JP2003192607A

JP2003192607A - 降圧ジペプチド

Info

Publication number: JP2003192607A
Application number: JP2001392042A
Authority: JP
Inventors: Katsuhiro Osajima; 克裕筬島; Kei Tamaya; 圭玉屋; Toshiro Matsui; 利郎松井; Kiyoshi Matsumoto; 清松本; Mitsuyo Inoue; 美津代井上
Original assignee: Senmi Ekisu Co Ltd
Current assignee: Senmi Ekisu Co Ltd
Priority date: 2001-12-25
Filing date: 2001-12-25
Publication date: 2003-07-09

Abstract

(57)【要約】【解決手段】Ｌ型ジペプチドＬ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｔｙｒ
（Ｌ−Ｖａｌｙｌ−Ｔｙｒｏｓｉｎｅ：ＬＶＬＹ）を有
効成分として含有することを特徴とする血圧降下剤。【効果】降圧ペプチドの本体（ＬＶＬＹ）がはじめて
つきとめられた。ＬＶＬＹは、すぐれた血圧降下作用を
有するだけでなく、即効性及び持続性を兼備しており、
そのうえ更に天然ペプチド由来であるために安全性につ
いても問題はない。したがって、ＬＶＬＹは、血圧降下
剤として医薬用途はもとより、それ自体を食品として使
用するほか、他の食品と併用したり、あるいは他の食品
に添加したりして各種の食品の用途にも利用できる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、血圧降下剤に関す
るものであり、更に詳細には、Ｌ型ジペプチドＬ−Ｖａ
ｌ−Ｌ−Ｔｙｒ（Ｌ−バリルチロシン）を有効成分とす
る血圧降下剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】魚肉や牛乳由来の一部のペプチドにアン
ジオテンシン変換酵素（Angiotensin-converting enxym
e, ACE）抑制（阻害）作用が認められ、高血圧の予防を
目的とした特定保健用食品として市販されているものが
あるが、生活習慣病の増加にともない、新しい高血圧発
症予防ないし血圧降下に有効な成分の新たな開発が希求
されている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記した当
業界の要望に応える目的でなされたものであって、本発
明者らは、従来の研究開発の基本姿勢を更にすすめて、
ＡＣＥ阻害作用を有する高分子のペプチドの開発にとど
まらず、血圧降下機能の本体をつきとめること、しかも
それをin vitro試験のみならずin vivo試験によって確
認すること、という困難な技術課題をあえて新たに設定
した。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決するため、各方面から検討を行い、イワシ筋肉を
酵素分解に供した結果、高いin vitro ACE阻害性を有す
るペプチドを有する分解物を得、この分解物について更
に検討の結果、ジペプチドＶａｌ−Ｔｙｒを高度に含有
する分解物ほどＡＣＥ阻害性が高いことをはじめて見出
した。

【０００５】そこで本発明者らは、このＶａｌ−Ｔｙｒ
に着目してこれを降圧主要ペプチドと同定し、Ｖａｌ−
Ｔｙｒについて、本ペプチドのみのＡＣＥ阻害作用、血
圧低下作用をin vitroのみでなくin vivo試験によって
確認し、そのうえ更に、作用部位の特定化を目的とし
て、本ペプチドの各種アイソマー（ｉｓｏｍｅｒ）につ
いてもこれらの試験を行った。

【０００６】その結果、降圧ペプチドの本体がＶａｌ−
Ｔｙｒであること、しかもＬ型でなければならないこ
と、をはじめて見出し、Ｌ型ペプチドＬ−Ｖａｌｙｌ−
Ｌ−Ｔｙｒｏｓｉｎｅ（ＬＶＬＹということもある）を
有効成分とする血圧降下剤に係る本発明を完成した。そ
して、本ペプチドとしては、Ｌ型であればよく、天然由
来のペプチド及び合成ペプチドのいずれも有効であるこ
とも確認した。したがって、本発明においては、天然由
来Ｖａｌ−Ｔｙｒでも合成Ｌ型Ｖａｌ−Ｔｙｒでも適宜
使用可能である。

