1-2,2 (m, 2H), 1,26 (t, 3H, J=7,0 Hz), 0,65 (s, 3H).

Ejemplo (5): 2-((4-am¡no-2-(etox¡met¡l)-6,7,8,9-tetrah¡dro-1H-¡m¡dazo[4,5-c]qu¡nol¡n-1-¡l)met¡l)-2-metilpropan-1,3-diol, sal de formiato

Se preparó de manera similar a 2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol, a partir de 6,7-dihidro-5H-cidopenta[b]piridin-2,4-diol, se prepararon 34 mg.Tiempo de retención de LCMS: 0,62l min (Columna: ACQUITY U<p>LC BEH C1850*2,1mm*1,7um; fase móvil A: 0,05 % de NH4OH en agua (v/v); fase móvil B: acetonitrilo; gradiente: 95 % de H2O/5 % de acetonitrilo a 0 % de H2O/100 % de acetonitrilo durante 1 min, mantenimiento a 0 % de H2O/100 % de acetonitrilo durante 0,2 min. Flujo: 1,0 ml/min.). LCMSm/z349,2 [M+H]+. 1H RMN (metanol-d4, 400 MHz), picos característicos: 88,4-8,6 (m, 1H), 4,63 (s, 2H), 3,59-3,68 (m, 2H), 3,1-3,6 (m, 5h , asumido; parcialmente oculto por solvente), 2,8-3,0 (m, 3h ), 1,72-2,06 (m, 4H), 1,22 (t, 3H, J=7,0 Hz), 0,60 (s, 3H).

Ejemplos (6) y (7): (R)-3-(4-ammo-2-(etoximetM)-6,7-dimetiMH-imidazo[4,5-c]piridm-1-M)-2-(metoximetM)-2-metilpropan-1-ol y (S)-3-(4-ammo-2-(etoximetM)-6,7-dimetiMH-imidazo[4,5-c]piridm-1-M)-2-(metoximetil)-2-metilpropan-1-ol

Etapa 1:Síntesis de (2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metanol

A una solución agitada de 2-(hidroximetil)-2-metilpropan-1,3-diol (50,0 g, 416,2 mmol) y 2,2-dimetoxipropano (65,0 g, 624,0 mmol) se agregó acetona (46 ml) y ácido p-toluensulfónico (3,96 g, 20, 8 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 30 °C durante 12 h. La reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se agregó una solución de bicarbonato de sodio (12 g) en agua (400 ml). El acuoso se extrajo con acetato de etilo y la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó en sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco. Rendimiento: 52,9 g, 330,2 mmol, 79,3 %. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 4,58 (t, J=5,40 Hz, 1H), 3,53-3,57 (m, 2H), 3,41-3,45 (m, 2H), 3,33-3,36 (m, 2H, parcialmente oculto por solvente), 1,32 (s, 3H), 1,26 (s, 3H), 0,74 (s, 3H).

Etapa 2:Síntesis de 5-(metoximetil)-2,2,5-trimetil-1,3-dioxano

A una suspensión de hidruro de sodio (33,8 g, 844 mmol, 60 % de dispersión en aceite mineral) en tolueno (1,35 l) enfriada hasta 0 °C se agregó (2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metanol (67,6 g, 421,9 mmol) y la reacción se agitó a 0 °C durante 10 min y luego se agitó hasta 40 °C durante 18 h. La reacción se enfrió hasta 0 °C, se agregó yoduro de metilo (135 g, 951,1 mmol) y la reacción se agitó a 15 °C durante 60 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua (300 ml) y el acuoso se extrajo con éter de petróleo (3 x 100 ml). La capa orgánica combinada se concentró para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo. Rendimiento: 60,0 g, 344,4 mmol, 81,6 %. 1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 83,51-3,57 (m, 2H), 3,43-3,49 (m, 2H), 3,28 (s, 2H), 3,25 (s, 3H), 1,33 (s, 3H), 1,27 (s, 3H), 0,79 (s, 3H).

Etapa 3:Síntesis de 2-(metoximetil)-2-metilpropan-1,3-diol

A una suspensión de 5-(metoximetil)-2,2,5-trimetil-1,3-dioxano (55,0 g, 315,7 mmol) en metanol (316 ml) enfriada hasta 0 °C se agregó ácido clorhídrico (31,6 ml, acuoso 3M). La mezcla de reacción se agitó a 25 °C durante 30 min. La mezcla de reacción se concentró y se agregó agua (100 ml) al residuo. El acuoso se extrajo con éter de petróleo (3 x 200 ml) y luego se liofilizó para proporcionar el compuesto del título como un aceite amarillo. Rendimiento: 32,2 g, 239,8 mmol, 75,9 %. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 83,65-3,69 (m, 2H), 3,62 (s, 2H), 3,54-3,58 (m, 2H), 3,37 (s, 2H), 3,34 (s, 3H), 0,81 (s, 3H).

Etapa 4:Síntesis de 3-((ter-butildimetilsilil)oxi)-2-(metoximetil)-2-metilpropan-1-ol

A una solución de 2-(metoximetil)-2-metilpropan-1,3-diol (515 mg, 3,84 mmol) en tetrahidrofurano (25 ml) enfriada hasta 0 °C, se agregó hidruro de sodio (144 mg, 3,61 mmol, 60 % de dispersión en aceite mineral). La reacción se agitó a 0 °C durante 15 min. Se agregó cloruro de ter-butildimetilsililo (579 mg, 3,84 mmol) en tetrahidrofurano (5 ml) por goteo. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 30 min y a temperatura ambiente durante 3 h. La reacción se diluyó luego con metanol (1 ml), bicarbonato de sodio acuoso saturado (10 ml) y agua (15 ml). El acuoso se extrajo con diclorometano (2 x 40 ml). Los orgánicos combinados se secaron en sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (heptano:acetato de etilo, gradiente 0-60 %) para proporcionar el compuesto del título, rendimiento: 446 mg, 1,80 mmol, 46,8 %. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 83,55-3,64 (m, 4H), 3,37 (d, J=3,90 Hz, 2H), 3,35 (s, 3H), 0,90-0,91 (s, 9H), 0,82 (s, 3H), 0,05-0,08 (s, 6H).

