ES3049312T3 - Co-crystal of gabapentin, ketoprofen and lysine, pharmaceutical compositions and their medical use - Google Patents

Abstract

La presente invención se refiere a un nuevo cocristal de Gabapentina, Ketoprofeno y Lisina, a composiciones farmacéuticas y a su uso en la prevención, reducción o tratamiento del dolor y/o inflamación. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0002] Cocristal de gabapentina, ketoprofeno y lisina, composiciones farmacéuticas y uso médico de los mismos

[0003] La presente invención se refiere a un cocristal de gabapentina, ketoprofeno y lisina, tal como se define en las reivindicaciones, a un procedimiento para su preparación, a una composición farmacéutica que comprende dicho cocristal y a la utilización de dicho cocristal o composición farmacéutica en el tratamiento del dolor agudo o crónico, en particular en el tratamiento del dolor neuropático o inflamatorio.

[0004] Antecedentes de la técnica

[0005] El dolor es una experiencia sensorial y emocional que generalmente aparece por un daño real o potencial en los tejidos.

[0006] Las condiciones de dolor se pueden dividir en agudas y crónicas.

[0007] El dolor agudo es un dolor que dura un corto período de tiempo, normalmente menos de tres meses, y que habitualmente está asociado a lesiones tisulares, inflamación, un procedimiento quirúrgico, parto o un proceso patológico breve.

[0008] El dolor crónico ha sido reconocido como un dolor que persiste más allá del tiempo normal de curación y que, por lo tanto, carece de la función de advertencia aguda de la nocicepción fisiológica. Generalmente, el dolor se clasifica como crónico cuando dura o reaparece durante más de tres meses.

[0009] El dolor crónico puede presentar diferentes etiologías e incluye dolor neuropático, dolor inflamatorio crónico, por ejemplo, la artritis, o dolor de origen desconocido, tal como la fibromialgia y el síndrome de las piernas inquietas. El dolor neuropático crónico es provocado por una lesión o enfermedad del sistema nervioso somatosensorial que proporciona información sobre el cuerpo, incluyendo la piel, el sistema musculoesquelético y los órganos viscerales. Varias enfermedades o afecciones patológicas pueden provocar un daño en las neuronas sensoriales, resultando en hiperalgesia o alodinia, tales como por ejemplo en el dolor lumbar, ciática, dolor postoperatorio, dolor del cáncer, dolor de miembro fantasma, dolor por VIH, dolor neuropático diabético, dolor por herpes zóster o neuralgia del trigémino. El dolor inflamatorio crónico está asociado a una fuerte inflamación de etiología infecciosa, autoinmune o metabólica, tal como la artritis reumatoide, y por cambios estructurales que afectan a los huesos, las articulaciones, los tendones o los músculos, tal como la osteoartritis.

[0010] La terapia de este tipo de dolor generalmente incluye la utilización de fármacos antiinflamatorios no esteroideos, acetaminofeno (paracetamol) y otros agentes modificadores de enfermedad.

[0011] Debido a su compleja etiología, el tratamiento farmacológico del dolor neuropático difiere del tratamiento del dolor no neuropático. Las directrices recomiendan la utilización de inhibidores de la recaptación de la serotonina y norepinefrina, antidepresivos tricíclicos, anticonvulsivos o tratamiento con lidocaína tópica como medicación de primera y segunda línea para el control del dolor neuropático, con opioides generalmente recomendados como terapias de segunda o tercera línea (Deng et al. BMC Anesthesiology (2016) 16:12). El acetaminofeno (paracetamol) y los antiinflamatorios no esteroideos resultan en gran medida ineficaces para el dolor neuropático.

[0012] La neuroinflamación es una afección fisiológica/patológica caracterizada por la infiltración de células inmunitarias, activación de células gliales y producción de mediadores inflamatorios en el sistema nervioso periférico y central. Los últimos avances indican que el desarrollo de la neuroinflamación de los tejidos, dentro del sistema nervioso periférico (SNP) y del sistema nervioso central (SNC), es responsable de generar y mantener la sensibilización de las neuronas nociceptivas, llevando al dolor crónico. La neuroinflamación ocurre en el SNP (es decir, nervios periféricos y ganglios) y en el SNC (es decir, médula espinal y cerebro) y se caracteriza por la infiltración de leucocitos y una producción incrementada de mediadores inflamatorios en estos sitios. El tráfico de diferentes tipos de leucocitos en el SNP y el SNC ocurre con diferentes perfiles temporales. La neuroinflamación se manifiesta como la activación de células gliales, tales como las células de Schwann en nervios, las células gliales satélites en los ganglios y la microglía, así como los astrocitos y oligodendrocitos en la médula espinal y el cerebro. La activación de las células gliales conduce a la producción de mediadores gliales que pueden modular la sensibilidad al dolor.

[0013] La neuroinflamación es una inflamación local, lo que significa que resulta más eficaz para inducir y mantener el dolor que la inflamación sistémica, sin embargo, es difícil de detectar en clínica. Por ejemplo, la fibromialgia, una afección crónica de dolores musculares, se había considerado anteriormente un dolor atípico, debido a que no se podía detectar ninguna patología obvia ni inflamación en los pacientes afectados. Sin embargo, un estudio reciente ha identificado neuropatía de fibras nerviosas pequeñas en pacientes con fibromialgia, lo que podría ser tanto un resultado como una causa de neuroinflamación crónica. La neuroinflamación aparentemente es permanente en pacientes con dolor crónico, pero también ocurre en afecciones no crónicas, tales como, por ejemplo, el dolor postquirúrgico.

[0015] La falta de eficacia de las terapias actualmente disponibles en el control de las afecciones neuroinflamatorias demanda la identificación de nuevos fármacos específicos y seguros para el tratamiento de necesidades médicas aún no satisfechas que están asociadas a procesos neuroinflamatorios agudos o crónicos (Ru-Rong Jil. Nat. Rev. Drug Discov. 2014 July; 13(7): 533-548.

[0017] La gabapentina es un analógico sintético anticonvulsivante del neurotransmisor ácido gamma-ammobutrnco (GABA, por sus siglas en inglés) de fórmula (I)

[0020]

[0022] Aunque se desconoce cuál es su mecanismo exacto de acción, la gabapentina aparentemente inhibe la actividad de las neuronas excitatorias. La molécula fue desarrollada originalmente como un análogo químico del ácido gammaaminobutírico para reducir el reflejo espinal en el tratamiento de la espasticidad, pero se encontró que no presentaba actividad en el sistema GABAérgico. Su mecanismo de acción incluye la unión a los canales del calcio en varias áreas del sistema nervioso central y la médula espinal en las que se expresan estos canales. Los canales de calcio se localizan en los terminales presinápticos, donde controlan la liberación de neurotransmisores.

[0024] La gabapentina fue aprobada en 1993 para la utilización como tratamiento complementario para las crisis epilépticas parciales en adultos y niños. Más recientemente, la gabapentina también ha sido aprobada para el tratamiento del dolor crónico, en particular de los síndromes de dolor neuropático. También se afirma que resulta beneficioso en varios otros trastornos clínicos, tales como la ansiedad, el trastorno bipolar y los sofocos. La gabapentina también ha demostrado ser eficaz a dosis elevadas en el tratamiento de la fibromialgia (Moore et al, Cochrane Database Syst Rev.

[0025] 27 de abril de 2014;(4):CD007938; Deng et al., BMC Anesthesiology (2016) 16:12).

[0027] Sin embargo, varios estudios han demostrado un perfil farmacológico y farmacocinético insatisfactorio cuando se utiliza gabapentina sola en el tratamiento del dolor, por ejemplo, en términos de escasa eficacia en tipos específicos de dolor, efectos secundarios o inicio retrasado de la respuesta. De hecho, la gabapentina se absorbe lentamente después de la administración oral, y alcanza un nivel máximo en el plasma en 3 a 4 horas (Quintero, Journal of Experimental Pharmacology 2017:9 13-21).

[0029] El nivel plasmático de gabapentina no se incrementa proporcionalmente al aumentar las dosis, por lo que se requiere una valoración cuidadosa de manera individual al inicio del tratamiento; la gabapentina no se une a las proteínas plasmáticas.

[0031] La gabapentina no resulta inhibida ni metabolizada por los enzimas hepáticos; además, la gabapentina puede ser expulsada por el sistema renal, y su semivida de excreción es de aproximadamente 6 horas. Los efectos secundarios más comunes de la gabapentina son la somnolencia (20 %), mareo (18 %), ataxia (13 %) y fatiga (11 %).

[0033] Las dosis orales de gabapentina se administran tres veces al día (tds) debido a su corta semivida. Puede conseguirse una titulación rápida con dosis de 300 mg una vez al día (frecuentemente por la noche para minimizar la sedación) el primer día, seguido de 300 mg dos veces al día el segundo día y 300 mg tres veces al día el tercer día. La dosis puede incrementarse adicionalmente si no se consigue la eficacia con esta dosis.

[0035] La dosis inicial recomendada en el tratamiento del dolor neuropático es de 300 mg tres veces al día con titulación si es necesario hasta un máximo de 3600 m gdía'1, aunque se han informado de dosis de hasta 4200 mg con las que se observa una eficacia limitada o nula (M. A. Rose, Anaesthesia, 2002, 57, páginas 451-462).

[0037] Por ejemplo, la gabapentina no está recomendada para el tratamiento del dolor lumbar porque demuestra poca eficacia junto con un mayor riesgo de efectos secundarios(Low back pain and sciatica in over 16s: assessment and management,National Institute for Health and Care Excellence NICE Guidelines 2016).

[0039] Además, la gabapentina presenta poca actividad en el dolor inflamatorio, como también se ha confirmado en la presente parte experimental en el modelo de inflamación por carragenano en ratas.

[0041] También se ha demostrado que el efecto terapéutico de la gabapentina en el tratamiento de la osteoartritis solo comienza después de una administración prolongada de tres meses (Enteshari-Moghaddam et al., Clinical Rheumatology 2019: 38, 2873-2880).

