JP2005013116A - ウナギ仔魚用飼料 - Google Patents
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Abstract
【課題】ウナギ仔魚をシラスウナギまで成長・変態させることができるウナギ仔魚用飼料を提供すること。
【解決手段】オキアミ分解物および／またはフィチン酸低減処理した大豆ペプチドを含有するウナギ仔魚用飼料。オキアミ分解物は、オキアミ内在酵素を分解処理に用いたオキアミ分解物である。オキアミ分解物は、さらに加熱変性されたものである。フィチン酸低減処理した大豆ペプチドは、大豆蛋白にプロテアーゼとフィターゼを作用させて得られるものである。フィチン酸低減処理した大豆ペプチドは、フィチン酸含量として大豆ペプチド中の１％以下である。ウナギ仔魚をシラスウナギまで成長させることができる飼料である。さらに、生物の卵成分を配合したものである。卵成分は魚卵または鶏卵由来のものである。さらに高度不飽和脂肪酸含有油脂を含有する。上記いずれかのウナギ仔魚用飼料を用いて育成したウナギ種苗。
【選択図】 図１
【解決手段】オキアミ分解物および／またはフィチン酸低減処理した大豆ペプチドを含有するウナギ仔魚用飼料。オキアミ分解物は、オキアミ内在酵素を分解処理に用いたオキアミ分解物である。オキアミ分解物は、さらに加熱変性されたものである。フィチン酸低減処理した大豆ペプチドは、大豆蛋白にプロテアーゼとフィターゼを作用させて得られるものである。フィチン酸低減処理した大豆ペプチドは、フィチン酸含量として大豆ペプチド中の１％以下である。ウナギ仔魚をシラスウナギまで成長させることができる飼料である。さらに、生物の卵成分を配合したものである。卵成分は魚卵または鶏卵由来のものである。さらに高度不飽和脂肪酸含有油脂を含有する。上記いずれかのウナギ仔魚用飼料を用いて育成したウナギ種苗。
【選択図】 図１
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、オキアミおよび／またはフィチン酸低減処理した大豆ペプチドを含有するウナギ種苗生産に不可欠なウナギ仔魚用飼料に関する。詳しくは、オキアミおよび／またはフィチン酸低減処理した大豆ペプチドを含有した、ウナギ仔魚をシラスウナギまで成長させることができるウナギ仔魚用飼料に関する。また、本発明はそれらウナギ仔魚用飼料を用いて育成したウナギ種苗に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ウナギは生産量が多い重要な養殖魚種であるが、種苗は全て天然のシラスウナギに依存している。したがって、漁獲量の多少によってシラスウナギの取り引き価格は大きく変動し、養鰻経営の不安定化の一因となっている。ウナギの種苗生産、すなわちシラスウナギが飼育下で安定的に大量生産できれば、養鰻経営の安定化だけでなく近年急速に減少しているウナギ資源の保護にも寄与する。ウナギの人工孵化が可能になった現在、仔魚をシラスウナギまで成長・変態させる飼料の開発が必要である。
【０００３】
天然のウナギは成熟過程、産卵場、孵化から仔魚の成長など謎に包まれていることが多い。ウナギは孵化後、プレレプトケファルスからレプトケファルスへと成長し、その後シラスウナギへと劇的に変態する。これまでに多数の天然レプトケファルスが採取され、消化管内滞留物の研究が進められているが、レプトケファルスの餌については未だ不明である。
【０００４】
ウナギの人工孵化が可能になってから２０年以上経過し、ウナギ仔魚の餌としてこれまでにワムシなどの生物餌料、市販の初期飼料、市販の栄養強化飼料、魚介類の生殖腺や鶏卵など極めて多くの物質が試されてきた。しかし、ウナギ仔魚の初期飼料としては、独立行政法人水産総合研究センター養殖研究所（当時水産庁養殖研究所）の研究グループが見いだしたサメ卵粉末が有効であるという知見（特許文献１）以外には、これまで多くの試みがなされたにもかかわらず、ウナギ仔魚に対し摂餌誘因性や成長性を有する飼料は全く見出されていなかった。しかも、前述のサメ卵でも、レプトケファルスをシラスまで成長・変態させることは不可能であった。
【０００５】
その後、サメ卵粉末に大豆ペプチド、ビタミンミックス、ミネラルミックス、オキアミ水抽出物を配合した沈降性飼料でウナギ仔魚をレプトケファルスまで成長させることに成功した（非特許文献１）が、この飼料によってもシラスウナギまで成長・変態するには至らなかった。
【０００６】
ところで、南極オキアミ（Ｅｕｐｈａｕｓｉａ ｓｕｐｅｒｂａ）は魚介類の餌として成長性や摂餌性に優れていることが知られている。養魚飼料原料としての南極オキアミは育成用飼料に用いられ、その利用形態は生あるいはミールである。上述のようにウナギ仔魚の飼料原料としてオキアミ水抽出物の有効性が示されていたが、オキアミの機能性を最大限に活用しているとは言えなかった。しかし、生やミールのような利用形態では、消化吸収能の弱いウナギ仔魚に対してオキアミの機能性を最大限に活用することはできなかった。
【０００７】
また、大豆ペプチドの飼料原料への有効性は既に確認されているが（非特許文献１）、ウナギ仔魚をシラスウナギまで成長させることができるような飼料には至っていなかった。