【０００７】なお、本明細書において、バリンはＶａｌ
又はＶ、チロシンはＴｙｒ又はＹと表記することもあ
る。したがって、例えばＬ型ペプチドＬ−Ｖａｌｙｌ−
Ｌ−Ｔｙｒｏｓｉｎｅは、Ｌ型Ｖａｌ−Ｔｙｒあるいは
Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−ＴｙｒあるいはＬＶＬＹと表記するこ
ともある。また、天然由来Ｖａｌ−ＴｙｒがＬ型Ｖａｌ
−Ｔｙｒであることは当然のことである。

【０００８】そして、アミノ酸にはＬ型のほかにＤ型が
存在するので、本ジペプチドＶａｌ−Ｔｙｒには、ＬＶ
ＬＹのほかに、ＬＶＤＹ、ＤＶＬＹ、ＤＶＤＹのアイソ
マーが存在するが、本発明者らは、これらのアイソマー
の内、Ｌ型ＶＹが降圧に有効であることを試験によって
確認し、（換言すれば、他のＶＹアイソマーはＡＣＥ阻
害性を示さないことを確認し）、Ｌ型ＶＹは経口摂取後
分解されることなく血中に直接入り、降圧作用を示すこ
と、つまり、Ｌ型ＶＹこそが体内吸収後に血圧降下作用
を示す降圧ペプチドの本体であることをはじめて見出し
たのである。

【０００９】本発明は、上記した有用新知見に基づき、
更に研究の結果、遂に完成されたものである。以下、本
発明について説明する。

【００１０】本発明の有効成分はＬ型ジペプチドＬＶＬ
Ｙであるが、ＬＶＬＹは、長いペプチド鎖の中に含まれ
ているＬＶＬＹではなく、ＬＶＬＹとして独立して存す
るジペプチドでなければならない。その際、ＬＶＬＹ
は、合成したもの、天然由来のものを問わない。

【００１１】合成Ｌ型ＶＹは、ペプチド合成の常法にし
たがって合成することができ、例えば、樹脂を用い、保
護基で保護したアミノ酸をＣ−末端側から付加して合成
する固相法等が挙げられる。固相法としては、保護基と
してＦｍｏｃ基（９−フルオレニルメトキシカルボニル
基）、Ｂｏｃ基（ブチルオキシカルボニル基）をそれぞ
れ用いたＦｍｏｃ法ペプチド合成、Ｂｏｃ法ペプチド合
成等が適宜使用されるが、Ｆｍｏｃアミノ酸誘導体を用
いたＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄの固相合成法（Ｐｅｐｔｉｄ
ｅ，１６，２０５−２１０（１９９５）その他）は好適
な合成法であり、また、自動固相合成機を利用して、本
ペプチドを合成することも可能である。

【００１２】例えば、Ｆｍｏｃ基等の保護基でアミノ基
を保護したＬ−Ｔｙｒ（又はＬ−Ｖａｌ）を付加した樹
脂に、アミノ基を保護したＬ−Ｖａｌ（又はＬ−Ｔｙ
ｒ）を加えて縮合せしめ、縮合せしめたＨ−Ｌ−Ｖａｌ
−Ｌ−Ｔｙｒ−Ｏ−樹脂からＨ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｔｙ
ｒ−ＯＨを切断し、酢酸又はトリフルオロ酢酸等を用い
てこれを抽出することにより、Ｌ−バリルチロシン（合
成Ｌ型Ｖａｌ−Ｔｙｒ）を製造することができる。ま
た、既述のように、Ｌ−バリルチロシンは、化学合成法
によるほか、イワシペプチド等の天然由来ペプチドを分
画することによっても得られる、天然由来Ｖａｌ−Ｔｙ
ｒも使用可能である。また、アイソマーの混合物あるい
はラセミ体の場合には、ＬＶＬＹのみを分離、分割すれ
ばよい。

【００１３】Ｌ型ペプチドＶＹは、後記する実施例から
も明らかなように、すぐれた血圧降下活性を示し、ま
た、本来、魚肉由来であるため、安全性には問題がない
ので（現に、ラットに対して１日当り５００ｍｇを強制
的に経口投与したところ、１０日経過後においても急性
毒性は認められなかった。）、血圧降下剤ないし血圧降
下を目的として特定保健用食品向けペプチドとしても使
用することができる。

【００１４】したがって、本ペプチドは、調味料、栄養
強化用食品ないしは動物飼料添加剤として使用されるほ
か、上記した独特の生理活性の故に、高血圧性疾病の予
防、ある場合には治療のために、医薬として、または輸
液、健康食品、臨床栄養食品等としても幅広く使用する
ことができる。なお、本発明において、食品には飲料も
包含される。