[0042] El solicitante ha realizado estudios para mejorar las propiedades de la gabapentina, con el objetivo de mejorar la actividad de la molécula en condiciones de dolor y extender la eficacia a otros síndromes de dolor y posiblemente reducir los efectos secundarios relacionados con la dosis. En particular, el solicitante ha llevado a cabo investigaciones sobre la gabapentina en combinación con ketoprofeno, específicamente con lisina de ketoprofeno.

[0043] El ketoprofeno, o ácido (RS)-2-(3-benzoílfenil)-propiónico, es un antiinflamatorio no esteroideo (AINE) bien establecido con efectos analgésicos y antipiréticos de fórmula II:

[0046]

[0048] Debido a su elevada tolerabilidad, el ketoprofeno es uno de los fármacos antiinflamatorios no esteroideos de uso generalizado a nivel clínico, tanto para el tratamiento de afecciones inflamatorias graves como para la utilización en analgésicos y antipiréticos mediante la inhibición de la producción corporal de prostaglandinas.

[0049] Las composiciones farmacéuticas utilizadas actualmente que contienen ketoprofeno presentan como ingrediente activo el racemato, en donde los dos enantiómeros, S(+) y R(-), están presentes en proporción equimolecular.

[0050] Las composiciones farmacéuticas de ketoprofeno actuales para la utilización oral pueden contener el ingrediente activo en forma de ácido libre, que, sin embargo, muestra una solubilidad muy baja en agua y, por lo tanto, una baja biodisponibilidad.

[0051] Con el fin de mejorar el perfil de disolución y la biodisponibilidad del ingrediente activo, también se han utilizado ventajosamente sales de ketoprofeno.

[0052] Estas sales se utilizan, por ejemplo, en el tratamiento por vía oral de aquellos síntomas patológicos de tipo reumatoide y crónico, que requieren que el fármaco se administre a dosis altas, de forma continua y durante largos períodos de tiempo, así como en manifestaciones de dolor que requieren un efecto analgésico inmediato.

[0053] En particular, la sal de ketoprofeno con el aminoácido lisina, aunque presenta un perfil farmacéutico paralelo y una potencia antiinflamatoria-analgésica similar a la del ácido libre, ofrece la ventaja de una solubilidad considerablemente mayor en agua que permite una absorción rápida y prácticamente completa del compuesto, garantizando un inicio de acción rápido y una mayor tolerabilidad gástrica.

[0054] El ketoprofeno se prescribe generalmente para dolores inflamatorios relacionados con la artritis, dolor de muelas intenso, tratamiento del dolor musculoesquelético, dolor neuropático, tal como la ciática, la neuralgia postherpética y el dolor referido por radiculopatía.

[0055] El mecanismo de acción del ketoprofeno se basa esencialmente en la inhibición de la biosíntesis de prostaglandinas, prostaciclinas y tromboxano.

[0056] Dependiendo de las condiciones del proceso, el ketoprofeno y la lisina pueden combinarse formando ya sea una sal o cocristales que presentan diferentes formas cristalinas (polimorfos), tal como se describe en las solicitudes de patente europea n.° EP18215336.1 y n.° EP19219293.8 y en la solicitud de patente internacional n.° PCT/EP2019/025464.

[0057] Descripción resumida de la invención

[0058] El solicitante durante estas investigaciones ha encontrado inesperadamente que la gabapentina forma un cocristal estable con el ketoprofeno y la lisina.

[0059] Además, el solicitante también ha encontrado que el nuevo cocristal muestra inesperados efectos biológicos.

[0060] En este sentido, el solicitante ha observado un efecto sinérgico sobre la inflamación y el dolor cuando la gabapentina se combina con el ketoprofeno y la lisina en el cocristal.

[0061] De hecho, cuando estos ingredientes activos se asocian en el cocristal de la invención, muestran una actividad antiinflamatoria y analgésica mayor que la de la gabapentina cuando se administran en combinación con lisina de ketoprofeno.

[0062] Además, en comparación con la gabapentina sola, se ha observado una prolongación de la eficacia a lo largo del tiempo.

[0063] Finalmente, el cocristal mejora las tasas de disolución del ketoprofeno, especialmente si se disuelve en un entorno fisiológico acuoso, y aumenta la absorción y/o la biodisponibilidad de las dos moléculas activas.

[0064] La solubilidad y la velocidad de disolución de los fármacos son factores decisivos relacionados con la velocidad y la extensión de la absorción después de la administración.

[0065] La mayor eficacia del presente cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina, en comparación con la coadministración de los activos separados gabapentina y lisina de ketoprofeno, permite la utilización de una dosis terapéutica más baja de gabapentina o ketoprofeno, o de ambos, y minimizar los efectos secundarios.

[0066] De esta manera, el objetivo de la presente invención es un cocristal de gabapentina, ketoprofeno y lisina en el que la proporción molar de los componentes es 1:1:1.

[0067] El cocristal se caracteriza por los picos de difracción de XRPD siguientes: 3,6, 9,5, 9,6, 18,5 y 20,0 grados 2-theta ± 0,2 grados 2-theta, preferentemente caracterizado adicionalmente por los picos de difracción de XRPD siguientes: 15,4, 17,8, 21,0, 21,8 y 24,2 grados 2-theta ± 0,2 grados 2-theta.

[0068] Un objetivo adicional de la presente invención es un procedimiento para la preparación del cocristal de la invención, que comprende:

[0069] a) suspender gabapentina, ketoprofeno y lisina en un solvente adecuado, seleccionado entre alcoholes, en el que la proporción molar de gabapentina frente a ketoprofeno está comprendida entre 1:1 y 1,5:1

[0070] b) disolver gabapentina, ketoprofeno y lisina, mediante calentamiento de la suspensión, opcionalmente bajo agitación, hasta obtener una solución transparente,

[0071] c) posteriormente enfriar la solución, y

[0072] d) opcionalmente añadir un antisolvente.

[0073] Un objetivo adicional de la presente invención es una composición farmacéutica que comprende el cocristal de la invención y por lo menos un excipiente farmacéuticamente aceptable. Un objetivo adicional de la invención es una composición farmacéutica que comprende el cocristal de la invención y por lo menos otro ingrediente farmacéuticamente activo.

[0074] Un objetivo adicional de la presente invención es el cocristal de la invención para la utilización como un medicamento. Un objetivo adicional de la presente invención es el cocristal de la invención para la utilización en la prevención, reducción o tratamiento del dolor y/o la inflamación.

[0075] Un objetivo adicional de la presente invención es el cocristal de la invención para la utilización en un método para el tratamiento del dolor y/o inflamación que consiste en administrar al paciente una cantidad eficaz del cocristal de la invención.

[0076] Definiciones

[0077] A efectos de la presente invención, la expresión «excipiente farmacéuticamente aceptable» se refiere a una sustancia desprovista de cualquier efecto farmacológico por sí misma y que no produce reacciones adversas cuando se administra a un mamífero, preferentemente a un ser humano.

[0078] Para los fines de la presente invención, la expresión «temperatura ambiente» se refiere a un intervalo de temperatura de 18 °C a 25 °C.

[0079] A los efectos de la presente invención, el término «cocristal» se refiere a un sistema multicomponente, en el que todos los componentes son sólidos bajo condiciones ambientales cuando se encuentran en su forma pura. Los componentes coexisten a nivel molecular dentro de un único cristal. Por lo menos algunos de los componentes están conectados mediante interacciones no covalentes y no iónicas.

[0080] A efectos de la presente invención, el término «dolor» se refiere a dolor causado por perturbaciones de diferente naturaleza y origen, tales como, por ejemplo: dolor de cabeza o cefalalgia: tanto primaria y, por lo tanto, no relacionada con otros factores o enfermedades, como secundaria y, por lo tanto, dependiente de traumatismos, lesiones y enfermedades diferenciadas; dolor de muelas: en caso de abscesos o caries que crean dolor en la pulpa dental, con numerosos vasos sanguíneos y nervios; dolores menstruales: dolor abdominal y en la parte baja del abdomen y dolores de cabeza causados por cambios hormonales típicos del período menstrual; neuralgia, o dolor nervioso intenso debido a distensiones, traumatismos e infecciones; dolor en los músculos, o mialgia: dolores localizados a nivel de los músculos al usarlos o tocarlos, debido a contracciones súbitas o traumatismos; dolores osteoarticulares, tales como inflamaciones articulares (de los huesos, cartílagos, ligamentos y tendones) que siguen a traumatismos, envejecimiento, distensiones y lesiones.

[0082] A los efectos de la presente invención, el término «inflamación» se refiere a la respuesta local de un organismo a una lesión celular que se caracteriza por la dilatación capilar, la infiltración leucocitaria, el enrojecimiento, el calor y el dolor, y que sirve como un mecanismo que inicia la eliminación de los agentes nocivos y del tejido dañado.

[0084] Para los fines de la presente invención, el término «antisolvente» se refiere a un solvente en el que un compuesto es insoluble o poco soluble.

[0086] El término «aproximadamente» en la presente memoria se refiere al intervalo del error experimental que puede producirse durante una medición.

[0088] Breve descripción de las figuras

[0090] Figura 1: Patrón de difracción de rayos X de los polvos de cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina 1:1:1. Figura 2: Termograma de calorimetría diferencial de barrido (CDB) de cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina 1:1:1.

[0091] Figura 3: Termograma de CDB del cocristal de lisina de ketoprofeno forma I.

[0092] Figura 4: Termograma de CDB de la gabapentina.

[0093] Figura 5: Termogramas TG (línea continua) y dTG (línea discontinua) del cocristal de ketoprofeno-lisinagabapentina 1:1:1.

[0094] Figura 6: Termogramas TG (línea continua) y dTG (línea discontinua) del cocristal de lisina de ketoprofeno forma I.

[0095] Figura 7: Termograma TG de la gabapentina.

[0096] Figura 8: Espectro de RMN-1H (400 MHz, D2O) del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina 1:1:1.

[0097] Figura 9: Espectros de CPMAS de 13C de cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina 1:1:1, del ketoprofeno, de la lisina y de la gabapentina.

[0098] Figura 10: ampliación de la región carboxílica de los espectros CPMAS del 13C de la Figura 9.

