ES3029063T3

ES3029063T3 - Benzothiadiazepine compounds and their use as bile acid modulators

Info

Publication number: ES3029063T3
Application number: ES20821142T
Authority: ES
Inventors: Per-Göran Gillberg; Ingemar Starke; Santosh S Kulkarni
Original assignee: Albireo AB
Current assignee: Albireo AB
Priority date: 2019-12-04
Filing date: 2020-12-04
Publication date: 2025-06-23
Anticipated expiration: 2040-12-04
Also published as: CN114761018A; EP4069247B1; US20210171483A1; JP7665620B2; EP4069247C0; EP4069247A1; JP2023504644A; US11225466B2; CN114761018B; CA3158184A1

Abstract

La invención se refiere a derivados de 1,2,5-benzotiadiazepina de fórmula (I). Estos compuestos son moduladores de ácidos biliares con actividad inhibidora del transportador apical de ácidos biliares dependiente de sodio (ASBT) y/o del transporte hepático de ácidos biliares (LBAT). La invención también se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden estos compuestos y a su uso en el tratamiento de enfermedades cardiovasculares, trastornos del metabolismo de los ácidos grasos y de la utilización de la glucosa, enfermedades gastrointestinales y enfermedades hepáticas. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Compuestos de benzotiadiazepina y su uso como moduladores de ácidos biliares

REFERENCIA CRUZADA A SOLICITUDES RELACIONADAS

[0001] Esta solicitud reivindica prioridad sobre la solicitud india n.° 201911049980, presentada el 4 de diciembre de 2019.

CAMPO TÉCNICO

[0002] La invención se refiere a 1,2,5-benzotiadiazepina de fórmula (I). Estos compuestos son moduladores de ácidos biliares con actividad inhibidora del transportador apical de ácidos biliares dependiente de sodio (ASBT) y/o del transporte hepático de ácidos biliares (LBAT). La invención también se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden estos compuestos y a su uso en el tratamiento de enfermedades cardiovasculares, trastornos del metabolismo de los ácidos grasos y de la utilización de la glucosa, enfermedades gastrointestinales y enfermedades hepáticas.

ANTECEDENTES

[0003] Los ácidos biliares son detergentes fisiológicos que desempeñan un papel importante en la absorción y el transporte intestinal de lípidos, nutrientes y vitaminas. También son moléculas de señalización que activan receptores nucleares y vías de señalización celular que regulan el metabolismo lipídico, de la glucosa y energético. Los ácidos biliares son ácidos esteroides que se sintetizan a partir del colesterol en el hígado y se almacenan en la vesícula biliar en forma de micelas mixtas. Durante la digestión, el duodeno desencadena la liberación de hormonas que provocan la contracción de la vesícula biliar, liberando así ácidos biliares en el intestino delgado, donde permiten la absorción de vitaminas liposolubles y colesterol. Al llegar al íleon, los ácidos biliares se reabsorben desde el intestino y se secretan a la sangre portal para regresar al hígado a través de la circulación venosa portal. Más del 90 % de los ácidos biliares se reciclan y regresan al hígado. Estos ácidos biliares se transportan a través de la membrana sinusoidal de los hepatocitos y se secretan de nuevo a través de la membrana canalicular hacia la bilis. En este primer paso, entre el 75 % y el 90 % de los ácidos biliares son captados por los hepatocitos, completando así una ronda de circulación enterohepática. La fracción de ácidos biliares que no se depura en el hígado entra en la circulación sistémica, donde los ácidos biliares libres son filtrados por el glomérulo renal, recuperados eficientemente en los túbulos proximales y exportados de nuevo a la circulación sistémica. Curiosamente, la mayoría de los ácidos biliares secretados a través de la membrana canalicular hacia la bilis provienen del reservorio recirculante, y menos del 10 % proviene de la síntesis hepáticade novo.La pequeña fracción de ácidos biliares que no se reabsorbe en el íleon llega al colon.

[0004] Dentro del lumen intestinal, los ácidos biliares primarios se transforman en ácidos biliares secundarios por acción de las bacterias intestinales, principalmente mediante reacciones de deshidroxilación simple o doble del núcleo esteroide. Los ácidos biliares que escapan a la absorción intestinal se excretan posteriormente en las heces. En general, el eficiente sistema de transporte ayuda a mantener un acervo constante de ácidos biliares, asegurando niveles suficientemente altos de ácidos biliares conjugados en el intestino para promover la absorción de lípidos y reducir la carga bacteriana del intestino delgado. El sistema también minimiza la pérdida de ácidos biliares fecales y urinarios y protege los compartimentos intestinales y hepatobiliares eliminando detergentes potencialmente citotóxicos (como lo revisaron Kosters y Karpen (Xenobiotica 2008, vol. 38, p. 1043-1071); Chiang (J. Lipid Res. 2009, vol. 50, p. 1955-1966); y Dawson (Handb. Exp. Pharmacol. 2011, vol. 201, p. 169-203)).

[0005] Se ha descubierto que la regulación del tamaño del depósito de ácidos biliares desempeña un papel clave en la homeostasis del colesterol mediante la conversión hepática del colesterol en ácidos biliares, lo que representa una vía principal para la eliminación del colesterol del organismo. El hígado desempeña un papel esencial en la eliminación de compuestos endógenos y xenobióticos del organismo. La secreción hepatobiliar normal y la circulación enterohepática son necesarias para la eliminación de compuestos endógenos como el colesterol y la bilirrubina, así como sus metabolitos, manteniendo así la homeostasis de lípidos y ácidos biliares. (Kosters y Karpen, Xenobiotica 2008, vol. 38, p. 1043-1071)

[0006] La reabsorción de ácidos biliares en el íleon puede ser inhibida por compuestos inhibidores del transportador apical de ácidos biliares dependiente de sodio (ASBT). Se ha descrito que la inhibición de la reabsorción de ácidos biliares es útil en el tratamiento de diversas enfermedades, como la dislipidemia, la diabetes, la obesidad, el estreñimiento, las enfermedades hepáticas colestásicas, la esteatohepatitis no alcohólica y otras enfermedades hepáticas. Se han descrito varios compuestos inhibidores de ASBT en las últimas décadas, véase, por ejemplo, WO 93/16055, WO 94/18183, WO 94/18184, WO 96/05188, WO 96/08484, WO 96/16051, WO 97/33882, WO 98/38182, WO 98/07449, WO 98/40375, WO 99/35135, WO 99/64409, WO 99/64410, WO 00/47568, WO 00/61568, WO 00/38725, WO 00/38726, WO 00/38727, WO 00/38728, WO 00/38729, WO 01/66533, WO 01/68096, WO 02/32428, WO 02/50051, WO 03/020710, WO 03/022286, WO 03/022825, WO 03/022830, WO 03/061663, WO 03/091232, WO 03/106482, WO 2004/006899, WO 2004/076430, WO 2007/009655, WO 2007/009656, WO 2011/137135, WO 2011/150286, WO 2013/063512, WO 2019/234077, WO 2020/161216, WO 2020/161217, DE 19825804, EP 864582, EP 489423, EP 549967, EP 573848, EP 624593, EP 624594, EP 624595, EP 624596, EP 0864582, EP 1173205, EP 1535913 y EP 3210977.

[0007] A pesar de la cantidad de compuestos inhibidores de ASBT que se han informado anteriormente, existe una necesidad de compuestos moduladores de ácidos biliares adicionales que tengan un perfil optimizado con respecto a la potencia, selectividad y biodisponibilidad.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

[0008] Se ha descubierto que ciertos derivados de 1,2,5-benzotiadiazepina son potentes inhibidores del transportador de ácidos biliares dependiente de sodio apical (ASBT) y/o del transportador de ácidos biliares hepático (LBAT), y pueden ser útiles para tratar enfermedades en las que es deseable la inhibición de la circulación de ácidos biliares.

[0009] En un primer aspecto, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I)

en donde

R1 y R2 son cada uno independientemente alquilo C<1-4>;

R3 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, hidroxi, alquilo C<1-4>, haloalquilo C<1-4>, alcoxi C<1-4>, haloalcoxi C<1-4>, ciano, nitro, amino, ^-(alquil C<1-4>)amino, W,W-di(alquil C<1-4>)amino, y W-(aril-alquil C<1-4>)amino;

n es un número entero 1, 2 o 3; y

R4 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, hidroxi, ciano, alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, alcoxi C<1-4>, cicloalquiloxi C<3-6>, alquiltio C<1.4>, cicloalquiltio C<3-6>, amino, A/-(alquil C<1-4>)amino y N,N-di(alquil C<1>.

<4>)amino;

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

con la condición de que el compuesto no sea un compuesto del grupo que consiste en:

ácido 2-((3,3-dibutil-7-metil-5-fenil-1,1-dióxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acético; ácido 2-((3,3-dibutil-7-(metiltio)-5-fenil-1,1-dióxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acético; y

ácido 2-((7-bromo-3,3-dibutil-5-fenil-1,1-dióxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acético.

[0010] En algunas formas de realización, R1 es n-butilo.

[0011] En algunas formas de realización, R2 es alquilo -C2-4. En una forma de realización preferida, R2 es etilo. En otra forma de realización preferida, R2 es n-propilo. En otra forma de realización preferida, R2 es n-butilo.

[0012] En algunas formas de realización, R3 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, hidroxi, ciano, haloalquilo C<1-4>, alcoxi C<1-4>y haloalcoxi C<1-4>. En una forma de realización preferida, R3 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, flúor, cloro, bromo, hidroxi, ciano, trifluorometilo, metoxi y trifluorometoxi.

[0013] En una forma de realización preferida, n es 1, es decir, el anillo fenilo está sustituido únicamente con un sustituyente R3. En otra forma de realización preferida, R3 está en posición para.

[0014] En algunas formas de realización, R4 se selecciona del grupo que consiste en halógeno, hidroxi, ciano, alquilo C<1>-<4>, alcoxi C<1-4>, alquiltio C<1-4>, amino, ^-(alquil e x a m in o y N,N-di(alquil C ^am ino . En una forma de realización preferida, R4 se selecciona del grupo que consiste en flúor, cloro, bromo, hidroxi, ciano, metilo, metoxi, etoxi, metiltio, etiltio, amino, metilamino y dimetilamino. En otra forma de realización preferida, R4 se selecciona del grupo que consiste en flúor, cloro, bromo, hidroxi, ciano, metoxi, etoxi, metiltio, etiltio y dimetilamino.

[0015] En una forma de realización preferida, el compuesto de fórmula (I) es un compuesto de fórmula (I-a)

en donde

R2 es alquilo C<2-4>;

R3 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, hidroxi, ciano, haloalquilo C<1-4>, alcoxi C<1-4>y haloalcoxi C<1-4>;

n es un número entero 1 o 2;

R4 se selecciona del grupo que consiste en halógeno, hidroxi, ciano, alquilo C<1-4>, alcoxi C<1-4>, alquiltio C<1-4>, amino, ^-(alquil C<1-4>)amino y N,N-di(-alquil C<1-4>)amino;

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

ácido 2-((3,3-dibutil-7(metiltio)-5-fenil-1,1-dióxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acético; y

ácido 2-((7-bromo3,3-dibutil5-fenil-1,1-dióxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acético.

[0016] En otra forma de realización preferida, el compuesto de fórmula (I) es un compuesto de fórmula (I-b)

en donde

R2 es etilo, n-propilo o n-butilo;

R3 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, flúor, cloro, bromo, hidroxi, ciano, trifluorometilo, metoxi y trifluorometoxi;

R4 se selecciona del grupo que consiste en flúor, cloro, bromo, hidroxi, ciano, metoxi, etoxi, metiltio, etiltio y dimetilamino;

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

[0017] Los compuestos preferidos de la invención son compuestos de fórmula (I-b), como se define anteriormente, donde M y R1 a R4 son como se indica en la Tabla 1 a continuación, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos: Tabla 1

(Continuación)

[0018] En una forma de realización particular, el compuesto de fórmula (I) se selecciona del grupo que consiste en:

ácido 2-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidrobenzo-1,2,5-tiadiazepin-8-il)oxi)acético; ácido (S)-2-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acético; y

ácido (R)-2-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acético;

0 una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0019] Como se utiliza en este documento, el término "halo" se refiere a flúor, cloro, bromo y yodo.

[0020] Como se utiliza en este documento, el término "alquilo Ci-a" se refiere a un grupo alquilo lineal o ramificado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono, y el término "alquilo C<1>-<4>" se refiere a un grupo alquilo lineal o ramificado que tiene de 1 a 4 átomos de carbono. Los ejemplos de alquilo C<1-4>incluyen metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, secbutilo y terc-butilo.

[0021] Como se usa en este documento, el término "haloalquilo C<1>-a" se refiere a un grupo alquilo C<1-4>lineal o ramificado, como se define en este documento, en el que uno o más átomos de hidrógeno han sido reemplazados por halógeno. Ejemplos de haloalquilo C<1-4>incluyen clorometilo, fluoroetilo y trifluorometilo.

[0022] Tal como se utilizan en el presente documento, los términos "alcoxi C<1>-<4>" y "alquiltio C<1>-<4>" se refieren a un grupo alquilo C<1-4>lineal o ramificado unido al resto de la molécula a través de un átomo de oxígeno o azufre, respectivamente.

[0023] Como se usa en este documento, el término "cicloalquilo C<3>-a" se refiere a un anillo hidrocarbonado monocíclico saturado con entre 3 y 6 átomos de carbono. Ejemplos de cicloalquilo C<3>-a incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo.

[0024] El término "arilo" se refiere a un anillo monocíclico aromático compuesto por 6 átomos de carbono o a un sistema de 6 anillos bicíclicos aromáticos compuesto por 10 átomos de carbono. Ejemplos de arilo incluyen fenilo, naftilo y azulenilo.

[0025] El término "amino" se refiere a un grupo -NH2. En este documento, los términos "W-falquil C<1>-<4>)amino" y "N,N-di(alquil C<1>-<4>)amino" se refieren a un grupo amino en el que uno o ambos átomos de hidrógeno, respectivamente, están reemplazados por un grupo alquilo C<1-4>lineal o ramificado. Ejemplos de W-(alquil C<1>-<4>)amino incluyen metilamino, etilamino y terc-butilamino, y ejemplos de W,W-di-(alquil C<1>-<4>)amino incluyen dimetilamino y dietilamino.

[0026] Como se utiliza en este documento, el término "W-(aril-C<1-4>alquil)amino" se refiere a un grupo amino en el que un átomo de hidrógeno se sustituye por un grupo aril-C<1-4>alquil. Ejemplos de W-(aril-C<1-4>alquil)amino incluyen bencilamino y feniletilamino.

[0027] Como se utiliza en este documento, el término "farmacéuticamente aceptable" se refiere a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación que son adecuados para uso farmacéutico humano y que son generalmente seguros, no tóxicos y no son biológicamente ni de otro modo indeseables.

[0028] Como se utiliza en este documento, el término "aproximadamente" se refiere a un valor o parámetro que incluye (y describe) formas de realización dirigidas a dicho valor o parámetro en sí. Por ejemplo, la descripción que hace referencia a "aproximadamente 20" incluye la descripción de "20". Los rangos numéricos incluyen los números que definen el rango. En general, el término "aproximadamente" se refiere al valor indicado de la variable y a todos los valores de la variable que se encuentran dentro del error experimental del valor indicado (p. ej., dentro del intervalo de confianza del 95 % para la media) o dentro del 10 % del valor indicado, el que sea mayor.029* ;;[0029] Los compuestos de 1,2,5-benzotiadiazepina de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, son inhibidores del transportador apical de ácidos biliares dependiente de sodio (inhibidores ASBT), del transportador hepático de ácidos biliares (inhibidores LBAT) o de ambos transportadores (inhibidores duales ASBT/LBAT). Por lo tanto, son útiles en el tratamiento o la prevención de afecciones, trastornos y enfermedades en las que es deseable la inhibición de la circulación de ácidos biliares, como enfermedades cardiovasculares, trastornos del metabolismo de ácidos grasos y de la utilización de glucosa, enfermedades gastrointestinales y enfermedades hepáticas. ;;[0030] Las enfermedades cardiovasculares y los trastornos del metabolismo de los ácidos grasos y la utilización de la glucosa incluyen, pero no se limitan a, hipercolesterolemia; trastornos del metabolismo de los ácidos grasos; diabetes mellitus tipo 1 y tipo 2; complicaciones de la diabetes, incluyendo cataratas, enfermedades micro y macrovasculares, retinopatía, neuropatía, nefropatía y cicatrización retardada de heridas, isquemia tisular, pie diabético, arteriosclerosis, infarto de miocardio, síndrome coronario agudo, angina de pecho inestable, angina de pecho estable, accidente cerebrovascular, enfermedad oclusiva arterial periférica, miocardiopatía, insuficiencia cardíaca, trastornos del ritmo cardíaco y reestenosis vascular; enfermedades relacionadas con la diabetes tales como resistencia a la insulina (homeostasis de la glucosa deteriorada), hiperglucemia, hiperinsulinemia, niveles elevados de ácidos grasos o glicerol en sangre, obesidad, dislipidemia, hiperlipidemia incluyendo hipertrigliceridemia, síndrome metabólico (síndrome X), aterosclerosis e hipertensión; y para aumentar los niveles de lipoproteínas de alta densidad. ;;[0031] Las enfermedades y trastornos gastrointestinales incluyen estreñimiento (incluyendo estreñimiento crónico, estreñimiento funcional, estreñimiento idiopático crónico (CIC), estreñimiento intermitente/esporádico, estreñimiento secundario a diabetes mellitus, estreñimiento secundario a accidente cerebrovascular, estreñimiento secundario a enfermedad renal crónica, estreñimiento secundario a esclerosis múltiple, estreñimiento secundario a enfermedad de Parkinson, estreñimiento secundario a esclerosis sistémica, estreñimiento inducido por fármacos, síndrome del intestino irritable con estreñimiento (SII-E), síndrome del intestino irritable mixto (SII-M), estreñimiento funcional pediátrico y estreñimiento inducido por opioides); enfermedad de Crohn; malabsorción primaria de ácidos biliares; síndrome del intestino irritable (SII); enfermedad inflamatoria intestinal (EII); inflamación ileal; y la enfermedad por reflujo y sus complicaciones, como el esófago de Barrett, la esofagitis por reflujo biliar y la gastritis por reflujo biliar. ;;[0032] Una enfermedad hepática, tal como se define en el presente documento, es cualquier enfermedad del hígado y de los órganos conectados con él, como el páncreas, la vena porta, el parénquima hepático, el árbol biliar intrahepático, el árbol biliar extrahepático y la vesícula biliar. En algunos casos, una enfermedad hepática es una enfermedad hepática dependiente de ácidos biliares. Las enfermedades y trastornos hepáticos incluyen, entre otros, un trastorno metabólico hereditario del hígado; errores congénitos de la síntesis de ácidos biliares; anomalías congénitas de los conductos biliares; atresia biliar; atresia biliar pos-Kasai; atresia biliar postrasplante de hígado; hepatitis neonatal; colestasis neonatal; formas hereditarias de colestasis; xantomatosis cerebrotendinosa; un defecto secundario de la síntesis de BA; síndrome de Zellweger; enfermedad hepática asociada a la fibrosis quística; deficiencia de alfa1-antitripsina; síndrome de Alagilles (ALGS); síndrome de Byler; un defecto primario de la síntesis de ácidos biliares (AB); colestasis intrahepática familiar progresiva (CIPF) que incluye CIPF-1, CIPF-2, CIPF-3 y CIPF no especificada, CIPF posderivación biliar y CIPF postrasplante de hígado; colestasis intrahepática recurrente benigna (BRIC) que incluye BRIC1, BRIC2 y BRIC no especificada, BRIC posderivación biliar y BRIC postrasplante de hígado; hepatitis autoinmune; cirrosis biliar primaria (CBP); fibrosis hepática; enfermedad del hígado graso no alcohólico (EHGNA); esteatohepatitis no alcohólica (EHNA); hipertensión portal; colestasis; colestasis del síndrome de Down; colestasis inducida por fármacos; colestasis intrahepática del embarazo (ictericia durante el embarazo); colestasis intrahepática; colestasis extrahepática; colestasis asociada a nutrición parenteral (PNAC); colestasis asociada a niveles bajos de fosfolípidos; síndrome de colestasis por linfedema 1 (LSC1); colangitis esclerosante primaria (CEP); colangitis asociada a inmunoglobulina G4; colangitis biliar primaria; colelitiasis (cálculos biliares); litiasis biliar; coledocolitiasis; pancreatitis por cálculos biliares; enfermedad de Caroli; neoplasia maligna de los conductos biliares; neoplasia maligna que causa obstrucción del árbol biliar; estenosis biliares; colangiopatía del SIDA; colangiopatía isquémica; prurito debido a colestasis o ictericia; pancreatitis; enfermedad hepática autoinmune crónica que conduce a colestasis progresiva; esteatosis hepática; hepatitis alcohólica; hígado graso agudo; hígado graso del embarazo; hepatitis inducida por fármacos; trastornos por sobrecarga de hierro; defecto congénito de la síntesis de ácidos biliares tipo 1 (SAB tipo 1); lesión hepática inducida por fármacos (DIL1); fibrosis hepática; fibrosis hepática congénita; cirrosis hepática; histiocitosis de células de Langerhans (LCH); colangitis esclerosante por ictiosis neonatal (NISCH); protoporfiria eritropoyética (EPP); ductopenia idiopática del adulto (IAD); hepatitis neonatal idiopática (INH); escasez no sindrómica de conductos biliares interlobulillares (NS PILBD); cirrosis infantil de indios norteamericanos (NAIC); sarcoidosis hepática; amiloidosis; enterocolitis necrotizante; toxicidades causadas por ácidos biliares séricos, incluyendo alteraciones del ritmo cardíaco (p. ej., fibrilación auricular) en el contexto de un perfil anormal de ácidos biliares séricos, miocardiopatía asociada con cirrosis hepática ("colecardia") y atrofia muscular esquelética asociada con enfermedad hepática colestásica; enfermedad hepática poliquística; hepatitis virales (incluidas las hepatitis A, B, C, D y E); carcinoma hepatocelular (hepatoma); colangiocarcinoma; cánceres gastrointestinales relacionados con ácidos biliares; y colestasis causada por tumores y neoplasias del hígado, las vías biliares y el páncreas. Los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, también son útiles para potenciar el tratamiento con corticosteroides en la hepatopatía.03*

[0033] Otras enfermedades que pueden tratarse o prevenirse con los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, incluyen síndromes de hiperabsorción (incluida la abetalipoproteinemia, la hipobetalipoproteinemia familiar (FHBL), la enfermedad de retención de quilomicrones (CRD) y la sitosterolemia); hipervitaminosis y osteopetrosis; hipertensión; hiperfiltración glomerular; enfermedad renal poliquística (PKD), incluida la enfermedad renal poliquística autosómica dominante (ADPKD) y la enfermedad renal poliquística autosómica recesiva (ARPKD); y prurito de insuficiencia renal. Los compuestos también son útiles en la protección contra la lesión renal asociada a enfermedades hepáticas o metabólicas.

