JP4971794B2 - アミロイド沈積、アミロイド神経毒性およびミクログリオーシスを低減する方法 - Google Patents
アミロイド沈積、アミロイド神経毒性およびミクログリオーシスを低減する方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4971794B2 JP4971794B2 JP2006533144A JP2006533144A JP4971794B2 JP 4971794 B2 JP4971794 B2 JP 4971794B2 JP 2006533144 A JP2006533144 A JP 2006533144A JP 2006533144 A JP2006533144 A JP 2006533144A JP 4971794 B2 JP4971794 B2 JP 4971794B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- nilvadipine
- use according
- amyloid
- human
- animal
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 29
- 206010029350 Neurotoxicity Diseases 0.000 title claims abstract description 16
- 206010044221 Toxic encephalopathy Diseases 0.000 title claims abstract description 16
- 230000007135 neurotoxicity Effects 0.000 title claims abstract description 16
- 231100000228 neurotoxicity Toxicity 0.000 title claims abstract description 16
- 230000007388 microgliosis Effects 0.000 title claims abstract description 9
- 230000003941 amyloidogenesis Effects 0.000 title description 2
- FAIIFDPAEUKBEP-UHFFFAOYSA-N Nilvadipine Chemical compound COC(=O)C1=C(C#N)NC(C)=C(C(=O)OC(C)C)C1C1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1 FAIIFDPAEUKBEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 101
- 229960005366 nilvadipine Drugs 0.000 claims abstract description 101
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 claims abstract description 44
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 44
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 26
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 26
- 102000009091 Amyloidogenic Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 22
- 108010048112 Amyloidogenic Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 22
- 230000003942 amyloidogenic effect Effects 0.000 claims abstract description 22
- 108010090849 Amyloid beta-Peptides Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 102000013455 Amyloid beta-Peptides Human genes 0.000 claims abstract description 18
- 241000282412 Homo Species 0.000 claims abstract description 14
- 230000006933 amyloid-beta aggregation Effects 0.000 claims abstract description 11
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims description 17
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 15
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 13
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 11
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 claims description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 8
- 230000003836 peripheral circulation Effects 0.000 claims description 7
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000006188 syrup Substances 0.000 claims description 4
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 claims description 4
- 241000238367 Mya arenaria Species 0.000 claims description 3
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 3
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 claims description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 3
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 claims description 3
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 claims description 3
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims description 3
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 claims description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 3
- 238000007914 intraventricular administration Methods 0.000 claims description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 3
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 3
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 claims description 3
- 235000012431 wafers Nutrition 0.000 claims description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 claims 2
- 230000037406 food intake Effects 0.000 claims 2
- 238000007919 intrasynovial administration Methods 0.000 claims 2
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 claims 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims 1
- 238000002663 nebulization Methods 0.000 claims 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 claims 1
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 abstract description 26
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 15
- 208000030886 Traumatic Brain injury Diseases 0.000 abstract description 11
- 230000009529 traumatic brain injury Effects 0.000 abstract description 11
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 abstract description 8
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 abstract description 5
- 229940127291 Calcium channel antagonist Drugs 0.000 abstract description 4
- 239000000480 calcium channel blocker Substances 0.000 abstract description 4
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 abstract description 4
- YNGDWRXWKFWCJY-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dihydropyridine Chemical compound C1C=CNC=C1 YNGDWRXWKFWCJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 abstract description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 38
- 230000002025 microglial effect Effects 0.000 description 21
- 108010064397 amyloid beta-protein (1-40) Proteins 0.000 description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 18
- 101710137189 Amyloid-beta A4 protein Proteins 0.000 description 15
- 102100022704 Amyloid-beta precursor protein Human genes 0.000 description 15
- 101710151993 Amyloid-beta precursor protein Proteins 0.000 description 15
- DZHSAHHDTRWUTF-SIQRNXPUSA-N amyloid-beta polypeptide 42 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)[C@@H](C)CC)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C(C)C)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DZHSAHHDTRWUTF-SIQRNXPUSA-N 0.000 description 15
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 11
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 11
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 9
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 9
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 8
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 8
- 102000002659 Amyloid Precursor Protein Secretases Human genes 0.000 description 7
- 108010043324 Amyloid Precursor Protein Secretases Proteins 0.000 description 7
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 7
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 210000004720 cerebrum Anatomy 0.000 description 7
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 7
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 6
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 6
- 210000000274 microglia Anatomy 0.000 description 6
- 210000001178 neural stem cell Anatomy 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 5
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 4
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 4
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 4
- 108010064539 amyloid beta-protein (1-42) Proteins 0.000 description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 4
- 230000006724 microglial activation Effects 0.000 description 4
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 4
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 4
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- 230000006433 tumor necrosis factor production Effects 0.000 description 4
