JP2000512619A

JP2000512619A - 神経系疾患治療用薬剤の調製のためのベンゾナフタレン誘導体の使用

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Publication number: JP2000512619A
Application number: JP09535900A
Authority: JP
Inventors: ヴィージュ，グザヴィエ; ブナヴィード，ジェシュ; シュロート，ブラアム; トーパン，ヴェロニク
Original assignee: ガルデルマリサーチアンドデヴェロップメントエスエヌシー
Priority date: 1996-04-05
Filing date: 1997-04-02
Publication date: 2000-09-26
Also published as: CN1221341A; ES2144857T3; HUP9902167A3; AU717704B2; PT900078E; CZ317698A3; GR3033061T3; ATE189385T1; ZA972875B; BR9708511A; CA2250755A1; FR2747041A1; RU2160098C2; SK133398A3; WO1997037648A1; US6043280A; NZ332158A; EP0900078B1; NO984651D0; HUP9902167A2

Abstract

(57)【要約】一般式（Ｉ）の化合物の、末梢神経障害、中枢神経変性疾患及び神経系の自己免疫疾患の治療に有効な薬剤の製造のための使用が開示される。

Description

【発明の詳細な説明】神経系疾患治療用薬剤の調製のためのベンゾナフタレン誘導体の使用本発明は、下記式（Ｉ）に相当する化合物及びそれらの塩の、末梢神経障害、中枢神経変性疾患及び神経系の自己免疫疾患の治療のための薬剤の調製のための使用に関する。ここで、・Ｒ₁は、-ＣＯＲ₆またはＣＨ₂ＯＨであり、Ｒ₆は以下の基：または基ＯＲ₇を示し、Ｒ₇は、水素原子、１から２０の炭素原子を持つアルキル基、モノヒドロキシアルキル基またはポリヒドロキシアルキル基を示し、ｒ’及びｒ”は、水素原子、低級アルキル基、モノ-またはポリヒドロキシアルキル基、任意に置換されていてもよいアリール基、または、アミノ酸またはアミノ糖残基を示すか、あるいは、両者が結合してヘテロ環を形成していてもよく、・Ｒ₂は、水素原子、１から１５の炭素原子を持つ分枝した又は分枝していないアルキル基、１から４の炭素原子を持つアルコキシ基、または、環状脂肪族基を示し、・Ｒ₃は、水素原子、ヒドロキシル基、１から４の炭素原子を持つ分枝した又は分枝していないアルキル基、１から１０の炭素原子を持つアルコキシ基、置換又は非置換の環状脂肪族基、チオ環状脂肪族基、または、式-Ｏ-Ｓｉ（ＣＨ₃）₂−Ｒ₈ の基を示し、Ｒ₈が直鎖状または分枝状の低級アルキル基を示し、・Ｒ₄及びＲ₅は、同一でも異なっていてもよく、水素原子、低級アルキル基、ヒドロキシル基、または、低級アシルオキシ基を示す。本発明では、１から２０あるいは１から１５の炭素原子を持つ分枝した又は分枝していないアルキル基の中で、特に、メチル、エチル、イソプロビル、ブチル、tert-ブチル、ヘキシル、オクチル、ノニル、２-エチルヘキシル及びドデシル基を挙げることができる。好ましくは、これらの基は１から12の炭素原子を持つ。低級の基である場合、アルキル基は一般に１から６の炭素原子を含む。低級アルキル基として、メチル、エチル、プロピル、イソプロビル、ブチル、tert-ブチル及びヘキシル基を挙げることができる。モノヒドロキシアルキルまたはポリヒドロキシアルキル基は、１から６の炭素原子及び１から５のヒドロキシル基を有する基であると解される。モノヒドロキシアルキル基の中で、好ましくは、１から３の炭素原子を含む基、特に、ヒドロキシメチル、２-ヒドロキシエチル、及び、２-または３-ヒドロキシプロピル基が好ましい。ポリヒドロキシアルキル基の中で、２，３-ジヒドロキシプロピル、２，３，４-トリヒドロキシブチル及び２，３，４，５-テトラヒドロキシベンチル基、またはペンタエリスリトール残基などの、３から６の炭素原子と２から５のヒドロキシル基を有する基が好ましい。アリール基の中で、水素原子、ヒドロキシル基、アルキル基、ニトロ官能基、メトキシ基、又は任意に置換されていてもよいアミン官能基の少なくとも１つで任意に置換されていてもよいフェニル、チオフェンまたはピリジン基が好ましい。