Etapa 5:Síntesis de 1-(3-((ter-butildimetilsilil)oxi)-2-(metoximetil)-2-metilpropil)-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-N-(2,4,4-trimetilpentan-2-il)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina

A una solución de 2-(etoximetil)-6,7-dimetil-N-(2,4,4-trimetilpentan-2-il)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina (69 mg, 0,21 mmol) y 3-((ter-butildimetilsilil)oxi)-2-(metoximetil)-2-metilpropan-1-ol (111 mg, 0,42 mmol) en tolueno (1 ml) se agregó cianometilentributilfosforano (125 mg, 0,519 mmol, 0,519 ml, 1,0 M en acetonitrilo). La reacción se agitó a 100 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se absorbió en gel de sílice y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (heptano:etilacetato, gradiente 0-60 %) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 69 mg, 0,12 mmol, 59 %. LCMSm/z563,7 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, MeOD) 84,38-4,78 (m, 4H), 3,44-3,65 (m, 4H), 3,02-3,22 (m, 2H), 2,47 (s, 3H), 2,41 (s, 3H), 2,08 (br, s., 2H), 1,56 (s, 6H), 1,25-1,35 (m, 4H), 1,19 (t, J=6,83 Hz, 3H), 0,94 (s, 9H), 0,92 (s, 9H), 0,69 (s, 3H), 0,07 (s, 6H).

Etapa 6:Síntesis del Ejemplo(6)y(7) (R)-3-(4-ammo-2-(etoximetM)-6,7-dimetiMH-imidazo[4,5-c]piridm-1-il)-2-(metoximetil)-2-metilpropan-1-ol y (S)-3-(4-ammo-2-(etoximetM)-6,7-dimetiMH-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)-2-(metoximetil)-2-metilpropan-1-ol

A una solución de 1-(3-((ter-butildimetilsilil)oxi)-2-(metoximetil)-2-metilpropil)-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-N-(2,4,4-trimetilpentan-2-il)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina (69 mg, 0,12 mmol) en hexafluoroisopropanol (5,0 ml) se agregó ácido metansulfónico (70,7 mg, 0,735 mmol, 0,048 ml). La reacción se agitó durante 5 h a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con bicarbonato de sodio acuoso saturado y se lavó con acetato de etilo (1 x) y diclorometano (1 x). Los orgánicos se combinaron, se secaron en sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (diclorometano: metanol, gradiente 0-30 %). El producto se recolectó, se concentró y se filtró a través de un disco de nailon. El solvente se retiró para proporcionar 41 mg de racemato. El racemato se disolvió luego en 1 ml de etanol y se purificó mediante cromatografía de fluido supercrítico. (Columna: Phenomenex Lux Cellulose 45 um 21 x 250 mm); fase móvil A: Metanol c/ 0,2 % de hidróxido de amonio (v/v); fase móvil B: CO2 (v/v); gradiente: 70,0 % de CO2/ 30,0 % de metanol c/ 0,2 % de hidróxido de amonio isocrático durante 5 min. Flujo: 75 ml/min. Presión trasera: 120 Bar), para obtener Ent 1 como el Ejemplo (6): 13,8 mg, 0,041 mmol, 33,6 %, 99 % de ee, y Ent 2 como el Ejemplo (7): 13,1 mg, 0,039 mmol, 31,9 %, 99 % de ee. Tiempo de retención de SFC de Ent 1 como el Ejemplo (6): 3,04 min,m/z337,5 [M+H]+, tiempo de retención de SFC de Ent 2 como el Ejemplo (7): 4,15 min,m/z337,5 [M+H]+ (Columna: Phenomenex Lux Cellulose 45 um 4,6 x 100mm; fase móvil A: Metanol c/ 0,2 % de hidróxido de amonio (v/v); fase móvil B: CO2 (v/v); gradiente: 60,0% de CO2/ 40,0% de metanol c/ 0,2 % de hidróxido de amonio isocrático durante 5 min. Flujo: 1,5 ml/min. Presión trasera: 120 Bar). La estereoquímica específica del Ejemplo (6) y el Ejemplo (7) no está asignada pero cada enantiómero es de 99 % de ee como se proporcionó anteriormente.

Ejemplo (8): 2-((4-ammo-6,7-dimetN-2-(2,2,2-trifluoroetM)-1H-imidazo[4,5-c]pmdm-1-N)metM)-2-metilpropan-1,3-diol, sal de trifluoroacetato

Etapa 1:Síntesis de N-(2-(bis(4-metoxibencil)amino)-5,6-dimetil-4-(((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)amino)piridin-3-il)-3,3,3-trifluoropropanamida

A una solución de ácido 3,3,3-trifluoropropiónico (15,1 mg, 0,118 mmol, 0,0104 ml) se agregó N2,N2-bis(4-metoxibencil)-5,6-dimetil-N4-((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)piridin-2,3,4-triamina (60 mg, 0,11 mmol) y trietilamina (22,7 mg, 0,224 mmol, 0,031 ml). Se agregó ácido propilfosfónico anhídrido (143 mg, 0,224 mmol, 0,101 ml, 50 % en acetato de etilo) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Se agregó agua, y el acuoso se lavó dos veces con acetato de etilo. Los orgánicos se combinaron y se secaron en sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron. El compuesto crudo se usó en la siguiente etapa sin purificación o análisis adicional, rendimiento: 60 mg, 0,093 mmol, 83 %.

Etapa 2:Síntesis de N,N-bis(4-metoxibencil)-6,7-dimetil-2-(2,2,2-trifluoroetil)-1-((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina

A una solución de N-(2-(bis(4-metoxibencil)amino)-5,6-dimetil-4-(((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)amino)piridin-3-il)-3,3,3-trifluoropropanamida (40 mg, 0,062 mmol) se agregó tetracloruro de carbono (1 ml). A esto se agregó trietilamina (18,8 mg, 0,186 mmol, 0,026 ml) y trifenilfosfina (48,8 mg, 0,186 mmol). La reacción se calentó a 80 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió luego hasta temperatura ambiente y se filtró a través de Celite® y la torta de filtro se lavó con acetato de etilo. El filtrado se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía de gel de sílice (heptano: acetato de etilo , gradiente 0-30 %) para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 10 mg, 0,016 mmol, 26%. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 8 7,27-7,30 (m, 4H, asumido; parcialmente oculto por CHCh residual), 6,82 (d, J=8,59 Hz, 4H), 5,25-5,37 (m, 2H), 4,83-5,01 (m, 3H), 4,33-4,58 (m, 2H), 3,79 (s, 6H), 3,76-3,84 (m, 1<h>, asumido; parcialmente oculto por pico a 3,79 ppm), 3,60-3,74 (m, 2H), 3,48-3,56 (m, 1H), 3,19-3,27 (m, 1H), 2,45 (s, 3H), 2,44 (s, 3H), 1,50 (s, 3H), 1,48 (s, 3H), 0,63 (s, 3H). LCMSm/z627,5 [M+H]+.