- 208000037259 Amyloid Plaque Diseases 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical class CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 208000005017 glioblastoma Diseases 0.000 description 3
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 3
- -1 troches Substances 0.000 description 3
- 108010062271 Acute-Phase Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000011767 Acute-Phase Proteins Human genes 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N Cyclic adenosine monophosphate Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 2
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- IVOMOUWHDPKRLL-UHFFFAOYSA-N UNPD107823 Natural products O1C2COP(O)(=O)OC2C(O)C1N1C(N=CN=C2N)=C2N=C1 IVOMOUWHDPKRLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- 229940095074 cyclic amp Drugs 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 210000000337 motor cortex Anatomy 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 2
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 2
- 230000001936 parietal effect Effects 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 230000001991 pathophysiological effect Effects 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 2
- 238000011820 transgenic animal model Methods 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- LLSVFVGOJJLPPS-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-4-(3-nitrophenyl)pyridine-3,5-dicarboxylic acid Chemical compound CC1=NC=C(C(O)=O)C(C=2C=C(C=CC=2)[N+]([O-])=O)=C1C(O)=O LLSVFVGOJJLPPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 102100022524 Alpha-1-antichymotrypsin Human genes 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 102100029470 Apolipoprotein E Human genes 0.000 description 1
- 101710095339 Apolipoprotein E Proteins 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 230000006970 Aβ cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000006974 Aβ toxicity Effects 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000005145 Cerebral amyloid angiopathy Diseases 0.000 description 1
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 1
- 235000019739 Dicalciumphosphate Nutrition 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 208000034826 Genetic Predisposition to Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000003736 Gerstmann-Straussler-Scheinker Disease Diseases 0.000 description 1
- 206010072075 Gerstmann-Straussler-Scheinker syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010018341 Gliosis Diseases 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 206010019196 Head injury Diseases 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 108090000192 Methionyl aminopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102100021118 Microtubule-associated protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 1
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 208000024777 Prion disease Diseases 0.000 description 1
- 229920001800 Shellac Polymers 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 102100023935 Transmembrane glycoprotein NMB Human genes 0.000 description 1
- SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N [4-(4-hydrazinylphenyl)phenyl]hydrazine Chemical compound C1=CC(NN)=CC=C1C1=CC=C(NN)C=C1 SXEHKFHPFVVDIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 210000001642 activated microglia Anatomy 0.000 description 1
- 230000004931 aggregating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 108010091628 alpha 1-Antichymotrypsin Proteins 0.000 description 1
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 230000007792 alzheimer disease pathology Effects 0.000 description 1
- 206010002022 amyloidosis Diseases 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 101150031224 app gene Proteins 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 208000037875 astrocytosis Diseases 0.000 description 1
- 230000007341 astrogliosis Effects 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 239000006189 buccal tablet Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003710 cerebral cortex Anatomy 0.000 description 1
- 238000002144 chemical decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003593 chromogenic compound Substances 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000005220 cytoplasmic tail Anatomy 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Chemical class 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Chemical class 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- NEFBYIFKOOEVPA-UHFFFAOYSA-K dicalcium phosphate Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O NEFBYIFKOOEVPA-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940038472 dicalcium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 229910000390 dicalcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 230000002964 excitative effect Effects 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 239000012458 free base Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 210000001879 hippocampal ca1 region Anatomy 0.000 description 1
- 230000000971 hippocampal effect Effects 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003960 inflammatory cascade Effects 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 239000006193 liquid solution Substances 0.000 description 1
- 239000006194 liquid suspension Substances 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 102000021160 microtubule binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091011150 microtubule binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 210000003061 neural cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002241 neurite Anatomy 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 210000001682 neurofibril Anatomy 0.000 description 1
- 230000007557 neuronal destruction Effects 0.000 description 1
- 230000002981 neuropathic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002887 neurotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 230000001151 other effect Effects 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940081974 saccharin Drugs 0.000 description 1
- 235000019204 saccharin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000901 saccharin and its Na,K and Ca salt Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 208000008864 scrapie Diseases 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000004208 shellac Substances 0.000 description 1
- ZLGIYFNHBLSMPS-ATJNOEHPSA-N shellac Chemical compound OCCCCCC(O)C(O)CCCCCCCC(O)=O.C1C23[C@H](C(O)=O)CCC2[C@](C)(CO)[C@@H]1C(C(O)=O)=C[C@@H]3O ZLGIYFNHBLSMPS-ATJNOEHPSA-N 0.000 description 1
- 229940113147 shellac Drugs 0.000 description 1
- 235000013874 shellac Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 208000020431 spinal cord injury Diseases 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 108091007466 transmembrane glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 108091005703 transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000035160 transmembrane proteins Human genes 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 210000000857 visual cortex Anatomy 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Psychiatry (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Hydrogenated Pyridines (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