任意に置換されていてもよいフェニル基が好ましい。アミノ酸残基は、特に、リシン、グリシン又はアスパラギン酸等のアミノ酸のうちの１つの残基を意味すると解され、ペプチド残基は、特に、アミノ酸の組み合わせからなるジペプチドまたはトリペプチド残基を意味すると解される。アミノ糖残基の中で、グルコサミン、ガラクトサミン及びマンノサミンから誘導された残基を挙げることができる。ヘテロ環は、好ましくは、ピペリジノ、モルホリノ、ピロリジノ、またはピペラジノ基を意味すると解され、任意に、その４-位において、上述したＣ₁−Ｃ₆ アルキルまたはポリヒドロキシアルキル基で置換されていてもよい。１から１０の炭素原子を持つアルコキシ基の中で、特に、メトキシ、エトキシ、イソプロポキシ、ヘキシロキシ及びデシロキシ基を挙げることができる。低級アシロキシ基は、１から４の炭素元素を持つ基、例えば、アセチルオキシまたはプロピオニルオキシ基などと解される。環状脂肪族基は、１から１０の炭素原子を持つ環状または多環状アルカンを意味すると解され、１つ又はそれ以上のハロゲン原子あるいは１つ又はそれ以上のヒドロキシル基で任意に置換されていてもよい。特に、アダマンチル又は１-メチルシクロヘキシル基を挙げることができる。好ましいチオ環状脂肪族基は、１−アダマンチルチオ基である。ハロゲン原子の中では、フッ素または塩素が好ましい。式（Ｉ）の化合物に対して、神経栄養活性の測定のために、幾つかの試験が行われた。培地中での星状細胞によるＮＧＦの産生に対する化合物の効果１または２日齢の新生マウスの大脳皮質から、一次星状細胞培地を調製した。解剖の後、皮質を、Blutexナイロン（83mM メッシュ）を通すことによって機械的に破砕した。細胞を、10%のウシ胎児血清、2.5mMのＬ-グルタミン、100U/mlのペニシリン、及び100mg/mlのストレプトマイシンを含有するＤＭＥＭ／Ｆ１２媒質（Gibco，Brl 1:1）中で（30ml当たりに１皮質）、12-ウェルのコーニングプレートにおいて、各ウェルに1mlの細胞調製液として培養した。プレートを、5% のＣＯ₂で飽和させたインキュベータ内で、37℃に置き、媒質を３日毎に交換し、培養の７日目のおける培地（全面の80-90％成長）を使用した。次いで、種々の化合物での処理を、ウェル当たりに上記の媒質500mlについて、40時間行った。処理の最後に、媒質中に分泌されたＮＧＦを、酵素免疫検定法によりアッセイし、膜タンパク質レベルをクマシーブルーを用いたブラッドフォード(Bradford) 技術によって評価した。ＮＧＦのアッセイＮＧＦレペルは、酵素免疫法技術によって評価した。96-ウエルのプレートを、37℃において、pH9.6の50mMのＮａ₂ＣＯ₃バッファーに溶解した抗-ＮＧＦモノクローナル抗体（0.67mg/ml）で２時間処理した。次いで、空のプレートを、室温において、同じバッファーに溶解した１％のウシ血清アルブミンで、１時間処理し、200mMのＮａＣｌ、10mMのＣａＣｌ₂、0.1％のTriton X-100、及び0.05％のＮａＮ₃を含むTris-HClバッファー（pH7.0）（バッファーＡ）で洗浄した。次いで、抽出バッファー（50mM Tris-HCl、pH7、200mM NaCl、1% BSA、0.1% Trito n X-100、4mg/mlアプチトニン、2mM EDTA、0.1mM塩化ベンゼトニウム及び0.05% ＮａＮ₃）中で9/10に希釈した星状細胞媒質、及び、ＮＧＦ標品（10から320pg/m lの一連のもの）を共に添加した（0.1ml/ウェル）。プレートを、４℃において約16時間インキュベートした。バツファーＡで洗浄した後、プレートを、ｂ-ガラクトシダーゼ（0.13-0.15 U/ml）と結合した第２の抗-ＮＧＦモノクローナル抗体と共に、37℃において４時間インキュベートした。バッファーＡで洗浄した後、プレートを、１50mMのＮａＣｌ、2mMのＭｇＣｌ₂、0.1%のＮａＮ₃及び1%のＢＳＡを含む10mMのＨＥＰＥＳ（pH7.0）中に調製したｂ-ガラクトシダーゼ基質、クロロフェノールレッド-ｂ-Ｄ-ガラクトピラノシド（2mg/ml）と共に、37℃ で２から３時間インキュベートした。反応生成物を、Bio Kinetics Reader EL 3 40によって、570nMにおいて測定した。結果本発明の化合物は、ＮＧＦの産生を増加させた。100nMの濃度において、本発明の最も活性な化合物は、ＮＧＦの産生を、対照に比較して70%以上増加させた。