JP2000501705A - ３―アミノ―１，２，４―ベンゾトリアジンジオキシドの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 ベンゾフラザン−１−オキシドを均質条件下でジナトリウムシアナミドと反応させ、次いで緩衝溶液中で結晶化を生じさせることによる、３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキシドの製造方法。好ましい態様では、該方法はベンゾフラザン−１−オキシドを均質条件下でシアナミドおよび水酸化ナトリウムと反応させ、次いでアセトンと酢酸の混合物中で精製することを含んで成る。

Description

【発明の詳細な説明】 ３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジンジオキシドの製造方法 発明の背景 発明の分野 本発明は、哺乳類の癌腫治療を目的とした全身投与のための高純度の３−アミ ノ−１，２，４−ベンゾトリアジンジオキシドの製造方法に関する。従来の技術 チラパザミンは、米国特許第3,869,378 号明細書中に抗菌剤としての使用が報 告されておりそして米国特許第3,957,779 号明細書中にその化合物とその同族化 合物が飼育家畜の成長促進としての使用について開示されている、既知化合物で ある。チラパザミンはまた、WO 91/04028（その記載は参考として本明細書中に 組み込まれる）に開示されるように哺乳類の抗癌腫剤として.有望な薬剤でもあ る。チラパザミンを全身に用いる時には、製造工程中に化合物の中に残っている 可能性がある不純物による副作用を伴うことなくそれの所望の抗癌腫活性が得ら れるように、該化合物が高度に精製されることが重要である。 チラパザミンの製造方法はAngew．Chem．84，1061 (1972)および米国特許第3, 868,371 号明細書中に次のように開示されている。 と反応させ、 ３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキシドに変換する。その方法の詳細をここに複製する。 ベンゾフロキサンの懸濁液に、20℃においてジナトリウムシアナミド17.2ｇ（0. 2モル）を分割して添加する。添加の過程で温度が50℃〜60℃に上昇し、溶液は 青紫色を呈する。それを約60℃で更に40分間攪拌し、析出した沈澱を濾過により 母液から取り出し、それを保持し更に処理する。この沈澱を水に溶かし、該溶液 を濾過し、濾液を酢酸で酸性にすると、12.5gの３−アミノ−１，２，４−ベン ゾトリアジン−１，４−ジ−Ｎ−オキシド（理論値の71％）が赤みかかった金色 の結晶（この結晶は220℃で分解を伴って融解する）の形で析出する。母液を酢 酸で酸性にすると、更に3.2ｇ（理論値の18％）の３−アミノ−１，２，４−ベ ンゾトリアジンが得られる。ジメチルホルムアミドからの再結晶後、この材料は 220℃で分解を伴って融解する。報告された全収率は理論値の89％である。 本発明者は、３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキシ ドの改良製造方法を発見した。 発明の要約 ３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキシ ドの製造方法は次の段階を含んで成る： ａ） １〜３のモル比でベンゾフラザン−１−オキシドをジメチルスルホキシド 中に溶かし； ｂ） ３〜２のモル比でジナトリウムシアナミドを反応フラスコ中の水に溶かし ； ｃ） ベンゾフラザン−１−オキシド溶液を約55℃〜65℃の温度で、好ましくは 約60℃の温度でジナトリウムシアナミド溶液に添加し、沈澱として３−アミノ− １，２，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキシドのナトリウム塩を得； ｄ） その沈澱を濾過により除去し； ｅ） 濾液を約１〜６容の水に懸濁し； ｆ） 懸濁した濾液に約3.5モル当量のメタンスルホン酸を加えて溶液を与え； ｇ） その溶液を濾過してそこから酸不溶性不純物を除去し； ｈ） 濾過した溶液を、過剰の酢酸ナトリウムを含む緩衝液に投入し； ｉ） 結晶化させて90％より多くが190 nm未満の粒度を有する結晶質粒子を形成 せしめ； ｊ） 結晶質粒子を濾過しそして水で洗浄し； ｋ） 洗浄した結晶質粒子を前記反応フラスコに戻し、約５容の水と共に攪拌し ；そして ｌ） 結晶質粒子を濾過し、次いでそれらをアセトンで洗浄して、精製した３− アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキシドを得る。 