本発明は、アルツハイマー疾患のような、大脳のアミロイド形成性疾患の病態生理作用を治療するための方法に関する。すなわち、アルツハイマー疾患のような大脳のアミロイド形成症と関連する疾患に苦しむヒトや動物の脳においてそうした病態生理作用を抑制する、特異的ジヒドロピリジンアンタゴニストカルシウムチャネルブロッカーであるニルバジピン（nilvadipine）を投与する方法である。
アルツハイマー疾患(AD)は加齢による最も一般的な神経変性の疾患であり、65歳を超える人々の約１％の人を苦しませている。この疾患の特徴として、細胞内神経原線維のもつれの蓄積が進行すること、細胞外実質組織の老人性斑、および脳内の脳血管の沈積物が挙げられる。老人斑と脳血管の沈積物の主成分は、39-43個のアミノ酸からなるβ-アミロイドペプチド(Aβ)であり、トランスメンブラン糖タンパク質のアミロイド前駆体タンパク質(APP)からタンパク質分解により生じる。
APPは、590-680個のアミノ酸の細胞外アミノ末端ドメインと約55個のアミノ酸からなる細胞質内の尾端とを有する単一のトランスメンブランタンパク質である。染色体21上にあるAPP遺伝子からのmＲＮＡは交互スプライシングを受け、８つの可能なイソ型を生じる。そのうち３つ(695、751および770個アミノ酸のイソ型)が脳内で優位を占める。APPは３つの酵素、α-,β-および γ-セクレターゼの作用によってタンパク質分解性のプロセッシングを受ける。α-セクレターゼはAβドメインのアミノ酸17でAPPを開裂し、大きな可溶性アミノ末端フラグメント、α-APPを分泌のため放出する。なぜならα-セクレターゼはAβドメイン内で開裂するために、この開裂によりAβ生成が阻害される。あるいはAPPは、Aβのアミノ末端範囲を定めるβ-セクレターゼにより開裂されて、可溶性アミノ末端フラグメントβ-APPを生じる。続いて、細胞内にあるAPPカルボキシ末端ドメインのγ-セクレターゼによる切断によって、多数のペプチドが生成し、その中の最も多い生成物は40-アミノ酸のAβ(Aβ40)および42-アミノ酸のAβ(Aβ42)である。Aβ40は分泌されたAβの90〜95%を占め、脊髄液から回収される優勢分子種である(Seubertら, Nature, 359: 325-7,1992)。これに比べて、Aβ42は分泌されたAβの10%未満である。Aβ42の生成が相対的に少量であるにもかかわらず、Aβ42は斑（plaque）に見出される優勢種であり、また最初に沈積するものである。これはAβ40よりも速やかに不溶性アミロイド凝集体を形成する能力によるものであろう(Jarrettら, Biochemistry, 32: 4693-7,1993)。脳内でのAβの異常な蓄積は、APPの過剰発現によるか、あるいはAPPプロセッシングの変調によるものと信じられている。
このようにAβペプチドはADの病理生物学において重要な役割を果たすと信じられているが、これはADの系統形態に関係しているすべての変異が、これらAPPからのペプチドのプロセッシング変調に帰着するからである。実際、脳内におけるAβの不溶性もしくは凝集性の原繊維の沈積は、AD形態すべての神経病理上の顕著な特徴であり、患者の遺伝子素質には関わらない。
Aβ沈積に付随してAD脳において炎症経路の激しい活性化が現れ、これにはAβ沈積の内部および周辺に、炎症性サイトカイン前駆体および急性相反応物質の産生が含まれる(McGeerら, J. Leukocyte Biol., 65: 409-15,1999)。
脳に内在する固有の免疫細胞、小グリア細胞（microglia）の活性化は、この炎症性カ
スケードに密接に関与していると考えられている。反応性の小グリア細胞が炎症性サイトカイン前駆体を生産することは証明されている。該前駆体には炎症性タンパク質および急性相の反応物質であり、たとえばα-1-アンチキモトリプシン、変換成長因子β、アポリポプロテインEおよび補体因子などであり、これらはすべてAβプラークに局在化されており、Aβプラークの「濃縮」もしくは成熟を促進することが示されている(Nilssonら, J Neurosci. 21:1444-5, 2001)。高レベルになるとさらに神経変性の促進が見られる。疫学的研究からは、非ステロイド系抗炎症性薬剤(NSAID)を使用している患者は、ADのリスクを50%も減少しており(Rogersら, Neurobiol. Agiyzg 17: 681-6,1996)、ならびにNSAID 治療を受けたAD患者の死後評価からは、このリスク減少は活性化小グリアの数の減少と関係していることが示された(Mackenzieら, Neurology 50: 986-90, 1998)。さらにTgAPPsw
マウス（アルツハイマー疾患のマウスモデル）にNSAID(イブプロフェン)を与えた場合、これらの動物では、活性化小グリア細胞の減少に関係したAβ沈積の減少、星状細胞症、および発育異常神経突起が見られる(Limら, J. Neurosci. 20 : 5709-14,2000)。
スケードに密接に関与していると考えられている。反応性の小グリア細胞が炎症性サイトカイン前駆体を生産することは証明されている。該前駆体には炎症性タンパク質および急性相の反応物質であり、たとえばα-1-アンチキモトリプシン、変換成長因子β、アポリポプロテインEおよび補体因子などであり、これらはすべてAβプラークに局在化されており、Aβプラークの「濃縮」もしくは成熟を促進することが示されている(Nilssonら, J Neurosci. 21:1444-5, 2001)。高レベルになるとさらに神経変性の促進が見られる。疫学的研究からは、非ステロイド系抗炎症性薬剤(NSAID)を使用している患者は、ADのリスクを50%も減少しており(Rogersら, Neurobiol. Agiyzg 17: 681-6,1996)、ならびにNSAID 治療を受けたAD患者の死後評価からは、このリスク減少は活性化小グリアの数の減少と関係していることが示された(Mackenzieら, Neurology 50: 986-90, 1998)。さらにTgAPPsw
マウス（アルツハイマー疾患のマウスモデル）にNSAID(イブプロフェン)を与えた場合、これらの動物では、活性化小グリア細胞の減少に関係したAβ沈積の減少、星状細胞症、および発育異常神経突起が見られる(Limら, J. Neurosci. 20 : 5709-14,2000)。
AD脳における炎症性過程の生成物は、それゆえAD病理を悪化させるかもしれない。さらにAD脳において活性化された小グリアは、Aβ除去の代わりにAβ線維素形成を促進し、結果的に老人性プラークのような沈積を生じさせることから病原性を有するという証拠もある(Wegielら, Acta Neuropathol. (Berl.) 100: 356-64,2000)。
AD発症病理はAβの神経毒性作用が原因であることが示唆されている。Aβの細胞毒性は、げっし類の脳からの初代培養細胞およびヒトの培養細胞によって、最初に確立された。Mattsonらの研究（J. Neurosci., 12:376-389, 1992）から、興奮性の神経伝達物質グルタミン酸の存在下で、Aβは細胞内カルシウムの急速かつ異常な増加をもたらすことが示された。このことは顕著に亢進した第二メッセンジャー活性を通じて細胞に対して著しい毒性を示すと信じられている。
かくしてADの特徴である、変えられない脳の変質進行の予防方法が必要とされる。この予防法はAD患者に見られるAβ沈積、Aβ神経毒性、小グリア細胞により賦活された炎症、およびAPPの過剰なまたは変調した発現に取り組み、解決する。
[発明の開示]
上記要請に応えるために、本発明はまずアルツハイマー疾患(AD)のような大脳のアミロイド形成性疾患に冒された動物またはヒトにおいて、カルシウムチャネルアンタゴニストであるニルバジピンの治療有効量を投与することにより、β-アミロイドの沈積、β-アミロイドの神経毒性およびミクログリオーシス（microgliosis）を軽減する方法を提供する。
[発明の開示]
上記要請に応えるために、本発明はまずアルツハイマー疾患(AD)のような大脳のアミロイド形成性疾患に冒された動物またはヒトにおいて、カルシウムチャネルアンタゴニストであるニルバジピンの治療有効量を投与することにより、β-アミロイドの沈積、β-アミロイドの神経毒性およびミクログリオーシス（microgliosis）を軽減する方法を提供する。
さらに本発明は、動物またはヒトの末梢循環におけるβ-アミロイドの血漿濃度を最初に測定すること;その動物またはヒトにニルバジピンの治療的有効量を単位投与形態で投与すること;その動物またはヒトの末梢循環におけるβ-アミロイドの血漿濃度をその後のある時点で２回目に測定すること;Aβの血漿濃度について最初の測定および２回目の測定との間の差を算出すること；により動物またはヒトにおけるADのような大脳アミロイド形成性疾患の診断方法、あるいはその動物またはヒトは大脳のアミロイド形成性疾患が進行するリスクに置かれているかどうかを決定する方法もまた提供する。最初の測定と比べて２回目の測定で、β-アミロイドの血漿濃度が上昇しておれば、動物またはヒトにおける大脳のアミロイド形成性疾患を進行させるリスクおよび／またはそれらしい徴候を示す。
本発明は、外傷性の脳損傷に苦しむ動物およびヒトにおいて、ニルバジピンの治療的有効量を単位投与形態で頭部損傷の直後からその動物またはヒトに投与され、その後もニルバジピン治療が指定された期間継続されることにより、β-アミロイドの沈積、β-アミロイドの神経毒性およびミクログリオーシスのリスクを低減する方法をさらに提供する。
本発明は、ADのような大脳アミロイド形成性疾患に苛まれる動物またはヒトの中枢神経系における神経幹細胞に対して、ニルバジピンの治療的有効量をその幹細胞を移植する前に投与することを含む、移植可能な神経幹細胞を処置する方法をも提供する。
動物およびヒトにおいてアルツハイマー疾患(AD)といった、ある大脳アミロイド形成性疾患の特徴である脳退化の仮借のない進行に対して、ニルバジピン (isopropyl-3-methyl-2-cyano-1,4-dihydro-6-methyl-4-(m-nitrophenyl)-3,5-pyridine-dicarboxylate; MW 385.4)、ジヒドロピリジン類縁体カルシウムチャネルアンタゴニストを投与することによる予防的方法を本発明が初めて提供する。
本発明の一態様として、特に大脳のアミロイド形成性の疾患または病態に苛まれる動物およびヒトに、ニルバジピンの治療的有効量を単位投与形態で投与することを含む、動物またはヒトにおけるβ-アミロイドの沈積、β-アミロイドの神経毒性およびミクログリオーシスを低減する方法が提供される。ADのような大脳のアミロイド形成性疾患の大半は、慢性的で進行性であり、治りにくい脳痴呆であるために、ニルバジピン治療の持続が動物またはヒトの終生まで続くことが想定される。そうした大脳アミロイド形成性疾患または病態には、限定されないが、アルツハイマー疾患、伝染性海綿様脳症、スクレーピー、外傷性の脳損傷、大脳のアミロイド脈管障害（angiopathy）およびGerstmann-Straussler-Scheinker症候群などが挙げられる。
本発明の別の態様において、外傷性脳損傷(TBI)に苦しむ動物およびヒトにおいて、その動物またはヒトにニルバジピンの治療的有効量を単位投与形態で投与することを含み、ニルバジピン投与がTBI直後から始められ、その後もニルバジピン治療が指定された期間、継続されることを特徴とする、β-アミロイド沈積、β-アミロイドの神経毒性およびミクログリオーシスのリスクを低減する方法が提供される。TBIは、AD進展に対する感受性を増強させることが示されており、ならびに理論に拘泥するわけではないが、TBIが大脳のAβ蓄積および酸化的ストレス（これらは協同的に作用して、ADを発症させるかその進行を推進するかも知れない）を助長させると信じられている。
ニルバジピンによる治療の持続は、TBIに苦しむ動物またはヒトについて想定されているのは、およそ１時間と５年間との間、好ましくは約２週間と３年間との間で、および最も好ましくは約６ヶ月と12ヶ月との間で続くものとされる。
本発明の別の態様は、動物またはヒトの末梢循環におけるβ-アミロイドの血漿濃度を最初に測定すること;その動物またはヒトにニルバジピンの治療的有効量を単位投与形態で投与すること;その動物またはヒトの末梢循環におけるβ-アミロイドの血漿濃度をその後のある時点で２回目に測定すること;次いで最初の測定および２回目の測定との間の差を算出すること；により、動物またはヒトにおけるADのような大脳アミロイド形成性疾患の診断方法、あるいはその疾患が進行するリスクを決定する方法もまた提供する。最初の測定と比べて２回目の測定で、β-アミロイドの血漿濃度が上昇しておれば、動物またはヒトにおける大脳のアミロイド形成性疾患が進行するリスクまたはそれらしい徴候を示される。
ニルバジピンが最初および２回目の血漿Aβ濃度測定との間で持続的に投与される期間は、およそ１日と12ヶ月との間、好ましくはおよそ１週間と６ヶ月との間、最も好ましくはおよそ２週間と４週間との間まで続く。ニルバジピンを投与した後、血漿Aβ濃度における少々の増加は、ADの進行のリスクおよび/またはAD発症段階の徴候を表すであろうと考えられる。ニルバジピン投与に血漿Aβ濃度が大きく増加することは、脳から末梢循環
へ遊離されたAβのより高い濃度を反映するものであり、このため一層ADを陽性と診断する指針となるであろう。
へ遊離されたAβのより高い濃度を反映するものであり、このため一層ADを陽性と診断する指針となるであろう。
本発明の方法に基づき、大脳のアミロイド形成性疾患に苛まれているか、あるいは外傷性の脳損傷に苦しむ動物またはヒトに対して単位投与形態で投与されるニルバジピンの治療的有効量のみならず、動物またはヒトにおいて大脳のアミロイド形成性疾患が進行するリスクおよび/または徴候を決定する目的で投与される治療的有効量は、次の範囲内にある。約0.05〜20mg/日の間、好ましくは約2〜15mg/日の間、さらに好ましくは約4〜12mg/日の間、特に好ましくは約8mg/日である。毎日の投与は、一日当り、単回の単位投与量、または２、３または４回の単位投与量に分割される。
本発明のもう一つの態様として、ADのような大脳のアミロイド形成性疾患に苛まれる動物またはヒトの中枢神経系における神経幹細胞に対してニルバジピンの治療的有効量をその幹細胞を移植する前に投与することによる、移植可能なヒトまたは異種の神経幹細胞を予備的に処置する方法がある。
おそらく神経幹細胞自体は、Aβの沈積を大して有しないであろう。しかしながら、もし神経細胞の移植がAβの載荷された環境のために意図されるのであれば、神経幹細胞の予備的な処置は、移植された神経細胞が新しい環境で生存してAβ濃度を低下させ、そのAβ毒性を減らすことができる能力を増強させるものでなくてはならない。神経幹細胞を予備的に処置するために単位投与形態で投与されるニルバジピンの治療的有効量は、約1nM〜3μMの間、好ましくは約10nM〜2μMの間、特に好ましくは、約100nM〜1μMの間の範囲にある。幹細胞は、特定タイプの細胞、例えば神経細胞に分化するように向かう場合、アルツハイマー疾患、パーキンソン氏疾患または脊髄損傷といった疾患および病態を治療するために、細胞および組織を置き換える再生可能な供給源の可能性を提供する。そのような細胞が患者に移植/埋め込みをされる場合、該細胞をニルバジピンで予備的に処置することのみならず、移植後においても患者にニルバジピンを用いた治療的処置を始めることが推奨される。
本発明の方法は、AD用のトランスジェニック動物モデル、例えばPDAPPおよびTgAPPswマウスモデルなどに用いることができると想定される。これによりそのような動物またはヒトの中枢神経系におけるアミロイド沈積、β-アミロイドおよびミクログリオーシスに関係した病態を処置し、予防しおよび/または抑制するために最終的には有用であるかも知れない。かくして本発明はAD用のトランスジェニック動物のモデルを提供する。これらは当業界で知られた標準的な方法、また以下の米国特許に示された方法を用いて構築される：米国特許番号5,487,992; 5,464,764; 5,387,742; 5,360,735; 5,347,075; 5,298,422; 5,288,846; 5,221,778; 5,175,385; 5,175,384; 5,175,383; および4,736,866.