【００１５】既述のように、本発明は降圧ペプチドの本
体がＬＶＬＹであることをはじめてつきとめたものであ
って、本発明に係る血圧降下剤の有効成分は「ＬＶＬ
Ｙ」である点に特徴を有するものである。本発明におい
て、ＬＶＬＹは、文字どおり２つのＬ−アミノ酸（Ｖ、
Ｙ）が結合したジペプチドを指し、それ単独で独立して
分離ないし取り出したものであって、ひとつの化合物と
して単離されたものをいい、長いペプチド鎖内にＬＶＬ
Ｙが包含されている場合は本発明から除かれる。

【００１６】したがって、本発明に係る「ＬＶＬＹ」を
有効成分とする降圧剤においては、ＬＶＬＹがひとつの
ジペプチド化合物として独立して存在していればよく、
ＬＶＬＹに他のペプチド、降圧成分、食品等が併用され
てもかまわない。これに対して、「ＬＶＬＹのみ」を有
効成分とする降圧剤においては、有効成分はＬＶＬＹの
みであって、有効成分としてＬＶＬＹのほかに他のペプ
チド、食品その他の降圧成分の併用を指すものではな
い。

【００１７】本発明に係る血圧降下剤を医薬として使用
する場合、ＬＶＬＹ又はＬＶＬＹのみを有効成分とし
て、各種剤型に製剤し、経口又は非経口投与する。経口
投与の場合には、常法にしたがって、錠剤、顆粒剤、粉
末剤、カプセル剤、散剤、ドリンク剤等とすることがで
き、１日に体重１ｋｇ当り０．１μｇ〜２００μｇ、好
ましくは３〜１５μｇ投与すればよい。なお、投与量
は、一応の目安であって、症状、年齢、目的等に応じて
適宜定めればよく、安全性に格別の問題はないので、上
記範囲を逸脱しても構わない。非経口投与の場合には、
例えば注射薬製剤、点滴剤、坐剤等として使用すること
ができる。

【００１８】また、食品として使用する場合には、本ペ
プチドをそのまま添加したり、他のペプチド、他の食品
ないし食品成分と併用したりして、適宜常法にしたがっ
て使用することができる。

【００１９】

【実施例１】（Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｔｙｒの合成）振とう
機にプロピレン製反応容器に入れたＦｍｏｃ−Ｌ−Ｔｙ
ｒ−Ｏ−Ｐｏｌｙｍｅｒ樹脂０．５ｇをセットし、以下
の工程により、Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｔｙｒを合成した。

【００２０】Ａ：洗浄、脱保護（１）反応容器にＤＭＦを加え、洗浄を行う。（２）２０％Ｐｉｐｅｒｉｄｉｎｅ／ＤＭＦを加え、脱
保護を行う。（３）ＤＭＦを加え、十分洗浄を行う。Ｆｍｏｃ−Ｌ−
Ｖａｌ，ＨＯＢＴを入れる。Ｂ：縮合（１）Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｔｙｒ−Ｏ−Ｐｏｌｙｍｅｒ樹脂
にＤＭＦ、ＤＩＰＣＩを加え、Ｆｍｏｃ−Ｌ−Ｖａｌを
縮合させる。Ｃ：洗浄（１）縮合させたＨ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｔｙｒ−Ｏ−Ｐ
ｏｌｙｍｅｒ樹脂をメタノールまたはジクロロメタンで
３回洗浄する。Ｄ：切断、抽出（１）洗浄したＨ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｔｙｒ−Ｏ−Ｐｏ
ｌｙｍｅｒ樹脂にＴＦＡ−Ｐｈｅｎｏｌ（９５／５）を
加え１時間攪拌を行い、Ｈ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｔｙｒ−
ＯＨを切断する。樹脂をＴＦＡ５ｍｌで洗浄しＨ−Ｌ
−Ｖａｌ−Ｌ−Ｔｙｒ−ＯＨを抽出する。Ｅ：精製（１）上記ＴＦＡ溶液を１〜２ｍｌまで濃縮した後、エ
ーテルを加えることで、Ｈ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｔｙｒ−
ＯＨを精製する。