なお、大豆からフィチン酸を除去する方法には、塩を利用して大豆蛋白の水抽出過程でフィチン酸を除去するもの（特許文献２、特許文献３）、フィターゼ等でフィチン酸を分解する方法、樹脂などに吸着させて除去する方法（特許文献４）などがある。
【０００８】
【特許文献１】
特開平１１−２５３１１１号公報
【特許文献２】
特開平８−１７３０５２号公報
【特許文献３】
特開平９−１２１７８０号公報
【特許文献４】
特開２００１−１６３８００号公報
【非特許文献１】
田中ら，プロダクション・オブ・レプトケファリ・オブ・ジャパニーズ ・イール（アングイラ・ジャポニカ）・イン・キャプティビティー （Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｅｐｔｏｃｅｐｈａｌｉ ｏｆ Ｊａｐａｎｅｓｅ ｅｅｌ （Ａｎｇｕｉｌｌａ ｊａｐｏｎｉｃａ） ｉｎ ｃａｐｔｉｖｉｔｙ），「アクアカルチャー（Ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ）」，（オランダ），エルセビア・サイエンス・ビーブイ（ＥＬＳＥＶＩＥＲ ＳＣＩＥＮＣＥ ＢＶ）， ２００１年９月１４日，２０１巻，１−２号，ｐ．５１−６０
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、ウナギ仔魚をシラスウナギまで成長・変態させることができるウナギ仔魚用飼料を提供することを目的とする。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは上記課題を解決するために、鋭意研究を重ねた結果、オキアミ分解物および／またはフィチン酸低減処理した大豆ペプチドを配合した飼料がウナギ仔魚に対し摂餌誘因性、成長性を有することを見出し本研究を完成するに至った。
【００１１】
本発明は、オキアミ分解物、好ましくはオキアミ内在酵素を分解処理に用いたオキアミ分解物、必要に応じ内在酵素により分解した後加熱変性させたオキアミ分解物、および／または、フィチン酸低減処理した大豆ペプチド、好ましくは大豆蛋白にプロテアーゼとフィターゼを作用させて得られるもの、より具体的にはフィチン酸低減処理した大豆ペプチドがフィチン酸含量として大豆ペプチド中の１％以下であるもの、を含有するウナギ仔魚用飼料を要旨とする。
本発明は、ウナギ仔魚をシラスウナギまで成長させることができる飼料である。
【００１２】
また、本発明はオキアミ分解物および／またはフィチン酸低減処理した大豆ペプチドに加え、生物の卵成分、好ましくは魚卵または鶏卵由来の卵成分、さらに必要に応じ高度不飽和脂肪酸含有油脂を配合したウナギ仔魚用飼料を要旨としている。
また、本発明は、オキアミ分解物、好ましくはオキアミ内在酵素を分解処理に用いたオキアミ分解物、必要に応じ内在酵素により分解した後加熱変性させたオキアミ分解物、および／または、フィチン酸低減処理した大豆ペプチド、好ましくは大豆蛋白にプロテアーゼとフィターゼを作用させて得られるもの、より具体的にはフィチン酸低減処理した大豆ペプチドがフィチン酸含量として大豆ペプチド中の１％以下であるもの、を含有するウナギ仔魚用飼料を用いて育成したウナギ種苗を要旨とする。
【００１３】
【発明の実施の形態】
本発明の対象となるウナギの仔魚は、例えばニホンウナギ（Ａｎｇｕｉｌｌａ ｊａｐｏｎｉｃａ）、ヨーロッパウナギ（Ａｎｇｕｉｌｌａ ａｎｇｕｉｌｌａ）等、養殖対象となるウナギの仔魚が挙げられる。なお、本発明で言うウナギ仔魚とは、プレレプトケファレス、レプトケファレス等、シラスウナギに変態する前の段階にあるウナギ仔魚を指す。
本発明で用いるオキアミとしては、産業上有用なオキアミ目（Ｅｕｐｈａｕｓｉａｃｅａ）が挙げられるが、南極オキアミ（Ｅｕｐｈａｕｓｉａ ｓｕｐｅｒｂａ）を用いるのが好ましい。又、このオキアミについては、内在性酵素による分解物（自己消化物）、あるいは市販の酵素を外添し、内在性酵素による分解を増強して得られた分解物を用いても良い。オキアミ分解物は例えば、オキアミをミンチにして撹拌しながら５０℃で１時間加熱を維持することで得ることができる。さらに、オキアミ分解物を常法により加熱変性させたものを用いても良い。
【００１４】
本発明で用いられるフィチン酸低減処理した大豆ペプチド（以下、「低フィチン大豆ペプチド」と言う。）は、以下に説明される。
まず大豆からフィチン酸を除去する方法は、（１）塩を利用して大豆蛋白の水抽出過程でフィチン酸を除去するもの（上記特許文献２、３）、（２）フィターゼ等でフィチン酸を分解する方法、（３）樹脂などに吸着させて除去する方法（上記特許文献４）などがあり、（１）や（３）の方法に比べて（２）の方法が工程が煩雑でなく工業的に有利である。このような方法により低フィチン化された原料にプロテアーゼを作用させて蛋白分解を行うことにより低フィチン大豆ペプチドを製造することができる。なお、低フィチン化とプロテアーゼによる分解はいずれを先に行っても、あるいは同時に行うことも可能である。残存するフィチン酸については完全除去が望ましいが、通常残存フィチン酸量としてバナドモリブテン酸吸光光度法による定量で（検出限界５ｍｇ／１００ｇ）で１．０％以下であればよく、好ましくは０．５％以下である。
【００１５】