脊髄神経節の神経再生及び神経炎成長に対する化合物の効果神経節（ＤＲＧ）を、14日齢の胎児ラットから取り出した。サンプルは、骨髄の３つの異なるレベル（頸部、胸部、及び仙骨部）において回収した。ＤＲＧは、5%のウシ胎児血清、100U/mlのペニシリン、及び、100mg/mlのストレプトマイシンを含むＤＭＥＭ媒質（Gibco、Brl）中で、実験すべき化合物とともに、あるいは化合物無しで、5%のＣＯ₂で飽和させたインキュベーター内で24時間培養した。次いで、媒質を、ウシ胎児血清を含まず、1mMのシトシンアラビシド(SIGMA)を含有する同じ媒質に交換して、非-神経細胞の増殖を阻止した。神経再生及び神経炎成長に対する化合物の効果は、培養してから48時間後に、 BIOCOM画像分析システムを用いた体型測定技術によって評価した。結果本発明の幾つかの化合物は、100nMの濃度において、神経節の外食片の神経再生を、対照に比較して100%以上増加させた。神経系の自己免疫疾患治療のための本発明の化合物の治療的能力も評価した。実験的自己免疫性脳炎（ＥＡＥ）を持つマウスのリンパ球の増殖に対する化合物の効果ＥＡＥの誘発雌ＳＪＬ／Ｊマウスに、Ｄ0及びＤ7において、フロイントアジュバント中に乳化したミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ、400mg/マウス）を皮下注射した。最初の免疫から約20日後に、ＥＡＥの臨床的徴候が進行した動物のリンパ節を、増殖試験用に使用した。リンパ球の増殖の測定神経節を取り出し、金属篩を通すことによって機械的に破砕した。細胞を、10 %の補体を除いたウシ胎児血清、2.5mMのＬ-グルタミン、100U/mlのペニシリン、 100mg/mlのストレプトマイシン、及び0.5％の2-メルカプトエタノールを含有するＲＰＭＩ媒質（Gibco、BRL）中で、TPP 96-ウェルプレートの各ウェル当たりに、250,000細胞の量で培養した。プレートは、5%のＣＯ₂で飽和させたインキュベーター内で37℃に置いた。細胞は、培養の日に、ＭＢＰ（25mg/ml抗原性刺激）の不存在下または存在下で、レチノイン酸の種々の類似物とともに96時間処理した。増殖は、インキュベーションの最後の16時間に培養媒質に添加したトリチウム化チミジンの取り込みを測定することにより評価した。結果結果の分析により、本発明の化合物が、ＥＡＥマウスから得たリンパ球の増殖を阻害し、ＩＣ₅₀が0.1から100nMの範囲であることが示された。活性化小グリア細胞によるＴＮＦ-α（腫瘍壊死因子-α）の産生に対する化合物の効果小グリア細胞を、1日齢の新生ラット皮質から調製した。細胞は、TPP 96-ウェルプレートにおいて、10%のウシ胎児血清（不活性化ミオクローン(myoclone)）、2.5mMのＬ-グルタミン、4.5g/lのＬ-グルコース、及び100mg/mlのゲンタマイシンを含有するＤめＭ媒質（Gibco、BRL）中で培養した。細胞は、レチノイン酸の種々の類似物で処理し、1mg/mlのリポポリサッカリド（ＬＰＳ）で刺激して、 TNFαの産生を誘発した。18時間のインキュベーションの後、ＴＮＦαのアッセイのために培養媒質を回収した。ＴＮＦαのアッセイ小グリア細胞の培養上清中のＴＮＦαレベルは、Ｌ９２９細胞系に対する細胞毒性の試験を用いて決定した。この試験は、ＭＴＴの比色アッセイによって可視化した。結果本発明の化合物は、培地の活性化小グリア細胞によるＴＮＦαの産生を減少させ、10nMの濃度において50%まで減少させる効果を有する。これらの結果は、本発明の化合物が神経再生活性を有し、外傷性、虚血性、代謝性、感染性、アルコール性、医原性または遺伝性タイプの末梢神経障害の治療における、及び、筋萎縮性外側硬化症及び脊髄性筋萎縮症などの運動ニューロンに影響する疾患の治療における応用が見出されることを示す。また、これらは、網膜症、大脳老化、多発性梗塞に伴う痴呆症、血管性痴呆の治療のための薬剤の調製のために、オリーブ橋小脳萎縮、及び、例えばアルツハイマー病、ピック病またはハンティングトン舞踏病などの他の神経変性疾患の治療において用いることができる。本発明の化合物は、脳血管障害あるいは髄質または頭部外傷に伴う神経死の予防における応用も見出された。また、これらは、多発性硬化症、ギャン-バレー疾患及び重症筋無力症などの自己免疫を起源とする疾病においても活性であることがわかった。最も活性な化合物は、以下の式に相当する。