精製した生成物を約50〜60℃で乾燥しそしてNo．10のステンレス鋼篩を通すこ とによりそれを均質化してもよく、それは次いで軟カプセル剤のような固形経口 医薬製剤にいつでも使用できる。 本発明の好ましい態様では、３−アミノ−１，２，４−ベンゾト リアジン−１，４−ジオキシドの製造方法は次の段階を含んで成る： ａ） １〜３のモル比のジメチルスルホキシド中のベンゾフラザン−１−オキシ ドの溶液を、約55℃〜65℃の温度で、３：６のモル比を有するシアナミドと水酸 化ナトリウムの水溶液に添加して、部分懸濁液／溶液として３−アミノ−１，２ ，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキシドのナトリウム塩を得； ｂ） その部分懸濁液／溶液を約１〜６の容積比の水により希釈し、それによっ て塩基不溶性不純物を含む溶液を得； ｃ） その溶液を濾過してそこから塩基不溶性不純物を除去し； ｄ） 該溶液をわずかに過剰の氷酢酸で中和して粗結晶質混合物を得； ｅ） 結晶質混合物を冷却し、そして固体を濾過により吸湿ケークの形で収集し ； ｃ） 攪拌しながら、約88：12の比のアセトンと酢酸の混合物を添加し； ｇ） 結晶質粒子を濾過により収集し、約88：12の比を有するアセトンと酢酸の 混合物を使ってそれらを洗浄し、次いで水で洗浄し； ｈ） 結晶質粒子に約５容の水を加えて懸濁液を与え； ｉ） その懸濁液を3.5モル当量のメタンスルホン酸により酸性化し； ｊ） 懸濁した結晶質粒子を濾過により収集し、それらを十分に攪拌した希酢酸 ナトリウム溶液に投入し、そしてそれらを微結晶化させて190 nm未満の平均粒度 を有する微結晶質粒子を形成せしめ； ｋ） 微結晶結晶質粒子を濾過により収集し、そして水で洗浄し、次いでアセト ンで洗浄して、精製した３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン−１，４− ジオキシドを得る。 精製した生成物を約50〜60℃で乾燥しそしてNo．10のステンレス鋼篩を通すこ とによりそれを均質化してもよく、それは次いで軟カプセル剤のような固形経口 医薬製剤にいつでも使用できる。凝集が 起こったならば、本発明の方法において軟カプセル剤中への充填前に微結晶質粒 子の均質性を確保するために磨砕工程を使うことができる。好ましくは、磨砕は 高い衝撃と熱の問題を避けるために低エネルギーコミルにより行うべきである。 発明の詳細な説明 チラパザミンは、癌腫に存在する低酸素性細胞に対して高められた毒性と選択 性を有することが証明された有力な細胞毒性剤である。その効力は非経口製剤と 固形経口製剤の両方で観察された。本発明の目的の１つは、チラパザミンの合成 の後で粒度を減少させる必要がない、固形経口製剤に適した粒度でチラパザミン を提供することである。 そのような医薬製剤用の高純度チラパザミンを得るために、Angew．Chem．84 ，1061(1972)および米国特許第3,868,371 号明細書に報告された方法および得ら れる生成物を改善するために様々な研究を行った。それを下記に記載する。不均質反応条件 例１ 前記参考文献中に記載された方法を、例１〜４に記載のような変更を伴って繰 り返した。 50％水性メタノール中での１モルのベンゾフラザン−１−オキシドと３モルの ジナトリウムシアナミドとの不均質反応は直ちに発熱性である。引用した参考文 献によれば、好ましい順序は、まずベンゾフラザン−１−オキシドと２モルのジ ナトリウムシアナミドを水性メタノール中に懸濁させることであった。数分後、 もう１モルのジナトリウムシアナミドを反応混合物に添加した。その後すぐに、 中間体のナトリウム塩が黒紫色のバター状固体として沈澱した。こ の湿った固体は慣用反応フラスコに移すのが困難な形態であり、濾過はゆっくり で扱いにくかった。粗製沈澱物を水に溶かし、濾過して塩基不溶性不純物を除去 した。濾液を酢酸で酸性にし、生成物を橙色固体として単離した。