本発明に用いる蛋白分解酵素（プロテアーゼ）は、エキソプロテアーゼまたはエンドプロテアーゼを単独または併用することができ、動物起源、植物起源あるいは微生物起源は問わない。具体的には、セリンプロテアーゼ（動物由来のトリプシン、キモトリプシン、微生物由来のズブチリシン、カルボキシペプチダーゼ等）、アスペルギルス・オリゼ起源の「プロチンＦＮ」 （大和化成（株）製）、「プロテアーゼＳ」（天野製薬（株）製）や「プロチンＡＣ−１０」（大和化成（株）製）が例示できる。
【００１６】
本発明の加水分解の条件は用いる蛋白分解酵素の種類により多少異なるが、概してその蛋白分解酵素の作用ｐＨ域、作用温度域で、低フィチン化された大豆蛋白を加水分解するに充分な量を用いるのがよい。加水分解の程度は、蛋白成分の１５％トリクロロ酢酸可溶率でいう大豆蛋白分解率で、５〜９８％程度、より通常には５０〜９０％程度になるまで行なわれる。蛋白分解酵素を作用させる時間は、使用する蛋白分解酵素の活性や量にもよるが、通常５分〜１２時間程度、好ましくは３０分〜５時間程度とすることができる。酵素分解時間が長すぎると腐敗を招きやすい。
【００１７】
本発明で用いる卵成分としては、魚卵あるいは鶏卵由来のものが挙げられる。魚卵としては、サメ卵、スケコ、マダラコ、マダイ卵等が挙げられ、特にサメ卵が好ましい。又、これらは液卵あるいは粉末のどちら状態のものを用いても良いが、液卵を用いる方が特に好ましい。
本発明で用いる高度不飽和脂肪酸含有油脂としては、動物起源、植物起源あるいは微生物起源は問わない。具体的には、イワシフィードオイル、タラ肝油、ω‐３やω‐６の高度不飽和脂肪酸を高濃度に含有する精製魚油等が挙げられる。
【００１８】
本発明のウナギ仔魚用飼料は、上述の成分を適宜混合して製造される。この時、オキアミ分解物と低フィチン大豆ペプチドはそれぞれ単独あるいは組み合わせて用いても良い。いずれも配合量は問わないが、飼料全体に対しオキアミ分解物は３〜５０％、低フィチン大豆ペプチドは３〜５０％で適宜組み合わせて用いることができる。例えば、卵成分を２０％、オキアミ分解物３％、低フィチン酸大豆ペプチド３％、ＤＨＡ高含有油４％、蒸留水７０％のような組み合わせが使用できる。
【００１９】
【作用】
本発明は、オキアミ分解物、好ましくはオキアミ内在酵素を分解処理に用いたオキアミ分解物および／または低フィチン大豆ペプチドを含むことを特徴とするウナギ仔魚用飼料である。飼料あるいは飼料原料に南極オキアミおよび／または低フィチン大豆ペプチドを用いることにより、ウナギ人工孵化仔魚をシラスウナギまで成長・変態させることができる。
【００２０】
【実施例】
以下に実施例を示し、本発明をより具体的に説明する。本発明はこれらの実施例によって何ら限定されるものではない。
【００２１】
実施例１
各種成分によるウナギ仔魚の成長性確認試験
人為催熟によって得られた受精卵から孵化し、目や口器が形成され摂餌可能となった孵化後８日のウナギ仔魚を供試魚とした。５Ｌアクリル製ボウル型水槽を１２個用い、それぞれにウナギ仔魚をおよそ２００尾収容した。飼育水温は２１．５℃とした。無給餌生存日数は孵化後１５日前後であるため、給餌期間を１０日間とした。
試験区をサメ卵給餌区（飼料１）、サメ卵＋低フィチン大豆ペプチド区（飼料２）、サメ卵＋オキアミ分解物区（飼料３）、およびサメ卵＋低フィチン大豆ペプチド＋オキアミ分解物区（飼料４）とした。飼料組成を表１に示す。なお、サメ卵液卵は水分５０％である。
【００２２】
【表１】
【００２３】
飼料の給餌方法は、特開平１１−２５３１１１号公報（上記特許文献１）およびＴａｎａｋａら〔上記非特許文献１（Ｈ．Ｔａｎａｋａ， Ｈ．Ｋａｇａｗａ， Ｈ．Ｏｈｔａ， Ａｑｕｑｃｕｌｔｕｒｅ ２０１（２００１）５１−６０）〕に準じた。すなわち、給餌前日あるいは当日調製して０〜１℃で保存し、給餌直前に注水を停止させた水槽の底に駒込ピペットで約５ｍｌ注入した。給餌３０分後に調温ろ過海水を０．４Ｌ／ｍｉｎで注入し、飼育海水をかけ流しとして水槽内を清潔に保った。給餌回数は１日５回、２時間毎とし、毎日夜間にサイフォンを用いて仔魚を清潔な水槽へ移動させた。飼育成績の統計処理は、分散分析で有意だった項目についてチューキー多重比較を行った。結果を図１（各試験区のウナギ仔魚の生存率）、図２（オキアミ分解物と低フィチン酸大豆ペプチドがウナギ仔魚の全長へ与える効果）、図３（オキアミ分解物と低フィチン酸大豆ペプチドがウナギ仔魚の体高へ与える効果）、図４（オキアミ分解物と低フィチン酸大豆ペプチドがウナギ仔魚の体高／全長へ与える効果）、および表２（成長に関する飼育成績）にそれぞれ示す。
【００２４】
この結果、いずれの飼料でも仔魚は良好な摂餌性を示し、順調に成長した。給餌１０日後の平均生残率は、飼料１が３３．１％、飼料２が３８．２％、飼料３が３７．７％、および飼料４が５４．７％であった。サメ卵とオキアミ分解物あるいはサメ卵と低フィチン大豆ペプチドを配合した飼料を給餌した場合、サメ卵単独給餌よりも生残率が高かった。さらに、サメ卵とオキアミ分解物と低フィチン大豆ペプチドを配合した場合で、最も高い生残率を示した。
【００２５】
給餌開始時の仔魚の平均全長は６．６５±０．２６ｍｍであった。給餌１０日後の各試験区の平均全長は、飼料１が８．２５±０．５６ｍｍ、飼料２が８．５３±０．６６ｍｍ、飼料３が８．８８±０．６４ｍｍおよび飼料４が８．９７±０．５５ｍｍであった。いずれの飼料についても給餌効果が認められ、給餌開始時と比較して有意（ｐ＜０．０１）に全長が伸びていた。サメ卵とオキアミ分解物を配合した飼料とサメ卵と低フィチン大豆ペプチドを配合した飼料はサメ卵単独と比べて有意に全長が伸びた（ｐ＜０．０１）。さらに、サメ卵とオキアミ分解物と低フィチン大豆ペプチドを配合した場合で、最も全長の伸長を示した。