上記式中、・Ｒ₆は、以下の基：または基ＯＲ₇を示し、Ｒ₇は、水素原子、１から20の炭素原子を持つアルキル基、モノヒドロキシアルキル基またはポリヒドロキシアルキル基を示し、ｒ’及びｒ>>は、水素原子、低級アルキル基、モノ−またはポリヒドロキシアルキル基、任意に置換されていてもよいアリール基、または、アミノ酸又はアミノ糖残基を示すか、あるいは、両者が結合してヘテロ環を形成していてもよく、・Ｒは、水素原子、ヒドロキシル基、１から４の炭素原子を持つ分枝した又は分枝していないアルキル基、または、１から４の炭素原子を持つアルキコキシ基である。６-［３-（１-アダマンチル）-４-メトキシフェニル］-２-ナフトエ酸、及び、６-［３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル］-２-ナフトエ酸、それらのエステル（特に、メチルエステル）、及び、それらのアミドが好ましい化合物である。これらの化合物は、以下の類の１つ又はそれ以上の化合物と組み合わせて使用してもよい：ステロイドまたは非ステロイド抗炎症薬、抗ウイルス薬（特に抗ヘルペス薬）、免疫抑制薬及び免疫調整薬。これらの化合物は、適当な賦形剤と組み合わせて、経腸、腸管外、又は局所投与に適した任意の製薬形態、例えば、錠剤、糖衣錠、ゼラチンカプセル、カプセル、座薬、パッチ、経口または注入可能な溶液または懸濁液といった形態で提供できる。1日の投与量は、活性成分0.01から100mgまで変化させてもよい。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】平成９年１１月１２日（１９９７．１１．１２）【補正内容】ＮＧＦのアッセイＮＧＦレベルは、酵素免疫法技術によって評価した。96-ウェルのプレートを、37℃において、pH9.6の50mMのＮａ₂ＣＯ₃バッファーに溶解した抗-ＮＧＦモノクローナル抗体（0.67mg/ml）で２時間処理した。次いで、空のプレートを、室温において、同じバッファーに溶解した1%のウシ血清アルブミンで、1時間処理し、200mMのNａＣｌ、10mMのＣａＣｌ₂、0.1%のTriton X-100、及び0.05%のＮａＮ₃を含むTris-HClバッファー（pH7.0）（バッファーＡ）で洗浄した。次いで、抽出バッファー（50mM Tris-HCl、pH7、200mM NaCl、1% BSA、0.1% Triton X-10 0、4mg/mlアプチトニン、2mM EDTA、0.1mM塩化ベンゼトニウム及び0.05% NaN₃）中で9/10に希釈した星状細胞媒質、及び、ＮＧＦ標品（10から320pg/mlの一連のもの）を共に添加した（0.1ml/ウェル）。プレートを、４℃において約16時間インキュベートした。バッファーＡで洗浄した後、プレートを、b-ガラクトシダーゼ（0.13-0.15U/ml）と結合した第２の抗-ＮＧＦモノクローナル抗体と共に、37℃ において４時間インキュベートした。バッファーＡで洗浄した後、プレートを、１50mM ＮａＣｌ、2mMのＭｇＣｌ₂、0.1%のＮａＮ₃及び1%のＢＳＡを含む10mMのＨＥＰＥＳ（pH7.0）中に調製したb-ガラクトシダーゼ基質、クロロフェノールレッド-ｂ-Ｄ-ガラクトピラノシド（2mg/ml）と共に、37℃で2から3時間インキュベートした。反応生成物を、Bio Kinetics Reader EL340によって、570nMにおいて測定した。結果本発明の化合物は、ＮＧＦの産生を増加させた。100nMの濃度において、本発明の最も活性な化合物は、ＮＧＦの産生を、対照に比較して70%以上増加させた。脊髄神経節の神経再生及び神経炎成長に対する化合物の効果神経節（ＤＲＧ）を、14日齢の胎児ラットから取り出した。サンプルは、骨髄の３つの異なるレベル（頸部、胸部、及び仙骨部）において回収した。ＤＲＧは、5%のウシ胎児血清、100U/mlのペニシリン、及び、100μg/mlのストレプトマイシンを含むＤＭＥＭ媒質（Gibco、Brl）中で、実験すべき化合物とともに、あるいは化合物無しで、5%のＣＯ₂で飽和させたインキュベーター内で24時間培養した。次いで、媒質を、ウシ胎児血清を含まず、1μMのシトシンアラビシド(SIGMA) を含有する同じ媒質に交換して、非-神経細胞の増殖を阻止した。神経再生及び神経炎成長に対する化合物の効果は、培養してから48時間後に、 BIOCOM画像分析システムを用いた体型測定技術によって評価した。結果本発明の幾つかの化合物は、100nMの濃度において、神経節の外食片の神経再生を、対照に比較して100%以上増加させた。神経系の自己免疫疾患治療のための本発明の化合物の治療的能力も評価した。