この生成物を 約10容の酢酸中に80℃で溶かしたが、濃縮するかあるいは低極性溶媒で希釈しな ければ容易に結晶化しなかった。例２ 実施例１と同じ方法を使ったが、ただし中間体の黒紫色バター状固体を濾過せ ずに水に溶かし酸性化した。回収率は高かったがＴＬＣにより不純物が観察され た。この不純物はクロマトグラフィーにより除去することが非常に困難であった 。この不純物をフラッシュクロマトグラフィーにより単離すると、フェナジン− １，５−ジ−Ｎ−オキシドであると同定された。この化合物は最も多い反応副産 物であり、ベンゾフラザン−１−オキシドの自己縮合から生じる。例３ 実施例１の方法に従って粗生成物を得たが、ただし２モルのベンゾフラザン− １−オキシドを６モルのジナトリウムシアナミドと反応させた。２つの溶液の添 加と同時に、ガス発生を伴って発熱反応が起こった。後処理後の収率は22％に減 少した。例４ 実施例１の方法に従って粗生成物を得たが、ただし1.2モルのベンゾフラザン −１−オキシドを3.6モルのジナトリウムシアナミドと反応させた。沈澱した粗 生成物を取り出したら、それを水に懸濁し、そして溶液が生成するまで35％水酸 化ナトリウムを加えた。得られた溶液を濾過し、酢酸で酸性化して結晶生成物を 得た。この生成物は不純物としてフェナジンのモノ−Ｎ−オキシドを含むことが わかった。また、該生成物は、85℃の温度での酢酸からの濾過によ ってのみ除去することができた凝集塊を含んだ。細胞毒性剤の高温溶液の処理は 重大な欠点であることがわかった。 その欠点と参考文献の方法の望ましくない特徴を取り除くため、改良方法に用 いる最良の実験条件と試薬を選択するために相当な研究を行った。均質反応条件 １．溶媒 試薬類の溶解性は、均質反応条件下で実験を行うための溶媒の選択肢を制限し た。ベンゾフラザン−１−オキシドはトルエンや酢酸エチルのような無極性溶媒 に易溶である。それはイソプロパノールやメタノールにはずっと低い溶解性であ る。しかしながら、それはジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドンまたは ジメチルスルホキシド（DMSO）のような極性非プロトン性溶媒には易溶である。 １モルのベンゾフラザン−１−オキシドは室温で３容のDMSO中に吸熱的に容易に 溶ける。 ジナトリウムシアナミドは有機溶媒に不溶であるが、水には発熱的に溶ける。 ３モル量を２容の水に溶かしてナトリウムシアナミドを与え、それを水酸化ナト リウムで平衡状態にする。 強苛性アルカリ反応媒質は、ベンゾフラザン−１−オキシド用溶媒の選択に対 する限定要因であった。強塩基中での確かな安定性のためにジメチルホルミアミ ドよりもジメチルスルホキシドを選んだ。 ２． 添加の方式 通常の添加は、水に溶かした過剰のジナトリウムシアナミドの溶液へのDMSO中 のベンゾフラザン−１−オキシドの溶液の添加として定義した。ジナトリウムシ アナミドの水溶液をメタノール中のベンゾフラザン−１−オキシドの溶液に添加 するという１実験では、生成物の回収率が低く、この反応からの主な副産物がフ ェナジンモノ −Ｎ−オキシドであると同定された。逆方向への添加の場合のように、過剰のベ ンゾフラザン−１−オキシドが存在する条件下では、フェナジン関連副産物の形 成が優勢である。 ３． 化学量論 文献〔Angew．Chem．Int．Ed.,第11巻（1972）1009〕と、不均質反応条件を使 った我々の研究に基づくと、チラパザミンの調製はベンゾフラザン−１−オキシ ド１当量ごとにジナトリウムシアナミド３当量を必要とする。均質条件下で１モ ル当量を２モル当量と反応させた或る実験では、出発のベンゾフラザン−１−オ キシドの26％回収率が得られた。ナトリウムシアナミドの水溶液の熱安定性は周 知であるが、高温ではシアネートへの加水分解およびアンモニアの遊離が起こる ことは知られている。シアナミドは二量体種におよび水不溶性三量体メラミンに 重合することも知られている。 DMSOと水の中でシアナミドとベンゾフラザン−１−オキシドを使って幾つかの 均質反応を実施した。生成物の形成は、３モルのシアナミドと６モルの水酸化ナ トリウムを使った時だけ、ジナトリウムシアナミドと同等であった。 ４． 温度 標準反応条件下で、室温のDMSO中のベンゾフラザン−１−オキシドの溶液をジ ナトリウムシアナミドの水溶液に添加した。ジナトリウムシアナミド溶液の温度 を添加中55〜60℃に維持した時に生成物の収率が最適であった。