[0034] El transporte de ácidos biliares en el cuerpo humano está controlado por la acción de los miembros de la familia SLClO de proteínas transportadoras de solutos, en particular por el polipéptido cotransportador de taurocolato de Na+ (NTCP, también llamado transportador de ácidos biliares del hígado (LBAT); símbolo génico SLC10A1), que se expresa en la membrana sinusoidal de los hepatocitos, y por el transportador de ácidos biliares dependiente de sodio apical (ASBT, también llamado transportador de ácidos biliares ileales (IBAT), ISBT, ABAT o NTCP2; símbolo génicoSLC10A2),que se expresa en la membrana apical de los enterocitos ileales, las células del túbulo renal proximal, el epitelio biliar, los colangiocitos grandes y las células epiteliales de la vesícula biliar. En el hígado, los ácidos biliares se extraen eficientemente de la sangre portal mediante el transportador hepático de ácidos biliares (LBAT) y se resecretan a través de la membrana canalicular mediante la bomba de exportación de sales biliares (BSEP; símbolo génicoABCB11).La reabsorción de ácidos biliares en el íleon es gestionada por el transportador apical de ácidos biliares dependiente de sodio (ASBT), donde se le conoce comúnmente como transportador ileal de ácidos biliares (IBAT). Tanto el LBAT como el ASBT funcionan como cotransportadores electrógenos de sodio-soluto que transportan dos o más iones Na+ por molécula de soluto.

[0035] Xenobióticos y endobióticos, incluidos los ácidos biliares, son captados por el hígado desde la sangre portal y secretados a la bilis por proteínas de transporte específicas con especificidades de sustrato individuales. Los ácidos biliares conjugados con glicina y taurina existen en forma aniónica y no pueden atravesar las membranas por difusión; por lo tanto, dependen completamente de las proteínas de transporte de membrana para entrar o salir del hepatocito (Kosters y Karpen, Xenobiotica 2008, vol. 38, p. 1043-1071). Los ácidos biliares conjugados con glicina y taurina (ASBT) y los ácidos biliares conjugados con LBAT (LBAT) prefieren las sales biliares conjugadas con glicina y taurina a sus contrapartes no conjugadas y muestran mayor afinidad por las sales biliares dihidroxiladas que por las trihidroxiladas. Aún no se han identificado sustratos no biliares para los ácidos biliares conjugados con glicina y taurina; sin embargo, también se ha observado que los ácidos biliares conjugados con LBAT transportan diversos sulfatos esteroides, hormonas y xenobióticos.

[0036] La LBAT no está tan completamente caracterizada como la ASBT en términos de requisitos de inhibición de fármacos. Dong et al. identificaron fármacos aprobados por la FDA que inhiben la LBAT humana y compararon los requisitos de inhibición de la LBAT y la ASBT. Se realizó una serie de estudios de inhibición de la LBAT utilizando fármacos aprobados por la FDA, en conjunción con el desarrollo de un modelo computacional iterativo. Los estudios de cribado<identificaron 27 fármacos como nuevos inhibidores de la LBAT, incluyendo irbesartán (Ki = 11,9 j>M)<y ezetimiba (Ki = 25,0 j>M).<El farmacóforo común indicó que dos hidrófobos y un aceptor de enlaces de hidrógeno eran importantes para>la inhibición de la LBAT. De 72 fármacos cribados in vitro, un total de 31 inhibieron la LBAT, mientras que 51 fármacos (es decir, más de la mitad) inhibieron la ASBT. Por lo tanto, si bien hubo superposición de inhibidores, el ASBT inesperadamente fue más permisivo a la inhibición del fármaco que el LBAT, y esto puede estar relacionado con que el LBAT posee menos características de farmacóforo (Dong et al., Mol. Pharm. 2013, vol. 10, p. 1008-1019).

[0037] Vaz et al. describen la identificación de la deficiencia de LBAT como un nuevo error innato del metabolismo con un fenotipo clínico relativamente leve. La identificación de la deficiencia de LBAT confirma que este transportador es el principal sistema de importación de sales biliares conjugadas al hígado, pero también indica que los transportadores auxiliares son capaces de mantener el ciclo enterohepático en su ausencia (Vaz et al., Hepatology 2015, vol. 61, p. 260 267). Estos hallazgos respaldan la hipótesis de que la inhibición de LBAT es un mecanismo de acción seguro, ya que los hepatocitos aún tienen la capacidad de absorber la cantidad necesaria de ácidos biliares.

[0038] Liu et al. describen la identificación de un nuevo tipo de hipercolonemia asociada a la homocigosidad para la mutación p.Ser267Phe enSLC10A1(LBAT). La frecuencia alélica de esta mutación en el genSLC10A1varía en diferentes poblaciones, con la mayor incidencia en el sur de China (8 % y 12 % en los chinos Han y Dai, respectivamente) y en Vietnam (11 %). Se cree que esta hipercolonemia "oculta" afecta al 0,64 % de la población Han del Sur, al 1,44 % de la población china Dai y al 1,21 % de la población vietnamita. También se observó un aumento en los niveles séricos de BA conjugada y no conjugada en los individuos homocigotos. Liu et al. sugieren que este hallazgo probablemente se deba a una reducción del transporte de BA desde la circulación portal hacia los hepatocitos. Esto respalda la hipótesis de que la función fisiológica de la circulación enterohepática no es solo reciclar los ácidos biliares, sino también eliminarlos de la circulación para lograr la homeostasis (Karpen y Dawson, Hepatology 2015, vol. 61, p.24-27). Alternativamente, el hígado puede sintetizar mayores niveles de ácidos biliares para compensar la reducción de la recirculación enterohepática en los portadores homocigotos. Dado que la LBAT también transporta ácidos biliares no conjugados, el aumento de estos ácidos en este estudio no fue sorprendente (Liu et al., Scientific Reports 2017, 7: 9214, pág. 1-7).

[0039] Se ha descubierto que la LBAT está regulada a la baja en varias formas de lesión hepática colestásica y colestasis, mientras que la ASBT presenta una regulación negativa en diversos trastornos gastrointestinales, como la enfermedad de Crohn, la malabsorción primaria de ácidos biliares, la enfermedad inflamatoria intestinal y la inflamación ileal, pero una regulación positiva en la colestasis. La LBAT también funciona como receptor celular para la entrada viral del virus de la hepatitis B (VHB) y el virus de la hepatitis D (VHD), que a su vez son la principal causa de enfermedad hepática y carcinoma hepatocelular.04

[0040] Se ha investigado la inhibición de ASBT para disminuir los niveles plasmáticos de colesterol y mejorar la resistencia a la insulina, así como para aliviar la carga hepática de ácidos biliares en la hepatopatía colestásica. Además, se ha descubierto que la inhibición de la ASBT restablece los niveles de insulina y la normoglucemia, lo que la convierte en un tratamiento prometedor para la diabetes mellitus tipo 2. Los inhibidores de la ASBT también se utilizan para el tratamiento del estreñimiento funcional.

[0041] Dado que la ASBT se expresa predominantemente en el íleon (donde a menudo se denomina IBAT), no es necesario que sus inhibidores estén disponibles sistémicamente. Por otro lado, la ASBT también se expresa en las células del túbulo proximal de los riñones. Por lo tanto, los inhibidores de la ASBT que están disponibles sistémicamente también pueden inhibir la recaptación de ácidos biliares en los riñones. Se cree que esto conduciría a un aumento de los niveles de ácidos biliares en la orina y a una mayor eliminación de ácidos biliares del organismo a través de la orina. Por lo tanto, se espera que los inhibidores de la ASBT disponibles sistémicamente que ejercen su efecto no solo en el íleon sino también en los riñones conduzcan a una mayor reducción de los niveles de ácidos biliares que los inhibidores de la ASBT no disponibles sistémicamente que solo ejercen su efecto en el íleon.

[0042] Los compuestos que tienen una alta potencia inhibidora de ASBT son particularmente adecuados para el tratamiento de enfermedades hepáticas que causan colestasis, tales como colestasis intrahepática familiar progresiva (CIPF), síndrome de Alagilles, atresia biliar y esteatohepatitis no alcohólica (EHNA).

[0043] La atresia biliar es una enfermedad hepática pediátrica poco frecuente que implica un bloqueo parcial o total (o incluso la ausencia) de los conductos biliares grandes. Esta obstrucción o ausencia causa colestasis, lo que conlleva la acumulación de ácidos biliares que daña el hígado. En algunas formas de realización, la acumulación de ácidos biliares se produce en el árbol biliar extrahepático. En algunas formas de realización, la acumulación de ácidos biliares se produce en el árbol biliar intrahepático. El tratamiento de referencia actual es el procedimiento de Kasai, una cirugía que extirpa los conductos biliares obstruidos y conecta directamente una porción del intestino delgado con el hígado. Actualmente no existen terapias farmacológicas aprobadas para este trastorno.

[0044] Se prevén en este documento usos en un método para el tratamiento de la atresia biliar en un sujeto que lo necesite. Dicho método comprende la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas formas de realización, el sujeto se ha sometido al procedimiento de Kasai antes de la administración de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas formas de realización, se administra al sujeto un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo antes de someterse al procedimiento de Kasai. En algunas formas de realización, el tratamiento de la atresia biliar disminuye el nivel sérico de ácidos biliares en el sujeto. En algunas formas de realización, el nivel sérico de ácidos biliares se determina, por ejemplo, mediante un ensayo enzimático ELISA o mediante los ensayos para la medición de ácidos biliares totales descritos en Danese et al., PLoS One. 2017, vol. 12(6): e0179200. En algunas formas de realización, el nivel de ácidos biliares séricos puede disminuir, por ejemplo, entre un 10 % y un 40 %, entre un 20 % y un 50 %, entre un 30 % y un 60 %, entre un 40 % y un 70 %, entre un 50 % y un 80 % o más del 90 % del nivel de ácidos biliares séricos previo a la administración de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas formas de realización, el tratamiento de la atresia biliar incluye el tratamiento del prurito.

[0045] La CIPF es un trastorno genético poco común que se estima que afecta a entre uno de cada 50.000 y 100.000 niños nacidos en todo el mundo y causa una enfermedad hepática progresiva y potencialmente mortal.

[0046] Una manifestación de la CIPF es el prurito, que a menudo reduce considerablemente la calidad de vida. En algunos casos, la CIPF provoca cirrosis e insuficiencia hepática. Las terapias actuales incluyen la derivación biliar externa parcial (DEPF) y el trasplante de hígado; sin embargo, estas opciones pueden conllevar un riesgo considerable de complicaciones posquirúrgicas, así como problemas psicológicos y sociales.

[0047] Se han identificado tres defectos genéticos alternativos que se correlacionan con tres subtipos distintos de CIPF, conocidos como tipos 1, 2 y 3:

• La CIPF tipo 1, a veces denominada "enfermedad de Byler", se debe a una secreción biliar deficiente debido a mutaciones en el gen ATP8B1, que codifica una proteína que ayuda a mantener un equilibrio adecuado de grasas, conocidas como fosfolípidos, en las membranas celulares de los conductos biliares. Un desequilibrio en estos fosfolípidos se asocia con colestasis y niveles elevados de ácidos biliares en el hígado. Las personas afectadas por CIPF tipo 1 suelen desarrollar colestasis en los primeros meses de vida y, en ausencia de tratamiento quirúrgico, progresan a cirrosis y enfermedad hepática terminal antes de la primera década de vida.

• La CIPF tipo 2, a veces denominada «síndrome de Byler», se debe a una secreción deficiente de sales biliares debido a mutaciones en el gen ABCB11, que codifica una proteína, conocida como bomba de exportación de sales biliares, que transporta los ácidos biliares fuera del hígado. Las personas con CIPF tipo 2 suelen desarrollar insuficiencia hepática durante los primeros años de vida y tienen un mayor riesgo de desarrollar un tipo de cáncer de hígado conocido como carcinoma hepatocelular.

• La CIPF tipo 3, que suele presentarse en los primeros años de la infancia con colestasis progresiva, se debe a mutaciones en el gen ABCB4, que codifica un transportador que transporta fosfolípidos a través de las membranas celulares.

[0048] Además, se ha propuesto que las mutaciones en los genes TJP2, NR1H4 o Myo5b sean causas de CIPF. Además, algunos sujetos con CIPF no presentan una mutación en ninguno de los genes ATP8B1, ABCB11, ABCB4, TJP2, NR1H4 o Myo5b. En estos casos, se desconoce la causa de la afección. Las Tablas 2 y 3 enumeran ejemplos de mutaciones del gen ATP8B1 o de la proteína resultante, con numeración basada en la proteína ATP8B1 humana de tipo silvestre (p. ej., SEQ ID NO: 1) o el gen (p. ej., SEQ ID NO: 2). Las Tablas 4 y 5 enumeran ejemplos de mutaciones del gen ABCB11 o de la proteína resultante, con numeración basada en la proteína ABCB11 humana de tipo silvestre (p. ej., SEQ ID NO: 3) o el gen (p. ej., SEQ ID NO: 4).

[0049] Como podrán apreciar los expertos en la materia, una posición de aminoácido en una secuencia de proteína de referencia que corresponde a una posición de aminoácido específica de aminoácido en la SEQ ID NO: 1 o 3 se puede determinar alineando la secuencia de proteína de referencia con la SEQ ID NO: 1 o 3 (p. ej., utilizando un programa informático como ClustalW2). Los cambios en estos residuos (denominados en este documento "mutaciones") pueden incluir sustituciones de uno o más aminoácidos, inserciones dentro o flanqueando las secuencias, y deleciones dentro o flanqueando las secuencias. Como podrán apreciar los expertos en la materia, la posición de un nucleótido en una secuencia génica de referencia que corresponde a una posición específica de nucleótido en la SEQ ID NO: 2 o 4 se puede determinar alineando la secuencia génica de referencia con la SEQ ID NO: 2 o 4 (p. ej., utilizando un programa informático como ClustalW2). Los cambios en estos residuos (denominados en este documento "mutaciones") pueden incluir sustituciones de uno o varios nucleótidos, inserciones dentro o flanqueando las secuencias, y deleciones dentro o flanqueando las secuencias. Véase también Kooistra, et al., "KLIFS: Una base de datos de interacción estructural quinasaligando", Nucleic Acids Res. 2016, vol. 44, n.° D1, págs. D365-D371.

Secuencia proteica canónica de ATP8B1 (SEQ ID NO: 1) - Uniprot ID O43520.

[0050]

MSTERDSETT FDEDSQPNDE VVPYSDDETE DELDDQGSAV EPEQNRVNRE AEENREPFRK

ECTWQVKAND RKYHEQPHFMNTKFLCIKES KYANNAIKTY KYNAFTFIPMNLFEQFKRAA

NLYFLALLIL QAVPQISTLA WYTTLVPLLV VLGVTAIKDL VDDVARHKMD KEINNRTCEV

IKDGRFKVAKWKEIOVGDVI RLKKNDFVPA DILLLSSSEP NSLCYVETAE LDGETNLKFK

MSLEITDOYL OREDTLATFD GFIECEEPNN RLDKFTGTLF WRNTSFPLDA DKILLRGCVI

R NTDFCHG T.V TF A G A D TK TM K N S G K TR FK R TKTDYT.M NYM V Y T T F V V T .T T , T.SAGT.ATGHA

YWEAQVGNSS WYLYDGEDDT PSYRGFLIFW GYIIVLNTMV PISLYVSVEV IRLGQSHFIN

WDLOMYYAEK DTPAKARTTT LNEOLGOIHY IFSDKTGTLT ONIMTFKKCC INGOIYGDHR

DASOHNHNKI EOVDFSWNTY ADGKLAFYDH YLIEOIOSGK EPEVROFFFL LAVCHTVMVD

RTDGOLNYOAASPDEGALVN AARNFGFAFLARTONTITIS ELGTERTYNV LAILDFNSDR

KRMSIIVRTP EGNIKLYCKG ADTVIYERLH RMNPTKOETO DALDIFANET LRTLCLCYKE

IEEKEFTEWN KKFMAASVAS TNRDEALDKV YEEIEKDLIL LGATAIEDKL ODGVPETISK

LAKADIKIWVLTGDKKETAE NIGFACELLT EDTTICYGED INSLLHARME NORNRGGVYA

KFAPPVOESF FPPGGNRALI ITGSWLNEIL LEKKTKRNKI LKLKFPRTEE ERRMRTOSKR

RLEAKKEQRQ KNFVDLACEC SAVICCRVTP KQKAMVVDLV KRYKKAITLA IGDGANDVNM

IKTAHIGVGI SGQEGMQAVM SSDYSFAQFR YLQRLLLVHG RWSYIRMCKF LRYFFYKNFA

FTLVHFWYSF FNGYSAQTAY EDWFITLYNV LYTSLPVLLM GLLDQDVSDKLSLRFPGLYI

VGQRDLLFNY KRFFVSLLHG VLTSMILFFI PLGAYLQTVG QDGEAPSDYQ SFAVTIASAL

VITVNFQIGL DTSYWTFVNA FSIFGSIALY FGIMFDFHSA GIHVLFPSAF QFTGTASNAL

RQPYIWLTII LAVAVCLLPV VAIRFLSMTI WPSESDKIQK HRKRLKAEEQ WQRRQQVFRR

GVSTRRSAYA FSHQRGYADL ISSGRSIRKK RSPLDAIVAD GTAEYRRTGD S

Secuencia proteica canónica de ATP8B1 (SEQ ID NO: 2)

[0051]