実験的自己免疫性脳炎（ＥＡＥ）を持つマウスのリンパ球の増殖に対する化合物の効果ＥＡＥの誘発雌ＳＪＬ／Ｊマウスに、Ｄ0及びＤ7において、フロイントアジュバント中に乳化したミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ、400μｇ/マウス）を皮下注射した。最初の免疫から約20日後に、ＥＡＥの臨床的徴候が進行した動物のリンパ節を、増殖試験用に使用した。リンパ球の増殖の測定神経節を取り出し、金属篩を通すことによって機械的に破砕した。細胞を、10 %の補体を除いたウシ胎児血清、2.5mMのＬ-グルタミン、100U/mlのベニシリン、 100μｇ/mlのストレプトマイシン、及び0.5%の2-メルカプトエタノールを含有するＲＰＭＩ媒質（Gibco、BRL）中で、TPP 96-ウェルプレートの各ウェル当たりに、250,000細胞の量で培養した。プレートは、5%のＣＯ₂で飽和させたインキュベーター内で37℃に置いた。細胞は、培養の日に、ＭＢＰ（25mg/ml、抗原性刺激）の不存在下または存在下で、レチノイン酸の種々の類似物とともに96時間処理した。増殖は、インキュベーションの最後の16時間に培養媒質に添加したトリチウム化チミジンの取り込みを測定することにより評価した。結果結果の分析により、本発明の化合物が、ＥＡＥマウスから得たリンパ球の増殖を阻害し、ＩＣ₅₀が0.1から100nMの範囲であることが示された。活性化小グリア細胞によるＴＮＦ-α（腫瘍壊死因子-α）の産生に対する化合物の効果小グリア細胞を、1日齢の新生ラット皮質から調製した。細胞は、TPP 96-ウェルプレートにおいて、10％のウシ胎児血清（不活性化ミオクローン(myoclone)）、2.5mMのＬ-グルタミン、4.5g/lのＬ-グルコース、及び100μｇ/mlのゲンタマイシンを含有するＤＭＥＭ媒質（Gibco、BRL）中で培養した。細胞は、レチノイン酸の種々の類似物で処理し、1μｇ/mlのリポポリサッカリド（ＬＰＳ）で刺激して、ＴＮＦαの産生を誘発した。18時間のインキュベーションの後、ＴＮＦα のアッセイのために培養媒質を回収した。ＴＮＦαのアッセイ小グリア細胞の培養上清中のＴＮＦαレベルは、Ｌ９２９細胞系に対する細胞毒性の試験を用いて決定した。この試験は、ＭＴＴの比色アッセイによって可視化した。結果本発明の化合物は、培地の活性化小グリア細胞によるＴＮＦαの産生を減少させ、10nMの濃度において50%まで減少させる効果を有する。これらの結果は、本発明の化合物が神経再生活性を有し、外傷性、虚血性、代謝性、感染性、アルコール性、医原性または遺伝性タイプの末梢神経障害の治療における、及び、筋萎縮性外側硬化症及び脊髄性筋萎縮症などの運動ニューロンに影響する疾患の治療における応用が見出されることを示す。また、これらは、網膜症、大脳老化、多発性梗塞に伴う痴呆症、血管性痴呆の治療のための薬剤の調製のために、オリーブ橋小脳萎縮、及び、例えばアルツハイマー病、ピック病またはハンティングトン舞踏病などの他の神経変性疾患の治療において用いることができる。本発明の化合物は、脳血管障害あるいは髄質または頭部外傷に伴う神経死の予防における応用も見出された。また、これらは、多発性硬化症、ギャン-バレー疾患及び重症筋無力症などの自己免疫を起源とする疾病においても活性であることがわかった。最も活性な化合物は、以下の式に相当する。上記式中、・Ｒ₆は、以下の基：または基ＯＲ₇を示し、Ｒ₇は、水素原子、１から20の炭素原子を持つアルキル基、モノヒドロキシアルキル基またはポリヒドロキシアルキル基を示し、ｒ’及びｒ”は、水素原子、低級アルキル基、モノ-またはポリヒドロキシアルキル基、任意に置換されていてもよいアリール基、または、アミノ酸又はアミノ糖残基を示すか、あるいは、両者が結合してヘテロ環を形成していてもよく、・Ｒは、水素原子、ヒドロキシル基、１から４の炭素原子を持つ分枝した又は分請求の範囲１．