反応はこの温度 で迅速に進行し、明白な発熱は観察されなかった。温度を34〜40℃に維持した一 実験では、出発のベンゾフラザン−１−オキシドが40％の収率で回収された。最 適反応温度での再現性を立証したこの実験および他の実験の詳細を表１に示す。Ａ^*＝ベンゾフラザン−１−オキシド Ｂ^*＝ジナトリウムシアナミド ５． 溶媒の比 ほとんどの実験は約１：１のDMSO／水を使って実施した。１：２の比のDMSO／ 水を使った一実験では、出発のベンゾフラザン−１−オキシドのわずかに高い回 収率が観察され、従ってチラパザミンの収率はより低かった。ほとんどの反応は ベンゾフラザン−１−オキシドに基づいて７：１の容量：重量比で実施した。 DMSOの代わりにイソプロパノールまたはＴＨＦのような溶媒を使った時、反応 は長時間の加熱後であっても優勢的に出発物質を与えた。 ６． 結晶化 粗チラパザミンの精製は、粗チラパザミンを80〜90℃で９容の酢酸に溶かすこ とにより行った。混合物を濾過して不溶性不純物を除去し、そして濾液を60℃で 部分真空下で元の容量の半分に濃縮した。酢酸からまたは酸性溶液からの結晶化 の忌避は、一貫して凝集塊の問題を引き起こした。凝集塊の素性は確認されなか った。凝集物を含む溶液の濾過は、濾紙上の染みと、標準分光法により特徴づけ るには不十分な固体を与えただけであった。 蒸留段階を回避するために、106℃で６容の酢酸から更に濃厚な溶液を調製す ることができた。これは便利であるけれども、潜在的に有害であると思われた。解性を調べるために３種類の酸（メタンスルホン酸、硫酸および塩酸）を選んだ 。メタンスルホン酸溶液は最も有望と思われ、水酸化ナトリウムでの中和後に遊 離塩基が単離された。この操作からの結晶を粒度について調べたが、90％が＜19 0 nmであるという規格を満たしていなかった。 水酸化ナトリウムによる中和からの発熱は、所望の粒度を有する結晶の生成に 必要と思われる迅速な添加を妨害した。この問題は、発熱を緩和しそして非常に 迅速な添加を考慮に入れた冷酢酸ナトリウム緩衝液中で酸性溶液を急冷（クエン チング）することにより、処理した。この方法で得られた結晶は粒度規格を満た した。ＴＬＣとＨＰＬＣによる回収率および初期検査は、酢酸から得られたもの と非常に類似した不純物プロフィールを与えた。より重要なことには、一晩放置 しておいた酢酸溶液から凝集塊の証拠が全く観察されなかった。 この実験により得られた均質反応パラメーターを使って、例５に記載の通りチ ラパザミンを調製した。例５ １モル、２モルおよび３モルのベンゾフラザン−１−オキシドと対応する３モ ル、６モルおよび９モルのジナトリウムシアナミドから、表２に示すようにスケ ールを変えて７つの反応を実施した。 １〜３のモル比のジメチルスルホキシド中のベンゾフラザン−１−オキシドの 溶液を、約60℃で反応容器に入った３〜２のモル比を有するジナトリウムシアナ ミドの水溶液に添加した。添加時間は８ 〜34分間であり、添加が終了してから数分後に生成物のナトリウム塩が沈澱した 。沈澱を濾過により集め、約１〜６の容積比で水に懸濁した。懸濁液は塩基不溶 性物質を含んだので、それを濾過して除去した。懸濁液に約3.5モル当量のメタ ンスルホン酸を室温で添加した。温度は約45℃に上がり、温かい溶液を濾過して 酸不溶性不純物を除去した。次いで濾液を過剰の酢酸ナトリウムを含む緩衝液中 に投入した。迅速な結晶化が起こり、該結晶の90％が190 nm未満の粒度を有した 。結晶質粒子を濾過しそして水でよく洗浄した。湿ったケークの形の結晶質粒子 を反応容器に戻し入れ、約５容の水と共に攪拌した。洗浄した後、固体を濾過し 、アセトンで洗浄して精製したチラパザミンを得た。精製物質を約50〜60℃で３ 日間乾燥した。乾燥した固体を、No.10ステンレス鋼篩を通して濾過することに より均質にした。 収率およびアッセイ結果を表２に示す。 Ａ^*＝ベンゾフラザン−１−オキシドのモル Ｂ^*＝ジナトリウムシアナミドのモル この方法を４および15モルスケールにおいて好結果で繰り返してキログラム量 のチラパザミンを純粋形態で提供した。この方法は安 全性と再現性の基準を満たす。こうして、癌腫の処置に使われる固形経口製剤に 必要なナノメートルサイズの結晶の形で、生成物が製造された。 本発明の方法の好ましい態様を例６および７に示す。