ニルバジピンは、患者に非経口、経口、腹腔内を含むさまざまな経路によって患者に投与され得る。非経口的な投与には以下のような経路が挙げられる：静脈内；筋肉内；組織実質内；動脈内；皮下；眼球内；頭蓋内；心室内；滑液嚢内；経皮、肺吸入、眼、舌下、頬側を含む経上皮的；眼、皮膚、眼球、直腸、吹送または噴霧による鼻からの吸引を含む局所的。
ニルバジピンは、患者に非経口、経口、腹腔内を含むさまざまな経路によって患者に投与され得る。非経口的な投与には以下のような経路が挙げられる：静脈内；筋肉内；組織実質内；動脈内；皮下；眼球内；頭蓋内；心室内；滑液嚢内；経皮、肺吸入、眼、舌下、頬側を含む経上皮的；眼、皮膚、眼球、直腸、吹送または噴霧による鼻からの吸引を含む局所的。
経口的に摂取されるニルバジピンは、硬殻もしくは軟殻ゼラチンカプセルに収めるか、または錠剤に圧縮することができる。ニルバジピンは、また賦形剤と合わされ、錠剤、頬側の錠剤、トローチ剤、カプセル剤、小袋剤（sachets）、薬用飴錠剤（lozenge）、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、ウエハー、および類似物の摂取可能な形態で用いることができる。ニルバジピンは、また粉末剤または顆粒剤、水性液体もしくは非水性液体の溶液または懸濁液あるいは油／水型または水／油型の乳剤の形態をとることができる。
錠剤、トローチ、丸剤、カプセル剤および類似物はまた、たとえばトラガカントゴム、アラビアゴム、コーンスターチのような結合剤；リン酸二カルシウムのようなゼラチン賦形剤；コーンスターチ、ジャガイモデンプン、アルギン酸および類似物のような崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤；ショ糖、乳糖、サッカリンのような甘味料、または香料を含有することができる。投与単位の形態がカプセル剤のときは、上記材料に加えて液体基剤を含有することができる。その他のさまざまな材料が、被覆剤として、あるいは投与単位の物理的形態を別のものに変えるために、存在することができる。たとえば、錠剤、丸剤またはカプセル剤は、シェラック、糖またはその両方で被覆することができる。シロップまたはエリキシル剤は、ニルバジピン、甘味料としてのショ糖、保存料としてのメチルもしくはプロピルパラベン、着色料および香料を含有することができる。さらに、ニルバジピンは徐放性の調剤物および処方製剤中に取り込め得る。
ニルバジピンは非経口的または腹腔内的にCNSに投与される。遊離の塩基または医薬的に許容される塩としてのニルバジピンの溶液は、ヒドロキシプロピルセルロースのような好適な界面活性剤の混じった水で調合される。分散液は、グリセロール、液体ポリエチレングリコールおよびそれらの混合物ならびに油脂の中で調合される。通常の貯蔵または使用の条件下で、微生物の成長または化学的劣化を防ぐために、これらの調合製剤は保存剤および/または酸化防止剤を含有することができる。
ADのようなアミロイド形成性疾患に関係した疾患に苦しむ動物またはヒトにおいて、Aβの病理的作用を軽減する本発明の方法は、限定を意図しない以下の実施例においてさらに詳細に記載される。
Aβ沈積(アミロイド積荷）に対するニルバジピンの長期にわたる投与
Aβ沈積(アミロイド積荷）に対するニルバジピンの長期にわたる投与の効果を、TgAPPswマウス脳の様々な領域において4G8抗Aβモノクローナル抗体免疫染色技術を用いて調べた。Aβ積荷の定量には、4G8免疫染色技術がAβ沈積の定量的解析についてそのしっかりしたシグナルおよび最良の結果であるために選ばれた。簡潔にはパラフィン切片を以前に記載されたように(Nakagawa,Y ら Exp. Neurol., 163: 244-252, 2000)、免疫組織化学的に調べた。切片は、キシレン中でパラフィンを除き、一連のエタノールおよび脱イオン水で水和させ、Aβについての免疫組織化学検査の前にその切片を60分間、88% 蟻酸に浸漬することにより、抗原検索工程にかけた。該切片を水で洗浄し、過酸化水素(33%, 30ml)を加えて調製した新鮮なメタノール(150ml)混合液を用いて、内因性ペルオキシダーゼを失活させた。アビジン-ビオチン複合体手法が、販売者の指示書(Vector Laboratories, Burlingame, CA)に従って利用された。アミロイド積荷は、Aβについて陽性に染色された大脳領域のパーセンテージを決定することにより評価された。陰性コントロールでは、一次抗体の代わりに免疫化前の血清を適用したことを除き、切片に同一の免疫組織化学の手順を実施することが含めてあった。TgAPPswマウスは、有効量のニルバジピンを受けた実験群(n=7)および媒体を受けたコントロール群(n=5)の２群に分けた。
Aβ沈積(アミロイド積荷）に対するニルバジピンの長期にわたる投与の効果を、TgAPPswマウス脳の様々な領域において4G8抗Aβモノクローナル抗体免疫染色技術を用いて調べた。Aβ積荷の定量には、4G8免疫染色技術がAβ沈積の定量的解析についてそのしっかりしたシグナルおよび最良の結果であるために選ばれた。簡潔にはパラフィン切片を以前に記載されたように(Nakagawa,Y ら Exp. Neurol., 163: 244-252, 2000)、免疫組織化学的に調べた。切片は、キシレン中でパラフィンを除き、一連のエタノールおよび脱イオン水で水和させ、Aβについての免疫組織化学検査の前にその切片を60分間、88% 蟻酸に浸漬することにより、抗原検索工程にかけた。該切片を水で洗浄し、過酸化水素(33%, 30ml)を加えて調製した新鮮なメタノール(150ml)混合液を用いて、内因性ペルオキシダーゼを失活させた。アビジン-ビオチン複合体手法が、販売者の指示書(Vector Laboratories, Burlingame, CA)に従って利用された。アミロイド積荷は、Aβについて陽性に染色された大脳領域のパーセンテージを決定することにより評価された。陰性コントロールでは、一次抗体の代わりに免疫化前の血清を適用したことを除き、切片に同一の免疫組織化学の手順を実施することが含めてあった。TgAPPswマウスは、有効量のニルバジピンを受けた実験群(n=7)および媒体を受けたコントロール群(n=5)の２群に分けた。
図１に示されるようにニルバジピンを使用する治療により、大脳の視覚野皮質ではコントロールと比較して約62%、頭頂葉皮質ではコントロールと比較して約65%、運動野皮質ではコントロールと比較して約58%、梨状皮質ではコントロールと比較して約58%、海馬CA1領域ではコントロールと比較して約52%、海馬のCA2-CA3領域ではコントロールと比較して約50%、Aβ積荷は減少した。
小グリア細胞活性化に対するニルバジピンの長期にわたる投与
TgAPPswマウスにおける小グリア細胞活性化に対するニルバジピンの長期にわたる投与
の効果をそのマウス大脳の３つの領域について、CD45免疫染色技術（CD45+小グリア細胞の個数が決定される）を用いて調べた。簡潔に述べると、CD45（白血球の特異的マーカー）の免疫組織化学がクリオスタット大脳切片について実施された。CD45-陽性の小グリア細胞は、CD45に対するマウス・モノクローナル抗体(Chemicon International)を用いて4℃で一晩インキュベーションし、続いてビオチン化ウサギ抗マウス二次抗体を30分間適用することにより、免疫的に固定化された。CD45の検出は、ジアミノベンチジン（diaminobenzidine）発色原基質（CD45-陽性小グリア細胞について、褐色の細胞表面染色を形成する）を用いることにより行なわれた。図２に示されるように有効投与量を投与するニルバジピン治療では、小グリア細胞活性化が海馬で約33%、頭頂葉皮質で約43%、および運動野皮質で約27%、コントロールと比較して減少した。
TgAPPswマウスにおける小グリア細胞活性化に対するニルバジピンの長期にわたる投与
の効果をそのマウス大脳の３つの領域について、CD45免疫染色技術（CD45+小グリア細胞の個数が決定される）を用いて調べた。簡潔に述べると、CD45（白血球の特異的マーカー）の免疫組織化学がクリオスタット大脳切片について実施された。CD45-陽性の小グリア細胞は、CD45に対するマウス・モノクローナル抗体(Chemicon International)を用いて4℃で一晩インキュベーションし、続いてビオチン化ウサギ抗マウス二次抗体を30分間適用することにより、免疫的に固定化された。CD45の検出は、ジアミノベンチジン（diaminobenzidine）発色原基質（CD45-陽性小グリア細胞について、褐色の細胞表面染色を形成する）を用いることにより行なわれた。図２に示されるように有効投与量を投与するニルバジピン治療では、小グリア細胞活性化が海馬で約33%、頭頂葉皮質で約43%、および運動野皮質で約27%、コントロールと比較して減少した。
小グリア細胞活性化に対するニルバジピン投与の効果
小グリア細胞活性化に対するニルバジピン投与の効果が、N9げっ歯類の小グリア細胞で、リポ多糖体(LPS)を用いて24時間インビトロで活性化させた細胞を用いて調べられた。N9げっ歯類の小グリア細胞は、胚性のマウス脳に由来し、詳しく調べられたスカベンジャーげっ歯類小グリア細胞クローンである。小グリア細胞活性化の程度は、ELISAで測定したTNF-α生産(pg/ml)により決定された。図３に示されるように、LPSで活性化されない小グリア細胞は、約40 pg/ml TNF-αを産生した(コントロール細胞)。小グリア細胞は、50 nMニルバジピンの存在で、約40 pg/mlTNF-αを産生した。ニルバジピン投与を10倍(500 nM)に増大させてもTNF-αの産生は変化しなかった。小グリア細胞は、1 μg/ml LPSの存在下で、約820 pg/mlTNF-αを産生し、コントロール細胞およびニルバジピン投与細胞よりも、およそ95%の増大である。小グリア細胞は、1μg/ml LPSおよび50nM ニルバジピン両方の存在では、約670 pg/mlTNF-αを産生した。LPSおよび500 nMニルバジピンの投与により、TNF-α産生は、約610 pg/mlに減少した。よってニルバジピンは、LPSにより誘導される小グリア細胞活性化をおよそ20〜25%抑制した。
小グリア細胞活性化に対するニルバジピン投与の効果が、N9げっ歯類の小グリア細胞で、リポ多糖体(LPS)を用いて24時間インビトロで活性化させた細胞を用いて調べられた。N9げっ歯類の小グリア細胞は、胚性のマウス脳に由来し、詳しく調べられたスカベンジャーげっ歯類小グリア細胞クローンである。小グリア細胞活性化の程度は、ELISAで測定したTNF-α生産(pg/ml)により決定された。図３に示されるように、LPSで活性化されない小グリア細胞は、約40 pg/ml TNF-αを産生した(コントロール細胞)。小グリア細胞は、50 nMニルバジピンの存在で、約40 pg/mlTNF-αを産生した。ニルバジピン投与を10倍(500 nM)に増大させてもTNF-αの産生は変化しなかった。小グリア細胞は、1 μg/ml LPSの存在下で、約820 pg/mlTNF-αを産生し、コントロール細胞およびニルバジピン投与細胞よりも、およそ95%の増大である。小グリア細胞は、1μg/ml LPSおよび50nM ニルバジピン両方の存在では、約670 pg/mlTNF-αを産生した。LPSおよび500 nMニルバジピンの投与により、TNF-α産生は、約610 pg/mlに減少した。よってニルバジピンは、LPSにより誘導される小グリア細胞活性化をおよそ20〜25%抑制した。