下記式（Ｉ）：（式中、・Ｒ₁は、-ＣＯＲ₅またはＣＨ₂ＯＨであり、Ｒ₆は以下の基：または基ＯＲ₇を示し、Ｒ₇は、水素原子、１から20の炭素原子を持つアルキル基、モノヒドロキシアルキル基またはポリヒドロキシアルキル基を示し、ｒ’及びｒ”は、水素原子、低級アルキル基、モノ-またはポリヒドロキシアルキル基、任意に置換されていてもよいアリール基、または、アミノ酸またはアミノ糖残基を示すか、あるいは、両者が結合してヘテロ環を形成していてもよく、・Ｒ₂は、水素原子、１から15の炭素原子を持つ分枝した又は分枝していないアルキル基、１から４の炭素原子を持つアルコキシ基、または、環状脂肪族基を示し、・Ｒ₃は、水素原子、ヒドロキシル基、１から４の炭素原子を持つ分枝した又は分枝していないアルキル基、１から10の炭素原子を持つアルコキシ基、置換又は非置換の環状脂肪族基、チオ環状脂肪族基、または、式-Ｏ-Ｓｉ（ＣＨ₃）₂−Ｒ₈ の基を示し、Ｒ₈が直鎖状または分枝状の低級アルキル基を示し、・Ｒ₄及びＲ₅は、同一でも異なっていてもよく、水素原子、低級アルキル基、ヒドロキシル基、または、低級アシルオキシ基を示す）に相当する化合物及びそれらの塩の、末梢神経障害、中枢神経変性疾患及び神経系の自己免疫疾患の治療薬の調製のための使用。２．下記式：（式中、・Ｒ₆は以下の基：または基ＯＲ₇を示し、Ｒ₇は、水素原子、１から２０の炭素原子を持つアルキル基、モノヒドロキシアルキル基またはポリヒドロキシアルキル基を示し、ｒ’及びｒ>>は、水素原子、低級アルキル基、モノ-またはポリヒドロキシアルキル基、任意に置換されていてもよいアリール基、または、アミノ酸又はアミノ糖残基を示すか、あるいは、両者が結合してヘテロ環を形成していてもよく、・Ｒは、水素原子、ヒドロキシル基、１から４の炭素原子を持つ分枝した又は分枝していないアルキル基、または、１から４の炭素原子を持つアルキコキシ基である）に相当する化合物及びそれらの塩の、末梢神経障害、中枢神経変性疾患及び神経系の自己免疫疾患の治療薬の調製のための使用。３．６-［３-（１-アダマンチル）-４-メトキシフェニル］-２-ナフトエ酸、そのエステル、及び／またはそのアミドの、末梢神経障害、中枢神経変性疾患及び神経系の自己免疫疾患の治療薬の調製のための使用。４．６-［３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル］-２-ナフトエ酸、そのエステル、及び／またはそのアミドの、末梢神経障害、中枢神経変性疾患及び神経系の自己免疫疾患の治療薬の調製のための使用。【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】平成１０年２月３日（１９９８．２．３）【補正内容】ＮＧＦのアッセイＮＧＦレベルは、酵素免疫法技術によって評価した。96-ウェルのプレートを、37℃において、pH9.6の50mMのＮａ₂ＣＯ₃バッファーに溶解した抗-ＮＧＦモノクローナル抗体（0.67mg/ml)で2時間処理した。次いで、空のプレートを、室温において、同じバッファーに溶解した1%のウシ血清アルプミンで、1時間処理し、200mMのＮａＣｌ、10mMのＣａＣｌ₂、0.1%のTriton X-100、及び0.05%のＮａＮ₃を含むTris-HClバッファー（pH7.0）（バッファーＡ）で洗浄した。次いで、抽出バッファー（50mM Tris-HCl、pH7、200mM NaCl、1% BSA、0.1% Triton X-10 0、4mg/mlアプチトニン、2mM EDTA、0.1mM塩化ベンゼトニウム及び0.05%，ＮａＮ₃）中で9/10に希釈した星状細胞媒質、及び、ＮＧＦ標品（10から320pg/mlの一連のもの）を共に添加した（0.1ml/ウェル）。プレートを、４℃において約16時間インキュベートした。バッファーＡで洗浄した後、プレートを、β-ガラクトシダーゼ（0.13-0.15U/ml）と結合した第2の抗-ＮＧＦモノクローナル抗体と共に、37℃において４時間インキュベートした。バッファーＡで洗浄した後、プレートを、１50mMのＮａＣｌ、2nMのＭｇＣｌ₂、0.1%のＮａＮ₃及び1%のＢＳＡを含む10mMのＨＥＰＥＳ（pH7.0）中に調製したβ-ガラクトシダーゼ基質、クロロフェノールレッド-β-Ｄ-ガラクトピラノシド（2mg/ml）と共に、37℃で2から3 時間インキュベートした。反応生成物を、Bio Kinetics Reader EL 340によって、570nMにおいて測定した。結果本発明の化合物は、ＮＧＦの産生を増加させた。100nMの濃度において、本発明の最も活性な化合物は、ＮＧＦの産生を、対照に比較して70%以上増加させた。脊髄神経節の神経再生及び神経炎成長に対する化合物の効果神経節（ＤＲＧ）を、14日齢の胎児ラットから取り出した。サンプルは、骨髄の３つの異なるレベル（頸部、胸部、及び仙骨部）において回収した。ＤＲＧは、5%のウシ胎児血清、100U/mlのペニシリン、及び、100mg/mlのストレプトマイシン【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項【提出日】平成１０年５月１３日（１９９８．