ATG AGT ACA GAA AGA GAC TCA GAA ACG ACA TTT GAC GAG GAT TCT CAG CCT AAT GAC GAA GTG GTT CCC TAC AGT GAT GAT GAA ACA GAA GAT GAA CTT GAT GAC CAG GGG TCT GCT GTT GAA CCA GAA CAA AAC CGA GTC AAC AGG GAA GCA GAG GAG AAC CGG GAG CCA TTC AGA AAA GAA TGT ACA TGG CAA GTC AAA GCA AAC GAT CGC AAG TAC CAC GAA CAA CCT CAC TTT ATG AAC ACA AAA TTC TTG TGT ATT AAG GAG AGT AAA TAT GCG AAT AAT GCA ATT AAA ACA TAC AAG TAC AAC GCA TTT ACC TTT ATA CCA ATG AAT CTG TTT GAG CAG TTT AAG AGA GCA GCC AAT TTA TAT TTC CTG GCT CTT CTT ATC TTA CAG GCA GTT CCT CAA ATC TCT ACC CTG GCT TGG TAC ACC ACA CTA GTG CCC CTG CTT GTG GTG CTG GGC GTC ACT GCA ATC AAA GAC CTG GTG GAC GAT GTG GCT CGC CAT AAA ATG GAT AAG GAA ATC AAC AAT AGG ACG TGT GAA GTC ATT AAG GAT GGC AGG TTC AAA GTT GCT AAG TGG AAA GAA ATT CAA GTT GGA GAC GTC ATT CGT CTG AAA AAA AAT GAT TTT GTT CCA GCT GAC ATT CTC CTG CTG TCT AGC TCT GAG CCT AAC AGC CTC TGC TAT GTG GAA ACA GCA GAA CTG GAT GGA GAA ACC AAT TTA AAA TTT AAG ATG TCA CTT GAA ATC ACA GAC CAG TAC CTC CAA AGA GAA GAT ACA TTG GCT ACA TTT GAT GGT TTT ATT GAA TGT GAA GAA CCC AAT AAC AGA CTA GAT AAG TTT ACA GGA ACA CTA TTT TGG AGA AAC ACA AGT TTT CCT TTG GAT GCT GAT AAA ATT TTG TTA CGT GGC TGT GTA ATT AGG AAC ACC GAT TTC TGC CAC GGC TTA GTC ATT TTT GCA GGT GCT GAC ACT AAA ATA ATG AAG AAT AGT GGG AAA ACC AGA TTT AAA AGA ACT AAA ATT GAT TAC TTG ATG AAC TAC ATG GTT TAC ACG ATC TTT GTT GTT CTT ATT CTG CTT TCT GCT GGT CTT GCC ATC GGC CAT GCT TAT TGG GAA GCA CAG GTG GGC AAT TCC TCT TGG TAC CTC TAT GAT GGA GAA GAC GAT ACA CCC TCC TAC CGT GGA TTC CTC ATT TTC TGG GGC TAT ATC ATT GTT CTC AAC ACC ATG GTA CCC ATC TCT CTC TAT GTC AGC GTG GAA GTG ATT CGT CTT GGA CAG AGT CAC TTC ATC AAC TGG GAC CTG CAA ATG TAC TAT GCT GAG AAG GAC ACA CCC GCA AAA GCT AGA ACC ACC ACA CTC AAT GAA CAG CTC GGG CAG ATC CAT TAT ATC TTC TCT GAT AAG ACG GGG ACA CTC ACA CAA AAT ATC ATG ACC TTT AAA AAG TGC TGT ATC AAC GGG CAG ATA TAT GGG GAC CAT CGG GAT GCC TCT CAA CAC AAC CAC AAC AAA ATA GAG CAA GTT GAT TTT AGC TGG AAT ACA TAT GCT GAT GGG AAG CTT GCA TTT TAT GAC CAC TAT CTT ATT GAG CAA ATC CAG TCA GGG AAA GAG CCA GAA GTA CGA CAG TTC TTC TTC TTG CTC GCA GTT TGC CAC ACA GTC ATG GTG GAT AGG ACT GAT GGT CAG CTC AAC TAC CAG GCA GCC TCT CCC GAT GAA GGT GCC CTG GTA AAC GCT GCC AGG AAC TTT GGC TTT GCC TTC CTC GCC AGG ACC CAG AAC ACC ATC ACC ATC AGT GAA CTG GGC ACT GAA AGG ACT TAC AAT GTT CTT GCC ATT TTG GAC TTC AAC AGT GAC CGG AAG CGA ATG TCT ATC ATT GTA AGA ACC CCA GAA GGC AAT ATC AAG CTT TAC TGT AAA GGT GCT GAC ACT GTT ATT TAT GAA CGG TTA CAT CGA ATG AAT CCT ACT AAG CAA GAA ACA CAG GAT GCC CTG GAT ATC TTT GCA AAT GAA ACT CTT AGA ACC CTA TGC CTT TGC TAC AAG GAA ATT GAA GAA AAA GAA TTT ACA GAA TGG AAT AAA AAG TTT ATG GCT GCC AGT GTG GCC TCC ACC AAC CGG GAC GAA GCT CTG GAT AAA GTA TAT GAG GAG ATT GAA AAA GACTTA ATT CTC CTG GGA GCT ACA GCT ATT GAA GAC AAG CTA CAG GAT GGA GTT CCA GAA ACC ATT TCA AAA CTT GCA AAA GCT GAC ATT AAG ATC TGG GTG CTT ACT GGA GAC AAA AAG GAA ACT GCT GAA AAT ATA GGA TTT GCT TGT GAA CTT CTG ACT GAA GAC ACC ACC ATC TGC TAT GGG GAG GAT ATT AAT TCT CTT CTT CAT GCA AGG ATG GAA AAC CAG AGG AAT AGA GGT GGC GTC TAC GCA AAG TTT GCA CCT CCT GTG CAG GAA TCT TTT TTT CCA CCC GGT GGA AAC CGT GCC TTA ATC ATC ACT GGT TCT TGG TTG AAT GAA ATT CTT CTC GAG AAA AAG ACC AAG AGA AAT AAG ATT CTG AAG CTG AAG TTC CCA AGA ACA GAA GAA GAA AGA CGG ATG CGG ACC CAA AGT AAA AGG AGG CTA GAA GCT AAG AAA GAG CAG CGG CAG AAA AAC TTT GTG GAC CTG GCC TGC GAG TGC AGC GCA GTC ATC TGC TGC CGC GTC ACC CCC AAG CAG AAG GCC ATG GTG GTG GAC CTG GTG AAG AGG TAC AAG AAA GCC ATC ACG CTG GCC ATC GGA GAT GGG GCC AAT GAC GTG AAC ATG ATC AAA ACT GCC CAC ATT GGC GTT GGA ATA AGT GGA CAA GAA GGA ATG CAA GCT GTC ATG TCG AGT GAC TAT TCC TTT GCT CAG TTC CGA TAT CTG CAG AGG CTA CTG CTG GTG CAT GGC CGA TGG TCT TAC ATA AGG ATG TGC AAG TTC CTA CGA TAC TTC TTT TAC AAA AAC TTT GCC TTT ACT TTG GTT CAT TTC TGG TAC TCC TTC TTC AAT GGC TAC TCT GCG CAG ACT GCA TAC GAG GAT TGG TTC ATC ACC CTC TAC AAC GTG CTG TAC ACC AGC CTG CCC GTG CTC CTC ATG GGG CTG CTC GAC CAG GAT GTG AGT GAC AAA CTG AGC CTC CGA TTC CCT GGG TTA TAC ATA GTG GGA CAA AGA GAC TTA CTA TTC AAC TAT AAG AGA TTC TTT GTA AGC TTG TTG CAT GGG GTC CTA ACA TCG ATG ATC CTC TTC TTC ATA CCT CTT GGA GCT TAT CTG CAA ACC GTA GGG CAG GAT GGA GAG GCA CCT TCC GAC TAC CAG TCT CTT GCC GTC ACC ATT GCC TCT GCT CTT GTA ATA ACA GTC AAT TTC CAG ATT GGC TTG GAT ACT TCT TAT TGG ACT TTT GTG AAT GCT TTT TCA ATT TTT GGA AGC ATT GCA CTT TAT TTT GGC ATC ATG TTT GAC TTT CAT AGT GCT GGA ATA CAT GTT CTC TTT CCA TCT GCA TTT CAA TTT ACA GGC ACA GCT TCA AAC GCT CTG AGA CAG CCA TAC ATT TGG TTA ACT ATC ATC CTG GCT GTT GCT GTG TGC TTA CTA CCC GTC GTT GCC ATT CGA TTC CTG TCA ATG ACC ATC TGG CCA TCA GAA AGT GAT AAG ATC CAG AAG CAT CGC AAG CGG TTG AAG GCG GAG GAG CAG TGG CAG CGA CGG CAG CAG GTG TTC CGC CGG GGC GTG TCA ACG CGG CGC TCG GCC TAC GCC TTC TCG CAC CAG CGG GGC TAC GCG GAC CTC ATC TCC TCC GGG CGC AGC ATC CGC AAG AAG CGC TCG CCG CTT GAT GCC ATC GTG GCG GAT GGC ACC GCG GAG TAC AGG CGC ACC GGG GAC AGC TGA

Tabla 2. Mutaciones ejemplares de ATP8B1

(Continuación)

Tabla 3. Mutaciones seleccionadas de ATP8B1 asociadas con CIPF-1

(Continuación)

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[0053] En algunas formas de realización, la mutación en ATP8B1 se selecciona entre L127P, G308V, T456M, D554N, F529del, I661T, E665X, R930X, R952X, R1014X y G1040R.

Secuencia proteica canónica de ABCB11 (SEQ ID NO: 3) - Uniprot ID O95342

[0054]

MSDSVILRSI KKFGEENDGF ESDKSYNNDK KSRLQDEKKG DGVRVGFFQL FRFSSSTDIW LMFVGSLCAF LHGIAQPGVL LIFGTMTDVF IDYDVELQEL QIPGKACVNN TIVWTNSSLN QNMTNGTRCG LLNIESEMIK FASYYAGIAV AVLITGYIQI CFWVIAAARQ IQKMRKFYFR RIMRMEIGWF DCNSVGELNT RFSDDINKIN DAIADQMALF IQRMTSTICG FLLGFFRGWK LTLVIISVSP LIGIGAATIG LSVSKFTDYE LKAYAKAGW ADEVISSMRT VAAFGGEKRE VERYEKNLVF AQRWGIRKGI VMGFFTGFVW CLIFLCYALA FWYGSTLVLD EGEYTPGTLV QIFLSVIVGA LNLGNASPCL EAFATGRAAA TSIFETIDRK PIIDCMSEDG YKLDRIKGEI EFHNVTFHYP SRPEVKILND LNMVIKPGEM TALVGPSGAG KSTALQLIQR FYDPCEGMVT VDGHDIRSLN IQWLRDQIGI VEQEPVLFST TIAENIRYGR EDATMEDIVQ AAKEANAYNF IMDLPQQFDT LVGEGGGQMS GGQKQRVAIA RALIRNPKIL LLDMATSALD NESEAMVQEV LSKIQHGHTI ISVAHRLSTV RAADTIIGFE HGTAVERGTH EELLERKGVY FTLVTLQSQG NQALNEEDIK DATEDDMLAR TFSRGSYQDS LRASIRQRSK SQLSYLVHEP PLAWDHKST YEEDRKDKDI PVQEEVEPAP VRRILKFSAP EWPYMLVGSV GAAVNGTVTP LYAFLFSQIL GTFSIPDKEE QRSQINGVCL LFVAMGCVSL FTQFLQGYAF AKSGELLTKR LRKFGFRAML GQDIAWFDDL RNSPGALTTR LATDASQVQG AAGSQIGMIV NSFTNVTVAM IIAFSFSWKL SLVILCFFPF LALSGATQTR MLTGFASRDK QALEMVGQIT NEALSNIRTV AGIGKERRFI EALETELEKP FKTAIQKANI YGFCFAFAQC IMFIANSASY RYGGYLISNE GLHFSYVFRV ISAWLSATA LGRAFSYTPS YAKAKISAAR FFQLLDRQPP ISVYNTAGEK WDNFQGKIDF VDCKFTYPSR PDSQVLNGLS VSISPGQTLA FVGSSGCGKS TSIQLLERFY DPDQGKVMID GHDSKKVNVQ FLRSNIGIVS QEPVLFACSI MDNIKYGDNT KEIPMERVIA AAKQAQLHDF VMSLPEKYET NVGSQGSQLS RGEKQRIAIA RAIVRDPKIL LLDEATSALD TESEKTVQVA LDKAREGRTC IVIAHRLSTI QNADIIAVMA QGVVIEKGTH EELMAQKGAY YKLVTTGSPI S

Secuencia de ADN canónica de ABCB11 (SEQ ID NO: 4)

[0055]

ATG TCT GAC TCA GTA ATT CTT CGA AGT ATA AAG AAA TTT GGA GAG GAG AAT

GAT GGT TTT GAG TCA GAT AAA TCA TAT AAT AAT GAT AAG AAA TCA AGG TTA

CAA GAT GAG AAG AAA GGT GAT GGC GTT AGA GTT GGC TTC TTT CAA TTG TTT

CGG TTT TCT TCA TCA ACT GAC ATT TGG CTG ATG TTT GTG GGA AGT TTG TGT

GCA TTT CTC CAT GGA ATA GCC CAG CCA GGC GTG CTA CTC ATT TTT GGC ACA

ATG ACA GAT GTT TTT ATT GAC TAC GAC GTT GAG TTA CAA GAA CTC CAG ATT

CCA GGA AAA GCA TGT GTG AAT AAC ACC ATT GTA TGG ACT AAC AGT TCC CTC

AAC CAG AAC ATG ACA AAT GGA ACA CGT TGT GGG TTG CTG AAC ATC GAG AGC

GAA ATG ATC AAA TTT GCC AGT TAC TAT GCT GGA ATT GCT GTC GCA GTA CTT

ATC ACA GGA TAT ATT CAA ATA TGC TTT TGG GTC ATT GCC GCA GCT CGT CAG

ATA CAG AAA ATG AGA AAA TTT TAC TTT AGG AGA ATA ATG AGA ATG GAA ATA

GGG TGG TTT GAC TGC AAT TCA GTG GGG GAG CTG AAT ACA AGA TTC TCT GAT

GAT ATT AAT AAA ATC AAT GAT GCC ATA GCT GAC CAA ATG GCC CTT TTC ATT

CAG CGC ATG ACC TCG ACC ATC TGT GGT TTC CTG TTG GGA TTT TTC AGG GGT

TGG AAA CTG ACC TTG GTT ATT ATT TCT GTC AGC CCT CTC ATT GGG ATT GGA

GCA GCC ACC ATT GGT CTG AGT GTG TCC AAG TTT ACG GAC TAT GAG CTG AAG

GCC TAT GCC AAA GCA GGG GTG GTG GCT GAT GAA GTC ATT TCA TCA ATG AGA

ACA GTG GCT GCT TTT GGT GGT GAG AAA AGA GAG GTT GAA AGG TAT GAG AAA

AAT CTT GTG TTC GCC CAG CGT TGG GGA ATT AGA AAA GGA ATA GTG ATG GGA TTC TTT ACT GGA TTC GTG TGG TGT CTC ATC TTT TTG TGT TAT GCA CTG GCC TTC TGG TAC GGC TCC ACA CTT GTC CTG GAT GAA GGA GAA TAT ACA CCA GGA ACC CTT GTC CAG ATT TTC CTC AGT GTC ATA GTA GGA GCT TTA AAT CTT GGC AAT GCC TCT CCT TGT TTG GAA GCC TTT GCA ACT GGA CGT GCA GCA GCC ACC AGC ATT TTT GAG ACA ATA GAC AGG AAA CCC ATC ATT GAC TGC ATG TCA GAA GAT GGT TAC AAG TTG GAT CGA ATC AAG GGT GAA ATT GAA TTC CAT AAT GTG ACC TTC CAT TAT CCT TCC AGA CCA GAG GTG AAG ATT CTA AAT GAC CTC AAC ATG GTC ATT AAA CCA GGG GAA ATG ACA GCT CTG GTA GGA CCC AGT GGA GCT GGA AAA AGT ACA GCA CTG CAA CTC ATT CAG CGA TTC TAT GAC CCC TGT GAA GGA ATG GTG ACC GTG GAT GGC CAT GAC ATT CGC TCT CTT AAC ATT CAG TGG CTT AGA GAT CAG ATT GGG ATA GTG GAG CAA GAG CCA GTT CTG TTC TCT ACC ACC ATT GCA GAA AAT ATT CGC TAT GGC AGA GAA GAT GCA ACA ATG GAA GAC ATA GTC CAA GCT GCC AAG GAG GCC AAT GCC TAC AAC TTC ATC ATG GAC CTG CCA CAG CAA TTT GAC ACC CTT GTT GGA GAA GGA GGA GGC CAG ATG AGT GGT GGC CAG AAA CAA AGG GTA GCT ATC GCC AGA GCC CTC ATC CGA AAT CCC AAG ATT CTG CTT TTG GAC ATG GCC ACG TCA GCT CTG GAC AAT GAG AGT GAA GCC ATG GTG CAA GAA GTG CTG AGT AAG ATT CAG CAT GGG CAC ACA ATC ATT TCA GTT GCT CAT CGC TTG TCT ACG GTC AGA GCT GCA GAT ACC ATC ATT GGT TTT GAA CAT GGC ACT GCA GTG GAA AGA GGG ACC CAT GAA GAA TTA CTG GAA AGG AAA GGT GTT TAC TTC ACT CTA GTG ACT TTG CAA AGC CAG GGA AAT CAA GCT CTT AAT GAA □AG GAC ATA AAG GAT GCA ACT GAA GAT GAC ATG CTT GCG AGG ACC TTT AGC AGA GGG AGC TAC CAG GAT AGT TTA AGG GCT TCC ATC CGG CAA CGC TCC AAG TCT CAG CTT TCT TAC CTG GTG CAC GAA CCT CCA TTA GCT GTT GTA GAT CAT AAG TCT ACC TAT GAA GAA GAT AGA AAG GAC AAG GAC ATT CCT GTG CAG GAA GAA GTT GAA CCT GCC CCA GTT AGG AGG ATT CTG AAA TTC AGT GCT CCA GAA TGG CCC TAC ATG CTG GTA GGG TCT GTG GGT GCA GCT GTG AAC GGG ACA GTC ACA CCC TTG TAT GCC TTT TTA TTC AGC CAG ATT CTT GGG ACT TTT TCA ATT CCT GAT AAA GAG GAA CAA AGG TCA CAG ATC AAT GGT GTG TGC CTA CTT TTT GTA GCA ATG GGC TGT GTA TCT CTT TTC ACC CAA TTT CTA CAG GGA TAT GCC TTT GCT AAA TCT GGG GAG CTC CTA ACA AAA AGG CTA CGT AAA TTT GGT TTC AGG GCA ATG CTG GGG CAA GAT ATT GCC TGG TTT GAT GAC CTC AGA AAT AGC CCT GGA GCA TTG ACA ACA AGA CTT GCT ACA GAT GCT TCC CAA GTT CAA GGG GCT GCC GGC TCT CAG ATC GGG ATG ATA GTC AAT TCC TTC ACT AAC GTC ACT GTG GCC ATG ATC ATT GCC TTC TCC TTT AGC TGG AAG CTG AGC CTG GTC ATC TTG TGC TTC TTC CCC TTC TTG GCT TTA TCA GGA GCC ACA CAG ACC AGG ATG TTG ACA GGA TTT GCC TCT CGA GAT AAG CAG GCC CTG GAG ATG GTG GGA CAG ATT ACA AAT GAA GCC CTC AGT AAC ATC CGC ACT GTT GCT GGA ATT GGA AAG GAG AGG CGG TTC ATT GAA GCA CTT GAG ACT GAG CTG GAG AAG

ccc TTC AAG ACA GCC ATT CAG AAA GCC AAT ATT TAC GGA TTC TGC TTT GCC TTT GCC CAG TGC ATC ATG TTT ATT GCG AAT TCT GCT TCC TAC AGA TAT GGA GGT TAC TTA ATC TCC AAT GAG GGG CTC CAT TTC AGC TAT GTG TTC AGG GTG ATC TCT GCA GTT GTA CTG AGT GCA ACA GCT CTT GGA AGA GCC TTC TCT TAC ACC CCA AGT TAT GCA AAA GCT AAA ATA TCA GCT GCA GGC TTT TTT CAA CTG CTG GAC CGA CAA CCC CCA ATC AGT GTA TAC AAT ACT GCA GGT GAA AAA TGG GAC AAC TTC CAG GGG AAG ATT GAT TTT GTT GAT TGT AAA TTT ACA TAT CCT TCT CGA CCT GAC TCG CAA GTT CTG AAT GGT CTC TCA GTG TCG ATT AGT CCA GGG CAG ACA CTG GCG TTT GTT GGG AGC AGT GGA TGT GGC AAA AGC ACT AGC ATT CAG CTG TTG GAA CGT TTC TAT GAT CCT GAT CAA GGG AAG GTG ATG ATA GAT GGT CAT GAC AGC AAA AAA GTA AAT GTC CAG TTC CTC CGC TCA AAC ATT GGA ATT GTT TCC CAG GAA CCA GTG TTG TTT GCC TGT AGC ATA ATG GAC AAT ATC AAG TAT GGA GAC AAC ACC AAA GAA ATT CCC ATG GAA AGA GTC ATA GCA GCT GCA AAA CAG GCT CAG CTG CAT GAT TTT GTC ATG TCA CTC CCA GAG AAA TAT GAA ACT AAC GTT GGG TCC CAG GGG TCT CAA CTC TCT AGA GGG GAG AAA CAA CGC ATT GCT ATT GCT CGG GCC ATT GTA CGA GAT CCT AAA ATC TTG CTA CTA GAT GAA GCC ACT TCT GCC TTA GAC ACA GAA AGT GAA AAG ACG GTG CAG GTT GCT CTA GAC AAA GCC AGA GAG GGT CGG ACC TGC ATT GTC ATT GCC CAT CGC TTG TCC ACC ATC CAG AAC GCG GAT ATC ATT GCT GTC ATG GCA CAG GGG GTG GTG ATT GAA AAG GGG ACC CAT GAA GAA CTG ATG GCC CAA AAA GGA GCC TAC TAC AAA CTA GTC ACC ACT GGA TCC CCC ATC AGT TGA

Tabla 4. Mutaciones ejemplares de ABCB11

(Continuación)

Tabla 5. Mutaciones seleccionadas de ABCB11 asociadas con CIPF-2

(Continuación)

Referencias para las Tablas 4 y 5

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[0057] En algunas formas de realización, la mutación en ABCB11 se selecciona entre A167T, G238V, V284L, E297G, R470Q, R470X, D482G, R487H, A570T, N591S, A865V, G982R, R1153C y R1268Q.

[0058] Se proporcionan usos en un método para el tratamiento de la CIPF (p. ej., CIPF-1 y CIPF-2) en un sujeto, que incluye la realización de un ensayo en una muestra obtenida del sujeto para determinar si presenta una mutación asociada con la CIPF (p. ej., una mutación de ATP8B1, ABCB11, ABCB4, TJP2, NR1H4 o Myo5b), y la administración (p. ej., administración específica o selectiva) de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, al sujeto con una mutación asociada con la CIPF. En algunas formas de realización, la mutación es una mutación de ATP8B1 o ABCB11. Por ejemplo, una mutación como la descrita en cualquiera de las Tablas 14. En algunas formas de realización, la mutación en ATP8B1 se selecciona entre L127P, G308V, T456M, D554N, F529del, I661T, E665X, R930X, R952X, R1014X y G1040R. En algunas formas de realización, la mutación en ABCB11 se selecciona entre A167T, G238V, V284L, E297G, R470Q, R470X, D482G, R487H, A570T, N591S, A865V, G982R, R1153C y R1268Q.

[0059] También se describen usos en un método para tratar la CIPF (p. ej., CIPF-1 y CIPF-2) en un sujeto que lo necesite. El método comprende: (a) detectar una mutación asociada con la CIPF (p. ej., una mutación de ATP8B1, ABCB11, ABCB4, TJP2, NR1H4 o Myo5b) en el sujeto; y (b) administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas formas de realización, los usos en un método para tratar la CIPF pueden incluir administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo a un sujeto que presenta una mutación asociada con la CIPF (p. ej., una mutación de ATP8B1, ABCB11, ABCB4, TJP2, NR1H4 o Myo5b). En algunas formas de realización, la mutación es una mutación de ATP8B1 o ABCB11. Por ejemplo, una mutación como la descrita en cualquiera de las Tablas 14. En algunas formas de realización, la mutación en ATP8B1 se selecciona entre L127P, G308V, T456M, D554N, F529del, I661T, E665X, R930X, R952X, R1014X y G1040R. En algunas formas de realización, la mutación en ABCB11 se selecciona entre A167T, G238V, V284L, E297G, R470Q, R470X, D482G, R487H, A570T, N591S, A865V, G982R, R1153C y R1268Q.

[0060] En algunas formas de realización, se determina que el sujeto tiene una mutación asociada con CIPF en un sujeto o una muestra de biopsia del sujeto mediante cualquier prueba reconocida en la técnica, incluida la secuenciación de nueva generación (NGS). En algunas formas de realización, se determina que el sujeto presenta una mutación asociada con CIPF mediante una prueba o ensayo aprobado por la agencia reguladora, por ejemplo, una prueba o ensayo aprobado por la FDA para identificar una mutación asociada con CIPF en un sujeto o en una muestra de biopsia del sujeto, o mediante la realización de cualquiera de los ejemplos no limitativos de ensayos descritos en el presente documento. Se describen métodos adicionales para el diagnóstico de CIPF en Gunaydin, M. et al., Hepat Med. 2018, vol. 10, págs. 95 104.