Etapa 3:Síntesis del Ejemplo(8):2-((4-ammo-6,7-dimetN-2-(2,2,2-trifluoroetM)-1H-imidazo[4,5-c]pmdm-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol, sal de trifluoroacetato

A una solución de N,N-bis(4-metoxibencil)-6,7-dimetil-2-(2,2,2-trifluoroetil)-1-((2,2,5-trimetiM,3-dioxan-5-il)metil)-1H-imidazo[4,5-c]piridin-4-amina (10 mg, 0,016 mmol) en hexafluoroisopropanol (0,5 ml) se agregó ácido metansulfónico (2 gotas). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La reacción se concentró luego y el residuo se diluyó con 1 ml de dimetilsulfóxido y se purificó a través de HPLC de fase inversa (Columna: Waters Sunfire C18 19x100, 5u; fase móvil A: 0,05 % de TFA en agua (v/v); fase móvil B: 0,05 % de TFA en acetonitrilo (v/v); gradiente: 95,0 % de H2O/5,0 % de acetonitrilo lineal a 70 % de H2O /30 % de acetonitrilo en 8,5 min a 0 % de H2O/100 % de MeCN a 9,0 min, mantenimiento a 0 % de H2O / 100 % de acetonitrilo de 9,0 a 10,0min. Flujo: 25 ml/min.) para proporcionar el compuesto del título, rendimiento: 5,5 mg, 0,012, 75 %; tiempo de retención de HPLC: 1,31 min. (Columna: Waters Atlantis® dc184,6x50, 5u; fase móvil A: 0,05 % de TFA en agua (v/v); fase móvil B: 0,05 % de TFA en acetonitrilo (v/v); 95,0 % de H2O/5,0 % de acetonitrilo lineal a 5 % de H2O/95 % de acetonitrilo en 4,0 min, mantenimiento a 5 % de H2O/95 % de acetonitrilo a 5,0 min. Flujo: 2 ml/min.). HPLCm/z347,5 [M+H]+.

Ejemplo (9): 2-((4-ammo-2-(etoximetM)-6,7-dimetiMH-imidazo[4,5-c]piridm-1-N)metM)-2-etMpropan-1,3-diol, sal de trifluoroacetato

Se preparó de manera similar al Ejemplo(2), mediante la utilización de (5-etil-2,2-dimetil-1,3-dioxan-5-il)metanol (Polymer Chemistry, 8(3), 592-604; 2017), en la Etapa 5. El producto se aisló mediante HPLC de fase inversa (Columna: Waters Sunfire C18 19x100, 5u; fase móvil A: 0,05 % de TFA en agua (v/v); fase móvil B: 0,05 % de TFA en acetonitrilo (v/v); gradiente: 95,0 % de H2O/5,0 % de acetonitrilo lineal a 45 % de H2O /55 % de acetonitrilo en 8,5 min a 0 % de H2O/100 % de MeCN a 9,0 min, mantenimiento a 0 % de H2O / 100 % de acetonitrilo de 9,0 a 10,0min. Flujo: 25 ml/min.) para obtener el compuesto del título, rendimiento: 25,2 mg, 0,056 mmol, 46,7 %; tiempo de retención de HP<l>C: 1,35 min (Columna: Waters Atlantis® dc184,6x50, 5u; fase móvil A: 0,05 % de TFA en agua (v/v); fase móvil B: 0.05 % de TFA en acetonitrilo (v/v); 95,0 % de H2O/5,0 % de acetonitrilo lineal a 5 % de H2O/95 % de acetonitrilo en 4,0 min, mantenimiento a 5 % de H2O/95 % de acetonitrilo a 5,0 min. Flujo: 2 ml/min.); HPLCm/z337,5 [M+H]+.

Ejemplo (10): 2-((4-amino-2-butil-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol

Se preparó de manera similar al Ejemplo (1) 2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol a partir de quinolin-2,4-diol en la Etapa 1 y con el uso de cloruro de valeroílo en la Etapa 4.Se prepararon 37,8 mg. Tiempo de retención de HPLC: 1,69 min (Columna: Waters Atlantis® dc18 4,6x50, 5u; fase móvil A: 0,05%de TFA en agua (v/v); fase móvil B: 0,05%de TFA en acetonitrilo (v/v); gradiente: 95,0 % de H2O/5,0 % de acetonitrilo lineal a 5 % de H2O/95 % de acetonitrilo en 4,0 min, mantenimiento a 5 % de H2O/95 % de acetonitrilo a 5,0 min. Flujo: 2 ml/min.). HPLCm/z343,5 [M+H]+.

Ejemplo (11): 2-((4-amino-2-butil-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol

Se preparó de manera similar a 2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetiMH-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol con el uso de cloruro de valeroílo en el Ejemplo 1, Etapa 4.Se prepararon 260mg. 1H RMN (DMSO-da, 400 MHz) 85,56 (s, 2H), 4,8-5,0 (m, 2H), 4,3-4,5 (m, 1H), 4,1-4,3 (m, 1H), 3,1-3,3 (m, 3H), 3,0-3,1 (m, 1H), 2,8-3,0 (m, 2H), 2,40 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 1,6-1,7 (m, 2H), 1,3-1,4 (m, 2H), 0,91 (t, 3H, J=7,2 Hz), 0,45 (s, 3H). LCMSm/z321,2 [M+H]+.

Ejemplo (12): 2-((4-amino-2-pentil-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol

Se preparó de manera similar al Ejemplo (1) 2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol a partir de quinolin-2,4-diol en la Etapa 1 y con el uso de cloruro de hexanoílo en la Etapa 4.Se prepararon 31,2 mg. Tiempo de retención de HpLC: 1,88 min (Columna: Waters Atlantis® dc184,6x50, 5u; fase móvil A: 0,05 % de TFA en agua (v/v); fase móvil B: 0,05 % de TFA en acetonitrilo (v/v); gradiente: 95,0 % de H2O/5,0 % de acetonitrilo lineal a 5 % de H2O/95 % de acetonitrilo en 4,0 min, mantenimiento a 5 % de H2O/95 % de acetonitrilo a 5,0 min. Flujo: 2 ml/min.). HPLCm/z357,5 [M+H]+.