[0099] Figura 11: ampliación de la región carboxílica de los espectros CPMAS de 13C de cocristales de ketoprofeno-lisinagabapentina 1:1:1, de la sal de lisina de ketoprofeno y del cocristal de lisina de ketoprofeno forma I.

[0100] Figura 12: solubilidad a diferentes pH del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina 1:1:1 y del cocristal de lisina de ketoprofeno forma I.

[0101] Figura 13: gráfico del volumen de la pata (ml) frente al tiempo (horas) en el modelo de edema de pata inducido por carragenano después de la inyección intraplantar de carragenano al 1 % seguido de la administración del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina 1:1:1, de una mezcla 1:1 de cocristal de lisina de ketoprofeno forma I y gabapentina, del cocristal de lisina de ketoprofeno forma I, de gabapentina, de indometacina o de vehículo. Cada punto temporal o barra representa la media ± EEM de seis ratas (vehículo)/ocho ratas (fármacos). Se consideró P<0,05 como significancia estadística y se calculó mediante la utilización de ANOVA de dos vías seguido de prueba post-hoc de Bonferroni. *vs vehículo, ° vs indometacina, § vs mezcla 1:1 de cocristal de lisina de ketoprofeno forma I y gabapentina.

[0102] Figura 14: gráfico de columnas del % de inhibición del volumen de la pata en el modelo de edema de pata inducido por carragenano en ratas inducido por cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina 1:1:1, por una mezcla 1:1 de cocristal de lisina de ketoprofeno forma I y gabapentina, por cocristal de lisina de ketoprofeno forma I, por gabapentina, por indometacina o por vehículo a las 3, 4 y 5 horas después de la inyección de carragenano. Cada punto temporal o barra representa la media ± EEM de seis ratas (vehículo)/ocho ratas (fármacos). Se consideró P<0,05 como significancia estadística y se calculó mediante la utilización de ANOVA de dos vías seguido de prueba post-hoc de Bonferroni. *vs vehículo, ° vs indometacina, § vs mezcla 1:1 de cocristal de lisina de ketoprofeno forma I y gabapentina.

[0103] Figura 15: gráfico del curso temporal del efecto antiinflamatorio del dolor del cocristal de ketoprofeno-lisinagabapentina 1:1:1 o del cocristal de lisina de ketoprofeno forma I y las mezclas de GABA en comparación con el cocristal de lisina de ketoprofeno forma I, gabapentina, indometacina o vehículo sobre la respuesta de retirada en ratas (g) después de la inyección intraplantar de carragenano al 1 %. Cada punto temporal o barra representa la media ± EEM de seis ratas (vehículo)/ocho ratas (fármacos). Se consideró P<0,05 como significancia estadística y se calculó utilizando ANOVA de dos vías seguido de pruebas post-hoc de comparaciones múltiples de Tukey *vs vehículo, vs mezcla 1:1 de cocristal de lisina de ketoprofeno forma I y gabapentina, y vs cocristal de lisina de ketoprofeno forma I, vs indometacina.

[0104] Figura 16: gráfico de columnas del efecto del tratamiento con diferentes dosis de cocristal de ketoprofeno-lisinagabapentina 1:1:1 de la invención y de gabapentina en comparación con el vehículo sobre la alodinia mecánica, medida como el umbral de retirada del 50 % (g), a las 1, 2, 3 y 6 horas de la administración. Todos los valores representan medias ± errores estándares de la media (EEM) en los grupos individuales. Se llevó a cabo ANOVA de una vía seguido de prueba de Dunnett para la comparación entre los grupos. Para el cocristal de ketoprofenolisina-gabapentina 1:1:1, se consideró significativa una p<0,05 vs gabapentina y vs grupo de vehículo. Para el grupo de gabapentina, se consideró que había significancia al nivel de p<0,05 en la comparación con el grupo de vehículo. El análisis estadístico se llevó a cabo con GraphPad Prism 5.0.

[0105] Figura 17: Proporción de penetración cerebral (% cerebro/plasma) de gabapentina, administrada por vía oral por sí sola y en forma de cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina 1:1:1.

[0106] Figura 18: Concentración de gabapentina en el cerebro y plasma, cuando se administra en forma de una mezcla física (MIX) de gabapentina y cocristal de lisina de ketoprofeno forma I o de cocristal de ketoprofeno-lisinagabapentina 1:1:1.

[0107] Figura 19: Concentración de gabapentina en el cerebro y plasma, cuando se administra en forma de una mezcla física (MIX) de gabapentina y cocristal de lisina de ketoprofeno forma I o de cocristal de ketoprofeno-lisinagabapentina 1:1:1.

[0108] Leyendas en las figuras: GAB: gabapentina; KL: lisina de ketoprofeno; Co-xx: cocristal; MIX: mezcla; KL Co-xx: cocristal de ketoprofeno-lisina; K-L-GA<b>Co-xx: cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina; KL Co-xx - GAB MIX: mezcla de cocristal de lisina de ketoprofeno con gabapentina.

[0109] Descripción detallada de la invención

[0110] Un objetivo de la presente invención es un cocristal de gabapentina, ketoprofeno y lisina, en el que la proporción molar de los componentes es 1:1:1, tal como se define en las reivindicaciones. De acuerdo con el análisis de RMN-13C de estado sólido informado en la parte experimental, en el presente cocristal, el grupo carboxílico del ketoprofeno está desprotonado e interactúa con el grupo £-NH3+ protonado de la lisina a través de enlaces iónicos que forman una sal neutra. La sal neutra de lisina de ketoprofeno interactúa con la gabapentina a través de enlaces no iónicos. El cocristal de la presente invención se caracteriza por los picos de difracción de XRPD siguientes: 3,6, 9,5, 9,6, 18,5 y 20,0 grados 2-theta con un margen de error sobre el valor indicado para cada pico de ±0,2 grados 2-theta, preferentemente caracterizado, además, por los picos de difracción de XRPD siguientes: 15,4, 17,8, 21,0, 21,8 y 24,2 grados 2-theta ± 0,2 grados 2-theta, tal como se muestra en la figura 1 y en la Tabla 2. Esta forma cristalina del cocristal de la invención se denomina en la presente memoria «forma I». Otros polimorfos del presente cocristal también se encuentran comprendidos dentro del alcance de la invención.

[0111] El cocristal de la presente invención se caracteriza, además, por el termograma de CBD de la figura 2, con el pico agudo endotérmico del cocristal correspondiente al punto de fusión a 141,4 °C con un inicio en 136,9 °C, el termograma TGA de la figura 5, espectros de FT Raman y FT-IR con las bandas de absorción típicas informadas en la Tabla 6 y 7, espectro de RMN-1H en solución de la figura 8 y asignaciones relativas en la Tabla 8 y/o CPMAS 13C de estado sólido de las Figuras 9 a 11 y asignaciones relativas en la Tabla 9.

[0112] En el cocristal de la invención, el ketoprofeno puede ser (S,R)-ketoprofeno racémico, (S)-ketoprofeno o (R)-ketoprofeno o cualquier mezcla de los mismos.

[0113] En una realización, el ketoprofeno es (S)-ketoprofeno (también llamado dexketoprofeno).

[0114] En otra realización, el ketoprofeno es (R)-ketoprofeno.

[0115] En el cocristal de la invención, la lisina puede ser (S,R)-lisina racémica, (S)-lisina o (R)-lisina, o cualquier mezcla de las mismas, preferentemente es el aminoácido natural (S)-lisina, también llamado L-lisina.

[0116] En una realización, el cocristal de la invención comprende (S)-ketoprofeno.

[0117] En una realización, el cocristal de la invención comprende (S)-lisina.

[0118] En una realización, el cocristal de la invención comprende (S)-ketoprofeno y (S)-lisina.

[0119] El cocristal de la presente invención pueden existir en formas no solvatadas, así como en formas solvatadas, incluyendo formas hidratadas.

[0120] El cocristal de la presente invención es fácilmente obtenible y estable.

[0121] El cocristal de la presente invención mostraría propiedades farmacéuticas, farmacocinética y eficacia mejoradas en condiciones de dolor, especialmente en comparación con la gabapentina o el ketoprofeno por sí solos y, inesperadamente, incluso en comparación con su mezcla, tal como se describe en la sección Experimental, posteriormente.

[0122] Un objetivo adicional de la presente invención es un procedimiento para la preparación del cocristal de la invención, que comprende:

[0123] a) suspender gabapentina, ketoprofeno y lisina en un solvente adecuado, seleccionado entre alcoholes, en el que la proporción molar de gabapentina frente a ketoprofeno está comprendida entre 1:1 y 1,5:1,

[0124] b) disolver gabapentina, ketoprofeno y lisina, mediante calentamiento de la suspensión, opcionalmente bajo agitación, hasta obtener una solución transparente,

[0125] c) posteriormente enfriar la solución, y

[0126] d) opcionalmente añadir un antisolvente.

[0127] En el presente procedimiento, el material de partida para el ketoprofeno puede ser el ácido libre de ketoprofeno o una sal de ketoprofeno, preferentemente lisina de ketoprofeno, o cualquier cocristal de lisina de ketoprofeno. En caso del ácido libre de ketoprofeno o de una sal de ketoprofeno diferente del lisinato, se añade lisina, preferentemente en su forma neutra. La lisina se utiliza preferentemente en la misma cantidad molar de ketoprofeno.

[0128] En la etapa a) del presente procedimiento, la proporción molar de gabapentina frente a ketoprofeno está comprendida entre 1:1 y 1,5:1, siendo más preferentemente entre 1:1 y 1,2:1, y todavía más preferentemente es de aproximadamente 1:1.

[0129] En una realización, la proporción molar de gabapentina: ketoprofeno: lisina en la etapa a) es aproximadamente 1:1:1. En el presente procedimiento, los solventes adecuados son alcoholes, preferentemente metanol y etanol; ésteres, preferentemente acetato de etilo; éteres, preferentemente tetrahidrofurano y éter terc-butilmetílico o solventes aromáticos, preferentemente tolueno.