[0061] En algunas formas de realización, el tratamiento de la CIPF (p. ej., CIPF-1 o CIPF-2) disminuye el nivel de ácidos biliares séricos en el sujeto. En algunas formas de realización, el nivel de ácidos biliares séricos se determina, por ejemplo, mediante un ensayo enzimático ELISA o mediante los ensayos para la medición de ácidos biliares totales descritos en Danese et al., PLoS One. 2017, vol. 12(6): e0179200.

[0062] En algunas formas de realización, el nivel de ácidos biliares séricos puede disminuir, por ejemplo, entre un 10 % y un 40 %, entre un 20 % y un 50 %, entre un 30 % y un 60 %, entre un 40 % y un 70 %, entre un 50 % y un 80 % o más del 90 % del nivel de ácidos biliares séricos previo a la administración de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas formas de realización, el tratamiento de la CIFP incluye el tratamiento del prurito.

[0063] Al expresarse la LBAT en los hepatocitos, las sustancias inhibidoras de LBAT y de ASBT/LBAT duales deben tener al menos cierta biodisponibilidad y fracción libre en sangre. Dado que los compuestos inhibidores de LBAT solo necesitan sobrevivir desde el intestino hasta el hígado, se espera que una exposición sistémica relativamente baja a dichos compuestos sea suficiente, minimizando así el riesgo potencial de efectos secundarios en el resto del organismo. Se espera que la inhibición de LBAT y ASBT tenga al menos efectos aditivos en la disminución de la concentración intrahepática de ácidos biliares. También se espera que un inhibidor dual de ASBT/LBAT pueda reducir los niveles de ácidos biliares sin inducir diarrea, como a veces se observa con los inhibidores de ASBT.

[0064] Se espera que los compuestos que tienen una alta potencia inhibidora de LBAT y suficiente biodisponibilidad sean particularmente adecuados para el tratamiento de la hepatitis. Se espera que los compuestos con doble potencia inhibidora de ASBT/LBAT y suficiente biodisponibilidad sean especialmente adecuados para el tratamiento de la esteatohepatitis no alcohólica (EHNA).

[0065] EHNA es una enfermedad hepática crónica común y grave similar a la enfermedad hepática alcohólica, pero que se presenta en personas que consumen poco o nada de alcohol. En pacientes con EHNA, la acumulación de grasa en el hígado, conocida como enfermedad del hígado graso no alcohólico (EHGNA) o esteatosis, y otros factores como el colesterol LDL alto y la resistencia a la insulina inducen inflamación crónica en el hígado y pueden conducir a la cicatrización progresiva del tejido, conocida como fibrosis, y cirrosis, seguida finalmente de insuficiencia hepática y muerte. Se ha observado que los pacientes con EHNA presentan concentraciones séricas totales de ácidos biliares significativamente más altas que los sujetos sanos en ayunas (incremento de 2,2 a 2,4 veces en la EHNA) y en todos los puntos temporales posprandiales (incremento de 1,7 a 2,2 veces en la EHNA). Esto se debe al aumento de los ácidos biliares primarios y secundarios conjugados con taurina y glicina. Los pacientes con EHNA mostraron una mayor variabilidad en su perfil de ácidos biliares en ayunas y posprandial. Estos resultados indican que los pacientes con EHNA presentan una mayor exposición en ayunas y posprandial a los ácidos biliares, incluyendo las especies secundarias más hidrofóbicas y citotóxicas. Una mayor exposición a los ácidos biliares podría estar relacionada con la lesión hepática y la patogénesis de la EHNA y la EHNA (Ferslew et al., Dig Dis Sci. 2015, vol. 60, p. 3318-3328). Por lo tanto, es probable que la inhibición de la ASB<t>o la LBAT sea beneficiosa para el tratamiento de la EHNA.

[0066] EHGNA se caracteriza por esteatosis hepática sin causas secundarias, como el consumo excesivo de alcohol, otras enfermedades hepáticas conocidas o el uso prolongado de medicamentos esteatogénicos (Chalasani et al., Hepatology 2018, vol. 67(1), p. 328-357). La EHGNA se puede clasificar en hígado graso no alcohólico (HGNA) y esteatohepatitis no alcohólica (EHNA). Según Chalasani et al., la EHNA se define como la presencia de > 5% de esteatosis hepática sin evidencia de lesión hepatocelular en forma de balonización hepatocítica. La EHNA se define como la presencia de > 5% de esteatosis hepática e inflamación con lesión hepatocítica (p. ej., balonización hepatocítica), con o sin fibrosis hepática. La EHNA también se asocia comúnmente con inflamación hepática y fibrosis hepática, que puede progresar a cirrosis, enfermedad hepática terminal y carcinoma hepatocelular. Si bien la fibrosis hepática no siempre está presente en la EHNA, su gravedad, cuando está presente, puede estar relacionada con los resultados a largo plazo. Existen diversos enfoques para evaluar si un sujeto padece EHNA y, de ser así, la gravedad de la enfermedad, incluyendo la diferenciación entre EHNA y EHNA. En algunas formas de realización, la gravedad de la EHNA se puede evaluar mediante el NAS. En algunas formas de realización, el tratamiento de la EHNA se puede evaluar mediante el NAS. En algunas formas de realización, el NAS se puede determinar como se describe en Kleiner et al., Hepatology. 2005, 41(6):13131321. Por ejemplo, la Tabla 6 muestra un esquema simplificado del NAS adaptado de Kleiner.

Tabla 6. Ejemplo de la puntuación de actividad de EHGNA (NAS) con estadio de fibrosis

[0067] En algunas formas de realización, el NAS se determina de forma no invasiva, por ejemplo, como se describe en la publicación de solicitud de EE. UU. N.° 2018/0140219.

[0068] En algunas formas de realización, la NAS se determina en una muestra del sujeto antes de la administración de un compuesto de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables. En algunas formas de realización, la NAS se determina durante o después de la administración de un compuesto de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables. En algunas formas de realización, una puntuación de NAS más baja durante o después de la administración de un compuesto de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, en comparación con la obtenida antes de la administración del compuesto de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, indica el tratamiento de la EHGNA (p. ej., EHNA). Por ejemplo, una disminución de la NAS en 1,2, 3, 4, 5, 6 o 7 indica el tratamiento de la EHGNA (p. ej., EHNA). En algunas formas de realización, la NAS tras la administración de un compuesto de fórmula (I), o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, es de 7 o menos. En algunas formas de realización, la NAS durante el periodo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, es de 5 o menos, 4 o menos, 3 o menos, o 2 o menos. En algunas formas de realización, la NAS durante el periodo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, es de 7 o menos. En algunas formas de realización, la NAS durante el periodo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, es de 5 o menos, 4 o menos, 3 o menos, o 2 o menos. En algunas formas de realización, la NAS tras la administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es de 7 o menos. En algunas formas de realización, la NAS tras la administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es de 5 o menos, 4 o menos, 3 o menos, o 2 o menos.

[0069] Otros enfoques para evaluar la EHNA en un sujeto incluyeron la determinación de uno o más de los siguientes factores: esteatosis hepática (p. ej., acumulación de grasa en el hígado); inflamación hepática; biomarcadores indicativos de uno o más de los siguientes: daño hepático, inflamación hepática, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática (p. ej., marcadores séricos y paneles). Otros ejemplos de indicadores fisiológicos de EHNA incluyen la morfología hepática, la rigidez hepática y el tamaño o peso del hígado del sujeto.

[0070] En algunas formas de realización, la EHNA en el sujeto se evidencia por la acumulación de grasa hepática y la detección de un biomarcador indicativo de daño hepático. Por ejemplo, la ferritina sérica elevada y los títulos bajos de autoanticuerpos séricos pueden ser características comunes de la EHNA.

[0071] En formas de realización, los métodos para evaluar la EHNA incluyen la resonancia magnética, ya sea por espectroscopia o por fracción grasa de densidad protónica (MRI-PDFF) para cuantificar la esteatosis, la elastografía transitoria (FIBROSCAN®), el gradiente de presión venosa hepática (HPVG), la medición de la rigidez hepática con ERM para diagnosticar fibrosis hepática significativa o cirrosis, y la evaluación de las características histológicas de la biopsia hepática. En algunas formas de realización, la resonancia magnética se utiliza para detectar esteatohepatitis (EHNA-MRI), fibrosis hepática (Fibro-MRI) y esteatosis. Véanse, por ejemplo, las publicaciones de solicitudes de EE. UU. n.° 2016/146715 y 2005/0215882.

[0072] En algunas formas de realización, el tratamiento de EHNA puede incluir una disminución de uno o más síntomas asociados con EHNA; reducción en la cantidad de esteatosis hepática; una disminución en el NAS; una disminución en la inflamación hepática; una disminución en el nivel de biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática; y una reducción en la fibrosis y/o cirrosis, una falta de progresión adicional de fibrosis y/o cirrosis, o una desaceleración de la progresión de fibrosis y/o cirrosis en el sujeto después de la administración de una o más dosis de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0073] En algunas formas de realización, el tratamiento de EHNA comprende la disminución de uno o más síntomas asociados con la EHNA en el sujeto. Algunos ejemplos de síntomas incluyen hepatomegalia, fatiga, dolor en la parte superior derecha del abdomen, hinchazón abdominal, vasodilatación justo debajo de la superficie cutánea, mamas agrandadas en hombres, bazo agrandado, palmas rojas, ictericia y prurito. En algunas formas de realización, el sujeto es asintomático. En algunas formas de realización, el peso corporal total del sujeto no aumenta. En algunas formas de realización, el peso corporal total del sujeto disminuye. En algunas formas de realización, el índice de masa corporal (IMC) del sujeto no aumenta. En algunas formas de realización, el índice de masa corporal (IMC) del sujeto disminuye. En algunas formas de realización, el índice de cintura-cadera (ICC) del sujeto no aumenta. En algunas formas de realización, el índice de cintura-cadera (ICC) del sujeto disminuye.

[0074] En algunas formas de realización, el tratamiento de EHNA puede evaluarse midiendo la esteatosis hepática. En algunas formas de realización, el tratamiento de la EHNA comprende una reducción de la esteatosis hepática tras la administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se describe en el presente documento. En algunas formas de realización, la esteatosis hepática se determina mediante uno o más métodos seleccionados del grupo que consiste en ecografía, tomografía computarizada (TC), resonancia magnética, espectroscopia por resonancia magnética (ERM), elastografía por resonancia magnética (ERM), elastografía transitoria (ET) (p. ej., F<ib>R<o>SCAN®), medición del tamaño o peso del hígado, o mediante biopsia hepática (véase, p. ej., Di Lascio et al., Ultrasound Med Biol. 2018, vol. 44(8), p. 1585-1596; Lv et al., J Clin Transl Hepatol. 2018, vol. 6(2), p. 217-221; Reeder et al., J Magn Reson Imaging. 2011, vol. 34(4), spcone; y de Lédinghen V, et al., J Gastroenterol Hepatol. 2016, vol. 31(4), pág. 848855).

[0075] En algunas formas de realización, el tratamiento de EHNA puede presentar una esteatosis hepática superior al 5 %, por ejemplo, entre el 5 % y el 25 %, entre el 25 % y el 45 %, entre el 45 % y el 65 % o superior al 65 %. En algunas formas de realización, un sujeto con una esteatosis hepática superior al 5 % y el 33 % presenta esteatosis hepática en estadio 1, un sujeto con una esteatosis hepática superior al 33 % y el 66 % presenta esteatosis hepática en estadio 2, y un sujeto con una esteatosis hepática superior al 66 % presenta esteatosis hepática en estadio 3. En algunas formas de realización, la cantidad de esteatosis hepática se determina antes de la administración de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas formas de realización, la esteatosis hepática se determina durante o después de la administración del compuesto de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables. En algunas formas de realización, una reducción de la esteatosis hepática durante o después de la administración del compuesto de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, en comparación con la situación previa a la administración del compuesto de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, indica el tratamiento de la EHNA. Por ejemplo, una reducción de la esteatosis hepática de entre el 1 % y el 50 %, entre el 25 % y el 75 % o entre el 50 % y el 100 % indica el tratamiento de la EHNA. En algunas formas de realización, una reducción en la cantidad de esteatosis hepática en aproximadamente 5%, aproximadamente 10%, aproximadamente 15%, aproximadamente 20%, aproximadamente 25%, aproximadamente 30%, aproximadamente 35%, aproximadamente 40%, aproximadamente 45%, aproximadamente 50%, aproximadamente 55%, aproximadamente 60%, aproximadamente 65%, aproximadamente 70%, aproximadamente 75%, aproximadamente 80%, aproximadamente 85%, aproximadamente 90% o aproximadamente 95% indica tratamiento de EHNa .

[0076] En algunas formas de realización, la presencia de inflamación hepática se determina mediante uno o más métodos seleccionados del grupo que consiste en biomarcadores indicativos de inflamación hepática y una o más muestras de biopsia hepática del sujeto. En algunas formas de realización, la gravedad de la inflamación hepática se determina a partir de una o más muestras de biopsia hepática del sujeto. Por ejemplo, la inflamación hepática en una muestra de biopsia hepática puede evaluarse como se describe en Kleiner et al., Hepatology 2005, vol. 41(6), p. 1313-1321 y Brunt et al., Am J Gastroenterol 1999, vol. 94, p. 2467-2474.

[0077] En algunas formas de realización, la gravedad de la inflamación hepática se determina antes de la administración de un compuesto de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables. En algunas formas de realización, la gravedad de la inflamación hepática se determina durante o después de la administración de un compuesto de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables. En algunas formas de realización, una disminución de la gravedad de la inflamación hepática durante o después de la administración de un compuesto de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, en comparación con antes de la administración del compuesto de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, indica el tratamiento de la EHNA. Por ejemplo, una disminución de la gravedad de la inflamación hepática de aproximadamente el 1 % al 50 %, de aproximadamente el 25 % al 75 % o de aproximadamente el 50 % al 100 % indica el tratamiento de la EHNA. En algunas formas de realización, una disminución de la gravedad de la inflamación hepática en aproximadamente un 5%, aproximadamente un 10%, aproximadamente un 15%, aproximadamente un 20%, aproximadamente un 25%, aproximadamente un 30%, aproximadamente un 35%, aproximadamente un 40%, aproximadamente un 45%, aproximadamente un 50%, aproximadamente un 55%, aproximadamente un 60%, aproximadamente un 65%, aproximadamente un 70%, aproximadamente un 75%, aproximadamente un 80%, aproximadamente un 85%, aproximadamente un 90% o aproximadamente un 95% indica tratamiento de EHNA.

[0078] En algunas formas de realización, la presencia de fibrosis o cirrosis se determina mediante uno o más métodos seleccionados del grupo que consiste en elastografía transitoria (p. ej., FIBROSCAN®), marcadores no invasivos de fibrosis hepática y características histológicas de una biopsia hepática. En algunas formas de realización, la gravedad (p. ej., estadio) de la fibrosis se determina mediante uno o más métodos seleccionados del grupo que consiste en elastografía transitoria (p. ej., FIBROSCAN®), un sistema de puntuación de fibrosis, biomarcadores de fibrosis hepática (p. ej., biomarcadores no invasivos) y gradiente de presión venosa hepática (PGVH). Los ejemplos no limitantes de sistemas de puntuación de fibrosis incluyen el sistema de puntuación de fibrosis EHGNA (ver, p. ej., Angulo et al., Hepatology 2007, vol. 45(4), p. 846-54), el sistema de puntuación de fibrosis en Brunt et al., Am. J. Gastroenterol. 1999, vol. 94, p. 2467 2474, el sistema de puntuación de fibrosis en Kleiner et al., Hepatology 2005, vol. 41(6), p. 1313-1321, y el sistema de puntuación de fibrosis ISHAK (ver Ishak et al., J. Hepatol. 1995, vol. 22, p. 696-699).

[0079] En algunas formas de realización, la gravedad de la fibrosis se determina antes de la administración de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas formas de realización, una disminución de la gravedad de la fibrosis durante o después de la administración de un compuesto de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, en comparación con antes de la administración del compuesto de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, indica el tratamiento de la EHNA. En algunas formas de realización, una disminución de la gravedad de la fibrosis, la ausencia de progresión de la fibrosis y/o cirrosis, o una ralentización de la progresión de la fibrosis y/o cirrosis, indica el tratamiento de la EHNA. En algunas formas de realización, la gravedad de la fibrosis se determina mediante un sistema de puntuación, como cualquiera de los sistemas de puntuación de fibrosis descritos en este documento. Por ejemplo, la puntuación puede indicar el estadio de la fibrosis, p. ej., estadio 0 (sin fibrosis), estadio 1, estadio 2, estadio 3 y estadio 4 (cirrosis) (véase, p. ej., Kleiner et al.). En algunas formas de realización, una disminución del estadio de la fibrosis se traduce en una disminución de su gravedad. Por ejemplo, una disminución de 1, 2, 3 o 4 estadios se traduce en una disminución de la gravedad de la fibrosis. En algunas formas de realización, una disminución en la etapa, por ejemplo, del estadio 4 al estadio 3, del estadio 4 al estadio 2, del estadio 4 al estadio 1, del estadio 4 al estadio 0, del estadio 3 al estadio 2, del estadio 3 al estadio 1, del estadio 3 al estadio 0, del estadio 2 al estadio 1, del estadio 2 al estadio 0 o del estadio 1 al estadio 0 indica tratamiento de EHNA. En algunas formas de realización, el estadio de fibrosis disminuye del estadio 4 al estadio 3, del estadio 4 al estadio 2, del estadio 4 al estadio 1, del estadio 4 al estadio 0, del estadio 3 al estadio 2, del estadio 3 al estadio 1, del estadio 3 al estadio 0, del estadio 2 al estadio 1, del estadio 2 al estadio 0, o del estadio 1 al estadio 0 después de la administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en comparación con antes de la administración del compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas formas de realización, el estadio de fibrosis disminuye del estadio 4 al estadio 3, del estadio 4 al estadio 2, del estadio 4 al estadio 1, del estadio 4 al estadio 0, del estadio 3 al estadio 2, del estadio 3 al estadio 1, del estadio 3 al estadio 0, del estadio 2 al estadio 1, del estadio 2 al estadio 0 o del estadio 1 al estadio 0 durante el período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en comparación con antes de la administración del compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas formas de realización, el estadio de fibrosis disminuye del estadio 4 al estadio 3, del estadio 4 al estadio 2, del estadio 4 al estadio 1, del estadio 4 al estadio 0, del estadio 3 al estadio 2, del estadio 3 al estadio 1, del estadio 3 al estadio 0, del estadio 2 al estadio 1, del estadio 2 al estadio 0, o del estadio 1 al estadio 0 después del período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en comparación con antes de la administración del compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0080] En algunas formas de realización, la presencia de EHNA se determina mediante uno o más biomarcadores que indican daño hepático, inflamación, fibrosis hepática o cirrosis hepática, o sus sistemas de puntuación. En algunas realizaciones, la gravedad de la EHNA se determina mediante uno o más biomarcadores que indican daño hepático, inflamación, fibrosis hepática o cirrosis hepática, o sus sistemas de puntuación. El nivel del biomarcador puede determinarse, por ejemplo, midiendo, cuantificando y monitorizando el nivel de expresión del gen o ARNm que codifica el biomarcador o el péptido o proteína del biomarcador. Ejemplos no limitativos de biomarcadores indicativos de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática o cirrosis hepática, o sus sistemas de puntuación, incluyen el índice de proporción de aspartato aminotransferasa (AST) a plaquetas (APRI); la proporción de aspartato aminotransferasa (AST) y alanina aminotransferasa (ALT) (AAR); la puntuación FIB-4, que se basa en el APRI, los niveles de alanina aminotransferasa (ALT) y la edad del sujeto (véase, por ejemplo, McPherson et al., Gut 2010, vol. 59(9), pág. 12659; ácido hialurónico; citocinas proinflamatorias; un panel de biomarcadores que consiste en a2-macroglobulina, haptoglobina, apolipoproteína A1, bilirrubina, gamma glutamil transpeptidasa (GGT) combinado con la edad y el sexo de un sujeto para generar una medida de fibrosis y actividad necroinflamatoria en el hígado (p. ej., FIBROTEST®, FIBROSURE®), un panel de biomarcadores que consiste en bilirrubina, gamma-glutamiltransferasa, ácido hialurónico, a2-macroglobulina combinado con la edad y el sexo del sujeto (p. ej., HEPASCORE®; ver, p. ej., Adams et al., Clin. Chem. 2005, vol. 51(10), p.

1867 -1873), y un panel de biomarcadores que consiste en inhibidor tisular de metaloproteinasa1, ácido hialurónico y a2-macroglobulina (p. ej., FIBROSPECT®); un panel de biomarcadores que consiste en el inhibidor tisular de metaloproteinasas 1 (TIMP1), el propéptido amino-terminal del procolágeno tipo III (PIIINP) y el ácido hialurónico (AH) (por ejemplo, la puntuación de fibrosis hepática mejorada (ELF), véase, por ejemplo, Lichtinghagen R, et al., J Hepatol.

2013 agosto;59(2):23642).

[0081] En algunas formas de realización, la presencia de fibrosis se determina mediante uno o más de los siguientes criterios: la puntuación FIB-4, un panel de biomarcadores que consiste en a2-macroglobulina, haptoglobina, apolipoproteína A1, bilirrubina, gamma glutamil transpeptidasa (GGT) combinada con la edad y el sexo de un sujeto para generar una medida de fibrosis y actividad necroinflamatoria en el hígado (p. ej., FIBROTEST®, FIBROSURE®), un panel de biomarcadores que consiste en bilirrubina, gamma-glutamiltransferasa, ácido hialurónico, a2-macroglobulina combinada con la edad y el sexo del sujeto (p. ej., HEPASCORE®; véase, p. ej., Adams et al., Clin. Chem. 2005, vol.