【００２６】
ウナギ仔魚の体形を評価するために体高を測定した。典型的なレプトケファルスは体高が高く、体高／体長比が大きい。給餌開始時の仔魚の平均体高は０．６５±０．０５ｍｍであった。給餌１０日後の各試験区の平均体高は、飼料１が０．８２±０．０８ｍｍ、飼料２が０．８５±０．１０ｍｍ、飼料３が０．９５±０．１１ｍｍおよび飼料４が０．９７±０．１１ｍｍであった。いずれの飼料についても給餌効果が認められ、給餌開始時と比較して有意（ｐ＜０．０１）に体高が高くなった。サメ卵とオキアミ分解物を配合した飼料を給餌した場合、サメ卵単独あるいはサメ卵と大豆ペプチドを配合した場合と比べて有意に体高が高くなった（ｐ＜０．０１）。さらに、サメ卵と大豆ペプチドとオキアミ分解物を配合した場合で、最も体高が高くなった。
【００２７】
各試験区の体高／体長（％）は、試験開始時が９．７９±０．４８％、飼料１が９．９１±０．６８％、飼料２が９．９１±０．６７％、飼料３が１０．７５±０．８３％および飼料４が１０．７８±０．９２％であった。オキアミ分解物を配合した飼料の給餌が、体高／体長比に関しても有意に大きくなることが示された（ｐ＜０．０１）。
以上の結果より、魚卵成分とオキアミ分解物あるいは低フィチン大豆ペプチドあるいはそれらの組み合わせの配合により、ウナギ仔魚を有意に成長させるものであることが確認された。
【００２８】
【表２】
【００２９】
実施例２
卵成分の違いによる成長性確認試験
人為催熟によって得られた受精卵から孵化し、目や口器が形成され摂餌可能となった孵化後８日の仔魚を用いた。ウナギ仔魚を２０Ｌアクリル製水槽に収容した。飼育水温は２１．５℃とした。
試験区を、サメ卵粉末と低フィチン大豆ペプチドとオキアミ分解物を配合した飼料を与えた飼料５と、鶏卵粉末と低フィチン大豆ペプチドとオキアミ分解物とω‐３高含有精製魚油（ＤＨＡ含有量４６％）を配合した飼料を与えた飼料６とした。飼料組成を表３に示す。なお、飼料の給餌方法は実施例１と同様に行った。
【００３０】
【表３】
【００３１】
これまでウナギ仔魚は、サメ卵を配合した飼料以外では成長が認められていなかった。しかし、サメ卵粉末を全く配合していない飼料６でも仔魚は良好な摂餌性を示し、順調に成長した。ふ化後２８日の平均全長について比較すると飼料５が９．８５±０．７０ｍｍ、飼料６が９．４３±０．８９ｍｍであった （図５）。ふ化後２８日の最長個体の全長は飼料５で１０．９ｍｍ、飼料６で１１．０ｍｍであった。
【００３２】
サメ卵粉末主体飼料を用いたＴａｎａｋａら〔上記非特許文献１（Ｈ．Ｔａｎａｋａ， Ｈ．Ｋａｇａｗａ， Ｈ．Ｏｈｔａ， Ａｑｕｑｃｕｌｔｕｒｅ ２０１（２００１）５１−６０）〕によると、人工受精により得られた仔魚は孵化後２５日で１０．６ｍｍまで成長している。本試験の結果より、鶏卵粉末、オキアミ分解物、低フィチン大豆ペプチドおよび魚油を配合した飼料６においても、サメ卵を配合した飼料である飼料５の成長に匹敵する成長性が示された。
【００３３】
本発明の飼料ではふ化後２８日で１０ｍｍを超える個体が多数認められ、鶏卵粉末、オキアミ分解物、低フィチン大豆ペプチドおよび魚油を配合した飼料は、サメ卵粉末主体飼料に十分に匹敵しうることが確認された。
【００３４】
実施例３
シラスウナギへの変態確認試験
人為催熟によって得られた受精卵から孵化し、目や口器が形成され摂餌可能となった孵化後８日の仔魚を用いた。ウナギ仔魚を２０Ｌアクリル製水槽に収容した。飼育水温は２１．５℃とした。飼料組成を表４に示す。なお、サメ卵液卵は水分５０％である。孵化１８日後までは飼料７を給餌し、孵化１９日後からは飼料８を給餌した。
【００３５】
【表４】
【００３６】
この結果、仔魚は順調に成長し、孵化から約７〜９ヶ月後に全長５０〜６０ｍｍに達し、レプトケファルスからシラスウナギへの変態を開始し、変態途中に体が湾曲した個体を除き約２〜３週間で全長が２〜８％短くなり，シラスウナギへと変態したことが確認された（図６、図７）。
【００３７】
【発明の効果】
本発明により、ウナギ仔魚をシラスウナギまで成長させることができる優れたウナギ仔魚用飼料を提供することが可能となった。
【図面の簡単な説明】
【図１】実施例１における、サメ卵給餌区（飼料１）、サメ卵＋低フィチン大豆ペプチド区（飼料２）、サメ卵＋オキアミ分解物区（飼料３）およびサメ卵＋低フィチン大豆ペプチド＋オキアミ分解物区（飼料４）の生残率比較。
【図２】実施例１における、サメ卵給餌区（飼料１）、サメ卵＋低フィチン大豆ペプチド区（飼料２）、サメ卵＋オキアミ分解物区（飼料３）およびサメ卵＋低フィチン大豆ペプチド＋オキアミ分解物区（飼料４）の全長（ｍｍ）比較。
【図３】実施例１における、サメ卵給餌区（飼料１）、サメ卵＋低フィチン大豆ペプチド区（飼料２）、サメ卵＋オキアミ分解物区（飼料３）およびサメ卵＋低フィチン大豆ペプチド＋オキアミ分解物区（飼料４）の体高（ｍｍ）比較。
【図４】実施例１における、サメ卵給餌区（飼料１）、サメ卵＋低フィチン大豆ペプチド区（飼料２）、サメ卵＋オキアミ分解物区（飼料３）およびサメ卵＋低フィチン大豆ペプチド＋オキアミ分解物区（飼料４）の体高／全長（％）比較。