[0130] Preferentemente, la etapa b) se lleva a cabo bajo calentamiento a la temperatura de reflujo del solvente.

[0131] Preferentemente, la solución de la etapa b) se enfría a temperatura ambiente.

[0132] Preferentemente, la solución de la etapa b) se enfría a temperatura ambiente y se filtra.

[0133] Preferentemente, la precipitación del cocristal se favorece mediante la adición de un antisolvente. El presente procedimiento proporciona el cocristal de la invención con altos rendimientos. Es simple y fácil de escalar a nivel industrial.

[0134] Según una realización, en la etapa a) del procedimiento según la invención, el ketoprofeno y la lisina pueden estar presentes en forma de una sal preformada o cocristal, en cualquier forma polimórfica.

[0135] El material de partida para la fabricación del cocristal de la gabapentina, ketoprofeno y sal de lisina de ketoprofeno o cocristales de los mismos de la presente invención puede prepararse de acuerdo con métodos de síntesis previamente publicados y bien conocidos por el químico orgánico de conocimientos habituales en la materia.

[0136] La sal de lisina de ketoprofeno se puede preparar tal como se describe, por ejemplo, en los documentos n.° GB1497044A y n.° BE882889.

[0137] El cocristal de lisina de ketoprofeno forma I se puede preparar tal como se describe, por ejemplo, en la solicitud de patente europea n.° EP18215336.1 o en la solicitud de patente internacional n.° PCT/EP2019/025464.

[0138] El cocristal de lisina de ketoprofeno forma IV se puede preparar tal como se describe, por ejemplo, en el documento n.° EP19219293.8.

[0139] Según una realización alternativa, dicho ketoprofeno es un ácido libre y/o dicha lisina se encuentra en forma neutra. En el presente procedimiento de preparación, la gabapentina se utiliza preferentemente en su forma neutra (sal interna zwiteriónica) o en cualquier forma salificada ácida o básica, por ejemplo, como hidrocloruro de gabapentina o sal sódica de gabapentina.

[0140] Preferentemente, la gabapentina se utiliza en su forma neutra.

[0141] La gabapentina puede estar en cualquier forma polimórfica.

[0142] La presente invención se refiere, además, a una composición farmacéutica que comprende un cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina según la presente invención, en particular un cocristal de ketoprofeno-lisinagabapentina tal como se ha definido anteriormente y por lo menos un excipiente farmacéuticamente aceptable. Por ejemplo, la composición según la presente invención puede contener de 0,5 % a 60 % en peso de los cocristales tal como se definen en la presente memoria y entre 40 % y 99,5 % en peso de uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.

[0143] La elección de los excipientes dependerá en gran medida de factores tales como el modo particular de administración, el efecto sobre la solubilidad y estabilidad, y la naturaleza de la forma de administración.

[0144] Las composiciones farmacéuticas según la presente invención pueden estar en cualquier forma adecuada para la aplicación en seres humanos y/o animales, preferentemente seres humanos, incluyendo bebés, niños y adultos, y pueden producirse mediante procedimientos convencionales conocidos por el experto en la materia.

[0145] La composición farmacéutica de la presente invención preferentemente es una composición sólida oral, tal como, por ejemplo, una cápsula, pellet, comprimido, sello, formas de administración masticables, polvos, pastilla, gránulos, gránulo soluble oral, suspensión, emulsión, spray, o en forma de polvos secos para la reconstitución en medio líquido. La composición farmacéutica puede contener adicionalmente uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables, tales como agentes de carga, aglutinantes, agentes de fluidez, desintegrantes, agentes reguladores de flujo y agentes de liberación.

[0146] Los excipientes adecuados se dan a conocer, por ejemplo, en «Handbook of Pharmaceutical Excipients», 3a edición, publicado por A.H. Kibbe, American Pharmaceutical Association, Washington, EE. UU., y Pharmaceutical Press, London.

[0147] Los agentes de carga adecuados son, por ejemplo, lactosa (monohidrato, monohidrato secado por pulverización, anhidro y similares), manitol, xilitol, dextrosa, sacarosa, sorbitol, celulosa microcristalina, almidón, fosfato de calcio dibásico dihidratado e hidrogenofosfato cálcico.

[0148] Los agentes de carga pueden estar presentes en una cantidad de 0 % a 80 % en peso, preferentemente en una cantidad de 10 % a 60 % en peso respecto al peso total de la composición.

[0149] Los aglutinantes adecuados son, por ejemplo, polivinilpirrolidona, celulosa microcristalina, hidroxi-propilcelulosa, hidroxi-propilmetilcelulosa, metilcelulosa, hidroxi-etilcelulosa, azúcares, dextrano, almidón de maíz, gelatina, polietilenglicol, gomas naturales y sintéticas, y almidón pregelatinizado.

[0150] Los aglutinantes pueden estar presentes en una cantidad de 0 % a 80 % en peso, preferentemente en una cantidad de 10 % a 60 % en peso respecto al peso total de la composición.

[0151] Los aglutinantes se utilizan generalmente para impartir cualidades cohesivas a una formulación de comprimido. Los glidantes adecuados son, por ejemplo, sales de metales alcalino-térreos de ácidos grasos, como el ácido esteárico, tales como estearato de magnesio, estearato de calcio, estearato de zinc, estearil-fumarato sódico y mezclas de estearato de magnesio con laurilsulfato sódico.

[0152] El glidante puede estar presente, por ejemplo, en una cantidad de 0 % a 2 % en peso, preferentemente en una cantidad de 0,5 % a 1,5 % en peso respecto al peso total de la composición.

[0153] Los desintegrantes adecuados son, por ejemplo, croscarmelosa sódica, carboximetil-almidón sódico, polivinilpirrolidona reticulada (crospovidona), carboximetilglicolato sódico, glicolato de almidón sódico, carboximetilcelulosa sódica, carboxi-metilcelulosa cálcica, polivinilpirrolidona, metilcelulosa, celulosa microcristalina, hidroxipropil-celulosa con sustitución de alquilo inferior, almidón, almidón pregelatinizado, alginato sódico y bicarbonato sódico.

[0154] El desintegrante puede estar presente en una cantidad de 0 % a 20 % en peso, preferentemente en una cantidad de 1 % a 15 % en peso respecto al peso total de la composición.

[0155] Un agente regulador de flujo adecuado es, por ejemplo, la sílice coloidal. El agente regulador del flujo puede estar presente en una cantidad de 0 % a 8 % en peso, preferentemente en una cantidad de 0,1 % a 3 % en peso respecto al peso total de dicha composición.

[0156] Un agente de liberación adecuado es, por ejemplo, el talco. El agente de liberación puede estar presente en una cantidad de 0 % a 5 % en peso, preferentemente en una cantidad de 0,5 % a 3 % en peso respecto al peso total de la composición.

[0157] La composición sólida puede recubrirse, preferentemente recubrirse con película.

[0158] Un agente de recubrimiento adecuado son, por ejemplo, derivados de celulosa, poli(meta)acrilato, polivinilpirrolidona, ftalato de acetato de polivinilo, y/o goma laca o gomas naturales, tales como carragenano.

[0159] Hay muchas situaciones en las que resultaría ventajoso o incluso necesario administrar el cocristal de la presente invención en forma de un sólido, por ejemplo, mediante la instalación de una composición de implante sólido en tejidos o cavidades corporales adecuados.

[0160] El implante puede comprender una matriz de materiales biocompatibles y bioerosionables en los que se dispersan partículas del cocristal de la presente invención, o en los que, posiblemente, se atrapan glóbulos o células aisladas de una mezcla líquida del presente cocristal. Deseablemente, la matriz será descompuesta y completamente absorbida por el cuerpo. La composición de la matriz también se selecciona preferentemente para proporcionar una liberación controlada, sostenida y/o retardada del cocristal de la presente invención durante períodos prolongados.

[0161] Alternativamente, el cocristal de la invención puede formularse en forma de un sólido, semisólido o líquido tixotrópico para la administración en forma de un depósito implantado que proporciona una liberación modificada del compuesto activo. Entre los ejemplos de dichas formulaciones se incluyen:

[0162] La presente composición se puede administrar tópicamente en la piel o mucosa, es decir, dérmicamente, epidérmicamente, subepidérmicamente o transdérmicamente.

[0163] La presente composición se puede administrar por vía sublingual o a través de un supositorio.

[0164] Entre las formulaciones habituales para este propósito se incluyen: tópico líquido (en inglés,pour-on),tópico en punto (en inglés,spot-on),inmersión, spray, espuma tópica, champú, formulaciones en polvo, geles, hidrogeles, lociones, cremas, pomadas, polvos para uso tópico, apósitos, espumas, películas, parches cutáneos, obleas, implantes, depósitos, esponjas, fibras, vendajes, microemulsiones y gránulos orosolubles. También pueden utilizarse los liposomas.

[0165] La composición farmacéutica de la presente invención puede ser una composición sólida para la preparación extemporánea de una solución para administración oral o parenteral, por ejemplo, para ser administrada mediante inyección intramuscular, intraperitoneal o intravenosa.

[0166] La composición farmacéutica de la presente invención puede prepararse mediante métodos bien conocidos por el experto en la materia.

[0167] La composición de la invención puede ser de tipo de liberación inmediata, retardada, modificada, sostenida, pulsada o controlada.

[0168] Según una realización adicional, la composición farmacéutica de la invención puede comprender el cocristal de la invención y por lo menos otro ingrediente farmacéuticamente activo.

[0169] El otro ingrediente farmacéuticamente activo se determinará según las circunstancias bajo las cuales se administre el agente terapéutico de la presente invención.

[0170] Un objetivo adicional de la presente invención es el cocristal de la invención para la utilización como un medicamento. El uso médico puede ser curativo, profiláctico o paliativo.

[0171] La asociación de los dos ingredientes activos en el mismo cristal presenta varias ventajas para el presente uso médico. En primer lugar, la gabapentina y el lisina de ketoprofeno que están asociados en el cocristal, a menudo se comportan como una sola entidad química, facilitando de esta manera los tratamientos, la formulación, la administración, etc. Además, los dos ingredientes activos se complementan entre sí en el tratamiento, especialmente del dolor, pero posiblemente también de otras diversas enfermedades o síntomas.