51(10), pág. 1867-1873), y un panel de biomarcadores que consiste en inhibidor tisular de metaloproteinasa-1, ácido hialurónico y a2-macroglobulina (p. ej., FIBROSPECT®); y un panel de biomarcadores que consiste en el inhibidor tisular de metaloproteinasas 1 (TIMP-1), el propéptido aminoterminal del procolágeno tipo III (PIIINP) y el ácido hialurónico (AH) (p. ej., la puntuación de Fibrosis Hepática Mejorada [ELF]). En algunas formas de realización, el nivel de aspartato aminotransferasa (AST) no aumenta. En algunas formas de realización, el nivel de aspartato aminotransferasa (AST) disminuye. En algunas formas de realización, el nivel de alanina aminotransferasa (ALT) no aumenta. En algunas formas de realización, el nivel de alanina aminotransferasa (ALT) disminuye. En algunas formas de realización, el "nivel" de una enzima se refiere a la concentración de la enzima, p. ej., en sangre. Por ejemplo, el nivel de AST o ALT puede expresarse en Unidades/L.

[0082] En algunas formas de realización, la gravedad de la fibrosis se determina mediante uno o más de los siguientes criterios: la -puntuación FIB-4, un panel de biomarcadores que consiste en a2-macroglobulina, haptoglobina, apolipoproteína A1, bilirrubina, gamma glutamil transpeptidasa (GGT) combinada con la edad y el sexo de un sujeto para generar una medida de fibrosis y actividad necroinflamatoria en el hígado (p. ej., FIBROTEST®, FIBROSURE®), un panel de biomarcadores que consiste en bilirrubina, gamma-glutamiltransferasa, ácido hialurónico, a2-macroglobulina combinada con la edad y el sexo del sujeto (p. ej., HEPASCORE®; véase, p. ej., Adams et al., Clin. Chem. 2005, vol.

51(10), pág. 1867-1873), y un panel de biomarcadores que consiste en inhibidor tisular de metaloproteinasa 1, ácido hialurónico y a2-macroglobulina (p. ej., FIBROSPECT®); y un panel de biomarcadores que consiste en el inhibidor tisular de metaloproteinasas 1 (TIMP1), el propéptido amino-terminal del procolágeno tipo III (PIIINP) y el ácido hialurónico (AH) (p. ej., la puntuación de fibrosis hepática mejorada (ELF)).

[0083] En algunas formas de realización, la inflamación hepática se determina por el nivel de biomarcadores de inflamación hepática, como las citocinas proinflamatorias. Entre los ejemplos no limitativos de biomarcadores indicativos de inflamación hepática se incluyen la interleucina-(IL) 6, la interleucina (IL) 1p, el factor de necrosis tumoral (TNF)-a, el factor de crecimiento transformante (TGF)-p, la proteína quimiotáctica monocítica (MCP)-1, la proteína C reactiva (PCR), PAI1 e isoformas de colágeno como Col1a1, Col1a2 y Col4a1 (véase, por ejemplo, Neuman et al., Can. J. Gastroenterol. Hepatol. 2014, vol. 28(11), p. 607618 y la patente estadounidense n.° 9.872.844).

[0084] La inflamación hepática también puede evaluarse mediante cambios en la infiltración de macrófagos, por ejemplo, midiendo un cambio en el nivel de expresión de CD68. En algunas formas de realización, la inflamación hepática puede determinarse midiendo o monitorizando los niveles séricos o circulantes de una o más de las siguientes sustancias: interleucina-(IL) 6, interleucina (IL) 1p, factor de necrosis tumoral (TNF)-a, factor de crecimiento transformante (TGF)-p, proteína quimiotáctica monocítica (MCP)1 y proteína C reactiva (PCR).

[0085] En algunas formas de realización, el nivel de uno o más biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática o cirrosis hepática en una muestra del sujeto antes de la administración de un compuesto de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables. En algunas formas de realización, se determina el nivel de uno o más biomarcadores indicativos de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática o cirrosis hepática durante o después de la administración de un compuesto de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables. En algunas formas de realización, una disminución en el nivel de uno o más biomarcadores indicativos de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática o cirrosis hepática durante o después de la administración de un compuesto de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, en comparación con el nivel previo a la administración del compuesto de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, indica el tratamiento de la EHNA. Por ejemplo, una disminución en el nivel de uno o más biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática en al menos aproximadamente un 5%, al menos aproximadamente un 10%, al menos aproximadamente un 15%, al menos aproximadamente un 20%, al menos aproximadamente un 25%, al menos aproximadamente un 30%, al menos aproximadamente un 35%, al menos aproximadamente un 40%, al menos aproximadamente un 45%, al menos aproximadamente un 50%, al menos aproximadamente un 55%, al menos aproximadamente un 60%, al menos aproximadamente un 65%, al menos aproximadamente un 70%, al menos aproximadamente un 75%, al menos aproximadamente un 80%, al menos aproximadamente un 85%, al menos aproximadamente un 90%, al menos aproximadamente un 95% o al menos aproximadamente un 99% indica tratamiento de EHNA. En algunas formas de realización, la disminución en el nivel de uno o más biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática tras la administración del compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es de al menos aproximadamente un 5 %, al menos aproximadamente un 10 %, al menos aproximadamente un 15 %, al menos aproximadamente un 20 %, al menos aproximadamente un 25 %, al menos aproximadamente un 30 %, al menos aproximadamente un 35 %, al menos aproximadamente un 40 %, al menos aproximadamente un 45 %, al menos aproximadamente un 50 %, al menos aproximadamente un 55 %, al menos aproximadamente un 60 %, al menos aproximadamente un 65 %, al menos aproximadamente un 70 %, al menos aproximadamente un 75 %, al menos aproximadamente un 80 %, al menos aproximadamente un 85 %, al menos aproximadamente un 90 %, al menos aproximadamente un 95 % o al menos aproximadamente un 99 %. En algunas formas de realización, el nivel de uno o más biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática durante el período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es de al menos aproximadamente un 5%, al menos aproximadamente un 10%, al menos aproximadamente un 15%, al menos aproximadamente un 20%, al menos aproximadamente un 25%, al menos aproximadamente un 30%, al menos aproximadamente un 35%, al menos aproximadamente un 40%, al menos aproximadamente un 45%, al menos aproximadamente un 50%, al menos aproximadamente un 55%, al menos aproximadamente un 60%, al menos aproximadamente un 65%, al menos aproximadamente un 70%, al menos aproximadamente un 75%, al menos aproximadamente un 80%, al menos aproximadamente un 85%, al menos aproximadamente un 90%, al menos aproximadamente un 95% o al menos aproximadamente un 99%. En algunas formas de realización, el nivel de uno o más biomarcadores indicativos de uno o más de daño hepático, inflamación, fibrosis hepática y/o cirrosis hepática después del período de tiempo de administración de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, es de al menos aproximadamente 5%, al menos aproximadamente 10%, al menos aproximadamente 15%, al menos aproximadamente 20%, al menos aproximadamente 25%, al menos aproximadamente 30%, al menos aproximadamente 35%, al menos aproximadamente 40%, al menos aproximadamente 45%, al menos aproximadamente 50%, al menos aproximadamente 55%, al menos aproximadamente 60%, al menos aproximadamente 65%, al menos aproximadamente 70%, al menos aproximadamente 75%, al menos aproximadamente 80%, al menos aproximadamente 85%, al menos aproximadamente 90%, al menos aproximadamente 95%, o al menos aproximadamente 99%.

[0086] En algunas formas de realización, el tratamiento de la EHNA disminuye el nivel de ácidos biliares séricos en el sujeto. En algunas formas de realización, el nivel de ácidos biliares séricos se determina, por ejemplo, mediante un ensayo enzimático ELISA o mediante los ensayos para la medición de ácidos biliares totales descritos en Danese et al., PLoS One. 2017, vol. 12(6): e0179200.

[0087] En algunas formas de realización, el nivel de ácidos biliares séricos puede disminuir, por ejemplo, entre un 10 % y un 40 %, entre un 20 % y un 50 %, entre un 30 % y un 60 %, entre un 40 % y un 70 %, entre un 50 % y un 80 %, o más del 90 % del nivel de ácidos biliares séricos previo a la administración de un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. En algunas formas de realización, la EHNA es EHNA con colestasis concomitante. En la colestasis, se bloquea la liberación de bilis, incluidos los ácidos biliares, desde el hígado. Los ácidos biliares pueden causar daño a los hepatocitos (ver, p. ej., Perez MJ, Briz O. World J. Gastroenterol. 2009, vol. 15(14), p.

1677 -1689) probablemente conduciendo o aumentando la progresión de la fibrosis (p. ej., cirrosis) y aumentando el riesgo de carcinoma hepatocelular (ver, p. ej., Sorrentino P et al., Dig. Dis. Sci. 2005, vol. 50(6), p. 11301135 y Satapathy SK y Sanyal AJ. Semin. Liver Dis. 2015, vol. 35(3), p. 221235).

[0088] En algunas formas de realización, el tratamiento de la EHNA incluye el tratamiento del prurito. En algunas formas de realización, el tratamiento de la EHNA con colestasis concomitante incluye el tratamiento del prurito. En algunas formas de realización, un sujeto con EHNA con colestasis concomitante presenta prurito.

[0089] Los biomarcadores ejemplares para EHNA se proporcionan en la Tabla 7.

Tabla 7. Biomarcadores ejemplares de EHNA

Biomarcadores de fibrosis hepática

Índice de proporción de aspartato aminotransferasa (AST) a plaquetas (APRI)

Proporción de aspartato aminotransferasa (AST) y alanina aminotransferasa (ALT) (AAR)

Puntuación FIB-41

Ácido hialurónico

Citocinas proinflamatorias

Un panel que incluye a2-macroglobulina, haptoglobina, apolipoproteína A1, bilirrubina, gamma glutamil transpeptidasa (GGT) combinada con la edad y el sexo del sujeto para generar una medida de fibrosis y actividad necroinflamatoria en el hígado (p. ej., FIBROTEST®, FIBROSUr E®)

Un panel que incluye bilirrubina, gamma glutamiltransferasa, ácido hialurónico, a2-macroglobulina combinada con la edad y el sexo del sujeto (p. ej., HEPASCORE®2)

Un panel que incluye inhibidor tisular de metaloproteinasa-1, ácido hialurónico y a2-macroglobulina (p. ej., FIBROSPECT®)

Un panel que incluye inhibidor tisular de metaloproteinasas 1 (TIMP-1), propéptido amino-terminal de procolágeno tipo III (PIIINP) y ácido hialurónico (AH) (p. ej., puntuación de fibrosis hepática mejorada [ELF]3) Biomarcadores de inflamación hepática4,5

Interleucina-(IL) 6

Interleucina (IL) 1p

Factor de necrosis tumoral (TNF)-a

Factor de crecimiento transformante (TGF)-p

Proteína quimiotáctica de monocitos (MCP)-1

Proteína C reactiva (PCR)

PAI-1

Isoformas de colágeno (p. ej., C o lla l, Col1a2 y Col4a1)

Cambio de la infiltración de macrófagos (p. ej., un cambio en el nivel de expresión de CD68)

Referencias para la Tabla7

1 McPherson et al., Gut. 2010, vol. 59(9), p. 1265-1269.

2 Adams, et al. Clin Chem. 2005, vol. 51(10), p. 1867-1873.

3 Lichtinghagen, et al. J Hepatol. 2013, vol. 59(2), pág. 236-242.

4 Neuman, et al. Can J Gastroenterol Hepatol. 2014, vol. 28(11), pág. 607-618.

5 Patente de EE. UU. n.° 9.872.844

[0090] Algunos compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, pueden presentar una fracción libre plasmática mayor. En algunas formas de realización, la fracción libre es superior a aproximadamente el 0,2 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 0,4 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 0,6 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 0,8 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 1,0 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 1,25 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 1,5 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 1,75 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 2,0 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 2,5 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 3 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 4 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 5 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 7,5 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 10 %, o por ejemplo, superior a aproximadamente el 20 %.

[0091] Algunos compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, pueden excretarse en la orina. En algunas realizaciones, la fracción del compuesto que se excreta en la orina es superior a aproximadamente el 0,2 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 0,4 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 0,6 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 0,8 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 1,0 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 2 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 3 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 5 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 7,5 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 10 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 15 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 20 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 30 %, o por ejemplo, superior a aproximadamente el 50 %.

[0092] Tras la absorción intestinal, algunos compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, pueden circular por la circulación enterohepática. En algunas realizaciones, la fracción del compuesto que circula por la circulación enterohepática es superior a aproximadamente el 0,1 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 0,2 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 0,3 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 0,5 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 1,0 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 1,5 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 2 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 3 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 5 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 7 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 10 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 15 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 20 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 30 % o por ejemplo, superior a aproximadamente el 50 %.

[0093] Algunos compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, pueden causar la excreción renal de sales biliares. En algunas formas de realización, la fracción de ácidos biliares circulantes que se excreta por vía renal es superior a aproximadamente el 1%, por ejemplo, superior a aproximadamente el 2%, por ejemplo, superior a aproximadamente el 5 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 7 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 10 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 15 %, por ejemplo, superior a aproximadamente el 20 % o por ejemplo, superior a aproximadamente el 25 %.

[0094] Algunos compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, pueden mostrar una permeabilidad mejorada u óptima. La permeabilidad puede medirse en células Caco2 y los valores se expresan como Papp (permeabilidad aparente) en cm/s. En algunas formas de realización, la permeabilidad es mayor que al menos aproximadamente 0,1 x 106 cm/s, tal como mayor que aproximadamente 0,2 x 106 cm/s, tal como mayor que aproximadamente 0,4 x 106 cm/s, tal como mayor que aproximadamente 0,7 x 106 cm/s, tal como mayor que aproximadamente 1,0 x 106 cm/s, tal como mayor que aproximadamente 2 x 106 cm/s, tal como mayor que aproximadamente 3 x 106 cm/s, tal como mayor que aproximadamente 5 x 106 cm/s, tal como mayor que aproximadamente 7 x 106 cm/s, tal como mayor que aproximadamente 10 x 106 cm/s, tal como mayor que aproximadamente 15 x 106 cm/s.

[0095] Algunos compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, pueden mostrar una biodisponibilidad mejorada u óptima. En algunas formas de realización, la biodisponibilidad oral es superior al 5 %, como superior al 7 %, como superior al 10 %, como superior al 15 %, como superior al 20 %, como superior al 30 %, como superior al 40 %, como superior al 50 %, como superior al 60 %, como superior al 70 % o como superior al 80 %. En otras formas de realización, la biodisponibilidad oral se sitúa entre el 10 % y el 90 %, como entre el 20 % y el 80 %, como entre el 30 % y el 70 %, o entre el 40 % y el 60 %.

[0096] Algunos compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, pueden ser un sustrato para transportadores relevantes en el riñón.

[0097] Algunos compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, pueden dar lugar a concentraciones de ácidos biliares en el intestino, el hígado y en el suero que no causan efectos gastrointestinales adversos.

[0098] Algunos compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, pueden disminuir la concentración de ácidos biliares en el hígado sin causar trastornos gastrointestinales tales como diarrea.

[0099] Tal como se utilizan en el presente documento, los términos "tratamiento", "tratar" y "tratando" se refieren a revertir, aliviar, retrasar la aparición o inhibir el progreso de una enfermedad o trastorno, o uno o más de sus síntomas, como se describe en el presente documento. En algunas formas de realización, el tratamiento puede administrarse después de la aparición de uno o más síntomas. En otras formas de realización, el tratamiento puede administrarse en ausencia de síntomas. Por ejemplo, el tratamiento puede administrarse a una persona susceptible antes de la aparición de los síntomas (p. ej., considerando antecedentes de síntomas o factores genéticos u otros factores de susceptibilidad). El tratamiento también puede continuar después de la resolución de los síntomas, por ejemplo, para prevenir o retrasar su recurrencia.

[0100] Una sal farmacéuticamente aceptable adecuada de un compuesto de la invención es, por ejemplo, una sal de adición de base de un compuesto de la invención que es suficientemente ácida, tal como una sal de metal alcalino (por ejemplo, una sal de sodio o potasio), una sal de metal alcalinotérreo (por ejemplo, una sal de calcio o magnesio), una sal de amonio o una sal con una base orgánica que proporciona un catión fisiológicamente aceptable, por ejemplo una sal con metilamina, dimetilamina, trimetilamina, piperidina, morfolina o tris-(2-hidroxietil)amina.

[0101] Algunos compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, pueden presentar centros quirales y/o centros isoméricos geométricos (isómeros E y Z). La invención abarca todos los isómeros ópticos, diastereoisómeros e isómeros geométricos que poseen actividad inhibidora de ASBT y/o LBAT. La invención también abarca todas las formas tautoméricas de los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, que poseen actividad inhibidora de ASBT y/o LBAT. Ciertos compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, pueden existir tanto en forma no solvatada como solvatada, como, por ejemplo, en forma hidratada. La invención abarca todas las formas solvatadas que poseen actividad inhibidora de ASBT y/o LBAT.

[0102] En otro aspecto, la invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables. Los excipientes pueden ser, por ejemplo, cargas, aglutinantes, desintegrantes, deslizantes y lubricantes. En general, las composiciones farmacéuticas pueden prepararse de forma convencional utilizando excipientes convencionales.

[0103] Entre los ejemplos de rellenos adecuados se incluyen, entre otros, fosfato dicálcico dihidratado, sulfato de calcio, lactosa (como la lactosa monohidratada), sacarosa, manitol, sorbitol, celulosa, celulosa microcristalina, almidón seco, almidones hidrolizados y almidón pregelatinizado. En ciertas formas de realización, el relleno es manitol y/o celulosa microcristalina.

[0104] Entre los ejemplos de aglutinantes adecuados se incluyen, entre otros, almidón, almidón pregelatinizado, gelatina, azúcares (como sacarosa, glucosa, dextrosa, lactosa y sorbitol), polietilenglicol, ceras, gomas naturales y sintéticas (como goma arábiga y goma tragacanto), alginato de sodio, derivados de celulosa (como hidroxipropilmetilcelulosa [o hipromelosa], hidroxipropilcelulosa y etilcelulosa) y polímeros sintéticos (como copolímeros de ácido acrílico y ácido metacrílico, copolímeros de ácido metacrílico, copolímeros de metacrilato de metilo, copolímeros de metacrilato de aminoalquilo, copolímeros de ácido poliacrílico/ácido polimetacrílico y polivinilpirrolidona [povidona]). En ciertas formas de realización, el aglutinante es hidroxipropilmetilcelulosa (hipromelosa).

[0105] Entre los ejemplos de desintegrantes adecuados se incluyen, entre otros, almidón seco, almidón modificado (como almidón parcialmente pregelatinizado, glicolato sódico de almidón y carboximetilalmidón sódico), ácido algínico, derivados de celulosa (como carboximetilcelulosa sódica, hidroxipropilcelulosa e hidroxipropilcelulosa de baja sustitución (L-HPC)) y polímeros reticulados (como carmelosa, croscarmelosa sódica, carmelosa cálcica y PVP reticulada [crospovidona]). En ciertas formas de realización, el desintegrante es croscarmelosa sódica.

[0106] Entre los ejemplos de deslizantes y lubricantes adecuados se incluyen, entre otros, talco, estearato de magnesio, estearato de calcio, ácido esteárico, behenato de glicerilo, sílice coloidal, dióxido de silicio acuoso, silicato de magnesio sintético, óxido de silicio granulado fino, almidón, lauril sulfato de sodio, ácido bórico, óxido de magnesio, ceras (como cera de carnauba), aceite hidrogenado, polietilenglicol, benzoato de sodio, polietilenglicol y aceite mineral. En ciertas formas de realización, el deslizante o lubricante es estearato de magnesio o sílice coloidal.

[0107] La composición farmacéutica puede recubrirse convencionalmente con una o más capas de recubrimiento. Capas de recubrimiento entérico o capas de recubrimiento para la liberación retardada o dirigida del compuesto de fórmula (I), o de sus sales farmacéuticamente aceptables. Las capas de recubrimiento pueden comprender uno o más agentes de recubrimiento y, opcionalmente, plastificantes y/o pigmentos (o colorantes).

[0108] Ejemplos de agentes de recubrimiento adecuados incluyen, pero no se limitan a, polímeros a base de celulosa (tales como etilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa (o hipromelosa), hidroxipropilcelulosa, acetato ftalato de celulosa, acetato succinato de celulosa, acetato succinato de hidroxipropilmetilcelulosa y ftalato de hidroxipropilmetilcelulosa), polímeros a base de vinilo (tales como alcohol polivinílico) y polímeros a base de ácido acrílico y derivados del mismo (tales como copolímeros de ácido acrílico y ácido metacrílico, copolímeros de ácido metacrílico, copolímeros de metacrilato de metilo, copolímeros de metacrilato de aminoalquilo, copolímeros de ácido poliacrílico/ácido polimetacrílico). En ciertas formas de realización, el agente de recubrimiento es hidroxipropilmetilcelulosa. En otras formas de realización, el agente de recubrimiento es alcohol polivinílico.

[0109] Entre los ejemplos de plastificantes adecuados se incluyen, entre otros, citrato de trietilo, triacetato de glicerilo, citrato de tributilo, ftalato de dietilo, citrato de acetiltributilo, ftalato de dibutilo, sebacato de dibutilo y polietilenglicol. En ciertas formas de realización, el plastificante es polietilenglicol.

[0110] Los ejemplos de pigmentos adecuados incluyen, pero no se limitan a, dióxido de titanio, óxidos de hierro (tales como óxidos de hierro amarillo, marrón, rojo o negro) y sulfato de bario.

[0111] La composición farmacéutica puede presentarse en una forma adecuada para administración oral, inyección parenteral (incluidas las inyecciones intravenosa, subcutánea, intramuscular e intravascular), administración tópica o administración rectal. En una forma de realización preferida, la composición farmacéutica se presenta en una forma adecuada para administración oral, como un comprimido o una cápsula.

[0112] La dosis requerida para el tratamiento terapéutico o profiláctico dependerá de la vía de administración, la gravedad de la enfermedad, la edad y el peso del paciente y otros factores normalmente considerados por el médico tratante, al determinar el régimen y el nivel de dosis adecuados para un paciente en particular.