例６ 約６モルの水酸化ナトリウムを含む水溶液に20〜30℃において約３モルのシア ナミドを加えた。混合物を室温で約１時間攪拌し、次いで約60℃に温めた。ジメ チルスルホキシド中に１モルのベンゾフラザン−１−オキシド（乾量に基づいて 計算）を含む溶液を塩基性シアナミド混合物に10〜20分間に渡り添加した。添加 の終わりに、発熱反応が起こったので冷却によって75℃より低く維持した。この 混合物を脱イオン水により希釈し、不溶性副産物を約45℃での濾過により除去し た。合わせた濾液と洗浄液を氷酢酸で酸性にした。結晶質混合物を冷却し、固形 物を濾過により集めた。濾過ケークを脱イオン水で洗浄し、湿った固形物をきれ いな反応容器に移した。 この湿った固形物を約88：12の比のアセトンと酢酸の混合物により希釈し、混 合物を室温で約30分間攪拌した。固形物を濾過により収集した。濾過ケークをア セトンと酢酸の混合溶液（88：12）で洗浄し、次いで脱イオン水で洗浄した。湿 った固形物をきれいな反応容器に移した。最終精製 湿った固形物を脱イオン水で希釈し、その懸濁液を希メタンスルホン酸で酸性 化した。混合物を活性炭処理し、約45℃で数分間攪拌した。それを熱濾過し、も う１回活性炭処理を繰り返した。濾過後、温かい濾液を、十分攪拌した希酢酸ナ トリウムの冷却溶液に投入した。固形物を濾過により収集した。濾過ケークを脱 イオン水で洗浄し、次いでアセトンで洗浄した。結晶質固体を約55℃で真空濾過 し て純粋な生成物を与えた。 全体収率は理論値の約40〜50％であった。例７ この例は、大規模バッチサイズ量の１，２，４−ベンゾトリアジン−３−アミ ノ−１，４−ジオキシドの製造方法を説明する。 と11.9kg（297モル）の水酸化ナトリウムビーズを装入した。発熱を抑えるため に冷却を使った。透明溶液が得られるまで混合物を攪拌し、次いで15〜25℃に冷 却した。得られた溶液に6.3kg（150モル）のシアナミドを装入し、20〜30℃で１ 時間攪拌した。その間に、別の容器(K-5)に7.4kgの湿ったベンゾフラザン−１− オキシド（乾量に基づいて計算すると7.0 kg）（50モル）と25.5kgのジメチルス ルホキシドを装入した。この混合物を20〜30℃に温めながら50分間攪拌した。 シアナミド溶液(K-7)を60℃に温めた。ベンゾフラザン−１−オキシド(K-5)を インラインカートリッジフィルターを通して約20分間に渡りシアナミド溶液へと 移した。反応混合物を冷却しながら更に20分間攪拌し、温度が71℃を越えないよ うにした。脱イオン水 性副産物をインラインカートリッジフィルターを通して濾過し、濾液を50ガロン 反応がま(K-8)の中に排出させた。その濾液を19.9kg（332 モル）の酢酸の添加 により酸性にした。生じた混合物を22℃に冷却し、攪拌を１時間続けた。固形物 を濾過により集めた。反応 湿った濾過ケークを50ガロン反応がま(K-8)に移した。 34.9kgのアセトンと6.0kgの酢酸を含む溶液を調製し、それをK-8中の粗製固形 物に添加した。混合物を25℃で３時間攪拌し、得ら れた固形物を濾過により集めた。濾過ケークを10.4kgのアセトンと イオン水を装入し、前記濾過ケークを洗浄するのに使った。最終精製工程では湿 った粗ケークを使った。 50ガロン反応がま(K-8)に11.6kg（141.5モル）の無水酢酸ナト 明溶液を10〜20℃に冷却した。 その間に、30ガロン反応がま(K-11)を窒素でパージし、そこに 生じた懸濁液を20分間攪拌し、そこに10.0kg（102モル）のメタンスルホン酸を 数分間に渡り添加した。40〜45℃に温度調整し、暗色溶液に0.2kgの活性炭と0.2 kgのソルカフロックを加えた。インラインフィルターを通して混合物を循環させ て固形物を除去した。活性炭とソルカフロック処理をもう１回繰り返した。研磨 用フィルターを通して濾液を循環させ、冷却した酢酸ナトリウム溶液(K-8)に素 早く投入した。生じた混合物を冷却しながら約1.5時間攪拌し、10℃で濾過によ り固形物を集めた。反応がま(K-8)に装填した脱イオン水（34kg）を使って濾過 ケークを洗浄した。濾過ケークを17.9kgのアセトンで最終洗浄し、55〜60℃で43 時間真空乾燥した。純粋生成物の重量は3.41kgであった（理論値の37.2％）。 今まで本発明をそれの好ましい態様に関して記載してきたが、本発明の範囲内 での変更が当業者に明白であることは理解されよう。