５．１３）【補正内容】明細書神経系疾患治療用薬剤の調製のためのベンゾナフタレン誘導体の使用本発明は、下記式（Ｉ）に相当する化合物及びそれらの塩の、末梢神経障害、中枢神経変性疾患及び神経系の自己免疫疾患の治療のための薬剤の調製のための使用に関する。これらの化合物は、その製造方法とともに、特許EP 0,199,636に記載されている。式（Ｉ）において、・Ｒ₁は、-ＣＯＲ₅またはＣＨ₂ＯＨであり、Ｒ₆は以下の基：または基ＯＲ₇を示し、Ｒ₇は、水素原子、１から２０の炭素原子を持つアルキル基、モノヒドロキシアルキル基またはポリヒドロキシアルキル基を示し、ｒ’及びｒ”は、水素原子、低級アルキル基、モノ-またはポリヒドロキシアルキル基、任意に置換されていてもよいアリール基、または、アミノ酸またはアミノ糖残基を示すか、あるいは、両者が結合してヘテロ環を形成していてもよく、・Ｒ₂は、水素原子、１から１５の炭素原子を持つ分枝した又は分枝していないアルキル基、１から４の炭素原子を持つアルコキシ基、または、環状脂肪族基を示し、・Ｒ₃は、水素原子、ヒドロキシル基、１から４の炭素原子を持つ分枝した又は分【手続補正書】【提出日】平成１０年１２月２２日（１９９８．１２．２２）【補正内容】特許請求の範囲１．下記式（Ｉ）：（式中、・Ｒ₁は、-ＣＯＲ₆またはＣＨ₂ＯＨであり、Ｒ₆は以下の基：または基ＯＲ₇を示し、Ｒ₇は、水素原子、１から２０の炭素原子を持つアルキル基、モノヒドロキシアルキル基またはポリヒドロキシアルキル基を示し、ｒ’及びｒ”は、水素原子、低級アルキル基、モノ-またはポリヒドロキシアルキル基、任意に置換されていてもよいアリール基、または、アミノ酸またはアミノ糖残基を示すか、あるいは、両者が結合してヘテロ環を形成していてもよく、・Ｒ₂は、水素原子、１から１５の炭素原子を持つ分枝した又は分枝していないアルキル基、１から４の炭素原子を持つアルコキシ基、または、環状脂肪族基を示し、・Ｒ₃は、水素原子、ヒドロキシル基、１から４の炭素原子を持つ分枝した又は分枝していないアルキル基、１から１０の炭素原子を持つアルコキシ基、置換又は非置換の環状脂肪族基、チオ環状脂肪族基、または、式-Ｏ-Ｓｉ（ＣＨ₃）₂- Ｒ₈４の基を示し、Ｒ₈が直鎖状または分枝状の低級アルキル基を示し、・Ｒ₄及びＲ₅は、同一でも異なっていてもよく、水素原子、低級アルキル基、ヒドロキシル基、または、低級アシルオキシ基を示す）に相当する化合物及びそれらの塩を含んでなる、末梢神経障害、中枢神経変性疾患及び神経系の自己免疫疾患の治療薬。２．下記式：（式中、・Ｒ₆は以下の基：または基ＯＲ₇を示し、Ｒ₇は、水素原子、１から２０の炭素原子を持つアルキル基、モノヒドロキシアルキル基またはポリヒドロキシアルキル基を示し、ｒ’及びｒ”は、水素原子、低級アルキル基、モノ-またはポリヒドロキシアルキル基、任意に置換されていてもよいアリール基、または、アミノ酸又はアミノ糖残基を示すか、あるいは、両者が結合してヘテロ環を形成していてもよく、・Ｒは、水素原子、ヒドロキシル基、１から４の炭素原子を持つ分枝した又は分枝していないアルキル基、または、１から４の炭素原子を持つアルキコキシ基である）に相当する化合物及びそれらの塩を含んでなる、末梢神経障害、中枢神経変性疾患及び神経系の自己免疫疾患の治療薬。３．前記化合物が、６-［３-（１-アダマンチル）-４-メトキシフェニル］-２-ナフトエ酸、そのエステル、及び／またはそのアミドであることを特徴とする請求項２記載の治療薬。４．前記化合物が、６-［３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル］-２-ナフトエ酸、そのエステル、及び／またはそのアミドであることを特徴とする請求項２記載の治療薬。５．下記式（Ｉ）：（式中、・Ｒ₁は、-ＣＯＲ₆またはＣＨ₂ＯＨであり、Ｒ₆は以下の基：または基ＯＲ₇を示し、Ｒ₇は、水素原子、１から２０の炭素原子を持つアルキル基、モノヒドロキシアルキル基またはポリヒドロキシアルキル基を示し、ｒ’及びｒ”は、水素原子、低級アルキル基、モノ-またはポリヒドロキシアルキル基、任意に置換されていてもよいアリール基、または、アミノ酸またはアミノ糖残基を示すか、あるいは、両者が結合してヘテロ環を形成していてもよく、・Ｒ₂は、水素原子、１から１５の炭素原子を持つ分枝した又は分枝していないアルキル基、１から４の炭素原子を持つアルコキシ基、または、環状脂肪族基を示し、・Ｒ₃は、水素原子、ヒドロキシル基、１から４の炭素原子を持つ分枝した又は分枝していないアルキル基、１から１０の炭素原子を持つアルコキシ基、置換又は非置換の環状脂肪族基、チオ環状脂肪族基、または、式-Ｏ-Ｓｉ（ＣＨ₃）₂- Ｒ₈の基を示し、Ｒ₈が直鎖状または分枝状の低級アルキル基を示し、・Ｒ₄及びＲ₅は、同一でも異なっていてもよく、水素原子、低級アルキル基、ヒドロキシル基、または、低級アシルオキシ基を示す）に相当する化合物及びそれらの塩の、末梢神経障害、中枢神経変性疾患及び神経系の自己免疫疾患の治療薬の調製のための使用。