[0172] Otra ventaja es que la asociación de dos ingredientes activos en una única especie puede permitir una mejor farmacocinética/farmacodinámica (FC/FD), incluyendo también una mejor penetración de la barrera hematoencefálica, lo que ayuda en el tratamiento del dolor.

[0173] El cocristal y la composición de la presente invención muestran una actividad sinérgica de los ingredientes activos gabapentina y lisina de ketoprofeno, tal como se muestra en la presente prueba predictiva del dolor y la inflamación. Esta sinergia inesperada proporciona una eficacia clínica mejorada en comparación con los componentes individuales del cocristal cuando se administran por separado, o una reducción en la dosis requerida de cada compuesto, lo que lleva a una reducción de los efectos secundarios a la vez que se mantiene o se mejora la eficacia clínica de los compuestos y del tratamiento.

[0174] Por ejemplo, el paciente puede experimentar una reducción mejorada en la frecuencia y la gravedad del dolor y/o la inflamación. Además, el paciente puede beneficiarse de una duración de acción más prolongada del tratamiento con el cocristal que del tratamiento con gabapentina o con lisina de ketoprofeno o con su combinación.

[0175] Es necesario que el experto en la materia, tal como un médico o un veterinario, no solo determine la vía de administración preferente y la forma y cantidad de las dosis correspondientes, sino que dicho experto también debe determinar el régimen posológico.

[0176] La dosis diaria para seres humanos y animales puede variar dependiendo de factores que tienen su base en las respectivas especies u otros factores, tales como la edad, el sexo, el peso o el grado de la enfermedad, etc.

[0177] La dosis diaria del cocristal según la invención para seres humanos preferentemente proporciona la forma ácida del ketoprofeno en una cantidad entre 25 y 200 mg, preferentemente entre 50 y 150 mg, más preferentemente de 50 mg, de 1 a 8 veces al día, preferentemente de 1 a 4 veces al día, resultando en una cantidad total de gabapentina muy baja en comparación con la dosis normal de gabapentina sola.

[0178] Un objetivo adicional de la presente invención es el cocristal de la invención para la utilización en la prevención, reducción o tratamiento del dolor y/o la inflamación.

[0179] El cocristal y la composición de la presente invención se utilizan preferentemente para el tratamiento del dolor, preferentemente del dolor agudo o crónico y la inflamación, preferentemente la neuroinflamación.

[0180] Preferentemente, dicho dolor se selecciona de dolor de cabeza, dolor de muelas, dolor menstrual, dolor muscular, dolor neuropático, neuropatía diabética, dolor asociado a neuroinflamación, dolor del cáncer, osteoartritis, dolor lumbar, ciática, fibromialgia, neuralgia del trigémino; dolor postquirúrgico y postoperatorio, neuralgia postherpética, artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, hombro congelado, dolor de miembro fantasma o dolor por VIH.

[0181] Un objetivo adicional de la presente invención es el cocristal de la invención para la utilización en un método para la prevención, la reducción o el tratamiento del dolor y/o inflamación que comprende la administración al paciente de una cantidad eficaz del cocristal de la invención.

[0182] Parte experimental

[0183] A continuación, se describe la fabricación del cocristal de gabapentina, ketoprofeno y lisina, así como su caracterización analítica y biológica.

[0184] 1. Síntesis del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina

[0185] Se disolvieron cocristal de lisina de ketoprofeno forma I (3,028 g, 1,05 eq.), preparado tal como se describe en la solicitud de patente europea n.° EP18215336.1 o en la solicitud de patente internacional n.° PCT/EP2019/025464 y gabapentina (1,233 g, 1,0 eq.) en 60 ml de metanol en ebullición. Se dejó que la solución transparente se enfriase a temperatura ambiente, se sometió a un filtro de pulido (filtro de HPLC de 0,45 pm) y después se añadió a 240 ml de THF bajo agitación. La precipitación del sólido tuvo lugar en aproximadamente 30 minutos y la suspensión se sometió a agitación a 25 °C durante 5 horas (300 rpm). El producto sólido se aisló mediante filtración al vacío en un filtro de papel, se lavó con metanol (2x3 ml) y después se exprimió bajo un flujo de nitrógeno durante aproximadamente 10 minutos. El sólido se trituró suavemente y después se secó a 40 °C y 30 mbar durante la noche, proporcionando 3,57 gramos del producto deseado en forma de un sólido blanco (rendimiento: 87 %).

[0186] 2. Análisis de XRPD

[0187] El análisis de XRPD se llevó a cabo con el siguiente instrumento y bajo las condiciones informadas en la Tabla 1, a continuación:

[0188] Tabla 1

[0191]

[0192] (continuación)

[0194]

[0196] El difractograma de rayos X de los polvos del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina 1:1:1 se informa en la figura 1.

[0197] La lista de picos de XRPD del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina se informa en la Tabla 2, a continuación:

[0198] Tabla 2. Cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina, pico mínimo de XRPD

[0200]

[0201] (continuación)

[0204]

[0206] 3. Análisis térmicos

[0207] Análisis de CBD

[0208] El análisis se llevó a cabo utilizando el instrumento de CBD Mettler Toledo DSC1. La muestra se pesó en una bandeja de aluminio herméticamente sellada con una tapa de aluminio. El análisis se llevó a cabo mediante calentamiento de la muestra de 25 °C a 320 °C a 10 K/min, bajo las condiciones que se muestran en la Tabla 3, a continuación:

[0209] Tabla 3

[0212]

[0214] El análisis se llevó a cabo en muestras de cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina (figura 2), de cocristal de lisina de ketoprofeno forma I (figura 3) y de gabapentina (figura 4).

[0215] Análisis termogravimétrico (ATG)

[0216] El análisis se llevó a cabo utilizando el instrumento Mettler Toledo TGA/DSC1.

[0217] La muestra se pesó en una bandeja de aluminio herméticamente sellada con una tapa de aluminio perforada. El análisis se llevó a cabo mediante calentamiento de la muestra de 25 °C a 320 °C a 10 K/min, bajo las condiciones que se muestran en la Tabla 4, a continuación:

[0218] Tabla 4

[0221]

[0223] El análisis de TG se llevó a cabo en muestras de cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina (figura 5, muestra de 10,33 mg, límite izquierdo: 113,90 °C, límite derecho: 211,31 °C), de cocristal de lisina de ketoprofeno forma I (figura 6, muestra de 12,32 mg, límite izquierdo: 144,51 °C, límite derecho: 207,29 °C) y de gabapentina (figura 7, muestra de 16,67 mg, límite izquierdo: 160,49 °C, límite derecho: 198,27 °C). Las figuras 5 y 6 muestran tanto los termogramas TG (línea continua) como dTG (línea de puntos) obtenidos para las muestras.

[0224] El análisis TG del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina 1:1:1 según la invención no muestra pérdida de peso a temperaturas inferiores al punto de fusión (ver la figura 4).

[0225] Análisis de producción de gases (APG)

[0226] Se llevó a cabo un análisis de APG en una muestra de cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina.

[0227] El termograma de CBD de la figura 2 mostró un solo evento endotérmico a 141,4 °C (inicio: 136,9 °C), asociado a la fusión y degradación de la muestra. Este pico era claramente diferente de los picos endotérmicos de los termogramas del cocristal de gabapentina y lisina de ketoprofeno forma I mostrados en la figura 3.

[0228] El análisis TG del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina en una proporción de 1:1:1 confirmó la presencia de un compuesto anhidro (figura 5).

[0229] El análisis de PG mostró la presencia en el gas producido de los productos de degradación característicos tanto de gabapentina como del cocristal de lisina de ketoprofeno forma I (figura no mostrada).

[0230] 4. FT-Raman y FT-IR

[0231] FT-Raman

[0232] Se registraron espectros Raman con un espectrómetro FT-IR Nicolet iS50. La fuente de excitación era un láser de Nd-YAG (1064 nm) en la configuración de retrodispersión (180°). El diámetro del haz de láser enfocado era de aproximadamente 50 mm y la resolución espectral, de 4 cm-1. Los espectros se registraron con una potencia láser en la muestra de aproximadamente 100 mW.

[0233] FT-IR

[0234] El análisis se llevó a cabo utilizando un espectrómetro Thermo Nicolet iS50 con módulo ATR, equipado con Smart Performer Diamond, detector DTGS KBr, fuente de IR, divisor de haz de KBr, bajo las condiciones que se muestran en la Tabla 5, a continuación:

[0235] Tabla 5

[0238]

[0239] (continuación)

[0242]

[0244] La lista de picos del espectro Raman del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina se informa en la Tabla 6, a continuación:

[0245] Tabla 6: Lista de picos Raman del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina

[0248]

[0250] La lista de picos del espectro de FT-IR del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina se informa en la Tabla 7, a continuación:

[0251] Tabla 7: Lista de picos de FT-IR del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina

[0254]

[0255] (continuación)

[0258]

[0261] 5. RMN de estado líquido y sólido

[0263] Se registraron espectros de resonancia magnética nuclear (RMN-1H) en el solvente indicado con tetrametilsilano (TMS) como patrón interno en un instrumento Bruker Avance3 de 400 MHz. Los desplazamientos químicos se informan en partes por millón (ppm) en relación con el patrón interno. Las abreviaturas utilizadas fueron las siguientes: s=singlete, d=doblete, t=triplete, q=cuarteto, m=multiplete, dd=dobletes de doblete, br=ancho. Las constantes de acoplamiento (valores de J) se expresan en hercios (Hz).