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 1. ３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキシドの製造 方法であって、次の段階： ａ） １〜３のモル比のジメチルスルホキシド中のベンゾフラザン−１−オキシ ドの溶液を、約55℃〜65℃の温度で、反応容器中に入れた３〜２のモル比のジナ トリウムシアナミドの水溶液に添加し、沈澱として３−アミノ−１，２，４−ベ ンゾトリアジン−１，４−ジオキシドのナトリウム塩を得； ｂ） その沈澱を取り出しそれを過剰の水に懸濁し； ｃ） その懸濁液に約3.5モル当量のメタンスルホン酸を加えて溶液を与え； ｄ） その溶液を濾過してそこから酸不溶性不純物を除去し； ｅ） 濾過した溶液を、過剰の酢酸ナトリウムを含む緩衝溶液に投入しそして結 晶化を生じさせ； ｆ） 結晶質粒子を濾過しそして水で洗浄し； ｇ） 洗浄した結晶質粒子を前記反応容器に戻し、それを約５容の水と共に攪拌 し；そして ｈ） 結晶質粒子を濾過し、次いでそれらをアセトンで洗浄して、精製３−アミ ノ−１，２，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキシドを得る を含んで成る方法。 ２．前記精製３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキシ ドを乾燥しそして均質化することを更に含んで成る、請求項１に記載の方法。 ３． 前記ベンゾフラザン−１−オキシドが前記ジナトリウムシアナミド溶液 に約60℃の温度で添加される、請求項１に記載の方法。 ４． 段階ｂ）において前記濾液が１〜６の容積比で水に懸濁される、請求項 １に記載の方法。 ５． 請求項１の方法により製造される、190 nm未満の粒度を有する結晶質粒 子の形の３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキシド。 ６． ３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキシドの製 造方法であって、次の段階： ａ） １〜３のモル比のジメチルスルホキシド中のベンゾフラザン−１−オキシ ドの溶液を、約55℃〜65℃の温度で、３：６のモル比を有するシアナミドと水酸 化ナトリウムの水溶液に添加して、部分懸濁液／溶液として３−アミノ−１，２ ，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキシドのナトリウム塩を得； ｂ） その部分懸濁液／溶液を約１〜６の容積比の水で希釈し、それによって塩 基不溶性不純物を含む溶液を得； ｃ） その溶液を濾過してそこから塩基不溶性不純物を除去し； ｄ） 該溶液をわずかに過剰の氷酢酸で中和して粗結晶質混合物を得； ｅ） その結晶質混合物を冷却し、そして濾過により固形物を湿ったケークの形 で収集し； ｆ） 攪拌しながら、約88：12の比のアセトンと酢酸の混合物を添加し； ｇ） 結晶質粒子を濾過により収集し、約88：12の比のアセトンと酢酸の混合物 を使ってそれらを洗浄し、次いで水で洗浄し； ｈ） 結晶質粒子に約５容の水を加えて懸濁液を与え； ｉ） その懸濁液を3.5モル当量のメタンスルホン酸により酸性化し； ｊ） 懸濁した結晶質粒子を濾過により収集し、それらを十分に攪拌した希酢酸 ナトリウム溶液に投入し、そしてそれらを微結晶化させて190 nm未満の平均粒度 を有する微晶質粒子を形成せしめ；そして ｋ） 微晶質粒子を濾過により収集し、水で洗浄し、次いでアセトンで洗浄して 、精製３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキシドを得る を含んで成る方法。 ７． 前記精製３−アミノ−１，２，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキ シドを乾燥しそして均質化することを更に含んで成る、請求項６に記載の方法。 ８． 前記ベンゾフラザン−１−オキシドが前記ジナトリウムシアナミドに約 60℃の温度で添加される、請求項６に記載の方法。 ９． 請求項６の方法により製造される、微晶質粒子の形の３−アミノ−１， ２，４−ベンゾトリアジン−１，４−ジオキシド。