【００２１】略称Ｆｍｏｃ−ＡＡ^*：Ｎ”−９−フルオレニルメチルオキ
シカルボニルアミノ酸（Ｎ”−９−Ｆｌｕｏｒｅｎｙ
ｌｍｅｔｈｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌａｍｉｎｏ
ａｃｉｄ）（ＡＡ^*：ここではＬ−Ｔｙｒ及びＬ−Ｖ
ａｌ）ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（Ｎ，Ｎ−Ｄｉ
ｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ) ＨＯＢＴ：Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（Ｎ−Ｈ
ｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏｔｒｉａｚｏｌｅ）ＤＩＰＣＩ：Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド
（Ｎ，Ｎ’−Ｄｉｉｓｏｐｒｏｐｙｌｃａｒｂｏｄｉｉ
ｍｉｄｅ）ＴＦＡ：Ｔｒｉｆｌｕｒｏａｃｅｔｉｃａｃｉｄ

【００２２】

【実施例２】ＶＹのアイソマーのＡＣＥ阻害活性は次の
通りに測定した。ＡＣＥ（シグマ社製（ＥＣ．３．４．
１５．１；ウサギ肺由来））２．５ｍＵ、ペプチド研究
所合成基質（Kippuyl-L-histidyl‐L-leusine １２．５
ｍＭを用いてCashmanらの方法に準じて測定した。すな
わち、生成した馬尿酸を吸光度２２８ｎｍで測定した。
被験液での吸光度をＥｂ、被験液のかわりに水を加えた
時の値をＥｃ、予め反応停止液を加えて反応させたとき
の被験液での値をＥｂ２、水での値をＥｂ１として、阻
害率（％）＝｛（Ｅｃ−Ｅｂ１）−（Ｅｂ−Ｅｂ２）｝
／（Ｅｃ−Ｅｂ１）×１００で表した。試料のＡＣＥ阻
害活性ＩＣ₅₀値はＡＣＥ活性（阻害率）阻害するために
必要な試料の濃度で示した。下表にＶＹアイソマーのＡ
ＣＥ阻害活性を示す。Ｎ．Ｄ．，not detected

【００２３】

【実施例３】（１）降圧ペプチドＶａｌ−Ｔｙｒ及びア
イソマーの循環及び組織ＡＣＥに対する生理作用につい
て、高血圧自然発症ラット（Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓｌ
ｙＨｙｐｅｒｔｅｎｓｉｖｅＲａｔ：ＳＨＲ）を用い
て、以下により試験を行った。なお、アイソマーは実施
例１及びそれに準じてそれぞれ製造した。

【００２４】（２）ＶＹ投与及び解剖プロトコールＳＨＲに対するＶＹ投与及び投与後の各組織からの粗酵
素抽出液の調製は、以下のようにして行った。また、Ｖ
Ｙ投与後のＡＣＥ活性測定に関しては、循環器系及び関
連組織に着目し、血清及び血漿、組織として腎臓、肺、
心臓、腹部大動脈、腸管大動脈について検討を行った。
まず、１１週齢のＳＨＲに対して体重１ｋｇ当たり１０
ｍｇのＶＹを投与した。ＶＹ投与前及び投与１、３、
６、９ｈｒ後に、それぞれの検体をエーテル麻酔後、腹
部大動脈より採血を行った。得られた血液は３０分間放
置後、あるいはへパリンを添加後直ちに、遠心処理（３
５００ｒｐｍ、１０分、３０分）を行った。そこにアン
ジオテンシン分解関連酵素のｉｎｈｉｂｉｔｏｒとし
て、２０μＭａｐｒｏｔｉｎｉｎ、１０μＭｃｈｙ
ｍｏｓｔａｔｉｎを添加し、それぞれ血清、血漿として
活性測定に供した。

【００２５】臓器は、腎臓、肺、心臓、腹部大動脈、腸
管大動脈の順に摘出した。摘出した組織に膜タンパク遊
離剤として０．５％のＮｏｎｉｄｅｔＰ−４０を含む
Ｔｒｉｓ−ＨＣｌｂｕｆｆｅｒを添加し、ホモジナイ
ズを行うことにより、組織からＡＣＥを遊離した。得ら
れたホモジナイズ液を遠心処理（１４０００ｒｐｍ、２
０分）に供し、得られた上清に、先程と同様のｉｎｈｉ
ｂｉｔｏｒを添加し、粗酵素抽出液として活性測定に供
した。なお、ＡＣＥ及びアンジオテンシン分解関連酵素
の活性変動を最小限とするため、臓器摘出から上清回収
までの時間を３０分間とし、さらにホモジナイズ等の操
作は４℃で行った。