【図５】実施例２における、サメ卵粉末＋低フィチン大豆ペプチド＋オキアミ分解物区（飼料５）と、鶏卵粉末＋低フィチン大豆ペプチド＋オキアミ分解物＋魚油区（飼料６）の全長（ｍｍ）推移比較。
【図６】実施例３における、仔魚の成長と変態。
【図７】実施例３における仔魚の変態例。上からふ化後２４８，２５４，２６２日の同一個体。
【発明の属する技術分野】
本発明は、オキアミおよび／またはフィチン酸低減処理した大豆ペプチドを含有するウナギ種苗生産に不可欠なウナギ仔魚用飼料に関する。詳しくは、オキアミおよび／またはフィチン酸低減処理した大豆ペプチドを含有した、ウナギ仔魚をシラスウナギまで成長させることができるウナギ仔魚用飼料に関する。また、本発明はそれらウナギ仔魚用飼料を用いて育成したウナギ種苗に関する。
【０００２】
【従来の技術】
ウナギは生産量が多い重要な養殖魚種であるが、種苗は全て天然のシラスウナギに依存している。したがって、漁獲量の多少によってシラスウナギの取り引き価格は大きく変動し、養鰻経営の不安定化の一因となっている。ウナギの種苗生産、すなわちシラスウナギが飼育下で安定的に大量生産できれば、養鰻経営の安定化だけでなく近年急速に減少しているウナギ資源の保護にも寄与する。ウナギの人工孵化が可能になった現在、仔魚をシラスウナギまで成長・変態させる飼料の開発が必要である。
【０００３】
天然のウナギは成熟過程、産卵場、孵化から仔魚の成長など謎に包まれていることが多い。ウナギは孵化後、プレレプトケファルスからレプトケファルスへと成長し、その後シラスウナギへと劇的に変態する。これまでに多数の天然レプトケファルスが採取され、消化管内滞留物の研究が進められているが、レプトケファルスの餌については未だ不明である。
【０００４】
ウナギの人工孵化が可能になってから２０年以上経過し、ウナギ仔魚の餌としてこれまでにワムシなどの生物餌料、市販の初期飼料、市販の栄養強化飼料、魚介類の生殖腺や鶏卵など極めて多くの物質が試されてきた。しかし、ウナギ仔魚の初期飼料としては、独立行政法人水産総合研究センター養殖研究所（当時水産庁養殖研究所）の研究グループが見いだしたサメ卵粉末が有効であるという知見（特許文献１）以外には、これまで多くの試みがなされたにもかかわらず、ウナギ仔魚に対し摂餌誘因性や成長性を有する飼料は全く見出されていなかった。しかも、前述のサメ卵でも、レプトケファルスをシラスまで成長・変態させることは不可能であった。
【０００５】
その後、サメ卵粉末に大豆ペプチド、ビタミンミックス、ミネラルミックス、オキアミ水抽出物を配合した沈降性飼料でウナギ仔魚をレプトケファルスまで成長させることに成功した（非特許文献１）が、この飼料によってもシラスウナギまで成長・変態するには至らなかった。
【０００６】
ところで、南極オキアミ（Ｅｕｐｈａｕｓｉａ ｓｕｐｅｒｂａ）は魚介類の餌として成長性や摂餌性に優れていることが知られている。養魚飼料原料としての南極オキアミは育成用飼料に用いられ、その利用形態は生あるいはミールである。上述のようにウナギ仔魚の飼料原料としてオキアミ水抽出物の有効性が示されていたが、オキアミの機能性を最大限に活用しているとは言えなかった。しかし、生やミールのような利用形態では、消化吸収能の弱いウナギ仔魚に対してオキアミの機能性を最大限に活用することはできなかった。
【０００７】
また、大豆ペプチドの飼料原料への有効性は既に確認されているが（非特許文献１）、ウナギ仔魚をシラスウナギまで成長させることができるような飼料には至っていなかった。
なお、大豆からフィチン酸を除去する方法には、塩を利用して大豆蛋白の水抽出過程でフィチン酸を除去するもの（特許文献２、特許文献３）、フィターゼ等でフィチン酸を分解する方法、樹脂などに吸着させて除去する方法（特許文献４）などがある。
【０００８】
【特許文献１】
特開平１１−２５３１１１号公報
【特許文献２】
特開平８−１７３０５２号公報
【特許文献３】
特開平９−１２１７８０号公報
【特許文献４】
特開２００１−１６３８００号公報
【非特許文献１】
田中ら，プロダクション・オブ・レプトケファリ・オブ・ジャパニーズ ・イール（アングイラ・ジャポニカ）・イン・キャプティビティー （Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｅｐｔｏｃｅｐｈａｌｉ ｏｆ Ｊａｐａｎｅｓｅ ｅｅｌ （Ａｎｇｕｉｌｌａ ｊａｐｏｎｉｃａ） ｉｎ ｃａｐｔｉｖｉｔｙ），「アクアカルチャー（Ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ）」，（オランダ），エルセビア・サイエンス・ビーブイ（ＥＬＳＥＶＩＥＲ ＳＣＩＥＮＣＥ ＢＶ）， ２００１年９月１４日，２０１巻，１−２号，ｐ．５１−６０
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、ウナギ仔魚をシラスウナギまで成長・変態させることができるウナギ仔魚用飼料を提供することを目的とする。
【００１０】
【課題を解決するための手段】
本発明者らは上記課題を解決するために、鋭意研究を重ねた結果、オキアミ分解物および／またはフィチン酸低減処理した大豆ペプチドを配合した飼料がウナギ仔魚に対し摂餌誘因性、成長性を有することを見出し本研究を完成するに至った。