[0113] La cantidad del compuesto a administrar varía según el paciente y puede variar entre aproximadamente 1 pg/kg de peso corporal y aproximadamente 50 mg/kg de peso corporal al día. Una dosis unitaria, como un comprimido o una cápsula, suele contener entre 1 y 250 mg de principio activo, por ejemplo, entre 1 y 100 mg, entre 1 y 50 mg, entre 1 y 20 mg, por ejemplo, 2,5 mg, 5 mg, 10 mg o 15 mg. La dosis diaria puede administrarse como dosis única o dividirse en una, dos, tres o más dosis unitarias. Una dosis diaria administrada por vía oral de un modulador de ácidos biliares está preferiblemente dentro de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 250 mg, más preferiblemente dentro de aproximadamente 1 a aproximadamente 100 mg, tal como dentro de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 mg, tal como dentro de aproximadamente 1 a aproximadamente 10 mg, tal como dentro de aproximadamente 1 a aproximadamente 15 mg, o tal como dentro de aproximadamente 1 a aproximadamente 20 mg.

[0114] En otro aspecto, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I)

en donde

R1 y R2 son cada uno independientemente alquilo C<1-4>;

R3 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, hidroxi,

alquilo C<1-4>, haloalquilo C<1-4>, alcoxi C<1-4>, haloalcoxi C<1-4>, ciano, nitro, amino, N(alquil C<1-4>)amino, N,N-di(alquil C<1>-<4>)amino, y N(aril-alquil C<1-4>)amino;

n es un número entero 1, 2 o 3;

R4 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, hidroxi, ciano, alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, alcoxi C<1-4>, cicloalquiloxi C<3-6>, alquiltio C<1-4>, cicloalquiltio C<3-6>, amino, N(alquil C<1-4>)amino y N,N-di(alquil C<1>-<4>)amino;

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso como medicamento.

[0115] En otro aspecto, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento o la prevención de cualquiera de las enfermedades aquí descritas. La invención también se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de cualquiera de las enfermedades aquí descritas. La invención también se refiere a un uso en un método para el tratamiento o la prevención de cualquiera de las enfermedades aquí descritas en un sujeto, como el ser humano, que comprende administrar al sujeto que necesita dicho tratamiento o prevención una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Terapia combinada

[0116] En un aspecto de la invención, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con al menos otro agente terapéuticamente activo, como uno, dos, tres o más agentes terapéuticamente activos. El compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y el al menos otro agente terapéuticamente activo pueden administrarse de forma simultánea, secuencial o por separado. Los agentes terapéuticamente activos adecuados para la combinación con los compuestos de fórmula (I) incluyen, entre otros, agentes activos conocidos útiles en el tratamiento de cualquiera de las afecciones, trastornos y enfermedades mencionadas anteriormente.

[0117] En una forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con otro inhibidor de ASBT. Los inhibidores de ASBT adecuados se describen en los documentos WO 93/16055, WO 94/18183, WO 94/18184, WO 96/05188, WO 96/08484, WO 96/16051, WO 97/33882, WO 98/38182, WO 98/07449, WO 98/40375, WO 99/35135, WO 99/64409, WO 99/64410, WO 00/47568, WO 00/61568, WO 00/38725, WO 00/38726, WO 00/38727, WO 00/38728, WO 00/38729, WO 01/66533, WO 01/68096, WO 02/32428, WO 02/50051, WO 03/020710, WO 03/022286, WO 03/022825, WO 03/022830, WO 03/061663, WO 03/091232, WO 03/106482, WO 2004/006899, WO 2004/076430, WO 2007/009655, WO 2007/009656, WO 2011/137135, WO 2019/234077, WO 2020/161216, WO 2020/161217, DE 19825804, EP 864582, EP 489423, EP 549967, EP 573848, EP 624593, EP 624594, EP 624595, EP 624596, EP 0864582, EP 1173205, EP 1535913 y EP 3210977.

[0118] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un aglutinante de ácidos biliares (también denominado secuestrante de ácidos biliares o resina), como colesevelam, colestiramina o colestipol. En una forma de realización preferida de dicha combinación, el aglutinante de ácidos biliares se formula para su liberación en el colon. Se describen ejemplos de dichas formulaciones en, por ejemplo, los documentos WO 2017/138877, WO 2017/138878, WO 2019/032026 y WO 2019/032027.

[0119] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de DPP-IV, incluyendo gliptinas tales como sitagliptina, vildagliptina, saxagliptina, linagliptina, gemigliptina, anagliptina, teneligliptina, alogliptina, trelagliptina, omarigliptina, evogliptina, gosogliptina y dutogliptina, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas.

[0120] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de la HMG CoA reductasa, tal como fluvastatina, lovastatina, pravastatina, simvastatina, atorvastatina, pitavastatina, cerivastatina, mevastatina, rosuvastatina, bervastatina o dalvastatina, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

[0121] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de la absorción de colesterol tal como ezetimiba, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0122] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un agonista de PPAR alfa, incluyendo fibratos tales como clofibrato, bezafibrato, ciprofibrato, clinofribrato, clofibrida, fenofibrato, gemfibrozil, ronifibrato y simfibrato, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

[0123] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un agonista de PPAR gamma, incluyendo tiazolidinedionas tales como pioglitazona, rosiglitazona y lobeglitazona, o una sal farmacéuticamente aceptable de las mismas.

[0124] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un agonista dual de PPAR alfa/gamma, incluyendo glitazares tales como saroglitazar, aleglitazar, muraglitazar o tesaglitazar, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

[0125] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un agonista dual de PPAR alfa/delta, tal como elafibranor.

[0126] En otra forma de realización más, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un agonista pan PPAR (es decir, un agonista PPAR que tiene actividad en todos los subtipos: a,<y>y 6), tal como IVA337.

[0127] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con moduladores del receptor X farnesoide (FXR), incluidos agonistas de FXR tales como cafestol, ácido quenodesoxicólico, ácido 6a-etil-quenodesoxicólico (ácido obeticólico; INT-747), fexaramina, tropifexor, cilofexor y MET409.

[0128] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un modulador del receptor TGR5, incluyendo agonistas de TGR5 tales como ácido 6a-etil 23(S)metilcólico (INT777).

[0129] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un agonista dual de FXR/TGR5 tal como INT-767.

[0130] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con ácido nor-ursodesoxicólico (nor-AUDC).

[0131] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un modulador de FGF19, tal como NGM282.

[0132] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un agonista de FGF21, tal como BMS-986036.

[0133] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de integrina, tal como PLN-74809 y PLN1474.

[0134] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de CCR2/CCR5, tal como cenicriviroc.

[0135] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de proteasa caspasa, tal como emricasan.

[0136] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de galectina 3, tal como GR-MD02.

[0137] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de la estearoil-CoA desaturasa (SCD), tal como aramchol (ácido araquidil amido colanoico).

[0138] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de la quinasa reguladora de la señal de apoptosis 1 (ASK1), tal como selonsertib.

[0139] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de LOXL2, tal como simtuzumab.

[0140] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de ACC, tal como GS-0976.

[0141] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un agonista del receptor p de la hormona tiroidea, tal como MGL3196.

[0142] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un agonista de GLP 1 tal como liraglutida.

[0143] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un péptido dual similar al glucagón y agonistas del receptor de glucagón, tales como SAR425899.

[0144] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor del transportador de piruvato mitocondrial, tal como MSDC-0602K.

[0145] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un agente antioxidante, tal como vitamina E.

[0146] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un inhibidor de SGLT1, un inhibidor de SGLT2 o un inhibidor dual de SGLT1 y SGLT2. Ejemplos de estos compuestos son dapagliflozina, sotagliflozina, canagliflozina, empagliflozina, LIK066 y SGL5213.

[0147] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de la diacilglicerol O-aciltransferasa 2 (DGAT2), tal como DGAT2RX y PF-06865571.

[0148] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de la sintasa de ácidos grasos (FASN), tal como TVB-2640.

[0149] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un activador de la proteína quinasa activada por AMP (AMPK), tal como PXL-770.

[0150] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se administran en combinación con un antagonista del receptor de glucocorticoides (GR), un antagonista del receptor de mineralocorticoides (MR) o un antagonista dual GR/MR. Ejemplos de dichos compuestos son MT-3995 y CORT-118335.

[0151] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un antagonista del receptor cannabinoide 1 (CB1), tal como IM102.

[0152] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un activador de Klothop (KLB) y del receptor del factor de crecimiento de fibroblastos (FGFR), tal como MK-3655 (anteriormente conocido como NGM-3l3).

[0153] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor del ligando 24 de quimiocina (motivo c-c) (CCL24), tal como CM 101.

[0154] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un antagonista A3, tal como PBF-1650.

[0155] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un antagonista del receptor P2x7, tal como SGM 1019.

[0156] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con agonistas del receptor P2Y13, tales como CER-209.

[0157] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un oxisterol sulfatado, tal como Dur-928.

[0158] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un antagonista del receptor de leucotrieno D4 (LTD4), tal como MN-001.

[0159] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de células T asesinas naturales tipo 1 (NKT1), tal como GRI-0621.

[0160] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un compuesto antilipopolisacárido (LPS), tal como IMM-124E.

[0161] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de VAP1, tal como BI1467335.

[0162] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un agonista del receptor de adenosina A3, tal como CF-102.

[0163] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un activador de SIRT 1, tal como NS20.

[0164] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un agonista del receptor de ácido nicotínico 1, tal como ARI-3037MO.

[0165] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un antagonista de TLR4, tal como JKB-121.

[0166] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de cetohexoquinasa, tal como PF-06835919.

[0167] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un agonista del receptor de adiponectina, tal como ADP-335.

[0168] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de autotaxina, tal como PAT-505 y PF8380.

[0169] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un antagonista del receptor 3 de quimiocina (motivo c-c) (CCR3), tal como bertilimumab.

[0170] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un estimulador del canal de cloruro, tal como cobiprostona y lubiprostona.

[0171] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de la proteína de choque térmico 47 (HSP47), tal como ND-L02-s0201.

[0172] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor del factor de transcripción de la proteína de unión al elemento regulador de esteroles (SREBP), tal como CAT-2003 y MDV4463.

[0173] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con una biguanidina, tal como metformina.

[0174] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con insulina.

[0175] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de la glucógeno fosforilasa y/o un inhibidor de la glucosa 6-fosfatasa.

[0176] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con una sulfonilurea, tal como glipizida, glibenklamid y glimepirida.

[0177] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con una meglitinida, tal como repaglinida, nateglinida y ormiglitinida.

[0178] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de glucosidasa, tal como acarbosa o miglitol.

[0179] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de la escualeno sintasa, tal como TAK -475.

[0180] En otra forma de realización, los compuestos de fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se administran en combinación con un inhibidor de PTPB1, tal como trodusquemina, ertiprotafib, JTT-551 y claramina.Preparación de compuestos

[0181] Los compuestos de la invención pueden prepararse como un ácido libre o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo mediante los procesos que se describen a continuación. A lo largo de la siguiente descripción de dichos procesos, se entiende que, cuando corresponda, se añadirán y posteriormente se eliminarán grupos protectores adecuados de los diversos reactivos e intermedios de una manera que sea fácilmente comprensible para un experto en la técnica de la síntesis orgánica. Los procedimientos convencionales para el uso de dichos grupos protectores, así como ejemplos de grupos protectores adecuados, se describen, por ejemplo, en "Protective Groups in Organic Synthesis" de Greene, de PGM Wutz y TW Greene, 4.a edición, John Wiley & Sons, Hoboken, 2006.

Métodos generales.

[0182] Todos los disolventes utilizados fueron de grado analítico. Se utilizaron habitualmente disolventes anhidros disponibles comercialmente para las reacciones. Los materiales de partida se consiguieron en proveedores comerciales o se prepararon según los procedimientos de la bibliografía. La temperatura ambiente se refiere a 20-25 °C. Las composiciones de la mezcla de disolventes se expresan como porcentajes o proporciones de volumen.

LCMS:

Nombre del instrumento: Agilent 1290 Infinity II.

[0183]

Método A: Fase móvil: A: 0,1 % HCOOH en H<2>O: ACN (95:5), B: ACN; velocidad de flujo: 1,5 mL/min; columna: ZORBAX XDB C-18 (50 x 4,6 mm) 3,5 pM.

Método B: Fase móvil: A: 10 mM NH<4>HCO<3>en agua, B: ACN; velocidad de flujo: 1,2 mL/min; columna: XBridge C<8>(50 x 4,6 mm), 3,5 pM.

Método C: Fase móvil: A: 0,1% HCOOH en agua: ACN (95:5), B: ACN; velocidad de flujo: 1,5 mL/min; columna: ATLANTIS dC18 (50 x 4,6 mm), 5 pM.

Método D: Fase móvil: A: 10 mMNH<4>OAc en agua, B: ACN; velocidad de flujo: 1,2 mL/min; columna: Zorbax ExtendC18 (50 x 4,6 mm) 5 pM.

Método E: Fase móvil: A: 0,1% TFA en agua: ACN (95:5), B: 0,1% TFA en ACN; Caudal: 1,5 mL/min; Columna: XBridge C<8>(50 x 4,6 mm), 3,5 pM.

UPLC:

Nombre del instrumento: Waters Acquity I Class

[0184] Método A: Fase móvil: A: 0,1 % de HCOOH en agua, B: 0,1 % de HCOOH en ACN; Caudal: 0,8 mL/min; Columna: Acquity UPLC HSS T3 (2,1 x 50) mm; 1,8 pm.

HPLC:

[0185]

Nombre del instrumento: Instrumentos Agilent serie 1260 Infinity II, como se indica a continuación, utilizando % con detección UV (maxplot).

Método A: Fase móvil: A: 10 mM NH<4>HCO<3>en agua, B: ACN; caudal: 1,0 mL/min; columna: XBridge C<8>(50 x 4,6 mm, 3,5 pm).

Método B: Fase móvil: A: 0,1 % TFA en agua, B: 0,1 % TFA en ACN; caudal: 2,0 mL/min; columna: XBridge C<8>(50 x 4,6 mm, 3,5 pm).

Método C: Fase móvil: A: 10 mM N ^O A c en agua milli-q, B: ACN; caudal: 1,0 mL/min; columna: Phenomenex Gemini C18 (150 x 4,6 mm, 3,0 pm).

SFC quiral:

Nombre del instrumento: PIC SFC 10 (analítico)

La relación entre el CO<2>y el codisolvente varía entre 60:40 y 80:20

[0186]

MétodoA:Fase móvil: 0,5%de isopropilamina en alcohol isopropílico (IPA); caudal: 3 mL/min; columna: YMC Amylose-SA (250 x 4,6 mm, 5 |jm).

Método B: Fase móvil: 0,5 % de isopropilamina en alcohol isopropílico (IPA); caudal: 3 mL/min; columna: Chiralpak AD-H (250 x 4,6 mm, 5 jm).

Método C: Fase móvil: 20 mM de amoníaco en metanol; caudal: 3 mL/min; columna: YMC Cellulose-SC (250 x 4,6 mm, 5 jm ).

Método D: Fase móvil: metanol; velocidad de flujo: 3 mL/min; columna: Lux A1 (250 x 4,6 mm, 5 jm ).

Método E: Fase móvil: isopropilamina al 0,5 % en metanol; velocidad de flujo: 5 mL/min; columna: Lux C4. Método F: Fase móvil: isopropilamina al 0,5 % en metanol; velocidad de flujo: 3 mL/min; columna: YMC Cellulose-SC.

Método G: Fase móvil: isopropilamina al 0,5 % en metanol; velocidad de flujo: 3 mL/min; columna: Lux A1. Método H: Fase móvil: isopropilamina al 0,5 % en IPA; velocidad de flujo: 3 mL/min; columna: Lux A1 (250 x 4,6 mm, 5 jm).

Método I: Fase móvil: isopropilamina al 0,5 % en metanol; velocidad de flujo: 3 mL/min; Columna: CCS quiral (250 x 4,6 mm, 5 jm).

Método J: Fase móvil: 0,5 % de isopropilamina en alcohol isopropílico (IPA); caudal: 5 mL/min; columna: YMC Cellulose-SC AD-H (250 x 4,6 mm, 5 jm).

HPLC preparativo:

Nombre del instrumento: Agilent 1290 Infinity II

[0187]

Método A: Fase móvil: A: 0,1 % TFA en agua; Fase móvil; B: 0,1 % TFA en ACN; caudal: 2,0 mL/min; Columna: X-Bridge C8 (50 X 4,6 mm, 3,5 jM).

Método B: Fase móvil: A: 10 mM NH<4>OAc en agua; B: ACN; caudal: 35 mL/min; columna: X select C18 (30 x 150 mm, 5 jm ).

Método C: Fase móvil: A: 10 mM NH<4>HCO<3>en agua; B: ACN; caudal: 1,0 mL/min; columna: XBridge C8 (50 x 4,6 mm, 3,5 jm ).

Método D: Fase móvil: A: 0,1 % HCOOH en agua; B: ACN; caudal: 1,0 mL/min; Columna: X-select C18 (30 x 150 mm, 5 jm ).

SFC preparativo quiral:

Nombre del instrumento: PIC SFC 100 y PSC SFC 400.

La relación entre CO2 y codisolvente oscila entre 60:40 y 80:20.

[0188]

Método A: Fase móvil: 0,5 % de isopropilamina en IPA; velocidad de flujo: 3 mL/min; columna: YMC Amylose-SA (250 x 30 mm, 5 jm ).

Método B: Fase móvil: 0,5 % de isopropilamina en IPA; velocidad de flujo: 3 mL/min; columna: Chiralpak AD-H (250 x 30 mm, 5 jm ).

Método C: Fase móvil: 20 mM de amoníaco en metanol; velocidad de flujo: 3 mL/min; columna: YMC Cellulose-SC (250 x 30 mm, 5 jm ).

Método D: Fase móvil: metanol; velocidad de flujo: 3 mL/min; columna: Chiral CCS (250 x 30 mm, 5 jm ). Método E: Fase móvil: metanol; velocidad de flujo: 3 mL/min; columna: Lux A1 (250 x 30 mm, 5 jm ).

Método F: Fase móvil: 0,5 % de isopropilamina en alcohol isopropílico (IPA); caudal: 3 mL/min; Columna: Lux A1 (250 x 30 mm, 5 jm ).

Método G: Fase móvil: 0,5 % de isopropilamina en metanol; caudal: 3 mL/min; Columna: CCS quiral (250 x 30 mm, 5 jm).

Abreviaturas

[0189]

ACN acetonitrilo

DCM diclorometano

DMF dimetilformamida

API alcohol isopropílico

LCMS cromatografía líquida - espectrometría de masas

HPLC cromatografía líquida de alta resolución

PE éter de petróleo

SFC cromatografía de fluidos supercríticos

TFA ácido trifluoroacético

THF tetrahidrofurano

TLC cromatografía en capa fina

UPLC cromatografía líquida de ultra rendimiento

[0190] La invención se describirá ahora mediante los siguientes ejemplos que no limitan la invención en ningún aspecto.

EJEMPLOS

Intermedio 1

Clorhidrato de 2-aminobutanoato de etilo

[0191]

[0192] A una solución agitada de ácido 2-aminobutanoico (100 g, 0,97 mol) en etanol (750 mL), se añadió cloruro de tionilo (78 mL, 1,07 mol) a 0 °C. La mezcla de reacción se calentó a 80 °C durante 16 horas. Tras completar la reacción, se concentró al vacío para obtener el compuesto del título crudo, que se utilizó tal cual en el siguiente paso sin purificación adicional. Rendimiento: 93 % (152 g, sólido blanco).

[0193] RMN 1H (400 MHz, DMSO-da): 88,66 (bs, 3H), 4,25 -4,16 (m, 2H), 3,983,85 (m, 1H), 1,84 (t,J= 7,2 Hz, 2H), 1,23 (t,J= 6,8 Hz, 3H), 0,92 (t,J= 7,6 Hz, 3H).

Intermedio 2

Butanoato de etilo (£J-2(bencilidenammo)

[0194]

[0195] A una solución agitada de clorhidrato de 2-aminobutanoato de etilo (Intermedio 1; 152 g, 0,91 mol) en DCM (900 mL), se añadió trietilamina (152 mL, 1,09 mol) a 0 °C durante un período de 30 minutos. Se añadió sulfato de magnesio (98 g, 0,82 mol) en porciones a la mezcla de reacción a 0 °C. A continuación, se añadió benzaldehído (84 mL, 0,82 mol) a la mezcla de reacción a 0 °C durante 20 minutos y la mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Tras completar la reacción (controlada por TLC), la mezcla de reacción se filtró a través de celita y el filtrado se concentró al vacío. El crudo resultante se disolvió en éter de petróleo (1000 mL) y se filtró de nuevo a través de celita. El filtrado se concentró al vacío para obtener el compuesto del título. Este material crudo se transfirió tal cual al siguiente paso sin purificación adicional. Rendimiento: 90 % (180 g, líquido marrón claro).

[0196] RMN 1H (400 MHz, DMSO-dej: 88,40 (s, 1H), 7,79 -7,76 (m, 2H), 7,497,47 (m, 3H), 4,164,10 (m, 2H), 3,983,95 (m, 1H), 1,921,89 (m, 1H), 1,791,74 (m, 1H), 1,19 (t,J= 7,2 Hz, 3H), 0,85 (t,J= 7,2 Hz, 3H).

Intermedio 3

Etilo (£J-2(bencilidenoammo)-2-etilhexanoato

[0197]

[0198] A una solución agitada de NaH (60 %; 32,8 g, 0,82 mol) en DMF (100 mL) a 0 °C, se anadio lentamente (E)-2-(bencilidenamino)butanoato de etilo (Intermedio 2; 180 g, 0,82 mol) en DMF (800 mL) durante un período de 30 minutos. La mezcla de reacción se agitó durante 1,5 horas a temperatura ambiente. Se añadió yoduro de n-butilo (93 ml, 0,82 mol) a la mezcla de reacción a 0 °C y la mezcla se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Tras completar la reacción (controlada por TLC), la mezcla de reacción se extinguió con 2-propanol (100 ml) a 0 °C y se diluyó con agua (1000 ml). La fase acuosa se extrajo con éter de petróleo (1000 ml). La fase orgánica se lavó con salmuera (200 mL) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el material crudo resultante se transfirió tal cual al siguiente paso sin purificación adicional. Rendimiento: 88 % (200 g, líquido amarillo).