【００２６】（３）投与後のＡＣＥ活性測定及び血中Ｖ
Ｙ濃度測定方法ＶＹアイソマー投与後の各組織におけるＡＣＥ活性測定
は次のようにして行った。前項で調製した、血漿、血
清、又は各組織の粗酵素抽出液に、擬似基質であるＨｉ
ｐ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ（食塩含有リン酸バッファー中）を
添加し、３７℃で３０分間インキュベートした後、メタ
リン酸を添加して反応を停止し、生成した馬尿酸量を逆
相ＨＰＬＣにより測定することによって行った。

【００２７】アイソマー投与後の血中ＶＹ濃度の測定
は、本発明者らが新たに開発するのに成功したＮＤＡ−
蛍光カラムスイッチングＨＰＬＣ法によって行った。す
なわち、血漿サンプルをＳｅｐ−ＰａｋＣ₁₈カートリ
ッジにアプライした後、ＣＨ₃ＣＮ／ＴＦＡで溶出し、
逆相ＨＰＬＣでＶＹフラクションを集め（ＣＨ₃ＣＮ／
ＴＦＡ；５０分、モニタリング吸収；２２０ｎｍ、流速
０．４１ｍｌ／ｍｉｎ、カラム：ＣｏｓｍｏｓｉｌＡ
Ｒ−II（φ４．６×２５０ｍｍ））、ホウ酸バッファー
に溶解し、ＮＤＡｄｅｒｉｖａｔｉｚａｔｉｏｎ後、
蛍光カラムスイッチングＨＰＬＣにより測定することに
よって血中ＶＹ濃度の測定を行った。

【００２８】（４）ＶＹアイソマー投与後の血圧変動ＶＹアイソマーをＳＨＲに対してそれぞれ単回投与した
後の収縮期血圧を測定し、得られた結果を図１に示し
た。測定結果から明らかなように、天然由来のＬＶＬＹ
投与群においては投与１時間後から血圧は明らかに低下
し、３時間後には最大の降下を示した。さらに、血圧低
下状態は投与６時間後においても持続していた。一方、
ＬＶＤＹ及びＤＶＤＹの両者においては、有意な血圧低
下は確認されなかった。この結果から、ＳＨＲにおける
血圧低下作用に関しては、ＬＶＬＹのみに生理作用が存
在することが明らかとなった。

【００２９】（５）ＬＶＤＹ及びＤＶＤＹの吸収挙動ＶＹｉｓｏｍｅｒ投与後に得られた血漿を用いて、こ
れらの吸収を測定し、得られた結果を図２に示した。こ
れらの吸収挙動を検討した結果、明らかに、三者ともほ
ぼ同様の吸収挙動が認められ、Ｌ型、Ｄ型にかかわら
ず、血中濃度は投与１時間後に最大に達し、その後緩や
かに減少する傾向にあった。吸収量が同程度にもかかわ
らず、ＬＶＬＹ投与群のみ血圧低下作用が認められたこ
とは、Ｄ型にはない、Ｌ型のみが有する生理作用の存在
を裏付けるものであった。

【００３０】（６）ＬＶＬＹ、ＬＶＤＹ及びＤＶＤＹ投
与後の循環ＡＣＥ活性ＬＶＬＹ投与群にのみ認められた血圧低下作用の検証を
行うために、まず循環ＡＣＥに着目し、ＶＹの最大吸収
が認められた投与１時間後、及び血圧低下作用が持続し
ていた６時間後に関して、血漿（ｐｌａｓｍａ）及び血
清（ｓｅｒｕｍ）中のＡＣＥ活性を測定し、得られた結
果を図３に示した。これら血液中のＡＣＥ活性挙動を検
討した結果、明らかに、血圧低下作用が認められたＬＶ
ＬＹのみ血漿、血清において投与１時間後に有意な活性
低下が認められ、このことは体内吸収されたＬＶＬＹが
循環ＡＣＥを抑制することを示していた。したがって、
ＬＶＬＹは循環ＡＣＥの抑制に卓越した即効性を有する
点で特徴的であり、しかも６時間近くもその効果が継続
することが認められる点でも特徴的である。