Aβ神経毒性に対するニルバジピン投与の効果
Aβ神経毒性に対するニルバジピン投与(10 nMおよび100 nM)の効果が、3日間、30μM プレ凝集（pre-aggregated）Aβ1-40(AgAβ)で処理されたヒトの神経前駆細胞(HNPC; human neuronal progenitor cell)を用いて調べられた。HNPC細胞は、cyclicAMPを用いる処理で容易に神経細胞に分化する。cyclicAMP (1mM)(Sigma)が培養培地に添加され、ならびにHNPC細胞は、37℃、48時間以上、血清フリーの条件下でインキュベートされた。この培地中で上記前駆細胞は、神経細胞系列の細胞に分化した。このことは、微小管結合タンパク質、MAP-2に対する抗体で細胞の大半を染色することにより確認された。神経毒性は、細胞から放出された乳酸脱水素酵素(LDH;あらゆる細胞に見出される細胞内酵素の一つ)の量を測定することにより評価された。
Aβ神経毒性に対するニルバジピン投与(10 nMおよび100 nM)の効果が、3日間、30μM プレ凝集（pre-aggregated）Aβ1-40(AgAβ)で処理されたヒトの神経前駆細胞(HNPC; human neuronal progenitor cell)を用いて調べられた。HNPC細胞は、cyclicAMPを用いる処理で容易に神経細胞に分化する。cyclicAMP (1mM)(Sigma)が培養培地に添加され、ならびにHNPC細胞は、37℃、48時間以上、血清フリーの条件下でインキュベートされた。この培地中で上記前駆細胞は、神経細胞系列の細胞に分化した。このことは、微小管結合タンパク質、MAP-2に対する抗体で細胞の大半を染色することにより確認された。神経毒性は、細胞から放出された乳酸脱水素酵素(LDH;あらゆる細胞に見出される細胞内酵素の一つ)の量を測定することにより評価された。
図４に示されるようにAgAβで処置された該細胞は、ニルバジピンで処置された細胞と比較して、LDH放出が約44%増加した。10 nMニルバジピンを、AgAβと一緒に加えた場合には、LDH放出には変化がなかった。しかしながら、ニルバジピンの投与量を10倍に増やして100nMにすると、LDH放出量は、約44%だけ減少した。
APPプロセッシングに対するニルバジピン投与の効果
APPプロセッシングに対するニルバジピン投与の効果が、APPswでトランスフェクトされたヒトグリア芽腫(glioblastoma)細胞を用いて調べられた。この細胞は50nMおよび250nMのニルバジピンで24時間および48時間処置され、さらに培養培地中におけるAβ1-40の産生が、商業的に入手できるヒトAβ1-40 ELISA(Biosource, CA)を使用して測定された。
APPプロセッシングに対するニルバジピン投与の効果が、APPswでトランスフェクトされたヒトグリア芽腫(glioblastoma)細胞を用いて調べられた。この細胞は50nMおよび250nMのニルバジピンで24時間および48時間処置され、さらに培養培地中におけるAβ1-40の産生が、商業的に入手できるヒトAβ1-40 ELISA(Biosource, CA)を使用して測定された。
図5-Aに表されるように処置して24時間後に、50 nMニルバジピンではAβl-40の産生を約9%だけ、ならびに250 nMニルバジピンでは、Aβ1-40の産生を約15%だけ減少させた。処置して48時間後においては(図5-B)、50 nMニルバジピンではAβ1-40産生を約18%だけ、ならびに250 nMニルバジピンではAβ1-40産生を約5%だけ減少させた。
血漿Aβレベルへのニルバジピン投与の効果
血漿Aβレベル(pg/ml)へのニルバジピン投与の効果が、2年齢のTgPS/APPswマウスを使用して調べられた。動物は、毎日腹腔内(I.P.)に3.5週間、ニルバジピン(1.5mg/kg体重; n=10)または媒体のみ(50% DMSO、PBS中;n=12)で処置された。この処置の後で100μlの血液が、抗凝固剤としてEDTA(4%)を使用し、動物の尾静脈から採取された。血液サンプルは、4000×gで1分間遠心分離され、血漿が回収された。これを４倍に希釈してから、商業的に入手できるヒトAβ1-40 ELISA(Biosource, CA)を使用し、ヒトAβ1-40についてアッセイした。
血漿Aβレベル(pg/ml)へのニルバジピン投与の効果が、2年齢のTgPS/APPswマウスを使用して調べられた。動物は、毎日腹腔内(I.P.)に3.5週間、ニルバジピン(1.5mg/kg体重; n=10)または媒体のみ(50% DMSO、PBS中;n=12)で処置された。この処置の後で100μlの血液が、抗凝固剤としてEDTA(4%)を使用し、動物の尾静脈から採取された。血液サンプルは、4000×gで1分間遠心分離され、血漿が回収された。これを４倍に希釈してから、商業的に入手できるヒトAβ1-40 ELISA(Biosource, CA)を使用し、ヒトAβ1-40についてアッセイした。
図6に表されるように、TgPS/APPswマウスにニルバジピンを1.5mg/kg体重の投与量で3.5週間にわたってI.P.投与することにより、血漿Aβレベル(pg/ml)は、コントロール動物に比較して42%の増加となった。
一般的結論
ニルバジピンの長期にわたる投与は、トランスジェニックマウスの大脳皮質の様々な領域および海馬において存在するAβ量を有意に減らし、小グリア細胞活性化の程度も有意に低下させた。N9げっ歯類小グリア細胞が、LPSにより活性化される場合、ニルバジピン投与は、LPSにより誘導される小グリア細胞の活性化を有意に低下させた。さらにニルバジピンは、ヒトの前駆体神経細胞系列においてAgAβによる神経毒性を有効に抑制した。Aβ1-40の産生はニルバジピン処置により有意に減少しなかったけれども、ニルバジピン投与後にAβ1-40の産生が減少に向かう傾向が見られた。このAβ1-40の減少は、潜在的に低下した生産を反映するものであるが、低下したAβ1-40出現が帰せられるべき他の機構には、限定されるものではないが、貪食作用または他の分解、あるいはその凝集と検出を妨げる細胞的な作用などが含まれる。しかしながら機構が何であれ、ニルバジピンの存在がAβ1-40存在を付随して減らしていることをデータは示唆している。最後に2歳のTgPS/APPswマウスへのニルバジピンの長期にわたるI.P.投与は、有意に血漿Aβレベルを上昇させたが、このことは大脳におけるAβ沈積を低下させるニルバジピンの能力に加えて、ニルバジピンの処置が罹病した患者の大脳において既に沈積したAβを減らすかもしれないことを示唆している。
一般的結論
ニルバジピンの長期にわたる投与は、トランスジェニックマウスの大脳皮質の様々な領域および海馬において存在するAβ量を有意に減らし、小グリア細胞活性化の程度も有意に低下させた。N9げっ歯類小グリア細胞が、LPSにより活性化される場合、ニルバジピン投与は、LPSにより誘導される小グリア細胞の活性化を有意に低下させた。さらにニルバジピンは、ヒトの前駆体神経細胞系列においてAgAβによる神経毒性を有効に抑制した。Aβ1-40の産生はニルバジピン処置により有意に減少しなかったけれども、ニルバジピン投与後にAβ1-40の産生が減少に向かう傾向が見られた。このAβ1-40の減少は、潜在的に低下した生産を反映するものであるが、低下したAβ1-40出現が帰せられるべき他の機構には、限定されるものではないが、貪食作用または他の分解、あるいはその凝集と検出を妨げる細胞的な作用などが含まれる。しかしながら機構が何であれ、ニルバジピンの存在がAβ1-40存在を付随して減らしていることをデータは示唆している。最後に2歳のTgPS/APPswマウスへのニルバジピンの長期にわたるI.P.投与は、有意に血漿Aβレベルを上昇させたが、このことは大脳におけるAβ沈積を低下させるニルバジピンの能力に加えて、ニルバジピンの処置が罹病した患者の大脳において既に沈積したAβを減らすかもしれないことを示唆している。
上記のデータによって、ADのような大脳のアミロイド形成性疾患に苛まれる動物またはヒトへのニルバジピン投与は、大脳の重要な領域（そこでは病理的な沈積が夥しいことが特徴的に示されている）において有意にAβ沈積量を減らすことのみならず、既に大脳に沈積したAβの量を減らすことに推論することができる。加えてニルバジピン投与は、Aβによる神経毒性、すなわちADに見られるように幅広くかつ壊滅的な神経細胞の破壊の原因となっていると信じられているその作用を抑制するのみならず、AD患者の大脳に見られる特徴的な炎症性反応を引き起こす小グリア細胞活性化を低下させる。最後にニルバジピン治療は、ADのような大脳のアミロイド形成性疾患に苛まれる動物またはヒトの大脳において、既に沈積したAβの濃度を低下させる。
本発明の方法において本発明の精神または範囲から逸脱しないで、様々な修飾および変更をなし得ることは当業者には自明なことであろう。したがって、添付した請求項およびそれと等価なものの範囲で思いつく限り、本発明はそのような修飾および変更のすべてを包含するものとして意図されるものである。
Claims (22)
- アルツハイマー疾患に苛まれる動物またはヒトにおけるβ-アミロイドの沈積、β-アミロイドの神経毒性およびミクログリオーシスを低減する治療用組成物の製造のためのニルバジピンの使用であって、
ニルバジピンの治療的有効量が、単位投与形態で該組成物に含まれる、使用。 - ニルバジピンの治療的有効量が0.05〜20mg/日の間である、請求項1の使用。
- ニルバジピンの治療的有効量が2〜15mg/日の間である、請求項1の使用。
- ニルバジピンの治療的有効量が4〜12mg/日の間である、請求項1の使用。
- ニルバジピンの治療的有効量が8mg/日である、請求項1の使用。
- ニルバジピン治療が、動物またはヒトの終生まで持続されることを特徴とする請求項１に記載の使用。
- 前記の動物またはヒトへのニルバジピンの投与が、非経口的、経口的または腹腔内への投与であることを特徴とする請求項１に記載の使用。
- 経口摂取の単位投与形態が、硬殻もしくは軟殻のゼラチンカプセル、錠剤、トローチ、小袋剤、薬用飴剤、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、ウエハー、散剤、顆粒剤、溶液剤および乳剤よりなる群から選ばれることを特徴とする請求項７に記載の使用。
- 前記の非経口的投与の経路が、静脈内；筋肉内；組織実質内；動脈内；皮下；眼球内；頭蓋内；心室内；滑液嚢内；経皮、肺吸入、眼、舌下、頬側を含む経上皮的；眼、皮膚、眼球、直腸、吹送または噴霧による鼻からの吸引を含む局所よりなる群から選ばれることを特徴とする請求項７に記載の使用。
- 前記のニルバジピンの鼻への投与が、エアゾル剤、アトマイザおよびネブライザよりなる群より選択される、請求項９に記載の使用。
- 動物またはヒトにおけるアルツハイマー疾患を診断する方法に用いる診断用組成物の製造のためのニルバジピンの使用であって、
該診断する方法が、
動物またはヒトの末梢循環におけるβ-アミロイドの血漿濃度を最初に測定すること;その動物またはヒトにニルバジピンを単位投与形態で投与すること;その動物またはヒトの末梢循環におけるβ-アミロイドの血漿濃度を２回目に測定すること;最初の測定および２回目の測定との間の差を算出することで、最初の測定と比べて２回目に測定されたβ-アミロイドの血漿濃度が上昇しておれば、動物またはヒトにおける大脳のアミロイド形成性疾患について診断が可能となる、使用。 - ニルバジピンの投与量が0.05〜20mg/日の間である、請求項11の使用。