Ejemplo (13): 2-((4-ammo-2-butN-6,7,8,9-tetrahidro-1H-imidazo[4,5-c]qumolm-1-N)metM)-2-metNpropan-1,3-diol, sal de formiato

Etapa 1: Síntesis de 3-nitro-5,6,7,8-tetrahidroquinolin-2,4-diol

A un matraz de 2 l se agregó ácido sulfúrico (275 ml). La reacción se enfrió en un baño de hielo y se agregó 5,6,7,8-tetrahidroquinolin-2,4-diol (65 g, 390 mmol) en porciones durante 15 minutos. La reacción se agitó durante 10 minutos más. Se agregó ácido nítrico (39,6 ml, 885 mmol) en porciones a una velocidad que mantuvo la temperatura de reacción interna por debajo de 30 °C. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas más. La reacción se vertió lentamente en hielo (2 l), los sólidos se filtraron y se lavaron con agua. Los sólidos se secaron al vacío a 50 °C. Rendimiento: 52,2 g, 390 mmol, 63 %. 1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 12,25 (br s, 1 H), 11,75 (br s, 1 H), 2,48 (m, 2 H), 2,34 (m, 2 H), 1,66 (m, 4 H). LCMSm/z211,2 [M+H].

Etapa 2: Síntesis de 2,4-dicloro-3-nitro-5,6,7,8-tetrahidroquinolina

A un matraz de 500 ml se agregó 3-nitro-5,6,7,8-tetrahidroquinolin-2,4-diol (13,1 g, 53,0 mmol), dicloroetano (70,0 ml), oxicloruro de fósforo(V) (65,1 g, 425 mmol, 40,0 ml). La reacción se calentó a 80 °C durante 16 horas. La reacción se enfrió luego a temperatura ambiente y se evaporó luego mediante evaporación de tolueno (2x). El residuo se filtró a través de un tapón de sílice con diclorometano y el eluyente se evaporó para proporcionar un sólido ceroso marrón/naranja. Rendimiento: 9,2 g, 37,2 mmol, 70 %. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 82,92-3,02 (m, 2H), 2,77-2,85 (m, 2H), 1,85-1,95 (m, 4H). GCMSm/z246,0. Se preparó material adicional con condiciones similares.

Etapa 3: Síntesis de 2-cloro-3-nitro-N-((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)-5,6,7,8-tetrahidroquinolin-4-amina

A 2,4-dicloro-3-nitro-5,6,7,8-tetrahidroquinolina (10,9 g, 44,5 mmol) y dimetilacetamida (55 ml, contiene 20 % de agua), se agregó trietilamina (9 g, 89,0 mmol, 12,4 ml) y luego (2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metanamina (12,7 g, 80,1 mmol) y la reacción se calentó a 35 °C durante 16 horas. La reacción se enfrió a 0°C, se agregó agua (70 ml) y la reacción se agitó durante 45 min. Los sólidos se filtraron y se lavaron con agua para proporcionar el compuesto del título como un sólido naranja. Rendimiento: 14,78 g, 39,96 mmol, 89,8 %. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 85,57 (br, s., 1H), 3,67-3,78 (m, 4H), 3,21 (d, J=4,68 Hz, 2H), 2,83 (t, J=5,66 Hz, 2H), 2,48 (t, J=5,66 Hz, 2H), 1,78-1,92 (m, 4H), 1,47 (d, J=5,85 Hz, 6H), 0,87 (s, 3H). LCMSm/z370,4 [M+H].

Etapa 4: Síntesis de N2,N2-bis(4-metoxibencil)-3-nitro-N4-((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)-5,6,7,8-tetrahidroquinolin-2,4-diamina

A 2-cloro-3-nitro-N-((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)-5,6,7,8-tetrahidroquinolin-4-amina (12,98 g, 35,09 mmol) se agregó bis(4-metoxibencil)amina (27,1 g, 105 mmol) e isopropanol (65 ml). La reacción se sometió a reflujo durante 51 horas, luego se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La reacción fue el diclorometano diluido (100 ml) y se filtró a través de Celite®. Los sólidos se lavaron con diclorometano (50 ml). Los orgánicos se concentraron y se diluyeron con etanol (40 ml) y se agitaron a temperatura ambiente durante 16 h. Los sólidos se filtraron, y el matraz se lavó con etanol (60 ml). Los sólidos se lavaron con etanol (30 ml) y se secaron al vacío para proporcionar un sólido amarillo. Rendimiento: 14,5 g, 24,6 mmol, 70,0 %. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 87,07-7,12 (m, 4H), 6,76-6,84 (m, 4H), 6,39 (t, J=5,66 Hz, 1H), 4,30 (s, 4H), 3,79 (s, 6H), 3,55-3,67 (m, 4H), 3,45 (d, J=5,85 Hz, 2H), 2,73 (t, J=6,44 Hz, 2H), 2,66 (t, J=5,85 Hz, 2H), 1,72-1,86 (m, 4H), 1,44 (s, 3H), 1,41 (s, 3H), 0,82-0,88 (m, 3H). LCMSm/z591,4 [M+H].

Etapa 5: N2,N2-bis(4-metoxibencil)-N4-((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)-5,6,7,8-tetrahidroquinolin-2,3,4-triamina

A N2,N2-bis(4-metoxibencil)-3-nitro-N4-((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)-5,6,7,8-tetrahidroquinolin-2,4-diamina (7,2 g, 12,2 mmol) se agregó metanol (40,6 ml), formiato de amonio (3,84 g, 60,9 mmol), y polvo de zinc (3,99 g, 60,9 mmol). La reacción se agitó durante 25 minutos. La reacción se filtró a través de un pad de Celite® y el filtrado se concentró. El residuo se disolvió en acetato de etilo, se lavó con agua, salmuera y el orgánico se secó en sulfato de sodio anhidro. La reacción se filtró y se concentró para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 6,83 g, 12,19 mmol, 100 %.1H RMN (400 MHz, CLoRoFORMO-d) 6 ppm 7,21 (d, J=8,59 Hz, 4 H), 6,81 (d, J=8,59 Hz, 4 H), 4,15 (s, 4 H), 3,99 (s, 2 H), 3,76 - 3,83 (m, 8 H), 3,63 - 3,70 (m, 2 H), 3,21 (br s, 2 H), 2,74 (br t, J=5,66 Hz, 2 H), 2,55 (br t, J=5,46 Hz, 2 H), 1,74 - 1,87 (m, 4 H), 1,48 (s, 3 H), 1,46 (s, 3 H), 0,93 (s, 3 H) LCMSm/z561,5 [M+H].

Etapa 6: Síntesis de N-(2-(bis(4-metoxibencil)amino)-4-(((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)amino)-5,6,7,8-tetrahidroquinolin-3-il)pentanamida

A N2,N2-bis(4-metoxibencil)-N4-((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)-5,6,7,8-tetra-hidroquinolin-2,3,4-triamina (6,84 g, 12,19 mmol) se agregó diclorometano (60,9 ml), agua (30,5 ml) y bicarbonato de sodio (2,56 g, 30,5 mmol). Se agregó cloruro de valerilo (1,62 g, 13,4 mmol, 1,59 ml) por goteo durante 1 minuto y luego se agitó durante 55 minutos. La capa orgánica se separó y el acuoso se lavó con diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron en sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron para proporcionar el compuesto del título que se usó sin purificación adicional. Rendimiento: 7,86 g, 12,19 mmol. LCMSm/z645,7 [M+H].