[0265] Se adquirieron los espectros de CPMAS 13C de estado sólido de ketoprofeno-lisina-gabapentina y gabapentina pura con un instrumento Jeol ECZR 600, operando a 600,17 y 150,91 MHz, para núcleos de 1H y 13C, respectivamente. Las muestras de polvos se empaquetaron en un rotor cilíndrico de zirconia con un diámetro exterior de 3,2 mm y un volumen de 60 pl. Se recogió una muestra de cada lote y se utilizó sin preparaciones adicionales para llenar el rotor. Los espectros de CPMAS 13C se adquirieron a temperatura ambiente, a una velocidad de rotación de 20 kHz, utilizando una secuencia de pulso de polarización cruzada con rampa, con un pulso de 1H de 90° de 2,1 ps y un tiempo de contacto de 3,5 ms. Se utilizó un retraso de reciclaje optimizado de 5,7 (ketoprofeno-lisina-gabapentina) o 100 s (GAB), para un número de escaneos de 2200 (ketoprofeno-lisina-gabapentina) o 20 (GAB). Para cada espectro, se utilizó un esquema de desacoplamiento de modulación de fase de dos pulsos (TPPM, por sus siglas en inglés), con un campo de radiofrecuencia de 108,5 kHz. La escala de desplazamiento químico de 13C se calibró a partir de la señal de metileno del patrón externo glicina (a 43,7 ppm). En cuanto al análisis de 13C T r 1H, se adquirieron 12 espectros para 350 escaneos con diferentes tiempos de relajación, incluidos en el intervalo de 0,1 a 60 s y calculados por el software Delta v5.2.1 mediante un algoritmo exponencial. Los espectros se adquirieron a una velocidad de rotación de 20 kHz a temperatura ambiente utilizando una secuencia de pulsos de polarización cruzada con rampa con un pulso de 1H de 90° de 2,1 ps y un tiempo de contacto de 2 ms.

[0267] Espectros de RMN-1H del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina

[0269] El espectro de RMN-1H del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina confirmó la presencia concomitante en la muestra de ketoprofeno-lisina-gabapentina con una estequiometría de 1:1:1. También se podrían detectar trazas de metanol residual (aprox. 0,2 % p/p).

[0271] La multiplicidad y la asignación de las señales de acuerdo con la numeración de los átomos mostrada en el Esquema 1

[0274]

[0277] se muestran en la Tabla 8, a continuación:

[0278] Tabla 8: RMN 1H

[0281]

[0283] El espectro de RMN-1H (400 MHz, D2O) del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina se muestra en la Figura 6.Espectro de CPMAS 13C de estado sólido del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina

[0284] Se confirmó una nueva fase homogénea de ketoprofeno-lisina-gabapentina mediante espectros de CPMAS de 13C. La estequiometría se evaluó que era de 1:1:1, con una molécula independiente de ketoprofeno, lisina y gabapentina en la celda unitaria. El grupo carboxílico del ketoprofeno está desprotonado e interactúa con el grupo £-NH3+ de la lisina protonada a través de enlaces iónicos, formando una sal neutra. La sal neutra de lisina de ketoprofeno interactúa con gabapentina a través de enlaces no iónicos, formando un cocristal. Tanto la lisina como la gabapentina están en un estado zwiteriónico en la nueva forma cristalina.

[0285] En la Tabla 9 a continuación, se resumen las resonancias características de RMN de 13C de estado sólido:

[0286] Tabla 9: RMN de 13C de estado sólido

[0289]

[0291] La figura 7 muestra los espectros de RMN CPMAS de 13C del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina y de los materiales de partida separados, es decir, ketoprofeno (KET), lisina (LYS) y gabapentina (GAB).

[0292] Todas las señales en el espectro del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina se caracterizan por valores similares de 1H Ti (aproximadamente 6,5 s), lo que significa que la difusión de espín está activa entre las moléculas de ketoprofeno, lisina y gabapentina, es decir, las tres moléculas están en la misma celda unitaria. En la figura 10, se muestra la ampliación de la región carboxílica.

[0294] En esta región ampliada se observaron tres resonancias distintas para los grupos carboxílicos/carboxilatos, lo que sugiere una proporción estequiométrica de 1:1:1 para el sistema de ketoprofeno-lisina-gabapentina, con una molécula independiente para cada compuesto.

[0296] La gabapentina es un zwiterión en su polimorfo puro de forma II: su grupo carboxilato permanece desprotonado en el aducto de ketoprofeno-lisina-gabapentina con un desplazamiento mínimo hacia frecuencias más altas, lo que indica que el entorno químico de la fracción COO' de la gabapentina es muy similar entre aducto y reactivo puro.

[0298] El carboxilato zwiteriónico de la lisina experimenta un desplazamiento de 176,7 ppm en la lisina pura a 178,2 ppm en ketoprofeno-lisina-gabapentina, probablemente debido a la participación del grupo carboxilato en enlaces de hidrógeno más fuertes que en el material de partida. Se supone que la lisina se encuentra en forma zwiteriónica.

[0299] Finalmente, el grupo carboxílico del ketoprofeno, que está involucrado en un sintón homodimérico en su forma pura, se encuentra en 181,2 ppm en ketoprofeno-lisina-gabapentina, disminuyendo su desplazamiento químico en prácticamente 3 ppm. Lo anterior sugiere fuertemente la ocurrencia de una transferencia protónica del grupo COOH del ketoprofeno, que se convierte en una fracción carboxilato, al único aceptador posible, el £-NH2 de la lisina.

[0301] La figura 11 muestra una comparación de las regiones carboxílicas del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina de la presente invención, el cocristal de lisina de ketoprofeno (forma I) y la sal de lisina de ketoprofeno.

[0303] La comparación de las señales de la figura 11 confirma el estado de desprotonación de la fracción carboxílica del ketoprofeno en el ketoprofeno-lisina-gabapentina. De hecho, el desplazamiento químico para su pico correspondiente es significativamente más similar al del grupo carboxilato del ketoprofeno en la sal ketoprofeno-lisina que a la señal del hidrógeno neutro unido al grupo COOH de ketoprofeno en el cocristal de ketoprofeno-lisina.

[0305] 6. Ensayo de solubilidad

[0307] Se llevaron a cabo los ensayos de solubilidad utilizando un titulador potenciométrico automático con el aparato SiriusT3 (Pion Inc. Ltd., East Sussex, Reino Unido) equipado con un electrodo de pH de referencia Ag/AgCl de doble unión, un espectrómetro Sirius D-PAS y un dispositivo de detección de turbidez. El electrodo de pH se calibró titulométricamente en el intervalo de pH 1,8 a 12,2. Se utilizó un agitador de sobremesa y con una sonda de temperatura se monitorizó la temperatura durante el transcurso del ensayo. Los experimentos de solubilidad se llevaron a cabo en 1,5 ml de solución de KCl 0,15 M (ISA water) bajo una atmósfera de nitrógeno a una temperatura de 25±1 °C. Todos los ensayos se llevaron a cabo utilizando KOH 0,5 M y HCl 0,5 M estandarizados como reactivos de titulación. Se llevaron a cabo los ensayos de solubilidad mediante pesaje de 15 a 20 mg de muestras en polvo, las muestras se sometieron a agitación a 800 rpm y se tituló automáticamente entre pH 11 y pH 1,5.

[0309] Solubilidad del cocristal de lisina de ketoprofeno forma I y cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina

[0311] La solubilidad del cocristal de lisina de ketoprofeno forma I y del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina se midió a pH 1,2 (estómago), pH 4,5 (duodeno), pH 6,5 (yeyuno/ileón), pH 7,4 (sangre) y pH 8,0 (colon). Las muestras mostraron una diferencia significativa de solubilidad en todos los valores de pH. Por encima de pH 5 (pKa del ketoprofeno: 4,08), la solubilidad aumentó considerablemente y, de esta manera, se requirieron dos gráficos con diferentes escalas (ver la figura 12). La solubilidad del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina 1:1:1 era generalmente 2,5 veces mayor que la del cocristal de lisina de ketoprofeno forma I. El cocristal de lisina de ketoprofeno forma I a pH 1,2 mostró un valor de solubilidad de 0,1624 ± 0,0016 mg/ml, mientras que el de ketoprofeno-lisinagabapentina fue de 0,4171±0,0312 mg/ml.

[0313] La Tabla 10, a continuación, muestra los datos de solubilidad obtenidos al pH más representativo del tracto gastrointestinal.

[0315] Tabla 10: Solubilidad a diferentes pH (mg/ml)

[0317]

[0320] 7. Ensayo de estabilidad

[0321] Se introdujeron muestras de ketoprofeno-lisina-gabapentina (aprox. 75 mg) en viales de vidrio sellados con un septo de PTFE/silicona y se almacenaron a la temperatura y humedad deseadas durante el tiempo requerido.

[0322] La humedad controlada se consiguió utilizando soluciones saturadas de sales: NaCl para 75 % de HR a 40 °C y NaBr para 60 % de HR a 25 °C.

[0323] Después del almacenamiento, las muestras sólidas se analizaron mediante análisis de XRPD. Cada ensayo de estabilidad se llevó a cabo por duplicado.

[0324] La estabilidad de las muestras se verificó después de 3 meses.

[0325] Ensayo de estabilidad del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina

[0326] Se sometió a ensayo la estabilidad del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina después de almacenarlo durante tres meses bajo condiciones controladas de temperatura y humedad (vial sellado). El compuesto resultó ser estable bajo ambas condiciones de ensayo: 25 °C y 65 % de HR, y 40 °C y 75 % de HR.

[0327] La estabilidad de la muestra se evaluó comparando los patrones de XRPD de las muestras sólidas recogidas después de los ensayos de estabilidad con el difractograma de la muestra no tratada.

[0328] Estabilidad después del almacenamiento a 25 °C y 60 % de HR

[0329] Los difractogramas de las muestras de ketoprofeno-lisina-gabapentina almacenadas a 25 °C y 60 % de HR en un vial sellado durante tres meses mostraron que no había diferencias significativas en los patrones de XRPD de la muestra almacenada respecto al material de partida no tratado. Los resultados del análisis de XRPD confirmaron que el estado sólido del cocristal se mantuvo sin cambios durante el almacenamiento bajo condiciones aceleradas.