- ニルバジピンの投与量が2〜15mg/日の間である、請求項11の使用。
- ニルバジピンの投与量が4〜12mg/日の間である、請求項11の使用。
- ニルバジピンの投与量が8mg/日である、請求項11の使用。
- ニルバジピンが、１日と12ヶ月との間で持続的に投与されることを特徴とする、請求項11に記載の使用。
- ニルバジピンが、１週間と６ヶ月との間で持続的に投与されることを特徴とする、請求項11に記載の使用。
- ニルバジピンが、２週間と４週間との間で持続的に投与されることを特徴とする、請求項11に記載の使用。
- 前記の動物またはヒトへのニルバジピンの投与が、非経口的、経口的または腹腔内への投与であることを特徴とする請求項11に記載の使用。
- 経口摂取の単位投与形態が、硬殻もしくは軟殻のゼラチンカプセル、錠剤、トローチ、小袋剤、薬用飴剤、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、ウエハー、散剤、顆粒剤、溶液剤および乳剤よりなる群から選ばれることを特徴とする請求項19に記載の使用。
- 前記の非経口的投与の経路が、静脈内；筋肉内；組織実質内；動脈内；皮下；眼球内；頭蓋内；心室内；滑液嚢内；経皮、肺吸入、眼、舌下、頬側を含む経上皮的；眼、皮膚、眼球、直腸、吹送または噴霧による鼻からの吸引を含む局所 よりなる群から選ばれることを特徴とする請求項19に記載の使用。
- 前記のニルバジピンの鼻への投与が、エアゾル剤、アトマイザおよびネブライザよりなる群より選択される、請求項21に記載の使用。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US47069403P | 2003-05-15 | 2003-05-15 | |
| US60/470,694 | 2003-05-15 | ||
| PCT/US2004/015417 WO2004110354A2 (en) | 2003-05-15 | 2004-05-17 | Method for reducing amyloid deposition, amyloid neurotoxicity and microgliosis |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2007501277A JP2007501277A (ja) | 2007-01-25 |
| JP4971794B2 true JP4971794B2 (ja) | 2012-07-11 |
Family
ID=33551420
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2006533144A Expired - Lifetime JP4971794B2 (ja) | 2003-05-15 | 2004-05-17 | アミロイド沈積、アミロイド神経毒性およびミクログリオーシスを低減する方法 |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US7732467B2 (ja) |
| EP (1) | EP1628663B1 (ja) |
| JP (1) | JP4971794B2 (ja) |
| CN (1) | CN100444840C (ja) |
| AT (1) | ATE437641T1 (ja) |
| CA (1) | CA2525970C (ja) |
| DE (1) | DE602004022284D1 (ja) |
| DK (1) | DK1628663T3 (ja) |
| ES (1) | ES2334029T3 (ja) |
| WO (1) | WO2004110354A2 (ja) |
Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1858325A4 (en) * | 2005-01-07 | 2010-06-30 | Roskamp Res Llc | COMPOUNDS FOR INHIBITING BETA-AMYLOID PRODUCTION AND METHODS FOR IDENTIFYING THESE COMPOUNDS |
| PT1874311E (pt) * | 2005-04-15 | 2011-11-25 | Res & Innovation S P A | Método para prevenir, retardar ou reverter a deposição anómala de amilóide |
| WO2007103683A2 (en) * | 2006-03-01 | 2007-09-13 | Roskamp Research Llc | Compounds for inhibiting beta-amyloid production |
| EP2120557A4 (en) * | 2006-12-08 | 2010-02-10 | Roskamp Res Llc | POLYHYDROQUINOLINE COMPOUNDS AND DIHYDROPYRIDINE COMPOUNDS FOR INHIBITING BETA-AMYLOID PRODUCTION |
| US8709394B2 (en) * | 2007-09-28 | 2014-04-29 | Ndsu Research Foundation | Antimicrobial polysiloxane materials containing metal species |
| WO2009046338A1 (en) * | 2007-10-05 | 2009-04-09 | Roskamp Research Llc | Method for increasing cerebral blood flow with (+)-nilvadipine enantiomer |
| NZ584729A (en) * | 2007-10-05 | 2012-12-21 | Alzheimer S Inst Of America Inc | Method for reducing amyloid deposition, amyloid neurotoxicity, and microgliosis with (-)-nilvadipine enantiomer |
| US20100093810A1 (en) * | 2007-10-05 | 2010-04-15 | Alzheimer's Institute Of America, Inc. | Pharmaceutical Compositions for Reducing Amyloid Deposition, Amyloid Neurotoxicity, and Microgliosis |
| WO2010132671A1 (en) * | 2009-05-15 | 2010-11-18 | The University Of Kentucky Research Foundation | Treatment of mci and alzheimer's disease |
| EP2311823A1 (en) * | 2009-10-15 | 2011-04-20 | AC Immune S.A. | 2,6-Diaminopyridine compounds for treating diseases associated with amyloid proteins or for treating ocular diseases |
| KR20140128230A (ko) * | 2013-04-26 | 2014-11-05 | 한국과학기술연구원 | 혈액 중 단백질 응집체의 용해를 통한 단백질의 비정상적인 응집 또는 미스폴딩과 관련된 질환 또는 질병을 진단하는 진단키트 |
Family Cites Families (52)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4338322A (en) | 1975-07-02 | 1982-07-06 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | 1,4-Dihydropyridine derivatives, pharmaceutical compositions containing same and methods of effecting vasodilation using same |
| JPS6038322A (ja) | 1983-08-11 | 1985-02-27 | Fujisawa Pharmaceut Co Ltd | ジヒドロピリジンａ物質含有易溶性固形製剤 |
| JPS61129140A (ja) | 1984-11-27 | 1986-06-17 | Nitto Electric Ind Co Ltd | 医薬組成物 |
| GB8431119D0 (en) | 1984-12-10 | 1985-01-16 | Fujisawa Pharmaceutical Co | Anti-arteriosclerotic composition |
| US4940556A (en) | 1986-01-30 | 1990-07-10 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Method of preparing long acting formulation |
| US5001139A (en) | 1987-06-12 | 1991-03-19 | American Cyanamid Company | Enchancers for the transdermal flux of nivadipine |
| EP0294601B1 (en) | 1987-06-12 | 1993-01-20 | American Cyanamid Company | Transdermal delivery of pharmaceuticals |
| US5114946A (en) | 1987-06-12 | 1992-05-19 | American Cyanamid Company | Transdermal delivery of pharmaceuticals |
| US4992445A (en) | 1987-06-12 | 1991-02-12 | American Cyanamid Co. | Transdermal delivery of pharmaceuticals |
| US5045553A (en) | 1987-06-24 | 1991-09-03 | Fujisawa Pharmaceutical Company, Ltd. | Pharmaceutical composition for percutaneous drug absorption and percutaneous drug absorption promoter |
| US4820720A (en) | 1987-08-24 | 1989-04-11 | Alza Corporation | Transdermal drug composition with dual permeation enhancers |