Etapa 7: Síntesis de 2-butil-N,N-bis(4-metoxibencil)-1-((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)-6,7,8,9-tetrahidro-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-4-amina

A N-(2-(bis(4-metoxibencil)amino)-4-(((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)amino)-5,6,7,8-tetrahidroquinolin-3-il)pentanamida (7,86 g, 12,19 mmol) se agregó etanol (122 ml) e hidróxido de sodio (4,88 g, 60,9 mmol, 3,22 ml, 50 % en peso de solución en agua). La reacción se calentó a 100 °C durante 48 horas. La reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y los sólidos se filtraron, se lavaron con etanol y se secaron para proporcionar el compuesto del título. Rendimiento: 6,7 g, 10,7 mmol, 87,7%. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 7,26 (d, J=8,59 Hz, 4 H), 6,81 (d, J=8,59 Hz, 4 H), 4,96 - 5,40 (m, 4 H), 4,39 - 4,72 (m, 2 H), 3,79 (s, 6 H), 3,41 -3,69 (m, 4 H), 2,63 -3,13 (m, 6 H), 1,84 (br s, 4 H), 1,69 (quin, J=7,51 Hz, 2 H), 1,57 (br s, 4 H), 1,46 (s, 6 H), 1,35 (dq, J=14,83, 7,41 Hz, 2 H), 0,89 (t, J=7,41 Hz, 3 H), 0,57 (s, 3 H). LCMSm /z627,7 [M+H].

Etapa 8: Síntesis de 2-((4-amino-2-butil-6,7,8,9-tetrahidro-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol

A 2-butil-N,N-bis(4-metoxibencil)-1-((2,2,5-trimetil-1,3-dioxan-5-il)metil)-6,7,8,9-tetrahidro-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-4-amina (6,70 g, 10,69 mmol) se agregó tolueno (32,4 ml) y ácido clorhídrico concentrado (21 ml). La reacción se calentó a 60 °C durante 3,25 horas. La capa acuosa se lavó con tolueno, se calentó hasta 60 °C y se llevó hasta pH 10 con carbonato de potasio sólido. La reacción se agitó luego a 60 °C durante 1 hora y 40 minutos y luego se enfrió hasta temperatura ambiente. Los sólidos se filtraron, se enjuagaron con agua y se secaron al vacío a 40 °C para proporcionar el Ejemplo (13). Rendimiento: 2,44 g, 7,04 mmol, 65,9 % de rendimiento. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 5,67 (br s, 2 H), 4,78 (br s, 2 H), 4,07 - 4,45 (m, 2 H), 2,71 -3,30 (m, 8 H), 2,66 (br s, 2 H), 1,53 - 1,93 (m, 6 H), 1,35 (m, J=7,34, 7,34, 7,34, 7,34, 7,34 Hz, 2 H), 0,91 (t, J=7,41 Hz, 3 H), 0,43 (s, 3 H). LCMSm /z347,3 [M+H].

Ejemplo (14): 2-((4-ammo-2-butM-7,8-dihidrocidopenta[b]imidazo[4,5-d]piridm-1(6H)-M)metM)-2-metilpropan-1,3-diol

Se preparó de manera similar al Ejemplo 13, a partir de 6,7-dihidro-5H-ciclopenta[b]piridin-2,4-diol. Seprepararon 336 mg (42,5%de rendimiento). Se purificó mediante HPLC (Columna: Welch Xtimate 75*40mm*3um; fase móvil A: 0,05 % de NH4OH en agua (v/v); fase móvil B: acetonitrilo; gradiente: 80 % de A a 40 % de A/60 % de B en 10 min, mantenimiento a 0 % de H2O/100 % de acetonitrilo durante 4 min. Flujo: 25 ml/min.). LCMSm/z333,1 [M+H]+. 1H RMN (400 MHz, DMSO) 85,72 (s, 2H), 4,80 (br. s., 2H), 4,14 (s, 2H), 3,25 (br. s., 3H), 2,99-3,34 (m, 3H), 2,88 (br. s., 2H), 2,62-2,78 (m, 2H), 2,02 (quin aparente, J=7,34 Hz, 2H), 1,64-1,75 (m, 2H), 1,35 (qd aparente, J=7,47, 14,74 Hz, 2H), 0,91 (t, J=7,28 Hz, 3H), 0,50 (s, 3H).

Ejemplo (15): 2-((4-amino-2-etil-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol

Se preparó de manera similar a 2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetiMH-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol, a partir de quinolin-2,4-diol.Se prepararon 301 mg. Se purificó mediante HPLC (Columna: Phenomenex Gemini NX-C18 150*30mm*5um; fase móvil A: 0,05 % de NH4OH en agua (v/v); fase móvil B: acetonitrilo; gradiente: 95 % de A a 55 % de A/45 % de B en 7 min, mantenimiento a 0 % de H2O/100 % de acetonitrilo durante 2 min. Flujo: 30 ml/min.) 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) d 8,51 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,58 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,38 (t, J=7,5 Hz, 1H), 7,18 (t, J=7,4 Hz, 1H), 6,43 (s, 2H), 4,98 (br s, 2H), 4,78 (br s, 1H), 4,45 (br s, 1H), 3,19 (br s, 4H), 3,02 (q, J=7,4 Hz, 2H), 1,34 (t, J=7,4 Hz, 3H), 0,55 (s, 3H). LCMSm/z315,1 [M+H]+.

Ejemplo (16): 2-((4-amino-2-propil-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol

Se preparó de manera similar al Ejemplo 13, a partir de quinolin-2,4-diol.Se prepararon 15,8 mg. Se purificó mediante HPLC (Columna: Waters XBridge C18 19x100, 5 um; fase móvil A: 0,03% de NH4OH en agua (v/v); fase móvil B: 0,03 % de NH4OH en acetonitrilo; gradiente: 95 % de A a 50 % de A/50 % de B en 8,5 min, mantenimiento a 0 % de H2O/100 % de acetonitrilo durante 1 min. Flujo: 25 ml/min.;). HPLC QC (Columna: Waters Atlantis dC184,6x50, 5 um; fase móvil A: 0,05 % de TFA en agua (v/v); fase móvil B: 0,05 % de TFA en acetonitrilo; gradiente: 95 % de A a 5 % de A/95 % de B en 4,0 min, mantenimiento a 5 % de H2O/95 % de acetonitrilo durante 1 min. Flujo: 2 ml/min.; tiempo de retención: 1,38min). LCMSm/z329,5 [M+H]+.

Ejemplo (17): 2-((4-ammo-2-(2-metoxietM)-7,8-dihidrocidopenta[b]imidazo[4,5-d]piridm-1(6H)-M)metM)-2-metilpropan-1,3-diol

El Ejemplo 17 se preparó de manera similar a 2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol, a partir de 6,7-dihidro-5H-ciclopenta[b]piridin-2,4-diol. Se prepararon 70 mg. Se purificó mediante HPLC (Columna: Phenomenex Gemini NX-C18 75*30mm*3um; fase móvil A: 0,05 % de NH4OH en agua (v/v); fase móvil B: acetonitrilo; gradiente: 100 % de A a 70 % de A/30 % de B en 7 min, mantenimiento a 0 % de H2O/100 % de acetonitrilo durante 2 min. Flujo: 30 ml/min.). LCMSm/z335,1 [M+H]+.

1H RMN (400 MHz, DMSO) 85,87 (br, s., 2H), 4,81 (br, s., 2H), 4,17 (br, s., 2H), 3,71 (t aparente, J=6,72 Hz,2H), 3,30 (br, s., 3H), 3,20-3,28 (m, 4H), 3,23 (s, 3H), 2,68-2,79 (m, 2H), 2,03 (quin, J=7,27 Hz, 2H), 0,50 (s, 3H). No se observó 1 protón (oculto).

Ejemplo (18): 2-((4-ammo-2-(2-metoxietil)-6,7,8,9-tetrahidro-1H-imidazo[4,5-c]qumolm-1-il)metM)-2-metilpropan-1,3-diol

El Ejemplo (18) se preparó de manera similar a 2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol, a partir de 5,6,7,8-tetrahidro-quinolin-2,4-diol. Se prepararon68mg. Se purificó mediante HPLC (Columna: Phenomenex Gemini NX-C18 75*30mm*3um; fase móvil A: 0,05 % de NH4OH en agua (v/v); fase móvil B: acetonitrilo; gradiente:100 % de A a 60 % de A/40 % de B en 7 min, mantenimiento a 0 % de H2O/100% de acetonitrilo durante 2 min. Flujo: 30 ml/min.). 1H RMN (400MHz, DMSO-da)85,70 (s, 2H), 4,82 (br s, 2H), 4,29 (br s, 2H), 3,69 (br s, 2H), 3,30 - 2,72 (m, 11H), 2,66 (br s, 2H), 1,74 (br s, 4H), 0,43 (s,3H). LCMSm /z349,2 [M+H]+.

Ejemplo (19): 2-((4-amino-2-(2-metoxietil)-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol

El Ejemplo (19) se preparó de manera similar a 2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropan-1,3-diol, a partir de quinolin-2,4-diol. Se prepararon 108 mg. Se purificó mediante HPLC (Columna: Phenomenex Gemini NX-C1875*30mm*3um; fase móvil A: 0,05 % de NH4OH en agua (v/v); fase móvil B: acetonitrilo; gradiente: 97 % de A a 57 % de A/43 % de B en 7 min, mantenimiento a 0 % de H2O/100% de acetonitrilo durante 2min. Flujo: 25 ml/min.;) LCMSm /z345,3 [M+H]+.1H RMN (400MHz, DMSO-d6)8= 8,52 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,58 (dd, J=1,1, 8,3 Hz, 1H), 7,43 - 7,34 (m, 1H), 7,23 - 7,14 (m, 1H), 6,45 (s, 2H), 5,00 (t, J=4,8 Hz, 2H), 4,76 (br s, 1H), 4,53 (br s, 1H), 3,79 (br s, 2H), 3,43 (br d, J=5,8 Hz, 3H), 3,30 -3,24 (m, 4H), 3,19 (br s, 2H), 0,55 (s, 3H).

Pruebas biológicas

Los ejemplos descritos se analizaron para determinar la actividad biológica en ensayos celulares funcionales con el uso de células HEK293 que sobreexpresan de manera estable TLR7 o TLR8humana. Los ensayos analizaron la capacidad de cada ejemplo para estimular la secreción de interferón alfa (IFNa) en células mononucleares de sangre primaria (PBMC) humana.

Ensayos funcionales de células hTLR7 y hTLR8

Con el fin de determinar la capacidad de cada ejemplo de activar un receptor tipo toll humano 7 (hTLR7) o receptor tipo toll humano8(hTLR8), se utilizaron sistemas indicadores a base de células. Las células HEK293 que sobreexpresaron de manera estable hTLR7 o hTLR8junto con un gen indicador que contenía un gen fosfatasa alcalina embriónica segregada (SEAP) optimizado, bajo el control del promotor mínimo IFN-b que se fusionó a cinco sitios de fijación a NF-kB y AP-1, se obtuvieron de Invivogen (HEK-Blue™ hTLR7, Cat. N.°Hkbhtlr7; HEK-Blue™ hTLR8, Cat. N^ Hkb-htlr8). La estimulación de hTLR7 o hTLR8en estas células activa NF-kB y AP-1 e induce la producción de SEAP que se puede cuantificar con el uso de un reactivo de detección de fosfatasa alcalina.

Las células se mantuvieron en medio de Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) (que contiene suero bovino fetal (FBS) inactivado con calor (10 %), Glutamax (2 mM), penicilina/estreptomicina, blasticidina (10 pg/ml), zeocina (100 pg/ml) y normocina (100 pg/ml)). El primer día de ensayo, los ejemplos se prepararon usando diluciones seriales semilogarítmicas de 11 puntos de una solución de reserva de DMSO 10 mM y se detectaron 50 nl en placas Viewplate de 384 cavidades (PerkinElmer, Cat. N^ 6007480). El agonista TLR7/8de control positivo y el control negativo (DMSO, no está en ejemplos) también se detectaron en la placa de ensayo y seusaron para determinar el porcentaje de efecto durante el proceso de análisis. Después de la resuspensión en medio de ensayo DMEM con FBS inactivado por calor (10 %), Glutamax (2 mM) y penicilina/estreptomicina, se agregaron 10.000 células/20 pl/cavidades a placas preparadas anteriormente. Las placas se incubaron durante la noche (16-20 h) a 37o C en un entorno de 5 % de CO2. Se usaron tapas Microclime (Labcyte, LLS-0310) humedecidas previamente para evitar la evaporación. El segundo día de ensayo, se preparó el reactivo de detección QUANTI-Blue™ mediante la reconstitución con polvo QUANTI-Blue™ (InvivoGen, Rep-qb1) con 100 ml de agua estéril y se equilibró hasta 37o C durante 15 minutos. 20 pl de reactivo de detección QUANTI-Blue™ se agregaron a cada placa y las placas se incubaron a temperatura ambiente durante 180 min. Al finalizar la incubación, las placas se leyeron en un lector de placas Envision (Perkin Elmer) con captura de absorbancia a 650 nm.

Con el uso de controles positivos (agonista de TLR7/8) y negativos (DMSO), el porcentaje (%) de efecto se calculó en cada ejemplo con la siguiente ecuación:

% de efecto = 100 - [100 * {(ejemplo - control positivo) / (control negativo - control positivo)}]

El % de efecto en cada concentración de cada ejemplo se calculó utilizando un paquete desoftwareABase (IBDS) y se relacionó con la cantidad de SEAP producida en las cavidades de control positivo y negativo en cada placa de ensayo. Las concentraciones y los valores de % de efecto para cada ejemplo se ajustaron usando un modelo de logística de 4 parámetros en ABase y se calculó la concentración de cada ejemplo que produjo 50 % de respuesta (EC50).

Ensayo de INFa de células mononucleares de sangre periférica (PBMC)

Con el fin de determinar la capacidad de cada ejemplo de inducir la liberación de interferón alfa (IFNa) de células mononucleares de sangre periférica (PBMC) recientemente aisladas, se utilizó un ensayo de fluorescencia homogénea de resolución temporal (HTRF). Se recolectó sangre humana de donantes sanos a través de punción venosa de acuerdo con los protocolos de Pfizer (N.° de protocolo GOHW RDP-01), aprobados por Shulman Institutional Review Board. 50 ml de muestra de sangre venosa humana de donantes individuales se heparinizaron mediante la adición a un tubo cónico con 714 unidades de inyección de heparina sódica MDV (Fresenius Kabi, Cat. N^ 70041) y luego, varias veces, mediante la inversión suave del tubo. Luego se transfirió sangre a un matraz, el tubo cónico se enjuagó con 40 ml de PBS que contenían 2 mM de EDTA (PBS-EDTA), y el enjuague se agregó al matraz de sangre mezclando suavemente. Se agregaron 30 ml de la sangre diluida a 3 tubos Histopaque separados (Sigma, Cat. N^ A0561), con aplicación directa a la frita. Los tubos Histopaque se centrifugaron durante 15 min a 1000 x g en una centrífuga de mesa. Luego de la separación por densidad, se aspiró la fase superior en exceso de plasma hasta ~5 ml por encima de la interfaz y el plasma restante junto con la interfaz turbia que contenía PBMC decantó suavemente en un nuevo tubo cónico. 15 ml de PBS-EDTA se agregaron al tubo Histopaque y se giraron suavemente para retirar las PBMC restantes que se adhirieron a la pared del tubo y este lavado se agregó a las PBMC existentes en el tubo. El volumen del tubo se llevó a 40 ml con PBS-EDTA y los tubos se centrifugaron a 250 x g durante 12 minutos a temperatura ambiente. Después de la aspiración del sobrenadante, el pelet se volvió a suspender suavemente con 10 ml de PBS-EDTA y se centrifugó nuevamente a 250 x g durante 12 minutos. El sobrenadante resultante se decantó, y el pelet se volvió a suspender en 20 ml de amortiguador de lisado ACK (ThermoFisher, Cat. N^ A10492-01) y luego se incubó a temperatura ambiente durante 5 minutos. El volumen de cada tubo se llevó a 50 ml con la adición de PBS-EDTA y los tubos se centrifugaron a 177 x g durante 12 minutos a temperatura ambiente. El pelet de PBMC se volvió a suspender en 10 ml de PBSsinEDTA y los tubos se centrifugaron por última vez a 177 x g durante 10 minutos. El sobrenadante decantó y las PBMC se volvieron a suspender en medio de ensayo (medio de base RPMI con 10 % de FBS inactivado con calor, 2mM de Glutamax y penicilina/estreptomicina).

Cada ejemplo se preparó para el ensayo con el uso de diluciones seriales semilogarítmicas de 11 puntos de una solución de reserva de DMSO 2,5 mM y se detectaron 400 nl en placas Viewplate de 384 cavidades (Perkin Elmer, Cat. N^ 6007480). Los controles positivo y negativo (descritos anteriormente) también se detectaron en la placa de ensayo y se usaron para determinar el porcentaje de efecto durante el proceso de análisis. Se hizo un recuento de las PBMC y se colocaron en placas a una densidad de 100.000 células/100pl/cavidad; las placas se cubrieron con una tapa Microclime humedecida previamente para evitar la evaporación y se incubaron durante 24 h a 37o C en una atmósfera de 5 % de CO2. Al finalizar la incubación, la tapa Microclime se retiró y las placas se centrifugaron a 1000 rpm durante 5 minutos. 16 pl de medio condicionado de la placa de células se transfirieron a una placa separada de bajo volumen de 384 cavidades (Greiner One, 784080). Los niveles de IFNa se cuantificaron con el uso de un kit HTRF® (Cisbio, Cat. N^ 62HIFNAPEG) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. El kit proporciona dos anticuerpos específicos diferentes, uno etiquetado con D2 (aceptor) y el otro etiquetado con criptato (donante), y amortiguador de detección. Las reservas de anticuerpo se diluyeron 1:20 en amortiguador de detección. Para una placa de 384 cavidades, se agregaron 62,5 pl de reserva de anticuerpo D2 y 62,5 pl de reserva de anticuerpo de criptato a 2,375 ml de amortiguador de detección, y se mezclaron bien. Se agregaron 4 pl de la mezcla de anticuerpos a cada cavidad que contenía medios obtenidos de la cavidad correspondiente de la placa Viewplate. Las placas de bajo volumen se sellaron y se incubaron durante 24 horas a temperatura ambiente. La señal de HTRf se leyó con un lector de placas de etiqueta múltiple Envision (Perkin Elmer) con excitación de 330 nm y emisiones de 615 nm y 665 nm. Los resultados se calcularon como (relación 665nm/615nM)*10.000 y los datos sin procesar se convirtieron a una concentración de IFNa (pg/ml) usando la curva estándar de citocina. Como se analizó anteriormente, los controles positivos (agonista de TLR7/8) y negativos (DMSO) se usaron para calcular el porcentaje (%) de efecto en cada ejemplo con la siguiente ecuación:

% de efecto = 100 - [100 * {(ejemplo - control positivo) / (control negativo - control positivo)}]

El % de efecto de cada concentración de cada ejemplo se calculó utilizando un paquete desoftwareABase (IBDS) y se relacionó con la cantidad de IFNa producida en las cavidades de control positivo y negativo en cada placa de ensayo. Las concentraciones y los valores de % de efecto para cada ejemplo se ajustaron usando un modelo de logística de 4 parámetros en ABase y la concentración de ejemplo que produjo 50 % de respuesta (EC50) se calculó y se proporcionó en la Tabla 1, como la media geométrica EC50 cuando un ejemplo se analizó más de una vez. Una celda en blanco en la Tabla 1 indica que no se obtuvieron datos para ese ejemplo en ese ensayo específico.

Tabla 1

Todas las publicaciones y solicitudes de patente citadas en la memoria descriptiva se incorporan a la presente por referencia en su totalidad. Será evidente para las personas del oficio de nivel medio que se pueden realizar algunos cambios y modificaciones sin apartarse del espíritu o alcance de las reivindicaciones adjuntas.

Claims (14)

1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de fórmula (I)

   o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R1 y R2 son independientemente alquilo C1-3; o R1 y R2 están unidos para formar un anillo carbocíclico de 5 a 7 miembros, donde dicho anillo carbocíclico puede estar saturado o insaturado; R3 es

   R4 es alquilo C1-6, o (CH2 )nO(CH2)mCH3, en el que el alquilo C1-6 o cualquier carbono del grupo (CH2 )nO(CH2)mCH3 está sustituido con 0 a 3 halógenos según lo permita la valencia; R5 es alquilo C1-3, o Oalquilo C1-3, en el que el alquilo C1-3 está sustituido con 0 a 3 F; R6 es H, o alquilo C1-3, en el que el alquilo C1-3 está sustituido con 0 a 3 F; m es 0 a 2 ; y n es 1 a 3.
2. 2. El compuesto de la reivindicación 1 de Fórmula (la):

   o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R1 y R2 son independientemente alquilo C1-2; o R1 y R2 están unidos para formar un anillo carbocíclico de 5 a 7 miembros, en el que dicho anillo carbocíclico puede estar saturado o insaturado; R3 es

   R4 es alquilo C3-5, o (CH2 )nO(CH2)mCH3; R5 es alquilo C1.2; R6 es H; m es 1; y n es 1.
3. 3. El compuesto de la reivindicación 1 de Fórmula (lb):

   o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R1 y R2 son independientemente alquilo C1-3; o R1 y R2 están unidos para formar un anillo carbocíclico de 5 a 7 miembros, en el que dicho anillo carbocíclico puede estar saturado o insaturado; R3 es

   R4 es alquilo C1-6, o (CH2 )nO(CH2)mCH3, en el que dicho alquilo C1-6 o cualquier carbono del grupo (CH2 )nO(CH2)mCH3 está sustituido con 0 a 3 halógenos según lo permita la valencia, en el qie halógeno es F; R5 es alquilo C1-3, u O-alquilo C1-3, en el que el alquilo C1-3 está sustituido con 0 a 3 F; R6 es H, o alquilo C1-3, en el que el alquilo C1-3 está sustituido con 0 a 3 F; m es 0 a 2 ; y n es 1 a 3.
4. 4. El compuesto de la reivindicación 3, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R1 y R2 son independientemente alquilo C1-2; o R1 y R2 están unidos para formar un anillo carbocíclico de 5 a 7 miembros, en el que dicho anillo carbocíclico puede estar saturado o insaturado; R3 es

   R5 es alquilo C1-3, o O alquilo C1-3, en el que el alquilo C1-3 está sustituido por 0 a 2 F; y R6 es H.
5. 5. El compuesto de la reivindicación 4, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R5 es alquilo C1-2.
6. 6. El compuesto de la reivindicación 1 que se selecciona entre: 2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1 H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropano-1,3-diol; 2-((4-amino-2-(etoximetil)-1 H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropano-1,3-diol; 2-((4-amino-2-(etoximetil)-7,8-dihidrociclopenta[b]imidazo[4,5-d]piridin-1(6H)il)metil)-2-metilpropano-1,3-diol; 2- ((4-amino-2-(etoximetil)-6,7, 8 , 9-tetrahidro-1H-im idazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropano-1,3-diol; 3- (4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)-2-(metoximetil)-2-metilpropan-1-ol; (R) -3-(4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)-2-(metoximetil)-2-metilpropan-1-ol; (S) -3-(4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1 H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)-2-(metoximetil)-2-metilpropan-1-ol; 2-((4-amino-6,7-dimetil-2-(2 ,2,2-trifluoroetil)-1 H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropano-1,3-diol; 2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1 H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-etilpropano-1,3-diol; 2-((4-amino-2-butil-1 H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropano-1, 3-diol; 2-((4-amino-2-butil-6,7-dimetil-1 H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropano-1,3-diol; y 2-((4-amino-2-pentil-1 H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropano-1,3-diol; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
7. 7. El compuesto de la reivindicación 6 que es 2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropano-1,3-diol; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
8. 8. El compuesto de la reivindicación 7 que es 2-((4-amino-2-(etoximetil)-6,7-dimetil-1H-imidazo[4,5-c]piridin-1-il)metil)-2-metilpropano-1,3-diol.
9. 9. El compuesto de la reivindicación 1 que se selecciona entre: 2-((4-amino-2-butil-6,7,8,9-tetrahidro-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropano-1,3-diol; 2-((4-amino-2-butil-7,8-dihidrociclopenta[b]imidazo[4,5-d]piridin-1(6H)-il)metil)-2-metilpropano-1,3-diol; 2-((4-amino-2-etil-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-1-il)metil)-2-metilpropano-1,3-diol; y 2-((4-amino-2-propil-1 H-imidazo[4,5-c]quinolin-1 -il)metil)-2-metilpropano-1,3-diol; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
10. 10. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y al menos un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable.
11. 11. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso como medicamento.
12. 12. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento del cáncer en un sujeto en necesidad del mismo.
13. 13. Un compuesto para su uso en el tratamiento del cáncer según la reivindicación 12, en el que dicho cáncer es carcinoma de células basales, cáncer de pulmón de células pequeñas, cáncer de pulmón de células no pequeñas, linfoma no Hodgkin, cáncer de ovario, cáncer colorrectal, cáncer de riñón, cáncer de próstata, cáncer de tiroides, melanoma, cáncer de páncreas, cáncer de vejiga, hepatoma, cáncer de mama o cáncer de cabeza y cuello.
14. 14. Un compuesto para su uso en el tratamiento del cáncer según la reivindicación 12, en el que dicho tratamiento comprende la administración de al menos un agente terapéutico adicional.