[0199] RMN 1H (400 MHz, DMSO-da): 8 8,34 (s, 1H), 7,80-7,77 (m, 2H), 7,47-7,44 (m, 3H), 4,16 (q,J= 7,0 Hz, 2H), 2,51-1,79 (m, 4H), 1,31 1,18 (m, 7H), 0,88-0,84 (m, 6H).

Intermedio 4

2-amino-2-etilhexanoato de etilo

[0200]

[0201] A una solución agitada de (E)-2-(bencilidenoamino)-2-etilhexanoato de etilo (Intermedio 3; 200 g, 0,73 mol) en éter de petróleo (500 mL), se añadió HCl diluido (1000 mL, 1,5 N) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó vigorosamente durante 16 horas a temperatura ambiente. Tras completarse la reacción (controlada por TLC), se separó la fase orgánica y se lavó la fase acuosa con EtOAc (2 x 100 mL). A continuación, se basificó la fase acuosa (pH ~8,5) utilizando bicarbonato de sodio sólido (200 g) y se extrajo con EtOAc (2 x 200 mL). La fase orgánica se lavó con agua (2 x 15 mL). La parte orgánica combinada se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro y se concentró al vacío para obtener el compuesto del título. El material bruto se envió tal cual a la siguiente etapa sin purificación adicional. Rendimiento: 80% (110 g, líquido amarillo pálido).

[0202] RMN 1H (400 MHz, DMSO-da): 84,08 (q,J= 7,1 Hz, 2H), 1,68 - 1,00 (m, 13H), 0,85 (t,J= 7,2 Hz, 3H), 0,77 (t,J= 7,4 Hz, 3H).

Intermedio 5

2-Amino -2-etil-N-fenilhexanamida

[0203]

[0204] A una solución agitada de anilina (48,3 mL, 534 mmol) en THF (250 mL) a -78 °C, se añadió gota a gota n-BuLi (2,6 M en hexanos; 205 mL, 534 mmol) durante un período de 30 minutos, y la mezcla de reacción se agitó durante 45 minutos a una temperatura de 25 °C a 30 °C. A continuación, se añadió 2-amino-2-etilhexanoato de etilo (Intermedio 4; 50 g, 267 mmol) en THF (250 mL) a la mezcla de reacción a 78 °C, y esta se agitó durante 2 horas a 78 °C. Tras completar la reacción (controlada por TLC), la mezcla de reacción se extinguió con agua (500 mL) a 78 °C. La mezcla de reacción se extrajo con EtOAc (2 x 250 mL) y la fase orgánica se lavó con agua (2 x 15 mL). La fase orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío para obtener el compuesto del título en bruto. El producto bruto se disolvió en éter de petróleo (1000 mL). La fase orgánica se lavó con metanol al 30 % en agua (2 x 250 mL) y se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro. La fase orgánica se concentró al vacío y el producto bruto resultante se transfirió al siguiente paso sin purificación adicional. Rendimiento: 66 g (líquido bruto de color marrón).

[0205] RMN 1H (400 MHz, DMSO-de):87,64 (d,J= 8,4 Hz, 2H), 7,30 (t,J= 7,4 Hz, 2H), 7,05 (t,J= 7,4 Hz, 1H), 6,55 (d,J= 8,5 Hz, 1H), 1,76 -1,07 (m, 10H), 0,860,77 (m, 6H).

Intermedio 6

2-Etil-N1-fenilhexano-1,2-diamina

[0206]

[0207] A una solución agitada de 2-amino-2-etil-W-fenilhexanamida (Intermedio 5; 66 g, 0,28 mol) en THF (600 mL), se añadió dimetilsulfuro de borano (2 M en THF, 253 mL, 0,51 mol) a 0 °C y la mezcla de reacción se calentó durante 16 horas a 70 °C. Tras completarse la reacción (monitoreada por TLC), la mezcla de reacción se extinguió con metanol (300 mL) a 0 °C. A continuación, la mezcla de reacción se calentó durante 2 horas a 70 °C. La mezcla de reacción se concentró al vacío y el residuo obtenido se disolvió en EtOAc (1000 mL). La fase orgánica se lavó con agua (2 x 150 mL), se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro y se concentró al vacío. El crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 40 % de EtOAc en hexano; gel de sílice: 230-400 mesh) para obtener el compuesto del título. Rendimiento: 82 % (50 g, líquido marrón).

[0208] RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 87,04 (t,J= 7,2 Hz, 2H), 6,61 (d,J= 8,4 Hz, 2H), 6,49 (t,J= 7,2 Hz, 1H), 5,15 (t,J= 4,8 Hz, 1H), 2,79 (d,J= 5,6 Hz, 2H), 1,39 - 1,17 (m, 10H), 0,88 -0,79 (m, 6H).

Intermedio 7

1,2-Bis(2,4-dibromo-5-metoxifenil)disulfano

[0209]

[0210] A una solución agitada de 3-metoxibencenotiol (100 g, 0,7 mol) en metanol (1000 mL), se añadió bromo (73 mL, 1,4 mol) gota a gota a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se evaporó al vacío y el crudo obtenido se diluyó con EtOAc (2000 mL) y se lavó con agua (2 x 500 mL). La capa orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro y se concentró al vacío. El crudo resultante se disolvió en ácido acético glacial (600 mL), se añadió bromo (20 mL) gota a gota a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. El sólido obtenido se filtró, se trituró con DCM y se secó al vacío para obtener el compuesto del título puro. Rendimiento: 37 % (78 g, sólido blanco). RMN 1H (400 MHz, DMSO-da):87,69 (s, 2H),7,17 (s, 2H), 3,84 (s, 6H).

Intermedio 8

Cloruro de 2,4-dibromo 5-metoxibencenosulfonilo

[0211]

[0212] A una suspensión agitada de 1,2-bis(2,4-dibromo-5-metoxifenil)disulfano (Intermedio 7; 20,0 g, 33,67 mmol) y nitrato de potasio (17,02 g, 168,35 mmol) en acetonitrilo (200 mL) se añadió gota a gota cloruro de sulfurilo (13,6 mL, 168,35 mmol) a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente. Tras completar la reacción (monitoreada mediante TLC), la mezcla de reacción se vertió en hielo picado y el sólido obtenido se filtró. El sólido se lavó con agua y se secó al vacío para obtener el compuesto del título puro. Rendimiento: 91 % (22,5 g, sólido blanco).

[0213] RMN 1H (400 MHz, DMSO-de):88,05 (s, 1H), 7,66 (s, 1H), 4,01 (s, 3H).

Intermedio 9

2,4-Dibromo-5-metoxi-N-(3((fenilamino)metil)heptan3-il)bencenosulfonamida

[0214]

[0215] A una solución agitada de 2-etil-N“-fenilhexano- 1,2-diamina (Intermedio 6; 4,9 g, 22,34 mmol) en THF (10 mL), se añadieron cloruro de 2,4-dibromo-5-metoxibencenosulfonilo (Intermedio 8; 10,5 g, 28,91 mmol) y trietilamina (9,3 mL, 67,02 mmol) a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. Tras completar la reacción (controlada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (50 mL). La fase orgánica se lavó con agua (2 x 15 mL) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. La parte orgánica se concentró al vacío y el crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 10 % de EtOAc/PE; gel de sílice: 230-400 mesh) para obtener el compuesto del título. Rendimiento: 59 % (7,2 g, sólido blanco).

[0216] RMN 1H (400 MHz, DMSO-de):88,01 (s,1H), 7,60 (s, 1H), 7,50 (s,1H), 7,03 (t,J= 8,1 Hz,2H), 6,54 -6,46 (m, 3H), 4,80 (t,J= 5,1 Hz, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,07 -2,96 (m, 2H), 1,66 1,41 (m, 4H), 1,150,95 (m, 4H), 0,780,69 (m, 6H).

Intermedio 10

7-Bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina 1,1-dióxido

[0217]

[0218] A una solución agitada de 2,4-dibromo 5-metoxi-N-(3((fenilamino)metil)heptan-3-il)bencenosulfonamida (Intermedio 9; 7,2 g, 13,1 mmol) en DMF (50 mL), se añadieron carbonato de potasio (3,62 g, 26,2 mmol) y polvo de cobre (834 mg, 13,1 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 24 horas a 150 °C. Tras completarse la reacción (monitoreada por TLC), la mezcla de reacción se filtró a través de celite y se lavó con EtOAc (25 mL). El filtrado se concentró al vacío y el crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 20 % de EtOAc/PE; gel de sílice: 230-400 mesh) para obtener el compuesto del título. Rendimiento: 83 % (5,1 g, sólido blanco).

[0219] RMN 1H (400 MHz, DMSO-dej: 87,43-7,30 (m, 4H), 7,157,13 (m, 2H), 7,037,01 (m, 2H), 4,003,60 (m, 5H), 1,62 1,34 (m, 4H), 1,080,95 (m, 4H), 0,740,71 (m, 6H). LCMS: (Método A) 467,0 (M+), Rt. 3,06 min, 95,31 % (máx.).

Intermedio 11

7-Bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi2(4-metoxibencil)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina 1,1-dióxido [0220]

[0221] A una solución agitada de 1,1-dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (Intermedio 10; 20,0 g, 42,7 mmol) en W-metil-2-pirrolidona (100 mL), se añadieron Cs2CO3 (27,8 g, 85,5 mmol) y bromuro de p-metoxibencilo (7,98 mL, 39,5 mmol) a 0 °C y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Tras completar la reacción (monitoreada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (200 mL) y la fase orgánica se lavó con agua (2 x 50 mL). La fase orgánica se secó sobre Na<2>SO3 anhidro y se concentró al vacío. El crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 10 % de EtOAc/PE; gel de sílice: 230-400 mesh) para obtener el compuesto del título. Rendimiento: 64 % (16 g, sólido blanco).

[0222] LCMS: (Método A) 587,2 (M+), Rt. 3,51 min, 92,94 % (máx.).

Intermedio 12

3-Butil-3-etil-8-hidroxi2(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina 1,1-dióxido [0223]

[0224] A una solución agitada de 1,1-dióxido de 7-bromo-3-butil-3-etil-8-metoxi-2(4-metoxibencil)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (Intermedio 11; 16,0 g, 27,2 mmol) en DMF (120 mL), se añadió tiometóxido de sodio (9,5 g, 136,1 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 16 horas a 60 °C. Tras completar la reacción (monitoreada por LCMS), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (200 mL) y la fase orgánica se lavó con agua (2 x 50 mL). La parte orgánica se secó sobre Na<2>SO<4>anhidro, se concentró al vacío y el crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: EtOAc/PE al 10 %; gel de sílice: 230-400 mesh) para obtener el compuesto del título. Rendimiento: 65 % (9,2 g, sólido blanco).

[0225] RMN 1H (400 MHz, DMSO-de):<8>10,37 (bs, 1H), 7,31-7,22 (m, 5H), 7,01-6,65 (m,<6>H), 4,32-4,13 (m, 2H), 4,10-3,90 (m, 2H), 3,74 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 1,62-1,34 (m, 4H), 1,08-0,98 (m, 4H), 0,74-0,65 (m,<6>H). LCMS: (Método E) 541,2 (M++H), Rt. 2,86 min, 93,67 % (máx.).

Intermedio 13

íerc-Butilo 2-((3-butN-3-etN-2-(4-metoxibencN)-7-(metMtio)-1,1-dióxido-5-fenN-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acetato

[0226]

[0227] A una solución de 1,1-dióxido de 3-butil-3-etil-8-hidroxi-2(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepina (Intermedio 12; 1 g, 1,85 mmol) en DMF (5 mL), se añadieron K<2>CO<3>seco (0,51 g, 3,70 mmol) y bromoacetatodetere-butilo (0,25 mL, 2,77 mmol) y la mezcla de reacción se calentó durante 16 horas a 100 °C. Tras completar la reacción (monitoreada por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (20 mL). La fase orgánica se lavó con agua (15 mL) y salmuera (15 mL), se secó sobre Na<2>SO<3>anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 15 % de EtOAc/PE; gel de sílice: 230-400 mesh) para obtener el compuesto del título. Rendimiento:<6 6>% (0,8 g, sólido blanco).

[0228] RMN 1H (400 MHz, DMSO-de):<8>7,29-7,27 (m, 4H), 7,11-6,96 (m, 4H),<6 , 8 8>(d,J= 7,8 Hz, 2H), 6,81 (s, 1H), 3,31 (s, 2H), 4,81 (s, 2H), 4,32 (s, 2H), 3,75 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 1,40 (s, 13H), 1,11-0,81 (m, 4H), 0,78-0,55 (m,<6>H). LCMS: (Método A) 655,3 (M++H), Rt. 3,51 min, 90,95 % (máx.).

Intermedio 14

íerc-Butilo (S)-2-((3-butil-3-etil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acetato y íerc-butilo (R)-2-((3-butN-3-etN-2-(4-metoxibencN)-7-(metMtio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acetato

[0229]

[0230] Los dos enantiómeros del 2-((3-butil-3-etil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acetato de íerc-butilo racémico (0,52 g, 0,79 mmol) se separaron por SFC quiral (método H). El material se concentró al vacío a 50 °C. La primera fracción de elución correspondió al enantiómero 1 y la segunda fracción de elución correspondió al enantiómero 2. Se desconoce la configuración absoluta de los dos enantiómeros.

[0231] Enantiómero 1: Rendimiento: 38 % (200 mg, sólido blanco). SFC quiral: (Método J) Rt. 3,13 min, 99,90 % (máx.). Enantiómero 2: Rendimiento: 42 % (220 mg, sólido blanco). LCMS: (Método E) 654,8 (M++H), Rt. 3,55 min, 99,21 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 7,12 min, 99,02 % (máx.). SFC quiral: (Método J) Rt. 3,84 min, 98,09 % (máx.).

Ejemplo 1

Ácido 2-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidrobenzo-1,2,5-tiadiazepin-8-il)oxi)acético

[0232]

[0233] A una solución agitada de2((3-butil-3-etil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetramdro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acetato de terc- butilo (Intermedio 13; 0,8 g, 1,22 mmol) en DCM (10 mL) a 0 °C, se añadieron TFA (4 mL) y trietilsilano (4 mL) y la mezcla de reacción se agitó durante 4 horas a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (controlada por TLC), la mezcla de reacción se vertió en agua helada y la capa acuosa se extrajo con DCM (2 x 10 mL). La capa orgánica combinada se lavó con agua helada (20 mL) y salmuera (20 mL), se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante HPLC preparativa (Método D) para obtener el compuesto del título. Rendimiento: 20 % (0,12 g, sólido blanquecino).

[0234] RMN 1H (400 MHz, DMSO-cfej: 813,18 (s, 1H), 7,27 (t,J= 8,0 Hz, 3H), 7,18 -7,04 (m, 3H), 6,956,93 (m, 1H), 6,60 (s, 1H), 4,77 (s, 2H), 3,82 (s, 2H), 2,12 (s, 3H), 1,621,52 (m, 2H), 1,491,43 (m, 2H), 1,401,35 (m, 1H), 1,240,97 (m, 3H), 0,760,72 (m, 6H). LCMS: (Método A) 479,1 (M++H), Rt. 2,65 min, 99,44 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5,58 min, 97,46 % (máx.).

Ejemplos 2 y 3: Ácido (S)-2-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acético y ácido (R)-2-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acético.

[0235]

[0236] A una solución del enantiómero 1 de 2-((3-butil-3-etil-2-(4-metoxibencil)-7-(metiltio)-1,1 -dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidrobenzo-1,2,5-tiadiazepin-8-il)oxi)acetato de terc-butilo (Intermedio 14; 0,20 g, 0,33 mmol) en tolueno (6 mL), se

añadió trifenilamina (0,16 g, 0,67 mmol) y la mezcla de reacción se enfrió a 0 °C. A continuación, se añadió TFA (0,77 g,

6.72 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 16 h a temperatura ambiente. Una vez completada la reacción (monitoreado por TLC), la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (15 mL) y la fase orgánica se lavó con agua (2 x 10

mL) y salmuera (10 mL). La fase orgánica se secó sobre Na2SO4 anhidro y se concentró al vacío. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna Isolera (eluyente: 30 % EtOAc/PE; gel de sílice: -mesh 230 x

400) para obtener el enantiómero 1 del compuesto del título.

[0237] El enantiómero 2 del compuesto del título se obtuvo siguiendo el mismo procedimiento, a partir de 0,22 g del enantiómero 2 del intermedio 14. No se conoce la configuración absoluta de los dos enantiómeros.

[0238] Enantiómero 1: Rendimiento: 43 % (70 mg, sólido blanco). RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): 8 13,14 (sb, 1H),

7,29-7,25 (m, 3H), 7,11 7,06 (m, 3H), 6,94 (t,J= 7,2 Hz, 1H), 6,60 (s, 1H), 4,78 (s, 2H), 3,85 (sb, 2H), 2,12 (s, 1.72 -1,58 (m, 1H), 1,57 1,45 (m, 1H), 1,43 1,35 (m, 2H), 1,29 1,14 (m, 1H), 1,130,88 (m, 3H), 0,74 (t,J= 7,2 Hz, 6H). LCMS: (Método E) 478,8 (M++H), Rt. 2,92 min, 98,18 % (máx.). HPLC: (Método B) Rt. 5,54 min, 97,87 % (máx.). SFC

quiral: (Método G) Rt. 2,0 min, 99,30 % (máx.).

[0239] Enantiómero 2: Rendimiento: 37 % (60 mg, sólido blanco). RMN 1H (400 MHz, DMSO-de): 8 13,10 (bs, 1H),

7,29 -7,25 (m, 3H), 7,11 7,06 (m, 3H), 6,966,94 (m, 1H), 6,60 (s, 1H), 4,78 (s, 2H), 3,80 (bs, 2H), 2,12 (s, 3H), 1,72 1,58

(m, 1H), 1,57 1,45 (m, 1H), 1,43 1,35 (m, 2H), 1,29 1,13 (m, 1H), 1,13 0,88 (m, 3H), 0,74 (t,J= 7,2 Hz, 6H). L (Método E) 478,9 (M++H), Rt. 2,92 min, 98,99 % (máx.), HPLC: (Método B) Rt. 5,53 min, 97,81 % (máx.). SFC quiral:

(Método G) Rt. 1,89 min, 100 % (máx.).

ENSAYOS BIOLÓGICOS:

Protocolo de ensayo IBAT (h/m).

[0240] 10.000 células (humanas o de ratón con sobreexpresión de IBAT) en una placa de 96 pocillos (Corning CLS3809) en 200 pL de medio MEM-alfa (Gibco 12571-063) suplementado con 10% de SFB (Gibco 10438026) que contenía puromicina (Gibco A1113803) (10 pg/mL) y se incubaron a 37 °C en CO<2>al 5% durante 48 horas. Tras la incubación, se decantó el medio de los pocillos y las células se lavaron dos veces con 300 pL de medio MEM-alfa basal (sin SFB). Tras

cada decantación del medio MEM-alfa basal, las placas se golpearon contra una toalla de papel para asegurar la máxima eliminación del medio residual. Se añadieron diluciones del inhibidor de prueba (con una concentración máxima de prueba

de 10 pM, dilución seriada triple, 10 puntos) preparadas en DMSO (Sigma D2650) a la mezcla de incubación (manteniendo

una concentración final de Dm SO del 0,2 %) que contenía 0,25 pM de ácido 3H-taurocólico (ARC ART1368) y 5 pM de

ácido taurocólico frío (Sigma T4009). A continuación, se añadieron 50 pL de la mezcla de incubación con inhibidores de

prueba a los pocillos (por duplicado) y las placas se incubaron durante 20 minutos en una incubadora de CO<2>a 37 °C.

Tras la incubación, se detuvo la reacción manteniendo las placas en una mezcla de agua helada durante 23 minutos y, a continuación, se aspiró completamente la mezcla de incubación de los pocillos. Los pocillos se lavaron dos veces con 250

pL de ácido taurocólico 1 mM frío sin marcar, disuelto en HBSS (Gibco 14175079) tamponado con HEPES (Gibco 15630080) (10 mM) (pH 7,4). Las placas se golpearon contra una toalla de papel después de cada lavado para asegurar la máxima eliminación del tampón de bloqueo. Se añadieron 100 pL de MicroScint20 (PerkinElmer 6013621) a los pocillos

y se mantuvieron a temperatura ambiente durante la noche antes de leer las placas en el contador de centelleo y luminiscencia de microplacas TopCount NXT™ de PerkinElmer, según el protocolo de la prueba 3H (tiempo de lectura de

120 segundos por pocillo).

Protocolo de ensayo LBAT (h/m)

[0241] Se sembraron 20.000 células (humanas o de ratón con sobreexpresión de LBAT) en una placa de 96 pocillos (Corning CLS3809) en 100 pL de medio MEM-alfa (Gibco 12571-063) suplementado con 10% de SFB (Gibco 10438026) que contenía Geneticina (Gibco 10131027) (1 mg/mL) y se incubaron a 37 °C en 5% de CO<2>durante 24 horas. Tras la incubación, se decantó el medio de los pocillos y las células se lavaron dos veces con 300 pL de medio MEM-alfa basal

(sin SFB). Tras cada decantación del medio MEM-alfa basal, las placas se golpearon contra una toalla de papel para asegurar la máxima eliminación del medio residual. Para LBAT humano, la mezcla de incubación se preparó añadiendo diluciones de inhibidor de prueba (dilución seriada de 3 veces en DMSO (Sigma D2650), 10 puntos) en MEM-alfa (sin FBS) que contenía 0,3 pM de ácido 3H-taurocólico (ARC ART1368) y 7,5 pM de ácido taurocólico frío (Sigma T4009) (manteniendo una concentración final de DMSO del 0,2%). Para LBAt de ratón, la mezcla de incubación se preparó añadiendo diluciones de inhibidor de prueba (dilución seriada de 3 veces en DMSO, 10 puntos) en MEM-alfa (sin FBS) que contenía 0,3 pM de ácido 3H-taurocólico y 25 pM de ácido taurocólico frío manteniendo una concentración final de DMSO del 0,2%).