【００３１】一方、ＬＶＤＹ及びＤＶＤＹに関しては、
有意な低下は確認されなかった。以上の結果は、ｉｎ
ｖｉｔｒｏでのＡＣＥ阻害性を極めて良好に反映してい
ることから、本例で得られたＡＣＥ活性抑制効果は血液
中のＡＣＥに対するＬＶＬＹの直接的阻害によるもので
あることが示された。

【００３２】（７）ＬＶＤＹ及びＤＶＤＹ投与後のＡＣ
Ｅ活性（肺）組織ＡＣＥに対しても同様に、活性挙動の検討を行っ
た。図４は、投与後の肺におけるＡＣＥ活性変動を示し
たものである。ＬＶＬＹ投与では顕著な活性低下が認め
られ、低下状態が６時間後においても持続していたが、
一方ＬＶＤＹ及びＤＶＤＹに関してはこのような活性低
下は全く認められなかった。

【００３３】（８）ＬＶＤＹ及びＤＶＤＹ投与後のＡＣ
Ｅ活性（腎臓）さらに、腎臓に関しても同様に検討を行った。結果を図
５に示した。その結果から明らかなように、ＬＶＬＹ投
与群では６時間後においても有意な低下が認められた。
一方、ＬＶＤＹ及びＤＶＤＹに関しては活性低下は何ら
確認されなかった。

【００３４】（９）ＬＶＤＹ及びＤＶＤＹ投与後のＡＣ
Ｅ活性（大動脈）さらに、腹部大動脈に関しても検討を行った結果、図６
に示したように、ＬＶＬＹ投与群では投与１時間及び６
時間後に、ＡＣＥ活性は有意に低下し、６時間後におい
ても活性抑制率が５３％と長期持続的な活性抑制が認め
られたのに対し、ＬＶＤＹ及びＤＶＤＹ投与群では、こ
のような活性低下は全く確認されなかった。従って、体
内吸収されたＬＶＬＹは循環だけでなく、組織に対して
も直接的なＡＣＥ活性抑制効果を発現していることが明
らかとなった。特に、腹部大動脈に対する抑制効果が最
も顕著であり、かつ持続的なものであることが示され
た。

【００３５】（結論）ＬＶＬＹと類似構造を有するが、
ＡＣＥ阻害性を示さないＬＶＤＹ、ＤＶＤＹのＶＹｉ
ｓｏｍｅｒを、ＳＨＲ単回投与試験に供した結果、
（１）いずれのＶＹｉｓｏｍｅｒも同様の体内吸収挙
動となったが、ＬＶＬＹ投与群のみ、有意な血圧低下が
認められた。（２）同時に、ＬＶＬＹ投与群においての
み、循環及び腹部大動脈、腎臓、肺の組織に存在するＡ
ＣＥの活性を顕著に抑制した。従って、（３）ＬＶＬＹ
は、体内吸収後に血圧低下作用を示す降圧ペプチドであ
ること、（４）その効果は循環及び組織に存在するＡＣ
Ｅに対する直接的阻害作用に基づくものであることが実
証された。

【００３６】

【実施例４】（ドリンクの製造） ――――――――――――――――――――――― １００ｍｌドリンク配合表 ――――――――――――――――――――――― 果糖ブドウ糖液糖４．５ｇ糖アルコール１ｇ酸味料０．２ｇ香料０．１３ｇ甘味料（ステビア）０．０３ｇカラメル色素０．０２ｇＬＶＬＹ０．４ｍｇ精製水全量を１００ｍｌに定容 ―――――――――――――――――――――――――― ５０ｍｌドリンク配合表 ―――――――――――――――――――――――――― 果糖ブドウ糖液糖１０ｇ香料０．３ｇ酸味料０．１６ｇ甘味料（ステビア）０．０１５ｇＬＶＬＹ０．４ｍｇ精製水全量を５０ｍｌに定容 ―――――――――――――――――――――――――― ３０ｍｌドリンク配合表 ―――――――――――――――――――――――――― 果糖ブドウ糖液糖５ｇ香料０．２５ｇ酸味料０．１ｇ甘味料（ステビア）０．０１５ｇＬＶＬＹ０．４ｍｇ精製水全量を３０ｍｌに定容 ――――――――――――――――――――――――――