[0330] Estabilidad después del almacenamiento a 40 °C y 75 % de HR

[0331] Los difractogramas de las muestras de ketoprofeno-lisina-gabapentina almacenadas a 40 °C y 75 % de HR en un vial sellado durante tres meses mostraron que no había diferencias significativas en los patrones de XRPD de la muestra almacenada respecto al material de partida no tratado. Los resultados del análisis de XRPD confirmaron que el estado sólido del cocristal se mantuvo sin cambios durante el almacenamiento bajo condiciones aceleradas.

[0332] 8. Estudios in vivo

[0333] Dolor inflamatorio en ratas inducido por inyección intraplantar de carragenano

[0334] Se alojaron de 2 a 3 ratas Wistar macho (270 a 280 g) (Envigo, Italia) por jaula, bajo iluminación controlada (ciclo de luz:oscuridad de 12:12 h; luz encendida a las 06:00 h) y condiciones ambientales estándares (temperatura ambiente: 22±1 °C, humedad: 60±10 %) durante por lo menos 1 semana antes de utilizarlas en los experimentos. La comida para ratas y el agua corriente estaban disponiblesad libitum.Los procedimientos fueron aprobados por el Comité de Ética Animal de la Universidad de Campania «Luigi Vanvitelli». El cuidado de los animales cumplió con el Decreto Legislativo Italiano (D.L. 116/92) y la Directiva de la Comisión Europea (O.J. de C.E. L358/1, 18/12/86), regulaciones en materia de protección de los animales de laboratorio. Se hicieron todos los esfuerzos para minimizar el sufrimiento animal y el número de animales utilizados.

[0335] Método de ensayo de edema en pata de rata inducido con carragenano

[0336] Se indujo dolor inflamatorio periférico en la pata trasera izquierda de cada animal mediante una única inyección intraplantar de A-carragenano al 1 % (100 pl por cada rata en NaCl al 0,9 %). Se administró vehículo (2 cápsulas de Avicel PH101.), indometacina (10 mg/kg, 100 pl), cocristal de lisina de ketoprofeno forma I (47,1 mg/kg, 1 cápsula), gabapentina (20,4 mg/kg, 2 ps), mezcla de gabapentina y cocristal de lisina de ketoprofeno forma I (47,1 mg/Kg 20,4 mg/kg, 2 cápsulas) y cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina (67,5 mg/Kg, 2 cápsulas), por vía oral 1 h antes de la inyección de carragenano. El volumen de la pata de los animales se midió con un pletismómetro (Ugo Basile, Varese, Italia) antes (0 h) y después de la inyección de carragenano a diferentes intervalos de tiempo (1, 2, 3, 4, 5 y 6 h después del carragenano). El edema se expresó como el aumento medio de volumen de la pata (ml) respecto a los animales de control. Se calculó el porcentaje de inhibición de la proliferación mediante la fórmula siguiente:

[0337] % de inhibición del edema = (Vc-Vt/Vc) x 100,

[0338] en la que Vc es el volumen de edema en el grupo de control y Vt es el volumen de edema en el grupo tratado.

[0339] El porcentaje de inhibición del edema resultante del ensayo anterior se muestra en la Tabla 11, a continuación: Tabla 11:%de inhibición de edema

[0342]

[0344] El efecto de los compuestos sometidos a ensayo sobre el edema en la pata de rata inducido por carragenano se representa en las figuras 13 a 15.

[0345] En la figura 13 se informa del curso temporal del efecto antiinflamatorio del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina 1:1:1 y de la mezcla 1:1 de gabapentina y cocristal de lisina de ketoprofeno forma I en comparación con el de cocristal de lisina de ketoprofeno forma I, gabapentina, indometacina y vehículo en la hinchazón de la pata de ratas (volumen de la pata en ml) después de la inyección intraplantar de carragenano al 1 %.

[0346] En la figura 14 se informa del % de inhibición del volumen de la pata inducida por el cocristal de ketoprofeno-lisinagabapentina en proporciones 1:1:1 y por el cocristal de gabapentina y lisina de ketoprofeno forma I en mezcla, en comparación con el cocristal de lisina de ketoprofeno forma I, gabapentina, indometacina y vehículo a las 3, 4 y 5 horas de la inyección de carragenano. En el gráfico, el valor del % de inhibición para el vehículo es cero.

[0347] La figura 15 muestra el curso temporal del efecto antiinflamatorio analgésico del cocristal de ketoprofeno-lisinagabapentina 1:1:1 o del cocristal de lisina de ketoprofeno forma I y las mezclas de GABA en comparación con el cocristal de lisina de ketoprofeno forma I, gabapentina, indometacina o vehículo sobre la respuesta de retirada en ratas (g) después de la inyección intraplantar de carragenano al 1 %.

[0348] En los gráficos de las figuras 13 a 15, cada punto temporal o columna representa una media ± EEM de seis ratas por vehículo y ocho ratas por fármaco. Se consideró P<0,05 como significancia estadística y se calculó mediante la utilización de ANOVA de dos vías seguido de prueba post-hoc de Bonferroni. Leyenda: * vs vehículo, § vs KL Co-xx -GAB MIX, & vs KL Co-xx forma I, ° vs indometacina.

[0349] A partir de los gráficos de las figuras 13 y 15 se observa que el cocristal de lisina de ketoprofeno forma I, la mezcla de gabapentina y el cocristal de lisina de ketoprofeno forma I y el cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina 1:1:1 atenuaron el edema inducido por carragenano, mientras que la gabapentina resultó menos eficaz.

[0350] Además, resulta claramente que el efecto antiinflamatorio del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina 1:1:1 de la invención fue mayor no solo que el efecto de los activos individuales gabapentina y lisina de ketoprofeno sino, inesperadamente, incluso mayor que el efecto de los dos activos cuando se administran juntos (efecto sinérgico). El cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina 1:1:1 de la invención mostró claramente el efecto sinérgico y un aumento de la biodisponibilidad, en comparación con la mezcla de gabapentina y lisina de ketoprofeno, o con gabapentina o lisina de ketoprofeno solos.

[0351] También se observó que el cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina de la presente invención aparentemente era notablemente más potente que la indometacina en este ensayo. Finalmente, la curva más inclinada del cocristal de ketoprofeno-lisina-gabapentina de la presente invención mostrada en la figura 13, podría ser predictiva de la eficacia durante un período de tiempo prolongado, más largo que el de los activos individuales administrados solos o incluso en mezcla.

[0352] Efectos comparativos del cocristal KSL-gabapentina y la gabapentina en el modelo de dolor neuropático inducido por ligadura de nervio

[0353] Las sustancias de ensayo fueron proporcionadas por Dompé Farmaceutici S.p.A., la gabapentina se adquirió de Spectrum (n.° de cat. G1092), y el almidón de arroz utilizado en el grupo de control de vehículo se obtuvo de Sigma (n.° de cat. S7260) en el presente proyecto. La gabapentina (Spectrum (n.° de cat. G1092)) sola o el cocristal KSL-gabapentina se administraron por vía oral mediante cápsulas de gelatina de tamaño 9 Torpac®. Para cada rata, se administraron de 1 a 3 cápsulas según las dosis propuestas. La gabapentina, que sirve como control positivo, se formuló en agua para inyección (WFI, por sus siglas en inglés) para administración oral a un volumen de 10 ml/kg. Las ratas Sprague Dawley macho de 180±20 g fueron proporcionadas por BioLasco Taiwán (bajo la licencia de Charles River Laboratories). La asignación de espacio para 2 a 3 animales fue de 45x25x21 cm. Todos los animales se mantuvieron en un entorno controlado de temperatura (20 °C a 24 °C) y humedad (30 % a 70 %) con ciclos de luz/oscuridad de 12 h. Se otorgó acceso gratuito a la dieta estándar para laboratorio [MFG (Oriental Yeast Co., Ltd., Japón)] y agua esterilizada en autoclave. Todos los aspectos de este trabajo, incluyendo el alojamiento, los experimentos y el sacrificio de los animales, se llevaron a cabo en general de acuerdo con la «Guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio: octava edición» (National Academies Press, Washington, D.C., 2011) en las instalaciones para animales de laboratorio de los presentes inventores, acreditadas por AAALAC. Además, el protocolo de cuidado y uso de animales fue revisado y aprobado por el IACUC en Pharmacology Discovery Services Taiwan, Ltd.

[0355] El día 0, bajo anestesia con pentobarbital sódico [50 mg/kg, por vía intraperitoneal (IP)], se expuso el nervio ciático izquierdo a nivel de medio muslo. Se ataron laxamente cuatro ligaduras de sutura de catgut crómico, separadas por aproximadamente 1 mm, en torno al nervio. A continuación, se alojaron los animales socialmente en jaulas con lecho suave durante 13 días antes de la evaluación de la alodinia mecánica.

[0357] Las ratas fueron colocadas bajo jaulas de metacrilato invertidas en un estante de malla metálica y se les permitió aclimatarse durante 20 a 30 minutos. El umbral de alodinia mecánica se evaluó mediante la prueba manual de von Frey utilizando el método de Chaplan de subida/bajada. Se dio a los animales de 20 a 30 minutos para aclimatarse a la malla metálica, en compartimentos individuales, antes de llevar a cabo las pruebas de comportamiento. Se tocó la pata con una serie de 8 monofilamentos manuales de von Frey con rigidez escalonada logarítmicamente [3,61 (0,4 g), 3,84 (0,6 g), 4,08 (1,0 g), 4,31 (2,0 g), 4,56 (4,0 g), 4,74 (6,0 g), 4,93 (8,0 g) y 5,18 (15,0 g)]. El monofilamento de von Frey se aplicó perpendicularmente desde debajo de la malla en la zona plantar central con suficiente fuerza para causar una ligera deformación contra la pata, y se mantuvo durante aproximadamente 6 a 8 segundos. Se observó una respuesta positiva si la pata se retiraba bruscamente; la ambulación se consideró una respuesta ambigua, y en tales casos, se reaplicó el estímulo. El umbral mecánico [umbral de retirada de 50 % (g)] se evaluó utilizando el método de subida/bajada siguiendo el procedimiento descrito por Chaplan (1994).