[0242] Se añadieron 50 pL de la mezcla de incubación con inhibidores de prueba a los pocillos (por duplicado) y las placas se incubaron durante 20 minutos en una incubadora de CO2 a 37 °C. Tras la incubación, se detuvo la reacción manteniendo las placas en una mezcla de agua helada durante 2-3 minutos y, a continuación, se aspiró completamente la mezcla de incubación de los pocillos. Los pocillos se lavaron dos veces con 250 pL de ácido taurocólico 1 mM frío sin marcar disuelto en HBSS tamponado con h Ep ES (Gibco 15630080) (10 mM) (Gibco 14175079) (pH 7,4). Las placas se golpearon contra una toalla de papel después de cada lavado para asegurar la máxima eliminación del tampón de bloqueo.

[0243] 100 pL de MicroScint -20 (PerkinElmer 6013621) a los pocillos y se mantuvieron durante la noche a temperatura ambiente antes de leer las placas en el contador de centelleo y luminiscencia de microplacas TopCount NXT™ de PerkinElmer. Protocolo de prueba 3H (tiempo de lectura de 120 segundos por pocillo, con orientación normal de la placa).

Ensayo de permeabilidad bidireccional (células Caco 2).

[0244] Caco 2 (Evotec) a una densidad de 70.000 células/pocillo en placas de inserción de cultivo celular Millicell® de 24 pocillos y se mantuvieron en una incubadora (37 °C, 5 % de CO<2>, 95 % de HR) durante 21 días con cambio de medio en días alternos.

[0245] Soluciones madre (10 mM) de los compuestos de prueba, atenolol (marcador de baja permeabilidad), propranolol (marcador de alta permeabilidad) y digoxina (sustrato de la vía de transporte de P-gp) en dimetilsulfóxido (DMSO). Se preparó una solución madre intermedia (1 mM) diluyendo 10 pL de la solución madre 10 mM con 90 pL de DMSO puro. Se preparó una solución madre de trabajo (10 pM) diluyendo 50 pL de la solución madre 1 mM con 4950 pL de tampón FaSSlF. Tras la adición de los compuestos al FaSSIF, las muestras se sometieron a sonicación durante 2 horas y se centrifugaron a 4000 RPM durante 30 minutos a 37 °C. Los 4 mL del sobrenadante resultante se utilizaron directamente en el ensayo. La concentración final de DMSO en los experimentos de transporte fue del 1%.

[0246] El día del ensayo, las monocapas de Caco<2>se lavaron dos veces con tampón de transporte (HBSS, pH 7,4) y se preincubaron durante 30 min (37 °C, 5 % de CO<2>, 95 % de HR) en una incubadora. La resistencia eléctrica de las monocapas se midió con un sistema Millicell® - ERS. Se seleccionaron para el ensayo las monocapas con valores de resistencia eléctrica transepitelial (TEER) superiores a 350 ohm.cm2.

[0247] El ensayo se realizó en dirección absortiva (A<2>B) y secretora (B<2>A). Los experimentos de transporte se iniciaron mediante la adición de tampón de ensayo de transporte (tampón FaSSIF preparado en HBSS), compuesto por compuestos, al compartimento donante (cámara apical AB; cámara basolateral BA) en pocillos duplicados (n=2). Se introdujo tampón HBSS sin fármaco (pH 7,4) con 1 % de albúmina sérica bovina (BSA) en los compartimentos receptor (AB-basolateral; B-A-Apical). Los volúmenes de los compartimentos apical y basolateral fueron de 0,4 y 0,8 mL, respectivamente. Tras añadir la solución de dosificación, las placas se incubaron en una incubadora durante 120 minutos a 37 °C. Después de 120 minutos, se recogieron las muestras del donante y del receptor y se realizó el emparejamiento de la matriz (1:1, 30 pL de muestra de estudio 30 pL de tampón blanco) con el tampón opuesto. Las muestras se dosificaron con una matriz de igualación (1:1, 30 pL de muestra de estudio 30 pL de tampón blanco) y el tampón opuesto. Las muestras se procesaron añadiendo acetonitrilo con estándar interno (60 pL de muestra de estudio 200 pL de acetonitrilo con estándar interno tolbutamida, 500 ng/mL). Las muestras se agitaron en vórtex y se centrifugaron a 4000 rpm durante 10 minutos. El sobrenadante obtenido (100 pL) se diluyó con 100 pL de agua y se transfirió a placas nuevas de 96 pocillos. La concentración de compuestos en las muestras se analizó mediante cromatografía líquida/espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS), utilizando un método bioanalítico de grado Discovery, según corresponda.

[0248] La permeabilidad aparente media (Papp, x 10'6-cm/s) de los compuestos de prueba, atenolol, propranolol y digoxina, se calculó de la siguiente manera:

Papp = -dq

dtEX—1 1

CoX-A

donde dq/dt = velocidad de transporte (velocidad de transporte del compuesto en el compartimento receptor), C<0>= concentración inicial en el compartimento donante, A = área superficial de la membrana filtrante efectiva.

Protocolo de ensayo basado en HepaRG.

[0249] Un vial criopreservado de células HepaRG diferenciadas (Biopredic International HPR116080) se descongela en medio de descongelación/siembra/uso general HepaRG (Biopredic International ADD670C) suplementado con 200 mM de Glutamax (Gibco 35050061), siguiendo el protocolo proporcionado por Biopredic International. Se siembran 70.000 células por pocillo en una placa de 96 pocillos (Corning CLS3809) en 100 pL de medio de descongelación/placación/propósito general HepaRG suplementado con 200 mM Glutamax y se incuban a 37 °C en 5 % de CO<2>durante 24 horas. Tras la incubación, el medio de siembra se reemplaza con medio de mantenimiento/metabolismo HepaRG (Biopredic International ADD620C) y se incuba durante 6 días, con reposición de medio de mantenimiento/metabolismo HepaRG fresco cada 48 horas. Tras 7 días de incubación, el medio de incubación se decanta de los pocillos y las células se lavan dos veces con 250 pL de medio basal William's E (Gibco 12551032). Tras cada decantación, las placas se golpean contra una toalla de papel para asegurar la máxima eliminación del medio residual. La mezcla de incubación se prepara añadiendo diluciones del inhibidor de prueba (dilución seriada triple en DMSO [Sigma D2650]) en medio William's E (basal) con 0,3 pM de ácido 3H-taurocólico (ARC ART-1368) y 7,5 pM de ácido taurocólico frío (Sigma T4009) (manteniendo una concentración final de DMSO del 0,2 %). A continuación, se añaden 50 pl de la mezcla de incubación con inhibidores de prueba a los pocillos (por duplicado) y las placas se incuban durante 30 minutos en una incubadora con CO2 al 5 % a 37 °C. Tras la incubación, se detiene la reacción manteniendo las placas en una mezcla de agua helada durante 23 minutos y, a continuación, se aspira completamente la mezcla de incubación de los pocillos. Los pocillos se lavan dos veces con 250 pL de ácido taurocólico 1 mM frío sin marcar, disuelto en HBSS tamponado con HEPES (Gibco 15630080) (10 mM) (Gibco 14175079) (pH 7,4). Las placas se golpean contra una toalla de papel después de cada lavado para garantizar la eliminación máxima del tampón de bloqueo.

[0250] 100 pL de MicroScint 20 (PerkinElmer 6013621) a los pocillos y se mantienen durante la noche a temperatura ambiente antes de leer las placas en el contador de centelleo y luminiscencia de microplacas TopCount NXT™ de PerkinElmer según el protocolo de prueba 3H (establecido en un tiempo de lectura de 120 segundos por pocillo, con orientación de placa normal).

Preparación de diluciones del compuesto de prueba

[0251] Todos los compuestos de prueba se proporcionaron en polvo a temperatura ambiente. Se prepararon soluciones madre de DMSO 10 mM, se alicuotaron y se almacenaron a 20 °C. A partir de la solución madre de DMSO 10 mM, se preparó una dilución seriada triple en DMSO para obtener un total de 10 diluciones. Se añadieron 0,5 pL de esta dilución en DMSO a 250 pL de medio basal sin FBS que contenía ácido 3H-taurocólico y ácido taurocólico frío para preparar la mezcla de incubación.

Estudios de biodisponibilidad

[0252] ratones macho (C57BL/6 o CD1) o ratas Wistar de 8 a 9 semanas de edad. Para cada compuesto de prueba, se formaron dos grupos de 3 animales cada uno. A un grupo se le administró una dosis intravenosa única de 1 mg/kg (vehículo DMSO al 100 %) por la vena de la cola, y al otro grupo se le administró una dosis oral única de 10 mg/kg mediante sonda gástrica. El grupo al que se le administró la dosis oral permaneció en ayunas durante la noche. Se recogieron muestras de sangre a las 0,083, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 6, 8 y 24 horas de la administración intravenosa, y a las 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 6, 8 y 24 horas de la administración oral. Las muestras de sangre se tomaron de la vena safena. Se utilizó EDTA al 0,2 % como anticoagulante. Las muestras fueron analizadas mediante un método bioanalítico de grado de descubrimiento desarrollado para la estimación del compuesto de prueba en plasma, utilizando un sistema LC-MS/MS.

Resultados

[0253] Los datos biológicos de los compuestos de los ejemplos se muestran en la Tabla 8 a continuación.

Tabla 8

[0254]Modelo PD: Evaluación del compuesto de prueba sobre los niveles de ácidos biliares totales en ratones macho C57BL6.

[0255] Ratones C57BL/6N Tac de 8 a 9 semanas de edad para estudiar el efecto de los moduladores de ácidos biliares en los niveles de ácidos biliares. Tras completar el período de cuarentena y aclimatación, los animales se distribuyeron aleatoriamente -, según su peso corporal, en x grupos experimentales: (i) control con vehículo, y (ii) compuesto de prueba y mg/kg por vía oral una vez al día. Los animales se trataron con el compuesto de prueba durante 7 días. El día 5 del estudio, los animales se alojaron individualmente en jaulas limpias. El día 7, se recolectaron heces de cada jaula y, a continuación, se extrajo sangre de cada animal por vía retroorbital. Los animales se sacrificaron para obtener hígado e íleon terminal de cada animal para su posterior análisis. El peso corporal y el consumo de alimento se midieron dos veces por semana. Los perfiles lipídicos séricos se analizan en muestras de suero del día 7. Los ácidos biliares totales en suero se miden en las muestras de suero del día 7. La excreción biliar fecal se mide en la muestra fecal del día 7. La expresión hepática de CYP7A1 y SHP se cuantifica en las muestras de hígado del día 7. Los triglicéridos hepáticos y el colesterol total se analizan en las muestras de hígado del día 7.

[0256]Modelo de ácido biliar en orina: evaluación de compuestos de prueba sobre los niveles de ácidos biliares en orina en ratones machos C57BL/6N.

[0257] Ratones C57BL/6N Tac de 8 a 9 semanas de edad para estudiar el efecto de los moduladores de ácidos biliares en los niveles de ácidos biliares. Tras completar el período de cuarentena y aclimatación, los animales se distribuyeron aleatoriamente, según su peso corporal, en x grupos experimentales: (i) control con vehículo, y (ii) compuesto de prueba y mg/kg por vía oral una vez al día. Los animales se trataron con el compuesto de prueba durante 7 días. El día 6 del estudio, se transfirieron a una jaula metabólica. El día 7, se recolectaron heces y orina de cada jaula metabólica, seguidas de una extracción de sangre de cada animal por vía retroorbital. Los animales se sacrificaron para obtener riñones de cada uno para su posterior análisis. El peso corporal se midió dos veces por semana. Los ácidos biliares totales en suero se miden en muestras de suero del día 7. La excreción fecal de ácidos biliares se mide en la muestra fecal del día 7. La excreción urinaria de ácidos biliares se mide en la muestra del día 7. La expresión renal de ASBT, OSTa, OSTAb y MRP2 se cuantifica en las muestras del día 7.

Claims

REIVINDICACIONES 1. Un compuesto de fórmula (I)

en donde R1 y R2 son cada uno independientemente alquilo C<1-4>; R3 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, hidroxi, alquilo C<1-4>, haloalquilo C<1-4>, alcoxi C<1-4>, haloalcoxi C<1-4>, ciano, nitro, amino, N-(alquil C<1-4>)amino,NN-di(alquil C<1-4>)amino y N-(aril-alquil C<1-4>)amino; n es un número entero 1, 2 o 3; y R4 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, hidroxi, ciano, alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, alcoxi C<1.4>, cicloalquiloxi C<3-6>, alquiltio C<1.4>, cicloalquiltio C<3-6>, amino, N-(alquil C<1-4>)amino yNN-di(alquil C<1>. <4>)amino; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, con la condición de que el compuesto no sea un compuesto del grupo que consiste en: ácido 2-((3,3-dibutil-7-metil-5-fenil-1,1-dióxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acético; ácido 2-((3,3-dibutil-7(metiltio)-5-fenil-1,1-dióxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acético; y ácido 2-((7-bromo-3,3-dibutil5-fenil-1,1-dióxido-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acético.
2. Un compuesto según la reivindicación 1, en el que R1 es n-butilo.
3. Un compuesto según la reivindicación 1o 2, en el que R2 es n-butilo.
4. Un compuesto según la reivindicación 1o 2, en el que R2 es etilo.
5. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que R3 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, hidroxi, ciano, haloalquilo C<1-4>, alcoxi C<1-4>y haloalcoxi C<1-4>.
6. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que R3 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, flúor, cloro, bromo, hidroxi, ciano, trifluorometilo, metoxi y trifluorometoxi.
7. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que R4 se selecciona del grupo que consiste en halógeno, hidroxi, ciano, -alquilo C<1-4>, alcoxi C<1-4>, alquiltio C<1-4>, amino, N-(alquil C<1-4>)amino y N,N-di(-alquil C<1-4>)amino.
8. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que R4 se selecciona del grupo que consiste en flúor, cloro, bromo, hidroxi, ciano, metilo, metoxi, etoxi, metiltio, etiltio, amino, metilamino y dimetilamino.
9. Un compuesto según la reivindicación 1, seleccionado del grupo que consiste en: ácido 2-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidrobenzo-1,2,5-tiadiazepin-8-il)oxi) acético; ácido (S)-2-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acético; y ácido (R)-2-((3-butil-3-etil-7-(metiltio)-1,1-dióxido-5-fenil-2,3,4,5-tetrahidro-1,2,5-benzotiadiazepin-8-il)oxi)acético; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
10. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.1
11. Un compuesto de fórmula (I)

en donde R1 y R2 son cada uno independientemente alquilo C<1-4>; R3 se selecciona independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, hidroxi, alquilo C<1-4>, haloalquilo C<1-4>, alcoxi C<1-4>, haloalcoxi C<1-4>, ciano, nitro, amino, /V-(alquil C<1-4>)amino, N,N-di(-alquil C<1-4>)amino y N-(aril-alquil C<1-4>)amino; n es un número entero 1,2 o 3; y R4 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, halógeno, hidroxi, ciano, -alquilo C<1-4>, cicloalquilo C<3-6>, alcoxi C<1.4>, cicloalquiloxi C<3-6>, alquiltio C<1.4>, cicloalquiltio C<3-6>, amino, N-(alquil C<1-4>)amino y N,N-di(-alqui<4>)amino; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso como medicamento.
12. El compuesto para su uso, según la reivindicación 11, en el tratamiento o la prevención de enfermedades cardiovasculares, trastornos del metabolismo de los ácidos grasos o trastornos de la utilización de la glucosa, como la hipercolesterolemia; trastornos del metabolismo de los ácidos grasos; diabetes mellitus tipo 1 y tipo 2; complicaciones de la diabetes, incluyendo cataratas, enfermedades microvasculares y macrovasculares, retinopatía, neuropatía, nefropatía y retraso en la cicatrización de heridas, isquemia tisular, pie diabético, arteriosclerosis, infarto de miocardio, síndrome coronario agudo, angina de pecho inestable, angina de pecho estable, accidente cerebrovascular, enfermedad arterial oclusiva periférica, miocardiopatía, insuficiencia cardíaca, trastornos del ritmo cardíaco y reestenosis vascular. enfermedades relacionadas con la diabetes, como resistencia a la insulina (alteración de la homeostasis de la glucosa), hiperglucemia, hiperinsulinemia, niveles elevados de ácidos grasos o glicerol en sangre, obesidad, dislipidemia, hiperlipidemia, incluida hipertrigliceridemia, síndrome metabólico (síndrome X), aterosclerosis e hipertensión; y para aumentar los niveles de lipoproteínas de alta densidad.
13. El compuesto para su uso según la reivindicación 11, en el tratamiento o la prevención de una enfermedad o trastorno gastrointestinal, como estreñimiento (incluyendo estreñimiento crónico, estreñimiento funcional, estreñimiento idiopático crónico (CIC), estreñimiento intermitente/esporádico, estreñimiento secundario a diabetes mellitus, estreñimiento secundario a accidente cerebrovascular, estreñimiento secundario a enfermedad renal crónica, estreñimiento secundario a esclerosis múltiple, estreñimiento secundario a enfermedad de Parkinson, estreñimiento secundario a esclerosis sistémica, estreñimiento inducido por fármacos, síndrome del intestino irritable con estreñimiento (SII-E), síndrome del intestino irritable mixto (SII-M), estreñimiento funcional pediátrico y estreñimiento inducido por opioides); enfermedad de Crohn; malabsorción primaria de ácidos biliares; síndrome del intestino irritable (SII); enfermedad inflamatoria intestinal (EII); inflamación ileal; y la enfermedad por reflujo y sus complicaciones, como el esófago de Barrett, la esofagitis por reflujo biliar y la gastritis por reflujo biliar.
14. El compuesto para uso según la reivindicación 11, en el tratamiento o prevención de una enfermedad o trastorno hepático, tal como un trastorno metabólico hereditario del hígado; errores congénitos de la síntesis de ácidos biliares; anomalías congénitas de los conductos biliares; atresia biliar 68; atresia biliar pos-Kasai; atresia biliar postrasplante de hígado; hepatitis neonatal; colestasis neonatal; formas hereditarias de colestasis; xantomatosis cerebrotendinosa; un defecto secundario de la síntesis de BA; síndrome de Zellweger; enfermedad hepática asociada a fibrosis quística; deficiencia de alfa1 -antitripsina; síndrome de Alagilles (ALGS); síndrome de Byler; un defecto primario de la síntesis de ácidos biliares (BA); colestasis intrahepática familiar progresiva (CIPF) que incluye CIPF-1, CIPF-2, CIPF-3 y CIPF no especificada, CIPF posderivación biliar y CIPF postrasplante de hígado; colestasis intrahepática recurrente benigna (BRIC) incluyendo BRIC1, BRIC2 y BRIC no especificado, BRIC posderivación biliar y BRIC postrasplante de hígado; hepatitis autoinmune; cirrosis biliar primaria (CBP); fibrosis hepática; enfermedad del hígado graso no alcohólico (EHGNA); esteatohepatitis no alcohólica (EHNA); hipertensión portal; colestasis; colestasis del síndrome de Down; colestasis inducida por fármacos; colestasis intrahepática del embarazo (ictericia durante el embarazo); colestasis intrahepática; colestasis extrahepática; colestasis asociada a nutrición parenteral (PNAC); colestasis asociada a bajos niveles de fosfolípidos; síndrome de colestasis por linfedema 1 (LSC1); colangitis esclerosante primaria (CEP); colangitis asociada a inmunoglobulina G4; colangitis biliar primaria; colelitiasis (cálculos biliares); litiasis biliar; coledocolitiasis; pancreatitis por cálculos biliares; enfermedad de Caroli; neoplasia maligna de los conductos biliares; neoplasia maligna que causa obstrucción del árbol biliar; estenosis biliares; colangiopatía del SIDA; colangiopatía isquémica; prurito debido a colestasis o ictericia; pancreatitis; enfermedad hepática autoinmune crónica que conduce a colestasis progresiva; esteatosis hepática; hepatitis alcohólica; hígado graso agudo; hígado graso del embarazo; hepatitis inducida por fármacos; trastornos de sobrecarga de hierro; defecto congénito de la síntesis de ácidos biliares tipo 1 (BAS tipo 1); lesión hepática inducida por fármacos (DILI); fibrosis hepática; fibrosis hepática congénita; cirrosis hepática; histiocitosis de células de Langerhans (LCH); colangitis esclerosante por ictiosis neonatal (NISCH); protoporfiria eritropoyética (EPP); ductopenia idiopática del adulto (IAD); hepatitis neonatal idiopática (INH); escasez no sindrómica de conductos biliares interlobulares (NS PILBD); cirrosis infantil en indios norteamericanos (NAIC); sarcoidosis hepática; amiloidosis; enterocolitis necrotizante; toxicidades causadas por ácidos biliares séricos, incluyendo alteraciones del ritmo cardíaco (p. ej., fibrilación auricular) en el contexto de un perfil anormal de ácidos biliares séricos, miocardiopatía asociada con cirrosis hepática ("colecardia") y atrofia muscular esquelética asociada con enfermedad hepática colestásica; enfermedad hepática poliquística; hepatitis viral (incluyendo hepatitis A, hepatitis B, hepatitis C, hepatitis D y hepatitis E); carcinoma hepatocelular (hepatoma); colangiocarcinoma; cánceres gastrointestinales relacionados con ácidos biliares; y colestasis causada por tumores y neoplasias del hígado, del tracto biliar y del páncreas; o en la mejora de la terapia con corticosteroides en enfermedad hepática.
15. El compuesto para su uso según la reivindicación 11, en el tratamiento o la prevención de síndromes de hiperabsorción (incluyendo abetalipoproteinemia, hipobetalipoproteinemia familiar (FHBL), enfermedad de retención de quilomicrones (CRD) y sitosterolemia); hipervitaminosis y osteopetrosis; hipertensión; hiperfiltración glomerular; enfermedad renal poliquística (PKD), incluyendo enfermedad renal poliquística autosómica dominante (ADPKD) y enfermedad renal poliquística autosómica recesiva (ARPKD); y prurito de insuficiencia renal; o en la protección contra daño renal asociado a enfermedad hepática o metabólica.