６．下記式：（式中、・Ｒ₆は以下の基：または基ＯＲ₇を示し、Ｒ₇は、水素原子、１から２０の炭素原子を持つアルキル基、モノヒドロキシアルキル基またはポリヒドロキシアルキル基を示し、ｒ’及びｒ”は、水素原子、低級アルキル基、モノ-またはポリヒドロキシアルキル基、任意に置換されていてもよいアリール基、または、アミノ酸又はアミノ糖残基を示すか、あるいは、両者が結合してへテロ環を形成していてもよく、・Ｒは、水素原子、ヒドロキシル基、１から４の炭素原子を持つ分枝した又は分枝していないアルキル基、または、１から４の炭素原子を持つアルキコキシ基である）に相当する化合物及びそれらの塩の、末梢神経障害、中枢神経変性疾患及び神経系の自己免疫疾患の治療薬の調製のための使用。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 31/216 Ａ６１Ｋ 31/216 31/695 31/695 Ａ６１Ｐ 25/00 Ａ６１Ｐ 25/00 25/02 25/02 37/00 37/00 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ (72)発明者シュロート，ブラアムフランス国 06600 アンティーブブールヴァールアルベール―プルミエ 18 (72)発明者トーパン，ヴェロニクフランス国 75013 パリリュボードリクール 62

Claims

【特許請求の範囲】１．下記式（Ｉ）：（式中、・Ｒ₁は、-ＣＯＲ₆またはＣＨ₂ＯＨであり、Ｒ₆は以下の基：または基ＯＲ₇を示し、Ｒ₇は、水素原子、１から２０の炭素原子を持つアルキル基、モノヒドロキシアルキル基またはポリヒドロキシアルキル基を示し、ｒ’及びｒ”は、水素原子、低級アルキル基、モノ-またはポリヒドロキシアルキル基、任意に置換されていてもよいアリール基、または、アミノ酸またはアミノ糖残基を示すか、あるいは、両者が結合してヘテロ環を形成していてもよく、・Ｒ₂は、水素原子、１から１５の炭素原子を持つ分枝した又は分枝していないアルキル基、１から４の炭素原子を持つアルコキシ基、または、環状脂肪族基を示し、・Ｒ₃は、水素原子、ヒドロキシル基、１から４の炭素原子を持つ分枝した又は分枝していないアルキル基、１から１０の炭素原子を持つアルコキシ基、置換又は非置換の環状脂肪族基、チオ環状脂肪族基、または、式-Ｏ-Ｓｉ（ＣＨ₃）₂− Ｒ₈の基を示し、Ｒ₈が直鎖状または分枝状の低級アルキル基を示し、・Ｒ₄及びＲ₅は、同一でも異なっていてもよく、水素原子、低級アルキル基、ヒドロキシル基、または、低級アシルオキシ基を示す）に相当する化合物及びそれらの塩の、末梢神経障害、中枢神経変性疾患及び神経系の自己免疫疾患の治療薬の調製のための使用。２．下記式：（式中、・Ｒ₆は以下の基：または基ＯＲ₇を示し、Ｒ₇は、水素原子、１から２０の炭素原子を持つアルキル基、モノヒドロキシアルキル基またはポリヒドロキシアルキル基を示し、ｒ’及びｒ>>は、水素原子、低級アルキル基、モノ-またはポリヒドロキシアルキル基、任意に置換されていてもよいアリール基、または、アミノ酸又はアミノ糖残基を示すか、あるいは、両者が結合してヘテロ環を形成していてもよく、・Ｒは、水素原子、ヒドロキシル基、１から４の炭素原子を持つ分枝した又は分枝していないアルキル基、または、１から４の炭素原子を持つアルキコキシ基である）に相当する化合物及びそれらの塩の、末梢神経障害、中枢神経変性疾患及び神経系の自己免疫疾患の治療薬の調製のための使用。３．６-［３-（１-アダマンチル）-４-メトキシフェニル］-２-ナフトエ酸、そのエステル、及び／またはそのアミドの、末梢神経障害、中枢神経変性疾患及び神経系の自己免疫疾患の治療薬の調製のための使用。４．６-［３-（１-アダマンチル）-４-ヒドロキシフェニル］-２-ナフトエ酸、そのエステル、及び／またはそのアミドの、末梢神経障害、中枢神経変性疾患及び神経系の自己免疫疾患の治療薬の調製のための使用。