【００１１】
本発明は、オキアミ分解物、好ましくはオキアミ内在酵素を分解処理に用いたオキアミ分解物、必要に応じ内在酵素により分解した後加熱変性させたオキアミ分解物、および／または、フィチン酸低減処理した大豆ペプチド、好ましくは大豆蛋白にプロテアーゼとフィターゼを作用させて得られるもの、より具体的にはフィチン酸低減処理した大豆ペプチドがフィチン酸含量として大豆ペプチド中の１％以下であるもの、を含有するウナギ仔魚用飼料を要旨とする。
本発明は、ウナギ仔魚をシラスウナギまで成長させることができる飼料である。
【００１２】
また、本発明はオキアミ分解物および／またはフィチン酸低減処理した大豆ペプチドに加え、生物の卵成分、好ましくは魚卵または鶏卵由来の卵成分、さらに必要に応じ高度不飽和脂肪酸含有油脂を配合したウナギ仔魚用飼料を要旨としている。
また、本発明は、オキアミ分解物、好ましくはオキアミ内在酵素を分解処理に用いたオキアミ分解物、必要に応じ内在酵素により分解した後加熱変性させたオキアミ分解物、および／または、フィチン酸低減処理した大豆ペプチド、好ましくは大豆蛋白にプロテアーゼとフィターゼを作用させて得られるもの、より具体的にはフィチン酸低減処理した大豆ペプチドがフィチン酸含量として大豆ペプチド中の１％以下であるもの、を含有するウナギ仔魚用飼料を用いて育成したウナギ種苗を要旨とする。
【００１３】
【発明の実施の形態】
本発明の対象となるウナギの仔魚は、例えばニホンウナギ（Ａｎｇｕｉｌｌａ ｊａｐｏｎｉｃａ）、ヨーロッパウナギ（Ａｎｇｕｉｌｌａ ａｎｇｕｉｌｌａ）等、養殖対象となるウナギの仔魚が挙げられる。なお、本発明で言うウナギ仔魚とは、プレレプトケファレス、レプトケファレス等、シラスウナギに変態する前の段階にあるウナギ仔魚を指す。
本発明で用いるオキアミとしては、産業上有用なオキアミ目（Ｅｕｐｈａｕｓｉａｃｅａ）が挙げられるが、南極オキアミ（Ｅｕｐｈａｕｓｉａ ｓｕｐｅｒｂａ）を用いるのが好ましい。又、このオキアミについては、内在性酵素による分解物（自己消化物）、あるいは市販の酵素を外添し、内在性酵素による分解を増強して得られた分解物を用いても良い。オキアミ分解物は例えば、オキアミをミンチにして撹拌しながら５０℃で１時間加熱を維持することで得ることができる。さらに、オキアミ分解物を常法により加熱変性させたものを用いても良い。
【００１４】
本発明で用いられるフィチン酸低減処理した大豆ペプチド（以下、「低フィチン大豆ペプチド」と言う。）は、以下に説明される。
まず大豆からフィチン酸を除去する方法は、（１）塩を利用して大豆蛋白の水抽出過程でフィチン酸を除去するもの（上記特許文献２、３）、（２）フィターゼ等でフィチン酸を分解する方法、（３）樹脂などに吸着させて除去する方法（上記特許文献４）などがあり、（１）や（３）の方法に比べて（２）の方法が工程が煩雑でなく工業的に有利である。このような方法により低フィチン化された原料にプロテアーゼを作用させて蛋白分解を行うことにより低フィチン大豆ペプチドを製造することができる。なお、低フィチン化とプロテアーゼによる分解はいずれを先に行っても、あるいは同時に行うことも可能である。残存するフィチン酸については完全除去が望ましいが、通常残存フィチン酸量としてバナドモリブテン酸吸光光度法による定量で（検出限界５ｍｇ／１００ｇ）で１．０％以下であればよく、好ましくは０．５％以下である。
【００１５】
本発明に用いる蛋白分解酵素（プロテアーゼ）は、エキソプロテアーゼまたはエンドプロテアーゼを単独または併用することができ、動物起源、植物起源あるいは微生物起源は問わない。具体的には、セリンプロテアーゼ（動物由来のトリプシン、キモトリプシン、微生物由来のズブチリシン、カルボキシペプチダーゼ等）、アスペルギルス・オリゼ起源の「プロチンＦＮ」 （大和化成（株）製）、「プロテアーゼＳ」（天野製薬（株）製）や「プロチンＡＣ−１０」（大和化成（株）製）が例示できる。
【００１６】
本発明の加水分解の条件は用いる蛋白分解酵素の種類により多少異なるが、概してその蛋白分解酵素の作用ｐＨ域、作用温度域で、低フィチン化された大豆蛋白を加水分解するに充分な量を用いるのがよい。加水分解の程度は、蛋白成分の１５％トリクロロ酢酸可溶率でいう大豆蛋白分解率で、５〜９８％程度、より通常には５０〜９０％程度になるまで行なわれる。蛋白分解酵素を作用させる時間は、使用する蛋白分解酵素の活性や量にもよるが、通常５分〜１２時間程度、好ましくは３０分〜５時間程度とすることができる。酵素分解時間が長すぎると腐敗を招きやすい。
【００１７】
本発明で用いる卵成分としては、魚卵あるいは鶏卵由来のものが挙げられる。魚卵としては、サメ卵、スケコ、マダラコ、マダイ卵等が挙げられ、特にサメ卵が好ましい。又、これらは液卵あるいは粉末のどちら状態のものを用いても良いが、液卵を用いる方が特に好ましい。
本発明で用いる高度不飽和脂肪酸含有油脂としては、動物起源、植物起源あるいは微生物起源は問わない。具体的には、イワシフィードオイル、タラ肝油、ω‐３やω‐６の高度不飽和脂肪酸を高濃度に含有する精製魚油等が挙げられる。
【００１８】
本発明のウナギ仔魚用飼料は、上述の成分を適宜混合して製造される。この時、オキアミ分解物と低フィチン大豆ペプチドはそれぞれ単独あるいは組み合わせて用いても良い。いずれも配合量は問わないが、飼料全体に対しオキアミ分解物は３〜５０％、低フィチン大豆ペプチドは３〜５０％で適宜組み合わせて用いることができる。例えば、卵成分を２０％、オキアミ分解物３％、低フィチン酸大豆ペプチド３％、ＤＨＡ高含有油４％、蒸留水７０％のような組み合わせが使用できる。
【００１９】
【作用】
本発明は、オキアミ分解物、好ましくはオキアミ内在酵素を分解処理に用いたオキアミ分解物および／または低フィチン大豆ペプチドを含むことを特徴とするウナギ仔魚用飼料である。飼料あるいは飼料原料に南極オキアミおよび／または低フィチン大豆ペプチドを用いることにより、ウナギ人工孵化仔魚をシラスウナギまで成長・変態させることができる。
【００２０】
【実施例】
以下に実施例を示し、本発明をより具体的に説明する。本発明はこれらの実施例によって何ら限定されるものではない。
【００２１】
実施例１
各種成分によるウナギ仔魚の成長性確認試験
人為催熟によって得られた受精卵から孵化し、目や口器が形成され摂餌可能となった孵化後８日のウナギ仔魚を供試魚とした。５Ｌアクリル製ボウル型水槽を１２個用い、それぞれにウナギ仔魚をおよそ２００尾収容した。飼育水温は２１．５℃とした。無給餌生存日数は孵化後１５日前後であるため、給餌期間を１０日間とした。
試験区をサメ卵給餌区（飼料１）、サメ卵＋低フィチン大豆ペプチド区（飼料２）、サメ卵＋オキアミ分解物区（飼料３）、およびサメ卵＋低フィチン大豆ペプチド＋オキアミ分解物区（飼料４）とした。飼料組成を表１に示す。なお、サメ卵液卵は水分５０％である。
【００２２】
【表１】
【００２３】
飼料の給餌方法は、特開平１１−２５３１１１号公報（上記特許文献１）およびＴａｎａｋａら〔上記非特許文献１（Ｈ．Ｔａｎａｋａ， Ｈ．Ｋａｇａｗａ， Ｈ．Ｏｈｔａ， Ａｑｕｑｃｕｌｔｕｒｅ ２０１（２００１）５１−６０）〕に準じた。すなわち、給餌前日あるいは当日調製して０〜１℃で保存し、給餌直前に注水を停止させた水槽の底に駒込ピペットで約５ｍｌ注入した。給餌３０分後に調温ろ過海水を０．４Ｌ／ｍｉｎで注入し、飼育海水をかけ流しとして水槽内を清潔に保った。給餌回数は１日５回、２時間毎とし、毎日夜間にサイフォンを用いて仔魚を清潔な水槽へ移動させた。飼育成績の統計処理は、分散分析で有意だった項目についてチューキー多重比較を行った。結果を図１（各試験区のウナギ仔魚の生存率）、図２（オキアミ分解物と低フィチン酸大豆ペプチドがウナギ仔魚の全長へ与える効果）、図３（オキアミ分解物と低フィチン酸大豆ペプチドがウナギ仔魚の体高へ与える効果）、図４（オキアミ分解物と低フィチン酸大豆ペプチドがウナギ仔魚の体高／全長へ与える効果）、および表２（成長に関する飼育成績）にそれぞれ示す。
【００２４】
この結果、いずれの飼料でも仔魚は良好な摂餌性を示し、順調に成長した。給餌１０日後の平均生残率は、飼料１が３３．１％、飼料２が３８．２％、飼料３が３７．７％、および飼料４が５４．７％であった。サメ卵とオキアミ分解物あるいはサメ卵と低フィチン大豆ペプチドを配合した飼料を給餌した場合、サメ卵単独給餌よりも生残率が高かった。さらに、サメ卵とオキアミ分解物と低フィチン大豆ペプチドを配合した場合で、最も高い生残率を示した。
【００２５】
給餌開始時の仔魚の平均全長は６．６５±０．２６ｍｍであった。給餌１０日後の各試験区の平均全長は、飼料１が８．２５±０．５６ｍｍ、飼料２が８．５３±０．６６ｍｍ、飼料３が８．８８±０．６４ｍｍおよび飼料４が８．９７±０．５５ｍｍであった。いずれの飼料についても給餌効果が認められ、給餌開始時と比較して有意（ｐ＜０．０１）に全長が伸びていた。サメ卵とオキアミ分解物を配合した飼料とサメ卵と低フィチン大豆ペプチドを配合した飼料はサメ卵単独と比べて有意に全長が伸びた（ｐ＜０．０１）。さらに、サメ卵とオキアミ分解物と低フィチン大豆ペプチドを配合した場合で、最も全長の伸長を示した。
【００２６】
ウナギ仔魚の体形を評価するために体高を測定した。典型的なレプトケファルスは体高が高く、体高／体長比が大きい。給餌開始時の仔魚の平均体高は０．６５±０．０５ｍｍであった。給餌１０日後の各試験区の平均体高は、飼料１が０．８２±０．０８ｍｍ、飼料２が０．８５±０．１０ｍｍ、飼料３が０．９５±０．１１ｍｍおよび飼料４が０．９７±０．１１ｍｍであった。いずれの飼料についても給餌効果が認められ、給餌開始時と比較して有意（ｐ＜０．０１）に体高が高くなった。サメ卵とオキアミ分解物を配合した飼料を給餌した場合、サメ卵単独あるいはサメ卵と大豆ペプチドを配合した場合と比べて有意に体高が高くなった（ｐ＜０．０１）。さらに、サメ卵と大豆ペプチドとオキアミ分解物を配合した場合で、最も体高が高くなった。
【００２７】
各試験区の体高／体長（％）は、試験開始時が９．７９±０．４８％、飼料１が９．９１±０．６８％、飼料２が９．９１±０．６７％、飼料３が１０．７５±０．８３％および飼料４が１０．７８±０．９２％であった。オキアミ分解物を配合した飼料の給餌が、体高／体長比に関しても有意に大きくなることが示された（ｐ＜０．０１）。
以上の結果より、魚卵成分とオキアミ分解物あるいは低フィチン大豆ペプチドあるいはそれらの組み合わせの配合により、ウナギ仔魚を有意に成長させるものであることが確認された。
【００２８】
【表２】
【００２９】
実施例２
卵成分の違いによる成長性確認試験