【００３７】上記配合を６０℃で混合溶解した後、１２
８℃、１０秒のプレート殺菌をした。次いでこれを充分
に洗浄した各容量の褐色ビンに９０℃で充填し、室温で
放冷後、流水水槽中で急冷し、ドリンクを製造した。

【００３８】

【発明の効果】本発明により、降圧ペプチドの本体がＬ
ＶＬＹであることがｉｎｖｉｔｒｏおよびｉｎｖｉ
ｖｏ試験によって確認された。ＬＶＬＹは、天然由来ジ
ペプチドであるため安全性には問題はなく、しかも即効
性を有するだけでなく持続性もあり、卓越した降圧ペプ
チドであることも確認された。したがって、ＬＶＬＹ
は、降圧剤として医薬して使用できるほか、それ自体を
食品として使用したり、他の食品に添加して使用するこ
ともでき、例えばＬＶＬＹを添加したビスケットやドリ
ンクは、降圧を目的とした機能性食品、特定保健用食品
としても使用可能である。

【図面の簡単な説明】

【図１】ＶＹアイソマーのＳＨＲに対する単回経口投与
後の収縮期血圧の変化を示す。図中、縦軸は収縮期血
圧、横軸は経過時間（時間）を表わす。

【図２】ＶＹアイソマーのＳＨＲに対する単回経口投与
後の血漿中における各アイソマーの吸収挙動を示す。図
中、縦軸は濃度（ｍｌ−血漿）、横軸は経過時間（時
間）を表わす。

【図３】ＶＹアイソマーのＳＨＲに対する単回経口投与
後の血漿及び血清中における循環ＡＣＥ活性の変化を示
す。図中、縦軸はＡＣＥ活性（ｍＵ／ｍｌ−血漿又は血
清）、横軸は経過時間（時間）を表わす。なお、ＡＣＥ
活性の差異はＳｔｕｄｅｎｔ’ｓｔ−ｔｅｓｔにてテ
ストした。

【図４】同じく肺におけるＡＣＥ活性の変化を示す。な
お、ＡＣＥ活性の差異はＤｕｎｃａｎ’ｓｔｅｓｔを
用いてテストした。

【図５】同じく腎臓におけるＡＣＥ活性の変化を示す。
なお、ＡＣＥ活性の差異はＤｕｎｃａｎ’ｓｔｅｓｔ
を用いてテストした。

【図６】同じく腹部大動脈におけるＡＣＥ活性の変化を
示す。なお、ＡＣＥ活性の差異はＤｕｎｃａｎ’ｓｔ
ｅｓｔを用いてテストした。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者松本清福岡県筑紫野市石崎146−１ (72)発明者井上美津代福岡県福岡市東区６−３−８−210 Ｆターム(参考） 4B018 MD20 MD74 ME04 MF10 4C084 AA01 AA02 AA03 AA06 BA01 BA08 BA14 CA59 NA14 ZA422 4H045 AA10 AA30 BA11 CA52 DA57 EA01 EA23

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】Ｌ型ジペプチドＬ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｔｙｒ
を有効成分とする血圧降下剤。
【請求項２】Ｌ型ジペプチドＬ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｔｙｒ
のみを有効成分とする血圧降下剤。
【請求項３】Ｌ型ジペプチドＬ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｔｙｒ
が天然由来のＶａｌ−Ｔｙｒ又は合成Ｌ型Ｖａｌ−Ｔｙ
ｒであること、を特徴とする請求項１又は２に記載の血
圧降下剤。
【請求項４】合成Ｌ型Ｖａｌ−Ｔｙｒが、下記の方法
によって合成されたものであること、を特徴とする請求
項３に記載の血圧降下剤：アミノ基を保護したＬ−Ｔｙ
ｒ又はＬ−Ｖａｌを付加した樹脂に、アミノ基を保護し
たＬ−Ｖａｌ又はＬ−Ｔｙｒを加えて縮合せしめ、縮合
せしめたＨ−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｔｙｒ−Ｏ−樹脂からＨ
−Ｌ−Ｖａｌ−Ｌ−Ｔｙｒ−ＯＨを切断し、これを抽出
してＬ型Ｖａｌ−Ｔｙｒを得る。