| EP0317780B1 (en) | 1987-11-25 | 1992-05-20 | American Cyanamid Company | Sustained (controlled) release delivery system for substituted dihydropyridine calcium channel blockers |
| US5160734A (en) | 1987-11-25 | 1992-11-03 | American Cyanamid Company | Sustained release delivery system for substituted dihydropyridine calcium channel blockers |
| US4902514A (en) | 1988-07-21 | 1990-02-20 | Alza Corporation | Dosage form for administering nilvadipine for treating cardiovascular symptoms |
| US5053419A (en) | 1989-03-31 | 1991-10-01 | The Children's Medical Center Corporation | Treatment of AIDS dementia, myelopathy and blindness |
| JP2867462B2 (ja) | 1989-09-12 | 1999-03-08 | 藤沢薬品工業株式会社 | 経皮吸収用製剤 |
| JPH03117658A (ja) | 1989-09-29 | 1991-05-20 | Mazda Motor Corp | 外燃式ロータリピストンエンジン |
| JP2920956B2 (ja) | 1989-10-06 | 1999-07-19 | 藤沢薬品工業株式会社 | ニルバジピン含有持続性錠剤 |
| WO1992003137A1 (en) | 1990-08-23 | 1992-03-05 | The Children's Medical Center Corporation | Treatment of aids dementia, myelopathy, peripheral neuropathy, and vision loss |
| WO1993005770A1 (fr) | 1991-09-20 | 1993-04-01 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | Preparation a longue duree d'action |
| JPH05139974A (ja) | 1991-11-26 | 1993-06-08 | Fujisawa Pharmaceut Co Ltd | ジヒドロピリジンａ物質含有易溶性固体分散体の製造法 |
| DE4141646A1 (de) | 1991-12-17 | 1993-06-24 | Klinge Co Chem Pharm Fab | Arzneimittelkombination mit synergistischer wirkung, verfahren zu seiner herstellung und seine verwendung |
| US5340591A (en) | 1992-01-24 | 1994-08-23 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | Method of producing a solid dispersion of the sparingly water-soluble drug, nilvadipine |
| DE4229805A1 (de) * | 1992-09-07 | 1994-03-24 | Werner E G Prof Dr Mueller | Kalzium-Kanal-Antagonisten oder deren Derivate zur Herstellung eines Arzneimittels zur Bekämpfung von Erkrankungen, die durch Prion-Proteine oder Prion-analoge Proteine ausgelöst werden |
| CA2125251C (en) | 1993-06-07 | 2005-04-26 | Yoshiyuki Inada | A pharmaceutical composition for angiotensin ii-mediated diseases |
| US5721263A (en) | 1993-06-07 | 1998-02-24 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Pharmaceutical composition for angiotensin II-mediated diseases |
| US6334997B1 (en) | 1994-03-25 | 2002-01-01 | Isotechnika, Inc. | Method of using deuterated calcium channel blockers |
| CA2252962A1 (en) | 1996-04-26 | 1997-11-06 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | Peripheral circulation improvers for ophthalmic tissues containing dihydropyridines |
| US6271259B1 (en) * | 1996-05-07 | 2001-08-07 | Ito En, Ltd. | Method for improving the brain function, inhibiting glutamate excitotoxicity and rescuing from neuronal death |
| KR100222306B1 (ko) | 1996-11-20 | 1999-10-01 | 이병언 | 닐바디핀 속효성 고형제제 및 이의 제조방법 |
| EP1085879A2 (en) | 1998-06-08 | 2001-03-28 | Advanced Medicine, Inc. | Multibinding agents that modulate the 5-ht transporter |
| EP1085863A1 (en) | 1998-06-08 | 2001-03-28 | Advanced Medicine, Inc. | Cross-reference to related applications |
| TR200100062T2 (tr) | 1998-07-10 | 2001-06-21 | Novartis Ag | Valsartan ve kalsiyum kanalı bloklayıcısının anti-hipertensif kombinasyonu |
| WO2001064250A1 (en) | 2000-03-03 | 2001-09-07 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | Remedies for malignant tumor-concomitant neurosis and azoor or analogous diseases thereof |
| TWI246921B (en) | 2000-04-11 | 2006-01-11 | Sankyo Co | Stabilized pharmaceutical composition with calcium blocker |
| JP2001335483A (ja) | 2000-05-30 | 2001-12-04 | Nichiko Pharmaceutical Co Ltd | ニルバジピン含有製剤 |
| AU7804501A (en) | 2000-07-27 | 2002-02-13 | Pharmacia Corp | Epoxy-steroidal aldosterone antagonist and calcium channel blocker combination therapy for treatment of congestive heart failure |
| JP3968687B2 (ja) | 2000-09-13 | 2007-08-29 | 東和薬品株式会社 | 易吸収性ニルバジピン錠 |
| JP3470096B2 (ja) | 2000-09-19 | 2003-11-25 | 沢井製薬株式会社 | ニルバジピン含有易溶性固形製剤およびその製造法 |
| EP1343506A1 (de) | 2000-12-19 | 2003-09-17 | MERCK PATENT GmbH | Pharmazeutische formulierung enthaltend pyrazolo 4,3-d]pyrimidine und antithrombotica, calcium-antagonisten, prostaglandine oder prostaglandinderivate |
| AU2002227957A1 (en) | 2000-12-19 | 2002-07-01 | Merck Patent Gmbh | Pharmaceutical formulation containing thienopyrimidines and antithrombotics, calcium antagonists, prostaglandins or prostaglandin derivatives |
| US7083642B2 (en) | 2000-12-22 | 2006-08-01 | Avantec Vascular Corporation | Delivery of therapeutic capable agents |
| CA2333494A1 (en) * | 2001-02-01 | 2002-08-01 | Vasogen Ireland Limited | Blood brain barrier modulation |
| JP2004532868A (ja) * | 2001-05-25 | 2004-10-28 | シェーリング コーポレイション | アルツハイマー病の処置におけるアゼチジノン置換誘導体の使用 |
| EG24716A (en) | 2002-05-17 | 2010-06-07 | Novartis Ag | Combination of organic compounds |
| WO2004034963A2 (en) | 2002-05-17 | 2004-04-29 | Eisai Co., Ltd. | Methods and compositions using cholinesterase inhibitors |
| PE20040468A1 (es) | 2002-05-17 | 2004-09-14 | Novartis Ag | Combinacion de compuestos organicos |
| BR0310084A (pt) | 2002-05-17 | 2005-02-15 | Novartis Ag | Composição farmacêutica compreendendo um inibidor de renina, um bloqueador de canal de cálcio e um diurético |