人為催熟によって得られた受精卵から孵化し、目や口器が形成され摂餌可能となった孵化後８日の仔魚を用いた。ウナギ仔魚を２０Ｌアクリル製水槽に収容した。飼育水温は２１．５℃とした。
試験区を、サメ卵粉末と低フィチン大豆ペプチドとオキアミ分解物を配合した飼料を与えた飼料５と、鶏卵粉末と低フィチン大豆ペプチドとオキアミ分解物とω‐３高含有精製魚油（ＤＨＡ含有量４６％）を配合した飼料を与えた飼料６とした。飼料組成を表３に示す。なお、飼料の給餌方法は実施例１と同様に行った。
【００３０】
【表３】
【００３１】
これまでウナギ仔魚は、サメ卵を配合した飼料以外では成長が認められていなかった。しかし、サメ卵粉末を全く配合していない飼料６でも仔魚は良好な摂餌性を示し、順調に成長した。ふ化後２８日の平均全長について比較すると飼料５が９．８５±０．７０ｍｍ、飼料６が９．４３±０．８９ｍｍであった （図５）。ふ化後２８日の最長個体の全長は飼料５で１０．９ｍｍ、飼料６で１１．０ｍｍであった。
【００３２】
サメ卵粉末主体飼料を用いたＴａｎａｋａら〔上記非特許文献１（Ｈ．Ｔａｎａｋａ， Ｈ．Ｋａｇａｗａ， Ｈ．Ｏｈｔａ， Ａｑｕｑｃｕｌｔｕｒｅ ２０１（２００１）５１−６０）〕によると、人工受精により得られた仔魚は孵化後２５日で１０．６ｍｍまで成長している。本試験の結果より、鶏卵粉末、オキアミ分解物、低フィチン大豆ペプチドおよび魚油を配合した飼料６においても、サメ卵を配合した飼料である飼料５の成長に匹敵する成長性が示された。
【００３３】
本発明の飼料ではふ化後２８日で１０ｍｍを超える個体が多数認められ、鶏卵粉末、オキアミ分解物、低フィチン大豆ペプチドおよび魚油を配合した飼料は、サメ卵粉末主体飼料に十分に匹敵しうることが確認された。
【００３４】
実施例３
シラスウナギへの変態確認試験
人為催熟によって得られた受精卵から孵化し、目や口器が形成され摂餌可能となった孵化後８日の仔魚を用いた。ウナギ仔魚を２０Ｌアクリル製水槽に収容した。飼育水温は２１．５℃とした。飼料組成を表４に示す。なお、サメ卵液卵は水分５０％である。孵化１８日後までは飼料７を給餌し、孵化１９日後からは飼料８を給餌した。
【００３５】
【表４】
【００３６】
この結果、仔魚は順調に成長し、孵化から約７〜９ヶ月後に全長５０〜６０ｍｍに達し、レプトケファルスからシラスウナギへの変態を開始し、変態途中に体が湾曲した個体を除き約２〜３週間で全長が２〜８％短くなり，シラスウナギへと変態したことが確認された（図６、図７）。
【００３７】
【発明の効果】
本発明により、ウナギ仔魚をシラスウナギまで成長させることができる優れたウナギ仔魚用飼料を提供することが可能となった。
【図面の簡単な説明】
【図１】実施例１における、サメ卵給餌区（飼料１）、サメ卵＋低フィチン大豆ペプチド区（飼料２）、サメ卵＋オキアミ分解物区（飼料３）およびサメ卵＋低フィチン大豆ペプチド＋オキアミ分解物区（飼料４）の生残率比較。
【図２】実施例１における、サメ卵給餌区（飼料１）、サメ卵＋低フィチン大豆ペプチド区（飼料２）、サメ卵＋オキアミ分解物区（飼料３）およびサメ卵＋低フィチン大豆ペプチド＋オキアミ分解物区（飼料４）の全長（ｍｍ）比較。
【図３】実施例１における、サメ卵給餌区（飼料１）、サメ卵＋低フィチン大豆ペプチド区（飼料２）、サメ卵＋オキアミ分解物区（飼料３）およびサメ卵＋低フィチン大豆ペプチド＋オキアミ分解物区（飼料４）の体高（ｍｍ）比較。
【図４】実施例１における、サメ卵給餌区（飼料１）、サメ卵＋低フィチン大豆ペプチド区（飼料２）、サメ卵＋オキアミ分解物区（飼料３）およびサメ卵＋低フィチン大豆ペプチド＋オキアミ分解物区（飼料４）の体高／全長（％）比較。
【図５】実施例２における、サメ卵粉末＋低フィチン大豆ペプチド＋オキアミ分解物区（飼料５）と、鶏卵粉末＋低フィチン大豆ペプチド＋オキアミ分解物＋魚油区（飼料６）の全長（ｍｍ）推移比較。
【図６】実施例３における、仔魚の成長と変態。
【図７】実施例３における仔魚の変態例。上からふ化後２４８，２５４，２６２日の同一個体。
Claims (10)
- オキアミ分解物および／またはフィチン酸低減処理した大豆ペプチドを含有するウナギ仔魚用飼料。
- オキアミ分解物が、オキアミ内在酵素を分解処理に用いたオキアミ分解物である、請求項１のウナギ仔魚用飼料。
- オキアミ分解物が、さらに加熱変性されたものである、請求項１または２のウナギ仔魚用飼料。
- フィチン酸低減処理した大豆ペプチドが、大豆蛋白にプロテアーゼとフィターゼを作用させて得られるものである、請求項１、２または３のウナギ仔魚用飼料。
- フィチン酸低減処理した大豆ペプチドが、フィチン酸含量として大豆ペプチド中の１％以下である、請求項１ないし４のいずれかのウナギ仔魚用飼料。
- ウナギ仔魚をシラスウナギまで成長させることができる飼料である請求項１ないし５のいずれかのウナギ仔魚用飼料。
- さらに、生物の卵成分を配合したものである請求項１ないし６のいずれかのウナギ仔魚用飼料。
- 卵成分が魚卵または鶏卵由来のものである請求項７のウナギ仔魚用飼料。
- さらに高度不飽和脂肪酸含有油脂を含有する請求項１ないし８のいずれかのウナギ仔魚用飼料。
- 請求項１ないし９いずれかのウナギ仔魚用飼料を用いて育成したウナギ種苗。
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