[0359] El patrón resultante de respuestas positivas y negativas se tabuló utilizando la convención, X=retirada; O=no retirada y el umbral de respuesta de 50 % se interpoló utilizando la fórmula: Umbral mecánico = (10 [Xf+k8]) / 10.000, en la que Xf=valor (en unidades logarítmicas) del filamento de von Frey utilizado; k=valor tabular para el patrón de respuestas positivas/negativas; y 5=diferencia media (en unidades logarítmicas) entre estímulos (en el presente ensayo, 0,224).

[0361] Todas las ratas fueron evaluadas para alodinia mecánica para los umbrales de alodinia prequirúrgicos el día -1 (línea base precirugía). Las ratas fueron preseleccionadas para la experimentación solo si el umbral de dolor el día 13 después de la ligadura del nervio (pretratamiento) se había reducido en 10 g de fuerza respecto a la respuesta de pata individual antes de la ligadura del nervio (precirugía), es decir, con una clara presencia de alodinia. Las ratas fueron aleatorizadas en función de las puntuaciones de alodinia mecánica previas a la administración de dosis a fin de formar grupos de tratamiento equilibrados. Los compuestos se administraron por vía oral (VO) en una o más cápsulas de gelatina tamaño 9 o en la formulación propuesta. La alodinia mecánica se evaluó nuevamente 1, 3 y 6 horas después de la administración del artículo de ensayo, vehículo o compuesto de referencia el día 14 postcirugía.

[0363] Se muestran los resultados en la Figura 16.

[0365] Todos los valores representan medias ± errores estándares de la media (EEM) en los grupos individuales. Se aplicó un ANOVA de una vía seguido de prueba de Dunnett para la comparación entre el control de vehículo y los grupos tratados con compuestos. Se consideró que había significancia con p<0,05. El análisis estadístico se llevó a cabo con GraphPad Prism 5.0.

[0367] La figura 16 muestra claramente el efecto sinérgico del cocristal de la invención 2 y 3 horas después de la administración de dosis.

[0369] Determinación de la exposición en plasma y cerebro de KLS y gabapentina después de su administración oral en forma de cápsulas en las ratas

[0371] El objetivo del estudio fue determinar la penetración cerebral de la gabapentina en el cocristal de KLS-gabapentina en comparación con la mezcla física de KLS y gabapentina, y gabapentina sola, después de la administración en cápsulas a las ratas. En este estudio se utilizaron ratas Sprague Dawley macho (con un peso corporal de 310 g en el momento del tratamiento). Los animales fueron suministrados originalmente por Harlan, Italia. Una vez recibidos de parte del proveedor, los animales fueron sometidos a exploraciones de salud para su aceptación o no. Los animales fueron alojados, en grupos de tres, en jaulas adecuadas para la especie y se mantuvieron rutinariamente en el ambiente siguiente, excepto por cortos períodos de tiempo en los que los procedimientos experimentales dictaban otra cosa. Los animales fueron aclimatados a las condiciones de alojamiento locales durante aproximadamente 5 días.

[0373] Los animales fueron alojados en una única sala exclusiva, con aire acondicionado para proporcionar un mínimo de 15 cambios de aire/hora. Los controles ambientales se establecieron para mantener una temperatura de aproximadamente 22 °C y humedad relativa comprendida dentro del intervalo de 50% a60%con un ciclo de luz aproximado de 12 horas de luz y 12 horas de oscuridad que se controlaba automáticamente. La comida (dieta estándar GLP de Mucedola) y agua se encontraron disponiblesad libitumdurante todo el estudio. Todos los animales fueron pesados el día de cada tratamiento. Se monitorizaron los signos clínicos a intervalos regulares a lo largo del estudio con el fin de evaluar cualquier reacción al tratamiento. Cada animal fue identificado de manera única con un spray de color en la espalda antes del experimento.

[0375] Al final del estudio, los animales fueron sacrificados por exanguinación bajo anestesia.

[0377] El experimento se llevó a cabo de acuerdo con la Ley italiana D. L.vo 4 marzo 2014, n. 26.

[0379] El protocolo experimental consistió en la extracción de muestras de sangre y tejido cerebral en los animales de acuerdo con las siguientes Tablas 12 y 13, y el análisis de muestras se realizó tal como se describe a continuación.

[0381] Tabla 12: Extracción de muestras de sangre

[0384]

[0387] Tabla 13: Muestreo de tejido cerebral

[0390]

[0393] Se prepararon soluciones madre de ketoprofeno y gabapentina a 1 mg/ml en MeOH y se preparó una solución madre mixta mediante dilución de los dos mencionados anteriormente hasta alcanzar una concentración final de 100 pg/ml de cada analito. Las soluciones madre de DF1681Y y de Impureza A de gabapentina se prepararon a concentraciones de 2 mg/ml y 1 mg/ml, respectivamente, en MeOH. Se preparó una mezcla de los dos en ACN a una concentración final de 5000 y 500 ng/ml, respectivamente (mix IS).

[0395] La curva de calibración y las muestras de control de calidad se prepararon en plasma de rata de blanco mediante la adición de 2 pl de cada solución patrón a 18 pl de plasma. Se añadieron muestras de plasma con adición a 200 pl de mix _IS y se centrifugaron durante 5 minutos a 9000 g a 5 °C. Las muestras de los tratamientos orales se prepararon diluidas 1:10 en plasma de blanco y se procesaron 20 pl del plasma diluido tal como se ha descrito anteriormente. A continuación, se diluyeron 100 pl de las muestras extraídas en 120 pl de la fase móvil A.

[0397] El cerebro muestreado se homogeneizó en tampón de formato amónico 10 mM 1 g/5 ml. Se prepararon muestras, así como calibradores y muestras de control de calidad, mediante la adición de 20 pl de homogenado cerebral a 200 pl de mix_IS y centrifugando durante 5 minutos a 9000 g a 5 °C. A continuación, se diluyeron 100 pl de las muestras extraídas con 120 pl de la fase móvil A.

[0399] Se midieron los niveles plasmáticos de ketoprofeno y gabapentina en ratas después de la administración de dos cápsulas del cocristal KLS-gabapentina y una mezcla física de los dos analitos. Las concentraciones en plasma y cerebro se informan en las figuras 17 a 19.

[0400] Las concentraciones en el cerebro y en plasma de los dos compuestos se evaluaron después de 2 horas, resultando en una relación de penetración cerebro/plasma de 37,8 % para la gabapentina administrada sola en comparación con 56,1 % administrada como cocristal de KLS-gabapentina (figura 17). Se consideró que había significancia con p<0,05. Curiosamente, los niveles de gabapentina y ketoprofeno en cerebro y plasma observados con cocristal de KLS-gabapentina eran estadísticamente significativamente más altos (p<0,05) que con la mezcla KLS+gabapentina (figuras 18 y 19).

[0402] Las figuras 18 y 19 muestran claramente el aumento de concentración del ketoprofeno del cocristal de la presente invención en cerebro y plasma en comparación con la mezcla de gabapentina y lisina de ketoprofeno gracias a una mejor biodisponibilidad.

Claims (16)

1. REIVINDICACIONES

i.Cocristal de gabapentina, ketoprofeno y lisina en el que la proporción molar de los componentes es 1:1:1, caracterizado por los siguientes picos de difracción de XRPD: 3,6, 9,5, 9,6, 18,5 y 20,0 grados 2-theta ± 0,2 grados 2-theta.

2. Cocristal según se reivindica en la reivindicación 1, caracterizado además por los siguientes picos de difracción de XRPD: 15,4, 17,8, 21,0, 21,8 y 24,2 grados 2-theta ± 0,2 grados 2-theta.

3. Cocristal según se reivindica en la reivindicación 1 o 2, en el que dicho ketoprofeno es (S)-ketoprofeno.

4. Cocristal según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que dicha lisina es (S)-lisina.

5. Cocristal según se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para la utilización como medicamento.

6. Cocristal según se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 para la utilización en la prevención, reducción o tratamiento del dolor y/o la inflamación.

7. Cocristal para la utilización según se reivindica en la reivindicación 6, en el que dicho dolor es dolor agudo o crónico.

8. Cocristal para la utilización según se reivindica en la reivindicación 6 o 7, en el que dicho dolor se selecciona de dolor de cabeza, dolor de muelas, dolor menstrual, dolor muscular, dolor neuropático, dolor asociado a neuroinflamación, neuropatía diabética, dolor por cáncer, osteoartritis, dolor lumbar, ciática, fibromialgia, neuralgia del trigémino; dolor postquirúrgico y postoperatorio, neuralgia postherpética, artritis reumatoide, espondilitis anquilosante, hombro congelado, dolor de miembro fantasma o dolor por VIH.

9. Composición farmacéutica que comprende un cocristal según se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 y por lo menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.

10. Composición farmacéutica según se reivindica en la reivindicación 9, que contiene de 0,5 % a 60 % en peso del cocristal y de 40 % a 99,5 % en peso de uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.

11. Composición farmacéutica según se reivindica en la reivindicación 9 o 10, que es una composición sólida oral.

12. Procedimiento para la preparación del cocristal según se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, que comprende:

a) suspender gabapentina, ketoprofeno y lisina en un solvente adecuado seleccionado de alcoholes, en el que la proporción molar de gabapentina a ketoprofeno está comprendida entre 1:1 y 1,5:1, b) disolver gabapentina, ketoprofeno y lisina mediante calentamiento de la suspensión, opcionalmente bajo agitación, hasta obtener una solución transparente,

c) posteriormente enfriar la solución, y

d) opcionalmente añadir un antisolvente.

13. Procedimiento según se reivindica en la reivindicación 12, en el que dicho ketoprofeno y lisina en la etapa a) se encuentran en forma de una sal de ketoprofeno y lisina o un cocristal.

14. Procedimiento según se reivindica en la reivindicación 12, en el que dicho ketoprofeno es el ácido libre y/o dicha lisina se encuentra en forma neutra.

15. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 12 a 14, en el que dicha gabapentina se encuentra en forma neutra (sal interna zwiteriónica).

16. Procedimiento según se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 13 a 15, en el que, en la etapa a), la proporción molar de gabapentina a ketoprofeno está comprendida entre 1:1 y 1,2:1, más preferentemente es de aproximadamente 1:1