| JP2003146878A (ja) | 2002-11-22 | 2003-05-21 | Sawai Pharmaceutical Co Ltd | ニルバジピン含有易溶性固形製剤およびその製造法 |
| AU2003292936A1 (en) * | 2002-12-24 | 2004-07-22 | Neurochem (International) Limited | Therapeutic formulations for the treatment of beta-amyloid related diseases |
| US20050031651A1 (en) | 2002-12-24 | 2005-02-10 | Francine Gervais | Therapeutic formulations for the treatment of beta-amyloid related diseases |
| JP2004002460A (ja) | 2003-07-29 | 2004-01-08 | Towa Yakuhin Kk | 易吸収性ニルバジピン錠の製造法 |
-
2004
- 2004-05-17 EP EP04752432A patent/EP1628663B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2004-05-17 DE DE602004022284T patent/DE602004022284D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2004-05-17 JP JP2006533144A patent/JP4971794B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2004-05-17 CA CA2525970A patent/CA2525970C/en not_active Expired - Fee Related
- 2004-05-17 ES ES04752432T patent/ES2334029T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2004-05-17 CN CNB2004800171974A patent/CN100444840C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2004-05-17 AT AT04752432T patent/ATE437641T1/de not_active IP Right Cessation
- 2004-05-17 WO PCT/US2004/015417 patent/WO2004110354A2/en not_active Ceased
- 2004-05-17 DK DK04752432.7T patent/DK1628663T3/da active
- 2004-05-17 US US10/847,630 patent/US7732467B2/en active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20050009885A1 (en) | 2005-01-13 |
| DE602004022284D1 (de) | 2009-09-10 |
| WO2004110354A3 (en) | 2005-02-10 |
| DK1628663T3 (da) | 2010-03-08 |
| HK1092358A1 (en) | 2007-02-09 |
| JP2007501277A (ja) | 2007-01-25 |
| EP1628663A4 (en) | 2006-05-24 |
| CN100444840C (zh) | 2008-12-24 |
| ATE437641T1 (de) | 2009-08-15 |
| CA2525970C (en) | 2011-03-22 |
| ES2334029T3 (es) | 2010-03-04 |
| EP1628663A2 (en) | 2006-03-01 |
| US7732467B2 (en) | 2010-06-08 |
| CA2525970A1 (en) | 2004-12-23 |
| WO2004110354A2 (en) | 2004-12-23 |
| CN1809352A (zh) | 2006-07-26 |
| EP1628663B1 (en) | 2009-07-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Querfurth et al. | Mechanisms of disease | |
| Zhang et al. | Pathological impacts of chronic hypoxia on Alzheimer’s disease | |
| US20200338040A1 (en) | Methods for treating alzheimer's disease and related disorders | |
| US20100324079A1 (en) | Medicament for prophylaxis and treatment of Alzheimer disease | |
| JP4971794B2 (ja) | アミロイド沈積、アミロイド神経毒性およびミクログリオーシスを低減する方法 | |
| JP2014513065A (ja) | （３ａＲ）−１，３ａ，８−トリメチル−１，２，３，３ａ，８，８ａ−ヘキサヒドロピロロ［２，３−ｂ］インドール−５−イルフェニルカルバメートの有効量およびその使用方法 | |
| Leung et al. | Microglia activation mediates fibrillar amyloid-β toxicity in the aged primate cortex | |
| Gąsiorowski et al. | Current and near-future treatment of Alzheimer’s disease | |
| JP6928450B2 (ja) | エンドセリンｂ受容体アゴニストを用いた、神経精神疾患を治療するための組成物及び方法 | |
| US20240189307A1 (en) | Methods of stabilizing the neuronal proteome against collapse and protecting vascular cells | |
| JP2010531854A (ja) | 抗アミロイド剤としてのピレンゼピンおよびその誘導体 | |
| AU2023347307A1 (en) | Methods of reducing neurodegeneration associated with neurodegenerative diseases | |
| RU2490014C2 (ru) | Способ уменьшения отложения амилоида, амилоидной нейротоксичности и микроглиоза с помощью (-)-энантиомера нилвадипина | |
| JP7249433B2 (ja) | 蜂毒抽出物を有効成分として含有する神経炎症疾患の予防または治療用組成物 | |
| HK1092358B (en) | Method for producing medicaments for reducing amyloid deposition, amyloid neurotoxicity and microgloisis | |
| Xiong et al. | BMP9 ameliorates amyloid pathology by promoting low-density lipoprotein receptor-related protein 1 expression in APP/PS1 transgenic mice | |
| Czech et al. | Disease modifying therapeutic strategies in Alzheimer's disease targeting the amyloid cascade | |
| US20100311726A1 (en) | Reduction of beta-amyloid levels by treatment with the small molecule differentiation-inducing factor |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20061127 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20100525 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20100819 |
|
| A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20100826 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20100924 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20100924 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20101214 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110310 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110412 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110711 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20111220 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120229 |
|
| RD02 | Notification of acceptance of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422 Effective date: 20120229 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20120229 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20120403 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20120406 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20150413 Year of fee payment: 3 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |